JP4601265B2

JP4601265B2 - Topically applied formulation

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Publication number: JP4601265B2
Application number: JP2003136503A
Authority: JP
Inventors: 健一春名; 哲央小池
Original assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2003-05-14
Filing date: 2003-05-14
Publication date: 2010-12-22
Anticipated expiration: 2023-05-14
Also published as: JP2004339119A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、テルペノイドを含有する局所適用製剤に関し、さらに詳しくは局所適用により角膜障害を予防し、角膜を保護するための組成物、及びこれを用いて紫外線等の光線による障害から角膜を保護するための方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、地球環境の変化によるオゾン層の破壊は、生体が強い紫外線に曝露される機会を増加し、日焼けをはじめとして様々な影響を及ぼしている。一方、眼も紫外線等の光線の影響を直接受ける器官であり、特に外界に露出している角膜は、常に紫外線等の光線にさらされることで、何らかの障害を受けていると言える。
【０００３】
紫外線等の光線の曝露による角膜障害の程度については、受ける線量等により異なるが、角膜上皮の表層部において被曝後数時間程度の比較的短い時間で現れるものや、角膜上皮の深部において12時間以上経過してから徐々に起こり始め、24時間程度でピークに達するものがある。
また、スキーなどのスポーツ時に強力な紫外線を一時に受けた場合、広範囲に及んで角膜上皮障害が起こる。さらにこれが紫外線眼炎（いわゆる、雪盲、雪目炎、ゆきめ）等の角膜炎や角膜潰瘍等の重篤な角膜障害を引き起こすこともある。一方で、あまり強力でない紫外線に繰り返し曝露されることにより、角膜が受ける障害についても無視できない。
従って、紫外線による角膜障害の発生を予防するためには、症状の有無にかかわらず、紫外線に曝露される恐れのある対象を適切な方法で処置することが最も重要である。
【０００４】
角膜が障害を受けるメカニズムについては、未だ完全には解明されていないが、最近では紫外線（ＵＶ）等の曝露により、角膜上皮細胞に異常なアポトーシス信号が発せられることによって起こる、異常なアポトーシスが関係していると言われている。ＵＶ曝露により生じた角膜上皮細胞のアポトーシスは角膜全体に影響を及ぼし、自覚症状がない状況でも、角膜組織にはアポトーシスで死んだ細胞が欠落してできる空隙が多数存在していると言われている。このような細胞死が増えると眼の違和感や痛みなどの自覚症状が現れ、眼をこする等の外的刺激が加わることで炎症などの角膜障害に発展する場合がある。
【０００５】
従って、紫外線等の光線による角膜障害に対しては、角膜上皮障害の発生を未然に予防すること、及び早期に角膜上皮障害の進行を抑制することが極めて重要であり、そのような処置に適した安全かつ安定で効果的な薬剤の開発が切望されている。
【０００６】
従来、角膜障害治療・予防剤としては、レシチン化スーパーオキシドディスムターゼを有効成分とするものが知られている（特許文献１）。しかし、特許文献１に記載の製剤は、有効成分として酵素を用いており、局所適用用の安定な製剤として供給することが困難である。また、アスコルビン酸とトコフェロールとのリン酸ジエステル化合物を含有してなる角膜障害治療剤も提供されている（特許文献２）。しかし、特許文献２に記載の製剤は、有効成分の分解や容器への吸着によって、効果を安定的に維持しえない恐れがある。
【０００７】
【特許文献１】
特開平9-124505号公報
【０００８】
【特許文献２】
特開平7-291870号公報
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、主として紫外線等の光線の曝露による角膜上皮障害の発生を防止し、角膜上皮障害の進行を抑制するための局所適用製剤を提供することを目的とするものである。
本発明はまた、角膜上皮細胞に対するアポトーシス抑制剤を提供することを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意研究を進めた結果、テルペノイドを配合した組成物を局所適用すると、紫外線等の光線による角膜上皮における障害の発生が予防され、角膜を保護しうることを見出し本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、有効成分としてテルペノイドを含有することを特徴とする、角膜障害を予防するための局所適用製剤を提供するものである。
本発明はまた有効成分としてテルペノイドを含有する角膜上皮細胞に対するアポトーシス抑制剤を提供するものである。
すなわち、本発明は、
（１）テルペノイドを含有することを特徴とする角膜障害を予防するための局所適用製剤、
（２）角膜障害が光線により惹起されるものである（１）に記載の局所適用製剤、
（３）テルペノイドを含有する紫外線眼炎の発生を抑制するための局所適用製剤、
（４）テルペノイドがメントール、ボルネオール及びカンフルからなる群から選ばれる少なくとも１種である（１）〜（３）に記載の局所適用製剤、
（５）テルペノイドを含有するアポトーシス抑制剤、
（６）テルペノイドがメントール、ボルネオール及びカンフルからなる群から選ばれる少なくとも１種である（５）に記載のアポトーシス抑制剤、
に関するものである。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明の目的から、「角膜障害を予防する」とは、角膜上皮障害の発生を未然に防止することや角膜上皮障害及び角膜障害の進行を抑制することを意味し、該障害は自覚症状の有無とは無関係である。光線等に曝露された場合の角膜上皮障害の程度は線量や部位により異なり、また障害の進行速度もまちまちである。角膜障害の症状は短時間のうちに死滅した角膜上皮細胞が多いほど深刻化し、患者の負担も大きくなる。そこで、細胞が致死量に相当する光線に曝露された場合においても、急激な細胞死を抑制するような処置が有効である。従って、本発明における角膜障害の予防は、光線等が細胞に致命的な作用を及ぼすことを防止し、角膜障害を軽減するための処置全てを包含し、例えば予防、症状の軽減・減退、症状の進行の減退・停止等、あらゆる段階、局面での処置を含む。従って、本発明の局所適用製剤は角膜保護剤としての機能を有する。
【００１２】
本発明における角膜障害の予防は、紫外線等の光線が角膜上皮細胞に致死的なダメージを及ぼすことを防止、細胞死に誘導される角膜上皮障害及び角膜障害の発生防止、進行抑制に有効である。
本発明に係る角膜上皮障害の原因としては、紫外線等の光線、例えば太陽光、溶接光、殺菌灯、レーザー光線等が挙げられるが、本発明の局所適用製剤は原因の如何にかかわらず有効である。本発明の局所適用製剤は、紫外線等の光線による障害に対する処置において特に有効である。
【００１３】
本発明の局所適用製剤はテルペノイドを配合することで角膜障害の適切な処置を可能にしたものである。従来、テルペノイドは、眼科用組成物などの局所適用性剤では、清涼化剤として使用されているが、これが角膜障害の処置用の局所適用製剤の有効成分となりうることは知られていなかった。
【００１４】
本発明の局所適用製剤には眼科的に許容される任意のテルペノイドを配合することができ、例えば、メントール、ボルネオール、カンフル、ゲラニオール、シネオール、アネトール、リモネン、オイゲノール等のモノテルペン、ファルネソール、ネロリドールなどのセスキテルペン、フィトール、センブレンなどのジテルペンなどが挙げられる。中でもメントール、ボルネオール、カンフルなどが好ましい。これらのテルペノイドは、ｄ体、ｌ体、dl体のいずれでもよく、また、これらのテルペノイドを含有した精油としても配合することができる。
本発明の局所適用製剤中のテルペノイドの濃度は、テルペノイドの種類や剤形によって異なるが、テルペノイドの濃度として0.0005〜1重量％の範囲であることが好ましく、点眼剤の場合、0.00１〜0.5重量％、洗眼剤の場合、0.001〜0.2重量％の範囲であることがより好ましい。
本発明の局所適用製剤は、紫外線等の曝露の前後に適用することができる。適当な量の製剤を紫外線等への曝露の約１時間前から最終曝露の約24時間後までの間に任意の回数で両眼に適用することで行うことができる。被曝前から被曝後約24時間の間に適用することが好ましい。適用量は、点眼薬の場合、１回の点眼で両眼あわせて0.2 ml程度、洗眼薬の場合、両眼で10ml程度、眼軟膏の場合、両眼で0.1g程度である。より好ましくは、１回１〜２滴、１日５〜６回点眼することにより、紫外線等の曝露による角膜障害を予防または軽減することができる。しかしながら、本発明の局所適用製剤の適用時期、適用回数、適用量等は曝露した光線等の種類、強さ、被曝した対象の状況（症状、年齢等）に応じて適宜調整されるべきであり、上記に限定されるものではない。
本発明の局所適用製剤は、角膜上皮障害の発生を防止するとともに、紫外線眼瞼炎などの角膜障害を予防することができる。
【００１５】
本発明はまた、紫外線等の光線に被曝する恐れのある対象に対しては被曝前に、被曝した対象に対しては被曝後約24時間以内にテルペノイドを含有する局所適用製剤を両眼に適用することからなる角膜障害の予防方法に関する。
【００１６】
本発明の局所適用製剤は、本発明の目的に反しない限り、テルペノイド以外の種々の成分を組み合わせて含有することができる。組み合わせることのできる成分としては、例えば、充血除去成分、抗炎症薬成分、抗ヒスタミン薬成分、他の収斂薬成分、殺菌薬成分、抗腫瘍薬成分、ホルモン類、タンパク質またはペプチド類、ビタミン類、アミノ酸類等が使用できる。具体的には、次のような成分が例示できる。
【００１７】
充血除去成分：エピネフリン、エフェドリン、テトラヒドロゾリン、ナファゾリン、フェニレフリン、メチルエフェドリン及びそれらの塩等。
【００１８】
眼筋調節薬成分：アセチルコリンと類似した活性中心を有するコリンエステラーゼ阻害剤、例えば、メチル硫酸ネオスチグミン等の第４級アンモニウム化合物及びそれらの塩等。
【００１９】
抗炎症薬成分：たとえば、硫酸亜鉛、乳酸亜鉛、セレコキシブ（celecoxib)、ロフェコキシブ（rofecoxib)、インドメタシン、ジクロフェナク、プラノプロフェン、ピロキシカム、メロキシカム（meloxicam)、イプシロン−アミノカプロン酸、ベルベリン、アズレンスルホン酸、グリチルリチン酸、リゾチーム、サリチル酸メチル、アラントイン及び薬理学的に許容される塩（例えば、塩化ベルベリン、硫酸ベルベリン、ジクロフェナクナトリウム、アズレンスルホン酸ナトリウム、グリチルリチン酸ニカリウム、塩化リゾチーム等）等。
【００２０】
抗ヒスタミン薬成分：例えば、ジフェンヒドラミン、クロルフェニラミン、イプロヘプチン、ケトチフェン、エメダスチン、クレマスチン、アゼラスチン、レボカバスチン、オロパタジン、クロモグリク酸、アンレキサノクス、メキタジン、ロラタジン（loratadine)、フェキソフェナジン（fexofenadine)、セチリジン（cetirizine）、イブジラスト、スプラタスト、ペミロラスト、及び薬理学的に許容される塩（例えば、塩酸ジフェンヒドラミン、マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸イプロヘプチン、フマル酸ケトチフェン、フマル酸エメダスチン、フマル酸クレマスチン、塩酸アゼラスチン、塩酸レボカバスチン、塩酸オロパタジン、クロモグリク酸ナトリウム等）等。
【００２１】
殺菌薬成分：例えば、スルホンアミド類（例えば、スルファメトキサゾール、スルフィソキサゾール、スルフィソミジン及び薬理学的に許容される塩（スルファメトキサゾールナトリウム、スルフィソミジンナトリウム等）、アクリノール、第４級アンモニウム化合物（例えば、ベンザルコニウム、ベンゼトニウム、セチルピリジニウム及び薬理学的に許容される塩（塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、臭化セチルピリジニウム等）、アルキルポリアミノエチルグリシン、ニューキノロン剤（ロメフロキサシン、レボフロキサシン、塩酸シプロフロキサシン、オフロキサシン、ノルフロキサシン等）等。
【００２２】
ビタミン類：例えば、ビタミンＡ類（例えば、レチナール、レチノール、レチノイン酸、カロチン、デヒドロレチナール、リコピン及びその薬理学的に許容される塩類（例えば、酢酸レチノール、パルミチン酸レチノール等））等、ビタミンＢ類（例えば、チアミン、チアミンジスルフィド、ジセチアミン、オクトチアミン、シコチアミン、ビスイブチアミン、ビスベンチアミン、プロスルチアミン、ベンフォチアミン、フルスルチアミン、リボフラビン、フラビンアデニンジヌクレオチド、ピリドキシン、ピリドキサール、ヒドロキソコバラミン、シアノコバラミン、メチルコバラミン、デオキシアデノコバラミン、葉酸、テトラヒドロ葉酸、ジヒドロ葉酸、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチニックアルコール、パントテン酸、パンテノール、ビオチン、コリン、イノシトール及びその薬理学的に許容されるこれらの塩類（例えば、塩酸チアミン、硝酸チアミン、塩酸ジセチアミン、塩酸フルスルチアミン、酪酸リボフラビン、フラビンアデニンジヌクレオチドナトリウム、塩酸ピリドキシン、リン酸ピリドキサール、リン酸ピリドキサールカルシウム、塩酸ヒドロキソコバラミン、酢酸ヒドロキソコバラミン、パントテン酸カルシウム、パントテン酸ナトリウム等））等、ビタミンＣ類（アスコルビン酸及びその誘導体、エリソルビン酸及びその誘導体及びその薬理学的に許容される塩類（例えば、アスコルビン酸ナトリウム、エリソルビン酸ナトリウム等）等、ビタミンＤ類（例えば、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、ヒドロキシコレカルシフェロール、ジヒドロキシコレカルシフェロール、ジヒドロタキステロール及びその薬理学的に許容される塩類等）等、ビタミンＥ類（例えば、トコフェロール及びその誘導体、ユビキノン誘導体及びその薬理学的に許容される塩類（酢酸トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール、コハク酸トコフェロール、コハク酸トコフェロールカルシウム等））等、その他のビタミン類（例えば、カルニチン、フェルラ酸、γ−オリザノール、オロチン酸、シアノコバラミン、ルチン、エリオシトリン、ヘスペリジン及びその薬理学的に許容される塩類（塩化カルニチン等）等。
【００２３】
アミノ酸類：例えば、ロイシン、イソイロイシン、バリン、メチオニン、トレオニン、アラニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、セリン、グルタミン、グルタミン酸、プロリン、チロシン、システイン、ヒスチジン、オルニチン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、グリシルグリシン、アミノエチルスルホン酸（タウリン）及びその薬理学的に許容される塩類（例えばアスパラギン酸カリウム、アスパラギン酸マグネシウム、塩酸システイン等）等。
糖類：単糖類（例えば、グルコース等）、二糖類（例えば、トレハロース、ラクトース、フルクトース等）、オリゴ糖類（例えば、ラクツロース、ラフィノース、プルラン等）、セルロースまたはその誘導体（例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、ニトロセルロース等）、高分子糖類（例えば、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸）及びその薬理学的に許容される塩類（例えば、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム等））、糖アルコール類（例えば、マンニトール、キシリトール、ソルビトール等）、鎮痒成分（クロタミトン、イクタモール、モクタモールまたはチモール酸等）等。
【００２４】
その他の成分：ポリビニルアルコール（完全または部分ケン化物）、ポリビニルピロリドン等。
【００２５】
これらの成分の含有量は、製剤の種類、活性成分の種類等に応じて選択でき、例えば、製剤全体に対して０．０００１〜３０％、好ましくは、０．００１〜１０％程度の範囲から選択できる。より具体的には，本発明の局所適用製剤中に各成分を以下に例示する量で含有させることができる。
【００２６】
眼筋調節薬成分：例えば、０．０００１〜０．５％、好ましくは０．０００２〜０．１％。
抗炎症薬成分または収斂薬成分：例えば、０．００１〜１０％、好ましくは０．００２〜３％。
抗ヒスタミン薬成分：例えば、０．０００１〜１０％、好ましくは０．００１〜５％。
殺菌薬成分：例えば、０．００１〜１０％、好ましくは、０．０１〜５％
ビタミン類：例えば、０．０００１〜１％、好ましくは、０．００１〜０．３％。
アミノ酸類：例えば、０．０００１〜１０％、好ましくは０．００１〜３％。
【００２７】
本発明の局所適用製剤は、必要に応じ、本発明の効果を損なわない範囲で、医薬品、医薬部外品等に使用される様々な成分や添加物を任意に選択、併用して製剤化することが可能である。以下に具体例を挙げるが、これに限定されるものではない。
【００２８】
糖類：例えば、グルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、リボース、リブロース、アラビノース、キシロース、リキソース、デオキシリボース、マルトース、トレハロース、スクロース、セロビオース、ラクトース、プルラン、ラクツロース、ラフィノース、マルチトール等、及びその薬理学的に許容される塩類等。
【００２９】
増粘剤：例えば、多糖類又はその誘導体（アラビアゴム、カラヤガム、キサンタンガム、キャロブガム、グアーガム、グアヤク脂、クインスシード、ダルマンガム、トラガント、ベンゾインゴム、ローカストビーンガム、カゼイン、寒天、アルギン酸、デキストリン、デキストラン、カラギーナン、ゼラチン、コラーゲン、ペクチン、デンプン、ポリガラクツロン酸、キチン及びその誘導体、キトサン及びその誘導体、エラスチン、ヘパリン、ヘパリノイド、ヘパリン硫酸、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸など）、セラミド、セルロース誘導体（メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、セルロースなど）、ポリビニルアルコール（完全、又は部分ケン化物）、ポリビニルピロリドン、マクロゴール、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミン、リボ核酸、デオキシリボ核酸など、及びその薬理学的に許容される塩類など。
【００３０】
糖類：例えば、グルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、リボース、リブロース、アラビノース、キシロース、リキソース、デオキシリボース、マルトース、トレハロース、スクロース、セロビオース、ラクトース、プルラン、ラクツロース、ラフィノース、マルチトールなど、及びその薬理学的に許容される塩類など。
【００３１】
界面活性剤：例えば、ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）−ポリオキシプロピレン（ＰＯＰ）ブロックコポリマー (例えば、ポロクサマー407 、ポロクサマー235 、ポロクサマー188 など) 、エチレンジアミンのポリオキシエチレン-ポリオキシプロピレンブロックコポリマー付加物（例えば、ポロキサミン）、モノラウリル酸ＰＯＥ(20)ソルビタン（ポリソルベート20) 、モノオレイン酸ＰＯＥ(20)ソルビタン (ポリソルベート80) などのＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類、ＰＯＥ(60)硬化ヒマシ油などのＰＯＥ硬化ヒマシ油、ＰＯＥ(9) ラウリルエーテルなどのＰＯＥアルキルエーテル類、ＰＯＥ(20)ＰＯＰ(4) セチルエーテルなどのＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類、ＰＯＥ(10)ノニルフェニルエーテルなどのＰＯＥアルキルフェニルエーテル類などの非イオン性界面活性剤；アルキルジアミノエチルグリシンなどのグリシン型、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタインなどの酢酸ベタイン型、イミダゾリン型などの両性界面活性剤；ＰＯＥ(10)ラウリルエーテルリン酸ナトリウムなどのＰＯＥアルキルエーテルリン酸及びその塩、ラウロイルメチルアラニンナトリウムなどのＮ−アシルアミノ酸塩、アルキルエーテルカルボン酸塩、Ｎ−ココイルメチルタウリンナトリウムなどのＮ−アシルタウリン塩、テトラデセンスルホン酸ナトリウムなどのスルホン酸塩、ラウリル硫酸ナトリウムなどのアルキル硫酸塩、ＰＯＥ(3) ラウリルエーテル硫酸ナトリウムなどのＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩などの陰イオン界面活性剤；アルキルアミン塩、アルキル４級アンモニウム塩（塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウムなど）、アルキルピリジニウム塩（塩化セチルピリジニウム、臭化セチルピリジニウムなど）などの陽イオン界面活性剤などが挙げられる。なお、括弧内の数字は付加モル数を示す。
【００３２】
防腐剤、殺菌剤又は抗菌剤：例えば、ソルビン酸またはその塩（ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸ナトリウム、ソルビン酸トリクロカルバンなど）、パラオキシ安息香酸エステル（パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなど）、アクリノール、塩化メチルロザニリン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、臭化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン又はその塩、ポリヘキサメチレンビグアニド、アルキルポリアミノエチルグリシン、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、クロロブタノール、イソプロパノール、エタノール、フェノキシエタノール、リン酸ジルコニウムの銀などの担持体、チメロサール、デヒドロ酢酸、クロルキシレノール、クロロフェン、レゾルシン、チモール、ヒノキチオール、スルファミン、リゾチーム、ラクトフェリン、トリクロサン、８−ヒドロキシキノリン、ウンデシレン酸、カプリル酸、プロピオン酸、安息香酸、ハロカルバン、チアベンダゾール、ポリミキシンＢ、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン、２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン、ポリリジン、過酸化水素、塩化ポリドロニウム、Ｇｌｏｋｉｌｌ（商品名例えばＧｌｏｋｉｌｌＰＱ、ローディア社製）、ポリジアリルジメチルアンモニウムクロライド、ポリ[オキシエチレン（ジメチルイミニオ）エチレン−（ジメチルイミニオ）エトレンジクロリド]、ポリエチレンポリアミン・ジメチルアミンエピクロルヒドリン重縮合物（商品名例えばBusan1157、バックマン社製）など。
【００３３】
ｐＨ調整剤：例えば、無機酸（塩酸、硫酸、リン酸、ポリリン酸、ホウ酸など）、有機酸（乳酸、酢酸、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、シュウ酸、グルコン酸、フマル酸、プロピオン酸、酢酸、アスパラギン酸、イプシロン−アミノカプロン酸、グルタミン酸、アミノエチルスルホン酸など）、グルコノラクトン、酢酸アンモニウム、無機塩基（炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウムなど）、有機塩基（モノエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、トリイソプロパノールアミン、リジンなど）、ホウ砂、及びその薬理学的に許容される塩類など。
【００３４】
無機塩類：例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、塩化カルシウム、硫酸マグネシウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、チオ硫酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなど。
【００３５】
ｐＨ調整剤：例えば、塩酸、硫酸、乳酸、酢酸、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、シュウ酸、グルコン酸、フマル酸、プロピオン酸、酢酸、アスパラギン酸、イプシロンアミノカプロン酸、グルタミン酸、アミノエチルスルホン酸、リン酸、ポリリン酸、ホウ酸、グルコノラクトン、酢酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、モノエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、トリイソプロパノールアミン、リジン、ホウ砂等、及びその薬理学的に許容される塩類等。
【００３６】
等張化剤：例えば、グリセリン、プロピレングリコール等の多価アルコール、ブトウ糖，マンニトール，ソルビトール等の糖類等。
【００３７】
キレート剤：例えば、エデト酸、クエン酸、ポリリン酸、ヘキサメタリン酸、メタリン酸、アスコルビン酸、コハク酸、トリヒドロキシメチルアミノメタン、ニトリロトリ酢酸、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸等、及びその薬理学的に許容される塩類等。
【００３８】
水溶性高分子物質：例えば、ゼラチン、ポリアクリル酸及びその塩類、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、メチルビニルエーテル・無水マレイン酸共重合体、アルギン酸ナトリウム、ポリエチレンオキサイド、アラビアゴム、キサンタンガム、トラガントガム等。
【００３９】
多価アルコール：例えば、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコール等。
【００４０】
さらに、必要に応じて香料または清涼化剤、局所麻酔剤等を加えることができる。
【００４１】
本発明の局所適用製剤によれば、経口投与などの全身投与と異なり、他の循環への影響なしに迅速かつ効果的に角膜障害の予防を行うことができる。本発明製剤は、眼科用局所適用製剤に用いられる任意の剤形に製剤化することができ、点眼薬、洗眼薬、眼軟膏、コンタクトレンズ装着液のほか、コンタクトレンズ用剤などの形であってよい。ここで、「コンタクトレンズ用剤」とは、コンタクトレンズを保存、洗浄、消毒するための組成物である。本発明の製剤は、特に点眼薬や洗眼薬であることが好ましい。このような剤形にすることで、紫外線等に被曝する恐れがある場合や被曝後早期に、使用者自身が本発明製剤を角膜に適用することができ、角膜障害の予防をより効果的に行い、症状の発現を防止し、かつ進行を阻止することが可能となる。
【００４２】
本発明の局所適用製剤は必要に応じて、生体に許容される範囲内のｐＨ及び／または浸透圧に調節される。許容されるｐＨは、通常ｐＨ4.0〜9.0、好ましくは4.5〜8.5、特に好ましくは4.5〜8.0である。浸透圧は、１００〜１２００ｍＯｓｍ、好ましくは１００〜６００、特に好ましくは１５０〜４００程度であり、生理食塩液に対する浸透圧比は、通常、０．３〜４．１、好ましくは０．３〜２．１、特に好ましくは０．５〜１．６程度である。ｐＨや浸透圧の調節は、既述のｐＨ調整剤、等張化剤、塩類等を用いて、当該技術分野で既知の方法で行うことができる。
【００４３】
点眼薬や洗眼薬は、蒸留水または精製水等の適当な希釈剤中で、テルペノイドと任意の配合成分とを混合して、上記の浸透圧及びｐＨに調整し、無菌環境下、ろ過滅菌処理し、洗浄滅菌済みの容器に無菌充填することにより製造できる。眼軟膏は、通常用いられる眼軟膏用基剤中にテルペノイドと任意の配合成分とを混和し、常法に従って無菌的に調製することができる。眼軟膏用の基剤としては、ワセリン、ゼレン５０、プラスチベース、マクロゴール等が例示され、更に親水性を高めることを目的として界面活性剤を加えることができる。
【００４４】
また、本発明は、有効成分としてテルペノイドを含有するアポトーシス抑制剤の関するものである。かかるアポトーシス抑制剤に配合するテルペノイドの種類、配合割合などは、本発明の局所適用製剤に関する前述の記載に従って行うことができる。かかるアポトーシス抑制剤は、角膜上皮細胞のみならず、外界に接した細胞や組織に適用することができる。
【００４５】
【実施例】
以下に、試験例および実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。
試験例１紫外線照射ウサギ角膜上皮細胞に対する保護作用（ＤＮＡ染色法）
テルペノイドの角膜保護作用を下記に記載の方法に従い、角膜上皮細胞のアポトーシス抑制効果に基づいて検討した。
方法）ウサギ角膜上皮細胞（NRCE2、クラボウ（株））を96穴マイクロプレートに播種し（2500 cells/well）、37℃、5% CO₂で5日間、無血清培地（RCGM2、クラボウ（株））で予備培養を行った。90％コンフレントになった細胞に上記無血清培地で段階希釈したｌ−メントールを添加した（処置群）。対照群には無血清培地のみを添加した。直ちに1000mJ/cm²のＵＶ（ＵＶ-Ｂ、302nm）を２０分間かけて照射しアポトーシスDye（APOPercentage dye, Biocolor, Ltd.)を細胞に添加し１時間反応させた。１時間後にアルカリ液(APOPercentage dye release reagent, Biocolor, Ltd.)によりアポトーシス細胞特異的に取り込まれた色素を抽出し、540nmの吸光度を測定し、その値をアポトーシスの指標とした。
【００４６】
結果）表１において、縦軸は対照群でのアポトーシス指標を100とした場合の処置群でのアポトーシス指標の割合（％）を示している。表1に示すように、対照群に比べてｌ−メントール添加群では、0.001%以上で濃度依存的なアポトーシスの抑制傾向が認められた。
【００４７】
【表１】

【００４８】
試験例２紫外線照射ウサギ角膜上皮細胞に対する保護作用（コメットアッセイ法）
テルペノイドの角膜保護作用を下記に記載の方法に従い、角膜上皮細胞のアポトーシス抑制効果に基づいて検討した。
方法）ウサギ角膜上皮細胞（NRCE2、クラボウ（株））を無血清培地（ＲＣＧＭ２、クラボウ（株））中に8×10⁵cells/mlに分散した細胞浮遊液と試験液を用いてＣｏｍｍｅｔＡｓｓａｙＫｉｔ（販売：Ｒ&Ｄ社）を用いて電気泳動を行い移動距離を測定した。詳細には、細胞浮遊液20μlと試験液90μlと１％low melting agarose90μlを混合した液とを混和した。混和液50μlをコメットスライドガラスにコーティング（1000cells／スライド）し、4℃で10分間放置した。トランスルイミネーターを用いてＵＶ−Ｂ（302ｎｍ）を500mJ/cm²照射した後、溶液A（Lysis solution 40mlにDMSO 400μlを混合し、ｐH10.0に調整した溶液）に60分間浸漬し、溶液B（300ｍM NaOH、1ｍM EDTA、ｐH13.0となるよう調整した溶液）に２０分間浸漬してDNAを抽出した。この液を用いて20分間電気泳動した後、DNAを染色した後、蛍光顕微鏡を用いて観察して、DNAの移動距離を測定した。
【００４９】
【表２】

【００５０】
表１に示すように、ｌ−メントール添加群では、ＵＶ照射によるＤＮＡ破壊が29.4％抑制されていることが認められ、ｌ−メントールによってアポトーシスが抑制されていることが示された。
【００５１】
試験例１及び２の実験結果から、ｌ−メントールがＵＶ曝露後の角膜上皮細胞におけるアポトーシスを抑制することが確認できた。角膜上皮細胞のアポトーシスはＵＶ誘発角膜炎の第一段階である。これらの結果は、テルペノイドがＵＶ曝露後の角膜上皮細胞におけるアポトーシスを抑制することにより角膜障害をその発生初期段階で抑制する作用を有し、角膜保護剤として有用であることを示すものである。さらに、試験例１及び２の実験結果から、テルペノイドはＵＶ等による角膜上皮障害の予防的処置に有効であることが確認された。これらの結果はまた、本発明の局所適用製剤を用いると、通常ならば重篤な角膜障害を引き起こす紫外線に曝露された場合であっても、その症状をより軽微なものに抑制できることを示している。
【００５２】
実施例１−８
常法により、以下の表に記載の処方の点眼薬を調製した。
【００５３】
【表３】

【００５４】
【発明の効果】
本発明のテルペノイドを含有する局所適用製剤は、紫外線等の光線に被曝する前から被曝後、好ましくは被曝前から被曝後早期段階に適用することにより、角膜障害の発生を予防し、進行を阻止し、眼痛などの発現を抑制する作用を示す。本発明の局所適用製剤は、適用形態が簡便であるために、様々な場面で広範に利用することができ、紫外線のみならず種々の光線により惹起され得る角膜障害の迅速で適切な処置を可能にするという利点を有する。
本発明のテルペノイドを含有するアポトーシス抑制剤は、細胞組織が紫外線等の光線に被曝する前から被曝後、好ましくは被曝前から被曝後早期段階に適用することにより、組織障害の発生を予防し、進行を阻止する作用を示す。本発明のアポトーシス抑制剤は、適用形態が簡便であるために、様々な場面で広範に利用することができ、紫外線のみならず種々の光線により惹起され得る組織障害の迅速で適切な処置を可能にするという利点を有する。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a topical preparation containing a terpenoid, and more specifically, a composition for preventing corneal damage by protecting the cornea by topical application, and protecting the cornea from damage caused by light rays such as ultraviolet rays using the composition. Related to the method.
[0002]
[Prior art]
In recent years, the destruction of the ozone layer due to changes in the global environment has increased the chances that living bodies are exposed to strong ultraviolet rays, and has various effects including sunburn. On the other hand, the eye is also an organ that is directly affected by light rays such as ultraviolet rays. In particular, the cornea exposed to the outside world is always exposed to light rays such as ultraviolet rays.
[0003]
The degree of corneal damage due to exposure to ultraviolet rays and other rays varies depending on the dose received, etc., but it appears in a relatively short time of several hours after exposure in the surface layer of the corneal epithelium or 12 hours or more in the deep part of the corneal epithelium. Some begin to occur gradually after a lapse and reach a peak in about 24 hours.
In addition, when intense ultraviolet rays are received at a time during sports such as skiing, corneal epithelial disorder occurs over a wide range. In addition, this may cause severe corneal disorders such as keratitis such as ultraviolet ophthalmitis (so-called snow blindness, snow eye flame, and snow) and corneal ulcers. On the other hand, the damage the cornea suffers from repeated exposure to less intense UV light cannot be ignored.
Therefore, in order to prevent the occurrence of corneal damage due to ultraviolet rays, it is most important to treat subjects who may be exposed to ultraviolet rays in an appropriate manner regardless of the presence or absence of symptoms.
[0004]
The mechanism by which the cornea is damaged has not yet been fully elucidated, but recently it is related to abnormal apoptosis caused by an abnormal apoptotic signal emitted to corneal epithelial cells by exposure to ultraviolet rays (UV). It is said that you are doing. Apoptosis of corneal epithelial cells caused by UV exposure affects the entire cornea, and even in the absence of subjective symptoms, corneal tissue is said to have many voids formed by the loss of apoptotic cells. Yes. When such cell death increases, subjective symptoms such as eye discomfort and pain may appear, and an external stimulus such as rubbing the eye may be applied to develop corneal disorders such as inflammation.
[0005]
Therefore, for corneal damage caused by light rays such as ultraviolet rays, it is extremely important to prevent the occurrence of corneal epithelial damage and to suppress the progression of corneal epithelial damage at an early stage, which is suitable for such treatment. Development of safe, stable and effective drugs is eagerly desired.
[0006]
Conventionally, as a corneal disorder treatment / prevention agent, one having lecithinized superoxide dismutase as an active ingredient is known (Patent Document 1). However, the preparation described in Patent Document 1 uses an enzyme as an active ingredient and is difficult to supply as a stable preparation for topical application. A corneal disorder therapeutic agent comprising a phosphoric diester compound of ascorbic acid and tocopherol is also provided (Patent Document 2). However, the preparation described in Patent Document 2 may not be able to stably maintain the effect due to decomposition of active ingredients and adsorption to containers.
[0007]
[Patent Document 1]
JP-A-9-124505
[0008]
[Patent Document 2]
Japanese Unexamined Patent Publication No. 7-291870
[0009]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a topical preparation for preventing the occurrence of corneal epithelial damage mainly by exposure to light such as ultraviolet rays and suppressing the progression of corneal epithelial damage.
Another object of the present invention is to provide an apoptosis inhibitor for corneal epithelial cells.
[0010]
[Means for Solving the Problems]
As a result of diligent research, the present inventors have found that when a composition containing a terpenoid is locally applied, damage to the corneal epithelium due to light rays such as ultraviolet rays can be prevented and the cornea can be protected. It came to be completed.
That is, the present invention provides a topical preparation for preventing corneal injury characterized by containing a terpenoid as an active ingredient.
The present invention also provides an apoptosis inhibitor for corneal epithelial cells containing terpenoid as an active ingredient.
That is, the present invention
(1) A topical preparation for preventing corneal injury characterized by containing a terpenoid,
(2) The topical preparation according to (1), wherein the corneal disorder is caused by light;
(3) Topically applied preparation for suppressing the occurrence of ultraviolet ophthalmitis containing terpenoid,
(4) The topical application preparation according to (1) to (3), wherein the terpenoid is at least one selected from the group consisting of menthol, borneol and camphor,
(5) an apoptosis inhibitor containing a terpenoid,
(6) The apoptosis inhibitor according to (5), wherein the terpenoid is at least one selected from the group consisting of menthol, borneol and camphor,
It is about.
[0011]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
For the purpose of the present invention, “preventing corneal injury” means preventing the occurrence of corneal epithelial injury and suppressing the progression of corneal epithelial injury and corneal injury, which is a subjective symptom. It has nothing to do with. The degree of corneal epithelial damage when exposed to light or the like varies depending on the dose and the site, and the speed of progression of the damage varies. Symptoms of corneal disorders become more serious as the number of corneal epithelial cells that die within a short period of time increases, and the burden on the patient also increases. Therefore, even when cells are exposed to a light beam corresponding to a lethal dose, treatment that suppresses rapid cell death is effective. Accordingly, the prevention of corneal injury in the present invention includes all treatments for preventing light and the like from having a lethal effect on cells and reducing corneal injury, such as prevention, symptom reduction / reduction, symptoms This includes treatment at every stage and phase, such as diminishing / stopping the progression of. Therefore, the topical preparation of the present invention has a function as a corneal protective agent.
[0012]
Prevention of corneal damage in the present invention is effective for preventing lethal damage to corneal epithelial cells by light rays such as ultraviolet rays, preventing corneal epithelial damage induced by cell death and corneal damage, and suppressing progression.
Causes of corneal epithelial disorder according to the present invention include ultraviolet rays and the like, for example, sunlight, welding light, germicidal lamp, laser beam, etc., but the topical preparation of the present invention is effective regardless of the cause. . The topical preparation of the present invention is particularly effective in the treatment for damage caused by light such as ultraviolet rays.
[0013]
The topical preparation of the present invention enables appropriate treatment of corneal disorders by incorporating a terpenoid. Conventionally, terpenoids have been used as cooling agents in topical agents such as ophthalmic compositions, but it has not been known that this can be an active ingredient in topical formulations for the treatment of corneal disorders.
[0014]
The topical preparation of the present invention can contain any terpenoid that is ophthalmically acceptable, for example, monoterpenes such as menthol, borneol, camphor, geraniol, cineol, anethole, limonene, eugenol, farnesol, nerolidol And diterpenes such as phytol and semblene. Of these, menthol, borneol, camphor and the like are preferable. These terpenoids may be any of d-form, l-form and dl-form, and can also be blended as an essential oil containing these terpenoids.
The concentration of the terpenoid in the topical preparation of the present invention varies depending on the type and dosage form of the terpenoid, but the terpenoid concentration is preferably in the range of 0.0005 to 1% by weight, and in the case of eye drops, 0.001 to 0.5% by weight. %, In the case of eye wash, it is more preferably in the range of 0.001 to 0.2% by weight.
The topical preparation of the present invention can be applied before and after exposure to ultraviolet rays or the like. An appropriate amount of the preparation can be applied to both eyes at any number of times from about 1 hour before exposure to ultraviolet light or the like to about 24 hours after the final exposure. It is preferable to apply between about 24 hours after exposure before exposure. The amount applied is about 0.2 ml for both eyes in the case of eye drops, about 10 ml for both eyes for eye wash, and about 0.1 g for both eyes in the case of eye ointment. More preferably, corneal damage due to exposure to ultraviolet rays or the like can be prevented or reduced by instilling 1 to 2 drops at a time and 5 to 6 times a day. However, the application time, the number of applications, the amount applied, etc. of the topical preparation of the present invention should be adjusted as appropriate according to the type and intensity of the exposed light, etc., and the situation (symptoms, age, etc.) of the exposed subject. However, the present invention is not limited to the above.
The topical preparation of the present invention can prevent the occurrence of corneal epithelial disorder and prevent corneal disorders such as ultraviolet blepitis.
[0015]
The present invention also applies a topical preparation containing terpenoids to both eyes before exposure to subjects who may be exposed to light rays such as ultraviolet rays, and within about 24 hours after exposure to exposed subjects. The present invention relates to a method for preventing corneal injury.
[0016]
The topical preparation of the present invention can contain various components other than terpenoids in combination as long as they do not contradict the purpose of the present invention. Examples of components that can be combined include, for example, a decongestant component, an anti-inflammatory component, an antihistamine component, another astringent component, a bactericidal component, an antitumor component, a hormone, a protein or peptide, a vitamin, Amino acids and the like can be used. Specifically, the following components can be exemplified.
[0017]
Decongestant: epinephrine, ephedrine, tetrahydrozoline, naphazoline, phenylephrine, methylephedrine and their salts.
[0018]
Eye muscle modulator component: cholinesterase inhibitor having an active center similar to acetylcholine, for example, quaternary ammonium compounds such as neostigmine methyl sulfate and salts thereof.
[0019]
Anti-inflammatory components: for example, zinc sulfate, zinc lactate, celecoxib, rofecoxib, indomethacin, diclofenac, pranoprofen, piroxicam, meloxicam, epsilon-aminocaproic acid, berberine, azulene sulfonic acid, glycyrrhizin Acid, lysozyme, methyl salicylate, allantoin and pharmacologically acceptable salts (for example, berberine chloride, berberine sulfate, sodium diclofenac, sodium azulenesulfonate, dipotassium glycyrrhizinate, lysozyme chloride, etc.) and the like.
[0020]
Antihistamine components: for example, diphenhydramine, chlorpheniramine, iproheptin, ketotifen, emedastine, clemastine, azelastine, levocabastine, olopatadine, cromoglycic acid, amlexanox, mequitazine, loratadine, fexofenine (f) , Ibudilast, suplatast, pemirolast, and pharmacologically acceptable salts (eg, diphenhydramine hydrochloride, chlorpheniramine maleate, iproheptin hydrochloride, ketotifen fumarate, emedastine fumarate, clemastine fumarate, azelastine hydrochloride, levocabastine hydrochloride, hydrochloric acid) Olopatadine, sodium cromoglycate, etc.).
[0021]
Bactericidal component: for example, sulfonamides (eg, sulfamethoxazole, sulfisoxazole, sulfisomidine and pharmacologically acceptable salts (sulfamethoxazole sodium, sulfisomidine sodium, etc.), Acrinol, quaternary ammonium compounds (eg, benzalkonium, benzethonium, cetylpyridinium and pharmacologically acceptable salts (benzalkonium chloride, benzethonium chloride, cetylpyridinium chloride, cetylpyridinium bromide, etc.), alkylpolyaminoethyl Glycine, new quinolone (lomefloxacin, levofloxacin, ciprofloxacin hydrochloride, ofloxacin, norfloxacin, etc.)
[0022]
Vitamin: for example, vitamin A (for example, retinal, retinol, retinoic acid, carotene, dehydroretinal, lycopene and pharmacologically acceptable salts thereof (for example, retinol acetate, retinol palmitate, etc.)), vitamin B (E.g. thiamine, thiamine disulfide, dicetiamine, octothiamine, chicotiamine, bisbutiamine, bisbenchamine, prosultiamine, benfotiamine, fursultiamine, riboflavin, flavin adenine dinucleotide, pyridoxine, pyridoxal, hydroxocobalamin, Cyanocobalamin, methylcobalamin, deoxyadenocobalamin, folic acid, tetrahydrofolic acid, dihydrofolic acid, nicotinic acid, nicotinamide, nicotinic alcohol, pantothenic acid, bread Nord, biotin, choline, inositol and pharmacologically acceptable salts thereof (for example, thiamine hydrochloride, thiamine nitrate, dicetiamine hydrochloride, fursultiamine hydrochloride, riboflavin butyrate, sodium flavin adenine dinucleotide, pyridoxine hydrochloride, phosphate) Pyridoxal, pyridoxal calcium phosphate, hydroxocobalamin hydrochloride, hydroxocobalamin acetate, calcium pantothenate, sodium pantothenate, etc.), vitamin Cs (ascorbic acid and derivatives thereof, erythorbic acid and derivatives thereof and pharmacologically acceptable Salts such as sodium ascorbate and sodium erythorbate, etc. and vitamin Ds such as ergocalciferol, cholecalciferol, hydroxycholecalcifero Vitamin Es (for example, tocopherol and derivatives thereof, ubiquinone derivatives and pharmacologically acceptable salts thereof, such as tocopherol acetate, dihydroxycholecalciferol, dihydrotaxosterol and pharmacologically acceptable salts thereof) Other vitamins such as carnitine, ferulic acid, γ-oryzanol, orotic acid, cyanocobalamin, rutin, eriocitrin, hesperidin and their pharmacologically, such as tocopherol nicotinate, tocopherol succinate and calcium tocopherol succinate))) Acceptable salts (such as carnitine chloride).
[0023]
Amino acids: for example, leucine, isoleucine, valine, methionine, threonine, alanine, phenylalanine, tryptophan, lysine, glycine, asparagine, aspartic acid, serine, glutamine, glutamic acid, proline, tyrosine, cysteine, histidine, ornithine, hydroxyproline, hydroxy Lysine, glycylglycine, aminoethylsulfonic acid (taurine) and pharmacologically acceptable salts thereof (for example, potassium aspartate, magnesium aspartate, cysteine hydrochloride, etc.) and the like.
Sugars: monosaccharides (eg glucose), disaccharides (eg trehalose, lactose, fructose etc.), oligosaccharides (eg lactulose, raffinose, pullulan etc.), cellulose or derivatives thereof (eg methylcellulose, ethylcellulose, hydroxyethylcellulose) , Hydroxypropylcellulose, carboxymethylcellulose, carboxyethylcellulose, nitrocellulose, etc.), high molecular sugars (eg, chondroitin sulfate, hyaluronic acid) and pharmacologically acceptable salts thereof (eg, sodium chondroitin sulfate, sodium hyaluronate) ), Sugar alcohols (eg, mannitol, xylitol, sorbitol, etc.), antipruritic ingredients (crotamiton, ictamol, moctamol, thymol acid, etc.), etc.
[0024]
Other components: polyvinyl alcohol (completely or partially saponified product), polyvinylpyrrolidone, etc.
[0025]
The content of these components can be selected according to the type of preparation, the type of active ingredient, etc., for example, from 0.0001 to 30%, preferably from about 0.001 to 10% with respect to the whole preparation. You can choose. More specifically, each component can be contained in the topical preparation of the present invention in the amounts exemplified below.
[0026]
Eye muscle modulator component: For example, 0.0001 to 0.5%, preferably 0.0002 to 0.1%.
Anti-inflammatory component or astringent component: for example 0.001-10%, preferably 0.002-3%.
Antihistamine component: For example, 0.0001 to 10%, preferably 0.001 to 5%.
Bactericidal component: for example 0.001 to 10%, preferably 0.01 to 5%
Vitamins: For example, 0.0001 to 1%, preferably 0.001 to 0.3%.
Amino acids: For example, 0.0001 to 10%, preferably 0.001 to 3%.
[0027]
The topical preparation of the present invention is formulated by arbitrarily selecting and using various ingredients and additives used for pharmaceuticals, quasi drugs, etc., as long as the effects of the present invention are not impaired. It is possible. Although a specific example is given below, it is not limited to this.
[0028]
Sugars: for example, glucose, fructose, galactose, mannose, ribose, ribulose, arabinose, xylose, lyxose, deoxyribose, maltose, trehalose, sucrose, cellobiose, lactose, pullulan, lactulose, raffinose, maltitol and the like Acceptable salts.
[0029]
Thickeners: for example, polysaccharides or derivatives thereof (gum arabic, karaya gum, xanthan gum, carob gum, guar gum, guaiac fat, quince seed, dalman gum, tragacanth, benzoin gum, locust bean gum, casein, agar, alginic acid, dextrin, dextran, Carrageenan, gelatin, collagen, pectin, starch, polygalacturonic acid, chitin and its derivatives, chitosan and its derivatives, elastin, heparin, heparinoid, heparin sulfate, heparan sulfate, hyaluronic acid, chondroitin sulfate, etc., ceramide, cellulose derivative (methylcellulose) , Ethylcellulose, hydroxyethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, carboxymethylcellulose, Ruboxyethyl cellulose, cellulose, etc.), polyvinyl alcohol (completely or partially saponified product), polyvinyl pyrrolidone, macrogol, polyvinyl methacrylate, polyacrylic acid, carboxyvinyl polymer, polyethyleneimine, ribonucleic acid, deoxyribonucleic acid, and the like Physically acceptable salts.
[0030]
Sugars: for example, glucose, fructose, galactose, mannose, ribose, ribulose, arabinose, xylose, lyxose, deoxyribose, maltose, trehalose, sucrose, cellobiose, lactose, pullulan, lactulose, raffinose, maltitol and the like Acceptable salts.
[0031]
Surfactant: For example, polyoxyethylene (POE) -polyoxypropylene (POP) block copolymer (for example, Poloxamer 407, Poloxamer 235, Poloxamer 188, etc.), polyoxyethylene-polyoxypropylene block copolymer adduct of ethylenediamine (for example, , Poloxamine), POE sorbitan fatty acid esters such as POE (20) sorbitan monolaurate (polysorbate 20), POE (20) sorbitan monooleate (polysorbate 80), POE cured castor oil such as POE (60) castor oil POE alkyl ethers such as POE (9) lauryl ether, POE / POP alkyl ethers such as POE (20) POP (4) cetyl ether, POE alkyl phenyl ethers such as POE (10) nonylphenyl ether, etc. I On-active surfactant; Glycine type such as alkyldiaminoethyl glycine, amphoteric surfactant such as betaine acetate type such as lauryldimethylaminoacetic acid betaine, imidazoline type; POE alkyl ether phosphorus such as POE (10) sodium lauryl ether phosphate Acids and salts thereof, N-acyl amino acid salts such as sodium lauroylmethylalanine, alkyl ether carboxylates, N-acyl taurine salts such as N-cocoylmethyl taurine sodium, sulfonates such as sodium tetradecenesulfonate, lauryl sulfate Anionic surfactants such as alkyl sulfates such as sodium, POE (3) POE alkyl ether sulfates such as sodium lauryl ether sulfate, α-olefin sulfonates; alkylamine salts, alkyl quaternary ammonium salts And cationic surfactants such as benzalkonium chloride and benzethonium chloride and alkylpyridinium salts such as cetylpyridinium chloride and cetylpyridinium bromide. The numbers in parentheses indicate the number of added moles.
[0032]
Preservatives, bactericides or antibacterial agents: for example, sorbic acid or a salt thereof (such as sorbic acid, potassium sorbate, sodium sorbate, triclocarban sorbate), paraoxybenzoic acid ester (methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate, Propyl paraoxybenzoate, butyl paraoxybenzoate, etc.), acrinol, methylrosaniline chloride, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, cetylpyridinium chloride, cetylpyridinium bromide, chlorhexidine or its salts, polyhexamethylene biguanide, alkylpolyaminoethylglycine, benzyl Alcohol, phenethyl alcohol, chlorobutanol, isopropanol, ethanol, phenoxyethanol, zirconium phosphate silver support, thimerosal, Hydroacetic acid, chloroxylenol, chlorophene, resorcin, thymol, hinokitiol, sulfamine, lysozyme, lactoferrin, triclosan, 8-hydroxyquinoline, undecylenic acid, caprylic acid, propionic acid, benzoic acid, halocarban, thiabendazole, polymyxin B, 5- Chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one, 2-methyl-4-isothiazolin-3-one, polylysine, hydrogen peroxide, polydronium chloride, Glokill (trade name such as Glokill PQ, Rhodia), polydiallyl Dimethylammonium chloride, poly [oxyethylene (dimethyliminio) ethylene- (dimethyliminio) etylene dichloride], polyethylene polyamine / dimethylamine epichlorohydrin Things (trade name, for example Busan1157, manufactured by Buckman Co., Ltd.), and the like.
[0033]
pH adjusters: For example, inorganic acids (hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, polyphosphoric acid, boric acid, etc.), organic acids (lactic acid, acetic acid, citric acid, tartaric acid, malic acid, succinic acid, oxalic acid, gluconic acid, fumaric acid , Propionic acid, acetic acid, aspartic acid, epsilon-aminocaproic acid, glutamic acid, aminoethylsulfonic acid, etc.), gluconolactone, ammonium acetate, inorganic base (sodium bicarbonate, sodium carbonate, potassium hydroxide, sodium hydroxide, hydroxide) Calcium, magnesium hydroxide, etc.), organic bases (monoethanolamine, triethanolamine, diisopropanolamine, triisopropanolamine, lysine, etc.), borax, and pharmacologically acceptable salts thereof.
[0034]
Inorganic salts: For example, sodium chloride, potassium chloride, sodium carbonate, sodium hydrogen carbonate, calcium chloride, magnesium sulfate, sodium hydrogen phosphate, disodium hydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, sodium thiosulfate, sodium acetate and the like.
[0035]
pH adjuster: for example, hydrochloric acid, sulfuric acid, lactic acid, acetic acid, citric acid, tartaric acid, malic acid, succinic acid, oxalic acid, gluconic acid, fumaric acid, propionic acid, acetic acid, aspartic acid, epsilon aminocaproic acid, glutamic acid, aminoethyl Sulfonic acid, phosphoric acid, polyphosphoric acid, boric acid, gluconolactone, ammonium acetate, sodium bicarbonate, sodium carbonate, potassium hydroxide, sodium hydroxide, calcium hydroxide, magnesium hydroxide, monoethanolamine, triethanolamine, Diisopropanolamine, triisopropanolamine, lysine, borax, etc., and pharmacologically acceptable salts thereof.
[0036]
Isotonizing agents: For example, polyhydric alcohols such as glycerin and propylene glycol, saccharides such as butter sugar, mannitol and sorbitol.
[0037]
Chelating agents: for example, edetic acid, citric acid, polyphosphoric acid, hexametaphosphoric acid, metaphosphoric acid, ascorbic acid, succinic acid, trihydroxymethylaminomethane, nitrilotriacetic acid, 1-hydroxyethane-1,1-diphosphonic acid, and the like Pharmacologically acceptable salts and the like.
[0038]
Water-soluble polymer substances: for example, gelatin, polyacrylic acid and its salts, polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, carboxyvinyl polymer, sodium carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxyethylcellulose, methylcellulose, ethylcellulose, methylvinylether / anhydrous Maleic acid copolymer, sodium alginate, polyethylene oxide, gum arabic, xanthan gum, gum tragacanth and the like.
[0039]
Polyhydric alcohol: For example, glycerin, sorbitol, propylene glycol, polyethylene glycol, 1,3-butylene glycol, ethylene glycol and the like.
[0040]
Furthermore, a fragrance | flavor or a cooling agent, a local anesthetic, etc. can be added as needed.
[0041]
According to the topical preparation of the present invention, unlike systemic administration such as oral administration, corneal injury can be prevented promptly and effectively without affecting other circulations. The preparation of the present invention can be formulated into any dosage form used for topical ophthalmic preparations, and is in the form of eye drop, eye wash, eye ointment, contact lens mounting liquid, contact lens preparation, etc. It's okay. Here, the “contact lens agent” is a composition for storing, cleaning, and disinfecting a contact lens. The preparation of the present invention is particularly preferably an eye drop or an eye wash. By adopting such a dosage form, when there is a risk of exposure to ultraviolet rays or the like, or at an early stage after exposure, the user himself can apply the preparation of the present invention to the cornea, and more effectively prevent corneal damage. It is possible to prevent the onset of symptoms and prevent progression.
[0042]
The topical preparation of the present invention is adjusted to a pH and / or osmotic pressure within a range acceptable to a living body as necessary. The acceptable pH is usually pH 4.0 to 9.0, preferably 4.5 to 8.5, particularly preferably 4.5 to 8.0. The osmotic pressure is about 100 to 1200 mOsm, preferably about 100 to 600, particularly preferably about 150 to 400, and the osmotic pressure ratio with respect to physiological saline is usually 0.3 to 4.1, preferably 0.3 to 2. 1, particularly preferably about 0.5 to 1.6. The adjustment of pH and osmotic pressure can be performed by a method known in the art using the aforementioned pH adjusting agent, tonicity agent, salts and the like.
[0043]
Eye drops and eyewashes are prepared by mixing terpenoids and optional ingredients in a suitable diluent such as distilled water or purified water, adjusting to the above osmotic pressure and pH, and subjecting to filtration sterilization in an aseptic environment. And can be manufactured by aseptically filling a container that has been sterilized by washing. The eye ointment can be prepared aseptically by mixing a terpenoid and an optional compounding component in a commonly used eye ointment base, and according to a conventional method. Examples of the base for eye ointment include petrolatum, zelene 50, plastibase, macrogol and the like, and a surfactant can be added for the purpose of further improving hydrophilicity.
[0044]
The present invention also relates to an apoptosis inhibitor containing a terpenoid as an active ingredient. The kind of terpenoid blended in the apoptosis inhibitor, the blending ratio, and the like can be determined according to the above description regarding the topical preparation of the present invention. Such an apoptosis inhibitor can be applied not only to corneal epithelial cells but also to cells and tissues in contact with the outside world.
[0045]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in detail based on test examples and examples, but the present invention is not limited thereto.
Test Example 1 Protective effect on UV-irradiated rabbit corneal epithelial cells (DNA staining method)
The corneal protective action of terpenoids was examined based on the inhibitory effect on apoptosis of corneal epithelial cells according to the method described below.
Method) Rabbit corneal epithelial cells (NRCE2, Kurabo Industries) are seeded in a 96-well microplate (2500 cells / well), 37 ° C, 5% CO ₂ And pre-cultured in serum-free medium (RCGM2, Kurabo Industries) for 5 days. 1-menthol serially diluted with the above serum-free medium was added to the cells that became 90% confluent (treatment group). Only the serum-free medium was added to the control group. Immediately 1000mJ / cm ² UV (UV-B, 302 nm) was irradiated for 20 minutes, and apoptotic dye (APOPercentage dye, Biocolor, Ltd.) was added to the cells and allowed to react for 1 hour. One hour later, a dye specifically incorporated into apoptotic cells was extracted with an alkaline solution (APOPercentage dye release reagent, Biocolor, Ltd.), the absorbance at 540 nm was measured, and the value was used as an indicator of apoptosis.
[0046]
Results) In Table 1, the vertical axis represents the ratio (%) of the apoptosis index in the treatment group when the apoptosis index in the control group is 100. As shown in Table 1, in the l-menthol addition group, a concentration-dependent inhibition tendency of apoptosis was observed at 0.001% or more as compared with the control group.
[0047]
[Table 1]

[0048]
Test Example 2 Protective action against UV-irradiated rabbit corneal epithelial cells (comet assay)
The corneal protective action of terpenoids was examined based on the inhibitory effect on apoptosis of corneal epithelial cells according to the method described below.
Method) Rabbit corneal epithelial cells (NRCE2, Kurabo Corp.) in serum-free medium (RCGM2, Kurabo Corp.) 8 × 10 ^Five Electrophoresis was performed using Comme Assay Kit (sold by R & D) using the cell suspension and test solution dispersed in cells / ml, and the movement distance was measured. Specifically, 20 μl of cell suspension, 90 μl of test solution, and 90 μl of 1% low melting agarose were mixed. 50 μl of the mixture was coated on a comet glass slide (1000 cells / slide) and left at 4 ° C. for 10 minutes. Using a transluminator, UV-B (302 nm) is 500 mJ / cm ² After irradiation, immerse in solution A (solution adjusted to pH 10.0 by mixing DMSO 400 μl in Lysis solution 40 ml) for 60 minutes and solution B (solution adjusted to 300 mM NaOH, 1 mM EDTA, pH 13.0) For 20 minutes to extract DNA. After electrophoresis for 20 minutes using this solution, the DNA was stained and then observed using a fluorescence microscope to measure the distance of DNA movement.
[0049]
[Table 2]

[0050]
As shown in Table 1, in the l-menthol addition group, it was recognized that DNA destruction by UV irradiation was suppressed by 29.4%, indicating that apoptosis was suppressed by l-menthol.
[0051]
From the experimental results of Test Examples 1 and 2, it was confirmed that l-menthol suppressed apoptosis in corneal epithelial cells after UV exposure. Apoptosis of corneal epithelial cells is the first stage of UV-induced keratitis. These results indicate that terpenoids have an action of suppressing corneal damage at an early stage of development by suppressing apoptosis in corneal epithelial cells after UV exposure, and are useful as a corneal protective agent. Furthermore, from the experimental results of Test Examples 1 and 2, it was confirmed that terpenoids are effective for preventive treatment of corneal epithelial damage by UV or the like. These results also show that the topical formulation of the present invention can be used to control the symptoms to a lesser degree even when exposed to UV radiation that would normally cause severe corneal damage. Yes.
[0052]
Example 1-8
Ophthalmic solutions having the formulations shown in the following table were prepared by a conventional method.
[0053]
[Table 3]

[0054]
【The invention's effect】
The topical preparation containing the terpenoid of the present invention is applied before exposure after exposure to light such as ultraviolet rays, preferably before exposure and at an early stage after exposure, thereby preventing the occurrence of corneal damage and preventing progression. And it shows the action of suppressing the expression of eye pain and the like. Since the topical preparation of the present invention has a simple application form, it can be widely used in various scenes, and enables rapid and appropriate treatment of corneal disorders that can be caused by various rays as well as ultraviolet rays. Has the advantage of
The apoptosis inhibitor containing the terpenoid of the present invention prevents the occurrence of tissue damage by applying the cell tissue before exposure to light such as ultraviolet rays after exposure, preferably from before exposure to an early stage after exposure, Shows the action to prevent progression. The apoptosis inhibitor of the present invention can be widely used in various scenes because of its simple application form, and enables rapid and appropriate treatment of tissue damage that can be caused by various light rays as well as ultraviolet rays. Has the advantage of

Claims

A prophylactic agent for ultraviolet ophthalmitis comprising at least one terpenoid selected from the group consisting of menthol, borneol and camphor as an active ingredient.

The prophylactic agent according to claim 1, wherein the ultraviolet ophthalmia is a dream.

The prophylactic agent according to claim 1 or 2, wherein the pH is 4.5 to 8.0.

The preventive agent according to any one of claims 1 to 3, which is an eye drop having a terpenoid concentration of 0.001 to 0.5% by weight.

The preventive agent according to any one of claims 1 to 3, which is an eye wash having a terpenoid concentration of 0.001 to 0.2% by weight.

An inhibitor of apoptosis of corneal epithelial cells by ultraviolet irradiation, comprising as an active ingredient at least one terpenoid selected from the group consisting of menthol, borneol and camphor.

A preventive agent for ultraviolet ophthalmitis, comprising at least one terpenoid selected from the group consisting of menthol, borneol and camphor.