JP4508958B2 - Method for producing γ-aminobutyric acid-containing composition - Google Patents

Method for producing γ-aminobutyric acid-containing composition Download PDF

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Description

本発明は、アスパラガスからγ−アミノ酪酸含有組成物の製造方法に関するものである。   The present invention relates to a method for producing a γ-aminobutyric acid-containing composition from asparagus.

γ−アミノ酪酸(以下、GABAと略す。)は生物界に微量ながら広く存在する非タンパク質構成アミノ酸であり、ヒトにおいては脳内で神経伝達物質として働くことが知られている。食品素材としてのGABAは血圧降下作用、精神安定作用、脳機能改善作用、更年期障害症状緩和作用、中性脂肪増加抑制作用等の健康維持意識の高い現代人にとって有効な生理作用を有している。その上、GABAはヒトが多量に摂取しても副作用が無いので、安全性の面でも有利であり、食事療法が効果的な生活習慣病、特に高血圧症を予防する成分として食品に付加させる開発が多くなされている。   γ-aminobutyric acid (hereinafter abbreviated as GABA) is a non-protein-constituting amino acid that exists widely in the living world, but is known to act as a neurotransmitter in the brain in humans. GABA as a food material has effective physiological effects for modern people with high health maintenance awareness, such as blood pressure lowering action, tranquilizing action, brain function improving action, climacteric symptom mitigating action, neutral fat increase suppressing action, etc. . In addition, GABA has no side effects even when taken in large quantities by humans, so it is advantageous in terms of safety, and development that is added to food as an ingredient to prevent lifestyle-related diseases, particularly hypertension, where diet is effective. There have been many.

そのようなものとして、米胚芽、米糠、小麦胚芽などの中に元来含まれる酵素の作用を利用してGABA富化穀物を製造する技術(例えば、特許文献1及び2参照)、トマト、カボチャ等の野菜などの中に含まれる酵素の作用を利用してGABA富化組成物を製造する技術(例えば、特許文献3〜5参照)、GABAを乳酸菌や麹菌などの微生物に生産させる技術(例えば、特許文献6〜8参照)、茶葉を嫌気処理することによってGABA含量の高い茶葉を製造する技術(例えば、特許文献9参照)などが報告されている。   As such, technologies for producing GABA-enriched grains using the action of enzymes originally contained in rice germ, rice bran, wheat germ, etc. (see, for example, Patent Documents 1 and 2), tomatoes, pumpkins Technology for producing a GABA-enriched composition using the action of an enzyme contained in vegetables such as vegetables (see, for example, Patent Documents 3 to 5), technology for producing GABA in microorganisms such as lactic acid bacteria and koji molds (for example, Patent Documents 6 to 8), and a technique for producing tea leaves having a high GABA content by anaerobic treatment of tea leaves (for example, see Patent Document 9) has been reported.

また、工業的にはγ−ハロゲノ酪酸のアミノ化やピロリドンの加水分解によって製造されている。その他、グルタミン酸を出発原料としてグルタミン酸デカルボキシラーゼによってGABAに変換する方法も開示されている。   Industrially, it is produced by amination of γ-halobutyric acid or hydrolysis of pyrrolidone. In addition, a method of converting glutamic acid into GABA by glutamic acid decarboxylase using a starting material is also disclosed.

一方、アスパラガスは、繊維質が豊富でカロリーの低い野菜であり、全国で年間約28000tが収穫されている他、海外からの輸入も盛んである。国内で収穫量の多い都道府県としては、長野県、北海道、佐賀県、福島県、香川県、長崎県、秋田県などが挙げられる。これまで、アスパラガスには食物繊維の他、アスパラギン酸、ビタミンU(メチルメチオニン)、ルチン、葉酸、サポニン類などの有用成分が多く含まれていることが知られていた。   On the other hand, asparagus is a vegetable that is rich in fiber and low in calories, and about 28,000 tons are harvested annually throughout the country, and imports from overseas are also popular. Prefectures with high yields in Japan include Nagano Prefecture, Hokkaido, Saga Prefecture, Fukushima Prefecture, Kagawa Prefecture, Nagasaki Prefecture, and Akita Prefecture. Until now, it has been known that asparagus contains many useful components such as aspartic acid, vitamin U (methylmethionine), rutin, folic acid, and saponins in addition to dietary fiber.

このような中、アスパラガスにGABAが含まれているとの報告は知られていなかったが、アスパラガスが他の野菜と比較しても非常に多量のGABAを含有することを見出し、本発明者らが既に報告している(特願2004−301557号)。   Under such circumstances, it has not been known that asparagus contains GABA, but it has been found that asparagus contains a very large amount of GABA even when compared with other vegetables. Have already reported (Japanese Patent Application No. 2004-301557).

また、アスパラガスの内在酵素を利用することによってグルタミン酸及び/又はグルタミン酸塩を効果的にGABAに変換できることも見出し、本発明者らが既に報告している(特願2005−164107号)。
特許第2590423号公報 特開2004−159617号公報 特公平7−12296号公報 特公平7−14333号公報 特開2001−252091号公報 特開2001−352940号公報 特開2003−70462号公報 特開平11−103825号公報 特許第3038373号公報
Further, it has also been found that glutamic acid and / or glutamate can be effectively converted to GABA by utilizing an endogenous enzyme of asparagus, and the present inventors have already reported (Japanese Patent Application No. 2005-164107).
Japanese Patent No. 2590423 JP 2004-159617 A Japanese Examined Patent Publication No. 7-12296 Japanese Patent Publication No. 7-14333 JP 2001-252091 A JP 2001-352940 A JP 2003-70462 A JP-A-11-103825 Japanese Patent No. 3038373

しかしながら、GABAを摂取して上記のような効果を得るためには成人で1日約26mgのGABAを摂取する必要があるといわれているが、従来これだけの量のGABAを摂取することは困難であった。例えば、特許文献6には米胚芽中のGABA含量を350〜400mg/100gにまで増加させる技術が開示されているが、米全体に対する米胚芽の量は2〜3%であることから胚芽米全体では12〜13mg/100gにしかならないことになる。米は高カロリーな食物であり、GABAを摂取したいがために胚芽米を多く摂取するとカロリーの過剰摂取から肥満や糖尿病になる恐れもあった。   However, in order to obtain the above effects by ingesting GABA, it is said that it is necessary for adults to ingest about 26 mg of GABA per day. However, it has been difficult to ingest such a large amount of GABA in the past. there were. For example, Patent Document 6 discloses a technique for increasing the GABA content in rice germ to 350 to 400 mg / 100 g, but the amount of rice germ relative to the whole rice is 2 to 3%. Then, it will be only 12-13 mg / 100g. Rice is a high-calorie food, and if you want to eat GABA, if you consume a lot of germ rice, you may become obese or diabetic due to excessive intake of calories.

また、発芽玄米の製造は、玄米を水に長時間浸漬する工程を含むため、雑菌の繁殖が問題になり、製造中に雑菌の数は108個/ml以上にまでなるといわれている。そのため、清浄度の維持や殺菌に多大なコストと労力がかかっていた。 In addition, since the production of germinated brown rice includes a step of immersing brown rice in water for a long time, the propagation of germs becomes a problem, and the number of germs is said to be 10 8 / ml or more during production. For this reason, a great deal of cost and labor has been required to maintain cleanliness and sterilization.

また、特許文献9に開示されている茶葉の嫌気処理ではGABAの増加率はせいぜい2倍〜3倍にしかならなかった。   In addition, in the anaerobic treatment of tea leaves disclosed in Patent Document 9, the increase rate of GABA was only 2 to 3 times at most.

アスパラガスのGABA含量は前記のような原料と比較すると非常に多いが、まだまだ十分に多い含量ではなく、またアスパラガス自体の商品価値が高くコストが高くなる問題があった。   The GABA content of asparagus is much higher than that of the raw materials as described above, but there is still a problem that the asparagus itself has a high commercial value and a high cost because it is not sufficiently high.

本発明はこのような状況に鑑みなされたものであり、効率よく簡便でしかも経済的な操作によってGABAを含有する組成物を製造する方法を提供することを目的とするものである。   The present invention has been made in view of such circumstances, and an object of the present invention is to provide a method for producing a composition containing GABA by an efficient, simple and economical operation.

本発明者らは上記した課題について鋭意検討した結果、アスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分に先端部分や中央部分と比較して多量のGABAが存在することを見出し、この部分を原料とすることでGABAが高含量で含有される組成物が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。 As a result of intensive studies on the above-mentioned problems, the present inventors have found that a large amount of GABA is present at a portion 25 cm or more away from the tip of the asparagus young shoot compared to the tip portion and the central portion, and this portion is used as a raw material. As a result, it was found that a composition containing a high GABA content was obtained, and the present invention was completed.

すなわち本発明は、アスパラガスを処理してγ−アミノ酪酸含有組成物を得る方法において、アスパラガスとして、アスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分を少なくとも50質量%用いることを特徴とするγ−アミノ酪酸含有組成物の製造方法を要旨とするものである。 That is, the present invention is characterized in that, in the method for obtaining a γ-aminobutyric acid-containing composition by treating asparagus, at least 50% by mass is used as the asparagus at a portion 25 cm or more away from the tip of the young asparagus stem. The gist of the method for producing a γ-aminobutyric acid-containing composition.

本発明によれば、GABA含有組成物を効率よく経済的な操作により容易に得ることができる。また、本発明の方法により得られたGABA含有組成物は、飲食品に含ませることで、GABAの作用により、血圧降下、リラックス、ストレス緩和、更年期障害症状改善、不眠改善、利尿、腎機能改善、肝機能改善等の効果が期待できる。また、前記のような効果に加え、GABA含有組成物に含まれるアミノ酸の作用により、疲労回復、脂肪燃焼、美肌等の効果が期待できるものである。   According to the present invention, a GABA-containing composition can be easily obtained efficiently and economically. In addition, the GABA-containing composition obtained by the method of the present invention can be contained in food and drink, so that the action of GABA reduces blood pressure, relaxes, relieves stress, improves menopausal symptoms, improves insomnia, diuresis, improves renal function In addition, effects such as improvement of liver function can be expected. In addition to the effects as described above, effects such as fatigue recovery, fat burning, and skin beautification can be expected by the action of amino acids contained in the GABA-containing composition.

以下、本発明を詳細に説明する。   Hereinafter, the present invention will be described in detail.

本発明で用いられるアスパラガスは、本発明の効果を損なうものでない限りいかなるものでもよい。アスパラガスには日光に当てて栽培するグリーンアスパラガス、土などで遮光しながら栽培するホワイトアスパラガス、細く短いうちに刈り取りを行うミニアスパラガス、グリーンアスパラガスとは別種で紫色を呈するムラサキアスパラガスなどがある。これらの中ではグリーンアスパラガス、ムラサキアスパラガスが好ましく、グリーンアスパラガスが特に好ましい。産地は特に限定されず、国産でも海外からの輸入品でもよい。品種は多様であるが、特に限定されず例えば、ウェルカム、メリーワシントン、北海100、マラソン、ぜんゆう、UC157、グリーンタワー、バイトル、キャンドル、ナイアガラ、UC800、ポールトム、ハイデル、フルート、フランクリン、ガインリム、セトグリーン、ヒロシマグリーン、グリーンフレッチェ等が好ましく、ウェルカム、メリーワシントン、グリーンタワー、ナイアガラ、ガインリムが特に好ましい。使用する部位は若茎が好ましく、特に根元部分はGABA含量が多いために好ましい。本発明で用いられるアスパラガスは前記のようなアスパラガスを1種類単独で用いてもよいし、2種類以上を組み合わせて用いてもよい。アスパラガスはそのまま使用してもよいし、破砕、切断、凍結乾燥、脱水などの処理を行った後に使用してもよい。   The asparagus used in the present invention may be any as long as it does not impair the effects of the present invention. Asparagus is green asparagus grown under sunlight, white asparagus cultivated while shading with soil, etc., mini asparagus that cuts in a thin and short period, and purple asparagus that is different from green asparagus. and so on. Among these, green asparagus and murasakia paragas are preferable, and green asparagus is particularly preferable. The production area is not particularly limited, and it may be domestically produced or imported from overseas. Variety is diverse, but not particularly limited, for example, Welcome, Mary Washington, North Sea 100, Marathon, Zenyu, UC157, Green Tower, Vitre, Candle, Niagara, UC800, Paul Tom, Heidel, Flute, Franklin, Gainrim, Seto Green, Hiroshima Green, Green Frecce and the like are preferable, and Welcome, Mary Washington, Green Tower, Niagara and Gain Rim are particularly preferable. The part to be used is preferably a young stem, and particularly the root part is preferred because of its high GABA content. Asparagus used in the present invention may be one kind of asparagus as described above, or two or more kinds may be used in combination. Asparagus may be used as it is, or may be used after processing such as crushing, cutting, freeze-drying and dehydration.

本発明においては、アスパラガスとして、アスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分を少なくとも50質量%用いることを特徴とするものである。本発明において、アスパラガス若茎とは、一般に食用とされる部分であり、地下茎から伸びる新芽のことをいう。 In the present invention, as asparagus, at least 50% by mass of a portion 25 cm or more away from the tip of the young asparagus stem is used. In the present invention, the asparagus stalk is a part that is generally edible and refers to a sprout that extends from the underground stalk.

また、本発明におけるアスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分は、一般的にアスパラガス若茎を食用として刈り取り、商品として長さを揃えた時に排出される切りカスとなる部分である。一般的なアスパラガス若茎は収穫時に先端から25cmから40cmほど離れた根元部分を切断し、その後各地域の農業共同組合の商品規格に沿って先端から22cm〜32cmの長さに切り揃えられることが慣例となっている。商品の長さに切り揃えられた後にはこの根元部分が大量に排出され、穂先部分に比べてGABA含量も非常に多いため、本発明のGABA含有組成物の原料としては好適なものである。また、ミニアスパラガスのような短いアスパラガスの場合は上記の規格とは異なることから、根元部分とは地表から−3〜10cm、好ましくは0〜5cm、さらに好ましくは0〜3 cmである。 In addition, the portion 25 cm or more away from the tip of the asparagus young shoot in the present invention is a portion that becomes a cut residue that is discharged when the asparagus young shoot is generally cut for food and the length is adjusted as a product. General asparagus young shoots are cut at the root part 25cm to 40cm away from the tip at the time of harvesting, and then cut to a length of 22cm to 32cm from the tip according to the product standards of the local agricultural cooperatives. Has become customary. After being trimmed to the length of the product, a large amount of this root portion is discharged, and the GABA content is much higher than that of the tip portion. Therefore, it is suitable as a raw material for the GABA-containing composition of the present invention. Moreover, in the case of short asparagus like mini asparagus, since it differs from said specification, it is -3-10 cm from a ground surface, Preferably it is 0-5 cm, More preferably, it is 0-3 cm.

また、本発明においては、上記したアスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分を少なくとも50質量%を用いることを必須とするものである。好ましく75質量%以上、さらに好ましくは90質量%以上用いるものである。アスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分以外としては、穂先から25cm以上離れた部分以外のうち、中でも、曲がり、細身、色悪、穂先の開き等で選別漏れとなった若茎を使用することが製造コスト面からは好ましい。アスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分の原料のアスパラガス中に占める割合が50質量%より低いと、取り出されたGABAの含量が少なくなるとともに、商品価値のある若茎先端部を使用すると製造コストが高くなるため採用できない。 In the present invention, it is essential to use at least 50% by mass of the portion 25 cm or more away from the tip of the asparagus young shoot described above. It is preferably 75% by mass or more, more preferably 90% by mass or more. As for the parts other than the part that is 25 cm or more away from the tip of the asparagus young shoot, among the parts that are more than 25 cm away from the tip , among other things, use the young stem that has been selected due to bending, slenderness, bad color, opening of the tip, etc. It is preferable from the viewpoint of manufacturing cost. When the proportion of raw material in the asparagus that is 25 cm or more away from the tip of the asparagus young stem is less than 50% by mass, the content of the extracted GABA is reduced and the tip of the young stem with commercial value is used. Then, since manufacturing cost becomes high, it cannot employ | adopt.

本発明の製造方法は、上記したアスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分を少なくとも50質量%以上用いてGABAを取り出すものであり、GABAを取り出す方法としては、水抽出、溶媒抽出、圧搾、酵素分解、超臨界抽出などが挙げられる。 In the production method of the present invention, GABA is extracted by using at least 50% by mass or more of a portion 25 cm or more away from the tip of the above-mentioned asparagus young shoot, and as a method for extracting GABA, water extraction, solvent extraction, pressing , Enzymatic degradation, supercritical extraction and the like.

上記したGABAを取り出す操作においては、アスパラガスをそのまま使用してもよいし、予め細断したアスパラガスを使用しても構わない。細断は、物理的にアスパラガスを細かく破砕する方法であり、使用する装置、機器、方法などは本発明の効果を損なわない限りいかなるものでもよい。アスパラガスの細断は包丁やカッターナイフ、ハサミなどを用いて手作業で行っても良いが、大量のアスパラガスを短時間で処理しようとする場合には装置を使用する。そのような装置としては、例えば、ミキサー、ブレンダー、ミル、ハンマー式粉砕機などが挙げられ、また野菜用の細断機を用いてもよい。   In the above-described operation for taking out GABA, asparagus may be used as it is, or asparagus that has been shredded in advance may be used. Shredding is a method of physically crushing asparagus finely, and any apparatus, device, method, etc. may be used as long as the effects of the present invention are not impaired. Asparagus shredding may be performed manually using a knife, cutter knife, scissors, or the like, but an apparatus is used to process a large amount of asparagus in a short time. Examples of such an apparatus include a mixer, a blender, a mill, a hammer-type pulverizer, and a vegetable shredder.

細断に供するアスパラガスは室温に置かれていてもよいし、凍結したものでもよいが、冷却機能の無い装置を用いる場合は、有効成分の分解を防ぐため凍結あるいは冷却したものを用いることが好ましい。   Asparagus to be shredded may be placed at room temperature or frozen, but when using a device without a cooling function, it should be frozen or cooled to prevent decomposition of the active ingredient. preferable.

細断されたアスパラガスの大きさは特に限定されないが、2cm以下が好ましく、5mm以下がより好ましい。   The size of the chopped asparagus is not particularly limited, but is preferably 2 cm or less, and more preferably 5 mm or less.

次に、上記したアスパラガスからGABAを取り出す操作について説明する。   Next, an operation for extracting GABA from the above asparagus will be described.

水抽出は、水を加えてそこに成分を溶出させる方法である。加える水の量は特に限定されないが、アスパラガス(水分を含む重量)に対して0.01〜100倍量が好ましく、0.5〜5倍量がより好ましい。水の量が0.01倍より少ないと抽出効率が落ち、100倍より多いと薄い抽出液しか得られず後に濃縮操作が必要になる場合がある。また、使用する水の温度は0℃〜100℃が好ましく、10℃〜80℃がより好ましい。水の温度が0℃より低い場合には抽出効率が低下する傾向があり、抽出温度が100℃より高い場合には有用成分が分解してしまうおそれが生じる。また、水は蒸留水、脱イオン水、上水などでもよいし、一定量の塩を溶解したもの、緩衝液でもよい。この時の塩の種類としては、食品に添加できるものであり本発明の効果を損なうもので無ければ特に限定されないが、好ましくは塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、炭酸アンモニウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、硫酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、リン酸水素2ナトリウム、リン酸2水素ナトリウム、リン酸水素2カリウム、リン酸2水素カリウム、リン酸水素2アンモニウム、リン酸2水素アンモニウム、安息香酸ナトリウム、クエン酸1カリウム、クエン酸3カリウム、クエン酸3ナトリウム、コハク酸1ナトリウム、コハク酸2ナトリウム、乳酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム、グルタミン酸カリウム、アスパラギン酸ナトリウム、リジン塩酸塩などが挙げられる。緩衝液としては、トリズマ塩基、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液などが好ましく、調整するpHは2.0〜11.0が好ましく、3.0〜8.0がより好ましい。また、塩、緩衝液の濃度は0.01%〜50%が好ましく、0.1%〜20%がより好ましい。この範囲より低い場合は塩、緩衝液の効果を期待できない可能性があり、この範囲より高い場合は抽出効率の低下、味の低下を招く可能性がある。   Water extraction is a method in which water is added to elute components. The amount of water to be added is not particularly limited, but is preferably 0.01 to 100 times, more preferably 0.5 to 5 times the amount of asparagus (weight including water). When the amount of water is less than 0.01 times, the extraction efficiency is lowered, and when it is more than 100 times, only a thin extract can be obtained and a concentration operation may be required later. Moreover, 0 to 100 degreeC is preferable and the temperature of the water to be used has more preferable 10 to 80 degreeC. When the temperature of water is lower than 0 ° C, the extraction efficiency tends to decrease, and when the extraction temperature is higher than 100 ° C, there is a possibility that useful components are decomposed. The water may be distilled water, deionized water, clean water or the like, or may be a solution in which a certain amount of salt is dissolved or a buffer solution. The kind of salt at this time is not particularly limited as long as it can be added to food and does not impair the effects of the present invention, but preferably sodium chloride, ammonium chloride, potassium chloride, calcium chloride, magnesium chloride, ammonium carbonate , Sodium carbonate, sodium bicarbonate, calcium carbonate, magnesium carbonate, sodium acetate, ammonium acetate, ammonium sulfate, sodium sulfate, magnesium sulfate, disodium hydrogen phosphate, sodium dihydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, dihydrogen phosphate Potassium, ammonium dihydrogen phosphate, ammonium dihydrogen phosphate, sodium benzoate, 1 potassium citrate, 3 potassium citrate, 3 sodium citrate, 1 sodium succinate, 2 sodium succinate, sodium lactate, malic acid Thorium, sodium glutamate, potassium glutamate, sodium aspartate, such as lysine hydrochloride salts. As the buffer solution, trizma base, phosphate buffer solution, acetate buffer solution, citrate buffer solution, succinate buffer solution and the like are preferable, and the pH to be adjusted is preferably 2.0 to 11.0, and 3.0 to 8. 0 is more preferable. Further, the salt and buffer concentrations are preferably 0.01% to 50%, more preferably 0.1% to 20%. If it is lower than this range, the effects of salt and buffer may not be expected. If it is higher than this range, extraction efficiency and taste may be reduced.

溶媒抽出は、アルコール類、炭化水素類、脂質類等の有機溶媒を用いて抽出する方法であり、使用する有機溶媒は特に限定されず、単独で用いてもよいし、他の溶媒と混合して使用してもよいし、水と混合して使用してもよい。好ましい有機溶媒の例としては、エタノール、メタノール、プロパノール、ブタノール、ヘキサン、アセトン、グリセリン、プロピレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、エチルエーテル、メチルエチルケトン、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N,N−ジメチルホルムアミド(DMF)、N,N−ジメチルアセトアミド(DMAC)が挙げられ、さらに好ましくは、エタノール、ヘキサン、アセトン、DMSO、グリセリンが挙げられる。加える有機溶媒の量は有機溶媒の種類にもより特に限定されないが、アスパラガスに対して0.01〜100倍量が好ましく、0.5倍〜5倍がより好ましい。有機溶媒の量が0.01倍より少ないと抽出効率が落ち、100倍より多いと薄い抽出液しか得られず後に濃縮操作が必要になる場合がある。また、使用する有機溶媒の温度は−20℃〜200℃が好ましく、0℃〜120℃がより好ましい。有機溶媒の温度が−20℃より低い場合には抽出効率が低下する傾向があり、抽出温度が200℃より高い場合には有効成分が分解してしまうおそれが生じる。   Solvent extraction is a method of extraction using an organic solvent such as alcohols, hydrocarbons and lipids, and the organic solvent to be used is not particularly limited, and may be used alone or mixed with other solvents. May be used in combination with water. Examples of preferred organic solvents include ethanol, methanol, propanol, butanol, hexane, acetone, glycerin, propylene glycol, ethylene glycol, polyethylene glycol, propylene glycol fatty acid ester, polyethylene glycol fatty acid ester, ethyl ether, methyl ethyl ketone, dimethyl sulfoxide (DMSO ), N, N-dimethylformamide (DMF), N, N-dimethylacetamide (DMAC), and more preferably ethanol, hexane, acetone, DMSO, and glycerin. The amount of the organic solvent to be added is not particularly limited by the type of the organic solvent, but is preferably 0.01 to 100 times, more preferably 0.5 to 5 times the amount of asparagus. When the amount of the organic solvent is less than 0.01 times, the extraction efficiency is lowered, and when it is more than 100 times, only a thin extract can be obtained and a concentration operation may be required later. Moreover, the temperature of the organic solvent to be used is preferably -20 ° C to 200 ° C, more preferably 0 ° C to 120 ° C. When the temperature of the organic solvent is lower than −20 ° C., the extraction efficiency tends to decrease, and when the extraction temperature is higher than 200 ° C., the active ingredient may be decomposed.

上記の水又は有機溶媒で抽出を行う時間は特に限定されず、1分〜48時間行うことが好ましく、5分〜4時間行うことがより好ましい。抽出を行う時間がこの範囲より短いと十分にGABAをはじめとする有効成分が抽出できない傾向があり、この範囲より長くしても抽出量の増加は期待できず、雑菌などの増殖のリスクが増えるだけである。   The time for performing the extraction with water or an organic solvent is not particularly limited, and it is preferably 1 minute to 48 hours, more preferably 5 minutes to 4 hours. If the extraction time is shorter than this range, there is a tendency that active ingredients such as GABA cannot be sufficiently extracted. Even if the extraction time is longer than this range, an increase in the extraction amount cannot be expected, and the risk of proliferation of germs increases. Only.

圧搾とは、アスパラガスに物理的な圧力をかけて、液を搾り出し、GABAを搾汁に移行せしめる方法である。圧力は一方向のみにかけてもよいし、二以上の方向からかけてもよく、せん断力を伴わせることもできる。圧搾の操作は市販の圧搾機を用いれば容易であるが、手搾り、足踏み搾りなど機械を用いない方法で行ってもよい。このとき、アスパラガスに水や湯を加えて圧搾してもよい。水や湯を加える量としては、アスパラガスに対して0.01〜100倍量が好ましく、0.5〜5倍量がより好ましい。水の量が0.01倍より少ないと抽出効率が落ち、100倍より多いと薄い抽出液しか得られず後に濃縮操作が必要になる場合がある。また、湯の温度は30℃〜100℃が好ましく、40℃〜80℃がより好ましい。   Squeezing is a method in which physical pressure is applied to asparagus to squeeze the liquid and transfer GABA to the juice. The pressure may be applied only in one direction, may be applied from two or more directions, and may be accompanied by a shearing force. Although the operation of pressing is easy if a commercially available pressing machine is used, it may be performed by a method that does not use a machine such as hand pressing or stepping. At this time, water or hot water may be added to asparagus and squeezed. The amount of water or hot water to be added is preferably 0.01 to 100 times, more preferably 0.5 to 5 times the amount of asparagus. When the amount of water is less than 0.01 times, the extraction efficiency is lowered, and when it is more than 100 times, only a thin extract can be obtained and a concentration operation may be required later. Moreover, 30 to 100 degreeC is preferable and the temperature of hot water has more preferable 40 to 80 degreeC.

酵素分解は、アスパラガスに酵素を作用させた後、固液分離してGABAをろ液に移行せしめる方法である。ここで酵素としては、本発明の効果を損なわない限り、特に限定されないが、食品用途として使用することを考慮すれば、食品用に使用できる酵素が好ましい。酵素の種類としては、特に限定されないが、アスパラガスの繊維質、ペクチン、多糖類などを分解し、効率良くGABAを取り出せるために、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ、キシラナーゼ、アラビナーゼ、アラバナーゼ、アミラーゼ、グルカナーゼ、デキストラナーゼなどが、蛋白質を分解し、遊離アミノ酸を多く回収するために、プロテアーゼ、ペプチダーゼなどが、グルタミン酸をGABAに変換するために、グルタミン酸デカルボキシラーゼなどが、グルタミンをグルタミン酸に変換するために、グルタミナーゼなどが使用できる。本発明における酵素分解においては、上記した酵素を一種類だけ用いてもよいし、二種以上を同時に又は連続して用いてもよい。   Enzymatic decomposition is a method in which an enzyme is allowed to act on asparagus and then separated into solid and liquid to transfer GABA to a filtrate. Here, the enzyme is not particularly limited as long as the effect of the present invention is not impaired, but an enzyme that can be used for food is preferable in consideration of use for food. The type of enzyme is not particularly limited, but cellulase, hemicellulase, pectinase, xylanase, arabinase, arabanase, amylase, glucanase, etc. in order to decompose GABA, pectin, polysaccharides, etc. In order for dextranase to degrade proteins and recover many free amino acids, protease, peptidase, etc. to convert glutamic acid to GABA, glutamic acid decarboxylase, etc. to convert glutamine to glutamic acid Glutaminase and the like can be used. In the enzymatic degradation in the present invention, only one kind of the above-described enzymes may be used, or two or more kinds may be used simultaneously or successively.

酵素分解を行うことによって、本来不溶性の繊維質が分解し、水溶性食物繊維として回収できる効果、繊維質を分解することで組織が破砕され、GABAやアミノ酸の回収率が高くなる効果、蛋白質を分解することによりアミノ酸の回収率が高くなる効果、グルタミン酸の回収率が高くなった結果、グルタミン酸から変換されるGABAの回収率が高くなる効果、グルタミナーゼやグルタミン酸デカルボキシラーゼなどの酵素を作用させることでGABAの回収率が高くなる効果などを得ることができる。   By performing enzymatic degradation, inherently insoluble fiber is degraded and can be recovered as water-soluble dietary fiber, tissue can be crushed by degrading the fiber, GABA and amino acids can be recovered more efficiently, The effect of increasing the recovery rate of amino acids by decomposition, the recovery rate of glutamic acid being increased, the effect of increasing the recovery rate of GABA converted from glutamic acid, and the action of enzymes such as glutaminase and glutamate decarboxylase The effect of increasing the GABA recovery rate can be obtained.

セルラーゼとしては、例えば新日本化学工業(株)製のスミチームAC、スミチームAC−LIQUID、スミチームC、エイチ・ビイ・アイ(株)製のセルロシンAC50、セルロシンAL、セルロシンT2、天野製薬(株)製のセルラーゼA“アマノ”3、セルラーゼT“アマノ”4、ヤクルト薬品工業(株)製のセルラーゼ“オノズカ”R−10、セルラーゼ“オノズカ”RS、洛東化成工業(株)製のエンチロンCM、エンチロンMCHなどが挙げられ、これらの中でもスミチームAC、セルロシンT2、エンチロンMCHが好ましく、セルロシンT2、エンチロンMCHが特に好ましい。   Examples of cellulases include Sumiteam AC, Sumiteam AC-LIQUID, Sumiteam AC, Cellulosin AC50, Cellulosin AL, Cellulosin T2, and Amano Pharmaceutical Co., Ltd., manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd. Cellulase A “Amano” 3, Cellulase T “Amano” 4, Cellulase “Onozuka” R-10, Yakult Pharmaceutical Co., Ltd., Cellulase “Onozuka” RS, Enchilon CM, Enchiron, manufactured by Toto Kasei Kogyo Co., Ltd. Among them, Sumiteam AC, cellulosin T2, and enchilon MCH are preferable, and cellulosin T2 and enchilon MCH are particularly preferable.

ヘミセルラーゼとしては、例えば新日本化学工業(株)製のスミチームACH、スミチームACH−LIQUID、スミチームX、天野製薬(株)製のヘミセルラーゼ“アマノ”90Gなどが挙げられる。   As hemicellulase, for example, Sumiteam ACH, Sumiteam ACH-LIQUID, Sumiteam X, manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd., hemicellulase “Amano” 90G manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd. and the like can be mentioned.

ペクチナーゼとしては、例えば新日本化学工業(株)製のスミチームPX、スミチームAP2、スミチームAP2−LIQUID、スミチームPMAC、スミチームCXC、スミチームLC、スミチームMC、スミチームSPC、スミチームPTE、中性ペクチナーゼ、エイチ・ビイ・アイ(株)製のセルロシンPC5、セルロシンPE60、セルロシンPEL、セルロシンME、可溶性ペクチナーゼ、天野製薬(株)製のペクチナーゼA“アマノ”、ペクチナーゼG“アマノ”、ペクチナーゼGL“アマノ”、ペクチナーゼPL“アマノ”、ヤクルト薬品工業(株)製のマセロチームR−10、Novozyme製のPectinexUltraPC−Lなどが挙げられ、これらの中でもスミチームPX、セルロシンPC5、ペクチナーゼA“アマノ”が好ましく、スミチームPXが特に好ましい。   Examples of pectinase include Sumiteam PX, Sumiteam AP2, LIQUID, Sumiteam PMAC, Sumiteam CXC, Sumiteam LC, Sumiteam MC, Sumiteam SPC, Sumiteam PTE, Neutral pectinase, H.B. Cellulosine PC5, cellulosin PE60, cellulosin PEL, cellulosin ME, soluble pectinase manufactured by I Co., Ltd., pectinase A “Amano”, pectinase G “Amano”, pectinase GL “Amano”, pectinase PL “manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.” Amano ”, Macero Team R-10 manufactured by Yakult Yakuhin Kogyo Co., Ltd., Pectinex Ultra PC-L manufactured by Novozyme, etc., among them, Sumiteam PX, Cellulosin PC5, Pectinase Preferably "Amano" Sumizyme PX is particularly preferred.

アラビナーゼとしては、新日本化学工業(株)製のスミチームARS、Megazyme製のアラビナーゼが、キシラナーゼとしてはエイチ・ビイ・アイ(株)製のセルロシンTP25、セルロシンHC100、セルロシンHCが、アミラーゼとしては新日本化学工業(株)製のスミチームAS、スミチームL、スミチームL−L、スミチームA10、スミチームAH、エイチ・ビイ・アイ(株)製の液化酵素T、リクィファーゼL45、フクタミラーゼ50、オリエンターゼAO10、ハイマルトシンG、グルターゼ6000が、天野製薬(株)製のアミラーゼAD“アマノ”、ビオザイムA、ビオザイムF10SD、グルクザイムAF6、シルバラーゼ、ビオザイムM、大和化成(株)製のクライスターゼ、コクゲン、コクゲンTが、ナガセ生化学工業(株)製のスピターゼHS、スピターゼM、β−アミラーゼLなどが、グルカナーゼとしては大和化成(株)製のツニカーゼが、デキストラナーゼとしては三共(株)製のデキストラナーゼ2Fが挙げられる。   As the arabinase, Sumiteam ARS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd., arabinase manufactured by Megazyme, cellulosin TP25, cellulosin HC100, cellulosin HC manufactured by HB I Co., Ltd. as xylanase, and New Japan as amylase Sumiteam AS, Sumiteam L, Sumiteam L-L, Sumiteam A10, Sumiteam AH, liquefied enzyme T, liquefase L45, Fuctamirase 50, orientase AO10, Hymaltocin G, manufactured by Chemical Industry Co., Ltd. Glutase 6000 is Amylase AD “Amano” manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd., Biozyme A, Biozyme F10SD, Gluczyme AF6, Silvalase, Biozyme M, Christa, Kokugen, Kokugen T manufactured by Daiwa Kasei Co., Ltd. Susease HS, Spytase M, β-amylase L, etc. manufactured by Se Seikagaku Co., Ltd., tunicase manufactured by Daiwa Kasei Co., Ltd. as glucanase, and dextranase 2F manufactured by Sankyo Co., Ltd. as dextranase Is mentioned.

プロテアーゼとしては、酸性プロテアーゼ、中性プロテアーゼ、塩基性プロテアーゼのいずれでもよく、例えば、プロテナーゼK、新日本化学工業(株)製のスミチームMMR、スミチームAP、スミチームRP、スミチームMP、スミチームLP50、スミチームLPL、スミチームP、スミチームCP、スミチームTP、エイチ・ビイ・アイ(株)製のオリエンターゼ20A、オリエンターゼ90N、オリエンターゼ10NL、ヌクレイシン、オリエンターゼONS、オリエンターゼ22BF、天野製薬(株)製のウマミザイム、ニューセラーゼF、パパインW−40、パンクレアチンF、プロテアーゼA“アマノ”G、プロテアーゼM“アマノ”、プロテアーゼN“アマノ”、プロテアーゼS“アマノ”、ブロメラインF、大和化成(株)のサモアーゼ、プロチンA、プロチンP、デスキンCが挙げられ、これらの中でもスミチームLPL、スミチームOP、オリエンターゼ20A、パパインW−40が好ましい。   The protease may be any of acidic protease, neutral protease, and basic protease. For example, proteinase K, Sumiteam MMR, Sumiteam AP, Sumiteam RP, Sumiteam MP, Sumiteam LP50, and Sumiteam LPL manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd. , Sumiteam P, Sumiteam CP, Sumiteam TP, orientase 20A, orientase 90N, orientase 10NL, manufactured by HBI Eye Co., Ltd., Nucleicin, orientase ONS, orientase 22BF, Ummamizyme manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd. , Neucellase F, Papain W-40, Pancreatin F, Protease A “Amano” G, Protease M “Amano”, Protease N “Amano”, Protease S “Amano”, Bromelain F, Yamato Kasei ( Thermoase of), Protin A, Protin P, Desukin C and the like, among these Sumiteam LPL, sumizyme OP, Orientase synthetase 20A, Papain W-40 are preferred.

ペプチダーゼとしては、例えば新日本化学工業(株)のスミチームFP、天野製薬(株)製のペプチダーゼRが挙げられる。   Examples of the peptidase include Sumiteam FP manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd. and peptidase R manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.

グルタミナーゼとしては、新日本化学工業(株)製のスミチームOP、天野製薬(株)製のグルタミナーゼF“アマノ”100、大和化成(株)製のグルタミナーゼダイワ300Sが挙げられる。グルタミン酸デカルボキシラーゼは、市販のものはほとんど無く、あっても遺伝子組み換え技術を使用していて食品用途に使用するのが困難なものか、高価なものであることから、グルタミン酸デカルボキシラーゼを高生産する乳酸菌、酵母、麹菌などの微生物から、分離精製して使用するか、米胚芽、米糠などから分離精製して使用する方法を取ることができる。   Examples of the glutaminase include Sumiteam OP manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd., Glutaminase F “Amano” 100 manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd., and Glutaminase Daiwa 300S manufactured by Daiwa Kasei Co., Ltd. There are few commercially available glutamate decarboxylases, and even if they are genetically modified, they are difficult to use for food applications or expensive, so glutamate decarboxylase is highly produced. It can be used by separating and purifying from microorganisms such as lactic acid bacteria, yeast, and koji molds, or by separating and purifying from rice germ, rice bran and the like.

本発明において酵素分解を行うために使用する酵素の量は、酵素の種類、力価にもよるが、アスパラガスに対して0.0001質量%〜20質量%が好ましく、0.001質量%〜5質量%がより好ましい。この範囲よりも少ない場合には十分な酵素分解が期待できない問題があり、この範囲よりも多い場合にはもはや酵素分解の増加は期待できず、製品中に酵素による味質の変化を及ぼす問題がある。   In the present invention, the amount of the enzyme used for the enzymatic decomposition is preferably 0.0001% by mass to 20% by mass, more preferably 0.001% by mass to 5 mass% is more preferable. If it is less than this range, there is a problem that sufficient enzymatic degradation cannot be expected, and if it is more than this range, an increase in enzymatic degradation can no longer be expected, and there is a problem that changes the taste quality due to enzymes in the product. is there.

酵素分解を行う際の温度は、0℃〜80℃が好ましく、10℃〜60℃がより好ましい。この範囲より低い場合には酵素反応の進行が遅く、有効成分を抽出するために長い時間を要する傾向があり、この範囲より高い場合には酵素が失活してしまうおそれがある。   The temperature during the enzymatic decomposition is preferably 0 ° C to 80 ° C, more preferably 10 ° C to 60 ° C. If it is lower than this range, the progress of the enzyme reaction tends to be slow, and it takes a long time to extract the active ingredient. If it is higher than this range, the enzyme may be deactivated.

酵素分解を行う時間は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されないが、10分間〜48時間が好ましく、30分間〜24時間が好ましい。この範囲より短い場合には十分に酵素分解が進行しない傾向があり、この範囲より長くしてももはや有効成分の抽出量が多くなることは無い。また、酵素分解をより効果的に行うために、攪拌、振とうなどを行ってもよい。   The time for performing the enzymatic decomposition is not particularly limited as long as the effect of the present invention is not impaired, but is preferably 10 minutes to 48 hours, and more preferably 30 minutes to 24 hours. If it is shorter than this range, there is a tendency that the enzymatic degradation does not proceed sufficiently, and even if it is longer than this range, the amount of active ingredient extracted no longer increases. Moreover, in order to perform enzyme decomposition more effectively, you may perform stirring, shaking, etc.

超臨界抽出とは、二酸化炭素や水を気液臨界点以上の圧力、温度にし、分子運動の盛んな超臨界流体とせしめ、これを抽出溶媒として使用するものである。本発明においては、超臨界流体は二酸化炭素が好ましい。   In supercritical extraction, carbon dioxide or water is brought to a pressure and temperature above the gas-liquid critical point to make it a supercritical fluid with active molecular motion, and this is used as an extraction solvent. In the present invention, the supercritical fluid is preferably carbon dioxide.

超臨界抽出を行う際の温度は、31℃〜150℃が好ましく、31℃〜100℃がより好ましい。温度がこの範囲より高い場合、有用成分が分解する可能性があり、この範囲より低い場合、抽出効率が低下する問題がある。   The temperature during supercritical extraction is preferably 31 ° C to 150 ° C, more preferably 31 ° C to 100 ° C. When the temperature is higher than this range, there is a possibility that useful components are decomposed. When the temperature is lower than this range, there is a problem that the extraction efficiency is lowered.

また、超臨界抽出を行う際の圧力は、7MPa〜50MPaが好ましく、7MPa〜30MPaがより好ましい。圧力がこの範囲より高い場合、有用成分の分解やコスト高、安全性に問題があり、圧力がこの範囲より低い場合には抽出効率が低下する傾向がある。   Moreover, the pressure at the time of performing supercritical extraction is preferably 7 MPa to 50 MPa, and more preferably 7 MPa to 30 MPa. When the pressure is higher than this range, there is a problem in decomposition of useful components, high cost, and safety, and when the pressure is lower than this range, the extraction efficiency tends to decrease.

以上、説明したアスパラガスからGABAを取り出す水抽出、溶媒抽出、圧搾、酵素分解及び超臨界抽出の操作は、各々単独で行うこともできるし、二種以上の操作を組み合わせて行うこともできる。好ましい組み合わせとしては、水抽出及び又は圧搾と酵素分解の組み合わせが挙げられ、これらは同時に行っても、水抽出及び又は圧搾の後に酵素分解を行っても、酵素分解の後に水抽出及び又は圧搾を行っても良い。さらに、水抽出と酵素分解を同時に組み合わせる方法は、抽出効率の向上という観点から望ましい。   As described above, the operations of water extraction, solvent extraction, squeezing, enzymatic decomposition and supercritical extraction for extracting GABA from asparagus described above can be performed alone or in combination of two or more operations. Preferred combinations include a combination of water extraction and / or squeezing and enzymatic degradation, which may be performed simultaneously, water extraction and / or squeezing followed by enzymatic degradation, or water extraction and / or squeezing after enzymatic degradation. You can go. Furthermore, a method of combining water extraction and enzymatic degradation simultaneously is desirable from the viewpoint of improving extraction efficiency.

また、本発明においては、アスパラガスからGABAを取り出す際に、アスパラガスに内在する酵素の作用によりGABAを富化させる処理を行ってもよい。GABAは生体内でグルタミン酸からグルタミン酸デカルボキシラーゼによって作られており、アスパラガスに内在するこの酵素の働きを利用しようとするものである。   Moreover, in this invention, when taking out GABA from asparagus, you may perform the process which enriches GABA by the effect | action of the enzyme which exists in asparagus. GABA is produced from glutamic acid by glutamic acid decarboxylase in vivo, and attempts to utilize the action of this enzyme inherent in asparagus.

GABAをアスパラガスの内在酵素によって富化するには、アスパラガス及び/又はアスパラガス抽出物を内在酵素が作用することのできる環境に一定時間置く方法を取ることが好ましい。かかる環境における温度は10℃〜50℃が好ましく、20℃〜35℃がより好ましい。この範囲より温度が高いと内在酵素が失活する可能性があり、この範囲より低ければ内在酵素が効果的に働かない問題がある。   In order to enrich GABA with an endogenous enzyme of asparagus, it is preferable to take a method in which asparagus and / or asparagus extract is placed in an environment where the endogenous enzyme can act for a certain period of time. The temperature in such an environment is preferably 10 ° C to 50 ° C, more preferably 20 ° C to 35 ° C. If the temperature is higher than this range, the endogenous enzyme may be inactivated. If the temperature is lower than this range, there is a problem that the endogenous enzyme does not work effectively.

また、pHは好ましくは2.0〜10.0であり、さらに好ましくは2.5〜8.5である。この範囲を外れる場合、内在酵素が効果的に働かない可能性がある。またpHを調整するために、緩衝液を用いることもできる。緩衝液としては、トリズマ塩基、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液などが好ましく、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液が特に好ましい。   Moreover, pH becomes like this. Preferably it is 2.0-10.0, More preferably, it is 2.5-8.5. If it is out of this range, the endogenous enzyme may not work effectively. In order to adjust pH, a buffer solution can also be used. As the buffer solution, trizma base, phosphate buffer solution, acetate buffer solution, citrate buffer solution, succinate buffer solution and the like are preferable, and phosphate buffer solution and acetate buffer solution are particularly preferable.

富化処理を行う時間は特に限定されないが、1時間〜10日間が好ましく、6時間〜5日間がさらに好ましい。これ以上の時間処理を行ってももはやGABAの増加は期待できず、これ以下の時間である場合には十分にGABAが増加しない問題がある。   The time for performing the enrichment treatment is not particularly limited, but is preferably 1 hour to 10 days, and more preferably 6 hours to 5 days. Even if processing is performed for a longer time, an increase in GABA can no longer be expected, and if the time is shorter than this, there is a problem that the GABA does not increase sufficiently.

富化処理を行う環境は好気環境、嫌気環境いずれでも良いが、嫌気環境で行うことが好ましい。嫌気環境としては、窒素、二酸化炭素、ヘリウム、アルゴン等の気体が充満している状態が好ましく、これらの中でも窒素で充満している環境で行うことが特に好ましい。   The environment for performing the enrichment process may be either an aerobic environment or an anaerobic environment, but it is preferable to perform the environment in an anaerobic environment. As an anaerobic environment, the state filled with gas, such as nitrogen, a carbon dioxide, helium, argon, is preferable, and it is especially preferable to carry out in the environment filled with nitrogen among these.

富化処理を行う場合、GABAの原料としてグルタミン酸又はその塩を添加することができる。グルタミン酸塩の中では特にナトリウム塩が好ましい。グルタミン酸又はその塩はグルタミン酸脱炭酸酵素の作用を受けてGABAに変換される為、グルタミン酸又はその塩を添加することでGABAの含量を著しく増加させることができる。加えるグルタミン酸又はその塩の量は特に限定されないが、原料アスパラアスに対して0.1質量%〜100質量%が好ましく、1質量%〜30質量%がより好ましい。この範囲より少なければGABA含量は増加するが微量に留まり、この範囲より多ければGABAに変換されないグルタミン酸又はその塩が多量に残存する問題がある。   When performing the enrichment treatment, glutamic acid or a salt thereof can be added as a raw material for GABA. Among glutamate salts, sodium salt is particularly preferable. Since glutamic acid or a salt thereof is converted to GABA by the action of glutamic acid decarboxylase, the content of GABA can be remarkably increased by adding glutamic acid or a salt thereof. The amount of glutamic acid or a salt thereof to be added is not particularly limited, but is preferably 0.1% by mass to 100% by mass and more preferably 1% by mass to 30% by mass with respect to the raw material asparagus. If it is less than this range, the GABA content increases but remains in a very small amount.

富化処理を行う場合、グルタミン酸脱炭酸酵素の補酵素としてピリドキサルリン酸又はその塩、又は塩酸ピリドキシンを添加することができる。ピリドキサルリン酸塩の中では特にナトリウム塩が好ましい。ピリドキサルリン酸又はその塩、又は塩酸ピリドキシンはグルタミン酸脱炭酸酵素の補酵素として働くため、酵素反応を効果的に進めることができ、GABAの含量を増加させることができる。加えるピリドキサルリン酸又はその塩、又は塩酸ピリドキシンの量は特に限定されないが、原料アスパラガスに対して0.001質量%〜20質量%が好ましく、0.005質量%〜5質量%がさらに好ましい。この範囲より少なければ、補酵素を添加する効果がほとんど期待できず、この範囲より多くとももはやこれ以上のGABA含量増加は期待できない。   When performing the enrichment treatment, pyridoxal phosphate or a salt thereof, or pyridoxine hydrochloride can be added as a coenzyme for glutamate decarboxylase. Among pyridoxal phosphates, sodium salt is particularly preferable. Since pyridoxal phosphate or a salt thereof or pyridoxine hydrochloride acts as a coenzyme for glutamate decarboxylase, the enzyme reaction can be effectively advanced and the GABA content can be increased. The amount of pyridoxal phosphoric acid or a salt thereof or pyridoxine hydrochloride to be added is not particularly limited, but is preferably 0.001% by mass to 20% by mass, and more preferably 0.005% by mass to 5% by mass with respect to the raw material asparagus. If it is less than this range, the effect of adding a coenzyme can hardly be expected, and if it exceeds this range, no further increase in GABA content can be expected.

富化処理を行う場合、酵素を添加することができる。酵素としては、ペクチナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、キシラナーゼ、アラバナーゼ、アミラーゼ、グルカナーゼ、デキストラナーゼ、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、グルタミナーゼ、グルタミン酸脱炭酸酵素等が使用できる。ペクチナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、キシラナーゼ、アラバナーゼ、アミラーゼ、グルカナーゼ、デキストラナーゼ等を用いれば可溶性オリゴ糖、単糖類が多く回収され、機能性糖質の増加、呈味の向上が達成できる。プロテアーゼ、ペプチダーゼ等を用いればアミノ酸量、ペプチド量が増加するとともに、原料となるグルタミン酸量が増加し、ひいてはGABA含量を増加させることができる。グルタミナーゼを用いればグルタミンがグルタミン酸に変換されるために、GABA含量を増加させることができる。グルタミン酸脱炭酸酵素を用いれば、内在酵素に含まれるものを補う形でさらに効果的にGABAの産生が期待でき、GABA含量を増加させることができる。本発明においては、上記した酵素を一種類だけ用いてもよいし、二種以上を同時に又は工程を分けて用いてもよい。使用する酵素の量は原料アスパラガスに対して0.001質量%〜10質量%であることが好ましく、0.01質量%〜5質量%であることがより好ましい。この範囲より少なければ酵素を添加する効果がほとんど期待できず、この範囲より多くとももはやこれ以上の効果は期待できない。   When performing the enrichment process, an enzyme can be added. As the enzyme, pectinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, arabanase, amylase, glucanase, dextranase, protease, peptidase, glutaminase, glutamate decarboxylase and the like can be used. If pectinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, arabanase, amylase, glucanase, dextranase and the like are used, a large amount of soluble oligosaccharides and monosaccharides are recovered, and an increase in functional carbohydrates and an improvement in taste can be achieved. If protease, peptidase, etc. are used, the amount of amino acids and peptides increases, the amount of glutamic acid used as a raw material increases, and the GABA content can be increased. If glutaminase is used, glutamine is converted to glutamic acid, so that the GABA content can be increased. If glutamic acid decarboxylase is used, GABA production can be expected more effectively in the form of supplementing what is contained in the endogenous enzyme, and the GABA content can be increased. In the present invention, only one type of the above-described enzyme may be used, or two or more types may be used simultaneously or in separate steps. The amount of the enzyme used is preferably 0.001% by mass to 10% by mass and more preferably 0.01% by mass to 5% by mass with respect to the raw material asparagus. If it is less than this range, the effect of adding an enzyme can hardly be expected, and if it exceeds this range, no further effect can be expected.

富化処理終了後は、引き続き製品化への工程を進めることができる。ここで、必要であれば高温での失活処理、滅菌処理を行うことができる。この時の温度は60℃〜121℃が好ましく、70℃〜110℃がさらに好ましい。この温度範囲より低ければ、失活、滅菌の効果が不十分になる問題があり、この温度範囲より高ければGABAをはじめ有効成分が分解する問題がある。   After the enrichment process is completed, the process for commercialization can be continued. Here, if necessary, inactivation treatment and sterilization treatment at high temperatures can be performed. The temperature at this time is preferably 60 ° C to 121 ° C, more preferably 70 ° C to 110 ° C. If it is lower than this temperature range, there is a problem that the effect of deactivation and sterilization becomes insufficient, and if it is higher than this temperature range, there is a problem that active ingredients such as GABA are decomposed.

上記のようにしてGABAを取り出す操作を行った後は、固液分離を行わずにそのまま使用することもできるが、従来公知の分離方法で液を分離することができる。分離方法としては、例えばフィルターろ過、圧搾ろ過、遠心分離、デカンテーションなど従来公知のあらゆる方法が使用できる。清澄な組成物を得る場合には、珪藻土などのろ過助剤を使用したフィルターろ過を行うことが好ましい。また、さらに清澄な液を得る場合や微生物の除去を行う場合には、これをさらに1μm未満の孔径のメンブランフィルターろ過を行うことが好ましい。   After performing the operation of taking out GABA as described above, it can be used as it is without performing solid-liquid separation, but the liquid can be separated by a conventionally known separation method. As a separation method, for example, any conventionally known methods such as filter filtration, squeeze filtration, centrifugation, and decantation can be used. In order to obtain a clear composition, it is preferable to perform filter filtration using a filter aid such as diatomaceous earth. Moreover, when obtaining a clearer liquid or removing microorganisms, it is preferable to further filter this with a membrane filter having a pore diameter of less than 1 μm.

上述した方法により得られたGABA含有組成物には、アスパラガスに含まれていたGABAが多量に含まれることとなり、またそれらに加えてアミノ酸や水溶性食物繊維を含むこととなる。アミノ酸としては、アスパラギン酸、グルタミン酸、バリン、ロイシン、イソロイシン、リジン、アラニン、セリン、プロリンなどが比較的多く含まれる。特にバリン、ロイシン、イソロイシンは分岐鎖アミノ酸(BCAA)と呼ばれ、ヒトの筋肉中の必須アミノ酸の約35%を占めている。これらのアミノ酸は特に近年運動能力向上、疲労回復、筋力向上の効果が認められたために注目を浴びている。本発明により得られたGABA含有組成物はアスパラガスを原料としているために、上記のように機能性の高いアミノ酸を多く含むことを特徴としている。   The GABA-containing composition obtained by the above-described method contains a large amount of GABA contained in asparagus, and in addition to them, amino acids and water-soluble dietary fiber. As amino acids, aspartic acid, glutamic acid, valine, leucine, isoleucine, lysine, alanine, serine, proline and the like are relatively contained. In particular, valine, leucine and isoleucine are called branched chain amino acids (BCAA) and occupy about 35% of essential amino acids in human muscle. These amino acids are particularly attracting attention because they have recently been shown to improve athletic ability, recover from fatigue, and improve muscle strength. Since the GABA-containing composition obtained by the present invention uses asparagus as a raw material, it is characterized by containing a large amount of highly functional amino acids as described above.

また、本発明においては、GABA含有組成物に含まれるGABA含有量を高め、種々の使用目的に応じるために、分子量の大きな多糖類、食物繊維、蛋白質等を取り除く操作を含めることもでき、その操作を経たGABA含有組成物中には、分子量の小さなアミノ酸類、GABA、ペプチド、単糖類、オリゴ糖類を含有したものとなる。そのような操作としては、例えば、生化学工業(株)製の樹脂、セルロファインシリーズを用いてゲル濾過で分離する方法や、限外濾過膜(UF膜)を用いて所定の分子量で分画する方法等を採用することができる。   In the present invention, in order to increase the GABA content contained in the GABA-containing composition and respond to various purposes of use, an operation of removing polysaccharides, dietary fibers, proteins, etc. having a large molecular weight can be included. The GABA-containing composition that has undergone manipulation contains amino acids having a low molecular weight, GABA, peptides, monosaccharides, and oligosaccharides. Such operations include, for example, separation by gel filtration using a resin, Cellulofine series manufactured by Seikagaku Corporation, and fractionation at a predetermined molecular weight using an ultrafiltration membrane (UF membrane). The method etc. to do can be adopted.

このようにして得られたGABA含有組成物は、そのまま使用してもよいし、さらに所定の濃度にまで希釈又は濃縮して使用することもできる。希釈するには水に限定されず、アルコール、油などを用いることもでき、このとき必要に応じて乳化剤や塩類を添加することができる。濃縮するには、減圧濃縮、加熱濃縮、濾過膜を用いた濃縮などいかなる方法で行ってもよいが、20℃〜60℃の範囲での減圧濃縮を行うことが好ましい。該減圧濃縮には、一般的なエバポレーター装置や(株)大川原製作所製の「エバポール」、関西化学機械製作(株)製の「ウォールウェッター」などを使用することができる。   The GABA-containing composition thus obtained may be used as it is, or further diluted or concentrated to a predetermined concentration. Dilution is not limited to water, and alcohol, oil, and the like can also be used. At this time, an emulsifier and salts can be added as necessary. Concentration may be performed by any method such as concentration under reduced pressure, concentration by heating, or concentration using a filtration membrane, but it is preferable to perform concentration under reduced pressure in the range of 20 ° C to 60 ° C. For the concentration under reduced pressure, a general evaporator apparatus, “Evapol” manufactured by Okawara Seisakusho, “Wall Wetter” manufactured by Kansai Chemical Machinery Co., Ltd., or the like can be used.

本発明の方法により得られたGABA含有組成物には、GABAが0.001〜99質量%含まれることとなり、使用目的に応じた最適な含有量の組成物を提供することができ、例えば0.005質量%〜50質量%に調製することができる。   The GABA-containing composition obtained by the method of the present invention contains 0.001 to 99% by mass of GABA, and can provide a composition having an optimum content according to the purpose of use. 0.005 mass% to 50 mass% can be prepared.

本発明において、GABA、アミノ酸の含有量は、以下の方法により求められた値である。すなわち、高速液体クロマトグラフィー法(HPLC法)により以下の条件で測定し、蛍光検出器を用いて検出した。
HPLC:島津製作所(株)製LC−9A
カラム:Shim−pack ISC−07/S1504
移動相:0.2規定クエン酸ナトリウム緩衝液(pH2.2)
流速:0.3ml/分
温度:55℃
反応液:オルト−フタルアルデヒド
検出波長:励起波長348nm、蛍光波長450nm
本発明の方法により得られたGABA含有組成物の形態としては、本発明の効果を損なわない限り限定されないが、例えば、水溶液、クリーム、懸濁液、ゲル、粉末、錠剤、カプセルなどが挙げられる。これらの中でも水溶液、粉末が特に好ましい。水溶液は、固形分を0.01〜70質量%含むことが好ましく、アスパラガスから製造されたそのものでも良いし、希釈、濃縮されていても良い。粉末はアスパラガスから製造された液状の組成物からそのまま粉末化されていても良いし、デキストリン、乳糖などの賦型剤を添加して粉末化されていても良い。粉末化方法は特に限定されないが、凍結乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥等の方法を用いて乾燥したものを、必要に応じて乳鉢、ブレンダー、フェザーミル、ハンマーミル、パワーミル、ミルミキサー等の粉砕機を用いて粉砕すればよい。また、これらの水溶液、粉末から乳化、打錠、ゲル化などの操作により、クリーム、錠剤、ゲルなどを製造しても良い。また、本発明の方法により得られたGABA含有組成物は、砂糖、果糖、ブドウ糖、オリゴ糖、蜂蜜等の糖類、食塩、にがりなどの塩類、だし、味の素、アミノ酸などで調味されていても良い。
In the present invention, GABA and amino acid contents are values determined by the following method. That is, it measured on the following conditions by the high performance liquid chromatography method (HPLC method), and detected using the fluorescence detector.
HPLC: Shimadzu Corporation LC-9A
Column: Shim-pack ISC-07 / S1504
Mobile phase: 0.2 N sodium citrate buffer (pH 2.2)
Flow rate: 0.3 ml / min Temperature: 55 ° C
Reaction solution: ortho-phthalaldehyde Detection wavelength: excitation wavelength 348 nm, fluorescence wavelength 450 nm
The form of the GABA-containing composition obtained by the method of the present invention is not limited as long as the effects of the present invention are not impaired, and examples thereof include aqueous solutions, creams, suspensions, gels, powders, tablets, and capsules. . Among these, aqueous solutions and powders are particularly preferable. The aqueous solution preferably contains 0.01 to 70% by mass of solid content, and may be produced from asparagus itself, or may be diluted and concentrated. The powder may be directly powdered from a liquid composition produced from asparagus, or may be powdered by adding an excipient such as dextrin or lactose. The powdering method is not particularly limited, but pulverizers such as mortars, blenders, feather mills, hammer mills, power mills, mill mixers, etc. may be used after drying using freeze drying, spray drying, vacuum drying or the like. What is necessary is just to grind using. Further, creams, tablets, gels and the like may be produced from these aqueous solutions and powders by operations such as emulsification, tableting and gelation. In addition, the GABA-containing composition obtained by the method of the present invention may be seasoned with sugars such as sugar, fructose, glucose, oligosaccharides, honey and the like, salts such as salt and bittern, dashi, ajinomoto and amino acids. .

以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、本実施例中のGABA、アミノ酸の含有量は前記した方法で測定した。   Hereinafter, the present invention will be specifically described with reference to examples, but the present invention is not limited thereto. In addition, the GABA and amino acid contents in this example were measured by the methods described above.

実施例1
グリーンアスパラガス若茎の穂先から25cm及び30cmの位置で切断し、その間の部分(根元部分)100gに水100mlを導入し、ミキサーで破砕した。振とう式インキュベーターを用いて50℃、16時間抽出を行い、得られた処理液は濾過助剤に珪藻土を用い、ろ紙(ADVANTEC東洋製No.5C)を用いて吸引濾過を行った。得られた抽出液は183gで黄緑色であった。GABA、アミノ酸の含有量を表1に示した。
Example 1
It cut | disconnected in the position of 25 cm and 30 cm from the tip of a green asparagus young shoot, 100 ml of water was introduce | transduced into the part (root part) between them, and it crushed with the mixer. Extraction was performed at 50 ° C. for 16 hours using a shaking incubator, and the obtained treatment liquid was subjected to suction filtration using filter paper (ADVANTEC Toyo No. 5C) using diatomaceous earth as a filter aid. The obtained extract was 183 g and yellowish green. Table 1 shows the contents of GABA and amino acids.

実施例2
グリーンアスパラガス若茎の穂先から25cm及び30cmの位置で切断し、その間の部分(根元部分)100gに水100mlを導入し、ミキサーで破砕した。これを振とう式インキュベーターを用いて25℃、24時間振とうし、GABA富化処理を行った。得られた処理液は濾過助剤に珪藻土を用い、ろ紙(ADVANTEC東洋製No.5C)を用いて吸引濾過を行い、黄緑色の組成物を180g得た。GABA、アミノ酸の含有量を表1に示した。
Example 2
It cut | disconnected in the position of 25 cm and 30 cm from the tip of a green asparagus young shoot, 100 ml of water was introduce | transduced into the part (root part) between them, and it crushed with the mixer. This was shaken at 25 ° C. for 24 hours using a shaking incubator, and GABA enrichment treatment was performed. The obtained treatment liquid was subjected to suction filtration using filter paper (ADVANTEC Toyo No. 5C) using diatomaceous earth as a filter aid to obtain 180 g of a yellow-green composition. Table 1 shows the contents of GABA and amino acids.

実施例3
グリーンアスパラガス若茎の穂先から25cm及び30cmの位置で切断し、その間に存在する部分(根元部分)100gに水100mlを導入し、ミキサーで破砕した。これにグルタミン酸ナトリウムを5g、ピリドキサルリン酸塩を0.1g添加し、振とう式インキュベーターを用いて25℃、24時間振とうしGABA富化処理を行い、黄緑色の組成物を182g得た。GABA、アミノ酸の含有量を表1に示した。
Example 3
It cut | disconnected in the position of 25 cm and 30 cm from the tip of a green asparagus young stalk, 100 ml of water was introduce | transduced into 100 g of the part (root part) which exists in the meantime, and it crushed with the mixer. To this was added 5 g of sodium glutamate and 0.1 g of pyridoxal phosphate, and the mixture was shaken for 24 hours at 25 ° C. using a shaking incubator to enrich the GABA to obtain 182 g of a yellow-green composition. Table 1 shows the contents of GABA and amino acids.

実施例4
グリーンアスパラガス若茎の穂先から25cm及び30cmの位置で切断し、その間に存在する部分(根元部分)85gと、グリーンアスパラガス若茎の曲がり、細身、色悪、穂先の開き等で選別漏れとなった若茎15gを混合し、水100mlを導入し、ミキサーで破砕した。振とう式インキュベーターを用いて50℃、16時間抽出を行い、得られた処理液は濾過助剤に珪藻土を用い、ろ紙(ADVANTEC東洋製No.5C)を用いて吸引濾過を行った。得られた抽出液は181gで黄緑色であった。GABA、アミノ酸の含有量を表1に示した。
Example 4
Cut at 25cm and 30cm from the tip of the green asparagus young shoot, and 85g of the portion (root portion) existing between them, and the green asparagus young shoot bent, slender, discolored, the opening of the tip, etc. The young shoots 15 g were mixed, 100 ml of water was introduced, and crushed with a mixer. Extraction was performed at 50 ° C. for 16 hours using a shaking incubator, and the obtained treatment liquid was subjected to suction filtration using filter paper (ADVANTEC Toyo No. 5C) using diatomaceous earth as a filter aid. The obtained extract was 181 g and yellowish green. Table 1 shows the contents of GABA and amino acids.

比較例1
グリーンアスパラガス若茎の商品部分(先端から25cmの長さで切り揃えられたもの)100gに、水100ml導入し、ミキサーで破砕した。振とう式インキュベーターを用いて50℃、16時間抽出を行い、得られた処理液は濾過助剤に珪藻土を用い、ろ紙(ADVANTEC東洋製No.5C)を用いて吸引濾過を行った。得られた抽出液は179gで黄緑色であった。GABA、アミノ酸の含有量を表1に示した。穂先から25〜30cmの部分を使用し同一の抽出条件で得られたもの(実施例1)に比べ、GABA回収量が低かった。
Comparative Example 1
100 ml of water was introduced into 100 g of a green asparagus young shoot (parts cut to a length of 25 cm from the tip) and crushed with a mixer. Extraction was performed at 50 ° C. for 16 hours using a shaking incubator, and the obtained treatment liquid was subjected to suction filtration using filter paper (ADVANTEC Toyo No. 5C) using diatomaceous earth as a filter aid. The obtained extract was 179 g and yellowish green. Table 1 shows the contents of GABA and amino acids. The amount of GABA recovered was lower than that obtained in the same extraction conditions using a portion of 25-30 cm from the tip (Example 1).

Claims (1)

アスパラガスを処理してγ−アミノ酪酸含有組成物を得る方法において、アスパラガスとして、アスパラガス若茎の穂先から25cm以上離れた部分を少なくとも50質量%用いることを特徴とするγ−アミノ酪酸含有組成物の製造方法。 In a method for obtaining a γ-aminobutyric acid-containing composition by treating asparagus, the portion that is 25 cm or more away from the tip of the asparagus young shoot is used as asparagus at least 50% by mass. A method for producing the composition.
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