JP4259813B2

JP4259813B2 - Method for stabilizing α-lipoyl amino acid and aqueous liquid preparation containing stabilized α-lipoyl amino acid

Info

Publication number: JP4259813B2
Application number: JP2002153574A
Authority: JP
Inventors: 一美緒方
Original assignee: Senju Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Senju Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2001-05-29
Filing date: 2002-05-28
Publication date: 2009-04-30
Anticipated expiration: 2022-05-28
Also published as: JP2003048833A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、α−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩を含有する水性液剤の安定化法並びに安定化されたα−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩を含有する水性液剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
α−リポ酸（別名：チオクト酸または６,８−ジチオオクタン酸）はミトコンドリアに存在する補酵素で、抗酸化能を有し、酸化ストレスによる種々の病態の治療、たとえば動脈硬化症および白内障の治療薬として注目されている。また、その還元型のジメルカプトオクタン酸は酸化型のグルタチオンやビタミンＣなどを還元再生させる作用がある。
【０００３】
一方、α−リポ酸誘導体として、α−リポ酸にグリシン、メチオニン、グルタミン酸、バリンなどがそれぞれ結合したα−リポイルアミノ酸が知られている（特公昭42-1286号）。また、特開2000-169371号公報にはα−リポイルアミノエチルスルホン酸のイミダゾール塩などのジチオラン誘導体が記載されており、これら化合物は酸化的ストレスによって起こる疾患、たとえば糖尿病や白内障などに有効であることが開示されている。
【０００４】
しかし、これらα−リポイルアミノ酸の水溶液は経時的に硫化水素またはメルカプタンの不快臭を発生し、製剤化が困難であるという欠点がある。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明はα−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩を含有する水性液剤の安定化法並びに安定化されたα−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩を含有する水性液剤を提供する。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記のような状況下、本発明者らは種々検討を重ねた結果、α−リポイルアミノ酸およびそれらの薬理学的に許容される塩が亜硫酸塩またはメタ重亜硫酸塩を添加することにより安定化できることを見出し、さらに研究を進めて本発明を完成させた。
【０００７】
すなわち、本発明は、
(1)α−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩と亜硫酸塩またはメタ重亜硫酸塩を含有する水性液剤、
(2)α−リポイルアミノ酸がＮ−α−リポイル−α−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−β−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−δ−アミノ酸およびＮ−α−リポイル−ε−アミノ酸からなる群から選ばれるものである、上記(1)記載の水性液剤、
(3)α−リポイルアミノ酸がＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸、Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸、Ｎ−α−リポイルグリシン、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ−ｎ−酪酸、Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン、Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｎ−α−リポイルアントラニル酸、Ｎ−α−リポイルメチオニンおよびＮ−α−リポイルシステインからなる群から選ばれるものである、上記(1)記載の水性液剤、
(4)亜硫酸塩が亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸水素ナトリウムまたは亜硫酸水素カリウムであり、メタ重亜硫酸塩がメタ重亜硫酸ナトリウムまたはメタ重亜硫酸カリウムである上記(1)記載の水性液剤、
(5)注射剤である上記(1)〜(4)のいずれかに記載の水性液剤、
(6)点眼剤である上記(1)〜(4)のいずれかに記載の水性液剤、
(7)化粧品である上記(1)〜(4)のいずれかに記載の水性液剤、
(8)亜硫酸塩またはメタ重亜硫酸塩を添加することを特徴とする、α−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩を含有する水性液剤の安定化法、
(9)α−リポイルアミノ酸がＮ−α−リポイル−α−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−β−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−δ−アミノ酸およびＮ−α−リポイル−ε−アミノ酸からなる群から選ばれるものである、上記(8)記載の安定化法、
(10)α−リポイルアミノ酸がＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸、Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸、Ｎ−α−リポイルグリシン、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ−ｎ−酪酸、Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン、Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｎ−α−リポイルアントラニル酸、Ｎ−α−リポイルメチオニンおよびＮ−α−リポイルシステインからなる群から選ばれるものである、上記(8)記載の安定化法、並びに
(11)亜硫酸塩が亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸水素ナトリウムまたは亜硫酸水素カリウムであり、メタ重亜硫酸塩がメタ重亜硫酸ナトリウムまたはメタ重亜硫酸カリウムである上記(8)記載の安定化法に関する。
【０００８】
本発明に用いられる亜硫酸塩としては亜硫酸ナトリウムまたは亜硫酸カリウム、亜硫酸水素ナトリウムまたは亜硫酸水素カリウムなどが挙げられ、メタ重亜硫酸塩としてはメタ重亜硫酸ナトリウムまたはメタ重亜硫酸カリウムなどが挙げられる。必要に応じてこれら塩のうち２種以上を適宜組み合わせて含有させることもできる。
【０００９】
本発明に用いられるα−リポイルアミノ酸はα−リポ酸とアミノ酸がアミド結合した構造を有している。本発明において、アミノ酸とは同一分子内にカルボキシル基とアミノ基を有する、いわゆるα−アミノ酸、β−アミノ酸、γ−アミノ酸、δ−アミノ酸、ε−アミノ酸、並びにアミノメチルシクロヘキサンカルボン酸およびアントラニル酸、並びに同一分子内にスルホン酸基とアミノ基を有するアミノエタンスルホン酸（タウリン）をいう。α−アミノ酸としては、たとえばグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、ヒドロキシトリプトファンなどが例示される。β−アミノ酸としてはβ−アラニンが挙げられ、γ−アミノ酸としてはγ−アミノ−ｎ−酪酸（GABA）やカルニチンが挙げられ、δ−アミノ酸としては５−アミノレプリン酸や５−アミノ吉草酸、ε−アミノ酸としては６−アミノヘキサン酸が挙げられる。
【００１０】
本発明に用いられるα−リポイルアミノ酸の薬理学的に許容できる塩としては、ナトリウム塩やカリウム塩などのアルカリ金属塩およびカルシウム塩やマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩が挙げられるが、これら以外の塩であっても本発明の安定化法により適宜安定化することができる。
【００１１】
本発明に用いられるα−リポイルアミノ酸は、例えば次の合成法により、またはこれに準じて適宜合成することができる。
【００１２】
【化１】

（式中、AはN結合したアミノ酸残基を示す。）
【００１３】
α−リポイルアミノ酸の合成法としては、アミノ酸の酸性基のカルボン酸を保護基としてエステル化し、α−リポ酸と脱水縮合剤で酸アミドとし、最後にケン化するのが一般的である。しかし、アミノエチルスルホン酸などの場合、この方法では合成するのが困難であるが、混合酸無水物法（MA法）により合成すると目的化合物のα−リポイルアミノ酸を高収率で得ることができる。すなわち、α−リポ酸を有機溶媒（たとえばクロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトニトリルなど）に溶かし、これに３級アミン（トリエチルアミン、トリブチルアミンやＮ−メチルモルホリン（NMM）など）の存在下−15℃〜−5℃でハロゲン化炭酸エステル（クロル炭酸エチル、クロル炭酸ブチルなど）、イソブチルオキシカルボニルクロリド、塩化ジエチルアセチルまたは塩化トリメチルアセチルなどの混合酸無水物化試薬を反応させてα−リポ酸の混合酸無水物とする。反応時間は1〜2分から数10分程度である。さらにアミノ酸をアルカリ（水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなど）存在下でアルコール、水またはそれらの混液などの溶媒に溶かしたものを加えて反応させた後、適当な溶媒、たとえば水またはアルコールから再結晶させると、高収率でα−リポイルアミノ酸を得ることができる。
【００１４】
本発明の水性液剤に使用される溶媒としては、精製水、特に注射用蒸留水が挙げられる。
【００１５】
本発明の水性液剤には、通常用いられる緩衝剤、等張化剤、溶解補助剤、防腐剤、粘稠剤、キレート剤、芳香剤等の各種添加剤を適宜添加してもよい。
【００１６】
緩衝剤としては、たとえばリン酸緩衝剤、ホウ酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、酢酸緩衝剤などが挙げられる。
【００１７】
等張化剤としては、たとえばソルビトール、グルコース、マンニトールなどの糖類、グリセリン、プロピレングリコールなどの多価アルコール類、塩化ナトリウムなどの塩類などが挙げられる。
【００１８】
溶解補助剤としては、たとえばポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ポリオキシエチレンオキシステアリン酸トリグリセリド、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などの非イオン界面活性剤などが挙げられる。
【００１９】
防腐剤としては、たとえば塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウムなどの第４級アンモニウム塩類、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、ソルビン酸およびそれらの塩、チメロサール、クロロブタノール、デヒドロ酢酸ナトリウムなどが挙げられる。
【００２０】
粘稠剤としては、たとえばポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースおよびそれらの塩などが挙げられる。
【００２１】
キレート剤としては、エデト酸ナトリウム、クエン酸などが挙げられる。
【００２２】
芳香剤としては、１−メントール、ボルネオール、カンフル、ユーカリ油などが挙げられる。
【００２３】
本発明の水性液剤は注射剤や点眼剤などとして使用される。注射剤として用いる場合、pHは通常約3.5〜8.5、好ましくは約6〜7に、点眼剤として用いる場合、pHは通常約3.5〜8.5、好ましくは約6〜7に調整する。
【００２４】
本発明の水性液剤の製造法は、液剤の種類によって異なるが、各液剤について公知の方法を適宜用いることができる。
【００２５】
本発明のα−リポイルアミノ酸を含有する水性液剤は、注射剤や点眼剤などとして、酸化ストレスによる種々の疾患、たとえば虚血性心疾患、脳虚血、動脈硬化症、糖尿病、白内障などの予防・治療に有用である。
【００２６】
本発明の水性液剤は約0.01〜5.0(w/v)%のα−リポイルアミノ酸に対し、亜硫酸塩またはメタ重亜硫酸塩を約0.001〜1.0(w/v)%、好ましくは約0.01〜0.5(w/v)%を含有してなる。
【００２７】
本発明に用いられるα−リポイルアミノ酸を上記のような疾患の予防・治療剤として使用する際の投与量は、使用するα−リポイルアミノ酸の種類、患者の体重や年齢、対象とする疾患の種類やその状態および投与方法などによっても異なるが、たとえば注射剤の場合成人1日1回約1mg〜約30mg程度投与するのがよい。また、点眼剤の場合は、成人1日数回、1回数滴、濃度が約0.01〜5(w/v)%の点眼剤を投与するのがよい。
【００２８】
本発明のα−リポイルアミノ酸を含有する水性液剤には、本発明の目的に反しない限り、その他の同種または別種の薬効成分を適宜含有させてもよい。
【００２９】
また、本発明の水性液剤は紫外線吸収（紫外線照射による紅斑の抑制、日焼け防止など）、美肌、美白（しみ、そばかすなどの原因であるメラニン色素の沈着防止など）および抗シワを目的とし、またはその他の化粧品成分の安定化を目的として、ローション剤や化粧水などの化粧品としても使用される。化粧品として本発明の水性液剤を用いる場合、通常化粧品に用いられる成分を適宜添加させることができる。
【００３０】
【実施例】
次に、参考例および実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。
【００３１】
参考例１Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム
DL−α−リポ酸6.2gをクロロホルム60mLに溶かし、トリエチルアミン3.2gを加えて−5℃に冷却して置き、これにクロル炭酸エチル3.3gを徐々に滴下し、滴下終了15分後にこれにアミノエタンスルホン酸4.5gおよび水酸化ナトリウム1.5gをメタノール60mLに溶かしたものを一挙に加えて、その温度で15分間、さらに室温に戻して1時間攪拌させた。次に、これに水酸化ナトリウム1.5gをメタノール50mLに溶かした溶液を加えて、減圧下で溶媒を1/3になるまで濃縮させ、これにエタノール60mLを加えて析出した結晶を濾取した。これを水−メタノールから再結晶させて、目的化合物のナトリウム塩の白色結晶5.8gを得た。融点235〜237℃。TLC、Rf＝0.53（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝4:1:2）
【００３２】
元素分析： C₁₀H₁₇NO₄S₃Na・H₂Oとして
理論値： C，34.08 H，5.43 N，3.97
実測値： C，34.23 H，5.54 N，3.80
【００３３】
参考例２Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸カリウム
参考例１の水酸化ナトリウムを水酸化カリウム4.0gに代えて参考例１と同様に反応処理してこれを水/メタノールから再結晶させて、目的化合物のカリウム塩の白色結晶6.5gを得た。融点240〜242℃。
【００３４】
参考例３Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸カルシウムおよびマグネシウム
参考例１で得られたナトリウム塩を水に溶かし、スルホン酸樹脂で脱塩して遊離酸として、これらに炭酸カルシウムまたは塩基性炭酸マグネシウムで、それぞれ中和させて、それぞれ水溶性のカルシウム塩またはマグネシウム塩を得た。それぞれ融点300℃以上。
【００３５】
参考例４Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸ナトリウム
DL−α−リポ酸4.2gおよび６−アミノヘキサン酸3.0gを用いて、参考例１と同様に反応させエタノールから再結晶させて、目的化合物の黄色がかった白色結晶3.0gを得た。融点200〜202℃（分解）。TLC、Rf=0.84（クロロホルム：メタノール：水＝5:4:1)
【００３６】
参考例５Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸ジナトリウム
DL−α−リポ酸4.2gおよびＬ−アスパラギン酸2.9gを用いて、参考例１と同様に反応処理して、水/メタノールから再結晶させて、目的化合物の白色結晶4.5gを得た。融点300℃以上。TLC、Rf=0.47（クロロホルム：メタノール：水＝4:1:2）
【００３７】
参考例６Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ−ｎ−酪酸ナトリウム
DL−α−リポ酸4.2gおよびγ−アミノ−ｎ−酪酸2.3gを用いて、参考例１と同様に反応処理して、エタノールから再結晶させて、目的化合物のナトリウム塩4.0gを得た。融点235℃付近から徐々に分解。TLC、Rf=0.76（クロロホルム：メタノール：水＝4:1:2）
【００３８】
参考例７Ｎ−α−リポイルグリシンナトリウム
DL−α−リポ酸4.2gおよびグリシン1.9gを用いて、参考例１と同様に反応処理して、メタノール/エタノールから再結晶させて、目的化合物の淡黄色結晶4.5gを得た。融点218〜220℃（分解）。TLC、Rf=0.64（クロロホルム：メタノール：水＝4:1:2）
【００３９】
参考例８Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン
DL−α−リポ酸4.2gおよびＬ−フェニルアラニン3.5gを用いて、参考例１と同様に反応させ、溶媒を留去させた後、塩酸酸性として酢酸エチルで抽出し、水洗後、酢酸エチルを留去した。残渣結晶をエタノール／イソプロピルエーテルから再結晶させて、目的化合物の淡黄色結晶5.4gを得た。融点154〜156℃（分解）。TLC、Rf=0.86（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝4:1:2）
【００４０】
参考例９Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン
DL−α−リポ酸4.2gおよびＬ−５−ハイドロキシトリプトファン5.0gを用いて、参考例８と同様に反応処理して、目的化合物の白色結晶6.4gを得た。融点118〜120℃。TLC、Rf=0.85（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝4:1:2）
【００４１】
参考例１０Ｎ−α−リポイルアントラニル酸ナトリウム
DL−α−リポ酸4.2gおよびアントラニル酸3.2gを用いて、参考例１と同様に反応処理して、目的化合物の白色結晶3.6gを得た。融点300℃以上。TLC、Rf=0.89（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝4:1:2）
【００４２】
参考例１１Ｎ−α−リポイルメチオニン
DL−α−リポ酸4.2gおよびＬ−メチオニン3.5gを用いて、参考例８と同様に反応処理して、目的化合物の淡黄色結晶4.0gを得た。融点108〜109℃以上。TLC、Rf=0.81（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝4:1:2）
【００４３】
参考例１２Ｎ−α−リポイルシステインナトリウム
DL−α−リポ酸4.2gおよびトリエチルアミン2.2gをテトラハイドロフラン60mLに溶解して−5℃に冷却して置き、攪拌下、これにクロル炭酸エチル2.3gを徐々に滴下し、滴下終了後、さらに６分後にＬ−システイン2.6gおよびトリエチルアミン2.5gを水20mLに溶かした溶液を加えて、参考例１と同様に反応させた後、塩酸酸性として酢酸エチルで抽出し水洗後、酢酸エチルを留去させ、残渣をエタノールに溶かし、これに水酸化ナトリウム／メタノール溶液を徐々に加えてpH7として析出する白色結晶を濾取し、水／エタノールから再結晶させて、目的化合物の白色結晶4.3gを得た。融点150℃付近から徐々に分解。TLC、Rf=0.72（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝4:1:2）
【００４４】

上記基本処方に、亜硫酸水素ナトリウムを0%、0.01%、0.1%（w/v）になるように添加した。
その結果、30℃、１ヶ月後の臭気の程度は亜硫酸水素ナトリウム0%（w/v）の場合を＋4とすると、0.01、0.1%（w/v）でそれぞれ+1、0であった。

【００４５】
一方、グルタチオンおよびシステインの水溶液の場合、亜硫酸塩を添加するとかえって臭気が増大した。
【００４６】
実施例２注射剤
基本処方
α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム 5.0g
Ｄ−マンニトール 2.0g
注射用蒸留水全量100mL
上記基本処方にメタ重亜硫酸ナトリウム0%（w/v）および0.1%（w/v）になるように添加し、上記の基準で臭気の程度を評価した。
その結果、30℃、１ヶ月後の臭気の程度はメタ重亜硫酸ナトリウム0%（w/v）の場合を＋4とすると、0.1%（w/v）では0であった。
【００４７】
実施例３点眼剤
Ｎ−α−リポイルシステインナトリウム 0.5g
亜硫酸水素ナトリウム 0.1g
ホウ酸 0.7g
塩化ナトリウム 0.5g
ｐ−オキシ安息香酸メチル 0.026g
ｐ−オキシ安息香酸プロピル 0.014g
滅菌精製水全量100mL
上記の基準で臭気の程度を評価した。30℃、１カ月後の臭気の程度は、実施例１と殆ど同じであった。
【００４８】
【発明の効果】
本発明のα−リポイルアミノ酸またはその薬理学的に許容できる塩の安定化法によれば、硫化水素やメルカプタンなどの発生を効果的に抑制する。したがって、本発明の水性液剤は注射剤、点眼剤および化粧品などとして有利に用いられる。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a method for stabilizing an aqueous solution containing an α-lipoylamino acid or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and an aqueous solution containing a stabilized α-lipoylamino acid or a pharmaceutically acceptable salt thereof. It relates to a liquid agent.
[0002]
[Prior art]
α-Lipoic acid (also known as thioctic acid or 6,8-dithiooctanoic acid) is a coenzyme present in mitochondria that has antioxidant capacity and treats various pathological conditions such as arteriosclerosis and cataract by oxidative stress. It is attracting attention as a therapeutic drug. The reduced dimercaptooctanoic acid has the effect of reducing and regenerating oxidized glutathione, vitamin C, and the like.
[0003]
On the other hand, α-lipoic acid derivatives in which glycine, methionine, glutamic acid, valine and the like are bonded to α-lipoic acid are known (Japanese Patent Publication No. 42-1286). JP-A 2000-169371 discloses dithiolane derivatives such as imidazole salt of α-lipoylaminoethylsulfonic acid, and these compounds are effective for diseases caused by oxidative stress, such as diabetes and cataract. It is disclosed that there is.
[0004]
However, these α-lipoylamino acid aqueous solutions have the disadvantage that they produce an unpleasant odor of hydrogen sulfide or mercaptan over time and are difficult to formulate.
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
The present invention relates to a method for stabilizing an aqueous solution containing an α-lipoylamino acid or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and an aqueous solution containing a stabilized α-lipoylamino acid or a pharmacologically acceptable salt thereof. I will provide a.
[0006]
[Means for Solving the Problems]
Under the circumstances as described above, as a result of various studies, the present inventors have stabilized α-lipoylamino acids and their pharmacologically acceptable salts by adding sulfite or metabisulfite. We found out what we can do and further researched to complete the present invention.
[0007]
That is, the present invention
(1) α-lipoylamino acid or a pharmacologically acceptable salt thereof and an aqueous solution containing sulfite or metabisulfite,
(2) α-lipoyl amino acid is N-α-lipoyl-α-amino acid, N-α-lipoyl-β-amino acid, N-α-lipoyl-γ-amino acid, N-α-lipoyl-δ-amino acid and N An aqueous liquid preparation according to the above (1), which is selected from the group consisting of -α-lipoyl-ε-amino acid,
(3) α-lipoylamino acid is N-α-lipoylaminoethanesulfonic acid, N-α-lipoylaspartic acid, N-α-lipoylglycine, N-α-lipoyl-γ-amino-n-butyric acid N-α-lipoyl-6-aminohexanoic acid, N-α-lipoylphenylalanine, N-α-lipoyl-5-hydroxytryptophan, N-α-lipoylanthranilic acid, N-α-lipoylmethionine and N -The aqueous liquid according to (1) above, which is selected from the group consisting of -α-lipoylcysteine,
(4) The aqueous liquid according to the above (1), wherein the sulfite is sodium sulfite, potassium sulfite, sodium bisulfite or potassium bisulfite, and the metabisulfite is sodium metabisulfite or potassium metabisulfite,
(5) The aqueous liquid according to any one of (1) to (4) above, which is an injection,
(6) The aqueous liquid preparation according to any one of the above (1) to (4), which is an eye drop,
(7) The aqueous liquid according to any one of the above (1) to (4), which is a cosmetic,
(8) A method for stabilizing an aqueous solution containing an α-lipoylamino acid or a pharmacologically acceptable salt thereof, characterized by adding sulfite or metabisulfite.
(9) α-lipoyl amino acid is N-α-lipoyl-α-amino acid, N-α-lipoyl-β-amino acid, N-α-lipoyl-γ-amino acid, N-α-lipoyl-δ-amino acid and N The stabilization method according to (8) above, which is selected from the group consisting of -α-lipoyl-ε-amino acid,
(10) α-lipoylamino acid is N-α-lipoylaminoethanesulfonic acid, N-α-lipoylaspartic acid, N-α-lipoylglycine, N-α-lipoyl-γ-amino-n-butyric acid N-α-lipoyl-6-aminohexanoic acid, N-α-lipoylphenylalanine, N-α-lipoyl-5-hydroxytryptophan, N-α-lipoylanthranilic acid, N-α-lipoylmethionine and N A stabilizing method according to (8) above, which is selected from the group consisting of -α-lipoylcysteine, and
(11) The stabilization method according to the above (8), wherein the sulfite is sodium sulfite, potassium sulfite, sodium bisulfite or potassium bisulfite, and the metabisulfite is sodium metabisulfite or potassium metabisulfite.
[0008]
Examples of the sulfite used in the present invention include sodium sulfite or potassium sulfite, sodium bisulfite or potassium bisulfite, and examples of the metabisulfite include sodium metabisulfite or potassium metabisulfite. If necessary, two or more of these salts may be contained in appropriate combination.
[0009]
The α-lipoyl amino acid used in the present invention has a structure in which α-lipoic acid and amino acid are amide-bonded. In the present invention, an amino acid is a so-called α-amino acid, β-amino acid, γ-amino acid, δ-amino acid, ε-amino acid, aminomethylcyclohexanecarboxylic acid and anthranilic acid having a carboxyl group and an amino group in the same molecule, In addition, it means aminoethanesulfonic acid (taurine) having a sulfonic acid group and an amino group in the same molecule. Examples of α-amino acids include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, serine, threonine, tyrosine, cysteine, methionine, aspartic acid, asparagine, glutamic acid, glutamine, arginine, lysine, histidine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, hydroxytryptophan Etc. are exemplified. Examples of β-amino acids include β-alanine, examples of γ-amino acids include γ-amino-n-butyric acid (GABA) and carnitine, and examples of δ-amino acids include 5-aminorepric acid and 5-aminovaleric acid. , Ε-amino acid includes 6-aminohexanoic acid.
[0010]
Examples of the pharmacologically acceptable salt of the α-lipoylamino acid used in the present invention include alkali metal salts such as sodium salt and potassium salt and alkaline earth metal salts such as calcium salt and magnesium salt. Even salts other than those can be appropriately stabilized by the stabilization method of the present invention.
[0011]
The α-lipoyl amino acid used in the present invention can be appropriately synthesized by, for example, the following synthesis method or a similar manner.
[0012]
[Chemical 1]

(In the formula, A represents an N-linked amino acid residue.)
[0013]
As a method for synthesizing α-lipoyl amino acids, it is common to esterify an acidic carboxylic acid of an amino acid as a protecting group, to form an acid amide with α-lipoic acid and a dehydrating condensing agent, and finally saponify. However, in the case of aminoethylsulfonic acid and the like, it is difficult to synthesize by this method, but when synthesized by the mixed acid anhydride method (MA method), the target compound α-lipoylamino acid can be obtained in high yield. it can. That is, α-lipoic acid is dissolved in an organic solvent (for example, chloroform, tetrahydrofuran, acetonitrile, etc.), and in the presence of a tertiary amine (triethylamine, tributylamine, N-methylmorpholine (NMM), etc.) −15 ° C. to −5 Reaction with a mixed acid anhydride reagent such as halogenated carbonate (ethyl chlorocarbonate, butyl chlorocarbonate, etc.), isobutyloxycarbonyl chloride, diethylacetyl chloride or trimethylacetyl chloride, and a mixed acid anhydride of α-lipoic acid To do. The reaction time is about 1-2 minutes to several tens of minutes. Further, the amino acid is reacted in the presence of an alkali (sodium hydroxide, potassium hydroxide, etc.) dissolved in a solvent such as alcohol, water or a mixture thereof, and then recrystallized from an appropriate solvent such as water or alcohol. As a result, α-lipoylamino acid can be obtained in high yield.
[0014]
Examples of the solvent used in the aqueous liquid preparation of the present invention include purified water, particularly distilled water for injection.
[0015]
Various additives such as commonly used buffers, isotonic agents, solubilizing agents, preservatives, thickeners, chelating agents, and fragrances may be appropriately added to the aqueous liquid preparation of the present invention.
[0016]
Examples of the buffer include a phosphate buffer, a borate buffer, a citrate buffer, a tartrate buffer, and an acetate buffer.
[0017]
Examples of the isotonic agent include sugars such as sorbitol, glucose and mannitol, polyhydric alcohols such as glycerin and propylene glycol, and salts such as sodium chloride.
[0018]
Examples of the solubilizer include nonionic surfactants such as polyoxyethylene sorbitan monooleate, polyoxyethylene oxystearic acid triglyceride, polyethylene glycol, and polyoxyethylene hydrogenated castor oil.
[0019]
Examples of the preservative include quaternary ammonium salts such as benzalkonium chloride, benzethonium chloride, cetylpyridinium chloride, paraoxybenzoates such as methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate, propyl paraoxybenzoate, and butyl paraoxybenzoate. Benzyl alcohol, phenethyl alcohol, sorbic acid and salts thereof, thimerosal, chlorobutanol, sodium dehydroacetate and the like.
[0020]
Examples of the thickener include polyvinyl pyrrolidone, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, methyl cellulose, hydroxypropyl methyl cellulose, carboxymethyl cellulose, and salts thereof.
[0021]
Examples of chelating agents include sodium edetate and citric acid.
[0022]
Examples of the fragrance include 1-menthol, borneol, camphor, and eucalyptus oil.
[0023]
The aqueous liquid preparation of the present invention is used as an injection or eye drops. When used as an injection, the pH is usually adjusted to about 3.5 to 8.5, preferably about 6 to 7, and when used as an eye drop, the pH is usually adjusted to about 3.5 to 8.5, preferably about 6 to 7.
[0024]
Although the manufacturing method of the aqueous liquid preparation of this invention changes with kinds of liquid agent, a well-known method can be used suitably for each liquid agent.
[0025]
The aqueous liquid preparation containing the α-lipoylamino acid of the present invention can be used as an injection or eye drops to prevent various diseases caused by oxidative stress, such as ischemic heart disease, cerebral ischemia, arteriosclerosis, diabetes, and cataract.・ Useful for treatment.
[0026]
The aqueous solution of the present invention contains about 0.001 to 1.0 (w / v)%, preferably about 0.01 to 0.5, of sulfite or metabisulfite with respect to about 0.01 to 5.0 (w / v)% α-lipoylamino acid. (w / v)%.
[0027]
When the α-lipoylamino acid used in the present invention is used as a prophylactic / therapeutic agent for the above-mentioned diseases, the dosage is the type of α-lipoylamino acid used, the weight and age of the patient, the target disease For example, in the case of injection, it is preferable to administer about 1 mg to about 30 mg once a day for adults. In the case of eye drops, it is preferable to administer an eye drop having a concentration of about 0.01 to 5 (w / v)% once a day for adults.
[0028]
The aqueous liquid preparation containing the α-lipoylamino acid of the present invention may appropriately contain other same or different medicinal ingredients as long as the object of the present invention is not violated.
[0029]
Further, the aqueous liquid preparation of the present invention is intended for ultraviolet absorption (suppression of erythema by UV irradiation, prevention of sunburn, etc.), skin whitening (prevention of melanin pigmentation causing stains, freckles, etc.) and anti-wrinkle, or For the purpose of stabilizing other cosmetic ingredients, it is also used as cosmetics such as lotions and lotions. When the aqueous liquid preparation of the present invention is used as cosmetics, components usually used in cosmetics can be appropriately added.
[0030]
【Example】
Next, the present invention will be described in more detail with reference examples and examples.
[0031]
Reference Example 1 N-α-Lipoylaminoethanesulfonic acid sodium salt
Dissolve 6.2 g of DL-α-lipoic acid in 60 mL of chloroform, add 3.2 g of triethylamine and cool it to −5 ° C., and gradually add 3.3 g of ethyl chlorocarbonate dropwise thereto. A solution prepared by dissolving 4.5 g of ethanesulfonic acid and 1.5 g of sodium hydroxide in 60 mL of methanol was added all at once, and the temperature was returned to room temperature for 15 minutes and further stirred for 1 hour. Next, a solution in which 1.5 g of sodium hydroxide was dissolved in 50 mL of methanol was added thereto, and the solvent was concentrated to 1/3 under reduced pressure, and 60 mL of ethanol was added thereto, and the precipitated crystals were collected by filtration. This was recrystallized from water-methanol to obtain 5.8 g of white crystals of the sodium salt of the target compound. Melting point 235-237 ° C. TLC, Rf = 0.53 (n-butanol: acetic acid: water = 4: 1: 2)
[0032]
Elemental analysis: C ₁₀ H ₁₇ NO ₄ S ₃ Na · H ₂ O Theoretical values: C, 34.08 H, 5.43 N, 3.97
Measured value: C, 34.23 H, 5.54 N, 3.80
[0033]
Reference Example 2 N-α-lipoylaminoethanesulfonic acid potassium The sodium hydroxide of Reference Example 1 was replaced with 4.0 g of potassium hydroxide and reacted in the same manner as in Reference Example 1, and recrystallized from water / methanol. As a result, 6.5 g of white crystals of the potassium salt of the target compound were obtained. Melting point 240-242 ° C.
[0034]
Reference Example 3 Calcium and magnesium N-α-lipoylaminoethanesulfonate The sodium salt obtained in Reference Example 1 was dissolved in water and desalted with a sulfonic acid resin to give a free acid. Each was neutralized with magnesium to obtain a water-soluble calcium salt or magnesium salt, respectively. Each melting point is over 300 ℃.
[0035]
Reference Example 4 N-α-Lipoyl-6-aminohexanoic acid sodium salt
Reaction was carried out in the same manner as in Reference Example 1 using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 3.0 g of 6-aminohexanoic acid, and recrystallized from ethanol to obtain 3.0 g of yellowish white crystals of the target compound. Melting point 200-202 ° C (decomposition). TLC, Rf = 0.84 (chloroform: methanol: water = 5: 4: 1)
[0036]
Reference Example 5 N-α-Lipoylaspartate disodium
Using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 2.9 g of L-aspartic acid, the reaction treatment was carried out in the same manner as in Reference Example 1 and recrystallized from water / methanol to obtain 4.5 g of white crystals of the target compound. Melting point 300 ° C or higher. TLC, Rf = 0.47 (chloroform: methanol: water = 4: 1: 2)
[0037]
Reference Example 6 N-α-lipoyl-γ-amino-n-butyric acid sodium salt
Using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 2.3 g of γ-amino-n-butyric acid, the reaction was carried out in the same manner as in Reference Example 1 and recrystallized from ethanol to obtain 4.0 g of the sodium salt of the target compound. . Decomposes gradually from around 235 ° C. TLC, Rf = 0.76 (chloroform: methanol: water = 4: 1: 2)
[0038]
Reference Example 7 N-α-lipoylglycine sodium
The reaction was carried out in the same manner as in Reference Example 1 using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 1.9 g of glycine, and recrystallized from methanol / ethanol to obtain 4.5 g of pale yellow crystals of the target compound. Melting point 218-220 ° C (decomposition). TLC, Rf = 0.64 (chloroform: methanol: water = 4: 1: 2)
[0039]
Reference Example 8 N-α-lipoylphenylalanine
Reaction was carried out in the same manner as in Reference Example 1 using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 3.5 g of L-phenylalanine, and the solvent was distilled off, followed by extraction with hydrochloric acid as ethyl acetate, washing with water, Distilled off. The residual crystals were recrystallized from ethanol / isopropyl ether to obtain 5.4 g of pale yellow crystals of the target compound. Melting point 154-156 ° C (decomposition). TLC, Rf = 0.86 (n-butanol: acetic acid: water = 4: 1: 2)
[0040]
Reference Example 9 N-α-lipoyl-5-hydroxytryptophan
Reaction was carried out in the same manner as in Reference Example 8 using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 5.0 g of L-5-hydroxytryptophan to obtain 6.4 g of the target compound as white crystals. Melting point 118-120 ° C. TLC, Rf = 0.85 (n-butanol: acetic acid: water = 4: 1: 2)
[0041]
Reference Example 10 N-α-Lipoyl anthranilate sodium
Using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 3.2 g of anthranilic acid, the reaction treatment was performed in the same manner as in Reference Example 1 to obtain 3.6 g of white crystals of the target compound. Melting point 300 ° C or higher. TLC, Rf = 0.89 (n-butanol: acetic acid: water = 4: 1: 2)
[0042]
Reference Example 11 N-α-Lipoylmethionine
A reaction treatment was carried out in the same manner as in Reference Example 8 using 4.2 g of DL-α-lipoic acid and 3.5 g of L-methionine to obtain 4.0 g of pale yellow crystals of the target compound. Melting point 108-109 ° C or higher. TLC, Rf = 0.81 (n-butanol: acetic acid: water = 4: 1: 2)
[0043]
Reference Example 12 N-α-lipoylcysteine sodium
DL-α-lipoic acid (4.2 g) and triethylamine (2.2 g) were dissolved in tetrahydrofuran (60 mL), cooled to −5 ° C. and stirred, and then ethyl chlorocarbonate (2.3 g) was gradually added dropwise thereto. After a further 6 minutes, a solution of 2.6 g of L-cysteine and 2.5 g of triethylamine in 20 mL of water was added and reacted in the same manner as in Reference Example 1, followed by extraction with ethyl acetate as acidic hydrochloric acid, washing with water, and then distilling ethyl acetate. The residue is dissolved in ethanol, sodium hydroxide / methanol solution is gradually added thereto to adjust the pH to 7, and the white crystals precipitated are collected by filtration and recrystallized from water / ethanol to give 4.3 g of the target compound as white crystals. Obtained. Decomposes gradually from around 150 ° C. TLC, Rf = 0.72 (n-butanol: acetic acid: water = 4: 1: 2)
[0044]

Sodium bisulfite was added to the above basic formulation so as to be 0%, 0.01%, and 0.1% (w / v).
As a result, the degree of odor after 1 month at 30 ° C. was 0.01 and 0.1% (w / v), respectively, +1 and 0, assuming that the case of sodium bisulfite 0% (w / v) was +4.

[0045]
On the other hand, in the case of an aqueous solution of glutathione and cysteine, the odor increased on the contrary when sulfite was added.
[0046]
Example 2 Injection Formulation Basic Formula Sodium α-Lipoylaminoethanesulfonate 5.0 g
D-mannitol 2.0g
100ml distilled water for injection
To the above basic formulation, sodium metabisulfite was added so as to be 0% (w / v) and 0.1% (w / v), and the degree of odor was evaluated based on the above criteria.
As a result, the degree of odor after 1 month at 30 ° C. was 0 at 0.1% (w / v), assuming that sodium metabisulfite 0% (w / v) was +4.
[0047]
Example 3 Eye Drop N-α-Lipoylcysteine Sodium 0.5g
Sodium bisulfite 0.1g
Boric acid 0.7g
Sodium chloride 0.5g
Methyl p-oxybenzoate 0.026g
Propyl p-oxybenzoate 0.014g
Sterile purified water Total volume 100mL
The degree of odor was evaluated according to the above criteria. The degree of odor after 1 month at 30 ° C. was almost the same as in Example 1.
[0048]
【The invention's effect】
According to the method for stabilizing an α-lipoylamino acid or a pharmacologically acceptable salt thereof of the present invention, generation of hydrogen sulfide, mercaptan and the like is effectively suppressed. Therefore, the aqueous liquid preparation of the present invention is advantageously used as injections, eye drops, cosmetics and the like.

Claims

An aqueous solution containing α-lipoylamino acid or a pharmacologically acceptable salt thereof and 0.01 to 0.5 w / v% sulfite or metabisulfite.

α-lipoylamino acid is N-α-lipoyl-α-amino acid, N-α-lipoyl-β-amino acid, N-α-lipoyl-γ-amino acid, N-α-lipoyl-δ-amino acid and N-α- The aqueous liquid preparation according to claim 1, which is selected from the group consisting of lipoyl-ε-amino acid.

α-lipoyl amino acid is N-α-lipoylaminoethanesulfonic acid, N-α-lipoylaspartic acid, N-α-lipoylglycine, N-α-lipoyl-γ-amino-n-butyric acid, N- α-lipoyl-6-aminohexanoic acid, N-α-lipoylphenylalanine, N-α-lipoyl-5-hydroxytryptophan, N-α-lipoylanthranilic acid, N-α-lipoylmethionine and N-α- The aqueous liquid preparation according to claim 1, which is selected from the group consisting of lipoylcysteine.

The aqueous liquid preparation according to claim 1, wherein the sulfite is sodium sulfite, potassium sulfite, sodium hydrogen sulfite or potassium hydrogen sulfite, and the metabisulfite is sodium metabisulfite or potassium metabisulfite.

It is an injection, The aqueous liquid preparation in any one of Claims 1-4.

The aqueous liquid preparation according to any one of claims 1 to 4, which is an eye drop.

It is cosmetics, The aqueous liquid agent in any one of Claims 1-4.

Addition of 0.01 to 0.5 w / v% sulfite or metabisulfite, an unpleasant odor of an aqueous liquid containing α-lipoylamino acid or a pharmacologically acceptable salt thereof A method to suppress the occurrence.

α-lipoylamino acid is N-α-lipoyl-α-amino acid, N-α-lipoyl-β-amino acid, N-α-lipoyl-γ-amino acid, N-α-lipoyl-δ-amino acid and N-α- The method according to claim 8, wherein the method is selected from the group consisting of lipoyl-ε-amino acid.

α-lipoyl amino acid is N-α-lipoylaminoethanesulfonic acid, N-α-lipoylaspartic acid, N-α-lipoylglycine, N-α-lipoyl-γ-amino-n-butyric acid, N- α-lipoyl-6-aminohexanoic acid, N-α-lipoylphenylalanine, N-α-lipoyl-5-hydroxytryptophan, N-α-lipoylanthranilic acid, N-α-lipoylmethionine and N-α- The method according to claim 8, wherein the method is selected from the group consisting of lipoylcysteine.

The method according to claim 8, wherein the sulfite is sodium sulfite, potassium sulfite, sodium hydrogen sulfite or potassium hydrogen sulfite, and the metabisulfite is sodium metabisulfite or potassium metabisulfite.