JP4143169B2

JP4143169B2 - ノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物

Info

Publication number: JP4143169B2
Application number: JP13857798A
Authority: JP
Inventors: 稔瀧澤; 知子野村; 登松尾; 匡秀星野
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1998-05-20
Filing date: 1998-05-20
Publication date: 2008-09-03
Anticipated expiration: 2018-05-20
Also published as: JPH11335390A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は新規なノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物、並びにこれを有効成分とする医薬、ラクトシルセラミド合成酵素阻害剤、細胞接着抑制剤及び癌転移抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
ノジリマイシン（５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−グルコピラノース）は、Ｄ−グルコース環を構成する酸素原子をＮＨで置換した構造を有する抗生物質である（ＩｓｈｉｄａＮ．，ＫｕｍａｇａｉＫ．，ＮｉｉｄａＴ．，ＨａｋｏｍｏｔｏＫ．，ＳｈｏｍｕｒａＴ．Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．Ｍａｒ．１９６７，２０（２）ｐ．６２−６５）。近年かかるノジリマイシンまたはその誘導体の生理活性について多くの研究が行われ、例えばノジリマイシン、ノジリマイシン亜硫酸付加物、ノジリマイシンＢ（５−アミノ−５−デオキシ−Ｄ−マンノピラノース）、ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物及び１−デオキシノジリマイシンが癌の転移抑制作用を有することが明らかとなった（特開平１−２７５５３１号公報）。しかしながら上記ノジリマイシン及びその誘導体の癌の転移抑制作用は必ずしも満足できるものではなかった。
【０００３】
一方スフィンゴ糖脂質の生合成に作用するラクトシルセラミド合成酵素は、動脈硬化症の発症に関与することが近年明らかになりつつある。このため、今後かかるラクトシルセラミド合成酵素を阻害する物質、特に同様にＵＤＰ−ガラクトースからガラクトースを転移させる点で共通するガラクトース転移酵素（ガラクトースを糖蛋白質の糖鎖に転移する酵素（ＹａｄａｖＳ．Ｐ．ａｎｄＢｒｅｗＫ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｊａｎ．１９９１，２６６（２）ｐ．６９８−７０３）の活性を阻害せず、ラクトシルセラミド合成酵素の活性のみを特異的に阻害する物質の研究が必要になると考えられるが、これまでラクトシルセラミド合成酵素を特異的に阻害する物質はほとんど見出されていないのが現状である。
【０００４】
血中を流れている癌細胞、白血球はセレクチン等の接着蛋白質と糖鎖の結合により血管内皮細胞に接着する。
かかる細胞接着性が増加した場合、腫瘍の増殖や転移が容易になるという極めて重大な問題が生じる。例えば悪性腫瘍においては、多くの腫瘍でルイスＸ、シアリルルイスＸ糖脂質の新たな発現により血管内皮や血小板への接着性が増大し、腫瘍の転移が容易になると考えられている（ＣｏｏｌｉｎｇＬ．Ｌ．Ｗ．，ＺｈａｎｇＤ．−Ｚ．，ＫｏｅｒｎｅｒＴ．Ａ．Ｗ．ＴｒｅｎｄｓｉｎＧｌｙｃｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＧｌｙｃｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｖｏｌ９Ｎｏ．４６（Ｍａｒｃｈ１９９７）ｐ．１９１−２０９）。このため細胞間接着を抑制する物質が望まれていた。
【０００５】
したがって本発明は、癌の転移、細胞間接着を抑制し、またラクトシルセラミド合成酵素を特異的に阻害することができる化合物、並びにかかる化合物を有効成分とする医薬、ラクトシルセラミド合成酵素阻害剤、癌転移抑制剤及び細胞接着抑制剤を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記目的を達成するため鋭意研究した結果、後記一般式（１）で表される新規なノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩が癌の転移や細胞間接着を抑制し、またラクトシルセラミド合成酵素を特異的に阻害することから医薬や種々の試薬として有用であることを見出し、本発明を完成させた。
【０００７】
すなわち、本発明は次の一般式（１）：
【０００８】
【化２】

【０００９】
（式中、Ｒは炭素数２〜１３の直鎖または分岐鎖のアシル基を示す。）で表されるノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩を提供するものである。
さらに本発明は、一般式（１）で表されるノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩を有効成分とする医薬、ラクトシルセラミド合成酵素阻害剤、細胞接着抑制剤及び癌転移抑制剤を提供するものである。
【００１０】
【発明の実施の形態】
一般式（１）中、Ｒは炭素数２〜１３の直鎖または分岐鎖のアシル基であり、具体的には例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、バレリル基、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、オクタノイル基、ノナノイル基、デカノイル基、ウンデカノイル基、ドデカノイル基、トリデカノイル基、イソブチリル基、イソバレリル基、ｓｅｃ−バレリル基、ｔｅｒｔ−バレリル基、イソヘキサノイル基、ｓｅｃ−ヘキサノイル基、ｔｅｒｔ−ヘキサノイル基、イソヘプタノイル基、ｓｅｃ−ヘプタノイル基、ｔｅｒｔ−ヘプタノイル基、イソオクタノイル基、ｓｅｃ−オクタノイル基、ｔｅｒｔ−オクタノイル基、イソノナノイル基、ｓｅｃ−ノナノイル基、ｔｅｒｔ−ノナノイル基、イソデカノイル基、ｓｅｃ−デカノイル基、ｔｅｒｔ−デカノイル基、イソウンデカノイル基、ｓｅｃ−ウンデカノイル基、ｔｅｒｔ−ウンデカノイル基、イソドデカノイル基、ｓｅｃ−ドデカノイル基、ｔｅｒｔ−ドデカノイル基、イソトリデカノイル基、ｓｅｃ−トリデカノイル基、ｔｅｒｔ−トリデカノイル基等が挙げられる。このうち炭素数２〜７の直鎖または分岐鎖のアシル基が好ましく、２〜５の直鎖のアシル基が特に好ましく、アセチル基が最も好ましい。
【００１１】
また一般式（１）で表されるノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物の塩としては、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、トリエタノールアミン、カルシウム、リチウム塩等が挙げられるが、それらには限定されない。
【００１２】
本発明のノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物は、例えばノジリマイシン亜硫酸付加物に対応するアシル基を有する酸または酸無水物等の反応性誘導体を反応させることにより得ることができる。
【００１３】
一般式（１）で表されるノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩は、他のガラクトース転移酵素を阻害せず、ラクトシルセラミド合成酵素を特異的に阻害する。したがって動脈硬化症治療剤等の医薬、その他の試薬として有用である。また癌転移の抑制に有効であり、さらに細胞接着の抑制、特に血管内皮細胞と腫瘍細胞との接着抑制に有効である。したがって、癌転移抑制剤、悪性腫瘍治療剤等の医薬としても有用である。
【００１４】
一般式（１）で表されるノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩は、医薬として使用する場合、外用及び内服のいずれの方法でも投与可能であるが、内服剤として用いることが好ましい。本発明の医薬は、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、または水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等に製剤化することができる。製剤化にあたっては、一般的に用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、基剤、懸濁化剤、乳化剤、保湿剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、矯味剤等を添加し、常法にしたがって製造することができる。
【００１５】
本発明の医薬は対象疾患、投与経路、年令、体重などによっても異なるが、通常ノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩として、１０〜５０００mg／日投与するのが好ましい。
【００１６】
【実施例】
次に実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００１７】
実施例１
ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物（一般式（１）においてＲがアセチル基、以下同じ）の合成
ノジリマイシン亜硫酸付加物１０mgをピリジン：無水酢酸＝１：１の溶液２mlに懸濁し、室温で２０時間撹拌して反応させた。反応終了後窒素気流で溶媒を除去し、生成物をクロロホルムに溶解し、蒸留水を加えてクロロホルム層を３回洗浄することにより、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物１４．６mg（収率６６％）を得た。該化合物の物性は次の通りである。
【００１８】
ＩＲ（νｎｅａｔ，ｃｍ^-1）；２９９０，１７５０，１６８５，１４２５，１３７０，１２３５，１０４５
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，δ）；２．０５（ｓ，３Ｈ）、２．０６（ｓ，３Ｈ）、２．０８（ｓ，３Ｈ）、２．１０（ｓ，３Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）、４．００−４．５０（ｍ，３Ｈ）、４．７５−５．５０（ｍ，４Ｈ）
【００１９】
試験例１
ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物によるＣＨＯ細胞のラクトシルセラミド及びＧＭ３合成阻害
６穴培養プレート上にコンフルエントとなったＣＨＯ−Ｋ１細胞に対して最終濃度６２．５μＭ、１２５μＭ、２５０μＭとなるようにノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物を添加した。これを３７℃で２時間培養後Ｄ−［Ｕ−¹⁴Ｃ］−ガラクトースを１２８ｋＢｑずつ添加し、さらに３７℃で６時間培養した。細胞をＰＢＳで洗浄した後収穫し、ＢｌｉｇｈａｎｄＤｙｅｒ法で抽出した。得られた脂質をシリカゲル６０ＨＰＴＬＣプレートに着点し、クロロホルム：メタノール：水＝６０：３５：８で展開した。次いでバイオ・イメージングアナライザーＢＡＳ２０００（冨士写真フィルム社製）を用いて、標識されたラクトシルセラミド及びＧＭ３の検出を行った。結果を図１に示す。図１はラクトシルセラミドまたはＧＭ３の合成量を、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物の濃度が０μＭの場合に対する相対値（％）で示したものである。
【００２０】
図１より、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物は、ＣＨＯ細胞におけるラクトシルセラミド及びＧＭ３の合成を強く阻害することが確認された。
【００２１】
試験例２
ＨＬ−６０細胞と血管内皮細胞との接着阻害
９６穴培養プレート上コンフルエントとなったヒト血管内皮細胞に対し、ヒトＩＬ−１αを最終濃度が２．５ng／mlとなるように添加し、６時間培養した。培養液を除去し、ＲＰＭＩ−１６４０培地で２回洗浄した。次いでこれに、予めノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物で２４時間培養後、⁵¹Ｃｒで標識したヒト骨髄腫細胞ＨＬ−６０（１０⁶ｃｅｌｌｓ／ml）を２００μｌ添加し、３０分間培養した。次いで未接着細胞を除去し、接着細胞を溶解後その放射活性を測定して細胞接着率（％）を算出した。結果を図２に示す。なおここで細胞接着率とは、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物の濃度が０μＭの場合に対する接着量（％）を示す。
【００２２】
図２より、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物は、ＨＬ−６０細胞と血管内皮細胞間において優れた細胞接着抑制活性を有することが確認された。
【００２３】
【発明の効果】
本発明のノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩は、優れたラクトシルセラミド合成酵素阻害効果、細胞接着抑制効果及び癌転移抑制効果を有し、医薬及び種々の試薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】ラクトシルセラミドまたはＧＭ３の合成量を、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物の濃度が０μＭの場合に対する相対値（％）で示したものである。
【図２】ＨＬ−６０細胞と血管内皮細胞との接着率を、ノジリマイシン亜硫酸付加物のアセチル化物の濃度が０μＭの場合に対する相対値で示したものである。

Claims

次の一般式（１）：

（式中、Ｒは炭素数２〜１３の直鎖または分岐鎖のアシル基を示す。）で表されるノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩。
請求項１記載のノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩を有効成分とする医薬。
請求項１記載のノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩を有効成分とするラクトシルセラミド合成酵素阻害剤。
請求項１記載のノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩を有効成分とする細胞接着抑制剤。
請求項１記載のノジリマイシン亜硫酸付加物のアシル化物またはその塩を有効成分とする癌転移抑制剤。