JP4077950B2

JP4077950B2 - 蓋付き容器

Info

Publication number: JP4077950B2
Application number: JP24811698A
Authority: JP
Inventors: 亨伊藤; 文隆百瀬; 正充本間
Original assignee: AGC Techno Glass Co Ltd
Current assignee: AGC Techno Glass Co Ltd
Priority date: 1998-09-02
Filing date: 1998-09-02
Publication date: 2008-04-23
Anticipated expiration: 2018-09-02
Also published as: JP2000069957A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、細胞および組織の培養、特に培養細胞遺伝子突然変異試験やモノクローナル抗体作成のためのハイブリドーマのクローニングなどのための多房型細胞培養容器として好適に使用することができる蓋付き容器に関する。
【０００２】
【従来の技術】
多房型細胞培養容器を含む細胞培養容器は、一般に細胞の生体外での培養のために使用されており、特に多房型細胞培養容器については、通常、６個、１２個、２４個、４８個および９６個の培養房と称される穴部を備えて形成されている。
【０００３】
上記多房型細胞培養容器の具体的な構造に関しては、例えば特公昭６２−６００７５号公報のほか、米国特許第４３４９６３２号、同第４０３８１４９号、同第４０１２２８８号、同第４０１００７８号、同第３５９７３２６号及び同第３１０７２０４号などとして既に提案されている。
【０００４】
これらのうち、特公昭６２−６００７５号公報に開示されている蓋付き容器は、図３に示す全体斜視図からも明らかなように、容器本体４と、該容器本体４の開口面を覆って施蓋される蓋体２とで蓋付き容器１の全体が構成されている。
【０００５】
この場合、容器本体４には、培養房と称される独立した複数個の穴部３が形成されており、これら穴部３内で細胞の培養ができるようになっていることから、培地および培養細胞も各穴部３ごとに独立した隔離状態を維持できるようになっている。したがって、該容器１を用いる場合には、例えばある特定物質に対する培養細胞の反応（増殖の様子や形態的な変化など）の観察等、様々な培養に関する試験や分析を好適に行うことができることになる。
【０００６】
しかし、同一の容器１を使用して培養する場合には、通常、各穴部３相互間でそれぞれの試料が混入してはならないことが多いので、各穴部３内への試料等の分注は個別に行わなければならならなかった。
【０００７】
一方、図４は、小容量の細胞培養や、ＨＬＡタイピング、リンパ球分類テスト、補体結合反応などの組織血液型判定用に使用する一般に周知のテラサキプレートと称されている蓋付き容器についての全体斜視図である。
【０００８】
テラサキプレートと称される蓋付き容器５の全体は、図３に示す多房型の容器１と同様に、容器本体６と、該容器本体６の開口面を覆って施蓋される蓋体９とで構成されている。そして、該容器５は、底板部７に凹設された複数個の穴部８を有する構造を備えている。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
ところで、図３に示す蓋付き容器１の場合、細胞の培養に関する試験や分析作業においては、各穴部３のすべてに同一の試料を分注することもあり、かかる場合においては、分注段階で穴部３ごとに独立に液体試料を注ぎ入れる必要がなく、各穴部３間で試料が混入しても、各穴部３あたり目的の量だけ分注できさえすれば支障がないこともある。具体的には、穴部３のすべてに同一の細胞懸濁液を分注し、一定期間培養後、各穴部３の観察及び形成された細胞のコロニーの計数または単離等を行う培養細胞遺伝子突然変異試験やモノクローナル抗体作製のためのハイブリドーマのスクリーニング等の実験がある。このような実験の場合、試料等の分注を各々の穴部３に対して独立に行う操作は大変煩雑で、時間を費やしてしまう。９６個の穴部３を有する容器（多房型培養容器）１については、現在、市販されている８連または１２連のピペットを用いれば、効率的に分注できるものの、枚数が多くなると、やはり大変煩雑な作業になる。処理数が大規模になれば、周知の自動分注機などを使用することにより、作業効率を高めることはできるものの、該自動分注器自体が非常に高価であり、中小規模の実験段階での使用には経済的に引き合わないという不都合があった。
【００１０】
また、図４に示す蓋付き容器（テラサキプレート）５の場合、容器本体６が備える各穴部８は、一般に容量が小さいため保持できる液量も少なく、また、穴部８の開口部から底部にかけて、ほぼ凹曲面状またはすり鉢状になっていて細かな顕微鏡観察には不向きであることから、培養細胞遺伝子突然変異試験等には適さないという問題があった。
【００１１】
本発明は従来技術にみられた上記課題に鑑み、容器本体の囲繞空間内に液体試料を注ぎ入れた後、吸引ノズルで余剰分の液体試料を単に吸い取ることによって、所定量の液体試料を各穴部内に分注できるようにして処理の迅速化を実現し、特に培養細胞遺伝子突然変異試験やモノクローナル抗体作製のためのハイブリドーマのスクリーニングなどの実験に優れた威力を発揮させることができる蓋付き容器を提供することにその目的がある。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明は上記目的を達成すべくなされたものであり、その構成上の特徴は、所要の板厚を備えた底板部の周囲に堰板部を立設して画成された囲繞空間を有してなる容器本体と、該容器本体の開口面を覆って施蓋される蓋体とで構成され、容器本体における前記底板部には、液体試料を個別に定量保持し得る複数個の穴部と、容器本体の囲繞空間内に注ぎ入れられた液体試料のうちの余剰分を吸引ノズルで吸引除去してその液面高さを調整する際に有用な少なくとも１個の液溜り穴部とを、前記底板部の平坦な上表面にそれぞれの開口部を位置させて個別に凹設したことにある。
【００１３】
この場合、前記穴部は、その底面部から開口部に向かって次第に拡径するテーパーが付された円形の平面形状を呈し、かつ、その深さが２〜７ｍｍとなってそれぞれが相互に同一の容量を有してることが好ましい。また、前記穴部のそれぞれは、行方向と列方向とに整列させ、かつ、行もしくは列方向で隣り合う相互の距離が等しくなるように離間させて配置するのが望ましい。
【００１４】
さらに、最外周に位置して堰板部と近接する一連の穴部は、堰板部の内側面側にそれぞれの外縁が到達する配置関係のもとで凹設するとともに、該内側面へと到達した部位の各穴部の拡径形状に沿わせて直上する円弧状の凹曲面を前記内側面に削成して連続させるのが好ましい。なお、前記容器本体と蓋体とは、透明なガラス材もしくは透明な合成樹脂材で形成するのが好ましい。
【００１５】
【発明の実施の形態】
図１は本発明に係る蓋付き容器の一例を開蓋状態のもとで示す全体斜視図であり、所要の板厚を備えて少なくともその上表面１４が平坦となった底板部１３の周囲に堰板部１７を立設して画成された囲繞空間２０を有してなる容器本体１２と、該容器本体１２の開口面１２ａを覆って施蓋される蓋体２１とで構成されている。
【００１６】
このうち、容器本体１２は、例えば短辺が７０〜９０ｍｍで、長辺が１２０〜１３０ｍｍで、板厚が３〜８ｍｍの方形の平面形状を呈する底板部１３と、該底板部１３における上表面１４からの高さが４〜６ｍｍである堰板部１７とで構成されており、図２（ａ）に示されるように例えば試験管２５から注ぎ込まれる所要量の液体試料Ｌを収容できるように形成されている。なお、容器本体１２は、図示例以外にも、穴部１５の必要個数との関係で定まる適宜の寸法のもとで適宜形成することができる。
【００１７】
しかも、底板部１３には、図２（ｃ）に示されるように一定量の液体試料Ｌを個別に保持し得る複数個の底面部１５ｂを有する穴部１５と、容器本体１２の囲繞空間２０内に注ぎ込まれた液体試料Ｌのうちの余剰分を吸引ノズル２６で吸引除去してその液面高さを調整する際に利用される例えば１個の液溜り穴部１６とが平坦な上表面１４にそれぞれの開口部１５ａ，１６ａを位置させて個別に凹設されている。
【００１８】
このうち、各穴部１５は、その底面部１５ｂから開口部１５ａに向かって次第に拡径するテーパーが付された円形の平面形状を呈し、かつ、その深さが２〜７ｍｍとなって、それぞれが倒置させた略截頭円錐形を呈する同一容量のもとで凹設するのが望ましい。
【００１９】
特に、培養細胞遺伝子突然変異試験等の細胞培養の場合では、各穴部１５の内部空間として４０〜３５００μl 程度の容量を確保できていれば十分なので、穴部１５の内径を５〜２５ｍｍの範囲で適宜設定することができる。また、穴部１５の底面部１５ｂが円形の平面形状を呈しているのが望ましい理由は、細胞が形成したコロニー等を単離する際、該穴部１５の底面部１５ｂが四角形等の角張った形状であると、コロニー等がコーナー部にできてしまった場合に回収しにくくなってしまうためである。
【００２０】
各穴部１５の深さを２〜７ｍｍとする理由は、底面部１５ｂから開口部１５ａまでの深さが２ｍｍよりも浅いと、穴部１５の内部空間体積が小さくなり、保持できる細胞培養用の培地が少なくなってしまい、培養細胞遺伝子突然変異試験を行うにあたって不都合が生じるからである。また、穴部１５の深さが７ｍｍよりも深いと、主な用途である培養細胞遺伝子突然変異試験等の細胞培養で細胞が形成するコロニーの観察および単離することに支障を生ずる恐れがあるためである。
【００２１】
さらに、個々の穴部１５は、例えば行もしくは列方向を１２個とし、列もしくは行方向を８個とすることにより、容器本体１２の底板部１３に計９６個を配列できるようにして凹設するなど、行方向と列方向とに整列させ、かつ、行もしくは列方向で隣り合う相互の距離が等しくなるように離間させて配置されている。しかも、この場合、図示は省略してあるが、例えば容器本体１２の堰板部１７の上端面１７ａを利用するなどして、穴部１５の行方向に沿わせて算用数字「１」〜「１２」を、列方向に沿わせてアルファベット「Ａ」〜「Ｈ」をそれぞれ表示するなど、位置座標を示す適宜の記号を行方向と列方向とに各別に表示しておくならば、個々の穴部１５の位置を迅速に特定できるので好ましい。
【００２２】
また、図１に示すように、底板部１３にあって最外周に位置する一連の穴部１５を堰板部１７の内側面１８側にそれぞれの外縁が到達する配置関係のもとで凹設するとともに、該内側面１８へと到達した部位の各穴部１５の拡径形状に沿わせて直上する円弧状の凹曲面１８ａを内側面１８に形成して連続させておくならば、容器本体１２内に注ぎ込まれるべき液体試料Ｌの供給量を必要最小限の量とすることができるので好ましい。
【００２３】
さらに、図２（ｂ）に示されるように液体試料Ｌを吸引するための吸引ノズル２６を差し込むために用意される液溜り穴部１６は、その開口部１６ａが穴部１５の開口部１５ａと同様に底板部１３の上表面１４に位置するものであれば、穴部１５の深さよりも深さが浅く、かつ、穴部１５の容量よりも小さな容量を保持するものであってもよい。また、液溜り穴部１６の配設位置と個数とは、穴部１５が凹設されていない底板部１３であれば特に制限はなく、適宜の一辺の１箇所または複数箇に凹設しておくのが好ましい。
【００２４】
さらにまた、容器本体１２にあって少なくとも前後もしくは左右のいずれか一方の側、図１に示した実施例では、左右に対となって位置する堰板部１７，１７のそれぞれの外側面１９，１９に前下がりに傾斜させて形成した斜面１９ａ，１９ａをガイド面とすることにより、蓋体２１をより容易に施蓋する例を示してあるが、これに限定されるものではなく、例えば垂直にするなど、所望に応じ適宜選定することができる。
【００２５】
なお、容器本体１２と蓋体２１とは、ポリスチレンなどの透明性のある樹脂材や透明なガラス材などを用いて形成するのが好ましい。
【００２６】
本発明はこのようにして構成されているので、その使用に際しては、図２（ａ）〜（ｃ）の過程を経ることにより各穴部１５内に液体試料Ｌを分注することができることになる。
【００２７】
すなわち、各種の試験や実験に従事する者は、あらかじめ試験管２５内に所要量入れてある例えば調整した細胞懸濁液などの液体試料Ｌを容器本体１２内に液面が底板部１３の上表面１４よりも高くなるよう単に注ぎ入れることにより、図（ａ）に示すように穴部１５内と液溜り穴部１６内とを含む囲繞空間２０内に適宜の液位のもとで液体試料Ｌを満たすことができる。
【００２８】
容器本体１２内への液体試料Ｌの注入を終えた後は、図（ｂ）に示すように液溜り穴部１６内に吸引ノズル２６を差し込んで液体試料Ｌを吸引することにより、余剰分を排除して液位を低くすることができる。
【００２９】
しかも、液溜り穴部１６の開口部１６ａは、穴部１５の開口部１５ａと同様に底板部１３の上表面１４に位置しているので、吸引ノズル２６による吸引除去作業を続けることにより、やがて、液体試料Ｌの液位も図（ｃ）に示すように底板部１３の上表面１４にまで下げることができる。また、必要に応じて容器本体１２を傾けることにより液体試料Ｌを液溜り穴部１６側に寄せた上で液溜り穴部１６に対する吸引ノズル２６による吸引除去作業を続けることにより、各穴部１５内にのみ液体試料Ｌを残して排除することができる。
【００３０】
このため、容器本体１２内へに注ぎ込まれた液体試料Ｌは、各穴部１５内に残留するのみとなり、余剰分の液体試料Ｌを容器本体１２内からすべて排除することができることになる。つまり、各穴部１５内に個別に液体試料Ｌを注入するという個別分注作業を経ることなく、容器本体１２の囲繞空間２０内に単に液体試料Ｌを注ぎ入れることにより、すべての穴部１５内にその容量に応じた所定分量の液体試料Ｌを自動的に保持させることができることになる。
【００３１】
【発明の効果】
以上述べたように本発明によれば、底板部には、液体試料を個別に定量保持し得る複数個の穴部と少なくとも１個の液溜り穴部とが、平坦な上表面にそれぞれの開口部を位置させて個別に凹設されているので、各穴部内に個別に液体試料を注入するという個別分注作業を経ることなく、液溜り穴部内の液体試料を吸引ノズルで吸引除去することですべての穴部内にその容量に応じた所定分量の液体試料を自動的に保持させることができ、実験もしくは試験時における作業効率の向上に大きく寄与させることができる。
【００３２】
また、深さが２〜７ｍｍとなって、それぞれが倒置させた略截頭円錐形を呈する同一容量のもとで各穴部が凹設されている場合には、培養細胞遺伝子突然変異試験等の細胞培養において、細胞が形成したコロニー等を単離する際にその回収を容易に行えるばかりでなく、必要にして十分な細胞培養用の培地を確保することができるほか、主な用途である培養細胞遺伝子突然変異試験等の細胞培養で細胞が形成するコロニーの観察と単離とを円滑に行うこともできることになる。
【００３３】
さらに、個々の穴部が底板部に行方向と列方向とに整列させ、かつ、行もしくは列方向で隣り合う相互の距離が等しくなるように離間させて配置されている場合には、主な用途である培養細胞遺伝子突然変異試験等において細胞が形成するコロニーの計数作業を容易化することができる。
【００３４】
さらにまた、各穴部の拡径形状に沿わせて直上する凹曲面が堰板部の内側面に形成されている場合には、容器本体内に注ぎ込まれるべき液体試料の供給量を必要最小限の量とすることができるので、作業性を向上させることができる。
【００３５】
また、容器本体の堰板部の外側面に斜面を形成してある場合には、蓋体を施蓋する際のガイド面とすることができるので、例えば自動施蓋装置を利用して施蓋する際などに有効に機能させることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明に係る蓋付き容器の一例を開蓋状態のもとで示す全体斜視図。
【図２】図１におけるＡ−Ａ線矢視方向での一部を省略した縦断面図を例に本発明に係る蓋付き容器に対し液体試料を分注する際の作業手順を（ａ）〜（ｃ）として示す説明図。
【図３】多房型細胞培養容器の従来例を開蓋状態のもとで示す全体斜視図。
【図４】一般にテラサキプレートと称されている蓋付き容器の従来例を開蓋状態のもとで示す全体斜視図。
【符号の説明】
１１蓋付き容器
１２容器本体
１２ａ開口面
１３底板部
１４上表面
１５穴部
１５ａ開口部
１５ｂ底面部
１６液溜り穴部
１６ａ開口部
１７堰板部
１７ａ上端面
１８内側面
１８ａ凹曲面
１９外側面
１９ａ斜面
２０囲繞空間
２１蓋体
２５試験管
２６吸引ノズル
Ｌ液体試料

Claims

所要の板厚を備えた底板部の周囲に堰板部を立設して画成された囲繞空間を有してなる容器本体と、該容器本体の開口面を覆って施蓋される蓋体とで構成され、容器本体における前記底板部には、液体試料を個別に定量保持し得る複数個の穴部と、容器本体の囲繞空間内に注ぎ入れられた液体試料のうちの余剰分を吸引ノズルで吸引除去してその液面高さを調整する際に有用な少なくとも１個の液溜り穴部とを、前記底板部の平坦な上表面にそれぞれの開口部を位置させて個別に凹設したことを特徴とする蓋付き容器。
前記穴部は、その底面部から開口部に向かって次第に拡径するテーパーが付された円形の平面形状を呈し、かつ、その深さが２〜７ｍｍとなってそれぞれが相互に同一の容量を有していることを特徴とする請求項１記載の蓋付き容器。
前記穴部のそれぞれは、行方向と列方向とに整列させ、かつ、行もしくは列方向で隣り合う相互の距離が等しくなるように離間させて配置したことを特徴とする請求項１または２記載の蓋付き容器。
最外周に位置して堰板部と近接する一連の穴部は、堰板部の内側面側にそれぞれの外縁が到達する配置関係のもとで凹設するとともに、該内側面へと到達した部位の各穴部の拡径形状に沿わせて直上する円弧状の凹曲面を前記内側面に削成して連続させたことを特徴とする請求項１ないし３のいずれかに記載の蓋付き容器。
前記容器本体と蓋体とは、透明なガラス材もしくは透明な合成樹脂材で形成されていることを特徴とする請求項１ないし４のいずれかに記載の蓋付き容器。