JP3983806B2 - Cyclic peptide analogues of somatostatin - Google Patents

Cyclic peptide analogues of somatostatin Download PDF

Info

Publication number
JP3983806B2
JP3983806B2 JP51344497A JP51344497A JP3983806B2 JP 3983806 B2 JP3983806 B2 JP 3983806B2 JP 51344497 A JP51344497 A JP 51344497A JP 51344497 A JP51344497 A JP 51344497A JP 3983806 B2 JP3983806 B2 JP 3983806B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
phe
cys
trp
lys
thr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP51344497A
Other languages
Japanese (ja)
Other versions
JPH11512707A (en
Inventor
コイ，デビッド，エッチ．
テイラー，ジョン，イー．
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Administrators of the Tulane Educational Fund
Original Assignee
Administrators of the Tulane Educational Fund
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Administrators of the Tulane Educational Fund filed Critical Administrators of the Tulane Educational Fund
Publication of JPH11512707A publication Critical patent/JPH11512707A/en
Application granted granted Critical
Publication of JP3983806B2 publication Critical patent/JP3983806B2/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/655—Somatostatins
    • C07K14/6555—Somatostatins at least 1 amino acid in D-form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/16—Somatostatin; related peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

A cyclic peptide analog of somatostatin wherein a disulfide bond links the N-terminus residue and the C-terminus residue.

Description

発明の背景
天然のソマトスタチンは、１４アミノ酸イソ型（ソマトスタチン−１４）および１８アミノ酸イソ型（ソマトスタチン−２８）双方から構成される。ハイマン（Heiman）ら、ニューロエンドクリノロジー（Neuroendocrinology）、４５：４２９〜４３６（１９８７年）。天然のソマトスタチンは半減期が短いので、様々なソマトスタチン類似体が、例えば、先端巨大症の処置を目的として、開発された。レイナー（Raynor）ら、モレキュラー ファーマコル（Molecular Pharmacol.）、４３：８３８（１９９３年）。５種の異なるソマトスタチンレセプターが同定されその特性が明らかになった。ホヤー（Hoyer）ら、ナウニン−シュミーデベルグス アーク ファーマコル（Naunyn-Schmiedeberg's Arch.Pharmacol.）、３５０：４４１（１９９４年）。ソマトスタチンは、成長ホルモン、グルカゴン、インスリン、アミリン等の、ホルモンの放出、および神経伝達物質の放出の修飾などの、様々な作用を生じる。上記作用のうち、特異的なソマトスタチンレセプターへの結合に関連するものがあった。例えば、成長ホルモンの阻害は、ソマトスタチンタイプ−２レセプター（ＳＳＴＲ−２）よるものであり（レイナー（Raynor）ら、モレキュラー ファーマコル（Molecular Pharmacol.）、４３：８３８（１９９３年）；ロイド（Lloyd）ら、アム ジェー フィジオル（Am.J.Physiol.）、２６８：Ｇ１０２（１９９５年））、インスリンの阻害はソマトスタチンタイプ−５レセプター（ＳＳＴＲ−５）よるものであった（コイ（Coy）ら、１９７：３６６〜３７１（１９９３年））。目的とする生体応答に応答可能な特異的なソマトスタチンレセプターサブタイプに対して選択的である、故に、望ましくない副作用を生じさせる他のレセプターサブタイプとの相互作用を抑制する類似体を有することが好ましい。
発明の要約
本発明は、下記一般式のペプチドに関するものである：

Figure 0003983806
ただし、
Ａ1はＣｙｓまたはＭｐａのＤ−またはＬ−異性体であり；
Ａ2はＡｓｎ、Ｇｌｎ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸である、または欠損しており；
Ａ3は芳香族アミノ酸であり；
Ａ4はＨｉｓまたは芳香族アミノ酸であり；
Ａ7はＴｈｒ、Ｓｅｒ、または脂肪族アミノ酸であり；
Ａ8は芳香族アミノ酸であり；
Ａ9はＣｙｓのＤ−またはＬ−異性体であり；
Ｒ1およびＲ2は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ1-12アルキル、Ｃ7-20フェニルアルキル、Ｃ11-20ナフチルアルキル、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル、Ｃ7-20ヒドロキシフェニルアルキル、Ｃ11-20ヒドロキシナフチルアルキル、またはＣＯＥ1であり、この際、Ｅ1はＣ1-12アルキル、Ｃ7-20フェニルアルキル、Ｃ11-20ナフチルアルキル、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル、Ｃ7-20ヒドロキシフェニルアルキル、若しくはＣ11-20ヒドロキシナフチルアルキルであり；および
Ｒ3はＮＨ2またはＮＨ・Ｙ・ＣＨ2・Ｚであり、この際、ＹはＣ1-12炭化水素部分（２価、例えば、直鎖または枝分れ鎖のアルキル基）であり、ＺはＨ、ＯＨ、ＣＯ2Ｈ、またはＣＯＮＨ2であり；および
ジスルフィド結合が残基Ａ1及びＡ9の側鎖を連結する；またはこれらの製薬上許容できる塩。
一実施態様によると、Ａ3及びＡ8は、それぞれ独立して、Ｐｈｅ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ｏ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ピリジル−Ａｌａ、Ｔｒｐ、β−Ｎａｌ、２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ（Ｉ）、またはＦ5−Ｐｈｅであり、Ａ4はＨｉｓ、Ｐｈｅ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ｏ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ピリジル−Ａｌａ、Ｔｒｐ、β−Ｎａｌ、２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ（Ｉ）、またはＦ5−Ｐｈｅであり、Ａ2はＡｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎｖａ、Ａｂｕ、Ｐｈｅ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ｏ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ピリジル−Ａｌａ、Ｔｒｐ、β−Ｎａｌ、２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ（Ｉ）、Ｆ5−Ｐｈｅである、または欠損しており、およびＡ7はＴｈｒ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎｖａ、またはＡｂｕである。
さらなる実施態様によると、Ａ9はＣｙｓであり、Ａ3及びＡ8は、それぞれ独立して、Ｐｈｅ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、またはＣＨ3である）、Ｔｙｒ（Ｉ）、またはＴｒｐであり、Ａ4はＨｉｓ、Ｐｈｅ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、またはＣＨ3である）、Ｔｙｒ（Ｉ）、またはＴｒｐであり、Ａ2はＡｓｎ、Ｇｌｎである、または欠損しており、およびＡ7はＴｈｒまたはＳｅｒである。
さらなる別の実施態様によると、Ａ2はＡｓｎであるまたは欠損しており、およびＡ3はＰｈｅであり、Ａ4はＰｈｅ、Ｈｉｓ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、またはＣＨ3である）、Ｔｙｒ（Ｉ）、またはＴｒｐであり、Ａ8はＰｈｅまたはｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、またはＣＨ3である）であり、およびＲ1およびＲ2は、それぞれ独立して、Ｈであり、およびＲ3はＮＨ2である。
上記式で包含される本発明のペプチドの例は下記のとおりである：
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ-Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体Ｉ）、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＩＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＩＶ）、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＩＩＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＶＩＩＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体Ｖ）、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＶＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−β−Ｎａｌ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＶＩＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｃｐａ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＩＸ）、
Ｈ2−ｃ［Ｍｐａ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体Ｘ）、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＸＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＸＩＩ）、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2（類似体ＸＩＩＩ）。
Ｎ−末端アミノ酸以外の、本明細書に記載されるアミノ酸のすべての略称（例えば、ＡｌａまたはＡ2）はＲがアミノ酸の側鎖（例えば、ＡｌａではＣＨ3）である、−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ）−ＣＯ−の構造式を表わす。Ｎ−末端アミノ酸に関しては、略称は、Ｒがアミノ酸の側鎖である、ＣｙｓのＤ−またはＬ−異性体である際には＝Ｎ−ＣＨ（ＣＨ2ＳＨ）−ＣＯ−をまたはＭｐａのＤ−またはＬ−異性体である際には＝Ｃ（−ＣＨ2ＳＨ）−ＣＯ−を表わす。Ｎｌｅ、Ｎｖａ、ピリジル−Ａｌａ、Ｆ5−Ｐｈｅ、２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ、β−Ｎａｌ、Ａｂｕ、Ｍｐａ、Ｃｐａ、及びＡｉｂは、それぞれ、以下のα−アミノ酸の略称である：ノルロイシン、ノルバリン、β−ピリジル−アラニン、ペンタフルオロ−フェニルアラニン、２，４−ジクロロフェニルアラニン、β−ナフチルアラニン、α−アミノ酪酸、メルカプトプロピオン酸、ｐ−クロロフェニルアラニン、及びα−アミノイソ酪酸。Ｔｙｒ（Ｉ）は、ヨウ素が放射性同位元素、例えば、Ｉ125、Ｉ127、またはＩ131である、ヨウ素化チロシン残基（例えば、３−Ｉ−Ｔｙｒ、５−Ｉ−Ｔｙｒ、３，５−Ｉ−Ｔｙｒ）を意味する。脂肪族アミノ酸は、独立して、炭化水素、例えば、１〜６炭素の直鎖あるいは枝分れ鎖である１または２個の側鎖を有するα−アミノ酸である。脂肪族アミノ酸の例としては、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、Ｎｖａ、またはＡｂｕが挙げられる。芳香族アミノ酸は、側鎖が中性の（例えば、酸性または塩基性でない）芳香族置換基、例えば、置換若しくは非置換（unsubstituted）フェニル、ナフチル、または芳香族複素環基（例えば、ピリジルまたはインドリル）を有するα−アミノ酸である。芳香族アミノ酸の例としては、Ｐｈｅ、ｐ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、若しくはＩ）、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ｏ−Ｘ−Ｐｈｅ（但し、Ｘはハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＣＨ3、またはＮＯ2である）、ピリジル−Ａｌａ、Ｔｒｐ、β−Ｎａｌ、２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ（Ｉ）、またはＦ5−Ｐｈｅが挙げられる。アミノ酸残基が光学活性を有する際には、特記しない限りＬ−異性体を意味するものとする。また、上記一般式において、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシフェニルアルキル、及びヒドロキシナフチルアルキルは１から４個のヒドロキシ置換基を含み、ＣＯＥ1は−Ｃ＝Ｏ・Ｅ1を表す。−Ｃ＝Ｏ・Ｅ1の例としては、以下に制限されないが、ｐ−ヒドロキシ−フェニルプロピオニル（即ち、−Ｃ＝Ｏ・ＣＨ2−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−ＯＨ）及びフェニルプロピオニルが挙げられる。本明細書中に列挙される式において、残基Ａ1（例えば、Ｍｐａ、Ｄ−Ｍｐａ、Ｃｙｓ、またはＤ−Ｃｙｓ）の側鎖のチオール基及び残基Ａ9（例えば、Ｍｐａ、Ｄ−Ｍｐａ、Ｃｙｓ、またはＤ−Ｃｙｓ）の側鎖のチオール基間のジスルフィド結合は示されない。本発明のペプチドはまた、他の形式、例えば、Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、によっても表されるが、この際、２個のジスルフィド結合残基（即ち、Ｃｙｓ）は「ｃ」の後の２つの括弧の間に置かれる。
本発明のペプチドは、被検者（ヒトの患者などの哺乳動物）のインスリンの放出を阻害するのに使用できる。したがって、本ペプチドは、インスリンの放出の阻害が好ましい生理学的症状、例えば、ＩＩ型糖尿病の処置に有用である。また、Ｔｙｒ（Ｉ）残基を有する本発明のペプチドは、ソマトスタチンレセプター（例えば、ＳＳＴＲ−５）を含む細胞をイメージする（image）のに使用できる。このような本発明のペプチドは、インビボでソマトスタチンレセプターを有する細胞（例えば、癌細胞）を検出するのにあるいはインビトロでソマトスタチンレセプター結合検定における放射リガンドとして使用できる。
本発明のペプチドは、製薬上許容できる塩の形態で提供されてもよい。このような塩の例としては、以下に限られないが、有機酸（例えば、酢酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、安息香酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、またはパモイックアシッド（pamoic acid））、無機酸（例えば、塩酸、硫酸、またはリン酸）、および高分子酸（polymeric acid）（例えば、タンニン酸、カルボキシメチルセルロース、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、またはポリ乳酸−グリコール酸の共重合体）が挙げられる。
治療上有効な量の本発明のペプチドおよび製薬上許容できる担体物質（例えば、炭酸マグネシウム、ラクトース、または治療化合物がそれと共にミセルを形成できるリン脂質）で、ペプチドを必要とする被検者への（例えば、経口、静脈内、経皮的、肺、経膣、皮下、経鼻的、イオン導入、または気管内による）投与を目的とする治療用組成物（例えば、ピル、錠剤、カプセル、または液体）を形成する。ピル、錠剤、またはカプセルは、組成物を被検者の小腸中を未消化な状態で通過させるのに十分な時間、被検者の胃内で胃酸または腸の酵素から組成物を保護できる物質で被覆してもよい。治療用組成物はまた、皮下または筋肉内投与を目的とする生分解性のまたは非生分解性の徐放性配合物の形態であってもよい。例えば、米国特許第３，７７３，９１９号及び４，７６７，６２８号ならびにＰＣＴ出願番号ＷＯ ９４／００１４８号を参照。持続的な投与はまた、埋込型または外部型ポンプ（例えば、インフューサイド（登録商標） ポンプ（INFUSAIDTM pump））を用いて上記治療用組成物を投与することにより達成されてもよい。本ペプチドは、患者の就寝前に投与されてもよい。
上記したような病気または疾患を治療するための本発明のペプチドの投与量は、投与形態、被検者の年齢や体重、及び治療される被検者の状態によって変化し、最終的には、主治医や獣医によって決定されるであろう。主治医や獣医によって決定されるペプチドの量を、本明細書では「治療上有効な量」と称する。
インスリン放出の阻害の必要性に関連する病気または疾患、例えば、ＩＩ型糖尿病を処置するのに、およびソマトスタチンレセプターを検出するのに、例えば、ラジオイメージング（radioimaging）に使用される上記一般式に含まれるペプチドもまた、本発明の概念に含まれる。
本発明の他の態様および利点は詳細な説明からおよび請求の範囲から明らかであろう。
発明の詳細な説明
本発明のソマトスタチン類似体の合成および使用は、当該分野における通常の知識を有するものの能力内によく含まれる。特記しない限り、本明細書中に使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本発明の属する分野における通常の知識を有するものによって共通して理解されるのと同様の意味を有する。また、本明細書中に記載されるすべての公報、特許出願、特許、及び他の参考文献は参考のため引用される。
当業者は、本明細書の記載に基づいて、本発明を十分利用できると考えられる。したがって、下記の特定の実施例は単に説明するためのものであり、残りの開示を何等制限するものではない
ソマトスタチン類似体の合成
短いペプチドの合成は、ペプチド分野においてよく試験される。例えば、ステュワート（Stewart）ら、ソリッド フェーズ シンテシス（Solid Phase Synthesis）（ピアース ケミカル シーオー（Pierce Chemical Co.）、第二版、１９８４年）を参照。類似体Ｉの合成は下記のとおりである。本発明の他のペプチドは、当該分野における通常の知識を有するものによって同様の方法により調製できる。
塩化物イオンの形態のベンズヒドリルアミン−ポリスチレン樹脂（アドバンスド ケムテック インコーポレイテッド（Advanced ChemTech,Inc.）、ルイスヴィレ、ケーワイ（Louisville,KY））（１．１ｇ、０．５ミリモル）を、下記試薬／溶剤をデリバーするようにプログラムされたアドバンスド ケムテック エーシーティー２００ペプチド合成器（Advanced ChemTech ACT 200 peptide synthesizer）の反応容器中に仕込んだ：（ａ）塩化メチレン；（ｂ）塩化メチレンにおける３３％トリフルオロ酢酸（それぞれ１及び２５分で２回）；（ｃ）塩化メチレン；（ｄ）エタノール；（ｅ）塩化メチレン；および（ｆ）クロロホルムにおける１０％トリエチルアミン。
中和された樹脂を、塩化メチレンにおけるＢｏｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｃｙｓ及びジイソプロピルカルボジイミド（各１．５ミリモル）と共に、１時間、撹拌し、さらに得られたアミノ酸樹脂を上記洗浄プログラムの段階（ａ）〜（ｆ）を行った。次に、下記アミノ酸（１．５ミリモル）を同様の操作によって順次カップリングした：Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、Ｂｏｃ−Ｏ−ベンジル−Ｔｈｒ、Ｂｏｃ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌｙｓ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、およびＢｏｃ−Ｓ−メチルベンジル−Ｃｙｓ。洗浄及び乾燥後、完全樹脂の重量は１．６ｇであった。
次に、この樹脂（１．６ｇ、０．５ミリモル）を、０℃でアニソール（５ｍｌ）、ジチオトレイトール（１００ｍｇ）、及び無水フッ化水素（３５ｍｌ）と混合し、４５分間撹拌した。過剰のフッ化水素を乾燥窒素の気流下で迅速に蒸発させ、遊離ペプチドを沈殿させ、エーテルで洗浄した。さらに、この未精製のペプチドを９０％酢酸５００ｍｌ中に溶解し、常時茶色が観察されるまで、Ｉ2／ＭｅＯＨの濃縮溶液を添加した。過剰のＩ2をアスコルビン酸を添加することにより除去し、溶液を小容量まで蒸発させ、これをセファデックスTM（SEPHADEXTM）Ｇ−２５のカラム（２．５×９０ｃｍ）にのせ、５０％ＡｃＯＨで溶出させた。さらに、紫外線（ＵＶ）吸収及び薄層クロマトグラフィーによって主要成分を含む画分を貯め、小容量まで蒸発させ、さらに、ＶＹＤＡＣTMオクタデシルシランシリカ（１０〜１５μｍ）のカラム（１．５×７０ｃｍ）にのせた。このカラムを、８０％溶液Ａ及び２０％溶液Ｂから４０％溶液Ａ及び６０％溶液Ｂの直線的な濃度勾配で溶出させた。この際、溶液Ａは水における０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）であり、溶液Ｂは７９．９％アセトニトリル、２０％水及び０．１％ＴＦＡである。画分を薄層クロマトグラフィー（ｔｌｃ）及び分析用高速液体クロマトグラフィー（ｈｐｌｃ）によって試験し、最高純度になるように貯めた。この溶液を水から繰り返し凍結乾燥することにより、９５ｍｇの生成物を白色の飛散性粉末として得た。
この生成物は、ｈｐｌｃ及びｔｌｃによって均質であることが分かる。酸加水分解産物のアミノ酸分析及びマトリックス補助レーザー脱離質量分析（matrix-assisted laser desorption mass spectrometry）（ＭＡＬＤＩ ＭＳ）によって、環状オクタペプチドの組成を確認した（算出された分子量 １０７７；実測分子量 １０８０）。
類似体Ｖの合成は下記のとおりである。塩化物イオンの形態のベンズヒドリルアミン−ポリスチレン樹脂（アドバンスド ケムテック インコーポレイテッド（Advanced ChemTech,Inc.））（０．７ｇ、０．２５ミリモル）を、下記試薬／溶剤をデリバーするようにプログラムされたアドバンスド ケムテック エーシーティー２００ペプチド合成器（Advanced ChemTech ACT 200 peptide synthesizer）の反応容器中に仕込んだ：（ａ）塩化メチレン；（ｂ）塩化メチレンにおける３３％トリフルオロ酢酸（それぞれ１及び２５分で２回）；（ｃ）塩化メチレン；（ｄ）エタノール；（ｅ）塩化メチレン；および（ｆ）クロロホルムにおける１０％トリエチルアミン。
中和された樹脂を、塩化メチレンにおけるＢｏｃ−Ｓ−メチルベンジル−Ｃｙｓ及びジイソプロピルカルボジイミド（各１．５ミリモル）と共に、１時間、撹拌し、さらに得られたアミノ酸樹脂を上記洗浄プログラムの段階（ａ）〜（ｇ）を行った。次に、下記アミノ酸（１．５ミリモル）を同様の操作によって順次カップリングした：Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、Ｂｏｃ−Ｏ−ベンジル−Ｔｈｒ、Ｂｏｃ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌｙｓ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ、およびＢｏｃ−Ｓ−メチルベンジル−Ｃｙｓ。洗浄及び乾燥後、完全樹脂の重量は１．２ｇであった。このペプチド樹脂について、上記したのと同様のＨＦ切断及びＩ2環化を施した。上記したのと同様の、カラムによる精製により、ｈｐｌｃ及びｔｌｃによって均質であることが分かった環状ノナペプチド２１ｍｇを得た。酸加水分解産物のアミノ酸分析及びＭＡＬＤＩ ＭＳによって、環状ノナペプチドの組成を確認した（算出された分子量 １１９２；実測分子量 １１９２）。
チロシン残基をヨウ素化したソマトスタチン類似体の合成（例えば、クロラミン−Ｔ法）は、よく報告され、当該分野における通常の知識を有するものの能力の範囲内である。例えば、チェルニック（Czenick）ら、ジェー バイオル ケム（J.Biol.Chem.）、２５８：５５２５（１９９３年）および欧州特許第３８９，１８０ Ｂ１号を参照。
ソマトスタチンレセプター結合検定
（１）ヒトＳＳＴＲ−２結合検定：
ＣＨＯ−Ｋ１（卵巣、チャイニーズハムスター）細胞を、アメリカン タイプ カルチャー コレクション（American Type Culture Collection）（ＡＴＣＣ）（ロックビレ、エムディー（Rockville,MD））（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ６１号）から得、この細胞に、分子生物学分野において既知の標準的な技術を用いて、ヤマダ（Yamada）ら、プロック ナショル アカデ サイ ユーエスエー（Proc.Natl.Acad.Sci.USA）、８９：２５１〜２５５（１９９２年）に記載されかつＡＴＣＣ（ＡＴＣＣ番号７９０４６号）から利用可能な、ヒトのＳＳＴＲ−２ ｃＤＮＡをトランスフェクションした。パテル（Patel）ら、バイオケム バイオフィズ レス コミュン（Biochem.Biophys.Res.Commun.）、１９８：６０５（１９９４年）を参照。未精製膜を、セッティング６のポリトロンTM（POLYTRONTM）ホモゲナイザー（ブリンクマン インストラメンツ（Brinkmann Instruments）、ウェストバリー、エヌワイ（Westbury,NY））で１５秒間、２０ｍｌの氷冷した５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（バッファーＡ）中でヒトのＳＳＴＲ−２がトランスフェクションされたＣＨＯ−Ｋ１細胞を均質化することによって調製した。さらにバッファーＡを最終容積が４０ｍｌになるように添加して、ホモジネートを、０〜４℃で１０分間、３９，０００ｇでソルバルTMＳＳ−３４ローター（SORVALTM SS-34 rotor）（デュポン（DuPont）、ニュータウン、シーティー（Newtown,CT））で遠心した。得られた上清をデカンテーションし、捨てた。ペレットを、前記と同様にして氷冷したバッファーＡ中に再均質化し、希釈し、さらに遠心した。最終ペレットを１０ｍＭトリス−ＨＣｌ中に再懸濁し、レセプター結合検定用に氷上に保持した。
この膜調製物のアリコートを、様々な濃度（例えば、１０-11〜１０-6Ｍ）の試験ペプチド、１０ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（フラクションＶ、シグマ ケミカル シーオー（Sigma Chemical Co.）、セント ルイス、エムオー（St.Louis,MO））、ＭｇＣｌ2（５ｍＭ）、トラジロール（２００ＫＩＵ／ｍｌ）、バシトラシン（０．０２ｍｇ／ｍｌ）、及びフェニルメチルスルホニルフッ化物（０．０２ｍｇ／ｍｌ）を含む５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）における０．０５ｎＭ［125Ｉ−Ｔｙｒ］ＭＫ−６７８（２０００Ｃｉ／ミリモル；ｃ［Ｎ−メチル−Ａｌａ−Ｔｙｒ（Ｉ125）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ］）と共に２５℃で９０分間、インキュベートした。最終検定容積は０．３ｍｌであった。フィルトレーションマニホールド（filtration manifold）（ブランデル（Brandel）、ガイザースブルグ、エムディー（Gaithersburg,MD））を用いたＧＦ／Ｃフィルター（予め０．３％ポリエチレンイミン中に３０分間浸漬した）によるラピッドフィルトレエーション（rapidfilltration）によって、インキュベーションを終了させた。次に、各チューブ及びフィルターを氷冷したバッファーＡの５ｍｌのアリコートで３回洗浄した。特異的な結合を、［（結合した全［125Ｉ−Ｔｙｒ］ＭＫ−６７８）−（２００ｎＭソマトスタチン−１４の存在下での結合）］として定義した。
下記試験ペプチドを検定した：ソマトスタチン−１４、ソマトスタチン−２８、類似体Ｉ、類似体ＩＩ、類似体ＩＩＩ、類似体ＩＶ、及び類似体Ｖ。類似体Ｉ〜Ｖの構造を上記に示す。試験ペプチドに関するＫｉ値を下記式を用いて算出した：
Ｋｉ＝ＩＣ50／［１＋（ＬＣ／ＬＥＣ）］
ただし、ＩＣ50は放射リガンド［125Ｉ−Ｔｙｒ］ＭＫ−６７８の特異的な結合の５０％を阻害するのに必要な試験ペプチドの濃度であり、ＬＣは放射リガンドの濃度（０．０５ｎＭ）であり、およびＬＥＣは放射リガンドの平衡解離定数（０．１５５ｎＭ）である。試験ペプチドに関して算出されたＫｉ値を、表１における見出しが「ＳＳＴＲ−２」であるカラムに示す。
（２）ヒトＳＳＴＲ−５結合検定：
ＣＨＯ−Ｋ１細胞に、分子生物学分野において既知の標準的な技術を用いて、ヤマダ（Yamada）ら、バイオケム バイオフィズ レス コミュン（Biochem.Biophys.Res.Commun.）、１９５〜８４４（１９９３年）に記載される、ヒトのＳＳＴＲ−５ ｃＤＮＡをトランスフェクションした。パテル（Patel）ら、バイオケム バイオフィズ レス コミュン（Biochem.Biophys.Res.Commun.）、１９８：６０５（１９９４年）を参照。未精製膜を、ポリトロンTM（POLYTRONTM）ホモゲナイザー（セッティング６、１５秒）で２０ｍｌの氷冷した５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中でヒトのＳＳＴＲ−５がトランスフェクションされたＣＨＯ−Ｋ１細胞を均質化することによって調製した。バッファーを最終容積が４０ｍｌになるように添加して、ホモジネートを、０〜４℃で１０分間、３９，０００ｇでソルバルTMＳＳ−３４ローター（SORVALTM SS-34 rotor）で遠心した。得られた上清をデカンテーションし、捨てた。ペレットを、前記と同様にして氷冷したバッファー中に再均質化し、希釈し、さらに遠心した。最終ペレットを１０ｍＭトリス−ＨＣｌ中に再懸濁し、レセプター結合検定用に氷上に保持した。
この膜調製物のアリコートを、様々な濃度（例えば、１０-11〜１０-6Ｍ）の試験ペプチド、１０ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（フラクションＶ）、ＭｇＣｌ2（５ｍＭ）、トラジロール（２００ＫＩＵ／ｍｌ）、バシトラシン（０．０２ｍｇ／ｍｌ）、及びフェニルメチルスルホニルフッ化物（０．０２ｍｇ／ｍｌ）を含む５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）における０．０５ｎＭ［125Ｉ−Ｔｙｒ11］ソマトスタチン−１４（２０００Ｃｉ／ミリモル；アマシャム コーポレイション（Amersham Corp.）、アーリントン ハイツ、アイエル（Arlington Heights,IL））と共に３０℃で３０分間、インキュベートした。最終検定容積は０．３ｍｌであった。ブランデルのフィルトレーションマニホールド（Brandel filtration manifold）を用いたＧＦ／Ｃフィルター（予め０．３％ポリエチレンイミン中に３０分間浸漬した）によるラピッドフィルトレエーション（rapid filltration）によって、インキュベーションを終了させた。次に、各チューブ及びフィルターを氷冷したバッファーの５ｍｌのアリコートで３回洗浄した。特異的な結合を、［（結合した全［125Ｉ−Ｔｙｒ11］ソマトスタチン−１４）−（１０００ｎＭソマトスタチンタイプ−５レセプターリガンドＢＩＭ−２３０５２（Ｈ2−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−ＮＨ2）の存在下での結合）］として定義した。試験ペプチドに関するＫｉ値を下記式を用いて算出した：
Ｋｉ＝ＩＣ50／［１＋（ＬＣ／ＬＥＣ）］
ただし、ＩＣ50は放射リガンド［125Ｉ−Ｔｙｒ11］ソマトスタチン−１４の特異的な結合の５０％を阻害するのに必要な試験ペプチドの濃度であり、ＬＣは放射リガンドの濃度（０．０５ｎＭ）であり、およびＬＥＣは放射リガンドの平衡解離定数（０．１６ｎＭ）である。試験ペプチドに関して算出されたＫｉ値を、表１における見出しが「ＳＳＴＲ−５」であるカラムに示す。
表１はまた、ヒトのＳＳＴＲ−２に関するＫｉ値及びヒトのＳＳＴＲ−５に関するＫｉ値の具体的な割合をも示す。本発明のペプチド（例えば、類似体Ｉ〜Ｖ）は、一方に比べて予想できないほど大きな割合を有し、これにより、ＳＳＴＲ−２に対してよりＳＳＴＲ−５に対する方がより選択的である。
Figure 0003983806
他の実施態様
本発明を詳細な説明と合わせて説明したが、前記説明は詳細に説明しようとするものであり、本発明の概念を制限するものではなく、本発明の概念は添付された請求の範囲の概念によって定義されることを理解すべきである。他の概念、利点、及び修飾は請求の範囲に含まれる。 Background of the Invention
Natural somatostatin is composed of both a 14 amino acid isoform (somatostatin-14) and an 18 amino acid isoform (somatostatin-28). Heiman et al., Neuroendocrinology, 45: 429-436 (1987). Since natural somatostatin has a short half-life, various somatostatin analogs have been developed, for example, for the treatment of acromegaly. Raynor et al., Molecular Pharmacol. 43: 838 (1993). Five different somatostatin receptors have been identified and characterized. Hoyer et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., 350: 441 (1994). Somatostatin produces a variety of actions such as growth hormone, glucagon, insulin, amylin, and other hormone release and neurotransmitter release modifications. Among the above effects, there were those related to binding to specific somatostatin receptors. For example, growth hormone inhibition is due to somatostatin type-2 receptor (SSTR-2) (Raynor et al., Molecular Pharmacol. 43: 838 (1993); Lloyd et al. Am. J. Physiol., 268: G102 (1995)), inhibition of insulin was due to somatostatin type-5 receptor (SSTR-5) (Coy et al., 197: 366-371 (1993)). Having analogs that are selective for a specific somatostatin receptor subtype capable of responding to the desired biological response and thus inhibit interaction with other receptor subtypes that cause undesirable side effects preferable.
Summary of invention
The present invention relates to peptides of the general formula:
Figure 0003983806
However,
A1Is the D- or L-isomer of Cys or Mpa;
A2Is Asn, Gln, an aliphatic amino acid, an aromatic amino acid, or is missing;
AThreeIs an aromatic amino acid;
AFourIs His or an aromatic amino acid;
A7Is Thr, Ser, or an aliphatic amino acid;
A8Is an aromatic amino acid;
A9Is the D- or L-isomer of Cys;
R1And R2Are independently H, C1-12Alkyl, C7-20Phenylalkyl, C11-20Naphthylalkyl, C1-12Hydroxyalkyl, C7-20Hydroxyphenylalkyl, C11-20Hydroxynaphthylalkyl or COE1In this case, E1Is C1-12Alkyl, C7-20Phenylalkyl, C11-20Naphthylalkyl, C1-12Hydroxyalkyl, C7-20Hydroxyphenylalkyl or C11-20Hydroxynaphthylalkyl; and
RThreeIs NH2Or NH ・ Y ・ CH2・ Z, where Y is C1-12A hydrocarbon moiety (divalent, eg, a linear or branched alkyl group), where Z is H, OH, CO2H or CONH2And; and
Disulfide bond is residue A1And A9Or pharmaceutically acceptable salts thereof.
According to one embodiment, AThreeAnd A8Are each independently Phe, p-X-Phe (where X is halogen, OH, OCHThree, CHThreeOr NO2O-X-Phe (where X is halogen, OH, OCH)Three, CHThreeOr NO2Pyridyl-Ala, Trp, β-Nal, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I), or FFive-Phe, AFourIs His, Phe, p-X-Phe (where X is halogen, OH, OCHThree, CHThreeOr NO2O-X-Phe (where X is halogen, OH, OCH)Three, CHThreeOr NO2Pyridyl-Ala, Trp, β-Nal, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I), or FFive-Phe, A2Is Asn, Gln, Ala, Aib, Val, Leu, Ile, Nle, Nva, Abu, Phe, p-X-Phe (where X is halogen, OH, OCHThree, CHThreeOr NO2O-X-Phe (where X is halogen, OH, OCH)Three, CHThreeOr NO2Pyridyl-Ala, Trp, β-Nal, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I), FFive-Phe or missing, and A7Is Thr, Ser, Ala, Aib, Val, Leu, Ile, Nle, Nva, or Abu.
According to a further embodiment, A9Is Cys and AThreeAnd A8Are each independently Phe, p-X-Phe (where X is halogen, OH, or CHThree), Tyr (I), or Trp, and AFourIs His, Phe, p-X-Phe (where X is halogen, OH, or CHThree), Tyr (I), or Trp, and A2Is Asn, Gln, or is missing, and A7Is Thr or Ser.
According to yet another embodiment, A2Is Asn or missing, and AThreeIs Phe and AFourIs Phe, His, p-X-Phe (where X is halogen, OH, or CHThree), Tyr (I), or Trp, and A8Is Phe or p-X-Phe (where X is halogen, OH, or CHThreeAnd R1And R2Are each independently H and RThreeIs NH2It is.
Examples of peptides of the invention encompassed by the above formula are as follows:
H2-C [Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analogue I),
H2-C [D-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog II),
H2-C [Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2(Analog IV),
H2-C [D-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2(Analog III),
H2-C [D-Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog VIII),
H2-C [D-Cys-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog V),
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Asn-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [D-Cys-Asn-Phe-Tyr (I) -D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH2,
H2-C [Cys-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog VI),
H2-C [Cys-Phe- [beta] -Nal-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog VII),
H2-C [Cys-Phe-Cpa-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analogue IX),
H2-C [Mpa-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog X),
H2-C [Cys-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Cys] -NH2(Analog XI),
H2-C [Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Tyr-Cys] -NH2(Analog XII),
H2-C [Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2(Analog XIII).
All abbreviations of the amino acids described herein, except the N-terminal amino acid (eg Ala or A2) Is a side chain of R is an amino acid (for example, CH in AlaThree) Represents a structural formula of —NH—CH (R) —CO—. With respect to the N-terminal amino acid, the abbreviation is ═N—CH (CH2SH) -CO- or when it is the D- or L-isomer of Mpa = C (-CH2SH) -CO-. Nle, Nva, pyridyl-Ala, FFive-Phe, 2,4-dichloro-Phe, β-Nal, Abu, Mpa, Cpa, and Aib are abbreviations for the following α-amino acids: norleucine, norvaline, β-pyridyl-alanine, pentafluoro- Phenylalanine, 2,4-dichlorophenylalanine, β-naphthylalanine, α-aminobutyric acid, mercaptopropionic acid, p-chlorophenylalanine, and α-aminoisobutyric acid. In Tyr (I), iodine is a radioisotope, for example, I125, I127Or I131Means an iodinated tyrosine residue (eg, 3-I-Tyr, 5-I-Tyr, 3,5-I-Tyr). An aliphatic amino acid is independently a hydrocarbon, for example an α-amino acid having 1 or 2 side chains which are linear or branched chains of 1 to 6 carbons. Examples of aliphatic amino acids include Ala, Aib, Val, Leu, Ile, Nle, Nva, or Abu. Aromatic amino acids are aromatic (eg, not acidic or basic) side-chain aromatic substituents, such as substituted or unsubstituted phenyl, naphthyl, or aromatic heterocyclic groups (eg, pyridyl or indolyl). ) -Amino acid having). Examples of aromatic amino acids include Phe, p-X-Phe (where X is halogen (eg, F, Cl, or I), OH, OCHThree, CHThreeOr NO2O-X-Phe (where X is halogen, OH, OCH)Three, CHThreeOr NO2Pyridyl-Ala, Trp, β-Nal, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I), or FFive-Phe. When an amino acid residue has optical activity, it means the L-isomer unless otherwise specified. In the above general formula, hydroxyalkyl, hydroxyphenylalkyl, and hydroxynaphthylalkyl contain 1 to 4 hydroxy substituents, and COE1Is -C = O · E1Represents. -C = O ・ E1Examples of include, but are not limited to, p-hydroxy-phenylpropionyl (ie, —C═O · CH2-CH2-C6HFour-OH) and phenylpropionyl. In the formulas enumerated herein, the residue A1Side chain thiol group and residue A (eg, Mpa, D-Mpa, Cys, or D-Cys)9No disulfide bond is shown between the thiol groups on the side chains of (eg, Mpa, D-Mpa, Cys, or D-Cys). The peptides of the present invention may also have other forms, such as H2-C [Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH2, Where two disulfide bond residues (ie, Cys) are placed between the two brackets after “c”.
The peptides of the present invention can be used to inhibit the release of insulin in a subject (a mammal such as a human patient). Thus, the peptides are useful for the treatment of physiological conditions where inhibition of insulin release is preferred, such as type II diabetes. Also, peptides of the invention having a Tyr (I) residue can be used to image cells containing a somatostatin receptor (eg, SSTR-5). Such peptides of the invention can be used to detect cells with somatostatin receptors in vivo (eg, cancer cells) or as radioligands in somatostatin receptor binding assays in vitro.
The peptides of the present invention may be provided in the form of pharmaceutically acceptable salts. Examples of such salts include, but are not limited to, organic acids (eg acetic acid, lactic acid, maleic acid, citric acid, malic acid, ascorbic acid, succinic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, toluenesulfonic acid. , Or pamoic acid), inorganic acids (eg, hydrochloric acid, sulfuric acid, or phosphoric acid), and polymeric acids (eg, tannic acid, carboxymethylcellulose, polylactic acid, polyglycolic acid, or Polylactic acid-glycolic acid copolymer).
To a subject in need of a peptide with a therapeutically effective amount of a peptide of the invention and a pharmaceutically acceptable carrier substance (eg, magnesium carbonate, lactose, or a phospholipid with which a therapeutic compound can form micelles). A therapeutic composition intended for administration (eg, oral, intravenous, transdermal, pulmonary, vaginal, subcutaneous, nasal, iontophoresis, or intratracheal) (eg, pill, tablet, capsule, or Liquid). A pill, tablet, or capsule is a substance that can protect the composition from gastric acid or intestinal enzymes in the subject's stomach for a time sufficient to pass the composition undigested through the subject's small intestine. You may coat with. The therapeutic composition may also be in the form of a biodegradable or non-biodegradable sustained release formulation intended for subcutaneous or intramuscular administration. See, for example, U.S. Pat. Nos. 3,773,919 and 4,767,628 and PCT Application No. WO 94/00148. Sustained administration can also be achieved with implantable or external pumps (eg, Infuside® pumps (INFUSAIDTM pump)) may be used to administer the therapeutic composition. The peptide may be administered before the patient goes to bed.
The dosage of the peptide of the present invention for treating a disease or disorder as described above varies depending on the dosage form, the age and weight of the subject, and the condition of the subject to be treated. It will be decided by your doctor or veterinarian. The amount of peptide determined by the attending physician or veterinarian is referred to herein as the “therapeutically effective amount”.
Included in the above general formula used for, for example, radioimaging to treat diseases or disorders associated with the need for inhibition of insulin release, eg, type II diabetes, and to detect somatostatin receptors Such peptides are also included in the concept of the present invention.
Other aspects and advantages of the invention will be apparent from the detailed description and from the claims.
Detailed Description of the Invention
The synthesis and use of the somatostatin analogs of the present invention are well within the ability of those with ordinary knowledge in the art. Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Also, all publications, patent applications, patents, and other references mentioned herein are cited for reference.
Those skilled in the art will be able to fully utilize the present invention based on the description herein. Accordingly, the specific embodiments below are for illustrative purposes only and are not intended to limit the remaining disclosure in any way.
Synthesis of somatostatin analogues.
The synthesis of short peptides is well tested in the peptide field. See, for example, Stewart et al., Solid Phase Synthesis (Pierce Chemical Co., 2nd edition, 1984). The synthesis of analog I is as follows. Other peptides of the invention can be prepared in a similar manner by those with ordinary knowledge in the art.
Benzhydrylamine-polystyrene resin in the form of chloride ion (Advanced ChemTech, Inc., Louisville, KY) (1.1 g, 0.5 mmol) was added to the following reagent / solvent: Was charged into a reaction vessel of an Advanced ChemTech ACT 200 peptide synthesizer programmed to deliver: (a) methylene chloride; (b) 33% trifluoroacetic acid in methylene chloride ( (2 times each at 1 and 25 minutes); (c) methylene chloride; (d) ethanol; (e) methylene chloride; and (f) 10% triethylamine in chloroform.
The neutralized resin was stirred with Boc-S-4-methylbenzyl-Cys and diisopropylcarbodiimide (1.5 mmol each) in methylene chloride for 1 hour, and the resulting amino acid resin was further washed through the washing program. (A) to (f) were performed. Next, the following amino acids (1.5 mmol) were sequentially coupled in the same manner: Boc-Phe, Boc-O-benzyl-Thr, Boc-N-benzyloxycarbonyl-Lys, Boc-D-Trp, Boc. -Phe, Boc-Phe, and Boc-S-methylbenzyl-Cys. After washing and drying, the complete resin weighed 1.6 g.
The resin (1.6 g, 0.5 mmol) was then mixed with anisole (5 ml), dithiothreitol (100 mg), and anhydrous hydrogen fluoride (35 ml) at 0 ° C. and stirred for 45 minutes. Excess hydrogen fluoride was quickly evaporated under a stream of dry nitrogen to precipitate the free peptide and washed with ether. Furthermore, this crude peptide was dissolved in 500 ml of 90% acetic acid and until a constant brown color was observed,2A concentrated solution of / MeOH was added. Excess I2Is removed by adding ascorbic acid and the solution is evaporated to a small volume, which is separated by SephadexTM(SEPHADEXTM) G-25 column (2.5 x 90 cm) and eluted with 50% AcOH. In addition, fractions containing major components are collected by ultraviolet (UV) absorption and thin layer chromatography, evaporated to a small volume, and VYDAC.TMIt was placed on a column (1.5 × 70 cm) of octadecylsilane silica (10-15 μm). The column was eluted with a linear concentration gradient from 80% solution A and 20% solution B to 40% solution A and 60% solution B. In this case, solution A is 0.1% trifluoroacetic acid (TFA) in water and solution B is 79.9% acetonitrile, 20% water and 0.1% TFA. Fractions were tested by thin layer chromatography (tlc) and analytical high performance liquid chromatography (hplc) and stored to the highest purity. This solution was repeatedly lyophilized from water to give 95 mg of product as a white dispersible powder.
This product is found to be homogeneous by hplc and tlc. The composition of the cyclic octapeptide was confirmed by amino acid analysis of the acid hydrolyzate and matrix-assisted laser desorption mass spectrometry (MALDI MS) (calculated molecular weight 1077; measured molecular weight 1080).
The synthesis of analog V is as follows. Benzhydrylamine-polystyrene resin in the form of chloride ion (Advanced ChemTech, Inc.) (0.7 g, 0.25 mmol) was advanced programmed to deliver the following reagents / solvents: Charged into a reaction vessel of Advanced ChemTech ACT 200 peptide synthesizer: (a) methylene chloride; (b) 33% trifluoroacetic acid in methylene chloride (twice at 1 and 25 minutes each) (C) methylene chloride; (d) ethanol; (e) methylene chloride; and (f) 10% triethylamine in chloroform.
The neutralized resin was stirred for 1 hour with Boc-S-methylbenzyl-Cys and diisopropylcarbodiimide (1.5 mmol each) in methylene chloride, and the resulting amino acid resin was further purified by the steps of the washing program (a ) To (g) were performed. Next, the following amino acids (1.5 mmol) were sequentially coupled in the same manner: Boc-Phe, Boc-O-benzyl-Thr, Boc-N-benzyloxycarbonyl-Lys, Boc-D-Trp, Boc. -Phe, Boc-Phe, Boc-Asn, and Boc-S-methylbenzyl-Cys. After washing and drying, the complete resin weighed 1.2 g. For this peptide resin, the same HF cleavage and I as described above.2Cyclization was performed. A column purification similar to that described above yielded 21 mg of cyclic nonapeptide found to be homogeneous by hplc and tlc. The composition of the cyclic nonapeptide was confirmed by amino acid analysis of the acid hydrolyzate and MALDI MS (calculated molecular weight 1192; measured molecular weight 1192).
Synthesis of somatostatin analogs iodinated at tyrosine residues (eg, the chloramine-T method) is well reported and within the ability of those with ordinary knowledge in the art. See, for example, Czenick et al., J. Biol. Chem., 258: 5525 (1993) and European Patent No. 389,180 B1.
Somatostatin receptor binding assay
(1)Human SSTR-2 binding assay:
CHO-K1 (ovary, Chinese hamster) cells were obtained from the American Type Culture Collection (ATCC) (Rockville, MD) (ATCC No. CCL61), and this cell contains molecular organisms. Using standard techniques known in the field of science, Yamada et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 251-255 (1992) and ATCC Human SSTR-2 cDNA available from (ATCC No. 79046) was transfected. See Patel et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 198: 605 (1994). Unpurified membrane is set to polytron of setting 6TM(POLYTRONTM) Human SSTR-2 was transfected in 20 ml ice-cold 50 mM Tris-HCl (buffer A) for 15 seconds with a homogenizer (Brinkmann Instruments, Westbury, NY). CHO-K1 cells were prepared by homogenization. Add more buffer A to a final volume of 40 ml and the homogenate is sorbalized at 39,000 g for 10 minutes at 0-4 ° C.TMSS-34 rotor (SORVALTM Centrifuged with SS-34 rotor (DuPont, Newtown, CT). The resulting supernatant was decanted and discarded. The pellet was re-homogenized, diluted and centrifuged further in ice-cold buffer A as before. The final pellet was resuspended in 10 mM Tris-HCl and kept on ice for receptor binding assays.
Aliquots of this membrane preparation can be obtained at various concentrations (eg, 10-11-10-6M) test peptide, 10 mg / ml bovine serum albumin (fraction V, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO), MgCl2(5 mM), 0.05 nM in 50 mM HEPES (pH 7.4) containing trazirol (200 KIU / ml), bacitracin (0.02 mg / ml), and phenylmethylsulfonyl fluoride (0.02 mg / ml) [125I-Tyr] MK-678 (2000 Ci / mmol; c [N-methyl-Ala-Tyr (I125) -D-Trp-Lys-Val-Phe]) for 90 minutes at 25 ° C. The final assay volume was 0.3 ml. Rapid fill with a GF / C filter (previously soaked in 0.3% polyethyleneimine for 30 minutes) using a filtration manifold (Brandel, Geysersburg, MD) Incubation was terminated by rapidfilltration. Each tube and filter was then washed 3 times with 5 ml aliquots of ice-cold buffer A. Specific binding is determined by [(total bound [125I-Tyr] MK-678)-(binding in the presence of 200 nM somatostatin-14)].
The following test peptides were assayed: somatostatin-14, somatostatin-28, analog I, analog II, analog III, analog IV, and analog V. The structures of analogs I to V are shown above. The Ki value for the test peptide was calculated using the following formula:
Ki = IC50/ [1+ (LC / LEC)]
However, IC50Is a radioligand [125I-Tyr] concentration of test peptide required to inhibit 50% of specific binding of MK-678, LC is the concentration of radioligand (0.05 nM), and LEC is the equilibrium of radioligand Dissociation constant (0.155 nM). The Ki values calculated for the test peptides are shown in the column whose heading in Table 1 is “SSTR-2”.
(2)Human SSTR-5 binding assay:
For CHO-K1 cells, using standard techniques known in the field of molecular biology, Yamada et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 195-844 (1993). The human SSTR-5 cDNA described in 1 was transfected. See Patel et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 198: 605 (1994). Unpurified membranes, polytronTM(POLYTRONTM) Prepared by homogenizing CHO-K1 cells transfected with human SSTR-5 in 20 ml ice-cold 50 mM Tris-HCl with a homogenizer (setting 6, 15 seconds). Buffer was added to a final volume of 40 ml and the homogenate was solvated at 39,000 g for 10 minutes at 0-4 ° C.TMSS-34 rotor (SORVALTM Centrifuged with SS-34 rotor). The resulting supernatant was decanted and discarded. The pellet was rehomogenized, diluted and centrifuged further in ice-cold buffer as before. The final pellet was resuspended in 10 mM Tris-HCl and kept on ice for receptor binding assays.
Aliquots of this membrane preparation can be obtained at various concentrations (eg, 10-11-10-6M) test peptide, 10 mg / ml bovine serum albumin (fraction V), MgCl2(5 mM), 0.05 nM in 50 mM HEPES (pH 7.4) containing trazirol (200 KIU / ml), bacitracin (0.02 mg / ml), and phenylmethylsulfonyl fluoride (0.02 mg / ml) [125I-Tyr11] Incubated with somatostatin-14 (2000 Ci / mmol; Amersham Corp., Arlington Heights, IL) for 30 minutes at 30 ° C. The final assay volume was 0.3 ml. Incubations were terminated by rapid filltration with GF / C filters (previously soaked in 0.3% polyethyleneimine for 30 minutes) using a Brandel filtration manifold. Each tube and filter was then washed 3 times with 5 ml aliquots of ice-cold buffer. Specific binding is determined by [(total bound [125I-Tyr11] Somatostatin-14)-(1000 nM somatostatin type-5 receptor ligand BIM-23052 (H2-D-Phe-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH2) In the presence of The Ki value for the test peptide was calculated using the following formula:
Ki = IC50/ [1+ (LC / LEC)]
However, IC50Is a radioligand [125I-Tyr11The concentration of test peptide required to inhibit 50% of the specific binding of somatostatin-14, LC is the concentration of radioligand (0.05 nM), and LEC is the equilibrium dissociation constant of radioligand ( 0.16 nM). The Ki values calculated for the test peptides are shown in the column whose heading in Table 1 is “SSTR-5”.
Table 1 also shows specific ratios of Ki values for human SSTR-2 and Ki values for human SSTR-5. The peptides of the invention (e.g. analogs I to V) have an unexpectedly large proportion compared to one, which makes them more selective for SSTR-5 than for SSTR-2.
Figure 0003983806
Other embodiments
Although the present invention has been described in conjunction with the detailed description, the description is intended to explain in detail and is not intended to limit the concept of the present invention, which is the concept of the appended claims. It should be understood that Other concepts, advantages, and modifications are within the scope of the claims.

Claims (6)

下記式のペプチド：
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−β−Ｎａｌ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｃｐａ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｍｐａ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ-Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 、もしくは
Ｈ 2 −ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ 2 ；またはこれらの製薬上許容できる塩。Peptides of the following formula:
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [D-Cys- Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Asn- Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [D-Cys- Phe-β-Nal-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Cpa-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Mpa-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Thr-Tyr-Cys] -NH 2, or
H 2 -c [Cys-Phe- His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2; or acceptable salt thereof in the pharmaceutical. 下記式の請求項１に記載のペプチド：
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈ
ｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−
Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−
Ｃｙｓ］−ＮＨ2、または
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐ
ｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2。The peptide of claim 1 of the following formula:
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [D-Cys- Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Ph
e-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-
Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-
Cys] -NH 2, or H 2 -c [Cys-Phe- Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-P
he-Cys] -NH 2. 下記式の請求項１に記載のペプチド：
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2、
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2。The peptide of claim 1 of the following formula:
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Asn- Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2,
H 2 -c [Cys-Phe- Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2. 下記式の請求項１に記載のペプチド：
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2。The peptide of claim 1 of the following formula:
H 2 -c [Cys-Phe- Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2. 下記式の請求項１に記載のペプチド：
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2。The peptide of claim 1 of the following formula:
H 2 -c [Cys-Asn- Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2. 下記式の請求項１に記載のペプチド：
Ｈ2−ｃ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ（Ｉ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＮＨ2。The peptide of claim 1 of the following formula:
H 2 -c [Cys-Phe- Tyr (I) -D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys] -NH 2.
JP51344497A 1995-09-29 1996-09-04 Cyclic peptide analogues of somatostatin Expired - Fee Related JP3983806B2 (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US463395P 1995-09-29 1995-09-29
US60/004,633 1995-09-29
US08/578,037 1995-12-26
US08/578,037 US5708135A (en) 1995-09-29 1995-12-26 Cyclic peptide analogs of somatostatin
PCT/US1996/014230 WO1997011962A1 (en) 1995-09-29 1996-09-04 Cyclic peptide analogs of somatostatin

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH11512707A JPH11512707A (en) 1999-11-02
JP3983806B2 true JP3983806B2 (en) 2007-09-26

Family

ID=26673267

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP51344497A Expired - Fee Related JP3983806B2 (en) 1995-09-29 1996-09-04 Cyclic peptide analogues of somatostatin

Country Status (23)

Country Link
US (2) US5708135A (en)
EP (1) EP0859785B1 (en)
JP (1) JP3983806B2 (en)
KR (1) KR100430716B1 (en)
CN (1) CN1154657C (en)
AT (1) ATE201696T1 (en)
AU (1) AU711423B2 (en)
BR (1) BR9610725A (en)
CA (1) CA2229544C (en)
CZ (1) CZ289282B6 (en)
DE (1) DE69613137T2 (en)
DK (1) DK0859785T3 (en)
ES (1) ES2158340T3 (en)
GR (1) GR3036447T3 (en)
HU (1) HU221979B1 (en)
IL (2) IL155693A0 (en)
NO (1) NO318369B1 (en)
NZ (1) NZ316822A (en)
PL (1) PL325959A1 (en)
PT (1) PT859785E (en)
SK (1) SK29298A3 (en)
TW (1) TW514642B (en)
WO (1) WO1997011962A1 (en)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7238340B1 (en) * 1991-11-27 2007-07-03 Cis Bio International Monoamine, diamide, thiol-containing metal chelating agents
US5708135A (en) * 1995-09-29 1998-01-13 Biomeasure Incorporated Cyclic peptide analogs of somatostatin
US6262229B1 (en) 1996-12-04 2001-07-17 Biomeasure Incorporated Somatostatin antagonists
PL334089A1 (en) * 1996-12-04 2000-01-31 Sod Conseils Rech Applic Compounds antagonistic in respect to somatostatin
US5972893A (en) * 1997-05-06 1999-10-26 Cedars-Sinai Medical Center Method of treating hyperprolactinemia and prolactinomas
EP1332762A1 (en) * 1997-05-01 2003-08-06 Cedars-Sinai Medical Center Method of treating hyperprolactinemia and prolactinomas
PT979098E (en) * 1997-05-01 2003-07-31 Cedars Sinai Medical Center METHOD FOR THE TREATMENT OF HYPERPROLACTINEMIA AND PROLACTINOMAS
WO1998051332A1 (en) * 1997-05-13 1998-11-19 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A. (S.C.R.A.S.) Somatostatin and somatostatin agonists for treating insulin insensitivity and syndrome x
CA2290592A1 (en) 1997-05-13 1998-11-19 Michael Anthony Cawthorne Somatostatin and somatostatin agonists for decreasing body weight
EP0981364B1 (en) * 1997-05-13 2006-03-01 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Method and compositions for treating hyperlipidemia
US6004928A (en) * 1997-05-13 1999-12-21 Biomeasure, Incorporated Method of treating hyperlipidemia
US6465613B1 (en) 1998-11-19 2002-10-15 Tulane University Hydrophilic somatostatin analogs
US6903074B1 (en) 1999-06-04 2005-06-07 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Neuromedin b and somatostatin receptor agonists
US6864234B1 (en) 1999-06-25 2005-03-08 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Somatostatin agonists
US6358491B1 (en) 1999-08-27 2002-03-19 Berlex Laboratories, Inc. Somatostatin analogs
US6579967B1 (en) 1999-12-14 2003-06-17 The Salk Institute For Biological Studies Receptor-selective somatostatin analogs
US7019109B2 (en) * 2001-03-16 2006-03-28 The Salk Institute For Bilogical Studies SSTR1-selective analogs
US7326685B2 (en) 2001-09-21 2008-02-05 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Diagnostic or therapeutic somatostatin or bombesin analog conjugates and uses thereof
ES2339934T3 (en) * 2002-03-01 2010-05-27 The Administrators Of The Tulane Educational Fund CONJUGATES OF CITOTOXIC AGENTS AND BIOLOGICALLY ACTIVE PEPTIDES.
AU2003259172A1 (en) * 2002-07-24 2004-02-09 The Salk Institute For Biological Studies Receptor (sstr4)- selective somatostatin analogs
WO2004081031A2 (en) * 2003-03-10 2004-09-23 Biogen Idec Inc. Thiol-mediated drug attachment to targeting peptides
US7968080B2 (en) * 2003-08-20 2011-06-28 The Regents Of The University Of California Somatostatin analogs with inhibitory activity to growth hormone release
US8691761B2 (en) 2006-10-16 2014-04-08 Jean E. F. Rivier Somatostatin receptor 2 antagonists
CA2666642C (en) 2006-10-16 2015-11-17 The Salk Institute For Biological Studies Receptor(sstr2)-selective somatostatin antagonists
EP2646088B1 (en) 2010-11-29 2018-08-01 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Medicated module with automatic reservoir engagement

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2416048A1 (en) * 1974-04-03 1975-10-30 Hoechst Ag NEW PEPTIDES WITH BIOLOGICAL EFFECT
US4133782A (en) * 1976-06-07 1979-01-09 The Salk Institute For Biological Studies Somatostatin analogs with dissociated biological activities
US4211693A (en) * 1977-09-20 1980-07-08 The Salk Institute For Biological Studies Peptides with para-substituted phenylalanine
US4225472A (en) * 1979-05-29 1980-09-30 American Home Products Corporation Truncated somatostatin analogs
FR2523125A1 (en) * 1982-03-08 1983-09-16 Sanofi Sa Somatostatin analogues having different activity profiles - inhibit growth hormone, insulin and glucagon secretion, are resistant to proteolysis and have little effect on gastric secretion
US4428942A (en) * 1982-05-17 1984-01-31 The Salk Institute For Biological Studies Analogs of somatostatin
GB8318552D0 (en) * 1983-07-08 1983-08-10 Sandoz Ltd Organic compounds
US4853371A (en) * 1986-06-17 1989-08-01 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Therapeutic somatostatin analogs
US4798821A (en) * 1987-03-02 1989-01-17 Merck & Co., Inc. Antihypertensive therapy for diabetics
AU639371B2 (en) * 1987-07-10 1993-07-22 Novartis Ag Method of treating breast cancer
DK0457888T3 (en) * 1989-12-08 1996-08-12 Univ Tulane Octapeptide analogues of somatostatin with threonine at the 6-position
JPH03252783A (en) * 1990-03-02 1991-11-12 Hitachi Ltd Data processor
JPH04227540A (en) * 1990-04-04 1992-08-17 Hitachi Ltd Arithmetic processor and digital signal processing processor
EP0673387B1 (en) * 1992-12-11 1999-09-22 University Of Florida Materials and methods for control of pests
JP3904244B2 (en) * 1993-09-17 2007-04-11 株式会社ルネサステクノロジ Single chip data processor
US5708135A (en) * 1995-09-29 1998-01-13 Biomeasure Incorporated Cyclic peptide analogs of somatostatin
JP3767085B2 (en) * 1996-09-04 2006-04-19 セイコーエプソン株式会社 Information processing circuit and microcomputer

Also Published As

Publication number Publication date
NO318369B1 (en) 2005-03-14
DE69613137D1 (en) 2001-07-05
EP0859785B1 (en) 2001-05-30
KR20000004896A (en) 2000-01-25
PT859785E (en) 2001-11-30
SK29298A3 (en) 1998-08-05
WO1997011962A1 (en) 1997-04-03
TW514642B (en) 2002-12-21
CA2229544C (en) 2007-11-20
EP0859785A1 (en) 1998-08-26
IL123357A0 (en) 1998-09-24
CZ289282B6 (en) 2001-12-12
NZ316822A (en) 1999-10-28
NO981395L (en) 1998-03-27
CN1154657C (en) 2004-06-23
DK0859785T3 (en) 2001-08-27
EP0859785A4 (en) 1999-05-26
HU221979B1 (en) 2003-03-28
IL155693A0 (en) 2003-11-23
DE69613137T2 (en) 2001-11-15
ATE201696T1 (en) 2001-06-15
JPH11512707A (en) 1999-11-02
NO981395D0 (en) 1998-03-27
HUP9802372A2 (en) 1999-02-01
KR100430716B1 (en) 2004-09-08
BR9610725A (en) 1999-07-13
CZ48998A3 (en) 1998-07-15
US5708135A (en) 1998-01-13
HUP9802372A3 (en) 2000-03-28
PL325959A1 (en) 1998-08-17
CN1197460A (en) 1998-10-28
GR3036447T3 (en) 2001-11-30
US6001801A (en) 1999-12-14
AU711423B2 (en) 1999-10-14
CA2229544A1 (en) 1997-04-03
ES2158340T3 (en) 2001-09-01
AU6914596A (en) 1997-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3983806B2 (en) Cyclic peptide analogues of somatostatin
US5847066A (en) Analogs of growth hormone-releasing factor
EP0395417B1 (en) Linear somatostatin analogues
FI83660C (en) FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING BUKSPOTTSKOERTELNS GRF HOS MAENNISKAN.
US4758550A (en) Calcitonin derivatives
WO1989002897A1 (en) Therapeutic peptides
KR20010071523A (en) Conformationally constrained backbone cyclized somatostatin analogs
CZ281507B6 (en) Synthetic peptides, biologically active fragment and said peptide non-toxic salts
JP4264762B2 (en) Somatostatin analog
US6579967B1 (en) Receptor-selective somatostatin analogs
KR20010101079A (en) Antagonistic analogs of gh-rh inhibiting igf-ⅰ and -ⅱ
US6703481B1 (en) Somatostatin antagonists
AU602657B2 (en) Therapeutic somatostatin analogs
US5633263A (en) Linear somatostatin analogs
RU2177006C2 (en) Cyclic peptide analog of somatostatin
AU739557B2 (en) Cyclic peptide analogs of somatostatin
AU622123C (en) Therapeutic peptides
CZ289370B6 (en) Peptide, use thereof and pharmaceutical preparation in which the peptide comprised
CZ196399A3 (en) Somatostatin antagonists

Legal Events

Date Code Title Description
A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20060815

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20061109

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20070213

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20070508

A911 Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911

Effective date: 20070614

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20070626

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20070705

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100713

Year of fee payment: 3

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

S531 Written request for registration of change of domicile

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531

S533 Written request for registration of change of name

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100713

Year of fee payment: 3

R350 Written notification of registration of transfer

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713

Year of fee payment: 4

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees