JP3733457B2 - Novel cyclohexyl fatty acid derivatives - Google Patents

Description

【０００７】
［式中、Ｒ^１ は水素原子、低級アルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基を示し、該フェニル基はハロゲン原子または低級アルキル基で置換されていてもよい。Ｒ ^２ は水素原子、低級アルキル基、フェニル低級アルキル基またはフェニル基を示す。Ａは低級アルキレン基を示す。］
【０００８】
上記で規定した基は、本明細書全体を通して以下の意味を有することとする。低級アルキル基とはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、３，３−ジメチルブチル等の１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキルを示す。
【０００９】
シクロアルキル基とはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロオクチル等の３〜８個の炭素原子を有するシクロアルキルを示す。
【００１０】
フェニル基は、ハロゲン原子（フッ素原子、塩素原子、臭素原子等）または低級アルキル基で置換されていてもよい。
【００１１】
低級アルキレン基とはメチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、メチルメチレン、ジメチルメチレン、エチルメチレン、プロピルメチレン、ブチルメチレン、メチルエチレン、ジメチルエチレン、エチルエチレン、プロピルエチレン、メチルトリメチレン等の１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキレンを示す。
【００１２】
Ｒ ^２ は水素原子、低級アルキル基、フェニル低級アルキル基またはフェニル基である。
【００１３】
本発明における塩類とは医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、ナトリウム、カリウム、カルシウム等のアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩などが挙げられる。
【００１４】
また、本発明化合物に幾何異性体または光学異性体が存在する場合には、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。
【００１５】
尚、本発明化合物は溶媒和物、例えば水和物の形態をとっていてもよい。
【００１６】
本発明化合物の好ましい例としては、一般式[I] で示される化合物において、各基が下記のものである化合物またはその塩類が挙げられる；
(1a)Ｒ^１ が低級アルキル基またはフェニル基から選択される基を示す；
(2a)Ｒ^２ が水素原子を示す；および／または
(3a)Ａが直鎖の低級アルキレン基を示す。
すなわち、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(1a)の化合物またはその塩類、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(2a)の化合物またはその塩類、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(3a)の化合物またはその塩類、および
・一般式[I] で示される化合物において、上記(1a)、(2a)および(3a)の２つ以上の組み合わせからなる化合物またはその塩類である。
【００１７】
すなわち、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(1a)の化合物またはその塩類、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(2a)の化合物またはその塩類、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(3a)の化合物またはその塩類、および
・一般式[I] で示される化合物において、上記(1a)、(2a)および(3a)の２つ以上の組み合わせからなる化合物またはその塩類である。
【００１８】
本発明化合物のより好ましい例としては、一般式[I] で示される化合物において、各基が下記のものである化合物またはその塩類が挙げられる；
(1b)Ｒ¹ がフェニル基を示す；および／または
(2b)Ａがエチレン基を示す。
【００１９】
すなわち、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(1b)の化合物またはその塩類、
・一般式[I] で示される化合物において、上記(2b)の化合物またはその塩類、および
・一般式[I] で示される化合物において、上記(1b)および(2b)の組み合わせからなる化合物またはその塩類である。
【００２０】
本発明化合物の最も好ましい具体例としては、３−［４−（２−フェニルアクリロイル）シクロヘキシル］プロピオン酸およびその塩類が挙げられる。
【００２１】
【化４】

【００２２】
本発明は、また、上記一般式[I] の化合物の合成中間体である下記一般式[II]で示される化合物およびその塩類に関するものでもある。式 [I] 中、Ｒ ^１ は低級アルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基を示し、該フェニル基はハロゲン原子または低級アルキル基で置換されていてもよい。Ｒ ^２ は水素原子、低級アルキル基、フェニル低級アルキル基またはフェニル基を示す。Ａは低級アルキレン基を示す。
【００２３】
【化５】

【００２４】
本発明化合物[I] の代表的な合成ルートを下記に示す。
【００２５】
【化６】

【００２６】
但し、上記合成ルートは代表的なルートを例示するものであって、全ての方法を示すものではない。具体的合成方法の詳細は後述の実施例で説明する。
【００２７】
上記ルートの合成方法を以下に詳しく説明する。
【００２８】
カルボン酸誘導体[III] を塩化チオニルで処理して対応する酸塩化物[IV]とし、この酸塩化物をグリニャール試薬[V] と縮合させ式[II]で表される化合物を得る。この化合物[II]を２級アミン存在下パラホルムアルデヒドとマンニッヒ反応により縮合した後、脱離反応により本発明化合物[I] を得る。
【００２９】
上記合成方法において、反応物質が分子内にエステル基を有する場合、このエステル基は常法により遊離酸基とすることもできる。
【００３０】
本発明化合物は文献未知の新規化合物であるが、その化学構造的特徴は、シクロヘキシル脂肪酸のシクロヘキサン環の４位にα，β−不飽和カルボニル基を導入したところにある。
【００３１】
従来の技術の項で記載したように、エタクリン酸は線維柱帯細胞に形態的変化を起こさせ、房水流出能を亢進することによって眼圧を下げる効果があることが報告されている（特公平７−１３０１３号公報参照）。エタクリン酸は、α，β−不飽和カルボニル基を有するフェノキシ酢酸誘導体であるが、本発明者等はこのエタクリン酸の化学構造に着目し、鋭意研究した結果、そのフェノキシ酢酸構造をシクロヘキシル脂肪酸に変換してなる本発明化合物が優れた眼圧降下効果を発揮することを見出し、さらにα，β−不飽和カルボニル基のα位にフェニル基を導入してなる化合物は、より優れた効果を発揮することを見出した。
【００３２】
薬物の投与方法としては、活性体そのものを投与する方法と共に、生体内で分解し、活性体に変換される形、即ちプロドラッグの形で本発明化合物を投与する方法も汎用されている。本発明化合物においても、分子中に遊離酸に変換されるエステル基を含む場合、エステルをそのまま投与されてもよい。
【００３３】
本発明化合物の有用性を調べるべく、本発明化合物の線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用を検討した。詳細については後述の薬理試験の項で示すが、本発明化合物を添加することによる線維柱帯細胞の形態変化を画像解析により検討した結果、本発明化合物は線維柱帯細胞に対し優れた細胞形態変化作用を示した。従って、本発明化合物は優れた眼圧下降作用を有すると考えられる。
【００３４】
本発明化合物は主として非経口投与されるが、経口でも投与することができる。投与剤型としては、点眼剤、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等が挙げられ、それらの製剤は汎用技術を用いて調製することができる。例えば、点眼剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリンなどの等張化剤；リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどの緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ステアリン酸ポリオキシ４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などの界面活性剤；クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウムなどの安定化剤；塩化ベンザルコニウム、パラベンなどの防腐剤などを必要に応じて用い調製することができる。ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、４〜８の範囲が好ましい。また、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は、必要に応じて、乳糖、デンプン、結晶セルロース、植物油等の増量剤；ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤
；ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースカルシウムなどの崩壊剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコン樹脂などのコーティング剤；ゼラチン皮膜剤を用いて調製することができる。
【００３５】
本発明化合物の投与量は症状、年令、剤型等によって適宜選択できるが、点眼剤であれば０．００１〜３％（ｗ／ｖ）のものを１日１回〜数回点眼すればよく、経口剤であれば通常１日当り１ｍｇ〜１０００ｍｇを１回または数回に分けて投与すればよい。
【００３６】
以下に、本発明化合物の製造例、製剤例および薬理試験の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００３７】
【実施例】
［製造例］
参考例１
３−（４−カルボキシシクロヘキシル）プロピオン酸エチルエステル（参考化合物１−１）
【化７】

【００３８】
窒素雰囲気下、４−カルボキシ桂皮酸エチルエステル（５．０ｇ）のエタノール（２３ｍｌ）−テトラヒドロフラン（２３ｍｌ）混合溶媒中の溶液に５％ロジウム／アルミナ（１．１ｇ）を加えたのち、水素雰囲気下（４．０ｋｇｆ／ｃｍ² ）室温で４日間撹拌する。反応液をセライト濾過し、濾液を減圧濃縮し、標記化合物（参考化合物１−１）を得る。
【００３９】
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^-1）２９３０，１７３５，１７０２，１１９６
【００４０】
実施例１
３−（４−ブチリルシクロヘキシル）プロピオン酸エチルエステル（化合物１−１）
【化８】

【００４１】
窒素雰囲気下、３−（４−カルボキシシクロヘキシル）プロピオン酸エチルエステル（参考化合物１−１、２．０ｇ）のクロロホルム（４ｍｌ）溶液に塩化チオニル（３．２ｍｌ）を滴下したのち、ジメチルホルムアミド（１滴）を加え８０分間加熱還流する。反応液を減圧濃縮し、生成した酸クロライドを含む残留物を得る。窒素雰囲気下、残留物を無水テトラヒドロフラン（２６ｍｌ）に溶解し、ドライアイス／メタノールで冷却する。塩化プロピルマグネシウムの２．０Ｍテトラヒドロフラン溶液（４．４ｍｌ）を攪拌下に滴下する。滴下終了後１０分間ドライアイス／メタノールで冷却し、更に室温で３０分間撹拌を続ける。反応液に１０％クエン酸水溶液を加えたのち、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物１−１、９００ｍｇ）を得る。
【００４２】
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^-1）２９３１，１７３３，１７０８，１１７４
【００４３】
実施例１と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【００４４】
・３−［４−（フェニルアセチル）シクロヘキシル］プロピオン酸エチルエステル（化合物１−２）
【００４５】
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^-1）２９２８，１７３２，１７１３，１６０２，１４９５，１４５３，１１７４
【００４６】
・３−［４−［（４−フルオロフェニル）アセチル］シクロヘキシル］プロピオン酸エチルエステル（化合物１−３）
【００４７】
・３−［４−（４−トリルアセチル）シクロヘキシル］プロピオン酸エチルエステル（化合物１−４）
【００４８】
・３−［４−（シクロヘキシルアセチル）シクロヘキシル］プロピオン酸エチルエステル（化合物１−５）
【００４９】
実施例２
３−（４−ブチリルシクロヘキシル）プロピオン酸（化合物２−１）
【化９】

【００５０】
窒素雰囲気下、３−（４−ブチリルシクロヘキシル）プロピオン酸エチルエステル（化合物１−１、９００ｍｇ）のエタノール（１０ｍｌ）溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（７．１ｍｌ）を加え、全体を室温で１時間撹拌する。反応液を１Ｎ塩酸の添加により酸性とし、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる析出物を濾取し、標記化合物（化合物２−１、３７３ｍｇ）を結晶として得る。
【００５１】
ｍｐ ８２．５〜８７．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）２９２４，１７０７，１４５０，１２８１，９４２
【００５２】
実施例２と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【００５３】
・３−［４−（フェニルアセチル）シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物２−２）
ｍｐ １１４．８〜１１８．３℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）２９３２，１７０７，１６９７，１４９６，９６３
【００５４】
・３−［４−［（４−フルオロフェニル）アセチル］シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物２−３）
【００５５】
・３−［４−（４−トリルアセチル）シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物２−４）
【００５６】
・３−［４−（シクロヘキシルアセチル）シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物２−５）
【００５７】
実施例３
３−［４−（２−エチルアクリロイル）シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物３−１）
【化１０】

【００５８】
３−（４−ブチリルシクロヘキシル）プロピオン酸（化合物２−１、５００ｍｇ）のジオキサン（４４ｍｌ）溶液を耐圧管に入れ、同溶液にパラホルムアルデヒド（２６５ｍｇ）、ジメチルアミン塩酸塩（７２１ｍｇ）、酢酸（２滴）および無水硫酸マグネシウム（３ｇ）を加えて全体を１２０℃に加熱しながら３日間撹拌する。放冷後、反応液を１０％クエン酸水溶液の添加により酸性とし酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物３−１、１３０ｍｇ）を結晶として得る。
【００５９】
ｍｐ ８１．０〜８４．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）２９３６，１６９９，１６６６，１４５４，１３００，９６４，９４７
【００６０】
実施例３と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【００６１】
・３−［４−（２−フェニルアクリロイル）シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物３−２）
ｍｐ １１３．５〜１１４．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）２９３４，１６９５，１６６０，１５７２，９６２
【００６２】
・３−［４−［２−（４−フルオロフェニル）アクリロイル］シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物３−３）
【００６３】
・３−［４−［２−（４−トリル）アクリロイル］シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物３−４）
【００６４】
・３−［４−（２−シクロヘキシルアクリロイル）シクロヘキシル］プロピオン酸（化合物３−５）
【００６５】
［製剤例］
本発明化合物の点眼剤および経口剤の製剤例を以下に示す。
【００６６】
１） 点眼剤
１０ｍｌ中
本発明化合物 １ｍｇ
濃グリセリン ２５０ｍｇ
ポリソルベート８０ ２００ｍｇ
リン酸二水素ナトリウム二水和物 ２０ｍｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
１Ｎ塩酸 適量
滅菌精製水 適量
【００６７】
２） 錠剤
１００ｍｇ中
本発明化合物 １ｍｇ
乳糖 ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン ２０ｍｇ
カルボキシメチルセルロース カルシウム ６ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ６ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．６ｍｇ
【００６８】
【発明の効果】
［薬理試験］
本発明化合物の緑内障に対する有用性を調べるため、本発明化合物が線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用について検討した。
【００６９】
１）線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用
薬物の培養線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用を評価することで、房水流出を亢進させる作用を有する薬物を見出し得る可能性が報告されている（Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 33, 2631-2640 (1992) ）。そこで上記文献に記載された 方法に準じて本発明化合物のウシ培養線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用を検討した。
【００７０】
（実験方法）
本発明化合物を添加することによるウシ培養線維柱帯細胞の形態変化を、画像解析により定量評価した。
【００７１】
［細胞の調製］
ウシ胎児血清（１０％）、アンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）およびゲンタマイシン（５０μｇ／ｍｌ）を添加したほ乳類細胞培養基本培地Ｄ−ＭＥＭ（Dulbecco′ s Modified Eagle Medium 、Gibco 社製）で培養したウシ線維柱帯細胞（継代数２〜５）を、後述の薬物処理２４時間前に、トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（０．０５％トリプシン、０．５３ｍＭ ＥＤＴＡ・４Ｎａ）で処理して、２４穴プレートに播種（１０⁴ cells ／well）した。後述の薬物処理１２時間前にリン酸緩衝生理食塩液による洗浄を行った後、培地をアンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）およびゲンタマイシン（５０μｇ／ｍｌ）を添加したＤ−ＭＥＭ（以下培地Ａとする）に交換した。後述の薬物処理１時間前に、上記のように調製した細胞から細胞同士が接触していない細胞を選び実験に用いた。
【００７２】
［被験化合物溶液の調製］
被験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した後、得られた溶液に培地Ａを加えて全体を濾過滅菌し、さらに培地Ａを加えて被験化合物を所定の濃度に希釈した。この希釈液を５％炭酸ガス雰囲気下、後述の薬物処理１時間前から３７℃で１時間恒温保持して被験化合物溶液を調製した。
【００７３】
［測定方法］
まず、薬物処理１時間前の前記細胞を自動位置検出装置（well-scanner）を用いて写真撮影した。次いで、細胞の培地を被験化合物溶液に交換して細胞を薬物処理し、５％炭酸ガス雰囲気下、３７℃で３時間インキュベートした後、well-scannerを用いて薬物処理１時間前に撮影したのと同じ細胞を写真撮影した。
【００７４】
（画像解析）
撮影した細胞像を写真からＣＣＤカメラ（HAMAMATU社製）にて、画像解析システムに取り込んだ。取り込んだ細胞像の輪郭をトレースし、細胞像の面積を測定した。被験化合物の線維柱帯細胞に及ぼす形態変化の程度は、下記の面積変化率（％）で示す。
【００７５】
【式１】

Ａ：薬物処理前の細胞面積
Ｂ：薬物処理後の細胞面積
【００７６】
（結果）
表１に試験結果の一例として、線維柱帯細胞の細胞面積を５０％縮小させるのに要した濃度（ＥＣ₅₀）を示す。また、対照薬物としてエタクリン酸を用いた結果も合わせて示す。
【００７７】
【表１】

【００７８】
表１から分かるように、本発明化合物は線維柱帯細胞に対し、優れた細胞形態変化作用を有することが認められる。これらの効果は、公知の比較対照薬物であるエタクリン酸に比べて格段に優れたものであった。
【００７９】
以上のことから、本発明化合物は優れた細胞形態変化作用を有しており、眼圧下降剤、即ち緑内障の治療剤として有用であることが認められる。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel compound useful as a therapeutic agent for glaucoma.
[0002]
[Prior art]
Glaucoma is a disease in which visual function is generally impaired by an increase in intraocular pressure. The outflow of aqueous humor is closely related to the increase in intraocular pressure, and when the outflow of aqueous humor is prevented, the increase in intraocular pressure is caused. Most of the aqueous humor flows out of the eyeball from the trabecular meshwork through Schlemm's canal. By reducing the resistance of aqueous humor outflow in the trabecular meshwork, aqueous humor outflow can be enhanced. The cells forming the trabecular meshwork (trabecular cells) have a sulfhydryl group, but administration of a compound that reacts with the sulfhydryl group causes morphological changes in the trabecular meshwork cells, A method for reducing intraocular pressure by enhancing aqueous outflow ability has been reported (see Japanese Patent Publication No. 7-13013). This publication discloses phenoxyacetic acid derivatives, particularly ethacrylic acid, as preferred compounds as compounds that react with sulfhydryl groups.
[0003]
[Problems to be solved by the invention]
The method of reducing intraocular pressure by causing a morphological change in trabecular meshwork cells is very interesting as a method for treating glaucoma. However, many studies on drugs having such a mechanism of action have not yet been made, and the creation of new drugs is a very interesting issue in the development of therapeutic agents for glaucoma.
[0004]
[Means for Solving the Problems]
Therefore, the present inventors pay attention to the effect that ethacrynic acid, which is a phenoxyacetic acid derivative having an α, β-unsaturated carbonyl group, causes a morphological change in trabecular meshwork cells and has an effect of reducing intraocular pressure, Various novel compounds were synthesized and their effects on trabecular cell morphology were investigated. As a result, the inventors have found that a novel cyclohexyl fatty acid derivative having a basic structure of cyclohexyl fatty acid and having an α, β-unsaturated carbonyl group introduced at the 4-position of the cyclohexane ring has an excellent effect, and has completed the present invention.
[0005]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The present invention relates to a compound represented by the following general formula [I] and salts thereof (hereinafter collectively referred to as the compound of the present invention unless otherwise specified) and a pharmaceutical composition containing them as an active ingredient.
[0006]
[Chemical 3]

[0007]
[Wherein, R ¹ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a cycloalkyl group having 3 to 8 carbon atoms, or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a halogen atom or a lower alkyl group. R ² represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl lower alkyl group or a phenyl group . A represents a lower alkylene group. ]
[0008]
The groups defined above shall have the following meanings throughout the specification. The lower alkyl group is a straight chain or branched chain having 1 to 6 carbon atoms such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, isopentyl, hexyl, isohexyl, 3,3-dimethylbutyl. Indicates branch alkyl.
[0009]
The cycloalkyl group refers to cycloalkyl having 3 to 8 carbon atoms such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cyclopentyl, cyclooctyl and the like.
[0010]
The phenyl group may be substituted with a halogen atom (fluorine atom, chlorine atom, bromine atom, etc.) or a lower alkyl group .
[0011]
The lower alkylene group is methylene, ethylene, trimethylene, tetramethylene, pentamethylene, hexamethylene, methylmethylene, dimethylmethylene, ethylmethylene, propylmethylene, butylmethylene, methylethylene, dimethylethylene, ethylethylene, propylethylene, methyltrimethylene. Straight chain or branched alkylene having 1 to 6 carbon atoms such as
[0012]
R ² is a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl lower alkyl group or a phenyl group.
[0013]
The salt in the present invention is not particularly limited as long as it is a pharmaceutically acceptable salt, and examples thereof include salts with alkali metals or alkaline earth metals such as sodium, potassium and calcium.
[0014]
Further, when a geometric isomer or an optical isomer exists in the compound of the present invention, these isomers are also included in the scope of the present invention.
[0015]
In addition, this invention compound may take the form of the solvate, for example, a hydrate.
[0016]
Preferred examples of the compound of the present invention include a compound represented by the general formula [I], wherein each group is as follows, or a salt thereof;
(1a) R ¹ represents a group selected from a lower alkyl group and a phenyl group;
(2a) R ² represents a hydrogen atom; and / or
(3a) A represents a linear lower alkylene group.
That is,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (1a) or a salt thereof,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (2a) or a salt thereof,
In the compound represented by the general formula [I], the compound (3a) or a salt thereof, and in the compound represented by the general formula [I], two of the above (1a), (2a) and (3a) A compound comprising the above combination or a salt thereof.
[0017]
That is,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (1a) or a salt thereof,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (2a) or a salt thereof,
In the compound represented by the general formula [I], the compound (3a) or a salt thereof, and in the compound represented by the general formula [I], two of the above (1a), (2a) and (3a) A compound comprising the above combination or a salt thereof.
[0018]
More preferred examples of the compound of the present invention include a compound represented by the general formula [I] wherein each group is as follows:
(1b) R ¹ represents a phenyl group; and / or
(2b) A represents an ethylene group.
[0019]
That is,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (1b) or a salt thereof,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (2b) or a salt thereof, and in the compound represented by the general formula [I], or a compound comprising the combination of the above (1b) and (2b) It is salt.
[0020]
The most preferred specific example of the compound of the present invention includes 3- [4- (2-phenylacryloyl) cyclohexyl] propionic acid and its salts.
[0021]
[Formula 4]

[0022]
The present invention also relates to a compound represented by the following general formula [II], which is a synthetic intermediate of the compound of the general formula [I], and salts thereof. In the formula [I] , R ¹ represents a lower alkyl group, a cycloalkyl group having 3 to 8 carbon atoms, or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a halogen atom or a lower alkyl group. R ² represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl lower alkyl group or a phenyl group. A represents a lower alkylene group.
[0023]
[Chemical formula 5]

[0024]
A typical synthesis route of the compound [I] of the present invention is shown below.
[0025]
[Chemical 6]

[0026]
However, the above synthesis route is an example of a typical route and does not indicate all methods. Details of the specific synthesis method will be described in the examples described later.
[0027]
The route synthesis method will be described in detail below.
[0028]
The carboxylic acid derivative [III] is treated with thionyl chloride to give the corresponding acid chloride [IV], and this acid chloride is condensed with the Grignard reagent [V] to obtain the compound represented by the formula [II]. This compound [II] is condensed with paraformaldehyde and Mannich reaction in the presence of a secondary amine, and then the compound [I] of the present invention is obtained by elimination reaction.
[0029]
In the above synthesis method, when the reactant has an ester group in the molecule, the ester group can be converted to a free acid group by a conventional method.
[0030]
The compound of the present invention is a novel compound unknown in the literature, but its chemical structural feature is that an α, β-unsaturated carbonyl group is introduced at the 4-position of the cyclohexane ring of the cyclohexyl fatty acid.
[0031]
As described in the section of the prior art, ethacrynic acid has been reported to have an effect of reducing intraocular pressure by causing a morphological change in trabecular meshwork cells and enhancing the outflow ability of aqueous humor. No. 7-13013). Etacrylic acid is a phenoxyacetic acid derivative having an α, β-unsaturated carbonyl group. The present inventors have paid attention to the chemical structure of ethacrynic acid, and as a result of intensive research, converted the phenoxyacetic acid structure into cyclohexyl fatty acid. The compound of the present invention is found to exhibit an excellent intraocular pressure-lowering effect, and the compound formed by introducing a phenyl group at the α-position of the α, β-unsaturated carbonyl group exhibits a more excellent effect. I found out.
[0032]
As a method for administering a drug, a method of administering the compound of the present invention in a form that is decomposed in vivo and converted into an active form, that is, a prodrug form, is widely used, in addition to a method of administering the active form itself. Even in the compound of the present invention, if the molecule contains an ester group that can be converted into a free acid, the ester may be administered as it is.
[0033]
In order to examine the usefulness of the compound of the present invention, the effect of the compound of the present invention on the morphology of trabecular meshwork cells was examined. The details will be described in the pharmacological test section below. As a result of examining image changes in the trabecular cells by adding the compound of the present invention, the compound of the present invention is superior to the trabecular cells. Change effect was shown. Therefore, it is considered that the compound of the present invention has an excellent intraocular pressure lowering action.
[0034]
The compound of the present invention is mainly administered parenterally, but can also be administered orally. Examples of the dosage form include eye drops, injections, tablets, capsules, granules and the like, and their preparations can be prepared using general-purpose techniques. For example, eye drops include isotonic agents such as sodium chloride and concentrated glycerin; buffering agents such as sodium phosphate and sodium acetate; polyoxyethylene sorbitan monooleate, polyoxy40 stearate, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, etc. Surfactant; Stabilizers such as sodium citrate and sodium edetate; Preservatives such as benzalkonium chloride and paraben can be used as necessary. The pH may be in the range acceptable for ophthalmic preparations, but is preferably in the range of 4-8. In addition, oral preparations such as tablets, capsules, granules, etc., can be used as needed: bulking agents such as lactose, starch, crystalline cellulose, vegetable oil; lubricants such as magnesium stearate and talc; hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone A disintegrating agent such as carboxymethylcellulose calcium; a coating agent such as hydroxypropylmethylcellulose, macrogol, silicone resin; and a gelatin film agent.
[0035]
The dose of the compound of the present invention can be appropriately selected depending on the symptom, age, dosage form, etc. In the case of eye drops, 0.001 to 3% (w / v) can be applied once to several times a day. If it is an oral preparation, 1 mg to 1000 mg per day is usually administered once or divided into several times.
[0036]
The production examples, formulation examples, and pharmacological test results of the compounds of the present invention are shown below, but these examples are for better understanding of the present invention and do not limit the scope of the present invention.
[0037]
【Example】
[Production example]
Reference example 1
3- (4-Carboxycyclohexyl) propionic acid ethyl ester (Reference compound 1-1)
[Chemical 7]

[0038]
Under a nitrogen atmosphere, 5% rhodium / alumina (1.1 g) was added to a solution of 4-carboxycinnamic acid ethyl ester (5.0 g) in a mixed solvent of ethanol (23 ml) -tetrahydrofuran (23 ml), and then in a hydrogen atmosphere. (4.0 kgf / cm ² ) Stir at room temperature for 4 days. The reaction solution is filtered through Celite, and the filtrate is concentrated under reduced pressure to obtain the title compound (Reference compound 1-1).
[0039]
IR (Film, cm ⁻¹ ) 2930, 1735, 1702, 1196
[0040]
Example 1
3- (4-Butyrylcyclohexyl) propionic acid ethyl ester (Compound 1-1)
[Chemical 8]

[0041]
Under a nitrogen atmosphere, thionyl chloride (3.2 ml) was added dropwise to a chloroform (4 ml) solution of 3- (4-carboxycyclohexyl) propionic acid ethyl ester (reference compound 1-1, 2.0 g), and then dimethylformamide (1 Drop) and heated to reflux for 80 minutes. The reaction solution is concentrated under reduced pressure to obtain a residue containing the produced acid chloride. The residue is dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (26 ml) under a nitrogen atmosphere and cooled with dry ice / methanol. A 2.0 M tetrahydrofuran solution (4.4 ml) of propylmagnesium chloride is added dropwise with stirring. After completion of dropping, the mixture is cooled with dry ice / methanol for 10 minutes, and further stirred at room temperature for 30 minutes. A 10% aqueous citric acid solution is added to the reaction mixture, and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue is purified by silica gel column chromatography to obtain the title compound (Compound 1-1, 900 mg).
[0042]
IR (Film, cm ⁻¹ ) 2931, 1733, 1708, 1174
[0043]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 1.
[0044]
3- [4- (Phenylacetyl) cyclohexyl] propionic acid ethyl ester (Compound 1-2)
[0045]
IR (Film, cm ⁻¹ ) 2928, 1732, 1713, 1602, 1495, 1453, 1174
[0046]
3- [4-[(4-Fluorophenyl) acetyl] cyclohexyl] propionic acid ethyl ester (Compound 1-3)
[0047]
3- [4- (4-Tolylacetyl) cyclohexyl] propionic acid ethyl ester (Compound 1-4)
[0048]
3- [4- (Cyclohexylacetyl) cyclohexyl] propionic acid ethyl ester (Compound 1-5)
[0049]
Example 2
3- (4-Butyrylcyclohexyl) propionic acid (Compound 2-1)
[Chemical 9]

[0050]
Under a nitrogen atmosphere, 1N aqueous sodium hydroxide solution (7.1 ml) was added to a solution of 3- (4-butyrylcyclohexyl) propionic acid ethyl ester (Compound 1-1, 900 mg) in ethanol (10 ml), and the whole was added at room temperature. Stir for hours. The reaction is acidified by addition of 1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The resulting precipitate is collected by filtration to give the title compound (Compound 2-1, 373 mg) as crystals.
[0051]
mp 82.5-87.0 ° C
IR (KBr, cm ⁻¹ ) 2924, 1707, 1450, 1281, 942
[0052]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 2.
[0053]
3- [4- (Phenylacetyl) cyclohexyl] propionic acid (Compound 2-2)
mp 114.8-118.3 ° C
IR (KBr, cm ⁻¹ ) 2932, 1707, 1697, 1496, 963
[0054]
3- [4-[(4-Fluorophenyl) acetyl] cyclohexyl] propionic acid (Compound 2-3)
[0055]
3- [4- (4-Tolylacetyl) cyclohexyl] propionic acid (Compound 2-4)
[0056]
3- [4- (cyclohexylacetyl) cyclohexyl] propionic acid (Compound 2-5)
[0057]
Example 3
3- [4- (2-Ethylacryloyl) cyclohexyl] propionic acid (Compound 3-1)
[Chemical Formula 10]

[0058]
A solution of 3- (4-butyrylcyclohexyl) propionic acid (Compound 2-1, 500 mg) in dioxane (44 ml) was placed in a pressure tube, and paraformaldehyde (265 mg), dimethylamine hydrochloride (721 mg), acetic acid ( 2 drops) and anhydrous magnesium sulfate (3 g) are added and the whole is stirred for 3 days while heating to 120 ° C. After allowing to cool, the reaction mixture is acidified by adding a 10% aqueous citric acid solution and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue is purified by silica gel column chromatography to obtain the title compound (Compound 3-1, 130 mg) as crystals.
[0059]
mp 81.0-84.0 ° C
IR (KBr, cm ⁻¹ ) 2936, 1699, 1666, 1454, 1300, 964, 947
[0060]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 3.
[0061]
3- [4- (2-Phenylacryloyl) cyclohexyl] propionic acid (Compound 3-2)
mp 113.5-114.5 ° C
IR (KBr, cm ⁻¹ ) 2934, 1695, 1660, 1572, 962
[0062]
3- [4- [2- (4-Fluorophenyl) acryloyl] cyclohexyl] propionic acid (Compound 3-3)
[0063]
3- [4- [2- (4-Tolyl) acryloyl] cyclohexyl] propionic acid (Compound 3-4)
[0064]
3- [4- (2-Cyclohexylacryloyl) cyclohexyl] propionic acid (Compound 3-5)
[0065]
[Formulation example]
Formulation examples of eye drops and oral preparations of the compound of the present invention are shown below.
[0066]
1) 1 mg of the present compound in 10 ml of eye drops
Concentrated glycerin 250mg
Polysorbate 80 200mg
Sodium dihydrogen phosphate dihydrate 20mg
1N sodium hydroxide appropriate amount 1N hydrochloric acid appropriate amount sterilized purified water appropriate amount [0067]
2) 1 mg of the compound of the present invention in 100 mg of a tablet
Lactose 66.4mg
Corn starch 20mg
Carboxymethylcellulose calcium 6mg
Hydroxypropylcellulose 6mg
Magnesium stearate 0.6mg
[0068]
【The invention's effect】
[Pharmacological test]
In order to examine the usefulness of the compound of the present invention for glaucoma, the effect of the compound of the present invention on the morphology of trabecular meshwork cells was examined.
[0069]
1) Effects on the morphology of trabecular meshwork cells It has been reported that by evaluating the effects of drugs on the morphology of cultured trabecular cells, it is possible to find drugs that have an action to enhance aqueous humor outflow ( Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 33 , 2631-2640 (1992)). Therefore, the effect of the compound of the present invention on the morphology of cultured bovine trabecular meshwork cells was examined according to the method described in the above document.
[0070]
(experimental method)
The morphological change of bovine cultured trabecular meshwork cells by adding the compound of the present invention was quantitatively evaluated by image analysis.
[0071]
[Preparation of cells]
Cultured in mammalian cell culture basic medium D-MEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium, Gibco) supplemented with fetal bovine serum (10%), amphotericin B (2.5 μg / ml) and gentamicin (50 μg / ml) Bovine trabecular meshwork cells (passage number 2-5) were treated with a trypsin-EDTA solution (0.05% trypsin, 0.53 mM EDTA · 4Na) 24 hours before the drug treatment described below, and placed on a 24-well plate. Seeding (10 ⁴ cells / well) was performed. After washing with phosphate buffered saline for 12 hours before the drug treatment described later, the medium was D-MEM (hereinafter referred to as Medium A and Medium) supplemented with amphotericin B (2.5 μg / ml) and gentamicin (50 μg / ml). Replaced). One hour before the drug treatment described later, cells that were not in contact with each other were selected from the cells prepared as described above and used for the experiment.
[0072]
[Preparation of test compound solution]
After dissolving the test compound in dimethyl sulfoxide (DMSO), medium A was added to the resulting solution and the whole was sterilized by filtration. Further, medium A was added to dilute the test compound to a predetermined concentration. This diluted solution was kept at a constant temperature at 37 ° C. for 1 hour from 1 hour before the drug treatment described below in a 5% carbon dioxide atmosphere to prepare a test compound solution.
[0073]
[Measuring method]
First, the cells 1 hour before drug treatment were photographed using an automatic position detector (well-scanner). Next, the cell culture medium was replaced with a test compound solution, the cells were treated with drugs, incubated at 37 ° C. in a 5% carbon dioxide atmosphere for 3 hours, and then photographed 1 hour before the drug treatment using a well-scanner. The same cells were photographed.
[0074]
(Image analysis)
The taken cell image was taken from the photograph into an image analysis system with a CCD camera (manufactured by HAMAMATU). The outline of the captured cell image was traced, and the area of the cell image was measured. The degree of morphological change of the test compound on trabecular meshwork cells is indicated by the following area change rate (%).
[0075]
[Formula 1]

A: Cell area before drug treatment B: Cell area after drug treatment
(result)
As an example of the test results, Table 1 shows the concentration (EC ₅₀ ) required to reduce the cell area of trabecular meshwork cells by 50%. In addition, the results of using ethacrynic acid as a control drug are also shown.
[0077]
[Table 1]

[0078]
As can be seen from Table 1, the compound of the present invention has an excellent cell shape change action on trabecular meshwork cells. These effects were far superior to those of ethacrynic acid, which is a known comparative control drug.
[0079]
From the above, it can be seen that the compound of the present invention has an excellent cell shape change action and is useful as an intraocular pressure lowering agent, that is, a therapeutic agent for glaucoma.

Claims (5)

A compound represented by the following general formula [I] or a salt thereof.

[Wherein, R ¹ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a cycloalkyl group having 3 to 8 carbon atoms, or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a halogen atom or a lower alkyl group. R ² represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl lower alkyl group or a phenyl group . A represents a lower alkylene group. ] A pharmaceutical composition comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof as an active ingredient. An aqueous humor outflow improver comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof as an active ingredient. An intraocular pressure-lowering agent comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof as an active ingredient. A compound represented by the following general formula [II] or a salt thereof.

[Wherein, R ¹ represents a lower alkyl group, a cycloalkyl group having 3 to 8 carbon atoms, or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a halogen atom or a lower alkyl group. R ² represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl lower alkyl group or a phenyl group . A represents a lower alkylene group. ]