JP3719407B2 - Preparative liquid chromatograph - Google Patents

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Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、分離カラムで分離され検出器で検出された分画成分を分取する分取液体クロマトグラフに関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
複数の成分を含む試料から幾つかの所望の成分を分画して取り出すために、高速液体クロマトグラフなどの液体クロマトグラフを用い、分離カラムにより成分ごとに分離して溶出させている。
【０００３】
オフラインによる方法では、分離カラムから溶出した成分を移動相とともにフラクションコレクタにより捕集している。フラクションコレクタで採取された成分は移動相溶媒とともに捕集されているので、捕集された成分を濃縮するためには移動相溶媒を除去しなければならない。そのため、試料成分と移動相溶媒を含む捕集溶液に窒素を吹き込んで溶媒を揮散させる窒素パージや、加熱することによって移動相溶媒を蒸発させる方法によって、分画された成分を乾固して濃縮している。
【０００４】
オンラインによる分取方法では、分離カラムの下流にトラップカラムを設け、分離カラムから溶出してきた所望の成分をそのトラップカラムに捕捉することにより濃縮した後、別の溶媒をそのトラップカラムに流すことにより捕捉された分画成分を溶出させる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
分画成分をオフラインで濃縮して採取しようとした場合、分画成分とともに採取される移動相溶媒が蒸発しにくい成分を含んでいる場合には、溶媒を揮散させるのに長時間を要する。また、所望の分画成分が分解しやすい物質である場合には、溶媒を加熱して揮散させようとすると、熱により分解される虞れがある。
【０００６】
トラップカラムを用いてオンラインで処理すれば、分画成分の回収を短時間で行なうことができ、しかも分画成分の分解を抑えることもできる。しかし、これまで１つのトラップカラムしか用いられていないので、１成分しか捕捉できない。そして分画成分のトラップ操作では、分離カラムから溶出してきた分画成分を移動相溶媒とともにそのままトラップカラムに導いているので、移動相溶媒によっては分画成分がトラップされにくい物質の場合には回収率が低下する問題が生じる。
【０００７】
本発明はトラップカラムを用いたオンライン分取において、捕集できる分画成分の数を複数にし、かつ回収率を高めることを目的とするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明では、分離カラムで分離され検出器で検出された分画成分を分取するために、分離カラムの下流に流路選択手段を介して互いに並列に接続された複数のトラップカラムと、トラップカラムの入口側流路に接続され分離カラムからの溶出液を希釈する希釈液を供給する希釈液供給流路と、トラップカラムに捕捉された分画成分をトラップカラムから脱離させる特性をもつ脱離用移動相をトラップカラムに個別に供給する脱離用移動相供給流路とを備え、希釈液供給流路は脱離用移動相を混入できるようになっている。
【０００９】
複数のトラップカラムを互いに並列に接続したことにより、トラップカラムの数だけの成分を捕集することができる。
分画成分をトラップカラムに導く際、希釈液により希釈しながらトラップカラムに捕捉させることにより、分離用の移動相溶媒のみでトラップカラムに捕捉させる場合に比べて捕捉させやすくなり、回収率が向上する。その際、希釈液に脱離用移動相を混入して希釈液の有機溶媒濃度を自由に調整することができる。
【００１０】
【発明の実施の形態】
流路選択手段は切換バルブその他、流路を選択できる適当な手段である。
検出器としては、液体クロマトグラフで一般に用いられている紫外可視吸光光度計、蛍光光度計、屈折率計、電気化学検出器、電気伝導度検出器の他、質量分析計などを用いることができる。
【００１１】
希釈液は溶出液の移動相溶媒と置換して分画成分がトラップカラムに捕捉されやすくする特性を備えたものを選択する。
トラップカラムの下流には、トラップカラムにいったん捕捉された後にトラップカラムから脱離した分画成分をそれぞれの捕集容器に捕集するために、フラクションコレクタなどの捕集手段を備えることが好ましい。分画成分をトラップカラムから脱離させるのに使用する移動相溶媒は、試料を分離カラムで分離させる際に使用した移動相溶媒とは異なり選択の幅が広がるので、捕集容器に捕集した分画成分を濃縮する場合には、蒸発させるのが容易な溶媒を選択することができる。
【００１２】
検出器により分離カラムからの溶出液を検出し、所望の分画成分が溶出してきたときに、その成分が検出器からトラップカラムに至るまでに要する時間を予め求めておき、その時間経過後に所定のトラップカラムに導くように流路選択手段を作動させる。トラップカラムに捕捉された成分をトラップカラムから脱離させて溶出させるために、トラップカラムに脱離用移動相溶媒を供給する。トラップカラムから脱離した成分は、他の分析装置のサンプルとしてオンラインで供給することもできるし、フラクションコレクタなどの手段を用いてそれぞれの捕集容器に捕集していくようにすることもできる。
【００１３】
【実施例】
図１は比較例を表わす。ここでは検出器として紫外可視吸光光度計検出器のほかに質量分析計を接続したＬＣ／ＭＳ構成のものを示す。また試料成分の分離のために、高圧グラジエント方式の高速液体クロマトグラフを使用する。
【００１４】
移動相溶媒としてＨ2ＯとＡＣＮ(アセトニトリル)を用意する。それぞれの移動相容器２，４から移動相を供給するために、送液ポンプ６，８が設けられ、高圧グラジエントによる移動相供給流路を構成している。各送液ポンプ６，８は時間とともに設定された流速になるように制御され、供給された溶媒は混合器１０によって混合されて所定の組成をもった移動相として分離カラム１４に供給される。
【００１５】
混合器１０とカラム１４の間の流路には試料を供給するためのインジェクタ１２が設けられている。インジェクタ１２には、オートサンプラによって試料が自動的に注入されるようにすることができる。
カラム１４の下流には検出器１６として紫外可視吸光光度計が設けられている。検出器１６を経た溶出液流路は切換バルブ２０に接続されているとともに、質量分析計１８にも導かれている。検出器１６を経た溶出液は大部分がバルブ２０側に導かれるが、その一部がスプリッタにより分離されて質量分析計１８に導かれ、検出器１６と質量分析計１８の何れか又は両方を用いて分画成分の検出が行えるようになっている。検出器として２種類のものを設けることにより、定性と定量をともに行なうことができる。
【００１６】
バルブ２０は、検出器１６を経て流れてきた溶出液をトラップカラム側又はドレイン２２側に切り換えて導く。トラップカラム側には切換バルブ２４を経て複数の流路が互いに並列に接続されており、各流路２６−１〜２６−ｎにはそれぞれトラップカラム２８が設けられている。それらの流路２６−１〜２６−ｎは１つの流路に合流し、再び切換えバルブ２０を経てドレイン２２又はフラクションコレクタ３０に切り換えて導かれるようになっている。流路２６−１はドレイン用の流路であるが、スプリッタによる分流で分流比を常に一定に保つために流路２６−１にもトラップ用の流路２６−２〜２６−ｎと同じトラップカラム２８が設けられている。
【００１７】
流路２６−１〜２６−ｎにはそれぞれ希釈液又はトラップカラム２８に捕捉された成分を脱離させて溶出するための脱離用移動相溶媒が供給されるように流路が接続されている。希釈液としてＨ2Ｏが設けられ、その容器３２からポンプ３４により供給され、切換えバルブ３６から３８を経てそれぞれの流路２６−１〜２６−ｎに導かれるようになっている。一方、脱離用移動相溶媒としてアセトニトリル（ＡＣＮ）が設けられ、その容器４０からポンプ４２により供給され、切換えバルブ３６，３８を経てそれぞれの流路２６−１〜２６−ｎに導かれるようになっている。切換えバルブ３６は希釈液Ｈ2Ｏと脱離用移動相溶媒ＡＣＮの何れかを選択して流路２６−１〜２６−ｎに導くとともに、脱離用移動相溶媒を選択したときには希釈液を流路４４を経てドレイン２２へ排出するためのものであり、切換えバルブ３８はその選択された希釈液又は移動相溶媒を何れかの流路２６−１〜２６−ｎに選択的に供給するものである。
【００１８】
次に、比較例の動作について説明する。
ポンプ６，８により高圧グラジエントによる移動相の供給を行ない、混合器１０を経てカラム１４に移動相を供給する。切換えバルブ２０は検出器を経た溶出液をバルブ２４側に導くように設定されており、切換えバルブ３６は希釈液を導くように設定されており、ポンプ３４により容器３２から希釈液が供給されている。希釈液の流量は検出器１６を経て送られてくる溶出液の流量に比べて、例えばその１０倍というように分画成分に合わせて任意に設定することができる。切換えバルブ２４は溶出液を流路２６-１に導き、切換えバルブ３８は希釈液を流路２６-１に導くように設定されている。ポンプ４２は作動していない。
【００１９】
この状態で、インジェクタ１２からオートサンプラにより試料が注入されると、移動相によりカラム１４に導かれて分離が行なわれる。カラム１４からの溶出液は検出器１６又は質量分析計１８の何れか又は両方によりピーク検出が行なわれる。
【００２０】
捕集しようとする所望成分のピークが検出器１６又は質量分析計１８で検出されたとき、所定の遅れ時間の後、切換えバルブ２４と３８が同じトラップカラム２８の流路２６−２〜２６−ｎの何れかを選択するように切り換えられる。これにより、その成分が希釈液で希釈されながら選択された流路２６−２〜２６−ｎのトラップカラム２８に捕捉されていく。その分画成分のピークが終了すると、所定の遅れ時間の後に切換えバルブ２４と３８がトレイン用の流路２６−１側に戻される。
【００２１】
その後、２番目、3番目の分画成分のピークが検出される毎に切換えバルブ２４と３８が切り換えられてそれぞれ別々のトラップカラム２８の流路２６−２〜２６−ｎに導かれ、各分画成分の捕集が繰り返されていく。
【００２２】
分取分析を終了すると、切換えバルブ２０が切り換えられてトラップカラム２８がフラクションコレクタ３０に接続され、検出器１６の下流の流路がドレイン２２側に接続される。切換えバルブ３６も切り換えられて脱離用移動相溶媒ＡＣＮの流路がトラップカラム２８に接続され、ポンプ４２が作動してその脱離用移動相溶媒が送液される。希釈液３２は切換えバルブ３６から流路４４を経てドレイン２２に排出される。
【００２３】
切換えバルブ３８により脱離用移動相溶媒が順次所定のトラップカラム２８の流路２６−２〜２６−ｎに切り換えて送液されることにより、それぞれの流路２６−２〜２６−ｎのトラップカラム２８に捕捉されていた分画成分が脱離して、フラクションコレクタ３０により別々の捕集容器に捕集されていく。トラップカラム２８に捕捉された成分を溶出させる時間は僅かなものであるので、高速液体クロマトグラフが次の分析のためにコンディショニング状態にある間に全ての捕捉成分を採取することができる。
【００２４】
図２は分離された成分を検出する手段として検出器１６だけを備え、質量分析計を備えていない場合の実施例である。質量分析計を設けないことにより、検出器１６からの溶出液の一定割合をスプリッタで質量分析計に導く必要がなくなるので、スプリッタによる分流で分流比を常に一定に保つために図１のように全ての流路２６−１〜２６−ｎにトラップカラム２８を配置する必要はなく、図２のようにドレイン用の流路２６−１は配管だけですむようになり、流路構成を簡略化することができる。
【００２５】
容器３２の希釈液と容器４０の脱離用移動相溶媒は共通の送液ポンプ３４により送液するようにすることができる。送液ポンプ３４につながる希釈液と脱離用移動相溶媒のそれぞれの流路には、送液を選択する開閉弁４６，４８が設けられている。
【００２６】
この実施例において分画成分を希釈液で希釈しながら各トラップ２８に捕捉する動作、及び各トラップ２８に捕捉された分画成分を脱離用移動相溶媒で脱離させて溶出させ、フラクションコレクタ３０により捕集する動作は、基本的には図１の比較例と同じである。異なるのは、図１の切換えバルブ３６の切換え動作に替わって開閉弁４６，４８の開閉を切り換えることになる点だけである。
【００２７】
図２の実施例のように、希釈液と脱離用移動相溶媒を同一のポンプで供給する場合、分画成分の析出を抑えるために、希釈液の有機溶媒濃度を脱離用移動相溶媒の添加により自由に調整することができる。
【００２８】
【発明の効果】
本発明では、分離カラムの下流に複数のトラップカラムを互いに並列に接続し、所望の分画成分を順次それぞれのトラップカラムに導いて歩測するようにしたので、トラップカラムの数だけの成分を捕捉することができる。
また、分画成分をトラップカラムに導く際、希釈液により希釈しながらトラップカラムに捕捉させるようにしたので、分離用の移動相溶媒のみでトラップカラムに捕捉させる場合に比べて捕捉させやすくなり、回収率が向上する。その際、希釈液に脱離用移動相を混入できるようにしたので、希釈液の有機溶媒濃度を脱離用移動相溶媒の添加により自由に調整することができて、分画成分の析出を抑えることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 比較例の分取液体クロマトグラフを示す流路図である。
【図２】 他の実施例の分取液体クロマトグラフを示す流路図である。
【符号の説明】
２，４ 移動相容器
６，８ 送液ポンプ
１０ 混合器
１２ インジェクタ
１４ 分離カラム
１６ 検出器
１８ 質量分析計
２０，２４，３６，３８ 切換えバルブ
２６−１〜２６−ｎ 流路
２８ トラップカラム
３２ 希釈液用容器
３４，４２ ポンプ
４０ 脱離用移動相溶媒用容器
４６，４８ 開閉弁[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a preparative liquid chromatograph for separating fraction components separated by a separation column and detected by a detector.
[0002]
[Prior art]
In order to fractionate and extract several desired components from a sample containing a plurality of components, a liquid chromatograph such as a high performance liquid chromatograph is used to separate and elute each component by a separation column.
[0003]
In the off-line method, components eluted from the separation column are collected by a fraction collector together with the mobile phase. Since the components collected by the fraction collector are collected together with the mobile phase solvent, the mobile phase solvent must be removed in order to concentrate the collected components. For this reason, the fractionated components are dried and concentrated by nitrogen purging by blowing nitrogen into the collection solution containing the sample components and mobile phase solvent, or by evaporating the mobile phase solvent by heating. are doing.
[0004]
In the on-line fractionation method, a trap column is provided downstream of the separation column, the desired components eluted from the separation column are concentrated by capturing in the trap column, and then another solvent is passed through the trap column. The captured fraction components are eluted.
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
When the fraction component is concentrated and collected offline, if the mobile phase solvent collected together with the fraction component contains a component that does not easily evaporate, it takes a long time to evaporate the solvent. In addition, when the desired fraction component is a substance that is easily decomposed, there is a possibility that it is decomposed by heat when the solvent is heated to volatilize it.
[0006]
If processing is performed online using a trap column, fraction components can be collected in a short time, and decomposition of the fraction components can be suppressed. However, since only one trap column has been used so far, only one component can be captured. In the fraction component trapping operation, the fraction component eluted from the separation column is directly introduced to the trap column together with the mobile phase solvent. Therefore, if the fraction component is difficult to trap depending on the mobile phase solvent, it is recovered. There arises a problem that the rate decreases.
[0007]
An object of the present invention is to increase the recovery rate by increasing the number of fraction components that can be collected in online fractionation using a trap column.
[0008]
[Means for Solving the Problems]
In the present invention, in order to fractionate the fraction components separated by the separation column and detected by the detector, a plurality of trap columns connected in parallel to each other via the channel selection means downstream of the separation column, and the trap A diluent supply channel that is connected to the inlet channel of the column and supplies a diluent for diluting the eluate from the separation column, and a desorption that has the property of desorbing the fraction components captured by the trap column from the trap column. A desorption mobile phase supply channel for individually supplying the desorption mobile phase to the trap column is provided, and the diluting solution supply channel can mix the desorption mobile phase.
[0009]
By connecting a plurality of trap columns in parallel to each other, it is possible to collect as many components as the number of trap columns.
When the fraction components are introduced to the trap column, they are captured by the trap column while being diluted with a diluent, making it easier to capture and improving the recovery rate compared to capturing the trap column using only the mobile phase solvent for separation. To do. At that time, the concentration of the organic solvent in the diluent can be freely adjusted by mixing the mobile phase for desorption into the diluent.
[0010]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The channel selection means is a switching valve or other appropriate means for selecting a channel.
As the detector, an ultraviolet-visible absorptiometer, a fluorimeter, a refractometer, an electrochemical detector, an electrical conductivity detector, a mass spectrometer, etc. that are generally used in liquid chromatographs can be used. .
[0011]
The diluent is selected to have a characteristic that facilitates the capture of the fraction components by the trap column by replacing the mobile phase solvent of the eluate.
In order to collect the fraction components once trapped in the trap column and then desorbed from the trap column in the downstream of the trap column, it is preferable to include a collection means such as a fraction collector. The mobile phase solvent used to desorb the fraction components from the trap column has a wider range of choices than the mobile phase solvent used to separate the sample with the separation column, so it was collected in a collection container. When concentrating the fraction components, a solvent that can be easily evaporated can be selected.
[0012]
When the eluate from the separation column is detected by the detector and the desired fractional component is eluted, the time required for the component to reach the trap column from the detector is determined in advance, The flow path selection means is operated so as to lead to the trap column. In order to desorb and elute the components captured by the trap column from the trap column, a desorption mobile phase solvent is supplied to the trap column. The component desorbed from the trap column can be supplied online as a sample of another analyzer, or can be collected in each collection container using means such as a fraction collector. .
[0013]
【Example】
FIG. 1 shows a comparative example. Here, a detector having an LC / MS configuration in which a mass spectrometer is connected in addition to a UV-visible absorptiometer detector is shown. A high-pressure gradient high-performance liquid chromatograph is used to separate sample components.
[0014]
H 2 O and ACN (acetonitrile) are prepared as mobile phase solvents. In order to supply the mobile phase from each of the mobile phase containers 2 and 4, liquid feed pumps 6 and 8 are provided to constitute a mobile phase supply flow path using a high-pressure gradient. The liquid feed pumps 6 and 8 are controlled so as to have a flow rate set with time, and the supplied solvent is mixed by the mixer 10 and supplied to the separation column 14 as a mobile phase having a predetermined composition.
[0015]
An injector 12 for supplying a sample is provided in a flow path between the mixer 10 and the column 14. A sample can be automatically injected into the injector 12 by an autosampler.
An ultraviolet-visible absorptiometer is provided as a detector 16 downstream of the column 14. The eluent flow path that has passed through the detector 16 is connected to the switching valve 20 and also led to the mass spectrometer 18. Most of the eluate that has passed through the detector 16 is guided to the valve 20 side, but a part of the eluate is separated by a splitter and guided to the mass spectrometer 18, and either or both of the detector 16 and the mass spectrometer 18 are connected. It can be used to detect fraction components. By providing two types of detectors, both qualitative and quantitative can be performed.
[0016]
The valve 20 guides the eluate flowing through the detector 16 by switching to the trap column side or the drain 22 side. A plurality of flow paths are connected in parallel to each other through the switching valve 24 on the trap column side, and a trap column 28 is provided in each of the flow paths 26-1 to 26-n. These flow paths 26-1 to 26-n merge into one flow path, and are switched to the drain 22 or the fraction collector 30 through the switching valve 20 and led again. Although the flow path 26-1 is a drain flow path, the same trap as the trap flow paths 26-2 to 26-n is provided in the flow path 26-1 in order to always keep the diversion ratio constant by the diversion by the splitter. A column 28 is provided.
[0017]
Channels are connected to the channels 26-1 to 26-n so that a mobile phase solvent for desorption for desorbing and eluting the components captured by the diluent or the trap column 28 is supplied. Yes. H 2 O is provided as a diluent, supplied from the container 32 by the pump 34, and led to the respective flow paths 26-1 to 26-n via the switching valves 36 to 38. On the other hand, acetonitrile (ACN) is provided as a mobile phase solvent for desorption, supplied from the container 40 by the pump 42, and led to the respective flow paths 26-1 to 26-n via the switching valves 36 and 38. It has become. The switching valve 36 selects either the diluent H 2 O or the desorption mobile phase solvent ACN and guides it to the flow paths 26-1 to 26-n. For discharging to the drain 22 through the flow path 44, the switching valve 38 selectively supplies the selected diluent or mobile phase solvent to any of the flow paths 26-1 to 26-n. It is.
[0018]
Next, the operation of the comparative example will be described.
The mobile phase is supplied by a high pressure gradient by the pumps 6 and 8, and the mobile phase is supplied to the column 14 through the mixer 10. The switching valve 20 is set so as to guide the eluate that has passed through the detector to the valve 24 side, and the switching valve 36 is set so as to guide the diluent, and the diluent 34 is supplied from the container 32 by the pump 34. Yes. The flow rate of the diluent can be arbitrarily set in accordance with the fractional component, for example, 10 times the flow rate of the eluate sent through the detector 16. The switching valve 24 is set to guide the eluate to the flow path 26-1, and the switching valve 38 is set to guide the diluted liquid to the flow path 26-1. Pump 42 is not operating.
[0019]
In this state, when a sample is injected from the injector 12 by the autosampler, separation is performed by being guided to the column 14 by the mobile phase. The eluate from the column 14 is subjected to peak detection by either or both of the detector 16 and the mass spectrometer 18.
[0020]
When the peak of the desired component to be collected is detected by the detector 16 or the mass spectrometer 18, after a predetermined delay time, the switching valves 24 and 38 are connected to the flow paths 26-2 to 26-of the same trap column 28. It is switched to select any one of n. Thereby, the component is captured by the trap column 28 of the selected flow paths 26-2 to 26-n while being diluted with the diluent. When the peak of the fractional component ends, the switching valves 24 and 38 are returned to the train channel 26-1 side after a predetermined delay time.
[0021]
Thereafter, each time the second and third fractional component peaks are detected, the switching valves 24 and 38 are switched and led to the flow paths 26-2 to 26-n of the separate trap columns 28, respectively. The collection of painting components is repeated.
[0022]
When the preparative analysis is completed, the switching valve 20 is switched, the trap column 28 is connected to the fraction collector 30, and the flow path downstream of the detector 16 is connected to the drain 22 side. The switching valve 36 is also switched so that the flow path of the desorption mobile phase solvent ACN is connected to the trap column 28, and the pump 42 is operated to feed the desorption mobile phase solvent. The diluent 32 is discharged from the switching valve 36 to the drain 22 through the flow path 44.
[0023]
The mobile phase solvent for desorption is sequentially switched to the flow paths 26-2 to 26-n of the predetermined trap column 28 by the switching valve 38, and sent to the traps of the respective flow paths 26-2 to 26-n. The fraction components captured by the column 28 are desorbed and collected by the fraction collector 30 in separate collection containers. Since the time to elute the components captured by the trap column 28 is short, all captured components can be collected while the high performance liquid chromatograph is in a conditioned state for the next analysis.
[0024]
FIG. 2 shows an embodiment in which only the detector 16 is provided as means for detecting separated components and no mass spectrometer is provided. By not providing a mass spectrometer, it is not necessary to guide a fixed proportion of the eluate from the detector 16 to the mass spectrometer with a splitter. Therefore, in order to keep the diversion ratio constant by the diversion by the splitter, as shown in FIG. It is not necessary to arrange the trap column 28 in all the flow paths 26-1 to 26-n, and the flow path 26-1 for the drain is only a pipe as shown in FIG. Can do.
[0025]
The diluting liquid in the container 32 and the mobile phase solvent for desorption in the container 40 can be sent by a common liquid feeding pump 34. Open / close valves 46 and 48 for selecting the liquid feed are provided in the respective flow paths of the diluting liquid connected to the liquid feed pump 34 and the mobile phase solvent for desorption.
[0026]
In this embodiment, the fraction component is captured in each trap 28 while being diluted with a diluent, and the fraction component captured in each trap 28 is desorbed and eluted with a mobile phase solvent for desorption, and the fraction collector The operation of collecting by 30 is basically the same as the comparative example of FIG. The only difference is that the opening / closing of the on-off valves 46, 48 is switched in place of the switching operation of the switching valve 36 of FIG.
[0027]
In the case where the diluent and the mobile phase solvent for desorption are supplied by the same pump as in the embodiment of FIG. 2, the concentration of the organic solvent in the dilute solution is set to the mobile phase solvent for desorption in order to suppress the precipitation of fraction components. It can be freely adjusted by adding.
[0028]
【The invention's effect】
In the present invention, a plurality of trap columns are connected in parallel to the downstream of the separation column, and the desired fraction components are sequentially guided to the respective trap columns for measurement, so that only the number of trap columns is captured. can do.
In addition, when the fraction component is introduced to the trap column, it is trapped on the trap column while diluting with a diluent, making it easier to capture than when trapping on the trap column using only the mobile phase solvent for separation. Recovery rate is improved. At that time, since the mobile phase for desorption can be mixed into the diluted solution, the organic solvent concentration of the diluted solution can be freely adjusted by adding the mobile phase solvent for desorption, and the fraction components can be precipitated. Can be suppressed.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a flow chart showing a preparative liquid chromatograph of a comparative example.
FIG. 2 is a flow chart showing a preparative liquid chromatograph of another embodiment.
[Explanation of symbols]
2,4 Mobile phase vessel 6,8 Liquid feed pump 10 Mixer 12 Injector 14 Separation column 16 Detector 18 Mass spectrometer 20, 24, 36, 38 Switching valve 26-1 to 26-n Flow path 28 Trap column 32 Dilution Liquid container 34, 42 Pump 40 Desorption mobile phase solvent container 46, 48 On-off valve

Claims (2)

分離カラムで分離され検出器で検出された分画成分を分取する分取液体クロマトグラフにおいて、
前記分離カラムの下流に流路選択手段を介して互いに並列に接続された複数のトラップカラムと、
前記トラップカラムの入口側流路に接続され前記分離カラムからの溶出液を希釈する希釈液を供給する希釈液供給流路と、
前記トラップカラムに捕捉された分画成分をトラップカラムから脱離させる特性をもつ脱離用移動相を前記トラップカラムに個別に供給する脱離用移動相供給流路とを備え、
前記希釈液供給流路は前記脱離用移動相を混入できるようになっていることを特徴とする分取液体クロマトグラフ。In a preparative liquid chromatograph that separates fraction components separated by a separation column and detected by a detector,
A plurality of trap columns connected in parallel to each other via a flow path selection means downstream of the separation column;
A diluent supply channel that is connected to the inlet-side channel of the trap column and supplies a diluent for diluting the eluate from the separation column;
A desorption mobile phase supply flow path for individually supplying a desorption mobile phase having a characteristic of desorbing the fraction components captured by the trap column from the trap column;
The preparative liquid chromatograph, wherein the diluting liquid supply channel can be mixed with the desorption mobile phase. 前記トラップカラムの下流には、トラップカラムから脱離してきた分画成分をそれぞれの捕集容器に捕集する手段を備えた請求項１に記載の分取液体クロマトグラフ。  2. The preparative liquid chromatograph according to claim 1, further comprising means for collecting a fraction component desorbed from the trap column in a respective collection container downstream of the trap column.
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