JP3633008B2 - Thienotriazolodiazepine compounds - Google Patents

Description

【０００５】
これらの接着分子の中で、特にＩＣＡＭ−１およびＬＦＡ−１は細胞浸潤のみならず、リンパ球間の接着およびその活性化にも深く関与していることが明らかとなっている（たとえば、マクロファージ上のＩＣＡＭ−１にＴリンパ球上のＬＦＡ−１が結合することによってＴリンパ球が活性化される）。したがって、ＩＣＡＭ−１とＬＦＡ−１の結合を阻害する物質は、広義の免疫抑制作用を有することも期待できる。
【０００６】
疾患との関連では、炎症性皮膚炎（接触性過敏症、光線過敏症など）および慢性関節リウマチなどにおいて、炎症部位でのＩＣＡＭ−１ならびにＥ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ発現の亢進が報告されている他、喘息においてもＩＣＡＭ−１、Ｍａｃ−１などの関与が示唆されている。また、臓器移植後の拒絶反応においてもＩＣＡＭ−１などを介した細胞接着が重要な役割を果たしていることが報告されている。さらに、癌転移においても接着分子が関与していることが示されている。
【０００７】
実験動物においても、種々の炎症モデル（遅延型過敏症、自己免疫性腎炎モデルなど）で接着分子の発現が亢進していること、ならびに抗ＩＣＡＭ−１抗体、抗ＬＦＡ−１抗体が炎症反応（アジュバント関節炎、コラーゲン関節炎など）を抑制することが報告されている。また、サル喘息モデルでの好酸球活性化における接着分子の役割も明らかにされている。さらに、マウス異所性心移植モデルにおいても抗ＬＦＡ−１および抗ＩＣＡＭ−１抗体の有効性が報告されており、ヒトの場合と同様に、移植片拒絶における接着分子の重要性が示唆されている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
種々の炎症性疾患ならびにアレルギー性疾患に対する治療薬としては、様々なステロイド剤、非ステロイド性抗炎症剤および炎症・アレルギー関連メディエーター遊離抑制剤などが使用されている。これらの薬剤のうち、ステロイド剤ではしばしば重篤な副作用が発現すること、また他の薬剤においては必ずしも十分な治療効果が得られないことなどが問題となっていた。
【０００９】
一方、近年になって、いくつかの炎症性疾患およびアレルギー性疾患の発症・進行に対し種々の細胞接着分子が深く関与していることが明らかになってきており、細胞接着阻害作用を有する化合物が優れた抗炎症薬または抗アレルギー薬となり得ることが期待されている。たとえば、プロシーティングス・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス・ユー・エス・エー（Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ．） 、第８８巻（１９９１年）３５５〜３５９頁には、Ｎ−（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）アミノ酸類が白血球接着を阻害することにより種々の動物炎症モデルにおける反応を抑制することが、また、アメリカン・フェデレーション・フォー・クリニカル・リサーチ・アニュアル・ミーティング（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｆｅｄｅｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ， １９９１年５月６日）の抄録には同系化合物が白血球上の接着分子（ＣＤ１８など）発現を抑制することにより血管内皮細胞への白血球接着が阻害されることなどが記載されている。
【００１０】
しかし、上記文献をを含む種々の公知文献に記載された化合物では未だに十分な細胞接着阻害作用を得ることができず、さらに強力な阻害剤の開発が望まれている。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、血管内皮細胞への白血球接着を強力に阻害する化合物の探索を目的として、ヒトさい帯静脈由来血管内皮細胞（ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｖｅｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ，ＨＵＶＥＣ）とヒト白血病細胞株を用いた細胞接着のアッセイ系を確立し、上記課題を解決するために鋭意研究を行ったところ、一般式（Ｉ） で示されるチエノトリアゾロジアゼピン化合物が強い白血球接着阻害作用を有していることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１２】
すなわち、本発明は以下の通りである。
（１）一般式
【００１３】
【化３】

【００１４】
〔式中、Ａｒはフェニル、ピリジル、チエニル、置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数１〜６個のアルコキシ、シアノ、アミノおよびトリハロメチルから選ばれる１〜３個を有するフェニル、または置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキルおよび炭素数１〜６個のアルコキシから選ばれる１〜３個を有するピリジルまたはチエニルを示す。
【００１５】
Ｒ^１ ，Ｒ^２ は同一または異なって水素、ハロゲン、炭素数１〜６個のアルキルまたは式
−（ＣＨ_２ ）ｍ−ＣＯＮ（Ｒ^６ ）（Ｒ^７ ）
（式中、ｍは１〜６の整数を示す。Ｒ^６ ，Ｒ^７ は同一または異なって、水素、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数２〜７個のアルカノイルまたはシクロアルキルを示すか、またはＲ^６ ，Ｒ^７ は結合して隣接する窒素原子とともに環状アミンを形成する。）により表される基を示すか、またはＲ^１ ，Ｒ^２ は互いに結合して炭素数５〜７個の環を形成するかもしくは環中にＮ（Ｒ^８ ）（Ｒ^８ は炭素数２〜７個のアルカノイルまたはシクロアルキルカルボニルを示す。）を有する５〜７員環を形成する基を示す。
【００１６】
Ｒ³ は水素、ハロゲンまたは炭素数１〜６個のアルキルを示す。Ｒ⁴ ，Ｒ⁵ は一方が水素を示し、他方が式
【００１７】
【化４】

【００１８】
（式中、ｎは０または１〜６の整数を示す。Ｙは酸素原子または硫黄原子を示す。Ｒ⁹ は炭素数１〜６個のアルキルを示す。Ｒ¹⁰，Ｒ¹¹は同一または異なって水素、炭素数１〜６個のアルキル、フェニル、ヘテロアリール、置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数１〜６個のアルコキシ、シアノ、アミノおよびトリハロメチルから選ばれる１〜３個を有するフェニルまたは置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキルおよび炭素数１〜６個のアルコキシから選ばれる１〜３個を有するヘテロアリールを示す。Ｒ¹²は水素または炭素数１〜６個のアルキルを示す。Ｘはハロゲンを示す。Ｒ¹³は水素、炭素数１〜６個のアルキル、アラルキルまたは置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数１〜６個のアルコキシ、シアノ、アミノおよびトリハロメチルから選ばれる１〜３個を有するアラルキルを示す。）により表される基を示すか、Ｒ ⁴ ，Ｒ ⁵ は共に前記（１）により表される基を示すか、またはＲ⁴ ，Ｒ⁵ は互いに結合し、環中にヘテロ原子として酸素原子、硫黄原子またはＮ（Ｒ¹⁴）（Ｒ¹⁴は水素、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数１〜６個のヒドロキシアルキル、フェニルまたは置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数１〜６個のアルコキシ、シアノ、アミノおよびトリハロメチルから選ばれる１〜３個を有するフェニルを示す。）を含んでいてもよく、さらに置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキル、炭素数１〜６個のアルコキシ、水酸基、カルボキシル、アルコキシカルボニル、シアノ、アミノまたはモノまたはジ置換アミノから選ばれる１〜３個を有していてもよい窒素含有環を形成する基を示す。〕により表されるチエノトリアゾロジアゼピン化合物またはその医薬上許容される塩。
【００１９】
本明細書において、ピリジルとは２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジルを示す。チエニルとは２−チエニル、３−チエニルを示す。ハロゲンとは塩素、臭素、フッ素、ヨウ素を示す。炭素数１〜６個のアルキルとはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第３級ブチル、ペンチル、第３級ペンチル、１−メチルブチル、ヘキシル、１−メチルペンチルなどを示し、炭素数１〜４個のアルキルが好ましく、メチルが特に好ましい。炭素数１〜６個のアルコキシとはメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、第３級ブトキシ、ペンチルオキシ、第３級ペンチルオキシ、ヘキシルオキシなどを示し、炭素数１〜４個のアルコキシが好ましく、メトキシが特に好ましい。トリハロメチルとはトリフルオロメチル、トリクロロメチル、トリブロモメチルなどを示し、トリフルオロメチルが好ましい。炭素数２〜７個のアルカノイルとはアセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、ヘプタノイルなどを示し、炭素数２〜５個のアルカノイルが好ましく、アセチル、プロピオニルが特に好ましい。シクロアルキルとはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどを示し、シクロプロピル、シクロヘキシルが好ましい。シクロアルキルカルボニルとはシクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニル、シクロヘキシルカルボニル、シクロヘプチルカルボニルなどを示し、シクロプロピルカルボニルが好ましい。ヘテロアリールとはピリジル（２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル）、チエニル（２−チエニル、３−チエニル）、フリル（２−フリル、３−フリル）などを示す。アラルキルとはベンジル、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、４−フェニルブチルなどを示し、ベンジルが好ましい。炭素数１〜６個のヒドロキシアルキルとはヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、１−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、５−ヒドロキシペンチル、６−ヒドロキシヘキシルなどを示し、炭素数１〜４個のヒドロキシアルキルが好ましく、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチルが特に好ましい。アルコキシカルボニルとはメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、第３級ブトキシカルボニルなどを示し、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルが好ましい。モノまたはジ置換アミノとはメチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、プロピルアミノ、ジプロピルアミノ、ブチルアミノ、ジブチルアミノなどを示し、メチルアミノ、ジメチルアミノが好ましい。
【００２０】
Ｒ^６ とＲ^７ が結合して隣接する窒素原子とともに形成する環状アミンとは１−ピロリジニル、ピペリジノ、モルホリノ、チオモルホリノまたは１−ピペラジニルを示し、ピペリジノ、モルホリノが好ましい。Ｒ^１ ，Ｒ^２ が互いに結合して形成する炭素数５〜７個の環または環中にＮ（Ｒ^８ ）（Ｒ^８ は前記と同義）を有する５〜７員環とはシクロペンテン環、ピロリン環、ピラゾリン環、シクロペンタジエン環、シクロヘキセン環、テトラヒドロピリジン環、シクロヘキサジエン環、ベンゼン環、シクロヘプテン環、シクロヘプタジエン環、シクロヘプタトリエン環などを示し、シクロヘキセン環、テトラヒドロピリジン環が好ましい。Ｒ^４ ，Ｒ^５ が互いに結合して形成する環中にヘテロ原子として酸素原子、硫黄原子またはＮ（Ｒ^１４）（Ｒ^１４は前記と同義）を含んでいてもよい窒素含有環とは１−ピロリジニル、ピペリジノ、モルホリノ、チオモルホリノ、４−Ｒ^１４−１−ピペラジニル、１−ピラゾリルなどを示し、これらは置換基としてハロゲン、炭素数１〜６個のアルキル（前記の通り）、炭素数１〜６個のアルコキシ（前記の通り）、水酸基、カルボキシル、アルコキシカルボニル（前記の通り）、シアノ、アミノまたはモノまたはジ置換アミノ（前記の通り）から選ばれる１〜３個を有していてもよい。
【００２１】
Ａｒの態様としてはフェニル、２−クロロフェニル、４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、２−チエニルなどが挙げられ、フェニル、４−クロロフェニル、２−クロロフェニルが好ましい。
【００２２】
Ｒ^１ の態様としては水素、メチルが、Ｒ^２ の態様としてはハロゲン、メチル、エチル、ヘキシル、２−（Ｎ−アセチルカルバモイル）エチル、２−（Ｎ−第３級ブチルカルバモイル）エチル、２−（Ｎ−シクロプロピルカルバモイル）エチル、２−モルホリノカルボニル、２−ピペリジノカルボニルエチルが挙げられ、Ｒ^１ としては水素、メチル、Ｒ^２ としてはメチル、２−モルホリノカルボニルエチルが好ましい。また、Ｒ^１ とＲ^２ が結合して形成される環としては、シクロヘキシル環またはＮ位にシクロプロピルカルボニルが置換したテトラヒドロピリジン環が好ましい。
【００２３】
Ｒ^３ の態様としてはメチル、ブチル、ヘキシルなどが挙げられ、メチルが好ましい。
【００２４】
Ｒ^４ ，Ｒ^５ の態様としてはＲ^４ が水素を示し、Ｒ^５ が前記（１）〜（６）の基であるか、Ｒ^４ ，Ｒ^５ が共に前記（１）であるものが挙げられ、Ｒ^４ が水素を示し、Ｒ^５ が前記（１）を示し、ｎが２、Ｙが酸素原子であるものが好ましい。または、Ｒ^４ ，Ｒ^５ が結合して形成される環の態様としてはモルホリノ、ピペリジノ、４−ヒドロキシピペリジノ、４−ジメチルアミノピペリジノ、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル、４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル、２−カルボキシ−１−ピロリジニル、２−エトキシカルボニル−１−ピロリジニルなどが挙げられ、モノホリノ、ピペリジノ、４−ヒドロキシピペリジノが好ましい。
【００２５】
一般式（Ｉ）の化合物の医薬上許容されうる塩としては無機酸または有機酸との酸付加塩、および無機塩基、有機塩基またはアミノ酸との塩があげられ、本発明の目的からするとそれら塩は実質的に無毒性のものが望ましい。また、水和物（１／２水和物、１水和物、３／２水和物等）やその他の溶媒和物も包含される。さらに、一般式（Ｉ）の化合物は少なくとも１個のキラルな炭素原子を有していることから、それに基づくラセミ体、光学活性体またはジアステレオマーなどはすべて本発明に包含されるものである。
【００２６】
一般式（Ｉ）の化合物は、たとえば下記化５に示す方法によって製造することができる。
【００２７】
【化５】

【００２８】
方法１の反応は、一般式（ＩＩ）の化合物と１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を反応を阻害しない適当な溶媒（テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなど）中、−２０℃から溶媒の沸点、好ましくは室温で２時間から５時間反応させてカルバモイルイミダゾール誘導体とし、次いで一般式（ＩＩＩ）のアミンを−２０℃から溶媒の沸点、好ましくは室温で反応させることにより進行する。
【００２９】
方法２の反応は、一般式（ＩＩ）の化合物とトリホスゲンを適当な溶媒（トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、４−ジメチルアミノピリジンなど）の存在下、本反応を阻害しない適当な溶媒（テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなど）中、−２０℃から溶媒の沸点で１時間から２４時間反応させて、イソシアネート誘導体とし、次いで一般式（ＩＩＩ）のアミンを−２０℃から溶媒の沸点で１時間から２４時間反応させることにより進行する。
【００３０】
方法３の反応は、一般式（ＩＩ）の化合物と４−ニトロフェニルクロロホルメートを適当な塩基（トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、４−ジメチルアミノピリジンなど）の存在下、本反応を阻害しない適当な溶媒（テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなど）中、−２０℃から溶媒の沸点で１時間から２４時間反応させて活性カルバメート体とし、次いで一般式（ＩＩＩ）のアミンを−２０℃から溶媒の沸点で１時間から２４時間反応させることにより進行する。
【００３１】
このようにして得られた一般式（Ｉ）の化合物は再結晶、カラムクロマトグラフィーなどのそれ自体公知の方法により、反応混合物から分離、精製することができる。一般式（Ｉ）の化合物は常法により無機酸（塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など）、有機酸（酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスコルビン酸など）、無機塩基（水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化亜鉛、水酸化アンモニウムなど）、有機塩基（メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリスヒドロキシメチルアミノメタン、キニーネ、グアニジン、シンコニンなど）またはアミノ酸（リジン、オルニチン、アルギニン、アラニンなど）と処理することにより医薬上許容される塩とすることができる。
【００３２】
本発明化合物中、キラルな炭素原子を有する場合には、通常ラセミ体として得られる。ラセミ体は常法により光学異性体に分割することができる。そのような光学異性体は光学活性な出発物質を使用することによっても製造することができる。個々のジアステレオマーは分別結晶またはクロマトグラフィーによって精製できる。
【００３３】
本発明の一般式（Ｉ）に包含される化合物を例示すると、以下の表の通りである。表中、Ｃｌは塩素を、Ｅｔはエチルを、Ｍｅはメチルを、ＭｅＯはメトキシを、Ｐｈはフェニルを示す。
【００３４】
【表２】

【００３５】
【表３】

【００３６】
【表４】

【００３７】
【表５】

【００３８】
【作用】
実験例１：ヒト組織球性白血病細胞株Ｕ９３７のＣＤ１１ｂ発現に対する作用
白血球系細胞の表面に発現する接着分子の一つであるＭａｃ−１のα鎖を構成するＣＤ１１ｂ抗原の発現に対する作用を検討した。Ｕ９３７細胞を、牛胎児血清を２０％含むＲＰＭＩ１６４０培地に浮遊させた後、フォルボール−１２，１３−ジブチレイト（ＰＤＢ、１０ｎｇ／ｍｌ）および試験化合物とともに９６ウェル濾過用プレートに添加した（３００００細胞／ウェル）。３７℃、５％二酸化炭素存在下で３日間培養した後、ＲＰＭＩ１６４０培地にて１回洗浄し、ラット抗ヒトＣＤ１１ｂモノクローナル抗体（２μｇ／ｍｌ）を添加した。氷冷下で１時間放置した後、２回洗浄し、パーオキシダーゼ標識抗ラットイムノグロブリン抗体（１μｇ／ｍｌ）を添加した。氷冷下で１時間放置した後、３回洗浄し、パーオキシダーゼ用発色基質（オルトフェニレンジアミン）を添加した。室温で１５分間放置した後、９６ウェルプレート用吸光度計を用いて４９０ｎｍの吸光度を測定し、ＣＤ１１ｂ抗原発現の指標とした。
【００３９】
ＰＤＢ添加時の発現量を１００％、非添加時の発現量を０％として算出した５０％抑制濃度（ＩＣ_５０値、μＭ）を以下の表６に示す。
【００４０】

【００４１】
上記の表６のように、化合物Ａ，ＢおよびＣはＵ９３７細胞のＣＤ１１ｂ発現を強力に抑制した。なお、化合物Ａは実施例１の化合物、化合物Ｂは実施例５の化合物、化合物Ｃは実施例１３の化合物を示す。
【００４２】
実験例２：オキサゾロン誘発マウス耳浮腫に対する作用
体毛を除去したマウス腹部にオキサゾロン溶液（アセトン中５０ｍｇ／ｍｌ）を５０μｌ塗布することによって感作した後、７日目にマウス右耳の表裏に５μｌずつオキサゾロンを塗布した。２４時間後に左右の耳を直径６ｍｍのパンチャーを用いてくり抜き、その重量を直示天秤にて測定した。処置耳（右耳）の重量から未処置耳（左耳）の重量を差し引いた値を浮腫の指標とした。試験化合物Ａは０．５％メチルセルロース溶液に懸濁し、感作後０〜８日目に経口投与した（０．１ｍｌ／体重１０ｇ）。結果を表７に示す。
【００４３】

【００４４】
上記の表７のように、化合物Ａはマウス耳浮腫を用量依存的に抑制し、ｉｎ ｖｉｖｏ においても細胞接着を阻害することによって炎症部位への白血球浸潤を抑制することが示唆された。
【００４５】
本発明の医薬は、血管内皮細胞への白血球接着反応がその発症・進行に関与する種々の炎症性疾患、アレルギー性疾患、自己免疫性疾患、関節リウマチならびに臓器移植時の拒絶反応を予防または治療するために、さらに、腫瘍細胞の転移を予防するために使用される。
【００４６】
本発明の医薬を製するにあたって、一般式（Ｉ）の化合物は治療上有効な量が含有されているのが好ましく、通常０．１〜５０ｍｇ程度でよい。当該医薬はこれら有効成分の他に、医薬上許容されうる担体、賦形剤、希釈剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤などと混合して錠剤、散剤、カプセル剤、注射剤、坐剤、点滴剤などとすることにより経口的または非経口的に安全に患者に投与することができる。投与量は、通常１日当たり成人に対し、経口投与で５〜１００ｍｇ、静脈投与で１〜５０ｍｇ程度である。
【００４７】
【実施例】
以下、原料調製例、実施例、製剤処方例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されものではない。
【００４８】
原料調製例１
炭酸ジエチル１５０ｍｌに４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン１２ｇおよび水素化ナトリウム２．４ｇを加え加熱する。１００℃前後で水素ガスの発泡が始まり、反応液は徐々に紫色を呈してくる。１時間還流した後、２０℃に冷却し、Ｏ−（２，４−ジニトロフェニル）ヒドロキシルアミン８ｇを加え、２時間攪拌する。反応後、氷水にあけ、炭酸ジエチル層を分取し、２回水洗した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。炭酸ジエチルを減圧下に留去して得られた残渣にジイソプロピルエーテルを加え析出する結晶を濾取し、エチル （６−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）カルボキシレート１１ｇを得た。
【００４９】
エタノール２５０ｍｌおよび水８０ｍｌの混合液にエチル （６−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）カルボキシレート１１ｇを溶解し、水酸化バリウム８水和物８．４ｇを加え、室温で２４時間攪拌する。減圧下に溶媒を留去して、水１００ｍｌを加え、１規定塩酸にてｐＨ２に調整し２０分間攪拌した後、炭酸水素ナトリウム水溶液にて中和し、クロロホルムにて２回抽出する。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧下に留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付す。溶媒留去後、得られた残渣をジイソプロピルエーテルから結晶化させ、濾取し、６−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン７ｇを得た。
【００５０】
原料調製例２
原料調製例１と同様にして、２，３，９−トリメチル−４−フェニル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンから６−アミノ−２，３，９−トリメチル−４−フェニル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンを得た。
【００５１】
原料調製例３
原料調製例１と同様にして、４−（２−クロロフェニル）−９−メチル−２−（２−モルホリノカルボニルエチル）−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンから６−アミノ−４−（２−クロロフェニル）−９−メチル−２−（２−モルホリノカルボニルエチル）−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンを得た。
【００５２】
原料調製例４
原料調製例１と同様にして、６−（２−クロロフェニル）−３−シクロプロピルカルボニル−１１−メチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリド〔４’，３’：４，５〕チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンから８−アミノ−５−（２−クロロフェニル）−３−シクロプロピルカルボニル−１１−メチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリド〔４’，３’：４，５〕チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンを得た。
【００５３】
実施例１
クロロホルム４０ｍｌに６−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン６ｇを溶解し、１，１’−カルボニルジイミダゾール４．１ｇを加え室温で２時間攪拌したのち、氷冷下エタノールアミン１．３ｍｌを加え室温で６時間撹拌した。反応液を０．３規定塩酸次いで水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒を留去し得られた残査にジイソプロピルエーテルを加え結晶とし、メタノール−水にて再結晶を行うと、融点２４０〜２４２℃（分解）のＮ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−Ｎ’−（２−ヒドロキシエチル）ウレア３．５ｇを得た。
【００５４】
実施例２
実施例１と同様にして、６−アミノ−２，３，９−トリメチル−４−フェニル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンとエタノールアミンから融点２２７〜２２８℃のＮ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ’−（２，３，９−トリメチル−４−フェニル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）ウレアを得た。
【００５５】
実施例３
実施例１と同様にして、６−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンと４−アミノ−１−ブタノールから融点２２３〜２２６℃のＮ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−Ｎ’−（４−ヒドロキシブチル）ウレアを得た。
【００５６】
実施例４
実施例１と同様にして、６−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピンと６−アミノ−１−ヘキサノールから融点２３７〜２３８℃のＮ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−Ｎ’−（６−ヒドロキシヘキシル）ウレアを得た。
【００５７】
実施例１と同様にして、次の化合物が得られる。
（５） Ｎ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）モルホリン−４−カルボキサミド、融点１６７〜１７０℃
【００５８】
（６） Ｎ−（２，３，９−トリメチル−４−フェニル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）モルホリン−４−カルボキサミド、融点２４７〜２４８℃
【００５９】
（７） エチル Ｎ−（３―（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）ウレイド）アセテート、融点２３３〜２３５℃
【００６０】
（８） Ｎ−（４―（４―クロロフェニル）―２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド、融点２３２〜２３６℃
【００６１】
（９） Ｎ−（２―クロロエチル）―Ｎ’―（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）ウレア、融点２４７〜２５１℃（分解）
【００６２】
（１０） Ｎ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−Ｎ’，Ｎ’−（ビス（２−ヒドロキシエチル））ウレア、融点１７２〜１７５℃
【００６３】
（１１） Ｎ−（４−（２―クロロフェニル）−９−メチル−２―（２―モルホリニルカルボニルエチル）―６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−Ｎ’―（２―ヒドロキシエチル）ウレア、
【００６４】
（１２） Ｎ−（６―（２―クロロフェニル）―３―シクロプロピルカルボニル―１１―メチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリド〔４’，３’：４，５〕チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−８−イル）−Ｎ’−（２−ヒドロキシエチル）ウレア、
【００６５】
（１３） Ｎ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−Ｎ’−（２−ジメチルアミノエチル）ウレア、融点２７２〜２７４℃
【００６６】
（１４） Ｎ−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキサミド、融点２０２〜２０７℃
【００６７】
（１５） Ｎ−（１−ベンジル−４−ピペリジル）−Ｎ’−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ〔３，２−ｆ〕〔１，２，４〕トリアゾロ〔４，３−ａ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−イル）ウレア、融点２４７〜２５０℃
実施例１と同様にして前記の表２〜表５に示す化合物が得られる。
【００６８】
製剤処方例１
実施例１の化合物０．５部、乳糖２５部、結晶セルロース３５部およびコーンスターチ３部とをよく混和したのち、コーンスターチ２部で製した結合剤とよく練合した。この練合物を１６メッシュで篩過し、オーブン中５０℃で乾燥後、２４メッシュで篩過した。ここに得た練合粉体とコーンスターチ８部、結晶セルロース１１部およびタルク９部とをよく混合したのち、圧搾打錠して１錠当たり有効成分０．５ｍｇ含有の錠剤を得る。
【００６９】
製剤処方例２
実施例１の化合物１．０ｍｇと塩化ナトリウム９．０ｍｇを注射用水にて溶解し、濾過して発熱物質を除去し、濾液を無菌下にアンプルに移し、殺菌後、溶融密封することにより有効成分１．０ｍｇ含有注射剤を得る。
【００７０】
【発明の効果】
上記明細書、特に実験例から明らかなように、本発明のチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、白血球上のＣＤ１１ｂ発現を抑制することによって血管内皮細胞への白血球接着を阻害する作用を有しており、またｉｎ ｖｉｖｏ における白血球浸潤をも抑制する。この作用により、本化合物が、細胞接着がその発症・進行に関与する種々の炎症性疾患、アレルギー性疾患、関節リウマチ等に対する治療薬または予防薬として有用であると期待される。また、自己免疫性疾患ならびに臓器移植時の拒絶反応を予防または治療するために、さらに、腫瘍細胞の転移を予防するためにも使用できる。[0001]
[Industrial application fields]
The present invention relates to a novel thienotriazolodiazepine compound having a leukocyte adhesion inhibitory action.
[0002]
[Prior art]
A thienotriazolodiazepine compound having a cell adhesion inhibitory action is known from International Publication No. WO 93/12117. JP-A-2-28181 and JP-A-3-223290 disclose thienodiazepine compounds having an antagonistic action against cholecystokinin (CCK) and gastrin. Furthermore, International Publication No. WO 93/07129 discloses thienotriazolodiazepine compounds used for osteoporosis treatment.
[0003]
In various inflammatory / allergic diseases, infiltration of so-called inflammatory cells (white blood cells in a broad sense) such as polymorphonuclear leukocytes, macrophages and lymphocytes is deeply involved in the pathology. It has long been thought that leukocytes adhere to vascular endothelial cells as a first step in leukocyte infiltration, but the mechanism was unknown. With recent advances in molecular biology, molecules involved in adhesion have been identified one after another, and their functional significance, namely, specific adhesion molecules expressed on vascular endothelial cells and leukocytes that specifically bind to them. It has been clarified that leukocyte adhesion occurs through the adhesion molecules of, followed by leukocyte infiltration into inflamed tissues. The following combinations are considered to be particularly important as molecules involved in leukocyte adhesion to vascular endothelial cells, but the degree of involvement of each adhesion molecule in various inflammatory and allergic diseases is not always clear is not.
[0004]
[Table 1]

[0005]
Among these adhesion molecules, it has been revealed that ICAM-1 and LFA-1 in particular are deeply involved in not only cell infiltration but also adhesion between lymphocytes and activation thereof (for example, macrophages). Tlymphocytes are activated by binding of LFA-1 on T lymphocytes to ICAM-1 above). Therefore, a substance that inhibits the binding of ICAM-1 and LFA-1 can also be expected to have a broad immunosuppressive effect.
[0006]
In relation to the disease, in inflammatory dermatitis (contact hypersensitivity, photosensitivity, etc.) and rheumatoid arthritis, as well as increased expression of ICAM-1 and E-selectin at the site of inflammation, asthma Also suggests involvement of ICAM-1, Mac-1, and the like. It has also been reported that cell adhesion via ICAM-1 plays an important role in rejection after organ transplantation. Furthermore, it has been shown that adhesion molecules are also involved in cancer metastasis.
[0007]
Also in experimental animals, the expression of adhesion molecules is increased in various inflammation models (delayed type hypersensitivity, autoimmune nephritis model, etc.), and anti-ICAM-1 antibody and anti-LFA-1 antibody cause inflammatory reaction ( It has been reported to suppress adjuvant arthritis, collagen arthritis, and the like. The role of adhesion molecules in eosinophil activation in a monkey asthma model has also been clarified. Furthermore, the effectiveness of anti-LFA-1 and anti-ICAM-1 antibodies has also been reported in mouse ectopic heart transplantation models, suggesting the importance of adhesion molecules in graft rejection as in humans. Yes.
[0008]
[Problems to be solved by the invention]
As a therapeutic agent for various inflammatory diseases and allergic diseases, various steroids, non-steroidal anti-inflammatory agents, inflammation / allergy related mediator release inhibitors, and the like are used. Of these drugs, steroids often have serious side effects, and other drugs are not necessarily effective enough.
[0009]
On the other hand, in recent years, it has become clear that various cell adhesion molecules are deeply involved in the onset and progression of several inflammatory diseases and allergic diseases, and compounds having a cell adhesion inhibitory action Is expected to be an excellent anti-inflammatory or anti-allergic agent. For example, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 88 (1991), pages 355-359, Proc. Natl. Acad. That N- (fluorenyl-9-methoxycarbonyl) amino acids suppress responses in various animal inflammation models by inhibiting leukocyte adhesion, and American Federation for Clinical Research Annual Meeting (American Federation for Clinical Research Annual Meeting, May 6, 1991) shows that homologous compounds inhibit leukocyte adhesion to vascular endothelial cells by suppressing the expression of adhesion molecules (such as CD18) on leukocytes. Etc. to be inhibited is described.
[0010]
However, the compounds described in various known literatures including the above-mentioned literature still cannot obtain a sufficient cell adhesion inhibitory action, and development of a more potent inhibitor is desired.
[0011]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors used human umbilical vein-derived vascular endothelial cells (HUVEC) and human leukemia cell lines for the purpose of searching for compounds that strongly inhibit leukocyte adhesion to vascular endothelial cells. As a result of extensive research to establish a cell adhesion assay system and to solve the above problems, it was found that the thienotriazolodiazepine compound represented by the general formula (I) has a strong leukocyte adhesion inhibitory action. The headline and the present invention have been completed.
[0012]
That is, the present invention is as follows.
(1) General formula
[0013]
[Chemical 3]

[0014]
[In the formula, Ar has 1 to 3 selected from phenyl, pyridyl, thienyl, halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbons, alkoxy having 1 to 6 carbons, cyano, amino and trihalomethyl. Pyridyl or thienyl having 1 to 3 selected from phenyl, halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms and alkoxy having 1 to 6 carbon atoms is shown.
[0015]
R¹, R²Are the same or different and are hydrogen, halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms or the formula
-(CH₂) M-CON (R⁶) (R⁷)
(In formula, m shows the integer of 1-6. R⁶, R⁷Are the same or different and each represents hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbons, alkanoyl or cycloalkyl having 2 to 7 carbons, or R⁶, R⁷Combine to form a cyclic amine with an adjacent nitrogen atom. Or a group represented by R¹, R²Are bonded to each other to form a ring having 5 to 7 carbon atoms, or N (R⁸) (R⁸Represents alkanoyl or cycloalkylcarbonyl having 2 to 7 carbon atoms. ) Having a 5- to 7-membered ring.
[0016]
R^ThreeRepresents hydrogen, halogen or alkyl having 1 to 6 carbon atoms. R^Four, R^FiveOne shows hydrogen and the otherWhoformula
[0017]
[Formula 4]

[0018]
(In the formula, n represents 0 or an integer of 1 to 6. Y represents an oxygen atom or a sulfur atom. R⁹Represents alkyl having 1 to 6 carbon atoms. R^Ten, R¹¹Are the same or different, hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, phenyl, heteroaryl, halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy having 1 to 6 carbon atoms, cyano, amino and trihalomethyl Or phenyl having 1 to 3 selected from 1 or heteroaryl having 1 to 3 selected from halogen, alkyl having 1 to 6 carbons and alkoxy having 1 to 6 carbons. R¹²Represents hydrogen or alkyl having 1 to 6 carbon atoms. X represents halogen. R¹³Is 1 to 3 selected from hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbons, aralkyl or halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbons, alkoxy having 1 to 6 carbons, cyano, amino and trihalomethyl Aralkyl having a Or a group represented byR ^Four , R ^Five Both represent a group represented by (1) above,Or R^Four, R^FiveAre bonded to each other, and an oxygen atom, sulfur atom or N (R¹⁴) (R¹⁴Is hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, hydroxyalkyl having 1 to 6 carbon atoms, phenyl or halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy having 1 to 6 carbon atoms, cyano, amino And phenyl having 1 to 3 groups selected from trihalomethyl. And a substituent selected from halogen, alkyl having 1 to 6 carbons, alkoxy having 1 to 6 carbons, hydroxyl, carboxyl, alkoxycarbonyl, cyano, amino, mono- or di-substituted amino The group which forms the nitrogen-containing ring which may have 1-3 which are selected. ] The thienotriazolodiazepine compound represented by these, or its pharmaceutically acceptable salt.
[0019]
In this specification, pyridyl means 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl. Thienyl is 2-thienyl or 3-thienyl. Halogen is chlorine, bromine, fluorine, or iodine. C1-C6 alkyl means methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tertiary butyl, pentyl, tertiary pentyl, 1-methylbutyl, hexyl, 1-methylpentyl, etc. 1-4 alkyls are preferred and methyl is particularly preferred. C1-C6 alkoxy means methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy, tertiary butoxy, pentyloxy, tertiary pentyloxy, hexyloxy, etc. Alkoxy is preferred, and methoxy is particularly preferred. Trihalomethyl means trifluoromethyl, trichloromethyl, tribromomethyl, etc., and trifluoromethyl is preferred. The alkanoyl having 2 to 7 carbon atoms includes acetyl, propionyl, butyryl, isobutyryl, valeryl, isovaleryl, pivaloyl, hexanoyl, heptanoyl and the like, preferably alkanoyl having 2 to 5 carbon atoms, and particularly preferably acetyl and propionyl. Cycloalkyl represents cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, etc., with cyclopropyl and cyclohexyl being preferred. Cycloalkylcarbonyl means cyclopropylcarbonyl, cyclobutylcarbonyl, cyclopentylcarbonyl, cyclohexylcarbonyl, cycloheptylcarbonyl, etc., and cyclopropylcarbonyl is preferred. Heteroaryl indicates pyridyl (2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl), thienyl (2-thienyl, 3-thienyl), furyl (2-furyl, 3-furyl) and the like. Aralkyl is benzyl, 1-phenylethyl, 2-phenylethyl, 3-phenylpropyl, 4-phenylbutyl or the like, and benzyl is preferred. Hydroxyalkyl having 1 to 6 carbon atoms includes hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl, 1-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl, 5-hydroxypentyl, 6-hydroxyhexyl and the like. -4 hydroxyalkyls are preferred, and hydroxymethyl and 2-hydroxyethyl are particularly preferred. Alkoxycarbonyl means methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl, butoxycarbonyl, tertiary butoxycarbonyl, etc., with methoxycarbonyl and ethoxycarbonyl being preferred. Mono- or di-substituted amino means methylamino, dimethylamino, ethylamino, diethylamino, propylamino, dipropylamino, butylamino, dibutylamino, etc., and methylamino and dimethylamino are preferred.
[0020]
R⁶And R⁷The cyclic amine formed by bonding with the adjacent nitrogen atom is 1-pyrrolidinyl, piperidino, morpholino, thiomorpholino or 1-piperazinyl, and piperidino and morpholino are preferred. R¹, R²Are bonded to each other to form a ring having 5 to 7 carbon atoms or N (R⁸) (R⁸Is a cyclopentene ring, pyrroline ring, pyrazoline ring, cyclopentadiene ring, cyclohexene ring, tetrahydropyridine ring, cyclohexadiene ring, benzene ring, cycloheptene ring, cycloheptadiene ring, cyclopentene ring, A heptatriene ring or the like is shown, and a cyclohexene ring and a tetrahydropyridine ring are preferable. R⁴, R⁵In the ring formed by bonding to each other as an oxygen atom, sulfur atom or N (R¹⁴) (R¹⁴Is a nitrogen-containing ring optionally containing 1-pyrrolidinyl, piperidino, morpholino, thiomorpholino, 4-R¹⁴-1-piperazinyl, 1-pyrazolyl and the like, which are halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms (as described above), alkoxy having 1 to 6 carbon atoms (as described above), hydroxyl group, carboxyl , Alkoxycarbonyl (as described above), cyano, amino or mono- or di-substituted amino (as described above).
[0021]
Examples of Ar include phenyl, 2-chlorophenyl, 4-chlorophenyl, 4-methylphenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 2-thienyl and the like, and phenyl, 4-chlorophenyl and 2-chlorophenyl are preferable.
[0022]
R¹In embodiments of the present invention, hydrogen, methyl, R²Examples of the above are halogen, methyl, ethyl, hexyl, 2- (N-acetylcarbamoyl) ethyl, 2- (N-tertiarybutylcarbamoyl) ethyl, 2- (N-cyclopropylcarbamoyl) ethyl, 2-morpholinocarbonyl , 2-piperidinocarbonylethyl, R¹As hydrogen, methyl, R²As methyl, 2-morpholinocarbonylethyl is preferable. R¹And R²The ring formed by bonding is preferably a cyclohexyl ring or a tetrahydropyridine ring substituted with cyclopropylcarbonyl at the N-position.
[0023]
R³Examples of are methyl, butyl, hexyl and the like, and methyl is preferred.
[0024]
R⁴, R⁵As an aspect of R⁴Represents hydrogen and R⁵Is a group of the above (1) to (6), or R⁴, R⁵In which both are the above (1), R⁴Represents hydrogen and R⁵Represents the above (1), n is preferably 2, and Y is an oxygen atom. Or R⁴, R⁵Examples of the ring formed by bonding are morpholino, piperidino, 4-hydroxypiperidino, 4-dimethylaminopiperidino, 4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazinyl, 4- (2-methoxy Phenyl) -1-piperazinyl, 2-carboxy-1-pyrrolidinyl, 2-ethoxycarbonyl-1-pyrrolidinyl and the like, and monoforino, piperidino and 4-hydroxypiperidino are preferable.
[0025]
Pharmaceutically acceptable salts of the compounds of general formula (I) include acid addition salts with inorganic acids or organic acids, and salts with inorganic bases, organic bases or amino acids. Is preferably substantially non-toxic. Also included are hydrates (1/2 hydrate, monohydrate, 3/2 hydrate, etc.) and other solvates. Furthermore, since the compound of the general formula (I) has at least one chiral carbon atom, any racemate, optically active substance or diastereomer based on the compound is included in the present invention. .
[0026]
The compound of the general formula (I) can be produced, for example, by the method shown in the following chemical formula 5.
[0027]
[Chemical formula 5]

[0028]
In the reaction of Method 1, an appropriate solvent (tetrahydrofuran, diethyl ether, diisopropyl ether, dioxane, dichloromethane, chloroform, dichloroethane, etc.) that does not inhibit the reaction of the compound of general formula (II) and 1,1′-carbonyldiimidazole (CDI) Ethyl acetate, benzene, toluene, xylene, dimethylformamide, dimethylacetamide, etc.) to react at −20 ° C. to the boiling point of the solvent, preferably at room temperature for 2 hours to 5 hours, to give a carbamoylimidazole derivative, and then of general formula (III) The reaction proceeds by reacting the amine from −20 ° C. to the boiling point of the solvent, preferably at room temperature.
[0029]
In the reaction of Method 2, the compound of the general formula (II) and triphosgene are combined with an appropriate solvent (tetrahydrofuran) that does not inhibit this reaction in the presence of an appropriate solvent (triethylamine, pyridine, N-methylmorpholine, 4-dimethylaminopyridine, etc.). , Diethyl ether, diisopropyl ether, dioxane, dichloromethane, chloroform, dichloroethane, ethyl acetate, benzene, toluene, xylene, dimethylformamide, dimethylacetamide, etc.) at -20 ° C. to the boiling point of the solvent for 1 to 24 hours, It proceeds by reacting with an isocyanate derivative and then reacting the amine of general formula (III) from -20 ° C to the boiling point of the solvent for 1 to 24 hours.
[0030]
In the reaction of Method 3, the compound of the general formula (II) and 4-nitrophenyl chloroformate are inhibited in the presence of an appropriate base (such as triethylamine, pyridine, N-methylmorpholine, 4-dimethylaminopyridine). In a suitable solvent (tetrahydrofuran, diethyl ether, diisopropyl ether, dioxane, dichloromethane, chloroform, dichloroethane, ethyl acetate, benzene, toluene, xylene, dimethylformamide, dimethylacetamide, etc.) from -20 ° C to the boiling point of the solvent for 1 hour The reaction is carried out for 24 hours to obtain an active carbamate, and then the reaction is carried out by reacting the amine of the general formula (III) from −20 ° C. to the boiling point of the solvent for 1 to 24 hours.
[0031]
The thus obtained compound of the general formula (I) can be separated and purified from the reaction mixture by a method known per se such as recrystallization and column chromatography. The compounds of general formula (I) are prepared by conventional methods using inorganic acids (hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, etc.), organic acids (acetic acid, propionic acid, succinic acid, glycolic acid, lactic acid, malic acid, tartaric acid , Citric acid, maleic acid, fumaric acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, ascorbic acid, etc.), inorganic base (sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide, magnesium hydroxide, zinc hydroxide, ammonium hydroxide, etc.) ), Organic bases (methylamine, diethylamine, triethylamine, dicyclohexylamine, triethanolamine, ethylenediamine, trishydroxymethylaminomethane, quinine, guanidine, cinchonine, etc.) or amino acids (lysine, ornithine, arginine, alanine, etc.) Pharmaceutically acceptable It can be.
[0032]
When the compound of the present invention has a chiral carbon atom, it is usually obtained as a racemate. Racemates can be resolved into optical isomers by conventional methods. Such optical isomers can also be prepared by using optically active starting materials. Individual diastereomers can be purified by fractional crystallization or chromatography.
[0033]
Examples of the compounds included in the general formula (I) of the present invention are as shown in the following table. In the table, Cl represents chlorine, Et represents ethyl, Me represents methyl, MeO represents methoxy, and Ph represents phenyl.
[0034]
[Table 2]

[0035]
[Table 3]

[0036]
[Table 4]

[0037]
[Table 5]

[0038]
[Action]
Experimental Example 1: Effect of human histiocytic leukemia cell line U937 on CD11b expression
The effect | action with respect to the expression of CD11b antigen which comprises the alpha chain of Mac-1 which is one of the adhesion molecules expressed on the surface of a leukocyte cell was examined. U937 cells were suspended in RPMI 1640 medium containing 20% fetal bovine serum and then added to 96-well filtration plates with phorbol-12,13-dibutyrate (PDB, 10 ng / ml) and test compounds (30000 cells / Well). After culturing at 37 ° C. in the presence of 5% carbon dioxide for 3 days, the plate was washed once with RPMI 1640 medium, and rat anti-human CD11b monoclonal antibody (2 μg / ml) was added. The mixture was allowed to stand for 1 hour under ice cooling, washed twice, and a peroxidase-labeled anti-rat immunoglobulin antibody (1 μg / ml) was added. The mixture was allowed to stand for 1 hour under ice cooling, washed 3 times, and a chromogenic substrate for peroxidase (orthophenylenediamine) was added. After standing at room temperature for 15 minutes, absorbance at 490 nm was measured using a 96-well plate absorptiometer, and used as an index of CD11b antigen expression.
[0039]
50% inhibition concentration (IC calculated with the expression level when PDB was added as 100% and the expression level when not added as 0%.₅₀Values, μM) are shown in Table 6 below.
[0040]

[0041]
As shown in Table 6 above, compounds A, B and C strongly suppressed CD11b expression in U937 cells. Compound A represents the compound of Example 1, Compound B represents the compound of Example 5, and Compound C represents the compound of Example 13.
[0042]
Experimental Example 2: Effect on oxazolone-induced mouse ear edema
After sensitization by applying 50 μl of an oxazolone solution (50 mg / ml in acetone) to the abdomen of the mouse from which the hair had been removed, 5 μl of oxazolone was applied to the front and back of the mouse right ear on the seventh day. After 24 hours, the left and right ears were cut out using a puncher with a diameter of 6 mm, and the weight was measured with a direct balance. A value obtained by subtracting the weight of the untreated ear (left ear) from the weight of the treated ear (right ear) was used as an index of edema. Test compound A was suspended in a 0.5% methylcellulose solution and orally administered from 0 to 8 days after sensitization (0.1 ml / body weight 10 g). The results are shown in Table 7.
[0043]

[0044]
As shown in Table 7 above, it was suggested that Compound A suppresses mouse ear edema in a dose-dependent manner, and also suppresses leukocyte infiltration at the inflamed site by inhibiting cell adhesion even in vivo.
[0045]
The medicament of the present invention prevents or treats various inflammatory diseases, allergic diseases, autoimmune diseases, rheumatoid arthritis, and rejection at the time of organ transplantation, in which leukocyte adhesion reaction to vascular endothelial cells is involved in its onset and progression In addition, it is used to prevent tumor cell metastasis.
[0046]
In producing the medicament of the present invention, the compound of the general formula (I) is preferably contained in a therapeutically effective amount, usually about 0.1 to 50 mg. In addition to these active ingredients, the medicament is mixed with pharmaceutically acceptable carriers, excipients, diluents, solubilizers, disintegrants, binders, etc. to form tablets, powders, capsules, injections, suppositories. It can be safely orally or parenterally administered to a patient by using an infusion or the like. The dose is usually about 5 to 100 mg for oral administration and about 1 to 50 mg for intravenous administration per day for an adult.
[0047]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be specifically described with reference to raw material preparation examples, examples, and pharmaceutical formulation examples, but the present invention is not limited thereto.
[0048]
Raw material preparation example 1
4- (4-Chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] in 150 ml of diethyl carbonate Add 12 g of diazepine and 2.4 g of sodium hydride and heat. Bubbling of hydrogen gas starts around 100 ° C., and the reaction solution gradually becomes purple. After refluxing for 1 hour, the mixture is cooled to 20 ° C., 8 g of O- (2,4-dinitrophenyl) hydroxylamine is added, and the mixture is stirred for 2 hours. After the reaction, the reaction mixture is poured into ice water, the diethyl carbonate layer is separated, washed twice with water, and dried over anhydrous magnesium sulfate. Diisopropyl ether was added to the residue obtained by distilling off diethyl carbonate under reduced pressure, and the precipitated crystals were collected by filtration, and ethyl (6-amino-4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H) was collected. -11 g of thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) carboxylate was obtained.
[0049]
Ethyl (6-amino-4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [250 ml of ethanol and 80 ml of water] 4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) carboxylate is dissolved, 8.4 g of barium hydroxide octahydrate is added, and the mixture is stirred at room temperature for 24 hours. The solvent is distilled off under reduced pressure, 100 ml of water is added, the pH is adjusted to 2 with 1N hydrochloric acid, the mixture is stirred for 20 minutes, neutralized with an aqueous sodium hydrogen carbonate solution, and extracted twice with chloroform. The organic layer is dried over anhydrous magnesium sulfate, and then the solvent is distilled off under reduced pressure and subjected to silica gel column chromatography. After distilling off the solvent, the obtained residue was crystallized from diisopropyl ether, collected by filtration, and 6-amino-4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f. ] [1,2,4] Triazolo [4,3-a] [1,4] diazepine 7g was obtained.
[0050]
Raw material preparation example 2
In the same manner as in Preparation Example 1, 2,3,9-trimethyl-4-phenyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4 From diazepine to 6-amino-2,3,9-trimethyl-4-phenyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepine Got.
[0051]
Raw material preparation example 3
In the same manner as in Raw Material Preparation Example 1, 4- (2-chlorophenyl) -9-methyl-2- (2-morpholinocarbonylethyl) -6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [ 4,3-a] [1,4] diazepine to 6-amino-4- (2-chlorophenyl) -9-methyl-2- (2-morpholinocarbonylethyl) -6H-thieno [3,2-f] [ 1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepine was obtained.
[0052]
Raw material preparation example 4
6- (2-Chlorophenyl) -3-cyclopropylcarbonyl-11-methyl-2,3,4,5-tetrahydro-8H-pyrido [4 ′, 3 ′: 4,5] ] Thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepine to 8-amino-5- (2-chlorophenyl) -3-cyclopropylcarbonyl-11 -Methyl-2,3,4,5-tetrahydro-8H-pyrido [4 ', 3': 4,5] thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepine was obtained.
[0053]
Example 1
6-Amino-4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1 in 40 ml of chloroform , 4] 6 g of diazepine was dissolved, 4.1 g of 1,1′-carbonyldiimidazole was added and stirred at room temperature for 2 hours, then 1.3 ml of ethanolamine was added under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 6 hours. The reaction mixture was washed with 0.3N hydrochloric acid and then with water, and then dried over anhydrous magnesium sulfate. The residue obtained by distilling off the solvent under reduced pressure was added with diisopropyl ether to form crystals, which were then recrystallized from methanol-water. When N- (4- (4-chlorophenyl) having a melting point of 240-242 ° C. -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) -N '-( There were obtained 3.5 g of 2-hydroxyethyl) urea.
[0054]
Example 2
In the same manner as in Example 1, 6-amino-2,3,9-trimethyl-4-phenyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [ 1,4] N- (2-hydroxyethyl) -N ′-(2,3,9-trimethyl-4-phenyl-6H-thieno [3,2-f] having a melting point of 227-228 ° C. from diazepine and ethanolamine [1,2,4] Triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) urea was obtained.
[0055]
Example 3
In the same manner as in Example 1, 6-amino-4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3 -A] [1,4] diazepine and 4-amino-1-butanol from N- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2] having a melting point of 223 to 226 ° C. -F] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) -N '-(4-hydroxybutyl) urea was obtained.
[0056]
Example 4
In the same manner as in Example 1, 6-amino-4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3 -A] [1,4] diazepine and 6-amino-1-hexanol from N- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2] having a melting point of 237-238 [deg.] C. -F] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) -N '-(6-hydroxyhexyl) urea was obtained.
[0057]
In the same manner as in Example 1, the following compound is obtained.
(5) N- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1, 4] diazepin-6-yl) morpholine-4-carboxamide, mp 167-170 ° C
[0058]
(6) N- (2,3,9-trimethyl-4-phenyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepine- 6-yl) morpholine-4-carboxamide, mp 247-248 ° C
[0059]
(7) Ethyl N- (3- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a ] [1,4] diazepin-6-yl) ureido) acetate, melting point 233-235 ° C.
[0060]
(8) N- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1, 4] diazepin-6-yl) piperidine-1-carboxamide, mp 232-236 ° C.
[0061]
(9) N- (2-chloroethyl) -N ′-(4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [ 4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) urea, mp 247-251 ° C. (decomposition)
[0062]
(10) N- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1, 4] diazepin-6-yl) -N ′, N ′-(bis (2-hydroxyethyl)) urea, mp 172 ° -175 ° C.
[0063]
(11) N- (4- (2-chlorophenyl) -9-methyl-2- (2-morpholinylcarbonylethyl) -6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] [1,4] diazepin-6-yl) -N ′-(2-hydroxyethyl) urea,
[0064]
(12) N- (6- (2-chlorophenyl) -3-cyclopropylcarbonyl-11-methyl-2,3,4,5-tetrahydro-8H-pyrido [4 ′, 3 ′: 4,5] thieno [ 3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-8-yl) -N ′-(2-hydroxyethyl) urea,
[0065]
(13) N- (4- (4-Chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1, 4] diazepin-6-yl) -N ′-(2-dimethylaminoethyl) urea, mp 272-274 ° C.
[0066]
(14) N- (4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2,4] triazolo [4,3-a] [1, 4] diazepin-6-yl) -4-hydroxypiperidine-1-carboxamide, mp 202-207 ° C.
[0067]
(15) N- (1-Benzyl-4-piperidyl) -N ′-(4- (4-chlorophenyl) -2,3,9-trimethyl-6H-thieno [3,2-f] [1,2, 4] Triazolo [4,3-a] [1,4] diazepin-6-yl) urea, mp 247-250 ° C.
The compounds shown in Tables 2 to 5 are obtained in the same manner as in Example 1.
[0068]
Formulation example 1
After thoroughly mixing 0.5 part of the compound of Example 1, 25 parts of lactose, 35 parts of crystalline cellulose and 3 parts of corn starch, the mixture was well kneaded with the binder made of 2 parts of corn starch. This kneaded product was sieved with 16 mesh, dried in an oven at 50 ° C., and sieved with 24 mesh. The kneaded powder obtained here, 8 parts of corn starch, 11 parts of crystalline cellulose and 9 parts of talc are mixed well, and then compressed into tablets to obtain tablets containing 0.5 mg of active ingredient per tablet.
[0069]
Formulation example 2
Dissolve 1.0 mg of the compound of Example 1 and 9.0 mg of sodium chloride in water for injection, filter to remove pyrogens, transfer the filtrate under aseptic conditions to an ampoule, sterilize, melt and seal the active ingredient An injection containing 1.0 mg is obtained.
[0070]
【The invention's effect】
As is clear from the above specification, particularly the experimental examples, the thienotriazolodiazepine compound of the present invention has an action of inhibiting leukocyte adhesion to vascular endothelial cells by suppressing CD11b expression on leukocytes. It also suppresses leukocyte infiltration in vivo. Due to this action, the present compound is expected to be useful as a therapeutic or prophylactic agent for various inflammatory diseases, allergic diseases, rheumatoid arthritis and the like in which cell adhesion is involved in the onset and progression thereof. It can also be used to prevent or treat autoimmune diseases and rejection at the time of organ transplantation, and also to prevent tumor cell metastasis.

Claims (1)

General formula

[In the formula, Ar has 1 to 3 selected from phenyl, pyridyl, thienyl, halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbons, alkoxy having 1 to 6 carbons, cyano, amino and trihalomethyl. Pyridyl or thienyl having 1 to 3 selected from phenyl, halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms and alkoxy having 1 to 6 carbon atoms is shown. R ¹ and R ² are the same or different and each represents hydrogen, halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, or the formula — (CH ₂ ) m-CON (R ⁶ ) (R ⁷ ).
(In the formula, m represents an integer of 1 to ^6. R ⁶ and R ⁷ are the same or different and each represents hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbons, alkanoyl having 2 to 7 carbons, or cycloalkyl. Or R ⁶ and R ⁷ are combined to form a cyclic amine together with the adjacent nitrogen atom.), Or R ¹ and R ² are bonded to each other to form a group having 5 to 7 carbon atoms. N (R ⁸⁾ on whether or in the ring to form a ring (R ⁸ represents. 2-7 alkanoyl or cycloalkylcarbonyl carbon atoms) group forming a 5- to 7-membered ring having. R ³ represents hydrogen, halogen, or alkyl having 1 to 6 carbon atoms. R ^4, R ⁵ is one represents hydrogen and the other person has the formula

(In the formula, n represents 0 or an integer of 1 to 6. Y represents an oxygen atom or a sulfur atom. R ⁹ represents an alkyl having 1 to 6 carbon atoms. R ¹⁰ and R ¹¹ are the same or different. 1 selected from hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, phenyl, heteroaryl, halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy having 1 to 6 carbon atoms, cyano, amino and trihalomethyl R 3 represents phenyl having 3 or heteroaryl having 1 to 3 selected from halogen, alkyl having 1 to 6 carbons and alkoxy having 1 to 6 carbons as a substituent, and R ¹² represents hydrogen or 1 carbon. -6 represents alkyl, X represents halogen, R ¹³ represents hydrogen, alkyl having 1 to 6 carbons, aralkyl or halogen as a substituent, alkyl having 1 to 6 carbons, 1 to 6 carbons of Alkoxy, or indicates cyano, or a group represented by aralkyl.) Having 1-3 selected from amino and trihalomethyl, a group represented by R ^4, R ⁵ are both (1) or R ^4, R ⁵ are bonded to each other, an oxygen atom as a hetero atom in the ring, a sulfur atom or N (R ¹⁴⁾ (R ¹⁴ represents hydrogen, 1-6 carbon atoms alkyl, 1-6 carbon atoms And a phenyl having 1 to 3 selected from halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy, cyano, amino and trihalomethyl). Further, as a substituent, halogen, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy having 1 to 6 carbon atoms, hydroxyl group, carboxyl, alkoxycarbonyl, cyano, amino Other is a group which forms a good nitrogen containing ring which may have 1 to 3 selected from mono- or di-substituted amino. ] The thienotriazolodiazepine compound represented by these, or its pharmaceutically acceptable salt.