JP3543306B2 - 細胞賦活剤、及び抗酸化剤 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、細胞賦活剤、抗酸化剤、並びに係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を含有する皮膚外用剤に関する。さらに詳しくは、ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を有効成分とする細胞賦活剤及び抗酸化剤、並びに係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を含有し、老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
加齢などによる真皮線維芽細胞の機能低下は、コラーゲンやエラスチン等の真皮マトリックスの減少や変性を引き起こし、シワや皮膚の弾性低下といった老化症状の重要な要因となっている。また、紫外線等の外来ストレスによる酸化傷害も、シワ，シミ，皮膚の弾性低下といった老化症状の原因となっている。これまでの皮膚外用剤の分野では、係る細胞の機能低下や酸化傷害による老化症状を防止あるいは改善するために、様々な細胞賦活剤や抗酸化剤の検索及び配合検討がなされてきた。細胞賦活剤としては、例えば、ポンカンのエッセンス（特開２００１−１３１０４５）、ツリガネニンジン属，クサギ及びそれらの抽出物（特開２０００−１７８１９８）、有機溶媒によるクロレラ抽出物（特開平１１−３３５２９３）等が知られており、抗酸化剤としては、例えば、キク科へテロテカ属植物抽出物（特開平１１−１８０８８６）やカユアンギンの抽出物（特開平１０−１８２４１３）等が知られている。
【０００３】
しかし、すでに報告されている生理活性物質は、老化現象の一部の過程にのみ作用している場合が多く、本質的な改善効果としては不十分であると考えられた。また、皮膚外用剤の基剤中に配合した場合、有効な効果を得るにはかなりの高濃度を配合しなければならず、製剤に好ましくない色や臭いを付与してしまう場合があるなど、作用効果や安定性の面ですべてを満足できるものが少ないのが現状であった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明においては、優れた効果を有する細胞賦活剤及び抗酸化剤を見出し、さらに係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を含有し、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤を提供することを目的とした。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた成分を見出すために、種々の物質について真皮線維芽細胞賦活作用と抗酸化作用に関する検討を行った。その結果、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物に優れた真皮線維芽細胞賦活作用と抗酸化作用を見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明の原料として用いられる植物は、ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）の植物であればよい。ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物としては、アオハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｊａｐｏｎｉｃａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ．ｍｕｓａｓｈｉｅｎｓｉｓ Ｈｉｙａｍａ），アラゲヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｏｒｒｅｓｉａｎａ （Ｇａｕｄ．） Ａｌｓｔｏｎ ｖａｒ．ｔｏｒｒｅｓｉａｎａ），イヌケホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｄｅｎｔａｔａ （Ｆｏｒｓｋ．） Ｓｔ．Ｊｏｈｎ），イヌホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ ｖａｒ． ｋｕｌｉａｎｇｅｎｓｉｓ （Ｃｈｉｎｇ） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），イブキシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｇｌａｂｒａｔａ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），イヨホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎｖａｒ． ｏｇａｔａｎａ （Ｋｏｉｄｚ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），イワハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｊａｐｏｎｉｃａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｇｌａｂｒａｔａ Ｃｈｉｎｇ），ウスゲヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｌａｘａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ ｆ． ｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ Ｈ．Ｉｔｏ），エラブコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｘ ｉｎｓｕｌａｒｉｓ （Ｋ．Ｉｗａｔｓ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），オオイブキシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ），オオコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｌｉｕｋｉｕｅｎｓｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ ｅｘ Ｍａｔｓｕｍ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），オオハシゴシダ（Ｔｈｅ ｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｎｇｕｌａｒｉｌｏｂａ Ｃｈｉｎｇ），オオバショリマ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｑｕｅｌｐａｅｒｔｅｎｓｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ），オオホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｂｏｎｉｎｅｎｓｉｓ （Ｋｏｄａｍａ ｅｘ Ｋｏｉｄｚ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），クシノハシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｓｕｂｐｕｂｅｓｃｅｎｓ （Ｂｌ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），クリンホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ ｆ． ｎａｇｕｒａｅ Ｓｈｉｍｕｒａ），ゲジゲジシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｄｅｃｕｒｓｉｖｅ−ｐｉｎｎａｔａ （ｖａｎＨａｌｌ） Ｃｈｉｎｇ），ケヒメシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｎｉｐｐｏｎｉｃａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｂｏｒｅａｌｉｓ （Ｈａｒａ） Ｈａｒａ），ケホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ （Ｌｉｎｎ．） Ｆｏｓｂｅｒｇ），コウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｒｉｐｈｙｌｌａ （Ｓｗ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），コバザケシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ （Ｃ． Ｃｈｒ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），コハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｒｏｎｓ （Ｍｉｑ．） Ｃｈｉｎｇ），シシホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ ｆ． ｃｒｉｓｔａｔａ Ｔａｇａｗａ），シマヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｇｒａｃｉｌｅｓｃｅｎｓ （Ｂｌ．） Ｃｈｉｎｇ），ヒメシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｐａｌｕｓｔｒｉｓ （Ｓａｌｉｓｂ．） Ｓｃｈｏｔｔ），タイヨウシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｅｒｕｂｅｓｃｅｎｓ （Ｗａｌｌ． ｅｘＨｏｏｋ．） Ｃｈｉｎｇ），タイワンハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓｃａｓｔａｎｅａ （Ｔａｇａｗａ） Ｃｈｉｎｇ），タイワンハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｕｒａｉｅｎｓｉｓ （Ｒｏｓ．） Ｃｈｉｎｇ），タチヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｂｕｋｏｅｎｓｉｓ （Ｔａｇａｗａ） Ｃｈｉｎｇ），チリメンホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｙａｍａｗａｋｉｉ Ｈ．Ｉｔｏ），ツクシヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｈａｔｔｏｒｉｉ （Ｈ．Ｉｔｏ） Ｔａｇａｗａ ｖａｒ． ｎｅｍｏｒａｌｉｓ （Ｃｈｉｎｇ） Ｋｕｒａｔａ），テツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅ ｒｒｕｐｔａ （Ｗｉｌｌｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ），トウヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｏｌｉｇｏｐｈｌｅｂｉａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），トサノミゾシダモドキ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｆｌｅｘｉｌｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ），ナタギリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｒｕｎｃａｔａ （Ｐｏｉｒ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），ニッコウシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｎｉｐｐｏｎｉｃａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ），ハイミミガタシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｕｒｉｔａ （Ｈｏｏｋ．）Ｃｈｉｎｇ），ハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｇｌａｎｄｕｌｉｇｅｒａ （Ｋｕｎｚｅ） Ｃｈｉｎｇ），ハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓｊａｐｏｎｉｃａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），ヒトツバコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｓｉｍｐｌｅｘ （Ｈｏｏｋ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），ヒメハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｃｙｓｔｏｐｔｅｒｏｉｄｅｓ （Ｅａｔｏｎ） Ｃｈｉｎｇ），ヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｏｒｒｅｓｉａｎａ （Ｇａｕｄ．） Ａｌｓｔｏｎ ｖａｒ． ｃａｌｖａｔａ （Ｂａｋ．） Ｈｏｌｔｔ．），ホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ），ホソバコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｒｉｐｈｙｌｌａ （Ｓｗ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ． ｖａｒ． ｐａｒｉｓｈｉｉ （Ｂｅｄｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），ホソバショリマ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｂｅｄｄｏｍｅｉ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），ミゾシダモドキ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｏｍｅｉｅｎｓｉｓ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），ミドリヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｖｉｒｉｄｉｆｒｏｎｓ Ｔａｇａｗａ），ミミガタシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｓｕｂａｕｒｉｔａ （Ｔａｇａｗａ） Ｃｈｉｎｇ），ミヤマワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｐｈｅｇｏｐｔｅｒｉｓ （Ｌｉｎｎ．） Ｓｌｏｓｓｏｎ ｅｘ Ｒｙｄｂ．），ムニンヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｏｇａｓａｗａｒｅｎｓｉｓ （Ｎａｋａｉ） Ｈ．Ｉｔｏ ｅｘ Ｈｏｎｄａ），ヤクシマショリマ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｑｕｅｌｐａｅｒｔｅｎｓｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｙａｋｕ−ｍｏｎｔａｎａ （Ｍａｓａｍ．） Ｔａｇａｗａ），ヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｌａｘａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ），ヨコグラヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｈａｔｔｏｒｉｉ （Ｈ．Ｉｔｏ） Ｔａｇａｗａ）などが知られている。
【０００７】
これらヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物を使用する際は、抽出物を用いるのが一般的である。抽出には、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体，配偶体のいずれの部位を用いても構わないが、簡便に利用するには、胞子体の全草，根，葉身，葉柄などを用いるとよい。抽出の際は、生のまま用いてもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒に浸漬するか、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出方法でも行うことができる。抽出効率を上げるため、撹拌や抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
【０００８】
抽出溶媒としては、水の他、メタノール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級アルコール、１，３−ブチレングリコール，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸ブチル，酢酸エチル等のエステル類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。さらに、水や二酸化炭素，エチレン，プロピレン，エタノール，メタノール，アンモニアなどの１種又は２種以上の超臨界流体や亜臨界流体を用いてもよい。
【０００９】
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の上記溶媒による抽出物は、そのままでも使用することができるが、濃縮，乾固した物を水や極性溶媒に再度溶解したり、或いはこれらの生理作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の前記抽出物やその処理物及び分画物は、各処理及び分画後に凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００１０】
本発明における細胞賦活剤及び抗酸化剤は、上述のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を有効成分とする。また、係るヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を細胞賦活剤及び抗酸化剤として皮膚外用剤に配合することにより、老化症状の予防・改善に優れた効果を発揮する。
【００１１】
本発明におけるヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の配合量は、皮膚外用剤の種類や目的等によって調整することができるが、皮膚外用剤の全量に対して、０．０００１〜１０．０重量％が好ましく、より好ましくは、０．００１〜５．０重量％である。
【００１２】
本発明に係る皮膚外用剤は、ローション，乳液，ゲル，クリーム，軟膏剤，粉末，顆粒等、種々の剤型で提供することができる。
【００１３】
なお、本発明に係る皮膚外用剤には、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の他に、通常医薬品，医薬部外品，皮膚化粧料，毛髪用化粧料及び洗浄料に配合される、油性成分，保湿剤，粉体，色素，乳化剤，可溶化剤，洗浄剤，紫外線吸収剤，増粘剤，薬剤，香料，樹脂，防菌防黴剤，アルコール類等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の細胞賦活剤，抗酸化剤，植物抽出物との併用も可能である。
【００１４】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。まず、本発明のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の調製方法について示す。
【００１５】
【発明の効果】
［調製方法１］
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草の乾燥粉砕物１ｋｇに５０重量％エタノール水溶液を１０リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１６】
［調製方法２］
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草の乾燥粉砕物１ｋｇに水を９リットル加え、９０℃にて６時間還流して抽出した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１７】
［調製方法３］
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草の乾燥粉砕物１ｋｇにメタノールを９リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１８】
［調製方法４］
超臨界抽出装置にヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草を投入し、４０℃において１５ＭＰａの大気圧下で二酸化炭素の超臨界流体を用いて抽出した。抽出物を回収し、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１９】
次に、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の真皮線維芽細胞賦活作用を示す。試料には、テツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅｒｒｕｐｔａ （Ｗｉｌｌｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ）より調製方法１を用いて抽出したテツホシダ抽出物を用いた。
【００２０】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に１％のウシ胎児血清を添加したものを用いた。２４時間培養後、任意の濃度の試料を添加した試験培地に交換し、さらに４８時間培養した。次いで３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を４００μｇ／ｍＬ含有する培地に交換して２時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを２−プロパノールにて抽出し、マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両測定値の差により細胞賦活作用を評価した。評価結果を、試料無添加のブランクにおける細胞賦活作用を１００とした相対値にて表１に示す。
【００２１】
【表１】
【００２２】
表１より、テツホシダ抽出物を添加した培地では、テツホシダ抽出物を０．１２５〜１．００ｍｇ／ｍＬ添加した場合に、ブランクと比較して、危険率１％未満で有意な真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。このことから、テツホシダ抽出物は、優れた真皮線維芽細胞賦活作用を有することが明らかとなった。
【００２３】
次に、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の抗酸化作用について示す。試料には、テツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅｒｒｕｐｔａ （Ｗｉｌｌｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ）より調製方法１を用いて抽出したテツホシダ抽出物を用いた。
【００２４】
評価は、以下の手順で行った。５０重量％エタノール水溶液にて１ｍｇ／ｍＬに希釈したテツホシダ抽出物溶液を９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加した。次に、０．２ｍＭの濃度になるようにエタノールにて調製した１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）溶液を９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加した。攪拌しながら暗所に放置し、１０分後と２４時間後に５１６ｎｍの吸光度を測定した。試料が無添加のブランクの吸光度を（Ａ）、試料を添加したときの吸光度を（Ｂ）としたとき、式（１）の値をラジカル消去率とした。
式（１） ｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００（％）
テツホシダ抽出物の実験結果を表２に示す。
【００２５】
【表２】
【００２６】
表２より明らかなように、テツホシダ抽出物は優れた抗酸化作用を有することが分かった。
【００２７】
続いて、本発明に係るヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を配合した皮膚外用剤の処方を示す。実施例１〜５の処方には、表３に示すヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を配合し、実施例６〜１８の各処方には、それぞれの処方に記載のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物を配合した。
【００２８】
［実施例１〜５］乳液
（１）スクワラン １０．０（重量％）（２）メチルフェニルポリシロキサン ４．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン １．０
（７）グリセリン １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）カルボキシビニルポリマー ０．１５
（１０）精製水 ５０．８５
（１１）アルギニン（１重量％水溶液） ２０．０
（１２）表３記載のヒメシダ属植物抽出物 ２．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、（１１）と（１２）を順次加え、均一に混合する。
【００２９】
【表３】
【００３０】
［実施例６］化粧水
（１）エタノール １５．０（重量％）（２）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 ０．３
（３）香料 ０．１
（４）精製水 ８１．３６
（５）クエン酸 ０．０２
（６）クエン酸ナトリウム ０．１
（７）グリセリン ３．０
（８）ヒドロキシエチルセルロース ０．１
（９）テツホシダ抽出物［調製方法３］ ０．０２
製法：（１）に（２）及び（３）を溶解する。溶解後、（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。
【００３１】
［実施例７］クリーム
（１）スクワラン １０．０（重量％）（２）ステアリン酸 ２．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）セタノール ３．６
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（７）グリセリン １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）アルギニン（２０重量％水溶液） １５．０
（１０）精製水 ４０．７
（１１）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液） １５．０
（１２）テツホシダ抽出物［調製方法１］ １．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、（１１）を加え、冷却を開始し、４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。
【００３２】
［実施例８］美容液
（１）精製水 ３２．３５（重量％）（２）グリセリン １０．０
（３）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（４）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液） １７．５
（５）アルギン酸ナトリウム（１重量％水溶液） １５．０
（６）モノラウリン酸ポリグリセリル １．０
（７）マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリル ３．０
（８）Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸
ジ（フィトステリル−２−オクチルドデシル） ２．０
（９）硬化パーム油 ２．０
（１０）スクワラン（オリーブ由来） １．０
（１１）ベヘニルアルコール ０．７５
（１２）ミツロウ １．０
（１３）ホホバ油 １．０
（１４）１，３−ブチレングリコール １０．０
（１５）Ｌ−アルギニン（１０重量％水溶液） ２．０
（１６）テツホシダ抽出物［調製方法３］ ０．１
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、５０℃にて（１５）を加える。さらに４０℃まで冷却し、（１６）を加え、均一に混合する。
【００３３】
［実施例９］水性ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー ０．５（重量％）（２）精製水 ８６．１
（３）水酸化ナトリウム（１０重量％水溶液） ０．５
（４）エタノール １０．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（６）香料 ０．１
（７）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．１
（８）ポリオキシエチレン（６０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 ０．１
（９）グリセリン ２．０
（１０）ミヤマワラビ抽出物［調製方法３］ ０．１
（１１）ヒメシダ抽出物［調製方法１］ ０．１
（１２）ヒメワラビ抽出物［調製方法３］ ０．１
（１３）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法１］ ０．１
（１４）オオバショリマ抽出物［調製方法２］ ０．１
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後，（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加える。均一に攪拌した後、（９）〜（１４）を順次加え、均一に混合する。
【００３４】
［実施例１０］クレンジング料
（１）スクワラン ８１．９５（重量％）（２）イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル １５．０
（３）精製水 ３．０
（４）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．０２
（５）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法４］ ０．０３
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）〜（５）を順次加え、均一に混合する。
【００３５】
［実施例１１］洗顔フォーム
（１）ステアリン酸 １６．０（重量％）（２）ミリスチン酸 １６．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（４）グリセリン ２０．０
（５）水酸化ナトリウム ７．５
（６）ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン １．０
（７）精製水 ３６．５
（８）テツホシダ抽出物［調製方法３］ ０．５
（９）ヒメシダ抽出物［調製方法２］ ０．５
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合撹拌する。冷却を開始し、４０℃にて（８）と（９）を加え、均一に混合する。
【００３６】
［実施例１２］メイクアップベースクリーム
（１）スクワラン １０．０（重量％）
（２）セタノール ２．０
（３）グリセリントリ−２−エチルヘキサン酸エステル ２．５
（４）親油型モノステアリン酸グリセリル １．０
（５）プロピレングリコール １１．０
（６）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（７）精製水 ７０．４
（８）酸化チタン １．０
（９）ベンガラ ０．１
（１０）黄酸化鉄 ０．４
（１１）香料 ０．１
（１２）テツホシダ抽出物［調製方法２］ ０．１
（１３）オオバショリマ抽出物［調製方法１］ ０．１
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（１０）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）〜（１３）の成分を加え、均一に混合する。
【００３７】
［実施例１３］乳液状ファンデーション
（１）メチルポリシロキサン ２．０（重量％）
（２）スクワラン ５．０
（３）ミリスチン酸オクチルドデシル ５．０
（４）セタノール １．０
（５）ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）
ソルビタンモノステアリン酸エステル １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン ０．７
（７）１，３−ブチレングリコール ８．０
（８）キサンタンガム ０．１
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（１０）精製水 ５８．５２
（１１）酸化チタン ９．０
（１２）タルク ７．４
（１３）ベンガラ ０．５
（１４）黄酸化鉄 １．１
（１５）黒酸化鉄 ０．１
（１６）香料 ０．１
（１７）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．０４
（１８）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法３］ ０．０４
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（１１）〜（１５）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１６）〜（１８）の成分を順次加え、均一に混合する。
【００３８】
［実施例１４］油中水型エモリエントクリーム
（１）流動パラフィン ３０．０（重量％）
（２）マイクロクリスタリンワックス ２．０
（３）ワセリン ５．０
（４）ジグリセリンオレイン酸エステル ５．０
（５）塩化ナトリウム １．３
（６）塩化カリウム ０．１
（７）プロピレングリコール ３．０
（８）１，３−ブチレングリコール ５．０
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（１０）テツホシダ抽出物［調製方法１］ ０．５
（１１）精製水 ４５．９
（１２）香料 ０．１
（１３）ヒメシダ抽出物［調製方法４］ ２．０
製法：（５）と（６）を（１１）の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した（４）に撹拌しながら徐々に加える。これを混合した後、７０℃にて加熱溶解した（１）〜（３）に均一に分散する。これに（７）〜（１０）を（１１）の残部に７０℃にて加熱溶解したものを撹拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１２）と（１３）を加え、均一に混合する。
【００３９】
［実施例１５］ヘアートニック
（１）エタノール ５０．０（重量％）
（２）精製水 ４９．８９８
（３）ヒメシダ抽出物［調製方法３］ ０．００１
（４）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．００１
（５）香料 ０．１
製法：（１）〜（５）の成分を混合，均一化する。
【００４０】
［実施例１６］パック
（１）精製水 ６８．９（重量％）
（２）ポリビニルアルコール １２．０
（３）エタノール １０．０
（４）グリセリン ５．０
（５）ポリエチレングリコール（平均分子量１０００） ２．０
（６）ミヤマワラビ抽出物［調製方法１］ １．０
（７）テツホシダ抽出物［調製方法２］ １．０
（８）香料 ０．１
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）〜（５）を加え、攪拌しながら冷却を開始する。４０℃まで冷却し、（６）〜（８）を加え、均一に混合する。
【００４１】
［実施例１７］ヘアーワックス
（１）ステアリン酸 ３．０（重量％）
（２）マイクロクリスタリンワックス ２．０
（３）セチルアルコール ３．０
（４）高重合メチルポリシロキサン ２．０
（５）メチルポリシロキサン ５．０
（６）ポリ（オキシエチレン・オキシプロピレン）
メチルポリシロキサン共重合体 １．０
（７）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（８）１，３−ブチレングリコール ７．５
（９）アルギニン ０．７
（１０）精製水 ７１．６
（１１）テツホシダ抽出物［調製方法１］ ２．０
（１２）ミヤマワラビ抽出物［調製方法１］ ２．０
（１３）香料 ０．１
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解後する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を７５℃にて加熱溶解し、前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）〜（１３）の成分を加え、均一に混合する。
【００４２】
［実施例１８］入浴剤
（１）香料 ０．３（重量％）
（２）テツホシダ抽出物［調製方法１］ ０．５
（３）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法３］ ０．５
（４）炭酸水素ナトリウム ５０．０
（５）硫酸ナトリウム ４８．７
製法：（１）〜（５）を均一に混合する。
【００４３】
本発明の実施例１〜５について使用試験を行い、シワ，タルミ，肌のハリの改善効果を評価した。その際、実施例１において、配合したテツホシダ抽出物を精製水に代替し、比較例１として同時に使用試験を行った。
【００４４】
各試料について、シワ，タルミ，肌のハリの低下といった症状が顕著に認められる５０〜６０才代の男女パネラー各２０名を一群とし、ブラインドにて１カ月間使用させ、使用前後の皮膚状態の変化を観察して評価した。皮膚症状の指標として、シワ，タルミ，肌のハリについて、「改善」，「やや改善」，「変化なし」の三段階で評価し、表４に各評価を得たパネラー数にて示した。
【００４５】
【表４】
【００４６】
表４より、シワ，タルミ，肌のハリについて、ヒメシダ属（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ Ｌ．）植物抽出物を含有しない比較例使用群においては、半数以上のパネラーに改善が認められなかったが、ヒメシダ属（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ Ｌ．）植物抽出物を配合した実施例使用群においては、６割以上のパネラーに明確な改善が認められた。
【００４７】
以上のように、本発明の実施例においては、従来の比較例よりも、シワ，タルミ，肌のハリといった老化症状の改善に優れた効果を有していた。
【００４８】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明により、優れた効果を有する細胞賦活剤及び抗酸化剤を得ることが出来た。また、係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を有効成分として配合することにより、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を有する皮膚外用剤を得ることが出来た。
【発明の属する技術分野】
本発明は、細胞賦活剤、抗酸化剤、並びに係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を含有する皮膚外用剤に関する。さらに詳しくは、ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を有効成分とする細胞賦活剤及び抗酸化剤、並びに係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を含有し、老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
加齢などによる真皮線維芽細胞の機能低下は、コラーゲンやエラスチン等の真皮マトリックスの減少や変性を引き起こし、シワや皮膚の弾性低下といった老化症状の重要な要因となっている。また、紫外線等の外来ストレスによる酸化傷害も、シワ，シミ，皮膚の弾性低下といった老化症状の原因となっている。これまでの皮膚外用剤の分野では、係る細胞の機能低下や酸化傷害による老化症状を防止あるいは改善するために、様々な細胞賦活剤や抗酸化剤の検索及び配合検討がなされてきた。細胞賦活剤としては、例えば、ポンカンのエッセンス（特開２００１−１３１０４５）、ツリガネニンジン属，クサギ及びそれらの抽出物（特開２０００−１７８１９８）、有機溶媒によるクロレラ抽出物（特開平１１−３３５２９３）等が知られており、抗酸化剤としては、例えば、キク科へテロテカ属植物抽出物（特開平１１−１８０８８６）やカユアンギンの抽出物（特開平１０−１８２４１３）等が知られている。
【０００３】
しかし、すでに報告されている生理活性物質は、老化現象の一部の過程にのみ作用している場合が多く、本質的な改善効果としては不十分であると考えられた。また、皮膚外用剤の基剤中に配合した場合、有効な効果を得るにはかなりの高濃度を配合しなければならず、製剤に好ましくない色や臭いを付与してしまう場合があるなど、作用効果や安定性の面ですべてを満足できるものが少ないのが現状であった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明においては、優れた効果を有する細胞賦活剤及び抗酸化剤を見出し、さらに係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を含有し、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する皮膚外用剤を提供することを目的とした。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた成分を見出すために、種々の物質について真皮線維芽細胞賦活作用と抗酸化作用に関する検討を行った。その結果、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物に優れた真皮線維芽細胞賦活作用と抗酸化作用を見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明の原料として用いられる植物は、ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）の植物であればよい。ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物としては、アオハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｊａｐｏｎｉｃａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ．ｍｕｓａｓｈｉｅｎｓｉｓ Ｈｉｙａｍａ），アラゲヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｏｒｒｅｓｉａｎａ （Ｇａｕｄ．） Ａｌｓｔｏｎ ｖａｒ．ｔｏｒｒｅｓｉａｎａ），イヌケホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｄｅｎｔａｔａ （Ｆｏｒｓｋ．） Ｓｔ．Ｊｏｈｎ），イヌホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ ｖａｒ． ｋｕｌｉａｎｇｅｎｓｉｓ （Ｃｈｉｎｇ） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），イブキシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｇｌａｂｒａｔａ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），イヨホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎｖａｒ． ｏｇａｔａｎａ （Ｋｏｉｄｚ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），イワハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｊａｐｏｎｉｃａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｇｌａｂｒａｔａ Ｃｈｉｎｇ），ウスゲヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｌａｘａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ ｆ． ｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ Ｈ．Ｉｔｏ），エラブコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｘ ｉｎｓｕｌａｒｉｓ （Ｋ．Ｉｗａｔｓ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），オオイブキシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｅｓｑｕｉｒｏｌｉｉ），オオコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｌｉｕｋｉｕｅｎｓｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ ｅｘ Ｍａｔｓｕｍ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），オオハシゴシダ（Ｔｈｅ ｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｎｇｕｌａｒｉｌｏｂａ Ｃｈｉｎｇ），オオバショリマ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｑｕｅｌｐａｅｒｔｅｎｓｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ），オオホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｂｏｎｉｎｅｎｓｉｓ （Ｋｏｄａｍａ ｅｘ Ｋｏｉｄｚ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），クシノハシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｓｕｂｐｕｂｅｓｃｅｎｓ （Ｂｌ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），クリンホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ ｆ． ｎａｇｕｒａｅ Ｓｈｉｍｕｒａ），ゲジゲジシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｄｅｃｕｒｓｉｖｅ−ｐｉｎｎａｔａ （ｖａｎＨａｌｌ） Ｃｈｉｎｇ），ケヒメシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｎｉｐｐｏｎｉｃａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｂｏｒｅａｌｉｓ （Ｈａｒａ） Ｈａｒａ），ケホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ （Ｌｉｎｎ．） Ｆｏｓｂｅｒｇ），コウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｒｉｐｈｙｌｌａ （Ｓｗ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），コバザケシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ （Ｃ． Ｃｈｒ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），コハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｒｏｎｓ （Ｍｉｑ．） Ｃｈｉｎｇ），シシホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ ｆ． ｃｒｉｓｔａｔａ Ｔａｇａｗａ），シマヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｇｒａｃｉｌｅｓｃｅｎｓ （Ｂｌ．） Ｃｈｉｎｇ），ヒメシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｐａｌｕｓｔｒｉｓ （Ｓａｌｉｓｂ．） Ｓｃｈｏｔｔ），タイヨウシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｅｒｕｂｅｓｃｅｎｓ （Ｗａｌｌ． ｅｘＨｏｏｋ．） Ｃｈｉｎｇ），タイワンハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓｃａｓｔａｎｅａ （Ｔａｇａｗａ） Ｃｈｉｎｇ），タイワンハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｕｒａｉｅｎｓｉｓ （Ｒｏｓ．） Ｃｈｉｎｇ），タチヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｂｕｋｏｅｎｓｉｓ （Ｔａｇａｗａ） Ｃｈｉｎｇ），チリメンホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｙａｍａｗａｋｉｉ Ｈ．Ｉｔｏ），ツクシヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｈａｔｔｏｒｉｉ （Ｈ．Ｉｔｏ） Ｔａｇａｗａ ｖａｒ． ｎｅｍｏｒａｌｉｓ （Ｃｈｉｎｇ） Ｋｕｒａｔａ），テツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅ ｒｒｕｐｔａ （Ｗｉｌｌｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ），トウヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｏｌｉｇｏｐｈｌｅｂｉａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），トサノミゾシダモドキ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｆｌｅｘｉｌｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ），ナタギリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｒｕｎｃａｔａ （Ｐｏｉｒ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），ニッコウシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｎｉｐｐｏｎｉｃａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ），ハイミミガタシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｕｒｉｔａ （Ｈｏｏｋ．）Ｃｈｉｎｇ），ハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｇｌａｎｄｕｌｉｇｅｒａ （Ｋｕｎｚｅ） Ｃｈｉｎｇ），ハリガネワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓｊａｐｏｎｉｃａ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），ヒトツバコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｓｉｍｐｌｅｘ （Ｈｏｏｋ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），ヒメハシゴシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｃｙｓｔｏｐｔｅｒｏｉｄｅｓ （Ｅａｔｏｎ） Ｃｈｉｎｇ），ヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｏｒｒｅｓｉａｎａ （Ｇａｕｄ．） Ａｌｓｔｏｎ ｖａｒ． ｃａｌｖａｔａ （Ｂａｋ．） Ｈｏｌｔｔ．），ホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ａｃｕｍｉｎａｔａ （Ｈｏｕｔｔ．） Ｍｏｒｔｏｎ），ホソバコウモリシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｔｒｉｐｈｙｌｌａ （Ｓｗ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ． ｖａｒ． ｐａｒｉｓｈｉｉ （Ｂｅｄｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ．），ホソバショリマ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｂｅｄｄｏｍｅｉ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），ミゾシダモドキ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｏｍｅｉｅｎｓｉｓ （Ｂａｋ．） Ｃｈｉｎｇ），ミドリヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｖｉｒｉｄｉｆｒｏｎｓ Ｔａｇａｗａ），ミミガタシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｓｕｂａｕｒｉｔａ （Ｔａｇａｗａ） Ｃｈｉｎｇ），ミヤマワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｐｈｅｇｏｐｔｅｒｉｓ （Ｌｉｎｎ．） Ｓｌｏｓｓｏｎ ｅｘ Ｒｙｄｂ．），ムニンヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｏｇａｓａｗａｒｅｎｓｉｓ （Ｎａｋａｉ） Ｈ．Ｉｔｏ ｅｘ Ｈｏｎｄａ），ヤクシマショリマ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｑｕｅｌｐａｅｒｔｅｎｓｉｓ （Ｃｈｒｉｓｔ） Ｃｈｉｎｇ ｖａｒ． ｙａｋｕ−ｍｏｎｔａｎａ （Ｍａｓａｍ．） Ｔａｇａｗａ），ヤワラシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｌａｘａ （Ｆｒａｎｃｈ． ｅｔ Ｓａｖａｔ．） Ｃｈｉｎｇ），ヨコグラヒメワラビ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｈａｔｔｏｒｉｉ （Ｈ．Ｉｔｏ） Ｔａｇａｗａ）などが知られている。
【０００７】
これらヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物を使用する際は、抽出物を用いるのが一般的である。抽出には、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体，配偶体のいずれの部位を用いても構わないが、簡便に利用するには、胞子体の全草，根，葉身，葉柄などを用いるとよい。抽出の際は、生のまま用いてもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒に浸漬するか、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出方法でも行うことができる。抽出効率を上げるため、撹拌や抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
【０００８】
抽出溶媒としては、水の他、メタノール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級アルコール、１，３−ブチレングリコール，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸ブチル，酢酸エチル等のエステル類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。さらに、水や二酸化炭素，エチレン，プロピレン，エタノール，メタノール，アンモニアなどの１種又は２種以上の超臨界流体や亜臨界流体を用いてもよい。
【０００９】
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の上記溶媒による抽出物は、そのままでも使用することができるが、濃縮，乾固した物を水や極性溶媒に再度溶解したり、或いはこれらの生理作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の前記抽出物やその処理物及び分画物は、各処理及び分画後に凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００１０】
本発明における細胞賦活剤及び抗酸化剤は、上述のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を有効成分とする。また、係るヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を細胞賦活剤及び抗酸化剤として皮膚外用剤に配合することにより、老化症状の予防・改善に優れた効果を発揮する。
【００１１】
本発明におけるヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の配合量は、皮膚外用剤の種類や目的等によって調整することができるが、皮膚外用剤の全量に対して、０．０００１〜１０．０重量％が好ましく、より好ましくは、０．００１〜５．０重量％である。
【００１２】
本発明に係る皮膚外用剤は、ローション，乳液，ゲル，クリーム，軟膏剤，粉末，顆粒等、種々の剤型で提供することができる。
【００１３】
なお、本発明に係る皮膚外用剤には、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の他に、通常医薬品，医薬部外品，皮膚化粧料，毛髪用化粧料及び洗浄料に配合される、油性成分，保湿剤，粉体，色素，乳化剤，可溶化剤，洗浄剤，紫外線吸収剤，増粘剤，薬剤，香料，樹脂，防菌防黴剤，アルコール類等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の細胞賦活剤，抗酸化剤，植物抽出物との併用も可能である。
【００１４】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。まず、本発明のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の調製方法について示す。
【００１５】
【発明の効果】
［調製方法１］
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草の乾燥粉砕物１ｋｇに５０重量％エタノール水溶液を１０リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１６】
［調製方法２］
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草の乾燥粉砕物１ｋｇに水を９リットル加え、９０℃にて６時間還流して抽出した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１７】
［調製方法３］
ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草の乾燥粉砕物１ｋｇにメタノールを９リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１８】
［調製方法４］
超臨界抽出装置にヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の胞子体全草を投入し、４０℃において１５ＭＰａの大気圧下で二酸化炭素の超臨界流体を用いて抽出した。抽出物を回収し、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を得た。
【００１９】
次に、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の真皮線維芽細胞賦活作用を示す。試料には、テツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅｒｒｕｐｔａ （Ｗｉｌｌｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ）より調製方法１を用いて抽出したテツホシダ抽出物を用いた。
【００２０】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に１％のウシ胎児血清を添加したものを用いた。２４時間培養後、任意の濃度の試料を添加した試験培地に交換し、さらに４８時間培養した。次いで３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を４００μｇ／ｍＬ含有する培地に交換して２時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを２−プロパノールにて抽出し、マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両測定値の差により細胞賦活作用を評価した。評価結果を、試料無添加のブランクにおける細胞賦活作用を１００とした相対値にて表１に示す。
【００２１】
【表１】
表１より、テツホシダ抽出物を添加した培地では、テツホシダ抽出物を０．１２５〜１．００ｍｇ／ｍＬ添加した場合に、ブランクと比較して、危険率１％未満で有意な真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。このことから、テツホシダ抽出物は、優れた真皮線維芽細胞賦活作用を有することが明らかとなった。
【００２３】
次に、ヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物の抗酸化作用について示す。試料には、テツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅｒｒｕｐｔａ （Ｗｉｌｌｄ．） Ｋ．Ｉｗａｔｓ）より調製方法１を用いて抽出したテツホシダ抽出物を用いた。
【００２４】
評価は、以下の手順で行った。５０重量％エタノール水溶液にて１ｍｇ／ｍＬに希釈したテツホシダ抽出物溶液を９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加した。次に、０．２ｍＭの濃度になるようにエタノールにて調製した１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）溶液を９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加した。攪拌しながら暗所に放置し、１０分後と２４時間後に５１６ｎｍの吸光度を測定した。試料が無添加のブランクの吸光度を（Ａ）、試料を添加したときの吸光度を（Ｂ）としたとき、式（１）の値をラジカル消去率とした。
式（１） ｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００（％）
テツホシダ抽出物の実験結果を表２に示す。
【００２５】
【表２】
表２より明らかなように、テツホシダ抽出物は優れた抗酸化作用を有することが分かった。
【００２７】
続いて、本発明に係るヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を配合した皮膚外用剤の処方を示す。実施例１〜５の処方には、表３に示すヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物抽出物を配合し、実施例６〜１８の各処方には、それぞれの処方に記載のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物を配合した。
【００２８】
［実施例１〜５］乳液
（１）スクワラン １０．０（重量％）（２）メチルフェニルポリシロキサン ４．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン １．０
（７）グリセリン １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）カルボキシビニルポリマー ０．１５
（１０）精製水 ５０．８５
（１１）アルギニン（１重量％水溶液） ２０．０
（１２）表３記載のヒメシダ属植物抽出物 ２．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、（１１）と（１２）を順次加え、均一に混合する。
【００２９】
【表３】
［実施例６］化粧水
（１）エタノール １５．０（重量％）（２）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 ０．３
（３）香料 ０．１
（４）精製水 ８１．３６
（５）クエン酸 ０．０２
（６）クエン酸ナトリウム ０．１
（７）グリセリン ３．０
（８）ヒドロキシエチルセルロース ０．１
（９）テツホシダ抽出物［調製方法３］ ０．０２
製法：（１）に（２）及び（３）を溶解する。溶解後、（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。
【００３１】
［実施例７］クリーム
（１）スクワラン １０．０（重量％）（２）ステアリン酸 ２．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）セタノール ３．６
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（７）グリセリン １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）アルギニン（２０重量％水溶液） １５．０
（１０）精製水 ４０．７
（１１）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液） １５．０
（１２）テツホシダ抽出物［調製方法１］ １．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、（１１）を加え、冷却を開始し、４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。
【００３２】
［実施例８］美容液
（１）精製水 ３２．３５（重量％）（２）グリセリン １０．０
（３）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（４）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液） １７．５
（５）アルギン酸ナトリウム（１重量％水溶液） １５．０
（６）モノラウリン酸ポリグリセリル １．０
（７）マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリル ３．０
（８）Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸
ジ（フィトステリル−２−オクチルドデシル） ２．０
（９）硬化パーム油 ２．０
（１０）スクワラン（オリーブ由来） １．０
（１１）ベヘニルアルコール ０．７５
（１２）ミツロウ １．０
（１３）ホホバ油 １．０
（１４）１，３−ブチレングリコール １０．０
（１５）Ｌ−アルギニン（１０重量％水溶液） ２．０
（１６）テツホシダ抽出物［調製方法３］ ０．１
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、５０℃にて（１５）を加える。さらに４０℃まで冷却し、（１６）を加え、均一に混合する。
【００３３】
［実施例９］水性ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー ０．５（重量％）（２）精製水 ８６．１
（３）水酸化ナトリウム（１０重量％水溶液） ０．５
（４）エタノール １０．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（６）香料 ０．１
（７）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．１
（８）ポリオキシエチレン（６０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 ０．１
（９）グリセリン ２．０
（１０）ミヤマワラビ抽出物［調製方法３］ ０．１
（１１）ヒメシダ抽出物［調製方法１］ ０．１
（１２）ヒメワラビ抽出物［調製方法３］ ０．１
（１３）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法１］ ０．１
（１４）オオバショリマ抽出物［調製方法２］ ０．１
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後，（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加える。均一に攪拌した後、（９）〜（１４）を順次加え、均一に混合する。
【００３４】
［実施例１０］クレンジング料
（１）スクワラン ８１．９５（重量％）（２）イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル １５．０
（３）精製水 ３．０
（４）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．０２
（５）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法４］ ０．０３
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）〜（５）を順次加え、均一に混合する。
【００３５】
［実施例１１］洗顔フォーム
（１）ステアリン酸 １６．０（重量％）（２）ミリスチン酸 １６．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（４）グリセリン ２０．０
（５）水酸化ナトリウム ７．５
（６）ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン １．０
（７）精製水 ３６．５
（８）テツホシダ抽出物［調製方法３］ ０．５
（９）ヒメシダ抽出物［調製方法２］ ０．５
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合撹拌する。冷却を開始し、４０℃にて（８）と（９）を加え、均一に混合する。
【００３６】
［実施例１２］メイクアップベースクリーム
（１）スクワラン １０．０（重量％）
（２）セタノール ２．０
（３）グリセリントリ−２−エチルヘキサン酸エステル ２．５
（４）親油型モノステアリン酸グリセリル １．０
（５）プロピレングリコール １１．０
（６）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（７）精製水 ７０．４
（８）酸化チタン １．０
（９）ベンガラ ０．１
（１０）黄酸化鉄 ０．４
（１１）香料 ０．１
（１２）テツホシダ抽出物［調製方法２］ ０．１
（１３）オオバショリマ抽出物［調製方法１］ ０．１
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（１０）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）〜（１３）の成分を加え、均一に混合する。
【００３７】
［実施例１３］乳液状ファンデーション
（１）メチルポリシロキサン ２．０（重量％）
（２）スクワラン ５．０
（３）ミリスチン酸オクチルドデシル ５．０
（４）セタノール １．０
（５）ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）
ソルビタンモノステアリン酸エステル １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン ０．７
（７）１，３−ブチレングリコール ８．０
（８）キサンタンガム ０．１
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（１０）精製水 ５８．５２
（１１）酸化チタン ９．０
（１２）タルク ７．４
（１３）ベンガラ ０．５
（１４）黄酸化鉄 １．１
（１５）黒酸化鉄 ０．１
（１６）香料 ０．１
（１７）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．０４
（１８）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法３］ ０．０４
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（１１）〜（１５）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１６）〜（１８）の成分を順次加え、均一に混合する。
【００３８】
［実施例１４］油中水型エモリエントクリーム
（１）流動パラフィン ３０．０（重量％）
（２）マイクロクリスタリンワックス ２．０
（３）ワセリン ５．０
（４）ジグリセリンオレイン酸エステル ５．０
（５）塩化ナトリウム １．３
（６）塩化カリウム ０．１
（７）プロピレングリコール ３．０
（８）１，３−ブチレングリコール ５．０
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（１０）テツホシダ抽出物［調製方法１］ ０．５
（１１）精製水 ４５．９
（１２）香料 ０．１
（１３）ヒメシダ抽出物［調製方法４］ ２．０
製法：（５）と（６）を（１１）の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した（４）に撹拌しながら徐々に加える。これを混合した後、７０℃にて加熱溶解した（１）〜（３）に均一に分散する。これに（７）〜（１０）を（１１）の残部に７０℃にて加熱溶解したものを撹拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１２）と（１３）を加え、均一に混合する。
【００３９】
［実施例１５］ヘアートニック
（１）エタノール ５０．０（重量％）
（２）精製水 ４９．８９８
（３）ヒメシダ抽出物［調製方法３］ ０．００１
（４）テツホシダ抽出物［調製方法４］ ０．００１
（５）香料 ０．１
製法：（１）〜（５）の成分を混合，均一化する。
【００４０】
［実施例１６］パック
（１）精製水 ６８．９（重量％）
（２）ポリビニルアルコール １２．０
（３）エタノール １０．０
（４）グリセリン ５．０
（５）ポリエチレングリコール（平均分子量１０００） ２．０
（６）ミヤマワラビ抽出物［調製方法１］ １．０
（７）テツホシダ抽出物［調製方法２］ １．０
（８）香料 ０．１
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）〜（５）を加え、攪拌しながら冷却を開始する。４０℃まで冷却し、（６）〜（８）を加え、均一に混合する。
【００４１】
［実施例１７］ヘアーワックス
（１）ステアリン酸 ３．０（重量％）
（２）マイクロクリスタリンワックス ２．０
（３）セチルアルコール ３．０
（４）高重合メチルポリシロキサン ２．０
（５）メチルポリシロキサン ５．０
（６）ポリ（オキシエチレン・オキシプロピレン）
メチルポリシロキサン共重合体 １．０
（７）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（８）１，３−ブチレングリコール ７．５
（９）アルギニン ０．７
（１０）精製水 ７１．６
（１１）テツホシダ抽出物［調製方法１］ ２．０
（１２）ミヤマワラビ抽出物［調製方法１］ ２．０
（１３）香料 ０．１
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解後する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を７５℃にて加熱溶解し、前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）〜（１３）の成分を加え、均一に混合する。
【００４２】
［実施例１８］入浴剤
（１）香料 ０．３（重量％）
（２）テツホシダ抽出物［調製方法１］ ０．５
（３）ゲジゲジシダ抽出物［調製方法３］ ０．５
（４）炭酸水素ナトリウム ５０．０
（５）硫酸ナトリウム ４８．７
製法：（１）〜（５）を均一に混合する。
【００４３】
本発明の実施例１〜５について使用試験を行い、シワ，タルミ，肌のハリの改善効果を評価した。その際、実施例１において、配合したテツホシダ抽出物を精製水に代替し、比較例１として同時に使用試験を行った。
【００４４】
各試料について、シワ，タルミ，肌のハリの低下といった症状が顕著に認められる５０〜６０才代の男女パネラー各２０名を一群とし、ブラインドにて１カ月間使用させ、使用前後の皮膚状態の変化を観察して評価した。皮膚症状の指標として、シワ，タルミ，肌のハリについて、「改善」，「やや改善」，「変化なし」の三段階で評価し、表４に各評価を得たパネラー数にて示した。
【００４５】
【表４】
表４より、シワ，タルミ，肌のハリについて、ヒメシダ属（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ Ｌ．）植物抽出物を含有しない比較例使用群においては、半数以上のパネラーに改善が認められなかったが、ヒメシダ属（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ Ｌ．）植物抽出物を配合した実施例使用群においては、６割以上のパネラーに明確な改善が認められた。
【００４７】
以上のように、本発明の実施例においては、従来の比較例よりも、シワ，タルミ，肌のハリといった老化症状の改善に優れた効果を有していた。
【００４８】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明により、優れた効果を有する細胞賦活剤及び抗酸化剤を得ることが出来た。また、係る細胞賦活剤及び抗酸化剤を有効成分として配合することにより、皮膚の老化症状の防止・改善に優れた効果を有する皮膚外用剤を得ることが出来た。
Claims (4)
- ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を有効成分とする細胞賦活剤。
- ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物がテツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅｒｒｕｐｔａ (Ｗｉｌｌｄ．) Ｋ．Ｉｗａｔｓ）である請求項１記載の細胞賦活剤。
- ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物の１種または２種以上の植物の抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
- ヒメシダ科（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ）のヒメシダ属（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ）植物がテツホシダ（Ｔｈｅｌｙｐｔｅｒｉｓ ｉｎｔｅｒｒｕｐｔａ (Ｗｉｌｌｄ．) Ｋ．Ｉｗａｔｓ）である請求項３記載の抗酸化剤。
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