JP3527679B2 - Heat royal jelly, its preparation and formulation - Google Patents
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Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、ローヤルゼリーの
熱処理により抗酸化作用が高められたヒートローヤルゼ
リーとその製法、ならびに、それを含む配合物に関す
る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a heat royal jelly having an antioxidant effect enhanced by heat treatment of royal jelly, a process for producing the same, and a composition containing the same.
【０００２】[0002]
【従来の技術】ローヤルゼリーは、これまでの研究によ
り、抗菌作用、抗腫瘍作用、糖尿病抑制作用、性ホルモ
ン作用、血流増加作用、体重増加作用、成長促進作用、
放射線障害に対する延命効果および動脈硬化抑制作用等
の多岐にわたる薬理作用を有することが明らかになって
おり、栄養補助食品、化粧品、医薬部外品、医薬品等に
幅広く利用されている。そして、健康食品として長年に
わたり多くの人々に利用され、その生体への安全性の高
さは実証されている。2. Description of the Related Art Royal jelly has been studied so far, and antibacterial action, antitumor action, diabetes suppression action, sex hormone action, blood flow increasing action, weight increasing action, growth promoting action,
It has been clarified that it has various pharmacological actions such as a life prolonging effect against radiation damage and an arteriosclerosis suppressing action, and is widely used in dietary supplements, cosmetics, quasi drugs, pharmaceuticals and the like. It has been used as a health food by many people for many years, and its high safety to living organisms has been demonstrated.
【０００３】ローヤルゼリーに含まれる様々な物質（各
種タンパク質、脂質、糖質、ミネラル、ビタミン類な
ど）、特に特異有効成分（活性栄養素）について、上記
の薬理作用との関係などが広く研究されている。これら
の成分は、光、熱、酸素によって変質しやすいため、ロ
ーヤルゼリーを採取後、直ちに冷凍保存、冷凍乾燥する
ことにより、その保存安定性の改良が図られている。[0003] Various substances contained in royal jelly (various proteins, lipids, sugars, minerals, vitamins, etc.), especially specific active ingredients (active nutrients), have been widely studied in relation to the above-mentioned pharmacological actions. . Since these components are easily deteriorated by light, heat and oxygen, the storage stability of the royal jelly has been improved by immediately storing it in frozen storage and freeze-drying it.
【０００４】一方、活性酸素による生体内の酸化ストレ
スは、種々の病態をはじめ、炎症、癌、老化に関連する
ことを示す多くの臨床報告がある。生体内で発生する活
性酸素には、三重項酸素（３O２）の１、２、３電子還
元分子種であるスーパーオキシドアニオンラジカル（O
２ −）、過酸化水素（H２O２）、ヒドロキシラジカル
（・OH）およびその励起状態である一重項酸素
（１O２）がある。また、細胞膜の脂質過酸化反応で生
じるアルコキシラジカル,ペルオキシラジカルが知られ
ている。On the other hand, there are many clinical reports showing that oxidative stress in the living body due to active oxygen is associated with various pathological conditions, inflammation, cancer and aging. The active oxygen generated in the living body includes superoxide anion radical (O, which is a 1,2,3 electron reducing molecular species of triplet oxygen ( 3 O 2 ).
2 -), hydrogen peroxide (H 2 O 2), there is a hydroxy radical (· OH) and singlet oxygen which is the excited state (1 O 2). In addition, alkoxy radicals and peroxy radicals that are generated by lipid peroxidation of cell membranes are known.
【０００５】これらの活性酸素に対して、生体内にもそ
の防御機構が備えられている。たとえば、スーパーオキ
シドアニオンラジカルに対して不均化反応を行う酵素の
スーパーオキシドジスムターゼがあり、これを化学的修
飾して生体内の活性酸素による障害に対する治療剤を開
発することが試みられてきた。A defense mechanism against these active oxygen is provided in the living body. For example, there is superoxide dismutase, which is an enzyme that disproportionates to superoxide anion radicals, and it has been attempted to chemically modify this to develop a therapeutic agent for damage caused by active oxygen in the living body.
【０００６】しかしながら、そうした治療剤の製造法、
原材料の入手には制限があり、生体内での代謝性や、さ
らに安全性に問題が残る。またビタミンＥ、ビタミンＣ
に抗酸化性があるので、そのものか又はその化学修飾し
た合成品が試験されてきたが、生体を用いた試験では安
定性や効果の点で十分でないなどの問題点が残る。However, a method for producing such a therapeutic agent,
There is a limit to the availability of raw materials, and there remains a problem in terms of metabolism in vivo and safety. Also vitamin E, vitamin C
Since it has antioxidative properties, it or its chemically modified synthetic products have been tested, but problems such as insufficient stability and effect in tests using living bodies remain.
【０００７】[0007]
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記に鑑み
てなされたものであり、生体内でより安全で、かつ、よ
り効果の高い抗酸化剤を開発することを目的とする。The present invention has been made in view of the above, and an object thereof is to develop an antioxidant which is safer and more effective in vivo.
【０００８】[0008]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成するために鋭意検討を重ねた結果、従来、熱を加
えることは安定性の観点から禁忌とされていたローヤル
ゼリーに対して熱処理を施すことにより、従来のローヤ
ルゼリーによりも高い抗酸化作用を有するヒートローヤ
ルゼリーが得られることを見いだし、本発明を完成させ
るに至った。Means for Solving the Problems As a result of intensive studies to achieve the above object, the present inventors have found that royal jelly, which was conventionally contraindicated from the viewpoint of stability, is not suitable for applying heat. It was found that a heat royal jelly having a higher antioxidant effect than that of the conventional royal jelly can be obtained by heat treatment, and the present invention has been completed.
【０００９】すなわち、本発明に係るヒートローヤルゼ
リーは、ローヤルゼリーを熱処理することにより抗酸化
作用が高められていることを特徴とするものである。That is, the heat royal jelly according to the present invention is characterized in that the antioxidant action is enhanced by heat-treating the royal jelly.
【００１０】本発明に係るヒートローヤルゼリーの製法
は、ローヤルゼリーを熱処理することを特徴とするもの
である。The manufacturing method of the heat royal jelly according to the present invention is characterized by heat treating the royal jelly.
【００１１】さらに、本発明に係るヒートローヤルゼリ
ー配合物は、ローヤルゼリーを熱処理することにより抗
酸化作用が高められたヒートローヤルゼリーを含むこと
を特徴とするものである。Further, the heat royal jelly composition according to the present invention is characterized in that it contains heat royal jelly having an enhanced antioxidant effect by heat-treating the royal jelly.
【００１２】本発明のヒートローヤルゼリーは、熱処理
することにより抗酸化作用が高められているので、生体
内でその抗酸化機能を効果的に発揮することができ、そ
の配合物は、生体内酸化ストレスまたは生体内酸化的傷
害によって引き起こされる種々の病態の予防および治療
剤として有用である。The heat royal jelly of the present invention has an enhanced antioxidative effect by heat treatment, so that it can effectively exhibit its antioxidative function in the living body, and the composition thereof has an in vivo oxidative stress. Alternatively, it is useful as a prophylactic and therapeutic agent for various pathological conditions caused by in vivo oxidative damage.
【００１３】[0013]
【発明の実施の形態】本発明におけるローヤルゼリーと
しては、特に限定されることはなく、生ローヤルゼリ
ー、または、生ローヤルゼリーを凍結真空乾燥した乾燥
ローヤルゼリー、を用いることができ、液状、粉末状、
タブレット状などの各種形態のものを用いることができ
る。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The royal jelly in the present invention is not particularly limited, and raw royal jelly or dried royal jelly obtained by freeze-drying royal royal jelly can be used, which is liquid, powdery,
Various forms such as tablets can be used.
【００１４】熱処理温度は、特に限定されることはな
く、抗酸化作用を高めることが可能であり且つ生理活性
が損なわれない範囲の温度下で行えばよい。具体的に
は、約５０〜約１１０℃程度で処理することが好まし
く、さらに好ましくは約６０〜約１００℃程度の温度で
処理される。The heat treatment temperature is not particularly limited, and may be carried out at a temperature within the range where the antioxidant action can be enhanced and the physiological activity is not impaired. Specifically, the treatment is preferably performed at about 50 to about 110 ° C, more preferably about 60 to about 100 ° C.
【００１５】また、処理時間についても、特に限定され
ることはなく、ある一定時間までは熱処理時間に伴いヒ
ートローヤルゼリーの抗酸化作用が向上することが認め
られているため、目的とする抗酸化作用レベルに対応す
る時間を任意に設定することができる。また、温度が低
ければそれだけ所定レベルの抗酸化作用に達するまでの
時間がより長く必要となるため、処理温度との関係で処
理時間を定めることが望ましい。たとえば、１００℃で
処理した場合は、１時間までは時間の経過と共にその抗
酸化作用は向上し、１時間を過ぎるとそれ以上の作用の
増加は認められないことが判明している。The treatment time is also not particularly limited, and it has been confirmed that the heat royal jelly has an improved antioxidant action with the heat treatment time up to a certain period of time. The time corresponding to the level can be set arbitrarily. Further, the lower the temperature, the longer it takes to reach a predetermined level of antioxidative action, so it is desirable to determine the treatment time in relation to the treatment temperature. For example, it has been found that when treated at 100 ° C., its antioxidant effect is improved with the lapse of time up to 1 hour, and no further increase in the effect is observed after 1 hour.
【００１６】ヒートローヤルゼリーの配合物とは、栄養
補助食品、健康食品、化粧品、医薬部外品、医薬品等で
あり、特に限定されることはない。それらの配合物の適
用法についても、経口投与、皮下投与など特に限定され
ることはなく、通常通り飲食あるいは皮膚へ塗布すれば
よい。The mixture of heat royal jelly is a dietary supplement, a health food, a cosmetic, a quasi drug, a drug or the like, and is not particularly limited. The application method of these formulations is not particularly limited, and oral administration, subcutaneous administration, etc. may be used, and they may be eaten or eaten or applied to the skin as usual.
【００１７】[0017]
【実施例】以下に、実施例により本発明をさらに詳しく
説明するが、本発明の技術思想を逸脱しない限り、本発
明はこれらの実施例に限定されるものではない。The present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the present invention is not limited to these examples without departing from the technical idea of the present invention.
【００１８】（１）ヒートローヤルゼリーの調製法
ローヤルゼリー（以下、「ＲＪ」と記す）としては、生
ローヤルゼリーを凍結真空乾燥した試料を用い、これに
水浴上所定温度・所定時間の熱処理を加え、ヒートロー
ヤルゼリー（以下、「ＨＲＪ」と記す）とした。(1) Method for preparing heat royal jelly As royal jelly (hereinafter referred to as "RJ"), a sample obtained by freeze-vacuating fresh royal jelly is used, and heat-treated at a predetermined temperature and for a predetermined time on a water bath. Royal jelly (hereinafter referred to as "HRJ") was used.
【００１９】１ｇのＨＲＪを０．２ＭのＮａＯＨ６ｍｌ
で溶解し、０．２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）４ｍｌ
を加えた。これを、同緩衝液を用いて所定倍率になるま
で希釈して、以下の抗酸化試験に用いた。1 g of HRJ was added to 6 ml of 0.2 M NaOH.
Dissolve in 0.2 M phosphate buffer (pH 7.4) 4 ml
Was added. This was diluted with the same buffer solution to a predetermined magnification and used in the following antioxidant test.
【００２０】（２）ＨＲＪの抗酸化作用
［実施例１］ＤＰＰＨラジカル消去活性
ＲＪを１００℃で２０分間、４０分間、６０分間、１８
０分間それぞれ熱処理して、ＤＰＰＨラジカル消去活性
からその抗酸化作用を評価した。ＨＲＪ試料は、５倍希
釈のものを用いた。(2) Antioxidant action of HRJ [Example 1] DPPH radical scavenging activity RJ was conducted at 100 ° C for 20 minutes, 40 minutes, 60 minutes, 18 hours.
Each was heat-treated for 0 minutes, and its antioxidant effect was evaluated from the DPPH radical scavenging activity. The HRJ sample used was a 5-fold dilution.
【００２１】このＤＰＰＨラジカルを用いる方法は、活
性酸素と同じく酸化作用の強いラジカルであるＤＰＰＨ
（1,1-Diphenyl-2-picryl hydrazyl）を用い、これが抗
酸化作用を有する物質と反応した結果ＤＰＰＨの吸光度
（５１７ｎｍ）がどの程度消失するかを分光光度計で測
定することにより、試料の抗酸化力を測定するものであ
る。すなわち、試料の抗酸化力が強い試料ほど、ＤＰＰ
Ｈの色の消失が著しい。The method using this DPPH radical is DPPH which is a radical having a strong oxidizing action like active oxygen.
By using (1,1-Diphenyl-2-picryl hydrazyl) and measuring the extent to which DPPH absorbance (517 nm) disappears as a result of reaction with a substance having an antioxidative effect, a spectrophotometer is used. It measures the antioxidant power. That is, the stronger the antioxidant power of the sample, the more the DPP
The color H disappears significantly.
【００２２】実際の評価試験は、０．０５Ｍトリス塩酸
緩衝液（ｐＨ７．４）１．９５ｍｌに、０．１ｍＭのＤ
ＰＰＨ１ｍｌと試料のＨＲＪ０．０５ｍｌを加えた反応
系で行った。反応液は遠心分離して、その上清画分を８
分後に測定した。ＤＰＰＨラジカル消去活性は、次の式
のＤＰＰＨ残存率（％）により求めた。The actual evaluation test was conducted by adding 1.95 ml of 0.05M Tris-HCl buffer (pH 7.4) to 0.1 mM D
It was carried out in a reaction system in which 1 ml of PPH and 0.05 ml of HRJ as a sample were added. The reaction solution is centrifuged and the supernatant fraction is separated into 8
Measured after a minute. The DPPH radical scavenging activity was determined by the DPPH residual rate (%) of the following formula.
【００２３】 ＤＰＰＨ残存率（％）＝（Ａ１／Ａ２）×１００ Ａ１：ＨＲＪ添加後の吸光度 Ａ２：ＨＲＪ添加前の吸光度 結果は以下のとおりである。[0023] DPPH residual rate (%) = (A1 / A2) × 100 A1: Absorbance after adding HRJ A2: Absorbance before adding HRJ The results are as follows.
【００２４】[0024]
【表１】
ＨＲＪのＤＰＰＨラジカル抑制と熱処理時間
熱処理時間／分（１００℃） ＤＰＰＨラジカル抑制率（％）
０ ４０．０
２０ ６５．１
４０ ７０．５
６０ ８５．６
１８０ ８６．５
表１の結果から、熱処理時間が長いほど、ＤＰＰＨラジ
カルの抑制率は高く、一方で１時間以上の処理を行って
も抑制率は変わらないことが判明した。したがって、１
００℃の熱処理では、抗酸化作用がより強いＨＲＪの調
製には、少なくとも６０分以上の熱処理時間が必要であ
る。[Table 1] HRJ DPPH radical suppression and heat treatment time Heat treatment time / min (100 ° C) DPPH radical suppression rate (%) 0 40.0 20 65.1 40 70.5 60 85.6 180 86.5 Table 1 From the results, it was found that the longer the heat treatment time, the higher the inhibition rate of DPPH radicals, while the inhibition rate did not change even after the treatment for 1 hour or longer. Therefore, 1
The heat treatment at 00 ° C. requires a heat treatment time of at least 60 minutes or more to prepare HRJ having a stronger antioxidant effect.
【００２５】次に、１００℃／１時間処理のＨＲＪを用
い、１〜１６０倍までの種々の希釈倍率の試料を調製し
て、実施例１と同様にＤＰＰＨラジカル抑制率を測定し
た。コントロールとして、熱処理しないしていないＲＪ
（１、２、４、８倍）を用いて同様に測定した。Next, samples at various dilution ratios from 1 to 160 times were prepared using HRJ treated at 100 ° C. for 1 hour, and the DPPH radical inhibition rate was measured in the same manner as in Example 1. As a control, RJ without heat treatment
The same measurement was performed using (1, 2, 4, 8 times).
【００２６】結果を、表２に示す。The results are shown in Table 2.
【００２７】[0027]
【表２】
ＨＲＪのＤＰＰＨラジカル抑制と試料の希釈倍率
ＨＲＪ 希釈倍率 ＤＰＰＨラジカル抑制率（％）
１ ８７．９
５ ８５．６
１０ ６１．９
２０ ４０．０
４０ ２４．８
８０ １６．８
１６０ ９．８
ＲＪのＤＰＰＨラジカル抑制と試料の希釈倍率
ＲＪ 希釈倍率 ＤＰＰＨラジカル抑制率（％）
１ ７５
２ ６６
４ ４５
８ ２１
表２の結果から、希釈倍率１で最も強いＤＰＰＨラジカ
ル消去活性が認められ、希釈倍率が大きくなるに伴いそ
の活性は弱くなることが判明した。すなわち、濃度依存
的にラジカル消去活性が示された。また、ＲＪと比べ、
ＨＲＪのラジカル消去活性は有意に高いことが判明し
た。[Table 2] HRJ DPPH radical inhibition and sample dilution rate HRJ dilution rate DPPH radical inhibition rate (%) 1 87.9 5 85.6 10 61.9 20 40.0 40 24.8 80 16.8 160 9 .8 RPH DPPH radical suppression and sample dilution ratio RJ dilution ratio DPPH radical suppression rate (%) 1 75 2 66 4 45 8 21 From the results of Table 2, the strongest DPPH radical scavenging activity was observed at a dilution ratio of 1, It was found that the activity becomes weaker as the dilution ratio becomes larger. That is, the radical scavenging activity was shown to depend on the concentration. Also, compared to RJ,
It was found that the radical scavenging activity of HRJ was significantly high.
【００２８】［実施例２］ＥＳＲによるスーパーオキシ
ドアニオンラジカル消去活性
本方法は、生体内のスーパーオキシドアニオンラジカル
生成系のキサンチン−キサンチンオキシダーゼ系より発
生させたスーパーオキシドアニオンラジカルをスピント
ラップ剤のＤＭＰＯ（5,5-Dimethyl-1-pyrroline-N-oxi
de）で捕捉して、得られたアダクトをＥＳＲ（電子スピ
ン共鳴装置、日本電子製、ＪＥＳ−ＦＲ３０）で検出す
ることにより行われる。このＥＳＲシグナルに対する、
ＨＲＪを含む系でのシグナルの減衰から、ラジカル消去
活性を評価した。[Example 2] Superoxide anion radical scavenging activity by ESR In this method, superoxide anion radicals generated from a xanthine-xanthine oxidase system, which is a superoxide anion radical producing system in vivo, are used as spin trap agents DMPO ( 5,5-Dimethyl-1-pyrroline-N-oxi
de), and the obtained adduct is detected by ESR (electron spin resonance device, JES-FR30, manufactured by JEOL Ltd.). For this ESR signal,
The radical scavenging activity was evaluated from the signal decay in the system containing HRJ.
【００２９】実際の評価試験は、０．２Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ７．４）４７μｌ、９ＭのＤＭＰＯ３μｌ、ヒポ
キサンチン５ｍＭ、ＨＲＪ（１００℃／１時間処理）、
１．０Ｕ／ｍｌキサンチンオキシダーゼ６０μｌを添加
した反応系で測定した。コントロールとして、ＨＲＪの
溶解・希釈に用いた上記緩衝液を試料の代わりに用いて
測定した。An actual evaluation test was carried out by using 47 μl of 0.2 M phosphate buffer (pH 7.4), 3 μl of 9 M DMPO, 5 mM hypoxanthine, HRJ (100 ° C./1 hour treatment),
It was measured in a reaction system to which 60 μl of 1.0 U / ml xanthine oxidase was added. As a control, the above buffer solution used for dissolution / dilution of HRJ was used instead of the sample for measurement.
【００３０】スーパーオキシドアニオンラジカル残存率
（％）＝（Ｂ１／Ｂ２）×１００
Ｂ１：ＨＲＪ添加後のＥＳＲシグナルの高さ
Ｂ２：ＨＲＪ添加前のＥＳＲシグナルの高さ
結果を図１に示す。Superoxide anion radical residual rate (%) = (B1 / B2) × 100 B1: Height of ESR signal after addition of HRJ B2: Height of ESR signal before addition of HRJ The results are shown in FIG.
【００３１】また、各種希釈倍率（１、２、４、８、２
０倍）でのスーパーオキシドアニオンラジカル抑制率を
ＲＪと比較した結果を表３に示す。Various dilution ratios (1, 2, 4, 8, 2)
Table 3 shows the results of comparing the superoxide anion radical inhibition rate at 0 times) with RJ.
【００３２】[0032]
【表３】 ＨＲＪとＲＪのスーパーオキシドアニオンラジカル抑制 ──────────────────────────────────── 希釈率 スーパーオキシドアニオンラジカル抑制率（％） ＨＲＪ ＲＪ ──────────────────────────────────── １ ７４ ４４ ２ ６０ ２２ ４ ５２ １７ ８ ４３ − ２０ １９ − ────────────────────────────────────[Table 3] HRJ and RJ superoxide anion radical suppression ──────────────────────────────────── Dilution rate Superoxide anion radical inhibition rate (%) HRJ RJ ──────────────────────────────────── 1 74 44 2 60 22 4 52 17 843- 20 19- ────────────────────────────────────
【００３３】［実施例３］白血球由来のラジカル消去活
性
白血球は、フォルボルミリステート（ＰＭＡ）の刺激に
よりラジカルを生成する。そこで、この方法は、この生
成したラジカルを増感剤のルミノールと反応させ、その
化学発光を発光検出器（東北電子製、ＣＬＤ−１１０）
で経時的に測定することにより行われる。同系にラジカ
ル消去作用を有する試料が存在すると、発光強度の減衰
が見られる。Example 3 Leukocyte-Derived Radical-Scavenging Activity Leukocytes produce radicals upon stimulation with forbolmyristate (PMA). Therefore, in this method, the generated radical is reacted with sensitizer luminol, and the chemiluminescence thereof is detected by a luminescence detector (CLD-110 manufactured by Tohoku Denshi Co., Ltd.).
It is performed by measuring with time. When a sample having a radical scavenging effect is present in the same system, the emission intensity is attenuated.
【００３４】実際の評価試験は、ハンクス緩衝液（ｐＨ
７．４）にラット血液から分離した白血球（１×１０８
個／ｍｌ）、０．５６ｍＭルミノール、ＨＲＪ試料（１
００℃／１時間処理）と１００ｍＭのＰＭＡを加え、こ
れらを含む反応液について行った。コントロールとして
は、ＨＲＪの溶解・希釈に用いた上記緩衝液を試料の代
わりに用いた。The actual evaluation test is performed in Hanks buffer (pH
7.4) white blood cells separated from rat blood (1 × 10 8
/ Ml), 0.56 mM luminol, HRJ sample (1
(00 ° C./1 hour treatment) and 100 mM PMA were added, and the reaction liquid containing them was performed. As a control, the above buffer solution used for dissolving / diluting HRJ was used instead of the sample.
【００３５】化学発光抑制率（％）＝｛１−（Ｃ１／Ｃ
２）｝×１００
Ｃ１：ＨＲＪ添加後の化学発光量（フォトン）
Ｃ２：ＨＲＪ添加前の化学発光量（フォトン）
１倍希釈のＨＲＪとコントロールの化学発光の結果を図
２に示す。Chemiluminescence suppression rate (%) = {1- (C1 / C
2)} × 100 C1: Chemiluminescence amount after addition of HRJ (photon) C2: Chemiluminescence amount before addition of HRJ (photon) The results of chemiluminescence of 1-fold diluted HRJ and control are shown in FIG.
【００３６】また、表４には、各種希釈倍率（１、１
０、５０倍）での抑制率をＲＪと比較した結果を示す。Table 4 shows various dilution ratios (1, 1).
The result of comparing the inhibition rate at 0, 50 times) with RJ is shown.
【００３７】[0037]
【表４】
ＨＲＪとＲＪによる白血球由来ラジカルの化学発光抑制作用
希釈率 化学発光抑制率 （％）
ＨＲＪ ＲＪ
１ ９４．３ ８３．４
１０ ７４．９ ５５．５
５０ ４２．３ ３１．０
図２にみるように、ラジカルによる白血球での発光量の
増加は、ＨＲＪにより抑制されている。すなわち、細胞
で生じるラジカルに対してもＨＲＪは抑制作用を有する
ことが示された。また、表４から、その抑制率には、こ
れまでに示したラジカル抑制と同様に、濃度依存性があ
り、ＨＲＪの抑制率はＲＪと比べて有意に高いことが判
明した。[Table 4] Chemiluminescence inhibition effect of leukocyte-derived radicals by HRJ and RJ Dilution rate Chemiluminescence inhibition rate (%) HRJ RJ 1 94.3 83.4 10 74.9 55.5 50 42.3 31.0 Figure 2 As can be seen from the above, the increase in the amount of luminescence in white blood cells due to radicals is suppressed by HRJ. That is, it was shown that HRJ also has an inhibitory effect on radicals generated in cells. Further, it was found from Table 4 that the inhibition rate has a concentration dependency, similarly to the radical inhibition shown so far, and the inhibition rate of HRJ is significantly higher than that of RJ.
【００３８】［実施例４］アルドースリダクターゼ阻害
活性
アルドースリダクターゼは、糖尿病で増加する糖尿病指
標酵素である。この酵素の異常増加がソルビトールの異
常な蓄積、ひいては白内障などの合併症を引き起こすこ
とが知られている。したがって、この酵素阻害をするこ
とは、糖尿病による合併症を抑制する。そこで、ＲＪお
よびＨＲＪのアルドースリダクターゼ阻害活性を検討し
た。Example 4 Aldose Reductase Inhibitory Activity Aldose reductase is a diabetes index enzyme that increases in diabetes. It is known that abnormal increase of this enzyme causes abnormal accumulation of sorbitol and eventually complications such as cataract. Therefore, inhibiting this enzyme suppresses complications due to diabetes. Therefore, the aldose reductase inhibitory activity of RJ and HRJ was examined.
【００３９】０．２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．２）７４
５μｌ、グリセルアルデヒド、１．５ｍＭ ＮＡＤＰ
Ｈ、ＲＪ（熱処理なし）およびＨＲＪ（１００℃／１時
間処理）、アルドースリダクターゼ（最終濃度：５×１
０−３ユニット）５μｌを含む反応液を、２５℃で３分
間インキュベーションして、ＮＡＤＰＨ（３４０ｎｍ）
の吸光度を測定した。なお、ＲＪとＨＲＪの試料は、そ
れぞれ、５倍および１０倍希釈のものを用いた。コント
ロールとしては、ＨＲＪの溶解・希釈に用いた上記緩衝
液を試料の代わりに用いた。阻害活性率は次の式で求め
た。0.2M phosphate buffer (pH 6.2) 74
5 μl, glyceraldehyde, 1.5 mM NADP
H, RJ (no heat treatment) and HRJ (100 ° C./1 hour treatment), aldose reductase (final concentration: 5 × 1
0 -3 units) reaction solution containing 5 [mu] l, and incubated for 3 min at 25 ℃, NADPH (340nm)
The absorbance of was measured. The RJ and HRJ samples were diluted 5 times and 10 times, respectively. As a control, the above buffer solution used for dissolving / diluting HRJ was used instead of the sample. The inhibitory activity rate was calculated by the following formula.
【００４０】化学発光抑制率（％）＝｛１−（Ｄ1／Ｄ
２）｝×１００
Ｄ１：試料添加後のＮＡＤＰＨ（３４０ｎｍ）吸光度
Ｄ２：試料添加前のＮＡＤＰＨ（３４０ｎｍ）吸光度
得られた結果を、表５に示す。Chemiluminescence suppression rate (%) = {1- (D1 / D
2)} × 100 D1: NADPH (340 nm) absorbance after sample addition D2: NADPH (340 nm) absorbance before sample addition Table 5 shows the obtained results.
【００４１】[0041]
【表５】
ＨＲＪおよびＲＪによるアルドースリダクターゼ阻害活性
希釈率 アルドースリダクターゼ抑制率（％）
ＨＲＪ ＲＪ
５ ８４．７ ８１．５
１０ ７４．９ ７７．５
表５に示されるように、ＨＲＪおよびＲＪによるアルド
ースリダクターゼ阻害活性は共に高かった。この結果か
ら、本発明のＨＲＪは、従来のＲＪの持つ生理活性を損
なわずに、抗酸化機能が高められた物質であることが明
らかである。Table 5 Aldose reductase inhibitory activity dilution rate by HRJ and RJ Aldose reductase inhibition rate (%) HRJ RJ 5 84.7 81.5 10 74.9 77.5 As shown in Table 5, aldoses by HRJ and RJ The reductase inhibitory activities were both high. From this result, it is clear that the HRJ of the present invention is a substance having an enhanced antioxidant function without impairing the physiological activity of the conventional RJ.
【００４２】[0042]
【発明の効果】本発明のヒートローヤルゼリーは、熱処
理が加えられているため、これまでのローヤルゼリーの
薬効（抗腫瘍作用、抗糖尿病作用、抗動脈硬化作用、抗
菌作用等）をそのまま有しつつ、新たに、高い抗酸化作
用を有するものとなっている。したがって、これを配合
した各種配合物は、生体内酸化的障害によって引き起こ
される種々の病態の予防および治療に有用である。Since the heat royal jelly of the present invention has been subjected to heat treatment, it has the same drug efficacy (antitumor action, antidiabetic action, antiarteriosclerotic action, antibacterial action, etc.) of the conventional royal jelly as it is, It has a high anti-oxidant effect. Therefore, various formulations containing the same are useful for the prevention and treatment of various pathological conditions caused by oxidative disorders in vivo.
【図１】図１は、本発明のヒートローヤルゼリーのスー
パーオキシドアニオンラジカル消去作用を示す、ＥＳＲ
のスペクトルである。FIG. 1 is an ESR showing the superoxide anion radical scavenging action of the heat royal jelly of the present invention.
Is the spectrum of.
【図２】図２は、本発明のヒートローヤルゼリーによる
白血球由来ラジカルの化学発光抑制作用を示したグラフ
である。FIG. 2 is a graph showing the chemiluminescence suppressing action of leukocyte-derived radicals by the heat royal jelly of the present invention.
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 31/04 Ａ６１Ｐ 31/04 35/00 35/00 (56)参考文献 特開 平５−23120（ＪＰ，Ａ) 特開 平４−200356（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−83551（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−174642（ＪＰ，Ａ) 特開2000−232856（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) A23L 1/076 A23L 1/30 A61K 35/64 Continuation of front page (51) Int.Cl. 7 identification code FI A61P 31/04 A61P 31/04 35/00 35/00 (56) References JP-A-5-23120 (JP, A) JP-A-4- 200356 (JP, A) JP-A-3-83551 (JP, A) JP-A-2-174642 (JP, A) JP-A-2000-232856 (JP, A) (58) Fields investigated (Int. Cl. 7) , DB name) A23L 1/076 A23L 1/30 A61K 35/64
Claims (3)
６以下の酸性条件下での熱処理を除く。）することによ
り抗酸化作用が高められていることを特徴とするヒート
ローヤルゼリー。1. Heat-treating royal jelly (however, pH
Excluding heat treatment under acidic conditions of 6 or less. The heat royal jelly is characterized by having an enhanced antioxidative effect.
６以下の酸性条件下での熱処理を除く。）することを特
徴とするヒートローヤルゼリーの製造方法。2. Heat treatment of royal jelly (provided that pH is
Excluding heat treatment under acidic conditions of 6 or less. ) A method for producing a heat royal jelly.
６以下の酸性条件下での熱処理を除く。）することによ
り抗酸化作用が高められたヒートローヤルゼリーを含む
ことを特徴とするヒートローヤルゼリー配合物。3. Heat treatment of royal jelly (provided that pH is
Excluding heat treatment under acidic conditions of 6 or less. And a heat royal jelly having an enhanced antioxidant effect.
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