JP3438501B2 - Microorganism, method for decomposing acrylamide monomer, method for treating industrial wastewater, and method for decomposing acrylamide monomer in acrylamide-based polymer product - Google Patents
Microorganism, method for decomposing acrylamide monomer, method for treating industrial wastewater, and method for decomposing acrylamide monomer in acrylamide-based polymer productInfo
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Description
【0001】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、新規な微生物、この微
生物を利用したアクリルアミドモノマーの分解方法、そ
の分解方法を利用した工業排水の処理方法及びアクリル
アミド系ポリマーの精製方法に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a novel microorganism, a method for decomposing an acrylamide monomer using the microorganism, a method for treating industrial wastewater using the decomposing method, and a method for purifying an acrylamide polymer.
【0002】[0002]
【従来の技術】近年、アクリルアミド系ポリマーは排水
処理の処理剤、老朽化した油田の石油3次回収剤及び製
紙分野での紙力増強剤、歩留り向上剤、凝集剤などに広
く使用されており、その使用量は増加の一途を辿ってい
る。特に、製紙工業で用いられているアクリルアミド系
の紙力増強剤は、紙力増強効果のほかに濾水性向上効果
や歩留り向上効果を有するため、重要な薬品として製紙
工程に不可欠であり、その使用範囲はさらに広まり、そ
の性能の改善もなされている。このようなアクリルアミ
ド系ポリマーは、原料にアクリルアミドモノマーを用い
た重合により合成されているが、その製造後得られるア
クリルアミド系ポリマーには未反応のアクリルアミドモ
ノマーの残存は避けられない。アクリルアミドモノマー
は、動物の神経系に障害を与えると言われており、これ
が残存するアクリルアミド系ポリマーの関連製品を製
造、使用等をする作業者等に悪影響を及ぼさないように
するために、アクリルアミド系ポリマーの製造に際して
はその残存モノマーを低減させる対策として、重合時間
を長くしたり、重合開始剤量を多くして重合率を高める
ことが行われている。このような対策は、アクリルアミ
ド系ポリマーの製造が煩雑になる上に、製造コストが上
昇するため、より適切な処理方法が望まれている。特
に、アクリルアミドモノマーや、アクリルアミド系ポリ
マーの製造工場、あるいはアクリルアミド系ポリマーを
使用する工場の工業排水中のアクリルアミドモノマーを
効率よく分解する方法の開発が望まれている。2. Description of the Related Art In recent years, acrylamide polymers have been widely used as a treatment agent for wastewater treatment, a tertiary oil recovery agent for aged oil fields, a paper strength enhancer, a yield improver, and a coagulant in the papermaking field. , Its usage is increasing steadily. In particular, the acrylamide type paper strength enhancer used in the paper manufacturing industry has an effect of improving drainage and a yield in addition to the effect of increasing the paper strength, and thus is essential as an important chemical in the paper making process. The range has become even wider and its performance has been improved. Such an acrylamide polymer is synthesized by polymerization using an acrylamide monomer as a raw material, but unreacted acrylamide monomer remains inevitable in the acrylamide polymer obtained after its production. Acrylamide monomers are said to damage the nervous system of animals, and in order to prevent them from adversely affecting workers who manufacture and use related products of residual acrylamide polymers, acrylamide monomers are used. In the production of polymers, as a measure for reducing the amount of residual monomers, it has been attempted to lengthen the polymerization time or increase the amount of the polymerization initiator to increase the polymerization rate. Such measures complicate the production of the acrylamide polymer and increase the production cost, so that a more appropriate treatment method is desired. In particular, it is desired to develop a method for efficiently decomposing acrylamide monomers in industrial wastewater of acrylamide monomers, acrylamide polymer manufacturing plants, or plants that use acrylamide polymers.
【0003】その改善策として微生物によりアクリルア
ミドモノマーを分解させる方法が提案されている。例え
ば、特開昭52−79073号公報にはブレビバクテリ
ウムアンモニアゲネスの菌株を用いるアクリルアミドモ
ノマーの分解方法が記載されている。また、特開昭52
−87289号公報にはバチルス属の菌株を用いるアク
リルアミドモノマーの分解方法、特開昭52−9447
0号公報にはブレビバクテリウム属の菌株とバチルス属
の菌株を併用するアクリルアミドモノマーの分解方法、
特開昭52−94473号公報にはブレビバクテリウム
属の菌株とシュードモナス属の菌株を併用するアクリル
アミドモノマーの分解方法、特開昭52−99281号
公報にはバチルス属の菌株とシュードモナス属の菌株を
併用するアクリルアミドモノマーの分解方法、そして特
開昭52−102489号公報にはブレビバクテリウム
属の菌株とバチルス属の菌株とシュードモナス属の菌株
を併用するアクリルアミドモノマーの分解方法がそれぞ
れ記載されている。As a countermeasure for this, a method of decomposing acrylamide monomer by a microorganism has been proposed. For example, Japanese Patent Laid-Open No. 52-79073 describes a method for decomposing acrylamide monomers using a strain of Brevibacterium ammoniagenes. In addition, JP-A-52
-87289 discloses a method for decomposing acrylamide monomers using a Bacillus strain, JP-A-52-9447.
No. 0 discloses a method for decomposing acrylamide monomer using a strain of Brevibacterium and a strain of Bacillus in combination,
Japanese Patent Application Laid-Open No. 52-94473 discloses a method for decomposing acrylamide monomers using a strain of the genus Brevibacterium and a strain of the genus Pseudomonas, and Japanese Patent Application Laid-Open No. 52-99281 discloses a strain of Bacillus and a strain of Pseudomonas. Japanese Patent Application Laid-Open No. 52-102489 describes a method for decomposing acrylamide monomers used in combination, and a method for decomposing acrylamide monomers in which strains of Brevibacterium, Bacillus and Pseudomonas are used in combination.
【0004】[0004]
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上述し
た重合時間を長くしたり、重合開始剤を多くして重合率
を高める方法の改善策として提案されたこれらの公知の
微生物によるアクリルアミドモノマーの分解方法では、
ポリアクリルアミド系ポリマーに残存するアクリルアミ
ドモノマーや、アクリルアミド系ポリマーを使用するこ
とに関連した工業排水中に残存するアクリルアミドモノ
マーを効率よく分解させることは困難である。However, these known methods for decomposing acrylamide monomers by microorganisms have been proposed as measures to improve the above-mentioned polymerization time and increase the polymerization rate by increasing the polymerization initiator. Then
It is difficult to efficiently decompose the acrylamide monomer remaining in the polyacrylamide polymer and the acrylamide monomer remaining in the industrial wastewater associated with the use of the acrylamide polymer.
【0005】本発明の第1の目的は、新規な微生物を提
供することにある。本発明の第2の目的は、新規な微生
物を用いたアクリルアミドモノマーの分解方法を提供す
ることにある。本発明の第3の目的は、新規な微生物を
用いてアクリルアミド系ポリマーを使用することに関連
した工業排水中のアクリルアミドモノマーを分解し除去
する工業排水の処理方法を提供することにある。本発明
の第4の目的は、新規な微生物を用いてアクリルアミド
系ポリマーを含有するアクリルアミド系ポリマー製品に
残存するアクリルアミドモノマーを分解し除去するアク
リルアミド系ポリマー製品中のアクリルアミドモノマー
の分解方法を提供することにある。本発明の第5の目的
は、上記第2〜4の目的を高効率、簡単、低コストで実
現することにある。The first object of the present invention is to provide a novel microorganism. A second object of the present invention is to provide a method for decomposing acrylamide monomers using a novel microorganism. A third object of the present invention is to provide a method for treating industrial wastewater by decomposing and removing acrylamide monomer in industrial wastewater, which is related to the use of acrylamide polymer using a novel microorganism. A fourth object of the present invention is to provide a method for decomposing acrylamide monomer in an acrylamide polymer product by decomposing and removing the acrylamide monomer remaining in the acrylamide polymer product containing the acrylamide polymer using a novel microorganism. It is in. A fifth object of the present invention is to realize the above-mentioned second to fourth objects with high efficiency, simplicity and low cost.
【0006】[0006]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、アクリル
アミドモノマーを炭素源及び窒素源として増殖可能な微
生物、すなわちアクリルアミドモノマーの分解能を有す
る微生物を広く自然界において探索した結果、岡山県の
土壌より分離し、同定したシュードモナス・スピーシズ
No.0351AM(Pseudomonas s
p.No.0351AM)がアクリルアミドモノマーを
分解する能力に優れていることを見出し、本発明を完成
するに到った。すなわち、本発明は、上記課題を解決す
るために、(1)、アクリルアミドモノマーの分解能力
を有するシュードモナス・スピーシズ No.0351
AM(Pseudomonas sp.No.0351
AM)である微生物を提供するものである。また、本発
明は、(2)、シュードモナス・スピーシズ No.0
351AM(Pseudomonas sp.No.0
351AM)を用いてアクリルアミドモノマーを分解す
るアクリルアミドモノマーの分解方法、(3)、シュー
ドモナス・スピーシズ No.0351AM(Pseu
domonas sp.No.0351AM)を用いて
工業排水中に含有されるアクリルアミドモノマーを分解
する工業排水の処理方法、(4)、アクリルアミドモノ
マーを含有するモノマーから合成したアクリルアミド系
ポリマーを含有するアクリルアミド系ポリマー製品にお
いて、シュードモナス・スピーシズ No.0351A
M(Pseudomonas sp.No.0351A
M)を用いて該アクリルアミド系ポリマーに付随して残
存するアクリルアミドモノマーを分解するアクリルアミ
ド系ポリマー製品中のアクリルアミドモノマーの分解方
法、(5)、アクリルアミド系ポリマー製品がアクリア
ミドモノマーを含有するアクリルアミドモノマー類から
合成したアクリルアミド系ポリマーからなる上記(4)
のアクリルアミド系ポリマー製品中のアクリルアミドモ
ノマーの分解方法、(6)、アクリルアミド系ポリマー
がアクリルアミドモノマーと、他のビニル系モノマーの
少なくとも1種との共重合体である上記(4)のアクリ
ルアミド系ポリマー製品中のアクリルアミドモノマーの
分解方法、(7)、他のビニル系モノマーの少なくとも
1種がカチオン性基を有するカチオンモノマー及びアニ
オン性基を有するアニオンモノマーの少なくとも1種で
ある上記(6)のアクリルアミド系ポリマー製品中のア
クリルアミドモノマーの分解方法を提供するものであ
る。Means for Solving the Problems The present inventors extensively searched for microorganisms capable of proliferating using acrylamide monomer as a carbon source and a nitrogen source, that is, microorganisms capable of degrading acrylamide monomer, and as a result, found that the soil of Okayama Prefecture Separated and identified Pseudomonas species No. 0351AM (Pseudomonas s
p. No. It was found that (0351 AM) has an excellent ability to decompose acrylamide monomers, and has completed the present invention. That is, in order to solve the above-mentioned problems, the present invention provides (1) Pseudomonas species No. 3 having the ability to decompose acrylamide monomers. 0351
AM (Pseudomonas sp. No. 0351
AM). The present invention also relates to (2), Pseudomonas species No. 0
351AM (Pseudomonas sp. No. 0
351 AM) to decompose the acrylamide monomer, (3), Pseudomonas species No. 0351AM (Pseu
domonas sp. No. 0351AM) for decomposing acrylamide monomer contained in industrial effluent using (4), acrylamide polymer product containing acrylamide polymer synthesized from acrylamide monomer containing Pseudomonas Species No. 0351A
M (Pseudomonas sp. No. 0351A)
A method for decomposing acrylamide monomers in an acrylamide polymer product, which comprises decomposing residual acrylamide monomers associated with the acrylamide polymer by using M), (5), acrylamide monomers in which the acrylamide polymer product contains acrylamide monomers. (4) consisting of an acrylamide polymer synthesized from
Method for decomposing acrylamide monomer in acrylamide polymer product, (6), The acrylamide polymer product according to (4), wherein the acrylamide polymer is a copolymer of acrylamide monomer and at least one other vinyl monomer. Method for decomposing acrylamide monomer in (7), wherein at least one of the other vinyl-based monomers is at least one of a cationic monomer having a cationic group and an anionic monomer having an anionic group. A method for degrading acrylamide monomers in polymer products is provided.
【0007】以下に本発明を詳細に説明する。本発明に
おいて、アクリルアミド系ポリマーとは、アクリルアミ
ドモノマーを含有するアクリルアミドモノマー類から合
成されたポリマー、アクリルアミドモノマーと他のビニ
ル系モノマーの少なくとも1種とのコポリマーの少なく
とも1種をいう。「他のビニル系モノマーの少なくとも
1種類」のビニル系モノマーには、アクリルアミドモノ
マーを除くその他のアクリルアミドモノマー類(a)、
カチオン性基を有するビニルモノマー(b)、アニオン
性基を有するビニルモノマー(c)、ノニオンモノマー
(d)、架橋性モノマー(e)が含まれる。アクリルア
ミドモノマー類(a)としては、例えばメタクリルアミ
ド、N−メチル(メタ)アクリルアミド、N−エチル
(メタ)アクリルアミド、N,N−ジメチル(メタ)ア
クリルアミド、N−イソプロピル(メタ)アクリルアミ
ド、N−t−オクチル(メタ)アクリルアミド等のN置
換アクリルアミド等が例示される。これらの1種又は2
種以上を併用して使用することができる。The present invention will be described in detail below. In the present invention, the acrylamide polymer means at least one kind of polymer synthesized from acrylamide monomers containing acrylamide monomer, and copolymer of acrylamide monomer and at least one other vinyl monomer. "At least one kind of other vinyl-based monomer" vinyl-based monomer includes other acrylamide monomers (a) other than acrylamide monomer,
A vinyl monomer (b) having a cationic group, a vinyl monomer (c) having an anionic group, a nonionic monomer (d), and a crosslinkable monomer (e) are included. Examples of the acrylamide monomers (a) include methacrylamide, N-methyl (meth) acrylamide, N-ethyl (meth) acrylamide, N, N-dimethyl (meth) acrylamide, N-isopropyl (meth) acrylamide, Nt. -N-substituted acrylamides such as octyl (meth) acrylamide are exemplified. One or two of these
One or more species can be used in combination.
【0008】上記カチオン性基を有するビニルモノマー
(b)としては、例えばジメチルアミノエチル(メタ)
アクリレート、ジエチルアミノエチル(メタ)アクリレ
ート、ジメチルアミノプロピル(メタ)アクリレート、
ジエチルアミノプロピル(メタ)アクリレート、ジメチ
ルアミノプロピル(メタ)アクリルアミド、ジエチルア
ミノプロピル(メタ)アクリルアミド、アルキルジアリ
ルアミン、ジアルキルジアリルアミン、ジアリルアミ
ン、アリルアミン等の3級アミノ基、2級アミノ基、1
級アミノ基を有するビニルモノマー、これらの塩酸、硫
酸、ギ酸、酢酸などの無機酸あるいは有機酸の塩類、こ
れらの3級アミノ基を有するビニルモノマーとメチルク
ロライド、メチルブロマイド等のアルキルハライド、ベ
ンジルクロライド、ベンジルブロマイド等のアリールア
ルキルハライド、ジメチル硫酸、ジエチル硫酸、エピク
ロロヒドリン、3−クロロ−2−ヒドロキシプロピルト
リメチルアンモニウムクロライド、グリシジルトリアル
キルアンモニウムクロライド等の4級化剤との反応によ
って得られる4級アンモウム塩を含有するビニルモノマ
ー、2−ヒドロキシN,N,N,N’,N’−ペンタメ
チル−N’−〔3−{(1−オキソ−2−プロペニル)
アミノ}プロピル〕−1,3−プロパンジアミニウムジ
クロライド等が挙げられる。Examples of the vinyl monomer (b) having a cationic group include dimethylaminoethyl (meth)
Acrylate, diethylaminoethyl (meth) acrylate, dimethylaminopropyl (meth) acrylate,
Tertiary amino groups such as diethylaminopropyl (meth) acrylate, dimethylaminopropyl (meth) acrylamide, diethylaminopropyl (meth) acrylamide, alkyldiallylamine, dialkyldiallylamine, diallylamine and allylamine, secondary amino groups, 1
Vinyl monomers having a primary amino group, salts of these inorganic or organic acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid, formic acid and acetic acid, vinyl monomers having these tertiary amino groups and alkyl halides such as methyl chloride and methyl bromide, benzyl chloride , Benzyl bromide and other arylalkyl halides, dimethylsulfate, diethylsulfate, epichlorohydrin, 3-chloro-2-hydroxypropyltrimethylammonium chloride, glycidyltrialkylammonium chloride and other quaternizing agents. Vinyl monomer containing a secondary ammonium salt, 2-hydroxy N, N, N, N ', N'-pentamethyl-N'-[3-{(1-oxo-2-propenyl)
Amino} propyl] -1,3-propanediaminium dichloride and the like.
【0009】また、アニオン性基を有するビニルモノマ
ー(c)としては、1価、2価、3価、4価の不飽和カ
ルボン酸若しくはそれらの塩類、例えばアクリル酸、メ
タクリル酸、クロトン酸等の1価の不飽和カルボン酸、
マレイン酸、フマル酸、イタコン酸、ムコン酸、シトラ
コン酸等の2価の不飽和カルボン酸、ビニルスルホン
酸、スチレンスルホン酸、アリルスルホン酸、2−アク
リルアミド−2−メチルプロパンスルホン酸等の有機ス
ルホン酸若しくはこれらの各種有機酸のナトリウム塩、
カリウム塩等のアルカリ金属塩類やアンモニウム塩等、
3−ブテン−1,2,3−トリカルボン酸、4−ペンテ
ン−1,2,4−トリカルボン酸、アコニット酸、4−
ペンテン−1,2,3,4−テトラカルボン酸若しくは
それらのナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、
ビニルホスホン酸、イソプロペニルホスホン酸、1−ブ
テン−2−ホスホン酸、α−フェニルビニルホスホン酸
若しくはそれらのナトリウム塩、カリウム塩等のアルカ
リ金属塩類やアンモニウム塩等が例示され、これらの1
種を単独又は2種以上を併用して使用できる。As the vinyl monomer (c) having an anionic group, a monovalent, divalent, trivalent, or tetravalent unsaturated carboxylic acid or a salt thereof such as acrylic acid, methacrylic acid, crotonic acid, etc. Monovalent unsaturated carboxylic acid,
Divalent unsaturated carboxylic acids such as maleic acid, fumaric acid, itaconic acid, muconic acid and citraconic acid, and organic sulfones such as vinylsulfonic acid, styrenesulfonic acid, allylsulfonic acid and 2-acrylamido-2-methylpropanesulfonic acid. Acids or sodium salts of these various organic acids,
Alkali metal salts such as potassium salts and ammonium salts,
3-butene-1,2,3-tricarboxylic acid, 4-pentene-1,2,4-tricarboxylic acid, aconitic acid, 4-
Pentene-1,2,3,4-tetracarboxylic acid or their sodium salts, potassium salts, ammonium salts,
Examples thereof include vinylphosphonic acid, isopropenylphosphonic acid, 1-butene-2-phosphonic acid, α-phenylvinylphosphonic acid or their sodium salts, alkali metal salts such as potassium salts, ammonium salts and the like.
The seeds may be used alone or in combination of two or more.
【0010】上記のノニオンモノマー(d)としては、
例えば炭素数1〜8のアルコール等のアルコール類とア
クリル酸もしくはメタクリル酸とのエステル、(メタ)
アクリロニトリル、スチレン、スチレン誘導体、酢酸ビ
ニル、プロピオン酸ビニル、メチルビニルエーテル等が
例示され、これらの1種を単独又は2種以上を併用して
使用することができる。As the above nonionic monomer (d),
For example, esters of alcohols such as alcohols having 1 to 8 carbon atoms with acrylic acid or methacrylic acid, (meth)
Acrylonitrile, styrene, styrene derivatives, vinyl acetate, vinyl propionate, methyl vinyl ether, etc. are exemplified, and one of these can be used alone or in combination of two or more.
【0011】上記架橋性モノマー(e)としては、エチ
レングリコールジ(メタ)アクリレート、ジエチレング
リコールジ(メタ)アクリレート、トリエチレングリコ
ールジ(メタ)アクリレート、プロピレングリコールジ
(メタ)アクリレート等のジ(メタ)アクリレート類、
グリセリンジ(メタ)アクリレート、トリメチロールプ
ロパン・エチレンオキサイド付加物トリアクリレート、
メチレンビス(メタ)アクリルアミド、エチレンビス
(メタ)アクリルアミド、ヘキサメチレンビス(メタ)
アクリルアミド、N,N’−ビスアクリルアミド酢酸、
N,N’−ビスアクリルアミド酢酸メチル、N,N−ベ
ンジリデンビスアクリルアミド等のビス(メタ)アクリ
ルアミド類、アジピン酸ジビニル、セバシン酸ジビニル
等のジビニルエステル類、エポキシアクリレート類、ウ
レタンアクリレート類、アリル(メタ)アクリレート、
ジアリルフタレート、ジアリルマレート、ジアリルサク
シネート、ジアリルアクリルアミド、ジビニルベンゼ
ン、ジイソプロピルベンゼン、N,N−ジアリルメタク
リルアミド、N−メチロールアクリルアミド、ジアリル
ジメチルアンモニウム、ジアリルクロレンデート、グリ
シジル(メタ)アクリレート等の2官能性ビニルモノマ
ー、1,3,5−トリアクリロイルヘキサヒドロ−S−
トリアジン、トリアリルイソシアヌレート、N,N−ジ
アリルアクリルアミド、トリアリルアミン、トリアリル
トリメリテート等の3官能性ビニルモノマー、テトラメ
チロールメタンテトラアクリレート、テトラアリルピロ
メリテート、N,N,N’,N’−テトラアリル−1,
4−ジアミノブタン、テトラアリルアミン塩、テトラア
リルオキシエタン等の4官能性ビニルモノマー、テトラ
メチロールメタン−トリ−βーアジリジニルプロピオネ
ート、トリメチロールプロパン−トリ−β−アジリジニ
ルプロピオンエート、4,4’−ビス(エチレンイミン
カルボニルアミノ)ジフェニルメタン等の水溶性アジリ
ジニル化合物、(ポリ)エチレングリコールジグリシジ
ルエーテル、(ポリ)プロピレングリコールジグリシジ
ルエーテル、(ポリ)グリセリンジグリシジルエーテ
ル、(ポリ)グリセリントリグリシジルエーテル等の水
溶性の多官能エポキシ化合物、及び3−(メタ)アクリ
ロキシメチルトリメトキシシラン、3−(メタ)アクリ
ロキシプロピルジメトキシメチルシラン、3−(メタ)
アクリロキシプロピルトリメトキシシラン、3−(メ
タ)アクリロキシプロピルメチルジクロロシラン、3−
(メタ)アクリロキシオクタデシルトリアセトキシシラ
ン、3−(メタ)アクリロキシ−2,5−ジメチルヘキ
シルジアセトキシメチルシラン、3−(メタ)アクリル
アミドプロピルトリメトキシシラン、2−(メタ)アク
リルアミドエチルトリメトキシシラン、1−(メタ)ア
クリルアミドメチルトリメトキシシラン、2−(メタ)
アクリルアミド−2−メチルプロピルトリメトキシシラ
ン、2−(メタ)アクリルアミド−2−メチルエチルト
リメトキシシラン、2−(メタ)アクリルアミドイソプ
ロピルトリメトキシシラン、3−(メタ)アクリルアミ
ドプロピルトリエトキシシラン、N−(2−(メタ)ア
クリルアミドエチル)アミノプロピルトリメトキシシラ
ン、(3−(メタ)アクリルアミドプロピル)オキシプ
ロピルトリメトキシシラン、3−(N−メチル(メタ)
アクリルアミド)プロピルトリメトキシシラン、3−
((メタ)アクリルアミド−メトキシ)−3−ヒドロキ
シプロピルトリメトキシシラン、3−((メタ)アクリ
ルアミド−メトキシ)プロピルトリメトキシシラン、3
−(ビニルベンジルアミノプロピル)トリメトキシシラ
ン、ジメチル−3−(メタ)アクリルアミド−プロピル
−3−(トリメトキシシリル)−プロピルアンモニウム
クロライド、ジメチル−2−(メタ)アクリルアミド−
2−メチルプロピル−3−(トリメトキシシリル)−プ
ロピルアンモニウムクロライド、3−(メタ)アクリル
アミドプロピルメチルジメトキシシラン、3−(メタ)
アクリルアミドプロピルジメチルメトキシシラン、3−
(メタ)アクリルアミドプロピルイソブチルジメトキシ
シラン、2−(メタ)アクリルアミドプロピルイソブチ
ルジメトキシシラン、2−(メタ)アクリルアミド−2
−メチルプロピルモノクロロジメトキシシラン、2−
(メタ)アクリルアミド−2−メチルプロピルハイドロ
ジエンジメトキシシラン、3−(メタ)アクリルアミド
プロピルベンジルジエトキシシラン、3−(メタ)アク
リルアミドプロピルトリアセトキシシラン、2−(メ
タ)アクリルアミドエチルトリアセトキシシラン、4−
(メタ)アクリルアミドブチルトリアセトキシシラン、
2−(メタ)アクリルアミド−2−メチルプロピルトリ
アセトキシシラン、N−(2−(メタ)アクリルアミド
エチル)アミノプロピルトリアセトキシシラン、2−
(N−エチル(メタ)アクリルアミド)エチルトリアセ
トキシシラン、3−(メタ)アクリルアミドプロピルオ
クチルジアセトキシシラン、1−(メタ)アクリルアミ
ドメチルフェニルジアセトキシシラン、3−(メタ)ア
クリルアミドプロピルトリプロピオニロキシシラン、3
−(メタ)アクリルアミドプロピルトリ(N−メチルア
ミノエトキシ)シラン、ビニルトリクロロシラン、ビニ
ルメチルジクロロシラン、ジビニルジクロロシラン、ビ
ニルフェニルジクロロシラン、ビニルジメチルクロロシ
ラン、ビニルメチルフェニルクロロシラン、ビニルジフ
ェニルクロロシラン、ビニルトリメトキシシラン、ビニ
ルメチルジメトキシシラン、ビニルイソブチルジメトキ
シシラン、ビニルジメチルメトキシシラン、ビニルトリ
エトキシシラン、3−ビニルベンジルアミノプロピルト
リエトキシシラン、ビニルメチルジエトキシシラン、ジ
ビニルジエトキシシラン、ビニルジメチルエトキシシラ
ン、ビニルジフェニルエトキシシラン、ビニルトリイソ
プロポキシシラン、ビニルトリブトキシシラン、ビニル
ジメチルイソブトキシシラン、ビニルトリフェノキシシ
ラン、ビニルジメチル(3−アミノフェノキシ)シラ
ン、ビニルジメチル(4−アミノフェノキシ)シラン、
ビニルジメチル(3−メチル−4−クロロフェノキシ)
シラン、ビニルジメチル(2−メチル−4−クロロフェ
ノキシ)シラン、ビニルトリアセトキシシラン、ビニル
メチルジアセトキシシラン、ビニルジメチルアセトキシ
シラン等のシリコン系化合物が例示できる。Examples of the crosslinkable monomer (e) include di (meth) acrylates such as ethylene glycol di (meth) acrylate, diethylene glycol di (meth) acrylate, triethylene glycol di (meth) acrylate and propylene glycol di (meth) acrylate. Acrylates,
Glycerin di (meth) acrylate, trimethylolpropane / ethylene oxide adduct triacrylate,
Methylenebis (meth) acrylamide, ethylenebis (meth) acrylamide, hexamethylenebis (meth)
Acrylamide, N, N'-bisacrylamide acetic acid,
Bis (meth) acrylamides such as N, N′-bisacrylamide methyl acetate, N, N-benzylidene bisacrylamide, etc., divinyl esters such as divinyl adipate, divinyl sebacate, epoxy acrylates, urethane acrylates, allyl (meth) ) Acrylate,
2 such as diallyl phthalate, diallyl malate, diallyl succinate, diallyl acrylamide, divinyl benzene, diisopropyl benzene, N, N-diallyl methacrylamide, N-methylol acrylamide, diallyl dimethyl ammonium, diallyl chlorendate, glycidyl (meth) acrylate Functional vinyl monomer, 1,3,5-triacryloylhexahydro-S-
Trifunctional vinyl monomers such as triazine, triallyl isocyanurate, N, N-diallyl acrylamide, triallylamine and triallyl trimellitate, tetramethylolmethane tetraacrylate, tetraallylpyromellitate, N, N, N ′, N '-Tetraallyl-1,
4-diaminobutane, tetraallylamine salt, tetrafunctional vinyl monomer such as tetraallyloxyethane, tetramethylolmethane-tri-β-aziridinylpropionate, trimethylolpropane-tri-β-aziridinylpropionate, Water-soluble aziridinyl compounds such as 4,4′-bis (ethyleneiminecarbonylamino) diphenylmethane, (poly) ethylene glycol diglycidyl ether, (poly) propylene glycol diglycidyl ether, (poly) glycerin diglycidyl ether, (poly) glycerin Water-soluble polyfunctional epoxy compounds such as triglycidyl ether, and 3- (meth) acryloxymethyltrimethoxysilane, 3- (meth) acryloxypropyldimethoxymethylsilane, 3- (meth)
Acryloxypropyltrimethoxysilane, 3- (meth) acryloxypropylmethyldichlorosilane, 3-
(Meth) acryloxyoctadecyltriacetoxysilane, 3- (meth) acryloxy-2,5-dimethylhexyldiacetoxymethylsilane, 3- (meth) acrylamidopropyltrimethoxysilane, 2- (meth) acrylamidoethyltrimethoxysilane, 1- (meth) acrylamidomethyltrimethoxysilane, 2- (meth)
Acrylamide-2-methylpropyltrimethoxysilane, 2- (meth) acrylamido-2-methylethyltrimethoxysilane, 2- (meth) acrylamidoisopropyltrimethoxysilane, 3- (meth) acrylamidopropyltriethoxysilane, N- ( 2- (meth) acrylamidoethyl) aminopropyltrimethoxysilane, (3- (meth) acrylamidopropyl) oxypropyltrimethoxysilane, 3- (N-methyl (meth))
Acrylamide) propyltrimethoxysilane, 3-
((Meth) acrylamide-methoxy) -3-hydroxypropyltrimethoxysilane, 3-((meth) acrylamide-methoxy) propyltrimethoxysilane, 3
-(Vinylbenzylaminopropyl) trimethoxysilane, dimethyl-3- (meth) acrylamide-propyl-3- (trimethoxysilyl) -propylammonium chloride, dimethyl-2- (meth) acrylamide-
2-methylpropyl-3- (trimethoxysilyl) -propylammonium chloride, 3- (meth) acrylamidopropylmethyldimethoxysilane, 3- (meth)
Acrylamidopropyldimethylmethoxysilane, 3-
(Meth) acrylamidopropylisobutyldimethoxysilane, 2- (meth) acrylamidopropylisobutyldimethoxysilane, 2- (meth) acrylamide-2
-Methylpropyl monochlorodimethoxysilane, 2-
(Meth) acrylamido-2-methylpropylhydrogendimethoxysilane, 3- (meth) acrylamidopropylbenzyldiethoxysilane, 3- (meth) acrylamidopropyltriacetoxysilane, 2- (meth) acrylamidoethyltriacetoxysilane, 4-
(Meth) acrylamidobutyltriacetoxysilane,
2- (meth) acrylamido-2-methylpropyltriacetoxysilane, N- (2- (meth) acrylamidoethyl) aminopropyltriacetoxysilane, 2-
(N-ethyl (meth) acrylamide) ethyltriacetoxysilane, 3- (meth) acrylamidopropyloctyldiacetoxysilane, 1- (meth) acrylamidomethylphenyldiacetoxysilane, 3- (meth) acrylamidopropyltripropionyloxysilane, Three
-(Meth) acrylamidopropyltri (N-methylaminoethoxy) silane, vinyltrichlorosilane, vinylmethyldichlorosilane, divinyldichlorosilane, vinylphenyldichlorosilane, vinyldimethylchlorosilane, vinylmethylphenylchlorosilane, vinyldiphenylchlorosilane, vinyltrimethoxy Silane, vinylmethyldimethoxysilane, vinylisobutyldimethoxysilane, vinyldimethylmethoxysilane, vinyltriethoxysilane, 3-vinylbenzylaminopropyltriethoxysilane, vinylmethyldiethoxysilane, divinyldiethoxysilane, vinyldimethylethoxysilane, vinyldiphenyl Ethoxysilane, vinyltriisopropoxysilane, vinyltributoxysilane, vinyldimethylisobuto Shishiran, vinyl triphenoxy silane, vinyl dimethyl (3-aminophenoxy) silane, vinyl dimethyl (4-aminophenoxy) silane,
Vinyl dimethyl (3-methyl-4-chlorophenoxy)
Examples thereof include silicon compounds such as silane, vinyldimethyl (2-methyl-4-chlorophenoxy) silane, vinyltriacetoxysilane, vinylmethyldiacetoxysilane, and vinyldimethylacetoxysilane.
【0012】本発明において、上記(a)〜(e)の各
成分の使用量は以下の範囲が好ましい。(a)成分の使
用量は、用いられるモノマー成分の合計モル量を基準に
して100〜70モル%、好ましくは100〜80モル
%である。同様に(b)成分は、多くて20モル%(2
0モル%以下又は0〜20モル%、「多くて」の意味は
以下同様)、好ましくは多くて15モル%であり、
(c)成分は、多くて15モル%、好ましくは多くて1
0モル%の範囲、(d)成分は多くて20モル%、好ま
しくは多くて10モル%の範囲である。(e)成分は、
(e)成分を除く使用モノマー成分の合計モル量に対し
て多くて5モル%の範囲である。なお、(b)〜(e)
の成分は任意の1成分、2成分、3成分及び全成分が0
であってもよい。これらのアクリルアミド系ポリマー
は、公知その他の重合方法により得られるポリマーであ
り、分子量は任意に設定でき、特にその分子量は限定さ
れるものではない。また、アクリルアミド系ポリマーは
水溶液、エマルション、粉体であっても良いが、粉体の
場合は塊り(ママコ状)を生じないように注意深く水に
溶解することが好ましい。In the present invention, the amount of each component (a) to (e) used is preferably in the following range. The amount of component (a) used is 100 to 70 mol%, preferably 100 to 80 mol%, based on the total molar amount of the monomer components used. Similarly, the component (b) is 20 mol% (2
0 mol% or less or 0 to 20 mol%, the meaning of "at most" is the same below), preferably at most 15 mol%,
Component (c) is at most 15 mol%, preferably at most 1
The amount of component (d) is at most 20 mol%, preferably at most 10 mol%. The component (e) is
It is in the range of at most 5 mol% with respect to the total molar amount of the used monomer components excluding the component (e). Note that (b) to (e)
Is zero for any one component, two components, three components and all components
May be These acrylamide polymers are polymers obtained by other known polymerization methods, and the molecular weight can be set arbitrarily, and the molecular weight is not particularly limited. The acrylamide polymer may be an aqueous solution, an emulsion, or a powder, but in the case of a powder, it is preferable to carefully dissolve it in water so as not to cause lumps (macomo shape).
【0013】本発明においては、シュードモナス・スピ
ーシズ No.0351AM(Pseudomonas
sp.No.0351AM)を用いるが、これは森
林、畑地、汚泥など広く自然界から採取され得る。この
シュードモナス・スピーシズNo.0351AM(Ps
eudomonas sp.No.0351AM)は、
本発明者らにより新たに岡山県の土壌より分離し、同定
した微生物である。この微生物は、平成8年11月19
日付けで工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託さ
れ、その受託番号はFERM P−15953である。
その菌学的性質は表1に示すとおりである。なお、これ
ら表の菌学的試験は、長谷川武治編著の「微生物の分類
と同定」の下巻(改定版)(1985年)の試験の方法
に基づいて行った。In the present invention, Pseudomonas species No. 0351AM (Pseudomonas
sp. No. 0351AM), which can be widely collected from nature such as forests, uplands, and sludges. This Pseudomonas species No. 0351AM (Ps
eudomonas sp. No. 0351AM) is
It is a microorganism newly isolated and identified from the soil of Okayama prefecture by the present inventors. This microorganism was produced on November 19, 1996.
It has been deposited at the Institute of Biotechnology, Institute of Biotechnology, Institute of Industrial Science, dated to FERM P-15953.
The mycological properties are shown in Table 1. The mycological tests in these tables were carried out based on the test method in the second volume (revised edition) (1985) of "Classification and Identification of Microorganisms", edited by Takeharu Hasegawa.
【0014】[0014]
【表1】 [Table 1]
【0015】以上の菌学的性質を、バージイズ・マニュ
アル・オブ・システマティック・バクテリオロジー(B
ergey’s Manual of Systema
tic Bacteriology)Vo.1(198
4年)に従って検索したところ、No.0351AMは
グラム陰性の好気性桿菌で、極鞭毛による運動性を有す
ることからシュードモナス(Pseudomonas)
属に属する細菌であると考えられる。本菌株と生化学的
性質が類似しているシュードモナス(Pseudomo
nas)属細菌には、シュードモナス・プチダ(Pse
udomonas Putida)とシュードモナス・
レモイグネイ(Pseudomonas lemoig
nei)がある。しかし、シュードモナス・プチダ(P
seudomonas Putida)は蛍光性色素を
生成するのに対し、本菌株は蛍光性色素を生成しないこ
と、シュードモナス・レモイグネイ(Pseudomo
nas lemoignei)は41℃で生育するのに
対し、本菌株は41℃で生育せず、41℃未満で生育
し、特に20〜37℃でよく生育することなど、本菌株
が該当する種が現在のところ存在しないことから、本菌
株はシュードモナス(Pseudomonas)属の新
菌種であると考えられる。そこで、本菌株をシュードモ
ナス・スピーシズNo.0351AM(Pseudom
onas sp.No.0351AM)と命名した。な
お、本発明においては上記菌株あるいはその変異株に限
ることなく、シュードモナス・スピーシズNo.035
1AM(Pseudomonas sp.No.035
1AM)に属し、アクリルアミドモノマーの分解能を有
する菌であればすべて使用できる。The above-mentioned mycological properties are based on the Virginize Manual of Systematic Bacteriology (B
energy's Manual of System
tic Bacteriology) Vo. 1 (198
4 years), No. 0351AM is a gram-negative aerobic bacillus, which has motility due to polar flagella, and thus Pseudomonas
It is considered to be a bacterium belonging to the genus. Pseudomonas (Pseudomo) that have similar biochemical properties to this strain
Pseudomonas putida (Pse)
udomonas Putida) and Pseudomonas
Pseudomonas lemoig
nei). However, Pseudomonas Petida (P
Seudomonas putida) produces a fluorescent dye, whereas this strain does not produce a fluorescent dye. Pseudomonas remoignei (Pseudomo)
nas lemoignei) grows at 41 ° C, whereas this strain does not grow at 41 ° C, grows at less than 41 ° C, and particularly well at 20 to 37 ° C. Since it does not exist, it is considered that this strain is a new strain of the genus Pseudomonas. Therefore, this strain was designated as Pseudomonas species No. 0351AM (Pseudom
onas sp. No. 0351 AM). In the present invention, Pseudomonas species No. is not limited to the above strains or mutants thereof. 035
1AM (Pseudomonas sp. No. 035
1AM), and any bacterium that has the ability to decompose acrylamide monomers can be used.
【0016】上記微生物を培養するための培地組成とし
ては、通常これらの微生物が生育し得るものであれば天
然培地及び合成培地のいずれでも使用でき、培地は固体
又は液体培地のいずれでも良い。例えば、炭素源として
グルコース、フラクトース、シュークロース等の糖類、
酢酸、クエン酸などの有機酸類、エタノール、グリセロ
ール等のアルコール類など、窒素源としてペプトン、肉
エキス、酵母エキス、タンパク質加水分解物、アミノ酸
などの一般天然窒素源のほかに各種無機、有機アンモニ
ウム塩などが使用できる。その他、カリウム塩、マグネ
シウム塩、鉄塩、カルシウム塩などの無機塩類などが必
要に応じて適宜使用される。上記微生物の培養は、慣用
の方法で行うことができる。通常、培養温度は20〜3
7℃、好ましくは20〜35℃、pH4〜8.5、好ま
しくはpH4.5〜8.0で、振とうあるいは通気撹拌
などの手段により好気的条件下に行われる。As a medium composition for culturing the above-mentioned microorganisms, either natural medium or synthetic medium can be used, so long as these microorganisms can grow, and the medium may be either solid or liquid medium. For example, sugars such as glucose, fructose, and sucrose as carbon sources,
Organic acids such as acetic acid and citric acid, alcohols such as ethanol and glycerol, etc. as a nitrogen source, in addition to general natural nitrogen sources such as peptone, meat extract, yeast extract, protein hydrolysate and amino acid, various inorganic and organic ammonium salts Etc. can be used. In addition, inorganic salts such as potassium salt, magnesium salt, iron salt, calcium salt and the like are appropriately used as necessary. Culturing of the above-mentioned microorganism can be performed by a conventional method. Usually, the culture temperature is 20 to 3
It is performed at 7 ° C., preferably 20 to 35 ° C., pH 4 to 8.5, preferably pH 4.5 to 8.0 under aerobic conditions by means such as shaking or aeration stirring.
【0017】本発明によるアクリルアミドモノマーの微
生物による分解においては、アクリルアミドモノマーを
炭素源及び窒素源とし、その他無機塩類等を含む培地中
で上記微生物を培養するか、あるいは予め上記微生物を
前記のごとき培養条件下で培養し、これら微生物体を集
菌した後、この微生物をアクリルアミドモノマーと接触
させれば良い。なお、本発明の微生物では、アクリルア
ミド系ポリマーが存在しても十分なアクリルアミドモノ
マーを分解することが可能である。また、公知のアクリ
ルアミドモノマー分解微生物では、例えば特開昭52−
94473号公報に記載のようにアクリルアミドモノマ
ーの微生物処理をpH6.5〜8.5のpH領域で行っ
ており、さらにリン酸水素二アンモニウムを窒素源とし
て添加した培地で、アクリルアミドモノマーを単一炭素
源として処理している。これに対して、本発明の微生物
は酸性領域でも十分なアクリルアミドモノマーを分解す
ることが可能であるため、アクリルアミド系ポリマーを
含有する製品のpHが4〜6であるポリアクリルアミド
系紙力増強剤等の紙用添加剤に対して、そのアクリルア
ミド系ポリマーに付随して存在するアクリルアミドモノ
マー(製造時の残存モノマーあるいは長期保存等による
自然分解時の生成モノマー)の分解に対して特に有用で
ある。さらに本発明の微生物はアクリルアミドモノマー
を単一炭素源及び単一窒素源として利用できるため、効
率よくアクリルアミドモノマーを分解することができ
る。また、本発明においては、微生物自体のほかにその
微生物が生産する酵素も使用することができる。すなわ
ち、菌を培養して得た培養物から菌体などの固形分を除
去した後の培養液も使用できる。In the microbial decomposition of acrylamide monomer according to the present invention, the above microorganism is cultured in a medium containing acrylamide monomer as a carbon source and a nitrogen source and other inorganic salts, or the above microorganism is previously cultured as described above. After culturing under the conditions and collecting these microorganisms, the microorganisms may be contacted with an acrylamide monomer. It should be noted that the microorganism of the present invention can sufficiently decompose acrylamide monomers even in the presence of an acrylamide polymer. Further, known acrylamide monomer-degrading microorganisms include, for example, JP-A-52-
As described in Japanese Patent Publication No. 94473, microbial treatment of acrylamide monomer is carried out in a pH range of pH 6.5 to 8.5, and further diammonium hydrogen phosphate is added as a nitrogen source in a medium to add acrylamide monomer to single carbon. Processing as a source. On the other hand, since the microorganism of the present invention is capable of decomposing sufficient acrylamide monomer even in an acidic region, a polyacrylamide paper strength enhancer or the like in which the pH of the product containing the acrylamide polymer is 4-6. It is particularly useful for the above-mentioned paper additive for the decomposition of acrylamide monomer (residual monomer at the time of production or monomer produced at the time of natural decomposition due to long-term storage, etc.) which is incidental to the acrylamide polymer. Further, the microorganism of the present invention can utilize the acrylamide monomer as a single carbon source and a single nitrogen source, and therefore can efficiently decompose the acrylamide monomer. Further, in the present invention, in addition to the microorganism itself, an enzyme produced by the microorganism can be used. That is, a culture solution obtained by removing solids such as bacterial cells from a culture obtained by culturing a bacterium can also be used.
【0018】本発明で用いる微生物及び/又は酵素とア
クリルアミドモノマーを接触させる方法としては、アク
リルアミド系ポリマーを使用することに関連した工業排
水中のアクリルアミドモノマーを分解する場合には、そ
の工業排水に前述の微生物及び/又は酵素を添加混合
し、一般の活性汚泥処理法と同様に処理すればよい。ま
た、上記の公知その他の重合方法で得られたアクリルア
ミド系ポリマーに残存する、あるいはそのポリマーの分
解により生成するアクリルアミドモノマーを分解するに
は、このアクリルアミド系ポリマーに前述の微生物及び
/又は酵素を添加混合すればよい。また、一般にアクリ
ルアミド系ポリマー系の紙力増強剤はその製品粘度がブ
ルックフィールド粘度計で1000cps以上(少なく
とも1000cps)と粘度が高いため、製紙工場で使
用される際には希釈して用いられているが、希釈した後
に前述の微生物及び/又は酵素を添加してもよい。本発
明の微生物とアクリルアミド系ポリマーを接触させると
きのアクリルアミド系ポリマーの水溶液の濃度は、30
重量%以下、好ましくは0.001〜5%であることが
好ましい。接触時間は通常1日〜10日であるが、接触
時間はアクリルアミドモノマーの量あるいは系内の微生
物濃度に依存する。例えば、アクリルアミドモノマーが
0.1%である工業排水の場合、接触時間24時間で1
00%分解することができる。なお、分解物は水、炭酸
ガス、アンモニア等である。また、例えばアクリルアミ
ドモノマーが0.08%残存するアクリルアミド系ポリ
マーの場合、接触時間24時間で残存するアクリルアミ
ドモノマーの約80%を分解することができる。また、
微生物の初期の添加量を調整することにより接触時間を
短縮することも可能である。As the method for contacting the acrylamide monomer with the microorganism and / or enzyme used in the present invention, when the acrylamide monomer in the industrial wastewater related to the use of the acrylamide polymer is decomposed, the above-mentioned industrial wastewater is used. The microorganisms and / or enzymes described in 1 above may be added and mixed, and treated in the same manner as a general activated sludge treatment method. Further, in order to decompose the acrylamide monomer remaining in the acrylamide polymer obtained by the above-mentioned other known polymerization method or generated by the decomposition of the polymer, the above-mentioned microorganism and / or enzyme is added to the acrylamide polymer. Just mix. In general, the acrylamide polymer-based paper strengthening agent has a high product viscosity of 1000 cps or more (at least 1000 cps) by a Brookfield viscometer, and is therefore diluted before being used in a paper mill. However, the aforementioned microorganisms and / or enzymes may be added after dilution. When the microorganism of the present invention is brought into contact with the acrylamide polymer, the concentration of the aqueous solution of the acrylamide polymer is 30.
It is preferably less than or equal to wt%, preferably 0.001 to 5%. The contact time is usually 1 to 10 days, but the contact time depends on the amount of acrylamide monomer or the concentration of microorganisms in the system. For example, in the case of industrial wastewater containing 0.1% of acrylamide monomer, the contact time is 24 hours.
Can be decomposed by 00%. The decomposed products are water, carbon dioxide, ammonia and the like. Further, for example, in the case of an acrylamide polymer in which 0.08% of acrylamide monomer remains, about 80% of the remaining acrylamide monomer can be decomposed in a contact time of 24 hours. Also,
It is also possible to shorten the contact time by adjusting the initial addition amount of the microorganism.
【0019】このようにしてアクリルアミドモノマーは
上記微生物による分解により、微生物増殖の炭素源及び
窒素源として利用され、その分解物は水、炭酸ガス、ア
ンモニア等となり、自然界に存在する物質となり、無害
化され、しかも揮発により除去することができる。な
お、本発明において、「シュードモナス・スピーシズ
No.0351AM(Pseudomonas sp.
No.0351AM)を用いて」とは微生物そのものの
みならず、上記した微生物が生産する酵素、これらの両
方、さらにはこれらの少なくとも1つをその他の物とと
もに使用してもよいことを示し、アクリルアミドモノマ
ーを分解できる原因が結果的にその微生物に起因するこ
とを意味する。また、「アクリルアミド系ポリマーを含
有するアクリルアミド系ポリマー製品」とは、紙力増強
剤、歩留り向上剤等の紙用添加剤、水処理用凝集剤その
他の工業製品をいい、これらにそれぞれの目的に応じて
他の成分が加えられていてもよい。In this way, the acrylamide monomer is utilized as a carbon source and a nitrogen source for microbial growth by the decomposition by the above microorganisms, and its decomposed products become water, carbon dioxide, ammonia and the like, which become substances existing in the natural world and are rendered harmless. And can be removed by volatilization. In addition, in the present invention, "Pseudomonas species
No. 0351AM (Pseudomonas sp.
No. "0351 AM)" means that not only the microorganism itself but also the above-mentioned enzymes produced by the microorganism, both of them, and at least one of them may be used together with other substances. It means that the cause of decomposability results from the microorganism. Further, "acrylamide-based polymer products containing acrylamide-based polymers" refers to paper strength additives, paper additives such as yield improvers, coagulants for water treatment, and other industrial products. Other ingredients may be added accordingly.
【0020】[0020]
【実施例】以下に実施例によって本発明をさらに詳細に
説明するが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。また、各実施例における%はいずれも重量%であ
る。なお、実験に使用した培地は常法にて滅菌した培地
を使用した。
参考例1(菌株の分離)
岡山県各地より採取した土壌サンプル約2gを、滅菌生
理食塩水10mlに混ぜて放置する。上澄100μlを
表2に示される培地10mlに加え、30℃で約4日間
振とう培養を行った。培養後、培養物を新たに調整した
上記培地に100μl接種し、30℃で約3日間振とう
培養を行った。得られた培養物を、アクリルアミドモノ
マー濃度0.3%の上記培地組成の培地に接種し、同培
地で培養を2回行った。アクリルアミドモノマー濃度
0.3%の上記培地組成の培地に1.5%の寒天を加え
て調整した平板培地に培養物を塗布し、30℃で7日間
培養してコロニーを形成させた。形成したコロニーの純
化を2回行い、純粋菌株としてのシュードモナス・スピ
ーシズ No.0351AM(Pseudomonas
sp.No.0351AM)を得た。微生物の同定
は、上記試験法に従って行ない、形態学的、生理学的及
び化学的な単離微生物の性質は表1に示したとおりであ
った。The present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the present invention is not limited thereto. Further,% in each example is% by weight. The medium used for the experiment was a medium sterilized by a conventional method. Reference Example 1 (Separation of Strain) About 2 g of a soil sample collected from various places in Okayama Prefecture is mixed with 10 ml of sterile physiological saline and left to stand. 100 μl of the supernatant was added to 10 ml of the medium shown in Table 2, and shake culture was performed at 30 ° C. for about 4 days. After the culture, 100 μl of the culture was newly inoculated into the above-prepared medium and shake culture was performed at 30 ° C. for about 3 days. The obtained culture was inoculated into a medium having the above medium composition with an acrylamide monomer concentration of 0.3%, and the culture was performed twice in the same medium. The culture was applied to a plate medium prepared by adding 1.5% agar to a medium having the above-mentioned medium composition with an acrylamide monomer concentration of 0.3%, and cultured at 30 ° C. for 7 days to form colonies. The formed colonies were purified twice, and Pseudomonas species No. 0351AM (Pseudomonas
sp. No. 0351 AM) was obtained. The microorganisms were identified according to the above test method, and the morphological, physiological and chemical properties of the isolated microorganisms were as shown in Table 1.
【0021】[0021]
【表2】 [Table 2]
【0022】参考例2(アニオン性アクリルアミド系ポ
リマーの合成)
撹拌機、温度計、還流冷却管及び窒素ガス導入管を備え
た四つ口フラスコに、50%アクリルアミド水溶液24
3.3g、アクリル酸10.0g、メタアリルスルホン
酸ナトリウム0.51g、水614.97gを仕込み、
pH3.0とし、窒素ガス導入下60℃に昇温し、次い
で5%過硫酸アンモニウム水溶液8.44gを加え、8
0℃で1時間反応させた。反応物を室温まで冷却し、固
形分14.8%、ブルックフィールド粘度計による粘度
(25℃)6,850cps、pH4.3のアニオン性
アクリルアミド系ポリマーの水溶液を得た。この水溶液
中のアクリルアミドモノマー量をガスクロマトグラフ法
により測定したところ、アクリルアミドモノマー量は
0.08%であった。Reference Example 2 (Synthesis of anionic acrylamide polymer) A 50% acrylamide aqueous solution 24 was placed in a four-necked flask equipped with a stirrer, a thermometer, a reflux condenser and a nitrogen gas inlet tube.
Charge 3.3 g, acrylic acid 10.0 g, sodium methallyl sulfonate 0.51 g, water 614.97 g,
The pH was adjusted to 3.0, the temperature was raised to 60 ° C. under introduction of nitrogen gas, and then 8.44 g of a 5% ammonium persulfate aqueous solution was added,
The reaction was carried out at 0 ° C for 1 hour. The reaction product was cooled to room temperature to obtain an aqueous solution of an anionic acrylamide polymer having a solid content of 14.8%, a Brookfield viscometer viscosity (25 ° C.) of 6,850 cps and a pH of 4.3. When the amount of acrylamide monomer in this aqueous solution was measured by gas chromatography, the amount of acrylamide monomer was 0.08%.
【0023】参考例3(両性アクリルアミド系ポリマー
の合成)
撹拌機、温度計、還流冷却管及び窒素ガス導入管を備え
た四つ口フラスコに、50%アクリルアミド水溶液52
9.0g、ジメチルアミノエチルメタクリレート31.
4g、イタコン酸10.4g、1%メチレンビスアクリ
ルアミド水溶液21.6g、イソプロピルアルコール3
6.0g、水1320.8g、20%硫酸水溶液48.
3gを仕込み、pH3.0とし、窒素ガス導入下60℃
に昇温し、次いで5%過硫酸アンモニウム水溶液9.1
2gと、2%メタ重亜硫酸ナトリウム水溶液9.52g
を加え、80℃で1時間反応させた。水86gを加える
と同時に、反応物を室温まで冷却し、固形分15.6
%、ブルックフィールド粘度計による粘度(25℃)1
2,000cps、pH4.9の両性のアクリルアミド
系ポリマーの水溶液を得た。この水溶液中のアクリルア
ミドモノマー量をガスクロマトグラフ法により測定した
ところ、アクリルアミドモノマー量は0.09%であっ
た。Reference Example 3 (Synthesis of Amphoteric Acrylamide Polymer) In a four-necked flask equipped with a stirrer, a thermometer, a reflux condenser and a nitrogen gas inlet tube, a 50% acrylamide aqueous solution 52 was added.
9.0 g, dimethylaminoethyl methacrylate 31.
4 g, itaconic acid 10.4 g, 1% methylenebisacrylamide aqueous solution 21.6 g, isopropyl alcohol 3
6.0 g, water 1320.8 g, 20% sulfuric acid aqueous solution 48.
Charge 3 g to adjust the pH to 3.0 and introduce nitrogen gas at 60 ° C.
The temperature is then raised to 9.1, and then a 5% ammonium persulfate aqueous solution 9.1 is added.
2g and 9.52g of 2% sodium metabisulfite aqueous solution
Was added and reacted at 80 ° C. for 1 hour. While adding 86 g of water, the reaction was cooled to room temperature at a solid content of 15.6.
%, Viscosity by Brookfield viscometer (25 ° C) 1
An aqueous solution of an amphoteric acrylamide polymer having a pH of 4.9 and 2,000 cps was obtained. When the amount of acrylamide monomer in this aqueous solution was measured by gas chromatography, the amount of acrylamide monomer was 0.09%.
【0024】実施例1
ブイヨン液体培地(日水製薬(株)製、培地pH7)
に、シュードモナス・スピーシズ No.0351AM
(Pseudomonas sp,No.0351A
M)の菌体を1白金耳接種し、30℃で3日間振とう培
養を行った。得られた培養物の1白金耳を参考例1に示
した表2の培地(pH6)(単一炭素源及び窒素源とし
てアクリルアミドモノーを使用した)10mlに接種
し、微生物の増殖を培養液の660nmにおける濁度を
分光光度計により測定した。その結果を表3に示す。Example 1 Broth liquid medium (manufactured by Nissui Pharmaceutical Co., Ltd., medium pH 7)
Pseudomonas species No. 0351AM
(Pseudomonas sp, No. 0351A
One platinum loop of the cells of M) was inoculated and shake culture was performed at 30 ° C. for 3 days. 1 platinum loop of the obtained culture was inoculated into 10 ml of the medium (pH 6) of Table 2 shown in Reference Example 1 (using acrylamide mono as a single carbon source and a nitrogen source), and the growth of microorganisms Turbidity at 660 nm was measured by a spectrophotometer. The results are shown in Table 3.
【0025】[0025]
【表3】 [Table 3]
【0026】比較例1
表4に示した公知のアクリルアミドモマー分解菌A、B
を使用すること以外は実施例1と全く同様にして試験を
行い、微生物の増殖を測定した。その結果を表3に示
す。Comparative Example 1 Known acrylamide momer-degrading bacteria A and B shown in Table 4
Tests were carried out in the same manner as in Example 1 except that was used to measure the growth of microorganisms. The results are shown in Table 3.
【0027】[0027]
【表4】 [Table 4]
【0028】実施例2
参考例1に示した表2の培地(pH4,6,8)にシュ
ードモナス・スピーシズ No.0351AM(Pse
udomonas sp.No.0351AM)の菌体
を1白金耳接種し、30℃で3日間振とう培養を行っ
た。得られた培養物100μlを新たに作製した同培地
10mlに接種し、アクリルアミドモノマーの分解率及
び微生物の増殖を測定した。アクリルアミドモノマーの
分解率の測定は、ガスクロマトグラフィー GC−14
A(島津製作所製)を用い、DB−WAXカラム(J&
W社製)で分離しFIDを検出器として培地中のアクリ
ルアミドモノマーを測定することによって行った。微生
物の増殖は、培養液の660nmにおける濁度を分光光
度計により測定した。その結果を表5に示す。Example 2 Pseudomonas species No. was added to the medium (pH 4, 6, 8) of Table 2 shown in Reference Example 1. 0351AM (Pse
udomonas sp. No. One platinum loop was inoculated with the bacterial cells of 0351 AM), and shake culture was carried out at 30 ° C. for 3 days. 100 μl of the obtained culture was inoculated into 10 ml of the same medium newly prepared, and the degradation rate of acrylamide monomer and the growth of microorganisms were measured. The decomposition rate of acrylamide monomer is measured by gas chromatography GC-14.
A (manufactured by Shimadzu Corporation), using DB-WAX column (J &
(Manufactured by W Co.) and using FID as a detector to measure acrylamide monomer in the medium. For the growth of microorganisms, the turbidity of the culture at 660 nm was measured by a spectrophotometer. The results are shown in Table 5.
【0029】[0029]
【表5】 [Table 5]
【0030】実施例3
実施例2で使用した培地において、アクリルアミドモノ
マー濃度を0.3%、培地pHを4.0にすること以外
は実施例2と同様にして試験を行い、アクリルアミドモ
ノマーの分解率及び微生物の増殖を測定した。結果を表
6に示した。Example 3 In the medium used in Example 2, a test was conducted in the same manner as in Example 2 except that the acrylamide monomer concentration was 0.3% and the medium pH was 4.0, to decompose the acrylamide monomer. Rate and microbial growth were measured. The results are shown in Table 6.
【0031】[0031]
【表6】 [Table 6]
【0032】実施例4
参考例2で示したアニオン性アクリルアミド系ポリマー
の水溶液に、シュードモナス・スピーシズ No.03
51AM(Pseudomonas sp.No.03
51AM)を菌体固形分として0.1%添加し十分に攪
拌した後、30℃に放置してアクリルアミドモノマーの
分解率をガスクロマトグラフ法により測定した。結果を
表7に示した。Example 4 The aqueous solution of the anionic acrylamide polymer shown in Reference Example 2 was added to Pseudomonas species No. 03
51AM (Pseudomonas sp. No. 03)
51%) was added as a bacterial cell solid content in an amount of 0.1% and sufficiently stirred, and then the mixture was allowed to stand at 30 ° C. and the decomposition rate of acrylamide monomer was measured by gas chromatography. The results are shown in Table 7.
【0033】[0033]
【表7】 [Table 7]
【0034】実施例5
参考例3で示した両性アクリルアミド系ポリマーの水溶
液に、シュードモナス・スピーシズ No.0351A
M(Pseudomonas sp,No.0351A
M)を菌体固形分として0.1%添加し十分に攪拌した
後、30℃に放置して48時間後にアクリルアミドモノ
マーの分解率をガスクロマトグラフ法により測定した。
結果を表8に示した。Example 5 The aqueous solution of the amphoteric acrylamide polymer shown in Reference Example 3 was added to Pseudomonas species No. 0351A
M (Pseudomonas sp, No. 0351A
M) was added as a cell solid content in an amount of 0.1% and sufficiently stirred, and the mixture was allowed to stand at 30 ° C. for 48 hours, and then the decomposition rate of acrylamide monomer was measured by gas chromatography.
The results are shown in Table 8.
【0035】上記実施例、比較例の結果から、シュード
モナス・スピーシズ No.0351AM(Pseud
omonas sp.No.0351AM)は、アクリ
ルアミドモノマーを炭素源、窒素源として利用すること
が示され、比較例のA、B菌に比べ、アクリルアミドモ
ノマーの分解能が優れることがわかる。From the results of the above Examples and Comparative Examples, Pseudomonas species No. 0351AM (Pseud
Omonas sp. No. 0351AM) is shown to utilize an acrylamide monomer as a carbon source and a nitrogen source, and it can be seen that the acrylamide monomer has a higher resolution than the bacteria A and B of Comparative Examples.
【0036】上記のポリマー溶液はそのままあるいは他
の添加剤を加えて紙力増強剤等の紙用添加剤として使用
できるが、これら製品についても上記に準ずる結果が得
られる。また、これら製品を製紙方法に使用した後の工
業排水についても上記に準ずる結果が得られる。The above polymer solution can be used as it is or by adding other additives as a paper additive such as a paper strengthening agent, and the results similar to the above can be obtained for these products. Further, the results similar to the above can be obtained for industrial wastewater after using these products in the paper manufacturing method.
【0037】[0037]
【発明の効果】本発明によれば、新規な微生物としてシ
ュードモナス・スピーシズ No.0351AM(Ps
eudomonas sp.No.0351AM)を提
供することができ、これによりこの新規な微生物を用い
たアクリルアミドモノマーの分解方法、アクリルアミド
系ポリマーを使用する関連工業排水中のアクリルアミド
モノマーを分解する工業排水の処理方法及びアクリルア
ミド系ポリマー等のアクリルアミド系ポリマー製品に残
存するアクリルアミドモノマーを分解し除去できるアク
リルアミド系ポリマー製品中のアクリルアミドモノマー
の分解方法を高効率、簡単、低コストで提供することが
できる。According to the present invention, Pseudomonas species No. 0351AM (Ps
eudomonas sp. No. 0351AM), thereby providing a method for decomposing acrylamide monomers using this novel microorganism, a method for treating industrial wastewater that decomposes acrylamide monomers in related industrial wastewater using acrylamide polymers, and acrylamide polymers, etc. It is possible to provide a method for decomposing acrylamide monomer in an acrylamide polymer product, which can decompose and remove the acrylamide monomer remaining in the acrylamide polymer product, with high efficiency, simplicity and low cost.
【表8】 [Table 8]
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI C08J 11/02 C08J 11/02 //(C12N 1/20 C12N 1/20 C12R 1:38) C12R 1:38 (56)参考文献 特開 昭52−99281(JP,A) 特開 昭52−94473(JP,A) 特開 昭52−102489(JP,A) 特開 昭52−105273(JP,A) 特開 平6−134433(JP,A) 特開 昭51−144777(JP,A) ARCH MICROBIOL (1990),Vol.154,No.2,p. 192−198 (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) C12N 1/00 - 1/38 C02F 3/00 C08J 11/00 BIOSIS/WPI(DIALOG)─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 7 Identification code FI C08J 11/02 C08J 11/02 // (C12N 1/20 C12N 1/20 C12R 1:38) C12R 1:38 (56) Reference Documents JP-A-52-99281 (JP, A) JP-A-52-94473 (JP, A) JP-A-52-102489 (JP, A) JP-A-52-105273 (JP, A) JP-A-6- 134433 (JP, A) JP-A-51-144777 (JP, A) ARCH MICROBIOL (1990), Vol. 154, No. 2, p. 192-198 (58) Fields investigated (Int. Cl. 7 , DB name) C12N 1/00-1/38 C02F 3/00 C08J 11/00 BIOSIS / WPI (DIALOG)
Claims (7)
するシュードモナス・スピーシズ No.0351AM
(Pseudomonas sp.No.0351A
M)である微生物。1. Pseudomonas species No. having an ability to decompose acrylamide monomer. 0351AM
(Pseudomonas sp. No. 0351A
M) a microorganism.
351AM(Pseudomonas sp.No.0
351AM)を用いてアクリルアミドモノマーを分解す
るアクリルアミドモノマーの分解方法。2. Pseudomonas species No. 0
351AM (Pseudomonas sp. No. 0
351 AM) to decompose an acrylamide monomer.
351AM(Pseudomonas sp.No.0
351AM)を用いて工業排水中に含有されるアクリル
アミドモノマーを分解する工業排水の処理方法。3. Pseudomonas species No. 0
351AM (Pseudomonas sp. No. 0
351 AM) to decompose the acrylamide monomer contained in the industrial wastewater.
マーから合成したアクリルアミド系ポリマーを含有する
アクリルアミド系ポリマー製品において、シュードモナ
ス・スピーシズ No.0351AM(Pseudom
onas sp.No.0351AM)を用いて該アク
リルアミド系ポリマーに付随して残存するアクリルアミ
ドモノマーを分解するアクリルアミド系ポリマー製品中
のアクリルアミドモノマーの分解方法。4. An acrylamide-based polymer product containing an acrylamide-based polymer synthesized from a monomer containing an acrylamide-based monomer, Pseudomonas species No. 0351AM (Pseudom
onas sp. No. A method for decomposing acrylamide monomer in an acrylamide polymer product, which comprises decomposing residual acrylamide monomer associated with the acrylamide polymer by using 0351AM.
アミドモノマーを含有するアクリルアミドモノマー類か
ら合成したアクリルアミド系ポリマーからなる請求項4
に記載のアクリルアミド系ポリマー製品中のアクリルア
ミドモノマーの分解方法。5. The acrylamide polymer product comprises an acrylamide polymer synthesized from acrylamide monomers containing an acrylamide monomer.
The method for decomposing acrylamide monomer in the acrylamide polymer product according to 1.
ミドモノマーと、他のビニル系モノマーの少なくとも1
種との共重合体である請求項4に記載のアクリルアミド
系ポリマー製品中のアクリルアミドモノマーの分解方
法。6. The acrylamide polymer is at least one of an acrylamide monomer and another vinyl monomer.
The method for decomposing acrylamide monomer in an acrylamide polymer product according to claim 4, which is a copolymer with a seed.
がカチオン性基を有するカチオンモノマー及びアニオン
性基を有するアニオンモノマーの少なくとも1種である
請求項6に記載のアクリルアミド系ポリマー製品中のア
クリルアミドモノマーの分解方法。7. The acrylamide monomer in the acrylamide polymer product according to claim 6, wherein at least one of the other vinyl monomers is at least one of a cationic monomer having a cationic group and an anionic monomer having an anionic group. Disassembly method.
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