JP3227764B2 - 液体クロマトグラフ - Google Patents
液体クロマトグラフInfo
- Publication number
- JP3227764B2 JP3227764B2 JP05990192A JP5990192A JP3227764B2 JP 3227764 B2 JP3227764 B2 JP 3227764B2 JP 05990192 A JP05990192 A JP 05990192A JP 5990192 A JP5990192 A JP 5990192A JP 3227764 B2 JP3227764 B2 JP 3227764B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- liquid chromatograph
- absorption spectrum
- sample
- peak
- component
- Prior art date
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- Expired - Lifetime
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- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、検出器としてフォトダ
イオードアレイ検出器を用いた液体クロマトグラフに係
り、特に成分同定能力の向上および同定の確かさを確認
するに好適な液体クロマトグラフに関する。
イオードアレイ検出器を用いた液体クロマトグラフに係
り、特に成分同定能力の向上および同定の確かさを確認
するに好適な液体クロマトグラフに関する。
【０００２】
【従来の技術】液体クロマトグラフにおいては、それぞ
れのピークの保持時間のみが得られたピークの成分同定
に用いられる。あらかじめ含有成分が既知の標準試料を
注入し、各成分の保持時間を決定する。その後含有成分
が未知の実試料を注入し、標準試料で決定された各成分
の保持時間に最も近いピークをその成分であると同定し
溶出面積あるいはピーク高さから定量を行っていた。
れのピークの保持時間のみが得られたピークの成分同定
に用いられる。あらかじめ含有成分が既知の標準試料を
注入し、各成分の保持時間を決定する。その後含有成分
が未知の実試料を注入し、標準試料で決定された各成分
の保持時間に最も近いピークをその成分であると同定し
溶出面積あるいはピーク高さから定量を行っていた。
【０００３】また、各ピークにおけるスペクトルが確認
できるフォトダイオードアレイ検出器を用いた液体クロ
マトグラフにおける同定においては、あらかじめ各含有
成分の吸収スペクトルを記憶し、実試料における各ピー
クについて記憶されているスペクトルと比較し、一番合
致するものを選択し同定を行っていた。
できるフォトダイオードアレイ検出器を用いた液体クロ
マトグラフにおける同定においては、あらかじめ各含有
成分の吸収スペクトルを記憶し、実試料における各ピー
クについて記憶されているスペクトルと比較し、一番合
致するものを選択し同定を行っていた。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】保持時間のみにより成
分同定を行う上記従来技術は、実試料中に目的成分と類
似の保持時間を持つ成分が混在することに配慮がされて
おらず、保持時間の類似した成分の実試料中への混在が
あり、その成分と分離が十分に行われず定量値に間違い
が生じた場合でも、その間違いが判別出来ないとの問題
点があった。
分同定を行う上記従来技術は、実試料中に目的成分と類
似の保持時間を持つ成分が混在することに配慮がされて
おらず、保持時間の類似した成分の実試料中への混在が
あり、その成分と分離が十分に行われず定量値に間違い
が生じた場合でも、その間違いが判別出来ないとの問題
点があった。
【０００５】また、吸収スペクトルにより同定を行う上
記従来技術は、各成分の吸収スペクトルがその溶媒によ
り変化することに配慮がされておらず、あらかじめ溶媒
組成を合わせてスペクトルを収集しておく必要があると
の問題があった。さらに、保持時間は異なるがその吸収
スペクトルが類似した他の成分を誤って同定する可能性
があるとの問題点もあった。
記従来技術は、各成分の吸収スペクトルがその溶媒によ
り変化することに配慮がされておらず、あらかじめ溶媒
組成を合わせてスペクトルを収集しておく必要があると
の問題があった。さらに、保持時間は異なるがその吸収
スペクトルが類似した他の成分を誤って同定する可能性
があるとの問題点もあった。
【０００６】本発明の目的は、同定の能力を向上させ、
さらに同定が確実に行われたことを確認容易な液体クロ
マトグラフを提供することにある。
さらに同定が確実に行われたことを確認容易な液体クロ
マトグラフを提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
の本発明の特徴は、試料をカラムによって分離し、吸光
度及び吸光スペクトルの検出を行う液体クロマトグラフ
において、検出結果に対して同定を行う際に、予め定め
られた保持時間範囲内に複数の吸光度ピークが存在する
場合、吸収スペクトルによって同定を行うことである。
の本発明の特徴は、試料をカラムによって分離し、吸光
度及び吸光スペクトルの検出を行う液体クロマトグラフ
において、検出結果に対して同定を行う際に、予め定め
られた保持時間範囲内に複数の吸光度ピークが存在する
場合、吸収スペクトルによって同定を行うことである。
【０００８】また、試料をカラムによって分離し、吸光
度及び吸光スペクトルの検出を行う液体クロマトグラフ
において、予め既知の成分を含む標準試料の検出結果の
吸光度のピークにおける吸光スペクトルを記憶する手段
を有し、実試料の検出結果に対する同定時に、予め定め
られた保持時間範囲内に複数の吸光度のピークがある場
合に、前記記憶手段の吸収スペクトルと実試料の吸収ス
ペクトルとの比較を行うことである。 また好ましくは、
予め既知の成分を含む標準試料の検出結果より検量線を
作製し記憶する手段を有し、実試料分析時に前記検量線
によって定量を行うことである。 また更に好ましくは、
実試料分析の結果として、各成分毎に前記定量結果を含
めた出力を行うことである。
度及び吸光スペクトルの検出を行う液体クロマトグラフ
において、予め既知の成分を含む標準試料の検出結果の
吸光度のピークにおける吸光スペクトルを記憶する手段
を有し、実試料の検出結果に対する同定時に、予め定め
られた保持時間範囲内に複数の吸光度のピークがある場
合に、前記記憶手段の吸収スペクトルと実試料の吸収ス
ペクトルとの比較を行うことである。 また好ましくは、
予め既知の成分を含む標準試料の検出結果より検量線を
作製し記憶する手段を有し、実試料分析時に前記検量線
によって定量を行うことである。 また更に好ましくは、
実試料分析の結果として、各成分毎に前記定量結果を含
めた出力を行うことである。
【０００９】
【作用】液体クロマトグラフにおける同定，定量におい
ては、標準試料及び実試料の分析において同じ溶離液組
成，同じ溶離液組成変化が用いられる。従って、同じ保
持時間の成分は標準試料及び実試料にかかわらず同じ溶
媒組成となる。従って、溶媒の変化による吸収スペクト
ル変化の影響を受けない。また、ある定められた保持時
間範囲内から同定を行っているため、全く異なる物質で
はあるが吸収スペクトルのみが類似した成分を誤って同
定することがない。さらに、実試料の分析において、同
定された成分の標準試料分析時の吸収スペクトル比較結
果が出力されているため、同定が確実に行われたことが
確認できる。
ては、標準試料及び実試料の分析において同じ溶離液組
成，同じ溶離液組成変化が用いられる。従って、同じ保
持時間の成分は標準試料及び実試料にかかわらず同じ溶
媒組成となる。従って、溶媒の変化による吸収スペクト
ル変化の影響を受けない。また、ある定められた保持時
間範囲内から同定を行っているため、全く異なる物質で
はあるが吸収スペクトルのみが類似した成分を誤って同
定することがない。さらに、実試料の分析において、同
定された成分の標準試料分析時の吸収スペクトル比較結
果が出力されているため、同定が確実に行われたことが
確認できる。
【００１０】
【実施例】以下、本発明の一実施例を図１〜７により説
明する。図１はシステムの構成例を示しており、１は溶
離液、２はポンプである。試料は３のサンプルインジェ
クタより注入され、４のカラムにより分離される。５の
ダイオードアレイ検出器はカラム４からの溶出液の吸収
スペクトルを連続的に検出しており、ダイオードアレイ
検出器で得られた検出データはデータ処理装置６に送ら
れ、同定，定量が行われる。図２は、標準試料を注入し
た際に得られた吸収スペクトルの変化を２５０ｎｍにお
ける吸光度の時間変化について表して得たクロマトグラ
ムである。７，８，９はそれぞれベンゼン，ナフタレ
ン，クリセンのピークである。標準試料分析時のそれぞ
れのピークトップにおける吸収スペクトルはデータ処理
装置６に記憶される。図３はデータ処理装置６に作成さ
れた成分テーブルの例である。この成分テーブルの各成
分の“保持時間（ＲＴ）”のデータは、標準試料注入時
に得られた保持時間により決められる。“WINDOW％”の
データは実試料分析において吸収スペクトル比較を行う
ピークの保持時間範囲を決めるもので、例えばベンゼン
（Benzene）の場合、１.４６±３％の保持時間をもつピ
ークのなかで吸収スペクトル比較が行われる。この保持
時間範囲は絶対値でも設定可能である。図４は実試料分
析時に図２と同様の方法で得たクロマトグラムの例であ
る。ベンゼン，ナフタレンに相当する保持時間範囲には
それぞれ１つのピークしか存在しないため、それぞれピ
ーク１０がベンゼン、ピーク１１がナフタレンとして同
定され、ピーク面積あるいは高さから定量が行われる。
これに対して、クリセンに対応する保持時間範囲にはピ
ーク１２，ピーク１３と２つのピークが存在する。この
ように複数のピークが存在する場合は標準試料分析時に
得られた成分と吸収スペクトルを比較して同定が行われ
る。図５は測定された吸収スペクトルの例である。１４
は標準試料分析時に得られたクリセンの吸収スペクト
ル、すなわちピーク９の吸収スペクトル、１５はピーク
１２の吸収スペクトル、１６はピーク１３の吸収スペク
トルである。１５，１６はそれぞれ１４のと比較が行わ
れ、吸収スペクトルのより類似している１５、すなわち
ピーク１２がクリセンとして同定され、ピーク面積ある
いは高さから定量が行われる。図６は定量結果出力レポ
ートの例である。ピーク番号(ＮＯ)，保持時間(ＲＴ)，
同定された成分名（ＮＡＭＥ），ピーク面積（ＡＲＥ
Ａ），定量値（ppm），ピークの立上り点と終了点の吸
収スペクトル比較によりもとめられたピーク純度（PURI
TY）とともに、ピーク同定が正しく行われたかどうかを
示す指標がＩＤ−ＣＯＲとして出力されている。これは
各ピークのピークトップの吸収スペクトルを、標準試料
分析時に得られた各成分ピークのピークトップの吸収ス
ペクトルと比較して得た相関係数である。図７は定量結
果出力レポートの別の例である。ピーク同定が正しく行
われたかどうかを示す指標を図６と同様の方法で求め、
この値があらかじめ設定した値に満たないピークについ
ては成分名のあとにマーク(＊)を付し判別を容易にして
いる。図８は一点検量線で標準試料１回分析の場合の分
析の進行例である。標準試料分析の場合には、各ピーク
の保持時間及び吸収スペクトルを保存し、各成分につい
て検量線を作製する。実試料分析においては、保持時間
及び吸収スペクトルによりピークを同定し、検量線から
各成分の定量を行い、標準試料分析時と実試料分析時で
のピークの吸収スペクトルを算出し、これらをレポート
に出力する。
明する。図１はシステムの構成例を示しており、１は溶
離液、２はポンプである。試料は３のサンプルインジェ
クタより注入され、４のカラムにより分離される。５の
ダイオードアレイ検出器はカラム４からの溶出液の吸収
スペクトルを連続的に検出しており、ダイオードアレイ
検出器で得られた検出データはデータ処理装置６に送ら
れ、同定，定量が行われる。図２は、標準試料を注入し
た際に得られた吸収スペクトルの変化を２５０ｎｍにお
ける吸光度の時間変化について表して得たクロマトグラ
ムである。７，８，９はそれぞれベンゼン，ナフタレ
ン，クリセンのピークである。標準試料分析時のそれぞ
れのピークトップにおける吸収スペクトルはデータ処理
装置６に記憶される。図３はデータ処理装置６に作成さ
れた成分テーブルの例である。この成分テーブルの各成
分の“保持時間（ＲＴ）”のデータは、標準試料注入時
に得られた保持時間により決められる。“WINDOW％”の
データは実試料分析において吸収スペクトル比較を行う
ピークの保持時間範囲を決めるもので、例えばベンゼン
（Benzene）の場合、１.４６±３％の保持時間をもつピ
ークのなかで吸収スペクトル比較が行われる。この保持
時間範囲は絶対値でも設定可能である。図４は実試料分
析時に図２と同様の方法で得たクロマトグラムの例であ
る。ベンゼン，ナフタレンに相当する保持時間範囲には
それぞれ１つのピークしか存在しないため、それぞれピ
ーク１０がベンゼン、ピーク１１がナフタレンとして同
定され、ピーク面積あるいは高さから定量が行われる。
これに対して、クリセンに対応する保持時間範囲にはピ
ーク１２，ピーク１３と２つのピークが存在する。この
ように複数のピークが存在する場合は標準試料分析時に
得られた成分と吸収スペクトルを比較して同定が行われ
る。図５は測定された吸収スペクトルの例である。１４
は標準試料分析時に得られたクリセンの吸収スペクト
ル、すなわちピーク９の吸収スペクトル、１５はピーク
１２の吸収スペクトル、１６はピーク１３の吸収スペク
トルである。１５，１６はそれぞれ１４のと比較が行わ
れ、吸収スペクトルのより類似している１５、すなわち
ピーク１２がクリセンとして同定され、ピーク面積ある
いは高さから定量が行われる。図６は定量結果出力レポ
ートの例である。ピーク番号(ＮＯ)，保持時間(ＲＴ)，
同定された成分名（ＮＡＭＥ），ピーク面積（ＡＲＥ
Ａ），定量値（ppm），ピークの立上り点と終了点の吸
収スペクトル比較によりもとめられたピーク純度（PURI
TY）とともに、ピーク同定が正しく行われたかどうかを
示す指標がＩＤ−ＣＯＲとして出力されている。これは
各ピークのピークトップの吸収スペクトルを、標準試料
分析時に得られた各成分ピークのピークトップの吸収ス
ペクトルと比較して得た相関係数である。図７は定量結
果出力レポートの別の例である。ピーク同定が正しく行
われたかどうかを示す指標を図６と同様の方法で求め、
この値があらかじめ設定した値に満たないピークについ
ては成分名のあとにマーク(＊)を付し判別を容易にして
いる。図８は一点検量線で標準試料１回分析の場合の分
析の進行例である。標準試料分析の場合には、各ピーク
の保持時間及び吸収スペクトルを保存し、各成分につい
て検量線を作製する。実試料分析においては、保持時間
及び吸収スペクトルによりピークを同定し、検量線から
各成分の定量を行い、標準試料分析時と実試料分析時で
のピークの吸収スペクトルを算出し、これらをレポート
に出力する。
【００１１】
【発明の効果】本発明によれば、標準試料中の各成分の
保持時間と吸収スペクトルを記憶し、実試料において
は、保持時間の類似したピークの中から最も吸収スペク
トルの類似したピークをその成分によるものであると同
定することにしたため、同定能が高い。
保持時間と吸収スペクトルを記憶し、実試料において
は、保持時間の類似したピークの中から最も吸収スペク
トルの類似したピークをその成分によるものであると同
定することにしたため、同定能が高い。
【００１２】また、標準試料により得られた各ピークの
吸収スペクトルと実試料中でその成分であると同定され
たピークの吸収スペクトルを比較し、その結果を表示し
ているため、同定が確実に行われたことを確認できる。
吸収スペクトルと実試料中でその成分であると同定され
たピークの吸収スペクトルを比較し、その結果を表示し
ているため、同定が確実に行われたことを確認できる。
【図１】実施例のシステムの構成図である。
【図２】標準試料分析時のクロマトグラム例を示す図で
ある。
ある。
【図３】成分テーブルの例を示す図である。
【図４】実試料分析時のクロマトグラム例を示す図であ
る。
る。
【図５】標準試料及び実試料分析時測定された吸収スペ
クトルの例を示す図である。
クトルの例を示す図である。
【図６】定量結果出力レポートの例を示す図である。
【図７】定量結果出力レポートの別例を示す図である。
【図８】分析の進行例を示す図である。
１…溶離液、２…ポンプ、３…サンプルインジェクタ、
４…カラム、５…フォトダイオードアレイ検出器、６…
データ処理装置。
４…カラム、５…フォトダイオードアレイ検出器、６…
データ処理装置。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭60−200166（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−131456（ＪＰ，Ａ) 特開 平４−355366（ＪＰ，Ａ) 実開 昭56−92855（ＪＰ，Ｕ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 30/00 - 30/96
Claims (4)
- 【請求項１】試料をカラムによって分離し、吸光度及び
吸光スペクトルの検出を行う液体クロマトグラフにおい
て、検出結果に対して同定を行う際に、予め定められた保持
時間範囲内に複数の吸光度ピークが存在する場合、吸収
スペクトルによって同定を行う ことを特徴とする液体ク
ロマトグラフ。 - 【請求項２】試料をカラムによって分離し、吸光度及び
吸光スペクトルの検出を行う液体クロマトグラフにおい
て、予め既知の成分を含む標準試料の検出結果の吸光度のピ
ークにおける吸光スペクトルを記憶する手段を有し、実
試料の検出結果に対する同定時に、予め定められた保持
時間範囲内に複数の吸光度のピークがある場合に、前記
記憶手段の吸収スペクトルと実試料の吸収スペクトルと
の比較を行う ことを特徴とする液体クロマトグラフ。 - 【請求項３】請求項２記載の液体クロマトグラフにおい
て、 予め既知の成分を含む標準試料の検出結果より検量線を
作製し記憶する手段を有し、実試料分析時に前記検量線
によって定量を行うことを特徴とする液体クロマトグラ
フ。 - 【請求項４】請求項３記載の液体クロマトグラフにおい
て、 実試料分析の結果として、各成分毎に前記定量結果を含
めた出力を行うことを特徴とする液体クロマトグラフ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP05990192A JP3227764B2 (ja) | 1992-03-17 | 1992-03-17 | 液体クロマトグラフ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP05990192A JP3227764B2 (ja) | 1992-03-17 | 1992-03-17 | 液体クロマトグラフ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05264533A JPH05264533A (ja) | 1993-10-12 |
| JP3227764B2 true JP3227764B2 (ja) | 2001-11-12 |
Family
ID=13126491
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP05990192A Expired - Lifetime JP3227764B2 (ja) | 1992-03-17 | 1992-03-17 | 液体クロマトグラフ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3227764B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008122081A (ja) * | 2006-11-08 | 2008-05-29 | Dkk Toa Corp | 分析計及び分析プログラム |
-
1992
- 1992-03-17 JP JP05990192A patent/JP3227764B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05264533A (ja) | 1993-10-12 |
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