JP3167402B2 - Iron absorption promotion composition - Google Patents
Iron absorption promotion compositionInfo
- Publication number
- JP3167402B2 JP3167402B2 JP07315392A JP7315392A JP3167402B2 JP 3167402 B2 JP3167402 B2 JP 3167402B2 JP 07315392 A JP07315392 A JP 07315392A JP 7315392 A JP7315392 A JP 7315392A JP 3167402 B2 JP3167402 B2 JP 3167402B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- iron
- peptide
- esp
- dan
- citric acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
【0001】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は鉄吸収促進性ペプチドE
SP−2及びDAN−100を有効成分とした鉄吸収促
進組成物及びこれらとクエン酸及び鉄化合物を混合乃至
はキレート結合させてなる吸収性のよい鉄剤に関するも
のである。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a peptide E for promoting iron absorption.
The present invention relates to an iron absorption-promoting composition containing SP-2 and DAN-100 as active ingredients, and a highly absorbable iron agent obtained by mixing or chelate-bonding these with citric acid and an iron compound.
【0002】本発明の鉄吸収促進組成物や鉄剤は鉄の吸
収性を著じるしく改善することができるので、貧血改善
のための健康食品、薬剤として好適なものである。[0002] The iron absorption-promoting composition and iron agent of the present invention can remarkably improve iron absorption, and are therefore suitable as health foods and drugs for ameliorating anemia.
【0003】[0003]
【従来の技術】本発明に先だって、本発明者らは、魚肉
をタンパク分解酵素処理し、得られたペプチド原液を活
性炭処理して、新規ペプチドESP−2を開発し(特開
平2−273144号)、そして、これを更にイオン交
換処理することによって、新規ペプチドDAN−100
を開発するのに成功した(特公平3−54958号)。Prior to the present invention, the present inventors developed a novel peptide ESP-2 by treating fish meat with proteolytic enzymes and treating the resulting peptide stock solution with activated carbon (Japanese Patent Laid-Open No. 2-273144). ) And further subjecting it to ion-exchange treatment to obtain a novel peptide, Dan-100.
Was successfully developed (Japanese Patent Publication No. 3-54958).
【0004】[0004]
【発明が解決しようとする課題】本発明では魚肉のタン
パク分解酵素処理によって得られたペプチドの鉄吸収促
進作用を確認し、更には貧血改善のための鉄剤ないし飲
食品、栄養剤、栄養食品、特定保健用食品等を開発せん
とするものである。SUMMARY OF THE INVENTION In the present invention, the iron absorption promoting effect of a peptide obtained by treating fish meat with proteolytic enzymes has been confirmed. We will develop foods for specified health use.
【0005】[0005]
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
に各方面から検討の結果、安全性の面から天然物を利用
することとし、そこで、先に本発明者らが開発した魚肉
由来のペプチド、DAN−100に着目した。そして、
DAN−100及び関連物質について、その生理活性を
徹底的に検討した結果ペプチドDAN−100のほか、
その原料であるところの魚肉のタンパク分解酵素処理物
を活性炭処理して得たペプチドESP−2が、すぐれた
鉄可溶化作用及び鉄吸収促進作用を有するという新規に
して有用な知見を得た。本発明はこのような有用な新知
見に基づいてなされたものである。In order to solve the above-mentioned problems, as a result of investigations from various fields, it was decided to use natural products from the viewpoint of safety. Attention was paid to the peptide, DAN-100. And
As a result of thoroughly examining the physiological activity of DAN-100 and related substances, in addition to peptide DAN-100,
A new and useful finding was obtained that the peptide ESP-2 obtained by treating a raw material of fish meat proteolytic enzyme, which is the raw material thereof, with activated carbon has an excellent iron solubilizing action and iron absorption promoting action. The present invention has been made based on such useful new findings.
【0006】本発明において使用するペプチドは、既述
のように本発明者らによって開発されたものであって、
例えば特開平2−273144号、特公平3−5495
8号に記載されているように、魚介類をタンパク分解酵
素で処理することによりペプチドを生成させた後、活性
炭処理して先ずペプチドESP−2を得、次いでこれを
アルコール分画、イオン交換樹脂処理することにより、
そして必要あればこ(れら)の処理をくり返して分離、
精製を行い、ペプチドDAN−100を得るのである。The peptide used in the present invention has been developed by the present inventors as described above,
For example, JP-A-2-273144, JP-B-3-5495
As described in No. 8, a peptide is produced by treating fish and shellfish with a proteolytic enzyme, followed by treatment with activated carbon to obtain peptide ESP-2, which is then subjected to alcohol fractionation and ion exchange resin. By processing
And if necessary, this process is repeated and separated,
Purification is performed to obtain peptide DAN-100.
【0007】本ペプチドは魚介類を原料として製造する
ものであるが、先ず、これを採肉機、デボーナー等によ
って処理して魚肉質を分離する。原料は出来る限り新鮮
なものが好ましい。分離した魚肉は、10kg程度のす
り身に分割し、このまま次の処理に使用してもよいが、
−20〜−50℃、例えば−30℃、程度の冷気を吹き
付けて急速凍結し、−20〜−25℃に保存しておき、
必要に応じてこれを適宜使用するようにしてもよい。[0007] The present peptide is produced using fish and shellfish as a raw material. First, the peptide is treated with a meat extractor, deboner or the like to separate fish meat. The raw materials are preferably as fresh as possible. The separated fish meat may be divided into about 10 kg of surimi and used as it is for the next process.
-20 to -50 ° C., for example, -30 ° C., is blown rapidly by blowing about cold air, and stored at -20 to -25 ° C.,
This may be appropriately used as needed.
【0008】魚介類としては、イワシ、アジ、マグロ、
カツオ、サンマ、サバ等赤身魚;ヒラメ、タイ、キス、
コノシロ、タラ、ニシン、ブリ等白身魚;サメ、エイ等
軟骨魚肉;ワカサギ、コイ、イワナ、ヤマメ等淡水魚
肉;アイザメ、アンコウ等深海魚肉のほか、エビ、カ
ニ、タコ、アミ類等も適宜使用できる。[0008] As seafood, sardines, horse mackerels, tuna,
Skipjack, saury, mackerel and other lean fish; flounder, Thailand, kiss,
White fish such as Konoshiro, cod, herring, yellowtail; cartilage fish such as sharks and rays; freshwater fish such as smelt, carp, char, yamame; deep-sea fish such as eye sharks and anglers, as well as shrimp, crab, octopus, and mysid it can.
【0009】本発明においては、採肉した後、粉砕機等
によって魚介類を粉砕し、原料重量に対して無加水〜1
0倍量加水、酵素適温(使用酵素によって異なるが、2
0〜60℃程度)にまで加温し、pHも適値(pH2〜
11程度)に調整し、蛋白分解酵素を加えて、1〜30
時間処理する。希望するのであれば粉砕魚介肉を加水し
た後攪拌タンク内で40〜60℃程度に1〜5時間保持
して自己消化せしめ、しかる後に酵素を添加して分解せ
しめてもよい。In the present invention, after the meat has been minced, the fish and shellfish are crushed by a crusher or the like, and no water is added.
0-fold amount of water, suitable temperature for enzyme (depending on enzyme used, 2
About 0 to 60 ° C), and the pH is adjusted to an appropriate value (pH 2 to 2).
11), add protease and add 1-30
Time processing. If desired, the ground fish and shellfish may be added to water and then kept in a stirred tank at about 40 to 60 ° C. for 1 to 5 hours to allow self-digestion, followed by addition of an enzyme to decompose.
【0010】蛋白分解酵素としては、蛋白質を分解し得
る酵素であればすべての酵素が単独で又は混合して使用
し得る。その起源は、動植物のほかに微生物に求めるこ
とができ、ペプシン、レニン、トリプシン、キモトリプ
シン、パパイン、ブロメレインのほか、細菌プロテアー
ゼ、糸状菌プロテアーゼ、放線菌プロテアーゼ等も広く
利用できる。これらの酵素は、通常、市販されているも
のが使用されるが、未精製の酵素、酵素を含有した培養
液、麹といった固体又は液体の酵素含有物も、目的によ
り必要に応じて使用することができる。As the proteolytic enzyme, any enzyme can be used alone or in combination as long as it is an enzyme capable of decomposing proteins. Its origin can be determined from microorganisms in addition to animals and plants, and in addition to pepsin, renin, trypsin, chymotrypsin, papain, bromelain, bacterial proteases, filamentous proteases, actinomycetes proteases and the like can be widely used. As these enzymes, those commercially available are generally used, but unpurified enzymes, culture solutions containing the enzymes, solid or liquid enzyme contents such as koji may also be used as necessary according to the purpose. Can be.
【0011】蛋白分解酵素の量は、酵素の精製度によっ
て相違し、また、処理時間によっても相違するが、処理
液の0.05〜5%、好ましくは0.1%程度の使用で
十分である。0.1%濃度のプロテアーゼ液を使用した
場合、魚肉としてイワシのような赤身肉を処理するとき
には、pH4.1、45℃で約17時間、又はpH5.
9、48℃で約4時間で酵素処理は終了する。The amount of the proteolytic enzyme varies depending on the degree of purification of the enzyme and also varies depending on the treatment time, but it is sufficient to use 0.05 to 5%, preferably about 0.1% of the treatment solution. is there. In the case of using a 0.1% protease solution, when treating red meat such as sardine as fish meat, pH 4.1, about 17 hours at 45 ° C., or pH 5.
9. The enzyme treatment is completed in about 4 hours at 48 ° C.
【0012】次いで中和した後、80℃以上の温度に5
〜30分間保持して酵素を失活させる。加熱失活処理
後、バイブロスクリーン等によって濾過し、必要により
ジェクター処理した後、シャープレス遠心分離機等を用
いて例えば10000〜30000rpmで遠心分離す
る。After neutralization, the temperature is raised to a temperature of 80 ° C. or higher.
Hold for ~ 30 min to inactivate enzyme. After the heat inactivation treatment, the mixture is filtered through a vibro screen or the like, and if necessary, subjected to a Jector treatment.
【0013】これを常法により濃縮し(30Bx程度に
まで)た後、再度遠心分離してペプチド原液を得る。After concentrating this by a conventional method (to about 30 Bx), it is centrifuged again to obtain a peptide stock solution.
【0014】次いでペプチド原液は、活性炭、ケイソウ
土を加えて脱色し、濾過してそのまま機能性ペプチド原
液として使用することができる。また、ここに得られる
機能性ペプチド原液は、デキストリンを添加もしくは添
加せずに、凍結乾燥したり、噴霧乾燥したりして、粉末
化することもできるものである。Next, the peptide stock solution is decolorized by adding activated carbon and diatomaceous earth, filtered, and used as it is as a functional peptide stock solution. The functional peptide stock solution obtained here can be freeze-dried or spray-dried without or with the addition of dextrin to be powdered.
【0015】このようにして得た機能性ペプチドは、文
献未載で新規なものであり、本発明者らによってESP
−2と命名された。[0015] The functional peptide thus obtained is a novel peptide which has not been published in any literature, and has been identified by the present inventors as ESP.
-2.
【0016】ペプチドESP−2の物理化学的性質は、
下記表1、表2のとおりである。The physicochemical properties of the peptide ESP-2 are as follows:
The results are shown in Tables 1 and 2 below.
【0017】[0017]
【表1】 [Table 1]
【0018】[0018]
【表2】 [Table 2]
【0019】上記により調製した機能性ペプチドESP
−2は、後記するように本発明における有効成分として
利用できるが、これを更に精製して得られるペプチドも
すぐれた機能性を有し、本発明の有効成分として利用す
ることができる。その精製は、次のようにして行う。先
ず、ESP−2にアルコールを加えて放置する。アルコ
ールとしては、メタノール、エタノール、プロパノー
ル、イソプロパノール、ブタノール等が好適であるが、
他のアルコールを使用してもさしつかえない。アルコー
ルは冷時使用し(0〜10℃)、ペプチド原液と等量な
いし30倍以上使用する。冷アルコール添加後、冷室に
30分〜3時間以上放置して沈殿を生成せしめて更に精
製してもよい。The functional peptide ESP prepared as described above
-2 can be used as an active ingredient in the present invention as described below, but a peptide obtained by further purifying it has excellent functionality and can be used as an active ingredient in the present invention. The purification is performed as follows. First, alcohol is added to ESP-2 and left. As the alcohol, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol and the like are preferable,
You can use other alcohols. The alcohol is used in a cold state (0 to 10 ° C.), and is used in an amount equal to or more than 30 times as much as the peptide stock solution. After the addition of the cold alcohol, the mixture may be left in a cold room for 30 minutes to 3 hours or more to generate a precipitate, and may be further purified.
【0020】上記によって得たアルコール沈殿に加水し
て溶液とした後、この溶液は、イオン交換樹脂で処理す
るが、樹脂としては、カチオン交換樹脂、特に強酸性カ
チオン交樹樹脂を使用する。例えば、これらの樹脂を充
填したカラムに上記溶液を注入し、水洗したあと希アン
モニウム水等のアルカリ水溶液で溶出し、溶出液を得
る。After adding water to the alcohol precipitate obtained above to form a solution, this solution is treated with an ion exchange resin. As the resin, a cation exchange resin, particularly a strongly acidic cation-crosslinked resin is used. For example, the above solution is injected into a column filled with these resins, washed with water, and then eluted with an aqueous alkaline solution such as dilute ammonium water to obtain an eluate.
【0021】得られた溶出液は、減圧濃縮等の方法によ
りアンモニアを除去した後、必要に応じて上記処理をく
り返し、濃縮して、常法にしたがって凍結乾燥等の方法
によって粉末化し、目的とする塩基性ペプチドを得る。
前記したように、上記溶出液を、濃縮又は希釈して、各
種の用途に使用してもよい。The obtained eluate is subjected to the above treatment if necessary, after removing ammonia by a method such as concentration under reduced pressure, concentrated, and powdered by a method such as freeze-drying according to a conventional method. To obtain a basic peptide.
As described above, the eluate may be concentrated or diluted and used for various purposes.
【0022】このようにして得られたペプチドは、本発
明者らによって開発されたものでありしかも極めて有用
なものであって、DAN−100と命名した。The peptide thus obtained has been developed by the present inventors and is extremely useful, and was named DAN-100.
【0023】ペプチドDAN−100の物理化学的性質
は、下記表3、表4のとおりである。The physicochemical properties of peptide Dan-100 are shown in Tables 3 and 4 below.
【0024】[0024]
【表3】 [Table 3]
【0025】[0025]
【表4】 [Table 4]
【0026】本発明に係るペプチドは、後記するところ
から明らかなように、いずれも、各種の鉄塩に対する鉄
可溶化能にすぐれているのみでなく、in vivoに
おいてもすぐれた鉄吸収促進作用を示し、人畜に対する
鉄の補給、鉄の強化、鉄欠乏性貧血の予防、治療、改善
に有利に使用することができ、鉄吸収促進組成物とし
て、例えば、鉄吸収促進剤、飲食品、栄養強化食品、機
能性食品(特定保健用食品)、ないしは動植物肥飼料添
加剤として使用されるほか、医薬として、または輸液、
健康食品、臨床栄養食品等としても巾広く使用すること
ができる。As will be apparent from the following description, the peptides according to the present invention not only have an excellent iron solubilizing ability with respect to various iron salts, but also have an excellent iron absorption promoting action in vivo. It can be used for supplementing iron to humans, strengthening iron, preventing, treating and ameliorating iron deficiency anemia, and as an iron absorption promoting composition, for example, iron absorption promoter, food and drink, nutritional enhancement Used as food, functional food (food for specified health use), or animal and plant fertilizer feed additive, as a medicine, infusion,
It can be widely used as health food, clinical nutrition food, etc.
【0027】また、後記するところから明らかなように
上記した作用は、クエン酸及び/又はクエン酸塩の存在
下で更に増巾されるので、本発明のペプチド、鉄化合物
及びクエン酸(塩)を併用すれば更に効果が高まること
となる。したがって、ペプチド及び鉄化合物を配合した
鉄剤、そして、これに更にクエン酸(塩)を配合した鉄
剤は、鉄欠乏性貧血をはじめとする各種の鉄欠乏による
疾病の予防、治療、改善のため、医薬品、飲食品、飼料
添加物等の形態に製剤化することができる。鉄化合物と
しては、特に限定されることなく、塩化鉄、硫酸第一
鉄、クエン酸第一鉄、クエン酸鉄アンモニウム、コハク
酸クエン酸鉄ナトリウム、乳酸鉄、ピロリン酸鉄その他
無機ないし有機の鉄化合物が適宜使用できるし、配合量
も市販鉄剤と同様にすればよい。本発明においては、鉄
の吸収促進効果が高いので、少量の鉄分を配合してもこ
れを有効に利用することができる。また、クエン酸
(塩)としては、遊離のクエン酸のほか、ナトリウム
塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩その他
の塩が適宜自由に使用することができ、格別の限定はな
い。そしてこの場合、クエン酸第一鉄ナトリウムといっ
た化合物を使用すれば、クエン酸と鉄とを同時に配合す
ることにもなる。As will be apparent from the following description, the above-mentioned action is further amplified in the presence of citric acid and / or citrate, so that the peptide of the present invention, the iron compound and citric acid (salt) If the combination is used, the effect will be further enhanced. Therefore, an iron preparation containing a peptide and an iron compound, and an iron preparation further containing citric acid (salt) are used to prevent, treat, and improve various diseases caused by iron deficiency including iron deficiency anemia. It can be formulated in the form of pharmaceuticals, foods and drinks, feed additives and the like. The iron compound is not particularly limited, and iron chloride, ferrous sulfate, ferrous citrate, iron ammonium citrate, sodium iron citrate succinate, iron lactate, iron pyrophosphate, and other inorganic or organic irons The compound can be used appropriately, and the compounding amount may be the same as that of the commercially available iron agent. In the present invention, since the effect of promoting absorption of iron is high, even if a small amount of iron is blended, it can be effectively used. In addition, as the citric acid (salt), in addition to free citric acid, a sodium salt, a potassium salt, a calcium salt, a magnesium salt and other salts can be freely used as appropriate, and there is no particular limitation. And in this case, if a compound such as sodium ferrous citrate is used, citric acid and iron will be simultaneously compounded.
【0028】本発明によって著効が奏される詳細なメカ
ニズムについては、今後の研究にまたねばならないが、
ESP−2、DAN−100を、HPLCを用いて、ク
エン酸第一鉄を含む酢酸緩衝液で溶出し、分画した画分
について鉄の濃度を測定したところ、ペプチドの溶出パ
ターンと同一パターンの鉄濃度変化が確認され、イワシ
筋肉由来ペプチドの鉄吸収促進効果はクエン酸を介した
鉄とのキレート現象によることが示唆された。したがっ
て本発明に係る鉄剤は、ペプチド、クエン酸及び/又は
その塩、鉄化合物の3成分を単に混合したもののみでな
く、これらのキレート結合せしめてなるものも包含する
ものである。The detailed mechanism of the remarkable effect of the present invention must be studied in future studies.
ESP-2 and DAN-100 were eluted with an acetate buffer containing ferrous citrate using HPLC, and the iron concentration of the fractionated fraction was measured. A change in iron concentration was confirmed, suggesting that the iron absorption promoting effect of the sardine muscle-derived peptide was due to a chelate phenomenon with iron via citric acid. Therefore, the iron agent according to the present invention includes not only a mixture of the three components of peptide, citric acid and / or a salt thereof, and an iron compound, but also those obtained by chelating these three components.
【0029】本発明に係るイワシ由来のペプチド(ES
P−2、DAN−100)を鉄吸収促進組成物、として
特に飲食品タイプで使用する場合には、ペプチド(液
状、ペースト状、粉末状)をそのまま添加したり、他の
食品ないしは食品成分と併用したりして適宜常法にした
がって使用できる。また、鉄吸収促進剤や鉄剤等医薬タ
イプとして使用する場合には、経口又は非経口投与する
ことができる。経口投与の場合には、例えば常法にした
がい、錠剤、顆粒剤、粉末剤、カプセル剤、散剤とする
ことができ、又、非経口投与の場合には、例えば注射薬
製剤、点滴剤、坐剤等として使用することができる。The sardine-derived peptide (ES) according to the present invention
When P-2 and DAN-100) are used as an iron absorption promoting composition, particularly in a food or drink type, the peptide (liquid, paste or powder) may be added as it is, or may be added to other foods or food ingredients. It can be used in accordance with a conventional method as appropriate. When used as a pharmaceutical type such as an iron absorption promoter or an iron agent, it can be administered orally or parenterally. In the case of oral administration, for example, tablets, granules, powders, capsules, and powders can be prepared in the usual manner. In the case of parenteral administration, for example, injection preparations, drops, suppositories It can be used as an agent or the like.
【0030】本発明に係るペプチドは、天然起源である
ために毒性が全くないか又は極めて低く、きわめて安全
である(LD50>3000mg/kg皮下、>5000
mg/kg経口:いずれもラット)。The peptides according to the invention have no or very low toxicity because of their natural origin and are very safe (LD 50 > 3000 mg / kg subcutaneous,> 5000
mg / kg orally: all rats).
【0031】以下、本発明の製造例及び実施例について
述べる。Hereinafter, Production Examples and Examples of the present invention will be described.
【0032】[製造例1]新鮮イワシをボデーナーで処
理して採肉した。採肉した魚肉質を10kgのすり身に
分割した。これを粉砕機で粉砕した後等量の水を加え、
45〜48℃に加熱し、これを攪拌タンクに移して同温
に2〜3時間保持して自己消化合解せしめた。次いでp
Hを4.1に調節した。これに、デナチーム(市販プロ
テアーゼ製剤商品名)の0.1%液を加え、45℃に1
7時間保持して酵素分解を行った。中和し、次いで15
分間煮沸して酵素を失活せしめた。[Preparation Example 1] Fresh sardines were treated with a body and minced. The minced fish meat was divided into 10 kg surimi. After crushing this with a crusher, add an equal amount of water,
The mixture was heated to 45 to 48 ° C., transferred to a stirring tank, kept at the same temperature for 2 to 3 hours, and allowed to self-digest and dissolve. Then p
H was adjusted to 4.1. To this, a 0.1% solution of denazyme (commercially available protease preparation) was added, and the mixture was heated at 45 ° C for 1 hour.
Enzymatic degradation was performed by holding for 7 hours. Neutralize, then 15
Boiled for minutes to inactivate the enzyme.
【0033】これをバイブロスクリーン(150メッシ
ュ)で濾過し、濾液を5000rpmでジェクター処理
した後、シャープレス遠心分離機で処理し(15000
rpm)、20Bxとなるまで常温加熱濃縮し、そして
再度シャープレス遠沈処理(15000rpm)してペ
プタイド原液(DAN−No.2)を得た。This was filtered through a vibro screen (150 mesh), and the filtrate was subjected to a Jector treatment at 5,000 rpm, followed by a Sharpless centrifuge (15000).
rpm), and concentrated by heating at room temperature until it became 20 Bx, and again subjected to a sharpless centrifugation (15,000 rpm) to obtain a peptide stock solution (DAN-No. 2).
【0034】[製造例2]上記で得たペプタイド原液
(pH6.22)を1840mlとり、これに活性炭1
00gを加え60分間攪拌した後濾過して濾液(pH
6.12)(ESP−2)1500mlを得た。次い
で、濾液を100mlとり、これに冷メタノールを20
00ml加え、冷室に60分間放置して沈澱を生ぜしめ
た。生じた沈澱物を水に加えて溶液(E)を得た。[Preparation Example 2] 1840 ml of the peptide solution (pH 6.22) obtained above was taken, and activated carbon 1 was added thereto.
After stirring for 60 minutes, the mixture was filtered and the filtrate (pH
6.12) 1500 ml of (ESP-2) were obtained. Next, 100 ml of the filtrate was taken, and 20 ml of cold methanol was added thereto.
After adding 00 ml, the mixture was allowed to stand in a cold room for 60 minutes to cause precipitation. The resulting precipitate was added to water to obtain a solution (E).
【0035】[製造例3]ESP−2を含有する上記溶
液(E)を100mlとり、これをダウエックス50W
〔H+〕を充填したカラム(径5×15cm)に注入し
た。そして、水2000mlを用いて樹脂を水洗し、2
N−NH4OH250mlを用いて溶出し、得られた溶
出液を濃縮した後、セファデックスG−25カラムによ
るクロマト処理を行った。得られたペプチドフラクショ
ンについて、上記と同様にダウエックスカラムクロマト
処理、脱イオン水による水洗、アンモニア水溶出、濃縮
処理を行った後、凍結乾燥してペプチドDAN−100
の白色粉末を得た。[Production Example 3] 100 ml of the above solution (E) containing ESP-2 was taken, and this was added to Dowex 50W.
It was injected into a column (diameter 5 × 15 cm) packed with [H +]. Then, the resin is washed with 2000 ml of water,
It was eluted with N-NH 4 OH250ml, After concentrating the resultant eluate was subjected to chromatographic treatment with Sephadex G-25 column. The obtained peptide fraction was subjected to Dowex column chromatography treatment, washing with deionized water, elution with ammonia water and concentration treatment in the same manner as described above, followed by lyophilization to give peptide DAN-100.
Was obtained as a white powder.
【0036】このようにして製造したペプチドESP−
2及びDAN−100について、Asahipak G
S−320カラム(径4.0mm×45cm)を用い、
次の条件で高速液体クロマトグラフィ(HPLC)を行
い、図1のパターンを得た。溶離液:0.1%トリフル
オロ酢酸中45%アセトニトリル、流速:0.5ml/
min、検出:UV220nm、マーカー:B=バシト
ラシン(分子量1,450)、G=グリシル−チロシン
(分子量238)。その結果、ESP−2で500〜1
0,000程度の、そしてまたDAN−100で500
〜2,000程度の分画分子量域を示した。The thus prepared peptide ESP-
2 and DAN-100, Asahipak G
Using an S-320 column (diameter 4.0 mm x 45 cm),
High performance liquid chromatography (HPLC) was performed under the following conditions to obtain the pattern in FIG. Eluent: 45% acetonitrile in 0.1% trifluoroacetic acid, flow rate: 0.5 ml /
min, detection: UV 220 nm, marker: B = bacitracin (molecular weight 1,450), G = glycyl-tyrosine (molecular weight 238). As a result, 500 to 1 for ESP-2
Around 000, and also 500 for DAN-100
A molecular weight cutoff range of about 2,2,000 was shown.
【0037】[実施例1]本発明に係るペプチドESP
−2、DAN−100について、各種の鉄試料に対する
pH7.0での(蒸留水ベース及びリン酸緩衝液ベー
ス)鉄可溶化試験を行った。なお、比較対照試料として
は、カゼインペプチドを用いた。[Example 1] Peptide ESP according to the present invention
-2, DAN-100 was subjected to an iron solubilization test (distilled water base and phosphate buffer base) at pH 7.0 for various iron samples. In addition, a casein peptide was used as a comparative control sample.
【0038】鉄のアッセイは次のようにして行った。先
ず、各ペプチド(タンパク含量0.1〜0.5%)に、
蒸留水ベースの場合(図面においてはAで示す)には蒸
留水を2.5ml加え、リン酸緩衝液ベースの場合(図
面においてはBに示す)には600mMホスフェートバ
ッファー(pH6.8)を2.5ml加え、HClでp
Hを2.5に調整した後、鉄の標準溶液(Fe:100
0ppm)をそれぞれ各0.1ml加え、HClでpH
を2.0に調整した後、室温に30分保持し、NaOH
でpHを7.0に調整した。これを希釈して10mlに
し、37℃に30分保持した後、濾過した(東洋、N
o.2)。濾液について、極性ゼーマン原子吸収スペク
トロフォトメーター(日立、HITACHI Z−61
00)により鉄含量を測定した。そして、上記と同様に
して各々の鉄を加えないペプチド自体の鉄含有量を求
め、差引値を鉄可溶化量とした。The iron assay was performed as follows. First, each peptide (protein content 0.1-0.5%)
In the case of a distilled water base (indicated by A in the drawing), add 2.5 ml of distilled water, and in the case of a phosphate buffer base (indicated by B in the drawing), add 2 mM of a 600 mM phosphate buffer (pH 6.8). .5 ml and add with HCl
After adjusting H to 2.5, a standard solution of iron (Fe: 100
0 ppm), and add 0.1 ml each, and adjust the pH with HCl.
Was adjusted to 2.0, and then kept at room temperature for 30 minutes.
The pH was adjusted to 7.0 with. This was diluted to 10 ml, kept at 37 ° C for 30 minutes, and filtered (Toyo, N
o. 2). For the filtrate, a polar Zeeman atomic absorption spectrophotometer (Hitachi, HITACHI Z-61)
00), the iron content was determined. Then, the iron content of each peptide to which iron was not added was determined in the same manner as described above, and the subtraction value was defined as the iron solubilization amount.
【0039】上記した手法にしたがって、5種類の鉄試
料、塩化鉄(FeCl2)、硫酸第一鉄(FeSO4)、
クエン酸第一鉄ナトリウム(FeNaH(C6H
8O7)2)、クエン酸添加塩化鉄、及びクエン酸添加硫
酸第一鉄について、鉄可溶化率を測定し、それぞれ図2
〜図6の結果を得た。なお、各図において、Aは蒸留水
ベース、及びBは150mMホスフェートバッファーベ
ースにおけるデータを示した。また、各試験において、
鉄及びクエン酸の含有量は100μg/10mlであっ
た。According to the method described above, five types of iron samples, iron chloride (FeCl 2 ), ferrous sulfate (FeSO 4 ),
Sodium ferrous citrate (FeNaH (C 6 H
The iron solubilization rate was measured for 8 O 7 ) 2 ), citric acid-added iron chloride, and citric acid-added ferrous sulfate.
To FIG. 6 were obtained. In each figure, A shows data on the basis of distilled water, and B shows data on the basis of 150 mM phosphate buffer. In each test,
The content of iron and citric acid was 100 μg / 10 ml.
【0040】上記結果から明らかなように、イワシ筋肉
由来ペプチドは、すぐれた鉄可溶化能を示し、とりわけ
クエン酸存在下では鉄可溶化能が大幅に増加することが
立証された。すなわち、図2にみられるように塩化鉄に
ついてはカゼインペプチドの方が鉄可溶化率が高かった
が、図3から明らかなように硫酸第一鉄を用いたリン酸
緩衝液ベースでは、カゼインペプチドの鉄可溶化率は低
下し、DAN−100の方が高い鉄可溶化率を示した。
図4から明らかなように、クエン酸第一鉄ナトリウムを
用いたときは、両ベースともにESP−2、DAN−1
00の鉄可溶化率が高く、リン酸緩衝液ベースではカゼ
インペプチドを大きく上回っていた。図5、図6から明
らかなように、塩化鉄(図2)、硫酸第一鉄(図3)単
用の場合に比して、クエン酸を添加することにより、E
SP−2、DAN−100の鉄可溶化率が増加するのに
対して、カゼインペプチドの鉄可溶化率の改善はみられ
なかった。As is clear from the above results, it was proved that the sardine muscle-derived peptide exhibited excellent iron solubilizing ability, and in particular, the iron solubilizing ability was significantly increased in the presence of citric acid. That is, as shown in FIG. 2, the casein peptide had a higher iron solubilization rate with respect to the iron chloride, but as apparent from FIG. 3, the casein peptide was based on the phosphate buffer using ferrous sulfate. , The iron solubilization rate decreased, and DAN-100 showed a higher iron solubilization rate.
As is clear from FIG. 4, when sodium ferrous citrate was used, ESP-2 and DAN-1 were used for both bases.
The iron solubilization rate was higher than that of casein peptide on a phosphate buffer basis. As is clear from FIGS. 5 and 6, compared with the case of using iron chloride (FIG. 2) and ferrous sulfate (FIG. 3) alone, the addition of citric acid resulted in
While the iron solubilization rate of SP-2 and DAN-100 was increased, the iron solubilization rate of the casein peptide was not improved.
【0041】[実施例2]イワシ筋肉由来ペプチド(E
SP−2)について、鉄欠乏性貧血モデルラットを用い
て鉄吸収促進作用を検討し、鉄欠乏性貧血改善効果を確
認した。Example 2 Sardine muscle-derived peptide (E
Regarding SP-2), the effect of promoting iron absorption was examined using iron deficiency anemia model rats, and the effect of improving iron deficiency anemia was confirmed.
【0042】すなわち、下記の表5に示した手順にした
がって鉄欠乏性貧血モデルラットによる貧血回復試験を
行った。つまり、雄性SD系ラットを鉄欠乏飼料で4週
間飼育し、鉄欠乏性貧血モデルラットとしたのち、クエ
ン酸第一鉄ナトリウムのみを与えたコントロール群、イ
ワシペプチドESP−2をクエン酸第一鉄ナトリウムと
ともに1.25%、5.00%それぞれ与えた群を40
日間飼育した。さらに初めから通常飼料で飼育したもの
を正常ラットとした。10日目ごとにヘモグロビン量、
ヘマトクリット値を、最終日に血清鉄及び不飽和鉄結合
能を測定した。That is, an anemia recovery test was performed using an iron deficiency anemia model rat according to the procedure shown in Table 5 below. In other words, male SD rats were bred for 4 weeks on an iron-deficient diet and used as an iron-deficient anemia model rat, and then a control group to which only ferrous sodium citrate was given, a sardine peptide ESP-2 was treated with ferrous citrate. The group given 1.25% and 5.00% each with sodium was 40
They were bred for days. Furthermore, normal rats fed from a normal diet from the beginning were used as normal rats. Hemoglobin amount every 10 days,
Hematocrit values were determined on the last day for serum iron and unsaturated iron binding capacity.
【0043】[0043]
【表5】 [Table 5]
【0044】鉄欠乏飼料の配合は、下記の表6に示し
た。なお、鉄欠乏飼料におけるミネラル混合及びビタミ
ン混合の組成は、下記の表7及び表8に示した。本実施
例においては、この鉄欠乏飼料を用いて鉄欠乏性貧血モ
デルラットを作成し、クエン酸第一鉄ナトリウムを12
mg/100g(Feとして10ppm)添加したもの
を実験試料(コントロール群)とした。The composition of the iron deficient feed is shown in Table 6 below. The compositions of the mineral mixture and the vitamin mixture in the iron-deficient feed are shown in Tables 7 and 8 below. In this example, an iron-deficient anemia model rat was prepared using this iron-deficient diet, and sodium ferrous citrate was added to the rat.
A sample to which mg / 100 g (10 ppm as Fe) was added was used as an experimental sample (control group).
【0045】[0045]
【表6】 [Table 6]
【0046】[0046]
【表7】 [Table 7]
【0047】[0047]
【表8】 [Table 8]
【0048】実験試料中のミネラル成分の実測値は、下
記の表9のとおりであり、また、ESP−2のミネラル
成分の実測値は下記の表10のとおりである。したがっ
て、本実施例においては、実験試料にESP−2を1.
25%及び5.00%添加しても、ミネラル成分の値は
ほぼ同等である。The measured values of the mineral components in the experimental samples are as shown in Table 9 below, and the measured values of the mineral components of ESP-2 are as shown in Table 10 below. Therefore, in this example, ESP-2 was used as an experimental sample.
Even when 25% and 5.00% are added, the values of the mineral components are almost the same.
【0049】[0049]
【表9】 [Table 9]
【0050】[0050]
【表10】 [Table 10]
【0051】鉄欠乏性貧血ラットの回復試験における体
重推移及び飼料摂取量の変化の結果は、図7及び図8に
示したとおりである。これらの結果から明らかなよう
に、イワシペプチドESP−2添加群においては、ペプ
チドの栄養効果が幾分認められるが、統計的な有意差は
認められなかった。また、飼料摂取量についても、自由
摂取のため幾分イワシペプチドESP−2添加群のほう
が摂取量が多いが、統計的な有意差はなかった。The results of changes in body weight and feed intake in the recovery test of iron deficient anemia rats are as shown in FIGS. 7 and 8. As is evident from these results, in the sardine peptide ESP-2 added group, a slight nutritional effect of the peptide was observed, but no statistically significant difference was observed. As for the feed intake, the sardine peptide ESP-2 added group had a somewhat higher intake due to free intake, but there was no statistically significant difference.
【0052】本貧血回復試験過程における血中へモグロ
ビン量及び血中ヘマトクリット値の変化の結果は、図9
及び図10に示したとおりである。これらの結果から明
らかなように、貧血状態からの鉄添加によるヘモグロビ
ン量の回復は、イワシペプチドESP−2添加群が20
日目以降有意な効果を示し、特に5.00%添加群は4
0日目において、正常ラットの90%のレベルにまで回
復した。また、回復の早さはイワシペプチドESP−2
添加のDose responseが認められた。ま
た、貧血回復試験過程における血中ヘマトクリット値の
変化については、ヘモグロビン量と同様、良好な回復促
進効果を示し、イワシペプチドESP−2添加群は20
日目以降、用量依存的に有意差が認められた。40日目
にはESP−2 5.00%添加群は正常ラットとほぼ
同等のレベルにまで回復した。The results of changes in blood hemoglobin amount and blood hematocrit during the anemia recovery test process are shown in FIG.
10 and FIG. As is clear from these results, the recovery of the hemoglobin amount by the addition of iron from the anemia state was less than 20% in the sardine peptide ESP-2 added group.
A significant effect was shown on and after the day.
On day 0, it recovered to a level of 90% of normal rats. The speed of recovery was sardine peptide ESP-2.
Dose response of addition was observed. In addition, the change in blood hematocrit during the process of anemia recovery test showed a good recovery promoting effect as in the case of the hemoglobin amount.
After the day, a significant difference was observed in a dose-dependent manner. On the 40th day, the ESP-2 5.00% addition group recovered to a level almost equal to that of the normal rat.
【0053】貧血回復試験40日後における心臓血液血
清中の4種のパラメーター、血清鉄(Fe)、不飽和鉄
結合能(UIBC)、総鉄結合能(TIBC)、飽和率
(BR)、を分析し、下記する表11の結果を得た。Analysis of four parameters, serum iron (Fe), unsaturated iron binding capacity (UIBC), total iron binding capacity (TIBC) and saturation rate (BR) in heart blood serum 40 days after the anemia recovery test Then, the results shown in Table 11 below were obtained.
【0054】[0054]
【表11】 [Table 11]
【0055】上記において、血清鉄はニトロソPSAP
法で測定した。上記結果から明らかなように、コントロ
ール群に対し、ESP−2添加群はDose resp
onseがあり、有意な差が認められた。特に5.00
%添加群は正常ラットに対し、90%以上まで回復し
た。In the above, serum iron is nitroso PSAP
It was measured by the method. As is clear from the above results, the Dose resp was higher in the ESP-2 added group than in the control group.
once, and a significant difference was observed. Especially 5.00
The% -added group recovered to 90% or more of normal rats.
【0056】不飽和鉄結合能は玄番らの方法により測定
した。上記結果から明らかなように、これもコントロー
ル群に比べ、用量依存的に有意な回復を示した。これか
ら算出した血液中の鉄飽和率は、コントロール群が正常
ラットに比べて46%であるのに対し、イワシペプチド
ESP−2 1.25%添加群は67%、5.00%添
加群は82%にまで回復し、コントロール群の2倍の効
果を示した。The unsaturated iron binding ability was measured by the method of Genban et al. As is clear from the above results, this also showed significant recovery in a dose-dependent manner as compared with the control group. The iron saturation in the blood calculated from this was 46% in the control group as compared with the normal rat, while 67% in the sardine peptide ESP-2 1.25% added group and 82 in the 5.00% added group. %, Which is twice the effect of the control group.
【0057】上記結果から明らかなように、ESP−2
を添加することにより、各種鉄塩の鉄可溶化率が増加し
た。鉄欠乏性貧血モデルラットについては、体重及び摂
餌量において有意な差を認めず、ヘモグロビン量及びヘ
マトリット値は20日目以降有意な回復が認められた。
血清鉄の回復及び不飽和鉄結合能から算出した結合率も
ESP−2の用量依存的に有意差が認められ、鉄欠乏性
貧血の改善に有効であることが確認された。つまり、イ
ワシ筋肉由来ペプチドは、鉄欠乏性貧血に対し、特にク
エン酸とともに用いることによって、その改善に有意な
効果があることが実証されたのである。この効果はES
P−2のみならずその有効成分を含有するペプチド例え
ばDAN−100においても当然に奏されるものであ
る。As is clear from the above results, ESP-2
By adding, the iron solubilization rate of various iron salts was increased. Regarding the iron deficiency anemia model rat, no significant difference was observed in the body weight and the amount of food consumed, and the hemoglobin amount and the hematrit value significantly recovered after the 20th day.
The binding rate calculated from the recovery of serum iron and the binding ability of unsaturated iron also showed a significant difference depending on the dose of ESP-2, confirming that it was effective in improving iron deficiency anemia. In other words, it has been demonstrated that the sardine muscle-derived peptide has a significant effect on iron deficiency anemia, especially when used in combination with citric acid. This effect is ES
Not only P-2 but also a peptide containing the active ingredient, for example, DAN-100, is naturally exerted.
【0058】[実施例3]本発明に係るイワシ筋肉由来
ペプチド、ESP−2及びDAN−100について、A
sahipak GS−320(径4.0mm×45c
m)を用い、次の条件で高速液体クロマトグラフィ(H
PLC)を行い、クエン酸第一鉄を含む酢酸バッファー
で溶出し、(緩衝液中の鉄濃度は鉄可溶化能測定時とほ
ぼ同様とした)分画について鉄の濃度を測定し、図11
及び図12の結果を得た。[Example 3] A sardine muscle-derived peptide according to the present invention, ESP-2 and DAN-100,
sahipak GS-320 (diameter 4.0mm × 45c)
m) and high performance liquid chromatography (H
PLC) and eluted with an acetate buffer containing ferrous citrate. The iron concentration was measured for the fractions (the iron concentration in the buffer was almost the same as when measuring the iron solubilizing ability).
And the result of FIG. 12 was obtained.
【0059】HPLC条件:溶離液:0.01Mアセテ
ートバッファー(pH4.0)/クエン酸第一鉄ナトリ
ウム(FeNaH(C6H8O7)2)(Fe:10.4p
pm)、流速:0.5ml/min、分画:1.0m
l。HPLC conditions: Eluent: 0.01M acetate buffer (pH 4.0) / ferrous sodium citrate (FeNaH (C 6 H 8 O 7 ) 2 ) (Fe: 10.4 p
pm), flow rate: 0.5 ml / min, fractionation: 1.0 m
l.
【0060】上記結果から明らかなように、いずれのペ
プチドにおいても、ペプチドの溶出パターンと同一パタ
ーンの鉄濃度変化が確認された。したがって、ペプチド
とクエン酸第一鉄が溶解して可溶化している状態におい
て、ペプチドとクエン酸第一鉄とそれぞれ単一に溶解し
ているのではなく、錯体を作り溶解している、すなわ
ち、キレートを起こしていることがわかる。このことか
ら、イワシ筋肉由来ペプチドの鉄吸収促進効果はクエン
酸を介した鉄とのキレート現象によることが強く示唆さ
れた。As is evident from the above results, a change in iron concentration was observed in all the peptides in the same pattern as the elution pattern of the peptide. Therefore, in a state in which the peptide and ferrous citrate are dissolved and solubilized, the peptide and ferrous citrate are not dissolved individually, but form a complex and are dissolved. It can be seen that chelation is occurring. This strongly suggested that the iron absorption promoting effect of the sardine muscle-derived peptide was due to the chelating effect of iron with citric acid.
【0061】[実施例4]ビタミンC 20g、硫酸第
一鉄 10g、グラニュー糖 40g、コーンスターチ
と乳糖の等量混合物 30gに、実施例3で得たペプチ
ドDAN−100を50g加えて充分に混合した。混合
物を100等分して袋に詰め、1袋1.5gの鉄吸収促
進性を有するスティック状栄養健康食品を100袋製造
した。Example 4 To 20 g of vitamin C, 10 g of ferrous sulfate, 40 g of granulated sugar, and 30 g of an equal mixture of corn starch and lactose, 50 g of the peptide Dan-100 obtained in Example 3 was added and mixed well. . The mixture was divided into 100 equal parts and packed into bags, and 100 bags of 1.5 g of nutritional health food sticks having an iron absorption promoting property were produced per bag.
【0062】[実施例5]ペプチドDAN−100にか
えて実施例2で得たペプチドESP−2を用い、またビ
タミンC20gにかえてビタミンCとクエン酸の等量混
合物20gを用いたほかは、実施例4と同様の処理をく
り返し、充分に乾燥せしめた後、鉄吸収促進性栄養健康
食品を製造した。Example 5 The peptide ESP-2 obtained in Example 2 was used in place of the peptide DAN-100, and 20 g of vitamin C was replaced with 20 g of an equal mixture of vitamin C and citric acid. After the same treatment as in Example 4 was repeated and dried sufficiently, an iron absorption-promoting nutritional health food was produced.
【0063】[実施例6]次の配合により鉄剤を製造し
た。(1)実施例2で得たペプチドESP−250g、
(2)硫酸第一鉄 10g、(3)クエン酸 10g、
(4)ラクトース 70g、(5)コーンスターチ 2
9g、(6)ステアリン酸マグネシウム1g。Example 6 An iron agent was produced according to the following formulation. (1) 250 g of the peptide ESP obtained in Example 2,
(2) 10 g of ferrous sulfate, (3) 10 g of citric acid,
(4) lactose 70 g, (5) corn starch 2
9 g, (6) 1 g of magnesium stearate.
【0064】先ず、(1)、(2)、(3)、(4)及
び(5)(但し17g)を混合し、(5)(但し7g)
から調製したペーストとともに顆粒化した。得られた顆
粒に(5)(但し5g)と(6)を加えてよく混合し、
この混合物を圧縮錠剤機により圧縮して、1錠あたり鉄
10mgを含有する錠剤100個を製造した。First, (1), (2), (3), (4) and (5) (17 g) were mixed, and (5) (7 g)
Granulated with the paste prepared from (5) (but 5 g) and (6) are added to the obtained granules and mixed well,
This mixture was compressed using a compression tablet machine to produce 100 tablets containing 10 mg of iron per tablet.
【0065】投与量は、患者の症状、年令によっても異
なるが、0.1〜1000mg/kg/dayで1日1
〜4回投与する。本発明において用いるペプチドは本来
食品由来のものであるので、既述のように安全性にはほ
とんど問題はなく、したがって上記用量をこえて投与し
ても差し支えはない。また、健康の維持、増進、保健、
栄養剤等としてこれを利用する場合は、上記用量よりも
少ない量を長期間に亘って服用すればよい。また、既述
のように本発明に係る鉄剤は、経口投与以外の方法でも
投与することができるが、静脈投与及び筋肉投与の場合
は0.01〜1000mg/kg/dayであり、通常
の鉄剤と同様にして投与することができる。The dose varies depending on the patient's condition and age, but is 0.1 to 1000 mg / kg / day, once a day.
Administer ~ 4 times. Since the peptide used in the present invention is originally derived from food, there is almost no problem in safety as described above, and therefore, it is safe to administer more than the above dose. In addition, health maintenance, promotion, health,
When this is used as a nutritional supplement or the like, a smaller dose than the above dose may be taken for a long period of time. As described above, the iron preparation according to the present invention can be administered by a method other than oral administration. In the case of intravenous administration and intramuscular administration, the dosage is 0.01 to 1000 mg / kg / day. Can be administered in the same manner as described above.
【0066】[実施例7]次の配合を用意した。(1)
実施例2で得たESP−2 10g、(2)塩化鉄 1
g、(3)クエン酸ナトリウム 1g、(4)塩化ナト
リウム 8g、(5)クロロブタノール 4g、(6)
炭酸水素ナトリウム 1g。Example 7 The following composition was prepared. (1)
10 g of ESP-2 obtained in Example 2, (2) iron chloride 1
g, (3) 1 g of sodium citrate, (4) 8 g of sodium chloride, (5) 4 g of chlorobutanol, (6)
1 g of sodium bicarbonate.
【0067】全成分を蒸留水1000mlに溶解し、こ
れを500mlの点滴ビン2本に分注し、鉄含有栄養輸
液を得た。All the components were dissolved in 1000 ml of distilled water, and this was dispensed into two 500 ml drip bottles to obtain an iron-containing nutrient infusion.
【0068】[0068]
【発明の効果】本発明においては、イワシ筋肉由来ペプ
チドESP−2、DAN−100を用いることにより、
鉄の吸収が促進され、クエン酸を配合することによって
それが更に増幅される。したがって、本発明に係る鉄吸
収促進剤や鉄剤は鉄の吸収性が著じるしく改善されるの
で、貧血改善のための鉄吸収組成物、例えば健康食品、
薬剤として好適なものである。According to the present invention, by using the sardine muscle-derived peptides ESP-2 and DAN-100,
Iron absorption is enhanced and it is further amplified by the incorporation of citric acid. Therefore, since the iron absorption enhancer and iron agent according to the present invention have significantly improved iron absorption, an iron absorption composition for improving anemia, such as a health food,
It is suitable as a drug.
【図1】ESP−2及びDAN−100のHPLCのパ
ターンを示す。FIG. 1 shows the HPLC pattern of ESP-2 and DAN-100.
【図2】塩化鉄(FeCl3)を用いたときの各ペプチ
ドの鉄可溶化率を示す。FIG. 2 shows the iron solubilization ratio of each peptide when iron chloride (FeCl 3 ) was used.
【図3】硫酸第一鉄(FeSO4)を用いたときの各ペ
プチドの鉄可溶化率を示す。FIG. 3 shows the iron solubilization rate of each peptide when ferrous sulfate (FeSO 4 ) was used.
【図4】クエン酸第一鉄ナトリウム(FeNaH(C6
H8O7)2)を用いたときの各ペプチドの鉄可溶化率を
示す。FIG. 4. Ferrous sodium citrate (FeNaH (C 6
H 8 O 7) 2) shows the iron solubilization rate of each peptide when using.
【図5】塩化鉄を用い、クエン酸を添加したときの、各
ペプチドの鉄可溶化率を示す。FIG. 5 shows the iron solubilization rate of each peptide when citric acid was added using iron chloride.
【図6】硫酸第一鉄を用い、クエン酸を添加したとき
の、各ペプチドの鉄可溶化率を示す。FIG. 6 shows the iron solubilization ratio of each peptide when ferrous sulfate was used and citric acid was added.
【図7】鉄欠乏貧血ラットの回復試験におけるラット体
重の推移を示す。FIG. 7 shows changes in rat body weight in a recovery test of iron-deficient anemia rats.
【図8】鉄欠乏貧血ラットの飼料給餌量を示す。FIG. 8 shows the amount of feed fed to iron-deficient anemic rats.
【図9】貧血回復過程におけるヘモグロビン量の変化を
示す。FIG. 9 shows changes in the amount of hemoglobin in the process of recovery from anemia.
【図10】貧血回復過程におけるヘマトクリット値の変
化を示す。FIG. 10 shows the change in hematocrit during the recovery process from anemia.
【図11】硫酸第一鉄含有溶離剤によるESP−2のH
PLCのパターンを示す。FIG. 11. H of ESP-2 with eluent containing ferrous sulfate
3 shows a PLC pattern.
【図12】硫酸第一鉄含有溶離剤によるDAN−100
のHPLCのパターンを示す。FIG. 12. DAN-100 with ferrous sulfate containing eluent
3 shows the HPLC pattern of the sample.
【図13】ESP−2のUVスペクトルを示す。FIG. 13 shows a UV spectrum of ESP-2.
【図14】ESP−2のIRスペクトルを示す。FIG. 14 shows an IR spectrum of ESP-2.
○:ESP−2 □:DAN−100 △:カゼインペプチド A:蒸留水 B:緩衝液 :: ESP-2 □: DAN-100 △: Casein peptide A: distilled water B: buffer
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI A61P 3/02 A61P 3/02 7/06 7/06 C12P 21/06 C12P 21/06 (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) A61K 38/00 BIOSIS(DIALOG) CA(STN) MEDLINE(STN) EMBASE(STN)Continuation of the front page (51) Int.Cl. 7 identification code FI A61P 3/02 A61P 3/02 7/06 7/06 C12P 21/06 C12P 21/06 (58) Fields surveyed (Int.Cl. 7 , DB name) A61K 38/00 BIOSIS (DIALOG) CA (STN) MEDLINE (STN) EMBASE (STN)
Claims (6)
−100を有効成分とする鉄吸収促進組成物。1. Peptide ESP-2 or peptide DAN
An iron absorption promoting composition containing -100 as an active ingredient.
性飲食品である請求項1に記載の鉄吸収促進組成物。2. The iron absorption promoting composition according to claim 1, wherein the composition is an iron absorption promoting agent or an iron absorption promoting food or drink.
合物からなる鉄剤。3. An iron preparation comprising the peptide ESP-2, citric acid and an iron compound.
鉄化合物からなる鉄剤。4. An iron preparation comprising the peptide Dan-100, citric acid and an iron compound.
ン酸第一鉄、クエン酸鉄アンモニウム、コハク酸クエン
酸鉄ナトリウム、乳酸鉄及びピロリン酸鉄からなる群か
ら選ばれるものである請求項3又は請求項4に記載の鉄
剤。5. The iron compound is selected from the group consisting of iron chloride, ferrous sulfate, ferrous citrate, iron ammonium citrate, iron sodium succinate, iron lactate and iron pyrophosphate. The iron agent according to claim 3 or 4.
合物を単に混合してなるもの、あるいは、これをキレー
ト結合させてなるものである請求項3〜請求項5のいず
れか1項に記載の鉄剤。6. The method according to claim 3, wherein the iron agent is obtained by simply mixing the peptide, citric acid and an iron compound, or is obtained by chelating the compound. Iron agent.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP07315392A JP3167402B2 (en) | 1992-02-25 | 1992-02-25 | Iron absorption promotion composition |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP07315392A JP3167402B2 (en) | 1992-02-25 | 1992-02-25 | Iron absorption promotion composition |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH05229959A JPH05229959A (en) | 1993-09-07 |
JP3167402B2 true JP3167402B2 (en) | 2001-05-21 |
Family
ID=13509953
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP07315392A Expired - Lifetime JP3167402B2 (en) | 1992-02-25 | 1992-02-25 | Iron absorption promotion composition |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP3167402B2 (en) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2683529B2 (en) * | 1994-02-08 | 1997-12-03 | 静次 片野 | Gel food |
WO1998029434A1 (en) * | 1996-12-31 | 1998-07-09 | Ford Henry Health System | Method and pharmaceutical composition for iron delivery in hemodialysis and peritoneal dialysis patients |
ES2444215T3 (en) * | 2002-07-29 | 2014-02-24 | Zymtech Production As | Method for the production of peptides and amino acids from material of animal origin comprising proteins |
JP4715078B2 (en) * | 2003-04-16 | 2011-07-06 | 大正製薬株式会社 | Liquid composition for internal use containing iron compounds |
EP1704871A4 (en) * | 2004-01-14 | 2008-08-06 | Gekkeikan Kk | Iron supplement and utilization of the same |
HUE029966T2 (en) * | 2007-12-14 | 2017-04-28 | Hofseth Biocare Asa | Compositions and methods for increasing iron absorption |
CN105852135A (en) * | 2016-03-30 | 2016-08-17 | 福建农林大学 | Preparation method of edible and medicinal fungus protein peptide-ferrous chelate |
JP2018110573A (en) * | 2017-01-06 | 2018-07-19 | 豊郎 中村 | Method for producing functional protein drink using meat and fish meat as raw material |
CN111560051B (en) * | 2020-05-26 | 2022-11-25 | 大连工业大学 | Shrimp-derived nonapeptide with iron absorption promoting activity and application thereof |
CN115067416B (en) * | 2022-08-23 | 2022-11-15 | 北京中科生仪科技有限公司 | Composition for supplementing iron and enriching blood and preparation process thereof |
CN115997935B (en) * | 2022-12-28 | 2024-03-19 | 浙江工业大学 | Preparation method of mackerel-derived assembled polypeptide-calcium nano-carrier |
-
1992
- 1992-02-25 JP JP07315392A patent/JP3167402B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH05229959A (en) | 1993-09-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3167402B2 (en) | Iron absorption promotion composition | |
JP2805194B2 (en) | Peptide for increasing blood triglyceride concentration and blood triglyceride concentration increase inhibitor containing the peptide as an active ingredient | |
JPH06293796A (en) | Adipose cell differentiation-inhibiting peptide and adipose cell differentation-inhibiting agent containing the peptide as active ingredient | |
JP4596513B2 (en) | Nutritional composition | |
JP2764276B2 (en) | Functional novel peptides and their use | |
JP3117779B2 (en) | Novel peptide α-1000 | |
JP3369233B2 (en) | New peptides, their production methods and applications | |
EP1460084B1 (en) | Novel peptide sy | |
JPS6287058A (en) | Novel peptide | |
JP2800877B2 (en) | Peptide for increasing blood triglyceride concentration and blood triglyceride concentration increase inhibitor containing the peptide as an active ingredient | |
JP2001002583A (en) | Blood sugar level increase inhibitor | |
JP3408739B2 (en) | Calcium absorption promoter and calcium supplement | |
JP3388602B2 (en) | New hydrophilic peptide | |
WO2000066626A1 (en) | Novel peptide y-2 | |
US20060040872A1 (en) | Calcium channel inhibitor | |
JP2785036B2 (en) | Functional food | |
JP5312780B2 (en) | Food / drink and pharmaceutical composition for reducing blood ammonia concentration | |
JP4135998B2 (en) | Calcium absorption promoter | |
JP2007153807A (en) | Iron absorption promoter | |
JPH0369269B2 (en) | ||
JP2732056B2 (en) | Antihypertensive and vasodilator | |
JPH06248000A (en) | New peptide, its production and use thereof | |
JP3483875B2 (en) | Novel hydrophilic peptide Y-2 | |
JPH11228599A (en) | New peptide y-2 | |
KR100523432B1 (en) | Hair growth accelerator |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100309 Year of fee payment: 9 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120309 Year of fee payment: 11 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |