JP3158179B2 - キャピラリ電気泳動装置およびその方法 - Google Patents
キャピラリ電気泳動装置およびその方法Info
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- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、一般に、タンパク質の
分離に関し、より詳細には外部電場の印加によって電気
浸透流が制御される所望のｐＨにおけるタンパク質のキ
ャピラリ・ゾーン電気泳動に関するものである。
分離に関し、より詳細には外部電場の印加によって電気
浸透流が制御される所望のｐＨにおけるタンパク質のキ
ャピラリ・ゾーン電気泳動に関するものである。
【０００２】
【従来技術とその問題点】微細のキャピラリ（７５μｍ
またはそれ以下）内のキャピラリ・ゾーン電気泳動（Ｃ
ＺＥ）は最初にヨルゲンソンとルーカクスによって説明
され、少量の溶質を分離するための効果的な方法として
有用なことが実証された（１９８１年発行のＪ．Ｃｈｒ
ｏｍａｔｏｇ．２１８，２０９ページ及び１９８１年発
行のＡｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，５３，１２９８ページ）。
分離プロセスは接線方向に印加された電場の影響の下で
の固体表面と接触する液体の流れとして一般に表わされ
る電気浸透効果に基づくものである。キャピラリ・ゾー
ン電気泳動による電気泳動分離のための魅力的な要因と
して、試料の大きさが小さくないこと、試料の前処理が
ほとんどまたは全くないこと、そして生物学的活性試料
定量および再現が可能であることが挙げられる。
またはそれ以下）内のキャピラリ・ゾーン電気泳動（Ｃ
ＺＥ）は最初にヨルゲンソンとルーカクスによって説明
され、少量の溶質を分離するための効果的な方法として
有用なことが実証された（１９８１年発行のＪ．Ｃｈｒ
ｏｍａｔｏｇ．２１８，２０９ページ及び１９８１年発
行のＡｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，５３，１２９８ページ）。
分離プロセスは接線方向に印加された電場の影響の下で
の固体表面と接触する液体の流れとして一般に表わされ
る電気浸透効果に基づくものである。キャピラリ・ゾー
ン電気泳動による電気泳動分離のための魅力的な要因と
して、試料の大きさが小さくないこと、試料の前処理が
ほとんどまたは全くないこと、そして生物学的活性試料
定量および再現が可能であることが挙げられる。
【０００３】キャピラリ・ゾーン電気泳動のただ一つの
最大の欠点はタンパク質などの巨大分子を分離しようと
するときにある。ＣＺＥによる巨大分子の分離はバイオ
ポリマーとシリカ・キャピラリの壁との好ましくない相
互作用をもたらす。
最大の欠点はタンパク質などの巨大分子を分離しようと
するときにある。ＣＺＥによる巨大分子の分離はバイオ
ポリマーとシリカ・キャピラリの壁との好ましくない相
互作用をもたらす。
【０００４】タンパク質のＣＺＥ分離に付随する問題に
対する一つの解決策として米国特許第４，９３１，３２
８号に報告されており、ここでは界面層がキャピラリ管
の内壁に共有結合される改良された毛細管が述べられて
いる。界面層は内壁とタンパク質溶質との相互作用を減
少させるのに効果的であり、水和可能な両性相を含んで
いる。この両性相は確定できる等電点を有し、溶液のｐ
Ｈを選択することによって電気浸透流を制御することが
できる。
対する一つの解決策として米国特許第４，９３１，３２
８号に報告されており、ここでは界面層がキャピラリ管
の内壁に共有結合される改良された毛細管が述べられて
いる。界面層は内壁とタンパク質溶質との相互作用を減
少させるのに効果的であり、水和可能な両性相を含んで
いる。この両性相は確定できる等電点を有し、溶液のｐ
Ｈを選択することによって電気浸透流を制御することが
できる。
【０００５】１９９０年発行のＡｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，
６２，１５５０〜１５５２ページに、ＣＺＥ技術につい
て報告しており、ここでは外部電場を利用して水溶液／
キャピラリ管内面におけるゼータ電位を変化させること
によって未処理のフェーズド・シリカ・キャピラリ電気
浸透が制御されている。
６２，１５５０〜１５５２ページに、ＣＺＥ技術につい
て報告しており、ここでは外部電場を利用して水溶液／
キャピラリ管内面におけるゼータ電位を変化させること
によって未処理のフェーズド・シリカ・キャピラリ電気
浸透が制御されている。
【０００６】
【発明の目的】本発明の目的はタンパク質が生物学的に
活性な状態を保ったままタンパク質を分離するためのキ
ャピラリ・ゾーン電気泳動法および装置を提供すること
にある。本発明の他の目的は、キャピラリ内面の電荷ゼ
ロ点またはその近くでタンパク質が分離され、そしてキ
ャピラリ壁を横切る外部電場を調整することによって電
気浸透流が制御されるキャピラリ・ゾーン電気泳動法お
よび装置を提供することにある。本発明のその他の目的
および利点は本願明細書を詳細に検討することによって
当業者には自明である。
活性な状態を保ったままタンパク質を分離するためのキ
ャピラリ・ゾーン電気泳動法および装置を提供すること
にある。本発明の他の目的は、キャピラリ内面の電荷ゼ
ロ点またはその近くでタンパク質が分離され、そしてキ
ャピラリ壁を横切る外部電場を調整することによって電
気浸透流が制御されるキャピラリ・ゾーン電気泳動法お
よび装置を提供することにある。本発明のその他の目的
および利点は本願明細書を詳細に検討することによって
当業者には自明である。
【０００７】
【発明の概要】本発明の一実施例においては、相互作用
相がアミノ基を含む改善された内面を有するキャピラリ
管が調整される。このようなアミノ相カラムはあらかじ
め定められた電荷ゼロ点が設けられる。これらのカラム
は、電気浸透流の大きさと方向が外部から印加された電
場によって制御されると同時に、ｐＨがあらかじめ定め
られたＰＺＣまたはその付近になるように調節されるＣ
ＺＥにおいて用いられる。
相がアミノ基を含む改善された内面を有するキャピラリ
管が調整される。このようなアミノ相カラムはあらかじ
め定められた電荷ゼロ点が設けられる。これらのカラム
は、電気浸透流の大きさと方向が外部から印加された電
場によって制御されると同時に、ｐＨがあらかじめ定め
られたＰＺＣまたはその付近になるように調節されるＣ
ＺＥにおいて用いられる。
【０００８】
【発明の実施例】ゼロ電荷点（ＰＺＣ）は一般に表面の
正味電荷がゼロになるｐＨとして定義される。米国特許
第４，９３１，３２８号に記載されているように、キャ
ピラリ管は界面層がキャピラリ管の内壁に共有結合され
るように改善することができる。内壁とタンパク質との
相互作用を最小化するのを助ける界面層は、水和可能な
両性相を含む。両性相は確定できる等電点を有する。し
たがって、両性相は特異なＰＺＣ特性を有する多様な表
面を提供することができる。
正味電荷がゼロになるｐＨとして定義される。米国特許
第４，９３１，３２８号に記載されているように、キャ
ピラリ管は界面層がキャピラリ管の内壁に共有結合され
るように改善することができる。内壁とタンパク質との
相互作用を最小化するのを助ける界面層は、水和可能な
両性相を含む。両性相は確定できる等電点を有する。し
たがって、両性相は特異なＰＺＣ特性を有する多様な表
面を提供することができる。
【０００９】１９９０年の発行のＡｎａｌ．Ｃｈｅ
ｍ．，６２，１５５０〜１５５２ページには分離キャピ
ラリの外側から印加された付加電場を利用することによ
ってキャピラリ電気泳動における電気浸透流の直接的な
制御が述べられている。この技術は外部から印加された
電位をキャピラリの内部の緩衝溶液を横切る電位とベク
トル的に組合せる。キャピラリ壁を横切るこの電位勾配
はキャピラリ壁の内面へのゼータ電位の極性および大き
さを制御するものと考えられる。電気浸透の方向と流速
はゼータ電位の極性および大きさに依存している。溶液
条件がｐＨが５で、１ｍＭリン酸塩緩衝液で、未処理の
フューズド・シリカ・キャピラリ電気泳動の電気浸透は
単に外部電位を変化させることによって直接制御され
る。
ｍ．，６２，１５５０〜１５５２ページには分離キャピ
ラリの外側から印加された付加電場を利用することによ
ってキャピラリ電気泳動における電気浸透流の直接的な
制御が述べられている。この技術は外部から印加された
電位をキャピラリの内部の緩衝溶液を横切る電位とベク
トル的に組合せる。キャピラリ壁を横切るこの電位勾配
はキャピラリ壁の内面へのゼータ電位の極性および大き
さを制御するものと考えられる。電気浸透の方向と流速
はゼータ電位の極性および大きさに依存している。溶液
条件がｐＨが５で、１ｍＭリン酸塩緩衝液で、未処理の
フューズド・シリカ・キャピラリ電気泳動の電気浸透は
単に外部電位を変化させることによって直接制御され
る。
【００１０】本発明は、キャピラリ表面のＰＺＣを任意
の所望のｐＨになるように調節するため、キャピラリ管
の内表面に被覆された（ｃｏａｔｅｄ）界面層を用いる
ことに部分的に基づくものである。この層は、キャピラ
リ・ボア（孔）に化学的に結合されるか、あるいは高度
に物理的に吸着させることができ、この層はキャピラリ
分離条件の下で安定である。界面層はアルカリ性又は酸
性の平衡状態を有する水和可能な両性層またはイオン化
可能な種を含むことができる。改良されたキャピラリ管
は、電気浸透流（ＥＯＦ）の大きさと方向が外部から印
加される電場によって制御されると同時にｐＨが改良さ
れた表面のあらかじめ定められたＰＺＣまたはこれの付
近になるように調節されるＣＺＥにおいて利用すること
ができる。
の所望のｐＨになるように調節するため、キャピラリ管
の内表面に被覆された（ｃｏａｔｅｄ）界面層を用いる
ことに部分的に基づくものである。この層は、キャピラ
リ・ボア（孔）に化学的に結合されるか、あるいは高度
に物理的に吸着させることができ、この層はキャピラリ
分離条件の下で安定である。界面層はアルカリ性又は酸
性の平衡状態を有する水和可能な両性層またはイオン化
可能な種を含むことができる。改良されたキャピラリ管
は、電気浸透流（ＥＯＦ）の大きさと方向が外部から印
加される電場によって制御されると同時にｐＨが改良さ
れた表面のあらかじめ定められたＰＺＣまたはこれの付
近になるように調節されるＣＺＥにおいて利用すること
ができる。
【００１１】タンパク質に立体配座（及び機能）はｐＨ
に非常に敏感なので、本発明はタンパク質の分離に特に
適している。タンパク質の分離には分離が行なわれる特
定のｐＨを選択することが望ましい。加えて、分離され
る成分の分解能を最適にするための制御が必要である。
に非常に敏感なので、本発明はタンパク質の分離に特に
適している。タンパク質の分離には分離が行なわれる特
定のｐＨを選択することが望ましい。加えて、分離され
る成分の分解能を最適にするための制御が必要である。
【００１２】
【実施例】相互作用相がアミノ基を含む改良された内表
面を有するキャピラリ管（ここではアミノ相カラムと呼
ばれ、本発明のイオン化可能な種の実施例を示す）は、
それぞれ米国特許第４，９３１，３２８号および第５，
００６，３１３号に記載されており、２−アミノプロピ
ルトリエトキシシランの０．５％溶液（ｐＨ４．５）を
１５分間キャピラリ管にポンピングさせた後、硬化させ
て調製した。アミノ相カラムは図１に示されるように、
システムの内側キャピラリとして使用した。
面を有するキャピラリ管（ここではアミノ相カラムと呼
ばれ、本発明のイオン化可能な種の実施例を示す）は、
それぞれ米国特許第４，９３１，３２８号および第５，
００６，３１３号に記載されており、２−アミノプロピ
ルトリエトキシシランの０．５％溶液（ｐＨ４．５）を
１５分間キャピラリ管にポンピングさせた後、硬化させ
て調製した。アミノ相カラムは図１に示されるように、
システムの内側キャピラリとして使用した。
【００１３】図１を参照すると、内径５０μｍ、外径１
５０μｍで長さが２５ｃｍのキャピラリ２０５を内径２
００μｍ、外径３５０μｍで長さが２２ｃｍのより大き
いキャピラリ２０６中に設置した。内側（試料）キャピ
ラリを貯蔵器２０１および２０４に結合し、大きい方の
（外側の）キャピラリを貯蔵器２０２および２０３に結
合した。貯蔵器と外側キャピラリに緩衝液を充満した。
双極性高電圧源２０７がライン２０８と電極２０９を介
して貯蔵器２０１中の緩衝液と接続させた。活性化され
ると、電源２０７は貯蔵器２０１と２０４の間の内側キ
ャピラリ管の内部に電場を生成させる。同様に、双極性
高電圧源２１０がライン２１１と電極２１２を介して貯
蔵器２０２と接続した。貯蔵器２０３中の緩衝液はライ
ン２１６と電極２１７を介して選択可能な抵抗はしご
（ｒｅｇｉｓｔｏｒ ｌａｄｄｅｒ）２１５と接続し、
次にはしごをライン２１４を経て双極高電圧源２１３と
接続させる。貯蔵器２０４を接地した。
５０μｍで長さが２５ｃｍのキャピラリ２０５を内径２
００μｍ、外径３５０μｍで長さが２２ｃｍのより大き
いキャピラリ２０６中に設置した。内側（試料）キャピ
ラリを貯蔵器２０１および２０４に結合し、大きい方の
（外側の）キャピラリを貯蔵器２０２および２０３に結
合した。貯蔵器と外側キャピラリに緩衝液を充満した。
双極性高電圧源２０７がライン２０８と電極２０９を介
して貯蔵器２０１中の緩衝液と接続させた。活性化され
ると、電源２０７は貯蔵器２０１と２０４の間の内側キ
ャピラリ管の内部に電場を生成させる。同様に、双極性
高電圧源２１０がライン２１１と電極２１２を介して貯
蔵器２０２と接続した。貯蔵器２０３中の緩衝液はライ
ン２１６と電極２１７を介して選択可能な抵抗はしご
（ｒｅｇｉｓｔｏｒ ｌａｄｄｅｒ）２１５と接続し、
次にはしごをライン２１４を経て双極高電圧源２１３と
接続させる。貯蔵器２０４を接地した。
【００１４】例えば、貯蔵器２０１を＋１０ｋＶに、貯
蔵器２０４を０Ｖに設定すると、１０ｋＶの軸方向の電
場を得ることができる。内側（試料）キャピラリ中に軸
方向内部電場を得た後、貯蔵器２０２と２０３の間に電
圧勾配を設けることによって二つの同軸キャピラリにお
けるキャピラリの間隙を横切る均一な放射方向の電場が
形成される。外部電場は正または負のどちらにもなりう
る。例えば、貯蔵器２０２および２０３における電位が
それぞれ＋１５ｋＶおよび＋５ｋＶであるならば、軸方
向で正の放射方向の均一な外部電場が得られる。これ
は、キャピラリの間隙を横切る＋５ｋＶの放射方向の電
場を確立する。他方では、貯蔵器２０２および２０３に
おける電位がそれぞれ＋５ｋＶおよび−５ｋＶになるよ
うに極性が変化されると、−５ｋＶの負で放射方向の均
一な外部電場が形成される。
蔵器２０４を０Ｖに設定すると、１０ｋＶの軸方向の電
場を得ることができる。内側（試料）キャピラリ中に軸
方向内部電場を得た後、貯蔵器２０２と２０３の間に電
圧勾配を設けることによって二つの同軸キャピラリにお
けるキャピラリの間隙を横切る均一な放射方向の電場が
形成される。外部電場は正または負のどちらにもなりう
る。例えば、貯蔵器２０２および２０３における電位が
それぞれ＋１５ｋＶおよび＋５ｋＶであるならば、軸方
向で正の放射方向の均一な外部電場が得られる。これ
は、キャピラリの間隙を横切る＋５ｋＶの放射方向の電
場を確立する。他方では、貯蔵器２０２および２０３に
おける電位がそれぞれ＋５ｋＶおよび−５ｋＶになるよ
うに極性が変化されると、−５ｋＶの負で放射方向の均
一な外部電場が形成される。
【００１５】図２はｐＨ３．０（５０ｍＭクエン酸塩）
において印加された外部電位勾配に対して電気浸透移動
度の絶対値をプロットしたグラフである。正の外部電場
はＥＯＦを増加させ、すなわちアノード・フローの速度
が大きくなることが明らかである。負の外部電場を印加
すると、ＥＯＦが遅くなるが、逆にはしなかった。
において印加された外部電位勾配に対して電気浸透移動
度の絶対値をプロットしたグラフである。正の外部電場
はＥＯＦを増加させ、すなわちアノード・フローの速度
が大きくなることが明らかである。負の外部電場を印加
すると、ＥＯＦが遅くなるが、逆にはしなかった。
【００１６】ｐＨ４．０において前述の実験が繰返さ
れ、アミノ相カラムのゼロ電荷点から、実験的にゼロ電
荷点は４．５であると計算された。図３は印加された外
部電位勾配に対して電気浸透移動度をプロットしたグラ
フである。これより、＋８ｋＶの電位においては一般に
ＥＯＦ（電気浸透流）が増加するが、−８ｋＶのオフセ
ットは流れの方向を逆にすることが分る。
れ、アミノ相カラムのゼロ電荷点から、実験的にゼロ電
荷点は４．５であると計算された。図３は印加された外
部電位勾配に対して電気浸透移動度をプロットしたグラ
フである。これより、＋８ｋＶの電位においては一般に
ＥＯＦ（電気浸透流）が増加するが、−８ｋＶのオフセ
ットは流れの方向を逆にすることが分る。
【００１７】図４はアミノ相カラムを使用してｐＨに対
して電気泳動移動度をプロットしたグラフである。図５
はｐＨを４．０に固定した（１０ｍＭのクエン酸塩緩衝
液）ときの外部電場に対する電気泳動移動度をプロット
したグラフである。図６は界面活性剤を添加してｐＨを
４．０に固定した（１０ｍＭ ＯＡＣ緩衝液、ＣＨＡＰ
ＳＯ）ときの印加された電場に対する電気泳動移動度を
プロットしたグラフである。
して電気泳動移動度をプロットしたグラフである。図５
はｐＨを４．０に固定した（１０ｍＭのクエン酸塩緩衝
液）ときの外部電場に対する電気泳動移動度をプロット
したグラフである。図６は界面活性剤を添加してｐＨを
４．０に固定した（１０ｍＭ ＯＡＣ緩衝液、ＣＨＡＰ
ＳＯ）ときの印加された電場に対する電気泳動移動度を
プロットしたグラフである。
【００１８】図７ａについて言えば、５０μｍのアミノ
相カラムが使用されて細菌ロドプシンと細菌オプシンと
の混合物がｐＨ４．０において外部制御なしに、すなわ
ち外部電場を印加しないで分離された（検出器へ９３ｍ
ｍ、λ２１０、１０ｍＭ、ＯＡＣ、１８．０ｍＭ、ＣＨ
ＡＰＳＯ、２０Ｖ／ｃｍ）。図７ｂは＋１０ｋＶの勾配
を適用した以外は同じ条件の下での同じタンパク質混合
物の分離を示している。０．１１ｍｍ／秒（図７ａ）か
ら０．２５ｍｍ／秒（図７ｂ）への電気浸透流の増加は
ＥＯＳの増加に比例して溶離時間を短縮することができ
る。本発明は好適な実施例に関連させて詳述したが、本
願発明はこれら説明および実施例に限定されるものでは
ないことは明らかである。
相カラムが使用されて細菌ロドプシンと細菌オプシンと
の混合物がｐＨ４．０において外部制御なしに、すなわ
ち外部電場を印加しないで分離された（検出器へ９３ｍ
ｍ、λ２１０、１０ｍＭ、ＯＡＣ、１８．０ｍＭ、ＣＨ
ＡＰＳＯ、２０Ｖ／ｃｍ）。図７ｂは＋１０ｋＶの勾配
を適用した以外は同じ条件の下での同じタンパク質混合
物の分離を示している。０．１１ｍｍ／秒（図７ａ）か
ら０．２５ｍｍ／秒（図７ｂ）への電気浸透流の増加は
ＥＯＳの増加に比例して溶離時間を短縮することができ
る。本発明は好適な実施例に関連させて詳述したが、本
願発明はこれら説明および実施例に限定されるものでは
ないことは明らかである。
【００１９】
【発明の効果】以上説明したように、本願発明により、
より効果的にタンパク質を分離することが可能なキャピ
ラリ電気泳動を得ることができる。
より効果的にタンパク質を分離することが可能なキャピ
ラリ電気泳動を得ることができる。
【図１】本発明に用いられるキャピラリ・ゾーン電気泳
動装置の概略図。
動装置の概略図。
【図２】本発明で得られるｐＨ３．０における電気浸透
移動度と印加される外部電場勾配の関係を示す図。
移動度と印加される外部電場勾配の関係を示す図。
【図３】本発明で得られるｐＨ４．０における電気浸透
移動度と印加される外部電場勾配の関係を示す図。
移動度と印加される外部電場勾配の関係を示す図。
【図４】本発明で得られるｐＨと電気浸透移動度の関係
を示す図。
を示す図。
【図５】本発明で得られるｐＨ４．０における電気泳動
移動度と印加される外部電場勾配の関係を示す図。
移動度と印加される外部電場勾配の関係を示す図。
【図６】本発明で得られる界面活性剤を添加し、ｐＨ
４．０における電気泳動移動度と印加される外部電場勾
配の関係を示す図。
４．０における電気泳動移動度と印加される外部電場勾
配の関係を示す図。
【図７ａ】外部制御なしでおこなったタンパク質混合物
の分離結果を示す図。
の分離結果を示す図。
【図７ｂ】外部電場を印加しておこなったタンパク質混
合物の分離結果を示す図。
合物の分離結果を示す図。
２０１、２０２、２０３、２０４：貯蔵器 ２０５、２０６：キャピラリ ２０７、２１０、２１３：電圧源 ２０９、２１２、２１７：電極 ２１５：抵抗はしご
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (73)特許権者 399117121 395 Ｐａｇｅ Ｍｉｌｌ Ｒｏａｄ Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎ ｉａ Ｕ．Ｓ．Ａ. (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 27/447 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
Claims (10)
- 【請求項１】外側キャピラリ壁と内側キャピラリ壁とを
有し、該内側キャピラリ壁の更に内側に長さ方向に延び
る孔が設けられ、前記内側キャピラリ壁の少なくとも前
記孔の内面にはタンパク質溶質との相互作用を減少させ
る化学的に結合又は物理的に吸着された界面層が設けら
れるキャピラリ管と、 前記内側キャピラリ壁内の前記孔の長さ方向に沿って内
部電場を印加する手段と、 前記外側キャピラリ壁と前記内側キャピラリー壁とを交
差する方向の外部電場を印加させる手段とを具えること
を特徴とする、キャピラリ電気泳動装置。 - 【請求項２】前記界面層は、タンパク質、ペプチド又は
両性物質から成る水和可能な両性層を含むことを特徴と
する、請求項１に記載のキャピラリ電気泳動装置。 - 【請求項３】前記界面層は、酸性又はアルカリ性の平衡
状態を有するイオン化可能な化学種を含むことを特徴と
する、請求項１に記載のキャピラリ電気泳動装置。 - 【請求項４】前記イオン化可能な化学種は、アミノ基を
含む族の材料であることを特徴とする、請求項３に記載
のキャピラリ電気泳動装置。 - 【請求項５】前記イオン化可能な化学種であるアミノ基
を含む族の材料は、２−アミノプロピルトリエトキシシ
ランを有することを特徴とする、請求項４に記載のキャ
ピラリ電気泳動装置。 - 【請求項６】前記内側キャピラリ壁の前記内面には、両
性物質で構成される物理的に吸着された前記界面層が設
けられることを特徴とする、請求項１に記載のキャピラ
リ電気泳動装置。 - 【請求項７】前記界面層の表面は、溶液の所望のｐＨで
あるか又はその付近であるゼロ電荷を有することを特徴
とする、請求項２乃至６の一つに記載のキャピラリ電気
泳動装置。 - 【請求項８】外部電場によって電気浸透流の制御を可能
にすることを特徴とする、請求項７に記載のキャピラリ
電気泳動装置。 - 【請求項９】外側キャピラリ壁及び内側キャピラリ壁を
具え、該内側キャピラリ壁の内部に長さ方向に延びる孔
が設けられ、前記内側キャピラリ壁の前記孔の前記内面
に前記内側キャピラリ壁とタンパク質溶質の相互作用を
減少させる界面層が化学的に結合又は物理的に吸着され
ているところのキャピラリ管の一方の端部を緩衝液貯蔵
器に配置させる工程と、 前記内部キャピラリ壁内の前記孔に沿った２つの点の間
に内部電場を確立する工程と、 前記外側キャピラリ壁と前記内側キャピラリ壁とを交差
する方向の外部電場を印加させる工程とを有することを
特徴とする、所望のｐＨの溶液でのタンパク質の分離に
有益なキャピラリ電気泳動方法。 - 【請求項１０】前記界面層はタンパク質、ペプチド又は
両性物質から成る水和可能な両性層を含むことを特徴と
する、請求項９に記載のキャピラリ電気泳動方法。
Applications Claiming Priority (2)
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|---|---|---|---|
| US71860091A | 1991-06-21 | 1991-06-21 | |
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Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
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| JP (1) | JP3158179B2 (ja) |
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|---|---|---|---|---|
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