JP3077975B1 - Novel microorganism having fat and oil decomposability, and method of treating wastewater containing fat and oil using the novel microorganism - Google Patents

Novel microorganism having fat and oil decomposability, and method of treating wastewater containing fat and oil using the novel microorganism

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JP3077975B1
JP3077975B1 JP3154299A JP3154299A JP3077975B1 JP 3077975 B1 JP3077975 B1 JP 3077975B1 JP 3154299 A JP3154299 A JP 3154299A JP 3154299 A JP3154299 A JP 3154299A JP 3077975 B1 JP3077975 B1 JP 3077975B1
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Abstract

【要約】 【課題】新規な油脂分解微生物を提供する。 【解決手段】 Staphylococcus属に属し、油脂成分に分
解性を有する新規微生物S.saprophyticus OD-1(FER
M P−17201)を見出した。
The present invention provides a novel fat-decomposing microorganism. SOLUTION: A novel microorganism S. saprophyticus OD-1 (FER) belonging to the genus Staphylococcus and having a decomposability in fat and oil components.
MP-17201).

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、動植物油脂分の分
解性を有する新規微生物に関する。
[0001] The present invention relates to a novel microorganism capable of decomposing animal and vegetable oils and fats.

【0002】[0002]

【従来の技術】排水中には動植物性の油脂分を多く含ん
でいることがあり、かかる排水をそのまま公共下水道等
に放流することは水域環境維持の観点から厳しく規制さ
れている。また、かかる規制の目的で排水基準が定めら
れており、各事業体は油脂分除外設備を設置するなどの
対応が義務づけられている。
2. Description of the Related Art Wastewater often contains a large amount of animal and vegetable oils and fats, and the discharge of such wastewater as it is to public sewers is strictly regulated from the viewpoint of maintaining the environment of water bodies. Also, wastewater standards are set for the purpose of such regulations, and each business entity is required to take measures such as installing oil and fat exclusion equipment.

【0003】しかし、従来用いられているグリーストラ
ップなどの油脂分除外設備の設置では、固形化油脂の蓄
積、下水管の閉塞、悪臭の発生、排水基準値の超過など
の問題が煩雑に発生する。
[0003] However, the installation of a conventionally used grease trap or other grease removal facility complicates problems such as accumulation of solidified grease, blockage of sewer pipes, generation of offensive odors, and exceeding of drainage standard values. .

【0004】この問題を解決する排水の処理技術の一つ
に生物学的処理法がある。この中で、特に活性汚泥法が
よく知られている。これは、自然界に存在する種々の生
物、とくに微生物を利用して排水中の油脂分を含む汚濁
物質を除去したり分解する方法である。
[0004] One of the wastewater treatment techniques for solving this problem is a biological treatment method. Among them, the activated sludge method is particularly well known. This is a method for removing or decomposing pollutants including oils and fats in wastewater using various organisms existing in nature, particularly microorganisms.

【0005】特に排水中の油脂分を処理し、分解除去す
るために市販され使用される微生物、またはそれによる
微生物製剤はいくつか知られいる。そのうち主要なもの
としては次のものがあげられる。すなわち、細菌として
は、Bacillus.sp., Psuedomonas.sp.などが、原生動物
としてはアメーバー類、繊毛虫類、鞭毛虫類などが、ま
た藻類としては藍藻類、緑藻類、ケイ藻類などがあげら
れる。
[0005] Several microorganisms which are commercially available and especially used for treating, decomposing and removing fats and oils in wastewater, and microbial preparations thereof are known. The main ones are as follows. That is, bacteria include Bacillus.sp., Psuedomonas.sp., And the like, protozoa include amoeba, ciliates, and flagellates, and algae include cyanobacteria, green algae, and diatoms. .

【0006】[0006]

【発明が解決しようとする課題】これらは、油脂分を含
む有機物並びに一部の無機物を分解することが出来る
が、それらの排水処理用としての安全性、油脂分分解の
活性、油脂分分解の効率、油脂分分解時間等に関しても
必ずしも満足のいくものではなかった。
These substances can decompose organic substances including fats and oils and some inorganic substances. However, they can be used for wastewater treatment, their safety, the activity of decomposing fats and oils, and the decomposition of fats and oils. Efficiency, fat and oil decomposition time, etc. were not always satisfactory.

【0007】また、これらの微生物を用いた排水中の油
脂分分解除去のための処理装置においても、該微生物に
よる分解活性を最大にかつ安定に維持する方法において
も改善されるべき問題があった。
Further, there is a problem to be solved in a treatment apparatus for decomposing and removing fats and oils in wastewater using these microorganisms, and in a method for maximally and stably maintaining the decomposition activity of the microorganisms. .

【0008】[0008]

【課題を解決するための手段】本発明者は前記問題を解
決するべく鋭意研究し、安全で、かつ水中の油脂分を高
い効率で分解する新規微生物を発見し、分離することに
成功し本発明を完成するに至ったものである。
Means for Solving the Problems The present inventors have conducted intensive studies to solve the above-mentioned problems, and have succeeded in discovering and separating novel microorganisms which can decompose oils and fats in water with high efficiency. The invention has been completed.

【0009】本発明は、動植物油脂分に対し高い分解活
性を有することを特徴とする新規微生物S.saprophyticu
s OD-1(FERM P−17201)に関する。また、
本発明は、前記微生物からなる微生物製剤、該微生物製
剤を用いた排水処理水中の油脂分を分解除去する排水処
理方法に関する。さらに、本発明は、該微生物の利用、
例えば該微生物を直接あるいはこれの培養液から新規油
脂分解性物質を分離精製することを特徴とする油脂分解
性物質の製造方法に関する。また、本発明は、前記の微
生物を含む油脂分解用微生物製剤に関する。さらに、本
発明は、前記の微生物を用いて排水を処理する排水処理
装置であって、前記排水に空気を吹き込むための散気装
置と、前記微生物の流出防止のためのトラップとを有す
ることを特徴とする排水処理装置に関する。なお、本発
明にかかる微生物による分解除去の対象となる油脂分
は、主には動植物由来のものであるが、必ずしもそれら
の由来に限られず、種々の合成化学的手法を含む方法で
得られた人工の油脂、その誘導体およびその他の種々の
炭化水素等をも含むものである。
The present invention provides a novel microorganism, S. saprophyticu, which has a high decomposition activity against animal and vegetable oils and fats.
s OD-1 (FERM P-17201). Also,
The present invention relates to a microorganism preparation comprising the microorganism, and a wastewater treatment method for decomposing and removing fats and oils in wastewater treatment water using the microorganism preparation. Further, the present invention provides the use of the microorganism,
For example, the present invention relates to a method for producing an lipolytic substance, which comprises separating and purifying a novel lipolytic substance directly from the microorganism or from a culture solution thereof. The present invention also relates to a microbial preparation for decomposing fats and oils containing the above-mentioned microorganism. Further, the present invention is a wastewater treatment device for treating wastewater using the microorganisms, comprising a diffuser for blowing air into the wastewater, and a trap for preventing the microorganisms from flowing out. The present invention relates to a characteristic wastewater treatment device. The fats and oils to be decomposed and removed by the microorganisms according to the present invention are mainly derived from animals and plants, but are not necessarily limited to their origin, and were obtained by methods including various synthetic chemical techniques. It also includes artificial fats and oils, derivatives thereof, and other various hydrocarbons.

【0010】[0010]

【0011】[0011]

【0012】さらには、本発明は、本発明にかかる前記
排水処理方法を用いることを特徴とする排水中の油脂分
を分解除去するための処理装置を提供するものである。
特に、高い分解活性を維持するために空気を吹き込むた
めの散気装置と、前記微生物若しくは前記微生物製剤の
流出防止し、かつ油分と分離するためのトラップとを有
することを特徴とする処理装置を提供するものである。
Further, the present invention provides a treatment apparatus for decomposing and removing fats and oils in waste water, characterized by using the waste water treatment method according to the present invention.
In particular, a processing apparatus characterized by having an air diffuser for blowing air in order to maintain high decomposition activity, and a trap for preventing the outflow of the microorganisms or the microbial preparation and separating the oil from the oil. To provide.

【0013】[0013]

【発明の実施の形態】以下、本発明を、発明の実施の形
態に即してさらに詳しく説明する。
DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to embodiments of the present invention.

【0014】A.微生物スクリーニング 水溶液中に存在する油脂分の分解性を有する微生物を土
壌より分離可能である。土壌は一般に毒性が少ないと言
われており、このような土壌より分離した微生物も人体
に対し安全である(やさしい)といえる。該有用菌株の
探索は、一般に使用されている動植物油脂成分を用い
て、適当な培地および培養条件を選択することにより可
能である。より具体的には、前記油脂成分として市販の
サラダ油を用いることが可能である。また、前記培養条
件としては具体的には、Luria-Bertani培地(以下LB培
地と省略する)を用いて培養することにより行うことが
可能である。培養条件は、使用する培地等に基づき、最
適な条件を設定することは当業者にとって容易に行うこ
とができる。たとえば、「微生物学実験法、微生物研究
法懇談会編、講談社(1993)」に記載の方法が好ましく適
用できる。
A. Microorganisms capable of decomposing oils and fats present in an aqueous solution of microorganism screening can be separated from soil. Soil is generally said to be less toxic, and microorganisms isolated from such soil are safe (friendly) for the human body. The search for the useful strain can be performed by using a commonly used animal and vegetable oil and fat component and selecting an appropriate medium and culture conditions. More specifically, a commercially available salad oil can be used as the oil component. Further, as the culture conditions, specifically, the culture can be performed by culturing using a Luria-Bertani medium (hereinafter abbreviated as LB medium). Culture conditions can be easily set by those skilled in the art based on the used medium and the like. For example, the method described in "Microbiological Experiment Method, Microbial Research Method Roundtable, edited by Kodansha (1993)" can be preferably applied.

【0015】培養で得られた油脂を分解する微生物
(菌)の分離は通常公知の種々の方法で行うことが可能
であり、具体的には、寒天を含むLB平板培地にて培養す
るにより行うことが可能である。
The microorganisms (bacteria) that decompose the fats and oils obtained by the culture can be separated by various known methods, specifically, by culturing on an LB plate medium containing agar. It is possible.

【0016】B.菌株の同定 分離された菌株の同定、主な性状、性質等は、通常公知
の種々の同定試験方法、若しくは市販の同定キットを用
いて行うことができ、最適な方法を選択することは当業
者にとって容易である。具体的には、「Bergey's Manua
l of DetectiveBacteriology, Holt,J.G.等編、William
s&Wilkins(1994)」に記載の方法が挙げられる。
B. Identification of strains Identification, main properties, properties, and the like of the isolated strains can be performed using various known identification test methods or commercially available identification kits. Is easy for Specifically, "Bergey's Manua
l of DetectiveBacteriology, Holt, JG, etc., William
s & Wilkins (1994) ".

【0017】C.微生物による排水中の油脂分の分解試
本発明の微生物による排水中の油脂分の分解は、種々の
油脂成分の分解量、分解率等を測定することにより可能
である。また、同様の条件で、既知の種々の微生物製剤
による分解との比較も容易に行うことが可能であり、本
発明の微生物、若しくは微生物製剤の効果を試験するこ
とが可能となる。
C. Decomposition test of oils and fats in wastewater by microorganisms
Test Decomposition of fats and oils in wastewater by the microorganism of the present invention is possible by measuring the decomposition amount and decomposition rate of various fats and oils components. Further, under the same conditions, comparison with degradation by various known microbial preparations can be easily performed, and the effect of the microorganism of the present invention or the microbial preparation can be tested.

【0018】より具体的には、適当な容積の培養フラス
コに培地もしくは、排水サンプルとを入れ、オートクレ
ーブにより滅菌し、その後、適当な油脂成分を加えて適
当な条件で培養する。培養後、油脂分をn−ヘキサンで
抽出し、溶媒除去後に残存油脂分の重量を測定し(同様
に、コントロール(菌無添加)実験を行う)、この油脂
分重量との差を油脂分解量とすることにより行うことが
できる。
More specifically, a culture medium or a drainage sample is placed in a culture flask having an appropriate volume, sterilized by an autoclave, and then cultured under appropriate conditions by adding an appropriate fat or oil component. After the cultivation, the fats and oils were extracted with n-hexane, and after removing the solvent, the weight of the remaining fats and oils was measured (similarly, a control (no bacteria added) experiment was carried out). Can be performed.

【0019】D.微生物製剤 本発明にかかる微生物を、公知の種々の担体による固定
化を行うことにより、種々の態様の製剤化が可能であ
る。たとえば、「応用微生物学改訂版、村尾澤夫、荒井
基夫共編、培風館(1993)」、「生物工学序論、佐田栄
三、小林猛、本多裕之著、講談社サイエンティフック(1
996)」、「産業用酵素、上島孝之著、丸善(株)(199
5)」に記載の方法を用いることにより、本発明にかかる
微生物の製剤化が可能である。
D. Microbial preparations The microorganisms of the present invention can be formulated into various forms by immobilizing them with various known carriers. For example, `` Applied Microbiology Revised Edition, Sawao Murao and Motoo Arai, edited by Baifukan (1993) '', `` Introduction to Biotechnology, Eizo Sada, Takeshi Kobayashi, Hiroyuki Honda, Kodansha Scientific Hook (1
996) "," Industrial enzymes, written by Takayuki Uejima, Maruzen Co., Ltd. (199
By using the method described in "5)," the microorganism according to the present invention can be formulated.

【0020】(1)液状化: 以下の工程により、粉体化
することが可能である。 (i)LB培地等の一般細菌用栄養培地で本発明微生物を12
〜24時間程度培養したもの、もしくはこれにpH調整剤等
を加えたものを製剤とする。 (ii)(i)の培養物を凍結乾燥等により、適度に濃縮した
もの、もしくはこれにpH調整剤を加えたものを製剤とす
る。 (iii)(i)の培養物から菌体を遠心分離等で回収し、生理
食塩水等の媒体に適当な濃度となるように懸濁したも
の、もしくはこれにpH調整剤等を加えたものを製剤とす
る。 (iv)(i)の培養物から菌体を遠心分離等で回収し、新鮮
なLB培地に懸濁したもの、もしくはこれにpH調整剤等を
加えたものを製剤とする。 (v)(iv)をさらに、凍結乾燥等により、適度に濃縮した
ものを製剤とする。
(1) Liquefaction: The powder can be formed by the following steps. (i) the microorganism of the present invention in a nutrient medium for general bacteria such as LB medium;
A preparation is prepared by culturing for about 24 hours or adding a pH adjuster or the like to this. (ii) A preparation is prepared by appropriately concentrating the culture of (i) by freeze-drying or the like, or by adding a pH adjuster thereto. (iii) Cells obtained by recovering cells from the culture of (i) by centrifugation or the like and suspending them in a medium such as physiological saline to an appropriate concentration, or adding a pH adjuster or the like thereto. As a preparation. (iv) The cells are collected from the culture of (i) by centrifugation or the like and suspended in a fresh LB medium, or a suspension prepared by adding a pH adjuster or the like to the preparation. (v) and (iv) are further appropriately concentrated by freeze-drying or the like to prepare a preparation.

【0021】(2)粉末化: 以下の工程により、粉体化
することが可能である。 (i)LB培地等の一般細菌用栄養培地で本発明微生物を12
〜24時間程度培養したもの、もしくはこれにpH調整剤等
を加えたものを凍結乾燥等により乾燥したものを製剤と
する。 (ii)(i)に繊維くず、おがくず等の微粉体を適度に加え
たものを製剤とする。 (iii)(i)の培養物から菌体を遠心分離等で回収し、生理
食塩水等の媒体に適当な濃度となるように懸濁したも
の、もしくはこれにpH調整剤を加え、凍結乾燥等により
乾燥したものを製剤とする。 (iv)(iii)に繊維くず、おがくず等の微粉体を適度に加
えたものを製剤とする。 (v)(i)の培養物から菌体を遠心分離等で回収し、新鮮な
LB培地に懸濁したもの、もしくはこれにpH調整剤等を加
えたものを凍結乾燥等により乾燥したものを製剤とす
る。 (vi)(v)に繊維くず、おがくず等の微粉体を適度に加え
たものを製剤とする。 (vii)さらに、公知の文献、例えば「産業用酵素、上島
孝之著、丸善(株)(1995年)」に記載されている方法
により、本発明微生物を顆粒化することが可能となる。
具体的には、前記(i)〜(v)と同様にして調製した菌体懸
濁液をプリム顆粒、マルム顆粒、フィルムコーティング
したマルム顆粒、セルロース繊維配合のT顆粒などとす
ることが可能である。
(2) Powdering: Powdering can be performed by the following steps. (i) the microorganism of the present invention in a nutrient medium for general bacteria such as LB medium;
A preparation is prepared by culturing for about 24 hours or by adding a pH adjuster or the like to this and then drying it by freeze-drying or the like. (ii) A formulation prepared by appropriately adding fine powder such as fiber waste and sawdust to (i). (iii) The cells were collected from the culture of (i) by centrifugation or the like, suspended in a medium such as physiological saline so as to have an appropriate concentration, or a pH adjuster was added thereto, and lyophilized. The product dried by the method is used as a preparation. (iv) A formulation prepared by appropriately adding fine powder such as fiber waste and sawdust to (iii). (v) Collect the cells from the culture of (i) by centrifugation, etc.
A formulation is prepared by suspending in an LB medium or by adding a pH adjuster or the like to the suspension and freeze-drying or the like. (vi) A formulation is prepared by appropriately adding fine powder such as fiber waste and sawdust to (v). (vii) Further, the microorganism of the present invention can be granulated by a method described in a known document, for example, “Industrial enzyme, Takayuki Uejima, Maruzen Co., Ltd. (1995)”.
Specifically, the cell suspension prepared in the same manner as in the above (i) to (v) can be used as prim granules, malm granules, film-coated malm granules, T granules containing cellulose fibers, and the like. is there.

【0022】(3)固定化: 担体結合法、架橋法、包括
法、複合法といった公知の技術によって、種々の固定化
用材料を用いることで、固定化が可能となる。
(3) Immobilization: Various techniques for immobilization can be used for immobilization by known techniques such as a carrier binding method, a cross-linking method, an entrapment method, and a composite method.

【0023】E.排水処理方法、処理装置 本発明にかかる微生物、微生物製剤等を用いた油脂分を
含む排水の処理方法については特に制限はされず、従来
公知である油脂分解微生物等を用いた排水処理方法、さ
らには処理装置、処理設備を大きく変更することなく使
用することが可能である。この際、本発明にかかる微生
物の諸性質に適合させて処理条件、処理装置の運転条件
等を最適化することは当業者にとって容易である。
E. Wastewater treatment method and treatment apparatus There is no particular limitation on the treatment method for wastewater containing oils and fats using the microorganisms and microbial preparations according to the present invention. The wastewater treatment method, and further, the treatment apparatus and the treatment equipment can be used without major changes. At this time, it is easy for those skilled in the art to optimize the processing conditions, the operating conditions of the processing apparatus, and the like in accordance with the properties of the microorganism according to the present invention.

【0024】さらに、本発明にかかる微生物、微生物製
剤等を用いた油脂分を含む排水の処理方法、およびその
処理装置については、腐敗による悪臭の発生、腐敗菌に
よる油脂分解能力低下やスラッジやスカム発生の原因と
なる生ゴミなどの固形物をスクリーン等で除去すること
が好ましい。また、高い分解活性を維持するために電動
ポンプ式や空気圧駆動方式による空気を吹き込むこと、
そのための散気装置の設置が好ましい。また、前記微生
物若しくは前記微生物製剤の流出を防止し、かつ油分と
十分に接触させるためのトラップとを有することが好ま
しい。前記油分と接触するためのトラップはより具体的
には所定のポアサイズ(微生物は透過させず、水ならび
に低分子化合物等のみ通過させる)を有する膜フィルタ
ーが上げられる。低温で固形化するような動物油脂を多
く含む排水の場合、ヒーター等によるトラップ内の排水
温度をコントロールすることによりより一層高い効果を
得ることができる。
Further, the method for treating wastewater containing oils and fats using the microorganisms and microbial preparations of the present invention, and the treatment apparatus therefor, generate odors due to putrefaction, decrease the ability to decompose oils and fats due to putrefactive bacteria, sludge and scum. It is preferable to remove solid matter such as garbage which causes generation by a screen or the like. In addition, blowing air by electric pump or pneumatic drive to maintain high decomposition activity,
It is preferable to install a diffuser for that purpose. Further, it is preferable to have a trap for preventing the outflow of the microorganisms or the microbial preparation and for bringing the microorganisms or the microbial preparation into sufficient contact with oil. More specifically, as the trap for contacting the oil, a membrane filter having a predetermined pore size (not allowing microorganisms to permeate, but allowing only water and low molecular compounds to pass) can be used. In the case of wastewater containing a large amount of animal fats and oils that solidifies at a low temperature, a higher effect can be obtained by controlling the temperature of the wastewater in the trap using a heater or the like.

【0025】F.油脂分解性物質 本発明にかかる油脂分解性物質は、上で説明した本発明
にかかる油脂分解性の微生物が分泌する成分若しくは組
成物であって、動物性、植物性若しくは合成油脂または
それらの誘導体を分解することができるものである。
F. The lipolytic substance according to the present invention is a component or a composition secreted by the lipolytic microorganism according to the present invention described above, and may be an animal, vegetable or synthetic oil or a derivative thereof. Can be decomposed.

【0026】前記油脂分解性物質は、本発明にかかる油
脂分解性の微生物の適当な培養条件の下で培養した際に
得られる培養液に含まれれる。この培養液を直接排水中
の油脂分の分解に使用することも可能でるあるが、必要
ならば公知の方法を用いて、分離することも可能であ
る。
The lipolytic substance is contained in a culture solution obtained when the lipolytic microorganism according to the present invention is cultured under appropriate culture conditions. This culture solution can be used directly for decomposing oils and fats in wastewater, but if necessary, it can be separated using a known method.

【0027】また、得られる油脂分解性物質の、油脂分
解性の試験方法も、油脂分解性微生物のそれと同様に行
うことができる。
The method for testing the fat and oil decomposability of the obtained fat and oil decomposable substance can be performed in the same manner as that of the fat and oil decomposable microorganism.

【0028】さらに、得られる油脂分解性物質を排水中
の油脂分の分解除去に用いる方法も特には制限されず、
それ自体を排水中に添加する方法や、担体等に固定化し
て製剤化して用いることも可能である。
Further, the method of using the obtained fat-decomposable substance for decomposing and removing fats and oils in wastewater is not particularly limited.
It is also possible to add the compound itself to wastewater, or to immobilize it on a carrier or the like to form a formulation and use it.

【0029】以下、本発明を実施例により詳細に説明す
るが、本発明はこれらに制限されるものではない。
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

【0030】[0030]

【実施例】本発明にかかる微生物の取得 本発明にかかる微生物の取得は、土壌中より探索するこ
とによって行った。探索は、市販のサラダ油10%を含む
Luria-Bertani培地(以下LB培地と省略する、pH7.2)を
用いて集積培養することにより行った。集積培養は、φ
18mmx180mmの試験管にLB培地5mlを入れ、37℃にて浸と
う培養(170strokes/min)することにより行った。
EXAMPLE Acquisition of the microorganism according to the present invention The microorganism according to the present invention was obtained by searching from soil. Search contains 10% commercial salad oil
The enrichment culture was performed using a Luria-Bertani medium (hereinafter abbreviated as LB medium, pH 7.2). Enrichment culture is φ
The test was performed by placing 5 ml of LB medium in a test tube of 18 mm x 180 mm and immersing and culturing (170 strokes / min) at 37 ° C.

【0031】油脂分解菌の分離は、1.5%寒天を含むLB
平板培地にて37℃で培養するにより行った。分離菌株の
同定は、市販同定キットID32STAPH(bioMerieux sa, Mar
cy l'Etoile社製,France)を用いて行い、以下の結果
を得た。
Separation of fat-decomposing bacteria was carried out using LB containing 1.5% agar.
This was performed by culturing at 37 ° C. on a plate medium. The identification of the isolated strain was performed using a commercial identification kit ID32STAPH (bioMerieux sa, Mar.
cy l'Etoile, France) and obtained the following results.

【0032】分離菌株の性状についての試験方法は以下
にまとめた方法により行った。 形態、大きさ: 倍率400〜1,000倍での光学顕微鏡にて
観察する。試験菌はLBあるいは普通寒天平板培地で37℃
×1日培養して、発生したコロニーより取る。使われた
普通寒天培地は、肉エキス5g、ペプトン10g、NaCl5g、
寒天15g、蒸留水1,000mlからなる。
The test methods for the properties of the isolated strains were performed according to the methods summarized below. Shape and size: Observe with an optical microscope at a magnification of 400 to 1,000 times. Test strain is 37 ℃ on LB or normal agar plate medium
X 1 day, pick from colonies that occur. The normal agar medium used was 5 g of meat extract, 10 g of peptone, 5 g of NaCl,
It consists of 15g of agar and 1,000ml of distilled water.

【0033】グラム染色: Huckerの変法にて行う。陽
性はクリスタルバイオレットの紫に、陰性は対比染色の
サフラニンの赤で判定する。試験菌は普通寒天平板培地
で37℃×1日培養して、発生したコロニーより取る。
Gram staining: Modified by Hucker's method. Positives are determined by crystal violet purple and negatives by counterstained safranin red. The test bacterium is cultured at 37 ° C. for 1 day on a normal agar plate medium, and is collected from the generated colony.

【0034】胞子: 胞子の有無は、1)普通ブイヨン培
地にて振とう培養した培養液を、85℃×15分加熱後、普
通寒天平板培地へ混釈培養し、コロニーの発生にて判断
する。使われた普通ブイヨン培地は、肉エキス3g、ペプ
トン5g、蒸留水1,000mlからなる。または、2)Wirtzの法
(Schaeffer-Fultonの変法)により胞子を染色し、菌体は
赤、胞子は緑の染色性にて判断する。菌体の赤色は0.5%
サフラニン水溶液、胞子の緑色は5%マラカイトグリーン
水溶液による。
Spores: The presence or absence of spores is determined by 1) heating a culture solution shake-cultured in a normal broth medium at 85 ° C. for 15 minutes, diluting and culturing on a normal agar plate medium, and determining the occurrence of colonies. . The normal broth medium used consisted of 3 g of meat extract, 5 g of peptone and 1,000 ml of distilled water. Or 2) Wirtz's law
Spores are stained by (Schaeffer-Fulton's modification), and the bacterial cells are judged to be red and the spores are judged to be green. 0.5% red color
Safranine aqueous solution, green color of spores is due to 5% malachite green aqueous solution.

【0035】運動性: 1)西沢・菅原の法にて鞭毛を染
色し、電子顕微鏡(倍率10,000倍)にて観察する(第1
液は、タンニン酸100ml、局方塩化第二鉄液1.5ml、ホル
マリン2ml、1%NaOH1ml、蒸留水100mlからなり、第2液
は硝酸銀2g、局方アンモニア水少量、蒸留水100mlから
なる)。または、2)半流動性普通寒天高層培地に穿刺培
養し、培地全体の混濁にて判定した。使われる半流動性
寒天培地は、肉エキス5g、ペプトン10g、NaCl5g、寒天5
g、蒸留水1,000mlからなる。
Motility: 1) Flagella are stained by the method of Nishizawa and Sugawara, and observed with an electron microscope (magnification: 10,000).
The liquid is composed of 100 ml of tannic acid, 1.5 ml of a ferric chloride solution in the form of pharmacy, 2 ml of formalin, 1 ml of 1% NaOH, and 100 ml of distilled water, and the second liquid is composed of 2 g of silver nitrate, a small amount of the aqueous ammonia solution, and 100 ml of distilled water. Alternatively, 2) puncture culture was performed on a semi-fluid ordinary agar high-layer medium, and the turbidity of the entire medium was determined. The semi-fluid agar medium used is meat extract 5g, peptone 10g, NaCl 5g, agar 5
g, consisting of 1,000 ml of distilled water.

【0036】抗酸性: 抗酸性は、Ziiehl-Neeisen染色
法により行う。陽性は石炭酸フクシンの赤に、陰性は対
比染色のマラカイトグリーンの緑で判定する。試験菌は
普通寒天平板培地で37℃×1日培養して、発生したコロ
ニーより取る。 酸素に対する態度: [培地組成](蒸留水1,000ml
中、市販普通寒天培地)肉エキス5g、塩化ナトリウム5
g、ペプトン10g、寒天15g(pH7.0±0.1)。[培養条
件]滅菌試験管に菌と培地を混釈した状態で高層に固定
して培養。37℃×1日。
Acid resistance: Acid resistance is determined by the Ziiehl-Neeisen staining method. Positive is determined by red of fuchsin carbonate and negative is determined by green of counterstained malachite green. The test bacterium is cultured at 37 ° C. for 1 day on a normal agar plate medium, and is collected from the generated colony. Attitude toward oxygen: [Medium composition] (1,000 ml of distilled water)
Medium, commercially available normal agar medium) meat extract 5g, sodium chloride 5
g, peptone 10 g, agar 15 g (pH 7.0 ± 0.1). [Culture conditions] In a sterilized test tube, the bacteria and the medium are mixed and fixed in a high layer and cultured. 37 ° C x 1 day.

【0037】[観察項目]好気、嫌気での生育の有無。 オキシターゼ: [培地組成](蒸留水1,000ml中)肉
エキス5g、ペプトン10g、塩化ナトリウム5g、寒天15g
[培養条件]滅菌シャーレ上に培地を固定し、その上に
画線培養する。37℃×1日。[観察項目]チトクローム
の存否:平板上のコロニーに、 dimetyl-p -phenylened
iamineの1%水溶液を滴下し、滴下色がピンクを経て黒
に変わった時、陽性と判定した。
[Observation items] The presence or absence of aerobic or anaerobic growth. Oxidase: [Medium composition] (in 1,000 ml of distilled water) 5 g of meat extract, 10 g of peptone, 5 g of sodium chloride, 15 g of agar
[Culture conditions] A medium is fixed on a sterile petri dish, and streaked culture is performed thereon. 37 ° C x 1 day. [Observation items] Presence / absence of cytochrome: Dimetyl-p-phenylened
A 1% aqueous solution of iamine was dropped, and the color was determined to be positive when the drop color changed to black via pink.

【0038】カタラーゼ: [培地組成](蒸留水1,00
0ml中)肉エキス5g、ペプトン10g、塩化ナトリウム5g、
寒天15g。培養条件]滅菌シャーレ上に培地を固定し、
その上に画線培養する。37℃×1日。[観察項目]カタ
ラーゼの存否:過酸化水素の分解を触媒する酵素の存
否。スライドグラスに3%H2O2液を1滴のせ、それに菌
を1白金耳良く混ぜて入れる。酸素の気泡が多量にまた
は継続的に発生した時、陽性と判定した。
Catalase: [Medium composition] (distilled water 1,00
0ml) meat extract 5g, peptone 10g, sodium chloride 5g,
Agar 15g. Culture conditions] Fix the medium on a sterile petri dish,
Streak culture is performed thereon. 37 ° C x 1 day. [Observation items] The presence or absence of catalase: the presence or absence of an enzyme that catalyzes the decomposition of hydrogen peroxide. One drop of 3% H 2 O 2 solution is placed on a slide glass, and one platinum loop of the bacterium is mixed well with the drop. When oxygen bubbles were generated in a large amount or continuously, it was determined to be positive.

【0039】リパーゼ: [培地組成]1%市販サラダ油
を含むLB平板培地。[培養条件]滅菌シャーレ上に培地
を固定し、その上に画線培養する。37℃×数日。[観察
項目]リパーゼの存否:脂肪酸エステルあるいは脂質の
エステル結合を加水分解する酵素の存否。培地上に生育
した菌の周囲が透ける現象(以下ハロー)が観察された
時、陽性と判定した。[分解油脂分のTLC分析]油脂分
解菌による植物油分解にともない分解油脂がどのような
過程で分解されているのかを明らかにするために、以下
の方法によりTLC(薄層クロマトグラフィー)で分析し
た。展開溶媒は、石油エーテル:ジエチルエーテル:酢
酸(7:3:2、体積比)を使用した。発色試薬は、0.5%硫
酸-メタノール溶液を使用した。各培養時間後に抽出さ
れた残存油分をn-ヘキサンで10倍に希釈したものを試料
とし、薄層プレート(Diamond K6FSilica gel 60オング
ストローム、Whatman製)の下端から、1.5cmの位置にス
ポットした(スポットの大きさは2mm程度になるように
し、それを2回繰り返しスポットした)。展開溶媒(約
20ml)を500mlビーカーにいれ、試料をスポットしたプ
レートを入れた)。展開槽はプラスチックフィルムで密
閉した。プレートの上端から1cm程度のところまで展開
溶媒を上昇させた後、プレートを取り出した。乾燥後、
発色試薬をプレート表面に噴霧し、乾燥後、ホットプレ
ート上で加熱して発色させた。各スポットのRf値から脂
肪酸の生成を確認した。
Lipase: [Medium composition] LB plate medium containing 1% commercial salad oil. [Culture conditions] A medium is fixed on a sterile petri dish, and streaked culture is performed thereon. 37 ° C x several days. [Observation items] Presence or absence of lipase: Presence or absence of an enzyme that hydrolyzes an ester bond of a fatty acid ester or lipid. Positive was determined when a phenomenon (hereinafter, halo) was observed around the bacteria grown on the medium. [TLC analysis of decomposed fats] In order to clarify the process of decomposition of decomposed fats and oils by vegetable oil decomposition by lipolytic bacteria, analysis was performed by TLC (thin layer chromatography) by the following method. . As a developing solvent, petroleum ether: diethyl ether: acetic acid (7: 3: 2, volume ratio) was used. As a coloring reagent, a 0.5% sulfuric acid-methanol solution was used. The remaining oil extracted after each culture time was diluted 10-fold with n-hexane as a sample, and spotted 1.5 cm from the lower end of a thin layer plate (Diamond K6FSilica gel 60 Å, Whatman) (spot). Was made to be about 2 mm in size and spotted repeatedly twice). Developing solvent (about
20 ml) was placed in a 500 ml beaker and the plate on which the sample was spotted was placed). The developing tank was sealed with a plastic film. After the developing solvent was raised to about 1 cm from the upper end of the plate, the plate was taken out. After drying,
The coloring reagent was sprayed on the plate surface, dried, and heated on a hot plate to develop a color. The production of fatty acids was confirmed from the Rf value of each spot.

【0040】プロテアーゼ: [培地組成](蒸留水1,
000ml中)スキムミルク30g、肉エキス5g、ペプトン10
g、塩化ナトリウム5g、寒天15g。[培養条件]滅菌シャ
ーレ上に培地を固定し、その上に画線培養する。37℃×
数日。[観察項目]プロテアーゼの存否:タンパク質を
加水分解する酵素の存否。ハローが観察された時、陽性
と判定した。
Protease: [Medium composition] (distilled water 1,
000ml) skim milk 30g, meat extract 5g, peptone 10
g, sodium chloride 5g, agar 15g. [Culture conditions] A medium is fixed on a sterile petri dish, and streaked culture is performed thereon. 37 ℃ ×
Several days. [Observation item] Presence or absence of protease: Presence or absence of an enzyme that hydrolyzes protein. When a halo was observed, it was determined to be positive.

【0041】アミラーゼ: [培地組成](蒸留水1,00
0ml中)可溶性でんぷん10g、肉エキス5g、ペプトン10
g、塩化ナトリウム5g、寒天15g。[培養条件]滅菌シャ
ーレ上に培地を固定し、その上に画線培養する。37℃×
数日。[観察項目]アミラーゼの存否:でんぷんを加水
分解する酵素の存否。生育した菌周囲にルゴール液を塗
布しし、青紫色の着色を示さない時、陽性と判定した。
Amylase: [Medium composition] (1,00 distilled water)
In 0ml) soluble starch 10g, meat extract 5g, peptone 10
g, sodium chloride 5g, agar 15g. [Culture conditions] A medium is fixed on a sterile petri dish, and streaked culture is performed thereon. 37 ℃ ×
Several days. [Observation items] Presence or absence of amylase: Presence or absence of an enzyme that hydrolyzes starch. Lugol's solution was applied around the grown bacteria, and it was determined to be positive when it did not show blue-violet coloring.

【0042】バイオサーファクタント生産能: [培地
組成]市販血液寒天培地(栄研化学(株)製)。[培養
条件]滅菌シャーレ上に培地を固定し、その上に画線培
養する。37℃×数日。[観察項目]バイオサーファクタ
ント生産能:油脂を乳化する物質の存否。ハローが観察
された時、陽性と判定した。
Biosurfactant-producing ability: [Medium composition] Commercially available blood agar medium (manufactured by Eiken Chemical Co., Ltd.). [Culture conditions] A medium is fixed on a sterile petri dish, and streaked culture is performed thereon. 37 ° C x several days. [Observation items] Biosurfactant production ability: presence or absence of a substance that emulsifies fats and oils. When a halo was observed, it was determined to be positive.

【0043】嫌気下でのグルコースからの酸の生成(O
−Fテスト): [培地組成](蒸留水1,000ml中)グ
ルコース10g、ペプトン2.7g、塩化ナトリウム10g、リン
酸1水素カリウム0.3g、ブロモチモールブルー0.06g、
寒天4g。[培養条件]試験管に上記軟寒天高層培地を固
定し、菌を穿刺後、一方に流動パラフィンを重層して培
養する。30℃×数日。[観察項目]酸の生成能:糖分解
の存否。両方が黄変した時、発酵型と判定した。
Production of acid from glucose under anaerobic condition (O
-F test): [Medium composition] (in 1,000 ml of distilled water) glucose 10 g, peptone 2.7 g, sodium chloride 10 g, potassium monohydrogen phosphate 0.3 g, bromothymol blue 0.06 g,
4g agar. [Culture conditions] The above soft agar high-layer medium is fixed in a test tube, and after puncturing the bacteria, liquid paraffin is overlaid on one side and cultured. 30 ° C x several days. [Observation item] Acid generation ability: presence or absence of glycolysis. When both yellowed, it was judged as fermentation type.

【0044】色素: [培地組成](蒸留水1,000ml
中)ペプトン20g、グリセリン10g、K2SO4 10g、MgCl2 1.
4g寒天15g。[培養条件]滅菌シャーレ上に培地を固定
し、その上に画線培養する。25℃×5日。[観察項目]
色素の生成:コロニー周辺部のみに着色した時は非水溶
性、培地全体に着色した時は水溶性各色素の生成がある
と判定した。
Dye: [Medium composition] (1,000 ml of distilled water)
Middle) peptone 20g, glycerin 10g, KTwoSOFour 10g, MgClTwo1.
4g agar 15g. [Culture conditions] Fix the medium on a sterile petri dish
And streak culture on it. 25 ° C x 5 days. [Observation items]
Pigment formation: water-insoluble when colored only around colonies
Water-soluble pigments are formed when the entire medium is colored
It was determined.

【0045】さらに、表2に記載の性状については、市
販キット(ビオメリューバイテック社製)に添付のマニ
ュアルに従って判定した。
Further, the properties shown in Table 2 were determined according to the manual attached to a commercially available kit (manufactured by BioMerieux Biotech).

【0046】本菌の性質を以下の表1、2にまとめた。
その結果本菌は、Staphylococcus saprophyticusと同定
された。なお、前記菌はS.saprophyticus OD-1と命名
し、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所特許
微生物寄託センターに、平成11年2月5日、FERM
P−17201として寄託されている。
The properties of this bacterium are summarized in Tables 1 and 2 below.
As a result, this bacterium was identified as Staphylococcus saprophyticus. The bacterium was named S. saprophyticus OD-1 and was registered with the Patented Microorganisms Depositary Center of the Institute of Biotechnology and Industrial Technology of the Ministry of International Trade and Industry on February 5, 1999, at FERM.
Deposited as P-17201.

【0047】本菌は、4℃にてすくなくとも30週間保存
可能であり、危険度レベルは1と非常に安全性が高く取
り扱いが非常に便利である。
The bacterium can be stored at 4 ° C. for at least 30 weeks, and has a risk level of 1, which is very safe and very convenient to handle.

【0048】(表1 分離菌株の主な性状) ============================================= 項目 --------------------------------------------- 形態 ブドウ状球菌 大きさ 0.65μm グラム染色 + 胞子 − 運動性 + 酸素に対する態度 好気性 オキシダーゼ + カタラーゼ + リパーゼ + プロテアーゼ − アミラーゼ − バイオサーファクタント生産能 + 嫌気下でのグルコースからの酸の生成 − 集落の色調 NP ============================================== NP:特徴的集落色素を生成せず(Table 1 Main Properties of Isolated Strains) ====================================== ======== Item ----------------------------------------- ---- Form Staphylococcus aureus Size 0.65 μm Gram stain + Spores-Motility + Attitude to oxygen Aerobic oxidase + Catalase + Lipase + Protease-Amylase-Biosurfactant-producing ability + Production of acid from glucose under anaerobic condition − Settlement color NP ============================================== = NP: Does not produce characteristic colony pigment

【0049】(表2 分離菌の性状) ============================================== 項目 ---------------------------------------------- ウレアーゼ + アルギニンジヒドラーゼ − オルニチンデカルポキシラーゼ − エスクリンの加水分解 − 酸の生成 グルコース + フラクトース + D−マンノース − D−マルトース + ラクトース + トレハロース + D-マンニトール + ラフイノース − シユークロース + N-アセチルグルコサミン + D-ツラノース + L-アラビノース − D-リボース − D-セロビオース − 硝酸塩の還元 − アセトインの生成 − β−ガラクトシダーゼ + β−グルクロニダーゼ − アルギニンアリルアミダーゼ − アルカリフオスフアターゼ − ピロリドニルアリルアミダーゼ + ノボビオシン耐性 + ===============================================(Table 2 Properties of Isolated Bacteria) ============================================== ======= Items ------------------------------------------ ---- Urease + arginine dihydrolase-ornithine decarboxylase-hydrolysis of esculin-acid formation glucose + fructose + D-mannose-D-maltose + lactose + trehalose + D-mannitol + raffinose-sucrose + N- Acetylglucosamine + D-turanose + L-arabinose-D-ribose-D-cellobiose-Reduction of nitrate-Formation of acetoin-β-galactosidase + β-glucuronidase-Arginine allyl amidase-Alkaline phosphatase-Pyrrolidonyl allyl amidase + Novobiocin resistance + ================================================

【0050】菌の生育 培地から5ml無菌的に採取し、10,000xgで5分間遠心分離
後、菌体を蒸留水で懸濁した。これを3回行うことによ
り菌体を洗浄した。洗浄菌体は、105℃で恒量となるま
で乾燥後、重量を測定した。これを菌体乾燥重量とし
た。
5 ml was aseptically collected from the growth medium of the bacteria, centrifuged at 10,000 × g for 5 minutes, and the cells were suspended in distilled water. This was performed three times to wash the cells. The washed cells were dried at 105 ° C. to a constant weight, and then weighed. This was defined as the dry weight of the cells.

【0051】全酸素消費量 全酸素消費量の測定は、湯浅イオニクス社製全酸素消費
量分析計TOD1248NSを用いて行った。
[0051] measurement of total oxygen consumption total oxygen consumption, was carried out using a Yuasa Ionics Inc. total oxygen consumption spectrometer TOD1248NS.

【0052】植物油の分解の測定 (1)微生物の懸濁液の調製:本試験にはS.saprophyticus
OD-1(FERMP−17201)を用い、以下のよう
に微生物の懸濁液を調製した。先述と同様にLB培地(pH
7.2)5mlに保存菌を1白金耳植菌し、28℃にて振とう培
養を1晩行った。これを以下の実験に用いた。また、油
脂分解率を比較するため、市販微生物製剤は、以下の国
外A、B社の2社から5製剤を、国内A、B、C社の3
社から4製剤を使用した。それぞれに含まれる油脂分解
微生物はBacillus sp.あるいはその混合菌(Bacillus sp
p.)もしくは混合微生物群である。
Measurement of Degradation of Vegetable Oil (1) Preparation of Microbial Suspension: This test uses S. saprophyticus
Using OD-1 (FERMP-17201), a microorganism suspension was prepared as follows. LB medium (pH
7.2) One platinum loop was inoculated with 5 ml of the preserved bacteria, and shaking culture was performed overnight at 28 ° C. This was used for the following experiments. In order to compare the fat and oil decomposition rates, five commercially available microbial preparations from two companies (A and B) and three (3) companies from Japan (A, B and C)
Four formulations from the company were used. The fat-decomposing microorganisms contained in each are Bacillus sp. Or a mixed bacterium (Bacillus sp.
p.) or a mixed microorganism group.

【0053】これら製剤を1%市販サラダ油を含むLB培地
(pH7.2)5mlに添加し、先述と同様に28℃にて24時間振と
う培養した。この前培養液を以下の油脂分解試験に供し
た。 (2)排水サンプル:飲食店2店舗、食品工場1件の排水を
採取し、そのまま実験に使用した。 (3)分解反応および効果の判定:500mlバッフル付き培養
フラスコにLB培地あるいは、その他培地(表3)もしく
は排水サンプル(表4)を100mlを入れ、オートクレー
プにより121℃、15分間滅菌した。その後、市販サラダ
油(排水サンプルを除く)、前培養菌液1%をクリーン
ベンチ内で加え、旋回式培養機で各温度、160rpmで培養
した。培養後、油脂分をn−ヘキサンで抽出し、溶媒除
去後に残存油脂分の重量を測定した。同様に、コントロ
ール(菌添加なし)実験を行い、この油脂分重量との差
を油脂分解量とした。
LB medium containing 1% of commercially available salad oil
(pH 7.2), and cultured with shaking at 28 ° C. for 24 hours as described above. This preculture solution was subjected to the following fat / oil decomposition test. (2) Wastewater sample: Wastewater from two restaurants and one food factory was collected and used as it was in the experiment. (3) Degradation reaction and determination of effect: 100 ml of LB medium or other medium (Table 3) or drainage sample (Table 4) was placed in a 500-ml baffled culture flask, and sterilized by autoclaving at 121 ° C. for 15 minutes. Thereafter, commercially available salad oil (excluding wastewater samples) and 1% of pre-cultured bacterial solution were added in a clean bench, and cultured at 160 rpm at each temperature in a rotary culture machine. After the culture, the oil and fat was extracted with n-hexane, and the weight of the remaining oil and fat was measured after removing the solvent. Similarly, a control (without adding bacteria) experiment was performed, and the difference from the weight of the fat and oil was defined as the fat and oil decomposition amount.

【0054】(表3 油脂単一培地) =================================== 酵母エキス 0.01% 硫酸アンモニウム 0.2% リン酸水素2カリウム 0.09% リン酸二水素カリウム 0.06% 硫酸マグネシウム7水和物 0.02% 塩化カルシウムニ水和物 0.005% 硫酸鉄(II)7水和物 0.002% pH 7.0 蒸留水にて調製 ===================================(Table 3 Oil and Fat Single Medium) =================================== Yeast Extract 0.01% Ammonium sulfate 0.2% dipotassium hydrogen phosphate 0.09% potassium dihydrogen phosphate 0.06% magnesium sulfate heptahydrate 0.02% calcium chloride dihydrate 0.005% iron (II) sulfate heptahydrate 0.002% pH 7.0 with distilled water Preparation ===================================

【0055】(表4 人工排水) =================================== ペプトン 0.25% 硫酸アンモニウム 0.25% リン酸水素2カリウム 2.5% pH 7.0 水道水にて調製 ===================================(Table 4 Artificial drainage) =================================== Peptone 0.25% Ammonium sulfate 0.25% Dipotassium hydrogen phosphate 2.5% pH 7.0 Prepared in tap water ==========================================

【0056】図1(A)、(B)、(C)に示すよう
に、LB培地における本菌による油脂分解の最適条件は、
25℃、pH7.2であることがわかる。また、油脂分解率
は、油脂濃度が低いほど高く、0.67g-油脂/L-培地の
時、24時間後油脂分解率は、83%であった。また本菌
は、51g-油脂/L−培地という高濃度の油脂濃度におい
ても高効率で油脂を分解することが可能であった。
As shown in FIGS. 1 (A), 1 (B), and 1 (C), the optimal conditions for fat and oil degradation by the present bacteria in an LB medium are as follows:
It turns out that it is 25 degreeC and pH7.2. In addition, the fat and oil decomposition rate was higher as the fat and oil concentration was lower, and the fat and oil decomposition rate was 24% after 24 hours in the case of 0.67 g-fat / L-medium. In addition, this bacterium was able to decompose oils and fats with high efficiency even at a high oil and fat concentration of 51 g-oil / L-medium.

【0057】さらに、図2に25℃、pH7.2、51g-油脂/L
-培地における油脂分解経時変化と生育曲線を示す。本
菌の倍加時間は、0.54時間と極めて生育速度が早く、24
時間後油脂分解量は、11.5g−油脂/L-培地であった。
この分解量は、従来知られている菌に比べて約3倍高い
ものである(Okuda,S., K.Ito,H.Ozawa, and K.Izaki,
1991, J.Ferment.Bioeng., 71,pp424-429.)。
Further, FIG. 2 shows that 25 ° C., pH 7.2, 51 g-fat / L
-Shows the change over time and the growth curve of fat and oil decomposition in the medium. The doubling time of this bacterium is extremely fast at 0.54 hours,
After time, the amount of fat and oil decomposition was 11.5 g-fat / L-medium.
This degradation amount is about three times higher than the conventionally known bacteria (Okuda, S., K. Ito, H. Ozawa, and K. Izaki,
1991, J. Ferment. Bioeng., 71, pp424-429. ).

【0058】表5にLB培地における本菌と市販微生物製
剤による植物油分解率を示した。
Table 5 shows the percentage of vegetable oil degraded by the present bacterium and commercial microbial preparations in LB medium.

【0059】本菌は、既存微生物製剤に比べ、約2〜5倍
の分解率を有していることが示される。
It is shown that this bacterium has about 2 to 5 times the degradation rate as compared with existing microbial preparations.

【0060】 *;抽出困難のため測定不能。条件;LB培地(pH7.
2)、25℃、市販サラダ油5ml
[0060] *: Cannot be measured due to difficulty in extraction. Conditions: LB medium (pH 7.
2), 25 ℃, commercial salad oil 5ml

【0061】さらに、表6には、各種排水中における本
菌による油脂分解率を示す。本菌は、油脂単一培地なら
びに人工排水という比較的低汚染排水にも適応可能であ
ることが示される。さらに、ある排水に含まれる油分を
24時間で48%分解することも示された。
Further, Table 6 shows the fat and oil decomposition rate of the present bacteria in various wastewaters. It is shown that this bacterium is applicable to a relatively low-contamination wastewater such as a fat and oil single medium and artificial wastewater. In addition, oil contained in certain wastewater
It was also shown to degrade 48% in 24 hours.

【0062】 (表6 本菌による排水処理実績) ==================================================================== 処理液 pH TOD(ppm) 油分濃度(g/L) 分解量* 分解率(%) 無機培地 7.0 1180 4.40 0.139 3.16 人工排水 7.0 4950 4.43 1.70 38.5 人工排水 7.0 48.12 3.57 7.41 LB培地 7.2 25300 4.22 2.51 59.4 LB培地 7.2 9.47 4.48 47.3 某A飲食店排水 5.9 1730 4.64 2.40 48.4 某A飲食店排水 7.2 0.271 0.131 48.3 某B飲食店排水 4.3 740 0.378 0 0 食品工場 5.1 1840 2.31 0 0 ==================================================================== *:(g-oil/L/日)(Table 6 Results of wastewater treatment by this bacterium) ============================================ =============================== Treatment solution pH TOD (ppm) Oil concentration (g / L) Decomposition amount * Decomposition rate (%) Inorganic medium 7.0 1180 4.40 0.139 3.16 Artificial drainage 7.0 4950 4.43 1.70 38.5 Artificial drainage 7.0 48.12 3.57 7.41 LB medium 7.2 25300 4.22 2.51 59.4 LB medium 7.2 9.47 4.48 47.3 A certain restaurant drainage 5.9 1730 4.64 2.40 48.4 A certain restaurant Drainage 7.2 0.271 0.131 48.3 Certain type B restaurant drainage 4.3 740 0.378 0 0 Food factory 5.1 1840 2.31 0 0 ============================ ======================================== * :( g-oil / L / day )

【0063】以上の結果から、本菌は油脂分解微生物製
剤としての有効性が極めて高いと判断した。更に本菌
は、リパーゼ活性、バイオサーファクタント生産能を有
している。
From the above results, it was determined that this bacterium was extremely effective as an oil / fat-decomposing microorganism preparation. Further, the bacterium has lipase activity and biosurfactant producing ability.

【0064】[0064]

【発明の効果】以上説明したように、本発明の微生物は
油脂分の分解効果に優れている。従って、例えば、油脂
分を含む排水を処理する排水処理設備、装置に用いるこ
とにより、排水の油脂分除去を、高い効率でかつ安全に
行うことができる。
As described above, the microorganism of the present invention has an excellent effect of decomposing fats and oils. Therefore, for example, by using the wastewater treatment equipment and apparatus for treating wastewater containing fats and oils, the removal of fats and oils from the wastewater can be performed with high efficiency and safety.

【0065】また、本発明の排水処理装置は、前記微生
物の油脂分分解除去作用を最適化し、安全に、かつ効率
的に排水の油脂分除去処理を可能とする。
The wastewater treatment apparatus of the present invention optimizes the action of the microorganisms for decomposing and removing fats and oils, and enables safe and efficient removal of fats and oils from wastewater.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図1】OD-1株による油脂分解に与える温度(A)、p
H(B)、および油脂濃度(C)の影響を示す図であ
る。ここで●は分解率を示し、■は油脂分解量を示す。
FIG. 1. Temperature (A), p given to fat and oil decomposition by OD-1 strain
It is a figure which shows the influence of H (B) and fats and oils concentration (C). Here, ● indicates the decomposition rate, and Δ indicates the amount of fat and oil decomposition.

【図2】OD-1株による油脂分解の経時変化を示す図であ
る。ここで、●は、油脂分解量を示し、×は菌体乾燥重
量を示す。
FIG. 2 is a graph showing the change over time of fat and oil degradation by the OD-1 strain. Here, ● indicates the amount of fats and oils decomposed, and X indicates the dry weight of bacterial cells.

フロントページの続き (56)参考文献 特開 平2−291259(JP,A) 特開 昭61−28397(JP,A) 特開 平10−34130(JP,A) 特開 平7−100477(JP,A) 特開 平6−170377(JP,A) (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) WPI(DIALOG) BIOSIS(DIALOG)Continuation of the front page (56) References JP-A-2-291259 (JP, A) JP-A-61-28397 (JP, A) JP-A-10-34130 (JP, A) JP-A 7-110047 (JP) (A) JP-A-6-170377 (JP, A) (58) Fields investigated (Int. Cl. 7 , DB name) WPI (DIALOG) BIOSIS (DIALOG)

Claims (5)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項1】 動植物油脂分に分解性を有することを特
徴とする新規微生物S.saprophyticus OD-1(FERM
P−17201)。
1. A novel microorganism, S. saprophyticus OD-1 (FERM), which is degradable to animal and vegetable oils and fats.
P-17201).
【請求項2】 請求項1に記載の微生物を用いて行なう
ことを特徴とする排水処理方法。
2. A method for treating wastewater, wherein the method is performed using the microorganism according to claim 1.
【請求項3】 請求項1に記載の微生物を培養し、該培
養液から新規油脂分解性物質を分離精製することを特徴
とする油脂分解性物質の製造方法。
3. A method for producing an oil-decomposable substance, comprising culturing the microorganism according to claim 1, and separating and purifying a novel oil-decomposable substance from the culture solution.
【請求項4】 請求項1に記載の微生物を含む油脂分解
用微生物製剤。
4. A microbial preparation containing the microorganism according to claim 1 for decomposing fats and oils.
【請求項5】 請求項1に記載の微生物を用いて排水を
処理する排水処理装置であって、前記排水に空気を吹き
込むための散気装置と、前記微生物の流出防止のための
トラップとを有することを特徴とする排水処理装置。
5. A wastewater treatment apparatus for treating wastewater using the microorganism according to claim 1, comprising: an air diffuser for blowing air into the wastewater; and a trap for preventing the microorganism from flowing out. A wastewater treatment device comprising:
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