JP2976014B2 - 精巣精子を用いたウナギの人工受精法 - Google Patents
精巣精子を用いたウナギの人工受精法Info
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- JP2976014B2 JP2976014B2 JP8007789A JP778996A JP2976014B2 JP 2976014 B2 JP2976014 B2 JP 2976014B2 JP 8007789 A JP8007789 A JP 8007789A JP 778996 A JP778996 A JP 778996A JP 2976014 B2 JP2976014 B2 JP 2976014B2
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、従来人工受精に利
用されていなかった精巣精子を利用して、ウナギの人工
受精を行う方法に関するものである。
用されていなかった精巣精子を利用して、ウナギの人工
受精を行う方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】深刻なウナギの種苗不足を解消するた
め、従来よりウナギの種苗生産技術に関し、様々な試み
がなされてきた。その結果、現在では成熟した卵の大量
生産手段は確立され、２種類のホルモンを投与すること
により１尾の雌から約４００g もの卵を得ることが可能
となっている（Yamauchi,K.(1990). Studies of gonada
lsteroids involved in final gonadal maturation in
the Japanese eel, Anguilla japonica, a review. In
t. Revue Ges. Hydrobiol., 75: 859-860.）。一方、成
熟した精子の大量生産手段は未だ開発されておらず、こ
れが人工受精による種苗生産の大きな障害となってい
た。
め、従来よりウナギの種苗生産技術に関し、様々な試み
がなされてきた。その結果、現在では成熟した卵の大量
生産手段は確立され、２種類のホルモンを投与すること
により１尾の雌から約４００g もの卵を得ることが可能
となっている（Yamauchi,K.(1990). Studies of gonada
lsteroids involved in final gonadal maturation in
the Japanese eel, Anguilla japonica, a review. In
t. Revue Ges. Hydrobiol., 75: 859-860.）。一方、成
熟した精子の大量生産手段は未だ開発されておらず、こ
れが人工受精による種苗生産の大きな障害となってい
た。
【０００３】ところで、ホルモン投与により成熟させた
雄の精巣中には、精液中の精子（精液精子）のおよそ２
０〜３０倍量の精子（精巣精子）が存在するが、この精
巣精子には、運動能力がなく、また、受精能力もない。
精子の運動能力と受精能力との間には高い相関関係があ
ることが知られており、精巣精子に運動能力を獲得させ
ることができれば、大量に存在する精巣精子を人工受精
に利用することが可能となる。
雄の精巣中には、精液中の精子（精液精子）のおよそ２
０〜３０倍量の精子（精巣精子）が存在するが、この精
巣精子には、運動能力がなく、また、受精能力もない。
精子の運動能力と受精能力との間には高い相関関係があ
ることが知られており、精巣精子に運動能力を獲得させ
ることができれば、大量に存在する精巣精子を人工受精
に利用することが可能となる。
【０００４】精巣精子に運動能力を獲得させようとする
試みは、既にサケ科魚類について行われている（Morisa
wa,S. and Morisawa,M. (1988). Induction of potenti
al for sperm motility by bicarbonate and pH in rai
nbow trout and chum salmon. J. Exp. Biol.,136:13-2
2.）。これは、サケ又はニジマスの精巣精子を炭酸水素
イオンを含む溶液中で培養して精子に運動能力を獲得さ
せ、それを真水に移して受精させるものである。しか
し、サケ又はニジマス以外の魚類で精巣精子に運動能力
を獲得させることに成功した例は全く知られていない。
試みは、既にサケ科魚類について行われている（Morisa
wa,S. and Morisawa,M. (1988). Induction of potenti
al for sperm motility by bicarbonate and pH in rai
nbow trout and chum salmon. J. Exp. Biol.,136:13-2
2.）。これは、サケ又はニジマスの精巣精子を炭酸水素
イオンを含む溶液中で培養して精子に運動能力を獲得さ
せ、それを真水に移して受精させるものである。しか
し、サケ又はニジマス以外の魚類で精巣精子に運動能力
を獲得させることに成功した例は全く知られていない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ウナ
ギ精巣精子に運動能力を付与し、人工受精に利用可能な
精巣精子を提供することにある。
ギ精巣精子に運動能力を付与し、人工受精に利用可能な
精巣精子を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記課題
を解決するため、精巣精子を種々のイオン及びｐＨの環
境で培養した後、海水で希釈し、運動能力を獲得する条
件について調べた。その結果、精巣精子が運動能力を獲
得するためには、カリウムイオンを含む溶液中で一定期
間培養することが必要であるという知見を得た。この知
見に基づき、本発明は完成されたものである。
を解決するため、精巣精子を種々のイオン及びｐＨの環
境で培養した後、海水で希釈し、運動能力を獲得する条
件について調べた。その結果、精巣精子が運動能力を獲
得するためには、カリウムイオンを含む溶液中で一定期
間培養することが必要であるという知見を得た。この知
見に基づき、本発明は完成されたものである。
【０００７】即ち、本発明は、ウナギの精巣精子をカリ
ウムイオンを含む溶液中で培養した後、卵に加えて混合
し、次に、この精巣精子及び卵に高張液を添加して受精
させることを特徴とするウナギの人工受精法である。
ウムイオンを含む溶液中で培養した後、卵に加えて混合
し、次に、この精巣精子及び卵に高張液を添加して受精
させることを特徴とするウナギの人工受精法である。
【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。本発明
は、一般にウナギと呼ばれている魚類、即ち、ニホンウ
ナギ（Anguillajaponica）などに適用することができ
る。
は、一般にウナギと呼ばれている魚類、即ち、ニホンウ
ナギ（Anguillajaponica）などに適用することができ
る。
【０００９】本発明の人工受精法では、まず、ウナギの
精巣精子をカリウムイオンを含む等張な溶液中で培養す
る。ここで「精巣精子」とは、ウナギの精巣中に含まれ
る精子で、そのまま高張液に入れても運動を開始しない
未熟な精子をいう。溶液中のカリウムイオン濃度は、精
巣精子に運動能力を付与し得る範囲内であれば特に制限
はないが、好ましくは、１５〜７５mM、さらに好ましく
は１５〜４５mMである。溶液中には、精巣精子に悪影響
を及ぼさない限り、カリウムイオン以外の他のイオンを
含んでもよい。溶液中に加えるカリウムイオン以外の好
ましいイオンとしては、炭酸水素イオンを挙げることが
できる。但し、ｐＨ値が高い場合には炭酸水素イオンが
存在しない場合でも、精巣精子に運動能力を付与できる
ので、このイオンは必須ではない。溶液に炭酸水素イオ
ンを加える場合には、その濃度は、１０〜１００mMとす
るのが好ましく、２０〜３０mMとするのがさらに好まし
い。溶液のｐＨは、精巣精子に悪影響を及ぼさない範囲
で任意に定めることができるが、炭酸水素イオンを含ま
ない場合はｐＨが低いと、精巣精子に運動能力を付与で
きない。炭酸水素イオンを含む場合は、ｐＨが７．５〜
８．７とするのが好ましく、８．１〜８．４とするのが
さらに好ましく、炭酸水素イオンを含まない場合は、
８．４〜９．０とするのが好ましい。溶液の温度は、精
巣精子に悪影響を及ぼさない範囲で任意に定めることが
できるが、２０℃前後が適当である。培養時間は、３０
〜１８０分とするのが好ましく、６０〜１２０分とする
のがさらに好ましい。
精巣精子をカリウムイオンを含む等張な溶液中で培養す
る。ここで「精巣精子」とは、ウナギの精巣中に含まれ
る精子で、そのまま高張液に入れても運動を開始しない
未熟な精子をいう。溶液中のカリウムイオン濃度は、精
巣精子に運動能力を付与し得る範囲内であれば特に制限
はないが、好ましくは、１５〜７５mM、さらに好ましく
は１５〜４５mMである。溶液中には、精巣精子に悪影響
を及ぼさない限り、カリウムイオン以外の他のイオンを
含んでもよい。溶液中に加えるカリウムイオン以外の好
ましいイオンとしては、炭酸水素イオンを挙げることが
できる。但し、ｐＨ値が高い場合には炭酸水素イオンが
存在しない場合でも、精巣精子に運動能力を付与できる
ので、このイオンは必須ではない。溶液に炭酸水素イオ
ンを加える場合には、その濃度は、１０〜１００mMとす
るのが好ましく、２０〜３０mMとするのがさらに好まし
い。溶液のｐＨは、精巣精子に悪影響を及ぼさない範囲
で任意に定めることができるが、炭酸水素イオンを含ま
ない場合はｐＨが低いと、精巣精子に運動能力を付与で
きない。炭酸水素イオンを含む場合は、ｐＨが７．５〜
８．７とするのが好ましく、８．１〜８．４とするのが
さらに好ましく、炭酸水素イオンを含まない場合は、
８．４〜９．０とするのが好ましい。溶液の温度は、精
巣精子に悪影響を及ぼさない範囲で任意に定めることが
できるが、２０℃前後が適当である。培養時間は、３０
〜１８０分とするのが好ましく、６０〜１２０分とする
のがさらに好ましい。
【００１０】上記のようにして、カリウムイオンを含む
溶液中で培養した精巣精子を、未受精卵に加えて、軽く
撹拌し、次に高張液を加える。ここで「高張液」とは、
ウナギの体液浸透圧よりも高い浸透圧を示す液体をい
う。この高張液は、精巣精子及び卵に悪影響を及ぼさな
い限り、いかなるイオン、分子を含むものを使用しても
よいが、通常は、天然海水、又は人工海水を用いる。高
張液のｐＨは、精巣精子及び卵に悪影響を及ぼさない範
囲で任意に定めることができるが、７．５〜９．０とす
るのが好ましく、７．８〜８．２とするのがさらに好ま
しい。高張液の温度は、精巣精子に悪影響を及ぼさない
範囲で任意に定めることができるが、１０〜３０℃とす
るのが好ましく、１５〜２５℃とするのがさらに好まし
い。
溶液中で培養した精巣精子を、未受精卵に加えて、軽く
撹拌し、次に高張液を加える。ここで「高張液」とは、
ウナギの体液浸透圧よりも高い浸透圧を示す液体をい
う。この高張液は、精巣精子及び卵に悪影響を及ぼさな
い限り、いかなるイオン、分子を含むものを使用しても
よいが、通常は、天然海水、又は人工海水を用いる。高
張液のｐＨは、精巣精子及び卵に悪影響を及ぼさない範
囲で任意に定めることができるが、７．５〜９．０とす
るのが好ましく、７．８〜８．２とするのがさらに好ま
しい。高張液の温度は、精巣精子に悪影響を及ぼさない
範囲で任意に定めることができるが、１０〜３０℃とす
るのが好ましく、１５〜２５℃とするのがさらに好まし
い。
【００１１】上記のように、精巣精子を高張液に移すこ
とにより、運動能力を獲得した精巣精子は運動を開始す
る。そこで、等張液で運動能力を獲得させた精子を卵に
加えて卵が物理的障害を受けない程度に軽く撹拌し、次
に高張液を加えることによって精子を運動させて受精を
行わせる。この受精の方法は、従来より行われてきてい
る精液精子を用いた人工受精法と同様である。
とにより、運動能力を獲得した精巣精子は運動を開始す
る。そこで、等張液で運動能力を獲得させた精子を卵に
加えて卵が物理的障害を受けない程度に軽く撹拌し、次
に高張液を加えることによって精子を運動させて受精を
行わせる。この受精の方法は、従来より行われてきてい
る精液精子を用いた人工受精法と同様である。
【００１２】
【発明の実施の形態】以下、本発明を実施例を用いてさ
らに詳細に説明する。但し、本発明の技術的範囲は、以
下の実施例に限定されるものではない。
らに詳細に説明する。但し、本発明の技術的範囲は、以
下の実施例に限定されるものではない。
【００１３】
〔実施例１〕養殖業者より購入した雄ウナギ（Anguilla
japonica）を海水中で飼育し、週に１回ＨＣＧ（帝国
臓器製、商品名「ゴナトロピン」）を１ IU/gBW の濃度
で反復投与して催熟した。排精が認められた投与６〜９
回目の個体の精巣を取り出し、ハサミで細かく切断した
後に２５０μm のメッシュで漉しとり、精巣精子を得
た。１尾のウナギより約１０g の精巣精子を得ることが
できた。
japonica）を海水中で飼育し、週に１回ＨＣＧ（帝国
臓器製、商品名「ゴナトロピン」）を１ IU/gBW の濃度
で反復投与して催熟した。排精が認められた投与６〜９
回目の個体の精巣を取り出し、ハサミで細かく切断した
後に２５０μm のメッシュで漉しとり、精巣精子を得
た。１尾のウナギより約１０g の精巣精子を得ることが
できた。
【００１４】次に、上記で得た精巣精子１０mgを、ｐＨ
の異なる５種類の基本培養液で２００倍に希釈し、２０
℃で１５、３０、６０分間培養した。基本培養液は、精
漿のイオン組成を模したものであり、その組成は表１に
示す通りである。また、基本培養液のｐＨ調整は、Ｎａ
ＯＨを加えることにより行った。
の異なる５種類の基本培養液で２００倍に希釈し、２０
℃で１５、３０、６０分間培養した。基本培養液は、精
漿のイオン組成を模したものであり、その組成は表１に
示す通りである。また、基本培養液のｐＨ調整は、Ｎａ
ＯＨを加えることにより行った。
【００１５】
【表１】
【００１６】培養終了後、精巣精子を含む基本培養液２
００μlを、４５０mMのＮａＣｌ溶液（ｐＨ７．５）で
５倍に希釈した。希釈１５秒後の精子の運動状態をビデ
オ顕微鏡で観察し、全精子中の運動を行っている精子の
占める割合（以下、これを「運動精子比」という）を求
めた。結果を図１に示す。
００μlを、４５０mMのＮａＣｌ溶液（ｐＨ７．５）で
５倍に希釈した。希釈１５秒後の精子の運動状態をビデ
オ顕微鏡で観察し、全精子中の運動を行っている精子の
占める割合（以下、これを「運動精子比」という）を求
めた。結果を図１に示す。
【００１７】図１に示すように、いずれのｐＨにおいて
も、精巣精子は運動能力を獲得することができた。
も、精巣精子は運動能力を獲得することができた。
【００１８】〔実施例２〕基本培養液（表１）から、以
下の３種類のイオンフリー培養液を調製した。 １）Ｋ+ フリー培養液：基本培養液中のＫＣｌの代わり
に同じ濃度のＮａＣｌを加えた溶液 ２）Ｃａ2+・Ｍｇ2+フリー培養液：基本培養液中のＣａ
Ｃｌ2 及びＭｇＣｌ2 の代わりに同じ濃度のＮａＣｌを
加えた溶液 ３）ＨＣＯ3 -フリー培養液：基本培養液中のＮａＨＣＯ
3 の代わりに同じ濃度のＮａＣｌを加えた溶液
下の３種類のイオンフリー培養液を調製した。 １）Ｋ+ フリー培養液：基本培養液中のＫＣｌの代わり
に同じ濃度のＮａＣｌを加えた溶液 ２）Ｃａ2+・Ｍｇ2+フリー培養液：基本培養液中のＣａ
Ｃｌ2 及びＭｇＣｌ2 の代わりに同じ濃度のＮａＣｌを
加えた溶液 ３）ＨＣＯ3 -フリー培養液：基本培養液中のＮａＨＣＯ
3 の代わりに同じ濃度のＮａＣｌを加えた溶液
【００１９】これら３種類のイオンフリー培養液と基本
培養液を用いて精巣精子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ
溶液で希釈した後の精子の運動状態を観察し、運動精子
比を求めた。精巣精子の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、
運動状態の観察は、実施例１と同様にして行った。ま
た、培養液のｐＨはすべて８．１とした。結果を図２に
示す。なお、この８．１というｐＨ値は、１１８個体の
ウナギ精液のｐＨを調べた結果、最も多くの個体が示し
た値である。
培養液を用いて精巣精子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ
溶液で希釈した後の精子の運動状態を観察し、運動精子
比を求めた。精巣精子の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、
運動状態の観察は、実施例１と同様にして行った。ま
た、培養液のｐＨはすべて８．１とした。結果を図２に
示す。なお、この８．１というｐＨ値は、１１８個体の
ウナギ精液のｐＨを調べた結果、最も多くの個体が示し
た値である。
【００２０】図２に示すように、通常の精液のｐＨ値で
ある８．１という条件では、カリウムイオン、炭酸水素
イオンのいずれか一方のイオンが存在しないと、精巣精
子は運動能力を獲得することができなかった。また、カ
ルシウムイオン及びマグネシウムイオンは精子の運動能
力獲得とは直接的な関係はなかった。
ある８．１という条件では、カリウムイオン、炭酸水素
イオンのいずれか一方のイオンが存在しないと、精巣精
子は運動能力を獲得することができなかった。また、カ
ルシウムイオン及びマグネシウムイオンは精子の運動能
力獲得とは直接的な関係はなかった。
【００２１】〔実施例３〕実施例２で用いたＨＣＯ3 -フ
リー培養液のｐＨを変化させ、ｐＨの異なる５種類の培
養液を調製した。これら５種類の培養液を用いて精巣精
子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の精
子の運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精子
の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、実
施例１と同様にして行った。結果を図３に示す。
リー培養液のｐＨを変化させ、ｐＨの異なる５種類の培
養液を調製した。これら５種類の培養液を用いて精巣精
子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の精
子の運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精子
の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、実
施例１と同様にして行った。結果を図３に示す。
【００２２】図３に示すように、ｐＨ値が低い場合に
は、精巣精子は運動能力を獲得することができないが、
ｐＨが８．４以上であれば、炭酸水素イオンが存在しな
くても精巣精子は運動能力を獲得することができた。
は、精巣精子は運動能力を獲得することができないが、
ｐＨが８．４以上であれば、炭酸水素イオンが存在しな
くても精巣精子は運動能力を獲得することができた。
【００２３】〔実施例４〕実施例２で用いたＫ+ フリー
培養液のｐＨを変化させ、ｐＨの異なる３種類の培養液
を調製した。これら３種類の培養液を用いて精巣精子を
培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の精子の
運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精子の培
養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、実施例
１と同様にして行った。結果を図４に示す。図４に示す
ように、カリウムイオンが存在しない場合には、ｐＨ値
を上げても精巣精子は運動能力を獲得することができな
かった。
培養液のｐＨを変化させ、ｐＨの異なる３種類の培養液
を調製した。これら３種類の培養液を用いて精巣精子を
培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の精子の
運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精子の培
養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、実施例
１と同様にして行った。結果を図４に示す。図４に示す
ように、カリウムイオンが存在しない場合には、ｐＨ値
を上げても精巣精子は運動能力を獲得することができな
かった。
【００２４】〔実施例５〕基本培養液のカリウムイオン
濃度を変化させ、カリウムイオン濃度の異なる７種類の
培養液を調製した。これら７種類の培養液を用いて精巣
精子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の
精子の運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精
子の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、
実施例１と同様にして行った。結果を図５に示す。な
お、ｐＨはすべて８．１とした。
濃度を変化させ、カリウムイオン濃度の異なる７種類の
培養液を調製した。これら７種類の培養液を用いて精巣
精子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の
精子の運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精
子の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、
実施例１と同様にして行った。結果を図５に示す。な
お、ｐＨはすべて８．１とした。
【００２５】図５に示すように、カリウムイオン濃度が
高くなるにつれて、運動精子比は上昇した。特に、濃度
が１５mMを超えると、運動精子比は急激に高くなった。
なお、図５には示さないが、濃度が３０mMを超えた場合
には、濃度が高くなってもそれ以上運動精子比は上昇し
なかった。
高くなるにつれて、運動精子比は上昇した。特に、濃度
が１５mMを超えると、運動精子比は急激に高くなった。
なお、図５には示さないが、濃度が３０mMを超えた場合
には、濃度が高くなってもそれ以上運動精子比は上昇し
なかった。
【００２６】〔実施例６〕基本培養液の炭酸水素イオン
濃度を変化させ、炭酸水素イオン濃度の異なる６種類の
培養液を調製した。これら６種類の培養液を用いて精巣
精子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の
精子の運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精
子の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、
実施例１と同様にして行った。結果を図６に示す。な
お、ｐＨはすべて８．１とした。図６に示すように、炭
酸水素イオン濃度が１０mM以上では、運動精子比はかな
り高い値を示したが、炭酸水素イオン濃度が５mM以下で
は、運動精子比は非常に低かった。
濃度を変化させ、炭酸水素イオン濃度の異なる６種類の
培養液を調製した。これら６種類の培養液を用いて精巣
精子を培養し、４５０mMのＮａＣｌ溶液で希釈した後の
精子の運動状態を観察し、運動精子比を求めた。精巣精
子の培養、ＮａＣｌ溶液での希釈、運動状態の観察は、
実施例１と同様にして行った。結果を図６に示す。な
お、ｐＨはすべて８．１とした。図６に示すように、炭
酸水素イオン濃度が１０mM以上では、運動精子比はかな
り高い値を示したが、炭酸水素イオン濃度が５mM以下で
は、運動精子比は非常に低かった。
【００２７】
【発明の効果】本発明の人工受精法は、精巣精子を利用
して人工受精を行うことできるので、ウナギ種苗を容易
かつ大量に供給することができる。
して人工受精を行うことできるので、ウナギ種苗を容易
かつ大量に供給することができる。
【図１】基本培養液のｐＨと精巣精子の運動精子比との
関係を示す図
関係を示す図
【図２】培養液を構成するイオンの種類と精巣精子の運
動精子比との関係を示す図
動精子比との関係を示す図
【図３】ＨＣＯ3 -フリー培養液のｐＨと精巣精子の運動
精子比との関係を示す図
精子比との関係を示す図
【図４】Ｋ+ フリー培養液のｐＨと精巣精子の運動精子
比との関係を示す図
比との関係を示す図
【図５】培養液中のＫ+ 濃度と精巣精子の運動精子比と
の関係を示す図
の関係を示す図
【図６】培養液中のＨＣＯ3 -濃度と精巣精子の運動精子
比との関係を示す図
比との関係を示す図
Claims (2)
- 【請求項１】 ウナギの精巣精子をカリウムイオンを含
む溶液中で培養した後、卵に加えて混合し、次に、この
精巣精子及び卵に高張液を添加して受精させることを特
徴とするウナギの人工受精法。 - 【請求項２】 カリウムイオンを含む溶液が、炭酸水素
イオンをも含むことを特徴とする請求項１記載のウナギ
の人工受精法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8007789A JP2976014B2 (ja) | 1996-01-19 | 1996-01-19 | 精巣精子を用いたウナギの人工受精法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8007789A JP2976014B2 (ja) | 1996-01-19 | 1996-01-19 | 精巣精子を用いたウナギの人工受精法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09191793A JPH09191793A (ja) | 1997-07-29 |
| JP2976014B2 true JP2976014B2 (ja) | 1999-11-10 |
Family
ID=11675434
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8007789A Expired - Lifetime JP2976014B2 (ja) | 1996-01-19 | 1996-01-19 | 精巣精子を用いたウナギの人工受精法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2976014B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111264423B (zh) * | 2020-03-27 | 2023-04-14 | 浙江省海洋水产养殖研究所 | 一种棘头梅童鱼的育苗方法 |
| KR102234367B1 (ko) * | 2020-09-07 | 2021-03-31 | 바이오메디팜 어업회사법인 주식회사 | 연어의 정소로부터 고순도 피디알엔의 추출 방법 |
-
1996
- 1996-01-19 JP JP8007789A patent/JP2976014B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｊ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．，Ｖｏｌ．１３６，（１９８８），ｐ．１３−２２ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH09191793A (ja) | 1997-07-29 |
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