JP2562355B2 - Antibacterial agent for plant pathogenic bacteria - Google Patents

Antibacterial agent for plant pathogenic bacteria

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JP2562355B2 JP63233251A JP23325188A JP2562355B2 JP 2562355 B2 JP2562355 B2 JP 2562355B2 JP 63233251 A JP63233251 A JP 63233251A JP 23325188 A JP23325188 A JP 23325188A JP 2562355 B2 JP2562355 B2 JP 2562355B2
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Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は植物病害の原因となる病原菌に効力を示す抗
菌剤に関する。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to an antibacterial agent showing efficacy against pathogenic bacteria that cause plant diseases.

(従来の技術) 植物病害の原因となる病原菌は多種に渡るが、従来、
これらの防除には無機及び有機合成殺菌剤、抗生物質剤
等からなる農薬が使われていた。
(Conventional technology) Although there are various pathogenic bacteria that cause plant diseases,
Agricultural chemicals composed of inorganic and organic synthetic bactericides, antibiotics, etc. have been used for controlling them.

(発明が解決しようとする課題) しかしながら、これらの農薬による環境汚染、地中へ
の農薬残留等に伴う人畜への加害、土や植物への加害が
社会的な問題となってきており、そのために少なくとも
人体に無害な天然物由来の農薬の開発が強く期待されて
いる。
(Problems to be solved by the invention) However, environmental pollution by these pesticides, harm to humans and animals due to pesticide residue in the ground, and harm to soil and plants are becoming social problems. Especially, it is strongly expected to develop pesticides derived from natural products that are harmless to the human body.

一方、天然物由来の農薬を開発するに当たっては、植
物病原菌に対し強い抗菌力を持つ成分を、当該天然物か
ら大量にかつ容易に抽出できることが要求されるが、こ
のような観点に立つ農薬は未だ開発されていない現状で
ある。
On the other hand, in developing a pesticide derived from a natural product, it is required that a component having a strong antibacterial activity against plant pathogens can be easily extracted in a large amount from the natural product. The situation is that it has not been developed yet.

本発明は、上記観点から大量にかつ容易に抽出できる
天然物由来の農楽を開発せんとするものである。
From the above viewpoints, the present invention aims to develop a natural product-derived agricultural music that can be easily extracted in a large amount.

(課題を解決するための手段) 上記目的を達成するために、本発明者は、人が大量に
飲用する茶に着目し、茶に抗菌能力が存在するかどうか
を研究した結果、茶の抽出物中に含有されているカテキ
ン類がある種の植物病原菌に対して有効な抗菌性を持
ち、防除作用をなすことを見出して本発明に至ったもの
である。
(Means for Solving the Problems) In order to achieve the above-mentioned object, the present inventor focused on tea that a person drinks in large quantities, and studied whether or not tea has an antibacterial ability, and extracted tea. The present invention has been accomplished by finding that catechins contained in a product have an effective antibacterial property against certain plant pathogenic fungi and have a control action.

カテキン類が有効な抗菌性を持つ植物病原菌として
は、シュードモナス フルオレッセンス,エルウィニア
カロトフォラ サブスピーシス アトロセプチカ,エ
ルウィニア カロトフォラ サブスピーシス ペタバス
キュローラム,エルウィニア カロトフォラ サブスピ
ーシス カロトフォラ,エルウィニア クリサンセミ,
エルウィニア クリセンサミ pv.ツェアエ,クルトバク
テリウム フラッカムファシエンス pv.オールチ,クラ
ビバクター ミシガネンセ サブスピーシス ミシガン
セ,シュードモナス アベナエ,シュードモナス アン
ドロポゴンス,シュードモナス チコリ,シュードモナ
ス フィクスエレクタエ,シュードモナス マージナリ
ス pv.マージナリス,シュードモナス シュードアルカ
リゲネス サブスピーシス コンニャシ,シュードモナ
ス ソラナセアラム,シュードモナス シリンゲ pv.エ
リオボトリエ,シュードモナス シリンゲ pv.ラクリマ
ンス,シュードモナス シリンゲ pv.フォゼオリコラ,
シュードモナス シリンゲ pv.スタリアファシエンス,
シュードモナス シリンゲ pv.テアエ,シュードモナス
ビリディフラバ,ザンソモナス キャンペストリス
類,トマト斑点細菌病菌及びカンキツかいよう病菌であ
る。
Pseudomonas fluorescens, Erwinia carotophora subspices atroseptica, Erwinia carotophora subspices petabass culoraum, Erwinia carotophora subsp.
Erwinia Cliensami pv. Ceae, Kurtobacter flacmum fasciens pv. Orchi, Clavibacter misiganense Subspicesis Michiganse, Pseudomonas avenae, Pseudomonas Andropogons, Pseudomonas chicory, Pseudomonas concierges napus majus naris p. , Pseudomonas solanacearum, Pseudomonas syringae pv. Eliobotlier, Pseudomonas syringae pv. Lacrimans, Pseudomonas syringae pv. Foseolicola,
Pseudomonas syringe pv. Staria fasciens,
Pseudomonas syringae pv. Theae, Pseudomonas viridi flava, Zanthomonas campestris, tomato spot bacterial pathogen and citrus canker pathogen.

カテキン類としては、エピカテキン、エピガロカテキ
ン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート
があり、特にエピガロカテキンガレートの効果が一層顕
著である。
The catechins include epicatechin, epigallocatechin, epicatechin gallate, and epigallocatechin gallate, and the effect of epigallocatechin gallate is particularly remarkable.

(実施例) 本発明に適用可能な茶は、茶類に包含されるものであ
れば特に限定されるものではなく、不発酵茶である緑
茶、半発酵茶であるウーロン茶、発酵茶である紅茶など
の茶、または未加工の茶葉も用いることができる。
(Example) The tea applicable to the present invention is not particularly limited as long as it is included in teas, green tea which is an unfermented tea, oolong tea which is a semi-fermented tea, and black tea which is a fermented tea. Tea such as, or raw tea leaves can also be used.

a.カテキン類の抽出 カテキン類の抽出、分離の方法の一例は、図面にフロ
ーチャートとして示されている。
a. Extraction of catechins An example of a method for extracting and separating catechins is shown as a flow chart in the drawings.

実施の一例として、緑茶1kgを10の熱水で10分間抽
出し、この抽出液を遠心分離機(2000xg、10分)によっ
て減圧濃縮した。この濃縮液をクロマトグラフィカラム
(SephadexLH−20、10cm、I.D.×25cmL)で段階抽出し
た。第1段階は、4の蒸留水と3の15%アセトン溶
液で抽出し、次いで、3の30%アセトン溶液でA分画
を抽出し、これを濃縮し、凍結乾燥して粗カテキンAを
得た。また、3の60%アセトン溶液でB分画を抽出
し、これを濃縮し、凍結乾燥して粗カテキンBを得た。
As an example of implementation, 1 kg of green tea was extracted with 10 hot water for 10 minutes, and this extract was concentrated under reduced pressure by a centrifuge (2000 × g, 10 minutes). This concentrated solution was subjected to stepwise extraction with a chromatography column (Sephadex LH-20, 10 cm, ID × 25 cmL). The first step was to extract with distilled water of 4 and 15% acetone solution of 3 and then extract A fraction with 30% acetone solution of 3, concentrate and freeze-dry to obtain crude catechin A. It was The B fraction was extracted with a 60% acetone solution of 3, concentrated and freeze-dried to obtain crude catechin B.

b.カテキン類の抗菌効果 培地と植物病原細菌(菌数:109cell/ml)を混ぜて固
めた普通寒天平板培地上に、上記粗カテキンA、及び粗
カテキンBを所定量含有(1000ppm)するペーパーデス
ク(直径8mmの濾紙)を置き、30℃で3日間培養後、阻
止円の値(菌の増殖を抑えた円の大きさ)を測定した。
その結果を第1表に示す(以下、表はすべて文末に示
す。) 計算式は、阻止円の値={(阻止円の外径)−(ペー
パーデスクの直径)}÷2である。
b. Antibacterial effect of catechins The above-mentioned crude catechin A and crude catechin B are contained in a predetermined amount (1000ppm) on a plain agar plate medium prepared by mixing medium and phytopathogenic bacteria (cell count: 10 9 cell / ml) and hardening. A paper desk (filter paper with a diameter of 8 mm) was placed, and after culturing at 30 ° C. for 3 days, the value of the inhibition circle (the size of the circle that suppressed the growth of bacteria) was measured.
The results are shown in Table 1 (all tables are shown at the end of the sentence below). The calculation formula is the value of the blocking circle = {(outer diameter of blocking circle)-(diameter of paper desk)} / 2.

表中、対照非病原菌とは植物に病原性のない細菌であ
る。
In the table, the control non-pathogenic bacteria are bacteria that are not pathogenic to plants.

また、最小生育阻止濃度(カテキン類が抗菌効果を持
つ最小濃度)を第2表に示した。この表中、最小濃度に
範囲があるのは、菌の濃度(菌の数)を変えて試験した
ことによるもので、1.0×109(菌の略々最大濃度とみて
よい)から1.0×105までの濃度範囲に対する有効性の濃
度である。
Table 2 shows the minimum growth inhibitory concentration (the minimum concentration of catechins having an antibacterial effect). In this table, the range of the minimum concentration is due to the test by changing the concentration of bacteria (the number of bacteria), from 1.0 × 10 9 (which can be regarded as the maximum concentration of bacteria) to 1.0 × 10 9. It is the concentration of efficacy for concentration ranges up to 5 .

以上の結果から、菌体による感受性の違いはあるが、
いずれもはっきりした阻止効果を示した。
From the above results, although there are differences in susceptibility depending on the bacterial cells,
All showed a clear blocking effect.

c.エピガロカテキンガレートの抗菌効果 上記bと同様にしてかつ濃度を異ならせて、エピガロ
カテキンガレートによる数種の菌に対する阻止円の値を
測定し、これを第3表に示す。
c. Antibacterial effect of epigallocatechin gallate In the same manner as in b above, but with different concentrations, the values of the inhibition circles of several kinds of fungi by epigallocatechin gallate were measured and are shown in Table 3.

この結果から、阻止効果がはっきりと表れ、濃度が高
いほど顕著になることが分る。
From this result, it can be seen that the blocking effect appears clearly and becomes more remarkable as the concentration increases.

d.濃度変化に伴う抗菌効果 菌体濃度を異ならせた上記b同様の培地上に、濃度を
変えた粗カテキンA、及び粗カテキンBのペーパーデス
クを置き、上記bと同法によって培養後、阻止円の値を
求め、濃度による効果の違いをみた。
d. Antibacterial effect due to change in concentration Place the paper desks of crude catechin A and crude catechin B with different concentrations on the same medium as in b above with different bacterial cell concentrations, and after culturing by the same method as in b above, The value of the inhibition circle was calculated and the difference in the effect depending on the concentration was observed.

また、緑茶1kgを10の熱水で10分間抽出した茶抽出
物(茶液)をそのまま含浸させたペーパーデスクを用
い、上記bと同様な方法によって阻止円の値を測定し
た。
Further, the value of the inhibition circle was measured by the same method as the above b using a paper desk in which a tea extract (tea liquor) obtained by extracting 1 kg of green tea with 10 hot water for 10 minutes was directly impregnated.

これらの結果を菌ごとに第4〜10表に示す。 The results are shown in Tables 4 to 10 for each fungus.

この結果からも阻止効果が示され、濃度が高いほど顕
著になることが分る。
This result also shows the blocking effect, and it can be seen that the higher the concentration, the more remarkable.

e.病害防除効果 カテキン類の含有量が2000ppmに調整された液を、草
丈約30cmに成長したトマトと夏みかんの苗に噴霧して処
理区とし、これを風乾して後、常法によりトマト斑点細
菌病菌、カンキツかいよう病菌を噴霧摂取して感染さ
せ、3週間後に発病度を調べた(発斑数及び発病状態を
点数表現して調査した)。
e. Disease control effect A solution in which the content of catechins is adjusted to 2000 ppm is sprayed onto tomatoes and summer mandarin orange seedlings grown to a plant height of about 30 cm to form a treatment zone, which is air-dried and then tomato spots are applied by the usual method. Bacterial pathogens and citrus canker pathogens were ingested by spraying and infected, and the degree of disease was examined 3 weeks later (the number of spots and the state of disease were expressed by scores and investigated).

対照区としてカテキン類無噴霧の無処理区を設け、こ
こに上記同様にして上記菌を噴霧感染させ、3週間後の
発病度を100%とし、これと上記例とを比較し、その結
果を第11表に示した。これによって発病の軽減が図られ
ていることが判明した。なお、この結果は、現在、植物
細菌病に最も有効とされている銅剤(商標名ドイツボル
ドー)に匹敵するものである。
As a control group, an untreated group without spraying catechins was provided, and the above bacteria were spray-infected in the same manner as above, and the disease severity after 3 weeks was set to 100%, and this was compared with the above example. It is shown in Table 11. As a result, it was revealed that the disease was alleviated. In addition, this result is comparable with the copper agent (brand name Germany Bordeaux) which is currently said to be the most effective against plant bacterial diseases.

(発明の効果) このようにして、本発明による茶抽出物特に熱水抽出
物、最も好ましくはカテキン類が植物病原菌に対して抗
菌的に働き、さらにこの抗菌作用を利用して植物細菌病
に適度な防除の効果を奏することが明らかとなった。
(Effects of the Invention) Thus, the tea extract according to the present invention, especially the hot water extract, most preferably catechins act antibacterially against phytopathogenic fungi, and by utilizing this antibacterial effect, it is possible to prevent plant bacterial diseases. It was clarified that a moderate control effect was achieved.

また、使用時において対象物と環境条件を考慮して補
助剤を用いることにより、一層の効果が得られる。
Further, by using the auxiliary agent in consideration of the object and the environmental condition at the time of use, a further effect is obtained.

特に、この有効成分は長年に渡り人が飲料として利用
してきた葉茶中に含まれる天然物由来の物質そのもので
あるので、毒性、環境汚染の面から人畜に及ぼす悪影響
が少なく、しかも抽出、分離法が比較的簡単なことから
大量生産が可能である。
In particular, since this active ingredient is a substance derived from a natural product contained in leaf tea, which has been used as a beverage by humans for many years, it has little adverse effect on humans and animals from the viewpoint of toxicity and environmental pollution, and is extracted and separated. Mass production is possible because the method is relatively simple.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

図面は茶カテキン類の抽出、分離法を示すフローチャー
ト図である。
The drawing is a flowchart showing the method for extracting and separating tea catechins.

フロントページの続き (72)発明者 提坂 裕子 静岡県榛原郡相良町女神21 株式会社伊 藤園中央研究所内 (72)発明者 後藤 正夫 静岡県静岡市大谷3800―233 (56)参考文献 特公 昭56−38591(JP,B2) The Journal of Ap plied Bacteriology Vol.64(April 1988)P. 293−297Front page continuation (72) Inventor Yuko Hezaka 21 Goddess Sagara-cho, Haibara-gun, Shizuoka Itoen Central Research Institute Co., Ltd. (72) Masao Goto 3800-233 Otani, Shizuoka-shi, Shizuoka (56) References 56-38591 (JP, B2) The Journal of Applied Applied Biology Vol. 64 (April 1988) P. 293-297

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項1】エピカテキン、エピガロカテキン、エピカ
テキンガレート、エピガロカテキンガレートの一種乃至
二種以上を有効成分として含有し、 植物病原菌であるところのシュードモナス フルオレッ
センス,エルウィニア カロトフォラ サブスピーシス
アトロセプチカ,エルウィニア カロトフォラ サブ
スピーシス ペタバスキュローラム,エルウィニア カ
ロトフォラ サブスピーシス カロトフォラ,エルウィ
ニア クリサンセミ,エルウィニア クリセンサミ pv.
ツェアエ,クルトバクテリウム フラッカムファシエン
ス pv.オールチ,クラビバクター ミシガネンセ サブ
スピーシス ミシガンセ,シュードモナス アベナエ,
シュードモナス アンドロポゴンス,シュードモナス
チコリ,シュードモナス フィクスエレクタエ,シュー
ドモナス マージナリス pv.マージナリス,シュードモ
ナス シュードアルカリゲネス サブスピーシス コン
ニャシ,シュードモナス ソラナセアラム,シュードモ
ナス シリンゲ pv.エリオボトリエ,シュードモナス
シリンゲ pv.ラクリマンス,シュードモナス シリンゲ
pv.フォゼオリコラ,シュードモナス シリンゲ pv.ス
タリアファシエンス,シュードモナス シリンゲ pv.テ
アエ,シュードモナス ビリディフラバ,ザンソモナス
キャンペストリス類,トマト斑点細菌病菌及びカンキ
ツかいよう病菌に対する抗菌作用を特徴とする植物病原
菌用抗菌剤。
1. Pseudomonas fluorescens, Erwinia carotophora subspsis atroceptica, Erwinia carotophora, which contains one or more of epicatechin, epigallocatechin, epicatechin gallate, and epigallocatechin gallate as active ingredients and is a plant pathogen. Sub-Spithesis Petabasculorum, Erwinia Carotophora Sub-Spisys Carotophora, Erwinia Chrysansemi, Erwinia Cliensami pv.
Tseae, Curtobacterium flakhamfaciens pv. Orchi, Clavibacter misiganense subspicesis michiganse, Pseudomonas avenae,
Pseudomonas Andropogons, Pseudomonas
Chicory, Pseudomonas fix erectae, Pseudomonas marginalis pv.
Syringe pv. Lacrimance, Pseudomonas syringae
pv. fozeolicola, Pseudomonas syringae pv. staria fasciens, Pseudomonas syringae pv. theae, Pseudomonas viridi flava, Xanthomonas campestris, an antibacterial agent for phytopathogenic fungi characterized by bacterial tomato spot fungus and citrus canker bacterium.
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