JP2024522544A

JP2024522544A - 可溶性ＦＲ－α患者におけるがんの治療

Info

Publication number: JP2024522544A
Application number: JP2023574396A
Authority: JP
Inventors: エリックウェスティン，; ジウジョウワン，; カラムスロス，
Original assignee: イミュノジェン，インコーポレイテッド
Priority date: 2021-06-04
Filing date: 2022-06-02
Publication date: 2024-06-21

Abstract

本開示は、がん患者に存在する可溶性葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の量が、ＦＲα標的療法の有効性の強い予測因子であることを実証する。驚くべきことに、可溶性ＦＲαのレベルの上昇は、改善された転帰と関連する。したがって、本開示は、可溶性ＦＲα患者のがんを治療する方法、及び可溶性ＦＲαレベルに基づいて抗ＦＲα療法に応答する可能性が高いがんを同定する方法を提供する。本明細書では、可溶性葉酸受容体アルファ（α）を有する患者におけるがんを治療する方法が提供される。
【選択図】なし

Description

関連出願の参照
本出願は、２０２１年６月４日に出願された米国仮出願第６３／１９６，７６３号の優先権利益を主張し、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

ＥＦＳ－ＷＥＢ経由で電子的に提出された配列表の参照
電子的に提出された配列表（名称：２９２１＿１１０ＰＣ０１＿Ｓｅｑｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５；サイズ：９７，０６３バイト、作成日：２０２２年６月１日）の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

開示の分野
本開示の分野は、概して、可溶性葉酸受容体アルファ（ＦＲα）を有する患者におけるがんを治療する方法、及びこのような治療における抗ＦＲα活性剤（例えば、抗体及び免疫複合体）の使用に関する。

開示の背景
がんは、先進国における主要な死因の１つであり、米国だけで、年間１００万人以上ががんと診断され、５０万人が死亡している。全体として、３人に１人より多くが生涯にわたって何らかの形態のがんを発症すると推定されている。

葉酸受容体－α（ＦＲαまたはＦＯＬＲ１）は、葉酸に対して高い親和性を有するグリコシルホスファチジルイノシトール結合細胞表面糖タンパク質である。正常組織とがん組織におけるその生理的役割については、まだ十分に解明されていない。ほとんどの正常組織はＦＲαを発現せず、ほとんどの細胞への生理的葉酸の輸送は、いくつかの他のタンパク質、最も顕著には低減された葉酸担体によって媒介されていると考えられる。ＦＲαは、漿液性上皮及び類内膜上皮性卵巣癌、子宮内膜腺癌、及び腺癌サブタイプの非小細胞肺癌において高レベルであることが判明した。重要なことに、ＦＲα発現は、卵巣癌患者の転移巣及び再発がんにおいて、ならびに上皮性卵巣癌及び子宮内膜癌の化学療法後も維持される。これらの特性は、正常組織でのＦＲαの発現が高度に制限されていることに加え、ＦＲαをＡＤＣなどの標的療法の非常に有望な標的にする。

ミルベツキシマブソラブタンシン（ＩＭＧＮ８５３）は、強力なチューブリン作用メイタンシノイドであるＤＭ４にコンジュゲートしたＦＲα標的抗体を含む葉酸標的抗体薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）であり、近年、免疫組織化学（ＩＨＣ）染色により測定した中程度の及び高い膜ＦＲαレベルを示すプラチナ耐性卵巣癌患者においてクリニックで評価された。ＦＯＲＷＡＲＤＩ第３相試験では、２：１に３６６人の患者をランダム化し、ミルベツキシマブソラブタンシンか、または医師が選択した単剤化学療法（ペグ化リポソームドキソルビシン、トポテカン、またはウィークリタキセル）を受け取った。試験は、主要評価項目である無増悪生存期間（ＰＦＳ）の改善（全集団危険率（ＨＲ）＝０．９８、ｐ＝０．８９７）を達成できなかったが、予め指定された高いＦＲα亜集団（２１８／３６６）は、標準化学療法では１０％であるのに対して、ＩＭＧＮ８５３治療では全体応答率が２４％であることを示した。また、予め指定された高いＦＲα亜集団では、化学療法（ＨＲ＝０．６９、ｐ値＝０．０４９）と比べてＩＭＧＮ８５３を受けた患者ではＰＦＳが長く、化学療法（ＨＲ＝０．６２、ｐ値＝０．０３３）と比べてＩＭＧＮ８５３を受けた患者では全体生存期間が長かった。これらの結果は、ＩＨＣによって測定した高レベルの膜ＦＲαを発現する腫瘍を有する患者にとって心強いものであるが、患者のかなりの部分は、ＩＨＣによって測定した高レベルの膜ＦＲαを示さない腫瘍を有する。さらに、可溶性ＦＲαは、理論的にはＦＲα標的療法を妨害する可能性がある。したがって、ＦＲα標的療法の安全性及び有効性に対する可溶性ＦＲαの効果を理解する必要があると共に、より幅広い患者集団を治療するための方法が必要とされている。

本明細書では、可溶性葉酸受容体アルファ（α）を有する患者におけるがんを治療する方法が提供される。

いくつかの態様において、患者におけるがんを治療する方法は、抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有するがん患者に投与することを含む。いくつかの態様において、患者の可溶性ＦＲαは、投与前に患者から得られたサンプル中に検出された。いくつかの態様では、患者から得られたがんサンプルは、高いＦＲα免疫組織化学（ＩＨＣ）スコアを有しない。いくつかの態様において、患者から得られたがんサンプルは、高いＦＲα ＩＨＣスコアを有する。いくつかの態様では、ＦＲα ＩＨＣスコアは患者から得られていない。

いくつかの態様において、患者におけるがんを治療する方法は、（ｉ）患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有する場合、及び／または患者から得られたがんサンプルが高いＦＲα ＩＨＣスコアを有する場合、抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を患者に投与すること、及び（ｉｉ）患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有さず、かつ患者から得られたがんサンプルが高いＦＲα ＩＨＣスコアを有さない場合、患者に化学療法を投与することを含む。

いくつかの態様では、この方法は、活性剤を投与する前に患者から得られたサンプル中の可溶性ＦＲαのレベルを決定することをさらに含む。

いくつかの態様では、この方法は、投与前に患者から得られたがんサンプルにおけるＦＲα ＩＨＣスコアを決定することをさらに含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高い患者のがんを同定するための方法は、患者から得られたサンプル中の可溶性ＦＲαを測定することと、場合により患者から得られた腫瘍サンプル中のＦＲα ＩＨＣスコアを決定することとを含み、ここで、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベル及び／または高ＦＲα ＩＨＣスコアの存在が、がんが抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高いことを示す。いくつかの態様では、この方法は、がんが応答する可能性が高い場合に、抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を患者に投与することをさらに含む。

いくつかの態様において、標的可溶性ＦＲαレベル以上ではない可溶性ＦＲαのレベル及び高くないＩＨＣスコアは、がんが抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物に応答する可能性が低いことを示す。いくつかの態様において、標的可溶性ＦＲαレベル以上ではない可溶性ＦＲαのレベル及び高くないＩＨＣスコアは、がんが抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物よりも化学療法に対してより応答性である可能性が高いことを示す。

いくつかの態様では、患者の可溶性ＦＲαのレベルは、液体クロマトグラフィー－質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、及び／またはメソスケールディスカバリー（ＭＳＤ）を用いて評価される。

いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約０．５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約０．６ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約０．７ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約０．７５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約０．８ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約０．９ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．１ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．２ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．２５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．３ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．４ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．６ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．７ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．７５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．８ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約１．９ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．０ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．１ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．２ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．２５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．３ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．４ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．６ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．７ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．７５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．８ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約２．９ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．０ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．１ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．２ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．２５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．３ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．４ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．６ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．７ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．７５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．８ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約３．９ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．０ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．１ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．２ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．２５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．３ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．４ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．６ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．７ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．７５ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．８ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約４．９ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは約５ｎｇ／ｍＬである。

いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは、中程度（５０～７４％の細胞陽性）または高い（少なくとも７５％の細胞陽性）膜ＦＲαレベルを有する腫瘍を有する卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌の患者における平均可溶性ＦＲαレベルであり、これは染色パーセント（ＰＳ）２＋染色強度によって決定される。

いくつかの態様では、高いＩＨＣスコアとは、少なくとも７５％の腫瘍細胞が染色パーセント（ＰＳ）２＋染色強度を有することを指す。いくつかの態様では、高いＩＨＣスコアとは、少なくとも５０％の腫瘍細胞がＰＳ２＋染色強度を有することを指す。

いくつかの態様では、がんは、固形腫瘍である。いくつかの態様において、がんは、卵巣癌、子宮癌、子宮内膜癌、膵臓癌、腎臓癌、肺癌、腹膜癌、乳癌、及び卵管癌からなる群から選択される。いくつかの態様において、がんは卵巣癌である。いくつかの態様において、卵巣癌は、プラチナ耐性またはプラチナ不応性である。いくつかの態様では、がんはプラチナ感受性卵巣癌である。いくつかの態様において、卵巣癌は上皮性卵巣癌である。いくつかの態様において、がんは、プラチナ耐性の進行した高悪性度上皮性卵巣癌である。いくつかの態様において、がんは子宮癌である。いくつかの態様において、がんは子宮内膜癌である。いくつかの態様において、がんは膵臓癌である。いくつかの態様において、がんは腎癌である。いくつかの実施形態において、がんは肺癌である。いくつかの態様において、肺癌は非小細胞肺癌である。いくつかの態様において、がんは腹膜癌である。いくつかの態様において、腹膜癌は、原発性腹膜癌である。いくつかの態様において、がんは乳癌である。いくつかの態様では、乳癌は、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である。いくつかの態様では、がんは卵管癌である。いくつかの態様において、がんは再発がんである。

いくつかの態様において、活性剤は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号３８のＶＨと配列番号４４のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号３８のＶＨと配列番号４４のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する。いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）相補性決定領域（ＣＤＲ）１と、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２と、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３と、配列番号１５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＨ）－ＣＤＲ１と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２と、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３とを含む。いくつかの態様では、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様では、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの態様において、活性剤中の抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＰＴＡ－１０７７２としてＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託されたプラスミドによってコードされる重鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む重鎖及び／またはＰＴＡ－１０７７４としてＡＴＣＣに寄託されたプラスミドによってコードされる軽鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号３７のＶＨと配列番号４３のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号３７のＶＨと配列番号４３のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する。いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号２のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）相補性決定領域（ＣＤＲ）１と、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２と、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３と、配列番号７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＨ）－ＣＤＲ１と、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２と、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３とを含む。いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び／または配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様では、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号５５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様において、活性剤は、抗ＦＲα抗体の抗原結合フラグメントを含む。いくつかの態様では、抗原結合フラグメントは一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である。いくつかの態様では、ｓｃＦｖは、配列番号６０のアミノ酸配列を有する。

いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、単一特異性抗体またはその抗原結合フラグメントである。いくつかの態様において、活性剤における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、バイパラトープ抗体またはその抗原結合フラグメントである。いくつかの態様において、バイパラトープ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を含む。

いくつかの態様では、活性剤は、細胞傷害性剤にコンジュゲートされた抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む免疫複合体である。いくつかの態様では、細胞傷害性剤は、リンカーによって抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントにコンジュゲートする。いくつかの態様では、リンカーは、切断可能なリンカー、切断不可能なリンカー、親水性リンカー、及びジカルボン酸系リンカーからなる群から選択される。いくつかの態様では、リンカーは、Ｎ－（γ－マレイミドブトリルオキシ（ｍａｌｅｉｍｉｄｏｂｕｔｒｙｌｏｘｙ））スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＧＭＢＳまたはｓＧＭＢＳ）、γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）、Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）－２－スルホブタノエート（スルホ－ＳＰＤＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）またはＮ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）－２－スルホペンタノエート（スルホ－ＳＰＰ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）、Ｎ－スクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）；Ｎ－スルホスクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（スルホＳＭＣＣ）；Ｎ－スクシンイミジル－４－（ヨードアセチル）－アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）；及びＮ－スクシンイミジル－［（Ｎ－マレイミドプロピオンアミド）－テトラエチレングリコール］エステル（ＮＨＳ－ＰＥＧ４－マレイミド）からなる群から選択される。いくつかの態様では、リンカーはスルホ－ＳＰＤＢである。いくつかの態様では、リンカーはスルホ－ＧＭＢＳである。いくつかの態様では、リンカーはＧＭＢＳである。

いくつかの態様において、細胞傷害性剤は、メイタンシノイド、メイタンシノイド類似体、ベンゾジアゼピン、タキソイド、ＣＣ－１０６５、ＣＣ－１０６５類似体、デュオカルマイシン、デュオカルマイシン類似体、カリケアミシン、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、トマイマイシン誘導体、及びレプトマイシン誘導体または細胞傷害性剤のプロドラッグからなる群から選択される。いくつかの態様では、細胞傷害性剤はメイタンシノイドである。いくつかの態様では、メイタンシノイドは、ＤＭ４である。いくつかの態様では、メイタンシノイドは、ＤＭ２１である。

いくつかの態様では、免疫複合体は、１～２０の細胞傷害性剤を含む。いくつかの態様では、免疫複合体は、１～１０の細胞傷害性剤を含む。いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ＣＢは、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり、
Ｌ_２は、以下の式：

のうちの１つで表され、
式中、
Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’は、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、ハロゲン、－Ｏ－（Ｃ_１－４アルキル）、－ＳＯ_３Ｈ、－ＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋、または－ＯＨ、ハロゲン、ＳＯ_３Ｈ、もしくはＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋で置換されていてもよいＣ_１－４アルキルであり、ここで、Ｒ_４０、Ｒ_４１、及びＲ_４２はそれぞれ独立してＨまたはＣ_１－４アルキルであり、
ｌ及びｋは、それぞれ独立して、１～１０の整数であり、
ｌ１は、２～５の整数であり、
ｋ１は、１～５の整数であり、かつ
ｓ１は細胞結合剤ＣＢに結合する部位を示し、ｓ３はＡ基に結合する部位を示し、
Ａは、アミノ酸残基、または２～２０個のアミノ酸残基を含むペプチドであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、またはＣ_１－３アルキルであり、
Ｌ_１は、以下の式で表され、
－ＣＲ^３Ｒ^４－（ＣＨ_２）_１－８－Ｃ（＝Ｏ）－
式中、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立して、ＨまたはＭｅであり、Ｌ_１中の－Ｃ（＝Ｏ）－部分は、Ｄに接続されており、
Ｄは、以下の式で表され、

ｑは、１～２０の整数である。

いくつかの態様において、Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’、及びＲ^ｙ’はすべてＨであり、ｌ及びｋはそれぞれ独立して、２～６の整数である。いくつかの態様において、Ａは、２～５個のアミノ酸残基を含むペプチドである。いくつかの態様では、Ａは、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ、Ａｌａ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｌｙｓ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ｌｙｓ、Ｐｈｅ－Ｃｉｔ、Ｌｅｕ－Ｃｉｔ、Ｉｌｅ－Ｃｉｔ、Ｐｈｅ－Ａｌａ、Ｐｈｅ－Ｎ^９－トシル－Ａｒｇ、Ｐｈｅ－Ｎ^９－ニトロ－Ａｒｇ、Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ、Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｌｅｕ、Ｖａｌ－Ａｌａ－Ｖａｌ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号５４）、β－Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号５５）、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号５６）、Ｖａｌ－Ａｒｇ、Ａｒｇ－Ａｒｇ、Ｖａｌ－Ｄ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｄ－Ｌｙｓ、Ｖａｌ－Ｄ－Ａｒｇ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｒｇ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ａｒｇ、Ｄ－Ａｒｇ－Ｄ－Ａｒｇ、Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｍｅｔ、Ｇｌｎ－Ｖａｌ、Ａｓｎ－Ａｌａ、Ｇｌｎ－Ｐｈｅ、Ｇｌｎ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｐｒｏ、及びＤ－Ａｌａ－ｔＢｕ－Ｇｌｙからなる群から選択され、ここで、各ペプチドの最初のアミノ酸がＬ_２基に接続され、各ペプチドの最後のアミノ酸が－ＮＨ－ＣＲ^１Ｒ^２－Ｓ－Ｌ_１－Ｄに接続される。いくつかの態様では、Ｒ^１及びＲ^２は、両方ともＨである。いくつかの態様では、Ｌ_１は、－（ＣＨ_２）_４－６－Ｃ（＝Ｏ）－である。いくつかの態様では、Ｄは以下の式で表される：

いくつかの態様では、免疫複合体は、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨと配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含み、その抗体または抗原結合フラグメントは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介してＤＭ４にコンジュゲートしている。いくつかの態様では、免疫複合体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む抗ＦＲα抗体を含む。いくつかの態様では、抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む医薬組成物は、ＩＭＧＮ８５３を含む。いくつかの態様では、ＩＭＧＮ８５３を含む医薬組成物は、調整された理想体重（ＡＩＢＷ）に基づく用量、例えば、約６ｍｇ／ｋｇのＡＩＢＷの用量または約５ｍｇ／ｋｇのＡＩＢＷの用量で投与される。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ＣＢＡは、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を含む抗体または抗原結合フラグメントであり、
Ｄ_１は、以下の式で表され、

ｑは、１～１０の整数である。

いくつかの態様では、抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む医薬組成物は、ＩＭＧＮ１５１を含む。

いくつかの態様では、医薬組成物は、抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均２～５個の細胞傷害性剤を含む抗ＦＲα免疫複合体を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα免疫複合体は、抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均３～４個の細胞傷害性剤を含む。いくつかの態様では、医薬組成物は、抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均２～３．５個の細胞傷害性剤を含む抗ＦＲα免疫複合体を含む。

いくつかの態様において、可溶性ＦＲαは、ＦＲαに特異的に結合する検出抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて検出され、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨと配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む抗体は、検出抗体またはその抗原結合フラグメントのＦＲαへの結合を競合的に阻害しない。いくつかの態様において、可溶性ＦＲαは、ＦＲαに特異的に結合する検出抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて検出され、葉酸は、検出抗体またはその抗原結合フラグメントのＦＲαへの結合を競合的に阻害しない。いくつかの態様において、可溶性ＦＲαは、ＦＲαに特異的に結合し、かつ（ａ）それぞれ、配列番号１８～２０及び配列番号２１～２３、または（ｂ）それぞれ、配列番号２４～２６及び配列番号２７～２９のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、検出抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて検出される。いくつかの態様において、検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ、配列番号３９及び配列番号４５、または（ｂ）それぞれ、配列番号４０及び配列番号４６のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ、配列番号５１及び配列番号５７、または（ｂ）それぞれ、配列番号５２及び配列番号５８の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む。

いくつかの態様において、可溶性ＦＲαは、（ｉ）固体支持体に結合した免疫捕捉試薬でＦＲαを捕捉すること、（ｉｉ）固体支持体からＦＲαを溶出すること、（ｉｉｉ）溶出したＦＲαを消化すること、及び（ｉｖ）消化したＦＲαに対してＬＣ／ＭＳ分析を実行することによって検出され、ここで、前記ＦＲαを、少なくとも１つのシグネチャＦＲαペプチドのクロマトグラフィー分離及び質量分析応答を監視することにより検出する。いくつかの態様では、固体支持体は、質量分析免疫アッセイ（ＭＳＩＡ）マイクロカラムを含む。いくつかの態様では、固体支持体は磁気ビーズを含む。いくつかの態様では、少なくとも１つの洗浄ステップは、固体支持体からＦＲαを溶出する前に行われる。いくつかの態様では、２つ以上の洗浄ステップが、固体支持体からＦＲαを溶出する前に行われる。いくつかの態様では、洗浄ステップは、固体支持体に結合したＦＲαを、洗浄緩衝液、塩溶液、及び洗剤と接触させることを含む。いくつかの態様では、ＦＲαは、酸性溶液で固体支持体から溶出される。いくつかの態様では、ＦＲαは、ＦＲαを消化する前に還元され、アルキル化される。いくつかの態様では、ＦＲαはトリプシン／Ｌｙｓ－Ｃで消化される。いくつかの態様では、ＦＲαを消化することにより、配列番号６８の配列を含むペプチドが生成される。いくつかの態様では、ＦＲαを消化することにより、配列番号６９の配列を含むペプチドが生成される。いくつかの態様では、ＦＲαを消化することにより、配列番号７０の配列を含むペプチドが生成される。いくつかの態様では、ＦＲαを消化することにより、配列番号７１の配列を含むペプチドが生成される。いくつかの態様では、ＦＲαの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つのシグネチャペプチドが、ＬＣ／ＭＳ分析ステップで選択されて監視される。いくつかの態様では、シグネチャペプチドは、（ａ）配列番号６８の配列を含むペプチド；（ｂ）配列番号６９の配列を含むペプチド；（ｃ）配列番号７０の配列を含むペプチド；及び（ｄ）配列番号７１の配列を含むペプチドを含む。

いくつかの態様では、患者の可溶性ＦＲαのレベルは、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて評価される。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、体液サンプル中で検出される。いくつかの態様において、体液は、血漿液、血清液、または腹水液である。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、末梢血サンプルにおいて検出される。

いくつかの態様では、ＦＲα ＩＨＣスコアは、参照サンプルと比較して腫瘍サンプルにおける染色強度と染色均一性とを区別するＩＨＣを使用して得られる。いくつかの態様では、ＦＲα ＩＨＣスコアは、ＦＲαに特異的に結合し、かつ配列番号３０～３２及び配列番号３３～３５のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２及びＶＬ－ＣＤＲ３アミノ酸配列をそれぞれ含むＩＨＣ抗体またはその抗原結合フラグメントを使用して得られる。いくつかの態様では、ＩＨＣ検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号４１及び配列番号４７のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、検出抗体または抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号５３及び配列番号５９の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む。

また、本明細書において、本明細書で提供される任意の実施形態による標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有する患者のがんの治療のための医薬組成物であって、抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む医薬組成物も提供される。

ＩＭＧＮ８５３の安全性及び有効性を、元のスケール（左のグラフ）またはｌｏｇ２スケール（右）のいずれかを使用して、選択された単剤化学療法の安全性及び有効性と比較した、第３相臨床試験に参加した患者において検出された可溶性ＦＲαのレベルを示す図である（実施例１を参照）。可溶性ＦＲαレベルによるＩＭＧＮ８５３で治療された対象における全体的な有効性を示す図である。ＰＦＳ＝無増悪生存期間、ＯＳ＝全体生存率、ＯＲＲ＝客観的応答率、ＢＩＲＣ＝盲検独立レビュー委員会、ＩＮＶ＝治験責任医師（実施例１を参照）。様々な可溶性ＦＲαレベルを有する患者におけるＩＭＧＮ８５３及び化学療法の相対的有効性を示す無増悪生存期間（ＰＦＳ）ハザード比フォレストプロットである（実施例１を参照）。可溶性ＦＲαレベルの各四分位数（Ｑ１～Ｑ４）においてＩＨＣによって測定した低い、中程度、及び高い膜ＦＲαを有する患者の割合を示す図である（実施例２を参照）。膜ＦＲα免疫組織化学（ＩＨＣ）染色の１＋、２＋、及び３＋レベルを示す図である。ＭＩＲＡＳＯＬ及びＦＯＲＷＡＲＤＩ臨床試験で観察された可溶性ＦＲα分布を示す図である。ボックスを半分にカットした水平線は、中央値を表し、ボックスの上部は、７５％の値を表す（実施例３を参照）。ＭＩＲＡＳＯＬ、ＦＯＲＷＡＲＤＩ、及びＳＯＲＡＹＡ臨床試験で観察された可溶性ＦＲα分布を示す図である。ボックスを半分にカットした水平線は、中央値を表し、ボックスの上部は、７５％の値を表す（実施例３を参照）。様々なＩＨＣＦＲα ＰＳ２スコアを有する患者における可溶性ＦＲαスコアを示す図である。ボックスを半分にカットした水平線は、中央値を表し、ボックスの上部は、７５％の値を表す（実施例３を参照）。様々なＩＨＣＦＲα ＰＳ２スコアを有する患者における可溶性ＦＲαスコアを示す図である。ボックスを半分にカットした水平線は、中央値を表し、ボックスの上部は、７５％の値を表す（実施例３を参照）。可溶性ＦＲα分布にわたる表面腫瘍ＦＲα発現を示す図である（実施例３を参照）。可溶性ＦＲα分布にわたる表面腫瘍ＦＲα発現を示す図である（実施例３を参照）。異なるＦＲα ＩＨＣを有する患者における低い（Ｑ１及びＱ２）または高い（Ｑ３及びＱ４）可溶性ＦＲαの患者の割合（上段）、及び異なる可溶性ＦＲαレベルを有する患者における低い（ＰＳ２が５０ｍ未満）、中程度（ＰＳ２が５０～７４）または高い（ＰＳ２が７５以上）ＦＲα ＩＨＣを有する患者の割合（下段）を示す図である（実施例２を参照）。異なるＦＲα ＩＨＣを有する患者における低い（Ｑ１及びＱ２、０．８ｎｇ／ｍＬ未満）または高い（Ｑ３及びＱ４、０．８ｎｇ／ｍＬ以上）可溶性ＦＲαの患者の割合（上段）、及び異なる可溶性ＦＲαレベルを有する患者におけるＰＳ２が０～２４、ＰＳ２が２５～４９、ＰＳ２が５０～７４、またはＰＳ２が７５以上のＦＲα ＩＨＣを有する患者の割合（下段）を示す図である。可溶性ＦＲα四分位数を、ＰＳ２スコアを有する４４０人のＭＩＲＡＳＯＬ患者からのデータに基づいて定義した。ＰＳ２スコアを有する４０４人の患者のみが図面に示されている結果に含まれている（実施例２を参照）。可溶性ＦＲαの検出における液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）及びＥＬＩＳＡ法の相関を示す図である（実施例４を参照）。ＥＬＩＳＡによって測定した場合の可溶性ＦＲαレベルの上昇が、無増悪生存期間（ＰＦＳ）及び全体応答率（ＯＲＲ）の増加と相関することを示す図である（実施例４を参照）。

開示の詳細な説明
Ｉ．定義
本開示の理解を促進するために、多数の用語及び語句を下記に定義する。

本明細書で使用する場合、「葉酸受容体１」、「ＦＲα」、「葉酸受容体アルファ（ＦＲ－α）」、または「ＦＯＬＲ１」という用語は、特に記載がない限り、任意の天然のＦＲαポリペプチドを指す。これらの用語は、「完全長」の未処理のＦＲαポリペプチド、ならびに細胞内の処理から生じるＦＲαポリペプチドの任意の形態を包含する。用語はまた、ＦＲαの天然に存在する変異体、例えば、スプライス変異体及び対立遺伝子変異体によってコードされるものも包含する。本明細書に記載されるＦＲαポリペプチドは、ヒト組織型から、若しくは別の源から等、多様な源から単離され得るか、または組み換え法または合成法によって調製され得る。具体的に示されている場合、「ＦＲα」は、ＦＲαポリペプチドをコードする核酸を指すために使用することができる。ヒトＦＲα配列は公知であり、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢアクセッション番号Ｐ１５３２８で公的に入手可能な配列（アイソフォームを含む）を含む。ＦＲαは、シグナルペプチド（アミノ酸１～２４）、ＦＲαタンパク質鎖（アミノ酸２５～２３４）、及び切断可能なプロペプチド（アミノ酸２３５～２５７）を含むことができる。本明細書で使用する場合、「完全長ヒトＦＲα」という用語は、配列番号１のアミノ酸配列を含むポリペプチドを指し、「成熟ヒトＦＲα」という用語は、配列番号１）のアミノ酸２５～２３４を含むポリペプチドを指す。
ＭＡＱＲＭＴＴＱＬＬＬＬＬＶＷＶＡＶＶＧＥＡＱＴＲＩＡＷＡＲＴＥＬＬＮＶＣＭＮＡＫＨＨＫＥＫＰＧＰＥＤＫＬＨＥＱＣＲＰＷＲＫＮＡＣＣＳＴＮＴＳＱＥＡＨＫＤＶＳＹＬＹＲＦＮＷＮＨＣＧＥＭＡＰＡＣＫＲＨＦＩＱＤＴＣＬＹＥＣＳＰＮＬＧＰＷＩＱＱＶＤＱＳＷＲＫＥＲＶＬＮＶＰＬＣＫＥＤＣＥＱＷＷＥＤＣＲＴＳＹＴＣＫＳＮＷＨＫＧＷＮＷＴＳＧＦＮＫＣＡＶＧＡＡＣＱＰＦＨＦＹＦＰＴＰＴＶＬＣＮＥＩＷＴＨＳＹＫＶＳＮＹＳＲＧＳＧＲＣＩＱＭＷＦＤＰＡＱＧＮＰＮＥＥＶＡＲＦＹＡＡＡＭＳＧＡＧＰＷＡＡＷＰＦＬＬＳＬＡＬＭＬＬＷＬＬＳ（配列番号１）。

本明細書で使用される「可溶性ＦＲα」または「ｓＦＲα」という用語は、可溶性であり、かつ細胞会合していないＦＲαタンパク質を指す。それは腫瘍組織の外側（例えば、血液及び／または血漿中）にある。いくつかの態様では、これには、完全長ＦＲα及びＦＲαのグリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカーが含まれる。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、完全長ＦＲαのみを含む。いくつかの態様では、ＥＣＤ及びＧＰＩアンカーは、膜（例えば、可溶性脂質ラフト）中に埋め込むことができる。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、配列番号１のアミノ酸１～２３３、配列番号１のアミノ酸２５～２３４、またはそれらのフラグメントを含む。

「抗ＦＲα抗体」または「ＦＲαに結合する抗体」という用語は、抗体がＦＲαを標的とする際に診断剤及び／または治療剤として有用になるように十分な親和性でＦＲαに結合することができる抗体を指す。本明細書で使用する場合、このような抗体は、例えば、単一特異性及び二重特異性（例えば、バイパラトープ）抗体を含む。他に指定しない限り、抗ＦＲα抗体が無関係の非ＦＲαタンパク質に結合する程度は、例えば放射免疫測定法（ＲＩＡ）によって測定される、抗体のＦＲαへの結合の約１０％未満である。ＦＲα抗体の例は当該技術分野で知られており、米国特許出願公開第２０１２／０００９１８１号及び第２０１２／０２８２１７５号、ならびに米国特許第９，２００，０７３Ｂ２号、ＰＣＴ公開第２０１１／１０６５２８Ａ１号、及び米国特許出願公開第２０２０／０３６２０２９号に開示されており、そのそれぞれが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

「ＩＭＧＮ８５３」（「ミルベツキシマブソラブタンシン」としても知られる）という用語は、ｈｕＭｏｖ１９（またはＭ９３４６Ａ）抗体、スルホ－ＳＰＤＢリンカー、及びＤＭ４メイタンシノイドを含む免疫複合体を含み、平均薬剤対抗体比（ＤＡＲ）が３．５である組成物を指す。「ｈｕＭｏｖ１９」（または「Ｍ９３４６Ａ」）抗体は、配列番号５０の全長重鎖（以下の配列番号５０に関連して下線が引かれている可変重鎖配列番号３８を含む）及び配列番号５６の全長軽鎖（以下の配列番号５６に関連して下線が引かれている可変軽鎖配列番号４４を含む）を含む抗ＦＲα抗体である。

ｈｕＭｏｖ１９（Ｍ９３４６Ａ）抗体は、ブダペスト条約の条項に基づいて、２０１０年４月７日に１０８０１ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＢｏｕｌｅｖａｒｄ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ２０１１０に位置するＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１０７７２及びＰＴＡ－１０７７４を有するプラスミドによってコードされる。ＤＭ４とは、Ｎ２’－デアセチル－Ｎ２’－（４－メルカプト－４－メチル－１－オキソペンチル）メイタンシノイドを指す。「スルホ－ＳＰＤＢ」とは、Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）－２－スルホブタノエート）リンカーを指す。

「ＩＭＧＮ１５１」という用語は、ＫＩＨ－ＦＲ５７ｓｃｆｖ－ｈｕＭｏｖ１９抗体、ＧＭＢＳリンカー、及びＤＭ２１Ｌメイタンシノイドを含む免疫複合体を含み、平均薬剤対抗体比（ＤＡＲ）が３．５である組成物を指す。ＫＩＨ－ＦＲ５７ｓｃｆｖ－ｈｕＭｏｖ１９抗体の配列を本明細書で提供する（例えば、以下の寄託物及び表８を参照）。

ＫＩＨ－ＦＲ５７ｓｃｆｖ－ｈｕＭｏｖ１９抗体は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１０７７４（２０１０年４月７日に寄託）、ＰＴＡ－１２５９１５（「Ｍｏｖ１９－Ｆｃ－ｈｏｌｅ」、２０１９年４月２９日にＡＴＣＣに寄託され、２０１９年４月３０日にＡＴＣＣに受領）、及びＰＴＡ－１２５９１６（「ＦＲ５７ｓｃＦｖ２－Ｆｃ－Ｋｎｏｂ」、２０１９年４月２９日にＡＴＣＣに寄託され、２０１９年４月３０日にＡＴＣＣに受領）を有するプラスミドによってコードされる。

特定の腫瘍、組織、またはサンプルにおけるＦＲαの「上昇」、ＦＲαの「発現の増加」、またはＦＲαの「過剰発現」という用語は、健康なまたは疾患のない（天然型、野生型）組織、細胞、または同じ型もしくは起源のサンプルに存在するレベルよりも高いレベルで存在するＦＲα（ＦＲαポリペプチドまたはそのようなポリペプチドをコードする核酸）を指す。このような発現の増加または過剰発現は、例えば、突然変異、遺伝子増幅、転写の増加、翻訳の増加、またはタンパク質の安定性の増加によって引き起こされ得る。

膜ＦＲα発現は、免疫組織化学（ＩＨＣ）により測定することができ、定義されたスコアを示す校正済み対照との比較により「染色強度スコア」及び／または「染色均一性スコア」が与えられることができる（例えば、強度がレベル３＋校正済み対照と同等である場合には、３＋の強度スコアが試験サンプルに与えられ、または、強度がレベル２＋校正済み対照と同等である場合には、２＋の強度が試験サンプルに与えられる）。スコア０は、染色がないことを指す。スコア１＋は、軽い（褐色）染色を指す。スコア２＋は中程度（褐色）の染色を指し、スコア３＋は濃い（褐色）染色を指す。１＋、２＋、及び３＋染色の例を、図５に示す。染色均一性は、特定の強度での細胞の染色のパーセンテージ（％）として表すことができる（例えば、１＋、２＋または３＋の強度での５０％の細胞染色）。ＩＨＣによる膜ＦＲαの発現に関して、「ＰＳ」は、染色された百分率を指す。したがって、例えば、「７５％以上の細胞がＰＳ２＋染色強度を有すること」は、サンプル中の細胞の少なくとも７５％が少なくとも２＋（すなわち、２＋または３＋）の染色強度を有することを示す。ＩＨＣによる膜ＦＲα発現の測定方法は、例えば、国際公開第２０１２／１３５６７５号及び国際公開第２０１５／０３１８１５号に開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

可溶性ＦＲαの測定方法は当該技術分野において公知であり、例えば国際公開第２０１９／０５０９３５号及び国際公開第２０１２／０６１７５９号に開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。可溶性ＦＲαを測定するために使用することができる市販のキットも入手できる（例えば、ＨｕｍａｎＦＯＬＲ１Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ＥＬＩＳＡＫｉｔ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ））。

「参照サンプル」は、得られた結果を試験サンプルと相関させ、比較するために使用することができる。参照サンプルは、細胞（例えば、細胞株、細胞ペレット）、体液、または組織であることができる。「参照サンプル」中のＦＲαレベルは、ＦＲαの絶対量もしくは相対量、量の範囲、最小量及び／もしくは最大量、平均量、ならびに／または中央量であり得る。「参照サンプル」は、試験サンプルと比較されるＦＲα発現のベースラインとしても機能し得る。「参照サンプル」は、同じ患者からの以前のサンプルもしくはベースラインサンプル、正常の参照、または関連する患者集団からの参照を含むことができる。一般的に、ＦＲαレベルは標準曲線における値として表される。標準曲線は、アッセイデータをプロットしてサンプル中のＦＲα濃度を求める定量的方法である。いくつかの態様では、参照サンプルは、精製されたＦＲαまたはＦＲα－Ｆｃを含む抗原標準である。本明細書に開示される検出方法は、試験サンプル中のＦＲαの発現レベルと、「参照値」または「参照レベル」との比較を含み得る。いくつかの態様では、参照値は、参照サンプル中のＦＲαの発現レベルである。参照値は、予め定められた値であることができ、また、試験サンプルと並行して試験された参照サンプル（例えば、対照生体サンプル）から求めることもできる。参照値は、中央値や平均値などの単一のカットオフ値、または信頼区間などの値の範囲とすることができる。参照値は、例えば、がんの素因を有する個体、初期または後期がんを有する個体、男性及び／または女性個体、あるいはがん治療を受けている個体など、個体の様々なサブグループについて設定することができる。

「生物学的サンプル」は、いくつかの態様では、例えば真核生物由来など、生物学的起源のものである。いくつかの態様において、サンプルはヒトサンプルであるが、動物サンプルも使用可能である。使用するサンプルの非限定的な供給源としては、例えば、固形組織、生検吸引物、腹水、流体抽出物、血液、血漿、血清、髄液、リンパ液、皮膚の外側部、呼吸器、腸管、及び泌尿生殖器管、涙液、唾液、乳、腫瘍、器官、細胞培養物、及び／または細胞培養成分が挙げられる。本明細書において提供される説明は、がんサンプルのために有用であり、このがんサンプルには、例えば、利用可能な物質の量が少ない腹水などの体液を含むがんサンプルが含まれる。

本明細書で使用される「捕捉試薬」という用語は、適切な条件下で、捕捉試薬－標的分子複合体をサンプルの残りの部分から分離することができるように、サンプル中の標的分子を結合して捕捉することができる試薬を指す。「免疫捕捉試薬」という用語は、適切な条件下で、捕捉試薬－標的分子複合体をサンプルの残りの部分から分離することができるように、サンプル中の標的分子を結合して捕捉することができる免疫学的試薬を指す。いくつかの態様では、免疫捕捉試薬は、抗体または抗原結合フラグメントである。いくつかの態様では、捕捉試薬または免疫捕捉試薬は固定化される。いくつかの態様では、捕捉試薬または免疫捕捉試薬は固体支持体上に固定化される。

本明細書で使用される場合、「検出可能な抗体」という用語は、検出手段によって増幅された標識を用いて直接、または例えば標識されている別の抗体を介して間接的に検出できる抗体を指す。直接標識の場合、抗体は、典型的には、いくつかの手段によって検出可能な部分にコンジュゲートされる。いくつかの態様では、検出可能な抗体は、ビオチン化抗体である。

本明細書で使用されるとき、「標識」という語は、「標識された」抗体を生成するために抗体に直接的に、または間接的にコンジュゲートされる、検出可能な化合物または組成物を指す。標識は、それ自体で検出可能（例えば、放射性同位標識または蛍光標識）であり得るか、または酵素標識の場合、検出可能である基質化合物もしくは組成物の化学改変を触媒し得る。

「相関する」または「相関すること」とは、任意の方法で、第１の分析の性能及び／または結果を、第２の分析の性能及び／または結果と比較することを意味する。例えば、第２の分析を行う際に第１の分析の結果を使用することができ、及び／または第１の分析の結果を使用して、第２の分析が行われるべきかを判定することができ、及び／または第１の分析の結果を第２の分析の結果と比較することができる。

「抗体」という用語は、標的、例えば、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、またはこれらの組み合わせを、当該免疫グロブリン分子の可変領域内の少なくとも１つの抗原認識部位を介して認識しこれに結合する免疫グロブリン分子を意味する。本明細書で使用される、「抗体」という用語は、無傷のポリクローナル抗体、無傷のモノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体を含む融合タンパク質、及び当該抗体が所望の生物活性を示すということであれば任意の他の修飾免疫グロブリン分子を包含する。本明細書で使用する場合、このような抗体は、例えば、単一特異性及び二重特異性（例えば、バイパラトープ）抗体を含む。抗体は、それぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、及びミューと呼ばれる重鎖定常ドメインの同一性に基づいて、５つの主な免疫グロブリンクラス、すなわち、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ、またはそれらのサブクラス（アイソタイプ）（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）のいずれかであり得る。異なるクラスの免疫グロブリンは、異なる周知のサブユニット構造及び三次元構造を有する。抗体は、ネイキッドであってもよいし、毒素（例えば、免疫複合体における）、放射性同位体などのような他の分子にコンジュゲートされていてもよい。

「抗体フラグメント」または「その抗体フラグメント」という用語は、無傷の抗体の一部を指す。「抗原結合フラグメント」とは、抗原に結合する無傷の抗体の一部を指す。抗原結合フラグメントは、無傷の抗体の抗原決定可変領域を含み得る。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片、線状抗体、及び一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）が挙げられるがこれらに限定されない。抗体フラグメントは、ネイキッドであってもよいし、毒素（例えば、免疫複合体における）、放射性同位体などのような他の分子にコンジュゲートされていてもよい。

「モノクローナル」抗体またはその抗原結合フラグメントとは、単一の抗原決定基、すなわち、エピトープの抗原特異性の高い認識及び結合に関与する均質な抗体または抗原結合断片集団を指す。これは、通常は異なる抗原決定基に対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体とは対照的である。「モノクローナル」抗体またはその抗原結合フラグメントという用語は、無傷かつ完全長のモノクローナル抗体同様、抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ）、一本鎖（ｓｃＦｖ）変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、及び抗原認識部位を含む任意の他の免疫グロブリン分子を包含する。さらに、「モノクローナル」抗体またはその抗原結合フラグメントは、ハイブリドーマ、ファージ選択、組み換え発現、及びトランスジェニック動物が挙げられるがこれらに限定されないあらゆる方法で作製される抗体及びその抗原結合断片を指す。

「ヒト化」抗体またはその抗原結合フラグメントという用語は、最小限の非ヒト（例えば、マウス）配列を含む特定の免疫グロブリン鎖、キメラ免疫グロブリン、またはそれらの断片である非ヒト（例えば、マウス）抗体または抗原結合断片を指す。通常、ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントは、ヒト免疫グロブリンであって、その相補性決定領域（ＣＤＲ）由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び機能を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ハムスター）のＣＤＲ由来の残基で置き換えられている（「ＣＤＲグラフト」）（Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３－３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４－１５３６（１９８８））。いくつかの態様では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）は、所望の特異性、親和性、及び機能を有する非ヒト種由来の抗体または断片における対応する残基で置き換えられる。ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントを、Ｆｖフレームワーク領域及び／または置き換えられた非ヒト残基内でのさらなる残基の置換によってさらに修飾し、抗体またはその抗原結合フラグメントの特異性、親和性、及び／または機能を改善及び最適化することができる。一般に、ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントは、非ヒト免疫グロブリンに対応するＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべてを含む、少なくとも１つ、通常は２つまたは３つの可変ドメインの実質的にすべてを含むが、ＦＲ領域のすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリンコンセンサス領域のものである。ヒト化抗体またはその抗原結合フラグメントは、通常はヒト免疫グロブリンのものである免疫グロブリン定常領域またはドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部も含むことができる。ヒト化抗体を生成するのに使用される方法の例は、特許第５，２２５，５３９号、Ｒｏｇｕｓｋａｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，９１（３）：９６９－９７３（１９９４）、及びＲｏｇｕｓｋａｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ．９（１０）：８９５－９０４（１９９６）に記載されている。いくつかの態様において、「ヒト化抗体」は、表面再形成抗体である。

抗体の「可変領域」とは、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を単独でまたは組み合わせて指す。重鎖及び軽鎖の可変領域は各々、超可変領域としても知られる３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）によってつながれた４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からなる。各鎖内のＣＤＲは、ＦＲにより極めて近接して一緒に保持され、他の鎖由来のＣＤＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。ＣＤＲを決定するには少なくとも２つの技術：（１）異種間配列変化に基づく方法（すなわち、Ｋａｂａｔｅｔａｌ．ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，（５ｔｈｅｄ．，１９９１，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，ＢｅｔｈｅｓｄａＭｄ．）“Ｋａｂａｔ”）、及び（２）抗原抗体複合体の結晶学的研究に基づく方法（Ａｌ－ｌａｚｉｋａｎｉｅｔａｌ，Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７－９４８（１９９７））がある。さらに、当技術分野ではこれら２つの方法の組み合わせを用いてＣＤＲを決定することもある。

抗体の「定常」領域は、抗体を抗原に結合することに直接関与はしないが、抗体依存性の細胞毒性における抗体の関与等の様々なエフェクター機能を示す。

Ｋａｂａｔナンバリングシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（大体、軽鎖の１～１０７残基及び重鎖の１～１１３残基）に言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈＥｄ．１９９１，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．）（“Ｋａｂａｔ”）。

Ｋａｂａｔのアミノ酸位置の番号付けとは、Ｋａｂａｔｅｔａｌ．（ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈＥｄ．，１９９１，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．），（“Ｋａｂａｔ”）における抗体の編成の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用されるナンバリングシステムを指す。このナンバリングシステムを使用すると、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＣＤＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含み得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従う残基５２ａ）、ならびに重鎖ＦＲ残基８２の後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従う残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃ等）を含み得る。残基のＫａｂａｔナンバリングは、「標準の」Ｋａｂａｔナンバリング配列との抗体の配列の相同性領域でのアライメントによって所与の抗体について決定され得る。一方、Ｃｏｔｈｉａは構造ループの位置を参照する（ＣｈｏｔｈｉａａｎｄＬｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））。Ｋａｂａｔナンバリング規則を用いてナンバリングした場合、ＣｈｏｔｈｉａＣＤＲ－Ｈ１ループの末端は、ループの長さに応じてＨ３２とＨ３４の間で異なる（これは、ＫａｂａｔナンバリングスキームがＨ３５ＡとＨ３５Ｂに挿入を置くためであり、３５Ａも３５Ｂも存在しない場合、このループは３２で終わり、３５Ａのみが存在する場合、このループは３３で終わり、３５Ａ及び３５Ｂの両方が存在する場合、このループは３４で終わる）。ＡｂＭ超可変領域は、ＫａｂａｔのＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａの構造的ループとの折衷物であり、ＯｘｆｏｒｄＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されている。

「ヒト」抗体またはその抗原結合フラグメントという用語は、ヒトによって産生された抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または当技術分野において公知の任意の技術を使用して作製した、ヒトによって産生された抗体もしくはその抗原結合フラグメントに対応するアミノ酸配列を有する抗体もしくはその抗原結合フラグメントを意味する。ヒト抗体またはその抗原結合フラグメントのこの定義には、無傷または完全長の抗体及びその断片が含まれる。

「キメラ」抗体またはその抗原結合フラグメントという用語は、アミノ酸配列が２つ以上の種に由来する抗体またはその抗原結合フラグメントを指す。通常、軽鎖及び重鎖の両可変領域は、所望の特異性、親和性、及び機能を有する哺乳類の一種（例えば、マウス、ラット、ウサギ等）由来の抗体またはその抗原結合フラグメントの可変領域に対応し、その定常領域は、別の種（通常はヒト）由来の抗体またはその抗原結合フラグメントの配列に対して相同であり、その種での免疫反応の誘発を回避する。

「エピトープ」または「抗原決定基」という用語は、本明細書では互換的に使用され、特定の抗体によって認識され特異的に結合されることが可能な抗原の部分を指す。抗原がポリペプチドの場合、エピトープは、隣接アミノ酸、及びタンパク質の第３次折り畳みによって並列した非隣接アミノ酸の両方から形成され得る。隣接アミノ酸から形成されたエピトープは、通常、タンパク質変性時に保持されるが、第３次折り畳みによって形成されたエピトープは、通常、タンパク質変性時に失われる。エピトープは、通常、少なくとも３個、より通常は少なくとも５個または８～１０個のアミノ酸を固有の空間構造に含む。

「結合親和性」とは、概して、分子の単一の結合部位（例えば、抗体）とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有相互作用の合計の強度を指す。別途指定されない限り、本明細書で使用されるとき、「結合親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する、本来の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）によって表すことができる。親和性は、本明細書に記載される方法を含む、当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定することができる。低親和性抗体は、一般に、抗原にゆっくり結合し、容易に解離する傾向があるが、高親和性抗体は、一般に、抗原により早く結合し、より長く結合したままである傾向がある。結合親和性を測定する様々な方法が当技術分野で既知であり、これらのいずれも、本開示の目的のために使用することができる。

結合親和性に言及するために本明細書で使用される場合の「またはそれよりよい」とは、分子とその結合パートナーとの間のより強い結合を指す。本明細書で使用される場合の「またはそれよりよい」とは、より小さい数値のＫｄ値によって表されるより強い結合を指す。例えば、抗原に対する親和性が「０．６ｎＭまたはそれよりよい」抗体、すなわち、該抗原に対する該抗体の親和性は、＜０．６ｎＭ、すなわち、０．５９ｎＭ、０．５８ｎＭ、０．５７ｎＭなど、または０．６ｎＭ未満の任意の値である。

「特異的に結合する」とは、一般に、抗体がその抗原結合ドメインを介してエピトープに結合すること、及び該結合が、該抗原結合ドメイン及び該エピトープの間にある程度の相補性を必要とすることを意味する。この定義によれば、抗体は、それがランダムな無関係のエピトープに結合するよりも容易にその抗原結合ドメインを介してそのエピトープに結合する際に、エピトープに「特異的に結合する」といわれる。「特異性」という用語は、本明細書では、ある特定の抗体がある特定のエピトープに結合する相対的親和性を限定するために使用される。例えば、抗体「Ａ」が所与のエピトープに対して抗体「Ｂ」より高い特異性を有する場合や、抗体「Ａ」がエピトープ「Ｃ」に対して関連するエピトープ「Ｄ」に対して有するよりも高い特異性で結合するといわれる場合がある。

「優先的に結合する」とは、抗体が、関連する、同様の、相同の、または類似のエピトープに対して結合するよりも容易にあるエピトープに特異的に結合することを意味する。したがって、所与のエピトープに「優先的に結合する」抗体は、かかる抗体が関連するエピトープに交差反応する場合があるとしても、該関連するエピトープに対するよりもそのエピトープに対して結合する可能性が高い。

ある抗体は、参照抗体が当該エピトープに結合するのをある程度ブロックする程度まで、そのエピトープ、または重複エピトープに優先的に結合する場合、所与のエピトープに対する参照抗体の結合を「競合的に阻害する」といわれる。競合的阻害は、当技術分野で既知の任意の方法、例えば、競合酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によって測定され得る。ある抗体は、所与のエピトープに対する参照抗体の結合を、少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％競合的に阻害するといわれ得る。

本明細書で使用される「実質的に同様の」または「実質的に同じ」という表現は、２つの数値（概して、一方は本開示の抗体に関連し、他方は参照／比較抗体に関連する）間の十分に高い類似度を表し、これは、当業者が、２つの値の間の差異を、該値（例えば、Ｋｄ値）によって測定される生物学的特徴において生物学的及び／または統計的有意性がほとんどないものと見なすようなものである。該２つの値の間の差異は、参照／比較抗体に関する値に応じて、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、または約１０％未満の場合がある。

「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書では、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指すために互換的に使用される。このポリマーは、直鎖状であっても分岐状であってもよく、修飾アミノ酸を含んでもよく、非アミノ酸によって中断されていてもよい。これらの用語は、自然に、または介入、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、もしくは任意の他の操作または修飾、例えば、標識成分とのコンジュゲーションにより修飾されたアミノ酸ポリマーも包含する。この定義に同様に含まれるのは、例えば、アミノ酸（例えば、非天然アミノ酸等を含む）の１つ以上の類似体を含むポリペプチド、及び当技術分野で既知の他の修飾である。本開示のポリペプチドは抗体に基づいているため、いくつかの態様では、該ポリペプチドは、一本鎖または結合鎖として存在し得ることが理解される。

本明細書において互換的に用いられる、用語「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾ヌクレオチドもしくは塩基、及び／またはそれらの類似体、あるいはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによりポリマーに組み込むことができる任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びそれらの類似体などの修飾ヌクレオチドを含み得る。存在する場合、ヌクレオチド構造への修飾は、ポリマーの組立て前または後に付与され得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分により中断され得る。ポリヌクレオチドは、例えば標識成分とのコンジュゲーションにより、重合化後にさらに修飾され得る。他のタイプの修飾としては、例えば、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上を類似体と置換する「キャップ」、ヌクレオチド間修飾、例えば、非電荷性結合（例えば、メチルホスホン酸塩、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）によるもの、及び電荷性結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）によるもの、例えば、タンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ－Ｌ－リシンなど）の懸垂部分を含むもの、挿入剤（例えば、アクリジン、ソラーレンなど）によるもの、キレート剤（例えば、金属、放射活性金属、ホウ素、酸化金属など）によるもの、アルキル化剤を含むもの、修飾結合（例えば、αアノマー核酸など）によるもの、ならびにポリヌクレオチド（複数可）の未修飾形態が挙げられる。さらに、糖内に通常存在するヒドロキシル基のうちのいずれかは、例えば、ホスホン酸基、リン酸基により置換されるか、標準保護基により保護されるか、もしくは活性化されて追加のヌクレオチドへの追加の結合を調製し得るか、または固体支持体にコンジュゲートされてもよい。５’及び３’末端ＯＨをリン酸化するか、またはアミンもしくは１～２０個の炭素原子の有機キャッピング基部分と置換することができる。他のヒドロキシルは、標準保護基に誘導体化されてもよい。ポリヌクレオチドは、一般に当該技術分野において既知のリボースまたはデオキシリボース糖の類似形態を含むこともでき、例えば、２’－Ｏ－メチル－２’－Ｏ－アリル、２’－フルオロ－もしくは２’－アジド－リボース、炭素環式糖類似体、α－アノマー糖、エピマー糖、例えば、アラビノース、キシロース、もしくはリキソース、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、非環式類似体、及び脱塩基ヌクレオシド類似体、例えば、メチルリボシドが挙げられる。１つ以上のホスホジエステル結合は、代替連結基に置き換えられてもよい。これらの代替連結基としては、限定されないが、リン酸塩がＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、（Ｏ）ＮＲ２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯまたはＣＨ２（「ホルムアセタール」）に置き換えられる態様を含み、各ＲまたはＲ’は、独立してＨであるか、または置換もしくは非置換アルキル（１－２０Ｃ）（任意にエーテル（－－Ｏ－－）結合を含む）、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、またはアラルジルである。ポリヌクレオチド内のすべての結合が同一である必要はない。前述の説明は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書において言及されるすべてのポリヌクレオチドに適用する。

「ベクター」という用語は、宿主細胞内に目的の１つ以上の遺伝子または配列を送達することができ、かつ場合によっては発現することができる構築物を意味する。ベクターの例としては、ウイルスベクター、ネイキッドＤＮＡもしくはＲＮＡ発現ベクター、プラスミド、コスミドもしくはファージベクター、カチオン性縮合剤に関連するＤＮＡもしくはＲＮＡ発現ベクター、リポソームにカプセル化されたＤＮＡもしくはＲＮＡ発現ベクター、及び特定の真核細胞、例えば生殖細胞が挙げられるが、これらに限定されない。

「単離された」ポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物は、天然には見られない形態のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物である。単離されたポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物には、もはやそれらが天然に見られる形態ではない程度まで精製されたものが含まれる。いくつかの態様では、単離された抗体、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物は、実質的に純粋である。

本明細書で使用される、「実質的に純粋」とは、少なくとも５０％純粋（すなわち、汚染物質を含まない）、少なくとも９０％純粋、少なくとも９５％純粋、少なくとも９８％純粋、または少なくとも９９％である材料を指す。

「二重特異性抗体」とは、２つの異なるエピトープに結合する抗体を指す。エピトープは、同じ標的抗原上にあってもよいし、異なる標的抗原上にあってもよい。

「バイパラトープ抗体」は、同じ標的抗原（例えば、ＦＲα）上の２つの異なる非重複エピトープに結合する二重特異性抗体である。

いくつかの態様では、本明細書に開示されるＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、多価分子である。本明細書において使用されている「価」という用語は、抗体分子中の特定の数の結合部位が存在することを意味する。例えば、自然抗体、または全長抗体は、２つの結合部位を有し、「二価」である。「四価」という用語は、抗原結合タンパク質に４つの結合部位が存在することを意味する。「三価」という用語は、抗体分子内に３つの結合部位が存在することを意味する。本明細書で使用される「二重特異性、四価」という用語は、４つの抗原結合部位を有する抗原結合タンパク質であって、そのうちの少なくとも１つの抗原結合部位は、第１の抗原に結合し、少なくとも１つの抗原結合部位は、第２の抗原または抗原の別のエピトープに結合する、抗原結合タンパク質を指す。

本明細書で使用される「免疫複合体」または「コンジュゲート」という用語は、細胞結合剤に連結され、一般式：Ｃ－Ｌ－Ａによって定義される化合物またはその誘導体を指し、式中、Ｃ＝細胞毒素、Ｌ＝リンカー、Ａ＝抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、抗ＦＲα抗体または抗体フラグメント）である。免疫複合体は、この一般式を逆の順序、すなわち、Ａ－Ｌ－Ｃによって定義することもできる。

「リンカー」は、化合物、通常はメイタンシノイドなどの薬剤を、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントなどの細胞結合剤に安定な共有結合様式で結合できる任意の化学部分である。リンカーは、化合物または抗体が活性状態を維持する条件下で、切断（例えば、酸誘導性の切断、光誘導性の切断、ペプチダーゼ誘導性の切断、エステラーゼ誘導性の切断、またはジスルフィド結合の切断）に感受性があるか、または実質的に抵抗性であることができる。適切なリンカーは当技術分野で周知であり、例えば、ジスルフィド基及びチオエーテル基が挙げられる。

本明細書で使用される場合、「細胞傷害性剤」という用語は、１つ以上の細胞機能を阻害するもしくは阻止する、及び／または細胞死を引き起こす、物質を指す。いくつかの態様では、細胞傷害性剤はメイタンシノイド、例えばＤＭ４またはＤＭ２１である。ＤＭ４及びＤＭ２１を含む免疫複合体は、ＷＯ２０１１／１０６５２８及びＷＯ２０１８／１６０５３９Ａ１に開示されており、それぞれの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

免疫複合体は、以下の構造式で表される「ＤＭ２１Ｃ」の部位特異的ＤＭ２１結合を含むことができ、

式中、Ｄ_１は、

である。

免疫複合体は、以下の構造式で表されるリジン結合ＤＭ２１「Ｌ－ＤＭ２１」、「ＤＭ２１－Ｌ」、「ＤＭ２１Ｌ」、または「ＤＭ２１Ｌ－Ｇ」を含むこともでき、

式中、Ｄ_１は上に示されており、リンカー、例えば、γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）またはＮ－（γ－マレイミドブトリルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＧＭＢＳまたはｓＧＭＢＳ）リンカーによって抗体に結合される。ＧＭＢＳ及びスルホ－ＧＭＢＳ（またはｓＧＭＢＳ）リンカーは当技術分野で知られており、以下の構造式で表すことができる。

「任意選択の」または「場合により」とは、後に記載される状況が発生する場合と発生しない場合があり、そのため、本出願には当該状況が発生する場合と発生しない場合が含まれることを意味する。例えば、「置換されていてもよい」という表現は、所定の原子上に非水素置換基が存在してもしなくてもよいことを意味し、したがって、本出願には、非水素置換基が存在する構造と非水素置換基が存在しない構造が含まれる。

「がん」及び「がん性」という用語は、細胞集団が制御されていない細胞成長を特徴とする哺乳動物における生理学的状態を指すか、または説明する。がんの例としては、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病が含まれるが、これらに限定されない。かかるがんのより特定な例としては、卵管癌、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、消化器癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、小腸癌、子宮内膜または子宮癌腫、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌腫、及び様々な型の頭頸部癌が挙げられる。がんは、ＦＲαを発現するがん（「ＦＲα発現がん」）であり得る。

「がん細胞」や「腫瘍細胞」という用語、及び文法上の同等物は、腫瘍または前がん病変に由来する細胞の総集団を指し、これには、腫瘍細胞集団の大部分を構成する非腫瘍形成性細胞と、腫瘍形成性幹細胞（がん幹細胞）との両方が含まれる。本明細書で使用される場合、用語「腫瘍細胞」は、それらの腫瘍細胞をがん幹細胞から区別するために再生及び分化する能力を欠く腫瘍細胞のみを指す場合、用語「非腫瘍形成性」によって修飾される。

「進行」がんとは、元の部位または器官の外に、局所浸潤または転移のいずれかによって広がったがんである。「進行」がんという用語は、局所的に進行した疾患及び転移性疾患の両方を含む。

「転移性」がんは、身体の１つの部分から身体の別の部分へ広がっているがんを指す。

「不応性」がんとは、化学療法などの抗腫瘍治療ががん患者に投与されるにもかかわらず進行するがんである。

「再発性」がんとは、初期療法に応答した後に、初期の部位または遠位部位で再増殖したがんである。

「再発」患者は、寛解後にがんの兆候または症状を有する者である。任意に、患者は、アジュバントまたはネオアジュバント療法後に再発した。

「維持療法」という用語は、初期治療後にがんが消失した後に再発を防ぐために行われる療法を指す。

「対象」及び「患者」という用語は、特定の治療を受けることになる、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類などを含むがこれらに限定されない任意の動物（例えば、哺乳動物）を指す。

「薬学的製剤」という用語は、活性成分の生物学的活性が有効になるような形態であり、かつ製剤が投与される対象に許容できない程度に毒性のさらなる成分を含有しない調製物を指す。製剤は無菌であってもよい。

本明細書に開示される抗体、免疫複合体、または他の薬剤の「有効量」とは、具体的に述べられた目的を実行するのに十分な量である。

「治療有効量」という用語は、対象または哺乳動物における疾患または障害を「治療する」のに有効な抗体、免疫複合体、または他の薬剤の量を指す。がんの場合、治療有効量の薬剤は、がん細胞の数を減らし、腫瘍のサイズまたは負担を軽減し、末梢臓器へのがん細胞の浸潤を阻害（すなわち、ある程度まで遅らせ、いくつかの態様では停止する）し、腫瘍の転移を阻害（すなわち、ある程度まで遅らせ、いくつかの態様では停止する）し、腫瘍の増殖をある程度阻害し、がんに関連する１つ以上の症状をある程度軽減し、及び／または、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、無病生存期間（ＤＦＳ）、もしくは全生存期間（ＯＳ）の増加、完全寛解（ＣＲ）、部分寛解（ＰＲ）などの良好な応答、あるいは、場合によっては、疾患の安定（ＳＤ）、進行性疾患の減少（ＰＤ）、進行までの時間（ＴＴＰ）の短縮、またはそれらの組み合わせをもたらすことができる。ここでの「治療」の定義を参照されたい。薬剤が既存のがん細胞の成長の予防及び／またはそれらの殺滅を行うことができる限り、この薬剤は細胞増殖抑制性及び／または細胞毒性であり得る。

「治療すること」または「治療」または「治療する」または「緩和すること」または「緩和する」などの用語は、診断された病的状態または障害の症状を治癒、減速、軽減、及び／または進行を停止する治療手段を指す。したがって、治療が必要なヒトには、すでにその障害と診断されているか、またはその疑いがあるヒトが含まれる。いくつかの態様では、患者が、がん細胞の数の減少もしくはがん細胞の不在；腫瘍サイズの縮小；例えば、軟組織及び骨へのがんの広がりを含む、末梢器官へのがん細胞浸潤の阻害または不在；腫瘍転移の阻害または不在；腫瘍増殖の阻害または不在；特定のがんに関連する１つ以上の症状の軽減；罹患率と死亡率の減少；生活の質の向上；腫瘍の腫瘍形成性、腫瘍形成頻度、もしくは腫瘍形成能力の低下；腫瘍内のがん幹細胞の数または頻度の減少；腫瘍形成性細胞の非腫瘍形成性状態への分化；無増悪生存期間（ＰＦＳ）、無病生存期間（ＤＦＳ）、もしくは全生存期間（ＯＳ）の増加、完全寛解（ＣＲ）、部分寛解（ＰＲ）、病状安定（ＳＤ）、進行性疾患（ＰＤ）の減少、進行までの時間（ＴＴＰ）の短縮、またはそれらの組み合わせの１つ以上を示す場合、対象は本開示の方法に従ってがんの「治療」に成功している。

本明細書で使用される、用語「投与する」、「投与すること」、「投与」などは、所望の生物作用部位への該免疫複合体の送達を可能にするために使用され得る方法を指す。本明細書に記載の薬剤及び方法と共に使用できる投与技術は、例えば、ＧｏｏｄｍａｎａｎｄＧｉｌｍａｎ，ＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ｃｕｒｒｅｎｔｅｄ．；Ｐｅｒｇａｍｏｎ；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ，ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ（ｃｕｒｒｅｎｔｅｄｉｔｉｏｎ），ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａに見られる。一態様では、免疫複合体は静脈内に投与される。

「指示すること」という用語は、適用可能な療法、投薬、治療、治療計画などについて、任意の手段、例えば、添付文書またはその他の書面による宣伝資料などの書面による指示を提供することを意味する。

「前治療する」及び「前治療」という用語は、治療用抗体、その抗原結合フラグメント、または免疫複合体の投与前に行われる治療手段を指す。例えば、本明細書でより詳細に記載されるように、ステロイド（例えば、コルチコステロイド）は、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）の投与前の約１週間、約５日間、約３日間、約２日間、または約１日間もしくは２４時間以内に予防薬として投与され得る。ステロイドは、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）と同じ日に、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）の前に投与することもできる。

本明細書で使用される場合、「約」及び「およそ」という用語は、数値または数値範囲を修飾するために使用される場合、値または範囲を上回って最大１０％、下回って１０％までの偏差が、記載された値または範囲の意図された意味内に留まることを示す。本明細書で態様が数値または範囲の「約」または「およそ」という言葉で説明される場合はどこでも、特定の数値または範囲（「約」なし）に言及する類似の態様も提供されることが理解される。

本明細書の変数の任意の定義の中の化学基のリストの列挙は、任意の単一の基または列挙した基の組み合わせとしてその変数の定義を含む。本明細書の態様についての列挙は、任意の単一の態様として、または任意の他の態様もしくはその一部と組み合わせてその態様を含む。

本開示及び特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ（１つの）」、「ａｎ（１つの）」、及び「ｔｈｅ（その）」は、文脈が別途明確に指示しない限り、複数形を含む。

本明細書において態様が「含む」という用語を用いて記載される場合は常に、「からなる」及び／または「から本質的になる」という用語で記載される類似の態様も提供されることが理解される。本開示において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する」、及び「有する」などは、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などを意味し得、「から本質的になる」または「本質的になる」という用語は制限がなく、引用されるものの基本的または新規の特徴が引用されるもの以上のものの存在によって変化しない限り、引用されるもの以上のものの存在を許容するが、先行技術の態様は除外する。

具体的に述べられるか、文脈から明らかでない限り、本明細書で使用される場合、「または」という用語は、包括的であることが理解される。本明細書において「Ａ及び／またはＢ」などの語句で使用される「及び／または」という用語は、「Ａ及びＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」、ならびに「Ｂ」の両方を含むことを意図する。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／またはＣ」などの語句で使用される「及び／または」という用語は、Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；ならびにＣ（単独）のそれぞれを包含することを意図している。

本明細書に提供する任意の組成物または方法は、本明細書に提供する任意の他の組成物及び方法のうちの１つ以上と組み合わせることができる。

ＩＩ．抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメント
本明細書に記載されるように、抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントは、治療的に（例えば、がんを治療するために）、及び／またはＦＲα（例えば、可溶性ＦＲα及び／または膜ＦＲα）を検出するために使用することができる。例示的な抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントは当技術分野で公知であり、例えば、それぞれＷＯ２０１１／１０６５２８、ＷＯ２０１４／０３６４９５、ＷＯ２０１５／０３１８１５、及び米国公開出願第２０２０／０３６２０２９号に開示されており、それらのそれぞれが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。さらなる抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントは当技術分野で公知であり、例えば、ＷＯ２０１２／０６１７５９、米国公開出願第２０１９／０２３３５１２号、米国公開出願第２０２０／０１４７２２９号、米国公開出願第２０２０／０２９７８６０号、米国公開出願第２０２０／０３５３０７６号、米国特許第１０，８２２，４１０号、及び米国特許第１０，１０１，３４３号に開示されており、それらのそれぞれが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

さらに、抗ＦＲα抗体ｈｕＭｏｖ１９（Ｍ９３４６Ａ）は、ブダペスト条約の条項に基づいて、２０１０年４月７日に１０８０１ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＢｏｕｌｅｖａｒｄ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ２０１１０に位置するＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１０７７２及びＰＴＡ－１０７７４を有するプラスミドによってコードされる。さらに、バイパラトープ抗ＦＲα抗体は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１０７７４（２０１０年４月７日に寄託）、ＰＴＡ－１２５９１５（「Ｍｏｖ１９－Ｆｃ－ｈｏｌｅ」、２０１９年４月２９日にＡＴＣＣに寄託され、２０１９年４月３０日にＡＴＣＣに受領）、及びＰＴＡ－１２５９１６（「ＦＲ５７ｓｃＦｖ２－Ｆｃ－Ｋｎｏｂ」、２０１９年４月２９日にＡＴＣＣに寄託され、２０１９年４月３０日にＡＴＣＣに受領）を有するプラスミドによってコードされる。

例として、ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ｈｕＭｏｖ１９抗体及び／またはＦＲ５７抗体もしくはその変異体、ｍｕ１－９抗体、ｍｕ１－１３抗体、または２．１抗体の６つのＣＤＲ配列（すなわち、ＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３）を含むことができる。ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＭＯＲＡｂ－００３抗体（ファーレツズマブとしても知られる）及び／または１８４８－Ｈ０１抗体の６つのＣＤＲ配列（すなわち、ＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３）を含むことができる。ＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔで定義されたＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａで定義されたＣＤＲ、ＡｂＭで定義されたＣＤＲ、またはそれらの混合物であり得る。ＣＤＲ配列は、ＩＭＧＴで定義されたＣＤＲであってもよい。ｈｕＭｏｖ１９、ＦＲ５７、及びそれらの変異体、１～９、１～１３、及び２．１のＣＤＲ配列を以下の表１及び表２に提供する。ＭＯＲＡｂ－００３及び１８４８－Ｈ０１のＣＤＲ配列も以下の表１及び２に提供する。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２～４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号５、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号５、３、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１３、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１０、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１３、１１、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１８～２０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号２１～２３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２４～２６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号２７～２９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号３０～３２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号３３～３５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号８０～８２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号８６～８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号８３～８５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号８９、９０、及び８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号９１～９３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号９６～９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号９４、９５、及び９３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号９６～９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ｈｕＭｏｖ１９抗体及び／またはＦＲ５７抗体もしくはその変異体、ｍｕ１－９抗体、ｍｕ１－１３抗体、または２．１抗体の重鎖及び／または軽鎖可変配列を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＭＯＲＡｂ－００３抗体または１８４８－Ｈ０１抗体の重鎖及び／または軽鎖可変配列を含む。ｈｕＭｏｖ１９、ＦＲ５７、及びそれらの変異体、１～９、１～１３、及び２．１の重鎖可変配列及び軽鎖可変配列を以下の表３及び表４に提供する。ＭＯＲＡｂ－００３及び１８４８－Ｈ０１の重鎖可変配列及び軽鎖可変配列も以下の表３及び表４に提供する。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ｈｕＭｏｖ１９抗体及び／またはＦＲ５７抗体もしくはその変異体、ｍｕ１－９抗体、ｍｕ１－１３抗体、または２．１抗体の重鎖及び／または軽鎖配列を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＭＯＲＡｂ－００３抗体の重鎖及び／または軽鎖配列を含む。ｈｕＭｏｖ１９、ＦＲ５７、及びそれらの変異体、１～９、１～１３、及び２．１の重鎖配列及び軽鎖可変配列を以下の表５及び表６に提供する。ＭＯＲＡｂ－００３の重鎖配列及び軽鎖可変配列も以下の表５及び表６に提供する。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＦＲ５７抗体またはその変異体の可変重鎖及び可変軽鎖を含むｓｃＦｖを含む。

したがって、いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、Ｎ末端からＣ末端まで：配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＬ、リンカー（例えば、グリシン－セリンリンカー）、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、Ｎ末端からＣ末端まで：配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＨ、リンカー（例えば、グリシン－セリンリンカー）、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、Ｎ末端からＣ末端まで：配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、リンカー（例えば、グリシン－セリンリンカー）、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、Ｎ末端からＣ末端まで：配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、リンカー（例えば、グリシン－セリンリンカー）、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ｈｕＭｏｖ１９の可変重鎖及び可変軽鎖を含むｓｃＦｖを含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、Ｎ末端からＣ末端まで：配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、リンカー（例えば、グリシン－セリンリンカー）、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、Ｎ末端からＣ末端まで：配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、リンカー（例えば、グリシン－セリンリンカー）、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

ＶＨとＶＬを接続するために使用できるリンカーは当技術分野で知られている。例えば、リンカーはグリシン－セリンリンカーであり得る。いくつかの態様では、リンカーは任意の長さであり得、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、５０、または６０以上のアミノ酸を含み得る。いくつかの態様では、本開示に有用なリンカーは、少なくとも１つのアミノ酸及び１００未満のアミノ酸、９０未満のアミノ酸、８０未満のアミノ酸、７０未満のアミノ酸、６０未満のアミノ酸、５０未満のアミノ酸、４０未満のアミノ酸、３０未満のアミノ酸、２０未満のアミノ酸、１９未満のアミノ酸、１８未満のアミノ酸、１７未満のアミノ酸、１６未満のアミノ酸、１５未満のアミノ酸、１４未満のアミノ酸、１３未満のアミノ酸、または１２未満のアミノ酸を有する。いくつかの態様では、リンカー配列はグリシンアミノ酸残基を含む。いくつかの態様では、リンカー配列はグリシン及びセリンアミノ酸残基の組み合わせを含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα ｓｃＦｖは、ＶＨとＶＬとの間にインフレームで融合されたリンカーを含む。いくつかの態様では、そのようなグリシン／セリンリンカーは、ペプチドＧＧＧＳ（配列番号６４）もしくはＧＧＧＧＳ（配列番号６５）、またはこれらの所与のペプチドの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回以上の反復を含む、これらの反復を含むがこれらに限定されない、アミノ酸残基の任意の組み合わせを含む。本明細書に開示されるグリシン／セリンリンカーは、（ＧＳ）_ｎ、（ＧＧＳ）_ｎ、（ＧＧＧＳ）_ｎ、（ＧＧＧＧＳ）_ｎ、または（ＧＧＧＧＳ）_ｎのアミノ酸配列を含み、ここで、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０の整数である。いくつかの態様では、リンカー配列は、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号６６）（（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_３とも呼ばれる）である。いくつかの態様では、リンカー配列は、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号６７）（（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_４とも呼ばれる）である。

ＦＲ５７抗体またはその変異体の可変重鎖及び可変軽鎖を含むｓｃＦｖの例示的な配列を以下の表７に提供する。

いくつかの態様において、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、バイパラトープ抗体またはその抗原結合フラグメントである。多くの異なるタイプの二重特異性構築物が当技術分野で知られており、バイパラトープ抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントを吸引するのに使用することができる。

いくつかの態様では、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、「ノブ・イン・ホール」構造を含む、非対称Ｆｃ分子を有する構築物である。Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，ＭＡｂｓ．，４（２）：１８２－９７（２０１２）を参照されたい。ノブ・イントゥ・ホール（ＫＩＨ）技術は、Ｃ_Ｈ３ドメインを操作して各重鎖に「ノブ」または「ホール」を作成し、ヘテロ二量体化を促進することを含む。ＫＩＨ技術は、例えば、Ｒｉｄｇｗａｙｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ９（７）：６１７－７２１（１９９６）；米国特許第５，７３１，１６８号；米国特許第５，８０７，７０６号；米国特許第５，８２１，３３３号に記載されており、そのそれぞれの全体が参照により本明細書に組み込まれる。「ＣｒｏｓｓＭａｂ」技術にはさらに、二重特異性抗体の半分のＦａｂ内で重鎖ドメインと軽鎖ドメインを交換することが含まれており、２つのアームが非常に異なるため、軽鎖と重鎖のミスペアリングは起こらない（Ｓｃｈａｅｆｅｒｅｔａｌ．，２０１１，ＰｒｏｃＮａｔｌ）．ＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ１０８：１１１８７－９２）。ノブ・イントゥ・ホールアプローチは、かさばる側鎖を持つアミノ酸を一方の重鎖のＣＨ３ドメインに導入し、もう一方の重鎖のＣＨ３ドメインにある適切に設計された空洞に適合させる。アプローチを組み合わせることで、重鎖と重鎖、及び重鎖と軽鎖の相互作用の両方のミスマッチが防止され、主に単一の生成物が得られる。

いくつかの態様では、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは二価（例えば、「ノブ・イン・ホール」形式）である。二価のバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、例えば、２つのｓｃＦｖ、別個のポリペプチド鎖上の２つのＶＨ－ＶＬ対、または別個のポリペプチド鎖上の１つのｓｃＦｖ及び１つのＶＨ－ＶＬ対を含み得る。

いくつかの態様では、二価バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、別個のポリペプチド上にｓｃＦｖ及びＶＨ－ＶＬ対を含む。このような態様では、ｓｃＦｖを重鎖定常領域に融合させることができ、ＶＨを重鎖定常領域に融合させることができる。いくつかの態様では、定常領域は「ノブ・アンド・ホール」配列を有する。「ノブ」配列は、ｓｃＦｖに融合された重鎖定常領域内にあってもよく、「ホール」配列は、ＶＨに融合された定常領域に融合されてもよい。あるいは、「ホール」変異は、ｓｃＦｖに融合された重鎖定常領域にあることができ、「ノブ」配列は、ＶＨに融合された定常領域に融合することができる。

いくつかの態様では、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは三価である。

いくつかの態様では、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは四価（例えば、「ノブ・イン・ホール」形式）である。四価抗体は、例えば、Ｍ．Ｊ．Ｃｏｌｏｍａ，Ｓ．Ｌ．Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１５（２）：１５９－６３（１９９７）に記載されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様では、四価のバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ｓｃＦｖである２つのＦＲα結合ドメインと、別個のポリペプチド上のＶＨ及びＶＬを含む２つのＦＲα結合ドメインとを含む。このような態様では、ｓｃＦｖは、ＶＨを含むポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に融合され得る。ｓｃＦｖは、ＶＬを含むポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に融合することもできる。

四価のバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、２つのポリペプチドを含むことができ、１つ目のポリペプチドは重鎖定常領域、ＶＨ、及びｓｃＦｖを含み、２つ目のポリペプチドは軽鎖定常領域及びＶＬを含む。四価のバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントはまた、２つのポリペプチドを含むことができ、１つ目のポリペプチドは重鎖定常領域及びＶＨを含み、２つ目のポリペプチドは軽鎖定常領域、ＶＬ、及びｓｃＦｖを含む。

いくつかの態様では、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、二重特異性ヘテロ二量体ダイアボディ、例えば、四量体の二重特異性ヘテロ二量体ダイアボディである。本明細書で使用される場合、用語「二重特異性ヘテロ二量体ダイアボディ」は、２つ以上のポリペプチド鎖またはタンパク質の複合体を指し、それぞれが少なくとも１つの抗体ＶＬドメイン及び１つの抗体ＶＨドメインを含むことができ、各ポリペプチド鎖中のＶＬドメイン及びＶＨドメインは、異なる抗体からのものである。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下の表８に開示されている配列、すなわち、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、マウス、キメラ、またはヒト化抗ＦＲα抗体もしくはその抗原結合フラグメントである。本明細書で使用される場合、ヒト化抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、再表面化された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり得る。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ヒトＦＲαに結合するが、ＦＯＬＲ２またはＦＯＬＲ３には結合しない。

抗原に対する抗体の親和性または結合力は、当技術分野で周知の任意の適切な方法、例えば、サイトメトリー（フローサイトメトリーを含む）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、または反応速度論（例えば、表面プラズモン共鳴分光法（ＢＩＡＣＯＲＥ（商標））分析）を使用して実験的に決定することができる。直接結合アッセイ及び競合結合アッセイ形式を容易に使用できる。例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ，ｅｔａｌ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ＡｎｔｉｇｅｎＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，”ＩｎＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｅｄ．，ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９８４）；Ｋｕｂｙ，ＪａｎｉｓＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎａｎｄＣｏｍｐａｎｙ：ＮｅｗＹｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９２）；及び本明細書に記載の方法を参照されたい。特定の抗体－抗原相互作用の測定された親和性は、異なる条件（塩濃度、ｐＨ、温度など）下で測定すると変動する可能性がある。したがって、親和性及び他の抗原結合パラメータ（例えば、ＫＤまたはＫｄ、Ｋ_ｏｎ、Ｋ_ｏｆｆ）の測定は、当技術分野で知られている、及び本明細書に記載の緩衝液などの、抗体及び抗原の標準化溶液、ならびに標準化緩衝液を用いて行われる。

いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤ定常領域などの重鎖定常領域を含む。いくつかの態様では、重鎖定常領域は、ＩｇＧ１重鎖定常領域またはＩｇＧ４重鎖定常領域である。さらに、いくつかの態様では、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、カッパ軽鎖定常領域またはラムダ軽鎖定常領域のいずれかの軽鎖定常領域を含むことができる。いくつかの態様では、軽鎖定常領域はカッパ軽鎖定常領域である。

モノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒａｎｄＭｉｌｓｔｅｉｎ，（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５によって記載されるものなどのハイブリドーマ方法を使用して調製され得る。ハイブリドーマ法を使用して、マウス、ハムスター、または他の適切な宿主動物が、上述のように免疫化されて、免疫抗原に特異的に結合する抗体のリンパ球による産生が誘発される。リンパ球もインビトロで免疫化することができる。免疫化後、リンパ球を単離し、例えばポリエチレングリコールを使用して適切な骨髄腫細胞株と融合させてハイブリドーマ細胞を形成し、その後、未融合リンパ球及び骨髄腫細胞から選択することができる。免疫沈降、イムノブロッティング、またはインビトロ結合アッセイ（ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）など）によって決定される、選択した抗原に対して特異的に指向するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマは、標準的な方法（Ｇｏｄｉｎｇ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８６）を使用してインビトロ培養するか、動物の腹水腫瘍としてインビボで増殖させることができる。次いで、ポリクローナル抗体について記載したように、モノクローナル抗体を培地または腹水から精製することができる。

あるいは、モノクローナル抗体は、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されるものなどの組み換えＤＮＡ法により製造されてもよい。モノクローナル抗体をコードするポリヌクレオチドは、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子を特異的に増幅するオリゴヌクレオチドプライマーを使用するＲＴ－ＰＣＲなどにより、成熟Ｂ細胞またはハイブリドーマ細胞から単離され、それらの配列は従来の手順を使用して決定される。次いで、重鎖と軽鎖をコードする単離されたポリヌクレオチドを適切な発現ベクターにクローン化し、宿主細胞、例えばＥ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または免疫グロブリンタンパク質を産生しない骨髄腫細胞などにトランスフェクトされると、モノクローナル抗体は宿主細胞によって生成される。また、所望の種の組換えモノクローナル抗体またはそのフラグメントは、記載されているように、所望の種のＣＤＲを発現するファージディスプレイライブラリから単離することができる（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙｅｔａｌ．，１９９０，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２－５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，１９９１，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８；及びＭａｒｋｓｅｔａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１－５９７）。

モノクローナル抗体をコードするポリヌクレオチド（複数可）は、組換えＤＮＡ技術を使用して多くの異なる方法でさらに修飾して、代替抗体を生成することができる。いくつかの態様では、例えばマウスモノクローナル抗体の、軽鎖及び重鎖の定常ドメインを、１）例えばヒト抗体のそれらの領域を置換してキメラ抗体を生成するか、または２）非免疫グロブリンポリペプチドと置換して融合抗体を生成することができる。いくつかの態様では、定常領域は、モノクローナル抗体の所望の抗体フラグメントを生成するために切断または除去される。可変領域の部位特異的または高密度突然変異誘発を使用して、モノクローナル抗体の特異性、親和性などを最適化することができる。

いくつかの態様では、ヒトＦＲαに対するモノクローナル抗体はヒト化抗体である。いくつかの態様では、このような抗体は、ヒト対象に投与された場合の抗原性及びＨＡＭＡ（ヒト抗マウス抗体）応答を低下させるために治療的に使用される。

非ヒト抗体またはヒト抗体を操作、ヒト化、または再表面化するための方法も使用することができ、当技術分野でよく知られている。ヒト化抗体、再表面化抗体、または同様に操作された抗体は、非ヒト供給源、例えば、限定されないが、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類または他の哺乳動物に由来する１つ以上のアミノ酸残基を有することができる。これらの非ヒトアミノ酸残基は、「インポート」残基と呼ばれることが多い残基によって置き換えられ、これらの残基は通常、既知のヒト配列の「インポート」可変ドメイン、定常ドメイン、または他のドメインから取られる。

このようなインポートされた配列は、当技術分野で知られているように、免疫原性を低下させるか、または結合、親和性、オン速度、オフ速度、結合力、特異性、半減期、もしくは任意の他の適切な特性を低下、増強または改変するために使用することができる。一般に、ＣＤＲ残基はＦＲα結合への影響に直接的かつ最も実質的に関与している。したがって、非ヒトまたはヒトのＣＤＲ配列の一部または全部は維持されるが、可変領域及び定常領域の非ヒト配列はヒトまたは他のアミノ酸で置き換えられ得る。

抗体はまた、場合により、抗原ＦＲαに対する高い親和性及び他の有利な生物学的特性を保持して操作されたヒト化抗体、再表面化抗体、操作抗体またはヒト抗体であってもよい。この目標を達成するために、場合により、ヒト化（もしくはヒト）または操作された抗ＦＲα抗体及び再表面化抗体は、親配列、操作配列、及びヒト化配列の三次元モデルを使用して親配列、様々な概念的ヒト化産物及び操作産物の分析プロセスによって調製されてもよい。三次元免疫グロブリンモデルは一般に入手可能であり、そして当業者によく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の推定される三次元立体配座構造を例示及び表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらの表示の検査により、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の可能な役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンのそのＦＲαなどの抗原に結合する能力に影響を及ぼす残基の分析が可能になる。このように、標的抗原（複数可）に対する増加した親和性等の所望の抗体特徴が達成されるように、フレームワーク（ＦＲ）残基をコンセンサス及び移入配列から選択し、組み合わされ得る。

本明細書に開示される抗体のヒト化、再表面化、または操作は、任意の既知の方法を使用して行うことができ、その例としては、限定するわけではないが、Ｗｉｎｔｅｒ（Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４（１９８８），Ｓｉｍｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）；ＣｈｏｔｈｉａａｎｄＬｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１（１９８７），Ｃａｒｔｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３），Ｒｏｇｕｓｋａｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，Ｕ．Ｓ．Ａ，９１（３）：９６９－９７３（１９９４），Ｒｏｇｕｓｋａｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ．９（１０）：８９５－９０４（１９９６）、米国特許第５，６３９，６４１号、第５，７２３，３２３号、第５，９７６，８６２号、第５，８２４，５１４号、第５，８１７，４８３号、第５，８１４，４７６号、第５，７６３，１９２号、第５，７２３，３２３号、第５，７６６，８８６号、第５，７１４，３５２号、第６，２０４，０２３号、第６，１８０，３７０号、第５，６９３，７６２号、第５，５３０，１０１号、第５，５８５，０８９号、第５，２２５，５３９号、第４，８１６，５６７号；ＰＣＴ／：ＵＳ９８／１６２８０号、ＵＳ９６／１８９７８号、ＵＳ９１／０９６３０号、ＵＳ９１／０５９３９号、ＵＳ９４／０１２３４号、ＧＢ８９／０１３３４号、ＧＢ９１／０１１３４号、ＧＢ９２／０１７５５号、ＷＯ９０／１４４４３号、ＷＯ９０／１４４２４号、ＷＯ９０／１４４３０号、ＥＰ２２９２４６号、同７，５５７，１８９号、同７，５３８，１９５号、及び同７，３４２，１１０号の文献に記載されている方法が挙げられ、これらの文献のそれぞれは、本明細書に引用されている文献を含め、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本明細書に開示されるＦＲαに特異的に結合する薬剤は、抗体フラグメントも包含する。抗体フラグメントを産生するために様々な技法が知られている。従来、これらのフラグメントは、無傷抗体のタンパク質分解消化により得られている（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏｅｔａｌ．，１９９３，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ２４：１０７－１１７；Ｂｒｅｎｎａｎｅｔａｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１を参照のこと）。いくつかの態様において、抗体フラグメントは組換え的に生成される。Ｆａｂ、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ抗体フラグメントがすべて、Ｅ．ｃｏｌｉまたは他の宿主細胞内で発現され、Ｅ．ｃｏｌｉまたは他の宿主細胞から分泌され得るため、これらのフラグメントの大量産生が可能になる。このような抗体フラグメントはまた、上述の抗体ファージライブラリから単離され得る。抗体フラグメントは、例えば、米国特許第５，６４１，８７０号に記載されているような線状抗体であってもよく、単一特異性または二重特異性であってもよい。抗体フラグメントを産生するための他の技法が、当業者に明らかであろう。

修飾抗体は、抗体とヒトＦＲαのポリペプチドとの会合を提供する任意の種類の可変領域を含むことができることを理解されたい。これに関して、可変領域は、液性応答を取り込み、所望の腫瘍関連抗原に対する免疫グロブリンを生成するように誘導され得る任意の種類の哺乳類を含むか、またはこれに由来することができる。このように、修飾抗体の可変領域は、例えば、ヒト、マウス、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、マカクなど）またはルピナス起源であることができる。いくつかの態様では、修飾された免疫グロブリンの可変領域及び定常領域の両方がヒトである。いくつかの態様において、適合性抗体（通常、非ヒト由来）の可変領域を、結合特性を改善するか、または分子の免疫原性を低下させるように操作または特異的に適合させることができる。この点において、様々な領域をヒト化することができ、あるいはインポートされたアミノ酸配列を含めることによって変更することができる。

いくつかの態様において、重鎖及び軽鎖の双方における可変ドメインが、１つ以上のＣＤＲの少なくとも部分的な置換により、そして必要に応じて、部分フレームワーク領域置換及び配列変更により変更される。ＣＤＲは、フレームワーク領域が誘導されている抗体と同じクラスまたはさらにはサブクラスの抗体から誘導することができるが、ＣＤＲは、異なるクラスの抗体から、いくつかの態様では、別の種由来の抗体から誘導されるものと想定される。ある可変ドメインの抗原結合能力を別の可変ドメインに移すために、ドナー可変領域からのＣＤＲのすべてを完全なＣＤＲと置き換える必要がない場合がある。むしろ、抗原結合部位の活性を維持するのに必要な残基を移すことのみ必要である可能性がある。米国特許第５，５８５，０８９号、第５，６９３，７６１号、及び第５，６９３，７６２号に記載の説明を考慮すると、日常的な実験を行うか、または試行錯誤試験によって、免疫原性が低下した機能性抗体を得ることは、十分に当業者の能力の範囲内であろう。

ポリペプチド及び類似体は、通常はタンパク質の一部ではない追加の化学部分を含むようにさらに修飾され得る。これらの誘導体化部分は、タンパク質の溶解性、生物学的半減期または吸収を改善し得る。これらの部分は、タンパク質などの望ましい副作用を低減または排除することもできる。これらの部分の概要は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’ＳＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳ，２０ｔｈｅｄ．，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（２０００）に見出すことができる。

ＩＩＩ．可溶性ＦＲα及びその検出
可溶性ＦＲαを検出する方法及びそのために使用できる抗体は、例えば、国際公開第２０１２／０６１７５９号、国際公開第２０１４／０３６４９５号、及び国際公開第２０１９／０５０９３５号に開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。さらに、可溶性ＦＲαを検出するために使用することができるキット（例えば、ヒトＦＯＬＲ１Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ＥＬＩＳＡＫｉｔ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ）など）は市販されている。可溶性ＦＲαは、患者、例えば、がんを有する患者から得られたサンプルにおいて検出することができる。サンプルは、体液を含むことができる。いくつかの態様において、体液は、血漿液、血清液、または腹水液である。いくつかの態様では、サンプルはプラズマである。いくつかの態様では、サンプルは、末梢血サンプルを含む。

いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて検出される。

抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントを用いて、可溶性ＦＲαを検出することができる。可溶性ＦＲαの検出に有用な抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントは、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントと呼ぶことができる。可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、例えば、上記のセクションＩＩに記載したｍｕＦＲ１－９及びｍｕＦＲ１－１３抗体を含む。可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、例えば、ｍｕＦＲ１－９及びｍｕＦＲ１－１３の６つのＣＤＲ（すなわち、ＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３）、あるいはｍｕＦＲ１－９及びｍｕＦＲ１－１３のＶＨ及び／またはＶＬを含む抗体及びその抗原結合フラグメントを含む。

いくつかの態様では、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１８～２０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号２１～２３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２４～２６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号２７～２９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの実施形態では、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、及び／または（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む。

いくつかの実施形態では、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、及び／または（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む。

いくつかの実施形態では、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号５１のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）、及び／または（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＣＬ）を含む。

いくつかの実施形態では、可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）、及び／または（ｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＣＬ）を含む。

いくつかの態様では、ＦＲαへのｈｕＭｏｖ１９の結合は、ＦＲαへの可溶性ＦＲα検出抗体または抗原結合フラグメントの結合を競合的に阻害しない。いくつかの態様では、ＦＲαへのＩＭＧＮ８５３の結合は、ＦＲαへの可溶性ＦＲα検出抗体または抗原結合フラグメントの結合を競合的に阻害しない。いくつかの態様において、（ｉ）ＰＴＡ－１０７７２としてＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託されたプラスミドによってコードされる重鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む重鎖及び（ｉｉ）ＰＴＡ－１０７７４としてＡＴＣＣに寄託されたプラスミドによってコードされる軽鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗体または抗原結合フラグメントのＦＲαへの結合は、ＦＲαへの可溶性ＦＲα検出抗体または抗原結合フラグメントの結合を競合的に阻害しない。

いくつかの態様では、ＦＲαへの葉酸の結合は、ＦＲαへの可溶性ＦＲα検出抗体または抗原結合フラグメントの結合を競合的に阻害しない。

いくつかの態様において、可溶性ＦＲα検出抗体または抗原結合フラグメントは、約１．０ｎＭ～約１０ｎＭのＫｄでヒトＦＲαに結合する。いくつかの態様において、可溶性ＦＲα検出抗体または抗原結合フラグメントは、約０．５ｎＭ～約５ｎＭのＫｄでヒトＦＲαに結合する。

いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、液体クロマトグラフィー－質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、または電気化学発光免疫測定法（ＥＣＬＩＡ）もしくはメソスケールディスカバリー（ＭＳＤ）を含む方法を用いて検出するものであり、ＭＳＤは、ＥＬＩＳＡにおいて用いられる比色反応とは対照的に、電気化学発光（ＥＣＬ）を検出技術として用いる点を除き、ＥＬＩＳＡに似た方法である。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、ＥＬＩＳＡを含む方法を用いて検出する。

いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、電気化学発光（ＥＣＬ）を用いて検出する。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、比色反応を用いた検出する。

いくつかの態様において、可溶性ＦＲαは、マルチステップ法を用いた検出する。そのようなマルチステップ法の１つでは、サンプル中のＦＲαを濃縮するために初期免疫捕捉ステップを実施し、続いてＦＲαをペプチドに消化し、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ／ＭＳ）により分析する。さらに、ＬＣ／ＭＳでペプチドを分析することにより、例えば、がん患者由来のサンプル中のＦＲαのレベルを含めて、サンプル中に存在するＦＲαのレベルを定量することができる。いくつかの態様において、サンプル中のヒトＦＲαを検出する方法は、（ａ）固体支持体に結合した免疫捕捉試薬で前記ＦＲαを捕捉すること、（ｂ）固体支持体からＦＲαを溶出すること、（ｃ）溶出したＦＲαを消化すること、及び（ｄ）消化したＦＲαに対して液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ／ＭＳ）を行うことを含み、ここで、ＦＲαを、少なくとも１つのシグネチャＦＲαペプチドのクロマトグラフィー分離及び質量分析応答を監視することにより検出する。このような方法は、感度及び選択性が向上するという利点を提供する。

固体支持体に結合させた免疫捕捉試薬を用いてサンプルに対して初期免疫捕捉ステップを実施する。免疫捕捉試薬は、例えば、上記のような可溶性ＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、ＦＲαに結合する任意の免疫学的試薬であってよい。免疫捕捉試薬として抗体または抗原結合フラグメントを使用する場合、ＦＲαへの抗体または抗原結合フラグメントの結合は、サンプル中のＦＲαへのＩＭＧＮ８５３などの抗体系活性剤の結合によって競合的に阻害されない場合がある。また、免疫捕捉試薬として抗体または抗原結合フラグメントを使用する場合、ＦＲαへの抗体または抗原結合フラグメントの結合は、サンプル中に存在する葉酸によって阻害されない場合がある。

いくつかの態様では、免疫捕捉試薬はビオチン化されている。いくつかの態様では、免疫捕捉試薬は、ビオチン－ストレプトアビジン相互作用を介して固体支持体に結合する。いくつかの態様では、固体支持体は、質量分析免疫アッセイ（ＭＳＩＡ）マイクロカラムである。いくつかの態様では、免疫捕捉試薬は磁気ビーズを含む。

初期免疫捕捉ステップを実行するために、ＦＲαを含むサンプルを、固体支持体に結合した免疫捕捉試薬と共にインキュベートすることができる。免疫捕捉ステップの後に洗浄ステップを実施して、捕捉されたＦＲαをさらに精製することができる。いくつかの態様では、１つ以上の洗浄ステップは、サンプルと免疫捕捉試薬とのインキュベーションの後、かつ捕捉されたＦＲαの溶出の前に実施される。いくつかの態様では、２つ以上の洗浄ステップが、捕捉されたＦＲαの溶出の前に実行される。いくつかの態様では、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、または少なくとも１０の洗浄ステップが、捕捉されたＦＲαに対して実行される。いくつかの態様では、洗浄ステップは、捕捉されたＦＲαを洗浄緩衝液と接触させることを含む。いくつかの態様において、洗浄緩衝液は、市販の洗浄緩衝液である。いくつかの態様では、洗浄ステップは、捕捉されたＦＲαを塩溶液及び洗剤と接触させることを含む。いくつかの態様では、塩溶液は４００ｍＭＮａＣｌであり、洗剤は０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０である。

免疫捕捉後、溶出ステップを行うことにより、ＦＲαを固体支持体から放出させることができる。いくつかの態様では、溶出ステップは、捕捉されたＦＲαを酸性溶液と接触させることにより実施される。いくつかの態様では、酸性溶液は市販の溶液である。いくつかの態様において、中和緩衝液の添加により溶出液のｐＨが中性にされる。いくつかの態様では、中和緩衝液は、ｐＨ８の５００ｍＭ重炭酸アンモニウムである。いくつかの態様では、中和緩衝液は、市販の緩衝液である。

免疫捕捉及び溶出後、得られたＦＲαタンパク質は、ペプチドに消化され、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ／ＭＳ）によって分析され得る。いくつかの態様では、ＦＲα含有溶液は、ＬＣ／ＭＳによる分析の前に、アルキル化され、且つ還元される。いくつかの態様では、ＦＲαはメタノールでアルキル化される。いくつかの態様では、ＦＲαは、ＦＲαをトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）を含有する溶液と接触させることによって還元される。いくつかの態様では、１００ｍＭＴＣＥＰを含有する溶液を使用して、ＦＲαを還元させる。いくつかの態様では、アルキル化及び還元後にシステインブロッキング試薬をＦＲα含有溶液に添加する。いくつかの態様では、システインブロッキング試薬はヨードアセトアミド（ＩＡＭ）である。いくつかの態様では、１００ｍＭＩＡＭを含有する溶液を、ＦＲα含有溶液に添加する。

アルキル化及び還元後に、ＦＲαはペプチドに消化される。いくつかの態様では、ＦＲαはトリプシンで消化される。いくつかの態様では、ＦＲαはＬｙｓ－Ｃで消化される。いくつかの態様では、ＦＲαは、トリプシンとＬｙｓ－Ｃとの混合物で消化される。いくつかの態様では、ＦＲαは、ＦＲαを３０ｎｇ／μＬのトリプシン／Ｌｙｓ－Ｃを含む５０ｍＭ重炭酸アンモニウム溶液と接触させることにより消化される。

トリプシン／Ｌｙｓ－ＣによるＦＲαの消化により、ＬＣ／ＭＳによるサンプルの定量分析の実施に有用なペプチドが生成される。ＦＲαの消化によって生成される例示的なシグネチャペプチドを以下の表９に示す。

ＦＲαをペプチドに消化した後、ペプチド含有溶液を調製してＬＣ／ＭＳ分析を行うことができる。いくつかの態様では、界面活性剤は、ＬＣ／ＭＳ分析の前にペプチド含有溶液に添加される。いくつかの態様では、界面活性剤は、質量分析用に配合された市販の試薬である。いくつかの態様において、界面活性剤との反応を１０％ギ酸の添加によりクエンチする。

ＬＣ／ＭＳ分析のためのサンプルの消化及び調製後、サンプルをＬＣ／ＭＳ装置に注入して分析することができる。いくつかの態様では、ＦＲαの少なくとも２つのシグネチャペプチドが、ＬＣ／ＭＳ分析ステップで選択されて監視される。いくつかの態様では、ＦＲαの少なくとも３つのシグネチャペプチドが、ＬＣ／ＭＳ分析ステップで選択されて監視される。いくつかの態様では、ＦＲαの少なくとも４つのシグネチャペプチドが、ＬＣ／ＭＳ分析ステップで選択されて監視される。いくつかの態様において、ＬＣ／ＭＳステップで選択及び監視される少なくとも４つのシグネチャ用ペプチドは、配列番号６８のアミノ酸配列を有するペプチド、配列番号６９のアミノ酸配列を有するペプチド、配列番号７０のアミノ酸配列を有するペプチド、及び配列番号７１のアミノ酸配列を有するペプチドを含む。いくつかの態様では、ＦＲαレベルの定量的測定はＬＣ／ＭＳ分析によって提供される。いくつかの態様では、サンプル中のＦＲαレベルは、サンプル中のＦＲαのレベルをＦＲαの参照レベルと比較することによって定量化される。ＬＣ／ＭＳ分析による分析方法は当該技術分野で周知であり、例えば、Ｙａｎｇｅｔａｌ．ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｐｏｒｔｓ．２０１５Ｎｏｖｅｍｂｅｒ１７；５：１６７３３；ｄｏｉ１０．１０３８／ｓｒｅｐ１６７３３に記載されている。

本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、サンプル中の少なくとも０．５ｎｇ／ｍＬのＦＲαレベルまで低いレベルのＦＲαを検出できる方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、サンプル中の少なくとも０．３ｎｇ／ｍＬのＦＲαレベルまで低いレベルのＦＲαを検出できる方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、サンプル中の少なくとも０．２５ｎｇ／ｍＬのＦＲαレベルまで低いレベルのＦＲαを検出できる方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、サンプル中の少なくとも０．２ｎｇ／ｍＬのＦＲαレベルまで低いレベルのＦＲαを検出できる方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、サンプル中の少なくとも０．１５ｎｇ／ｍＬのＦＲαレベルまで低いレベルのＦＲαを検出できる方法を用いて検出される。

本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、少なくとも５の信号対雑音比が観察される方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、少なくとも６の信号対雑音比が観察される方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、少なくとも７の信号対雑音比が観察される方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、少なくとも８の信号対雑音比が観察される方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、少なくとも９の信号対雑音比が観察される方法を用いて検出される。本明細書で提供されるいくつかの態様では、可溶性ＦＲαは、少なくとも１０の信号対雑音比が観察される方法を用いて検出される。

いくつかの態様において、可溶性ＦＲαレベルは、腫瘍のサイズに対して正規化された可溶性ＦＲαレベルであり、このような正規化された可溶性ＦＲαレベルは、可溶性ＦＲαレベルを腫瘍のサイズで割ることによって決定することができる。いくつかの態様において、可溶性ＦＲαレベルは腫瘍のサイズに対して正規化されていない。

ＩＶ．ＦＲα標的療法の有効性の指標としての可溶性ＦＲα
本明細書に記載されるように、がん患者におけるより高い可溶性ＦＲαレベルは、驚くべきことに、ＦＲα標的療法（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）に対する応答の改善と関連しており、この関連は、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって測定されるような膜ＦＲαレベルとは独立していることができる。したがって、標的可溶性ＦＲαレベル以上の患者における可溶性ＦＲαレベルは、抗ＦＲα活性剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３またはＩＭＧＮ１５１などの抗ＦＲα免疫複合体）に対する患者のがんの応答性の独立した予測因子となり得る。したがって、本明細書では、抗ＦＲα活性剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３またはＩＭＧＮ１５１などの抗ＦＲα免疫複合体）を含む医薬組成物を、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有するがん患者に投与することを含む、患者におけるがんを治療する方法が提供される。いくつかの態様において、患者の可溶性ＦＲαは、（例えば上記のセクションＩＩＩに記載されているように）投与前に検出されている。いくつかの態様において、この方法はさらに、（例えば上記のセクションＩＩＩに記載されているように）、投与前に患者の可溶性ＦＲαを検出することを含む。

いくつかの態様において、がん治療の有効性を高める方法は、抗ＦＲα活性剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３またはＩＭＧＮ１５１などの抗ＦＲα免疫複合体）を含む医薬組成物をがん患者に投与することを含み、ここで、患者の可溶性ＦＲαレベルは標的可溶性ＦＲαレベル以上である。いくつかの態様において、患者の可溶性ＦＲαは、（例えば上記のセクションＩＩＩに記載されているように）投与前に検出されている。いくつかの態様において、この方法はさらに、（例えば上記のセクションＩＩＩに記載されているように）、投与前に患者の可溶性ＦＲαを検出することを含む。

いくつかの態様において、患者におけるがんを治療する方法は、患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有するかどうかを（例えば、他の当事者により測定された可溶性ＦＲα検査結果を取得することにより）判定すること、及び、患者において標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルが検出された場合、抗ＦＲα活性剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３またはＩＭＧＮ１５１などの抗ＦＲα免疫複合体）を含む医薬組成物を投与することを含む。

いくつかの態様において、患者におけるがんを治療する方法は、がん患者から得られたサンプル中に標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルが存在するかどうかを判定すること、及び、サンプル中に標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルが検出された場合に、抗ＦＲα活性剤（例えば、ＩＭＧＮ８５３またはＩＭＧＮ１５１などの抗ＦＲα免疫複合体）を含む医薬組成物を投与するように医師に指示することを含む。

いくつかの態様において、患者におけるがんを治療する方法は、（ｉ）患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有する場合、抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を患者に投与すること、及び（ｉｉ）患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有さない、または患者から得られたがんサンプルが高いＦＲα ＩＨＣスコアを有さない場合、患者に化学療法を投与することを含む。いくつかの態様では、ＩＨＣ決定に使用されるがんサンプルは、患者の可溶性ＦＲαレベルの検出の少なくとも６か月前、少なくとも９か月前、少なくとも１年前、または少なくとも１８か月前に得られた。いくつかの態様において、患者の可溶性ＦＲαは、（例えば上記のセクションＩＩＩに記載されているように）投与前に検出されている。いくつかの態様において、この方法はさらに、（例えば上記のセクションＩＩＩに記載されているように）、投与前に患者の可溶性ＦＲαを検出することを含む。

いくつかの態様では、ＦＲα ＩＨＣスコアは、投与前に検出されている。いくつかの態様では、ＩＨＣ決定に使用されるがんサンプルは、投与の少なくとも６か月前、少なくとも９か月前、少なくとも１年前、少なくとも１８か月前、または少なくとも２年前に得られた。いくつかの態様では、この方法は、投与前にＦＲα ＩＨＣスコアを検出することをさらに含む。いくつかの態様では、可溶性ＦＲα及びＦＲα ＩＨＣスコアは、投与前に検出されている。いくつかの態様では、ＩＨＣ決定に使用されるがんサンプルは、投与の少なくとも６か月前、少なくとも９か月前、少なくとも１年前、少なくとも１８か月前、または少なくとも２年前に得られた。いくつかの態様では、この方法は、投与前に可溶性ＦＲα及びＦＲα ＩＨＣスコアを検出することをさらに含む。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαは投与前に検出されており、この方法は、投与前にＦＲα ＩＨＣスコアを検出することをさらに含む。いくつかの態様では、ＦＲα ＩＨＣスコアが、投与前に（例えば、投与の少なくとも６か月前、少なくとも９か月前、少なくとも１年前、少なくとも１８か月前、または少なくとも２年前に得られたがんサンプルにおいて）検出されており、この方法は、投与前に可溶性ＦＲαをさらに検出する。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高い患者のがんを同定するための方法は、患者から得たサンプル中の可溶性ＦＲαを測定すること、及び場合により、患者から得たサンプル中のＦＲα ＩＨＣスコアを決定することを含み、ここで、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルの存在及び／または高いＦＲα ＩＨＣスコアは、がんが抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高いことを示し、場合により、この方法は、がんが応答する可能性が高い場合に、抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を患者に投与することをさらに含む。

本明細書では、がんが抗ＦＲα活性剤に応答する可能性を決定するための有効な標的可溶性ＦＲαレベルを実証する。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約０．６ｎｇ／ｍＬ、約０．７ｎｇ／ｍＬ、約０．７５ｎｇ／ｍＬ、約０．８ｎｇ／ｍＬ、約０．９ｎｇ／ｍＬ、または約１ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは、約１．１ｎｇ／ｍＬ、約１．２ｎｇ／ｍＬ、約１．２５ｎｇ／ｍＬ、約１．３ｎｇ／ｍＬ、約１．４ｎｇ／ｍＬ、約１．５ｎｇ／ｍＬ、約１．６ｎｇ／ｍＬ、約１．７ｎｇ／ｍＬ、約１．７５ｎｇ／ｍＬ、約１．８ｎｇ／ｍＬ、約１．９ｎｇ／ｍＬ、または約２ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは、約２．１ｎｇ／ｍＬ、約２．２ｎｇ／ｍＬ、約２．２５ｎｇ／ｍＬ、約２．３ｎｇ／ｍＬ、約２．４ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約２．６ｎｇ／ｍＬ、約２．７ｎｇ／ｍＬ、約２．７５ｎｇ／ｍＬ、約２．８ｎｇ／ｍＬ、約２．９ｎｇ／ｍＬ、または約３ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは、約３．１ｎｇ／ｍＬ、約３．２ｎｇ／ｍＬ、約３．２５ｎｇ／ｍＬ、約３．３ｎｇ／ｍＬ、約３．４ｎｇ／ｍＬ、約３．５ｎｇ／ｍＬ、約３．６ｎｇ／ｍＬ、約３．７ｎｇ／ｍＬ、約３．７５ｎｇ／ｍＬ、約３．８ｎｇ／ｍＬ、約３．９ｎｇ／ｍＬ、または約４ｎｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、標的可溶性ＦＲαレベルは、約４．１ｎｇ／ｍＬ、約４．２ｎｇ／ｍＬ、約４．２５ｎｇ／ｍＬ、約４．３ｎｇ／ｍＬ、約４．４ｎｇ／ｍＬ、約４．５ｎｇ／ｍＬ、約４．６ｎｇ／ｍＬ、約４．７ｎｇ／ｍＬ、約４．７５ｎｇ／ｍＬ、約４．８ｎｇ／ｍＬ、約４．９ｎｇ／ｍＬ、または約５．０ｎｇ／ｍＬである。

本明細書で実証されるように、卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌を有し、かつそのような患者の可溶性ＦＲαの平均レベルを上回る患者は、抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高い。したがって、いくつかの態様では、可溶性ＦＲαの高レベルとは、卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌の患者について平均を上回るレベルを指す。いくつかの態様において、可溶性ＦＲαの高いレベルとは、卵巣癌、原発性腹膜癌または卵管癌患者の７５％のレベルよりも高いレベルを指す。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαの高いレベルとは、ＰＳ２スコアリングによって決定されるように、中程度（５０～７４％の細胞陽性）または高い（少なくとも７５％の細胞陽性）膜ＦＲαレベルを有する腫瘍を有する卵巣、原発性腹膜、または卵管癌の患者について平均を上回るレベルを指す。いくつかの態様では、可溶性ＦＲαの高いレベルとは、ＰＳ２スコアリングによって決定されるように、中程度（５０～７４％の細胞陽性）または高い（少なくとも７５％の細胞陽性）膜ＦＲαレベルを有する腫瘍を有する卵巣、原発性腹膜、または卵管癌の患者の７５％のレベルよりも高いレベルを指す。

Ｖ．抗ＦＲα活性剤
本明細書で提供されるように、抗ＦＲα活性剤は、可溶性ＦＲαを有する患者に投与することができる。抗ＦＲα活性剤としては、例えば、抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメント、ならびに抗ＦＲα免疫複合体が挙げられる。抗ＦＲα活性剤及びそれを使用する方法は、例えば、国際公開第２０１１／１０６５２８号、国際公開第２０１５／０５４４００号、及び米国公開出願第２０２０／０３６２０２９号に記載されており、それらのそれぞれが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。さらなる抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントは当技術分野で公知であり、例えば、国際公開第２０１２／０６１７５９号、米国公開出願第２０１９／０２３３５１２号、米国公開出願第２０２０／０１４７２２９号、米国公開出願第２０２０／０２９７８６０号、米国公開出願第２０２０／０３５３０７６号、米国特許第１０，８２２，４１０号、及び米国特許第１０，１０１，３４３号に開示されており、それらのそれぞれが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。抗ＦＲα活性剤は、例えば、上記のセクションＩＩに記載されたＦＲ５７抗体及びその変異体、及びｈｕＭｏｖ１９抗体、ならびにその抗原結合フラグメント及びその免疫複合体を含む。

抗ＦＲα活性剤はまた、例えば、ＦＲ５７の６つのＣＤＲ（すなわち、ＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３）、その変異体、及びｈｕＭｏｖ１９を含む抗体及びそれらの抗原結合フラグメント、ならびにそれらの免疫複合体を含む。抗ＦＲα活性剤はまた、例えば、ＦＲ５７の６つのＶＨ及び／またはＶＬ、その変異体、及びｈｕＭｏｖ１９を含む抗体及びその抗原結合フラグメント、ならびにそれらの免疫複合体を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号３８のＶＨと配列番号４４のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号３８のＶＨと配列番号４４のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号３７のＶＨと配列番号４３のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号３７のＶＨと配列番号４３のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２～４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号５、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号５、３、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１３、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１０、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１３、１１、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２～４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号５、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０、１１、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３６のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、（ｂ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、（ｂ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３６のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、（ｂ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）、（ｃ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び（ｄ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）、（ｃ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び（ｄ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号６０のアミノ酸配列を含む一本鎖可変領域（ｓｃＦｖ）、（ｂ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）、及び／または（ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＣＬ）を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号４９のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）、及び／または（ｂ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＣＬ）を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）、及び／または（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＣＬ）を含む。

いくつかの態様において、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むポリペプチド、（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むポリペプチド、及び／または（ｃ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα抗体または免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号８０～８２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびに（ｂ）それぞれ配列番号８６～８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα抗体または免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号８３～８５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびに（ｂ）それぞれ配列番号８９、９０、及び８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα抗体または免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα抗体または免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１０３のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤における抗体またはその抗原結合フラグメントは、ファーレツズマブ（ＭＯＲＡｂ－００３）である。ＭＯＲＡｂ－００３は、米国公開出願第２０２０／０２９７８６０号に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号９１～９３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびに（ｂ）それぞれ配列番号９６～９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号９４、９５、及び９３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびに（ｂ）それぞれ配列番号９６～９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様において、かかる抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＫａｂａｔまたはＫａｂａｔのＥＵ番号付けスキームに従って、重鎖位置Ｆ４０４に非天然アミノ酸を含む。いくつかの態様において、かかる抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＫａｂａｔまたはＫａｂａｔのＥＵ番号付けスキームに従って、重鎖位置Ｙ１８０に非天然アミノ酸を含む。いくつかの態様において、かかる抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＫａｂａｔまたはＫａｂａｔのＥＵ番号付けスキームに従って、重鎖位置Ｆ４０４及びＹ１８０に非天然アミノ酸を含む。非天然アミノ酸配列は、例えば、パラ－アジドメチルフェニルアラニン及びｐ－アジドメチル－Ｌ－フェニルアラニンである。抗体は、例えば、ＩｇＧ１抗体であり得る。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤における抗体またはその抗原結合フラグメントは１８４８－Ｈ０１である。１８４８－Ｈ０１は、米国公開出願第２０１９／００８３６４１号に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、変更された（例えば、突然変異または操作された）Ｆｃ領域を含む。例えば、いくつかの態様において、Ｆｃ領域は、抗体のエフェクター機能を低下もしくは増強し、血清半減期または抗体の他の機能的特性を変化させるように変更されている。エフェクター機能の低下または除去は、特定の場合、例えば、その作用機序が標的抗原を有する細胞を死滅させずにブロッキングまたは拮抗作用を伴う抗体の場合に望ましい。エフェクター機能の増加は、ＦｃγＲが低レベルで発現する腫瘍や外来細胞などの望ましくない細胞、例えばＦｃγＲＩＩＢのレベルが低い腫瘍特異的Ｂ細胞（例えば、非ホジキンリンパ腫、ＣＬＬ、及びバーキットリンパ腫）に向けられた場合に一般に望ましい。このような付与または変更されたエフェクター機能活性を有する抗ＦＲα活性物質（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、エフェクター機能活性の有効性の増強が望まれる疾患、障害または感染の治療及び／または予防に有用である。いくつかの態様では、Ｆｃ領域は、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、または他のアイソタイプから選択されるアイソタイプである。

抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＦｃ領域は、１つ以上のＦｃ受容体（例えば、ＦｃγＲ（複数可））に結合する能力を有し得るが、いくつかの態様では、抗体または抗原結合フラグメントは、（野生型Ｆｃ領域が示す結合と比較して）ＦｃγＲＩＡ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２Ａ）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２Ｂ）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、またはＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）に対する結合が変更した変異体Ｆｃ領域を含み、例えば、活性化受容体への結合が増強され、及び／または、阻害性受容体（複数可）への結合能力が実質的に低下し、もしくは阻害性受容体（複数可）への結合能力がない。したがって、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＦｃ領域は、完全なＦｃ領域のＣＨ２ドメインの一部もしくはすべて及び／またはＣＨ３ドメインの一部もしくはすべてを含むことができ、あるいは変異体ＣＨ２及び／または変異体ＣＨ３配列（例えば、完全なＦｃ領域のＣＨ２またはＣＨ３ドメインに対する１つ以上の挿入及び／または１つ以上の欠失を含むことができる）を含むことができる。そのようなＦｃ領域は、非Ｆｃポリペプチド部分を含んでもよく、または非天然に完全なＦｃ領域の一部を含んでもよく、またはＣＨ２及び／もしくはＣＨ３ドメインの天然に存在しない配向（例えば、２つのＣＨ２ドメインもしくは２つのＣＨ３ドメイン、またはＮ末端からＣ末端への方向で、ＣＨ２ドメインに連結されたＣＨ３ドメインなど）を含んでもよい。

エフェクター機能を変化させると同定されたＦｃ領域修飾は当技術分野において公知であり、これには、活性化受容体（例えば、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ１６Ａ）への結合を増加させ、かつ阻害受容体（例えば、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２Ｂ）への結合を減少させる改変が含まれる（例えば、Ｓｔａｖｅｎｈａｇｅｎ，ｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．５７（１８）：８８８２－８８９０（２００７））。表１０に、活性化受容体への結合を増加させ、及び／または阻害受容体への結合を減少させる例示的な修飾の例示的な単一置換、二重置換、三重置換、四重置換及び五重置換（番号付けは、ＫａｂａｔにおけるようにＥＵインデックスのものであり、置換は、配列番号７２のアミノ酸配列に対するものである）を挙げる。

ＣＤ３２Ｂへの結合が減少し、及び／またはＣＤ１６Ａへの結合が増加したヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域の例示的な変異体は、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、またはＰ３９６Ｌ置換を含み、ここで、番号付けは、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスの番号付けである。これらのアミノ酸置換は、ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域において、任意の組み合わせで存在することができる。いくつかの態様では、変異型ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域は、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ置換を含む。いくつかの態様では、変異型ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域は、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ置換を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、エフェクター機能を低下させる修飾を含む免疫グロブリン重鎖定常領域を含む（例えば、Ｉｄｕｓｏｇｉｅｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：２５７１－２５７５（２００１）；Ｓａｚｉｎｓｋｙｅｔａｌ．，ＰＮＡＳＵＳＡ１０５：２０１６７－２０１７２（２００８）；Ｄａｖｉｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．３４：２２０４－２２１０（２００７）；Ｂｏｌｔｅｔａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：４０３－４１１（１９９３）；Ａｌｅｇｒｅｅｔａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ５７：１５３７－１５４３（１９９４）；Ｘｕｅｔａｌ．，ＣｅｌｌＩｍｍｕｎｏｌ．２００：１６－２６（２０００）；Ｃｏｌｅｅｔａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ６８：５６３－５７１（１９９９）；Ｈｕｔｃｈｉｎｓｅｔａｌ．，ＰＮＡＳＵＳＡ９２：１１９８０－１１９８４（１９９５）；Ｒｅｄｄｙｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：１９２５－１９３３（２０００）；国際公開第９７／１１９７１号、及び国際公開第０７／１０６５８５号；米国出願公開第２００７／０１４８１６７Ａ１号；ＭｃＥａｒｃｈｅｒｎｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１０９：１１８５－１１９２（２００７）；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５－６９１（２００９）；ならびにＫｕｍａｇａｉｅｔａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４７：１４８９－１４９７（２００７）を参照されたい。これらの文献のそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＦｃ領域は、野生型ＩｇＧＦｃ領域によって示される結合と比較して、ＦｃγＲＩＡ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２Ａ）（アロタイプＲ１３１及びＨ１３１）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２Ｂ）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）（アロタイプＶ１５８及びＦ１５８）、及びＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）（アロタイプＦｃγＩＩＩｂ－ＮＡ１及びＦｃγＩＩＩｂ－ＮＡ２）からなる群から選択されるエフェクター受容体への結合の減少（または実質的に結合なし）を示す。いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＦｃ領域変異体エフェクター受容体への結合親和性は、対応する免疫グロブリンの野生型Ｆｃ領域を含む対応する抗体または抗体結合フラグメントの結合親和性と比較して、１／１０以下、１／５０以下または１／１００以下に低減されている。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、低下したエフェクター機能（例えば、低下したＡＤＣＣ）を示し、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２６５、２６６、２６７、２６９、２７０、２７１、２９５、２９６、２９７、２９８、３００、３２４、３２５、３２７、３２８、３２９、３３１、及び３３２からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸位置において修飾を含むＩｇＧＦｃ領域を含み、ここで、アミノ酸位置の番号付けは、Ｋａｂａｔに記載されているようにＥＵインデックスに従う。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｄ２６５Ａ、Ｎ２９７Ｑ、Ｎ２９７Ａ、及びＮ２９７Ｇのうちのいずれか１つ、２つ、３つまたは４つを含み、ここで、番号付けは、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵ指数インデックスの番号付けである。いくつかの態様では、ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、Ｎ２９７Ｑ置換、Ｎ２９７Ａ置換、またはＬ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換を含み、これらの変異により、ＦｃＲ結合が消失するからである。あるいは、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）への結合の減少（または実質的に結合なし）及び／または（野生型ＩｇＧ１Ｆｃ領域（配列番号７２）が示す結合及びエフェクター機能と比較して）減少したエフェクター機能を本質的に示す、天然に存在するＦｃ領域のＣＨ２－ＣＨ３ドメインを含む。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＦｃ定常領域は、ＩｇＧ２Ｆｃ領域（配列番号７３）またはＩｇＧ４Ｆｃ領域（配列番号７４）を含む。Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ｑ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＤ２６５Ａ置換により、エフェクター機能が消失するため、エフェクター機能が望まれる状況では、これらの置換を使用しない可能性がある。

エフェクター機能が低下または消失した抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）におけるＦｃ領域含有抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインのＩｇＧ１配列は、置換Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ（配列番号７５において下線を付して示す）を含む。

エフェクター機能が低下または消失した抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）におけるＦｃ領域含有抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインのＩｇＧ１配列は、置換Ｎ２９７Ａ（配列番号７６において下線を付して示す）を含む。

エフェクター機能が低下または消失した抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）におけるＦｃ領域含有抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントのＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインのＩｇＧ１配列は、置換Ｎ２９７Ｑ（配列番号７７において下線を付して示す）を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、配列番号７５、配列番号７６、または配列番号７７から選択されるＦｃ（免疫グロブリン）配列を含む。

いくつかの態様では、バイパラトープ抗ＦＲα活性剤（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα免疫複合体）におけるバイパラトープ抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、エフェクター機能が低下または消失したＦｃ（免疫グロブリン）配列を含み（例えば、配列番号７５、配列番号７６、及び／または配列番号７７に示される置換を含む）、本明細書に開示される１つ以上のノブ・イン・ホール変異を含む。いくつかの態様では、Ｆｃ配列は、本明細書に開示されるノブ突然変異を含む。いくつかの態様では、Ｆｃ配列は、本明細書に開示されるホール変異を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、ＩｇＧ１－Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｐ２３８Ｓ；ＩｇＧ１－Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ；ＩｇＧ１－Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ；ＩｇＧ１－Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ；ＩｇＧ１－Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ；ＩｇＧ１－Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ；ＩｇＧ１－Ｈ２６８Ｑ、Ａ３３０Ｓ、Ｐ３３１Ｓ；ＩｇＧ１－Ｇ２３６Ｒ、Ｌ３２８Ｒ；ＩｇＧ１－Ｌ２３５Ｇ、Ｇ２３６Ｒ、ＩｇＧ１－Ｎ２９７Ａ；ＩｇＧ１－Ｎ３２５Ａ、Ｌ３２８Ｒ；ＩｇＧ１－Ｎ３２５Ｌ、Ｌ３２８Ｒ；ＩｇＧ１－Ｋ３２６Ｗ、Ｅ３３３Ｓ；ＩｇＧ２－Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ；ＩｇＧ２－Ｅ３３３Ｓ；ＩｇＧ２Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ａ３３１Ｓ；ＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３６Ｅ；ＩｇＧ４－Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ；ＩｇＧ４－Ｆ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｅ３１８Ａ；ＩｇＧ４－Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｅ３１８Ａ；ＩｇＧ４－Ｌ２３６Ｅ；ＩｇＧ２－ＥＵ配列１１８～２６０；及びＩｇＧ４－ＥＵ配列２６１～４４７に対応する１つ以上の修飾を含み、ここで、位置の番号付けは、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスに従う。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、低減されたＣＤＣ活性を有する重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。特定の態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、ＣＤＣ活性を低下させる変異を含むＩｇＧ１重鎖定常領域を含む（例えば、国際公開第１９９７／１１９７１号及び国際公開第２００７／１０６５８５号；米国出願公開第２００７／０１４８１６７Ａ１号；ＭｃＥａｒｃｈｅｒｎｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１０９：１１８５－１１９２（２００７）；Ｈａｙｄｅｎ－Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒｅｔａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ１５：２７３９－２７４６（２００９）；Ｌａｚａｒｅｔａｌ．，ＰＮＡＳＵＳＡ１０３：４００５－４０１０（２００６）；Ｂｒｕｃｋｈｅｉｍｅｒｅｔａｌ．，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ１１：５０９－５１７（２００９）；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５－６９１（２００９）；及びＳａｚｉｎｓｋｙｅｔａｌ．，ＰＮＡＳＵＳＡ１０５：２０１６７－２０１７２（２００８）を参照されたい；これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ＣＤＣを低下させる重鎖定常ドメイン配列修飾の例としては、ＥＵインデックスに従うと、ＩｇＧ１－Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ；ＩｇＧ１－Ｃ２２６Ｓ、Ｐ２３０Ｓ；ＩｇＧ１－Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ；ＩｇＧ１－Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ２ＥＵ配列１１８～２６０；ＩｇＧ４－ＥＵ配列２６１～４４７；及びＩｇＧ２－Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ａ３３１Ｓに対応する１つ以上の修飾が挙げられる。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、１つ以上の半減期の延長アミノ酸修飾（例えば、置換）を含む重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。Ｆｃ領域含有分子の半減期を延長することができる多数の変異が当該技術分野で知られており、本明細書で提供される抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントの成分として包含される。例えば、米国特許第６，２７７，３７５号、第７，０８３，７８４号、第７，２１７，７９７号、及び第８，０８８，３７６号；米国公開第２００２／０１４７３１１号及び第２００７／０１４８１６４号；ならびにＰＣＴ公開ＷＯ１９９８／２３２８９号、ＷＯ２００９／０５８４９２号、ＷＯ２０１０／０３３２７９号を参照されたい。これらの文献のそれぞれの内容が参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

ＦｃＲｎに対するＦｃ領域の結合親和性を高めることで、Ｆｃ領域を含むタンパク質の血清半減期を延長することができる。本明細書で使用される「半減期」という用語は、分子の投与後の平均生存時間の尺度である分子の薬物動態学的特性を意味する。半減期は、例えば、血清、すなわち、循環半減期または他の組織で測定されるように、対象（例えば、ヒト患者または他の哺乳類）の体またはその特定の区画から既知の量の分子の５０％を除去するのに必要な時間として表すことができる。一般に、半減期の増加は、投与された分子の循環における平均滞留時間（ＭＲＴ）の増加をもたらす。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、２３８、２５０、２５２、２５４、２５６、２５７、２５６、２６５、２７２、２８６、２８８、３０３、３０５、３０７、３０８、３０９、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、４２８、４３３、４３４、４３５、及び４３６からなる群から選択される１つ以上の位置において半減期アミノ酸置換を含み、ここで、アミノ酸位置は、ＥＵインデックスに従って番号付けられる。いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、位置２５１～２５７、２８５～２９０、３０８～３１４、３８５～３８９、及び４２８～４３６においてアミノ酸残基の１つ以上のアミノ酸置換を含み、ここで、アミノ酸位置はＥＵインデックスに従って番号付けられる。いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、Ｋａｂａｔ位置２５２のＴｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、またはＴｈｒによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置２５４のＴｈｒによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置２５６のＳｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、またはＴｈｒによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置２５７のＬｅｕによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置３０９のＰｒｏによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置３１１のＳｅｒによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置４２８のＴｈｒ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、またはＳｅｒによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置４３３のＡｒｇ、Ｓｅｒ、Ｉｓｏ、Ｐｒｏ、またはＧｌｎによるアミノ酸の置換、あるいはＫａｂａｔ位置４３４のＴｒｐ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒによるアミノ酸の置換のうちの１つ以上の置換を含む。より具体的には、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、野生型ヒトＩｇＧ定常ドメインと比較して、Ｋａｂａｔ位置２５２のＴｙｒによるアミノ酸の置換、Ｋａｂａｔ位置２５４のＴｈｒによるアミノ酸の置換、及びＫａｂａｔ位置２５６のＧｌｕによるアミノ酸の置換を含むアミノ酸置換を含むことができる。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｋ２８８Ｄ、Ｔ３０７Ｑ、Ｖ３０８Ｐ、Ａ３７８Ｖ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３５Ｋ、及びＹ４３６Ｉから選択される少なくとも１つの置換を含み、ここで、番号付けは、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスの番号付けである。いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、（ａ）Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ及びＴ２５６Ｅ；（ｂ）Ｍ２５２Ｙ及びＳ２５４Ｔ；（ｃ）Ｍ２５２Ｙ及びＴ２５６Ｅ；（ｄ）Ｔ２５０Ｑ及びＭ４２８Ｌ；（ｅ）Ｔ３０７Ｑ及びＮ４３４Ａ；（ｆ）Ａ３７８Ｖ及びＮ４３４Ａ；（ｇ）Ｎ４３４Ａ及びＹ４３６Ｉ；（ｈ）Ｖ３０８Ｐ及びＮ４３４Ａ；ならびに（ｉ）Ｋ２８８Ｄ及びＨ４３５Ｋから選択される置換を含む。

いくつかの態様では、抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントは、置換Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ及びＴ２５６Ｅのうちのいずれか１つ、２つまたは３つを含む変異体ＩｇＧＦｃ領域を含む。本開示はさらに、（ａ）エフェクター機能及び／またはＦｃγＲを変化させる１つ以上の変異、ならびに（ｂ）血清半減期を延長する１つ以上の変異を含む変異体Ｆｃ領域を有する抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）における抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントを提供する。

いくつかの態様において、抗ＦＲα活性剤は、抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメント及び細胞傷害性剤を含む。細胞傷害性剤は、抗ＦＲα抗体または抗原結合フラグメントに直接的に結合またはコンジュゲートすることができ、あるいは「免疫複合体」、「コンジュゲート」もしくは「ＡＤＣ」を生成するために当技術分野において公知の技術を用いたリンカーを介して間接的に結合またはコンジュゲートすることができる。適切な細胞傷害性剤は、細胞の死をもたらすか、細胞死を誘導するか、または何らかの方法で細胞生存率を低下させる任意の化合物であってもよく、例えば、メイタンシノイド及びメイタンシノイド類似体を含む。

Ａ．例示的な免疫複合体
本明細書で提供されるように、抗ＦＲα免疫複合体は、メイタンシノイドに連結された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたメイタンシノイドを含むことができ、ここで、メイタンシノイドは、ＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、例えば国際公開第２０１５／０５４４００号に開示されるように、６ｍｇ／ｋｇの調整された理想体重（ＡＩＢＷ）または５ｍｇ／ｋｇのＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号１３、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたメイタンシノイドを含むことができ、ここで、メイタンシノイドは、ＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号１０、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたメイタンシノイドを含むことができ、ここで、メイタンシノイドは、ＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号１３、１１、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたメイタンシノイドを含むことができ、ここで、メイタンシノイドは、ＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＣＤＲ配列及びＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ；及び（ｂ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたメイタンシノイドを含むことができ、ここで、メイタンシノイドは、ＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＶＨ及びＶＬ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＶＨ及びＶＬ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＶＨ及びＶＬ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）；及び（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたメイタンシノイドを含むことができ、ここで、メイタンシノイドは、ＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドは、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＨＣ及びＬＣ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＨＣ及びＬＣ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＨＣ及びＬＣ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）ＰＴＡ－１０７７２としてＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託されたプラスミドによってコードされる重鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）及び（ｂ）ＰＴＡ－１０７７４としてＡＴＣＣに寄託されたプラスミドによってコードされる軽鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含み得、ここで、メイタンシノイドはＤＭ４であり、及び／またはメイタンシノイドはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されている。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。列挙されたＨＣ及びＬＣ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与され得る。いくつかの態様において、列挙されたＨＣ及びＬＣ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様において、列挙されたＨＣ及びＬＣ配列ならびにＤＭ４メイタンシノイド及び／またはスルホ－ＳＰＤＢリンカーを含むそのような免疫複合体は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）は、ＩＭＧＮ８５３であってもよい。ＩＭＧＮ８５３は、６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与することができる。いくつかの態様では、ＩＭＧＮ８５３は、３週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。いくつかの態様では、ＩＭＧＮ８５３は、４週間ごとに６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与される。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号２～４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号５、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１３、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号２、６、及び４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０、１４、及び１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、（ｃ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び（ｄ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）配列番号６０のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖ、（ｂ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むポリペプチド、（ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むポリペプチド、及び（ｃ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）ＰＴＡ－１２５９１５としてＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託されたプラスミドによってコードされるアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含むポリペプチド、（ｂ）ＰＴＡ－１２５９１５としてＡＴＣＣに寄託されたプラスミドによってコードされるアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含むポリペプチド、及び（ｃ）ＰＴＡ－１０７７４としてＡＴＣＣに寄託されたプラスミドによってコードされる軽鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されているメイタンシノイドを含むことができる。メイタンシノイドは、例えば、ＤＭ２１であり得る。メイタンシノイドは、ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０個、２～５個、または３～４個のメイタンシノイドを含み得る。

抗ＦＲα活性剤（例えば、抗ＦＲα免疫複合体）は、ＩＭＧＮ１５１であってもよい。

第１の特定の態様（Ａ１）では、本明細書で提供される免疫複合体は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント上に位置する１つ以上のリジン残基のε－アミノ基を介してメイタンシノイド化合物に共有結合されている、本明細書に記載の抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。いくつかの態様では、免疫複合体は、式（Ｉ）

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ＣＢは、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント）であり、
Ｌ_２は、以下の式：

のうちの１つで表され、
式中、
Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’は、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、ハロゲン、－Ｏ－（Ｃ_１－４アルキル）、－ＳＯ_３Ｈ、－ＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋、または－ＯＨ、ハロゲン、ＳＯ_３Ｈ、もしくはＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋で置換されていてもよいＣ_１－４アルキルであり、ここで、Ｒ_４０、Ｒ_４１、及びＲ_４２はそれぞれ独立してＨまたはＣ_１－４アルキルを表し、
ｌ及びｋは、それぞれ独立して、１～１０の整数であり、
ｌ１は、２～５の整数であり、
ｋ１は、１～５の整数であり、かつ
ｓ１は細胞結合剤ＣＢに結合する部位を示し、ｓ３はＡ基に結合する部位を示し、
Ａは、アミノ酸残基、または２～２０個のアミノ酸残基を含むペプチドであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、またはＣ_１－３アルキルであり、
Ｌ_１は、以下の式で表され、
－ＣＲ^３Ｒ^４－（ＣＨ_２）_１－８－Ｃ（＝Ｏ）－
式中、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立して、ＨまたはＭｅであり、Ｌ_１中の－Ｃ（＝Ｏ）－部分は、Ｄに接続されており、
Ｄは、以下の式で表され、

及び
ｑは、１～２０の整数である。いくつかの態様では、ｑは、１～１０の整数である。いくつかの態様において、ｑは２～５の整数である。いくつかの態様において、ｑは３～４の整数である。

第１の特定の態様（Ａ１－１）の第１の特定の態様では、本明細書で提供される免疫複合体は、上記の式（Ｉ）で表され、式中、Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’はすべてＨであり、ｌ及びｋはそれぞれ独立して、２～６の整数であり、残りの変数は、式（Ｉ）について上で説明した通りである。

第１の特定の態様（Ａ１－２）の第２の特定の態様では、本明細書で提供される免疫複合体は、上記の式（Ｉ）で表され、式中、Ａは、２～５個のアミノ酸残基を含むペプチドであり、残りの変数は、第１の特定の態様（Ａ１）の式（Ｉ）または第１の特定の態様（Ａ１－１）の第１の特定の態様について上で説明した通りである。いくつかの態様では、Ａはプロテアーゼによって切断可能なペプチドである。いくつかの態様において、ペプチドは、腫瘍組織内に発現されたプロテアーゼによって切断可能である。いくつかの態様において、Ａは、それぞれ独立してＬまたはＤ異性体として存在する、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｉｔ、Ｃｙｓ、ｓｅｌｉｎｏ－Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ及びＶａｌからなる群から選択される－ＮＨ－ＣＲ^１Ｒ^２－Ｓ－Ｌ_１－Ｄに共有結合したアミノ酸を有するペプチドである。いくつかの態様では、－ＮＨ－ＣＲ^１Ｒ^２－Ｓ－Ｌ_１－Ｄに接続されたアミノ酸は、Ｌアミノ酸である。

第１の特定の態様（Ａ１－３）の第３の特定の態様では、本明細書で提供される免疫複合体は、上記の式（Ｉ）で表され、ここで、Ａは、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ、Ａｌａ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｌｙｓ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ｌｙｓ、Ｐｈｅ－Ｃｉｔ、Ｌｅｕ－Ｃｉｔ、Ｉｌｅ－Ｃｉｔ、Ｐｈｅ－Ａｌａ、Ｐｈｅ－Ｎ９－トシル－Ａｒｇ、Ｐｈｅ－Ｎ９－ニトロ－Ａｒｇ、Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ、Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｌｅｕ、Ｖａｌ－Ａｌａ－Ｖａｌ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号７８）、β－Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号７９）、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号６３）、Ｖａｌ－Ａｒｇ、Ａｒｇ－Ａｒｇ、Ｖａｌ－Ｄ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｄ－Ｌｙｓ、Ｖａｌ－Ｄ－Ａｒｇ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｒｇ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ａｒｇ、Ｄ－Ａｒｇ－Ｄ－Ａｒｇ、Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｍｅｔ、Ｇｌｎ－Ｖａｌ、Ａｓｎ－Ａｌａ、Ｇｌｎ－Ｐｈｅ、Ｇｌｎ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｐｒｏ、及びＤ－Ａｌａ－ｔＢｕ－Ｇｌｙからなる群から選択され、ここで、各ペプチドの最初のアミノ酸がＬ_２基に接続され、各ペプチドの最後のアミノ酸が－ＮＨ－ＣＲ_１Ｒ_２－Ｓ－Ｌ_１－Ｄに接続され、残りの変数は、第１の特定の態様（Ａ１）の式（Ｉ）または第１の特定の態様（Ａ１－１）の第１の特定の態様について記載した通りである。

第１の特定の態様（Ａ１－４）の第４の特定の態様では、本明細書で提供される免疫複合体は、上記の式（Ｉ）で表され、式中、Ｒ^１及びＲ^２は、両方ともＨであり、残りの変数は、第１の特定の態様（Ａ１）の式（Ｉ）、第１の特定の態様（Ａ１－１）の第１の特定の態様、第１の特定の態様（Ａ１－２）の第２の態様、または第１の特定の態様（Ａ１－３）の第３の特定の態様について記載した通りである。

第１の特定の態様（Ａ１－５）の第５の特定の態様では、本明細書で提供される免疫複合体は、上記の式（Ｉ）で表され、式中、Ｌ_１は、－（ＣＨ_２）_４－６－Ｃ（＝Ｏ）－であり、残りの変数は、第１の特定の態様（Ａ１）の式（Ｉ）、第１の特定の態様（Ａ１－１）の第１の特定の態様、第１の特定の態様（Ａ１－２）の第２の態様、第１の特定の態様（Ａ１－３）の第３の特定の態様、または第１の特定の態様（Ａ１－４）の第４の特定の態様について記載した通りである。

第１の特定の態様（Ａ１－６）の第６の特定の態様では、本明細書で提供される免疫複合体は、上記の式（Ｉ）で表され、式中、Ｄは、以下の式で表され、

残りの変数は、第１の特定の態様（Ａ１）の式（Ｉ）、第１の特定の態様（Ａ１－１）の第１の特定の態様、第１の特定の態様（Ａ１－２）の第２の態様、第１の特定の態様（Ａ１－３）の第３の特定の態様、第１の特定の態様（Ａ１－４）の第４の特定の態様、または第１の特定の態様（Ａ１－５）の第５の特定の態様について記載した通りである。

第７の特定の態様（Ａ７）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、

は、Ｌｙｓアミン基を介してＬ_２基に接続された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント）であり、

は、Ｃｙｓチオール基を介してＬ_２基に接続された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント）であり、
Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立して、ＨまたはＭｅであり、
ｍ１、ｍ３、ｎ１、ｒ１、ｓ１及びｔ１は、それぞれ独立して、１～６の整数であり、
ｍ２、ｎ２、ｒ２、ｓ２及びｔ２は、それぞれ独立して、１～７の整数であり、
ｔ３は、１～１２の整数であり；
Ｄ_１は、以下の式で表され、

及び
ｑは、１～２０の整数である。いくつかの態様では、ｑは、１～１０の整数である。いくつかの態様において、ｑは２～５の整数である。いくつかの態様においては、ｑは３～４の整数である。いくつかの態様においては、Ｄ_１は、以下の式で表される：

第８の特定の態様（Ａ８）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表され、
式中、
ｍ１及びｍ３は、それぞれ独立して、２～４の整数であり；
ｍ２は、２～５の整数であり、
ｒ１は、２～６の整数であり、
ｒ２は、２～５の整数であり、かつ
残りの変数は、第７の特定の態様（Ａ７）で説明した通りである。

第９の特定の態様（Ａ９）では、第７または第８の特定の態様（Ａ７またはＡ８）に記載される免疫複合体について、Ａは、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｐｒｏ、またはＤ－Ａｌａ－ｔＢｕ－Ｇｌｙである。いくつかの態様において、第７または第８の特定の態様（Ａ７またはＡ８）に記載される免疫複合体について、Ａは、Ｌ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ｌ－Ａｌａである。

第１０の特定の態様（Ａ１０）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ａは、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｐｒｏ、またはＤ－Ａｌａ－ｔＢｕ－Ｇｌｙであり、かつ
Ｄ_１は、以下の式で表され、

残りの変数は、第７の特定の態様、第８の特定の態様、または第９の特定の態様（Ａ７、Ａ８、またはＡ９）で説明した通りである。いくつかの態様では、Ａは、Ｌ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ｌ－Ａｌａである。いくつかの態様では、Ｄ_１は以下の式で表される：

第１１の特定の態様（Ａ１１）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表され、
式中、Ｄ_１は、以下の式で表される

いくつかの態様では、Ｄ_１は以下の式で表される：

第１２の特定の態様（Ａ１２）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表され、
式中、
ＣＢＡは、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり、ここで、前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２～４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み、
ｑが、１または２であり、
Ｄ_１は、以下の式で表される。

いくつかの態様では、式（Ｉ－４）または（Ｉ－６）の免疫複合体について、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。

第１３の特定の態様（Ａ１３）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表され、
式中、
ＣＢＡは、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり、ここで、前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号２～４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；（ｂ）それぞれ配列番号７～９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；（ｃ）それぞれ配列番号１０～１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｄ）それぞれ配列番号１５～１７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み、
ｑは、１～１０の整数、例えば、１または１０であり、かつ
Ｄ_１は、以下の式で表される

いくつかの態様では、式（Ｉ－２）の免疫複合体について、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様において、式（Ｉ－２）の免疫複合体について、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

第１４の態様（Ａ１４）では、本明細書で提供される免疫複合体は、以下の構造式で表されるメイタンシノイド化合物ＤＭ２１Ｃ（Ｍａｌ－ＬＤＬ－ＤＭまたはＭａｌＣ５－ＬＤＬ－ＤＭまたは化合物１７ａとも呼ばれる）に結合されたバイパラトープ抗ＦＲα抗体を含み、

式中、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含み、Ｄ_１は、下記の式で表される。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の構造式で表され、

式中、
ＣＢＡは、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり、
ｑは１または２である。

いくつかの態様では、第１４の特定の態様（Ａ１４）の免疫複合体を含む組成物（例えば、医薬組成物）について、ＤＡＲは、１．５～２．２、１．７～２．２、または１．９～２．１の範囲にある。いくつかの態様では、ＤＡＲは、１．７、１．８、１．９、２．０または２．１である。

第１５の特定の態様（Ａ１５）では、本明細書で提供される免疫複合体は、γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）またはＮ－（γ－マレイミドブトリルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＧＭＢＳまたはｓＧＭＢＳ）リンカーを介して、以下の構造式：

で表されるメイタンシノイド化合物ＤＭ２１（ＤＭ２１Ｌ、ＬＤＬ－ＤＭ、ＤＭ２１Ｌ－Ｇ、または化合物１４ｃとも呼ばれる）に結合されたバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。

ＧＭＢＳ及びスルホ－ＧＭＢＳ（またはｓＧＭＢＳ）リンカーは当技術分野で知られており、以下の構造式で表すことができる。

式中、
ＣＢＡは、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬ、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨを含むバイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり、
ｑは、１～１０の整数、例えば、１または１０である。いくつかの態様において、ｑは２～５の整数である。いくつかの態様において、ｑは３～４の整数である。

いくつかの態様において、第１５の特定の態様（Ａ１５）の免疫複合体について、バイパラトープ抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

いくつかの態様では、第１５の特定の態様（Ａ１５）の免疫複合体を含む組成物（例えば、医薬組成物）について、ＤＡＲは、３．０～４．０、３．２～３．８、３．１～３．７、または３．４～３．７の範囲にある。いくつかの態様では、ＤＡＲは、３．２、３．３、３．４、３．５、３．５、３．７、または３．８である。いくつかの態様では、ＤＡＲは３．５である。

いくつかの態様では、リジンコンジュゲートを含む組成物について、ＤＡＲは、１．５～３．１の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは約２．０である。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号８０または８３、８１または８４、及び８２または８５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号８６または８９、８７または９０、及び８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたエリブリンメシル酸塩を含むことができる。エリブリンメシル酸塩は、カテプシンＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０、２～５、または４つのエリブリンメシル酸塩を含むことができる。

抗ＦＲα免疫複合体は、配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたエリブリンメシル酸塩を含むことができる。エリブリンメシル酸塩は、カテプシンＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０、２～５、または４つのエリブリンメシル酸塩を含むことができる。

抗ＦＲα免疫複合体は、配列番号１０３のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結されたエリブリンメシル酸塩を含むことができる。エリブリンメシル酸塩は、カテプシンＢリンカーを介して抗体またはその抗原結合フラグメントに結合し得る。免疫複合体は、１～１０、２～５、または４つのエリブリンメシル酸塩を含むことができる。

いくつかの態様では、抗ＦＲα免疫複合体は、ＭＯＲＡｂ－２０２である。ＭＯＲＡｂ－２０２は、カテプシンＢ切断可能なリンカーを介してエリブリンメシル酸塩にコンジュゲートしたファーレツズマブ（ＭＯＲＡｂ－００３）を含有する抗体薬剤コンジュゲートである。ＭＯＲＡｂ－２０２。ＭＯＲＡｂ－２０２は、米国公開出願第２０２０／０２９７８６０号に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

抗ＦＲα免疫複合体は、（ａ）それぞれ配列番号９１または９４、９２または９５、及び９３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号９６～９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結された３－アミノフェニルヘミアステリン（ＳＣ２０９）を含むことができる。抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＫａｂａｔまたはＫａｂａｔのＥＵ番号付けスキームに従うＨＣ－Ｆ４０４、ＨＣ－Ｙ１８０、及びＬＣ－Ｋ４２からなる群から選択される部位において１以上の非天然アミノ酸を含む抗体を含むことができる。免疫複合体は、ＳＣ２３９リンカー－細胞毒素を含み得る。免疫複合体は、１～１０、２～５、または４つのＳＣ２３９を含むことができる。

抗ＦＲα免疫複合体は、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに連結された３－アミノフェニルヘミアステリン（ＳＣ２０９）を含むことができる。抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＫａｂａｔまたはＫａｂａｔのＥＵ番号付けスキームに従うＨＣ－Ｆ４０４、ＨＣ－Ｙ１８０、及びＬＣ－Ｋ４２からなる群から選択される部位において１以上の非天然アミノ酸を含む抗体を含むことができる。免疫複合体は、ＳＣ２３９リンカー－細胞毒素を含み得る。免疫複合体は、１～１０、２～５、または４つのＳＣ２３９を含むことができる。

いくつかの態様では、抗ＦＲα免疫複合体は、ＳＴＲＯ－００２である。ＳＴＲＯ－００２は、切断可能な薬剤リンカー（ＳＣ２３９）にコンジュゲートした抗ＦｏｌＲａヒトＩｇＧ１抗体（ＳＰ８１６６）を含有する。ＳＴＲＯ－００２は、米国公開出願第２０１９／００８３６４１号に開示されており、これは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様では、第１の態様（Ａ１）、または第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、第１０、第１１、第１２、第１３、第１４、もしくは第１５の特定の態様（Ａ１－１、Ａ１－２、Ａ１－３、Ａ１－４、Ａ１－５、Ａ１－６、Ａ７、Ａ８、Ａ９、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１２、Ａ１３、Ａ１４、もしくはＡ１５）の免疫複合体を含む組成物（例えば、医薬組成物）については、組成物中の薬剤対抗体比（ＤＡＲ）としても知られる、抗体分子当たりの細胞毒性薬剤の平均数（すなわち、ｑの平均値）は、１．０～８．０の範囲内である。いくつかの態様においては、ＤＡＲは、１．０～５．０、１．０～４．０、１．５～４．０、２．０～４．０、２．５～４．０、１．０～３．４、１．０～３．０、３．０～４．０、３．１～３．５、３．１～３．７、３．４～３．６、１．５～２．５、２．０～２．５、１．７～２．３、または１．８～２．２の範囲にある。いくつかの態様では、ＤＡＲは、４．０未満、３．８未満、３．６未満、３．５未満、３．０未満、または２．５未満である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、３．１～３．７の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、３．１～３．４の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、３．３～３．７の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、３．５～３．９の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、または３．８である。いくつかの態様では、ＤＡＲは３．５である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、１．８～２．０の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、１．７～１．９の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、１．９～２．１の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、１．９、２．０または２．１である。いくつかの態様において、１つ以上のシステインチオール基を介してメイタンシノイド化合物に連結された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む免疫複合体について、ＤＡＲは、１．５～２．５、１．８～２．２、１．１～１．９、または１．９～２．１の範囲である。いくつかの態様では、ＤＡＲは、１．８、１．９、２．０または２．１である。

Ｂ．リンカー
当技術分野で知られている任意の適切なリンカーを、免疫複合体の調製に使用することができる。いくつかの態様において、リンカーは二官能性リンカーである。本明細書で使用する場合、「二官能性リンカー」という用語は、２つの反応性基を有し、一方は細胞結合剤と反応することができ、他方はメイタンシノイド化合物と反応して２つの部分を互いに結合することができる修飾剤を指す。このような二官能性架橋剤は、当該技術分野ではよく知られている（例えば、ＩｓａｌｍａｎｄＤｅｎｔｉｎＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎｃｈａｐｔｅｒ５，ｐ２１８－３６３，ＧｒｏｖｅｓＤｉｃｔｉｏｎａｒｉｅｓＩｎｃ．ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９９を参照）。例えば、チオエーテル結合を介した結合を可能にする二官能性架橋剤は、マレイミド基を導入するためのＮ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、またはヨードアセチル基を導入するためのＮ－スクシンイミジル－４－（ヨードアセチル）－アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）を含む。細胞結合剤にマレイミド基またはハロアセチル基を導入するその他の二官能性架橋剤は、当該技術分野で周知であり（米国特許公開第２００８／００５０３１０号、第２００５０１６９９３３号、ＰｉｅｒｃｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩｎｃ．Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ１１７，Ｒｏｃｋｌａｎｄ，ＩＬ６１１０５，ＵＳＡから入手可能）、これらに限定されないが、ビス－マレイミドポリエチレングリコール（ＢＭＰＥＯ）、ＢＭ（ＰＥＯ）_２、ＢＭ（ＰＥＯ）_３、Ｎ－（β－マレイミドプロピルオキシ）スクシンイミドエステル（ＢＭＰＳ）、γ－マレイミド酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）、ε－マレイミドカプロン酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）、５－マレイミド吉草酸ＮＨＳ、ＨＢＶＳ、Ｎ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシ－（６－アミドカプロエート）（ＳＭＣＣ（ＬＣ－ＳＭＣＣ）の「長鎖」類似体）、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）、４－（４－Ｎ－マレイミドフェニルヒドラジド）－酪酸ヒドラジドまたはＨＣｌ塩（ＭＰＢＨ）、Ｎ－スクシンイミジル－３－（ブロモアセトアミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）、Ｎ－スクシンイミジルヨードアセテート（ＳＩＡ）、κ－マレイミドウンデカン酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＫＭＵＡ）、Ｎ－スクシンイミジル４－（ｐ－マレイミドフェニル）－ブチレート（ＳＭＰＢ）、スクシンイミジル－６－（β－マレイミドプロピオナミド）ヘキサノエート（ＳＭＰＨ）、スクシンイミジル－（４－ビニルスルホニル）ベンゾエート（ＳＶＳＢ）、ジチオビス－マレイミドエタン（ＤＴＭＥ）、１，４－ビス－マレイミドブタン（ＢＭＢ）、１，４－ビスマレイミジル－２，３－ジヒドロキシブタン（ＢＭＤＢ）、ビス－マレイミドヘキサン（ＢＭＨ）、ビス－マレイミドエタン（ＢＭＯＥ）、スルホスクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（スルホ－ＳＭＣＣ）、スルホスクシンイミジル（４－ヨード－アセチル）アミノベンゾエート（スルホ－ＳＩＡＢ）、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＭＢＳ）、Ｎ－（γ－マレイミドブトリルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＧＭＢＳまたはｓＧＭＢＳ）、Ｎ－（ε－マレイミドカプロイルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＥＭＣＳ）、Ｎ－（κ－マレイミドウンデカノイルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＫＭＵＳ）、及びスルホスクシンイミジル４－（ｐ－マレイミドフェニル）ブチレート（スルホ－ＳＭＰＢ）を含む。

ヘテロ二官能性架橋剤は、２つの異なる反応性基を有する二官能性架橋剤である。アミン反応性Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド基（ＮＨＳ基）及びカルボニル反応性ヒドラジン基の両方を含むヘテロ二官能性架橋剤は、本明細書に記載の細胞傷害性化合物を抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントと結合させるために使用することもできる。このような市販のヘテロ二官能性架橋剤の例としては、スクシンイミジル６－ヒドラジノニコチンアミドアセトンヒドラゾン（ＳＡＮＨ）、スクシンイミジル４－ヒドラジドテレフタレート塩酸塩（ＳＨＴＨ）、及びスクシンイミジルヒドラジニウムニコチン酸塩酸塩（ＳＨＮＨ）が挙げられる。酸に不安定な結合を有するコンジュゲートは、本開示のヒドラジン含有ベンゾジアゼピン誘導体を使用して調製することもできる。使用可能な二官能性架橋剤の例としては、スクシンイミジル－ｐ－ホルミルベンゾエート（ＳＦＢ）及びスクシンイミジル－ｐ－ホルミルフェノキシアセテート（ＳＦＰＡ）が挙げられる。

ジスルフィド結合を介して細胞結合剤と細胞傷害性化合物との結合を可能にする二官能性架橋剤は、当技術分野において公知であり、ジチオピリジル基を導入するためのＮ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、Ｎ－スクシンイミジル－４－（２－ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）、Ｎ－スクシンイミジル－４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）、Ｎ－スクシンイミジル－４－（２－ピリジルジチオ）２－スルホブタノエート（スルホ－ＳＰＤＢまたはｓＳＰＤＢ）を含む。ジスルフィド基を導入するために使用できるその他の二官能性架橋剤は、当該技術分野で公知であり、米国特許第６，９１３，７４８号、同第６，７１６，８２１号、ならびに米国特許公開第２００９／０２７４７１３号及び同第２０１０／０１２９３１４号に開示されており、それぞれ、その内容全体を参照により本明細書に援用するものとする。あるいは、チオール基を導入する２－イミノチオラン、ホモシステインチオラクトンまたはＳ－アセチルコハク酸無水物などの架橋剤を使用することもできる。

いくつかの態様において、リンカーはカテプシン－Ｂリンカーである。

Ｃ．細胞傷害性剤
免疫複合体における細胞傷害性剤は、細胞の死をもたらすか、細胞死を誘導するか、または何らかの方法で細胞生存率を低下させる任意の化合物であってもよく（例えば、チューブリン作用剤、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ架橋剤、ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤）、例えば、メイタンシノイド及びメイタンシノイド類似体、ベンゾジアゼピン、インドリノベンゾジアゼピン、カンプトテシン、タキソイド、ＣＣ－１０６５及びＣＣ－１０６５類似体、デュオカルマイシン及びデュオカルマイシン類似体、カリケアマイシンなどのエンジイン、ドラスタチン及びオーリスタチンを含むドラスタチン類似体、トマイマイシン誘導体、レプトマイシン誘導体、メトトレキサート、シスプラチン、カルボプラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロランブシル及びモルホリノドキソルビシンを含む。いくつかの態様では、細胞傷害性剤は、メイタンシノイド及びメイタンシノイド類似体である。

適切なメイタンシノイドの例としては、メイタンシノール及びメイタンシノール類似体のエステルが挙げられる。マイタンシノール及びメイタンシノール類似体と同様に、微小管形成を阻害し、哺乳動物細胞に対して毒性が高い任意の薬剤が含まれる。

例示的な細胞傷害性剤は、ＷＯ２０１８／１６０５３９号及びＷＯ２０１１／１０６５２８号に以前に記載されており、これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書で提供される免疫複合体は、以下の式：

で表されるメイタンシノイド化合物、またはその薬学的に許容される塩を含み得、式中、
Ｌ_２ ^’は、以下の構造式：

で表され、
式中、
Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’は、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、ハロゲン、－Ｏ－（Ｃ_１－４アルキル）、－ＳＯ_３Ｈ、－ＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋、または－ＯＨ、ハロゲン、－ＳＯ_３Ｈ、もしくはＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋で置換されていてもよいＣ_１－４アルキルであり、ここで、Ｒ_４０、Ｒ_４１、及びＲ_４２はそれぞれ独立してＨまたはＣ_１－４アルキルを表し、
ｌ及びｋは、それぞれ独立して、１～１０の整数であり、
Ｊ_ＣＢ ^’は、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨまたは－ＣＯＥであり、ここで、－ＣＯＥは反応性エステルであり、
Ａは、アミノ酸、または２～２０個のアミノ酸を含むペプチドであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、またはＣ_１－３アルキルであり、
Ｌ_１は、以下の式で表され、
－ＣＲ^３Ｒ^４－（ＣＨ_２）_１－８－Ｃ（＝Ｏ）－
式中、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立して、ＨまたはＭｅであり、Ｌ_１中の－Ｃ（＝Ｏ）－部分は、Ｄに接続されており、
Ｄは、以下の式で表され、

かつ
ｑは、１～２０の整数である。いくつかの態様では、ｑは、１～１０の整数である。いくつかの態様において、ｑは２～５の整数である。いくつかの態様において、ｑは３～４の整数である。

いくつかの態様では、メイタンシノイドは、以下の式：

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ａ’は、アミノ酸、または２～２０個のアミノ酸を含むペプチド（すなわち、Ａ－ＮＨ_２）であり、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、またはＣ_１－３アルキルであり、
Ｌ_１は、－ＣＲ^３Ｒ^４－（ＣＨ_２）_１－８－Ｃ（＝Ｏ）－であり、Ｒ^３及びＲ^４はそれぞれ独立してＨまたはＭｅであり、
Ｄは、以下の式で表され、

いくつかの態様では、メイタンシノイドは、以下の式：

で表されるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’は、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、ハロゲン、－Ｏ－（Ｃ_１－４アルキル）、－ＳＯ_３Ｈ、－ＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋、または－ＯＨ、ハロゲン、ＳＯ_３Ｈ、もしくはＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋で置換されていてもよいＣ_１－４アルキルであり、ここで、Ｒ_４０、Ｒ_４１、及びＲ_４２はそれぞれ独立してＨまたはＣ_１－４アルキルを表し、
ｋは、１～１０の整数であり、
Ａは、アミノ酸残基、または２～２０個のアミノ酸残基を含むペプチドであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、またはＣ_１－３アルキルであり、
Ｌ_１は、－ＣＲ^３Ｒ^４－（ＣＨ_２）_１－８－Ｃ（＝Ｏ）－であり、Ｒ^３及びＲ^４はそれぞれ独立してＨまたはＭｅであり、
Ｄは、以下の式で表され、

いくつかの態様では、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のメイタンシノイド化合物について、変数は、第１の態様（Ａ１）、または第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、第１０、第１１、第１２、第１３、第１４、もしくは第１５の特定の態様（Ａ１－１、Ａ１－２、Ａ１－３、Ａ１－４、Ａ１－５、Ａ１－６、Ａ７、Ａ８、Ａ９、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１２、Ａ１３、Ａ１４、またはＡ１５）に記載の通りである。

いくつかの態様では、メイタンシノイド化合物は、以下の式：

で表される。

適切なメイタンシノールエステルの追加の例としては、修飾された芳香環を有するもの、及び他の位置に修飾を有するものが挙げられる。このような適切なメイタンシノイドは、米国特許第４，４２４，２１９号、第４，２５６，７４６号、第４，２９４，７５７号、第４，３０７，０１６号、第４，３１３，９４６号、第４，３１５，９２９号、第４，３３１，５９８号、第４，３６１，６５０号、第４，３６２，６６３号、第４，３６４，８６６号、第４，４５０，２５４号、第４，３２２，３４８号、第４，３７１，５３３号、第５，２０８，０２０号、第５，４１６，０６４号、第５，４７５，０９２号、第５，５８５，４９９号、第５，８４６，５４５号、第６，３３３，４１０号、第７，２７６，４９７号、及び第７，４７３，７９６号に記載されている。さらに、そのような抗体－メイタンシノイドコンジュゲートを製造するためのいくつかの説明は、米国特許第６，３３３，４１０号、同第６，４４１，１６３号、同第６，７１６，８２１号、及び同第７，３６８，５６５号に提供されており、これらの文献のそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に援用される。

いくつかの態様では、免疫複合体は、Ｎ^２’－デアセチル－Ｎ^２’－（３－メルカプト－１－オキソプロピル）－メイタンシン（ＤＭ１）、Ｎ^２’－デアセチル－Ｎ－^２’（４－メルカプト－１－オキソペンチル）－メイタンシン（ＤＭ３と呼ばれる）、Ｎ^２’－デアセチル－Ｎ^２’－（４－メルカプト－４－メチル－１－オキソペンチル）メイタンシン（ＤＭ４）を含み、両方ともＰＣＴ出願公開ＷＯ２０１１／１０６５２８Ａ１号及び米国特許第８，５５７，９６６Ｂ２号に以前に記載されており、これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様では、免疫複合体は、３－アミノフェニルヘミアスタリン（ＳＣ２０９）を含む。

いくつかの態様では、免疫複合体は、エリブリンメシル酸塩を含む。

Ｄ．薬剤コンジュゲーション
本明細書に記載の細胞傷害性剤（例えば、メイタンシノイド）に共有結合した抗ＦＲα結合抗体またはその抗原結合フラグメントを含む免疫複合体は、当技術分野で知られている任意の適切な方法に従って調製することができる。

いくつかの態様では、第１の態様（Ａ１）の免疫複合体は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを、式（ＩＩ）のメイタンシノイド化合物と反応させるステップを含む第１の方法によって調製することができる。

いくつかの態様では、第１の態様（Ａ１）の免疫複合体は、
（ａ）式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のメイタンシノイド化合物を本明細書に記載のリンカー化合物と反応させて、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントに共有結合し得るアミン反応性基またはチオール反応性基が結合した細胞傷害性剤－メイタンシノイド化合物（例えば、式（ＩＩ）の化合物）を形成するステップ、及び
（ｂ）抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントをメイタンシノイドリンカー化合物と反応させて免疫複合体を形成するステップを含む第２の方法によって調製することができる。

いくつかの態様では、第１の態様（Ａ１）の免疫複合体は、
（ａ）抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを本明細書に記載されるリンカー化合物と反応させて、式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のメイタンシノイド化合物に共有結合し得るアミン反応性基またはチオール反応性基が結合した修飾された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを形成するステップ、及び
（ｂ）修飾された抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のメイタンシノイド化合物と反応させて免疫複合体を形成するステップを含む第３の方法によって調製することができる。

いくつかの態様において、上記の第２、第３、または第４の方法について、リンカー化合物は、式（ａ１Ｌ）～（ａ１０Ｌ）：

のいずれか１つで表され、
式中、Ｘは、ハロゲン、Ｊ_Ｄ－ＳＨ、または－ＳＳＲ^ｄであり、Ｒ^ｄは、フェニル、ニトロフェニル、ジニトロフェニル、カルボキシニトロフェニル、ピリジル、またはニトロピリジルであり、Ｒ^ｇは、アルキルであり、Ｕは、－ＨまたはＳＯ_３Ｈまたはその薬学的に許容される塩である。

いくつかの態様において、リンカー化合物は、式（ａ９Ｌ）で表されるＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳ（またはｓＧＭＢＳ）であり、式中、Ｕは、－ＨまたはＳＯ_３Ｈまたはその薬学的に許容される塩である。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表され、免疫複合体は、上記の第２、第３、または第４の方法によって調製され、ここで、リンカー化合物は、式（ａ９Ｌ）で表されるＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳであり、式中、Ｕは、－ＨまたはＳＯ_３Ｈまたはその薬学的に許容される塩であり、メイタンシノイド化合物は、上記式（Ｄ－１）で表される。いくつかの態様では、式（Ｉ－１）の免疫複合体は、式（Ｄ－１）のメイタンシノイド化合物をリンカー化合物ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳと反応させてメイタンシノイドリンカー化合物を形成し、次いで、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントをメイタンシノイドリンカー化合物と反応させることによって調製される。いくつかの態様では、メイタンシノイドリンカー化合物は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントと反応する前に精製されない。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表され、免疫複合体は、上記の第２、第３、または第４の方法によって調製されることができ、ここで、リンカー化合物は、式（ａ９Ｌ）で表されるＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳであり、式中、Ｕは、－ＨまたはＳＯ_３Ｈまたはその薬学的に許容される塩であり、メイタンシノイド化合物は、上記式（Ｄ－２）で表される。いくつかの態様では、式（Ｉ－２）の免疫複合体は、式（Ｄ－２）のメイタンシノイド化合物をリンカー化合物ＧＭＢＳまたはスルホ－ＧＭＢＳと反応させてメイタンシノイドリンカー化合物を形成し、次いで、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントをメイタンシノイドリンカー化合物と反応させることによって調製される。いくつかの態様では、メイタンシノイドリンカー化合物は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントと反応する前に精製されない。いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表され、免疫複合体は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを上記の式（Ｄ－３）のメイタンシノイド化合物と反応させることにより、上記の第１の方法に従って調製される。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表され、免疫複合体は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを上記の式（Ｄ－４）のメイタンシノイド化合物と反応させることにより、上記の第１の方法に従って調製される。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表され、免疫複合体は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを上記の式（Ｄ－５）のメイタンシノイド化合物と反応させることにより、上記の第１の方法に従って調製される。

いくつかの態様では、免疫複合体は、以下の式：

で表され、免疫複合体は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを上記の式（Ｄ－６）のメイタンシノイド化合物と反応させることにより、上記の第１の方法に従って調製される。

いくつかの態様では、上記で開示された式Ｉ－３～Ｉ－６によって表される免疫複合体は、２０１９年３月２１日に出願された米国仮出願第６２／８２１，７０７号及び関連する米国特許出願第１６／８２５，１２７号に記載されている方法に従って調製される。

いくつかの態様では、上記のいずれかの方法によって調製された免疫複合体は、精製ステップに供される。この点に関して、免疫複合体は、接線流ろ過（ＴＦＦ）、非吸着クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、吸着ろ過、選択的沈殿、または任意の他の適切な精製プロセス、ならびにそれらの組み合わせを使用して、混合物の他の成分から精製することができる。

いくつかの態様では、免疫複合体は、単一の精製ステップ（例えば、ＴＦＦ）を用いて精製される。いくつかの態様では、複合体は、単一の精製ステップ（例えば、ＴＦＦ）を用いて精製され、適切な製剤に交換される。いくつかの態様では、免疫複合体は、２つの連続した精製ステップを用いて精製される。例えば、免疫複合体は、最初に選択的沈殿、吸着ろ過、吸着クロマトグラフィーまたは非吸着クロマトグラフィーによって精製され、次いでＴＦＦで精製され得る。当業者は、免疫複合体を精製することにより、細胞傷害性剤に化学的に結合された細胞結合剤を含む安定なコンジュゲートの単離が可能になることを理解するであろう。

精製には、ペリコン型システム（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｅｒｉｃａ，Ｍａｓｓ．）、サルトコンカセット型システム（ＳａｒｔｏｒｉｕｓＡＧ，Ｅｄｇｅｗｏｏｄ，Ｎ．Ｙ．）、及びセントラセット型システム（ＰａｌｌＣｏｒｐ．，ＥａｓｔＨｉｌｌｓ，Ｎ．Ｙ．）など、任意の適切なＴＦＦシステムを利用できる。

任意の適切な吸着クロマトグラフィー樹脂を精製に利用することができる。吸着クロマトグラフィー樹脂としては、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、疎水性電荷誘導クロマトグラフィー（ＨＣＩＣ）、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）、イオン交換クロマトグラフィー、混合モードイオン交換クロマトグラフィー、固定化金属アフィニティクロマトグラフィー（ＩＭＡＣ）、色素リガンドクロマトグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、及びそれらの組み合わせが挙げられる。適切なヒドロキシアパタイト樹脂の例としては、セラミックヒドロキシアパタイト（ＣＨＴタイプＩ及びタイプＩＩ、Ｂｉｏ－ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃａｌｉｆ．）、ＨＡウルトロゲルヒドロキシアパタイト（ＰａｌｌＣｏｒｐ．，ＥａｓｔＨｉｌｌｓ，Ｎ．Ｙ．）、及びセラミックフルオロアパタイト（ＣＦＴタイプＩ及びタイプＩＩ、Ｂｉｏ－ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃａｌｉｆ．）が挙げられる。適切なＨＣＩＣ樹脂の一例は、ＭＥＰＨｙｐｅｒｃｅｌ樹脂（ＰａｌｌＣｏｒｐ．，ＥａｓｔＨｉｌｌｓ，Ｎ．Ｙ．）である。適切なＨＩＣ樹脂の例としては、ブチル－セファロース、ヘキシル－セファロース、フェニル－セファロース、及びオクチルセファロース樹脂（すべてＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）、ならびにＭａｃｒｏ－ｐｒｅｐメチル樹脂及びＭａｃｒｏ－Ｐｒｅｐｔ－ブチル樹脂（ＢｉｏｒａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃａｌｉｆ）が挙げられる。適切なイオン交換樹脂の例としては、ＳＰ－セファロース、ＣＭ－セファロース、及びＱ－セファロース樹脂（すべてＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）、ならびにＵｎｏｓｐｈｅｒｅＳ樹脂（Ｂｉｏ－ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃａｌｉｆ．）が挙げられる。適切な混合モードイオン交換体の例としては、ＢａｋｅｒｂｏｎｄＡＢｘ樹脂（ＪＴＢａｋｅｒ，ＰｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇＮ．Ｊ．）が挙げられる。適切なＩＭＡＣ樹脂の例としては、キレート化セファロース樹脂（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）及びＰｒｏｆｉｎｉｔｙＩＭＡＣ樹脂（Ｂｉｏ－ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃａｌｉｆ．）が挙げられる。適切な色素リガンド樹脂の例としては、青色セファロース樹脂（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）及びアフィゲル青色樹脂（Ｂｉｏ－ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃａｌｉｆ．）が挙げられる。適切なアフィニティー樹脂の例としては、プロテインＡセファロース樹脂（例えば、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）（ここで、細胞結合剤は抗体である）及びレクチンアフィニティー樹脂（例えば、レンチルレクチンセファロース樹脂（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．））（ここで、細胞結合剤は適切なレクチン結合部位を有している）が挙げられる。あるいは、細胞結合剤に特異的な抗体を使用することができる。このような抗体は、例えば、セファロース４高速流動樹脂（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）に固定化することができる。適切な逆相樹脂の例としては、Ｃ４、Ｃ８、及びＣ１８樹脂（ＧｒａｃｅＶｙｄａｃ，Ｈｅｓｐｅｒｉａ，Ｃａｌｉｆ．）が挙げられる。

任意の適切な非吸着クロマトグラフィー樹脂を精製に利用することができる。適切な非吸着クロマトグラフィー樹脂の例としては、限定されないが、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ－２５、Ｇ－５０、Ｇ－１００、ＳＥＰＨＡＣＲＹＬ（商標）樹脂（例えば、Ｓ－２００及びＳ－３００）、ＳＵＰＥＲＤＥＸ（商標）樹脂（例えば、ＳＵＰＥＲＤＥＸ（登録商標）７５及びＳＵＰＥＲＤＥＸ（商標）２００）、ＢＩＯ－ＧＥＬ（登録商標）（例えば、Ｐ－６、Ｐ－１０、Ｐ－３０、Ｐ－６０、及びＰ－１００）、及び当業者に知られている他の樹脂が挙げられる。

ＶＩ．組成物及びキット
本明細書において、生理学的に許容される担体、賦形剤または安定剤において所望の純度を有する、本明細書に記載の抗ＦＲα活性剤（例えば、免疫複合体、抗体、またはその抗原結合フラグメント）を含む組成物が提供される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）。許容される担体、賦形剤、または安定剤は、使用される投与量及び濃度でレシピエントに対して無毒性である。

医薬組成物は、対象への特定の投与経路のために製剤化することができる。例えば、医薬組成物は、非経口投与、例えば、静脈内投与のために製剤化することができる。インビボ投与に使用される組成物は、滅菌であり得る。これは、例えば、滅菌ろ過膜を通すろ過によって容易に達成される。

本明細書に記載の医薬組成物は、いくつかの態様では、薬剤として使用するためのものである。本明細書に記載の医薬組成物は、がんなどの状態の治療に有用であり得る。本明細書に記載のように治療できるがんの例としては、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病が含まれるが、これらに限定されない。かかるがんのより特定な例としては、卵管癌、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、消化器癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、小腸癌、子宮内膜または子宮癌腫、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌腫、及び様々な型の頭頸部癌が挙げられる。

本明細書において提供される医薬組成物は、抗ＦＲα免疫複合体を含むことができ、医薬組成物（医薬組成物中の免疫複合体）は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント１つあたり平均１～２０個の薬剤を有することができる。いくつかの態様では、医薬組成物は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均１～１０個の薬剤を含む。いくつかの態様では、医薬組成物は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均２～５個の薬剤を含む。いくつかの態様では、医薬組成物は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均３～４個の薬剤を含む。いくつかの態様では、医薬組成物は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり約３．５個の薬剤を含む。

また、本明細書において、可溶性ＦＲα及び抗ＦＲα活性剤を検出するための試薬、または可溶性ＦＲαもしくは高レベルの可溶性ＦＲαが検出された場合に抗ＦＲα活性剤を投与するための説明書を含むキットも提供される。可溶性ＦＲαを検出するための試薬は、（ａ）ＦＲαに結合する免疫捕捉試薬となり得る第１の試薬、及び（ｂ）捕捉されたＦＲαをペプチドに消化し得る消化試薬を含むことができる。本明細書の他の箇所で提供されるように、免疫捕捉試薬は、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり得、例えば、ＦＲ１－９抗体またはその抗原結合フラグメント、ＦＲ１－１３抗体またはその抗原結合フラグメント、ＦＲ１－９またはＦＲ１－１３抗体のＣＤＲを含む抗体またはその抗原結合フラグメント、あるいはＦＲ１－９またはＦＲ１－１３抗体のＶＨ及び／またはＶＬを含む抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。

このキットは、ＦＲαに由来する少なくとも１つのペプチドをさらに含むことができる。このペプチドは、液体クロマトグラフィー－質量分析における標準として使用することができる。いくつかの態様では、キットは、配列番号６８の配列を含むペプチドを含む。いくつかの態様では、キットは、配列番号６９の配列を含むペプチドを含む。いくつかの態様では、キットは、配列番号７０の配列を含むペプチドを含む。いくつかの態様では、キットは、配列番号７１の配列を含むペプチドを含む。いくつかの態様では、キットは、液体クロマトグラフィー－質量分析における標準として使用することができる４つのシグネチャペプチドを含む。いくつかの態様では、４つのシグネチャペプチドは、１）配列番号６８の配列を含むペプチド；２）配列番号６９の配列を含むペプチド；３）配列番号７０の配列を含むペプチド；及び４）配列番号７１の配列を含むペプチドからなる。

このキットは、捕捉試薬用の固体支持体をさらに含むことができ、これは別個の要素として提供されていてもよく、またはこれに捕捉試薬がすでに固定化されていてもよい。したがって、キットにおける捕捉抗体またはその抗原結合フラグメントは、固体支持体上に固定化することができ、あるいはキットに含まれるか、またはキットとは別個に提供されるかかる支持体上に固定化することができる。いくつかの態様では、固体支持体は、質量分析免疫アッセイ（ＭＳＩＡ）マイクロカラムを含む。いくつかの態様では、固体支持体は磁気ビーズを含む。いくつかの態様において、固体支持体はストレプトアビジンで被覆されている。いくつかの態様では、免疫捕捉試薬は、ビオチン－ストレプトアビジン相互作用を介して固体支持体に結合される。

ＶＩＩ．治療するがん
本明細書で提供されるように、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有する患者におけるがんは、抗ＦＲα活性剤を使用して治療することができる。特定の態様において、がんは、以下に限定されるものではないが、卵管癌、がん腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病を含むがんである。かかるがんのより特定な例としては、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、消化器癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ））、結腸癌、結腸直腸癌、小腸癌、子宮内膜または子宮癌腫、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌腫、及び様々な型の頭頸部癌が挙げられる。

このようながんのより具体的な例としては、卵巣癌、上皮性卵巣癌、卵巣原発性腹膜癌、または卵管癌が挙げられる。いくつかの実施形態において、がんは卵巣癌である。いくつかの態様において、卵巣癌は上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）である。いくつかの態様において、卵巣癌（例えば、ＥＯＣ）は、プラチナ耐性、再発性、または不応性である。いくつかの態様において、がんは腹膜癌である。いくつかの態様において、腹膜癌は、原発性腹膜癌である。いくつかの態様において、がんは子宮内膜癌である。いくつかの態様において、子宮内膜癌は漿液性子宮内膜癌である。いくつかの実施形態において、がんは肺癌である。いくつかの態様において、肺癌は非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。いくつかの態様において、肺癌は、腺癌または細気管支肺胞癌である。いくつかの態様において、がんは子宮癌である。

いくつかの実施形態では、がんはプラチナ不応性である。いくつかの実施形態では、がんは原発性プラチナ不応性である。いくつかの態様において、がんはプラチナ感受性である。

いくつかの態様において、がんは、転移性がんまたは進行性がんである。

特定の態様では、ＩＭＧＮ１５１で治療するがんは、ＩＭＧＮ８５３での治療に対して耐性である。

本明細書で実証されるように、可溶性ＦＲαレベルは、ＦＲα標的療法に対する応答性の独立した予測因子となり得る（例えば、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって測定される膜ＦＲαスコアに依存しない）（例えば、実施例２及び３を参照）。したがって、本明細書に提供されるいくつかの態様では、腫瘍に関してＩＨＣスコアを得ていない。ＩＨＣによる膜ＦＲαの検出方法は当技術分野で知られており、例えば、国際公開第２０１２／１３５６７５号及び国際公開第２０１５／０３１８１５号に開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

ＦＲαは、抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントを用いてＩＨＣによって検出することができる。ＩＨＣによるＦＲαの検出に有用な抗ＦＲα抗体及びその抗原結合フラグメントは、ＩＨＣＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントと呼ぶことができる。ＩＨＣＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、例えば、上記のセクションＩＩに記載の２．１抗体を含む。ＩＨＣＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、例えば、２．１の６つのＣＤＲ（すなわち、ＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３）、あるいは２．１のＶＨ及び／またはＶＬを含む抗体及びその抗原結合フラグメントを含む。

いくつかの態様では、ＩＨＣＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号３０～３２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号３３～３５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの実施形態では、ＩＨＣＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）、及び／または（ｂ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む。

いくつかの実施形態では、ＩＨＣＦＲα検出抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号５３のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）、及び／または（ｂ）配列番号５９のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＣＬ）を含む。

いくつかの態様では、ＩＨＣによって測定された膜ＦＲαタンパク質は、定義されたスコアを示す対照（例えば、校正済み対照）との比較により、染色強度スコア及び／または染色均一性スコアが与えられる（例えば、強度がレベル３＋校正済み対照と同等である場合には、３＋の強度スコアが試験サンプルに与えられ、または、強度がレベル２＋校正済み対照と同等である場合には、２＋（中程度）の強度が試験サンプルに与えられる）。染色の均一性は、染色された細胞の割合に基づく。

いくつかの態様では、患者から得られた腫瘍サンプルには、パーセント染色（ＰＳ）２＋染色強度を有する細胞が少なくとも７５％含まれていない。いくつかの態様では、患者から得られた腫瘍サンプルには、ＰＳ２＋強度を有する細胞が少なくとも５０％含まれていない。いくつかの態様では、ＩＨＣ染色及び強度は、投与前に決定されている。本明細書で実証されるように、そのような患者は、抗ＦＲα活性剤（例えば、免疫複合体）で正常に治療することができる。これは、可溶性ＦＲαが、膜ＦＲα ＩＨＣスコアとは無関係に、そのような活性剤の有効性を予測するからである。

いくつかの態様では、患者から得られた腫瘍サンプルには、少なくとも７５％の細胞がＰＳ２＋染色強度を有する。いくつかの態様では、患者から得られた腫瘍サンプルには、少なくとも５０％の細胞がＰＳ２＋染色強度を有する。いくつかの態様では、ＩＨＣ染色及び強度は、投与前に決定されている。

一部の態様では、対象はヒトである。

抗ＦＲα活性剤の投与は、静脈内投与を含む非経口投与とすることができる。

状態の治療に有効な抗ＦＲα活性剤（例えば、免疫複合体、抗体もしくはその抗原結合フラグメント）または組成物の量は、疾患の性質に依存することになる。組成物に使用されるべき正確な用量は、投与経路及び疾患の重症度にも依存することになる。

本開示の態様は、本開示の特定の抗体の詳細な調製、及び本開示の抗体を使用するための方法を詳細に記述する、下記の非限定的な例への参照により、さらに定義されることが可能である。材料及び方法の両方への、多くの修正形態が本開示の範囲から逸脱することなく実施されることが可能であることが当業者に明らかである。

本明細書に記載される実施例及び態様が例証のみを目的とするものであり、それを考慮した様々な修正または変更が当業者に示唆され、本出願の趣旨及び範囲内に含まれるべきであることが理解される。

実施例１．可溶性ＦＲαレベルがＦＲα標的療法の有効性を予測する
可溶性ＦＲαのレベルを、抗ＦＲα免疫複合体ＩＭＧＮ８５３（ミルベツキシマブソラブタンシン）の投与を含む第３相臨床試験（ＦＯＲＷＡＲＤＩ）に参加した患者において検出した。この試験は、プラチナ耐性進行上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、原発性腹膜癌、及び／または卵管癌を有する女性を対象に、ＩＭＧＮ８５３の安全性及び有効性を、選択された単剤化学療法（治験責任医師選択（ＩＣ））の安全性及び有効性と比較するように設計された。参加した患者はすべて、１０×免疫組織化学（ＩＨＣ）で決定されるようにＦＲα陽性腫瘍を有していた。（これらの患者のＩＨＣスコアを、その後ＰＳ２スコアを使用して再評価した。）可溶性ＦＲαレベルは、可溶性ＦＲαを免疫捕捉し、可溶性ＦＲαを消化し、消化された可溶性ＦＲαに対して液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ／ＭＳ）を行うことによって測定した（米国公開出願第２０２０／０２８４８１０号に開示されており、これは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。患者における可溶性ＦＲαレベルの分布を図１に示す。

患者はランダムに割り付けられ、ＩＭＧＮ８５３を６ｍｇ／ｋｇの調整された理想体重（ＡＩＢＷ）で３週間に１回の投与（Ｑ３Ｗ）、またはパクリタキセル（週に８０ｍｇ／ｍ^２）、ペグ化されたリポソームドキソルビシン（４０ｍｇ／ｍ^２、４週間に１回（Ｑ４Ｗ））の投与、またはトポテカン（１日目、８日目、及び１５日目に４ｍｇ／ｍ^２（Ｑ４Ｗ）もしくは１～５日目に１．２５ｍｇ／ｍ^２（Ｑ３Ｗ））の投与のいずれかで治療された。ランダム化日から死亡日まで測定した無増悪生存期間（ＰＦＳ）、ＲＥＣＩＳＴ１．１による客観的応答率（ＯＲＲ）、及び全体生存率（ＯＳ）を最長２年間測定した。ＰＦＳ及びＯＲＲは、双方とも盲検独立レビュー委員会（ＢＩＲＣ）及び（ＩＮＶ）によって測定された。

患者を、可溶性ＦＲαのレベルに基づいて４つの四分位数に分けた。第１の四分位数「Ｑ１」の患者は、可溶性ＦＲαレベルが最も低く、第４の四分位数「Ｑ４」の患者は、可溶性ＦＲαレベルが最も高かった。これらの四分位数のそれぞれにおけるＩＭＧＮ８５３治療の有効性が決定された。結果を図２に示す。Ｑ４におけるＰＦＳ期間の中央値は、ＢＩＲＣによって測定されたＱ１におけるＰＦＳ期間の中央値よりも２．６か月長く（５．５か月対２．９か月）、ＩＮＶによって測定されたものよりも３．９か月長かった（６．９か月対３．０か月）。さらに、全体応答率は、ＢＩＲＣによるＱ１でのわずか１２％に対し、Ｑ４では３３％であり、ＩＮＶによるＱ１でのわずか１４％に対し、Ｑ４では４２％であった。

ＩＭＧＮ８５３及び化学療法の相対有効性も四分位のそれぞれで比較した（図３）。より高いレベルの可溶性ＦＲαを有する２つの四分位数（Ｑ３及びＱ４）の患者は、ＩＭＧＮ８５３で治療した場合、化学療法で治療した場合よりもＰＦＳ期間が長かった。対照的に、より低いレベルの可溶性ＦＲαを有する２つの四分位数（Ｑ１及びＱ２）の患者は、ＩＭＧＮ８５３で治療した場合よりも、化学療法で治療した場合のＰＦＳ期間が長かった。

これらの結果は、驚くべきことに、より高いレベルの可溶性ＦＲαが、ＩＭＧＮ８５３に対する応答（ＰＦＳ及びＯＲＲ）の改善と関連していることを示している。したがって、患者の可溶性ＦＲαレベルと標的可溶性ＦＲαレベルとの比較は、患者のがんが抗ＦＲα活性剤に応答する可能性の独立した予測因子として使用することができる。患者の可溶性ＦＲαレベルが標的レベル以上である場合は、患者のがんがＩＭＧＮ８５３やＩＭＧＮ１５１などの抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高いことを示す。

実施例２．可溶性ＦＲαレベルは、膜ＦＲα ＩＨＣレベルと有意に相関しなかった
腫瘍中のＦＲαのＩＨＣレベルの増加は、ＩＭＧＮ８５３に対する応答性の増加に関連していることが以前に示されていた。したがって、ＩＨＣで測定した場合の可溶性ＦＲαのレベルと膜ＦＲαの腫瘍レベルとの関係を調べた。図４は、可溶性ＦＲαレベルの各四分位数においてＩＨＣによって測定した低い（２＋強度以上のＦＲα膜染色を有する細胞が５０％未満）、中程度（２＋強度以上のＦＲα膜染色を有する細胞が５０～７４％）、及び高い（２＋強度以上のＦＲα膜染色を有する細胞が７５％以上）膜ＦＲαを有する患者の割合を示す。その結果は、可溶性ＦＲα及びＩＨＣによって測定した膜ＦＲαの腫瘍レベルが、有意に相関しなかったことを証明している。例えば、可溶性ＦＲαの最も高い四分位数（Ｑ４）の患者は、ＩＨＣによって測定した場合に、低、中、または高い膜ＦＲαを有し得た（図９Ａ）。同様に、可溶性ＦＲαの最も低い四分位数（Ｑ１）の患者も、ＩＨＣによって測定した場合に、低、中、または高い膜ＦＲαを有し得た（図９Ａ）。同様の分析をより大きな患者群で行い、可溶性ＦＲαの最も高い四分位数（Ｑ４）の患者は、ＩＨＣによる測定でＰＳ２０～２４、ＰＳ２２５～４９、ＰＳ２５０～７４、またはＰＳ２≧７５の膜ＦＲαを有し得たことが確認された（図９Ｂ）。同様に、可溶性ＦＲαの最も低い四分位数（Ｑ１及びＱ２）の患者も、ＩＨＣによって測定した場合に、ＰＳ２０～２４、ＰＳ２２５～４９、ＰＳ２５０～７４、またはＰＳ２≧７５の膜ＦＲαを有し得た（図９Ｂ）。

さらに、ＰＳ２染色を用いた高いＩＨＣスコア（２＋強度以上のＦＲα膜染色を有する細胞が７５％以上）を有しないが、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベル（例えば、Ｑ３またはＱ４中の可溶性ＦＲαレベル）を有するＩＭＧＮ８５３で治療した患者では、部分応答及び／または完全応答（ＢＩＲＣ及び／またはＩＮＶによって測定）が観察された。

したがって、可溶性ＦＲαレベルは、ＦＲα標的療法に対する応答性の独立した予測因子を表す。

実施例３．可溶性ＦＲαの分布は、ＦＯＲＷＡＲＤＩ試験及びＭＩＲＡＳＯＬ試験において類似しており、可溶性ＦＲα血清濃度は、ＩＨＣＦＲαスコアと有意に相関しない
可溶性ＦＲαのレベルは、ＩＭＧＮ８５３を用いた第３相臨床試験（ＭＩＲＳＡＳＯＬ）についてスクリーニングされた患者において検出された。この試験は、プラチナ耐性進行上皮性卵巣癌（ＥＯＣ）、原発性腹膜癌、及び／または卵管癌を有する女性を対象に、ＩＭＧＮ８５３の投与を受けるようランダム化された患者の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を、選択された単剤化学療法（治験責任医師選択（ＩＣ））の安全性及び有効性と比較するように設計された。血清サンプルを、ＭＩＲＡＳＯＬについてスクリーニングした患者から採取し、患者が研究に参加しているかどうかに関係なく、ＬＣ－ＭＳを使用して可溶性ＦＲαレベルを測定した。可溶性ＦＲαレベルを、ＦＯＲＷＡＲＤＩ試験に登録された患者において観察されたレベルと比較した。ＦＯＲＷＡＲＤＩ試験は、ＩＨＣによって測定されたように、よりＦＲαが豊富な集団を表しているにもかかわらず、２つの試験間で同様の可溶性ＦＲα分布が観察された（図６Ａ）。（図６Ａに示すように）ＭＩＲＡＳＯＬ試験についてスクリーニングされた１３５人の患者の可溶性ＦＲαレベルも表１２に示し、（図６Ａに示すように）ＦＯＲＷＡＲＤＩ患者の可溶性ＦＲαレベルを表１３に示す。

より大きな患者群（ＭＩＲＡＳＯＬ試験では４４０人の患者、及びＦＯＲＷＡＲＤＩでは２５０人の患者）からの可溶性ＦＲαのレベルを図６Ｂに示す。ＳＯＲＡＹＡと呼ばれる追加の臨床試験を、以前にＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）で治療されたＦＲα高（ＩＨＣによる）プラチナ耐性卵巣癌において行った。ＳＯＲＡＹＡ試験からの患者及び３つの臨床試験（すなわち、ＭＩＲＡＳＯＬ、ＦＯＲＷＡＲＤＩ、及びＳＯＲＡＹＡ）からの患者における可溶性ＦＲαのレベルも図６Ｂに示す。

ＭＩＲＡＳＯＬ試験についてスクリーニングされた患者からの可溶性ＦＲαデータポイントを、ＩＨＣＦＲα ＰＳ２スコアに基づいて３つの群に分けた。同様の可溶性ＦＲα分布が、表面腫瘍ＦＲα発現に関係なく観察された（図７Ａ）。（図７Ａに示すように）ＰＳ２スコアリングにより決定してＦＲα陽性腫瘍を有するＭＩＲＡＳＯＬ試験における１１９人の患者の可溶性ＦＲαレベルも、表１４Ａ～１４Ｃに示す。

ＭＩＲＡＳＯＬ試験に関してより大きな患者群からの可溶性ＦＲαデータポイントを、ＩＨＣＦＲα ＰＳ２スコアに基づいて４つの群に分け、その結果を図７Ｂに示す。

ＭＩＲＡＳＯＬ試験についてスクリーニングされた患者からの可溶性ＦＲαデータポイントを、患者の対応するＩＨＣＦＲα ＰＳ２スコアに対してプロットした。可溶性ＦＲαレベルと表面腫瘍ＦＲα発現（ＰＳ２）との間に有意な相関は見られず（図８Ａ）、これらの結果は、より大きな患者群で確認された（図８Ｂ）。

したがって、可溶性ＦＲαとＩＨＣスコアとの間に有意な相関は観察されなかった。

実施例４．可溶性ＦＲα測定値は検出方法間で相関している
ヒトＦＯＬＲ１ＱｕａｎｔｉｋｉｎｅＥＬＩＳＡＫｉｔ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓカタログ番号：ＤＦＬＲ１０）を用いて、ＦＯＲＷＡＲＤＩ試験からの患者の血清から可溶性ＦＲαレベルを測定した。すべてのサンプルは、Ｉ試験の一環としてミルベツキシマブソラフタンシンの投与を継続した患者から治験薬の投与前に収集された。ＥＬＩＳＡによって測定した可溶性ＦＲαレベルを、液体クロマトグラフィー－質量分析法（ＬＣ－ＭＳ）によって検出した可溶性ＦＲαレベルとの相関について評価した。図１０に示す結果は、ＥＬＩＳＡとＬＣ－ＭＳによって検出された可溶性ＦＲαレベルが相関していることを示している。さらに、ＥＬＩＳＡによって測定した異なる可溶性ＦＲαレベルを有する患者において、ＰＦＳ及びＯＲを比較した。図１１に示す結果は、ＥＬＩＳＡによって測定した可溶性ＦＲαレベルが増加した患者におけるＰＦＳ及びＯＲＲの増加を示している。
* * *

発明の概要及び要約の項ではなく、発明を実施するための形態の項は、特許請求の範囲を解釈するために使用されることが意図されていることを理解されたい。発明の概要及び要約の項は、本発明者（複数可）によって熟考されるような本開示の１つ以上ではあるがすべてではない例示的な態様を説明し、それ故、決して本開示及び添付の特許請求の範囲を限定することは意図しない。

本開示は、その特定の機能の実現及び関係を示す機能ビルディングブロックを用いて上記に記述された。これらの機能ビルディングブロックの境界線は、記述上の便宜のためにここに恣意的に定義されたものである。その特定の機能の実現及び関係が適切に遂行される限りにおいて、別の境界線が定義され得る。

本明細書に記載の特定の態様についての上述の説明は、当業者の範囲内の知識を適用することにより、他者が、様々な応用のために、このような特定の態様を、過度な実験をすることなく、本開示の概括的な概念から離脱することなく、容易に変更及び／または改造し得るという本開示の概括的な特徴を十分に公表することになる。したがって、そのような改造及び変更は、ここに提示されている教示及び指導に基づき、本明細書に開示された態様の等価物の意味と範囲の内にあることが意図される。本明細書の語法または用語法は、教示及び指導に鑑み、当業者により理解されるべきものであるように、ここでの語法または用語法は、説明の目的であり、かつ制限する目的ではないことを理解されたい。

本開示の広がりや範囲は、上記の例示的な態様のいずれによっても限定されるべきではなく、以下の特許請求の範囲やそれらの等価物に従ってのみ定義されるべきである。

Claims

抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む医薬組成物を、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有するがん患者に投与することを含む、患者におけるがんを治療する方法。
前記患者の可溶性ＦＲαが、前記投与前に前記患者から得られたサンプル中に検出されていた、請求項１に記載の方法。
前記患者から得られたがんサンプルが、高いＦＲα免疫組織化学（ＩＨＣ）スコアを有しない、請求項１または２に記載の方法。
前記患者から得られたがんサンプルが、高いＦＲα ＩＨＣスコアを有する、請求項１または２に記載の方法。
前記患者からＦＲα ＩＨＣスコアが得られていない、請求項１または２に記載の方法。
（ｉ）患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有する場合、及び／または前記患者から得られたがんサンプルが高いＦＲα ＩＨＣスコアを有する場合、抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を前記患者に投与すること、ならびに（ｉｉ）前記患者が標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有さず、かつ前記患者から得られたがんサンプルが高いＦＲα ＩＨＣスコアを有さない場合、前記患者に化学療法を投与することを含む、前記患者におけるがんを治療する方法。
前記活性剤を投与する前に、前記患者から得られたサンプル中の可溶性ＦＲαのレベルを決定することをさらに含む、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
前記投与前に前記患者から得られたがんサンプルにおける前記ＦＲα ＩＨＣスコアを決定することをさらに含む、請求項３、４、６、及び７のいずれか１項に記載の方法。
抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高い患者のがんを同定するための方法であって、前記方法が、前記患者から得られたサンプル中の可溶性ＦＲαを測定することと、場合により前記患者から得られた腫瘍サンプル中のＦＲα ＩＨＣスコアを決定することとを含み、標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベル及び／または高ＦＲα ＩＨＣスコアの存在が、前記がんが前記抗ＦＲα活性剤に応答する可能性が高いことを示し、場合により、前記方法が、前記がんが応答する可能性が高い場合に、前記抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物を前記患者に投与することをさらに含む、前記方法。
標的可溶性ＦＲαレベル以上ではない可溶性ＦＲαのレベル及び高くないＩＨＣスコアは、前記がんが前記抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物に応答する可能性が低いことを示す、請求項１０に記載の方法。
標的可溶性ＦＲαレベル以上ではない可溶性ＦＲαのレベル及び高くないＩＨＣスコアは、前記がんが前記抗ＦＲα活性剤を含む医薬組成物よりも化学療法に対してより応答性である可能性が高いことを示す、請求項１０に記載の方法。
前記患者の可溶性ＦＲαのレベルが、液体クロマトグラフィー－質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、及び／またはメソスケールディスカバリー（ＭＳＤ）を用いて評価される、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約０．５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約０．６ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約０．７ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約０．７５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約０．８ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約０．９ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．１ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．２ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．２５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．３ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．４ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．６ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．７ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．７５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．８ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約１．９ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．０ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．１ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．２ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．２５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．３ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．４ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．６ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．７ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．７５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．８ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約２．９ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．０ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．１ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．２ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．２５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．３ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．４ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．６ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．７ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．７５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．８ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約３．９ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．０ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．１ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．２ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．２５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．３ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．４ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．６ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．７ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．７５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．８ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約４．９ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが約５ｎｇ／ｍＬである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
前記標的可溶性ＦＲαレベルが、染色パーセント（ＰＳ）２＋染色強度によって決定される、中程度（５０～７４％の細胞陽性）または高い（少なくとも７５％の細胞陽性）膜ＦＲαレベルを有する腫瘍を有する卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌の患者における平均可溶性ＦＲαレベルである、請求項１～６７のいずれか１項に記載の方法。
高いＩＨＣスコアとは、少なくとも７５％の腫瘍細胞が染色パーセント（ＰＳ）２＋染色強度を有することを指す、請求項３、４、及び６～６８のいずれか１項に記載の方法。
高いＩＨＣスコアとは、少なくとも５０％の腫瘍細胞がＰＳ２＋染色強度を有することを指す、請求項３、４、及び６～６８のいずれか１項に記載の方法。
前記がんが固形腫瘍である、請求項１～７０のいずれか１項に記載の方法。
前記がんが、卵巣癌、子宮癌、子宮内膜癌、膵臓癌、腎臓癌、肺癌、腹膜癌、乳癌、及び卵管癌からなる群から選択される、請求項１～７１のいずれか１項に記載の方法。
前記がんが、卵巣癌であり、場合により、前記卵巣癌が、プラチナ耐性またはプラチナ不応性である、請求項７２に記載の方法。
前記がんがプラチナ感受性卵巣癌である、請求項７２に記載の方法。
前記卵巣癌が、上皮性卵巣癌である、請求項７２～７４のいずれか１項に記載の方法。
前記がんが、プラチナ耐性の進行した高悪性度上皮性卵巣癌である、請求項７２、７３または７５に記載の方法。
前記がんが子宮癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが、子宮内膜癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが、膵臓癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが、腎癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが肺癌であり、場合により、前記肺癌が、非小細胞肺癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが腹膜癌であり、場合により、前記腹膜癌が原発性腹膜癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが、乳癌であり、場合により、前記乳癌が、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが、卵管癌である、請求項７２に記載の方法。
前記がんが、再発がんである、請求項１～８４のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤が、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項１～８５のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号３８のＶＨと配列番号４４のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号３８のＶＨと配列番号４４のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する、請求項８６に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）相補性決定領域（ＣＤＲ）１と、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２と、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３と、配列番号１５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＨ）－ＣＤＲ１と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２と、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３とを含む、請求項８６または８７に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項８６～８８のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項８６～８９のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤中の前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、ＰＴＡ－１０７７２としてＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託されたプラスミドによってコードされる重鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む前記重鎖及び／またはＰＴＡ－１０７７４としてＡＴＣＣに寄託されたプラスミドによってコードされる軽鎖のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む前記軽鎖を含む、請求項８６～８９のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号３７のＶＨと配列番号４３のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号３７のＶＨと配列番号４３のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する、請求項８６～９１のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号２のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）相補性決定領域（ＣＤＲ）１と、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２と、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３と、配列番号７のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＨ）－ＣＤＲ１と、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２と、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３とを含む、請求項８６～９２のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項８６～９３のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号４９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号５５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項８６～９４のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤が、抗ＦＲα抗体の抗原結合フラグメントを含む、請求項１～９５のいずれか１項に記載の方法。
前記抗原結合フラグメントが、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であり、場合により、前記ｓｃＦＶが、配列番号６０のアミノ酸配列を含む、請求項９６に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、単一特異性抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１～９７のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、バイパラトープ抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１～９７のいずれか１項に記載の方法。
前記バイパラトープ抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を含む、請求項９９に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号９９のＶＨと配列番号１０１のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号９９のＶＨと配列番号１０１のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する、請求項８６に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号８０または８３のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）相補性決定領域（ＣＤＲ）１と、配列番号８１または８４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２と、配列番号８２または８５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３と、配列番号８６または８９のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＨ）－ＣＤＲ１と、配列番号８７または９０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２と、配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３とを含む、請求項８６または１０１に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項８６、１０１、または１０２のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号１０３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項８６及び１０１～１０３のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号１００のＶＨと配列番号１０２のＶＬとを含む抗体と同じＦＲαエピトープに結合し、及び／または配列番号１００のＶＨと配列番号１０２のＶＬとを含む抗体のＦＲαへの結合を競合的に阻害する、請求項８６に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号９１または９４のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）相補性決定領域（ＣＤＲ）１と、配列番号９２または９５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２と、配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３と、配列番号９６のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＨ）－ＣＤＲ１と、配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２と、配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３とを含む、請求項８６または１０５に記載の方法。
前記活性剤における前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項８６、１０５、または１０６のいずれか１項に記載の方法。
前記活性剤が、細胞傷害性剤にコンジュゲートされた抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含む免疫複合体である、請求項１～１０７のいずれか１項に記載の方法。
前記細胞傷害性剤が、リンカーによって前記抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントにコンジュゲートし、場合により、前記リンカーが、切断可能なリンカー、切断不可能なリンカー、親水性リンカー、及びジカルボン酸系リンカーからなる群から選択される、請求項１０８に記載の方法。
前記リンカーが、Ｎ－（γ－マレイミドブトリルオキシ（ｍａｌｅｉｍｉｄｏｂｕｔｒｙｌｏｘｙ））スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＧＭＢＳまたはｓＧＭＢＳ）、γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）、Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）－２－スルホブタノエート（スルホ－ＳＰＤＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）またはＮ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）－２－スルホペンタノエート（スルホ－ＳＰＰ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）、Ｎ－スクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）；Ｎ－スルホスクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（スルホＳＭＣＣ）；Ｎ－スクシンイミジル－４－（ヨードアセチル）－アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）；及びＮ－スクシンイミジル－［（Ｎ－マレイミドプロピオンアミド）－テトラエチレングリコール］エステル（ＮＨＳ－ＰＥＧ４－マレイミド）からなる群から選択される、請求項１０９に記載の方法。
前記リンカーが、スルホ－ＳＰＤＢである、請求項１０８または１０９に記載の方法。
前記リンカーが、スルホ－ＧＭＢＳである、請求項１０８または１０９に記載の方法。
前記リンカーが、ＧＭＢＳである、請求項１０８または１０９に記載の方法。
前記リンカーが、カテプシン－Ｂリンカーである、請求項１０８または１０９に記載の方法。
前記細胞傷害性剤が、メイタンシノイド、メイタンシノイド類似体、ベンゾジアゼピン、タキソイド、ＣＣ－１０６５、ＣＣ－１０６５類似体、デュオカルマイシン、デュオカルマイシン類似体、カリケアミシン、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、トマイマイシン誘導体、及びレプトマイシン誘導体または前記細胞傷害性剤のプロドラッグからなる群から選択される、請求項１０８～１１４のいずれか１項に記載の方法。
前記細胞傷害性剤がメイタンシノイドである、請求項１０８～１１５のいずれか１項に記載の方法。
前記メイタンシノイドが、ＤＭ４である、請求項１１６に記載の方法。
前記メイタンシノイドが、ＤＭ２１である、請求項１１６に記載の方法。
前記細胞傷害性剤がエリブリンメシル酸塩である、請求項１０８～１１４のいずれか１項に記載の方法。
前記細胞傷害性剤がアミノフェニルヘミアステリン（ＳＣ２０９）である、請求項１０８～１１４のいずれか１項に記載の方法。
前記免疫複合体が、１～２０の細胞傷害性剤を含み、場合により、前記免疫複合体が、１～１０の細胞傷害性剤を含む、請求項１０８～１２０のいずれか１項に記載の方法。
前記免疫複合体が、以下の式：

、またはその薬学的に許容される塩で表され、式中、
ＣＢは、抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントであり、
Ｌ_２は、以下の式：

のうちの１つで表され、
式中、
Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’は、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、ハロゲン、－Ｏ－（Ｃ_１－４アルキル）、－ＳＯ_３Ｈ、－ＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋、または－ＯＨ、ハロゲン、ＳＯ_３Ｈ、もしくはＮＲ_４０Ｒ_４１Ｒ_４２ ^＋で置換されていてもよいＣ_１－４アルキルであり、ここで、Ｒ_４０、Ｒ_４１、及びＲ_４２はそれぞれ独立してＨまたはＣ_１－４アルキルであり、
ｌ及びｋは、それぞれ独立して、１～１０の整数であり、
ｌ１は、２～５の整数であり、
ｋ１は、１～５の整数であり、かつ
ｓ１は細胞結合剤ＣＢに結合する部位を示し、ｓ３はＡ基に結合する部位を示し、
Ａは、アミノ酸残基、または２～２０個のアミノ酸残基を含むペプチドであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、またはＣ_１－３アルキルであり、
Ｌ_１は、以下の式で表され、
－ＣＲ^３Ｒ^４－（ＣＨ_２）_１－８－Ｃ（＝Ｏ）－
式中、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立して、ＨまたはＭｅであり、Ｌ_１中の－Ｃ（＝Ｏ）－部分は、Ｄに接続されており、
Ｄは、以下の式で表され、

ｑは、１～２０の整数である、請求項１０８に記載の方法。
Ｒ^ｘ、Ｒ^ｙ、Ｒ^ｘ’及びＲ^ｙ’はすべてＨであり、ｌ及びｋは、それぞれ独立して、２～６の整数である、請求項１２２に記載の方法。
Ａが、２～５個のアミノ酸残基を含むペプチドである、請求項１２２または１２３に記載の方法。
Ａは、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ、Ａｌａ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｌｙｓ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ｌｙｓ、Ｐｈｅ－Ｃｉｔ、Ｌｅｕ－Ｃｉｔ、Ｉｌｅ－Ｃｉｔ、Ｐｈｅ－Ａｌａ、Ｐｈｅ－Ｎ^９－トシル－Ａｒｇ、Ｐｈｅ－Ｎ^９－ニトロ－Ａｒｇ、Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ、Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｌｅｕ、Ｖａｌ－Ａｌａ－Ｖａｌ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号７８）、β－Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号７９）、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号６３）、Ｖａｌ－Ａｒｇ、Ａｒｇ－Ａｒｇ、Ｖａｌ－Ｄ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｄ－Ｌｙｓ、Ｖａｌ－Ｄ－Ａｒｇ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ－Ａｒｇ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ｃｉｔ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ－Ｄ－Ａｒｇ、Ｄ－Ａｒｇ－Ｄ－Ａｒｇ、Ａｌａ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ、Ａｌａ－Ｍｅｔ、Ｇｌｎ－Ｖａｌ、Ａｓｎ－Ａｌａ、Ｇｌｎ－Ｐｈｅ、Ｇｌｎ－Ａｌａ、Ｄ－Ａｌａ－Ｐｒｏ、及びＤ－Ａｌａ－ｔＢｕ－Ｇｌｙからなる群から選択され、各ペプチドの最初のアミノ酸がＬ_２基に接続され、各ペプチドの最後のアミノ酸が－ＮＨ－ＣＲ^１Ｒ^２－Ｓ－Ｌ_１－Ｄに接続される、請求項１２４に記載の方法。
Ｒ^１及びＲ^２は、両方ともＨである、請求項１２２～１２５のいずれか１項に記載の方法。
Ｌ_１が、－（ＣＨ_２）_４－６－Ｃ（＝Ｏ）－である、請求項１２２～１２５のいずれか１項に記載の方法。
Ｄが、以下の式：

で表される、請求項１２２～１２７のいずれか１項に記載の方法。
前記免疫複合体が、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨと配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む抗ＦＲα抗体またはその抗原結合フラグメントを含み、前記抗体またはその抗原結合フラグメントが、スルホ－ＳＰＤＢリンカーを介してＤＭ４にコンジュゲートしている、請求項１０８に記載の方法。
前記免疫複合体が、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む抗ＦＲα抗体を含む、請求項１２９に記載の方法。
抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む前記医薬組成物が、ＩＭＧＮ８５３を含む、請求項１２９に記載の方法。
前記免疫複合体を、調整された理想体重（ＡＩＢＷ）に基づく用量で投与する、請求項１２９～１３１のいずれか１項に記載の方法。
前記免疫複合体を、約６ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与する、請求項１３２に記載の方法。
前記免疫複合体を、約５ｍｇ／ｋｇＡＩＢＷの用量で投与する、請求項１３２に記載の方法。
前記免疫複合体が、以下の式：

、またはその薬学的に許容される塩で表され、式中、
ＣＢＡは、配列番号６１、６２、及び５６のアミノ酸配列を含む抗体または抗原結合フラグメントであり、
Ｄ_１は、以下の式で表され、

かつ
ｑは、１～１０の整数である、請求項１０８に記載の方法。
抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む前記医薬組成物が、ＩＭＧＮ１５１を含む、請求項１０１に記載の方法。
前記医薬組成物が、抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均２～５個の細胞傷害性剤を含む抗ＦＲα免疫複合体を含み、場合により、前記抗ＦＲα免疫複合体が、抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均３～４個の細胞傷害性剤を含む、請求項１～１３６のいずれか１項に記載の方法。
前記医薬組成物が、抗体またはその抗原結合フラグメント１つ当たり平均３．５個の細胞傷害性剤を含む抗ＦＲα免疫複合体を含む、請求項１３７に記載の方法。
前記可溶性ＦＲαが、ＦＲαに特異的に結合する検出抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて検出され、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨと配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む抗体が、前記検出抗体またはその抗原結合フラグメントのＦＲαへの結合を競合的に阻害しない、請求項１～１３８のいずれか１項に記載の方法。
前記可溶性ＦＲαが、ＦＲαに特異的に結合する検出抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて検出され、葉酸が、前記検出抗体またはその抗原結合フラグメントのＦＲαへの結合を競合的に阻害しない、請求項１～１３９のいずれか１項に記載の方法。
前記可溶性ＦＲαが、ＦＲαに特異的に結合し、かつ
（ａ）それぞれ、配列番号１８～２０及び配列番号２１～２３、または
（ｂ）それぞれ、配列番号２４～２６及び配列番号２７～２９のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、検出抗体またはその抗原結合フラグメントを用いて検出される、請求項１～１４０のいずれか１項に記載の方法。
前記検出抗体またはその抗原結合フラグメントが、
（ａ）それぞれ、配列番号３９及び配列番号４５、または
（ｂ）それぞれ、配列番号４０及び配列番号４６のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む、請求項１４１に記載の方法。
前記検出抗体またはその抗原結合フラグメントが、
（ａ）それぞれ、配列番号５１及び配列番号５７、または
（ｂ）それぞれ、配列番号５２及び配列番号５８の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項１４２に記載の方法。
前記可溶性ＦＲαが、（ｉ）固体支持体に結合した免疫捕捉試薬でＦＲαを捕捉すること、（ｉｉ）前記固体支持体からＦＲαを溶出すること、（ｉｉｉ）溶出した前記ＦＲαを消化すること、及び（ｉｖ）消化した前記ＦＲαに対してＬＣ／ＭＳ分析を実行することによって検出され、前記ＦＲαを、少なくとも１つのシグネチャＦＲαペプチドのクロマトグラフィー分離及び質量分析応答を監視することにより検出する、請求項１～１４３のいずれか１項に記載の方法。
前記固体支持体が、質量分析免疫アッセイ（ＭＳＩＡ）マイクロカラムを含む、請求項１４４に記載の方法。
前記固体支持体が磁気ビーズを含む、請求項１４４に記載の方法。
少なくとも１つの洗浄ステップが、前記固体支持体からＦＲαを溶出する前に行われ、場合により、２つ以上の洗浄ステップが、前記固体支持体からＦＲαを溶出する前に行われる、請求項１４４～１４６のいずれか１項に記載の方法。
前記洗浄ステップが、前記固体支持体に結合した前記ＦＲαを、洗浄緩衝液、塩溶液、及び洗剤と接触させることを含む、請求項１４７に記載の方法。
ＦＲαが、酸性溶液で前記固体支持体から溶出される、請求項１４３～１４８のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲαが、前記ＦＲαを消化する前に還元され、アルキル化される、請求項１４９に記載の方法。
前記ＦＲαがトリプシン／Ｌｙｓ－Ｃで消化される、請求項１４３～１４９のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲαを消化することにより、配列番号６８の配列を含むペプチドが生成される、請求項１４３～１５１のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲαを消化することにより、配列番号６９の配列を含むペプチドが生成される、請求項１４３～１５２のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲαを消化することにより、配列番号７０の配列を含むペプチドが生成される、請求項１４０～１５３のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲαを消化することにより、配列番号７１の配列を含むペプチドが生成される、請求項１４０～１５４のいずれか１項に記載の方法。
ＦＲαの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つのシグネチャペプチドが選択され、前記ＬＣ／ＭＳ分析ステップで監視される、請求項１４０～１５５のいずれか１項に記載の方法。
前記シグネチャペプチドが、
ａ．配列番号６８の配列を含むペプチド；
ｂ．配列番号６９の配列を含むペプチド；
ｃ．配列番号７０の配列を含むペプチド；及び
ｄ．配列番号７１の配列を含むペプチドを含む、請求項１５６に記載の方法。
前記患者の可溶性ＦＲαのレベルが、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて評価される、請求項１～１４２のいずれか１項に記載の方法。
前記可溶性ＦＲαが体液サンプル中で検出され、場合により、前記体液が、血漿液、血清液、または腹水液である、請求項１～１５８のいずれか１項に記載の方法。
前記可溶性ＦＲαが、末梢血サンプルにおいて検出される、請求項１～１５９のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲα ＩＨＣスコアが、参照サンプルと比較して腫瘍サンプルにおける染色強度と染色均一性とを区別するＩＨＣを使用して得られる、請求項３、４、または６～１６０のいずれか１項に記載の方法。
前記ＦＲα ＩＨＣスコアが、ＦＲαに特異的に結合し、かつ配列番号３０～３２及び配列番号３３～３５のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２及びＶＬ－ＣＤＲ３アミノ酸配列をそれぞれ含むＩＨＣ抗体またはその抗原結合フラグメントを使用して得られる、請求項３、４、または６～１６１のいずれか１項に記載の方法。
前記ＩＨＣ検出抗体またはその抗原結合フラグメントが、それぞれ配列番号４１及び配列番号４７のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む、請求項１６２に記載の方法。
前記検出抗体または抗原結合フラグメントが、それぞれ配列番号５３及び配列番号５９の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項１６３に記載の方法。
請求項１～１６４のいずれか１項に記載の方法に従って標的可溶性ＦＲαレベル以上の可溶性ＦＲαレベルを有する患者のがんを治療するための医薬組成物であって、抗葉酸受容体α（ＦＲα）活性剤を含む、前記医薬組成物。