JP2024505955A - 新型キメラ抗原受容体及びその使用 - Google Patents
新型キメラ抗原受容体及びその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2024505955A JP2024505955A JP2023546352A JP2023546352A JP2024505955A JP 2024505955 A JP2024505955 A JP 2024505955A JP 2023546352 A JP2023546352 A JP 2023546352A JP 2023546352 A JP2023546352 A JP 2023546352A JP 2024505955 A JP2024505955 A JP 2024505955A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- seq
- immune cell
- cdr
- chimeric antigen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 title claims abstract description 65
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims abstract description 107
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 83
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 80
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 80
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 59
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims abstract description 37
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims abstract description 35
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 20
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 claims abstract description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 144
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 126
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 82
- 101000914496 Homo sapiens T-cell antigen CD7 Proteins 0.000 claims description 63
- 102100027208 T-cell antigen CD7 Human genes 0.000 claims description 60
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 53
- -1 CD86 Proteins 0.000 claims description 51
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 51
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 44
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 42
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 38
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 38
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 claims description 32
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 31
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 26
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 25
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 22
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 22
- 102100020986 DNA-binding protein RFX5 Human genes 0.000 claims description 17
- 101001075432 Homo sapiens DNA-binding protein RFX5 Proteins 0.000 claims description 17
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 claims description 17
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 claims description 17
- 101100382122 Homo sapiens CIITA gene Proteins 0.000 claims description 16
- 102100026371 MHC class II transactivator Human genes 0.000 claims description 16
- 108700002010 MHC class II transactivator Proteins 0.000 claims description 16
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 16
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 claims description 15
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 claims description 15
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 claims description 13
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 claims description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 12
- 102100021044 DNA-binding protein RFXANK Human genes 0.000 claims description 11
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 claims description 11
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 claims description 11
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 claims description 11
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 claims description 11
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims description 10
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims description 10
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims description 10
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims description 10
- 101001075464 Homo sapiens DNA-binding protein RFXANK Proteins 0.000 claims description 10
- 101001075466 Homo sapiens Regulatory factor X-associated protein Proteins 0.000 claims description 10
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 claims description 10
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 claims description 10
- 102100030569 Nuclear receptor corepressor 2 Human genes 0.000 claims description 10
- 102100021043 Regulatory factor X-associated protein Human genes 0.000 claims description 10
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 claims description 10
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 claims description 10
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 10
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 10
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 9
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 claims description 9
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 claims description 9
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 claims description 9
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 9
- 102100038078 CD276 antigen Human genes 0.000 claims description 8
- 101001138062 Homo sapiens Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1 Proteins 0.000 claims description 8
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 claims description 8
- 101000679851 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 claims description 8
- 102100020943 Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1 Human genes 0.000 claims description 8
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 claims description 8
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 claims description 8
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 8
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 claims description 7
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 claims description 7
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 claims description 7
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 claims description 7
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 claims description 7
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 7
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 claims description 7
- 201000011648 T-cell childhood lymphoblastic lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000020982 T-lymphoblastic lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims description 6
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 102100026094 C-type lectin domain family 12 member A Human genes 0.000 claims description 6
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 6
- 102100038083 Endosialin Human genes 0.000 claims description 6
- 102100021197 G-protein coupled receptor family C group 5 member D Human genes 0.000 claims description 6
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 claims description 6
- 101000884279 Homo sapiens CD276 antigen Proteins 0.000 claims description 6
- 101000884275 Homo sapiens Endosialin Proteins 0.000 claims description 6
- 101001040713 Homo sapiens G-protein coupled receptor family C group 5 member D Proteins 0.000 claims description 6
- 101001042104 Homo sapiens Inducible T-cell costimulator Proteins 0.000 claims description 6
- 101001109501 Homo sapiens NKG2-D type II integral membrane protein Proteins 0.000 claims description 6
- 101000971513 Homo sapiens Natural killer cells antigen CD94 Proteins 0.000 claims description 6
- 102100021317 Inducible T-cell costimulator Human genes 0.000 claims description 6
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 102100022680 NKG2-D type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 6
- 102100021462 Natural killer cells antigen CD94 Human genes 0.000 claims description 6
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims description 6
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 claims description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 6
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100028970 HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain E Human genes 0.000 claims description 5
- 102100028967 HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain G Human genes 0.000 claims description 5
- 108010041384 HLA-DPA antigen Proteins 0.000 claims description 5
- 108010062347 HLA-DQ Antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 108010024164 HLA-G Antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000986085 Homo sapiens HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain E Proteins 0.000 claims description 5
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 claims description 5
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 claims description 5
- 101001109503 Homo sapiens NKG2-C type II integral membrane protein Proteins 0.000 claims description 5
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 claims description 5
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 claims description 5
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 claims description 5
- 102100022683 NKG2-C type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 5
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 claims description 5
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 claims description 5
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 5
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 4
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims description 4
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims description 4
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 102100028801 Calsyntenin-1 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 claims description 4
- 208000016937 Extranodal nasal NK/T cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 102000010451 Folate receptor alpha Human genes 0.000 claims description 4
- 108050001931 Folate receptor alpha Proteins 0.000 claims description 4
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100040505 HLA class II histocompatibility antigen, DR alpha chain Human genes 0.000 claims description 4
- 108010067802 HLA-DR alpha-Chains Proteins 0.000 claims description 4
- 102100029360 Hematopoietic cell signal transducer Human genes 0.000 claims description 4
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 claims description 4
- 101000834898 Homo sapiens Alpha-synuclein Proteins 0.000 claims description 4
- 101000914324 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000914321 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 7 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000990188 Homo sapiens Hematopoietic cell signal transducer Proteins 0.000 claims description 4
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 claims description 4
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 claims description 4
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001051490 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule L1 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000617725 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001117312 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 claims description 4
- 101001136981 Homo sapiens Proteasome subunit beta type-9 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000652359 Homo sapiens Spermatogenesis-associated protein 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 claims description 4
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 claims description 4
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 102100024964 Neural cell adhesion molecule L1 Human genes 0.000 claims description 4
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 claims description 4
- 102100026547 Platelet-derived growth factor receptor beta Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022019 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Human genes 0.000 claims description 4
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 claims description 4
- 102100035764 Proteasome subunit beta type-9 Human genes 0.000 claims description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 4
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 claims description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 108010087914 epidermal growth factor receptor VIII Proteins 0.000 claims description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 4
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 229920001481 poly(stearyl methacrylate) Polymers 0.000 claims description 4
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 4
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102100040079 A-kinase anchor protein 4 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710109924 A-kinase anchor protein 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 102000017918 ADRB3 Human genes 0.000 claims description 3
- 108060003355 ADRB3 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100026402 Adhesion G protein-coupled receptor E2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100026423 Adhesion G protein-coupled receptor E5 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032187 Androgen receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 102000030431 Asparaginyl endopeptidase Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025218 B-cell differentiation antigen CD72 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 102100027522 Baculoviral IAP repeat-containing protein 7 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037086 Bone marrow stromal antigen 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710188619 C-type lectin domain family 12 member A Proteins 0.000 claims description 3
- 108700012439 CA9 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024263 CD160 antigen Human genes 0.000 claims description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 claims description 3
- 108010058905 CD44v6 antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 108010062802 CD66 antigens Proteins 0.000 claims description 3
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 claims description 3
- 102100029390 CMRF35-like molecule 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 claims description 3
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 claims description 3
- 102100024533 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025466 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024965 Caspase recruitment domain-containing protein 11 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710178046 Chorismate synthase 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100038449 Claudin-6 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100035167 Coiled-coil domain-containing protein 54 Human genes 0.000 claims description 3
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 claims description 3
- 101710152695 Cysteine synthase 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102000012804 EPCAM Human genes 0.000 claims description 3
- 101150084967 EPCAM gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100030340 Ephrin type-A receptor 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100031507 Fc receptor-like protein 5 Human genes 0.000 claims description 3
- 101150032879 Fcrl5 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102000010449 Folate receptor beta Human genes 0.000 claims description 3
- 108050001930 Folate receptor beta Proteins 0.000 claims description 3
- 102100036939 G-protein coupled receptor 20 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710088083 Glomulin Proteins 0.000 claims description 3
- 102100032530 Glypican-3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100028966 HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain F Human genes 0.000 claims description 3
- 108010007712 Hepatitis A Virus Cellular Receptor 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100034459 Hepatitis A virus cellular receptor 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 claims description 3
- 101000718211 Homo sapiens Adhesion G protein-coupled receptor E2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000718243 Homo sapiens Adhesion G protein-coupled receptor E5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000934359 Homo sapiens B-cell differentiation antigen CD72 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000936083 Homo sapiens Baculoviral IAP repeat-containing protein 7 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000740785 Homo sapiens Bone marrow stromal antigen 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000912622 Homo sapiens C-type lectin domain family 12 member A Proteins 0.000 claims description 3
- 101000761938 Homo sapiens CD160 antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 101000990055 Homo sapiens CMRF35-like molecule 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914337 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000761179 Homo sapiens Caspase recruitment domain-containing protein 11 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000882898 Homo sapiens Claudin-6 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000737052 Homo sapiens Coiled-coil domain-containing protein 54 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000954709 Homo sapiens Doublecortin domain-containing protein 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001071355 Homo sapiens G-protein coupled receptor 20 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000608769 Homo sapiens Galectin-8 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001014668 Homo sapiens Glypican-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000986080 Homo sapiens HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain F Proteins 0.000 claims description 3
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000985516 Homo sapiens Hermansky-Pudlak syndrome 5 protein Proteins 0.000 claims description 3
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 claims description 3
- 101000878602 Homo sapiens Immunoglobulin alpha Fc receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 101000840267 Homo sapiens Immunoglobulin lambda-like polypeptide 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001103039 Homo sapiens Inactive tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000935040 Homo sapiens Integrin beta-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000614481 Homo sapiens Kidney-associated antigen 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000777628 Homo sapiens Leukocyte antigen CD37 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984197 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984190 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984189 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984192 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001047640 Homo sapiens Linker for activation of T-cells family member 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001065550 Homo sapiens Lymphocyte antigen 6K Proteins 0.000 claims description 3
- 101001018034 Homo sapiens Lymphocyte antigen 75 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000764294 Homo sapiens Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 claims description 3
- 101001014223 Homo sapiens MAPK/MAK/MRK overlapping kinase Proteins 0.000 claims description 3
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001103036 Homo sapiens Nuclear receptor ROR-alpha Proteins 0.000 claims description 3
- 101000721757 Homo sapiens Olfactory receptor 51E2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000613490 Homo sapiens Paired box protein Pax-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000601724 Homo sapiens Paired box protein Pax-5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000589399 Homo sapiens Pannexin-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000691463 Homo sapiens Placenta-specific protein 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001064779 Homo sapiens Plexin domain-containing protein 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000880770 Homo sapiens Protein SSX2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000702132 Homo sapiens Protein spinster homolog 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000932478 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000665137 Homo sapiens Scm-like with four MBT domains protein 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000863882 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 7 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000884271 Homo sapiens Signal transducer CD24 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000824971 Homo sapiens Sperm surface protein Sp17 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000873927 Homo sapiens Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000831007 Homo sapiens T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Proteins 0.000 claims description 3
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000596234 Homo sapiens T-cell surface protein tactile Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000655352 Homo sapiens Telomerase reverse transcriptase Proteins 0.000 claims description 3
- 101000714168 Homo sapiens Testisin Proteins 0.000 claims description 3
- 101000772267 Homo sapiens Thyrotropin receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 101000763579 Homo sapiens Toll-like receptor 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000763537 Homo sapiens Toll-like receptor 10 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000831496 Homo sapiens Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000669460 Homo sapiens Toll-like receptor 5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000669406 Homo sapiens Toll-like receptor 6 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000800483 Homo sapiens Toll-like receptor 8 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000894428 Homo sapiens Transcriptional repressor CTCFL Proteins 0.000 claims description 3
- 101000648507 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001047681 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase Lck Proteins 0.000 claims description 3
- 101000808105 Homo sapiens Uroplakin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000851007 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 108010031794 IGF Type 1 Receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 102100038005 Immunoglobulin alpha Fc receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 102100029616 Immunoglobulin lambda-like polypeptide 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039615 Inactive tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039688 Insulin-like growth factor 1 receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102000002698 KIR Receptors Human genes 0.000 claims description 3
- 108010043610 KIR Receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 101150069255 KLRC1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100034872 Kallikrein-4 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 claims description 3
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 claims description 3
- 102100031586 Leukocyte antigen CD37 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025586 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025584 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025583 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025582 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024032 Linker for activation of T-cells family member 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032129 Lymphocyte antigen 6K Human genes 0.000 claims description 3
- 102100033486 Lymphocyte antigen 75 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100034709 Lymphocyte cytosolic protein 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710195102 Lymphocyte cytosolic protein 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100026894 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 claims description 3
- 102100031520 MAPK/MAK/MRK overlapping kinase Human genes 0.000 claims description 3
- 108700012912 MYCN Proteins 0.000 claims description 3
- 101150022024 MYCN gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101100404845 Macaca mulatta NKG2A gene Proteins 0.000 claims description 3
- 108090000015 Mesothelin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000003735 Mesothelin Human genes 0.000 claims description 3
- 108700026495 N-Myc Proto-Oncogene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100030124 N-myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022682 NKG2-A/NKG2-B type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 3
- 108010069196 Neural Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 claims description 3
- 102100025128 Olfactory receptor 51E2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100040891 Paired box protein Pax-3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037504 Paired box protein Pax-5 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032364 Pannexin-3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100026181 Placenta-specific protein 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100031889 Plexin domain-containing protein 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 claims description 3
- 102100023832 Prolyl endopeptidase FAP Human genes 0.000 claims description 3
- 102100032831 Protein ITPRID2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100037686 Protein SSX2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100020718 Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100029946 Sialic acid-binding Ig-like lectin 7 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100038081 Signal transducer CD24 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100035748 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024834 T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Human genes 0.000 claims description 3
- 102100029453 T-cell receptor-associated transmembrane adapter 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100035268 T-cell surface protein tactile Human genes 0.000 claims description 3
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 claims description 3
- 101150057140 TACSTD1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 108010032166 TARP Proteins 0.000 claims description 3
- 102100036494 Testisin Human genes 0.000 claims description 3
- 102100029337 Thyrotropin receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100027010 Toll-like receptor 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100027009 Toll-like receptor 10 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024324 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039357 Toll-like receptor 5 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039387 Toll-like receptor 6 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100033110 Toll-like receptor 8 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100021393 Transcriptional repressor CTCFL Human genes 0.000 claims description 3
- 108010023649 Tripartite Motif Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 claims description 3
- 101710178300 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 claims description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024036 Tyrosine-protein kinase Lck Human genes 0.000 claims description 3
- 102100038851 Uroplakin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims description 3
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 108700020467 WT1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101150084041 WT1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101001038499 Yarrowia lipolytica (strain CLIB 122 / E 150) Lysine acetyltransferase Proteins 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 claims description 3
- 108010055066 asparaginylendopeptidase Proteins 0.000 claims description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 3
- 108010024383 kallikrein 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 claims description 3
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 claims description 3
- DAZSWUUAFHBCGE-KRWDZBQOSA-N n-[(2s)-3-methyl-1-oxo-1-pyrrolidin-1-ylbutan-2-yl]-3-phenylpropanamide Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCCC1)C(=O)CCC1=CC=CC=C1 DAZSWUUAFHBCGE-KRWDZBQOSA-N 0.000 claims description 3
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 3
- 101150047061 tag-72 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 230000005945 translocation Effects 0.000 claims description 3
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 claims description 3
- 102100023003 Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Human genes 0.000 claims description 2
- 102100026197 C-type lectin domain family 2 member D Human genes 0.000 claims description 2
- 102100038077 CD226 antigen Human genes 0.000 claims description 2
- 102100036008 CD48 antigen Human genes 0.000 claims description 2
- 102100029758 Cadherin-4 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 2
- 101100481408 Danio rerio tie2 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 claims description 2
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010055196 EphA2 Receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100038664 Fibrinogen-like protein 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000123 Fos-related antigen 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100021260 Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-beta-glucuronosyltransferase 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100039554 Galectin-8 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100031351 Galectin-9 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710121810 Galectin-9 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000757191 Homo sapiens Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Proteins 0.000 claims description 2
- 101000912615 Homo sapiens C-type lectin domain family 2 member D Proteins 0.000 claims description 2
- 101000716130 Homo sapiens CD48 antigen Proteins 0.000 claims description 2
- 101000738354 Homo sapiens CD9 antigen Proteins 0.000 claims description 2
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001031635 Homo sapiens Fibrinogen-like protein 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000894906 Homo sapiens Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-beta-glucuronosyltransferase 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000599862 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 3 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 claims description 2
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 claims description 2
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984186 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984185 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 5 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001023712 Homo sapiens Nectin-3 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001094545 Homo sapiens Retrotransposon-like protein 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000650817 Homo sapiens Semaphorin-4D Proteins 0.000 claims description 2
- 101000818543 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase ZAP-70 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000814512 Homo sapiens X antigen family member 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100037871 Intercellular adhesion molecule 3 Human genes 0.000 claims description 2
- 101150074862 KLRC3 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025578 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025577 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 5 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 claims description 2
- 102000016200 MART-1 Antigen Human genes 0.000 claims description 2
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 101100481410 Mus musculus Tek gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108050000637 N-cadherin Proteins 0.000 claims description 2
- 102100022701 NKG2-E type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 2
- 102100032870 Natural cytotoxicity triggering receptor 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100032852 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100038082 Natural killer cell receptor 2B4 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100035488 Nectin-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100035487 Nectin-3 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010051742 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100029740 Poliovirus receptor Human genes 0.000 claims description 2
- 108010086890 R-cadherin Proteins 0.000 claims description 2
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100027744 Semaphorin-4D Human genes 0.000 claims description 2
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100021125 Tyrosine-protein kinase ZAP-70 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100039490 X antigen family member 1 Human genes 0.000 claims description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 2
- 125000002446 fucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O1)C)* 0.000 claims description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims description 2
- 108010048507 poliovirus receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 claims description 2
- 102000003817 Fos-related antigen 1 Human genes 0.000 claims 1
- 102000044445 Galectin-8 Human genes 0.000 claims 1
- 101000599858 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 2 Proteins 0.000 claims 1
- 101000783723 Homo sapiens Leucine-rich alpha-2-glycoprotein Proteins 0.000 claims 1
- 101000633780 Homo sapiens Signaling lymphocytic activation molecule Proteins 0.000 claims 1
- 101000980827 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1a Proteins 0.000 claims 1
- 101000716149 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1b Proteins 0.000 claims 1
- 101000716124 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1c Proteins 0.000 claims 1
- 101000638154 Homo sapiens Transmembrane protease serine 2 Proteins 0.000 claims 1
- 102100037872 Intercellular adhesion molecule 2 Human genes 0.000 claims 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 claims 1
- 102100035987 Leucine-rich alpha-2-glycoprotein Human genes 0.000 claims 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims 1
- 102100029215 Signaling lymphocytic activation molecule Human genes 0.000 claims 1
- 102100024219 T-cell surface glycoprotein CD1a Human genes 0.000 claims 1
- 102100031989 Transmembrane protease serine 2 Human genes 0.000 claims 1
- 102100039094 Tyrosinase Human genes 0.000 claims 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 claims 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 abstract 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 36
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 description 30
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 28
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 25
- 239000000047 product Substances 0.000 description 23
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 19
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 17
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 15
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 14
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 14
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 13
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 13
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 12
- 101710153660 Nuclear receptor corepressor 2 Proteins 0.000 description 12
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 11
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 11
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 10
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 10
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 9
- 102100027314 Beta-2-microglobulin Human genes 0.000 description 8
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 8
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 8
- 101000937544 Homo sapiens Beta-2-microglobulin Proteins 0.000 description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 7
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 7
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 108091033409 CRISPR Proteins 0.000 description 6
- 208000027190 Peripheral T-cell lymphomas Diseases 0.000 description 6
- 208000031672 T-Cell Peripheral Lymphoma Diseases 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 208000020968 mature T-cell and NK-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 6
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 208000009052 Precursor T-Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 5
- 208000029052 T-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 5
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 238000010354 CRISPR gene editing Methods 0.000 description 4
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 4
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 4
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 4
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 4
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 3
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 3
- 101000971533 Homo sapiens Killer cell lectin-like receptor subfamily G member 1 Proteins 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 208000017414 Precursor T-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 3
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 3
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 2
- 206010073478 Anaplastic large-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101001005269 Arabidopsis thaliana Ceramide synthase 1 LOH3 Proteins 0.000 description 2
- 101001005312 Arabidopsis thaliana Ceramide synthase LOH1 Proteins 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 101710185679 CD276 antigen Proteins 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 2
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 102100023721 Ephrin-B2 Human genes 0.000 description 2
- 108010044090 Ephrin-B2 Proteins 0.000 description 2
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 2
- 102100028976 HLA class I histocompatibility antigen, B alpha chain Human genes 0.000 description 2
- 102100028971 HLA class I histocompatibility antigen, C alpha chain Human genes 0.000 description 2
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 2
- 108010058607 HLA-B Antigens Proteins 0.000 description 2
- 108010052199 HLA-C Antigens Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000692455 Homo sapiens Platelet-derived growth factor receptor beta Proteins 0.000 description 2
- 101000633784 Homo sapiens SLAM family member 7 Proteins 0.000 description 2
- 101000874179 Homo sapiens Syndecan-1 Proteins 0.000 description 2
- 101710123134 Ice-binding protein Proteins 0.000 description 2
- 101710082837 Ice-structuring protein Proteins 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 102100021457 Killer cell lectin-like receptor subfamily G member 1 Human genes 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 208000032004 Large-Cell Anaplastic Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 2
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 2
- 101000668858 Spinacia oleracea 30S ribosomal protein S1, chloroplastic Proteins 0.000 description 2
- 101000898746 Streptomyces clavuligerus Clavaminate synthase 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 description 2
- 101150106031 TRI gene Proteins 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 2
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 2
- 101710107540 Type-2 ice-structuring protein Proteins 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 101150063416 add gene Proteins 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 206010002449 angioimmunoblastic T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 238000010362 genome editing Methods 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 2
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 2
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 1
- CDKIEBFIMCSCBB-UHFFFAOYSA-N 1-(6,7-dimethoxy-3,4-dihydro-1h-isoquinolin-2-yl)-3-(1-methyl-2-phenylpyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)prop-2-en-1-one;hydrochloride Chemical compound Cl.C1C=2C=C(OC)C(OC)=CC=2CCN1C(=O)C=CC(C1=CC=CN=C1N1C)=C1C1=CC=CC=C1 CDKIEBFIMCSCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 1
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 101150076800 B2M gene Proteins 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100022970 Basic leucine zipper transcriptional factor ATF-like Human genes 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102100026549 Caspase-10 Human genes 0.000 description 1
- 102100038918 Caspase-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 1
- 102000002029 Claudin Human genes 0.000 description 1
- 108050009302 Claudin Proteins 0.000 description 1
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100027417 Cytochrome P450 1B1 Human genes 0.000 description 1
- 102100027816 Cytotoxic and regulatory T-cell molecule Human genes 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- 230000007018 DNA scission Effects 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 101100347633 Drosophila melanogaster Mhc gene Proteins 0.000 description 1
- 101150076616 EPHA2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 101000809594 Escherichia coli (strain K12) Shikimate kinase 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 108050001049 Extracellular proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100026693 FAS-associated death domain protein Human genes 0.000 description 1
- 201000008808 Fibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100027581 Forkhead box protein P3 Human genes 0.000 description 1
- 102100023372 Fos-related antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102100040754 Guanylate cyclase soluble subunit alpha-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100040735 Guanylate cyclase soluble subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100028963 Guanylate cyclase soluble subunit beta-2 Human genes 0.000 description 1
- 101000691214 Haloarcula marismortui (strain ATCC 43049 / DSM 3752 / JCM 8966 / VKM B-1809) 50S ribosomal protein L44e Proteins 0.000 description 1
- 102100028008 Heme oxygenase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010007707 Hepatitis A Virus Cellular Receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100035081 Homeobox protein TGIF1 Human genes 0.000 description 1
- 101000903742 Homo sapiens Basic leucine zipper transcriptional factor ATF-like Proteins 0.000 description 1
- 101000983518 Homo sapiens Caspase-10 Proteins 0.000 description 1
- 101000741087 Homo sapiens Caspase-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000983528 Homo sapiens Caspase-8 Proteins 0.000 description 1
- 101000725164 Homo sapiens Cytochrome P450 1B1 Proteins 0.000 description 1
- 101000911074 Homo sapiens FAS-associated death domain protein Proteins 0.000 description 1
- 101000861452 Homo sapiens Forkhead box protein P3 Proteins 0.000 description 1
- 101001038755 Homo sapiens Guanylate cyclase soluble subunit alpha-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001038749 Homo sapiens Guanylate cyclase soluble subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001059095 Homo sapiens Guanylate cyclase soluble subunit beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001079615 Homo sapiens Heme oxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000596925 Homo sapiens Homeobox protein TGIF1 Proteins 0.000 description 1
- 101001083151 Homo sapiens Interleukin-10 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001003149 Homo sapiens Interleukin-10 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101000599048 Homo sapiens Interleukin-6 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000599056 Homo sapiens Interleukin-6 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101001091194 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase G Proteins 0.000 description 1
- 101000692259 Homo sapiens Phosphoprotein associated with glycosphingolipid-enriched microdomains 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100194605 Homo sapiens RFXANK gene Proteins 0.000 description 1
- 101000821449 Homo sapiens Secreted and transmembrane protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001068027 Homo sapiens Serine/threonine-protein phosphatase 2A catalytic subunit alpha isoform Proteins 0.000 description 1
- 101001068019 Homo sapiens Serine/threonine-protein phosphatase 2A catalytic subunit beta isoform Proteins 0.000 description 1
- 101000863883 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000863692 Homo sapiens Ski oncogene Proteins 0.000 description 1
- 101000688996 Homo sapiens Ski-like protein Proteins 0.000 description 1
- 101000809875 Homo sapiens TYRO protein tyrosine kinase-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 101001050288 Homo sapiens Transcription factor Jun Proteins 0.000 description 1
- 101000610604 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Proteins 0.000 description 1
- 101000922131 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase CSK Proteins 0.000 description 1
- 101000997835 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase JAK1 Proteins 0.000 description 1
- 101000934996 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase JAK3 Proteins 0.000 description 1
- 101001135589 Homo sapiens Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 22 Proteins 0.000 description 1
- 101000617285 Homo sapiens Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000926525 Homo sapiens eIF-2-alpha kinase GCN2 Proteins 0.000 description 1
- 101150017040 I gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102100027268 Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Human genes 0.000 description 1
- 102100030236 Interleukin-10 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100020788 Interleukin-10 receptor subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100037795 Interleukin-6 receptor subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 230000004163 JAK-STAT signaling pathway Effects 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010024305 Leukaemia monocytic Diseases 0.000 description 1
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025280 Lymphocytosis Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 101001043810 Macaca fascicularis Interleukin-7 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 101150076359 Mhc gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025751 Mothers against decapentaplegic homolog 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710143123 Mothers against decapentaplegic homolog 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100025748 Mothers against decapentaplegic homolog 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710143111 Mothers against decapentaplegic homolog 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100025725 Mothers against decapentaplegic homolog 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710143112 Mothers against decapentaplegic homolog 4 Proteins 0.000 description 1
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- 208000010505 Nose Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100024894 PR domain zinc finger protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 208000009565 Pharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034811 Pharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 1
- 102100026066 Phosphoprotein associated with glycosphingolipid-enriched microdomains 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000004211 Platelet factor 4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000778 Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 108010009975 Positive Regulatory Domain I-Binding Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000007568 Proto-Oncogene Proteins c-fos Human genes 0.000 description 1
- 108010071563 Proto-Oncogene Proteins c-fos Proteins 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 1
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 102100021853 Secreted and transmembrane protein 1 Human genes 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100034464 Serine/threonine-protein phosphatase 2A catalytic subunit alpha isoform Human genes 0.000 description 1
- 102100034470 Serine/threonine-protein phosphatase 2A catalytic subunit beta isoform Human genes 0.000 description 1
- 102100029965 Sialic acid-binding Ig-like lectin 9 Human genes 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 102100029969 Ski oncogene Human genes 0.000 description 1
- 102100024451 Ski-like protein Human genes 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000032383 Soft tissue cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101000987219 Sus scrofa Pregnancy-associated glycoprotein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001045447 Synechocystis sp. (strain PCC 6803 / Kazusa) Sensor histidine kinase Hik2 Proteins 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 108091007178 TNFRSF10A Proteins 0.000 description 1
- 102100038717 TYRO protein tyrosine kinase-binding protein Human genes 0.000 description 1
- BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N Temozolomide Chemical compound O=C1N(C)N=NC2=C(C(N)=O)N=CN21 BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102100023132 Transcription factor Jun Human genes 0.000 description 1
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 1
- 102100040113 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Human genes 0.000 description 1
- 102100040112 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Human genes 0.000 description 1
- 102100031167 Tyrosine-protein kinase CSK Human genes 0.000 description 1
- 102100033438 Tyrosine-protein kinase JAK1 Human genes 0.000 description 1
- 102100025387 Tyrosine-protein kinase JAK3 Human genes 0.000 description 1
- 102100033138 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 22 Human genes 0.000 description 1
- 102100021657 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 6 Human genes 0.000 description 1
- 208000023915 Ureteral Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046392 Ureteric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004354 Vulvar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000033559 Waldenström macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N Yttrium-90 Chemical compound [90Y] VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 108010046882 ZAP-70 Protein-Tyrosine Kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000007624 ZAP-70 Protein-Tyrosine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010017070 Zinc Finger Nucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 208000017733 acquired polycythemia vera Diseases 0.000 description 1
- QQINRWTZWGJFDB-YPZZEJLDSA-N actinium-225 Chemical compound [225Ac] QQINRWTZWGJFDB-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 229940125666 actinium-225 Drugs 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 206010065867 alveolar rhabdomyosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-OUBTZVSYSA-N bismuth-210 Chemical compound [210Bi] JCXGWMGPZLAOME-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-RNFDNDRNSA-N bismuth-213 Chemical compound [213Bi] JCXGWMGPZLAOME-RNFDNDRNSA-N 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 1
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 108700010039 chimeric receptor Proteins 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024207 chronic leukemia Diseases 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 108010072917 class-I restricted T cell-associated molecule Proteins 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005220 cytoplasmic tail Anatomy 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 102100034175 eIF-2-alpha kinase GCN2 Human genes 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 208000024519 eye neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 1
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940097042 glucuronate Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002709 granulomonocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 1
- 102000008640 interleukin-21 receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040002099 interleukin-21 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 201000007450 intrahepatic cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 210000001821 langerhans cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 206010024627 liposarcoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001048 lympholytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical class CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 201000003956 middle ear cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024191 minimally invasive lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 201000006894 monocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000001611 myxosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000037830 nasal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000008106 ocular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 230000007903 penetration ability Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 229940109328 photofrin Drugs 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 201000003437 pleural cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 1
- 208000037244 polycythemia vera Diseases 0.000 description 1
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000009101 premedication Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N rachelmycin Chemical compound C1([C@]23C[C@@H]2CN1C(=O)C=1NC=2C(OC)=C(O)C4=C(C=2C=1)CCN4C(=O)C1=CC=2C=4CCN(C=4C(O)=C(C=2N1)OC)C(N)=O)=CC(=O)C1=C3C(C)=CN1 UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- WUAPFZMCVAUBPE-IGMARMGPSA-N rhenium-186 Chemical compound [186Re] WUAPFZMCVAUBPE-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 229960004964 temozolomide Drugs 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000008181 tonicity modifier Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005102 vulva cancer Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/001129—Molecules with a "CD" designation not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001148—Regulators of development
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4613—Natural-killer cells [NK or NK-T]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464412—CD19 or B4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
- A61K2039/804—Blood cells [leukemia, lymphoma]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/10—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the structure of the chimeric antigen receptor [CAR]
- A61K2239/17—Hinge-spacer domain
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/10—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the structure of the chimeric antigen receptor [CAR]
- A61K2239/21—Transmembrane domain
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/10—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the structure of the chimeric antigen receptor [CAR]
- A61K2239/22—Intracellular domain
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/27—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by targeting or presenting multiple antigens
- A61K2239/29—Multispecific CARs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
- A61K2239/48—Blood cells, e.g. leukemia or lymphoma
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
- C12N2740/15041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
- C12N2740/15041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/15043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/16043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Abstract
Description
本発明は、免疫療法分野に属する。より具体的には、本発明は、CD7を標的とする新型キメラ抗原受容体、及びその疾患の処置における使用に関する。
CD7は、細胞表面糖タンパク質であり、分子量が約40kDaであり、免疫グロブリンスーパーファミリーの一員に属する。CD7は、ほとんどのT細胞、NK細胞、骨髄細胞、T細胞急性リンパ球性白血病/リンパ腫、急性顆粒球性白血病と慢性顆粒球白血病に発現している。CD7分子がそのリガンドK12/SECTM1との結合により、T細胞活性化期間に共刺激シグナルの役割を果たすことが報告されている。そして、マウスT前駆細胞におけるCD7分子を破壊すると、依然として正常なT細胞の発育と体内バランスが発生し、表明CD7は、T細胞の発育と機能に重要な影響を与えないようであり、急性リンパ球性白血病(ALL)を処置するのに非常に適切な処置標的となっていることが示される。実際には、CD7は、白血病とリンパ腫を処置する細胞傷害性分子の標的としてすでに広く研究されている。
現在、CD7に対するCAR-T療法は、非常に限られている。そのため、本発明は、効率的なCD7を標的とするCAR細胞療法を提供することを目的とする。
第一の態様によれば、本発明は、新型キメラ抗原受容体を提供し、この新型キメラ抗原受容体は、抗原結合領域と、膜貫通ドメインと、細胞内シグナル伝達領域とを含み、前記抗原結合領域は、CD7を特異的に標的とする抗体を含み、前記細胞内シグナル伝達領域は、共刺激ドメインと、一次シグナル伝導ドメインと、γc鎖又はその細胞内領域とからなる。
一つの好ましい実施形態では、γc鎖のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:14に示し、その細胞内領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:16に示す。
一つの実施形態では、前記抗体は、IgG、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd、Fd′、Fv、scFv、sdFv、線形抗体、シングルドメイン抗体、ナノ抗体とダイアボディから選択され、好ましくは、Fab、scFv、シングルドメイン抗体とナノ抗体から選択され、最も好ましくは、scFvである。
一つの実施形態では、前記抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、マウス化抗体とキメラ抗体から選択される。
一つの実施形態では、前記膜貫通ドメインは、TCRα鎖、TCRβ鎖、TCRγ鎖、TCRδ鎖、CD3ζサブユニット、CD3εサブユニット、CD3γサブユニット、CD3δサブユニット、CD45、CD4、CD5、CD8α、CD9、CD16、CD22、CD33、CD28、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137とCD154というタンパク質の膜貫通ドメインから選択される。好ましくは、膜貫通ドメインは、CD8α、CD4、CD28とCD278の膜貫通ドメインから選択される。
一つの実施形態では、前記共刺激ドメインは、TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、CARD11、CD2、CD7、CD8、CD18(LFA-1)、CD27、CD28、CD30、CD40、CD54(ICAM)、CD83、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)、CD270(HVEM)、CD272(BTLA)、CD276(B7-H3)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)、DAP10、LAT、NKG2C、SLP76、PD-1、LIGHT、TRIM、CD94、LTB及びZAP70というタンパク質から選択される一つ又は複数の共刺激シグナル伝導ドメインである。好ましくは、前記共刺激ドメインは、CD27、CD28、CD134、CD137又はCD278の共刺激シグナル伝導ドメインである。
一つの実施形態では、前記一次シグナル伝導ドメインは、FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζ、CD22、CD79a、CD79bとCD66dというタンパク質のシグナル伝導ドメインから選択される。好ましくは、前記一次シグナル伝導ドメインは、CD3ζのシグナル伝導ドメインを含む。
一つの実施形態では、前記キメラ抗原受容体の抗原結合領域は、第二の抗原を標的とする抗体をさらに含み、前記第二の抗原は、TSHR、CD19、CD123、CD22、BAFF-R、CD30、CD171、CS-1、CLL-1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL-13Ra2、メソテリン、IL-l lRa、PSCA、PRSS21、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR-β、SSEA-4、CD20、Folate受容体α、ERBB2(Her2/neu)、MUC1、EGFR、NCAM、Claudin18.2、Prostase、PAP、ELF2M、Ephrin B2、IGF-I受容体、CAIX、LMP2、gploo、bcr-abl、チロシナーゼ、EphA2、Fucosyl GMl、sLe、GM3、TGS5、HMWMAA、o-アセチル-GD2、Folate受容体β、TEM1/CD248、TEM7R、CLDN6、GPRC5D、CXORF61、CD97、CD 179a、ALK、ポリシアル酸、PLAC1、GloboH、NY-BR-1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、GPR20、LY6K、OR51E2、TARP、WT1、NY-ESO-1、LAGE-la、MAGE-A1、レグマイン、HPV E6、E7、MAGE Al、ETV6-AML、精子タンパク質17、XAGE1、Tie 2、MAD-CT-1、MAD-CT-2、Fos関連抗原1、p53、p53変異体、前立腺特異的タンパク質、生存タンパク質とテロメラーゼ、PCTA-l/Galectin 8、MelanA/MARTl、Ras変異体、hTERT、肉腫転座切断点、ML-IAP、ERG(TMPRSS2ETS融合遺伝子)、NA17、PAX3、アンドロゲン受容体、Cyclin Bl、MYCN、RhoC、TRP-2、CYP1B 1、BORIS、SART3、PAX5、OY-TES 1、LCK、AKAP-4、SSX2、RAGE-1、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、RU1、RU2、腸内カルボキシルエステラーゼ、mut hsp70-2、CD79a、CD79b、CD72、LAIR1、FCAR、LILRA2、CD300LF、CLEC12A、BST2、EMR2、LY75、GPC3、FCRL5、IGLL1、PD1、PDL1、PDL2、TGFβ、APRIL、NKG2Dとそれらのいずれかの組み合わせから選択される。
第二の態様によれば、本発明は、本発明のキメラ抗原受容体をコードする配列を含む核酸、前記核酸を含むベクター、及び前記核酸又はベクターを含む免疫細胞をさらに提供する。
一つの実施形態では、本発明は、核酸を提供し、この核酸は、本発明のキメラ抗原受容体をコードする配列を含む。好ましくは、前記核酸は、DNA又はRNAである。
一つの実施形態では、本発明は、上記核酸を含むベクターを提供する。具体的には、前記ベクターは、線形核酸分子、プラスミド、レトロウイルス、レンチウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、ラウス肉腫ウイルス(RSV)、ポリオーマウイルスとアデノ随伴ウイルス(AAV)、ファージ、ファージミド、コスミド又は人工染色体から選択される。いくつかの実施形態では、このベクターは、免疫細胞内で自律的に複製される始点、選択マーカー、制限酵素切断部位、プロモーター、ポリアデニル酸テール(polyA)、3’UTR、5’UTR、エンハンサー、ターミネーター、インシュレーター、オペロン、選択マーカー、レポーター遺伝子、標的配列及び/又はタンパク質精製タグなどの要素をさらに含む。一つの具体的な実施形態では、前記ベクターは、インビトロで転写されたベクターである。
一つの実施形態では、本発明は、本発明のキメラ抗原受容体を発見できる、本発明の核酸又はベクターを含む操作された免疫細胞を提供する。一つの具体的な実施形態では、前記免疫細胞は、T細胞、マクロファージ、樹状細胞、単球、NK細胞又はNKT細胞から選択される。好ましくは、前記T細胞は、CD4+/CD8+二重陽性T細胞、CD4+ヘルパーT細胞、CD8+T細胞、腫瘍浸潤細胞、記憶T細胞、ナイーブT細胞、CD4-CD8-T細胞、調節性T細胞、γδ-T細胞又はαβ-T細胞である。
一つの実施形態では、前記操作された免疫細胞の内因性CD7と少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子の発現が抑制又はサイレンシングされる。好ましくは、前記免疫細胞の少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現が抑制又はサイレンシングされる。
一つの実施形態では、前記TCR/CD3遺伝子は、TRAC、TRBC、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζとそれらの組み合わせから選択され、前記MHC-II系関連遺伝子は、HLA-DPA、HLA-DQ、HLA-DRA、RFX5、RFXAP、RFXANK、CIITAとそれらの組み合わせから選択される。
一つの具体的な実施形態では、前記操作された免疫細胞の内因性CD7と、TRACとTRBCから選択される少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子と、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITAから選択される少なくとも一つのMHC-II系遺伝子との発現は、抑制又はサイレンシングされる。
第三の態様によれば、本発明は、薬物組成物を提供し、この薬物組成物は、上記で定義された本発明のキメラ抗原受容体又はそのコード核酸、ベクター又はそれらを含む操作された免疫細胞と、一つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含む。
第四の態様によれば、一つの態様では、本発明は、CD7の発現に関連する疾患の被験者を処置する方法をさらに提供し、この方法は、有効量の本発明に記載の操作された免疫細胞又は薬物組成物を前記被験者に投与することを含む。そのため、本発明は、操作された免疫細胞及びそれを含む組成物の、CD7の発現に関連する疾患を処置するための薬物の製造における使用をさらにカバーする。
一つの実施形態では、CD7の発現に関連する疾患は、好ましくは急性リンパ球性白血病(ALL、例えばT-ALL、NK-ALL)、急性骨髄性白血病(AML)、慢性顆粒球性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髓性白血病、Tリンパ芽球性リンパ腫(T-LBL)、非ホジキンリンパ腫、末梢性T細胞リンパ腫(PTCL)、結節外NK/T細胞リンパ腫、γδT細胞リンパ腫と初期のプロTリンパ芽球性白血病(ETP-ALL)から選択される。
発明の詳細な説明
特に断りのない限り、本明細書に使用されるすべての科学技術用語の意味は、本発明の当業者が一般的に理解しているものと同じである。
特に断りのない限り、本明細書に使用されるすべての科学技術用語の意味は、本発明の当業者が一般的に理解しているものと同じである。
キメラ抗原受容体
本明細書で使用されるように、用語である「キメラ抗原受容体」又は「CAR」とは、人工的に構築されたハイブリッドポリペプチドであり、このハイブリッドポリペプチドの基礎構造は、抗原結合領域(例えば抗体の抗原結合部分)、膜貫通ドメイン、共刺激ドメインと一次シグナル伝導ドメインを含む。CARは、モノクローナル抗体の抗原結合特性を利用して非MHC制限的方式でT細胞と他の免疫細胞の特異性と反応性を、選択された標的にリダイレクトすることができる。非MHC制限的抗原認識は、CARを発現するT細胞に抗原処理とは無関係に抗原を認識する能力を与えるため、腫瘍脱出の主なメカニズムを迂回している。なお、T細胞内で発現した場合、CARは、内因性T細胞受容体(TCR)のα鎖とβ鎖と二量化しないことが有利である。
本明細書で使用されるように、用語である「キメラ抗原受容体」又は「CAR」とは、人工的に構築されたハイブリッドポリペプチドであり、このハイブリッドポリペプチドの基礎構造は、抗原結合領域(例えば抗体の抗原結合部分)、膜貫通ドメイン、共刺激ドメインと一次シグナル伝導ドメインを含む。CARは、モノクローナル抗体の抗原結合特性を利用して非MHC制限的方式でT細胞と他の免疫細胞の特異性と反応性を、選択された標的にリダイレクトすることができる。非MHC制限的抗原認識は、CARを発現するT細胞に抗原処理とは無関係に抗原を認識する能力を与えるため、腫瘍脱出の主なメカニズムを迂回している。なお、T細胞内で発現した場合、CARは、内因性T細胞受容体(TCR)のα鎖とβ鎖と二量化しないことが有利である。
一つの実施形態では、本発明による新型キメラ抗原受容体は、抗原結合領域と、膜貫通ドメインと、細胞内シグナル伝達領域とを含み、前記抗原結合領域は、CD7を特異的に標的とする抗体を含み、前記細胞内シグナル伝達領域は、共刺激ドメインと、一次シグナル伝導ドメインと、γc鎖又はその細胞内領域とからなる。言い換えれば、本発明のキメラ抗原受容体の細胞内領域は、共刺激ドメイン、一次シグナル伝導ドメイン、及びγc鎖又はその細胞内領域を除き、シグナル伝導作用を有する他の構造を含まない。そのため、従来のCAR構造の細胞内領域(一次シグナル伝導ドメイン、又は一次シグナル伝導ドメインと共刺激ドメインを含む)と比べて、本発明の新型キメラ抗原受容体の細胞内領域は、γc鎖又はその細胞内領域をさらに含む。一つの実施形態では、前記細胞内シグナル伝達領域に含まれる共刺激ドメイン、一次シグナル伝導ドメイン及びγc鎖又はその細胞内領域は、細胞膜からの距離の近い順に並べられる。即ち共刺激ドメインは、細胞膜から最も近いが、γc鎖又はその細胞内領域は、細胞膜から最も遠い。本明細書で使用されるように、「抗原結合領域」とは、抗原と結合できる任意の構造又はその機能的変異体である。抗原結合領域は、抗体又はその抗原結合部分であってもよい。本明細書で使用されるように、用語である「抗体」は、当業者に理解される最も広い意味を有するとともに、モノクローナル抗体(完全抗体を含む)、ポリクローナル抗体、多価抗体、多重特異的抗体(例えば二重特異的抗体)と、所望の生体活性を示すことができる、一つ又は複数のCDR配列を担持した抗体断片又は合成ポリペプチドを含む。本発明の抗体は、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、マウス化抗体、キメラ抗体及びその抗原結合部分も含む。「抗体断片」又は「抗原結合部分」とは、完全抗体の一部であり、一般的には完全抗体の抗原結合部位を含み、且つそのため、抗原を結合する能力を保持する。本発明における抗体断片の実例は、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd断片、Fd′、Fv断片、scFv、ジスルフィド結合-連結のFv(sdFv)、抗体の重鎖可変領域(VH)又は軽鎖可変領域(VL)、線形抗体、二つの抗原結合部位を有する「ダイアボディ」、シングルドメイン抗体、ナノ抗体、前記抗原の天然リガンド又はその機能的断片などを含むが、それらに限らない。そのため、本発明の「抗体」は、上記で定義された抗体の抗体断片又は抗原結合部分をカバーする。
そのため、一つの実施形態では、本発明の抗体は、IgG、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd、Fd′、Fv、scFv、sdFv、線形抗体、シングルドメイン抗体、ナノ抗体とダイアボディから選択され、好ましくは、Fab、scFv、シングルドメイン抗体とナノ抗体から選択され、最も好ましくは、scFvである。本発明では、抗体は、1価又は2価であってもよく、且つ単特異性、二重特異性又は多重特異性の抗体であってもよい。
「Fab」とは、免疫グロブリン分子がパパインによって溶解された後に発生した二つの同じ断片のうちのいずれかであり、ジスルフィド結合によって連結された完全軽鎖と重鎖N端部分からなり、ここで、重鎖N端部分は、重鎖可変領域とCH1とを含む。完全なIgGと比べて、Fabは、Fc断片がなく、流動性と組織透過能力が比較的高いとともに、抗体効果を媒介することなく抗原を1価結合することができる。
「一本鎖抗体」又は「scFv」は、抗体の重鎖可変領域(VH)と軽鎖可変領域(VL)がリンカーを介して連結された抗体である。リンカーの最適な長さ及び/又はアミノ酸組成を選択することができる。リンカーの長さは、scFvの可変領域の折り畳みと相互作用に明らかに影響する。実は、短いリンカー(例えば5~10個のアミノ酸の間)を使用すると、鎖内の折り畳みを防止することができる。リンカーの大きさと組成の選択については、例えば、Hollingerら、1993Proc Natl Acad.Sci.U.S.A.90:6444-6448、美国特許出願公開番号2005/0100543、2005/0175606、2007/0014794、及びPCT公開番号WO2006/020258とWO2007/024715を参照し、その全文は、援用により本明細書に組込まれる。よく使われるリンカーは、例えばGSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQ ID NO:66)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:67)である。scFvは、任意の順序で連結されたVHとVL、例えばVH-リンカー-VL又はVL-リンカー-VHを含んでもよい。
「シングルドメイン抗体」又は「sdAb」とは、天然の軽鎖欠失抗体であり、この抗体は、一つの重鎖可変領域(VHH)と二つの通常のCH2とCH3領域のみを含み、「重鎖抗体」とも呼ばれる。
「ナノ抗体」又は「Nb」とは、単独でクローンして発現したVHH構造であり、原重鎖抗体に相当する構造安定性及び抗原との結合活性を有し、現在既知の標的抗原と結合可能な最小単位である。
用語である「機能的変異体」又は「機能的断片」とは、前記変異体が親のアミノ酸配列の生体活性を保持するという条件で、基本的に、親のアミノ酸配列を含むがこの親のアミノ酸配列と比べて少なくとも一つのアミノ酸修飾(即ち置換、欠失又は挿入)を含む変異体である。一つの実施形態では、前記アミノ酸修飾は、好ましくは保存的修飾である。
本明細書で使用されるように、用語である「保守的修飾」とは、このアミノ酸配列を含む抗体又は抗体断片の結合特徴に明らかに影響しないか又は変えないアミノ酸修飾である。これらの保存的修飾は、アミノ酸の置換、添加及び欠失を含む。修飾は、当分野で知られている規格技術、例えば部位特異的変異誘発とPCRにより媒介される変異誘発によって本発明のキメラ抗原受容体に導入することができる。保守的アミノ酸の置換は、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換された置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基ファミリーは、すでに当分野で定義されており、塩基性側鎖(例えばリジン、アルギニン、ヒスチジン)、酸性側鎖(例えばアスパラギン酸、グルタミン酸)、非電荷極性側鎖(例えばグリシン、アスパラギン酸、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン)、非極性側鎖(例えばアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン)、β-分岐側鎖(例えばスレオニン、バリン、イソロイシン)及び芳香族側鎖(例えばチロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン)を含む。保守的修飾は、例えば極性、電荷、溶解度、疎水性、親水性及び/又は関与する残基の両親媒性の類似性に基づいて選択することができる。
そのため、「機能的変異体」又は「機能的断片」は、親のアミノ酸配列と少なくとも75%、好ましくは少なくとも76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有するとともに、親のアミノ酸の生体活性、例えば結合活性を保持する。
本明細書で使用されるように、用語である「配列同一性」は、二つの(ヌクレオチド又はアミノ酸)配列が比較において同じ位置に同じ残基を有する程度を表すとともに、一般的には百分率として表される。好ましくは、同一性は、比較される配列の全長にわたって決定される。そのため、全く同じ配列を有する二つのコピーは、100%の同一性を有する。当業者は、規格パラメータを用いて配列同一性を決定するために、いくつかのアルゴリズム、例えばBlast(Altschulらの(1997)Nucleic Acids Res.25:3389-3402)、Blast2(Altschulらの(1990)J.Mol.Biol.215:403-410)、Smith-Waterman(Smithらの(1981)J.Mol.Biol.147:195-197)とClustalWを使用できることを認識する。
一つの実施形態では、本発明のキメラ抗原受容体に含まれるCD7を標的とする抗体は、SEQ ID NO:1、2、と3に示すCDR-L1、CDR-L2とCDR-L3、とSEQ ID NO:4、5と6に示すCDR-H1、CDR-H2とCDR-H3を含む。好ましくは、本発明のCD7を標的とする抗体は、SEQ ID NO:7、10、13、16と19から選択されるアミノ酸配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%、98%、99%又は100%の配列同一性を有する軽鎖可変領域と、SEQ ID NO:8、11、14、17と20から選択されるアミノ酸配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%、98%、99%又は100%の配列同一性を有する重鎖可変領域とを含む。より好ましくは、本発明のキメラ抗原受容体は、抗CD7抗体を含み、そのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:9、12、15、18又は21に示す。
一つの実施形態では、CD7を標的とする抗体に加えて、本発明のキメラ抗原受容体の抗原結合領域は、第二の抗原を標的とする抗体をさらに含み、前記第二の抗原は、TSHR、CD19、CD123、CD22、BAFF-R、CD30、CD171、CS-1、CLL-1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL-13Ra2、メソテリン、IL-l lRa、PSCA、PRSS21、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR-β、SSEA-4、CD20、AFP、Folate受容体α、ERBB2(Her2/neu)、MUC1、EGFR、CS1、CD138、NCAM、Claudin18.2、Prostase、PAP、ELF2M、Ephrin B2、IGF-I受容体、CAIX、LMP2、gploo、bcr-abl、チロシナーゼ、EphA2、Fucosyl GMl、sLe、GM3、TGS5、HMWMAA、o-アセチル-GD2、Folate受容体β、TEM1/CD248、TEM7R、CLDN6、GPRC5D、CXORF61、CD97、CD 179a、ALK、ポリシアル酸、PLAC1、GloboH、NY-BR-1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、GPR20、LY6K、OR51E2、TARP、WT1、NY-ESO-1、LAGE-la、MAGE-A1、レグマイン、HPV E6、E7、MAGE Al、ETV6-AML、精子タンパク質17、XAGE1、Tie 2、MAD-CT-1、MAD-CT-2、Fos関連抗原1、p53、p53変異体、前立腺特異的タンパク質、生存タンパク質とテロメラーゼ、PCTA-l/Galectin 8、MelanA/MARTl、Ras変異体、hTERT、肉腫転座切断点、ML-IAP、ERG(TMPRSS2ETS融合遺伝子)、NA17、PAX3、アンドロゲン受容体、Cyclin Bl、MYCN、RhoC、TRP-2、CYP1B1、BORIS、SART3、PAX5、OY-TES 1、LCK、AKAP-4、SSX2、RAGE-1、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、RU1、RU2、腸内カルボキシルエステラーゼ、mut hsp70-2、CD79a、CD79b、CD72、LAIR1、FCAR、LILRA2、CD300LF、CLEC12A、BST2、EMR2、LY75、GPC3、FCRL5、IGLL1、PD1、PDL1、PDL2、TGFβ、APRIL、NKG2Dとそれらのいずれかの組み合わせから選択される。好ましくは、前記第二の抗原は、CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD38、CD123、CD138、CD171、MUC1、AFP、Folate受容体α、CEA、PSCA、PSMA、Her2、EGFR、IL13Ra2、GD2、NKG2D、EGFRvIII、CS1、BCMA、メソテリンとそれらのいずれかの組み合わせから選択される。当分野で知られている上記腫瘍抗原を標的とする抗体は、いずれも本発明に用いることができる。
一つの好ましい実施形態では、前記第二の抗原を標的とする抗体は、CD19を標的とする抗体であり、それは、
(1)SEQ ID NO:44に示すCDR-L1、SEQ ID NO:45に示すCDR-L2、SEQ ID NO:46に示すCDR-L3、SEQ ID NO:47に示すCDR-H1、SEQ ID NO:48に示すCDR-H2とSEQ ID NO:49に示すCDR-H3、又は
(2)SEQ ID NO:50に示すCDR-L1、SEQ ID NO:51に示すCDR-L2、SEQ ID NO:52に示すCDR-L3、SEQ ID NO:53に示すCDR-H1、SEQ ID NO:54に示すCDR-H2とSEQ ID NO:55に示すCDR-H3を含む。
(1)SEQ ID NO:44に示すCDR-L1、SEQ ID NO:45に示すCDR-L2、SEQ ID NO:46に示すCDR-L3、SEQ ID NO:47に示すCDR-H1、SEQ ID NO:48に示すCDR-H2とSEQ ID NO:49に示すCDR-H3、又は
(2)SEQ ID NO:50に示すCDR-L1、SEQ ID NO:51に示すCDR-L2、SEQ ID NO:52に示すCDR-L3、SEQ ID NO:53に示すCDR-H1、SEQ ID NO:54に示すCDR-H2とSEQ ID NO:55に示すCDR-H3を含む。
一つの好ましい実施形態では、前記第二の抗原を標的とする抗体は、CD19を標的とする抗体であり、それは、SEQ ID NO:56又は59に示すアミノ酸配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%、99%又は100%の配列同一性を有する軽鎖可変領域配列と、SEQ ID NO:57又は60に示すアミノ酸配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%、99%又は100%の配列同一性を有する重鎖可変領域配列とを含む。より好ましくは、本発明のキメラ抗原受容体は、CD7を標的とする抗体と、CD19を標的とする抗体とを含み、前記CD19を標的とする抗体のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:58又は61に示す。
本明細書で使用されるように、用語である「膜貫通ドメイン」とは、キメラ抗原受容体を免疫細胞(例えばリンパ球、NK細胞又はNKT細胞)の表面に発現させるとともに、免疫細胞の標的細胞に対する細胞応答を誘導できるポリペプチド構造である。膜貫通ドメインは、天然又は合成であってもよく、任意の膜結合タンパク質又は膜貫通タンパク質に由来してもよい。キメラ受容体ポリペプチドが標的抗原と結合すると、膜貫通ドメインは、シグナル伝導を行うことができる。特に本発明に適用される膜貫通ドメインは、例えばTCRα鎖、TCRβ鎖、TCRγ鎖、TCRδ鎖、CD3ζサブユニット、CD3εサブユニット、CD3γサブユニット、CD3δサブユニット、CD45、CD4、CD5、CD8α、CD9、CD16、CD22、CD33、CD28、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154及びその機能的断片に由来してもよい。又は、膜貫通ドメインは、合成であってもよく且つ、疎水性残基、例えばロイシンとバリンを主に含んでもよい。好ましくは、前記膜貫通ドメインは、ヒトCD8α鎖に由来し、それは、SEQ ID NO:22に示すアミノ酸配列又はSEQ ID NO:23に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。
一つの実施形態では、本発明のキメラ抗原受容体は、抗原結合領域と膜貫通ドメインとの間に位置するヒンジ領域をさらに含んでもよい。本明細書で使用されるように、用語である「ヒンジ領域」は、一般的には膜貫通ドメインを抗原結合領域に連結するように作用する任意のオリゴペプチド又はポリペプチドである。具体的には、ヒンジ領域は、抗原結合領域のためにより大きな柔軟性とアクセス可能性を提供するために用いられる。ヒンジ領域は、最大300個のアミノ酸、好ましくは10~100個のアミノ酸且つ最も好ましくは25~50個のアミノ酸を含んでもよい。ヒンジ領域は、全部又は一部が天然分子に由来し、例えば全部又は一部がCD8、CD4又はCD28の細胞外領域に由来し、又は全部又は一部が抗体定常領域に由来してもよい。又は、ヒンジ領域は、天然存在するヒンジ配列に対応する合成配列であってもよく、又は、完全に合成されたヒンジ配列であってもよい。好ましい実施の形態では、前記ヒンジ領域は、CD8α鎖、CD28、CD4、FcγRIIIα受容体、IgG4又はIgG1のヒンジ領域部分、より好ましくはCD8α、CD28又はIgG4ヒンジを含み、それは、SEQ ID NO:38、40又は42に示すアミノ酸配列又はSEQ ID NO:39、41又は43に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。
本明細書で使用されるように、用語である「一次シグナル伝導ドメイン」とは、エフェクター機能シグナルを伝導し、特定の機能を行うよう細胞に指導するタンパク質部分である。一次シグナル伝導ドメインは、抗原結合領域で抗原が結合した後の細胞内一次シグナル伝導を担当、それによって免疫細胞と免疫反応の活性化をもたらす。言い換えれば、一次シグナル伝導ドメインは、そのうちのCARを発現する免疫細胞の正常なエフェクター機能の少なくとも一つの活性化を担当する。例えば、T細胞のエフェクター機能は、サイトカインの分泌を含む細胞溶解活性又は補助活性であってもよい。
一つの実施形態では、本発明のキメラ抗原受容体に含まれる一次シグナル伝導ドメインは、抗原受容体結合後に一次シグナル伝導を開始するために共に作用するT細胞受容体と共受容体の細胞質配列、及びこれらの配列の任意の誘導体又は変異体と同じ又は類似の機能を有する任意の合成配列であってもよい。一次シグナル伝導ドメインは、多くの免疫受容対チロシン活性化モチーフ(Immunoreceptor Tyrosine-based Activation Motifs、ITAM)を含んでもよい。本発明の一次シグナル伝導ドメインの非制限的実施例は、FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζ、CD22、CD79a、CD79bとCD66dに由来するそれらのものを含むが、それらに限らない。好ましい実施の形態では、本発明によるCARの一次シグナル形質導入ドメインは、CD3ζシグナル伝導ドメインを含んでもよく、このシグナル伝導ドメインは、SEQ ID NO:30又は32に示すアミノ酸配列又はSEQ ID NO:31又は33に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。
一つの実施形態では、本発明のキメラ抗原受容体の細胞内シグナル伝達領域は、一つ又は複数の共刺激ドメインを含んでもよい。共刺激ドメインは、共刺激分子に由来する細胞内機能的シグナル伝導ドメインであってもよく、それは、前記共刺激分子の細胞内部分全体、又はその機能断片を含む。「共刺激分子」とは、T細胞上で共刺激リガンドと特異的に結合することによって、T細胞の共刺激反応(例えば増殖)を媒介する相同結合パートナーである。共刺激分子は、クラス1 MHC分子、BTLAとTollリガンド受容体を含むが、それらに限らない。本発明の共刺激ドメインの非制限的実施例は、TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、CARD11、CD2、CD7、CD8、CD18(LFA-1)、CD27、CD28、CD30、CD40、CD54(ICAM)、CD83、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)、CD270(HVEM)、CD272(BTLA)、CD276(B7-H3)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)、DAP10、LAT、NKG2C、SLP76、PD-1、LIGHT、TRIM、CD94、LTB及びZAP70のタンパク質に由来する共刺激シグナル伝導ドメインを含むが、それらに限らない。
一つの好ましい実施形態では、前記共刺激ドメインは、DAP10、DAP12、CD27、CD28、CD134、4-1BB又はCD278というタンパク質から選択される一つ又は複数の細胞内領域を含む。例えば、一つの実施形態では、前記共刺激ドメインは、4-1BBの細胞内領域を含む。一つの実施形態では、前記共刺激ドメインは、CD28の細胞内領域を含む。一つの実施形態では、前記共刺激ドメインは、4-1BBの細胞内領域とCD28の細胞内領域とを含む。
一つの実施形態では、4-1BBの細胞内領域は、SEQ ID NO:28に示すアミノ酸配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有し、又はそのコード配列は、SEQ ID NO:29に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。一つの実施形態では、CD28の細胞内領域は、SEQ ID NO:26に示すアミノ酸配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有し、又はそのコード配列は、SEQ ID NO:27に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。
一つの実施形態では、共刺激ドメインと一次シグナル伝導ドメインがシグナル伝導として用いられることに加えて、本発明のキメラ抗原受容体は、シグナル伝導を補強するためにγc鎖又はその細胞内領域をさらに含む。この実施形態では、本発明のキメラ抗原受容体の細胞内領域(即ち、シグナル伝導のための構造)は、共刺激ドメインと、一次シグナル伝導ドメインと、γc鎖又はその細胞内領域との3つのシグナル伝導構造からなる。これは、本発明のキメラ抗原受容体が第4種類のシグナル伝導構造、例えば他のサイトカインのシグナル伝導領域、例えばIL-2Ra、IL2Ra、IL2Rb、IL4Ra、IL7Ra、IL9Ra、IL15Ra、IL21Raなどの細胞内領域を含まないことを意味する。
本明細書で使用されるように、用語である「γc鎖」とは、サイトカインIL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15、IL-21の受容体が共有するγ鎖である。γc鎖は、最初IL-2受容体に同定されたが、その後IL-4、IL-7、IL-9、IL-15、IL-21などの受容体の組成にも関与していることを発見したため、汎用γ鎖とも呼ばれる。例えば、IL-2受容体は、3つの形式があり、α鎖(IL-2Rαとも呼ばれる)、β鎖(IL-2Rβとも呼ばれる)とγc鎖(IL-2Rγ又はIL-2Rgとも呼ばれる)の異なる組み合わせで形成されており、ここで、他の組み合わせと比べて、3つの鎖すべてを含むIL-2受容体は、IL-2サイトカインと最も高い親和力を有する。IL-2受容体の3つの鎖は、細胞膜にアンカーされ、IL-2と結合することで生化学的シグナルを細胞内に伝導する。これらのγ鎖依存的サイトカインのうち、サイトカイン受容体特有の成分、例えばIL-2Rβ、IL-4Rα、IL-7Rα、IL-9Rα、IL-21Rなどは、JAK1との結合を担当するが、γc鎖は、JAK3と結合する。これらのサイトカイン受容体がサイトカインと結合すると、MAPキナーゼ、PI3キナーゼとJAK-STAT経路を含む三つの主なシグナル経路が活性化され、さらにT細胞とNK細胞の生存及び増殖を制御する。
γc鎖は、分子量64kDの糖タンパク質であり、347個のアミノ酸からなり、そのうちは、232個のアミノ酸の細胞外領域と、29個のアミノ酸の膜貫通領域と、86個のアミノ酸の細胞内領域とを含む。細胞内領域には、Src相同領域が含まれ、細胞の生長及びIL-2により媒介されるc-myc、c-fos、c-junなどの遺伝子の発現を促進するのに重要である。一つの実施形態では、本発明に使用できるγc鎖は、SEQ ID NO:62に示すアミノ酸配列又はSEQ ID NO:63に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。一つの実施形態では、本発明に使用できるγc鎖細胞内領域は、SEQ ID NO:64に示すアミノ酸配列又はSEQ ID NO:65に示すヌクレオチド配列と少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも90%、95%、97%又は99%又は100%の配列同一性を有する。好ましくは、本発明のγc鎖は、SEQ ID NO:63に示し、その細胞内領域は、SEQ ID NO:65に示す。一つの実施形態では、本発明のCARは、それが細胞、例えばT細胞で発現された場合、新生タンパク質が内質網に誘導されて、その後、細胞表面に誘導されるように、シグナルペプチドをさらに含んでもよい。シグナルペプチドのコアは、長い疎水性アミノ酸セグメントを含んでもよく、それは、単一のα-らせんを形成する傾向がある。シグナルペプチドの末端には、一般的にシグナルペプチダーゼによって認識と切割されるアミノ酸セグメントがある。シグナルペプチダーゼは、游離シグナルペプチドと成熟タンパク質を産生するために、変位期間又は完了後に切割されてもよい。そして、游離シグナルペプチドは、特定のプロテアーゼによって消化される。本発明に使用できるシグナルペプチドは、当業者によく知られており、例えばCD8α、IgG1、GM-CSFRαなどに由来するシグナルペプチドである。
一つの実施形態では、本発明のCARは、CARの発現時間を制御するためのスイッチ構造をさらに含んでもよい。例えば、スイッチ構造は、該当するリガンドとの結合によってコンホメーション変化を生じさせ、細胞外の抗原結合領域を露出させ、標的される抗原と結合させることによって、シグナル伝導経路を活性化する二量化ドメインの形式であってもよい。又は、スイッチ構造を使用してそれぞれ抗原結合領域とシグナル伝導ドメインとを連結してもよく、スイッチ構造が互いに結合している場合(例えば誘導化合物が存在している場合)にのみ、抗原結合領域とシグナル伝導ドメインは、二量体を介して連結され、それによってシグナル経路を活性化することができる。スイッチ構造は、マスキングペプチドの形式であってもよい。マスキングペプチドは、細胞外の抗原結合領域を遮蔽し、標的される抗原との結合を阻止することができ、例えばプロテアーゼによりマスキングペプチドを切断した後、細胞外の抗原結合領域を露出させ、「通常」のCAR構造とすることができる。当業者に知られている様々なスイッチ構造は、いずれも本発明に用いることができる。
一つの実施形態では、本発明のCARは、自殺遺伝子をさらに含んでもよく、即ち、必要に応じて(例えば深刻な毒性副作用が発生する場合)CAR細胞を除去するために、外来物質によって誘導され得る細胞死シグナルを発見させる。例えば、自殺遺伝子は、挿入されたエピトープの形式、例えばCD20エピトープ、RQR8などであってもよく、必要に応じて、これらのエピトープを標的とする抗体又は試剤を加えることにより、CAR細胞を除去することができる。自殺遺伝子は、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ(HSV-TK)であってもよく、この遺伝子は、ガンシクロビル処置を受けて細胞を誘導して死亡させることができる。自殺遺伝子は、iCaspase-9であってもよく、化学誘導薬物、例えばAP1903、AP20187などによってiCaspase-9の二量化を誘導し、それによって下流のCaspase3分子を活性化し、アポトーシスを引き起こすことができる。当業者に知られている様々な自殺遺伝子は、いずれも本発明に用いることができる。
核酸
本発明は、核酸をさらに提供し、この核酸は、本発明のキメラ抗原受容体をコードする配列を含む。
本発明は、核酸をさらに提供し、この核酸は、本発明のキメラ抗原受容体をコードする配列を含む。
本明細書で使用されるように、用語である「核酸」は、リボヌクレオチドとデオキシリボヌクレオチドの配列、例えば修飾された又は修飾されていないRNA又はDNAを含み、それぞれが一本鎖及び/又は二本鎖形式の線形又は環状、又はそれらの混合物(ヘテロ分子を含む)である。そのため、本発明に係る核酸は、DNA(例えば、dsDNA、ssDNA、cDNA)、RNA(例えば、dsRNA、ssRNA、mRNA、ivtRNA)、それらの組み合わせ又は誘導体(例えば、PNA)を含む。好ましくは、前記核酸は、DNA又はRNA、より好ましくはmRNAである。
核酸は、通常のリン酸ジエステル結合又は非通常の結合(例えばアミド結合、例えばペプチド(PNA)において発見される)を含んでもよい。本発明の核酸は、一つ又は複数の修飾された塩基、例えば、トリフェニルメチル化された塩基と一般的ではない塩基(例えば、イノシン)をさらに含んでもよい。本発明の多鎖CARがポリヌクレオチドから発現することができる限り、化学的、酵素的又は代謝的修飾を含む他の修飾も考えられる。核酸は、分離された形式で提供されてもよい。一つの実施形態では、核酸は、調節配列、例えば転写制御要素(プロモーター、エンハンサー、オペロン、インヒビターと転写終了シグナルを含む)、リボソーム結合部位、イントロンなどを含んでもよい。
本発明の核酸配列をコドン最適化して必要な宿主細胞(例えば、免疫細胞)において最適な発現を行い、又は細菌、酵母菌又は昆虫細胞において発現するために用いられてもよい。コドン最適化とは、目的配列に存在する特定の種の高度発現遺伝子における一般的にまれなコドンを、その種の高度発現遺伝子において一般的によく見られるコドンに置き換えることであり、置き換え前後のコドンは、同じアミノ酸をコードする。そのため、最適なコドンの選択は、宿主ゲノムのコドン使用の選好に依存する。
ベクター
本発明は、ベクターをさらに提供し、このベクターは、本発明に記載の一つ又は複数の核酸を含む。
本発明は、ベクターをさらに提供し、このベクターは、本発明に記載の一つ又は複数の核酸を含む。
本明細書で使用されるように、用語である「ベクター」は、(外来)遺伝子物質を宿主細胞に移送する媒介核酸分子として用いられ、この宿主細胞において前記核酸分子は、例えば複製及び/又は発現可能である。
ベクターは、一般的に標的ベクターと発現ベクターとを含む。「標的ベクター」は、例えば相同組換えにより又は特異的な標的部位に配列するヘテロ組換え酵素を用いて分離された核酸を細胞内部に送達する媒体である。「発現ベクター」は、非相同核酸配列(例えば本発明のキメラ抗原受容体ポリペプチドをコードするそれらの配列)の適切な宿主細胞における転写及びそれらのmRNAの翻訳のためのベクターである。本発明に使用できる適切なベクターは、当分野で知られているとともに、多くは市販から入手可能である。一つの実施形態では、本発明のベクターは、線形核酸分子(例えばDNA又はRNA)、プラスミド、ウイルス(例えばレトロウイルス、レンチウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、ラウス肉腫ウイルス(RSV、ポリオーマウイルスとアデノ随伴ウイルス(AAV)など)、ファージ、ファージミド、コスミドと人工染色体(BACとYACを含む)を含むが、それらに限らない。ベクター自体は、一般的にヌクレオチド配列であり、一般的にはインサート(遺伝子組み換え)のDNA配列とベクターの「骨格」としての比較的大きい配列を含む。工学的ベクターは、一般的に宿主細胞において自律的に複製される始点(ポリヌクレオチドの安定的な発現が必要な場合)と、選択マーカーと、制限酵素切断部位(例えばポリクローナル部位、MCS)をさらに含む。ベクターは、プロモーター、ポリアデニル酸テール(polyA)、3’UTR、エンハンサー、ターミネーター、インシュレーター、オペロン、選択マーカー、レポーター遺伝子、標的配列及び/又はタンパク質精製タグなどの要素をさらに含んでもよい。一つの具体的な実施形態では、前記ベクターは、インビトロで転写されたベクターである。
操作された免疫細胞
本発明は、操作された免疫細胞を提供し、この操作された免疫細胞は、キメラ抗原受容体又はそのコード核酸を含む。
本発明は、操作された免疫細胞を提供し、この操作された免疫細胞は、キメラ抗原受容体又はそのコード核酸を含む。
本明細書で使用されるように、用語である「免疫細胞」とは、免疫系の一つ又は複数のエフェクター機能(例えば、細胞傷害性細胞殺傷活性、サイトカインの分泌、ADCC及び/又はCDCの誘導)を有する任意の細胞である。例えば、免疫細胞は、T細胞、マクロファージ、樹状細胞、単球、NK細胞及び/又はNKT細胞であってもよい。一つの実施形態では、免疫細胞は、乾細胞、例えば成体乾細胞、胚性乾細胞、臍帯血乾細胞、前駆細胞、骨髓乾細胞、誘導多能性乾細胞、全能性乾細胞又は造血乾細胞などから誘導される。好ましくは、免疫細胞は、T細胞である。T細胞は、任意のT細胞、例えばインビトロで培養されたT細胞、例えば初代T細胞であってもよく、又はインビトロで培養されたT細胞系、例えばJurkat、SupT1などのT細胞、又は被験者から得られたT細胞に由来してもよい。被験者の例としては、ヒト、イヌ、ネコ、マウス、ラット及びその遺伝子組み換え種を含む。T細胞は、様々な源から得られてもよく、末梢血単球、骨髓、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位に由来する組織、腹水、胸膜貯留液、脾組織及び腫瘍を含む。T細胞は、濃縮又は精製されてもよい。T細胞は、任意のタイプのT細胞であってもよく且つ任意の発育段階にあってもよく、CD4+/CD8+二重陽性T細胞、CD4+ヘルパーT細胞(例えばTh1とTh2細胞)、CD8+T細胞(例えば、細胞傷害性T細胞)、腫瘍浸潤細胞、記憶T細胞、ナイーブT細胞、CD4-CD8-T細胞、調節性T細胞、γδ-T細胞、αβ-T細胞などを含むが、それらに限らない。一つの好ましい実施形態では、免疫細胞は、ヒトT細胞である。当業者に知られている様々な技術を用いることができ、例えばFicoll分離は、被験者の血液からT細胞を得る。本発明では、免疫細胞は、キメラ抗原受容体ポリペプチドを発見するようにエンジニアリング化される。
当分野で知られている一般的な方法(例えば形質導入、トランスフェクション、形質転換など)を採用することで、キメラ抗原受容体ポリペプチドをコードする核酸配列を免疫細胞に導入し、本発明のキメラ抗原受容体ポリペプチドを発見させることができる。「トランスフェクション」とは、核酸分子又はポリヌクレオチド(ベクターを含む)を標的細胞に導入するプロセスである。一例は、RNAトランスフェクションであり、即ちRNA(例えば、インビトロで転写されたRNA、ivtRNA)を宿主細胞に導入するプロセスである。この用語は、主に真核細胞における非ウイルス方法に用いられる。用語である「形質導入」は、一般的にウイルスにより媒介される核酸分子又はポリヌクレオチドの移送を記述するために用いられる。動物細胞のトランスフェクションは、一般的に細胞膜に瞬間的な穴又は「洞」を開け、材料の取り込みを許容することに関する。リン酸カルシウムを用いて、エレクトロポレーションにより、細胞押し出しにより、又はカチオン性脂質と材料とを混合し、細胞膜と融合してそれらの担体を内部に沈着させたリポソームを産生することにより、トランスフェクションを行うことができる。真核宿主細胞をトランスフェクションするための例示的な技術は、脂質小胞により媒介される取り込み、熱ショックにより媒介される取り込み、リン酸カルシウムにより媒介されるトランスフェクション(リン酸カルシウム/DNA共沈)、マイクロインジェクションとエレクトロポレーションを含む。用語である「形質転換」は、核酸分子又はポリヌクレオチド(ベクターを含む)の細菌へ、非動物真核細胞(植物細胞を含む)における非ウイルスへの移送を記述するために用いられる。そのため、形質転換は、細菌又は非動物真核細胞の遺伝子改変であり、細胞膜を介してその周囲から直接取り込み、その後に外来遺伝子物質(核酸分子)を取り込むことによって発生する。形質転換は、人工的な手段で実現することができる。形質転換を起こすためには、細胞又は細菌は、感受性状態でなければならない。原核形質転換に対して、技術は、熱ショックにより媒介される取り込み、完全細胞の細菌プロトプラストとの融合、マイクロインジェクションとエレクトロポレーションを含んでもよい。
一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の内因性CD7の発現は、抑制又はサイレンシングされる。一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子の発現は、抑制又はサイレンシングされる。一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の内因性CD7と少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子の発現は、抑制又はサイレンシングされる。
CD7は、腫瘍細胞、例えばT細胞急性リンパ球性白血病/リンパ腫、急性顆粒球性白血病と慢性顆粒球白血病に発現されるだけでなく、ほとんどの正常なT細胞とNK細胞にも発現される。そのため、CD7を標的とするCAR細胞間の相互認識と殺傷を回避するために、CAR細胞の内因性CD7遺伝子の発現を抑制又はサイレンシングする必要がある。
T細胞表面受容体(T cell receptor、TCR)は、すべてのT細胞表面の特徴的なマーカーであり、非共有結合でCD3と結合してTCR/CD3複合体を形成し、抗原提示細胞表面の特異的MHC-抗原ペプチド複合体と結合することにより、特異的抗原刺激シグナルを生成し、T細胞を活性化し、殺傷作用を発揮する。そのため、CAR-T細胞における内因性TCR/CD3遺伝子の発現を抑制又はサイレンシングさせることは、患者体内の正常な細胞又は組織への攻撃を回避し、さらに移植片対宿主病(GvHD)の発生リスクを回避又は低減させることができる。TCRは、2つの異なるペプチド鎖から構成されるヘテロダイマーであり、一般的には、α/β型とγ/δ型の2種類に分けられ、ここで、95%以上の末梢Tリンパ球性は、いずれもTCRα/βを発現する。TCRα鎖は、TRAC遺伝子によりコードされ、β鎖は、TRBC遺伝子によりコードされる。TCRの各ペプチド鎖は、可変領域(V領域)と、定常領域(C区)と、膜貫通領域と、細胞質領域とを含み、ここで、細胞質領域は、非常に短く、抗原刺激シグナルを伝導する能力を備えない。TCR分子は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、その抗原特異性は、V領域に存在し、V領域には、さらに三つの高変位領域CDR1、CDR2、CDR3があり、そのうち、CDR3の変異が最も大きく、TCRの抗原結合特異性を直接決める。TCRがMHC-抗原ペプチド複合体を認識する時、CDR1、CDR2は、MHC分子を認識して結合するが、CDR3は、抗原ペプチドに直接結合する。CD3は、4種類のサブユニット:γ、δ、ε、ζを含み、一般的には二量体εγ、εδ、ζζの形式で存在する。これらの4種類のサブユニットは、いずれも保存された免疫受容対チロシン活性化モチーフ(Immunoreceptor tyrosine-based activation motif、ITAM)を含み、そのうちの2つのチロシン残基は、チロシンタンパク質キナーゼによってリン酸化された後、T細胞に活性化シグナルを伝導する。そのため、一つの実施形態では、少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子は、TRAC、TRBC、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζから選択される。
一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現は、抑制又はサイレンシングされる。一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の内因性CD7と少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現は、抑制又はサイレンシングされる。一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子と少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現は、抑制又はサイレンシングされる。一つの実施形態では、本発明による操作された免疫細胞の内因性CD7、少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子と少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現は、抑制又はサイレンシングされる。この実施形態では、MHC-II系関連遺伝子は、MHC-II系遺伝子自体、及びMHC-II系遺伝子と相互作用するか又はその発見を制御する遺伝子を含む。
主要組織適合性複合体(major histocompatibility complex、MHC)は、最初に移植反応において主な役割を果たすタンパク質として特徴付けられ、すべての高等脊椎動物の表面に発現されるとともに、マウスではH-2と呼ばれ、ヒト細胞ではHLAと呼ばれる。MHCは、主にI類とII類の2種類がある。I類MHCタンパク質は、二つのタンパク質のヘテロダイマーであり、一つは、MHC I遺伝子によりコードされる膜貫通タンパク質α鎖であり、別は、MHC遺伝子クラスター内にない遺伝子によりコードされる細胞外タンパク質のβ2ミクログロブリン鎖である。α鎖は、三つのドメインを含み、外来ペプチドは、N末端でも最も可変な二つのドメインα1、α2と結合する。II類MHCタンパク質は、ヘテロダイマーでもあり、MHC複合体内の遺伝子によりコードされる二つの膜貫通タンパク質を含む。I類MHC/抗原複合体は、細胞傷害性T細胞(例えばCD8+T細胞)と相互作用するが、II類MHCは、ヘルパーT細胞(例えばCD4+T細胞)に抗原を提示する。なお、I類MHCタンパク質は、ほぼすべての有核細胞と血小板(及びマウスにおける赤血球)で発見される傾向があるが、II類MHCタンパク質は、より選択的に発現される。一般的には、II類MHCタンパク質は、B細胞、いくつかのマクロファージと単球、活性化されたT細胞、ランゲルハンス細胞(Langerhans cell)と樹状細胞に発現される。
ヒトのII類HLAクラスターは、三つの主要遺伝子座DP、DQとDRを含む。II類分子は、共に膜にアンカーされたα鎖とβ鎖からなるヘテロダイマーであり、ここで、α鎖は、約33-35kDaであるとともに、5つのエクソンを含む。エクソン1は、前駆ペプチドをコードし、エクソン2と3は、二つの細胞外ドメインをコードし、エクソン4は、膜貫通ドメインをコードし、エクソン5は、細胞質尾部をコードする。そのため、一つの実施形態では、MHC-II系関連遺伝子は、HLA-DPA、HLA-DQとHLA-DRAから選択される。
MHC-II系遺伝子の発現は、さらに様々な重要なフォワードコントロールタンパク質、例えばRFX複合体、CIITAなどに依存している。RFX複合体は、三つのサブユニット:RFXANK(RFXBとも呼ばれる)、RFX5とRFXヘルパータンパク質(RFXAPとも呼ばれる)からなる。RFX複合体は、他の転写因子のII類MHC分子のプロモーターへの結合を促進し、プロモーター結合の特異性を補強することにより、II類MHC分子の発現を促進する。CIITAは、II類MHC発現の主な制御因子である。CIITAは、酸性アミノ酸に富むN端、Pro、Ser、Thrに富むPST領域、中間のGTP結合領域及びLeu反復配列(LRR)に富むC端を含み、ここで、N端酸性領域とPST領域は、転写活性化領域である。そのため、一つの実施形態では、MHC-II系関連遺伝子は、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITAから選択される。
そのため、一つの実施形態では、MHC-II系関連遺伝子は、HLA-DPA、HLA-DQ、HLA-DRA、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITAから選択され、好ましくは、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITA、より好ましくはRFX5又はCIITAから選択される。
一つの実施形態では、CAR-T細胞における内因性MHC-I系遺伝子(例えばHLA-A、HLA-B、HLA-C、B2Mなど)は、機能性である。別の実施形態では、CAR-T細胞における内因性MHC-I系遺伝子の発現も抑制又はサイレンシングされる。
一つの実施形態では、本発明に記載の発現CD7を標的とするキメラ抗原受容体の操作された免疫細胞の内因性CD7、少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子と少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現が抑制又はサイレンシングされ、ここで、前記少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子は、TRAC、TRBC、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζとそれらの組み合わせから選択され、前記少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子は、HLA-DPA、HLA-DQ、HLA-DRA、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITAから選択される。一つの好ましい実施形態では、本発明に記載の発現CD7を標的とするキメラ抗原受容体の操作された免疫細胞の内因性CD7と、TRACとTRBCから選択される少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子と、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITAから選択される少なくとも一つのMHC-II系遺伝子との発現が抑制又はサイレンシングされる。より好ましくは、本発明に記載の発現CD7を標的とするキメラ抗原受容体の操作された免疫細胞の内因性CD7、TRACとTRBCから選択される少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子とRFX5の発現が抑制又はサイレンシングされる。より好ましくは、本発明に記載の発現CD7を標的とするキメラ抗原受容体の操作された免疫細胞の内因性CD7、TRACとTRBCから選択される少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子とCIITAの発現が抑制又はサイレンシングされる。一つの実施形態では、前記操作された免疫細胞におけるMHC-I系遺伝子、例えばHLA-A、HLA-B、HLA-CとB2Mの発現は、機能性である。
一つの実施形態では、CD7、MHC-II系関連遺伝子とTCR/CD3遺伝子に加えて、本発明の操作された免疫細胞は、CD52、GR、dCKと免疫検査点遺伝子、例えばPD1、LAG3、TIM3、CTLA4、PPP2CA、PPP2CB、PTPN6、PTPN22、PDCD1、HAVCR2、BTLA、CD160、TIGIT、CD96、CRTAM、TNFRSF10B、TNFRSF10A、CASP8、CASP10、CASP3、CASP6、CASP7、FADD、FAS、TGFBRII、TGFRBRI、SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD10、SKI、SKIL、TGIF1、IL10RA、IL10RB、HMOX2、IL6R、IL6ST、EIF2AK4、CSK、PAG1、SIT、FOXP3、PRDM1、BATF、GUCY1A2、GUCY1A3、GUCY1B2とGUCY1B3から選択される少なくとも一つの遺伝子の発現が抑制又はサイレンシングされるをさらに含んでもよい。
遺伝子の発現を抑制するか又は遺伝子をサイレンシングさせる方法は、当業者に良く知られているものであり、例えば通過広範囲ヌクレアーゼ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、TALEヌクレアーゼ又はCRISPR系におけるCas酵素の媒介によるDNA切断、又は通過アンチセンスオリゴヌクレオチド、RNAi、shRNAなどの技術による遺伝子の不活性化を含むが、それらに限らない。
一つの実施形態では、本発明の操作された免疫細胞は、免疫抑制分子をさらに発見し、前記免疫抑制分子は、一つ又は複数の免疫細胞抗原結合領域と、膜貫通ドメインと、共刺激ドメインとを含む。本発明の操作された免疫細胞を被験者に投与する場合、前記免疫抑制分子は、前記被験者体内の免疫細胞(例えばNK細胞、T細胞)の外来性操作された免疫細胞に対する免疫反応を抑制又は低減させ、さらにHvGリスクを低減させることができる。一つの実施形態では、前記免疫抑制分子は、一次シグナル伝導ドメインを含まない。膜貫通ドメイン、共刺激ドメインと一次シグナル伝導ドメインは、上記のように定義される。
一つの実施形態では、前記免疫細胞抗原結合領域は、免疫細胞抗原を標的とする抗体、免疫細胞抗原のリガンド又はその組み合わせである。好ましくは、前記抗体は、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd、Fd′、Fv、scFv、sdFv、線形抗体、シングルドメイン抗体、ナノ抗体とダイアボディから選択される。好ましくは、前記免疫細胞抗原は、NKG2A、NKG2B、NKG2C、NKG2D、NKG2E、NKP46、LIR1、LIR2、LIR3、LIR5、LIR8、PD-1、TIGIT、TIM3、LAG3、KIR、CEACAM1、LAIR1、SIGLEC7、SIGLCE9、KLRG1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CD16a、CD16b、CD25、CD27、CD28、CD30、CD38、CD45、CD48、CD50、CD52、CD56、CD57、CD62L、CD69、CD94、CD96、CD100、CD102、CD122、CD127、CD132、CD137、CD160、CD161、CD178、CD218、CD226、CD244、CD279、CD305、CD337、CS1とそれらの組み合わせから選択される。好ましくは、前記免疫細胞抗原は、NKG2A、NKG2B、CD94、LIR1、LIR2、LIR3、SIGLEC7、SIGLCE9、KIR、CEACAM1、LAIR1、KLRG1とそれらの組み合わせから選択される。一つの実施形態では、前記免疫細胞抗原のリガンドは、HLA-E、HLA-F、HLA-G、カドヘリン(例えばE-カドヘリン、N-カドヘリン、R-カドヘリン)、コラーゲン、OCIL、シアル酸、PD-L1、PD-L2、CD155、CTLA4、CD112、CD113、Gal-9、FGL1又はその細胞外領域から選択される。好ましくは、前記免疫細胞抗原のリガンドは、HLA-E、HLA-F、HLA-G、E-カドヘリン、PD-L1、PD-L2又はその細胞外領域から選択される。一つの実施形態では、前記免疫細胞抗原結合領域は、抗NKG2A抗体、抗LIR1抗体、抗SIGLEC7抗体、抗SIGLCE9抗体、抗KIR抗体、抗KLRG1抗体、PD-L1細胞外領域、PD-L2細胞外領域、E-カドヘリン細胞外領域、HLA-E細胞外領域、HLA-G細胞外領域又はそれらの組み合わせを含む。一つの実施形態では、前記操作された免疫細胞は、第二の抗原を標的とする第二のキメラ抗原受容体をさらに含み、前記第二の抗原は、上記のように定義される。この実施形態では、前記第二のキメラ抗原受容体は、γc鎖又はその細胞内領域を含んでも又は含まなくてもよい。
一つの実施形態では、様々な免疫細胞を提供し、各免疫細胞は、一つ又は複数のキメラ抗原受容体を発見するように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、一つの免疫細胞を、CD7を結合する及び/又は標的とするキメラ抗原受容体(例えば、本発明に記載の抗CD7抗体のCARを含む)を発見するように改変するとともに、別の細胞を、他の抗原を結合する及び/又は標的とするキメラ抗原受容体を発見するように改変する。一つの実施形態では、免疫細胞は、多重特異的キメラ抗原受容体も発見することができ、それは、CD7を含む一つ又は複数の抗原を標的とする。例えば、このような多重特異的キメラ抗原受容体は、CD7を標的とする多重特異的抗体を含み、又は本発明に記載の抗CD7抗体と他の抗原を標的とする抗体を同時に含んでもよい。このような実施形態では、前記様々な操作された免疫細胞は、一緒に又は個別に投与されてもよい。一つの実施形態では、前記様々な免疫細胞は、同一組成物に又は異なる組成物にあってもよい。細胞の例示的な組成物は、本出願の次の章に記述された組成物を含む。
薬物組成物
本発明は、薬物組成物をさらに提供し、それは、活性剤として本発明に記載のキメラ抗原受容体、核酸、ベクター又は操作された免疫細胞と、一つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含む。そのため、本発明は、前記キメラ抗原受容体、核酸、ベクター又は操作された免疫細胞の、薬物組成物又は薬物の製造における使用をさらにカバーする。
本発明は、薬物組成物をさらに提供し、それは、活性剤として本発明に記載のキメラ抗原受容体、核酸、ベクター又は操作された免疫細胞と、一つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含む。そのため、本発明は、前記キメラ抗原受容体、核酸、ベクター又は操作された免疫細胞の、薬物組成物又は薬物の製造における使用をさらにカバーする。
本明細書で使用されるように、用語である「薬学的に許容される賦形剤」とは、薬理学的及び/又は生理学的に被験者と有効成分に適合する(即ち、任意の望ましくない局所的又は全身的な作用を引き起こすことなく、必要な処置効果を誘発することができる)ベクター及び/又は賦形剤であり、それは、当分野において公知である(例えばRemington’s Pharmaceutical Sciences.Edited by Gennaro AR、19th ed.Pennsylvania:Mack Publishing Company、1995を参照する)。薬学的に許容される賦形剤の実例は、充填剤、結合剤、崩壊剤、コーティング剤、吸着剤、付着防止剤、流動促進剤、酸化防止剤、調味剤、着色剤、甘味剤、溶媒、共溶媒、緩衝剤、キレート剤、画面活性剤、希釈剤、潤湿剤、防腐剤、乳化剤、被覆剤、等張化剤、吸収遅延剤、安定剤と張力調節剤を含むが、それらに限らない。当業者は、本発明の所望の薬物組成物を製造するために適切な賦形剤を選択することが知られている。本発明の薬物組成物において使用される例示的な賦形剤は、塩水、緩衝塩水、グルコースと水を含む。一般的には、適切な賦形剤の選択は、特に使用される活性剤、処置される疾患と薬物組成物の所望の剤形に依存する。
本発明に係る薬物組成物は、様々な経路での投与に適用されてもよい。一般的には、胃腸外で投与が完了する。胃腸外送達方法は、局所、動脈内、筋内、皮下、髓内、鞘内、心室内、静脈内、腹膜内、子宮内、膣内、舌下又は鼻内投与を含む。
本発明に係る薬物組成物は、処置すべき疾患の処置及び/又は予防に適用される一つ又は複数の他の薬剤と組み合わせて投与することもできる。組み合わせに適用される薬剤の好ましい実例は、既知の抗癌薬物、例えばシスプラチン、メイタンシン誘導体、ラケルマイシン(rachelmycin)、カリケアマイシン(calicheamicin)、ドセタキセル、エトポシド、ゲムシタビン、イホスファミド、イホスファミド、イホスファミド、ミトキサントロン、ソルフィマーソディウムホトフィリンII(sorfimer sodiumphotofrin II)、テモゾロマイド、トポテカン、トリメトレキサート(trimetreate glucuronate)、オーリスタチンE(auristatin E)、ビンクリスチン及びドキソルビシン、ペプチド細胞毒素、例えばジフテリア、ジフテリア毒素、シュードモナス細菌外毒素A、DNA酵素とRNA酵素、放射性核種、例えばヨウ素131、レニウム186、インジウム111、イットリウム90、ビスマス210と213、アクチニウム225とアスタチン213、前薬、例えば抗体指向性酵素プロドラッグ、免疫増強剤、例えばIL-2、ケモカイン例えば、IL-8、血小板第4因子、メラノーマ増殖刺激タンパク質など、抗体又はその断片、例えば抗CD3抗体又はその断片、補体活性化剤、非相同タンパク質ドメイン、相同タンパク質ドメイン、ウイルス性/細菌性タンパク質ドメインとウイルス性/細菌性ペプチドを含む。なお、本発明の薬物組成物は、他の一つ又は複数の処置方法、例えば化学療法、放射線療法と組み合わせて使用することもできる。
処置応用
本発明は、CD7の発現に関連する疾患に罹患している被験者を処置する方法をさらに提供し、この方法は、有効量の本発明に記載の免疫細胞又は薬物組成物を前記被験者に投与することを含む。そのため、本発明は、前記操作された免疫細胞及び薬物組成物の、CD7の発現に関連する疾患を処置する薬物の製造における使用をさらにカバーする。
本発明は、CD7の発現に関連する疾患に罹患している被験者を処置する方法をさらに提供し、この方法は、有効量の本発明に記載の免疫細胞又は薬物組成物を前記被験者に投与することを含む。そのため、本発明は、前記操作された免疫細胞及び薬物組成物の、CD7の発現に関連する疾患を処置する薬物の製造における使用をさらにカバーする。
一つの実施形態では、有効量の本発明の免疫細胞及び/又は薬物組成物を被験者に直接投与する。
別の実施形態では、本発明の処置方法は、エクソボ療法である。具体的には、この方法は、(a)免疫細胞を含むサンプルを提供するステップと、(b)本発明のキメラ抗原受容体及び他の外来性遺伝子(ある場合)をインビトロで前記免疫細胞に導入し、前記免疫細胞における特定の遺伝子(例えば内因性CD7、TCR/CD3遺伝子とMHC-II系関連遺伝子)の発現を抑制又はサイレンシングさせ、修飾された免疫細胞を得るステップと、(c)前記修飾された免疫細胞を必要のある被験者に投与するステップとを含む。好ましくは、ステップ(a)で提供される免疫細胞は、マクロファージ、樹状細胞、単球、T細胞、NK細胞及び/又はNKT細胞から選択されるとともに、前記免疫細胞は、当分野で知られている一般的な方法により被験者のサンプル(特に血液サンプル)から得られる。しかしながら、本発明のキメラ抗原受容体を発見でき、且つ本明細書に記載の所望の生物学的効果機能を発揮できる他の免疫細胞を使用することもできる。なお、一般的に選択される免疫細胞は、被験者の免疫系と適合であり、即ち好ましくは、前記免疫細胞は、免疫原性応答を誘発しない。例えば、「汎用受容体細胞」、即ち所望の生物学的効果機能を発揮する、一般的に適合性のある、インビトロで成長と増幅可能なリンパ球性を使用することができる。このような細胞の使用は、被験者自体のリンパ球性の取得及び/又は提供を必要としない。ステップ(c)のエクスビボ導入は、エレクトロポレーションを介して本明細書に記載の核酸又はベクターを免疫細胞に導入するか又はウイルスベクターで免疫細胞を感染させることによって実施することができ、前記ウイルスベクターは、前記に記載のレンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター又はレトロウイルスベクターである。他の考えられる方法は、トランスフェクション試剤(例えば、リポソーム)の使用又は瞬時RNAトランスフェクションを含む。
一つの実施形態では、前記免疫細胞は、自己又は同種異系の細胞、好ましくはT細胞、マクロファージ、樹状細胞、単球、NK細胞及び/又はNKT細胞、より好ましくはT細胞、NK細胞又はNKT細胞である。
本明細書で使用されるように、用語である「自己」とは、個体に由来の任意の材料が後でこの同じ個体に再導入されることである。
本明細書で使用されるように、用語である「同種異系」とは、任意の材料が、この材料が導入された個体と同じ種の異なる動物又は異なる患者に由来することである。一つ又は複数の遺伝子座における遺伝子が異なる場合、二つ又は複数の固体が互いに同種であると考えられる。いくつかの場合に、同一種の各個体に由来する同種異系材料の遺伝子的な相違は、抗原相互作用を起こすのに十分である可能性がある。
本明細書で使用されるように、用語である「被験者」は、哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長類動物、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマ又はウシであってもよいが、これらの実例に限らない。ヒト以外の哺乳動物は、癌動物モデルを代用する被験者として有利に用いることができる。好ましくは、前記被験者は、ヒトである。
一つの実施形態では、CD7の発現に関連する疾患は、非固形腫瘍(例えば血液学的腫瘍、例えば白血病とリンパ腫)と固形腫瘍を含む。血液学的腫瘍は、血液又は骨髓の癌であり、急性白血病、例えば急性リンパ球性白血病(ALL、例えばT-ALL、NK-ALL)、急性骨髄性白血病(AML)、急性骨髓性白血病と骨髄芽球性、前骨髄球性、顆粒単球型、単球性と赤白血病、慢性白血病、例えば慢性顆粒球性白血病、慢性骨髓性白血病と慢性リンパ球性白血病、真性赤血球増加症、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫(無痛性と高位性)、末梢性T細胞リンパ腫(PTCL)、血管免疫芽球 T細胞リンパ腫 (AITL)、未分化大細胞リンパ腫(ALCL)、結節外NK/T細胞リンパ腫、多発性骨髓瘤、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、骨髄異形成症候群、有毛細胞白血病、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Tリンパ芽球性リンパ腫(T-LBL)、γδT細胞リンパ腫、初期のプロTリンパ芽球性白血病(ETP-ALL)、小リンパ球性リンパ腫(SLL)と骨髄異形成症候群を含むが、それらに限らない。固形腫瘍は、一般的に嚢胞又は液体領域を含まない組織の異常な腫瘤であり、それは、良性又は悪性であってもよい。異なるタイプの固形腫瘍は、それらを形成する細胞タイプで命名される(例えば肉腫、癌とリンパ腫)。固形腫瘍の実例は、繊維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫中皮瘤、膵臓癌、卵巣癌、腹膜、大網膜と腸間膜癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、腎癌、皮膚癌、小腸癌、黒色瘤、腎癌、喉頭癌、軟部癌、胃癌、精巣癌、結腸癌、食道癌、子宮頸癌、胞巣型横紋筋肉腫、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳腺癌、肛門癌、眼癌、肝内胆管癌、関節癌、頸部癌、胆のう癌、胸膜癌、鼻癌、中耳癌、口腔癌、外陰癌、甲状腺癌と尿管癌を含むが、それらに限らない。
一つの実施形態では、CD7の発現に関連する疾患は、好ましくは急性リンパ球性白血病(ALL、例えばT-ALL、NK-ALL)、急性骨髄性白血病(AML)、慢性顆粒球性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髓性白血病、Tリンパ芽球性リンパ腫(T-LBL)、非ホジキンリンパ腫、末梢性T細胞リンパ腫(PTCL)、結節外NK/T細胞リンパ腫、γδT細胞リンパ腫と初期のプロTリンパ芽球性白血病(ETP-ALL)から選択される。
以下は、図面を参照して実例を結び付けながら本発明を詳細に説明する。説明すべきこととして、当業者は、本発明の図面及びその実施例がただ例示の目的であり、本発明に対して任意の制限を構成しないことを理解すべきである。矛盾することなく、本出願における実施例及び実施例における特徴は、互いに組み合わせられる可能である。
実施例1:デュアルノックアウトCD7-UCAR T細胞の製造
以下のタンパク質のコード配列を合成し、pLVXベクター(Public Protein/Plasmid Library(PPL)、品番:PPL00157-4a):CD8αシグナルペプチド(SEQ ID NO:36)、抗CD7 scFv(SEQ ID NO:12)、CD8αヒンジ領域(SEQ ID NO:38)、CD8α膜貫通領域(SEQ ID NO:22)、4-1BB共刺激ドメイン(SEQ ID NO:28)、CD3ζ一次シグナル伝導ドメイン(SEQ ID NO:32)に順にクローンし、従来のbbz-CARプラスミドを得、そしてシークエンスにより目的配列の正しい挿入を確認した。同様な方法でbbzg-CARプラスミドを得、bbz-CARプラスミドとの唯一の相違点は、CD3ζ一次シグナル伝導ドメインと結合するγ鎖細胞内領域(SEQ ID NO:65)をさらに含み、ここで、γ鎖細胞内領域がCD3ζのC端に位置することである。
以下のタンパク質のコード配列を合成し、pLVXベクター(Public Protein/Plasmid Library(PPL)、品番:PPL00157-4a):CD8αシグナルペプチド(SEQ ID NO:36)、抗CD7 scFv(SEQ ID NO:12)、CD8αヒンジ領域(SEQ ID NO:38)、CD8α膜貫通領域(SEQ ID NO:22)、4-1BB共刺激ドメイン(SEQ ID NO:28)、CD3ζ一次シグナル伝導ドメイン(SEQ ID NO:32)に順にクローンし、従来のbbz-CARプラスミドを得、そしてシークエンスにより目的配列の正しい挿入を確認した。同様な方法でbbzg-CARプラスミドを得、bbz-CARプラスミドとの唯一の相違点は、CD3ζ一次シグナル伝導ドメインと結合するγ鎖細胞内領域(SEQ ID NO:65)をさらに含み、ここで、γ鎖細胞内領域がCD3ζのC端に位置することである。
無菌チューブに3ml Opti-MEM(Gibco、品番31985-070)を加えて上記プラスミドを希釈した後、さらにプラスミド:ウイルス包装ベクター:ウイルスエンベロープベクター=4:2:1の割合で包装ベクターpsPAX2(Addgene、品番12260)とエンベロープベクターpMD2.G(Addgene、品番12259)を加えた。そして、120ul X-treme GENE HP DNAトランスフェクション試剤(Roche、品番06366236001)を加えると、即座に均一混合し、室温で15minインキュベートし、そしてプラスミド/ベクター/トランスフェクション試剤混合物を293T細胞の培養瓶に1滴ずつ加えた。24時間と48時間にウイルスを収集し、それを統合した後、超速遠心分離(25000g、4℃、2.5時間)して濃縮bbz-CARレンチウイルスとbbzg-CARレンチウイルスを得た。
DynaBeads CD3/CD28 CTSTM(Gibco、品番40203D)でT細胞を活性化し、37℃と5%CO2で1日培養した。そしてCRISPR/Cas9系を用いて野生型T細胞におけるTCR/CD3成分(具体的にはTRAC遺伝子)とCD7遺伝子をノックアウトし、TCR/CD7ダブルノックアウトのdKO-T細胞を得た。遺伝子がノックアウトされていない野生型T細胞(即ち、NT細胞)を対照とした。
FITC Mouse Anti-Human CD3(BD Pharmingen、品番555916)抗体とPE mouse anti-human CD7(biolegend品番395604)を用いて、フローサイトメトリーによりT細胞におけるTCRとCD7の遺伝子編集効率を検出し、結果を表1に示す。
表1.T細胞における遺伝子の発現効率
表1から分かるように、本発明により製造されたdKO-T細胞では、関連する遺伝子の発現は、効果的に抑制又はサイレンシングされた。
濃縮後のレンチウイルスをdKO-T細胞に加え、二つのUCAR-T細胞(即ち、bbz-dKO T細胞とbbzg-dKO T細胞)を得た。37℃と5%CO2で11日培養した後、Biotin-SP(long spacer)AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG、F(ab’)2Fragment Specific(min X Hu、Bov、Hrs Sr Prot)(jackson immunoresearch、品番115-065-072)を一次抗体として用い、APC Streptavidin(BD Pharmingen、品番554067)又はPE Streptavidin(BD Pharmingen、品番554061)を二次抗体として用い、フローサイトメトリーによりUCAR T細胞上のscFvの発現レベルを検出し、結果を図1に示す。
結果から分かるように、本実施例により製造されたUCAR-T細胞におけるscFvは、いずれも効果的に発現されることができ、γ鎖細胞内領域の加えがCAR構造の表面発現に影響しないことを示す。
実施例2:UCAR T細胞による標的細胞の殺傷効果とサイトカイン放出
2.1 UCAR-T細胞による標的細胞の殺傷効果
CAR-T細胞による標的細胞の殺傷能力を検出するために、まず1x104/ウェルでルシフェリン遺伝子を担持したJurkat標的細胞を96ウェルプレートに敷き詰め、そして2.5:1のエフェクター標的比で二つのCAR T細胞とNT細胞を96ウェルプレートに敷き詰めて共培養し、8時間後に酵素マーカーを用いて蛍光値を測定した。計算式:(標的細胞蛍光平均値-サンプル蛍光平均値)/標的細胞蛍光平均値×100%に基づいて、殺傷効率を算出し、結果を図2に示す。
2.1 UCAR-T細胞による標的細胞の殺傷効果
CAR-T細胞による標的細胞の殺傷能力を検出するために、まず1x104/ウェルでルシフェリン遺伝子を担持したJurkat標的細胞を96ウェルプレートに敷き詰め、そして2.5:1のエフェクター標的比で二つのCAR T細胞とNT細胞を96ウェルプレートに敷き詰めて共培養し、8時間後に酵素マーカーを用いて蛍光値を測定した。計算式:(標的細胞蛍光平均値-サンプル蛍光平均値)/標的細胞蛍光平均値×100%に基づいて、殺傷効率を算出し、結果を図2に示す。
結果から分かるように、NTと比べて、bbz-dKO T細胞とbbzg-dKO T細胞は、標的細胞に対していずれも特異的殺傷があるとともに、本発明のbbzg-dKO T細胞による標的細胞の殺傷効果は、従来のbbz-dKO T細胞よりも有意に高かった。
2.2 UCAR-T細胞のサイトカイン放出
T細胞が標的細胞を殺傷すると、標的細胞数が減少するとともにサイトカインIL2とIFN-γなどが放出された。以下のステップに従って、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)を用いて本発明のUCAR T細胞が標的細胞を殺傷する時のサイトカインIL2の放出レベルを測定した。
T細胞が標的細胞を殺傷すると、標的細胞数が減少するとともにサイトカインIL2とIFN-γなどが放出された。以下のステップに従って、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)を用いて本発明のUCAR T細胞が標的細胞を殺傷する時のサイトカインIL2の放出レベルを測定した。
(1)細胞共培養上清の収集
1x105/ウェルでJurkat標的細胞を96ウェルプレートに敷き詰め、そして1:1の割合で二つのUCAR T細胞とNT細胞(陰性対照)をそれぞれ標的細胞と共培養し、8時間後に細胞共培養上清を収集した。
1x105/ウェルでJurkat標的細胞を96ウェルプレートに敷き詰め、そして1:1の割合で二つのUCAR T細胞とNT細胞(陰性対照)をそれぞれ標的細胞と共培養し、8時間後に細胞共培養上清を収集した。
(2)ELISAによる上清におけるIL2分泌量の検出
捕捉抗体Purified anti-human IL-2 Antibody(Biolegend、品番500302)を用いて96ウェルプレートで4℃インキュベートして一晩を過ごし、そして抗体溶液を除去し、2%BSA(sigma、品番V900933-1kg)含有PBST(0.1%トウェインを含む1XPBS)溶液250μLを加え、37℃で2時間インキュベートした。そしてPBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)でプレートを3回洗浄した。各ウェルに50μLの細胞共培養上清又は標準品を加え、37℃で1時間インキュベートし、そしてPBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)でプレートを3回洗浄した。そして各ウェルにそれぞれ検出抗体Anti-IL-2抗体50μLを加え、37℃で1時間インキュベートした後、PBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)でプレートを3回洗浄した。さらにHRP Streptavidin(Biolegend、品番405210)を加え、37℃で30分間インキュベートした後、上清を捨て、PBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)を加え、5回洗浄した。各ウェルにTMB基質溶液を50μL加えた。反応を室温で暗所で30分間発生させ、その後各ウェルに1mol/L H2SO4を50μL加えて反応を停止させた。反応停止から30分間、酵素マーカーを用いて450nmで吸光度を検出し、検量線(根据標準品の読み取り値と濃度からプロット)からサイトカインの含有量を計算し、結果を図3に示す。
捕捉抗体Purified anti-human IL-2 Antibody(Biolegend、品番500302)を用いて96ウェルプレートで4℃インキュベートして一晩を過ごし、そして抗体溶液を除去し、2%BSA(sigma、品番V900933-1kg)含有PBST(0.1%トウェインを含む1XPBS)溶液250μLを加え、37℃で2時間インキュベートした。そしてPBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)でプレートを3回洗浄した。各ウェルに50μLの細胞共培養上清又は標準品を加え、37℃で1時間インキュベートし、そしてPBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)でプレートを3回洗浄した。そして各ウェルにそれぞれ検出抗体Anti-IL-2抗体50μLを加え、37℃で1時間インキュベートした後、PBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)でプレートを3回洗浄した。さらにHRP Streptavidin(Biolegend、品番405210)を加え、37℃で30分間インキュベートした後、上清を捨て、PBST 250μL(0.1%トウェインを含む1XPBS)を加え、5回洗浄した。各ウェルにTMB基質溶液を50μL加えた。反応を室温で暗所で30分間発生させ、その後各ウェルに1mol/L H2SO4を50μL加えて反応を停止させた。反応停止から30分間、酵素マーカーを用いて450nmで吸光度を検出し、検量線(根据標準品の読み取り値と濃度からプロット)からサイトカインの含有量を計算し、結果を図3に示す。
結果から分かるように、bbz-dKO T細胞とbbzg-dKO T細胞による標的細胞の因子放出は、いずれも対照NT群よりも有意に高く、且つbbzg-dKO T細胞の放出レベルは、bbz-dKO T細胞よりも有意に高かった。
実施例3:トリノックアウトのCD7-UCAR T細胞の製造とその機能の検証
DynaBeads CD3/CD28 CTSTM(Gibco、品番40203D)でT細胞を活性化し、37℃と5%CO2で1日培養した。そしてCRISPR/Cas9系を用いて野生型T細胞におけるTCR/CD3成分(具体的にはTRAC遺伝子)、CD7遺伝子とMHC-II系関連遺伝子(具体的にはRFX5)をノックアウトし、TCR/CD7/RFX5トリノックアウトのtKO-T細胞を得た。遺伝子がノックアウトされていない野生型T細胞(即ち、NT細胞)を対照とした。
DynaBeads CD3/CD28 CTSTM(Gibco、品番40203D)でT細胞を活性化し、37℃と5%CO2で1日培養した。そしてCRISPR/Cas9系を用いて野生型T細胞におけるTCR/CD3成分(具体的にはTRAC遺伝子)、CD7遺伝子とMHC-II系関連遺伝子(具体的にはRFX5)をノックアウトし、TCR/CD7/RFX5トリノックアウトのtKO-T細胞を得た。遺伝子がノックアウトされていない野生型T細胞(即ち、NT細胞)を対照とした。
FITC Mouse Anti-Human CD3(BD Pharmingen、品番555916)抗体、PE mouse anti-human CD7(biolegend品番395604)とAPC anti-human DR、DP、DQ(biolegend、品番361714)抗体を用いて、フローサイトメトリーによりT細胞におけるTCR/CD7/RFX5の遺伝子編集効率を検出し、結果を表2に示す。
表2.T細胞における遺伝子の発現効率
表2から分かるように、本発明により製造されたtKO-T細胞では関連する遺伝子の発現は、効果的に抑制又はサイレンシングされた。
実施例1により製造されたbbz-CARレンチウイルスとbbzg-CARレンチウイルスをtKO-T細胞に加え、二つのUCAR-T細胞(即ち、bbz-tKO T細胞とbbzg-tKO T細胞)を得、フローサイトメトリーによりUCAR T細胞上のscFvの発現レベルを検出し、結果を図4に示す。結果から分かるように、本実施例により製造されたUCAR T細胞におけるscFvは、いずれも効果的に発現されることができる。
実施例2に記載の方法に従って、UCAR-T細胞による標的細胞の特異的殺傷活性(エフェクター標的比が5:1、2.5:1と1.25:1である)とサイトカインIL-2の放出レベルを検出し、結果をそれぞれ図5と図6に示す。bbz-tKO T細胞とbbzg-tKO T細胞による標的細胞の特異的殺傷とサイトカイン放出は、いずれも対照NT群よりも有意に高く、且つbbzg-tKO T細胞の放出レベルは、bbz-tKO T細胞よりも高かった。
実施例4:二標的UCAR-T細胞の製造とその機能の検証
以下のタンパク質をコードする配列を合成し、pLVXベクター(Public Protein/Plasmid Library(PPL)、品番:PPL00157-4a):CD8αシグナルペプチド(SEQ ID NO:36)、抗CD7scFv(SEQ ID NO:12)、結合ペプチド(SEQ ID NO:67)、抗CD19scFv(SEQ ID NO:58)、CD8αヒンジ領域(SEQ ID NO:38)、CD8α膜貫通領域(SEQ ID NO:22)、4-1BB細胞内領域(SEQ ID NO:28)、CD3ζ細胞内シグナル伝導ドメイン(SEQ ID NO:32)とγ鎖細胞内領域(SEQ ID NO:65)に順にクローンし、そしてシークエンスにより目的配列の正しい挿入を確認した。
以下のタンパク質をコードする配列を合成し、pLVXベクター(Public Protein/Plasmid Library(PPL)、品番:PPL00157-4a):CD8αシグナルペプチド(SEQ ID NO:36)、抗CD7scFv(SEQ ID NO:12)、結合ペプチド(SEQ ID NO:67)、抗CD19scFv(SEQ ID NO:58)、CD8αヒンジ領域(SEQ ID NO:38)、CD8α膜貫通領域(SEQ ID NO:22)、4-1BB細胞内領域(SEQ ID NO:28)、CD3ζ細胞内シグナル伝導ドメイン(SEQ ID NO:32)とγ鎖細胞内領域(SEQ ID NO:65)に順にクローンし、そしてシークエンスにより目的配列の正しい挿入を確認した。
実施例1の方法に従って上記プラスミドベクターをレンチウイルスとしてパッケージングし、tkO-T細胞に感染させ、CAR7X19T細胞を得た。修飾されていない野生型T細胞を陰性対照(NT)とした。
実施例2に記載の方法に従って、CAR7X19 T細胞による標的細胞(Nalm6とJurkat)の殺傷機能を検出し、結果を図7に示すように、Purified anti-human IFN-γAntibody(Biolegend、品番506502)でサイトカインIFN-γの放出レベルを検出し、結果を図8に示す。
結果から分かるように、NT細胞と比べて、CAR7X19 T細胞は、Nalm6とJurkatの二つの標的細胞に対していずれも有意に上昇した特異的殺傷活性とサイトカイン放出レベルがあった。
実施例5:免疫抑制分子によるNK細胞の殺傷作用の抑制効果
表3に示すように免疫抑制分子No.1-14を合成し、実施例1に記載の方法に従って、pLVXベクタープラスミド(Public Protein/Plasmid Library(PPL)、品番:PPL00157-4a)にクローンし、そしてレンチウイルスにトランスフェクションし、活性化されたT細胞に感染させ、免疫抑制分子を発現するT細胞を得た。CRISPR系を用いて免疫抑制分子No.1-10を発現する細胞におけるTCR/CD3成分(具体的にはTRAC遺伝子)とMHC関連遺伝子(具体的にはB2MとRFX5)をノックアウトし、免疫抑制分子No.11-14を発現する細胞におけるB2M遺伝子をノックアウトし、フローサイトメトリーにより各遺伝子が効果的にノックアウトされたことを確認し、UNKi-T細胞を得た。
表3に示すように免疫抑制分子No.1-14を合成し、実施例1に記載の方法に従って、pLVXベクタープラスミド(Public Protein/Plasmid Library(PPL)、品番:PPL00157-4a)にクローンし、そしてレンチウイルスにトランスフェクションし、活性化されたT細胞に感染させ、免疫抑制分子を発現するT細胞を得た。CRISPR系を用いて免疫抑制分子No.1-10を発現する細胞におけるTCR/CD3成分(具体的にはTRAC遺伝子)とMHC関連遺伝子(具体的にはB2MとRFX5)をノックアウトし、免疫抑制分子No.11-14を発現する細胞におけるB2M遺伝子をノックアウトし、フローサイトメトリーにより各遺伝子が効果的にノックアウトされたことを確認し、UNKi-T細胞を得た。
表3.免疫抑制分子構造
ここで、抗KIR scFvのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:71に示し、抗LIR1scFv-1のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:72に示し、抗LIR1scFv-2のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:73に示し、Eカドヘリン細胞外領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:74に示し、提示ペプチドのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:75に示し、突然変異型B2Mの核酸配列は、SEQ ID NO:76に示し、アミノ酸配列は、SEQ ID NO:77に示し、HLA-E細胞外領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:78に示し、HLA-Gのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:79に示し、抗NKG2A scFvのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:80に示し、抗SIGLEC7scFvのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:81に示し、抗SIGLEC7/SIGLEC9scFvのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:82に示し、抗KLRG1scFvのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:83に示し、PDL1シグナルペプチドのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:68に示し、PDL1細胞外領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:69に示し、PDL1膜貫通領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:70に示し、IgG4ヒンジ領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:42に示し、CD28ヒンジ領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:40に示し、CD8α膜貫通領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:22に示し、CD28膜貫通領域のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:24に示し、CD28共刺激ドメインのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:26に示し、B2Mシグナルペプチドのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:34に示し、CD8αシグナルペプチドのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:36に示す。
そして以下の方法に従って免疫抑制分子No.1-13を発現するUNKi-T細胞によるNK細胞の殺傷作用の抑制効果を検出し、即ち、Far-Red(invitrogen、品番C34564)で本発明により製造されたUNKi-T細胞とMock-T細胞を標識した。そして1x104つの細胞/ウェルの濃度で標識されたUNKi-T細胞とNT細胞を96ウェルプレートに敷き詰め、2:1のエフェクター標的比でNK92細胞(免疫抑制分子No.3-10を発現するためUNKi-T細胞とMock T細胞)又はNK92-KLRG1細胞(免疫抑制分子No.1-2と11-13を発現するためUNKi-T細胞で、KLRG1遺伝子をNK92細胞に導入することで製造される)を加えて共培養した。16-18時間後に、フローサイトメトリーにより培養物におけるT細胞の割合を検出し、さらにNK細胞によるT細胞の殺傷効果を計算し、結果を図9と図10Aに示す。
以下の方法で免疫抑制分子No.14を発見するT細胞によるNK細胞の殺傷作用の抑制効果を検出し、即ち、T細胞を培養してマイトマイシンCで処理するとともに、二つの異体由来のPBMC(donor1とdonor2)をFar-Redで標識した後、T細胞:PBMC=1:2の割合で共培養した。2-3日ごとに半換液処理を行った。8d後に細胞計数してPE anti-human CD3(メーカbiolegend、品番:317308)とFITC anti-human CD56(メーカ:biolegend、品番:362546)を用いて染色し、そしてフローサイトメトリーによりNK細胞群の割合を検出した。細胞総量*NK細胞群割合に基づいてNK細胞数を計算し、結果を図10Bに示す。
図9と図10から分かるように、免疫抑制分子を発現しないT細胞と比べて、免疫抑制分子No.1-14を発現するUNKi-T細胞は、いずれもNK細胞によるT細胞の殺傷作用を著しく低下させることができる。そして、免疫細胞抗原結合領域と膜貫通ドメイン(即ち、共刺激ドメインを含まない)のみを発見するT細胞(G0、E0、Ecad0)と比べて、共刺激ドメインを加えることにより、T細胞によるNK細胞の殺傷抑制(G28、E28、ECad28、図9C参照)をさらに著しく補強することができる。そのため、上記免疫抑制分子は、NK細胞によるUNKi-T細胞の殺傷作用を著しく低下させることができ、それによってHvGDリスクを効果的に低減させることができる。
実施例6:二つの免疫抑制分子を発現するCAR-T細胞の殺傷活性及びそれによる免疫細胞の殺傷作用の抑制効果
実施例1で製造されたbbzg-CARプラスミドには、表1に示す免疫抑制分子No.5と10(2Aペプチドを介して連結)がさらに含まれ、bbzg-EAプラスミドを得、又は、免疫抑制分子No.14と10(2Aペプチドを介して連結)をさらに含み、bbzg-PAプラスミドを得た。実施例1に記載の方法に従って、上記二つプラスミドをウイルスに封入し、TCR/CD7/CIITA三遺伝子をノックアウトしたT細胞にトランスフェクションし、bbzg-EAとbbzg-PAを発見する汎用型CAR-T細胞を得た。TCR/CD7/CIITA三遺伝子をノックアウトしたT細胞を対照(Mock T細胞)とした。
実施例1で製造されたbbzg-CARプラスミドには、表1に示す免疫抑制分子No.5と10(2Aペプチドを介して連結)がさらに含まれ、bbzg-EAプラスミドを得、又は、免疫抑制分子No.14と10(2Aペプチドを介して連結)をさらに含み、bbzg-PAプラスミドを得た。実施例1に記載の方法に従って、上記二つプラスミドをウイルスに封入し、TCR/CD7/CIITA三遺伝子をノックアウトしたT細胞にトランスフェクションし、bbzg-EAとbbzg-PAを発見する汎用型CAR-T細胞を得た。TCR/CD7/CIITA三遺伝子をノックアウトしたT細胞を対照(Mock T細胞)とした。
実施例2に記載の方法に従って上記汎用型CAR-T細胞によるJurkat標的細胞の殺傷効果を検出し、結果を図11に示す。結果から分かるように、様々なエフェクター標的比で、bbzg-EAとbbzg-PAを発現する汎用型CAR-T細胞は、Jurkat標的細胞に対していずれも強い殺傷効果を示す。
以下の方法に従ってbbzg-EAを発見する上記汎用型CAR-T細胞によるNK細胞の殺傷作用の抑制効果を検出し、即ち、Far-Red(invitrogen、品番C34564)で本発明により製造されたbbzg-EA-CAR T細胞とNT細胞を標識した。そして1x104つの細胞/ウェルの濃度で標識されたbbzg-EA-CAR T細胞とNT細胞を96ウェルプレートに敷き詰め、4:1、2:1又は1:1のエフェクター標的比でNK92細胞を加えて共培養した。16-18時間後、フローサイトメトリーにより培養物におけるT細胞の割合を検出し、さらにNK細胞によるT細胞の殺傷率を計算し、結果を図12に示す。結果から分かるように、異なるエフェクター標的比で、この汎用型CAR-T細胞は、いずれもNK細胞による殺傷効果を著しく抑制することができる。
なお、以下の方法に従ってbbzg-PAを発見する上記汎用型CAR-T細胞によるT細胞の殺傷作用の抑制効果を検出し、即ちCAR-T細胞とNT細胞を培養してマイトマイシンCで処理するとともに、三つの異体由来のPBMC(donor1、donor2とdonor3)をFar-Redで標識した後、T細胞:PBMC=1:2の割合で共培養した。2-3日ごとに半換液処理を行った。8d後に細胞計数し、PE anti-human CD8(メーカbiolegend、品番:344706)で染色し、そしてフローサイトメトリーによりT細胞群の割合を検出した。細胞総量*T細胞群の割合からT細胞数を計算した。結果を図13に示す。結果から分かるように、二つの免疫抑制分子の組み合わせを発見する汎用型CAR-T細胞は、T細胞の殺傷作用を著しく抑制することができる。
以上をまとめると、免疫抑制分子は、CAR-T細胞の殺傷活性に影響しないとともに、免疫細胞(例えばNK細胞、T細胞など)による殺傷作用を著しく抑制することができる。
説明すべきこととして、上位機は、本発明の好ましい実施例にすぎず、本発明を制限するものではなく、当業者にとって、本発明は、様々な変更と変化が可能である。当業者が理解するように、本発明の精神と原則の範囲内において行われた任意の修正、同等の置き換え、改良などは、いずれも本発明の保護範囲内に含まれる。
Claims (31)
- キメラ抗原受容体であって、抗原結合領域と、膜貫通ドメインと、細胞内シグナル伝達領域とを含み、前記抗原結合領域は、CD7を特異的に標的とする抗体を含み、前記細胞内シグナル伝達領域は、共刺激ドメインと、一次シグナル伝導ドメインと、γc鎖又はその細胞内領域とからなる、キメラ抗原受容体。
- 前記抗体は、IgG、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd、Fd′、Fv、scFv、sdFv、線形抗体、シングルドメイン抗体、ナノ抗体とダイアボディから選択される、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記膜貫通ドメインは、TCRα鎖、TCRβ鎖、TCRγ鎖、TCRδ鎖、CD3ζサブユニット、CD3εサブユニット、CD3γサブユニット、CD3δサブユニット、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD28、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137とCD154というタンパク質の膜貫通ドメインから選択される、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記一次シグナル伝導ドメインは、FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζ、CD22、CD79a、CD79bとCD66dというタンパク質のシグナル伝導ドメインから選択される、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記共刺激ドメインは、TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、CARD11、CD2、CD7、CD8、CD18、CD27、CD28、CD30、CD40、CD54、CD83、CD134、CD137、CD150、CD152、CD223、CD270、CD272、CD273、CD274、CD276、CD278、CD357、DAP10、LAT、NKG2C、SLP76、LIGHT、TRIM、CD94、LTB及びZAP70というタンパク質から選択される共刺激シグナル伝導ドメインである、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記γc鎖は、SEQ ID NO:63又は65と少なくとも95%の配列同一性を有する、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記CD7を標的とする抗体は、SEQ ID NO:1に示すCDR-L1、SEQ ID NO:2に示すCDR-L2、SEQ ID NO:3に示すCDR-L3、SEQ ID NO:4に示すCDR-H1、SEQ ID NO:5に示すCDR-H2とSEQ ID NO:6に示すCDR-H3を含む、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記CD7を標的とする抗体は、SEQ ID NO:7、10、13、16と19から選択されるアミノ酸配列と少なくとも95%の配列同一性を有する軽鎖可変領域と、SEQ ID NO:8、11、14、17と20から選択されるアミノ酸配列と少なくとも95%の配列同一性を有する重鎖可変領域とを含む、請求項7に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記抗原結合領域は、第二の抗原を標的とする抗体をさらに含み、前記第二の抗原は、TSHR、CD19、CD123、CD22、BAFF-R、CD30、CD171、CS-1、CLL-1、CD33、EGFRvIII、GD2、GD3、BCMA、GPRC5D、Tn Ag、PSMA、ROR1、FLT3、FAP、TAG72、CD38、CD44v6、CEA、EPCAM、B7H3、KIT、IL-13Ra2、メソテリン、IL-l lRa、PSCA、PRSS21、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR-β、SSEA-4、CD20、Folate受容体α、ERBB2(Her2/neu)、MUC1、EGFR、NCAM、Claudin18.2、Prostase、PAP、ELF2M、Ephrin B2、IGF-I受容体、CAIX、LMP2、gploo、bcr-abl、チロシナーゼ、EphA2、Fucosyl GMl、sLe、GM3、TGS5、HMWMAA、o-アセチル-GD2、Folate受容体β、TEM1/CD248、TEM7R、CLDN6、GPRC5D、CXORF61、CD97、CD 179a、ALK、ポリシアル酸、PLAC1、GloboH、NY-BR-1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、GPR20、LY6K、OR51E2、TARP、WT1、NY-ESO-1、LAGE-la、MAGE-A1、レグマイン、HPV E6、E7、MAGE Al、ETV6-AML、精子タンパク質17、XAGE1、Tie 2、MAD-CT-1、MAD-CT-2、Fos関連抗原1、p53、p53変異体、前立腺特異的タンパク質、生存タンパク質とテロメラーゼ、PCTA-l/Galectin 8、MelanA/MARTl、Ras変異体、hTERT、肉腫転座切断点、ML-IAP、ERG(TMPRSS2 ETS融合遺伝子)、NA17、PAX3、アンドロゲン受容体、Cyclin Bl、MYCN、RhoC、TRP-2、CYP1B 1、BORIS、SART3、PAX5、OY-TES 1、LCK、AKAP-4、SSX2、RAGE-1、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、RU1、RU2、腸内カルボキシルエステラーゼ、mut hsp70-2、CD79a、CD79b、CD72、LAIR1、FCAR、LILRA2、CD300LF、CLEC12A、BST2、EMR2、LY75、GPC3、FCRL5、IGLL1、PD1、PDL1、PDL2、TGFβ、APRIL、NKG2Dとそれらのいずれかの組み合わせから選択される、請求項1に記載のキメラ抗原受容体。
- 前記第二の抗原を標的とする抗体は、CD19を標的とする抗体であり、
(1)SEQ ID NO:44に示すCDR-L1、SEQ ID NO:45に示すCDR-L2、SEQ ID NO:46に示すCDR-L3、SEQ ID NO:47に示すCDR-H1、SEQ ID NO:48に示すCDR-H2とSEQ ID NO:49に示すCDR-H3、又は
(2)SEQ ID NO:50に示すCDR-L1、SEQ ID NO:51に示すCDR-L2、SEQ ID NO:52に示すCDR-L3、SEQ ID NO:53に示すCDR-H1、SEQ ID NO:54に示すCDR-H2とSEQ ID NO:55に示すCDR-H3を含む、請求項9に記載のキメラ抗原受容体。 - 前記CD19を標的とする抗体は、SEQ ID NO:56又は59に示すアミノ酸配列と少なくとも95%の配列同一性を有する軽鎖可変領域と、SEQ ID NO:57又は60に示すアミノ酸配列と少なくとも95%の配列同一性を有する重鎖可変領域とを含む、請求項10に記載のキメラ抗原受容体。
- 請求項1から11のいずれか1項に記載のキメラ抗原受容体をコードする配列を含む、核酸。
- 請求項12に記載の核酸を含む、ベクター。
- 前記ベクターは、線形核酸分子、プラスミド、レトロウイルス、レンチウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、ラウス肉腫ウイルス(RSV)、ポリオーマウイルス、アデノ随伴ウイルス(AAV)、ファージ、コスミド又は人工染色体である、請求項13に記載のベクター。
- 請求項1から11のいずれか1項に記載のキメラ抗原受容体、請求項12に記載の核酸、又は請求項13又は14に記載のベクターを含む、操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞は、T細胞、マクロファージ、樹状細胞、単球、NK細胞又はNKT細胞から選択される、請求項15に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞は、CD4+/CD8+二重陽性T細胞、CD4+ヘルパーT細胞、CD8+T細胞、腫瘍浸潤細胞、記憶T細胞、ナイーブT細胞、CD4-CD8-T細胞、調節性T細胞、γδ-T細胞とαβ-T細胞から選択されるT細胞である、請求項16に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞の内因性CD7の発現が抑制又はサイレンシングされる、請求項15から17のいずれか1項に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞の少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子の発現が抑制又はサイレンシングされる、請求項15から18のいずれか1項に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞の少なくとも一つのMHC-II系関連遺伝子の発現が抑制又はサイレンシングされる、請求項15から19のいずれか1項に記載の操作された免疫細胞。
- 前記TCR/CD3遺伝子は、TRAC、TRBC、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζとそれらの組み合わせから選択される、請求項19又は20に記載の操作された免疫細胞。
- 前記MHC-II系関連遺伝子は、HLA-DPA、HLA-DQ、HLA-DRA、RFX5、RFXAP、RFXANK、CIITAとそれらの組み合わせから選択される、請求項20に記載の操作された免疫細胞。
- 前記操作された免疫細胞の内因性CD7と、TRACとTRBCから選択される少なくとも一つのTCR/CD3遺伝子と、RFX5、RFXAP、RFXANKとCIITAから選択される少なくとも一つのMHC-II系遺伝子との発現は、抑制又はサイレンシングされる、請求項22に記載の操作された免疫細胞。
- 一つ又は複数の免疫細胞抗原結合領域と、膜貫通ドメインと、共刺激ドメインとを含む免疫抑制分子をさらに発現する、請求項15から23のいずれか1項に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫抑制分子は、一次シグナル伝導ドメインを含まない、請求項24に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞抗原結合領域は、免疫細胞抗原を標的とする抗体、免疫細胞抗原のリガンド又はその組み合わせである、請求項24に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞抗原は、NKG2A、NKG2B、NKG2C、NKG2D、NKG2E、NKP46、LIR1、LIR2、LIR3、LIR5、LIR8、PD-1、TIGIT、TIM3、LAG3、KIR、CEACAM1、LAIR1、SIGLEC7、SIGLCE9、KLRG1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CD16a、CD16b、CD25、CD27、CD28、CD30、CD38、CD45、CD48、CD50、CD52、CD56、CD57、CD62L、CD69、CD94、CD96、CD100、CD102、CD122、CD127、CD132、CD137、CD160、CD161、CD178、CD218、CD226、CD244、CD279、CD305、CD337、CS1とそれらの組み合わせから選択される、請求項24に記載の操作された免疫細胞。
- 前記免疫細胞抗原のリガンドは、HLA-E、HLA-F、HLA-G、カドヘリン(例えばE-カドヘリン、N-カドヘリン、R-カドヘリン)、コラーゲン、OCIL、シアル酸、PD-L1、PD-L2、CD155、CTLA4、CD112、CD113、Gal-9、FGL1又はその細胞外領域から選択される、請求項26に記載の操作された免疫細胞。
- 請求項1から11のいずれか1項に記載のキメラ抗原受容体、請求項12に記載の核酸、請求項13又は14に記載のベクター又は請求項15から28のいずれか1項に記載の操作された免疫細胞と、一つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含む、薬物組成物。
- 請求項1から11のいずれか1項に記載のキメラ抗原受容体、請求項12に記載の核酸、請求項13又は14に記載のベクター、請求項15から28のいずれか1項に記載の操作された免疫細胞又は請求項29に記載の薬物組成物の、CD7の発現に関連する疾患を処置するための薬物の製造における使用。
- 前記CD7の発現に関連する疾患は、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性顆粒球性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髓性白血病、Tリンパ芽球性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、末梢性T細胞リンパ腫、結節外NK/T細胞リンパ腫、γδT細胞リンパ腫と初期のプロTリンパ芽球性白血病から選択される、請求項30に記載の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110147730.4 | 2021-02-03 | ||
CN202110147730 | 2021-02-03 | ||
PCT/CN2021/135963 WO2022166365A1 (zh) | 2021-02-03 | 2021-12-07 | 新型嵌合抗原受体及其用途 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2024505955A true JP2024505955A (ja) | 2024-02-08 |
Family
ID=82628484
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023546352A Pending JP2024505955A (ja) | 2021-02-03 | 2021-12-07 | 新型キメラ抗原受容体及びその使用 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20240082306A1 (ja) |
EP (1) | EP4273175A1 (ja) |
JP (1) | JP2024505955A (ja) |
KR (1) | KR20230137923A (ja) |
CN (1) | CN114853900A (ja) |
WO (1) | WO2022166365A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111269326A (zh) * | 2020-02-28 | 2020-06-12 | 南京北恒生物科技有限公司 | 新型嵌合抗原受体及其用途 |
CN115927192A (zh) * | 2022-08-10 | 2023-04-07 | 浙江康佰裕生物科技有限公司 | 一种新型通用car-t细胞的制备及应用 |
WO2024047562A1 (en) * | 2022-09-02 | 2024-03-07 | Janssen Biotech, Inc. | Materials and processes for bioengineering cellular hypoimmunogenicity |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
CN1294148C (zh) | 2001-04-11 | 2007-01-10 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 环状单链三特异抗体 |
JP5026072B2 (ja) | 2003-07-01 | 2012-09-12 | イミューノメディクス、インコーポレイテッド | 二重特異性抗体の多価キャリヤー |
JP2008512352A (ja) | 2004-07-17 | 2008-04-24 | イムクローン システムズ インコーポレイティド | 新規な四価の二重特異性抗体 |
RU2515108C2 (ru) | 2005-08-19 | 2014-05-10 | Эббви Инк | Иммуноглобулин с двойными вариабельными доменами и его применения |
EP3545082A4 (en) * | 2016-11-22 | 2020-07-01 | National University of Singapore | BLOCKING OF CD7 EXPRESSION AND CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORS FOR THE IMMUNOTHERAPY OF T-CELL MALIGNANCIES |
CN111269326A (zh) * | 2020-02-28 | 2020-06-12 | 南京北恒生物科技有限公司 | 新型嵌合抗原受体及其用途 |
CN112300282A (zh) * | 2020-11-03 | 2021-02-02 | 南京北恒生物科技有限公司 | 靶向cd7的人源化抗体及其用途 |
-
2021
- 2021-12-07 KR KR1020237026357A patent/KR20230137923A/ko unknown
- 2021-12-07 WO PCT/CN2021/135963 patent/WO2022166365A1/zh active Application Filing
- 2021-12-07 CN CN202111485723.1A patent/CN114853900A/zh active Pending
- 2021-12-07 EP EP21924358.1A patent/EP4273175A1/en active Pending
- 2021-12-07 JP JP2023546352A patent/JP2024505955A/ja active Pending
- 2021-12-07 US US18/263,439 patent/US20240082306A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP4273175A1 (en) | 2023-11-08 |
CN114853900A (zh) | 2022-08-05 |
KR20230137923A (ko) | 2023-10-05 |
US20240082306A1 (en) | 2024-03-14 |
WO2022166365A1 (zh) | 2022-08-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7462777B2 (ja) | 新規キメラ抗原受容体とその使用 | |
WO2021129559A1 (zh) | T细胞受体融合蛋白及其用途 | |
WO2022048523A1 (zh) | 靶向nk激活性受体的嵌合抗原受体 | |
US20240082306A1 (en) | Novel chimeric antigen receptor and use thereof | |
EP4219693A1 (en) | Chimeric antigen receptor targeting cd7 and use thereof | |
WO2021249462A1 (zh) | 表达nk抑制性分子的工程化免疫细胞及其用途 | |
EP4148125A1 (en) | Engineered immune cell for allotransplantation | |
US20240009308A1 (en) | Chimeric antigen receptor comprising novel co-stimulatory domain and use thereof | |
WO2022267983A1 (zh) | 工程化免疫细胞及其用途 | |
WO2023025009A1 (zh) | 工程化免疫细胞及其用途 | |
EP4186929A1 (en) | Novel co-stimulatory domain and uses thereof | |
WO2023083003A1 (zh) | 工程化免疫细胞及其用途 | |
CN115785279A (zh) | 包含新型共刺激结构域的嵌合抗原受体及其用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230731 |