JP2023554550A - 心臓弁プロテーゼ - Google Patents

Abstract

【課題】ヒトまたは動物の生体組織から作ることができ、安定的、かつ、簡単な方法で製造することができる改良型心臓弁プロテーゼを提供する。
【解決手段】本発明は、ａ）ヒトまたは動物の生体組織を提供する工程と、ｂ）生体組織に心臓弁の形状および大きさを与える成形過程において生体組織を成形する工程と、ｃ）生体組織を架橋剤で固定および安定化することにより、成形過程で生体組織に与えられた形状を保持し、心臓弁プロテーゼを得る工程と、を含む方法により得ることができる心臓弁プロテーゼに関する。ここで、架橋剤は、一般式（Ｉ）に従う構造を有する少なくとも１つの化合物を含む。
【選択図】図１

Description

本発明は、請求項１に記載の心臓弁プロテーゼと、請求項１３に記載の心臓弁プロテーゼの医療用途に関する。

国際公開第２００４／０４７６２０号（特許文献１）には、フェノール性タンニンを含む溶液で組織を固定する工程が記載されている。この国際特許出願は、さらに、タンニン酸架橋剤で架橋されたエラスチンからなる固定組織を含むバイオプロテーゼの心臓弁を移植することによって、損傷した心臓弁を置換するプロセスを記載している。この国際特許出願に開示されたバイオプロテーゼは、タンニン酸架橋剤で架橋されたエラスチンからなる固定組織の他に、固定組織に取り付けられた支持材を有する。

国際公開第２００４／１１３４３１号（特許文献２）は、ポリペプチドや多糖類などの生体高分子を架橋する無毒な架橋剤としてのセコイリドイド含有物質の使用に関する。

国際公開第２００６／１１５７３３号（特許文献３）は、組織構造の破壊、特にエラスチンの劣化により弱くなった結合組織の治療方法および製品に関する。この治療薬は、エラスチン分解を減少させるために、フェノール化合物の特定の固有特性を利用している。

国際公開第２００８／０７９２７２号（特許文献４）には、リーフレット部と、環状に間隔をあけた交連部を有する環状ステントとを含むプロテーゼの心臓弁が記載されている。リーフレット部は、動物由来の心膜から作ることができる。

国際公開第２０１２／０６８２４１号（特許文献５）には、バイオプロテーゼの組織およびその製造方法が記載されている。これらの方法は、０．１～１０ｗｔ％のグルタルアルデヒドを用いた昇温での処理によりバイオプロテーゼのインプラント組織を固定し、ジアミン架橋剤を用いた処理により前記固定組織を覆い、前記覆われた組織を約０．６ｗｔ％のグルタルアルデヒドで処理することを含む。

Antunes et al.（Antunes, A. P. M. et al. 「オレウロペインのコラーゲンフィルムへの架橋剤としての利用」, J. Leather Sci, (2008) 2(1)）は、オリーブ(Olea europaea L.)から単離されたフェノール化合物オレウロペインをコラーゲンの架橋剤として調査した。オレウロペイン濃度、酵素濃度、培養期間など、各種パラメータが調査された。

国際公開第２００４／０４７６２０号 国際公開第２００４／１１３４３１号 国際公開第２００６／１１５７３３号 国際公開第２００８／０７９２７２号 国際公開第２０１２／０６８２４１号

Antunes et al.（Antunes, A. P. M. et al. 「オレウロペインのコラーゲンフィルムへの架橋剤としての利用」, J. Leather Sci, (2008) 2(1)）

本発明の目的は、ヒトまたは動物の生体組織から作ることができ、安定的、かつ、簡単な方法で製造することができる改良型心臓弁プロテーゼを提供することである。

この目的は、請求項１の構成を有する心臓プロテーゼによって達成される。このような心臓弁プロテーゼは、以下に説明する工程を含む方法によって得られるか、または得ることができる。まず、ヒトまたは動物の生体組織が提供される。次に、生体組織に心臓弁の形状および大きさを与えるために、生体組織を成形工程で成形する。その後、成形生体組織は、以下に定義する架橋剤によって固定され、安定化される。これにより、成形工程で生体組織に与えられた形状が保持される。その結果、心臓弁プロテーゼが得られる。

「生体組織」との用語は、結合組織、筋肉組織、神経組織、上皮組織、筋膜組織、腹膜組織、心筋組織から構成される。これらの組織も液体成分を含むが、固体の生体組織と呼ぶことができる。「生体組織」との用語は、血液やリンパのような液生体組織を含まないことを明示している。

一実施形態において、「生体組織」との用語は、天然の心臓弁組織を包含しない。

一実施形態において、動物生体組織は、齧歯類または非ヒト哺乳類に由来する。

従来技術では、架橋剤は単に使用される生体組織の生分解性を低下させるために使用されていたが、請求項に記載された心臓弁プロテーゼの製造に使用される方法は、所望の形状および大きさ、すなわち心臓弁の形状および大きさを生体組織に与える成形工程を利用するものである。そして、架橋剤がこの所定の形状を保持する。先行技術には、架橋剤が所定の形状を保持するために使用され得るという示唆はない。むしろ、例を挙げると、国際公開第２００４／０４７６２０号には、一方では架橋剤で固定された組織を有し、他方では、固定された組織に取り付けられた支持材を有するバイオプロテーゼが開示されている。したがって、先行文献には、使用される架橋剤が、処理された生体組織の化学構造を変更するために使用され得ることが教示されている。しかしながら、先行文献には、架橋剤を使用することによって、生体組織の所定の形状を保持可能であることは教示されていない。

対して、本願請求項の発明による心臓弁プロテーゼは、自己完結型の心臓弁プロテーゼであり、さらなる支持材または支持構造を必要とせず、また含んでいない。むしろ、追加の支持材または支持構造は存在しない。心臓弁プロテーゼは、心臓弁プロテーゼと、心臓弁プロテーゼに接続されたキャリア（例えば、ステント）とを含む心臓弁プロテーゼ組み合わせ体の形態で移植され得る。心臓弁プロテーゼをキャリアに接続するために、心臓弁プロテーゼをキャリアに縫い付けることができる。しかし、キャリアは心臓弁プロテーゼを構造的に支えるために必要ではない。むしろ、キャリアは心臓弁プロテーゼを移植した状態で定位置に保ち、心臓弁プロテーゼの機能を適切に発揮させるためのものである。

一実施形態において、成形工程は、生体組織に正圧または負圧を加える工程である。一例を挙げると、生体組織は、型に挿入され、圧力を加えることによって、例えば、吸引工程によって成形され得る。そして、金型の形状となる。

一実施形態において、成形工程は、深絞り工程（deep drawing process）、例えば、個別に成形された型（last）を使用する深絞り工程である。

一実施形態において、架橋剤は、生体組織の所定の形状を維持するだけでなく、生体組織の細胞外マトリックスの構造を安定化するためにも役立ち、細胞外マトリックスは、グリコサミノグリカン、コラーゲンおよびエラスチンを含む。

架橋剤は、下記一般式（Ｉ）に対応するセコイリドイドの少なくとも１種、または、セコイリドイドを有する。

Ｒ^１およびＲ^３は、互いに独立して、かつ、化合物中の他の残基とは独立して、ＨまたはＣＨ_３を示す。
Ｒ^４ は、化合物中の他の残基とは独立して、Ｈまたは一般式（ＩＩ）に従う構造を有する残基を示す。

Ｒ^５，Ｒ^６，Ｒ^７，Ｒ^８，Ｒ^９は、互いに独立して、かつ、化合物中の他の残基とは独立して、ＨまたはＯＨを示す。
Ｒ^２は、化合物中の他の残基とは独立して、Ｈ、ＯＨまたは一般式（ＩＩＩ）に従う構造を有する残基を示す。

Ｒ^１０，Ｒ^１１，Ｒ^１２，Ｒ^１３は、互いに独立して、かつ、化合物中の他の残基と独立して、ＨまたはＯＨを示す。

Ｒ^２が式（ＩＩＩ）に相当する場合、残基Ｒ^２と隣接する複素環式化合物との間の結合は、残基Ｒ^２の複素環に結合している残基Ｒ^２の酸素原子から離れる方向に伸びる結合により、下記式（ＶＩ）の構造を生じるように行われる。

一実施形態において、式（Ｉ）に従う構造の残基は、以下の式（ＩＶ）に従う構造を有する。

一実施形態において、残基Ｒ^２は、一般式（ＩＩＩ）に従う構造を有し、下記式（Ｖ）に従う構造を有している。

後者２つの実施形態を組み合わせることにより、一般式（ＶＩＩ）に従う以下の構造が得られる。

一実施形態において、残基Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、およびＲ^９のうち少なくとも２つはＯＨを示す。

一実施形態において、残基Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^９はＨを示し、残基Ｒ^７およびＲ^８はＯＨを示す。

一実施形態において、残基Ｒ^１およびＲ^３は、ＣＨ_３を示す。

一実施形態において、残基Ｒ^２はＯＨを示す。また、架橋剤は、下記一般式（ＶＩＩＩ）ないし（ＩＸ）を有する、またはそれに相当するものである。

一実施形態において、残基Ｒ^１、Ｒ^３は、式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）においてＣＨ_３を示す。

一実施形態において、架橋剤は、下記式（Ｘ）または（ＸＩ）に相当する化合物を有するか、またはこれら式に架橋剤自体が相当する。

式（Ｘ）に相当する構造を有する架橋剤は、下記式（ＸＩＩ）に相当する構造と平衡して存在する。

式（ＸＩ）に相当する構造を有する架橋剤は、下記式（ＸＩＩＩ）に相当する構造と平衡して存在する。

一実施形態において、架橋剤は、式（ＶＩ）、式（Ｘ）、式（ＸＩ）、式（ＸＩＩ）、式（ＸＩＩＩ）もしくはその誘導体に従う少なくとも１つの化合物を含むか、または式（ＶＩ）、式（Ｘ）、式（ＸＩ）、式（ＸＩＩ）、式（ＸＩＩＩ）もしくはその誘導体に従う化合物である。

一実施形態において、「誘導体」との用語は、特定の化合物から自然に存在する生体変換プロセスによって誘導され得る化合物を示す。すなわち、これらの誘導体は、酵素活性または非酵素的な生化学的変換または成熟プロセスにより、ヒトまたは動物の体内で形成されるであろう。式（ＶＩ）、式（Ｘ）、式（ＸＩ）、式（ＸＩＩ）、または式（ＸＩＩＩ）に従う化合物の誘導体の具体例は、以下の式（ＸＩＶ）～（ＸＸＩＩ）に相当する化合物である。

これらの誘導体、特に式（ＸＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）または（ＸＸＩＩ）に従う構造を有する化合物はすべて、ヒトまたは動物の生体組織を架橋するのに特に適している。

上記で説明した特定の誘導体と同様の生化学的方法で、式（Ｉ）に従う構造を有する化合物から誘導できる化合物も、本願請求項に記載されている主題に包含され、本発明の一部を形成する。

一実施形態において、残基Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３の少なくとも２つはＯＨを示す。

一実施形態において、残基Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３の各々は、ＯＨを示す。

一実施形態において、残基Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^９はＨを示し、残基Ｒ^７およびＲ^８はＯＨを示し、残基Ｒ^１およびＲ^３はＣＨ_３を示し、残基Ｒ^２は式（ＩＩＩ）に相当し、残基Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３はＯＨを示す。そして、この化合物は、下記一般式（ＸＸＩＩＩ）に相当する構造を有する。

一実施形態において、残基Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^９はＨを示し、残基Ｒ^７およびＲ^８はＯＨを示し、残基Ｒ^１およびＲ^３はＣＨ_３を示し、残基Ｒ^２は式（Ｖ）に相当し、残基Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３はＯＨを示しており、式（Ｉ）に従う構造の残基は式（ＩＶ）に従う構造を有する。そして、その化合物は、下記一般式（ＸＸＩＶ）に相当する構造を有する。

一実施形態において、所定の形状に保持される生体組織は、心臓組織である。

一実施形態において、所定の形状に保持される生体組織は、心筋組織である。

一実施形態において、所定の形状に保持される生体組織は、心膜組織である。

一実施形態において、心臓弁プロテーゼは、大動脈弁プロテーゼ、肺動脈弁プロテーゼ、僧帽弁プロテーゼ、または三尖弁プロテーゼである。

一実施形態において、心臓弁の形状、すなわち生体組織に与えるべき形状は、以下に説明する工程を実行することによって定義される。第１に、適切な撮像方法、例えば、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、（３次元）超音波、または３次元回転血管撮影によって、個々の疾患心臓弁の３次元画像を取得する。第２に、撮像データの３次元再構成を、病気を矯正しながら行う（いわゆる仮想弁膜症手術）。第３に、必要な心臓弁プロテーゼのデジタル３次元型を作成する。第４に、デジタル３次元型を基に「本物の」心臓弁の型を作成する。これは、例えば、３次元印刷や射出成形などの適切な技術によって達成可能である。

成形工程を実施するために、生体組織を心臓弁型に挿入し、適切な成形技術、例えば、深絞りによって成形する。生体組織が心臓弁型内で所望の形状になったところで、架橋剤を成形生体組織に添加する。架橋剤の添加により、生体組織が架橋され、心臓弁型内で生体組織に与えられた形状を安定的に維持できるようになる。その結果、生体組織から作られたヒト工心臓弁、すなわち心臓弁プロテーゼが完成する。生体組織の化学的架橋により、架橋剤および型を除去した後も、成形生体組織は与えられた形状を維持する。この人工心臓弁を個人に移植することが可能である。

一実施形態において、架橋剤は、処理液の全量に対して、０．０１～１０％（ｖ／ｖ）または（ｗ／ｗ）、特に０．０２～９％、特に０．０３～８％、特に０．０４～７％、特に０．０５～６％、特に０．０６～５％、特に０．０７～４％、０７～４％、特に０．０８～３％、特に０．０９～２％、特に０．１～１％、特に０．２～０．９％、特に０．３～０．８％、特に０．４～０．７％、特に０．５～０．６％の濃度で使用される。

一実施形態において、架橋剤を、１時間から７２時間、特に２時間から４８時間、特に３時間から３６時間、特に４時間から２４時間、特に５時間から２０時間、特に６時間から１５時間、特に８時間から１２時間の範囲にある時間帯にわたって成形された生体組織と接触させたままにする。

一実施形態において、成形された生体組織の架橋剤を用いた培養期間では、温度を、１５℃から４０℃、特に２０℃から３８℃、特に２２℃から３７℃、特に２５℃から３５℃、特に２７℃から３０℃の範囲内にする。

一実施形態において、架橋剤を有する処理溶液は、処理溶液を約５のｐＨ値付近で緩衝化可能な緩衝剤も含んでいる。処理溶液の特に適切なｐＨ値は、ｐＨ４からｐＨ６、特にｐＨ４．５からｐＨ５．５、特にｐＨ４．７からｐＨ５．２、特にｐＨ４．８からｐＨ５．０のｐＨ範囲である。クエン酸緩衝液は、特に適切な緩衝剤である。

一実施形態において、成形処理の少なくとも一部の間、成形された生体組織と処理液は、揺動式シェイカーのようなシェイカーで撹拌される。例を挙げると、撹拌は、５分から２時間、特に１０分から１．５時間、特に２０分から１時間、特に３０分から４５分の範囲にある時間帯にわたって行われる。攪拌は、典型的には、架橋工程の開始時に行われる。適切な撹拌速度は、毎分１０回転（ｒｐｍ）から５００ｒｐｍ、特に２０ｒｐｍから４５０ｒｐｍ、特に３０ｒｐｍから４００ｒｐｍ、特に４０ｒｐｍから３５０ｒｐｍ、特に５０ｒｐｍから３００ｒｐｍ、特に６０ｒｐｍから２５０ｒｐｍ、特に７０ｒｐｍから２００ｒｐｍ、特に８０ｒｐｍから１５０ｒｐｍ、特に９０ｒｐｍから１００ｒｐｍの範囲にある速度である。

一実施形態において、成形される生体組織は、心臓弁プロテーゼが後に移植される個体と同じ個体に由来する。つまり、心臓弁プロテーゼは、自己由来の心臓弁プロテーゼである。

一実施形態において、成形処理を行う前、および生体組織を架橋する前に、ヒトまたは動物の体から生体組織が切除される。このような切除は、典型的には、通常の外科的手法によって行われる。

一態様において、本発明は、先の説明による心臓弁プロテーゼとキャリア（例えば、ステント）とを含む心臓弁プロテーゼ組み合わせ体に関する。

一態様において、本発明は、治療を必要とするヒトまたは動物の障害または病気の心臓弁を、先の説明による心臓弁プロテーゼによって置換することによって、障害のある心臓弁に起因する心臓疾患を治療する医療方法に関する。

一態様において、本発明は、障害のある心臓弁に起因する心臓疾患の治療における、先の説明による心臓弁プロテーゼの医療用途に関する。このような心臓疾患は、例えば、心臓弁の不全または狭窄である。

一実施形態において、心臓弁プロテーゼは、心臓弁プロテーゼの製造に使用した生体組織を得たのと同じヒトまたは動物の身体に移植される。つまり、心臓弁プロテーゼは、自己由来の心臓弁プロテーゼである。

一態様において、本発明は、治療を必要とする個々のヒトまたは動物のための心臓弁プロテーゼを製造する医療方法に関する。その方法は、ヒトまたは動物の生体組織を提供する工程と、生体組織に心臓弁の所望の形状および大きさを与える成形過程において生体組織を成形する工程と、成形された生体組織を架橋剤と接触させて生体組織を固定および安定化することにより、成形過程で生体組織に与えられた形状を保持する工程とを含む。これらの工程によって、心臓弁プロテーゼが得られる。一実施形態において、架橋剤は、上記で説明した一般式（Ｉ）に従う構造を有する化合物を含み、またはその化合物のみからなる。それにより、式（Ｉ）の個々の残基は、上記で説明したような化合物を有する。

記載された心臓弁プロテーゼ、方法および用途の全ての実施形態は、所望の方法で組み合わせることができ、記載された用途および他の方法に代えることができる。その逆もまた同様である。

さらに詳細な本発明の態様として、例示的な実施形態および添付の図について説明する。
成形された生体組織の架橋に使用される２種類の架橋剤の比較を示す図である。

架橋剤の違いによって、生体組織の架橋に異なる効果があるかどうかを確認するために、インビトロ試験を実施した。インビトロ試験のために、ヒトおよび動物の生体組織を使用し、深絞り工程で生体組織に心臓弁、すなわち肺動脈弁の形と大きさを与えるために成形した。

その後、成形された生体組織は、２つの異なる架橋剤の添加により固定し、安定化された。一方ではグルタルアルデヒド（ＧＡ）を使用し、他方では式（Ｘ）の構造を有する化合物を使用した。後者の化合物は、以下において化合物Ｘと称する。ＧＡの最終濃度は、処理液中で０．２～０．６２５％の範囲となるように選択された。化合物Ｘの最終濃度は、処理液中０．０５％となるように選択された。培養は、２０℃から４０℃の範囲にある温度で、２０分（ＧＡ）または２４時間（化合物Ｘ）の時間にわたって実施された。架橋剤を含む処理溶液は、ｐＨ４．８～ｐＨ５．０の範囲でクエン酸緩衝液によって緩衝化された。架橋工程の最初の３０分以内に、成形された生体組織と処理溶液を１００ｒｐｍの揺動式シェイカーで攪拌した。

その後、引張試験を実施した。ＧＡと化合物Ｘはいずれも一般的に成形された生体組織を架橋することができたが、化合物Ｘは成形された生体組織の構造がより安定化するため、架橋工程にさらに適していることが判明した。

図１からわかるように、化合物Ｘで処理した生体組織（曲線１）は、ＧＡで架橋した生体組織（曲線２）よりも１．５倍の耐応力性を示した（９．５ＭＰａと６．７ＭＰａ）。同時に、達した最大歪みは、ＧＡで架橋した場合、化合物Ｘで架橋した場合よりも１０％高かった（５７％と５１％）。しかし、心臓弁の機能を発揮させるためには、高耐歪性だけでなく、より高い耐応力性と十分な高耐歪性が重要であると考えられる。そこで、化合物Ｘで架橋した成形された生体組織に関してのみ、その後の特性試験を実施することにした。

示差走査熱量計（ＤＳＣ）による収縮温度の調査から、生体組織が十分に架橋されていることが確認された。その後、細胞毒性試験と生体適合性試験を行ったところ、関連する細胞毒性はなく、生体適合性も十分に高いことが確認された。また、架橋生体組織を線維芽細胞培養液に入れたところ、壊死は観察されなかった。

その後、実際の環境下で長期間にわたって架橋生体組織の安定性を評価するため、インビボ試験を実施した。

最初の前臨床試験で、心臓弁置換法の一般的な実現可能性と安全性を示すことに成功した。

２つ目の前臨床試験では、製造された心臓弁プロテーゼの長期安定性を確認した。動物モデル（羊）を用いて、１．５年の期間にわたって架橋組織の十分高い安定性が示された。また、２０％以上の逆流を伴う心不全は観察されなかった。さらに、心臓弁の狭窄も観察されなかった。

また、製造された心臓弁プロテーゼは、さまざまな組織学的検査が行われた。製造された心臓弁プロテーゼの厚さ、長さ、構造は、置換された天然心臓弁の厚さ、長さ、構造と一致した。血栓は、全体的に、また尖端のヒンジ部には観察されなかった。心臓弁プロテーゼの内皮は、完全かつ正確に局在していることが確認された。新生内膜が正しく局所的に形成していることが観察され、その範囲は十分であった。

Ｍ１（ＣＤ８０）、Ｍ２（ＣＤ１６３）マクロファージ、Ｔ細胞（ＣＤ３）、Ｂ細胞（ＣＤ７９ａ）を対象として、異物反応やその他の炎症反応を分析したところ、Ｍ２マクロファージの増加が観察された。これは、筋線維芽細胞への分化が望まれる免疫反応の表れと考えることができる。

関連する新生血管は観察できなかった。心臓弁プロテーゼは肺動脈壁と完全に密着していた。石灰化は観察できなかった。さらに、肺動脈壁が壊死するような兆候は見られなかった。

すなわち、生体組織を成形し、架橋性化合物Ｘで架橋することで製造された心臓弁プロテーゼは、周囲の生体組織と適切に一体化し、長期にわたって安定した機能を有する心臓弁プロテーゼとなった。

Claims (14)

1. 心臓弁プロテーゼであって、
   ａ）ヒトまたは動物の生体組織を提供する工程と、
   ｂ）前記生体組織に心臓弁の形状および大きさを与える成形過程において前記生体組織を成形する工程と、
   ｃ）前記生体組織を架橋剤で固定および安定化することにより、前記成形過程で前記生体組織に与えられた形状を保持し、心臓弁プロテーゼを得る工程と、
   を含む方法によって得ることができる心臓弁プロテーゼにおいて、
   前記架橋剤が、一般式（Ｉ）：
   

   

   に従う構造を有する化合物、塩または誘導体の少なくとも１種を含み、
   式中、Ｒ^１およびＲ^３は、互いに独立して、かつ、化合物中の他の残基とは独立して、ＨまたはＣＨ_３を示し、
   Ｒ^４ は、化合物中の他の残基とは独立して、Ｈまたは一般式（ＩＩ）：
   

   

   式中、Ｒ^５，Ｒ^６，Ｒ^７，Ｒ^８，Ｒ^９は、互いに独立して、かつ、化合物中の他の残基とは独立して、ＨまたはＯＨを示し、
   Ｒ^２は、化合物中の他の残基とは独立して、Ｈ、ＯＨまたは一般式（ＩＩＩ）：
   

   

   式中、Ｒ^１０，Ｒ^１１，Ｒ^１２，Ｒ^１３は、互いに独立して、かつ、化合物中の他の残基と独立して、ＨまたはＯＨを示す、
   心臓弁プロテーゼ。
2. 請求項１に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、式（Ｉ）に従う構造の残基が、式（ＩＶ）：
   

   
3. 請求項１または２に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^２は一般式（ＩＩＩ）に従う構造を有し、式（Ｖ）：
   

   
4. 請求項１から３のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^５，Ｒ^６，Ｒ^７，Ｒ^８，およびＲ^９のうち少なくとも２つはＯＨを示すことを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
5. 請求項１から４のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^５，Ｒ^６，およびＲ^９がＨを示し、残基Ｒ^７およびＲ^８がＯＨを示すことを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
6. 請求項１から５のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^１およびＲ^３がＣＨ_３を示すことを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
7. 請求項１から６のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^２がＯＨを示すことを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
8. 請求項１から７のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^１０，Ｒ^１１，Ｒ^１２，Ｒ^１３がそれぞれＯＨを示すことを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
9. 請求項１から８のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^５，Ｒ^６および^９がＨを示し、残基Ｒ^７およびＲ^８がＯＨを示し、残基Ｒ^１およびＲ^３がＣＨ_３を示し、残基Ｒ^２が式（ＩＩＩ）に相当し、残基Ｒ^１０，Ｒ^１１，Ｒ^１２，Ｒ^１３がＯＨを示すことを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
10. 請求項２または３に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、残基Ｒ^５，Ｒ^６およびＲ^９がＨを示し、残基Ｒ^７およびＲ^８がＯＨを示し、残基Ｒ^１およびＲ^３がＣＨ_３を示し、残基Ｒ^２が式（Ｖ）に相当し、残基Ｒ^１０，Ｒ^１１，Ｒ^１２，Ｒ^１３がＯＨを示し、式（Ｉ）に従う構造の残基が式（ＩＶ）に従う構造を有することを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
11. 請求項１から１０のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、前記生体組織が、結合組織、筋膜組織、腹膜組織または心臓組織であることを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
12. 請求項１１に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、前記生体組織が心膜組織であることを特徴とする、心臓弁プロテーゼ。
13. 請求項１から１２のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、障害のある心臓弁に起因する心臓疾患の治療に使用する、心臓弁プロテーゼ。
14. 請求項１３に記載の用途のための請求項１から１２のいずれか一項に記載の心臓弁プロテーゼにおいて、心臓弁プロテーゼが移植されるヒトまたは動物と同じ生体由来の生体組織が、前記心臓弁プロテーゼの製造に使用される、心臓弁プロテーゼ。
    

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