JP2023552456A - 治療薬の家畜動物における半減期を増加させるための組成物及びその使用方法 - Google Patents

治療薬の家畜動物における半減期を増加させるための組成物及びその使用方法 Download PDF

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Abstract

１つまたは複数のポリペプチドの家畜動物における半減期を増加させるための組成物及びその使用方法が提供される。組成物は、バリアントＩｇＧ Ｆｃ領域を含む。【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年１２月７日に出願された米国特許仮出願第６３／１２２，３６５号の優先権を主張するものであり、その内容は、その全体が参照により本明細書に援用される。
本開示は、概して、家畜動物における半減期が野生型同等物と比較して増加したポリペプチド（例えば、ポリペプチド－Ｆｃ領域融合体などの融合ポリペプチド；または抗体もしくは受容体－Ｆｃ融合体のリガンド結合部分などの結合分子）に関する。
配列表
ＵＳＰＴＯ ＥＦＳ－ＷＥＢサーバーを介した以下の配列表の電子提出の全内容は、ＭＰＥＰ§１７３０ＩＩ．Ｂ．２（ａ）に認可及び規定されている通り、その全体が、全ての目的のために、参照により本明細書に援用される。配列表は、以下の通り識別される、電子的に提出されたテキストファイル内にある：
ファイル名：４７４０６－００１７ＷＯ１＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔ
作成日：２０２１年１２月１日
サイズ（バイト）：６４，９６０バイト
抗体のＦｃ領域は、多くの機能的役割を担っており、限定するものではないが、リソソーム経路を介した分解から抗体を保護すること、抗体のエフェクター機能を媒介することなどが挙げられる。家畜動物における抗体の治療薬としての使用が増えるにつれ、最適なＦａｂを選択することだけでなく、望ましい半減期及びエフェクター機能を得るのに適切なＦｃと組み合わせることにも重点が置かれてきている。
当該技術分野において、家畜動物に使用するポリペプチド治療薬（例えば、抗体）の半減期を増加させることに関する指針はほとんどない。本開示は、家畜動物におけるポリペプチド（例えば、抗体）の血清中持続性を改善するＦｃ領域バリアントを提供することによってその欠落を解消するものである。
本明細書で提供されるのは、治療用ポリペプチドに有用な家畜動物のＦｃ（例えば、ＩｇＧのＦｃ領域バリアント）またはそのＦｃＲｎ結合断片である。本開示は、対照ポリペプチド（例えば、野生型同等物であるＩｇＧのＦｃ領域）よりも家畜動物のＦｃＲｎに対する結合が増加したポリペプチドを特徴とする。いくつかの場合において、これらのポリペプチドは、ｐＨ５．５、ｐＨ６．０及び／またはｐＨ６．５において、対照ポリペプチドと比較したとき、家畜動物のＦｃＲｎに対する結合が増加する。いくつかの場合において、これらのポリペプチドは、例えば、中性ｐＨ（例えば、ｐＨ７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、または７．５）よりも酸性ｐＨ（例えば、ｐＨ５．５、ｐＨ６．０またはｐＨ６．５）で、より高いレベルで家畜動物のＦｃＲｎに結合することができる。いくつかの場合において、これらのポリペプチドは、ｐＨ７．４よりもｐＨ５．５及び／または６．０でより高いレベルで家畜動物のＦｃＲｎに結合する。本開示は、部分的には、家畜動物における半減期が野生型同等物よりも増加したポリペプチドに関する。例えば、本明細書で開示されるＦｃ領域またはそのＦｃＲｎ結合領域に結合していない結合分子のバージョンと比べて半減期が増加した結合分子（例えば、抗体または受容体のリガンド結合部分）が提供される。また、酵素－Ｆｃ領域融合体、リガンド－Ｆｃ領域融合体、ナノボディ－Ｆｃ融合体、及びペプチド－Ｆｃ領域融合体も提供され、融合体は、野生型同等物と比較して半減期が増加している。Ｆｃ領域は、半減期を増加させる１つまたは複数の置換（同じ種の家畜動物の野生型Ｆｃ領域と比べて）を有することに加えて、例えば、エフェクター機能の増加、エフェクター機能の減少、プロテインＡに対する結合の増加及び／またはポリペプチドの不均一性の減少（例えば、Ｆｃ領域における１つ以上の翻訳後修飾を取り除くことによる）をもたらす他の置換も含み得る。家畜動物のＦｃ領域配列は、家畜動物の任意の抗体に由来し得る。いくつかの場合において、家畜動物のＦｃ領域配列は、ＩｇＧに由来し、そのサブクラスは、本明細書に別途記載される。
本開示は、（１）リガンドまたはタンパク質のエピトープに特異的に結合する結合ドメインまたはその断片を含み、ここで、結合ドメインは、（２）本明細書で開示される家畜動物のＦｃ領域（ＣＨ２＋ＣＨ３領域）またはそのＦｃＲｎ結合領域を含むドメインに結合している、組み換えタンパク質を特徴とする。いくつかの場合において、結合ドメインは、（ｉ）６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、例えば、家畜動物またはヒト／ヒト化抗体のもの；（ｉｉ）ナノボディ；（ｉｉｉ］リガンドに結合する可溶性受容体結合ドメインまたはそのリガンド結合断片、及び（ｉｖ）家畜動物受容体タンパク質の細胞外ドメインを含む。
本開示はまた、（１）本明細書に記載される家畜動物ＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む第１のＦｃ領域（例えば、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、ＣＨ２＋ＣＨ３ドメイン）を含む第１のポリペプチドと、（２）本明細書に記載される家畜動物ＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む第２のＦｃ領域を含む第２のポリペプチドとを含む、組成物を提供する。第１及び第２のポリペプチドは、第１及び第２のＦｃ領域を介して会合することができる。いくつかの場合において、第１及び第２のＦｃ領域のアミノ酸配列は、同じである。他の場合において、第１及び第２のＦｃ領域のアミノ酸配列は、異なる（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５アミノ酸）。
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域バリアントは、ＩｇＧ１ａ、ＩｇＧ１ｂ、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４ａ、ＩｇＧ４ｂ、ＩｇＧ５ａ、ＩｇＧ５ｂ、ＩｇＧ６ａ及びＩｇＧ６ｂからなる群から選択されるブタＩｇＧのＦｃバリアントである。
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域バリアントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３からなる群から選択されるウシＩｇＧのＦｃバリアントである。
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域バリアントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＧ５、ＩｇＧ６及びＩｇＧ７からなる群から選択されるウマＩｇＧのＦｃバリアントである。
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域バリアントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３からなる群から選択されるヒツジＩｇＧのＦｃバリアントである。
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域バリアントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３からなる群から選択されるヤギＩｇＧのＦｃバリアントである。
本明細書で開示される家畜動物ＩｇＧのＦｃ領域バリアント及びポリペプチドを含む、融合分子も開示される。いくつかの場合において、家畜動物ＩｇＧのＦｃ領域バリアントは、ポリペプチドに共有結合的に結合される（例えば、ヒンジ領域またはリンカーを介して）。いくつかの場合において、ポリペプチドは、家畜動物受容体タンパク質のリガンド結合ドメイン、家畜動物受容体タンパク質の細胞外ドメイン、または抗原結合ドメインである。いくつかの場合において、ポリペプチドは、ＩＬ－１３Ｒα１またはＩＬ－１３Ｒα２のリガンド結合ドメインまたは細胞外ドメイン、家畜動物エリスロポエチン（ＥＰＯ）、家畜動物ＣＴＬＡ４、家畜動物ＬＦＡ３、家畜動物ＶＥＧＦＲ１／ＶＥＧＦＲ３、家畜動物ＩＬ－１Ｒ、家畜動物ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、及び家畜動物トロンボポエチン結合ペプチドから選択される。いくつかの場合において、ポリペプチドは、ｓｃＦｖ、ナノボディ、または単一ドメイン抗体である。いくつかの場合において、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントは、家畜動物ＩｇＧ１ａ抗体のＦｃ領域のバリアントである。いくつかの場合において、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントは、家畜動物ＩｇＧ１ｂ抗体のＦｃ領域のバリアントである。いくつかの場合において、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントは、家畜動物ＩｇＧ２抗体のＦｃ領域のバリアントである。
いくつかの態様において、本開示は、家畜動物のＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ｉ２５０Ｑ、Ｉ２５０Ｅ、Ａ２５０Ｑ、Ａ２５０Ｅ、Ｖ２５０Ｑ及びＶ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ、Ｔ２５２Ｆ、Ｋ２５２Ｙ、Ｋ２５２Ｗ及びＫ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｍ２５６Ａ、Ｍ２５６Ｄ、Ｍ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２８６Ｙ、Ｓ２８６Ｆ、Ｓ２８６Ｗ、Ｓ２８６Ｌ、Ｓ２８６Ｄ、Ｓ２８６Ｅ、Ｔ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｅ３１１Ｖ、Ｅ３１１Ｋ、Ｅ３１１Ｒ、Ｅ３１１Ｌ、Ｅ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ、Ｋ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ、Ｖ４２６Ｈ、Ｇ４２６Ｙ、Ｇ４２６Ｆ及びＧ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ、Ｍ４２８Ｆ、Ｈ４２８Ｌ、Ｈ４２８Ｙ及びＨ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ、Ｔ４３６Ｈ、Ｆ４３６Ｈ及びＶ４３６Ｈからなる群から選択される、位置に含み、
ここで、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、ポリペプチドは、野生型ＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、家畜動物のＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、ポリペプチドを提供する。
いくつかの実施形態において、家畜動物は、ブタである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ｉ２５０Ｑ及びＩ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ及びＭ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ及びＳ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｅ３１１Ｖ、Ｅ３１１Ｋ、Ｅ３１１Ｒ、Ｅ３１１Ｌ及びＥ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ、Ｍ４２８Ｆ、Ｈ４２８Ｌ、Ｈ４２８Ｙ及びＨ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ及びＴ４３６Ｈからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｅである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９ＤまたはＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙである、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｙである、位置；及び
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、野生型ＩｇＧのＦｃは、配列番号１～１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＦｃである。
いくつかの実施形態において、家畜動物は、ウシである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ及びＱ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、野生型ＩｇＧのＦｃは、配列番号１２～１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＦｃである。
いくつかの実施形態において、家畜動物は、ウマである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ａ２５０Ｑ、Ａ２５０Ｅ、Ｖ２５０Ｑ及びＶ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｋ２５２Ｙ、Ｋ２５２Ｗ及びＫ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｍ２５６Ａ、Ｍ２５６Ｄ、Ｍ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２８６Ｙ、Ｓ２８６Ｆ、Ｓ２８６Ｗ、Ｓ２８６Ｌ、Ｓ２８６Ｄ、Ｓ２８６Ｅ、Ｔ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ及びＫ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ、Ｖ４２６Ｈ、Ｇ４２６Ｙ、Ｇ４２６Ｆ及びＧ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ、Ｆ４３６Ｈ及びＶ４３６Ｈからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｅである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＧ４２６Ｙである、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、野生型ＩｇＧのＦｃは、配列番号１５～２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＦｃである。
いくつかの実施形態において、家畜動物は、ヒツジである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＶ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、位置。
いくつかの実施形態において、野生型ＩｇＧのＦｃは、配列番号２２～２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＦｃである。いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｙからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、野生型ＩｇＧのＦｃは、配列番号２２～２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＦｃである。
いくつかの実施形態において、家畜動物は、ヤギである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ、Ｋ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、位置。
いくつかの実施形態において、野生型ＩｇＧのＦｃは、配列番号２５～２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＦｃである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、少なくとも１つのアミノ酸置換のうちの２つ以上を含み、ここで、２つ以上のアミノ酸置換は、異なる位置にあり、ポリペプチドは、（ａ）家畜動物の野生型ＩｇＧのＦｃドメイン、及び（ｂ）２つ以上のアミノ酸置換のうちの１つのみを含むポリペプチドと比較した場合、家畜動物のＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、結合ドメインを更に含む。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、（ｉ）免疫グロブリン分子の６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）；（ｉｉ）家畜動物の受容体タンパク質のリガンド結合ドメイン、（ｉｉｉ）ナノボディ、または（ｉｖ）家畜動物の受容体タンパク質の細胞外ドメインを含む。
いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＮＧＦ、ＴｒＫＡ、ＡＤＡＭＴＳ、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－４Ｒ、アンジオテンシン１型（ＡＴ１）受容体、アンジオテンシン２型（ＡＴ２）受容体、ＩＬ－５、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－３１、ＩＬ－３３、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ４７、ＣＤ５２、及び補体系複合体からなる群から選択される抗原に特異的に結合する。
いくつかの実施形態において、結合ドメイン（例えば、抗体の結合ドメイン）と抗原の間の特異的結合は、ＫＤ値によって表される。ＫＤは、抗体の抗体解離速度（ｋｏｆｆ）と抗体会合速度（ｋｏｎ）の比である。ＫＤ値は、特定の抗体／抗原相互作用のｋｏｎ速度及びｋｏｆｆ速度を測定し、次いで、これらの値の比を使用してＫＤ値を算出することによって、決定することができる。ＫＤ値が小さいほど、抗体（またはその結合ドメイン）のその標的に対する親和性は大きくなる。いくつかの実施形態において、特異的結合のＫＤ値は、約１０－６～約１０－１２の範囲（例えば、１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、１０－１０、１０－１１、または１０－１２）である。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、ＥＰＯ、ＣＴＬＡ４、ＬＦＡ３、ＶＥＧＦＲ１／ＶＥＧＦＲ３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４Ｒ、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、及びトロンボポエチン結合ペプチドからなる群から選択されるタンパク質を更に含む。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、中性ｐＨよりも酸性ｐＨでより高いレベルで家畜動物のＦｃＲｎに結合する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、ｐＨ７．４よりもｐＨ５．５でより高いレベルで家畜動物のＦｃＲｎに結合する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、ｐＨ７．４よりもｐＨ６．０でより高いレベルで家畜動物のＦｃＲｎに結合する。
また、（ｉ）本明細書に記載されるポリペプチド、及び（ｉｉ）薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物も本明細書で開示される。
本開示はまた、本明細書に記載されるポリペプチドをコードする１つまたは複数の核酸に及ぶ。
本明細書で開示される別の態様において、本明細書に記載される１つまたは複数の核酸を含む、１つまたは複数の発現ベクターが提供される。本開示はまた、本明細書で開示される１つもしくは複数の核酸または本明細書で開示される１つもしくは複数の発現ベクターを含む、宿主細胞に及ぶ。
また、ポリペプチドを作製する方法も本明細書で開示され、方法は、以下を含む：
（ａ）本明細書で開示される１つまたは複数の核酸を提供すること；
（ｂ）宿主細胞培養物中で１つまたは複数の核酸を発現させ、それにより、ポリペプチドを産生すること；及び
（ｃ）（ｂ）で産生されたポリペプチドを宿主細胞培養物から回収すること。
いくつかの実施形態において、方法は、ポリペプチドを医薬製剤として製剤化することを更に含む。
本開示はまた、家畜動物の疾患または障害を治療することを、それを必要とする家畜動物に行う方法であって、本明細書で開示される医薬組成物を含む組成物の有効量を家畜動物に投与することを含む、方法に及ぶ。
本開示はまた、家畜動物の疾患または障害を予防することを、それを必要とする家畜動物に行う方法であって、本明細書で開示される医薬組成物を含む組成物の有効量を家畜動物に投与することを含む、方法に及ぶ。
いくつかの実施形態において、疾患または障害は、アレルギー、慢性疼痛、急性疼痛、炎症性疾患、自己免疫疾患、内分泌疾患、胃腸疾患、心血管疾患、腎臓疾患、生殖機能関連障害、感染症またはがんである。
いくつかの実施形態において、疾患または障害は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、骨関節炎痛、関節炎、貧血、または肥満である。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。本発明の実施または検証には、本明細書に記載されるものと同様または同等の方法及び材料を使用することができるが、例示的な方法及び材料について以下に記載する。本明細書で言及される全ての公開物、特許出願、特許及び他の参考文献は、その全体が参照により援用される。矛盾が生じる場合には、定義を含め、本出願が優先される。材料、方法及び例は、例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。
本発明の他の特徴及び利点は、以下の発明を実施するための形態及び特許請求の範囲から明らかとなろう。
ブタＩｇＧ１ａ、ヒツジＩｇＧ１、ウシＩｇＧ１、ウマＩｇＧ１、ネコＩｇＧ１ａ、イヌＩｇＧＢ及びヒトＩｇＧ１の野生型Ｆｃ領域のアミノ酸配列アライメントを示す。これらの配列は、それぞれ配列番号３０～３６が割り当てられている。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むブタ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むヒツジ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウシ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定した、Ｆｃバリアントを含むウマ抗体の純度を示す。各抗体の純度は、＞９０％であった。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ブタＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウシＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。 ウマＩｇＧバリアント及び野生型のカイネティクス結合データのセンサーグラムを示す。
家畜動物に罹患する多種多様な疾患の予防及び治療のための治療薬としてポリペプチド（例えば、抗体、受容体のリガンド結合ドメイン、酵素、リガンド、ペプチド）の使用が増えているが、特に、ポリペプチドを繰り返し投与しなければならない慢性疾患の予防または治療には、半減期の長いポリペプチドを開発することが重要である。
したがって、本開示は、家畜動物の免疫グロブリンＦｃ領域またはそのＦｃＲｎ結合領域であって、家畜動物において、これらの配列を含む１つまたは複数のポリペプチドの半減期を向上させる変異を含むものを特徴とする。また、これらのドメインを含むポリペプチド及びその使用方法も開示される。これらのペプチドは、様々な治療用途及び診断用途に使用することができる。
値が範囲で記載されている場合、その記載は、特定の数値または特定の下位範囲が明示されているかどうかにかかわらず、かかる範囲内の全ての可能な下位範囲及びかかる範囲内に入る特定の数値の開示を含むことが理解されるべきである。全ての数の表記、例えば、ｐＨ、温度、時間、濃度、及び分子量は、範囲を含め、近似値であり、１．０または０．１の増分で適宜（＋）または（－）に変動し、あるいは＋／－１５％、あるいは１０％、あるいは５％、あるいは２％の変動がある。必ずしも常に明示されているわけではないが、全ての数の表記は、「約」という語が先行することが理解される。また、必ずしも常に明示されているわけではないが、本明細書に記載される試薬は単なる例示であり、その等価物は当該技術分野において知られていることも理解される。
「約」という用語は、量または濃度などの測定可能な値に言及する際に本明細書で使用される場合、明記される量の２０％、１０％、５％、１％、０．５％、または０．１％の変動を包含することを意味している。
ブタ抗体
ブタは、典型的に、ＩｇＧ１ａ、ＩｇＧ１ｂ、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４ａ、ＩｇＧ４ｂ、ＩｇＧ５ａ、ＩｇＧ５ｂ、ＩｇＧ６ａ及びＩｇＧ６ｂと呼ばれる１１のＩｇＧ重鎖を有する。これらの重鎖は、１１の異なるブタＩｇＧのサブクラスを表している。これらの重鎖アミノ酸及びＤＮＡ配列は、ＧＥＮＢＡＮＫデータベースから入手可能である。１１つのブタＩｇＧ重鎖のＦｃ領域のそれぞれのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列の例示的な例を以下に示し（ＣＨ２ドメインには下線を付す）、各重鎖Ｆｃ領域のＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号（アミノ酸配列またはアミノ酸配列の元となるｍＲＮＡ配列）を示す：
ブタ（Ｓｕｓ ｓｃｒｏｆａ）ＩｇＧのＦｃ配列
ＩｇＧ１ａ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＡ５２２１９．１）
ＩｇＧ１ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＡ５２２１６．１）
ＩｇＧ２ａ（ＧｅｎＢａｎｋ Ｕ０３７７９）
ＩｇＧ２ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ Ｕ０３７８０）
ＩｇＧ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢＹ８５８１０．１）
ＩｇＧ４ａ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＡ５２２２０．１）
ＩｇＧ４ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢＹ８５８０６．１）
ＩｇＧ５ａ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢＹ８５８０９．１）
ＩｇＧ５ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢ６９９６８７）
ＩｇＧ６ａ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢ６９９６８７）
ＩｇＧ６ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢＹ８５８０５．１）
ブタ抗体のＣＨ２領域は、ブタＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～３４０（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ２領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ブタ抗体のＣＨ３領域は、ブタＩｇＧ抗体のアミノ酸３４１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ３領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ブタＩｇＧ抗体のＦｃ領域は、ブタＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。
以下の表１は、ヒトＩｇＧ１、イヌＩｇＧＢ及びネコＩｇＧ１ａのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列を１１のブタＩｇＧアイソタイプのそれぞれとＥＵナンバリングに基づき比較するものである：





半減期を改善するブタＩｇＧ Ｆｃの置換
血清中持続性の増加は、治療用ポリペプチドにとって有益な特性である。本開示は、野生型ブタＩｇＧ１ａ、ＩｇＧ１ｂ、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４ａ、ＩｇＧ４ｂ、ＩｇＧ５ａ、ＩｇＧ５ｂ、ＩｇＧ６ａ及びＩｇＧ６ｂのＦｃ領域の置換を特徴とし、置換は、１つまたは複数の対照ポリペプチドと比べて、これらのＦｃ領域を含む１つまたは複数のポリペプチドのブタにおける半減期を向上させるものであり、ここで、１つまたは複数の対照ポリペプチドは、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントの代わりに、対応する野生型ブタＩｇＧのＦｃ領域を有する以外は１つまたは複数のポリペプチドと同一であるものである。半減期を増加させる置換は、ブタＣＨ２領域、ブタＣＨ３領域のうちの１つ以上、またはブタＦｃ（例えば、ＣＨ２＋ＣＨ３）領域との関連でなされ得る。
本開示は、ブタＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのブタＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１）の位置：
（ｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ｉ２５０Ｑ及びＩ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ及びＭ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ及びＳ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｅ３１１Ｖ、Ｅ３１１Ｋ、Ｅ３１１Ｒ、Ｅ３１１Ｌ及びＥ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ、Ｍ４２８Ｆ、Ｈ４２８Ｌ、Ｈ４２８Ｙ及びＨ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）野生型ブタＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ及びＴ４３６Ｈからなる群から選択される、位置に含み、
ここで、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、ポリペプチドは、野生型ブタＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、ウシＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、ポリペプチドを提供する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、または７つ）の位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｅである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９ＤまたはＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙである、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｙである、位置；及び
（ｖｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、約５．０～約６．５（例えば、約５．５または約６．０）のｐＨにおけるブタＦｃＲｎに対する結合親和性が、同じｐＨにおける野生型ブタＩｇＧのＦｃドメインと比較して増加している。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１～１１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％）同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１～１１のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインに対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントを提供する。また、配列番号１～１１に示されるＣＨ２ドメインのいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントも提供される。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１～１１のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％または少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。また、配列番号１～１１のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメイン配列のいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１～１１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＦｃ領域バリアントを特徴とする。また、配列番号１～１１のいずれか１つとは１～２０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＦｃ領域バリアントも開示される。
いくつかの実施形態において、ブタＩｇＧのＦｃ ＣＨ２ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドが提供され、ＣＨ２ドメインバリアントは、配列番号１～１１のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ブタＩｇＧのＦｃ ＣＨ３ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、ＣＨ３ドメインバリアントは、配列番号１～１１のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ブタＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、Ｆｃ領域バリアントは、配列番号１～１１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
ウシ抗体
ウシは、典型的に、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、及びＩｇＧ３と呼ばれる３つのＩｇＧ重鎖を有する。これらの重鎖は、３つの異なるウシＩｇＧのサブクラスを表している。これらの重鎖アミノ酸及びＤＮＡ配列は、ＧＥＮＢＡＮＫデータベースから入手可能である。３つのウシＩｇＧ重鎖のＦｃ領域のそれぞれのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列の例示的な例を以下に示し（ＣＨ２ドメインには下線を付す）、各重鎖Ｆｃ領域のＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号（アミノ酸配列またはアミノ酸配列の元となるｍＲＮＡ配列）を示す：
ウシＢｏｓ Ｔａｕｒｕｓ
ＩｇＧ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＢＥ６８６１９．１）
ＩｇＧ２（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＱＴ２７０５７．１）
ＩｇＧ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＣ４８７６１．１）
ウシ抗体のＣＨ２領域は、ウシＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～３４０（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ２領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ウシ抗体のＣＨ３領域は、ウシＩｇＧ抗体のアミノ酸３４１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ３領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ウシＩｇＧ抗体のＦｃ領域は、ウシＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。
以下の表２は、ヒトＩｇＧ１、イヌＩｇＧＢ及びネコＩｇＧ１ａのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列を３つのウシＩｇＧアイソタイプのそれぞれとＥＵナンバリングに基づき比較するものである：





半減期を改善するウシＩｇＧ Ｆｃの置換
血清中持続性の増加は、治療用ポリペプチドにとって有益な特性である。本開示は、野生型ウシＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３のＦｃ領域の置換を特徴とし、置換は、１つまたは複数の対照ポリペプチドと比べて、これらのＦｃ領域を含む１つまたは複数のポリペプチドのウシにおける半減期を向上させるものであり、ここで、１つまたは複数の対照ポリペプチドは、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントの代わりに、対応する野生型ウシＩｇＧのＦｃ領域を有する以外は１つまたは複数のポリペプチドと同一であるものである。半減期を増加させる置換は、ウシＣＨ２ドメイン、ウシＣＨ３ドメインのうちの１つ以上、またはウシＦｃ（例えば、ＣＨ２＋ＣＨ３）領域との関連でなされ得る。
本開示は、ウシＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのウシＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１）の位置：
（ｉ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ及びＱ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘ）野生型ウシＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、位置に含み、
ここで、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、ポリペプチドは、野生型ウシＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、ウシＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、ポリペプチドを提供する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、または５つ）の位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、約５．０～約６．５（例えば、約５．５または約６．０）のｐＨにおけるウシＦｃＲｎに対する結合親和性が、同じｐＨにおける野生型ウシＩｇＧのＦｃドメインと比較して増加している。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１２～１４からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％）同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１２～１４のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインに対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントを提供する。また、配列番号１２～１４に示されるＣＨ２ドメインのいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントも提供される。
他の場合において、本開示は、配列番号１２～１４のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％または少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。また、配列番号１２～１４のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメイン配列のいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。
ある特定の場合において、本開示は、配列番号１２～１４のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＦｃ領域バリアントを特徴とする。また、配列番号１２～１４のいずれか１つとは１～２０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＦｃ領域バリアントも開示される。
いくつかの実施形態において、ウシＩｇＧのＦｃ ＣＨ２ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドが提供され、ＣＨ２ドメインバリアントは、配列番号１２～１４のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ウシＩｇＧのＦｃ ＣＨ３ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、ＣＨ３ドメインバリアントは、配列番号１２～１４のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ウシＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、Ｆｃ領域バリアントは、配列番号１２～１４のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
ウマ抗体
ウマは、典型的に、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＧ５、ＩｇＧ６及びＩｇＧ７と呼ばれる７つのＩｇＧ重鎖を有する。これらの重鎖は、７つの異なるウマＩｇＧのサブクラスを表している。これらの重鎖アミノ酸及びＤＮＡ配列は、ＧＥＮＢＡＮＫデータベースから入手可能である。７つのウマＩｇＧ重鎖のＦｃ領域のそれぞれのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列の例示的な例を以下に示し（ＣＨ２ドメインには下線を付す）、各重鎖Ｆｃ領域のＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号（アミノ酸配列またはアミノ酸配列の元となるｍＲＮＡ配列）を示す：
ウマＥｑｕｕｓ ｃａｂａｌｌｕｓ
ＩｇＧ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＣ４４７６０．１）
ＩｇＧ２（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＣ４４７６１．１）
ＩｇＧ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＰ８２１８１．１）
ＩｇＧ４（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＳ１８４１５．１）
ＩｇＧ５（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＣ８６３４０．１）
ＩｇＧ６（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＣ８６３４１．１）
ＩｇＧ７（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＳ１８４１４．１）
ウマ抗体のＣＨ２領域は、ウマＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～３４０（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ２領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ウマ抗体のＣＨ３領域は、ウマＩｇＧ抗体のアミノ酸３４１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ３領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ウマＩｇＧ抗体のＦｃ領域は、ウマＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。
以下の表３は、ヒトＩｇＧ１、イヌＩｇＧＢ及びネコＩｇＧ１ａのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列を７つのウマＩｇＧアイソタイプのそれぞれとＥＵナンバリングに基づき比較するものである：





半減期を改善するウマＩｇＧ Ｆｃの置換
血清中持続性の増加は、治療用ポリペプチドにとって有益な特性である。本開示は、野生型ウマＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＧ５、ＩｇＧ６及びＩｇＧ７のＦｃ領域の置換を特徴とし、置換は、１つまたは複数の対照ポリペプチドと比べて、これらのＦｃ領域を含む１つまたは複数のポリペプチドのウマにおける半減期を向上させるものであり、ここで、１つまたは複数の対照ポリペプチドは、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントの代わりに、対応する野生型ウマＩｇＧのＦｃ領域を有する以外は１つまたは複数のポリペプチドと同一であるものである。半減期を増加させる置換は、ウマＣＨ２ドメイン、ウマＣＨ３ドメインのうちの１つ以上、またはウマＦｃ（例えば、ＣＨ２＋ＣＨ３）領域との関連でなされ得る。
本開示は、ウマＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのウマＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１）の位置：
（ｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ａ２５０Ｑ、Ａ２５０Ｅ、Ｖ２５０Ｑ及びＶ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｋ２５２Ｙ、Ｋ２５２Ｗ及びＫ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｍ２５６Ａ、Ｍ２５６Ｄ、Ｍ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２８６Ｙ、Ｓ２８６Ｆ、Ｓ２８６Ｗ、Ｓ２８６Ｌ、Ｓ２８６Ｄ、Ｓ２８６Ｅ、Ｔ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ及びＫ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ、Ｖ４２６Ｈ、Ｇ４２６Ｙ、Ｇ４２６Ｆ及びＧ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）野生型ウマＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ、Ｆ４３６Ｈ及びＶ４３６Ｈからなる群から選択される、位置に含み、
ここで、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、ポリペプチドは、野生型ウマＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、ウマＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、ポリペプチドを提供する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、または６つ）の位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｅである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＧ４２６Ｙである、位置；
（ｖｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、約５．０～約６．５（例えば、約５．５または約６．０）のｐＨにおけるウマＦｃＲｎに対する結合親和性が、同じｐＨにおける野生型ウマＩｇＧのＦｃドメインと比較して増加している。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１５～２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％）同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１５～２１のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインに対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントを提供する。また、配列番号１５～２１に示されるＣＨ２ドメインのいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントも提供される。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１５～２１のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％または少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。また、配列番号１５～２１のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメイン配列のいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号１５～２１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＦｃ領域バリアントを特徴とする。また、配列番号１５～２１のいずれか１つとは１～２０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＦｃ領域バリアントも開示される。
いくつかの実施形態において、ウマＩｇＧのＦｃ ＣＨ２ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドが提供され、ＣＨ２ドメインバリアントは、配列番号１５～２１のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ウマＩｇＧのＦｃ ＣＨ３ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、ＣＨ３ドメインバリアントは、配列番号１５～２１のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ウマＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、Ｆｃ領域バリアントは、配列番号１５～２１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
ヒツジ抗体
ヒツジは、典型的に、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３と呼ばれる３つのＩｇＧ重鎖を有する。これらの重鎖は、３つの異なるヒツジＩｇＧのサブクラスを表している。これらの重鎖アミノ酸及びＤＮＡ配列は、ＧＥＮＢＡＮＫデータベースから入手可能である。３つのヒツジＩｇＧ重鎖のＦｃ領域のそれぞれのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列の例示的な例を以下に示し（ＣＨ２ドメインには下線を付す）、各重鎖Ｆｃ領域のＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号（アミノ酸配列またはアミノ酸配列の元となるｍＲＮＡ配列）を示す：
Ｓｈｅｅｐ Ｏｖｉａｒｉ
ＩｇＧ２（Ｇｅｎｂａｎｋ Ｘ７０９８３）
ＩｇＧ３（Ｓｃｈｗａｒｔｚ ｅｔ ａｌ，２０１８，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，７０：３１７）
ヒツジ抗体のＣＨ２領域は、ヒツジＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～３４０（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ２領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ヒツジ抗体のＣＨ３領域は、ヒツジＩｇＧ抗体のアミノ酸３４１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ３領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ヒツジＩｇＧ抗体のＦｃ領域は、ヒツジＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。
以下の表４は、ヒトＩｇＧ１、イヌＩｇＧＢ及びネコＩｇＧ１ａのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列を３つのヒツジＩｇＧアイソタイプのそれぞれとＥＵナンバリングに基づき比較するものである：





半減期を改善するヒツジＩｇＧ Ｆｃの置換
血清中持続性の増加は、治療用ポリペプチドにとって有益な特性である。本開示は、野生型ヒツジＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３のＦｃ領域の置換を特徴とし、置換は、１つまたは複数の対照ポリペプチドと比べて、これらのＦｃ領域を含む１つまたは複数のポリペプチドのヒツジにおける半減期を向上させるものであり、ここで、１つまたは複数の対照ポリペプチドは、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントの代わりに、対応する野生型ヒツジＩｇＧのＦｃ領域を有する以外は１つまたは複数のポリペプチドと同一であるものである。半減期を増加させる置換は、ヒツジＣＨ２ドメイン、ヒツジＣＨ３ドメインのうちの１つ以上、またはヒツジＦｃ（例えば、ＣＨ２＋ＣＨ３）領域との関連でなされ得る。
本開示は、ヒツジＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのヒツジＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１）の位置：
（ｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＶ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）野生型ヒツジＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、位置に含み、
ここで、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、ポリペプチドは、野生型ヒツジＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、ヒツジＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、ポリペプチドを提供する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、または５つ）の位置に含む：
（ｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５２Ｙである、位置；
（ｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、位置；
（ｉｉｉ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、位置；
（ｉｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｙからなる群から選択される、位置；
（ｖ）家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、約５．０～約６．５（例えば、約５．５または約６．０）のｐＨにおけるヒツジＦｃＲｎに対する結合親和性が、同じｐＨにおける野生型ヒツジＩｇＧのＦｃドメインと比較して増加している。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２２～２４からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％）同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号２２～２４のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインに対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントを提供する。また、配列番号２２～２４に示されるＣＨ２ドメインのいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントも提供される。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号２２～２４のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％または少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。また、配列番号２２～２４のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメイン配列のいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号２２～２４のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＦｃ領域バリアントを特徴とする。また、配列番号２２～２４のいずれか１つとは１～２０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＦｃ領域バリアントも開示される。
いくつかの実施形態において、ヒツジＩｇＧのＦｃ ＣＨ２ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドが提供され、ＣＨ２ドメインバリアントは、配列番号２２～２４のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ヒツジＩｇＧのＦｃ ＣＨ３ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、ＣＨ３ドメインバリアントは、配列番号２２～２４のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ヒツジＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、Ｆｃ領域バリアントは、配列番号２２～２４のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
ヤギ抗体
ヤギは、典型的に、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３と呼ばれる３つのＩｇＧ重鎖を有する。これらの重鎖は、３つの異なるヤギＩｇＧのサブクラスを表している。これらの重鎖アミノ酸及びＤＮＡ配列は、ＧＥＮＢＡＮＫデータベースから入手可能である。３つのヤギＩｇＧ重鎖のＦｃ領域のそれぞれのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列の例示的な例を以下に示す（ＣＨ２ドメインには下線を付す）：
ヤギＣａｐｒａ ｈｉｒｃｕｓ
ＩｇＧ１（Ｓｃｈｗａｒｔｚ ｅｔ ａｌ，２０１８，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，７０：３１７）
ＩｇＧ２（Ｓｃｈｗａｒｔｚ ｅｔ ａｌ，２０１８，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，７０：３１７）
ＩｇＧ３（Ｓｃｈｗａｒｔｚ ｅｔ ａｌ，２０１８，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，７０：３１７）
ヤギ抗体のＣＨ２領域は、アミノ酸２３１～３４０（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ２領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ヤギ抗体のＣＨ３領域は、ヤギＩｇＧ抗体のアミノ酸３４１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。ＣＨ３領域は、そのＮ末端及び／またはＣ末端に、１～６個（例えば、１、２、３、４、５、６個）の追加のアミノ酸または欠失を含み得ることが理解される。
ヤギＩｇＧ抗体のＦｃ領域は、ヤギＩｇＧ抗体のアミノ酸２３１～４４７（ＥＵナンバリングに従う）を含むか、またはそれらからなる。
以下の表５は、ヒトＩｇＧ１、イヌＩｇＧＢ及びネコＩｇＧ１ａのＣＨ２及びＣＨ３ドメインのアミノ酸配列を３つのヤギＩｇＧアイソタイプのそれぞれとＥＵナンバリングに基づき比較するものである：





半減期を改善するヤギＩｇＧ Ｆｃの置換
血清中持続性の増加は、治療用ポリペプチドにとって有益な特性である。本開示は、野生型ヤギＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ３のＦｃ領域の置換を特徴とし、置換は、１つまたは複数の対照ポリペプチドと比べて、これらのＦｃ領域を含む１つまたは複数のポリペプチドのヤギにおける半減期を向上させるものであり、ここで、１つまたは複数の対照ポリペプチドは、ＩｇＧのＦｃ領域バリアントの代わりに、対応する野生型ヤギＩｇＧのＦｃ領域を有する以外は１つまたは複数のポリペプチドと同一であるものである。半減期を増加させる置換は、ヤギＣＨ２ドメイン、ヤギＣＨ３ドメインのうちの１つ以上、またはヤギＦｃ（例えば、ＣＨ２＋ＣＨ３）領域との関連でなされ得る。
本開示は、ヤギＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのヤギＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１）の位置：
（ｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｉｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｉｉｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＳ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｖ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ、Ｋ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｖｉｉｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、位置；
（ｉｘ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、位置；
（ｘ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、位置；ならびに
（ｘｉ）野生型ヤギＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、位置に含み、
ここで、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、ポリペプチドは、野生型ヤギＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、ヤギＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、ポリペプチドを提供する。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、約５．０～約６．５（例えば、約５．５または約６．０）のｐＨにおけるヤギＦｃＲｎに対する結合親和性が、同じｐＨにおける野生型ヤギＩｇＧのＦｃドメインと比較して増加している。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、配列番号２５～２７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％）同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号２５～２７のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインに対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントを提供する。また、配列番号２５～２７に示されるＣＨ２ドメインのいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＣＨ２ドメインバリアントも提供される。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号２５～２７のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％または少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。また、配列番号２５～２７のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメイン配列のいずれか１つとは１～１５個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＣＨ３ドメインバリアントを特徴とする。
いくつかの場合において、本開示は、配列番号２５～２７のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＦｃ領域バリアントを特徴とする。また、配列番号２５～２７のいずれか１つとは１～２０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個）のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＦｃ領域バリアントも開示される。
いくつかの実施形態において、ヤギＩｇＧのＦｃ ＣＨ２ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドが提供され、ＣＨ２ドメインバリアントは、配列番号２５～２７のいずれか１つに示されるＣＨ２ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ヤギＩｇＧのＦｃ ＣＨ３ドメインバリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、ＣＨ３ドメインバリアントは、配列番号２５～２７のいずれか１つに示されるＣＨ３ドメインのアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ヤギＩｇＧのＦｃ領域バリアントを含む１つまたは複数のポリペプチドを特徴とし、Ｆｃ領域バリアントは、配列番号２５～２７のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。
本開示は、アミノ酸置換がＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインのいずれか１つまたは両方になされた１つまたは複数のポリペプチドに及ぶ。いくつかの場合において、ＣＨ２ドメイン及び／またはＣＨ３ドメイン上の置換は、同一である。いくつかの場合において、ＣＨ２ドメイン及び／またはＣＨ３ドメイン上の置換は、同一ではない。いくつかの場合において、Ｆｃ領域は、エフェクター機能の増加もしくは減少及び／または産物の不均一性の改善をもたらす１つ以上の追加の置換を含む。
半減期を向上させる置換と組み合わせることができる他の置換
治療用ポリペプチド／タンパク質（例えば、モノクローナル抗体）の開発は、所望のポリペプチド／タンパク質を生成するために、一連の複雑な作業の調整を必要とする複雑なプロセスである。これらには、特異性、親和性、機能活性、人工細胞株における発現レベルの最適化、長期安定性、エフェクター機能の除去または向上、ならびに商業的に利用可能な製造法及び精製法の開発が含まれる。本開示は、上記の目標のいずれか１つ以上を促進する任意の追加の置換を包含する。
いくつかの実施形態において、プロテインＡクロマトグラフィーによる精製を容易にするために、置換を家畜動物の野生型ＩｇＧ Ｆｃ領域に導入して、プロテインＡへの結合を高める。そのような置換は、当業者に知られており、ＩｇＧの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個）の位置にあり得る。
いくつかの実施形態において、追加のアミノ酸置換は、親ポリペプチドまたは野生型ポリペプチドと比較して、ＦｃＲｎに対する結合親和性を変更するためになされる（例えば、ＦｃＲｎとの結合親和性を増加または減少させる）。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドは、家畜動物の抗体のヒンジ領域を含む。いくつかの実施形態において、修飾は、半減期を増加させるために、家畜動物の抗体のヒンジ領域に行うことができる。そのような修飾は、当業者に知られている。
ＩｇＧ Ｆｃバリアントを含むポリペプチド
本開示は、家畜動物における半減期を増加させることから利益を得ることができる任意のポリペプチドを包含する。半減期を増加させるために、これらのポリペプチドは、上に開示されるＦｃ領域バリアント（例えば、ＣＨ２領域、ＣＨ３領域、ＣＨ２＋ＣＨ３領域）を含むように設計される。
例示的なポリペプチドとしては、限定するものではないが、全抗体、ｓｃＦｖ、ナノボディ、受容体のリガンド結合部分、サイトカイン、成長因子、酵素、及びペプチドが挙げられる。例えば、上で開示されるＣＨ３ドメインバリアントは、ｓｃＦｖナノボディ、受容体のリガンド結合部分（例えば、ＩＬ－１３Ｒα１またはＩＬ－１３Ｒα２のリガンド結合部分）、サイトカイン、成長因子、酵素、またはペプチドに結合されてもよい。本明細書で使用される場合、「ナノボディ」、「ＶＨＨ」、「ＶＨＨ抗体断片」及び「単一ドメイン抗体」という用語は、ラクダ科動物で見られる種類の抗体の単一重鎖の可変ドメインを示すために、本明細書中で区別なく使用され、典型的に天然で軽鎖を欠いている。好適なナノボディは、当業者によく知られているが、その実例としては、ラクダ、ヒトコブラクダ、ラマ及びアルパカのナノボディが挙げられる。あるいは、上に開示されるＦｃ領域バリアントは、これらのポリペプチドに結合され得る。別の実施形態において、家畜動物に由来する抗体は、本明細書で開示されるＦｃ領域バリアントを含むように改変される。
いくつかの実施形態において、本開示のポリペプチドは、抗体ヒンジ領域を含む。ヒンジ領域は、抗原またはポリペプチドのリガンド結合ドメインとＦｃ領域バリアントとの間に配置され得る。いくつかの場合において、ヒンジ領域は、サイトカイン、成長因子、酵素、またはペプチドのＣ末端に結合され、ヒンジ領域は、Ｆｃ領域バリアントのＮ末端に結合される。好適なヒンジ領域配列は、当業者に知られている。
本開示のポリペプチドにおけるヒンジ領域は、使用される場合、天然ヒンジ領域のアミノ酸配列と比べて、０～６個（すなわち、０、１、２、３、４、５、または６個）のアミノ酸置換を含み得る。いくつかの場合において、本開示の組み換えタンパク質に使用されるヒンジ領域は、天然ヒンジ領域のアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である。
本開示の１つまたは複数のポリペプチドは、結合ドメインを含み得る。結合ドメインは、本明細書に記載される選択標的のタンパク質、サブユニット、ドメイン、モチーフ、及び／またはエピトープに特異的に結合することができる。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のポリペプチド（例えば、融合ポリペプチド）は、タンパク質を含み得、ここで、タンパク質は、本明細書に記載される治療用タンパク質である。いくつかの実施形態において、標的（例えば、結合ドメインの標的）または治療用タンパク質（例えば、融合ポリペプチド）は、以下からなる群から選択される：１７－ＩＡ、４－１ＢＢ、４Ｄｃ、６－ケト－ＰＧＦ１ａ、８－イソ－ＰＧＦ２ａ、８－オキソ－ｄＧ、Ａ１アデノシン受容体、Ａ３３、ＡＣＥ、ＡＣＥ－２、アクチビン、アクチビンＡ、アクチビンＡＢ、アクチビンＢ、アクチビンＣ、アクチビンＲＩＡ、アクチビンＲＩＡ ＡＬＫ－２、アクチビンＲＩＢ ＡＬＫ－４、アクチビンＲＩＩＡ、アクチビンＲＩＩＢ、ＡＤＡＭ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７／ＴＡＣＥ、ＡＤＡＭＳ、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＤＡＭＴＳ５、アドレシン、ａＦＧＦ、ＡＬＣＡＭ、ＡＬＫ、ＡＬＫ－１、ＡＬＫ－７、アルファ－１－抗トリプシン、アルファ－Ｖ／ベータ－１アンタゴニスト、ＡＮＧ、Ａｎｇ、ＡＰＡＦ－１、ＡＰＥ、ＡＰＪ、ＡＰＰ、ＡＰＲＩＬ、ＡＲ、ＩｇＥ、アンジオテンシン１型（ＡＴ１）受容体、アンジオテンシン２型（ＡＴ２）受容体、ＡＲＣ、ＡＲＴ、アルテミン、抗Ｉｄ、ＡＳＰＡＲＴＩＣ、心房性ナトリウム利尿因子、ａｖ／ｂ３インテグリン、Ａｘｌ、ｂ２Ｍ、Ｂ７－１、Ｂ７－２、Ｂ７－Ｈ、Ｂリンパ球刺激因子（ＢｌｙＳ）、ＢＡＣＥ、ＢＡＣＥ－１、Ｂａｄ、ＢＡＦＦ、ＢＡＦＦ－Ｒ、Ｂａｇ－１、ＢＡＫ、Ｂａｘ、ＢＣＡ－１、ＢＣＡＭ、Ｂｃｌ、ＢＣＭＡ、ＢＤＮＦ、ｂ－ＥＣＧＦ、ｂＦＧＦ、ＢＩＤ、Ｂｉｋ、ＢＩＭ、ＢＬＣ、ＢＬ－ＣＡＭ、ＢＬＫ、ＢＭＰ、ＢＭＰ－２ ＢＭＰ－２ａ、ＢＭＰ－３オステオゲニン、ＢＭＰ－４ ＢＭＰ－２ｂ、ＢＭＰ－５、ＢＭＰ－６ Ｖｇｒ－１、ＢＭＰ－７（ＯＰ－１）、ＢＭＰ－８（ＢＭＰ－８ａ、ＯＰ－２）、ＢＭＰＲ、ＢＭＰＲ－ＩＡ（ＡＬＫ－３）、ＢＭＰＲ－ＩＢ（ＡＬＫ－６）、ＢＲＫ－２、ＲＰＫ－１、ＢＭＰＲ－ＩＩ（ＢＲＫ－３）、ＢＭＰｓ、ｂ－ＮＧＦ、ＢＯＫ、ボンベシン、骨由来神経栄養因子、ＢＰＤＥ、ＢＰＤＥ－ＤＮＡ、ＢＴＣ、補体因子３（Ｃ３）、Ｃ３ａ、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ５ａ、Ｃ１０、ＣＡ１２５、ＣＡＤ－８、カルシトニン、ｃＡＭＰ、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、癌腫関連抗原、カテプシンＡ、カテプシンＢ、カテプシンＣ／ＤＰＰＩ、カテプシンＤ、カテプシンＥ、カテプシンＨ、カテプシンＬ、カテプシンＯ、カテプシンＳ、カテプシンＶ、カテプシンＸ／Ｚ／Ｐ、ＣＢＬ、ＣＣ１、ＣＣＫ２、ＣＣＬ、ＣＣＬ１、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＣＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＣＬ２８、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９／１０、ＣＣＲ、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＤ１、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ３２、ＣＤ３３（ｐ６７タンパク質）、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４９ａ、ＣＤ５２、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ６４、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ７４、ＣＤ８０（Ｂ７－１）、ＣＤ８９、ＣＤ９５、ＣＤ１２３、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１４８、ＣＤ１５２、ＣＤ１６４、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＴＲ、ｃＧＭＰ、ＣＩＮＣ、ボツリヌス菌毒素、ウェルシュ菌毒素、ＣＫｂ８－１、ＣＬＣ、ＣＭＶ、ＣＭＶ ＵＬ、ＣＮＴＦ、ＣＮＴＮ－１、ＣＯＸ、Ｃ－Ｒｅｔ、ＣＲＧ－２、ＣＴ－１、ＣＴＡＣＫ、ＣＴＧＦ、ＣＴＬＡ－４、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＬ、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＲ、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、サイトケラチン腫瘍関連抗原、ＤＡＮ、ＤＣＣ、ＤｃＲ３、ＤＣ－ＳＩＧＮ、崩壊促進因子、ｄｅｓ（１－３）－ＩＧＦ－Ｉ（脳ＩＧＦ－１）、Ｄｈｈ、ジゴキシン、ＤＮＡＭ－１、Ｄｎａｓｅ、Ｄｐｐ、ＤＰＰＩＶ／ＣＤ２６、Ｄｔｋ、ＥＣＡＤ、ＥＤＡ、ＥＤＡ－Ａ１、ＥＤＡ－Ａ２、ＥＤＡＲ、ＥＧＦ、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ－１）、ＥＭＡ、ＥＭＭＰＲＩＮ、ＥＮＡ、エンドセリン受容体、エンケファリナーゼ、ｅＮＯＳ、Ｅｏｔ、エオタキシン１、ＥｐＣＡＭ、エフリンＢ２／ＥｐｈＢ４、ＥＰＯ、ＥＲＣＣ、Ｅ－セレクチン、ＥＴ－１、第ＩＩａ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩｃ因子、第ＩＸ因子、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、Ｆａｓ、ＦｃＲ１、ＦＥＮ－１、フェリチン、ＦＧＦ、ＦＧＦ－１９、ＦＧＦ－２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ－８、ＦＧＦＲ、ＦＧＦＲ－３、フィブリン、ＦＬ、ＦＬＩＰ、Ｆｌｔ－３、Ｆｌｔ－４、卵胞刺激ホルモン、フラクタルカイン、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＦＺＤ１０、Ｇ２５０、Ｇａｓ６、ＧＣＰ－２、ＧＣＳＦ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧＤＦ、ＧＤＦ－１、ＧＤＦ－３（Ｖｇｒ－２）、ＧＤＦ－５（ＢＭＰ－１４、ＣＤＭＰ－１）、ＧＤＦ－６（ＢＭＰ－１３、ＣＤＭＰ－２）、ＧＤＦ－７（ＢＭＰ－１２、ＣＤＭＰ－３）、ＧＤＦ－８（ミオスタチン）、ＧＤＦ－９、ＧＤＦ－１５（ＭＩＣ－１）、ＧＤＮＦ、ＧＤＮＦ、ＧＦＡＰ、ＧＦＲａ－１、ＧＦＲ－アルファ１、ＧＦＲ－アルファ２、ＧＦＲ－アルファ３、ＧＩＴＲ、ＧＬＰ１、ＧＬＰ２、グルカゴン、Ｇｌｕｔ４、糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ（ＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ）、ＧＭ－ＣＳＦ、ｇｐ１３０、ｇｐ７２、ＧＲＯ、ＧｎＲＨ、成長ホルモン放出因子、ハプテン（ＮＰ－ｃａｐまたはＮＩＰ－ｃａｐ）、ＨＢ－ＥＧＦ、ＨＣＣ、ＨＣＭＶ ｇＢエンベロープ糖タンパク質、ＨＣＭＶ）ｇＨエンベロープ糖タンパク質、ＨＣＭＶ ＵＬ、造血成長因子（ＨＧＦ）、Ｈｅｐ Ｂ ｇｐ１２０、ヘパラナーゼ、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ（ＥｒｂＢ－２）、Ｈｅｒ３（ＥｒｂＢ－３）、Ｈｅｒ４（ＥｒｂＢ－４）、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）ｇＢ糖タンパク質、ＨＳＶ ｇＤ糖タンパク質、ＨＧＦＡ、高分子メラノーマ関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、ＨＩＶ ｇｐ１２０、ＨＩＶ ＩＩＩＢ ｇｐ１２０ Ｖ３ループ、ＨＬＡ、ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＭ１．２４、ＨＭＦＧ ＰＥＭ、ＨＲＧ、Ｈｒｋ、心臓ミオシン、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、成長ホルモン（ＧＨ）、ＨＶＥＭ、１－３０９、ＩＡＰ、ＩＣＡＭ、ＩＣＡＭ－１、ＩＣＡＭ－３、ＩＣＥ、ＩＣＯＳ、ＩＦＮｇ、Ｉｇ、ＩｇＡ受容体、ＩｇＥ、ＩＧＦ、ＩＧＦ結合タンパク質、ＩＧＦ－１Ｒ、ＩＧＦＢＰ、ＩＧＦ－Ｉ、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＬ、ＩＬ－１、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－２５、ＩＬ－３１、ＩＬ－３３、インターロイキン受容体（例えば、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－８Ｒ、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－１２Ｒ、ＩＬ－１３Ｒ、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－１７Ｒ、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ－２２Ｒ、ＩＬ－２３Ｒ、ＩＬ－２５Ｒ、ＩＬ－３１Ｒ、ＩＬ－３３Ｒ）、インターフェロン（ＩＮＦ）－アルファ、ＩＮＦ－ベータ、ＩＮＦ－ガンマ、インヒビン、ｉＮＯＳ、インスリンＡ鎖、インスリンＢ鎖、インスリン様成長因子１、インテグリンアルファ２、インテグリンアルファ３、インテグリンアルファ４、インテグリンアルファ４／ベータ１、インテグリンアルファ４／ベータ７、インテグリンアルファ５（アルファＶ）、インテグリンアルファ５／ベータ１、インテグリンアルファ５／ベータ３、インテグリンアルファ６、インテグリンベータ１、インテグリンベータ２、インターフェロンガンマ、ＩＰ－１０、Ｉ－ＴＡＣ、ＪＥ、カリクレイン２、カリクレイン５、カリクレイン６、カリクレイン１１、カリクレイン１２、カリクレイン１４、カリクレイン１５、カリクレインＬ１、カリクレインＬ２、カリクレインＬ３、カリクレインＬ４、ＫＣ、ＫＤＲ、ケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）、ラミニン５、ＬＡＭＰ、ＬＡＰ、ＬＡＰ（ＴＧＦ－１）、潜在型ＴＧＦ－１、潜在型ＴＧＦ－１ ｂｐ１、ＬＢＰ、ＬＤＧＦ、ＬＥＣＴ２、Ｌｅｆｔｙ、ルイスＹ抗原、ルイスＹ関連抗原、ＬＦＡ－１、ＬＦＡ－３、Ｌｆｏ、ＬＩＦ、ＬＩＧＨＴ、リポタンパク質、ＬＩＸ、ＬＫＮ、Ｌｐｔｎ、Ｌ－セレクチン、ＬＴ－ａ、ＬＴ－ｂ、ＬＴＢ４、ＬＴＢＰ－１、肺サーファクタント、黄体形成ホルモン、リンホトキシンベータ受容体、Ｍａｃ－１、ＭＡｄＣＡＭ、ＭＡＧ、ＭＡＰ２、ＭＡＲＣ、ＭＣＡＭ、ＭＣＡＭ、ＭＣＫ－２、ＭＣＰ、Ｍ－ＣＳＦ、ＭＤＣ、Ｍｅｒ、メタロプロテアーゼ、ＭＧＤＦ受容体、ＭＧＭＴ、ＭＨＣ（ＨＬＡ－ＤＲ）、ＭＩＦ、ＭＩＧ、ＭＩＰ、ＭＩＰ－１－アルファ、ＭＫ、ＭＭＡＣ１、ＭＭＰ、ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－１０、ＭＭＰ－１１、ＭＭＰ－１２、ＭＭＰ－１３、ＭＭＰ－１４、ＭＭＰ－１５、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－２４、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－７、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＰＩＦ、Ｍｐｏ、ＭＳＫ、ＭＳＰ、ムチン（Ｍｕｃ１）、ＭＵＣ１８、ミュラー管阻害因子、Ｍｕｇ、ＭｕＳＫ、ＮＡＩＰ、ＮＡＰ、ＮＡＶ１．７、ＮＣＡＤ、Ｎ－カドヘリン、ＮＣＡ９０、ＮＣＡＭ、ＮＣＡＭ、ネプリライシン、ニューロトロフィン－３、－４、または－６、ニュールツリン、神経成長因子（ＮＧＦ）、ＮＧＦＲ、ＮＧＦ－ベータ、ｎＮＯＳ、ＮＯ、ＮＯＳ、Ｎｐｎ、ＮＲＧ－３、ＮＴ、ＮＴＮ、ＯＢ、ＯＧＧ１、ＯＰＧ、ＯＰＮ、ＯＳＭ、ＯＸ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｒ、ｐ１５０、ｐ９５、ＰＡＤＰｒ、副甲状腺ホルモン、ＰＡＲＣ、ＰＡＲＰ、ＰＢＲ、ＰＢＳＦ、ＰＣＡＤ、Ｐ－カドヘリン、ＰＣＮＡ、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦ、ＰＤＫ－１、ＰＥＣＡＭ、ＰＥＭ、ＰＦ４、ＰＧＥ、ＰＧＦ、ＰＧＩ２、ＰＧＪ２、ＰＩＮ、ＰＬＡ２、胎盤性アルカリホスファターゼ（ＰＬＡＰ）、Ｐ１ＧＦ、ＰＬＰ、ＰＰ１４、プロインスリン、プロレラキシン、プロテインＣ、ＰＳ、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、ＰＴＥＮ、ＰＴＨｒｐ、Ｐｔｋ、ＰＴＮ、Ｒ５１、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫＬ、ＲＡＮＴＥＳ、ＲＡＮＴＥＳ、レラキシンＡ鎖、レラキシンＢ鎖、レニン、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）Ｆ、ＲＳＶ Ｆｇｐ、Ｒｅｔ、リウマトイド因子、ＲＬＩＰ７６、ＲＰＡ２、ＲＳＫ、Ｓ１００、ＳＣＦ／ＫＬ、ＳＤＦ－１、ＳＥＲＩＮＥ、血清アルブミン、ｓＦＲＰ－３、Ｓｈｈ、ＳＩＧＩＲＲ、ＳＫ－１、ＳＬＡＭ、ＳＬＰＩ、ＳＭＡＣ、ＳＭＤＦ、ＳＭＯＨ、ＳＯＤ、ＳＰＡＲＣ、Ｓｔａｔ、ＳＴＥＡＰ、ＳＴＥＡＰ－ＩＩ、ＴＡＣＥ、ＴＡＣＩ、ＴＡＧ－７２（腫瘍関連糖タンパク質－７２）、ＴＡＲＣ、ＴＣＡ－３、Ｔ細胞受容体（例えば、Ｔ細胞受容体アルファ／ベータ）、ＴｄＴ、ＴＥＣＫ、ＴＥＭ１、ＴＥＭ５、ＴＥＭ７、ＴＥＭ８、ＴＥＲＴ、精巣ＰＬＡＰ様アルカリホスファターゼ、ＴｆＲ、ＴＧＦ、ＴＧＦ－アルファ、ＴＧＦ－ベータ、ＴＧＦ－ベータＰａｎ特
異的、ＴＧＦ－ベータＲ１（ＡＬＫ－５）、ＴＧＦ－ベータＲ１１、ＴＧＦ－ベータＲＩＩｂ、ＴＧＦ－ベータＲＩＩＩ、ＴＧＦ－ベータ１、ＴＧＦ－ベータ２、ＴＧＦ－ベータ３、ＴＧＦ－ベータ４、ＴＧＦ－ベータ５、トロンビン、胸腺Ｃｋ－１、甲状腺刺激ホルモン、Ｔｉｅ、ＴＩＭＰ、ＴＩＱ、組織因子、ＴＭＥＦＦ２、Ｔｍｐｏ、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＮＦ、ＴＮＦ－アルファ、ＴＮＦ－アルファベータ、ＴＮＦ－ベータ２、ＴＮＦｃ、ＴＮＦ－ＲＩ、ＴＮＦ－ＲＩＩ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ（ＴＲＡＩＬ Ｒ１Ａｐｏ－２、ＤＲ４）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ（ＴＲＡＩＬ Ｒ２ＤＲ５、ＫＩＬＬＥＲ、ＴＲＩＣＫ－２Ａ、ＴＲＩＣＫ－Ｂ）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ（ＴＲＡＩＬ Ｒ３ＤｃＲ１、ＬＩＴ、ＴＲＩＤ）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ（ＴＲＡＩＬ Ｒ４ ＤｃＲ２、ＴＲＵＮＤＤ）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ（ＲＡＮＫ ＯＤＦ Ｒ、ＴＲＡＮＣＥ Ｒ）、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ（ＯＰＧ ＯＣＩＦ、ＴＲ１）、ＴＮＦＲＳＦ１２（ＴＷＥＡＫ Ｒ ＦＮ１４）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ（ＴＡＣＩ）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ（ＢＡＦＦ Ｒ）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＨＶＥＭ ＡＴＡＲ、ＨｖｅＡ、ＬＩＧＨＴ Ｒ、ＴＲ２）、ＴＮＦＲＳＦ１６（ＮＧＦＲ ｐ７５ＮＴＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１７（ＢＣＭＡ）、ＴＮＦＲＳＦ１８（ＧＩＴＲ ＡＩＴＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＲＯＹ ＴＡＪ、ＴＲＡＤＥ）、ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ（ＲＥＬＴ）、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ（ＴＮＦ Ｒ１ＣＤ１２０ａ、ｐ５５－６０）、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ（ＴＮＦ ＲＩＩ ＣＤ１２０ｂ、ｐ７５－８０）、ＴＮＦＲＳＦ２６（ＴＮＦＲＨ３）、ＴＮＦＲＳＦ３（ＬＴｂＲ ＴＮＦ ＲＩＩＩ、ＴＮＦＣ Ｒ）、ＴＮＦＲＳＦ４（ＯＸ４０ ＡＣＴ３５、ＴＸＧＰ１ Ｒ）、ＴＮＦＲＳＦ５（ＣＤ４０ ｐ５０）、ＴＮＦＲＳＦ６（Ｆａｓ Ａｐｏ－１、ＡＰＴ１、ＣＤ９５）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＤｃＲ３Ｍ６８、ＴＲ６）、ＴＮＦＲＳＦ７（ＣＤ２７）、ＴＮＦＲＳＦ８（ＣＤ３０）、ＴＮＦＲＳＦ９（４－１ＢＢ ＣＤ１３７、ＩＬＡ）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＤＲ６）、ＴＮＦＲＳＦ２２（ＤＣＴＲＡＩＬ Ｒ２ ＴＮＦＲＨ２）、ＴＮＦＲＳＴ２３（ＤＣＴＲＡＩＬ Ｒ１ＴＮＦＲＨ１）、ＴＮＦＲＳＦ２５（ＤＲ３Ａｐｏ－３、ＬＡＲＤ、ＴＲ－３、ＴＲＡＭＰ、ＷＳＬ－１）、ＴＮＦＳＦ１０（ＴＲＡＩＬ Ａｐｏ－２リガンド、ＴＬ２）、ＴＮＦＳＦ１１（ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫリガンドＯＤＦ、ＯＰＧリガンド）、ＴＮＦＳＦ１２（ＴＷＥＡＫ Ａｐｏ－３リガンド、ＤＲ３リガンド）、ＴＮＦＳＦ１３（ＡＰＲＩＬ ＴＡＬＬ２）、ＴＮＦＳＦ１３Ｂ（ＢＡＦＦ ＢＬＹＳ、ＴＡＬＬ１、ＴＨＡＮＫ、ＴＮＦＳＦ２０）、ＴＮＦＳＦ１４（ＬＩＧＨＴ ＨＶＥＭリガンド、ＬＴｇ）、ＴＮＦＳＦ１５（ＴＬ１Ａ／ＶＥＧＩ）、ＴＮＦＳＦ１８（ＧＩＴＲリガンドＡＩＴＲリガンド、ＴＬ６）、ＴＮＦＳＦ１Ａ（ＴＮＦ－ａ Ｃｏｎｅｃｔｉｎ、ＤＩＦ、ＴＮＦＳＦ２）、ＴＮＦＳＦ１Ｂ（ＴＮＦ－ｂ ＬＴａ、ＴＮＦＳＦ１）、ＴＮＦＳＦ３（ＬＴｂ ＴＮＦＣ、ｐ３３）、ＴＮＦＳＦ４（ＯＸ４０リガンドｇｐ３４、ＴＸＧＰ１）、ＴＮＦＳＦ５（ＣＤ４０リガンドＣＤ１５４、ｇｐ３９、ＨＩＧＭ１、ＩＭＤ３、ＴＲＡＰ）、ＴＮＦＳＦ６（ＦａｓリガンドＡｐｏ－１リガンド、ＡＰＴ１リガンド）、ＴＮＦＳＦ７（ＣＤ２７リガンドＣＤ７０）、ＴＮＦＳＦ８（ＣＤ３０リガンドＣＤ１５３）、ＴＮＦＳＦ９（４－１ＢＢリガンドＣＤ１３７リガンド）、ＴＰ－１、ｔ－ＰＡ、Ｔｐｏ、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＩＬ Ｒ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ１、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、ＴＲＡＮＣＥ、トランスフェリング受容体、ＴＲＦ、Ｔｒｋ（例えば、ＴｒｋＡ）、ＴＲＯＰ－２、ＴＳＧ、ＴＳＬＰ、腫瘍関連抗原ＣＡ１２５、ルイスＹ関連炭水化物を発現する腫瘍関連抗原、ＴＷＥＡＫ、ＴＸＢ２、Ｕｎｇ、ＵＰＡＲ、ｕＰＡＲ－１、ウロキナーゼ、ＶＣＡＭ、ＶＣＡＭ－１、ＶＥＣＡＤ、ＶＥ－カドヘリン、ＶＥ－カドヘリン－２、ＶＥＦＧＲ－１（ｆｉｔ－１）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、ＶＥＧＦＲ－３（ｆｌｔ－４）、ＶＥＧＩ、ＶＩＭ、ウイルス抗原、ＶＬＡ、ＶＬＡ－１、ＶＬＡ－４、ＶＮＲインテグリン、フォン・ヴィレブランド因子、ＷＩＦ－１、ＷＮＴ１、ＷＮＴ２、ＷＮＴ２Ｂ／１３、ＷＮＴ３、ＷＮＴ３Ａ、ＷＮＴ４、ＷＮＴ５Ａ、ＷＮＴ５Ｂ、ＷＮＴ６、ＷＮＴ７Ａ、ＷＮＴ７Ｂ、ＷＮＴ８Ａ、ＷＮＴ８Ｂ、ＷＮＴ９Ａ、ＷＮＴ９Ａ、ＷＮＴ９Ｂ、ＷＮＴ１０Ａ、ＷＮＴ１０Ｂ、ＷＮＴ１１、ＷＮＴ１６、ＸＣＬ１、ＸＣＬ２、ＸＣＲ１、ＸＣＲ１、ＸＥＤＡＲ、ＸＩＡＰ、ＸＰＤ、ならびにホルモン及び成長因子の受容体。
いくつかの実施形態において、結合ドメインは、家畜動物において、１つ以上の治療標的または抗原に特異的に結合し、例えば、限定するものではないが、ＡＣＥ、ＡＣＥ－２、アクチビン、アクチビンＡ、アクチビンＡＢ、アクチビンＢ、アクチビンＣ、アクチビンＲＩＡ、アクチビンＲＩＡ ＡＬＫ－２、アクチビンＲＩＢ ＡＬＫ－４、アクチビンＲＩＩＡ、アクチビンＲＩＩＢ、ＡＤＡＭ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７／ＴＡＣＥ、ＡＤＡＭＳ、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＮＧ、Ａｎｇ、アンジオテンシン１型（ＡＴ１）受容体、アンジオテンシン２型（ＡＴ２）受容体、心房性ナトリウム利尿因子、ａｖ／ｂ３インテグリン、ｂ－ＥＣＧＦ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３０、ＣＤ３４、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４７、ＣＯＸ、ＣＴＬＡ－４、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ－１）、ＥＰＯ、卵胞刺激ホルモン、ＧＤＦ－８（ミオスタチン）、ＧＬＰ１、ＧＬＰ２、ＧｎＲＨ、成長ホルモン放出因子、ＩｇＥ、ＩＬ、ＩＬ－１、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－２５、ＩＬ－３１、ＩＬ－３３、インターロイキン受容体（例えば、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－８Ｒ、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－１２Ｒ、ＩＬ－１３Ｒ、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－１７Ｒ、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ－２２Ｒ、ＩＬ－２３Ｒ、ＩＬ－２５Ｒ、ＩＬ－３１Ｒ、ＩＬ－３３Ｒ）、ＬＡＰ（ＴＧＦ－１）、潜在型ＴＧＦ－１、潜在型ＴＧＦ－１ ｂｐ１、ＬＦＡ－１、神経成長因子（ＮＧＦ）、ＮＧＦＲ、ＮＧＦ－ベータ、ＯＸ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｒ、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＴＧＦ、ＴＧＦ－アルファ、ＴＧＦ－ベータ、ＴＧＦ－ベータＰａｎ特異的、ＴＧＦ－ベータＲ１（ＡＬＫ－５）、ＴＧＦ－ベータＲ１１、ＴＧＦ－ベータＲＩＩｂ、ＴＧＦ－ベータＲＩＩＩ、ＴＧＦ－ベータ１、ＴＧＦ－ベータ２、ＴＧＦ－ベータ３、ＴＧＦ－ベータ４、ＴＧＦ－ベータ５、ＴＮＦ、ＴＮＦ－アルファ、ＴＮＦ－アルファベータ、ＴＮＦ－ベータ２、ＴＮＦｃ、ＴＮＦ－ＲＩ、ＴＮＦ－ＲＩＩ、ＴＮＦＲＳＦ１６（ＮＧＦＲ ｐ７５ＮＴＲ）、ＴＮＦＲＳＦ９（４－１ＢＢ ＣＤ１３７、ＩＬＡ）、ＶＥＦＧＲ－１（ｆｉｔ－１）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、及びＶＥＧＦＲ－３（ｆｌｔ－４）などが挙げられる。
いくつかの実施形態において、１つまたは複数のポリペプチドは、タンパク質を含むことができ、ここで、タンパク質は、治療用タンパク質、例えば、ＥＰＯ、ＣＴＬＡ４、ＬＦＡ３、ＶＥＧＦＲ１／ＶＥＧＦＲ３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４Ｒ、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、またはトロンボポエチン結合ペプチドである。いくつかの実施形態において、治療用タンパク質は、ＡＣＥ、ＡＣＥ－２、アクチビン、アクチビンＡ、アクチビンＡＢ、アクチビンＢ、アクチビンＣ、アクチビンＲＩＡ、アクチビンＲＩＡ ＡＬＫ－２、アクチビンＲＩＢ ＡＬＫ－４、アクチビンＲＩＩＡ、アクチビンＲＩＩＢ、ＡＤＡＭ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７／ＴＡＣＥ、ＡＤＡＭＳ、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＮＧ、Ａｎｇ、アンジオテンシン１型（ＡＴ１）受容体、アンジオテンシン２型（ＡＴ２）受容体、心房性ナトリウム利尿因子、ａｖ／ｂ３インテグリン、ｂ－ＥＣＧＦ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３０、ＣＤ３４、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４７、ＣＯＸ、ＣＴＬＡ－４、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ－１）、ＥＰＯ、卵胞刺激ホルモン、ＧＤＦ－８（ミオスタチン）、ＧＬＰ１、ＧＬＰ２、ＧｎＲＨ、成長ホルモン放出因子、ＩｇＥ、ＩＬ、ＩＬ－１、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－２５、ＩＬ－３１、ＩＬ－３３、インターロイキン受容体（例えば、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－８Ｒ、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－１２Ｒ、ＩＬ－１３Ｒ、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－１７Ｒ、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ－２２Ｒ、ＩＬ－２３Ｒ、ＩＬ－２５Ｒ、ＩＬ－３１Ｒ、ＩＬ－３３Ｒ）、ＬＡＰ（ＴＧＦ－１）、潜在型ＴＧＦ－１、潜在型ＴＧＦ－１ ｂｐ１、ＬＦＡ－１、神経成長因子（ＮＧＦ）、ＮＧＦＲ、ＮＧＦ－ベータ、ＯＸ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｒ、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＴＧＦ、ＴＧＦ－アルファ、ＴＧＦ－ベータ、ＴＧＦ－ベータＰａｎ特異的、ＴＧＦ－ベータＲ１（ＡＬＫ－５）、ＴＧＦ－ベータＲ１１、ＴＧＦ－ベータＲＩＩｂ、ＴＧＦ－ベータＲＩＩＩ、ＴＧＦ－ベータ１、ＴＧＦ－ベータ２、ＴＧＦ－ベータ３、ＴＧＦ－ベータ４、ＴＧＦ－ベータ５、ＴＮＦ、ＴＮＦ－アルファ、ＴＮＦ－アルファベータ、ＴＮＦ－ベータ２、ＴＮＦｃ、ＴＮＦ－ＲＩ、ＴＮＦ－ＲＩＩ、ＴＮＦＲＳＦ１６（ＮＧＦＲ ｐ７５ＮＴＲ）、ＴＮＦＲＳＦ９（４－１ＢＢ ＣＤ１３７、ＩＬＡ）、ＶＥＦＧＲ－１（ｆｉｔ－１）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、またはＶＥＧＦＲ－３（ｆｌｔ－４）である。
医薬組成物
本明細書に記載される１つまたは複数のポリペプチドの医薬組成物または無菌組成物を調製するために、１つまたは複数のポリペプチドは、薬学的に許容される担体または賦形剤とともに混合され得る。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９８４）参照）。
治療薬及び診断薬の製剤は、許容される担体、賦形剤、または安定剤と混合することによって、例えば、凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液または懸濁液の形態に調製され得る（例えば、Ｈａｒｄｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；Ａｖｉｓ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｗｅｉｎｅｒ ａｎｄ Ｋｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．参照）。いくつかの実施形態において、本発明の１つまたは複数のポリペプチドは、ｐＨ５～６の酢酸ナトリウム溶液で適切な濃度に希釈され、張性のためにＮａＣｌまたはスクロースが添加される。安定性を高めるために、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０などの追加の剤が添加されてもよい。
単独または別の薬剤と組み合わせて投与されるポリペプチド組成物の毒性及び治療有効性は、細胞培養または実験動物における標準的な製薬手順、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％にとって致死的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％において治療上有効な用量）を決定するための手順によって決定することができる。毒性と治療効果との間の用量の比が治療指数である（ＬＤ５０／ＥＤ５０）。特定の態様において、高い治療指数を呈する１つまたは複数のポリペプチドが望ましい。これらの細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータは、家畜動物に使用するための投与量の範囲を導き出すのに使用することができる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、毒性がほとんどまたは全くないＥＤ５０に入る循環濃度の範囲内である。投与量は、採用される剤形及び投与経路に応じて、この範囲内で変動し得る。
投与の様式は、様々であり得る。好適な投与経路には、経口、直腸、経粘膜、腸、非経口；筋肉内、皮下、皮内、髄内、髄腔内、直接脳（心）室内、静脈内、腹腔内、鼻腔内、眼内、吸入、吹送、局所、皮膚、経皮、または動脈内が含まれる。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のポリペプチドは、注射などの侵襲性経路によって投与することができる。更なる実施形態において、１つまたは複数のポリペプチドは、静脈内、皮下、筋肉内、動脈内、腫瘍内、または吸入、エアロゾル送達によって投与される。
本明細書で開示される医薬組成物は、注入によって投与されてもよい。医薬組成物を投与するよく知られているインプラント及びモジュールの形態の例としては、制御された速度で薬剤を分注するための埋め込み可能な微量注入ポンプを開示する米国特許第４，４８７，６０３号；正確な注入速度で薬物を送達するための薬剤注入ポンプを開示する米国特許第４，４４７，２３３号；連続的な薬物送達のための埋め込み可能な可変流量の注入装置を開示する米国特許第４，４４７，２２４号；マルチチャンバーコンパートメントを有する浸透性薬物送達系を開示する米国特許第４，４３９，１９６号が挙げられる。他の多くのそのようなインプラント、送達系、及びモジュールは、当業者によく知られている。
代替的にまたは追加的に、１つまたは複数のポリペプチドはまた、局所的に投与されてもよく、例えば、免疫病理学によって特徴付けられる関節炎の関節または病原体誘発病変に、多くの場合、デポーまたは持続放出性製剤で、抗体を直接注射することによりなされてもよい。更に、１つまたは複数のポリペプチドは、標的化された薬物送達系で投与されてもよく、例えば、免疫病理学によって特徴付けられる関節炎の関節または病原体誘発病変を標的とする、例えば、組織特異的抗体でコーティングされたリポソームで投与されてもよい。リポソームは、患部組織に対して標的化され、患部組織によって選択的に取り込まれる。
投与レジメンは、限定するものではないが、治療を受けるまたは受けている家畜動物の年齢、体重、及び体調、治療用抗体の血清または組織回転率、症状のレベル、１つまたは複数の治療用ポリペプチドの免疫原性、ならびに生物学的マトリックスにおける標的細胞のアクセス容易性を含む、いくつかの因子に依存する。いくつかの実施において投与レジメンは、標的とする疾患状態の改善をもたらすのに十分な１つまたは複数の治療用ポリペプチドを送達し、同時に望ましくない副作用を最小化するものである。したがって、送達される生物学的製剤の量は、１つまたは複数の特定の治療用ポリペプチド及び治療される状態の重症度に部分的に依存する。治療用抗体の適切な用量を選択する際のガイダンスは、入手可能である（例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂｉｏｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂ．Ｌｔｄ，Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，ＵＫ（１９９６）；Ｍｉｌｇｒｏｍ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１９６６－１９７３（１９９９）；Ｓｌａｍｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３－７９２（２００１）；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：６１３－６１９（２０００）；Ｇｈｏｓｈ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：２４－３２（２００３）；Ｌｉｐｓｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：１５９４－１６０２（２０００）参照）。
１つまたは複数のポリペプチドの適切な用量の決定は、例えば、当該技術分野において治療に影響することが知られているまたは推定されているパラメーターまたは因子を使用して、当業者によってなされる。一般に、投与は、至適用量よりもいくらか少ない量から開始され、その後、あらゆる負の副作用に対して望ましいまたは最適な効果が達成されるまで、少量ずつ増量される。重要な診断指標には、例えば、炎症の症状または産生される炎症性サイトカインのレベルが含まれる。
核酸、ベクター、宿主細胞、及び作製方法
本開示はまた、本明細書に記載される１つまたは複数のポリペプチドをコードする１つまたは複数の核酸、１つまたは複数の核酸を含む１つまたは複数のベクター、及び１つもしくは複数の核酸または１つもしくは複数のベクターを含む宿主細胞を包含する。
本明細書に記載される１つまたは複数のポリペプチドは、細菌細胞または真核細胞で産生され得る。いくつかのポリペプチド、例えば、Ｆａｂ’は、細菌細胞、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞で産生することができる。ポリペプチドはまた、形質転換細胞株（例えば、ＣＨＯ、２９３Ｅ、ＣＯＳ、２９３Ｔ、Ｈｅｌａ）などの真核細胞で産生することもできる。加えて、ポリペプチド（例えば、ｓｃＦｖ）は、Ｐｉｃｈｉａ（例えば、Ｐｏｗｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２５１：１２３－３５（２００１）参照）、Ｈａｎｓｅｕｌａ、またはＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓなどの酵母菌細胞で発現させることができる。目的の抗体を産生させるために、１つまたは複数のポリペプチドをコードする１つまたは複数のポリヌクレオチドを構築し、１つまたは複数の発現ベクターに導入し、次いで、好適な宿主細胞で発現させる。発現を改善するために、遺伝子のヌクレオチド配列は、アミノ酸配列を変えることなく（または最小限の変更、例えば、重鎖または軽鎖のＣ末端残基の除去）、再コード化することができる。再コード化の対象となり得る領域には、翻訳開始、コドン使用頻度、及び意図されないｍＲＮＡスプライシング候補に関連するものが含まれる。本明細書に記載されるＦｃ領域バリアントをコードするポリヌクレオチドは、当業者には容易に想定されるであろう。
標準的な分子生物学技術を使用して、組み換え発現ベクター（複数可）を調製し、宿主細胞をトランスフェクトし、形質転換体を選択し、宿主細胞を培養し、ポリペプチド（例えば、抗体）を回収することができる。
１つまたは複数のポリペプチドが細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）で発現される場合、発現ベクターは、細菌細胞におけるベクターの増幅を可能にする特徴を有していなければならない。更に、ＪＭ１０９、ＤＨ５α、ＨＢ１０１、またはＸＬ１－ＢｌｕｅなどのＥ．ｃｏｌｉが宿主として使用される場合、ベクターは、Ｅ．ｃｏｌｉでの十分な発現を可能にし得るプロモーター、例えば、ｌａｃＺプロモーター（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，３４１：５４４－５４６（１９８９）、ａｒａＢプロモーター（Ｂｅｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４０：１０４１－１０４３（１９８８））、またはＴ７プロモーターを有している必要がある。そのようなベクターの例としては、例えば、Ｍ１３ベクター、ｐＵＣシリーズベクター、ｐＢＲ３２２、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ、ｐＣＲ－Ｓｃｒｉｐｔ、ｐＧＥＸ－５Ｘ－１（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、「ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓ ｓｙｓｔｅｍ」（ＱＩＡＧＥＮ）、ｐＥＧＦＰ、及びｐＥＴ（この発現ベクターが使用される場合は、宿主は、好ましくは、Ｔ７ ＲＮＡポリメラーゼを発現するＢＬ２１である）が挙げられる。発現ベクターは、抗体分泌のためのシグナル配列を含有し得る。Ｅ．ｃｏｌｉのペリプラズムへの産生の場合、ｐｅｌＢシグナル配列（Ｌｅｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，１６９：４３７９（１９８７））が抗体分泌のためのシグナル配列として使用され得る。細菌発現の場合、塩化カルシウム法またはエレクトロポレーション法を使用して、細菌細胞に発現ベクターを導入することができる。
１つまたは複数のポリペプチドがＣＨＯ、ＣＯＳ、及びＮＩＨ３Ｔ３細胞などの動物細胞で発現される場合、発現ベクターは、これらの細胞での発現に必要なプロモーター、例えば、ＳＶ４０プロモーター（Ｍｕｌｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２７７：１０８（１９７９））（例えば、初期シミアンウイルス４０プロモーター）、ＭＭＬＶ－ＬＴＲプロモーター、ＥＦ１αプロモーター（Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１８：５３２２（１９９０））、またはＣＭＶプロモーター（例えば、ヒトサイトメガロウイルス前初期プロモーター）を含む。Ｆｃ領域バリアントをコードする核酸配列に加えて、組み換え発現ベクターは、宿主細胞でベクターの複製を調節する配列（例えば、複製起点）及び選択マーカー遺伝子などの追加の配列を保有し得る。選択マーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，６３４，６６５号及び同第５，１７９，０１７号）。例えば、典型的に、選択マーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞に、Ｇ４１８、ハイグロマイシン、またはメトトレキサートなどの薬物に対する耐性を付与する。選択マーカーを含むベクターの例としては、ｐＭＡＭ、ｐＤＲ２、ｐＢＫ－ＲＳＶ、ｐＢＫ－ＣＭＶ、ｐＯＰＲＳＶ、及びｐＯＰ１３が挙げられる。
いくつかの実施形態において、１つまたは複数のポリペプチドは、哺乳動物細胞で産生される。１つまたは複数のポリペプチドを発現させるための例示的な哺乳動物宿主細胞としては、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（Ｕｒｌａｕｂ ａｎｄ Ｃｈａｓｉｎ（１９８０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６－４２２０に記載されているｄｈｆｒ－ＣＨＯ細胞を含み、例えば、Ｋａｕｆｍａｎ ａｎｄ Ｓｈａｒｐ（１９８２）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１６２１に記載されているようにＤＨＦＲ選択マーカーとともに使用される）、ヒト胎児腎臓２９３細胞（例えば、２９３、２９３Ｅ、２９３Ｔ）、ＣＯＳ細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、リンパ球細胞株、例えば、ＮＳ０骨髄腫細胞及びＳＰ２細胞、及びトランスジェニック動物、例えば、トランスジェニック哺乳動物に由来する細胞が挙げられる。例えば、細胞は、乳腺上皮細胞である。
抗体発現のための例示的な系において、抗体の抗体重鎖及び抗体軽鎖の両方をコードする組み換え発現ベクターがリン酸カルシウムを介したトランスフェクションによってｄｈｆｒ－ＣＨＯ細胞に導入される。組み換え発現ベクター内において、抗体の重鎖及び軽鎖遺伝子は、高い遺伝子転写レベルを駆動するために、エンハンサー／プロモーター調節エレメント（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、アデノウイルスなどに由来するもの、例えば、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントまたはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメント）に作動可能にそれぞれ連結される。また、組み換え発現ベクターは、ＤＨＦＲ遺伝子を保有しており、これにより、ベクターをトランスフェクトしたＣＨＯ細胞を、メトトレキサート選択／増幅を使用して選択することが可能となる。選択された形質転換宿主細胞は、抗体の重鎖及び軽鎖が発現するように培養され、培養培地から抗体が回収される。
治療方法
本明細書で開示される１つまたは複数のポリペプチドは、任意の疾患または障害の治療または予防を、それを必要とする家畜動物において行うために使用することができる。本発明は、繰り返し投与が必要な慢性状態の治療に特に有用である。タンパク質治療薬の半減期が増加するため、投与頻度の減少及び／または用量レベルの減少が可能となり得る。
いくつかの実施形態において、治療または予防される疾患、障害、状態または症状は、アレルギー性疾患、慢性疼痛、急性疼痛、炎症性疾患、自己免疫疾患、内分泌疾患、胃腸疾患、骨格／筋骨格疾患、心血管疾患、神経系疾患、腎臓疾患、代謝疾患、免疫疾患、遺伝／遺伝性疾患、生殖機能関連障害、感染症またはがんである。ある特定の実施形態において、治療または予防される疾患または障害は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、食物アレルギー、骨関節痛、周術期の疼痛、歯痛、がん疼痛、関節炎、貧血、肥満、または糖尿病である。
抗体は、疾患の治療または予防だけでなく、正常な生物学的機能を調節するため、例えば、生殖能力または行動を管理するためにも使用され得る。
診断
本明細書で開示される１つまたは複数のポリペプチドはまた、様々な診断用途、例えば、家畜動物が任意の特定の疾患または障害を有するかどうかを決定するために使用することができる。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のポリペプチドは、結合ドメインを含み得る。結合ドメインは、本明細書に記載されるタンパク質、サブユニット、ドメイン、モチーフ、及び／またはエピトープ（例えば、がん細胞のマーカー）に特異的に結合することができる。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のポリペプチドは、標識基を更に含む。一般に、標識基は、それらが検出されるアッセイに応じて、様々な種類に分けられる：ａ）放射性同位体または重元素同位体であり得る同位体標識；ｂ）磁気標識（例えば、磁気粒子）；ｃ）酸素還元活性部分；ｄ）光学色素；酵素基（例えば、セイヨウワサビペルオキシダーゼ、β－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）；ｅ）ビオチン化基；及びｆ）二次レポーターによって認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパーペア配列、二次抗体用の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグなど）。いくつかの実施形態において、標識基は、潜在的な立体障害を減少させるために、様々な長さのスペーサーアームを介して抗体に結合される。タンパク質を標識するための様々な方法が当該技術分野において知られており、本発明を実施する際に使用され得る。
いくつかの実施形態において、標識基は、プローブ、色素（例えば、蛍光色素）、または放射性同位体（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、２２Ｎａ、３６Ｃｌ、３５Ｓ、３３Ｐ、または１２５Ｉ）である。
特定の標識にはまた、光学色素も含まれ、限定するものではないが、発色団、蛍光体及びフルオロフォアが含まれ、後者は、多くの場合、特異的である。フルオロフォアは、「小分子」の蛍光体、またはタンパク質性の蛍光体のいずれかであり得る。
蛍光標識は、その固有の蛍光特性を介して検出され得る任意の分子であり得る。好適な蛍光標識には、フルオレセイン、ローダミン、テトラメチルローダミン、エオシン、エリスロシン、クマリン、メチル－クマリン、ピレン、Ｍａｌａｃｉｔｅ ｇｒｅｅｎ、スチルベン、Ｌｕｃｉｆｅｒ Ｙｅｌｌｏｗ、Ｃａｓｃａｄｅ ＢｌｕｅＪ、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ、ＩＡＥＤＡＮＳ、ＥＤＡＮＳ、ＢＯＤＩＰＹ ＦＬ、ＬＣ Ｒｅｄ ６４０、Ｃｙ ５、Ｃｙ ５．５、ＬＣ Ｒｅｄ ７０５、Ｏｒｅｇｏｎ ｇｒｅｅｎ、Ａｌｅｘａ－Ｆｌｕｏｒ色素（Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ３５０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４３０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５４６、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５６８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５９４、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６３３、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６６０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６８０）、Ｃａｓｃａｄｅ Ｂｌｕｅ、Ｃａｓｃａｄｅ Ｙｅｌｌｏｗ及びＲ－フィコエリトリン（ＰＥ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）、ＦＩＴＣ、ローダミン、及びＴｅｘａｓ Ｒｅｄ（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．）、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，Ｐａ．）が含まれるが、これらに限定されない。好適な光学色素は、フルオロフォアを含め、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｂｙ Ｒｉｃｈａｒｄ Ｐ．Ｈａｕｇｌａｎｄに記載されており、その全体が参照により本明細書に援用される。
好適なタンパク質性蛍光標識にはまた、緑色蛍光タンパク質（Ｒｅｎｉｌｌａ、Ｐｔｉｌｏｓａｒｃｕｓ、またはＡｅｑｕｏｒｅａ種のＧＦＰを含む）（Ｃｈａｌｆｉｅ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６３：８０２－８０５）、ＥＧＦＰ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｕ５５７６２）、青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ、Ｑｕａｎｔｕｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．１８０１ ｄｅ Ｍａｉｓｏｎｎｅｕｖｅ Ｂｌｖｄ．Ｗｅｓｔ，８ｔｈ Ｆｌｏｏｒ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃａｎａｄａ Ｈ３Ｈ１Ｊ９；Ｓｔａｕｂｅｒ，１９９８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４：４６２－４７１；Ｈｅｉｍ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．６：１７８－１８２）、改良型黄色蛍光タンパク質（ＥＹＦＰ，Ｃｌｏｎｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、ルシフェラーゼ（Ｉｃｈｉｋｉ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：５４０８－５４１７）、βガラクトシダーゼ（Ｎｏｌａｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２６０３－２６０７）及びＲｅｎｉｌｌａ（ＷＯ９２／１５６７３、ＷＯ９５／０７４６３、ＷＯ９８／１４６０５、ＷＯ９８／２６２７７、ＷＯ９９／４９０１９、米国特許第５，２９２，６５８号、同第５，４１８，１５５号、同第５，６８３，８８８号、同第５，７４１，６６８号、同第５，７７７，０７９号、同第５，８０４，３８７号、同第５，８７４，３０４号、同第５，８７６，９９５号、同第５，９２５，５５８号）が含まれるが、これらに限定されない。本段落中において上で引用される参考文献は全て、その全体が参照により本明細書に明示的に援用される。
アッセイ
ＦｃγＲＩ及びＦｃγＲＩＩＩ結合：
ＦｃγＲＩ及びＦｃγＲＩＩＩへの結合は、ＡＤＣＣを媒介する抗体の能力の指標である。抗体のこの特性を評価するために、ＦｃγＲＩ及びＦｃγＲＩＩＩに対する抗体の結合を測定するアッセイが当該技術分野において知られている方法を使用して実施され得る。
Ｃ１ｑ結合：
補体の第１成分であるＣ１ｑへの結合は、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を媒介する抗体の能力の指標である。抗体のこの特性を評価するために、Ｃ１ｑに対する抗体の結合を測定するアッセイが当該技術分野において知られている方法を使用して実施され得る。
半減期：
抗体の半減期を測定する方法は、当該技術分野においてよく知られている。例えば、Ｂｏｏｔｈ ｅｔ ａｌ．，ＭＡｂｓ，１０（７）：１０９８－１１１０（２０１８）を参照されたい。一例として、抗体の半減期は、Ｆｃの由来である種（標的種）に抗体を注射し、ある一定期間にわたって血清中の抗体レベルを測定することによって測定することができる。あるいは、マウスＦｃＲｎアルファ鎖が欠損しており、標的種のＦｃＲｎアルファ導入遺伝子を発現するトランスジェニックマウスモデルを使用することもできる。標的種のＦｃＲｎアルファ鎖は、マウスβ２－ミクログロブリンタンパク質と対合することができるか、またはマウスβ２－ミクログロブリン遺伝子を標的種のβ２－ミクログロブリン遺伝子に置換することができ、これにより、天然ＦｃＲｎアルファ鎖－β２－ミクログロブリンヘテロ二量体タンパク質を形成することができる。
実施例１：選択された位置でのＮＮＫ飽和変異導入ライブラリーの生成及び個々のバリアントの解析
ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ及びヤギＩｇＧ（配列番号１～２７に示す）のＣＨ２及びＣＨ３ドメインの野生型（ｗｔ）配列を合成し、ＮＮＫ変異導入の鋳型として使用した。ＮＮＫ飽和変異導入法は、所望の位置に２０個の可能な全てのアミノ酸を生成するのに効果的な戦略である（Ｈｏｇｒｅｆｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．３３：１１５８－１１６５［２００２］；その内容はその全体が参照により本明細書に援用される）。位置２５０、２５２、２５４、２５６、２８６、３０９、３１１、４２６、４２８、４３４及び４３６（ＥＵナンバリング）の個々のＮＮＫライブラリーを生成する。特定位置のＮＮＫ（Ｎ＝Ａ／Ｃ／Ｇ／Ｔ、Ｋ＝Ｇ／Ｔ）プライマーをＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ Ｓｉｔｅ－Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（Ａｇｉｌｅｎｔ）で使用する。ＰＣＲ産物をＧｅｎＳｃｒｉｐｔ ＦＡＳＥＢＡプラスミドにサブクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉに形質転換し、バリアントの存在について配列を確認する。ＣＨ２ドメインの下流は、アルブミンに対してｐＭの親和性を有するＳＡＳＡ（血清アルブミンに対する単一ドメイン抗体）タグである（Ｚｈａｎｇ，Ｊ．；Ｗｕ，Ｓ．；Ｌｉｕ，Ｊ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｓｙｓｔｅｍｓ ｆｏｒ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．特許出願番号：ＵＳ２０１３／０１２９７２７Ａ１；その内容はその全体が参照により本明細書に援用される）。ＳＡＳＡ抗体は、以下に記載されるセンサーチップ表面へのＦｃの捕捉を可能にするものである。ＰｅｌＢ（ペクチン酸リアーゼＢ）シグナルペプチドは、Ｎ末端にあり、Ｆｃの培地への分泌を促進する。ＣＨ２－ＣＨ３タンパク質の発現は、Ｌａｃプロモーターによって制御する。馴化培地からの上清を、ｐＨ６．０における標的の家畜動物／種のＦｃＲｎへのバリアントの結合について、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して解析する。
各ライブラリーから得た複数の個々の形質転換体の上清を、以下に記載されるようにＢｉａｃｏｒｅ法を使用して、ｐＨ６．０で家畜動物／種ＦｃＲｎへの結合についてアッセイする。
Ｂｉａｃｏｒｅ ８Ｋを使用したＳＰＲ解析では、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）をＣＭ５センサーチップに固定する。フローセル１及び２のセンサーチップ表面を、新たに混合した５０ｍｍｏｌ／ＬのＮ－ヒドロキシスクシンイミド及び２００ｍｍｏｌ／Ｌの１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩によって、４２０秒（１０μＬ／分）かけて活性化させる。その後、１０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）で希釈したＢＳＡをフローセル２に注入してコンジュゲーションを達成し、フローセル１をブランクとする。アミンカップリング反応後、チップ表面上に残存する活性カップリング部位を、１ｍＭエタノールアミン塩酸塩を４２０秒注入してブロックする。結合実験のためのランニング緩衝液は、ＨＢＳ－ＥＰ（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５００ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、ｐＨ５．５）であり、２５℃で実施する。バリアントの上清をチップ表面に注入し、固定したＢＳＡにＳＡＳＡタグを介して６０秒かけて捕捉させる。家畜動物／種のＦｃＲｎを２００ｎＭで１２０秒間注入し、解離をランニング緩衝液で１２０秒間行う。ＢＳＡの固定化フェーズの流量は、１０μｌ／分であり、会合及び解離フェーズの流量は、３０μｌ／分である。データは全て、Ｂｉａｃｏｒｅ ８Ｋ評価ソフトウェアバージョン１．１を使用して処理する。その結果は、試験したＩｇＧのＦｃバリアントが、同じ家畜動物／種の野生型ＩｇＧのＦｃと比較した場合、ｐＨ６．０において、対応する家畜動物／種のＦｃＲｎに対して増加した結合親和性を有することを示すであろう。
実施例２：ＩｇＧ Ｆｃのスキャニング変異導入
ファージディスプレイライブラリーアプローチを使用して、ｐＨ６．０において、同じ家畜動物または種のＦｃＲｎに対して増加した親和性を有するＩｇＧ１ Ｆｃバリアントを同定する。アミノ酸変異（置換）を１つ以上の位置に有する複数のバリアントを生成するために、ＩｇＧのＦｃ（配列番号１～２７のＣＨ２＋ＣＨ３ドメインを含む）をＴｗｉｓｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅによって合成する。変異させる位置のそれぞれに、８つの可能なアミノ酸の置換を行う。これらのアミノ酸は、アルギニン及びリシン（正電荷側鎖）、アスパラギン酸及びグルタミン酸（負電荷側鎖）、トレオニン及びグルタミン（極性非電荷側鎖）、ならびにロイシン及びバリン（疎水性側鎖）である。Ｆｃ分子ごとに平均２つのバリアントを有するようにＦｃ ＤＮＡライブラリーを設計する。修飾の組み合わせ数は、式：ｎＣｒ＝ｎ！／ｒ！＊（ｎ－ｒ）！（式中、ｎは、部位数を表し、ｒは、分子あたりのバリアント数を表す）を使用して算出することができる。所望の部位特異的変異を含むＦｃバリアントを、変異原性オリゴヌクレオチドとしてＴｗｉｓｔのシリコンベースプラットフォームでプリントする。
次いで、アセンブリＰＣＲを使用して、オリゴヌクレオチドを連結し、全長Ｆｃ遺伝子断片プールを生成する。次いで、連結したＦｃ遺伝子断片プールを、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｓｉｇｎ Ｌａｂｓ社のｐＡＤＬ－２２ｃファージミドベクターのＳｆｉ切断部位にクローニングする。クローニングしたＤＮＡライブラリーをＴＧ１ Ｅ．ｃｏｌｉエレクトロコンピテントセルに形質転換し、典型的に＞１０１０バリアントの実験的多様性を創出する。次いで、ファージミドで形質転換したＥ．ｃｏｌｉ細胞をＭ１３Ｋ０７ヘルパーファージとコトランスフェクトして、タンパク質に基づくパニングに使用するファージプールを作製する。ライブラリーを２０ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０及び３％ミルク中に再懸濁する。
ライブラリーの品質は、９６個のランダムファージクローンを選択することによって決定し、サンガー法によって配列決定を行う。
最初のファージ選択では、プロテインＡ結合を失ったあらゆるＦｃバリアントを除去するために、プロテインＡ捕捉ステップを使用する。この選択のために、ファージライブラリーをプロテインＡビーズ上に捕捉し、ＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄する。ファージを０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．７）で溶出し、ｐＨを１Ｍ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）で直ちに中和する。中和したファージをポリエチレングリコール／ＮａＣｌで沈殿させ、遠心分離にかける。ペレット化したファージを２０ｍＭ ＭＥＳ（ｐＨ６．０）、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、３％ミルク中に再懸濁する。
次のファージ選択は、Ｂｏｒｒｏｋ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｊ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２９０：４２８２（その内容は、その全体が参照により本明細書に援用される）に記載されているプロトコルに基づく。簡潔に述べると、Ｎｕｎｃ ９６マルチウェルプレートをニュートロアビジンでコーティングし、次いで、５％ウシ血清アルブミンＰＢＳ（ｐＨ７．４）でブロッキングする。標的家畜動物または種のビオチン化したＦｃＲｎをＰＢＳ（ｐＨ６．０）中、約０．３０μｇ／ｍｌの濃度でウェルに固定する。ＰＢＳ（ｐＨ６．０）中のファージライブラリーを、固定化したＦｃＲｎとインキュベートし、次いで、ＰＢＳ（ｐＨ６．０）、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、０．３Ｍ ＮａＣｌで洗浄する。ＰＢＳ（ｐＨ７．４）を用いてファージを３７℃で３０分間インキュベートすることによって溶出する。溶出したファージを、ｐＨ７．４で、約０．３０μｇ／ｍｌの同じ家畜動物または種のＦｃＲｎで枯渇させる。結合していないファージをＴＧ１細胞中で増殖させる。
次いで、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＭｉＳｅｑを使用する次世代シーケンシングによって、クローンの配列決定を行う。
ユニークなバリアントをＩｇＧに再フォーマットし、ミニプレッププラスミドＤＮＡを、ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅ２９３トランスフェクション試薬を用いて、Ｅｘｐｉ２９３細胞にトランスフェクトすることができる。次いで、馴化培地からＩｇバリアントをプロテインＡクロマトグラフィーで精製し、４３ｍＭクエン酸ナトリウム、１３０ｍＭ炭酸水素ナトリウム、ｐＨ６．０に調整することができる。
対応する家畜動物／種のＦｃＲｎに対するＩｇＧバリアントの親和性を決定するために、Ｃａｒｔｅｒｒａ機器を使用して結合カイネティクスを決定することができる。このアプローチでは、抗体（約５μｇ／ｍｌ）を、典型的には、ＥＤＣ／ＮＨＳ活性化、続くエタノールアミンＨＣｌでのクエンチによって、ＨＣ３０Ｍセンサーチップにアミンカップリングさせる。
異なる濃度（３３３ｎＭ、１１１ｎＭ、３７ｎＭ、１２．３ｎＭ、４．１ｎＭ、１．３７ｎＭ、０．４５ｎＭ）のＦｃＲｎを、ＨＢＳＴＥ（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ－２０）、０．５％ウシ血清アルブミン、ｐＨ６．０中でセンサーチップ上に流して、ｐＨ６．０におけるカイネティクスを決定する。ＨＢＳＴＥ緩衝液のｐＨを７．４に調整する以外はこれと同じ戦略を使用して、ｐＨ７．４におけるＦｃＲｎへの結合カイネティクスを決定することができる。
同じ家畜動物／種の対応するＦｃＲＮに対するＩｇＧ Ｆｃバリアントの結合を増加させるアミノ酸置換の一覧を以下の表６に提供する：
実施例３：ＩｇＧ ＦｃバリアントのＦｃＲｎに対する結合カイネティクス
ブタ、ヒツジ、ウシ及びウマＩｇＧについて、Ｆｃバリアントのセットを発現させ、精製した。各ＩｇＧの重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、Ｇｅａｒｉｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１６，Ｊ Ｖｅｔ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ，３０：１１２９）によって先に記載されている。様々な種のＩｇＧに使用した重鎖及び軽鎖定常ドメインは、以下の通りであった：ブタの場合、ＩｇＧ１ａ（Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＡＡ５２２１９．１配列番号１）及びブタカッパ鎖（Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＨＢ１７９９０．１）であり、ヒツジの場合、ＩｇＧ１（Ｇｅｎｂａｎｋ Ｘ６９７９７、配列番号２２）及びヒツジカッパ鎖（Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＵ４５０９４．１）であり、ウシの場合、ＩｇＧ１（Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＢＥ６８６１９．１、配列番号１２）及びウシカッパ鎖（Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＥＭ４５００４．１）であり、ウマの場合、ＩｇＧ１（Ｇｅｎｂａｎｋ ＣＡＣ４４７６０．１、配列番号１５）及びウマカッパ鎖（Ｇｅｎｂａｎｋ ＣＡＡ５３２８４．１）であった。各種のＦｃにおいて、位置２５２、２８６、３０９、３１１、４２６、４２８、４３４、及び４３６におけるバリアントを作製した（図１）（ＥＵナンバリング）。各バリアント及び野生型について合成したＤＮＡをｐｃＤＮＡ３．４発現ベクター（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にサブクローニングし、ＨＥＫ２９３細胞で発現させた。各バリアント及び野生型の馴化培地を表７に示される樹脂で精製し、精製した抗体をＰＢＳ（ｐＨ７．２）で調整した。樹脂は、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから購入したＲｏｂｏＣｏｌｕｍｎ Ｅｓｈｍｕｎｏ Ａ以外は全て、Ｃｙｔｉｖａから入手した。
抗体の純度は、クマシーブルーで染色したＳＤＳ／ＰＡＧＥゲルのスキャニングデンシトメトリーによって決定したところ、それぞれ＞９０％であった（図２Ａ～２Ｊ、３Ａ～３Ｊ、４Ａ～４Ｊ、５Ａ～５Ｊ）。
ＦｃＲｎ複合体は、大サブユニットｐ５１及びβ－２－ミクログロブリンから構成される。Ａｖｉタグ配列（配列番号２８、ＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥ）及び８Ｘ Ｈｉｓタグを大サブユニットｐ５１の細胞外ドメインのＣ末端（ブタ：Ｇｅｎｂａｎｋ Ｅ９ＬＫ２４；ヒツジ：Ｇｅｎｂａｎｋ Ｑ８ＨＺＶ２；ウシ：Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＡＦ６０９５６．１；ウマ：Ｇｅｎｂａｎｋ ＸＰ＿０２３５０５９０８．１）に融合し、ｐｃＤＮＡ３．４発現ベクター（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にサブクローニングした。Ｆｌａｇタグ（配列番号２９、ＤＹＫＤＤＤＤＫ）をβ－２－ミクログロブリンのＣ末端（ブタ：Ｇｅｎｂａｎｋ Ｌ１３８５４．１；ヒツジ：Ｇｅｎｂａｎｋ ＡＹ５４９９６２．１；ウシ：Ｇｅｎｂａｎｋ Ｘ６９０８４．１；ウマ：Ｇｅｎｂａｎｋ Ｘ６９０８３．１）に融合し、ｐｃＤＮＡ３．４発現ベクターにサブクローニングした。それぞれの種について、大サブユニットｐ５１発現ベクターをβ－２－ミクログロブリンとともにＨＥＫ２９３細胞にコトランスフェクトした。ＦｃＲｎ複合体を、ＨｉｓＴｒａｐファーストフロークロマトグラフィー（Ｃｙｔｉｖａ）を使用して馴化培地から精製し、次いで、タンパク質をＰＢＳ、ｐＨ７．２に調整した。タンパク質を、ＳＤＳ／ＰＡＧＥ及びＴＳＫｇｅｌ Ｇ３０００ＳＷｘｌカラムを使用する分析的ＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）によって解析した。タンパク質の純度は、ＳＤＳ／ＰＡＧＥによれば、＞９５％であり、ＦｃＲｎ複合体の＞９５％は、分析的ＳＥＣによれば、大サブユニットｐ５１とβ－２－ミクログロブリンのヘテロ二量体であった。
ＦｃＲｎ結合実験は、Ｂｉａｃｏｒｅ ８Ｋ＋システムで２５℃で実施した。Ｈｉｓタグに対するポリクローナル抗体を、Ｈｉｓ Ｃａｐｔｕｒｅ Ｋｉｔ（Ｃｙｔｉｖａ、Ｃａｔ２８９９５０５６）を製造元の説明書に従って使用して、ＣＭ５バイオセンサーチップにカップリングした。様々な種のＨｉｓタグ付ＦｃＲｎを抗Ｈｉｓポリクローナルバイオセンサーチップ上におよそ１００ＲＵが捕捉されるまで１０μｌ／分で流した。ブタ、ウシ、ウマ及びヒツジＦｃＲｎタンパク質のバイオセンサーチップでは、様々なブタ、ヒツジ、ウシ及びウマのＩｇＧバリアント及び野生型がアナライトであった。５つの濃度のＩｇＧを３０μｌ／分で９０秒間注入し、３０秒の解離時間とした。各種の野生型ＩｇＧについて、ＩｇＧの濃度は、６．２ｎＭ、１８ｎＭ、５５ｎＭ、１６７ｎＭ、及び５００ｎＭであった。各種のバリアントＩｇＧについて、ＩｇＧの濃度は、１．２ｎＭ、３．７ｎＭ、１１ｎＭ、３３ｎＭ、及び１００ｎＭであった。ランニング緩衝液は、ｐＨ５．９に調節した１Ｘ ＰＢＳ－Ｐ＋（Ｃｙｔｉｖａ、Ｃａｔ＃２８９９５０８４）であった。表面は、１０ｍＭグリシン（ｐＨ１．５）で３０μｌ／分で３０秒間、再生した。Ｉｎｓｉｇｈｔ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用し、１：１カイネティクス相互作用モデルへのフィッティングまたは定常状態の親和性へのフィッティングによって、データを評価した。
ブタＩｇＧバリアント及び野生型に関するカイネティクス結合データを表８に示し、結合データのセンサーグラムを図６Ａ～６Ｊに示す。
ヒツジＩｇＧバリアント及び野生型に関するカイネティクス結合データを表９に示し、結合データのセンサーグラムを図７Ａ～７Ｊに示す。
ウシＩｇＧバリアント及び野生型に関するカイネティクス結合データを表１０に示し、結合データのセンサーグラムを図８Ａ～８Ｊに示す。
ウマＩｇＧバリアント及び野生型に関するカイネティクス結合データを表１１に示し、結合データのセンサーグラムを図９Ａ～９Ｊに示す。
表１２は、野生型Ｆｃと比較した、各Ｆｃバリアントの倍数増加の種間比較を示す。
他の実施形態
本発明について、その詳細な説明とともに記載してきたが、前述の説明は、本発明の範囲を例示するものであり、これを限定する意図はなく、本発明は、添付する特許請求の範囲によって定義される。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内である。

Claims (38)

  1. 家畜動物のＩｇＧのＦｃ領域バリアントまたはそのＦｃＲｎ結合領域を含むポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ｉ２５０Ｑ、Ｉ２５０Ｅ、Ａ２５０Ｑ、Ａ２５０Ｅ、Ｖ２５０Ｑ及びＶ２５０Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ、Ｔ２５２Ｆ、Ｋ２５２Ｙ、Ｋ２５２Ｗ及びＫ２５２Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｍ２５６Ａ、Ｍ２５６Ｄ、Ｍ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２８６Ｙ、Ｓ２８６Ｆ、Ｓ２８６Ｗ、Ｓ２８６Ｌ、Ｓ２８６Ｄ、Ｓ２８６Ｅ、Ｔ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｅ３１１Ｖ、Ｅ３１１Ｋ、Ｅ３１１Ｒ、Ｅ３１１Ｌ、Ｅ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ、Ｋ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ、Ｖ４２６Ｈ、Ｇ４２６Ｙ、Ｇ４２６Ｆ及びＧ４２６Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ、Ｍ４２８Ｆ、Ｈ４２８Ｌ、Ｈ４２８Ｙ及びＨ４２８Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；ならびに
    （ｘｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ、Ｔ４３６Ｈ、Ｆ４３６Ｈ及びＶ４３６Ｈからなる群から選択される、前記位置
    に含み、
    ここで、前記アミノ酸位置は、ＥＵナンバリングに基づき、前記ポリペプチドは、前記野生型ＩｇＧのＦｃドメインと比較した場合、前記家畜動物のＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、前記ポリペプチド。
  2. 前記家畜動物がブタである、請求項１に記載のポリペプチド。
  3. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ｉ２５０Ｑ及びＩ２５０Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ及びＭ２５２Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ及びＳ２５４Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｅ３１１Ｖ、Ｅ３１１Ｋ、Ｅ３１１Ｒ、Ｅ３１１Ｌ及びＥ３１１Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ、Ｍ４２８Ｆ、Ｈ４２８Ｌ、Ｈ４２８Ｙ及びＨ４２８Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；ならびに
    （ｘｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ及びＴ４３６Ｈからなる群から選択される、前記位置
    に含む、請求項２に記載のポリペプチド。
  4. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙである、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２８６Ｅである、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９ＤまたはＱ３０９Ｖである、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＡ４２６Ｙである、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｙである、前記位置；及び
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置
    に含む、請求項３に記載のポリペプチド。
  5. 前記野生型ＩｇＧのＦｃが、配列番号１～１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ブタＩｇＧのＦｃである、請求項２～４のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  6. 前記家畜動物がウシである、請求項１に記載のポリペプチド。
  7. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ及びＱ３１１Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；ならびに
    （ｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、前記位置
    に含む、請求項６に記載のポリペプチド。
  8. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５２Ｙである、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；及び
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈからなる群から選択される、前記位置
    に含む、請求項７に記載のポリペプチド。
  9. 前記野生型ＩｇＧのＦｃが、配列番号１２～１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ウシＩｇＧのＦｃである、請求項６～８のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  10. 前記家畜動物がウマである、請求項１に記載のポリペプチド。
  11. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５０Ｑ、Ｔ２５０Ｅ、Ａ２５０Ｑ、Ａ２５０Ｅ、Ｖ２５０Ｑ及びＶ２５０Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｋ２５２Ｙ、Ｋ２５２Ｗ及びＫ２５２Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｍ２５６Ａ、Ｍ２５６Ｄ、Ｍ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２８６Ｙ、Ｓ２８６Ｆ、Ｓ２８６Ｗ、Ｓ２８６Ｌ、Ｓ２８６Ｄ、Ｓ２８６Ｅ、Ｔ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ及びＫ３１１Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ、Ｖ４２６Ｈ、Ｇ４２６Ｙ、Ｇ４２６Ｆ及びＧ４２６Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｙ、Ｈ４３４Ａ、Ｈ４３４Ｆ、Ｈ４３４Ｓ、Ｈ４３４Ｗ及びＨ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；ならびに
    （ｘｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈ、Ｆ４３６Ｈ及びＶ４３６Ｈからなる群から選択される、前記位置
    に含む、請求項１０に記載のポリペプチド。
  12. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙである、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２８６Ｅである、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＧ４２６Ｙである、前記位置；及び
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置
    に含む、請求項１１に記載のポリペプチド。
  13. 前記野生型ＩｇＧのＦｃが、配列番号１５～２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ウマＩｇＧのＦｃである、請求項１０～１２のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  14. 前記家畜動物がヒツジである、請求項１に記載のポリペプチド。
  15. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ及びＴ２５６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＶ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；ならびに
    （ｘｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、前記位置
    に含む、請求項１４に記載のポリペプチド。
  16. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５２Ｙである、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖである、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖである、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｙからなる群から選択される、前記位置；及び
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置
    に含む、請求項１５に記載のポリペプチド。
  17. 前記野生型ＩｇＧのＦｃが、配列番号２２～２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ヒツジＩｇＧのＦｃである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  18. 前記家畜動物がヤギである、請求項１に記載のポリペプチド。
  19. 前記ポリペプチドが、アミノ酸置換を、以下からなる群から選択される少なくとも１つの位置：
    （ｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５０に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５０Ｑ、Ｓ２５０Ｅ、Ｔ２５０Ｑ及びＴ２５０Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５２に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ２５２Ｙ、Ｍ２５２Ｗ、Ｍ２５２Ｆ、Ｔ２５２Ｙ、Ｔ２５２Ｗ及びＴ２５２Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＳ２５４Ｒ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｈ、Ｔ２５４Ｒ、Ｔ２５４Ｋ及びＴ２５４Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２５６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２５６Ａ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｋ２５６Ａ、Ｋ２５６Ｄ及びＫ２５６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置２８６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＴ２８６Ｙ、Ｔ２８６Ｆ、Ｔ２８６Ｗ、Ｔ２８６Ｌ、Ｔ２８６Ｄ及びＴ２８６Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３０９に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３０９Ｖ、Ｑ３０９Ｄ及びＱ３０９Ｅからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置３１１に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＱ３１１Ｖ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｈ、Ｋ３１１Ｖ、Ｋ３１１Ｒ、Ｋ３１１Ｌ、Ｋ３１１Ｈ、Ｄ３１１Ｖ、Ｄ３１１Ｋ、Ｄ３１１Ｒ、Ｄ３１１Ｌ及びＤ３１１Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｖｉｉｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＡ４２６Ｙ、Ａ４２６Ｆ、Ａ４２６Ｈ、Ｖ４２６Ｙ、Ｖ４２６Ｆ及びＶ４２６Ｈからなる群から選択される、前記位置；
    （ｉｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４２８に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＭ４２８Ｌ、Ｍ４２８Ｙ及びＭ４２８Ｆからなる群から選択される、前記位置；
    （ｘ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３４に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＮ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｗ及びＮ４３４Ｙからなる群から選択される、前記位置；ならびに
    （ｘｉ）前記家畜動物の野生型ＩｇＧのアミノ酸位置４３６に対応する位置であって、前記アミノ酸置換はＹ４３６Ｈである、前記位置
    に含む、請求項１８に記載のポリペプチド。
  20. 前記野生型ＩｇＧのＦｃが、配列番号２５～２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ヤギＩｇＧのＦｃである、請求項１８または請求項１９に記載のポリペプチド。
  21. 前記ポリペプチドが、前記少なくとも１つのアミノ酸置換のうちの２つ以上を含み、前記２つ以上のアミノ酸置換は、異なる位置にあり、前記ポリペプチドは、（ａ）前記家畜動物の前記野生型ＩｇＧのＦｃドメイン、及び（ｂ）前記２つ以上のアミノ酸置換のうちの１つのみを含むポリペプチドと比較した場合、前記家畜動物のＦｃＲｎに対する結合親和性が増加している、請求項１～２０のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  22. 結合ドメインを更に含む、請求項１～２１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  23. 前記結合ドメインが、（ｉ）免疫グロブリン分子の６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）；（ｉｉ）前記家畜動物の受容体タンパク質のリガンド結合ドメイン、（ｉｉｉ）ナノボディ、または（ｉｖ）前記家畜動物の受容体タンパク質の細胞外ドメインを含む、請求項２２に記載のポリペプチド。
  24. 前記結合ドメインが、ＮＧＦ、ＴｒＫＡ、ＡＤＡＭＴＳ、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－４Ｒ、アンジオテンシン１型（ＡＴ１）受容体、アンジオテンシン２型（ＡＴ２）受容体、ＩＬ－５、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－３１、ＩＬ－３３、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ４７、ＣＤ５２、及び補体系複合体からなる群から選択される抗原に特異的に結合する、請求項２２または請求項２３に記載のポリペプチド。
  25. ＥＰＯ、ＣＴＬＡ４、ＬＦＡ３、ＶＥＧＦＲ１／ＶＥＧＦＲ３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４Ｒ、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、及びトロンボポエチン結合ペプチドからなる群から選択されるタンパク質を更に含む、請求項１～２４のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  26. 前記ポリペプチドが、中性ｐＨよりも酸性ｐＨでより高いレベルで前記家畜動物のＦｃＲｎに結合する、請求項１～２５のいずれか１項に記載のポリペプチド。
  27. 前記ポリペプチドが、ｐＨ７．４よりもｐＨ５．５でより高いレベルで前記家畜動物のＦｃＲｎに結合する、請求項２６に記載のポリペプチド。
  28. 前記ポリペプチドが、ｐＨ７．４よりもｐＨ６．０でより高いレベルで前記家畜動物のＦｃＲｎに結合する、請求項２６に記載のポリペプチド。
  29. （ｉ）請求項１～２８のいずれか１項に記載のポリペプチドと、（ｉｉ）薬学的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
  30. 請求項１～２８のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードする１つまたは複数の核酸。
  31. 請求項３０に記載の１つまたは複数の核酸を含む、１つまたは複数の発現ベクター。
  32. 請求項３０に記載の１つもしくは複数の核酸または請求項３１に記載の１つもしくは複数の発現ベクターを含む、宿主細胞。
  33. ポリペプチドを作製する方法であって、
    （ａ）請求項３０に記載の１つまたは複数の核酸を提供すること；
    （ｂ）宿主細胞培養物中で前記１つまたは複数の核酸を発現させ、それにより、前記ポリペプチドを産生すること；及び
    （ｃ）（ｂ）で産生された前記ポリペプチドを前記宿主細胞培養物から回収すること
    を含む、前記方法。
  34. 前記ポリペプチドを医薬製剤として製剤化することを更に含む、請求項３３に記載の方法。
  35. 家畜動物の疾患または障害を治療することを、それを必要とする家畜動物に行う方法であって、請求項２９に記載の医薬組成物を含む組成物の有効量を前記家畜動物に投与することを含む、前記方法。
  36. 家畜動物の疾患または障害を予防することを、それを必要とする家畜動物に行う方法であって、請求項２９に記載の医薬組成物を含む組成物の有効量を前記家畜動物に投与することを含む、前記方法。
  37. 前記疾患または前記障害が、アレルギー、慢性疼痛、急性疼痛、炎症性疾患、自己免疫疾患、内分泌疾患、胃腸疾患、心血管疾患、腎臓疾患、生殖機能関連障害、感染症またはがんである、請求項３５または請求項３６に記載の方法。
  38. 前記疾患または前記障害が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、骨関節炎痛、関節炎、貧血、または肥満である、請求項３５または請求項３６に記載の方法。
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