JP2023551203A - 抗体－薬物コンジュゲートのためのグリコシド二重切断リンカー - Google Patents

抗体－薬物コンジュゲートのためのグリコシド二重切断リンカー Download PDF

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Abstract

本開示は、抗体－薬物コンジュゲート構造であって、抗体を薬物に連結し、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を有する切断可能なリンカーを含む、抗体－薬物コンジュゲート構造を提供する。本開示はまた、そのようなコンジュゲートを生成するための化合物及び方法、並びにコンジュゲートを使用する方法を包含する。【選択図】図２

Description

関連出願の相互参照
この出願は、２０２０年１１月２０日に出願された米国仮出願第６３／１１６，６３２号、及び２０２１年１月２０日に出願された米国仮出願第６３／１３９，６８５号の利益を主張するものであり、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。
序論
タンパク質－小分子療法コンジュゲートの分野は、大幅に進化し、今後数年間でより多くの薬物を提供することを期待して、多くの臨床的に有益な薬物を提供しつつある。タンパク質－コンジュゲート療法薬は、例えば、特異性、機能の多様性、及び比較的低いオフターゲット活性に起因して、いくつかの利点を提供することができ、副作用は、より少なくなる。タンパク質の化学修飾は、これらの利点をより強力に、安定的に、又は多様にすることによって、これらの利点を拡張し得る。
本開示は、抗体－薬物コンジュゲート構造であって、抗体を薬物に連結し、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を有する切断可能なリンカーを含む、抗体－薬物コンジュゲート構造を提供する。本開示はまた、そのようなコンジュゲートを生成するための化合物及び方法、並びにコンジュゲートを使用する方法を包含する。
本開示の態様は、抗体と、薬物と、抗体を薬物に連結し、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を有する切断可能なリンカーとを含む、コンジュゲートを含む。
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉ）のコンジュゲートであり、
Figure 2023551203000002
 式中、
Ｚが、ＣＲ４又はＮであり、
Ｘが、Ｏ又はＮＲ４であり、
Ｒ１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ２及びＲ３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、及び置換アルキニルから選択され、
各Ｒ６が、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
ｋが、１～１０の整数であり、
Ｒ７が、第２の酵素的に切断可能な部分を含み、
Ｌ１が、第１のリンカーであり、
Ｌ２が、第２のリンカーであり、
Ｗ１が、薬物であり、
Ｗ２が、抗体である。
いくつかの実施形態では、ｋが、２であり、コンジュゲートは、式（Ｉａ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000003
いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、ガラクトシドを含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、グルコシドを含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、マンノシドを含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、フシソド（ｆｕｃｉｓｏｄｅ）を含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃを含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、Ｏ－ＧａｌＮＡｃを含む。
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｂ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000004
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｃ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000005
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｄ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000006
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｅ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000007
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｆ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000008
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｇ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000009
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、
－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－
を含み、
式中、
ａ、ｂ、ｃ、及びｄが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、
－（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－
を含み、
式中、
ｅ、ｆ、ｇ、及びｈが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル及び置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
式中、
（ＰＥＧ）ｎが、
Figure 2023551203000010
 であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造
Figure 2023551203000011
 を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
Figure 2023551203000012
 であり、
各Ｒ１２及びＲ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ２が、－ＮＨ－であり、
Ｔ３が、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、
ｄが、０である。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯ－であり、
ｆ、ｇ、及びｈが、０である。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯＮＲ１５－であり、
Ｔ６が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ６が、－ＣＯ－であり、
ｇ及びｈが、０である。
いくつかの実施形態では、薬物は、細胞毒素、キナーゼ阻害剤、免疫刺激剤、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、オリゴヌクレオチド、アプタマー、サイトカイン、ステロイド、及びペプチドから選択される。いくつかの実施形態では、薬物は、アウリスタチン、マイタンシン、及びデュオカルマイシンから選択される。いくつかの実施形態では、薬物は、チューブリシンＭ、カリケアミシン、ＳＮ－３８、エキサテカン、ＳＴＡＴ３阻害剤、アルファ－アマニチン、オーロラキナーゼ阻害剤、ベロテカン、９－アミノカンプトテシン（９－ＡＣ）、及びアントラサイクリンから選択される。
本開示の態様は、化合物であって、抗体を薬物に連結するための切断可能なリンカーを含み、切断可能なリンカーが、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドを有する第２の酵素的に切断可能な部分を含む、化合物を含む。
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩ）の化合物であり、
Figure 2023551203000013
 式中、
Ｚが、ＣＲ４又はＮであり、
Ｘが、Ｏ又はＮＲ４であり、
Ｒ２及びＲ３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ６が、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
ｋが、１～１０の整数であり、
Ｒ７が、第２の酵素的に切断可能な部分を含み、
Ｌ１が、第１のリンカーであり、
Ｌ２が、第２のリンカーであり、
Ｗ１が、薬物である。
いくつかの実施形態では、ｋが、２であり、化合物は、式（ＩＩａ）の化合物である。
Figure 2023551203000014
いくつかの実施形態では、第２の切断可能な部分は、ガラクトシドを含む。いくつかの実施形態では、第２の切断可能な部分は、グルコシドを含む。いくつかの実施形態では、第２の切断可能な部分は、マンノシドを含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、フシソド（ｆｕｃｉｓｏｄｅ）を含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃを含む。いくつかの実施形態では、第２の酵素的に切断可能な部分は、Ｏ－ＧａｌＮＡｃを含む。
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩｂ）の化合物である。
Figure 2023551203000015
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩｃ）の化合物である。
Figure 2023551203000016
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩｄ）の化合物である。
Figure 2023551203000017
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩｅ）の化合物である。
Figure 2023551203000018
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩｆ）の化合物である。
Figure 2023551203000019
いくつかの実施形態では、化合物は、式（ＩＩｇ）の化合物である。
Figure 2023551203000020
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、
－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－
を含み、
式中、
ａ、ｂ、ｃ、及びｄが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、
－（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－
を含み、
式中、
ｅ、ｆ、ｇ、及びｈが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル及び置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
式中、
（ＰＥＧ）ｎが、
Figure 2023551203000021
 であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造
Figure 2023551203000022
 を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
Figure 2023551203000023
 であり、
各Ｒ１２及びＲ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ２が、－ＮＨ－であり、
Ｔ３が、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、
ｄが、０である。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯ－であり、
ｆ、ｇ、及びｈが、０である。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、本明細書に記載される通りであり、ここで、
Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯＮＲ１５－であり、
Ｔ６が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ６が、－ＣＯ－であり、
ｇ及びｈが、０である。
いくつかの実施形態では、薬物は、細胞毒素、キナーゼ阻害剤、免疫刺激剤、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、オリゴヌクレオチド、アプタマー、サイトカイン、ステロイド、及びペプチドから選択される。いくつかの実施形態では、薬物は、アウリスタチン、マイタンシン、及びデュオカルマイシンから選択される。いくつかの実施形態では、薬物は、チューブリシンＭ、カリケアミシン、ＳＮ－３８、エキサテカン、ＳＴＡＴ３阻害剤、アルファ－アマニチン、オーロラキナーゼ阻害剤、ベロテカン、９－アミノカンプトテシン（９－ＡＣ）、及びアントラサイクリンから選択される。
本開示の態様は、本明細書に記載されるコンジュゲートと、薬学的に許容される賦形剤と、を含む薬学的組成物を含む。
本開示の態様は、対象にコンジュゲートを投与する方法であって、本方法が、対象に、本明細書に記載のコンジュゲートを投与することを含む、方法を含む。
本開示の態様は、対象においてがんを治療する方法であって、本方法が、対象に、本明細書に記載のコンジュゲートを含む治療有効量の薬学的組成物を投与することを含み、投与することが、対象においてがんを治療するのに有効である、方法を含む。
治療用抗体－薬物コンジュゲートを生成するために一般的に使用される細胞毒素を示す。矢印は、塩基不安定性基を示す。 抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の合成のためのＨＩＰＳライゲーションを示す。アルデヒド部分を保有する抗体を、Ｈｙｄｒａｚｉｎｏ－ｉｓｏ－Ｐｉｃｔｅｔ－Ｓｐｅｎｇｌｅｒ（ＨＩＰＳ）リンカー及びペイロードと反応させ、安定なアザカルボリン結合を有する部位特異的にコンジュゲートしたＡＤＣを生成した。 構築物３０トラスツズマブコンジュゲートの疎水性相互作用カラム（ＨＩＣ）トレースを示し、ＨＩＣによって決定される場合、ＤＡＲは１．７であった。 構築物３０トラスツズマブコンジュゲートの分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）トレースを示し、これは、コンジュゲートが、分析ＳＥＣによって決定される場合、９７．１％がモノマーであることを示していた。 構築物３３トラスツズマブコンジュゲートのＨＩＣトレースを示し、ＨＩＣによって決定される場合、ＤＡＲは１．６６であった。 構築物３３トラスツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、これは、コンジュゲートが、分析ＳＥＣによって決定される場合、９７．６％がモノマーであることを示していた。 構築物３０ポラツズマブコンジュゲートのＨＩＣトレースを示し、ＨＩＣによって決定される場合、ＤＡＲは１．７８であった。 構築物３０ポラツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、これは、コンジュゲートが、分析ＳＥＣによって決定される場合、９５．４％がモノマーであることを示していた。 構築物３３ポラツズマブコンジュゲートのＨＩＣトレースを示し、ＨＩＣによって決定される場合、ＤＡＲは１．６であった。 構築物３３ポラツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、これは、コンジュゲートが、分析ＳＥＣによって決定される場合、９６．８％がモノマーであることを示していた。 比較分子３５（単一切断マイタンシン構築物）及び３４（グルクロニド二重切断ＭＭＡＥ構築物）の構造を示す。 Ｇｒａｎｔａ－５１９細胞に対する、単一切断（３５）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 Ｒａｍｏｓ－ＲＡ細胞に対する、単一切断（３５）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＮＣＩ－Ｎ８７細胞に対する、単一切断（３５）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 Ｓｋ－Ｂｒ－３細胞に対する、単一切断（３５）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 Ｒａｍｏｓ－ＲＡ細胞に対する、グルクロニド修飾二重切断リンカー（３４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３３）を保有するＭＭＡＥとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＮＣＩ－Ｎ８７細胞に対する、グルクロニド修飾二重切断リンカー（３４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３３）を保有するＭＭＡＥとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 Ｓｋ－Ｂｒ－３細胞に対する、グルクロニド修飾二重切断リンカー（３４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３３）を保有するＭＭＡＥとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 構築物４６抗ＦＩＴＣコンジュゲートのＰＬＲＰトレースを示し、ＰＬＲＰによって決定される場合、ＤＡＲは１．７０であった。 構築物４６抗ＦＩＴＣコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、分析ＳＥＣによって決定される場合、９５．９％がモノマーであった。 構築物４６トラスツズマブコンジュゲートのＰＬＲＰトレースを示し、ＰＬＲＰによって決定される場合、ＤＡＲは１．７９であった。 構築物４６トラスツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、分析ＳＥＣによって決定される場合、９６．２％がモノマーであった。 構築物４６サシツズマブコンジュゲートのＰＬＲＰトレースを示し、ＰＬＲＰによって決定される場合、ＤＡＲは１．１５であった。 構築物４６サシツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、分析ＳＥＣによって決定される場合、９４．４％がモノマーであった。 構築物４４抗ＦＩＴＣコンジュゲートのＰＬＲＰトレースを示し、ＰＬＲＰによって決定される場合、ＤＡＲは１．６８であった。 構築物４４抗ＦＩＴＣコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、分析ＳＥＣによって決定される場合、９６．０％がモノマーであった。 構築物４４トラスツズマブコンジュゲートのＰＬＲＰトレースを示し、ＰＬＲＰによって決定される場合、ＤＡＲは１．７８であった。 構築物４４トラスツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、分析ＳＥＣによって決定される場合、９６．０％がモノマーであった。 構築物４４サシツズマブコンジュゲートのＰＬＲＰトレースを示し、ＰＬＲＰによって決定される場合、ＤＡＲは１．１６であった。 構築物４４サシツズマブコンジュゲートの分析ＳＥＣトレースを示し、分析ＳＥＣによって決定される場合、９４．５％がモノマーであった。 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞に対する、グルコシド修飾（４４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＢｘＰＣ３細胞に対する、グルコシド修飾（４４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＳＫＢＲ３細胞に対する、グルコシド修飾（４４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＮＣＩ－Ｎ８７細胞に対する、グルコシド修飾（４４）又はガラクトシド修飾二重切断リンカー（３０）を保有するマイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞に対する、グルクロニド修飾（３４）又はグルコシド修飾二重切断リンカー（４６）を保有するＭＭＡＥとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。 ＢｘＰＣ３細胞に対する、グルクロニド修飾（３４）又はグルコシド修飾二重切断リンカー（４６）を保有するＭＭＡＥとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力のグラフを示す。
定義
以下の用語は、別段で指示がない限り、以下の意味を有する。定義されていない任意の用語は、当該技術分野で認識されている意味を有する。
「アルキル」は、１～１０個の炭素原子、例えば１～６個の炭素原子、又は１～５個、又は１～４個、又は１～３個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語には、例として、直鎖及び分枝鎖のヒドロカルビル基、例えば、メチル（ＣＨ３－）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２－）、ｎ－プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２－）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ－）、ｎ－ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２－）、ｓｅｃ－ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ－）、ｔ－ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ－）、ｎ－ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、及びネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２－）が含まれる。
「置換アルキル」という用語は、アルキル鎖中の１個以上の炭素原子（Ｃ１炭素原子を除く）が、任意選択的に－Ｏ－、－Ｎ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）ｎ－（式中、ｎは０～２である）、－ＮＲ－（式中、Ｒは水素又はアルキルである）等のヘテロ原子で置き換えられており、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、及び－ＮＲａＲｂからなる群から選択される１～５個の置換基を有し、Ｒ’及びＲ”が、同じであってもよく、又は異なっていてもよく、水素、任意選択的に置換されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロ環から選択される、本明細書に定義されるアルキル基を指す。
「アルキレン」は、二価の脂肪族ヒドロカルビル基、好ましくは、直鎖又は分枝鎖のいずれかである１～６個、より好ましくは１～３個の炭素原子を有し、任意選択的に－Ｏ－、－ＮＲ１０－、－ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０－等から選択される１つ以上の基で中断されている基を指す。この用語には、例として、メチレン（－ＣＨ２－）、エチレン（－ＣＨ２ＣＨ２－）、ｎ－プロピレン（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、ｉｓｏ－プロピレン（－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）－）、（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２－）、（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）－）、（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－）、（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２－）等が含まれる。
「置換アルキレン」は、以下の「置換」の定義において炭素について記載されているように、置換基で置き換えられた１～３個の水素を有するアルキレン基を指す。
「アルカン」という用語は、本明細書で定義されるような、アルキル基及びアルキレン基を指す。
「アルキルアミノアルキル」、「アルキルアミノアルケニル」、及び「アルキルアミノアルキニル」という用語は、Ｒ’が本明細書で定義されるアルキル基であり、Ｒ”が本明細書で定義されるアルキレン、アルケニレン又はアルキニレン基であるＲ’ＮＨＲ”－基を指す。
「アルカリール」又は「アラルキル」という用語は、－アルキレン－アリール及び－置換アルキレン－アリール基であって、アルキレン、置換アルキレン及びアリールが本明細書で定義される通りである基を指す。
「アルコキシ」は、－Ｏ－アルキル基であって、アルキルが本明細書で定義される通りである基を指す。アルコキシには、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｎ－ペントキシ等が含まれる。「アルコキシ」という用語はまた、アルケニル－Ｏ－、シクロアルキル－Ｏ－、シクロアルケニル－Ｏ－、及びアルキニル－Ｏ－基であって、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル及びアルキニルが本明細書で定義される通りである基を指す。
「置換アルコキシ」という用語は、置換アルキル－Ｏ－、置換アルケニル－Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｏ－、置換シクロアルケニル－Ｏ－、及び置換アルキニル－Ｏ－の基であって、置換アルキル、置換アルケニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル及び置換アルキニルが本明細書で定義される通りである基を指す。
「アルコキシアミノ」という用語は、－ＮＨ－アルコキシ基であって、アルコキシが本明細書で定義される通りである基を指す。
「ハロアルコキシ」という用語は、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されているアルキル－Ｏ－基を指し、例として、トリフルオロメトキシ等の基が含まれる。
「ハロアルキル」という用語は、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されている上述の置換アルキル基を指す。そのような基の例には、限定されないが、フルオロアルキル基、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロエチル等が含まれる。
「アルキルアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｏ－アルキル、アルキレン－Ｏ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｏ－アルキル、及び置換アルキレン－Ｏ－置換アルキル基であって、アルキル、置換アルキル、アルキレン及び置換アルキレンが本明細書で定義される通りである基を指す。
「アルキルチオアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｓ－アルキル、アルキレン－Ｓ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｓ－アルキル、及び置換アルキレン－Ｓ－置換アルキル基であって、アルキル、置換アルキル、アルキレン及び置換アルキレンが本明細書で定義される通りである基を指す。
「アルケニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～４個の炭素原子を有し、かつ少なくとも１個、好ましくは１～２個の二重結合不飽和部位を有する、直鎖又は分枝鎖のヒドロカルビル基を指す。この用語には、例として、ビ－ビニル、アリル、及びブタ－３－エン－１－イルが含まれる。この用語には、シス及びトランス異性体、又はこれらの異性体の混合物が含まれる。
「置換アルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有する、本明細書に定義されるようなアルケニル基を指す。
「アルキニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～３個の炭素原子を有し、かつ少なくとも１個、好ましくは１～２個の三重結合不飽和部位を有する、直鎖又は分枝鎖の一価ヒドロカルビル基を指す。そのようなアルキニル基の例としては、アセチレニル（－Ｃ≡ＣＨ）、及びプロパルギル（－ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。
「置換アルキニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有する、本明細書に定義されるようなアルキニル基を指す。
「アルキニルオキシ」は、－Ｏ－アルキニル基であって、アルキニルが本明細書で定義される通りである基を指す。アルキニルオキシには、例として、エチニルオキシ、プロピニルオキシ等が含まれる。
「アシル」は、Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、アルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）－、アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アリール－Ｃ（Ｏ）－、置換アリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、置換ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－、及び置換ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。例えば、アシルには、「アセチル」基ＣＨ３Ｃ（Ｏ）－が含まれる。
「アシルアミノ」は、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキル、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロアリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）ヘテロ環、及び－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロ環の基であって、Ｒ２０が、水素又はアルキルであり、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「アミノカルボニル」、又は「アミノアシル」という用語は、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ２１Ｒ２２基であって、Ｒ２１及びＲ２２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択され、Ｒ２１及びＲ２２が、任意選択的にそれらに結合する窒素とともに接続し、ヘテロ環又は置換ヘテロ環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「アミノカルボニルアミノ」は、－ＮＲ２１Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２Ｒ２３基であって、Ｒ２１、Ｒ２２、及びＲ２３が、独立して、水素、アルキル、アリール、若しくはシクロアルキルから選択されるか、又は２つのＲ基が接続してヘテロシクリル基を形成する基を指す。
「アルコキシカルボニルアミノ」という用語は、－ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ基であって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクリルであり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルが本明細書で定義される通りである基を指す。
「アシルオキシ」という用語は、アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、アリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、及びヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－の基であって、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルが本明細書で定義される通りである基を指す。
「アミノスルホニル」は、－ＳＯ２ＮＲ２１Ｒ２２基であって、Ｒ２１及びＲ２２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、置換ヘテロ環からなる群から選択され、Ｒ２１及びＲ２２が、任意選択的にそれらに結合する窒素とともに接続し、ヘテロ環又は置換ヘテロ環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「スルホニルアミノ」は、－ＮＲ２１ＳＯ２Ｒ２２基であって、Ｒ２１及びＲ２２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択され、Ｒ２１及びＲ２２が、任意選択的にそれらに結合する原子とともに接続し、ヘテロ環又は置換ヘテロ環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「アリール」又は「Ａｒ」は、単環（例えば、フェニル基に存在する）、又は接続点が芳香環の原子を介することを条件として縮合環が芳香族であってもよいし、若しくは芳香族でなくてもよい、複数の縮合環を有する環系（そのような芳香環系の例には、ナフチル、アントリル、及びインダニルが含まれる）を有する、６～１８個の炭素原子の一価芳香族炭素環式基を指す。この用語は、例として、フェニル及びナフチルを含む。アリール置換基についての定義によって別段の制約がない限り、かかるアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、及びトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。
「アリールオキシ」は、－Ｏ－アリール基であって、アリールが本明細書に定義される通りである基を指し、例として、フェノキシ、ナフトキシ等を含み、これも本明細書で定義される任意選択的に置換されるアリール基を含む。
「アミノ」は、－ＮＨ２基を指す。
「置換アミノ」という用語は、－ＮＲＲ基であって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、但し、少なくとも１つのＲが水素ではない基を指す。
「アジド」という用語は、－Ｎ３基を指す。
「カルボキシル」、「カルボキシ」又は「カルボキシレート」は、－ＣＯ２Ｈ又はその塩を指す。
「カルボキシルエステル」若しくは「カルボキシエステル」、又は「カルボキシアルキル」若しくは「カルボキシルアルキル」という用語は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロ環、及び－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロ環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「（カルボキシルエステル）オキシ」又は「カーボネート」は、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロ環、及び－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロ環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「シアノ」又は「ニトリル」は、－ＣＮ基を指す。
「シクロアルキル」は、縮合環系、架橋環系、及びスピロ環系を含む、単環式環又は多環式環を有する３～１０個の炭化水素原子の環状アルキル基を指す。好適なシクロアルキル基の例は、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチル等を含む。そのようなシクロアルキル基には、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチル等の単環構造、又はアダマンタニル等の多環構造が含まれる。
「置換シクロアルキル」という用語は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有するシクロアルキル基を指す。
「シクロアルケニル」は、単環又は多環を有し、かつ少なくとも１個の二重結合、好ましくは１～２個の二重結合を有する、３～１０個の炭素原子の非芳香族環状アルキル基を指す。
「置換シクロアルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有するシクロアルケニル基を指す。
「シクロアルキニル」は、単環又は多環を有し、かつ少なくとも１個の三重結合を有する、５～１０個の炭素原子の非芳香族シクロアルキル基を指す。
「シクロアルコキシ」は、－Ｏ－シクロアルキルを指す。
「シクロアルケニルオキシ」は、－Ｏ－シクロアルケニルを指す。
「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードを指す。
「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」は、－ＯＨ基を指す。
「ヘテロアリール」は、１～１５個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子と、環内の酸素、窒素、及び硫黄からなる群から選択される１～１０個のヘテロ原子との芳香族基を指す。かかるヘテロアリール基は、単環（例えば、ピリジニル、イミダゾリル、若しくはフリル）、又は複数の縮合環を環系に有していてもよく（例えば、インドリジニル、キノリニル、ベンゾフラン、ベンズイミダゾリル、若しくはベンゾチエニル等の基の中にあるような）、環系内の少なくとも１つの環は芳香族である。価数の要件を満たすために、かかるヘテロアリール環の中の任意のヘテロ原子は、Ｈ又は置換基、例えば、本明細書に記載されるアルキル基若しくは他の置換基に結合されていてもよく、又は結合されていなくてもよい。特定の実施形態では、ヘテロアリール基の窒素及び／又は硫黄環原子は、任意選択的に酸化されて、Ｎ－オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、又はスルホニル部分を提供する。この用語には、例として、ピリジニル、ピローリル、インドリル、チオフェニル、及びフラニルが含まれる。ヘテロアリール置換基についての定義によって別段の制約がない限り、かかるヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリール、並びにトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。
「ヘテロアラルキル」という用語は、－アルキレン－ヘテロアリール基であって、アルキレン及びヘテロアリールが本明細書で定義される通りである基を指す。この用語には、例として、ピリジルメチル、ピリジルエチル、インドリルメチル等が含まれる。
「ヘテロアリールオキシ」は、－Ｏ－ヘテロアリールを指す。
「ヘテロ環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）」、「ヘテロ環式（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）」、「ヘテロシクロアルキル」、及び「ヘテロシクリル」は、縮合環系、架橋環系、及びスピロ環系を含む、単環又は複数の縮合環を有し、かつ、１～１０個のヘテロ原子を含む３～２０個の環原子を有する、飽和又は不飽和な基を指す。これらの環原子は、窒素、硫黄、又は酸素から選択され、縮合環系において、接続点が非芳香族環を介することを条件として、環のうちの１つ以上はシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリールであり得る。特定の実施形態では、ヘテロ環基の窒素及び／又は硫黄原子は、任意選択的に酸化され、Ｎ－オキシド、－Ｓ（Ｏ）－、又は－ＳＯ２－部分を提供する。価数の要件を満たすために、かかるヘテロ環式環の中の任意のヘテロ原子は、１つ以上のＨ又は１つ以上の置換基、例えば、本明細書に記載されるアルキル基若しくは他の置換基に結合されていてもよく、又は結合されていなくてもよい。
ヘテロ環及びヘテロアリールの例としては、限定されないが、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソオキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７－テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも称される）、１，１－ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニル等が挙げられる。
ヘテロ環置換基についての定義によって別段の制約がない限り、かかるヘテロ環基は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、及び縮合ヘテロ環から選択される１～５個、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。
「ヘテロシクリルオキシ」は、－Ｏ－ヘテロシクリル基を指す。
「ヘテロシクリルチオ」という用語は、ヘテロ環－Ｓ－基を指す。
「ヘテロシクレン」という用語は、本明細書で定義されるように、ヘテロ環から形成されるジラジカル基を指す。
「ヒドロキシアミノ」という用語は、－ＮＨＯＨ基を指す。
「ニトロ」は、－ＮＯ２基を指す。
「オキソ」は、原子（＝Ｏ）を指す。
「スルホニル」は、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アルケニル、－ＳＯ２－置換アルケニル、－ＳＯ２－シクロアルキル、－ＳＯ２－置換シクロアルキル、－ＳＯ２－シクロアルケニル、－ＳＯ２－置換シクロアルケニル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－置換アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、－ＳＯ２－置換ヘテロアリール、－ＳＯ２－ヘテロ環、及び－ＳＯ２－置換ヘテロ環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。スルホニルには、例として、メチル－ＳＯ２－、フェニル－ＳＯ２－、及び４－メチルフェニル－ＳＯ２－が含まれる。
「スルホニルオキシ」は、－ＯＳＯ２－アルキル、－ＯＳＯ２－置換アルキル、－ＯＳＯ２－アルケニル、－ＯＳＯ２－置換アルケニル、－ＯＳＯ２－シクロアルキル、－ＯＳＯ２－置換シクロアルキル、－ＯＳＯ２－シクロアルケニル、－ＯＳＯ２－置換シクロアルケニル、－ＯＳＯ２－アリール、－ＯＳＯ２－置換アリール、－ＯＳＯ２－ヘテロアリール、－ＯＳＯ２－置換ヘテロアリール、－ＯＳＯ２－ヘテロ環、及び－ＯＳＯ２－置換ヘテロ環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「サルフェート」又は「硫酸エステル」は、－Ｏ－ＳＯ２－ＯＨ、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－アルキル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換アルキル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－アルケニル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換アルケニル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－シクロアルキル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－アリール、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換アリール、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－ヘテロ環、及び－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－置換ヘテロ環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「アミノカルボニルオキシ」という用語は、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ基であって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロ環であり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロ環が本明細書で定義される通りである基を指す。
「チオール」は、－ＳＨ基を指す。
「チオキソ」、又は「チオケト」という用語は、原子（＝Ｓ）を指す。
「アルキルチオ」、又は「チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－アルキル基であって、アルキルが本明細書で定義される通りである基を指す。特定の実施形態では、硫黄は、－Ｓ（Ｏ）－へと酸化され得る。スルホキシドは、１つ以上の立体異性体として存在し得る。
「置換チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－置換アルキル基を指す。
「チオアリールオキシ」という用語は、アリール－Ｓ－基であって、アリール基が本明細書で定義される通りであり、これも本明細書で定義される任意選択的に置換されるアリール基を含む基を指す。
「チオヘテロアリールオキシ」という用語は、ヘテロアリール－Ｓ－基であって、ヘテロアリール基が本明細書で定義される通りであり、これも本明細書で定義される任意選択的に置換されるアリール基を含む基を指す。
「チオヘテロシクロオキシ」という用語は、ヘテロシクリル－Ｓ－基であって、ヘテロシクリル基が本明細書で定義される通りであり、これも本明細書で定義される任意選択的に置換されるヘテロシクリル基を含む基を指す。
本明細書の開示に加えて、「置換」という用語はまた、指定された基又はラジカルを修飾するために使用される場合、その指定された基又はラジカルの１個以上の水素原子が、各々互いに独立して、以下に定義されるのと同じ又は異なる置換基で置き換えられることを意味することができる。
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、特定の基又はラジカル中の飽和炭素原子上の１個以上の水素を置換するための置換基（単一の炭素上の任意の２個の水素が、＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ－ＯＲ７０、＝Ｎ２、又は＝Ｓと置き換えられてもよい）は、別途指定されない限り、－Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、－ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＳＯ２Ｒ７０、－ＳＯ２Ｏ－Ｍ＋、－ＳＯ２ＯＲ７０、－ＯＳＯ２Ｒ７０、－ＯＳＯ２Ｏ－Ｍ＋、－ＯＳＯ２ＯＲ７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）２（Ｍ＋）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｍ＋、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－Ｍ＋、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－ＮＲ７０ＣＯ２ －Ｍ＋、－ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、及び－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０が、任意選択的に置換されるアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、各Ｒ７０が、独立して、水素又はＲ６０であり、各Ｒ８０が、独立してＲ７０であるか、又はあるいは、２つのＲ８０が、それらが結合する窒素原子とともに、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群から選択される同じ又は異なる１～４個の追加のヘテロ原子を任意選択的に含んでいてもよく、そのうちのＮが、－Ｈ又はＣ１～Ｃ３アルキル置換を有していてもよい、５員、６員、若しくは７員のヘテロシクロアルキルを形成し、各Ｍ＋が、正味の単一の正電荷を有する対イオンである。各Ｍ＋は、独立して、例えば、アルカリイオン、例えば、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋；アンモニウムイオン、例えば、＋Ｎ（Ｒ６０）４；又はアルカリ土類イオン、例えば、［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、又は［Ｂａ２＋］０．５（下付きの０．５は、かかる二価アルカリ土類イオンについての対イオンのうちの１つが、本発明の化合物のイオン化形態であってもよく、他方が塩化物等の典型的な対イオンであってもよく、又は本明細書に開示される２つのイオン化化合物は、かかる二価アルカリ土類イオンについての対イオンとして機能してもよく、又は本発明の二重にイオン化された化合物は、かかる二価アルカリ土類イオンについての対イオンとして機能してもよいことを意味する）であってもよい。具体例として、－ＮＲ８０Ｒ８０は、－ＮＨ２、－ＮＨ－アルキル、Ｎ－ピロリジニル、Ｎ－ピペラジニル、４Ｎ－メチル－ピペラジン－１－イル及びＮ－モルホリニルを含むことを意味する。
本明細書の開示に加えて、「置換」アルケン、アルキン、アリール、及びヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素の置換基は、別途指定されない限り、－Ｒ６０、ハロ、－Ｏ－Ｍ＋、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、－Ｓ－Ｍ＋、－ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、－ＣＦ３、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ２、－Ｎ３、－ＳＯ２Ｒ７０、－ＳＯ３ －Ｍ＋、－ＳＯ３Ｒ７０、－ＯＳＯ２Ｒ７０、－ＯＳＯ３ －Ｍ＋、－ＯＳＯ３Ｒ７０、－ＰＯ３ －２（Ｍ＋）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、－ＣＯ２ －Ｍ＋、－ＣＯ２Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、－ＯＣＯ２ －Ｍ＋、－ＯＣＯ２Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－ＮＲ７０ＣＯ２ －Ｍ＋、－ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、及び－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０、及びＭ＋は、以前に定義した通りであり、但し、置換アルケン又はアルキンの場合、置換基は、－Ｏ－Ｍ＋、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、又は－Ｓ－Ｍ＋ではない。
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、「置換」ヘテロアルキル及びシクロヘテロアルキル基中の窒素原子上の水素の置換基は、別途指定されない限り、－Ｒ６０、－Ｏ－Ｍ＋、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、－Ｓ－Ｍ＋、－ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、－ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ２、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－Ｍ＋、－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、－ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－Ｍ＋、－ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）２（Ｍ＋）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、－Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、及び－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０、及びＭ＋は、既に定義した通りである。
本明細書の開示に加えて、特定の実施形態では、置換される基は、１、２、３、若しくは４個の置換基、１、２、若しくは３個の置換基、１若しくは２個の置換基、又は１個の置換基を有する。
上で定義されている全ての置換された基において、それ自体に更なる置換基を有する置換基（例えば、それ自体が置換アリール基で置換されており、更に置換アリール基によって置換されている、置換基として置換アリール基を有する置換アリール等）を定義することによって到達するポリマーは、本明細書に含まれることを意図していないことが理解される。そのような場合では、かかる置換の最大数は、３である。例えば、本明細書で具体的に企図される置換アリール基の連続的な置換は、置換アリール－（置換アリール）－置換アリールに限定される。
特に指定しない限り、本明細書で明示的に定義されない置換基の命名法は、官能基の末端部分に続いて隣接官能基を接続点に向かって命名することによって達せられる。例えば、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は、（アリール）－（アルキル）－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－基を指す。
１つ以上の置換基を含有する本明細書に開示される基のうちのいずれかに関して、そのような基は、立体的に実施不可能であり、かつ／又は合成的に実現不可能である任意の置換又は置換パターンを当然含有しないことを理解されたい。加えて、主題の化合物には、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学異性体が含まれる。
「薬学的に許容される塩」という用語は、患者、例えば、哺乳動物への投与に対して許容される塩（所与の投薬計画に対して許容される哺乳動物安全性を有する対イオンを有する塩）を意味する。かかる塩は、薬学的に許容される無機塩基又は有機塩基、及び薬学的に許容される無機酸又は有機酸に由来し得る。「薬学的に許容される塩」は、化合物の薬学的に許容される塩を指し、塩は、当該技術分野で周知の様々な有機及び無機の対イオンに由来し、単なる例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウム等が含まれ、分子が塩基性官能性を含有する場合、塩酸塩、臭化水素塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩等の有機酸又は無機酸の塩が含まれる。
「その塩」という用語は、酸のプロトンが、金属カチオン又は有機カチオン等のカチオンによって置き換えられたときに形成される化合物を意味する。該当する場合、塩は、薬学的に許容される塩であるが、このことは、患者への投与を意図していない中間化合物の塩には必要ではない。例として、本発明の化合物の塩は、無機酸又は有機酸の共役塩基を塩のアニオン性構成要素として用い、化合物が無機酸又は有機酸によってプロトン化されてカチオンを形成するものを含む。
「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子又はイオンとの組み合わせによって形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、又は両方の混合物であり得る。溶媒のいくつかの例としては、限定されないが、メタノール、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、及び水が挙げられる。溶媒が水であるとき、形成される溶媒和物は水和物である。
「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒ）」及び「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ）」は、同じ原子連結性を有するが、空間における異なる原子配置を有する化合物を指す。立体異性体には、シス－トランス異性体、Ｅ及びＺ異性体、鏡像異性体、並びにジアステレオマーが含まれる。
「互変異性体」とは、原子の電子結合のみ、及び／又はプロトンの位置のみが異なる分子の代替形態、例えば、エノール－ケト及びイミン－エナミン互変異性体、又はピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール、及びテトラゾール等の－Ｎ＝Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－環原子配置を含有するヘテロアリール基の互変異性体形態を指す。当業者は、他の互変異性環原子配置が可能であることを認識するであろう。
「又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体」という用語は、塩、溶媒和物、及び立体異性体の全ての並べ替え（ｐｅｒｍｕｔａｔｉｏｎ）、例えば、主題の化合物の立体異性体の薬学的に許容される塩の溶媒和物を含むことを意図していることを理解されたい。
「薬学的有効量」及び「治療有効量」は、特定の障害若しくは疾患、又はその症状の１つ以上を治療し、かつ／又はその疾患又は障害の発生を防止するのに十分な化合物の量を指す。腫瘍原性増殖性障害に関して、薬学的有効量又は治療有効量は、特に、腫瘍を縮小させるか、又は腫瘍の成長速度を低下させるのに十分な量を含む。
「患者」は、ヒト及び非ヒト対象、特に、哺乳動物対象を指す。
本明細書で使用される「治療すること」又は「治療」という用語は、患者、例えば、哺乳動物（特にヒト）における疾患又は医学的状態を治療すること、又は治療を意味し、（ａ）疾患若しくは医学的状態が起こるのを防止すること、例えば、対象の予防的治療、（ｂ）疾患若しくは医学的状態を軽減すること、例えば、患者において、疾患若しくは医学的状態をなくすこと、又は逆行させること、（ｃ）疾患若しくは医学的状態を、例えば、患者において疾患若しくは医学的状態の進行を遅らせるか、又は休止させることによって、抑制すること、あるいは（ｄ）患者において疾患若しくは医学的状態の症状を緩和することを含む。
「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、任意の長さのアミノ酸のポリマー形態を指すために本明細書で互換的に使用される。特に別段の指示がない限り、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、遺伝的にコードされているアミノ酸及びコードされていないアミノ酸、化学的若しくは生化学的に修飾されているか、又は誘導体化されているアミノ酸、並びに修飾ペプチド骨格を有するポリペプチドを含み得る。この用語は、融合タンパク質を含み、融合タンパク質は、限定されないが、異種アミノ酸配列を有する融合タンパク質、異種及び相同リーダー配列を有する融合物、少なくとも１つのＮ末端メチオニン残基を含有するタンパク質（例えば、組換え宿主細胞中における産生を容易にするための）、免疫学的にタグ化されたタンパク質等を含む。
「天然アミノ酸配列」又は「親アミノ酸配列」は、本明細書で互換的に使用され、修飾アミノ酸残基を含むような修飾の前のポリペプチドのアミノ酸配列を指す。
「アミノ酸類似体」、「非天然アミノ酸」等の用語は、互換的に使用されてもよく、天然に存在するタンパク質（例えば、Ａｌａ又はＡ、Ｃｙｓ又はＣ、Ａｓｐ又はＤ、Ｇｌｕ又はＥ、Ｐｈｅ又はＦ、Ｇｌｙ又はＧ、Ｈｉｓ又はＨ、Ｉｌｅ又はＩ、Ｌｙｓ又はＫ、Ｌｅｕ又はＬ、Ｍｅｔ又はＭ、Ａｓｎ又はＮ、Ｐｒｏ又はＰ、Ｇｌｎ又はＱ、Ａｒｇ又はＲ、Ｓｅｒ又はＳ、Ｔｈｒ又はＴ、Ｖａｌ又はＶ、Ｔｒｐ又はＷ、Ｔｙｒ又はＹ）中に一般的に見出される１つ以上のアミノ酸と構造及び／又は全体的な形状が類似しているアミノ酸様化合物を含む。アミノ酸類似体には、修飾側鎖又は骨格を有する天然アミノ酸も含まれる。アミノ酸類似体はまた、天然に存在するＤ形態と同じ立体化学を有するアミノ酸類似体、並びにアミノ酸類似体のＬ形態を含む。場合によっては、アミノ酸類似体は、１つ以上の天然アミノ酸の骨格構造及び／又は側鎖構造を共有し、その違いは、分子中の１つ以上の修飾基である。かかる修飾としては、限定されないが、ある原子（例えばＮ）の関連する原子（例えばＳ）による置換、ある基（例えば、メチル、若しくはヒドロキシル等）又はある原子（例えば、Ｃｌ、若しくはＢｒ等）の付加、ある基の欠失、共有結合の置換（例えば、単結合を二重結合等へ）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられ得る。例えば、アミノ酸類似体は、α－ヒドロキシ酸、及びα－アミノ酸等を含み得る。
「アミノ酸側鎖」又は「アミノ酸の側鎖」等の用語は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、及びアミノ酸類似体を含むアミノ酸残基のα－炭素に接続した置換基を指すために使用され得る。アミノ酸側鎖はまた、本明細書に記載の修飾アミノ酸及び／又はコンジュゲートの文脈で記載されるアミノ酸側鎖を含み得る。
「炭水化物」等の用語は、単糖類、二糖類、オリゴ糖類、及び多糖類のモノマー単位及び／又はポリマーを指すために使用され得る。糖という用語は、単糖類、二糖類等のより小さな炭水化物を指すために使用され得る。「炭水化物誘導体」という用語は、目的の炭水化物の１つ以上の官能基が置換され（任意の好都合な置換基によって置き換えられ）、修飾され（任意の好都合な化学物質を使用して別の基に変換され）るか、又は存在しない（例えば、除去されるか、若しくはＨによって置き換えられる）化合物を含む。様々な炭水化物及び炭水化物誘導体が入手可能であり、主題の化合物及びコンジュゲートでの使用に適合され得る。
「グリコシド」又は「グリコシル」という用語は、グリコシド結合を介して部分に結合した糖分子又は基を指す。例えば、グリコシドが結合する部分は、本明細書に記載される切断可能なリンカーであり得る。グリコシド結合は、様々な種類の結合、例えば、限定されないが、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）、Ｎ－グリコシド結合（グリコシルアミン）、Ｓ－グリコシド結合（チオグリコシド）、又はＣ－グリコシド結合（Ｃ－グリコシド又はＣ－グリコシル）を介して、グリコシドを他の部分に連結し得る。ある場合には、グリコシドは、それらが接続している部分から、例えば、化学的に媒介される加水分解又は酵素的に媒介される加水分解によって切断させることができる。
「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及び多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト化抗体、一本鎖抗体、キメラ抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ断片）等を含む。抗体は、標的抗原に結合することができる。（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、抗体の１つ以上の可変領域によって形成される相補性決定領域（ＣＤＲ）によって認識される、エピトープとも呼ばれる１つ以上の結合部位を有し得る。
「自然抗体」という用語は、抗体の重鎖及び軽鎖が作製されており、多細胞生物の免疫系によって対形成されている抗体を指す。脾臓、リンパ節、骨髄、及び血清は、自然抗体を産生する組織の例である。例えば、抗原で免疫付与された第１の動物から単離された抗体を産生する細胞によって産生される抗体は、自然抗体である。
「ヒト化抗体」又は「ヒト化免疫グロブリン」という用語は、ヒト抗体からの、対応して配置されるアミノ酸で置換されている１つ以上のアミノ酸を（例えば、フレームワーク領域、定常領域又はＣＤＲ中に）含有する非ヒト（例えば、マウス又はウサギ）抗体を指す。一般に、ヒト化抗体は、同じ抗体の非ヒト化態様と比較した場合に、ヒト宿主中で減少した免疫応答を生成する。抗体は、例えば、ＣＤＲグラフティング（ＥＰ２３９，４００、ＰＣＴ公開第ＷＯ９１／０９９６７号、米国特許第５，２２５，５３９号、第５，５３０，１０１号、及び第５，５８５，０８９号）、ベニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）又はリサーフェシング（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）（ＥＰ５９２，１０６、ＥＰ５１９，５９６、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９－４９８（１９９１）、Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５－８１４（１９９４）、Ｒｏｇｕｓｋａ．ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ９１：９６９－９７３（１９９４））、及び鎖シャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号）を含む、当該技術分野で既知の様々な技術を使用してヒト化され得る。特定の実施形態では、フレームワーク置換は、ＣＤＲ及びフレームワーク残基の相互作用のモデリングによって特定され、抗原結合及び配列比較に重要なフレームワーク残基を特定し、特定の位置にある異常なフレームワーク残基を特定する（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）を参照されたい）。本発明での使用が企図される抗体をヒト化するための追加の方法は、米国特許第５，７５０，０７８号、第５，５０２，１６７号、第５，７０５，１５４号、第５，７７０，４０３号、第５，６９８，４１７号、第５，６９３，４９３号、第５，５５８，８６４号、第４，９３５，４９６号、及び第４，８１６，５６７号、並びにＰＣＴ公開第ＷＯ９８／４５３３１号及び第ＷＯ９８／４５３３２号に記載されている。特定の実施形態では、主題のウサギ抗体は、ＵＳ２００４／００８６９７９及びＵＳ２００５／００３３０３１に示される方法に従ってヒト化され得る。したがって、上述の抗体は、当該技術分野で周知の方法を使用してヒト化され得る。
「キメラ抗体」という用語は、軽鎖及び重鎖の遺伝子が、異なる種に属している抗体の可変領域及び定常領域の遺伝子から、典型的には遺伝子操作によって構築された抗体を指す。例えば、マウスモノクローナル抗体からの遺伝子の可変セグメントは、ガンマ１及びガンマ３等のヒト定常セグメントに結合され得る。療法用キメラ抗体の一例は、マウス抗体由来の可変ドメイン又は抗原結合ドメインと、ヒト抗体由来の定常ドメイン又はエフェクタードメインとから構成されているハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳動物種由来のドメインも使用され得る。
免疫グロブリンポリペプチドの免疫グロブリン軽鎖又は重鎖可変領域は、「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」とも呼ばれる３つの超可変領域によって中断されているフレームワーク領域（ＦＲ）から構成されている。フレームワーク領域及びＣＤＲの程度は、定義されている（“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，”Ｅ．Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，１９９１を参照されたい）。構成要素である軽鎖及び重鎖の組み合わされたフレームワーク領域である、抗体のフレームワーク領域は、ＣＤＲを位置決定し、アラインメントするのに役立つ。ＣＤＲは、主に、抗原のエピトープへの結合に寄与する。
「親Ｉｇポリペプチド」は、本明細書に記載のアルデヒドタグ化定常領域を欠くアミノ酸配列を含むポリペプチドである。親ポリペプチドは、天然配列定常領域を含んでいてもよく、又は既存のアミノ酸配列修飾（付加、欠失、及び／若しくは置換等）を有する定常領域を含んでいてもよい。
本明細書で使用される場合、「単離された」という用語は、化合物が天然で存在するものとは異なる環境にある目的の化合物を記載することを意味する。「単離された」は、目的の化合物が実質的に濃縮されており、かつ／又は目的の化合物が部分的若しくは実質的に精製されている、試料内にある化合物を含むことを意味する。
本明細書で使用される場合、「実質的に精製された」という用語は、その天然の環境から除去され、天然に関連する他の構成要素を少なくとも６０％含まない、少なくとも７５％含まない、少なくとも８０％含まない、少なくとも８５％含まない、少なくとも９０％含まない、少なくとも９５％含まない、少なくとも９８％含まない、又は９８％を超える分を含まない、化合物を指す。
「生理学的条件」という用語は、生存細胞と適合性のあるそれらの条件、例えば、生存細胞と適合性のある温度、ｐＨ、塩分等の主に水性条件を包含することを意味する。
「反応性パートナー」とは、別の反応性パートナーと特異的に反応し、反応生成物を生成する分子又は分子部分を意味する。例示的な反応性パートナーは、スルファターゼモチーフのシステイン又はセリン、及びホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）を含み、これらが反応して、モチーフ中のシステイン又はセリンの代わりに、ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）を含有する変換されたアルデヒドタグの反応生成物を形成する。他の例示的な反応性パートナーは、変換されたアルデヒドタグのｆＧｌｙ残基のアルデヒド（例えば、反応性アルデヒド基）、並びにアルデヒド反応性基及び目的の部分を含む「アルデヒド反応性の反応性パートナー」を含み、これらが反応して、修飾ｆＧｌｙ残基を介して修飾ポリペプチドにコンジュゲートされた目的の部分を有する修飾アルデヒドタグ化ポリペプチドの反応生成物を形成する。
「Ｎ末端」は、遊離アミン基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基を指し、非Ｎ末端アミノ酸残基中のアミン基が、通常、ポリペプチドの共有結合性骨格の一部を形成する。
「Ｃ末端」は、遊離カルボキシル基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基を指し、非Ｃ末端アミノ酸残基中のカルボキシル基が、通常、ポリペプチドの共有結合性骨格の一部を形成する。
ポリペプチド又はポリペプチドのアミノ酸配列に関して使用される場合の「内部部位」とは、Ｎ末端又はＣ末端ではないポリペプチドの領域を意味する。
本発明を更に説明する前に、本発明は、説明される特定の実施形態に限定されるものではなく、したがって、当然に変化し得ることが理解されるべきである。また、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるので、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明するためのものにすぎず、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
ある値の範囲が提供される場合、文脈が別途明確に指示しない限り、その範囲の上限と下限との間の下限の単位の１０分の１までの各介在値、及び記載された範囲内の任意の他の記載された値又は介在値は、本発明内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、より小さい範囲に独立して含まれてもよく、記載された範囲内の任意の具体的に除外された境界に従って、これらも本開示に包含される。記載された範囲が境界の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる境界のいずれか又は両方を除外する範囲も、同様に本発明に含まれる。
明確にするために、別個の実施形態の文脈で記載される本発明の特定の特徴はまた、単一の実施形態で組み合わせて提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈において記載される本開示の様々な特徴はまた、別々に又は任意の好適なサブコンビネーションで提供され得る。本発明に関する実施形態の全ての組み合わせは、本開示によって具体的に包含され、そのような組み合わせが、例えば、安定した化合物である化合物（すなわち、作製され、単離され、特性決定され、生物学的活性について試験され得る化合物）である発明主題を包含する程度まで、それぞれ及び全ての組み合わせが個別かつ明示的に開示されたかのように、本明細書に開示される。加えて、様々な実施形態及びその要素（例えば、かかる変数を記述する実施形態に列挙される化学基の元素）の全てのサブコンビネーションはまた、本開示によって具体的に包含され、それぞれ及び全てのそのようなサブコンビネーションが個別かつ明示的に本明細書に開示されたかのように、本明細書に開示される。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記載される方法及び材料と同様又は同等の任意の方法及び材料は、本発明の実施又は試験においても使用され得るが、好ましい方法及び材料を、ここで記載する。本明細書で言及される全ての刊行物は、引用された刊行物に関連する方法及び／又は材料を開示及び説明するために、参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。特許請求の範囲は、あらゆる任意選択的な要素を排除するように記載され得ることに更に留意されたい。したがって、この記述は、特許請求の範囲の要素の記載に関連する「単に」、「のみ」等の排他的な用語の使用、又は「否定的」な限定の使用の先行詞としての役割を果たすことが意図される。
明確にするために、別個の実施形態の文脈で記載される本発明の特定の特徴はまた、単一の実施形態で組み合わせて提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈において記載される本開示の様々な特徴はまた、別々に又は任意の好適なサブコンビネーションで提供され得る。
本明細書で考察される刊行物は、本出願の出願日前に専らそれらの開示のために提供されている。本明細書におけるいかなるものも、本発明が先行発明によってそのような公開に先行する権利がないことを認めるものと解釈されるべきではない。更に、提供される刊行物の日付は、独立して確認する必要があり得る実際の刊行日とは異なる場合がある。
本開示は、抗体を薬物に連結する切断可能なリンカーを含む、抗体－薬物コンジュゲート構造を提供する。切断可能なリンカーは、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を含む。本開示はまた、そのようなコンジュゲートの生成方法、並びにそのコンジュゲートを使用する方法を包含する。

抗体－薬物コンジュゲート
本開示は、コンジュゲート、例えば、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。「コンジュゲート」とは、第２の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）と安定に会合する第１の部分（例えば、抗体）を意味する。例えば、抗体－薬物コンジュゲートは、別の部分（例えば、抗体）と安定に会合する薬物又は活性薬剤を含む。「安定に会合する」とは、ある部分が、標準的な条件下で別の部分又は構造に結合することを意味する。特定の実施形態では、第１の部分及び第２の部分は、１つ以上の官能基及び共有結合を介して互いに結合している。例えば、１つ以上の官能基及び共有結合は、本明細書に記載の切断可能なリンカーを含み得る。
特定の実施形態では、コンジュゲートは、第２の部分にコンジュゲートしたポリペプチド（例えば、抗体）を含む、ポリペプチドコンジュゲートである。特定の実施形態では、ポリペプチドにコンジュゲートした部分は、限定されないが、薬物、活性薬剤、検出可能な標識、水溶性ポリマー、又は膜若しくは表面へのポリペプチドの固定化のための部分等の様々な目的の部分のいずれかであり得る。特定の実施形態では、コンジュゲートは、ポリペプチドが抗体であり、したがって、抗体－薬物コンジュゲートを提供する、薬物コンジュゲートである。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチドが薬物又は活性薬剤にコンジュゲートしている、薬物コンジュゲートであり得る。様々な種類の薬物又は活性薬剤が、コンジュゲートに使用されてもよく、以下により詳細に記載される。
特定の実施形態では、コンジュゲートは、抗体及び薬物がリンカーによってともに連結されている、抗体－薬物コンジュゲートである。場合によっては、リンカーは、切断可能なリンカーである。切断可能なリンカーは、１つ以上の切断可能な部分を含むリンカーであり、切断可能な部分は、特定の条件下で解離することができ、したがって、切断可能なリンカーを２つ以上の分離可能な部分に分離することができる１つ以上の結合を含む。例えば、切断可能な部分は、１つ以上の共有結合を含んでいてもよく、１つ以上の共有結合は、特定の条件下で解離又は分離して、切断可能なリンカーを２つ以上の部分に分離することができる。そのような切断可能なリンカーは、抗体－薬物コンジュゲート中に含まれ得るため、その結果、適切な条件下で、切断可能なリンカーが切断され、その薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離するか、又は放出する。
場合によっては、切断可能なリンカーは、２つの切断可能な部分、例えば、第１の切断可能な部分及び第２の切断可能な部分を含む。切断可能な部分は、その薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離するか、又は放出するように、両方の切断可能な部分の切断が必要となるように構成され得る。例えば、切断可能なリンカーの切断は、最初に２つの切断可能な部分のうちの１つを切断し、次いで２つの切断可能な部分の他方を切断することによって達成することができる。特定の実施形態では、切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分と、第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分と、を含む。「切断を妨害する」とは、切断されていない第２の切断可能な部分の存在が、第１の切断可能な部分の切断の可能性を減少させるか、又は切断を実質的に阻害し、したがって、切断可能なリンカーの切断の量を実質的に減少させるか、又は切断を防止することを意味する。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分の切断を妨害することができる。第２の切断可能な部分の存在による第１の切断可能な部分の切断の妨害は、ひいては、抗体からの薬物の放出の量を実質的に減少させるか、又は放出を防止する。例えば、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。
ある場合には、第２の切断可能な部分が、第１の切断可能な部分の切断を妨害するため、切断可能なリンカーの切断は、最初に第２の切断可能な部分を切断し、次いで第１の切断可能な部分を切断することによって達成することができる。第２の切断可能な部分の切断は、第１の切断可能な部分の切断に対する妨害を減少させるか、又はなくすことができ、したがって、第１の切断可能な部分の切断を可能にする。第１の切断可能な部分の切断により、切断可能なリンカーが上述のように２つ以上の部分に解離又は分離して、抗体－薬物コンジュゲートから薬物を放出することができる。場合によっては、第１の切断可能な部分の切断は、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下では実質的に起こらない。実質的にとは、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で、第１の切断可能な部分の約１０％以下の切断が起こること、例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で、第１の切断可能な部分の約９％以下、又は約８％以下、又は約７％以下、又は約６％以下、又は約５％以下、又は約４％以下、又は約３％以下、又は約２％以下、又は約１％以下、又は約０．５％以下、又は約０．１％以下の切断が起こることを意味する。
別の言い方をすれば、第２の切断可能な部分は、第１の切断可能な部分を切断されないように保護することができる。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分を切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。したがって、第２の切断可能な部分の切断により、第１の切断可能な部分を露出させ（例えば、第１の切断可能な部分を脱保護し）、したがって、第１の切断可能な部分の切断を可能にし、切断可能なリンカーの切断が起こり、次いで、上述の薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離又は放出する。特定の場合では、第２の切断可能な部分の切断により、第１の切断可能な部分を、その後の切断に対して露出させるが、第２の切断可能な部分は、切断可能なリンカーの中にはなく、それ自体は切断可能なリンカーの切断を起こさない（すなわち、切断可能なリンカーを切断するために、第１の切断可能な部分の切断が依然として必要である）。
切断可能なリンカーに含まれる切断可能な部分は、各々、酵素的に切断可能な部分であり得る。例えば、第１の切断可能な部分は、第１の酵素的に切断可能な部分であってもよく、第２の切断可能な部分は、第２の酵素的に切断可能な部分であってもよい。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用によって上述のように２つ以上の部分に分離することができる切断可能な部分である。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用によって切断することができる任意の切断可能な部分、例えば、限定されないが、ペプチド、グリコシド等であり得る。場合によっては、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、抗体－薬物コンジュゲートから放出される薬物の所望の作用標的部位等の所望の作用標的部位に存在する。ある場合には、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、全血液、血漿、又は血清等の他の領域に有意な量では存在しない。したがって、酵素的に切断可能な部分の切断は、実質的な切断が所望の作用部位で起こるように制御することができ、一方で、他の領域で、又は抗体－薬物コンジュゲートが所望の作用部位に到達する前に、切断は有意に起こらない。
例えば、本明細書に記載されるように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、がんの治療のために、例えば、がん細胞が存在する所望の作用部位へのがん療法薬の送達のために使用することができる。ある場合には、酵素、例えば、プロテアーゼ酵素カテプシンＢは、がん細胞において過剰発現される、がんについてのバイオマーカーであり得る。がんにおける特定の酵素の過剰発現、したがって局在化を、本開示の抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーに含まれる酵素的に切断可能な部分の文脈で使用して、所望の作用部位（すなわち、がん（及び過剰発現した酵素）の部位）で薬物を特異的に放出させることができる。したがって、いくつかの実施形態では、酵素的に切断可能な部分は、がん細胞において過剰発現される酵素によって切断され得る切断可能な部分（例えば、ペプチド）である。例えば、酵素は、プロテアーゼ酵素カテプシンＢであり得る。したがって、場合によっては、酵素的に切断可能な部分は、プロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）によって切断され得る切断可能な部分（例えば、ペプチド）である。
特定の実施形態では、酵素的に切断可能な部分は、ペプチドである。ペプチドは、切断可能なリンカーにおける使用に好適であり、かつ酵素の酵素作用によって切断することができる、任意のペプチドであり得る。酵素的に切断可能な部分として使用され得るペプチドの非限定的な例としては、例えば、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ等が挙げられる。例えば、上述の第１の切断可能な部分（すなわち、第２の切断可能な部分によって早期切断から保護される切断部分）は、ペプチドを含み得る。切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分（ペプチド）を、プロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）によって切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。場合によっては、第１の切断可能な部分を含むペプチドのアミノ酸残基のうちの１つは、置換基に連結しているか、又は置換基を含み、置換基は、第２の切断可能な部分を含む。場合によっては、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む。
いくつかの実施形態では、酵素的に切断可能な部分は、糖部分、例えば、グリコシド（又はグリコシル）である。ある場合には、グリコシドは、グリコシドを含まない切断可能なリンカーと比較して、切断可能なリンカーの親水性の増加を促進することができる。グリコシドは、切断可能なリンカーにおける使用に好適であり、かつ酵素の酵素作用によって切断することができる、任意のグリコシドであり得る。例えば、第２の切断可能な部分（すなわち、第１の切断可能な部分を早期切断から保護する切断可能な部分）は、グリコシドであり得る。例えば、いくつかの実施形態では、第１の切断可能な部分は、ペプチドを含み、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む。特定の実施形態では、第２の切断可能な部分は、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドである。場合によっては、第２の切断可能な部分は、ガラクトシドである。場合によっては、第２の切断可能な部分は、グルコシドである。場合によっては、第２の切断可能な部分は、マンノシドである。場合によっては、第２の切断可能な部分は、フコシドである。場合によっては、第２の切断可能な部分は、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃである。場合によっては、第２の切断可能な部分は、Ｏ－ＧａｌＮＡｃである。
グリコシドは、グリコシド結合を介して切断可能なリンカーに接続（共有結合）することができる。グリコシド結合は、様々な種類の結合、例えば、限定されないが、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）、Ｎ－グリコシド結合（グリコシルアミン）、Ｓ－グリコシド結合（チオグリコシド）、又はＣ－グリコシド結合（Ｃ－グリコシド又はＣ－グリコシル）を介して、グリコシドを切断可能なリンカーに連結し得る。場合によっては、グリコシド結合は、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）である。ある場合には、グリコシドは、酵素によって接続する切断可能なリンカーから（例えば、グリコシド結合の酵素によって媒介される加水分解を介して）切断され得る。グリコシドを、グリコシドを切断可能なリンカーに接続するグリコシド結合の切断（加水分解）を実行することが可能な任意の好都合な酵素によって、切断可能なリンカーから除去又は切断することができる。グリコシドを切断可能なリンカーに接続するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用され得る酵素の一例は、グリコシダーゼ、例えば、ガラクトシダーゼ、グルコシダーゼ、マンノシダーゼ、フコシダーゼ等である。他の好適な酵素も、グリコシドを切断可能なリンカーに接続するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用され得る。ある場合には、グリコシドを切断可能なリンカーに接続するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用される酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に、又はその付近に見出される。例えば、酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に、又はその付近の細胞において見出される、リソソーム酵素、例えば、リソソームグリコシダーゼであり得る。ある場合には、酵素は、第１の切断可能な部分の切断を媒介する酵素が見出される標的部位、又はその付近で見出される酵素である。
目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）は、ポリペプチドの任意の所望の部位でポリペプチド（例えば、抗体）にコンジュゲートされ得る。したがって、本開示は、例えば、ポリペプチドのＣ末端又はその付近の部位でコンジュゲートされた部分を有する修飾ポリペプチドを提供する。他の例としては、ポリペプチドのＮ末端又はその付近の位置でコンジュゲートされた部分を有する修飾ポリペプチドが挙げられる。例としては、ポリペプチドのＣ末端とＮ末端との間の位置（例えば、ポリペプチドの内部部位）でコンジュゲートされた部分を有する修飾ポリペプチドも挙げられる。上の組み合わせは、修飾ポリペプチドが２つ以上の部分にコンジュゲートされている場合にも可能である。
特定の実施形態では、本開示のコンジュゲートは、アミノ酸残基のα炭素でポリペプチドのアミノ酸残基にコンジュゲートされた薬物又は活性薬剤を含む。別の言い方をすれば、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基の側鎖が、薬物又は活性薬剤に接続する（例えば、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性薬剤に接続する）ように修飾されたポリペプチドを含む。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基のα－炭素が、薬物又は活性薬剤に接続する（例えば、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性薬剤に接続する）ように修飾されたポリペプチドを含む。
本開示の実施形態は、ポリペプチドが、１個以上の部分、例えば、２個の部分、３個の部分、４個の部分、５個の部分、６個の部分、７個の部分、８個の部分、９個の部分、又は１０個以上の部分にコンジュゲートされる、コンジュゲートを含む。部分は、ポリペプチド中の１つ以上の部位でポリペプチドにコンジュゲートされ得る。例えば、１つ以上の部分は、ポリペプチドの単一アミノ酸残基にコンジュゲートされ得る。ある場合には、１つの部分が、ポリペプチドのアミノ酸残基にコンジュゲートされる。他の実施形態では、２つの部分が、ポリペプチドの同じアミノ酸残基にコンジュゲートされ得る。他の実施形態では、第１の部分は、ポリペプチドの第１のアミノ酸残基にコンジュゲートされ、第２の部分は、ポリペプチドの第２のアミノ酸残基にコンジュゲートされる。上述の組み合わせも可能であり、例えば、ポリペプチドは、第１のアミノ酸残基に第１の部分がコンジュゲートされ、第２のアミノ酸残基に２つの他の部分がコンジュゲートされる。他の組み合わせ、例えば、限定されないが、第１のアミノ酸残基に第１及び第２の部分がコンジュゲートされ、第２のアミノ酸残基に第３及び第４の部分がコンジュゲートされるポリペプチド等も可能である。
１つ以上の部分にコンジュゲートされるポリペプチドの１つ以上のアミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸、非天然アミノ酸、又はそれらの組み合わせであり得る。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチドの天然に存在するアミノ酸残基にコンジュゲートされた部分を含み得る。他の場合では、コンジュゲートは、ポリペプチドの非天然アミノ酸残基にコンジュゲートされた部分を含み得る。１つ以上の部分は、上述のように、単一の天然又は非天然アミノ酸残基でポリペプチドにコンジュゲートされ得る。ポリペプチド中の１つ以上の天然又は非天然アミノ酸残基は、本明細書に記載されるように、１つ又は複数の部分にコンジュゲートされ得る。例えば、ポリペプチド中の２つ（又はそれ以上）のアミノ酸残基（例えば、天然又は非天然のアミノ酸残基）は、各々１つ又は２つの部分にコンジュゲートされてもよく、その結果、ポリペプチド中の複数の部位が修飾される。
本明細書に記載されるように、ポリペプチドは、１つ以上の部分にコンジュゲートされ得る。特定の実施形態では、目的の部分は、薬物、活性薬剤、又は検出可能な標識等の化学エンティティである。例えば、薬物（又は活性薬剤）は、ポリペプチドにコンジュゲートされてもよく、又は他の実施形態では、検出可能な標識は、ポリペプチドにコンジュゲートされ得る。したがって、例えば、本開示の実施形態は、限定されないが、以下のものを含む。ポリペプチド及び薬物のコンジュゲート、ポリペプチド及び活性薬剤のコンジュゲート、ポリペプチド及び検出可能な標識のコンジュゲート、２つ以上の薬物及びポリペプチドのコンジュゲート、２つ以上の検出可能な標識及びポリペプチドのコンジュゲート等。
特定の実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体）及び目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）は、カップリング部分を介してコンジュゲートされる。例えば、ポリペプチド及び目的の部分は、各々カップリング部分に結合（例えば、共有結合）してもよく、したがって、カップリング部分を介して、ポリペプチド及び目的の部分を一緒に間接的に結合する。ある場合には、カップリング部分は、ヒドラジニル－インドリル若しくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、又はヒドラジニル－インドリル若しくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物の誘導体を含む。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して、ポリペプチドに目的の部分をカップリングするための一般的なスキームは、以下の一般的な反応スキームに示される。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、本明細書でそれぞれ、ヒドラジノ－ｉｓｏ－Ｐｉｃｔｅｔ－Ｓｐｅｎｇｌｅｒ（ＨＩＰＳ）カップリング部分及びアザ－ヒドラジノ－ｉｓｏ－Ｐｉｃｔｅｔ－Ｓｐｅｎｇｌｅｒ（アザＨＩＰＳ）カップリング部分とも称される。
Figure 2023551203000024
上の反応スキームにおいて、Ｒは、ポリペプチドにコンジュゲートされる（例えば、本明細書に記載の切断可能なリンカーを介してポリペプチドにコンジュゲートされる）目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）を含む。上の反応スキームに示されるように、２－ホルミルグリシン残基（ｆＧｌｙ）を含むポリペプチドを、カップリング部分（例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を含むように修飾された薬物又は活性薬剤と反応させ、カップリング部分に接続したポリペプチドコンジュゲートを生成し、したがって、カップリング部分を介して、ポリペプチドに薬物又は活性薬剤を接続する。
本明細書に記載されるように、この部分は、様々な部分、例えば、限定されないが、化学エンティティ、例えば、検出可能な標識、又は薬物若しくは活性薬剤のうちのいずれかであり得る。Ｒ’及びＲ”は、各々独立して、任意の所望の置換基、例えば、限定されないが、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルであり得る。Ｚは、ＣＲ２１、ＮＲ２２、Ｎ、Ｏ、又はＳであってもよく、Ｒ２１及びＲ２２は、各々独立して、上のＲ’及びＲ”について記載される置換基のうちのいずれかから選択される。
本明細書に記載されるコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分も可能である。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、リンカーに接続する（例えば、共有結合する）ように修飾され得る。したがって、本開示の実施形態は、リンカーを介して薬物又は活性薬剤に接続されるヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含む。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物又は活性薬剤にカップリングし得るリンカーの様々な実施形態を、本明細書で詳細に記載する。例えば、場合によっては、リンカーは、切断可能なリンカー、例えば、本明細書に記載の切断可能なリンカーである。
特定の実施形態では、ポリペプチドは、目的の部分にコンジュゲートしてもよく、ポリペプチドは、目的の部分にコンジュゲート化する前に修飾される。ポリペプチドの修飾は、目的の部分にコンジュゲート化するのに適した１つ以上の反応性基を含有する修飾ポリペプチドを生成し得る。ある場合には、ポリペプチドは、１つ以上のアミノ酸残基で修飾され、目的の部分（例えば、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分等のカップリング部分を含む部分）にコンジュゲート化するのに適した１つ以上の反応性基を提供し得る。例えば、ポリペプチドは、反応性アルデヒド基（例えば、反応性アルデヒド）を含むように修飾され得る。反応性アルデヒドは、「アルデヒドタグ」又は「ａｌｄ－タグ」に含まれてもよく、これらは、本明細書で使用される場合、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン残基（本明細書では「ＦＧｌｙ」と称される）を含有するように変換された、スルファターゼモチーフ由来のアミノ酸配列（例えば、Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲ）を指す。ＦＧＥによって生成されるＦＧｌｙ残基は、「ホルミルグリシン」としても称され得る。言い換えれば、「アルデヒドタグ」という用語は、「変換された」スルファターゼモチーフ（すなわち、システイン又はセリン残基がＦＧＥの作用によってＦＧｌｙに変換されたスルファターゼモチーフ、例えば、Ｌ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲ）を含むアミノ酸配列を指すために本明細書で使用される。変換されたスルファターゼモチーフは、「変換されていない」スルファターゼモチーフ（すなわち、システイン又はセリン残基がＦＧＥによってＦＧｌｙに変換されていないが、変換されることは可能であるスルファターゼモチーフ、例えば、配列Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲを有する変換されていないスルファターゼモチーフ）を含むアミノ酸配列に由来し得る。スルファターゼモチーフ上のホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用の文脈において使用される場合の「変換」とは、スルファターゼモチーフ中のシステイン又はセリン残基からホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基への（例えば、ＣｙｓからＦＧｌｙへ、又はＳｅｒからＦＧｌｙへの）生化学的修飾を指す。部位特異的タンパク質修飾におけるアルデヒドタグ及びその使用の更なる態様は、米国特許第７，９８５，７８３号及び米国特許第８，７２９，２３２号に記載され、これらの各々の開示は、参照によって本明細書に組み込まれる。
ある場合には、ＦＧｌｙ残基を含有する修飾ポリペプチドは、ＦＧｌｙと化合物（例えば、上述のように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する化合物）との反応によって、目的の部分にコンジュゲートされ得る。例えば、ＦＧｌｙ含有ポリペプチドを、ポリペプチドへの薬物のコンジュゲート化を提供するのに適した条件下、反応性パートナーを含有する薬物と接触させてもよい。場合によっては、反応性パートナーを含有する薬物は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含み得る。例えば、薬物又は活性薬剤は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含むように修飾され得る。ある場合には、薬物又は活性薬剤は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに接続し、例えば、リンカー（例えば、本明細書に詳細に記載される切断可能なリンカー）を介して、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに共有結合する。
特定の実施形態では、本開示のコンジュゲートは、少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を有するポリペプチド（例えば、抗体）を含む。ポリペプチドの修飾アミノ酸残基は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物又は活性薬剤にカップリングされ得る。特定の実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体）の修飾アミノ酸残基は、上述のようにＦＧｌｙ残基に変換されたシステイン又はセリン残基に由来し得る。特定の実施形態では、ＦＧｌｙ残基は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物又は活性薬剤にコンジュゲートし、薬物又は活性薬剤がヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介してポリペプチドにコンジュゲートされる本開示のコンジュゲートを提供する。本明細書で使用される場合、ＦＧｌｙ’という用語は、目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）にカップリングされるポリペプチド（例えば、抗体）の修飾アミノ酸残基を指す。
特定の実施形態では、コンジュゲートは、本明細書に記載の少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を含み、修飾アミノ酸残基は、本明細書に記載のリンカー（切断可能なリンカー）に接続し、次いで薬物又は活性薬剤に接続する。例えば、コンジュゲートは、上述の少なくとも１つの修飾アミノ酸残基（ＦＧｌｙ’）を含み得る。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉ）のコンジュゲートであり、
Figure 2023551203000025
 式中、
Ｚが、ＣＲ４又はＮであり、
Ｘが、Ｏ又はＮＲ４であり、
Ｒ１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ２及びＲ３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、及び置換アルキニルから選択され、
各Ｒ６が、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
ｋが、１～１０の整数であり、
Ｒ７が、第２の酵素的に切断可能な部分を含み、
Ｌ１が、第１のリンカーであり、
Ｌ２が、第２のリンカーであり、
Ｗ１が、薬物であり、
Ｗ２が、抗体である。
式（Ｉ）の特定の実施形態では、ｋが、２であり、コンジュゲートは、式（Ｉａ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000026
式（Ｉ）の特定の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｂ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000027
式（Ｉ）の特定の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｃ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000028
式（Ｉ）の特定の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｄ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000029
式（Ｉ）の特定の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｅ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000030
式（Ｉ）の特定の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｆ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000031
式（Ｉ）の特定の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｇ）のコンジュゲートである。
Figure 2023551203000032
式（Ｉ）のコンジュゲートに関連する置換基は、以下により詳細に記載される。式（Ｉ）への言及は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、（Ｉｆ）及び（Ｉｇ）も包含することを意図している。
特定の実施形態では、Ｚは、ＣＲ４又はＮである。特定の実施形態では、Ｚは、ＣＲ４である。特定の実施形態では、Ｚは、Ｎである。
特定の実施形態では、Ｘは、Ｏ又はＮＲ４である。場合によっては、Ｘは、Ｏである。場合によっては、Ｘは、ＮＲ４である。場合によっては、Ｘは、ＮＨである。
特定の実施形態では、Ｒ１は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ１は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ１は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ１は、アルキニル若しくは置換アルキニル、例えば、Ｃ２～６アルキニル若しくはＣ２～６置換アルキニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ１は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ１は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ１は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。
特定の実施形態では、Ｒ２は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ２は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ２は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ２は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ２は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ２は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ２は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ２は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ２は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、Ｒ３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ３は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ３は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、環状に連結され、５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、環状に連結され、６員のヘテロシクリルを形成する。
特定の実施形態では、各Ｒ４は、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
各Ｒ４についての様々な可能性は、以下により詳細に記載される。特定の実施形態では、Ｒ４は、水素である。特定の実施形態では、各Ｒ４は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ４は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ等のハロゲンである。特定の実施形態では、Ｒ４は、Ｆである。特定の実施形態では、Ｒ４は、Ｃｌである。特定の実施形態では、Ｒ４は、Ｂｒである。特定の実施形態では、Ｒ４は、Ｉである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ４は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ４は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリール（例えば、フェニル若しくは置換フェニル）である。特定の実施形態では、Ｒ４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、各Ｒ５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、及び置換アルキニルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ５は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ５は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ５は、エチルである。特定の実施形態では、Ｒ５は、プロピル（例えば、ｎ－プロピル又はイソプロピル）である。特定の実施形態では、Ｒ５は、ブチル（例えば、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、又はｔ－ブチル）である。特定の実施形態では、Ｒ５は、ペンチル（例えば、ｎ－ペンチル又はネオペンチル等）である。特定の実施形態では、Ｒ５は、ネオペンチルである。特定の実施形態では、Ｒ５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ５は、アルキニル又は置換アルキニルである。
特定の実施形態では、各Ｒ６は、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ６は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ６は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、エチルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、プロピル（例えば、ｎ－プロピル又はイソプロピル）である。特定の実施形態では、Ｒ６は、ブチル（例えば、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、又はｔ－ブチル）である。特定の実施形態では、Ｒ６は、ペンチル（例えば、ｎ－ペンチル又はネオペンチル等）である。特定の実施形態では、Ｒ６は、ネオペンチルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、アルキニル又は置換アルキニルである。
特定の実施形態では、Ｒ６は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリール（例えば、フェニル若しくは置換フェニル）である。特定の実施形態では、Ｒ６は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ６は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、Ｒ６は、アミノ酸の側鎖を表す。例えば、Ｒ６は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、及びアミノ酸類似体を含む、アミノ酸残基のα炭素に接続した置換基を表し得る。ある場合には、Ｒ６は、天然に存在するタンパク質中に見出されるアミノ酸の側鎖（例えば、Ａｌａ又はＡ、Ｃｙｓ又はＣ、Ａｓｐ又はＤ、Ｇｌｕ又はＥ、Ｐｈｅ又はＦ、Ｇｌｙ又はＧ、Ｈｉｓ又はＨ、Ｉｌｅ又はＩ、Ｌｙｓ又はＫ、Ｌｅｕ又はＬ、Ｍｅｔ又はＭ、Ａｓｎ又はＮ、Ｐｒｏ又はＰ、Ｇｌｎ又はＱ、Ａｒｇ又はＲ、Ｓｅｒ又はＳ、Ｔｈｒ又はＴ、Ｖａｌ又はＶ、Ｔｒｐ又はＷ、Ｔｙｒ又はＹの側鎖）を表す。特定の実施形態では、Ｒ６は、バリン（Ｖａｌ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ６は、イソプロピルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、アラニン（Ａｌａ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ６は、メチルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ６は、ベンジルである。特定の実施形態では、Ｒ６は、リジン（Ｌｙｓ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ６は、４－アミノ－ブチルである。
特定の実施形態では、ｋは、１～１０の整数である。特定の実施形態では、ｋは、１である。特定の実施形態では、ｋは、２である。特定の実施形態では、ｋは、３である。特定の実施形態では、ｋは、４である。特定の実施形態では、ｋは、５である。特定の実施形態では、ｋは、６である。特定の実施形態では、ｋは、７である。特定の実施形態では、ｋは、８である。特定の実施形態では、ｋは、９である。特定の実施形態では、ｋは、１０である。
特定の実施形態では、括弧－下付きｋによって囲まれる式（Ｉ）の部分は、１つ以上のアミノ酸（例えば、ペプチド）を示す。例えば、上述のように、本開示のコンジュゲートは、第１の酵素的に切断可能な部分を含んでいてもよく、第１の酵素的に切断可能な部分は、ペプチドである。式（Ｉ）に表されるように、１つ以上のアミノ酸は、第１の酵素的に切断可能な部分を含むペプチドであり得る。
特定の実施形態では、Ｒ７は、本明細書に記載の第２の酵素的に切断可能な部分である。例えば、Ｒ７は、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシドを含み得る。場合によっては、Ｒ７は、ガラクトシドを含む。場合によっては、Ｒ７は、グルコシドを含む。場合によっては、Ｒ７は、マンノシドを含む。場合によっては、Ｒ７は、フコシドを含む。場合によっては、Ｒ７は、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃを含む。場合によっては、Ｒ７は、Ｏ－ＧａｌＮＡｃを含む。
特定の実施形態では、Ｌ１は、第１のリンカーである。Ｌ１に好適なリンカーは、以下により詳細に記載される。
特定の実施形態では、Ｌ２は、第２のリンカーである。Ｌ２に好適なリンカーは、以下により詳細に記載される。
特定の実施形態では、Ｗ１は、薬物（又は活性薬剤）である。本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物に使用するのに適した薬物及び活性薬剤の更なる説明は、以下により詳細に見出される。
特定の実施形態では、Ｗ２は、抗体である。主題のコンジュゲートにおける用途を見出す抗体の更なる記載は、本明細書の開示中に見出される。
特定の実施形態では、式（Ｉ）のコンジュゲートは、１つ以上のリンカーを含む。リンカーを利用して、目的の１つ以上の部分及び／又は１つ以上のポリペプチドにカップリング部分を結合し得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、ポリペプチド、又は薬物等の化学エンティティのいずれかに、カップリング部分を結合する。リンカーは、任意の好都合な位置で（例えば、本明細書に記載されるように）カップリング部分に結合され得る（例えば、共有結合され得る）。例えば、リンカーは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物（例えば、マイタンシン又はアウリスタチン）に接続し得る。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を使用して、リンカー（したがって薬物）をポリペプチド、例えば、抗体にコンジュゲートし得る。例えば、カップリング部分を使用して、リンカー（したがって薬物）を、ポリペプチドの修飾アミノ酸残基、例えば、抗体のＦＧｌｙ残基（ｒｅｓｉｄｅ）にコンジュゲートし得る。
特定の実施形態では、リンカーは、１つ以上のリンカー、例えば、第１のリンカーＬ１及び第２のリンカーＬ２を含む。加えて、リンカーは、本明細書に記載されるように、１つ以上の切断可能な部分（例えば、第１の切断可能な部分及び第２の切断可能な部分）を含み得る。ある場合には、リンカーは、１つ以上のリンカー、例えば、第１のリンカーＬ１及び第２のリンカーＬ２を含む。例えば、リンカーは、第１の切断可能な部分をカップリング部分（例えば、本明細書に記載のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）に連結する第１のリンカー（Ｌ１）と、第１の切断可能な部分を化学エンティティ、例えば、本明細書に記載の薬物又は活性薬剤に連結する第２のリンカー（Ｌ２）と、を含み得る。したがって、リンカーは、第１の切断可能な部分を抗体に（例えば、本明細書に記載のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して）連結する第１のリンカー（Ｌ１）と、第１の切断可能な部分を化学エンティティ、例えば、本明細書に記載の薬物又は活性薬剤に連結する第２のリンカー（Ｌ２）と、を含み得る。
例えば、上の式（Ｉ）に示されるように、Ｌ１は、カップリング部分を介してＷ２に接続し、したがって、Ｗ２は、カップリング部分を介して第１のリンカーＬ１に間接的に結合する。上述のように、Ｗ２は、抗体であり、したがって、Ｌ１は、カップリング部分を介して抗体に接続し、例えば、第１のリンカーＬ１は、カップリング部分を介して（例えば、本明細書に記載のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して）抗体に間接的に結合する。加えて、上の式（Ｉ）に示されるように、Ｌ１は、Ｌ２に（間接的に）接続し、Ｌ２は、Ｗ１に接続している。上述のように、Ｗ１は、薬物であり、したがって、第２のリンカーＬ２は、第１のリンカーＬ１及びカップリング部分（例えば、本明細書に記載のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を介して抗体Ｗ２に薬物を接続する。
任意の好都合なリンカーが、主題のコンジュゲート及び化合物における第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）に利用され得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換アルキルアミド、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アルキル又は置換アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アルケニル又は置換アルケニル基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アルキニル又は置換アルキニル基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アルコキシ又は置換アルコキシ基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アミノ又は置換アミノ基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、カルボキシル又はカルボキシルエステル基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アシルアミノ基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アルキルアミド又は置換アルキルアミド基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、アリール又は置換アリール基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリール基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、シクロアルキル又は置換シクロアルキル基を含み得る。特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリル基を含み得る。
特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ１）及び第２のリンカー（Ｌ２）は、各々独立して、ポリマーを含み得る。例えば、ポリマーは、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー（例えば、ホモポリマー及びコポリマーが非置換であるか、又はアルキル基で一端で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、それらの組み合わせ等を含む、ポリアルキレングリコール及びその誘導体を含み得る。特定の実施形態では、ポリマーは、ポリアルキレングリコールである。特定の実施形態では、ポリマーは、ポリエチレングリコールである。他のリンカーも、以下により詳細に記載されるコンジュゲート及び化合物において示されるように、可能である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、式－（Ｌ１１）ａ－（Ｌ１２）ｂ－（Ｌ１３）ｃ－（Ｌ１４）ｄ－によって記載される第１のリンカーであり、式中、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１３、及びＬ１４は、各々独立して、第１のリンカーサブユニットであり、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、及びｄの合計は、１～４である。
特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、１である。特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、２である。特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、３である。特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、４である。特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃ及びｄは、各々１である。特定の実施形態では、ａ、ｂ及びｃは、各々１であり、ｄは、０である。特定の実施形態では、ａ及びｂは、各々１であり、ｃ及びｄは、各々０である。特定の実施形態では、ａは、１であり、ｂ、ｃ及びｄは、各々０である。
特定の実施形態では、Ｌ１１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続している（例えば、上の式（Ｉ）において示される通り）。特定の実施形態では、Ｌ１２は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｌ１３は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｌ１４は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。
任意の好都合なリンカーサブユニットが、第１のリンカーＬ１に利用され得る。目的のリンカーサブユニットとしては、限定されないが、ポリエチレングリコール、ポリエチレン及びポリアクリレート、アミノ酸残基、炭水化物系ポリマー又はその炭水化物残基及びその誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基等のポリマーの単位、それらの組み合わせ、並びにそれらの置換態様が挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１３、及びＬ１４の各々が（存在する場合）、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、及びジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１１は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１１は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１２は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１２は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１３は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１３は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１４は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１４は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１４は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１４は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１４は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１４は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、－（Ｌ１１）ａ－（Ｌ１２）ｂ－（Ｌ１３）ｃ－（Ｌ１４）ｄ－を含む第１のリンカーであり、式中、
－（Ｌ１１）ａ－が、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－であり、
－（Ｌ１２）ｂ－が、－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－であり、
－（Ｌ１３）ｃ－が、－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－であり、
－（Ｌ１４）ｄ－が、－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－であり、
式中、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４は、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４は、存在する場合、共有結合又は連結官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、及びｄの合計は、１～４である。
上述のように、特定の実施形態では、Ｌ１１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続している（例えば、上の式（Ｉ）において示される通り）。したがって、特定の実施形態では、Ｔ１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続している（例えば、上の式（Ｉ）において示される通り）。特定の実施形態では、Ｖ１は、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｌ１２は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ２は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続しているか、又はＶ２は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｌ１３は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ３は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続しているか、又はＶ３は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｌ１４は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ４は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続しているか、又はＶ４は、存在する場合、第１の切断可能な部分に接続している。
テザー基Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４に関して、任意の好都合なテザー基が、主題のリンカーで利用され得る。いくつかの実施形態では、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４は、各々、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから独立して選択される１つ以上の基を含み、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数である。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル又は置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルを含む。特定の実施形態では、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖のアルキル基である。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、アルキル又は置換アルキル、例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、又は（Ｃ１～Ｃ１０）アルキル、又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、又は（Ｃ１～Ｃ３）アルキルであり得る。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ２－アルキルである。例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、アルキレン又は置換アルキレン、例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキレン、又は（Ｃ１～Ｃ１０）アルキレン、又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキレン、又は（Ｃ１～Ｃ３）アルキレンであり得る。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ２－アルキレン（例えば、ＣＨ２ＣＨ２）である。
特定の実施形態では、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖の置換アルキル基である。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換アルキル、例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、又は置換（Ｃ１～Ｃ１０）アルキル、又は置換（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、又は置換（Ｃ１～Ｃ３）アルキルであり得る。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ２－アルキルである。例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換アルキレン、例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキレン、又は置換（Ｃ１～Ｃ１０）アルキレン、又は置換（Ｃ１～Ｃ６）アルキレン、又は置換（Ｃ１～Ｃ３）アルキレンであり得る。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ２－アルキレンである。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、又は置換ヘテロシクリルを含む。場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、アリール又は置換アリールを含む。例えば、アリールは、フェニルであり得る。ある場合には、置換アリールは、置換フェニルである。置換フェニルは、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される１つ以上の置換基で置換され得る。場合によっては、置換アリールは、置換フェニルであり、置換基は、本明細書に記載の第２の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド）を含む。
場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールを含む。場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、シクロアルキル又は置換シクロアルキルを含む。場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを含む。場合によっては、置換ヘテロアリール、置換シクロアルキル、又は置換ヘテロシクリル上の置換基は、本明細書に記載の第２の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド）を含む。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、ＥＤＡ含有テザーを含む。特定の実施形態では、（ＥＤＡ）ｗは、１つ以上のＥＤＡ部分を含み、例えば、ｗが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、又は６の整数である）。連結したエチレンジアミン（ＥＤＡ）部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換され得る。特定の実施形態では、ＥＤＡ部分は、以下の構造
Figure 2023551203000033
 によって記載され、
式中、ｙが、１～６、又は０若しくは１の整数であり、各Ｒ１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、ｙは、１、２、３、４、５、又は６である。特定の実施形態では、ｙは、１であり、ｒは、０である。特定の実施形態では、ｙは、１であり、ｒは、１である。特定の実施形態では、ｙは、２であり、ｒは、０である。特定の実施形態では、ｙは、２であり、ｒは、１である。特定の実施形態では、各Ｒ１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。特定の実施形態では、ＥＤＡの任意の２つの隣接するＲ１２基は、環状に連結され、例えば、ピペラジニル環を形成してもよい。特定の実施形態では、ｙは、１であり、２つの隣接するＲ１２基は、アルキル基であり、環状に連結され、ピペラジニル環を形成する。特定の実施形態では、ｙは、１であり、隣接するＲ１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）、及び置換アルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨ又はプロピル－ＯＨ）から選択される。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分（本明細書では、ピペリジン－４－アミノ、Ｐ４Ａとも称される）を含む。４ＡＰ部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換され得る。特定の実施形態では、４ＡＰ部分は、以下の構造
Figure 2023551203000034
 によって記載され、
式中、Ｒ１２が、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコール、又は修飾ポリエチレングリコール）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１２は、ポリエチレングリコール部分である。特定の実施形態では、Ｒ１２は、カルボキシ修飾ポリエチレングリコールである。
特定の実施形態では、Ｒ１２は、以下の式によって記載されるポリエチレングリコール部分（ＰＥＧ）ｋを含み、以下の構造
Figure 2023551203000035
 によって表されてもよく、
式中、ｋが、１～２０、例えば、１～１８、又は１～１６、又は１～１４、又は１～１２、又は１～１０、又は１～８、又は１～６、又は１～４、又は１若しくは２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０の整数である。場合によっては、ｋは、２である。特定の実施形態では、Ｒ１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、又はＣＯＯＲから選択され、Ｒは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１７は、ＣＯＯＨである。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、（ＰＥＧ）ｎを含み、式中、（ＰＥＧ）ｎが、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール連結単位である。特定の実施形態では、（ＰＥＧ）ｎは、以下の構造
Figure 2023551203000036
 によって記載され、
式中、ｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。場合によっては、ｎは、２である。場合によっては、ｎは、３である。場合によっては、ｎは、６である。場合によっては、ｎは、１２である。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、（ＡＡ）ｐを含み、式中、ＡＡが、アミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用され得る。目的のアミノ酸としては、限定されないが、Ｌ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主なアルファ－アミノ酸及びベータ－アラニンのうちのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸類似体）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸又は天然に存在しないベータ－アミノ酸等が挙げられる。特定の実施形態では、ｐは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。特定の実施形態では、ｐは、１である。特定の実施形態では、ｐは、２である。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及び／又はＴ４）は、式－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－によって記載される部分を含み、式中、ｈが０であるか、又はｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は１２の整数である。特定の実施形態では、ｈは、１である。特定の実施形態では、ｈは、２である。特定の実施形態では、Ｒ１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１３は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、Ｒ１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。これらの実施形態では、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールは、Ｒ１３について上に記載されている通りである。
連結官能基Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４に関して、任意の好都合な連結官能基が、第１のリンカーＬ１で利用され得る。目的の連結官能基としては、限定されないが、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、チオホスホライデート等が挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４は、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、ｑは、１～６の整数である。特定の実施形態では、ｑは、１～６（例えば、１、２、３、４、５、又は６）の整数である。特定の実施形態では、ｑは、１である。特定の実施形態では、ｑは、２である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
各Ｒ１５についての様々な可能性は、以下により詳細に記載される。特定の実施形態では、Ｒ１５は、水素である。特定の実施形態では、各Ｒ１５は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、各Ｒ１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態では、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル置換基は、Ｒ１５について上に記載されている通りである。
特定の実施形態では、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、又はエステルを含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、アセタール基を含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、ジスルフィドを含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、ヒドラジンを含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、エステルを含む。
上述のように、いくつかの実施形態では、Ｌ１は、（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－を含む第１のリンカーであり、ここで、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、及びｄの合計は、１～４である。
いくつかの実施形態では、第１のリンカーＬ１において、
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル及び置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、ｑが、１～６の整数であり、
式中、
（ＰＥＧ）ｎが、
Figure 2023551203000037
 であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造
Figure 2023551203000038
 を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
Figure 2023551203000039
 であり、
ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｐが、１～２０の整数であり、
各Ｒ１５及びＲ１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。
特定の実施形態において、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４、並びにＶ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４は、以下から選択される。
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ２が、－ＮＨ－であり、
Ｔ３が、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、
ｄが、０である（すなわち、Ｔ４及びＶ４が存在しない）。
特定の実施形態では、上のリンカー構造の左側は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続し、上のリンカー構造の右側は、第１の切断可能な部分に接続している。例えば、第１の切断可能な部分がペプチドを含む場合、上のリンカー構造の右側は、第１の切断可能な部分を含むペプチドのアミノ酸に接続し得る。場合によっては、上のリンカー構造の右側のカルボニル基は、第１の切断可能な部分を含むペプチドのアミノ酸とアミド結合を形成し得る。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、式－（Ｌ２１）ｅ－（Ｌ２２）ｆ－（Ｌ２３）ｇ－（Ｌ２４）ｈ－によって記載される第２のリンカーであり、式中、Ｌ２１、Ｌ２２、Ｌ２３、及びＬ２４は、各々独立して、第２のリンカーサブユニットであり、ここで、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈは、各々独立して、０又は１であり、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈの合計は、０～４である。
特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇ及びｈの合計は、０である。これらの場合では、第２のリンカーＬ２は存在しない。別の言い方をすれば、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈの合計が０である場合、第２のリンカーＬ２は、共有結合である。特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇ及びｈの合計は、１である。特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇ及びｈの合計は、２である。特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇ及びｈの合計は、３である。特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇ及びｈの合計は、４である。特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇ及びｈは、各々１である。特定の実施形態では、ｅ、ｆ及びｇは、各々１であり、ｈは、０である。特定の実施形態では、ｅ及びｆは、各々１であり、ｇ及びｈは、各々０である。特定の実施形態では、ｅは、１であり、ｆ、ｇ及びｈは、各々０である。
特定の実施形態では、Ｌ２１は、薬物（例えば、上の式（Ｉ）に示されるようなＷ１）に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２２は、存在する場合、薬物に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２３は、存在する場合、薬物に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２４は、存在する場合、薬物に接続している。
任意の好都合なリンカーサブユニットが、第２のリンカーＬ２に利用され得る。目的のリンカーサブユニットとしては、限定されないが、ポリエチレングリコール、ポリエチレン及びポリアクリレート、アミノ酸残基、炭水化物系ポリマー又はその炭水化物残基及びその誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基等のポリマーの単位、それらの組み合わせ、並びにそれらの置換態様が挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｌ２１、Ｌ２２、Ｌ２３、及びＬ２４の各々が（存在する場合）、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、及びジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ２１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２１は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２１は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ２２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２２は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２２は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ２３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２３は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２３は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ２４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２４は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２４は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２４は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２４は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２４は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２４は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、－（Ｌ２１）ｅ－（Ｌ２２）ｆ－（Ｌ２３）ｇ－（Ｌ２４）ｈ－を含む第２のリンカーであり、式中、
－（Ｌ２１）ｅ－が、－（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－であり、
－（Ｌ２２）ｆ－が、－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－であり、
－（Ｌ２３）ｇ－が、－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－であり、
－（Ｌ２４）ｈ－が、－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－であり、
式中、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８は、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８は、存在する場合、共有結合又は連結官能基であり、
ｅ、ｆ、ｇ、及びｈは、各々独立して、０又は１であり、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈの合計は、０～４である。
特定の実施形態では、Ｌ２１は、第１の切断可能な部分に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ５は、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｖ５は、薬物（例えば、上の式（Ｉ）に示されるようなＷ１）に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２２は、存在する場合、薬物に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ６は、存在する場合、薬物に接続しているか、又はＶ６は、存在する場合、薬物に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２３は、存在する場合、薬物に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ７は、存在する場合、薬物に接続しているか、又はＶ７は、存在する場合、薬物に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２４は、存在する場合、薬物に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ８は、存在する場合、薬物に接続しているか、又はＶ８は、存在する場合、薬物に接続している。
テザー基Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８に関して、任意の好都合なテザー基が、主題のリンカーで利用され得る。いくつかの実施形態では、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８は、各々、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから独立して選択される１つ以上の基を含み、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数である。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル又は置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルを含む。特定の実施形態では、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖のアルキル基である。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、アルキル又は置換アルキル、例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、又は（Ｃ１～Ｃ１０）アルキル、又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、又は（Ｃ１～Ｃ３）アルキルであり得る。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ２－アルキルである。例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、アルキレン又は置換アルキレン、例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキレン、又は（Ｃ１～Ｃ１０）アルキレン、又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキレン、又は（Ｃ１～Ｃ３）アルキレンであり得る。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ２－アルキレン（例えば、ＣＨ２ＣＨ２）である。場合によっては、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ１－アルキレン（例えば、ＣＨ２）である。
特定の実施形態では、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖の置換アルキル基である。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換アルキル、例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、又は置換（Ｃ１～Ｃ１０）アルキル、又は置換（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、又は置換（Ｃ１～Ｃ３）アルキルであり得る。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ２－アルキルである。例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換アルキレン、例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキレン、又は置換（Ｃ１～Ｃ１０）アルキレン、又は置換（Ｃ１～Ｃ６）アルキレン、又は置換（Ｃ１～Ｃ３）アルキレンであり得る。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ２－アルキレンである。場合によっては、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ１－アルキレンである。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、又は置換ヘテロシクリルを含む。場合によっては、テザー基は、アリール又は置換アリールを含む。例えば、アリールは、フェニル又は置換フェニルであり得る。場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールを含む。場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、シクロアルキル又は置換シクロアルキルを含む。場合によっては、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを含む。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、上述のＥＤＡ部分、例えば、以下の構造によって記載されるＥＤＡ部分
Figure 2023551203000040
 を含み、
式中、ｙが、１～６、又は０若しくは１の整数であり、各Ｒ１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、ｙは、１、２、３、４、５、又は６である。特定の実施形態では、ｙは、１であり、ｒは、０である。特定の実施形態では、ｙは、１であり、ｒは、１である。特定の実施形態では、ｙは、２であり、ｒは、０である。特定の実施形態では、ｙは、２であり、ｒは、１である。特定の実施形態では、各Ｒ１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。特定の実施形態では、ＥＤＡの任意の２つの隣接するＲ１２基は、環状に連結され、例えば、ピペラジニル環を形成してもよい。特定の実施形態では、ｙは、１であり、２つの隣接するＲ１２基は、アルキル基であり、環状に連結され、ピペラジニル環を形成する。特定の実施形態では、ｙは、１であり、隣接するＲ１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）、及び置換アルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨ又はプロピル－ＯＨ）から選択される。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、上述の４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分、例えば、以下の構造によって記載される４ＡＰ部分
Figure 2023551203000041
 を含み、
式中、Ｒ１２が、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコール、又は修飾ポリエチレングリコール）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１２は、ポリエチレングリコール部分である。特定の実施形態では、Ｒ１２は、カルボキシ修飾ポリエチレングリコールである。
特定の実施形態では、Ｒ１２は、以下の式によって記載されるポリエチレングリコール部分（ＰＥＧ）ｋを含み、以下の構造
Figure 2023551203000042
 によって表されてもよく、
式中、ｋが、１～２０、例えば、１～１８、又は１～１６、又は１～１４、又は１～１２、又は１～１０、又は１～８、又は１～６、又は１～４、又は１若しくは２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０の整数である。場合によっては、ｋは、２である。特定の実施形態では、Ｒ１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、又はＣＯＯＲから選択され、Ｒは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１７は、ＣＯＯＨである。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、上述のポリエチレングリコール部分（ＰＥＧ）ｎ、例えば、以下の構造によって記載される（ＰＥＧ）ｎ部分
Figure 2023551203000043
 を含み、
式中、ｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。場合によっては、ｎは、２である。場合によっては、ｎは、３である。場合によっては、ｎは、６である。場合によっては、ｎは、１２である。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、（ＡＡ）ｐを含み、式中、ＡＡが、アミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用され得る。目的のアミノ酸としては、限定されないが、Ｌ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主なアルファ－アミノ酸及びベータ－アラニンのうちのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸類似体）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸又は天然に存在しないベータ－アミノ酸等が挙げられる。特定の実施形態では、ｐは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。特定の実施形態では、ｐは、１である。特定の実施形態では、ｐは、２である。
特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及び／又はＴ８）は、式－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－によって記載される部分を含み、式中、ｈが０であるか、又はｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は１２の整数である。特定の実施形態では、ｈは、１である。特定の実施形態では、ｈは、２である。特定の実施形態では、Ｒ１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態では、Ｒ１３は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、Ｒ１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。これらの実施形態では、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールは、Ｒ１３について上に記載されている通りである。
連結官能基Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８に関して、任意の好都合な連結官能基が、第２のリンカーＬ２で利用され得る。目的の連結官能基としては、限定されないが、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、チオホスホライデート等が挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８は、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、ｑは、１～６の整数である。特定の実施形態では、ｑは、１～６（例えば、１、２、３、４、５、又は６）の整数である。特定の実施形態では、ｑは、１である。特定の実施形態では、ｑは、２である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
各Ｒ１５についての様々な可能性は、以下により詳細に記載される。特定の実施形態では、Ｒ１５は、水素である。特定の実施形態では、各Ｒ１５は、水素である。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキル若しくはＣ１～６置換アルキル、又はＣ１～４アルキル若しくはＣ１～４置換アルキル、又はＣ１～３アルキル若しくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニル若しくはＣ２～６置換アルケニル、又はＣ２～４アルケニル若しくはＣ２～４置換アルケニル、又はＣ２～３アルケニル若しくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、スルホニルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリール若しくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリール若しくはＣ５置換アリール、又はＣ６アリール若しくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリール若しくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリール若しくはＣ５置換ヘテロアリール、又はＣ６ヘテロアリール若しくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキル若しくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキル若しくはＣ３～６置換シクロアルキル、又はＣ３～５シクロアルキル若しくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態では、Ｒ１５は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリル若しくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリル若しくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、又はＣ３～５ヘテロシクリル若しくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態では、各Ｒ１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態では、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル置換基は、Ｒ１５について上に記載されている通りである。
特定の実施形態では、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、又はエステルを含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、アセタール基を含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、ジスルフィドを含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、ヒドラジンを含む。いくつかの実施形態では、テザー基は、エステルを含む。
上述のように、いくつかの実施形態では、Ｌ２は、－（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－を含む第２のリンカーであり、ここで、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈが、各々独立して、０又は１であり、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈの合計が、０～４である。
いくつかの実施形態では、第２のリンカーＬ２において、
Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８が、各々独立して、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、若しくは置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、ｑが、１～６の整数であり、
式中、
（ＰＥＧ）ｎが、
Figure 2023551203000044
 であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造
Figure 2023551203000045
 を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
Figure 2023551203000046
 であり、
ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｐが、１～２０の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。
特定の実施形態では、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８、並びにＶ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８は、存在しない（すなわち、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈの合計は、０である）。
特定の実施形態では、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８、並びにＶ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８は、以下から選択される。
Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－Ｃ（Ｏ）－であり、
ｆが、０であり（すなわち、Ｔ６及びＶ６が存在せず）、
ｇが、０であり（すなわち、Ｔ７及びＶ７が存在せず）、
ｈが、０である（すなわち、Ｔ８及びＶ８が存在しない）。
特定の実施形態では、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８、並びにＶ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８は、以下から選択される。
Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯＮＲ１５－であり、
Ｔ６が、アルキルであり、Ｖ６が、－ＣＯ－であり、
ｇが、０であり（すなわち、Ｔ７及びＶ７が存在せず）、
ｈが、０である（すなわち、Ｔ８及びＶ８が存在しない）。
特定の実施形態では、上のリンカー構造の左側は、第１の切断可能な部分に接続し、上のリンカー構造の右側は、薬物に接続している。
上の構造において示される化学エンティティ、リンカー及びカップリング部分のうちのいずれかは、主題の化合物及びコンジュゲートにおける使用に適合され得る。
ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、及びコンジュゲートを生成するための方法に関する追加の開示は、米国特許第９，３１０，３７４号及び米国特許第９，４９３，４１３号に見出され、これらの各々の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
コンジュゲートを生成するのに有用な化合物
本開示は、本明細書に記載のコンジュゲートを生成するのに有用なヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物を提供する。特定の実施形態では、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物は、抗体と薬物又は活性薬剤とのコンジュゲート化に有用なカップリング部分であり得る。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物は、抗体に結合し、薬物にも結合し、したがって、抗体と薬物とをともに間接的に結合し得る。
特定の実施形態では、化合物は、抗体を薬物に連結するための切断可能なリンカーを含み、切断可能なリンカーが、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃからなる群から選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を含む。
特定の実施形態では、化合物は、式（ＩＩ）の化合物であり、
Figure 2023551203000047
 式中、
Ｚが、ＣＲ４又はＮであり、
Ｘが、Ｏ又はＮＲ４であり、
Ｒ２及びＲ３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ６が、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
ｋが、１～１０の整数であり、
Ｒ７が、第２の酵素的に切断可能な部分であり、
Ｌ１が、第１のリンカーであり、
Ｌ２が、第２のリンカーであり、
Ｗ１が、薬物である。
場合によっては、ｋが、２であり、化合物は、式（ＩＩａ）の化合物である。
Figure 2023551203000048
例えば、化合物は、式（ＩＩｂ）の化合物であり得る。
Figure 2023551203000049
場合によっては、化合物は、式（ＩＩｃ）の化合物であり得る。
Figure 2023551203000050
場合によっては、化合物は、式（ＩＩｄ）の化合物であり得る。
Figure 2023551203000051
場合によっては、化合物は、式（ＩＩｅ）の化合物であり得る。
Figure 2023551203000052
場合によっては、化合物は、式（ＩＩｆ）の化合物であり得る。
Figure 2023551203000053
場合によっては、化合物は、式（ＩＩｇ）の化合物であり得る。
Figure 2023551203000054
式（ＩＩ）のコンジュゲートに関連する置換基は、本明細書に記載される。式（ＩＩ）への言及は、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）及び（ＩＩｇ）も包含することを意図している。
式（ＩＩ）の化合物に関して、置換基Ｚ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｌ１、Ｌ２、及びＷ１は、式（Ｉ）のコンジュゲートに関して上に記載した通りである。同様に、式（ＩＩ）の第１のリンカーＬ１及び第２のリンカーＬ２に関し、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４、並びにＴ５、Ｔ６、Ｔ７、Ｔ８、Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８置換基は、式（Ｉ）のコンジュゲートに関して上に記載した通りである。
特定の実施形態では、化合物は、以下の構造の化合物である。
Figure 2023551203000055
抗体
上に示されるように、主題のコンジュゲートは、置換基Ｗ２として抗体を含んでいてもよく、抗体は、２－ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書で使用される場合、アミノ酸は、それらの標準的な名称、それらの標準的な３文字の略称、及び／又はそれらの標準的な１文字の略称、例えば、アラニン又はＡｌａ又はＡ、システイン又はＣｙｓ又はＣ、アスパラギン酸又はＡｓｐ又はＤ、グルタミン酸又はＧｌｕ又はＥ、フェニルアラニン又はＰｈｅ又はＦ、グリシン又はＧｌｙ又はＧ、ヒスチジン又はＨｉｓ又はＨ、イソロイシン又はＩｌｅ又はＩ、リジン又はＬｙｓ又はＫ、ロイシン又はＬｅｕ又はＬ、メチオニン又はＭｅｔ又はＭ、アスパラギン又はＡｓｎ又はＮ、プロリン又はＰｒｏ又はＰ、グルタミン又はＧｌｎ又はＱ、アルギニン又はＡｒｇ又はＲ、セリン又はＳｅｒ又はＳ、トレオニン又はＴｈｒ又はＴ、バリン又はＶａｌ又はＶ、トリプトファン又はＴｒｐ又はＷ、及びチロシン又はＴｙｒ又はＹと称され得る。
特定の実施形態では、抗体のアミノ酸配列は、インビボで（例えば、細胞においてアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳時に）、又はインビトロで（例えば、無細胞系においてアルデヒドタグ含有タンパク質とＦＧＥとを接触させることによって）のいずれかで、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基へと変換する（酸化する）ことが可能なセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾される。かかるスルファターゼモチーフは、本明細書では、ＦＧＥ修飾部位とも称され得る。
スルファターゼモチーフ
アルデヒドタグの最小スルファターゼモチーフは、通常、５アミノ酸残基長又は６アミノ酸残基長であり、通常、６個以下のアミノ酸残基長である。Ｉｇポリペプチドにおいて提供されるスルファターゼモチーフは、少なくとも５又は６個のアミノ酸残基であり、例えば、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、又は６個未満のアミノ酸残基長のスルファターゼモチーフを画定するように、５～１６個、６～１６、５～１５、６～１５、５～１４、６～１４、５～１３、６～１３、５～１２、６～１２、５～１１、６～１１、５～１０、６～１０、５～９、６～９、５～８、又は６～８個のアミノ酸残基長であり得る。
特定の実施形態では、目的のポリペプチドは、ポリペプチド中にスルファターゼモチーフの配列を提供するための天然アミノ酸配列と比較して、１個以上のアミノ酸残基、例えば、２個以上、又は３個以上、又は４個以上、又は５個以上、又は６個以上、又は７個以上、又は８個以上、又は９個以上、又は１０個以上、又は１１個以上、又は１２個以上、又は１３個以上、又は１４個以上、又は１５個以上、又は１６個以上、又は１７個以上、又は１８個以上、又は１９個以上、又は２０個以上のアミノ酸残基が挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）たものを含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、ポリペプチドの天然アミノ酸配列に対して、アミノ酸配列の２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、又は２個未満のアミノ酸残基の修飾（挿入、付加、欠失、及び／又は置換／置き換え）を含む。ポリペプチド（例えば、抗体）に対する天然のアミノ酸配列が、所望のスルファターゼモチーフの１つ以上の残基を含有する場合、残基の修飾の総数は、例えば、所望のスルファターゼモチーフの配列を提供するような天然のアミノ酸残基に隣接するアミノ酸残基の部位特異的修飾（挿入、付加、欠失、置換／置き換え）によって、減少させることができる。特定の実施形態では、標的抗体の天然のアミノ酸配列の修飾の程度は、（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に対して）挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）、及び／又は付加されるアミノ酸残基の数を最小限に抑えるように、最小限に抑えられる。標的抗体のアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、かかる修飾が抗体の機能及び／又は構造に及ぼし得る影響を最小限に抑え得る。
特定の目的のアルデヒドタグは、少なくとも１つの最小スルファターゼモチーフ（「コンセンサススルファターゼモチーフ」とも称される）を含むものであるが、より長いアルデヒドタグが、本開示によって企図及び包含され、本開示の組成物及び方法において用途を見出し得ることが容易に理解されることに留意されたい。したがって、アルデヒドタグは、５個又は６個の残基の最小スルファターゼモチーフを含んでもよく、又はより長くてもよく、追加のアミノ酸残基によってモチーフのＮ末端側及び／又はＣ末端側に隣接され得る最小スルファターゼモチーフを含んでもよい。例えば、５個又は６個のアミノ酸残基のアルデヒドタグ、並びに５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個より多く、又はそれより多いアミノ酸残基のより長いアミノ酸配列が企図される。
アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣ末端又はその付近に存在してもよく、例えば、アルデヒドタグは、天然の野生型Ｉｇ重鎖のＣ末端の１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ１ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ２ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ３ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ軽鎖定常領域中に、例えば、カッパ軽鎖定常領域又はラムダ軽鎖定常領域中に存在し得る。
特定の実施形態では、使用されるスルファターゼモチーフは、以下の式によって記載されてもよく、
Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（Ｉ’）
式中、
Ｚ１０が、システイン又はセリンであり（（Ｃ／Ｓ）によって表すこともでき）、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）若しくはヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよく）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、若しくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、若しくはＩであり、
Ｘ１が、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、独立して、任意のアミノ酸であってもよいが、通常は、脂肪族アミノ酸、極性非帯電アミノ酸、又は硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよい。
抗体重鎖及び／又は軽鎖のアミノ酸配列を、式Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０の少なくとも５個のアミノ酸の配列を提供するように修飾してもよく、式中、
Ｚ１０が、システイン又はセリンであり、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基であり、
Ｚ３０が、脂肪族アミノ酸又は塩基性アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸であり、但し、異種スルファターゼモチーフがポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、各々独立して、任意のアミノ酸である。
スルファターゼモチーフは、一般に、選択されたＦＧＥ、例えば、アルデヒドタグ化ポリペプチドが発現される宿主細胞中に存在するＦＧＥ、又は無細胞インビトロ法においてアルデヒドタグ化ポリペプチドと接触されるＦＧＥによって変換可能なように選択される。
例えば、ＦＧＥが真核生物ＦＧＥ（例えば、ヒトＦＧＥを含む、哺乳動物ＦＧＥ）である場合、スルファターゼモチーフは、以下の式
Ｘ１ＣＸ２ＰＸ３Ｚ３０（Ｉ”）
のスルファターゼモチーフであってもよく、
式中、
Ｘ１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、又はＧであってもよく、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）若しくはヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよく）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、若しくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、若しくはＩである。
スルファターゼモチーフの具体例としては、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号：／／）、ＭＣＴＰＳＲ（配列番号：／／）、ＶＣＴＰＳＲ（配列番号：／／）、ＬＣＳＰＳＲ（配列番号：／／）、ＬＣＡＰＳＲ（配列番号：／／）、ＬＣＶＰＳＲ（配列番号：／／）、ＬＣＧＰＳＲ（配列番号：／／）、ＩＣＴＰＡＲ（配列番号：／／）、ＬＣＴＰＳＫ（配列番号：／／）、ＭＣＴＰＳＫ（配列番号：／／）、ＶＣＴＰＳＫ（配列番号：／／）、ＬＣＳＰＳＫ（配列番号：／／）、ＬＣＡＰＳＫ（配列番号：／／）、ＬＣＶＰＳＫ（配列番号：／／）、ＬＣＧＰＳＫ（配列番号：／／）、ＬＣＴＰＳＡ（配列番号：／／）、ＩＣＴＰＡＡ（配列番号：／／）、ＭＣＴＰＳＡ（配列番号：／／）、ＶＣＴＰＳＡ（配列番号：／／）、ＬＣＳＰＳＡ（配列番号：／／）、ＬＣＡＰＳＡ（配列番号：／／）、ＬＣＶＰＳＡ（配列番号：／／）、及びＬＣＧＰＳＡ（配列番号：／／）が挙げられる。
ＦＧｌｙ含有配列
修飾抗体の重鎖及び／又は軽鎖にＦＧＥが作用すると、スルファターゼモチーフ中のセリン又はシステインが、ＦＧｌｙに修飾される。したがって、ＦＧｌｙ含有スルファターゼモチーフは、以下の式
Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（Ｉ’’’）
のスルファターゼモチーフであってもよく、
式中、
ＦＧｌｙが、ホルミルグリシン残基であり、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）若しくはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、若しくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、若しくはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、又はＧであってもよい。
上述のように、ＦＧｌｙ残基を含有する修飾ポリペプチドは、ＦＧｌｙと薬物（例えば、上述のように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物）との反応によって、薬物（例えば、マイタンシノイド）にコンジュゲートされ、ＦＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフを生成し得る。本明細書で使用される場合、ＦＧｌｙ’という用語は、薬物、例えば、マイタンシン又はアウリスタチンにカップリングされるスルファターゼモチーフの修飾アミノ酸残基を指す。したがって、ＦＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフは、以下の式
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
のスルファターゼモチーフであってもよく、
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）若しくはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、若しくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、若しくはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、又はＧであってもよい。
修飾部位
上に示されるように、抗体のアミノ酸配列は、インビボで（例えば、細胞においてアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳時に）、又はインビトロで（例えば、無細胞系においてアルデヒドタグ含有タンパク質とＦＧＥとを接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によって、ＦＧｌｙ残基へと変換する（酸化する）ことが可能なセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾される。本開示のコンジュゲートを生成するために使用される抗体は、少なくともＩｇ定常領域、例えば、Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１及びＣＨ２ドメイン；ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン；又はＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４ドメイン）、又はＩｇ軽鎖定常領域を含む。かかるＩｇポリペプチドは、本明細書で「標的Ｉｇポリペプチド」又は「タグ化抗体」と称される。
スルファターゼモチーフが導入される抗体中の部位は、任意の好都合な部位であり得る。上に示されるように、場合によっては、標的ポリペプチドの天然のアミノ酸配列の修飾の程度は、（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に対して）挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）、及び／又は付加されるアミノ酸残基の数を最小限に抑えるように、最小限に抑えられる。標的抗体のアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、かかる修飾が抗体の機能及び／又は構造に及ぼし得る影響を最小限に抑え得る。
抗体重鎖定常領域は、任意の重鎖アイソタイプ、天然に存在しないＩｇ重鎖定常領域（コンセンサスＩｇ重鎖定常領域を含む）のＩｇ定常領域を含み得る。Ｉｇ定常領域は、アルデヒドタグを含むように修飾されてもよく、アルデヒドタグは、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の中、又はそれに隣接して存在する。Ｉｇ定常領域は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、又は１６個のアミノ酸、又は１６個より多いアミノ酸の挿入及び／又は置換によって修飾され、上述のようなスルファターゼモチーフのアミノ酸配列を提供することができる。
ある場合には、アルデヒドタグ化抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１及びＣＨ２ドメイン；ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン；又はＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４ドメイン）を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、若しくはＩｇＧ４アイソタイプ重鎖、又はその任意のアロタイプバリアント、例えば、ヒト重鎖定常領域配列若しくはマウス重鎖定常領域配列、ハイブリッド重鎖定常領域、合成重鎖定常領域、又はＦＧＥによって修飾され、ＦＧｌｙ修飾Ｉｇポリペプチドを生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むように修飾されたコンセンサス重鎖定常領域配列等の重鎖定常領域配列を含み得る。Ｉｇ重鎖のアロタイプバリアントは、当該技術分野で既知である。例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １：４を参照されたい。
ある場合には、アルデヒドタグ化抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域は、カッパ軽鎖、ラムダ軽鎖、例えば、ヒトカッパ若しくはラムダ軽鎖定常領域、ハイブリッド軽鎖定常領域、合成軽鎖定常領域、又はＦＧＥによって修飾され、ＦＧｌｙ修飾抗体を生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むように修飾されたコンセンサス軽鎖定常領域配列等の定常領域配列を含み得る。例示的な定常領域は、ヒトガンマ１及びガンマ３領域を含む。スルファターゼモチーフを除き、修飾定常領域は、野生型アミノ酸配列を有していてもよく、又は野生型アミノ酸配列に対して少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％同一）であるアミノ酸配列を有し得る。
いくつかの実施形態では、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド重鎖のＣ末端以外の位置に、又はＩｇポリペプチド重鎖のＣ末端に加えた位置にある。上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗体は、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された重鎖定常領域を含んでいてもよく、スルファターゼモチーフは、抗体重鎖定常領域の表面接近可能なループ領域の中にあるか、又はそれに隣接している。
スルファターゼモチーフは、Ｉｇ重鎖のかかる修飾部位のこれらのアミノ酸配列のうちの１つ以上の内部、又はそれに隣接して提供され得る。例えば、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）、これらの修飾部位に隣接してＮ末端に、及び／又は隣接してＣ末端にスルファターゼモチーフを提供することができる。あるいは、又はこれに加えて、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）、Ｉｇ重鎖修飾部位の任意の２つの残基間にスルファターゼモチーフを提供することができる。いくつかの実施形態では、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、２つのモチーフを含むように修飾されてもよく、これらが互いに隣接していてもよく、又は１個、２個、３個、４個、又はそれより多く（例えば、約１～約２５個、約２５～約５０個、又は約５０～約１００個、又はそれより多くのアミノ酸によって分離されてもよい。あるいは、又はこれに加えて、天然アミノ酸配列が、スルファターゼモチーフ配列の１つ以上のアミノ酸残基を提供する場合、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列の修飾部位の選択されたアミノ酸残基が、修飾部位にスルファターゼモチーフを提供するように修飾されてもよい（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）。
本開示の抗体－薬物コンジュゲートで使用される抗体は、限定されないが、例えば、がん細胞上に存在する抗原、自己免疫細胞上に存在する抗原、病原性微生物上に存在する抗原、ウイルス感染細胞（例えば、ヒト免疫不全ウイルス感染細胞）上に存在する抗原、疾患細胞上に存在する抗原等を含み、様々な抗原結合特異性のうちのいずれかを有し得る。例えば、抗体コンジュゲートは、抗原に結合してもよく、抗原は、細胞の表面上に存在する。本開示の抗体コンジュゲートは、好適な結合親和性で、例えば、５×１０－６Ｍ～１０－７Ｍ、１０－７Ｍ～５×１０－７Ｍ、５×１０－７Ｍ～１０－８Ｍ、１０－８Ｍ～５×１０－８Ｍ、５×１０－８Ｍ～１０－９Ｍ、又は１０－９Ｍより大きな結合親和性で、抗原に結合し得る。
非限定的な例として、主題の抗体コンジュゲートは、がん細胞上に存在する抗原（例えば、腫瘍特異的抗原、がん細胞上で過剰発現される抗原等）に結合してもよく、コンジュゲートされた部分は、薬物、例えば、細胞傷害性化合物（例えば、細胞傷害性小分子、細胞傷害性合成ペプチド等）であり得る。例えば、主題の抗体コンジュゲートは、がん細胞上の抗原に特異的であってもよく、コンジュゲートされた部分は、薬物、例えば、細胞傷害性化合物（例えば、細胞傷害性小分子、細胞傷害性合成ペプチド等）である。
更なる非限定的な例として、主題の抗体コンジュゲートは、ウイルスに感染した細胞上に存在する抗原（例えば、抗原がウイルスによってコードされる場合、抗原が、ウイルスによって感染する細胞型上に発現される場合等）に結合してもよく、コンジュゲートされた部分は、薬物、例えば、ウイルス融合阻害剤であり得る。例えば、主題の抗体コンジュゲートは、ウイルスに感染した細胞上に存在する抗原に結合してもよく、コンジュゲートされた部分は、薬物、例えば、ウイルス融合阻害剤であり得る。
ポリペプチドへのコンジュゲートのための薬物
本開示は、薬物－ポリペプチドコンジュゲート（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）を提供する。いくつかの薬物のいずれかは、抗体にコンジュゲートするための反応性パートナーとして、使用するのに適しているか、又は使用に適するように修飾され得る。薬物の例としては、小分子薬物及びペプチド薬物を含む。
本明細書で使用される「小分子薬物」は、目的の薬学的活性を示し、一般に、８００Ｄａ以下、又は２０００Ｄａ以下の分子量を有するが、最大５ｋＤａの分子を包含してもよく、１０ｋＤａ程度の大きさであってもよい、化合物、例えば、有機化合物を指す。小さな無機分子は、炭素原子を含有しない分子を指し、小さな有機分子は、少なくとも１個の炭素原子を含有する化合物を指す。
例えば、薬物又は活性薬剤は、マイタンシンであり得る。「マイタンシン」、「マイタンシン部分」、「マイタンシン活性薬剤部分」、及び「マイタンシノイド」は、マイタンシン、及びその類似体及び誘導体、並びに薬学的に活性なマイタンシン部分及び／又はその部分を指す。ポリペプチドにコンジュゲートされたマイタンシンは、例えば、限定されないが、本明細書に記載のマイタンシン及びその類似体及び誘導体（例えば、デアシルマイタンシン）等の様々なマイタンシノイド部分のうちのいずれかであり得る。他の場合では、薬物又は活性薬剤は、アウリスタチン、又はその類似体若しくは誘導体、又はその薬学的に活性なアウリスタチン部分及び／又はその一部であり得る。ポリペプチドにコンジュゲートされたアウリスタチンは、例えば、限定されないが、本明細書に記載のアウリスタチン及びその類似体及び誘導体等の様々なアウリスタチン部分のうちのいずれかであり得る。他の場合では、薬物又は活性薬剤は、デュオカルマイシン、又はその類似体若しくは誘導体、又はその薬学的に活性なデュオカルマイシン部分及び／又はその一部であり得る。ポリペプチドにコンジュゲートされたデュオカルマイシンは、例えば、限定されないが、本明細書に記載のデュオカルマイシン及びその類似体及び誘導体等の様々なデュオカルマイシン部分のうちのいずれかであり得る。
特定の実施形態では、薬物は、細胞毒素、キナーゼ阻害剤、免疫刺激剤、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、オリゴヌクレオチド、アプタマー、サイトカイン、ステロイド、及びペプチドから選択される。
例えば、細胞毒素は、細胞死（例えば、壊死若しくはアポトーシス）又は細胞生存率の低下を引き起こす任意の化合物を含み得る。
キナーゼ阻害剤としては、限定されないが、アダボセルチブ、アファチニブ、アキシチニブ、ボスチニブ、セツキシマブ、コビメチニブ、クリゾチニブ、カボザンチニブ、ダコミチニブ、ダサチニブ、エヌトレクチニブ、エルダフィチニブ、エルロチニブ、フォスタマチニブ、ゲフィチニブ、イブルチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レンバチニブ、ムブリチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ペガプタニブ、ルキソリチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、ツカチニブ、バンデタニブ、ベムラフェニブ等が挙げられ得る。
免疫刺激剤としては、限定されないが、ワクチン（例えば、細菌又はウイルスワクチン）、コロニー刺激因子、インターフェロン、インターロイキン等が挙げられ得る。ＴＬＲアゴニストとしては、限定されないが、イミキモド、レシキモド等が挙げられる。
オリゴヌクレオチド乳房としては、限定されないが、ホミビルセン、ペガプタニブ、ミポメルセン、エテプリルセン、デフィブロチド、ヌシネルセン、ゴロディルセン、ビルトラルセン、ボラネソルセン、イノテルセン、トフェルセン、トミネルセン等が挙げられる。
アプタマー薬物としては、限定されないが、ペガプタニブ、ＡＳ１４１１、ＲＥＧ１、ＡＲＣ１７７９、ＮＵ１７２、ＡＲＣ１９０５、Ｅ１００３０、ＮＯＸ－Ａ１２、ＮＯＸ－Ｅ３６等が挙げられる。
サイトカインとしては、限定されないが、アルブインターフェロンアルファ－２Ｂ、アルデスロイキン、ＡＬＴ－８０１、アナキンラ、アンセスチム、アボテルミン（Ａｖｏｔｅｒｍｉｎ）、バルグラスチム、ベンペガルデスロイキン、ビネトラキン、シントレデキン・ベスドトックス（Ｃｉｎｔｒｅｄｅｋｉｎ Ｂｅｓｕｄｏｔｏｘ）、ＣＴＣＥ－０２１４、ダルベポエチンアルファ、デニロイキンジフチトクス、デュラネルミン、エドデキンアルファ、エンフィレルミン、エポエチンデルタ、エリスロポエチン、ヒトインターロイキン－２、インターフェロンアルファ、インターフェロンアルファ－２ｃ、インターフェロンアルファ－ｎ１、インターフェロンアルファ－ｎ３、インターフェロンアルファコン－１、インターフェロンベータ－１ａ、インターフェロンベータ－１ｂ、インターフェロンガンマ－１ｂ、インターフェロンカッパ、インターロイキン－１アルファ、インターロイキン－１０、インターロイキン－７、レノグラスチム、レリジスチム、リペグフィルグラスチム、ロルカフスプ（Ｌｏｒｕｋａｆｕｓｐ）アルファ、Ｍａｘｙ－Ｇ３４、メトキシポリエチレングリコール－エポエチンベータ、モルグラモスチム、ムプレスチム、ナグレスチペン、オプレルベキン、ペグフィルグラスチム、ペギロデカキン、ペグインターフェロンアルファ－２ａ、ペグインターフェロンアルファ－２ｂ、ペグインターフェロンベータ－１ａ、ペグインターフェロンラムダ－１ａ、組換え体ＣＤ４０－リガンド、レグラモスチム、ロミプロスチム、サルグラモスチム、トロンボポエチン、ツコツズマブ・セルモロイキン（Ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ウイルスマクロファージ－炎症性タンパク質等が挙げられる。
ステロイド薬物としては、限定されないが、プレドニゾロン、ベタメタゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デフラザコート等が挙げられる。
本明細書で使用される「ペプチド薬物」は、アミノ酸含有ポリマー化合物を指し、天然に存在する、及び天然に存在しないペプチド、オリゴペプチド、環式ペプチド、ポリペプチド、及びタンパク質、並びにペプチド模倣物を包含することを意図する。ペプチド薬物は、化学合成によって得てもよく、又は遺伝子的にコードされた供給源（例えば、組換え体の供給源）から生成されてもよい。ペプチド薬物は、分子量が様々であってもよく、２００Ｄａ～１０ｋＤａ、又はそれより大きな分子量であってもよい。好適なペプチドとしては、限定されないが、細胞傷害性ペプチド、血管新生ペプチド、抗血管新生ペプチド、Ｂ細胞を活性化するペプチド、Ｔ細胞を活性化するペプチド、抗ウイルスペプチド、ウイルス融合を阻害するペプチド、１つ以上のリンパ球集団の生成を増加させるペプチド、抗微生物ペプチド、成長因子、成長ホルモン放出因子、血管作動性ペプチド、抗炎症ペプチド、グルコース代謝を調節するペプチド、抗血栓性ペプチド、抗侵害受容性ペプチド、血管拡張剤ペプチド、血小板凝集阻害剤、鎮痛剤等が挙げられる。
本明細書に記載されるコンジュゲート及び化合物での用途が見出される薬物の例としては、限定されないが、チューブリシンＭ、カリケアミシン、ＳＮ－３８、エキサテカン、ＳＴＡＴ３阻害剤、アルファ－アマニチン、オーロラキナーゼ阻害剤、ベロテカン、９－アミノカンプトテシン（９－ＡＣ）、及びアントラサイクリンが挙げられる。
薬物の他の例としては、がん化学療法剤等の小分子薬物が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（又はその断片）である場合、抗体は、修飾アミノ酸を含むように本明細書で記載のように修飾されてもよく、その後、がん化学療法剤にコンジュゲートされ得る。がん化学療法剤は、がん細胞の増殖を減少させる非ペプチド性（すなわち、非タンパク質性）化合物を含み、細胞傷害性剤及び細胞増殖抑制剤を包含する。化学療法剤の非限定的な例としては、アルキル化剤、ニトロソウレア、代謝拮抗物質、抗腫瘍抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、及びステロイドホルモンが挙げられる。ペプチド性化合物も使用可能である。
好適ながん化学療法剤としては、ドラスタチン及びその活性類似体及び誘導体、及びアウリスタチン及びその活性類似体及び誘導体（例えば、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）等）が挙げられる。例えば、ＷＯ９６／３３２１２、ＷＯ９６／１４８５６、及びＵ．Ｓ．６，３２３，３１５を参照されたい。例えば、ドラスタチン１０又はアウリスタチンＰＥは、本開示の抗体－薬物コンジュゲートに含まれ得る。好適ながん化学療法剤としてはまた、マイタンシノイド及びその活性類似体及び誘導体（例えば、ＥＰ１３９１２１３、及びＬｉｕ ｅｔ ａｌ（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：８６１８－８６２３を参照されたい）、デュオカルマイシン及びその活性類似体及び誘導体（例えば、合成類似体ＫＷ－２１８９及びＣＢ１－ＴＭ１を含む）、並びにベンゾジアゼピン及びその活性類似体及び誘導体（例えば、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）が挙げられる。
細胞増殖を減少させるために作用する薬剤は、当該技術分野で既知であり、幅広く使用される。かかる薬剤としては、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホネート、及びトリアゼンが挙げられ、限定されないが、メクロレタミン、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（商標））、メルファラン（Ｌ－サルコリシン）、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（メチル－ＣＣＮＵ）、ストレプトゾトシン、クロロゾトシン、ウラシルマスタード、クロルメチン、イホスファミド、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホラミン、ブスルファン、ダカルバジン、及びテモゾロミドを含む。
代謝拮抗剤としては、葉酸類似体、ピリミジン類似体、プリン類似体、及びアデノシンデアミナーゼ阻害剤が挙げられ、限定されないが、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ－Ｕ）、シトシンアラビノシド、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦｕｄＲ）、６－チオグアニン、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ）、ペントスタチン、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、メトトレキサート、１０－プロパルギル－５，８－ジデアザフォレート（ＰＤＤＦ、ＣＢ３７１７）、５，８－ジデアザテトラヒドロ葉酸（ＤＤＡＴＨＦ）、ロイコボリン、リン酸フルダラビン、ペントスタチン、及びゲムシタビンを含む。
好適な天然産物及びそれらの誘導体（例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍抗生物質、酵素、リンホカイン、及びエピポドフィロトキシン）としては、限定されないが、Ａｒａ－Ｃ、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、デオキシコホルマイシン、マイトマイシン－Ｃ、Ｌ－アスパラギナーゼ、アザチオプリン；ブレキナル；アルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン等；ポドフィロトキシン、例えば、エトポシド、テニポシド等；抗生物質、例えば、アントラサイクリン、ダウノルビシン塩酸塩（ダウノマイシン、ルビドマイシン、セルビジン）、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、及びモルホリノ誘導体等；フェノキシゾンビスシクロペプチド、例えば、ダクチノマイシン；塩基性糖ペプチド、例えば、ブレオマイシン；アントラキノングリコシド、例えば、プリカマイシン（ミトラマイシン）；アントラセンジオン、例えば、ミトキサントロン；アジリノピロロインドールジオン、例えば、マイトマイシン；大環状免疫抑制剤、例えば、シクロスポリン、ＦＫ－５０６（タクロリムス、プログラフ）、ラパマイシン等；等が挙げられる。
他の抗増殖性細胞傷害性剤は、ナベルビン、ＣＰＴ－１１、アナストロゾール、レトロゾール、カペシタビン、レロキサフィン（ｒｅｌｏｘａｆｉｎｅ）、シクロホスファミド、イホスファミド、及びドロロキサフィン（ｄｒｏｌｏｘａｆｉｎｅ）である。
抗増殖活性を有する微小管作用剤も、使用するのに適しており、限定されないが、アロコルヒチン（ＮＳＣ ４０６０４２）、ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ ６０９３９５）、コルヒチン（ＮＳＣ ７５７）、コルヒチン誘導体（例えば、ＮＳＣ ３３４１０）、ドルスタチン（ｄｏｌｓｔａｔｉｎ）１０（ＮＳＣ ３７６１２８）、マイタンシン（ＮＳＣ １５３８５８）、リゾキシン（ＮＳＣ ３３２５９８）、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、Ｔａｘｏｌ（登録商標）誘導体、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、チオコルヒチン（ＮＳＣ ３６１７９２）、トリチルシステイン、ビンブラスチンサルフェート、ビンクリスチンサルフェート、限定されないが、エポチロンＡ、エポチロンＢ、ディスコデルモリドを含む天然及び合成のエポチロン；エストラムスチン、ノコダゾール等が挙げられる。
使用するのに好適であるホルモン調節剤及びステロイド（合成類似体を含む）としては、限定されないが、副腎皮質ステロイド、例えば、プレドニゾン、デキサメタゾン等；エストロゲン及びプレゲスチン、例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、エストラジオール、クロミフェン、タモキシフェン等；副腎皮質抑制剤、例えば、アミノグルテチミド；１７α－エチニルエストラジオール；ジエチルスチルベストロール、テストステロン、フルオキシメステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン（ｄｒｏｍｏｓｔａｎｏｌｏｎｅ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、テストラクトン、メチルプレドニゾロン、メチル－テストステロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ロイプロリド、フルタミド（ドロゲニル（Ｄｒｏｇｅｎｉｌ））、トレミフェン（フェアストン）、及びＺｏｌａｄｅｘ（登録商標）が挙げられる。エストロゲンは、増殖及び分化を刺激し、したがって、エストロゲン受容体に結合する化合物を使用して、この活性を遮断する。コルチコステロイドは、Ｔ細胞増殖を阻害し得る。
他の好適な化学療法剤としては、金属錯体、例えば、シスプラチン（ｃｉｓ－ＤＤＰ）、カルボプラチン等；尿素、例えばヒドロキシ尿素；及びヒドラジン、例えば、Ｎ－メチルヒドラジン；エピドフィロトキシン（ｅｐｉｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；ロイコボリン；テガフール等が挙げられる。目的の他の抗増殖性剤としては、免疫抑制剤、例えば、ミコフェノール酸、サリドマイド、デスオキシスペルグアリン（ｄｅｓｏｘｙｓｐｅｒｇｕａｌｉｎ）、アザスポリン（ａｚａｓｐｏｒｉｎｅ）、レフルノミド、ミゾリビン、アザスピラン（ＳＫＦ １０５６８５）；Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）（ＺＤ １８３９、４－（３－クロロ－４－フルオロフェニルアミノ）－７－メトキシ－６－（３－（４－モルホリニル）プロポキシ）キナゾリン）等が挙げられる。
タキサンは、使用するのに好適である。「タキサン」は、パクリタキセル、並びに任意の活性タキサン誘導体又はプロドラッグを含む。「パクリタキセル」（例えば、ドセタキセル、ＴＡＸＯＬ（商標）、ＴＡＸＯＴＥＲＥ（商標）（ドセタキセルの製剤）、パクリタキセルの１０－デスアセチル類似体等、及びパクリタキセルの３’Ｎ－デスベンゾイル－３’Ｎ－ｔ－ブトキシカルボニル類似体等の類似体、製剤、及び誘導体を含むことが本明細書で理解されるべきである）は、当業者に既知の技術を利用して容易に調製され得る（ＷＯ９４／０７８８２、ＷＯ９４／０７８８１、ＷＯ９４／０７８８０、ＷＯ９４／０７８７６、ＷＯ９３／２３５５５、ＷＯ９３／１００７６、米国特許第５，２９４，６３７号、第５，２８３，２５３号、第５，２７９，９４９号、第５，２７４，１３７号、第５，２０２，４４８号、第５，２００，５３４号、第５，２２９，５２９号、及び第ＥＰ ５９０，２６７号も参照されたい）か、又は例えば、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．を含む様々な商業的供給源から得られ得る（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａからのＴ７４０２、又はＴａｘｕｓ ｙａｎｎａｎｅｎｓｉｓからのＴ－１９１２）。
パクリタキセルは、パクリタキセルの一般の化学的に利用可能な形態だけではなく、類似体及び誘導体（例えば、上に示されるようなＴａｘｏｔｅｒｅ（商標）ドセタキセル）、及びパクリタキセルコンジュゲート（例えば、パクリタキセル－ＰＥＧ、パクリタキセル－デキストラン、又はパクリタキセル－キシロース）も指すことを理解されるべきである。
親水性誘導体、及び疎水性誘導体の両方を含む、様々な既知の誘導体もまた、「タキサン」という用語に含まれる。タキサン誘導体としては、限定されないが、国際特許出願第ＷＯ９９／１８１１３号に記載されるガラクトース及びマンノース誘導体、ＷＯ９９／１４２０９に記載されるピペラジノ及び他の誘導体、ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１、及び米国特許第５，８６９，６８０号に記載されるタキサン誘導体、ＷＯ９８／２８２８８に記載される６－チオ誘導体、米国特許第５，８２１，２６３号に記載されるスルフェンアミド誘導体、並びに米国特許第５，４１５，８６９号に記載されるタキソール誘導体が挙げられる。更に、限定されないが、ＷＯ９８／５８９２７、ＷＯ９８／１３０５９、及び米国特許第５，８２４，７０１号に記載されているものを含む、パクリタキセルのプロドラッグを含む。
使用するのに好適な生物学的改変剤としては、限定されないが、（１）チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）活性の阻害剤、（２）セリン／トレオニンキナーゼ活性の阻害剤、（３）腫瘍抗原に特異的に結合する抗体等の腫瘍関連抗原アンタゴニスト、（４）アポトーシス受容体アゴニスト、（５）インターロイキン－２、（６）ＩＦＮ－α、（７）ＩＦＮ－γ、（８）コロニー刺激因子、及び（９）血管新生の阻害剤が挙げられる。
薬物の例としては、がん化学療法剤等の小分子薬物が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（又はその断片）である場合、抗体は、修飾アミノ酸を含むように本明細書で記載のように修飾されてもよく、その後、微小管作用剤等のがん化学療法剤にコンジュゲートされ得る。特定の実施形態では、薬物は、抗増殖活性を有する微小管作用剤、例えば、マイタンシノイドである。
特定の実施形態では、薬物は、以下の構造として、マイタンシノイドであり、
Figure 2023551203000056
 式中、
Figure 2023551203000057
 が、本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物において、マイタンシノイドと第２のリンカーＬ２との間の接続点を示す。「接続点」とは、記号
Figure 2023551203000058
 が、本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物において、マイタンシノイドのＮと第２のリンカーＬ２との間の結合を示すことを意味する。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ１は、マイタンシノイド、例えば、上の構造のマイタンシノイドであってもよく、
Figure 2023551203000059
 は、マイタンシノイドと第２のリンカーＬ２との間の接続点を示す。ある場合には、上の構造のマイタンシノイドは、デアシルマイタンシンと称され得る。
特定の実施形態では、薬物は、抗有糸分裂剤、例えば、アウリスタチン、又はその活性なアウリスタチン類似体若しくは誘導体（例えば、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）等）である。特定の実施形態では、薬物は、ＭＭＡＥであり、以下の構造を有する。
Figure 2023551203000060
例えば、ＭＭＡＥ活性薬剤は、以下のような抗体－薬物コンジュゲートに含まれてもよく、
Figure 2023551203000061
 式中、
Figure 2023551203000062
 が、本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物において、アウリスタチンと第２のリンカーＬ２との間の接続点を示す。例えば、記号
Figure 2023551203000063
 は、例えば、式（Ｉ）に示されるように、アウリスタチンのＮと第２のリンカーＬ２との間の結合を示す。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ１は、アウリスタチン、例えば、ＭＭＡＥであってもよく、式中、上の構造中の
Figure 2023551203000064
 が、ＭＭＡＥと第２のリンカーＬ２との間の接続点を示す。
特定の実施形態では、薬物は、ＤＮＡアルキル化剤、例えば、デュオカルマイシンである。デュオカルマイシンの例としては、限定されないが、デュオカルマイシンＡ、デュオカルマイシンＢ１、デュオカルマイシンＢ２、デュオカルマイシンＣ１、デュオカルマイシンＣ２、デュオカルマイシンＤ、デュオカルマイシンＳＡ、及びＣＣ－１０６５が挙げられる。いくつかの実施形態では、デュオカルマイシンは、デュオカルマイシン類似体、例えば、限定されないが、アドゼレシン、ビゼレシン、又はカルゼレジンである。
場合によっては、デュオカルマイシンは、以下の構造を有する化合物である。
Figure 2023551203000065
例えば、デュオカルマイシン活性薬剤は、以下のような抗体－薬物コンジュゲート
Figure 2023551203000066
 に含まれていてもよく、
式中、
Figure 2023551203000067
 が、本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物において、デュオカルマイシンと第２のリンカーＬ２との間の接続点を示す。例えば、記号
Figure 2023551203000068
 は、例えば、式（Ｉ）に示されるように、デュオカルマイシンと第２のリンカーＬ２との間の結合を示す。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ１は、デュオカルマイシン、例えば、上に示すデュオカルマイシンであってもよく、
Figure 2023551203000069
 は、デュオカルマイシンと第２のリンカーＬ２との間の接続点を示す。
上述のように、特定の実施形態では、Ｌ２は、式－（Ｌ２１）ｅ－（Ｌ２２）ｆ－（Ｌ２３）ｇ－（Ｌ２４）ｈ－によって記載される第２のリンカーであり、式中、Ｌ２１、Ｌ２２、Ｌ２３及びＬ２４は、各々独立して、第２のリンカーサブユニットである。特定の実施形態では、Ｌ２１は、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２１は、存在する場合、Ｗ１（薬物）にも接続している。特定の実施形態では、Ｌ２２は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２３は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。特定の実施形態では、Ｌ２４は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。
上述のように、特定の実施形態では、第２のリンカー－（Ｌ２１）ｅ－（Ｌ２２）ｆ－（Ｌ２３）ｇ－（Ｌ２４）ｈ－は、式－（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－によって記載され、式中、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈは、各々独立して、０又は１であり、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈの合計は、０～４である。特定の実施形態では、上述のように、Ｌ２１は、第１の切断可能な部分に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ５は、第１の切断可能な部分に接続している。特定の実施形態では、Ｖ５は、Ｗ１（薬物）に接続している。特定の実施形態では、上述のように、Ｌ２２は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ６は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続しているか、又はＶ６は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。特定の実施形態では、上述のように、Ｌ２３は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ７は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続しているか、又はＶ７は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。特定の実施形態では、上述のように、Ｌ２４は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。したがって、特定の実施形態では、Ｔ８は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続しているか、又はＶ８は、存在する場合、Ｗ１（薬物）に接続している。
本開示の実施形態は、抗体が、１個以上の薬物部分、例えば、２個の薬物部分、３個の薬物部分、４個の薬物部分、５個の薬物部分、６個の薬物部分、７個の薬物部分、８個の薬物部分、９個の薬物部分、又は１０個の薬物部分にコンジュゲートされる、コンジュゲートを含む。薬物部分は、本明細書に記載されるように、抗体中の１つ以上の部位で抗体にコンジュゲートされ得る。特定の実施形態では、コンジュゲートは、０．１～１０、又は０．５～１０、又は１～１０、例えば、１～９、又は１～８、又は１～７、又は１～６、又は１～５、又は１～４、又は１～３、又は１～２の範囲の平均薬物対抗体比（ＤＡＲ）（モル比）を有する。特定の実施形態では、コンジュゲートは、１～２、例えば、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、又は２の平均ＤＡＲを有する。特定の実施形態では、コンジュゲートは、１～１．５の平均ＤＡＲを有する。特定の実施形態では、コンジュゲートは、１．５～２の平均ＤＡＲを有する。平均とは、算術平均を意味する。
ポリペプチドにコンジュゲートされる薬物は、ポリペプチドとの反応のための反応性パートナーを組み込むように修飾され得る。薬物がペプチド薬物である場合、反応性部分（例えば、アミノオキシ又はヒドラジンは、Ｎ末端領域、Ｎ末端、Ｃ末端領域、Ｃ末端、又はペプチドに対して内部の位置に位置し得る。例えば、方法の一例は、アミノオキシ基を有するペプチド薬物を合成することを伴う。この例では、ペプチドは、Ｂｏｃ保護された前駆体から合成される。ペプチドのアミノ基を、カルボン酸基及びオキシ－Ｎ－Ｂｏｃ基を含む化合物と反応させ得る。一例として、ペプチドのアミノ基は、３－（２，５－ジオキソピロリジン－１－イルオキシ）プロパン酸と反応する。カルボン酸基及びオキシ－Ｎ－保護基を含む化合物に対する他の変化は、アルキレンリンカー中に異なる炭素数、及びアルキレンリンカー上の置換を含み得る。ペプチドのアミノ基と、カルボン酸基及びオキシ－Ｎ－保護基を含む化合物との間の反応は、標準的なペプチドカップリング化学を介して起こる。使用され得るペプチドカップリング剤の例としては、限定されないが、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）、ジ－ｐ－トルオイルカルボジイミド、ＢＤＰ（１－ベンゾトリアゾールジエチルホスフェート－１－シクロヘキシル－３－（２－モルホリニルエチル）カルボジイミド）、ＥＤＣ（１－（３－ジメチルアミノプロピル－３－エチル－カルボジイミド塩酸塩）、フッ化シアヌル、塩化シアヌル、ＴＦＦＨ（テトラメチルフルオロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスホスフェート）、ＤＰＰＡ（ジフェニルホスホロアジデート）、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＢＴＵ（Ｏ－ベンゾトリアゾール－１－イル－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＢＴＵ（Ｏ－ベンゾトリアゾール－１－イル－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＴＳＴＵ（Ｏ－（Ｎ－スクシンイミジル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＨＡＴＵ（Ｎ－［（ジメチルアミノ）－１－Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５，６］－ピリジン－１－イルメチレン］－Ｎ－メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド）、ＢＯＰ－Ｃｌ（ビス（２－オキソ－３－オキサゾリジニル）ホスフィニッククロリド）、ＰｙＢＯＰ（（１－Ｈ－１，２，３－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）－トリス（ピロリジノ）ホスホニウムテトラフルオロホスフェート）、ＢｒＯＰ（ブロモトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＤＥＰＢＴ（３－（ジエトキシホスホルイルオキシ）－１，２，３－ベンゾトリアジン－４（３Ｈ）－オン）ＰｙＢｒＯＰ（ブロモトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）が挙げられる。非限定的な例として、ＨＯＢｔ及びＤＩＣは、ペプチドカップリング試薬として使用され得る。
アミノオキシ官能性を露出させるための脱保護は、Ｎ－保護基を含むペプチド上で行われる。Ｎ－オキシスクシンイミド基の脱保護は、例えば、環状アミド基についての標準的な脱保護条件に従って起こる。脱保護条件は、Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ Ｅｄ．，１９９９，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，ＮＹ ａｎｄ Ｈａｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．中に見出され得る。特定の脱保護条件としては、ヒドラジン試薬、アミノ試薬、又は水素化ホウ素ナトリウムが挙げられる。Ｂｏｃ保護基の脱保護は、ＴＦＡを用いて行うことができる。脱保護のための他の試薬としては、限定されないが、ヒドラジン、メチルヒドラジン、フェニルヒドラジン、水素化ホウ素ナトリウム、及びメチルアミンが挙げられる。生成物及び中間体は、ＨＰＬＣ精製等の従来の手段によって精製され得る。
当業者は、ｐＨ及び立体障害（すなわち、目的の反応性パートナーとの反応に対するアミノ酸残基の接近可能性）等の因子が重要であることを理解するであろう。最適なコンジュゲート化条件を提供するための反応条件を変えることは、十分に当業者の技術の範囲内であり、当該技術分野で慣例である。コンジュゲート化が、生存細胞内又は生存細胞上に存在するポリペプチドとともに行われる場合、その条件は、生理学的に適合するように選択される。例えば、ｐＨは、反応を起こさせるのに十分な時間であるが、細胞によって忍容される期間内（例えば、約３０分～１時間）、一時的に低下されてもよい。細胞表面上でポリペプチドの修飾を行うための生理学的条件は、細胞表面アジドを保有する細胞の修飾においてケトン－アジド反応において使用されるものに類似し得る（例えば、Ｕ．Ｓ．６，５７０，０４０を参照されたい）。
本明細書に開示される化合物又はコンジュゲートとともに反応性パートナーとして役立つα－求核性基を含有するか、又は含有するように修飾された小分子化合物はまた、本開示のポリペプチド－薬物コンジュゲート中の薬物としての使用が企図される。一般的な方法は、化学合成スキーム及び目的の化合物を合成するのに有用な条件について、当該技術分野で既知である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１、又はＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照されたい）。
製剤
本開示のコンジュゲートは、様々な異なる方法で製剤化され得る。一般に、コンジュゲートが、抗体－薬物コンジュゲートである場合、コンジュゲートは、薬物、抗体、治療される状態、及び使用される投与経路に適合した方法で製剤化される。
いくつかの実施形態では、本開示のコンジュゲートのうちのいずれかと、薬学的に許容される賦形剤と、を含む薬学的組成物が提供される。
コンジュゲート（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）は、任意の好適な形態で、例えば、薬学的に許容される塩の形態で提供されてもよく、投与の任意の好適な経路、例えば、経口、局所、又は非経口投与のために製剤化され得る。コンジュゲートが、注射可能な液体（それらが静脈内又は直接的に組織に投与されるそれらの実施形態におけるもの等）として提供される場合、コンジュゲートは、すぐに使用可能な剤形として、又は薬学的に許容される担体及び賦形剤で構成される再構築可能な貯蔵安定性粉末若しくは液体として提供され得る。
コンジュゲートを製剤化するための方法は、容易に利用可能なものから適応され得る。例えば、コンジュゲートは、治療有効量のコンジュゲートと、薬理学的に許容される担体（例えば、生理食塩水）と、を含む薬学的組成物で提供され得る。薬学的組成物は、任意選択的に、他の添加剤（例えば、緩衝剤、安定剤、防腐剤等）を含み得る。いくつかの実施形態では、製剤は、哺乳動物への投与に適しており、例えば、ヒトへの投与に適したものである。
治療方法
本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、親薬物（すなわち、抗体へのコンジュゲート化前の薬物）の投与による治療に適した対象において状態又は疾患の治療における用途を見出す。
いくつかの実施形態では、有効量（例えば、治療有効量）の本開示のコンジュゲートのいずれかを対象に投与することを含む方法が提供される。
特定の態様では、対象において標的部位に薬物を送達する方法であって、本方法が、本開示のコンジュゲートのいずれかを含む薬学的組成物を対象に投与することを含み、投与することが、対象において標的部位にコンジュゲートから治療有効量の薬物を放出するのに有効である、方法が提供される。例えば、本明細書に記載されるように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、切断可能なリンカー、例えば、第１の酵素的に切断可能な部分及び第２の酵素的に切断可能な部分を含む酵素的に切断可能なリンカーを含み得る。場合によっては、切断可能なリンカーは、適切な条件下で切断され、その薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離又は放出し得る。例えば、第１の切断可能なリンカーが切断しないように保護する第２の切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分の切断を可能にするために切断されてもよく、これにより、切断可能なリンカーを２つ以上の部分に切断し、したがって、所望の作用部位で抗体－薬物コンジュゲートから薬物が放出される。
特定の実施形態では、第１の切断可能な部分は、酵素的に切断可能な部分であり得る。場合によっては、第１の切断可能な部分の切断を促進する酵素は、治療される対象に投与される（すなわち、治療される対象に対して外因性の）酵素である。例えば、第１の酵素は、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの投与の前、投与と同時、又は投与の後に投与され得る。
特定の実施形態では、第２の切断可能な部分は、酵素的に切断可能な部分であり得る。場合によっては、第２の切断可能な部分の切断を促進する酵素は、治療される対象に投与される（すなわち、治療される対象に対して外因性の）酵素である。例えば、第２の酵素は、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの投与の前、投与と同時、又は投与の後に投与され得る。特定の実施形態では、第１の酵素と第２の酵素は、異なる酵素である。
他の場合では、第１の切断可能な部分の切断を促進する第１の酵素は、治療される対象中に存在する（すなわち、治療される対象に対して内因性の）酵素である。例えば、第１の酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に存在し得る。抗体－薬物コンジュゲートの抗体は、所望の作用部位に特異的に標的化されてもよく（例えば、所望の作用部位に存在する抗原に特異的に結合してもよく）、所望の作用部位はまた、第１の酵素の存在を含む。場合によっては、第１の酵素は、治療される対象の身体の他の領域と比較して、所望の作用部位で過剰な存在量で存在する。例えば、第１の酵素は、治療される対象の身体の他の領域と比較して、所望の作用部位で過剰発現され得る。場合によっては、第１の酵素は、特定の領域又は場所における第１の酵素の局在化に起因して、所望の作用部位で過剰な存在量で存在する。例えば、第１の酵素は、リソソーム等の所望の作用部位内の特定の構造に関連し得る。ある場合には、第１の酵素は、対象の身体の他の領域と比較して、リソソーム中に過剰な存在量で存在する。いくつかの実施形態では、第１の酵素を含むリソソームは、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位、例えば、薬物で治療されるがん又は腫瘍の部位に見出される。特定の実施形態では、第１の酵素は、ヒトプロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）等のプロテアーゼである。
特定の実施形態では、第２の切断可能な部分の切断を促進する第２の酵素は、治療される対象中に存在する（すなわち、治療される対象に対して内因性の）酵素である。例えば、第２の酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に存在し得る。抗体－薬物コンジュゲートの抗体は、所望の作用部位に特異的に標的化されてもよく（例えば、所望の作用部位に存在する抗原に特異的に結合してもよく）、所望の作用部位はまた、第２の酵素の存在を含む。場合によっては、第２の酵素は、治療される対象の身体の他の領域と比較して、所望の作用部位で過剰な存在量で存在する。例えば、第２の酵素は、治療される対象の身体の他の領域と比較して、所望の作用部位で過剰発現され得る。場合によっては、第２の酵素は、特定の領域又は場所における第２の酵素の局在化に起因して、所望の作用部位で過剰な存在量で存在する。例えば、第２の酵素は、リソソーム等の所望の作用部位内の特定の構造に関連し得る。ある場合には、第２の酵素は、対象の身体の他の領域と比較して、リソソーム中に過剰な存在量で存在する。いくつかの実施形態では、第２の酵素を含むリソソームは、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位、例えば、薬物で治療されるがん又は腫瘍の部位に見出される。特定の実施形態では、第２の酵素は、グリコシダーゼ、例えば、ガラクトシダーゼ、グルコシダーゼ、マンノシダーゼ、フコシダーゼ等である。
任意の好適な酵素を、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの第１の切断可能な部分及び第２の切断可能な部分の切断に使用することができる。他の酵素、例えば、限定されないが、他の脊椎動物（例えば、霊長類、マウス、ラット、ネコ、ブタ、ウズラ、ヤギ、イヌ等）由来の酵素も、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの第１の切断可能な部分及び第２の切断可能な部分の切断に使用するのに適している場合がある。
特定の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、標準的な条件下で実質的に安定である。実質的に安定とは、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーが、上述の第１の酵素及び第２の酵素の存在しない状態で、有意な量の切断を受けないことを意味する。例えば、上述のように、第２の切断可能な部分は、第１の切断可能な部分が切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーは、上述の第２の酵素が存在しない状態で、有意な量の切断を受けない。例えば、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーは、抗体－薬物コンジュゲートの２５％以下、例えば、２０％以下、又は１５％以下、又は１０％以下、又は５％以下、又は４％以下、又は３％以下、又は２％以下、又は１％以下が、第１の酵素及び／又は第２の酵素が存在しない状態で切断するような、実質的に安定なものであり得る。ある場合には、抗体－薬物コンジュゲートは、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーが、第１の酵素及び／又は第２の酵素が存在しない状態で有意な量の切断を受けないように実質的に安定であるが、第１の酵素及び第２の酵素が存在する場合には切断され得る。例えば、抗体－薬物コンジュゲートは、対象への投与後に実質的に安定であり得る。ある場合には、抗体－薬物コンジュゲートは、対象への投与後に実質的に安定であり、次いで、抗体－薬物コンジュゲートが、所望の作用部位で第２の酵素存在下にあるとき、第２の切断可能な部分は、切断可能なリンカーから切断され、したがって、第１の切断可能な部分が、第１の酵素によるその後の切断に対して露出し、次いで、その所望の作用部位で薬物を放出することができる。特定の実施形態では、対象への投与後、抗体－薬物コンジュゲートは、第１の酵素及び／又は第２の酵素が存在しない状態で、例えば、１時間以上、又は２時間以上、又は３時間以上、又は４時間以上、又は５時間以上、又は６時間以上、又は７時間以上、又は８時間以上、又は９時間以上、又は１０時間以上、又は１５時間以上、又は２０時間以上、又は２４時間（１日）以上、又は２日以上、又は３日以上、又は４日以上、又は５日以上、又は６日以上、又は７日（１週間）以上の長期間にわたって安定である。特定の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、第１の酵素及び／又は第２の酵素が存在しない状態で、あるｐＨ範囲で、例えば、２～１０、又は３～９、又は４～８、又は５～８、又は６～８、又は７～８の範囲のｐＨ等で、長期間安定である。
上述のように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、親薬物の投与による治療に適した対象において状態又は疾患の治療における用途を見出す。「治療」とは、宿主が罹患している状態に関連する症状の少なくとも軽減が達成されることを意味し、軽減は、治療される状態に関連するパラメータ（例えば、症状）の大きさの少なくとも減少を指すために広義で使用される。したがって、治療はまた、病的状態、又はそれと関連する少なくとも症状が、完全に阻害され、例えば、起こることが防止されるか、又は停止され、例えば、終了され、その結果、宿主がもはやその状態、又はその状態を特徴付ける少なくとも症状を患わない状況も含む。したがって、治療は、（ｉ）防止、すなわち、臨床症状を発症させないようにすること、例えば、有害な状態への疾患進行を防止することを含む、臨床症状の発症のリスクを減少させること、（ｉｉ）阻害、すなわち、臨床症状の発症又は更なる発症を休止させること、例えば、活動性疾患を軽減するか、又は完全に阻害すること、並びに／又は（ｉｉｉ）緩和、すなわち、臨床症状を逆行させることを含む。
治療される対象は、療法の必要がある対象であってもよく、治療される対象は、親薬物を使用した治療に適した対象である。したがって、様々な対象は、本明細書に開示される抗体－薬物コンジュゲートを使用した治療に適していてもよい。一般に、かかる対象は、「哺乳動物」であり、ヒトは、目的のものである。他の対象は、家庭用ペット（例えば、イヌ及びネコ）、家畜（例えば、ウシ、ブタ、ヤギ、ウマ等）、げっ歯類（例えば、マウス、モルモット、及びラット、例えば、疾患の動物モデル等）、並びに非ヒト霊長類（例えば、チンパンジー及びサル）を含み得る。
投与される抗体－薬物コンジュゲートの量は、親薬物の用量及び／又は投薬レジメンの指導に基づいて最初に決定され得る。一般に、抗体－薬物コンジュゲートは、結合した薬物の標的化送達及び／又は増強された血清半減期を提供することができ、したがって、投薬レジメンにおいて用量の減少又は投与の減少のうちの少なくとも１つを提供する。したがって、抗体－薬物コンジュゲートは、本開示の抗体－薬物コンジュゲートにコンジュゲートされる前に、親薬物に対して投薬レジメンの用量の減少及び／又は投与の減少を提供することができる。
更に、上に示されるように、抗体－薬物コンジュゲートは、薬物送達の制御された化学量論を提供し得るため、抗体－薬物コンジュゲートの投薬量は、抗体－薬物コンジュゲート当たりに提供される薬物分子の数に基づいて計算することができる。
いくつかの実施形態では、複数の用量の抗体－薬物コンジュゲートが投与される。抗体－薬物コンジュゲートの投与の頻度は、例えば、症状の重症度、対象の状態等の様々な因子のいずれかに依存して変化し得る。例えば、いくつかの実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に３回、隔週、週に１回（ｑｗｋ）、週に２回、週に３回、週に４回、週に５回、週に６回、１日おき、毎日（ｑｄ／ｏｄ）、１日に２回（ｂｄｓ／ｂｉｄ）、又は１日に３回（ｔｄｓ／ｔｉｄ）等で投与される。
がんを治療する方法
本開示は、がんを有する個体に本開示のコンジュゲートを送達することを含む方法を提供する。本方法は、がん腫、肉腫、白血病、及びリンパ腫を含む、多種多様ながんを治療するのに有用である。がんの文脈において、「治療する」という用語は、固形腫瘍の成長を減少させること、がん細胞の複製を阻害すること、全体的な腫瘍負荷を減少させること、及びがんに関連する１つ以上の症状を軽減することのうちの１つ以上（例えば、それぞれ）を含む。
主題の方法を使用して治療され得るがん腫としては、限定されないが、食道がん腫、肝細胞がん腫、基底細胞がん腫（皮膚がんの一形態）、扁平細胞がん腫（様々な組織）、移行細胞がん腫（膀胱の悪性新生物）を含む膀胱がん腫、気管支原性がん腫、結腸がん腫、結腸直腸がん腫、胃がん腫、肺の小細胞がん腫及び非小細胞がん腫を含む肺がん腫、副腎皮質がん腫、甲状腺がん腫、膵臓がん腫、乳がん腫、卵巣がん腫、前立腺がん腫、腺がん、汗腺がん腫、脂腺がん腫、乳頭がん腫、乳頭腺がん、嚢胞腺がん腫、髄様がん腫、腎細胞がん腫、非浸潤性乳管がん腫又は胆管がん腫、絨毛がん腫、セミノーマ、胎児性がん腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん腫、子宮がん腫、精巣がん腫、骨がん腫、上皮がん腫、及び鼻咽頭がん腫等が挙げられる。
主題の方法を使用して治療され得る肉腫としては、限定されないが、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、脊索腫、骨原性肉腫、骨肉腫、脈管肉腫、軟部肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、及び他の軟組織肉腫が挙げられる。
主題の方法を使用して治療され得る他の固形腫瘍としては、限定されないが、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、及び網膜芽腫が挙げられる。
主題の方法を使用して治療され得る白血病としては、限定されないが、ａ）慢性骨髄増殖性症候群（多能性造血幹細胞の新生物性障害）、ｂ）急性骨髄性白血病（多能性造血幹細胞又は系統可能性が制御された造血幹細胞の新生物性形質転換）、ｃ）慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ、免疫学的に未成熟であり、かつ機能不全である小さなリンパ球のクローン増殖）、Ｂ細胞ＣＬＬ、Ｔ細胞ＣＬＬ前リンパ球性白血病、及び有毛細胞白血病を含む、並びにｄ）急性リンパ芽球性白血病（リンパ芽球の蓄積を特徴とする）が挙げられる。主題の方法を使用して治療され得るリンパ腫としては、限定されないが、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンＢ細胞リンパ腫等が挙げられる。
特定の態様では、対象においてがんを治療する方法であって、このような方法が、対象に、治療有効量の本開示のコンジュゲートのうちのいずれかを含む薬学的組成物を投与することを含み、投与することが、対象においてがんを治療するのに有効である、方法が提供される。
以下の実施例は、当業者に、本発明の作製及び使用方法の完全な開示及び記載を提供するために提示されるものであり、発明者が発明とみなす範囲を限定することを意図せず、また、以下の実験が実行される全て又は唯一の実験であることを表すことを意図するものではない。使用される数字（例えば、量、温度等）に対する正確性を確保する努力がなされているが、ある程度の実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。特に指定しない限り、部は、重量部であり、分子量は、重量平均分子量であり、温度は、摂氏であり、圧力は、大気圧又は大気圧に近い圧力である。「平均」とは、算術平均を意味する。標準的な略語が使用されてもよく、例えば、ｂｐ、塩基対；ｋｂ、キロベース；ｐｌ、ピコリットル；ｓ又はｓｅｃ、秒；ｍｉｎ、分；ｈ又はｈｒ、時間；ａａ、アミノ酸；ｋｂ、キロベース；ｂｐ、塩基対；ｎｔ、ヌクレオチド；ｉ．ｍ．、筋肉内（に）；ｉ．ｐ．、腹腔内（に）；ｓ．ｃ．、皮下（に）等が使用されてもよい。
一般的な合成手順
開示される化合物を合成するのに有用な一般的に知られている化学合成スキーム及び条件を提供する多くの一般的な参照文献が利用可能である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１、又はＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照されたい）。
本明細書に記載の化合物は、ＨＰＬＣ、分取薄層クロマトグラフィー、フラッシュカラムクロマトグラフィー、及びイオン交換クロマトグラフィー等のクロマトグラフィーを含む、当該技術分野で既知の任意の精製プロトコルによって精製することができる。順相及び逆相、並びにイオン性樹脂を含む任意の好適な固定相を使用することができる。特定の実施形態では、開示される化合物は、シリカゲル及び／又はアルミナクロマトグラフィーを介して精製される。例えば、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｍｏｄｅｒｎ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｅｄ．Ｌ．Ｒ．Ｓｎｙｄｅｒ ａｎｄ Ｊ．Ｊ．Ｋｉｒｋｌａｎｄ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９７９、及びＴｈｉｎ Ｌａｙｅｒ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｅｄ Ｅ．Ｓｔａｈｌ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９６９を参照されたい。
主題の化合物の調製のためのプロセスのいずれかの間に、関心のある分子のうちのいずれかの感受性基又は反応性基を保護することが必要であり、かつ／又は望ましい場合がある。このことは、例えば、Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９７３、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９９、“Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”；Ｖｏｌｕｍｅ ３（編集者：Ｅ．Ｇｒｏｓｓ ａｎｄ Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ），Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９８１、“Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ”，Ｈｏｕｂｅｎ－Ｗｅｙｌ，４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１５／ｌ，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４、Ｈ．－Ｄ．Ｊａｋｕｂｋｅ ａｎｄ Ｈ．Ｊｅｓｃｈｅｉｔ，“Ａｍｉｎｏｓａｕｒｅｎ，Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｐｒｏｔｅｉｎｅ”，Ｖｅｒｌａｇ Ｃｈｅｍｉｅ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ Ｂｅａｃｈ，ａｎｄ Ｂａｓｅｌ １９８２、及び／又はＪｏｃｈｅｎ Ｌｅｈｍａｎｎ，“Ｃｈｅｍｉｅ ｄｅｒ Ｋｏｈｌｅｎｈｙｄｒａｔｅ：Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ Ｄｅｒｉｖａｔｅ”，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４等の標準的な研究に記載されるような従来の保護基の手段によって達成され得る。保護基は、当該技術分野で既知の方法を使用して、好都合なその後の段階で除去されてもよい。
主題の化合物は、市販されている出発物質及び／又は従来の合成方法によって調製された出発物質を使用して、様々な異なる合成経路を介して合成することができる。本明細書に開示される化合物を合成するために使用され得る合成経路の様々な例が、以下のスキームに記載される。
実施例１
抗体－薬物コンジュゲートのためのガラクトシド及びグルコシド二重切断リンカー
序論
グルクロニド－ジペプチド二重切断可能なリンカーの有用性は、例えば、以下のスキーム１に示されており、ここで、自己犠牲ユニットに接続したグルクロニド部分とともにＶａｌ－Ａｌａ－ＰＡＢＣリンカーを有するＭＭＡＥ構築物４は、抗体とコンジュゲート化すると、一般的なジペプチドＭＭＡＥ薬物リンカーと比較して、優れた安定性を有するが、インビボで同様の有効性を有する、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供した。グルクロニド系ＭＭＡＥ構築物を、１０の合成ステップで、良好な全収率で、スキーム１に示されるように合成した。この合成は、市販されていた完全に保護されたβ－グルクロン酸臭化物から開始された。中間体３のグルクロニド部分中の全てのアセテート基の必要な全体的脱保護、及びメチルエステルの切断は、強い塩基性条件（メタノール中のＬｉＯＨ）下での加水分解によって達成された。
Figure 2023551203000070
これらの強塩基条件は、ＭＭＡＥ薬物（特に強塩基に感受性ではない）に適合したものであったが、その合成の最後のステップにおける塩基性加水分解の必要性は、グルクロニド系二重切断可能なリンカーの適用を著しく制限した。実際に、抗体－薬物コンジュゲートを生成するために頻繁に使用される様々な細胞毒素は、塩基不安定な官能基を含有する（図１）。例えば、デュオカルマイシンＤＭ５中の一級塩化アルキル及びアミド基は、チューブリシンＭ６中のアセテート基及びカリケアミシン７中のエステル官能と同様に、塩基性加水分解を非常に受けやすい。マイタンシノイド８及び９は、それらの構造がエステル及びエポキシドを含有するため、塩基性条件下では特に不安定である。同様に、ＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害剤、例えば、ＳＮ－３８ １０及びエキサテカン１１中のラクトンは、穏和な塩基性条件下でさえ、加水分解することが知られている。
上述の適合性の問題にもかかわらず、本願発明者らは以前に、特定のマイタンシノイド、例えば、４ＡＰ－マイタンシン９（図１）は、依然としてグルクロニド系リンカーと対形成し得るが、このような構築物に向けた合成は、骨の折れるものであり、非効率であった（１７ステップ、全収率１．８％、スキーム２）。この合成経路では、グルクロニドリンカー１２は、別々に調製し、後の段階で、完全に脱保護された形態で合成配列をもたらし、別々に合成されたマイタンシン誘導体１３と反応させなければならなかった。
Figure 2023551203000071
この特定のマイタンシノイド（９）は、合成修飾にある程度適していたが、より魅力的なＮＭＣ３－マイタンシン（８）は、その構造要素に起因して、同様の様式で使用することはできないだろう。９（スキーム２）に使用される合成戦略を８に利用する場合、合成の後の段階で、グルクロン酸中間体１８中の２つのカルボン酸基を区別するという選択性の問題に必然的に直面し（スキーム３）、代替的かつ長期的な保護－脱保護アプローチが必要となる。
Figure 2023551203000072
結果及び考察
序論に記載された例とは対照的に、異なる生物学的に関連するグリコシドを二重切断可能なリンカーに使用した場合、より大きな範囲の細胞毒素を、合成に首尾良く使用することができる。したがって、グルクロニドの代わりにガラクトシドを使用することにより、１１の合成ステップ（スキーム４）において、ＮＭＣ３－マイタンシン（８、図１）を使用し、良好な全収率（７．５％）でＰ１’－ガラクトシド構築物３０を生成することが可能であった。カルボン酸基が存在しないことに起因して（化合物２９、スキーム４のような）、その完全に脱保護された形態でのガラクトシド部分は、化学選択性の問題を提起せず、多数の塩基感受性ＡＤＣペイロードを首尾良く利用することができる。グルコシド及びマンノシドについても、それらの構造がガラクトシドと有意に異なるわけではないため、同じことが起こると期待される。
Figure 2023551203000073
実際に、ガラクトシドと同様に、ＡＤＣを生成するのに有用な塩基感受性ペイロードの他の単糖誘導体を調製することができる。したがって、二重切断可能なグルコシドリンカーは、ＮＭＣ３－マイタンシンペイロードと首尾良く対形成し、スキーム５に示されるように、良好な全収率（１１ステップで４．９％）で、対応する構築物４４を提供した。
Figure 2023551203000074
更に、ガラクトシド又はグルコシドを利用することで、グルクロニド対応物と比較して、薬物－リンカーの一貫して更に効率的かつ高収率の合成が可能になることがわかった。したがって、スキーム６に示されるＰ１’－ガラクトシドＭＭＡＥ構築物３３への合成経路により、優れた全収率で所望の化合物を生成した（グルクロニド構築物について、９．４％対４．２％、表１）。
Figure 2023551203000075
同様に、グルクロニド含有化合物４と比較した場合に、対応する単糖誘導体４１から開始して、グルコシド同族体４６を、改変された合成経路（スキーム７）に従って、より効率的な方法で調製した（グルクロニド構築物について、収率７．６％対４．２％、表１）。
Figure 2023551203000076
更に、材料コストの比較により、平均して必要なガラクトース及びグルコース誘導体が、対応するグルクロン酸誘導体よりも１０～２０倍安価であることが明らかになった（表１を参照されたい）。
Figure 2023551203000077
酵素的に切断可能なジペプチドに近接してリンカーに組み込まれる場合、グリコシドは、循環中の抗体－薬物コンジュゲートジペプチドリンカーの早期切断を防止する一時的な保護基として機能し得る。ＡＤＣが細胞のリソソーム区画内にトラフィッキングされると、グリコシド部分は、ジペプチドリンカーを露出するためにリソソームグリコシダーゼによって切断されなければならず、次いで、酵素媒介性の切断を受けてペイロードを放出する。異なる基質嗜好性、並びに異なる細胞及び組織の発現パターンを有するいくつかのヒトグリコシダーゼが存在する。以前に、ペイロード遊離の達成に向けた第１のステップとして、グルクロニド部分が多種多様な細胞型において効率的に除去され得ることを示すことができたが、ガラクトシド又はグルコシド部分が同様に処理されるか否かは明らかではなかった。この問題に対処するために、構築物３０及び３３を、アルデヒドタグ化抗ＨＥＲ２及び抗ＣＤ７９ｂ抗体とのＨＩＰＳライゲーションを使用してコンジュゲートし、構築物４４及び４６を、アルデヒドタグ化抗ＦＩＴＣ、抗ＨＥＲ２、及び抗ＴＲＯＰ－２抗体とのＨＩＰＳライゲーションを使用してコンジュゲートした（図２）。得られたコンジュゲートの分析的特性決定が図３～図１０及び図１９～図３０に示される。
得られたコンジュゲートのインビトロ活性を、ＨＥＲ２＋（ＮＣＩ－Ｎ８７、Ｓｋ－Ｂｒ－３）、ＣＤ７９ｂ＋（Ｇｒａｎｔａ－５１９、Ｒａｍｏｓ－ＲＡ）、及びＴＲＯＰ－２＋（ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＢｘＰＣ３）がん細胞株を使用して試験した。いくつかの研究では、ガラクトシド修飾二重切断可能なリンカー（３０）を保有するマイタンシンコンジュゲートＡＤＣの効力を、単一切断可能なリンカーペイロード３５（図１１に示される構築物３５、図１２～図１５に示されるインビトロ効力データ）から生成された対応するＡＤＣの活性と比較した。他の研究では、ガラクトシド修飾二重切断可能なリンカー（３０）を保有するマイタンシンコンジュゲートＡＤＣの効力を、グルコシド修飾二重切断可能なリンカー４４を使用して生成された対応するＡＤＣの活性と比較した（図３１～図３４に示されるインビトロ効力データ）。ＭＭＡＥコンジュゲートＡＤＣに関して、ガラクトシド修飾（３３）又はグルコシド修飾（４６）二重切断可能なリンカーのインビトロ効力を、グルクロニド修飾二重切断可能なリンカー３４のインビトロ効力（図１１に示される構築物３４、図１６～図１８、図３５、及び図３６に示されるインビトロ効力データ）と比較した。まとめると、その結果は、固形（胃がん、膵臓がん、及び乳がん）及び血液腫瘍の適応症の両方を表す細胞株にわたって、グルクロニド、ガラクトシド、及びグルコシドバリアントを含む単一切断可能なリンカー及び二重切断可能なリンカーを用いて作製されたＡＤＣが、同様のレベルの効力を提供することを示した。そのデータは、グリコシダーゼ発現パターン及び基質特異性が知られていないにもかかわらず、ガラクトシド及びグルコシド部分の除去が、強固かつ効率的であり、全体的なＡＤＣ異化及びペイロード放出は、試験した全てのリンカーについて同等であったことを示唆している。
材料及び方法
一般
合成試薬は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ａｃｒｏｓ、ＡＫ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、又は他の商業的供給源から購入し、精製することなく使用した。無水溶媒は、商業的供給源から密封されたボトルの状態で得た。アセトブロモ－α－Ｄ－ガラクトース２１、アセトブロモ－α－Ｄ－グルコース３６、ＭＭＡＥ２、及びマイタンシン１７を、商業的供給源から購入した。ＨＩＰＳリンカー化合物３２は、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｍｅｄｉｃｉｌｏｎから商業的に得て、精製することなく使用した。標準的な文献の手順を使用して、ペンタフルオロ－エステル２８を、３２から合成した。化合物３４及び３５の合成は、以前に記載した。全ての場合に、溶媒を、Ｂｕｃｈｉ Ｖ－７００真空ポンプを取り付けたＢｕｃｈｉ Ｒｏｔｏｖａｐｏｒ Ｒ－１１４を用い、減圧下で除去した。Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａクロマトグラフィーシステムを用いて、カラムクロマトグラフィーを行った。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ ５μｍ ＥＶＯ Ｃ１８ １５０×２１．２ｍｍカラムを取り付けたＷａｔｅｒｓ分取ＨＰＬＣユニットを使用して、分取ＨＰＬＣ精製を行った。Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３２２Ａ Ｄｅｇａｓｓｅｒ、Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３１１Ａ Ｑｕａｒｔｅｒｎａｒｙ Ｐｕｍｐ、Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３２９Ａ Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ、Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３１４ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ １２０ ＳＢ Ｃ１８，４．６ｍｍ×５０ｍｍカラムを取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ １１００ Ｓｅｒｉｅｓ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ＨＰＬＣで、室温で、０．１％ギ酸を含有する水及びアセトニトリルの１０～１００％勾配を使用して、ＨＰＬＣ分析を実施した。ＨＰＬＣを２５４ｎｍでモニタリングした。
構築物３０及び３３の合成
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（５－ホルミル－２－ニトロフェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２１ａ）の調製
５０ｍＬの丸底フラスコに、２０４ｍｇ（１．２２ｍｍｏｌ）の３－ヒドロキシ－４－ニトロベンズアルデヒド２０及びアセトブロモ－α－Ｄ－ガラルクトース２１（５００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、続いて２０ｍＬの無水アセトニトリルを充填した。溶液を酸化銀（Ｉ）（９８６ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を暗所で２４時間、室温で激しく撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した後、残渣を、酢酸エチル－ヘキサン混合物を溶出液（０～１００％の勾配）として使用したシリカゲルで精製し、４２０ｍｇ（０．８５ｍｍｏｌ、収率７０％）の生成物を淡い黄色がかった固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ５２０．０［Ｍ＋Ｎａ］＋、Ｃ２１Ｈ２３ＮＯ１３についての計算値ｍ／ｚ ５２０．１。
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－アミノ－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２２）の調製
アセテート保護されたガラクトシド中間体２１ａ（３５０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル３ｍＬ溶液に、炭素上のパラジウム３０ｍｇ（１０重量％）及びトリエチルアミン３０μＬを加えた。空気を除去した後、フラスコに水素バルーンを取り付け、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。セライトのパッドを通して濾過した後、溶媒を真空下で除去し、残渣を高真空下で乾燥させ、３００ｍｇの粗生成物２２を白色固体として得て、これを更に精製することなく、更に合成で使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ４７０．１［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ２１Ｈ２７ＮＯ１１についての計算値ｍ／ｚ ４７０．２。
（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（アセトキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２６）の調製
Ｂｏｃ－Ｌ－アラニン（２２０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）及びアニリン誘導体２２（５２０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を、５ｍＬの無水ジクロロメタン及び０．５０ｍＬの無水メタノール中で合わせた。得られた溶液を、ＥＥＤＱ（２８０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を用い、室温で処理した。反応混合物を暗所で１時間撹拌した、次いで、溶媒を真空中で除去した。得られた粗化合物２３を高真空下で１時間乾燥させ、６ｍＬの１：１のＴＦＡ－ＤＣＭ混合物に室温で溶解させた。溶液を１時間放置した後、溶媒を除去し、得られた粗アミン２４を高真空下で数時間保存した。
別個の２０ｍＬシンチレーションバイアル中、Ｆｍｏｃ－Ｌ－バリン（３７５ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を、３ｍＬの無水ＤＭＦ中、ＨＡＴＵ（４２０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（３７５μＬ、２．１５ｍｍｏｌ）と混合した。混合物を室温で３０分間撹拌し、粗化合物２４と合わせ、ＬＣＭＳ分析によって反応が完了したと判断されるまで、撹拌を一晩続けた。反応混合物を逆相Ｃ１８カラム（ＣＨ３ＣＮ－Ｈ２Ｏ／０．０５％ＴＦＡ、０～８０％勾配）で直接的に精製し、化合物２５を微量不純物との混合物として得た。生成物を高真空下で十分に乾燥させ、更に精製することなく次のステップを行った。
化合物２５を６ｍＬの無水ＤＣＭに溶解させ、ＤＩＰＥＡ（３７５μＬ、２．１５ｍｍｏｌ）で処理し、続いて６８６ｍｇ（２．２６ｍｍｏｌ）のビス（４－エントロフェニル（ｎｔｒｏｐｈｅｎｙｌ））カーボネートを一度に用い、室温で処理した。反応混合物を１時間撹拌し、次いで、溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ－ヘキサン、１０～１００％勾配）によって精製して、ｐ－ニトロフェニルカーボネート生成物２６（６４０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ、４ステップで収率５６％）を黄色がかった固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １０４９．３［Ｍ＋Ｎａ］＋、Ｃ５１Ｈ５４Ｎ４Ｏ１９についての計算値ｍ／ｚ １０４９．３。
４－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－３－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ブタン酸（２７）の調製
２０ｍＬのシンチレーションバイアルに、４－（メチルアミノ）ブタン酸（６１ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、６１μＬ（０．３５ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡ、及び１ｍＬの無水ＤＭＦを加えた。得られた溶液を１８０ｍｇ（０．１７５ｍｍｏｌ）のＰＮＰ－カーボネート２６と室温で合わせた。ＬＣＭＳ分析によって判断される場合にＰＮＰ－カーボネートが完全に消費されるまで、反応混合物を１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣を３ｍＬのメタノールに溶解した。得られた溶液を０℃まで冷却し、３ｍＬの１Ｍ水酸化リチウム水溶液で処理した。反応混合物を３０分間撹拌し、次いで、室温まで加温し、真空下で濃縮した。残渣を逆相Ｃ１８カラム（ＣＨ３ＣＮ－Ｈ２Ｏ／０．０５％ＴＦＡ、０～５０％勾配）で直接的に精製し、９０ｍｇ（０．１４６ｍｍｏｌ、２ステップで収率８３％）の化合物２７を黄色油状物として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６１５．３［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ２７Ｈ４２Ｎ４Ｏ１２についての計算値ｍ／ｚ ６１５．３。
（２Ｓ，５Ｓ，１８Ｒ）－１－（（４－（（（（４－（（（Ｓ）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３２Ｒ，３３Ｒ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジンアナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－１－オキソプロパン－２－イル）（メチル）アミノ）－４－オキソブチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）メチル）－２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）フェニル）アミノ）－１８－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパンアミド）－５－イソプロピル－２－メチル－１，４，７，１７－テトラオキソ－１０，１３－ジオキサ－３，６，１６－トリアザノナデカン－１９－スルホン酸（３０）の調製
２０ｍＬのシンチレーションバイアルに、化合物２７（８４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、１ｍＬの無水ＤＭＦ、及びＤＩＰＥＡ（４８μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を加え、続いて１３０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）のペンタフルオロエステル２８を加えた。カップリングが完了したと判断されるまで（ＬＣＭＳ）、得られた混合物を３０分間撹拌した。マイタンシン１７（８９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ０．５ｍＬ中の溶液として反応混合物に直接加え、続いてＨＡＴＵ（５２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、反応混合物を逆相Ｃ１８カラム（ＣＨ３ＣＮ－Ｈ２Ｏ／０．０５％ＴＦＡ、１０～９５％勾配）で精製した。溶媒を完全に除去した後、得られた中間体２９を３ｍＬのＤＭＦに溶解させ、１５０μＬのピペリジンを用い、室温で処理した。３０分後、反応混合物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、ＣＨ３ＣＮ－Ｈ２Ｏ／０．０５％ＴＦＡ、０～５０％勾配）で直接的に精製した。純粋な画分を凍結乾燥させ、５８ｍｇ（０．０３２ｍｍｏｌ、３ステップで収率２３％）の化合物３０を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １８０１．８［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ８２Ｈ１１８ＣｌＮ１３Ｏ２８Ｓについての計算値ｍ／ｚ １８００．８。
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３１）の調製
４ｍＬのガラスバイアル中、ＭＭＡＥ２（１３．４ｍｇのＴＦＡ塩、０．０１６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．８μＬ、０．０２２ｍｍｏｌ）、及び１ｍＬの無水ＤＭＦを混合した。得られた溶液を、ＰＮＰ－カーボネート２６（１５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）及びＨＯＡｔ（１．０ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）で処理した。室温で一晩撹拌した後、ピペリジン（３０μＬ）を反応混合物に直接加えた。３０分後、反応混合物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、ＣＨ３ＣＮ－Ｈ２Ｏ／０．０５％ＴＦＡ、０～５０％勾配）で精製した。純粋な画分を凍結乾燥させ、８ｍｇ（０．００６ｍｍｏｌ、２ステップで収率４０％）の化合物３１をオフホワイト色固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １３８３．５［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ６９Ｈ１０６Ｎ８Ｏ２１についての計算値ｍ／ｚ １３８３．８。
（２Ｓ，５Ｓ，１８Ｒ）－１－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）－２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）フェニル）アミノ）－１８－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパンアミド）－５－イソプロピル－２－メチル－１，４，７，１７－テトラオキソ－１０，１３－ジオキサ－３，６，１６－トリアザノナデカン－１９－スルホン酸（３３）の調製
４ｍＬのガラスバイアル中、化合物３１（８ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）、ＨＩＰＳリンカー化合物３２（４．５ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．５μＬ、０．００９ｍｍｏｌ）、及び２．３ｍｇ（０．０６ｍｍｏｌ）のＨＡＴＵを１ｍＬのＤＭＦ中で合わせた。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、ＤＭＦを真空中で除去し、残渣を１ｍＬのメタノールに溶解させた。この溶液に、１ｍＬの１Ｍ水酸化リチウム水溶液を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、ＣＨ３ＣＮ－Ｈ２Ｏ／０．０５％ＴＦＡ、１０～６０％勾配）で直接的に精製し、純粋な画分を凍結乾燥して、６ｍｇ（０．００３３ｍｍｏｌ、２ステップで収率６０％）の化合物３３をオフホワイト色粉末として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １７７０．９［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ８４Ｈ１３２Ｎ１４Ｏ２５Ｓについての計算値ｍ／ｚ １７６９．９。
構築物４４及び４６の合成
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－アミノ－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３７）の調製。
無水アセトニトリル（１００ｍＬ）中の化合物２０（５．０ｇ、２９．９ｍｍｏｌ、１．７当量）及び化合物３６（７．２３ｇ、１７．６ｍｍｏｌ、１当量）の混合物に、酸化銀（Ｉ）（１５．６ｇ、８７．９ｍｍｏｌ、５当量）を加えた。混合物を窒素下、暗所で、２５℃で２４時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（０～３０％ヘキサン－ＥｔＯＡｃ）によって精製した。ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）中の中間体アルデヒド（５．６１ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．５ｍＬ）の混合物に、炭素上パラジウム（１０重量％、８００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物をＨ２雰囲気下、２５℃で２４時間撹拌した。固体を濾別し、得られた濾液を濃縮して、５．２ｇ（１１．１ｍｍｏｌ、収率９８％）の生成物３７を白色固体として得て、これを更に精製することなく次のステップに使用した。
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３８）の調製。
無水ＤＣＭ（４０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（４ｍＬ）中の化合物３７（５．２０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ－Ｌ－Ａｌａ－ＯＨ（１．７５ｇ、９．２５ｍｍｏｌ）及びＥＥＤＱ（２．３ｇ、９．２５ｍｍｏｌ）の混合物を、暗所で、室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、５．５ｇの粗生成物３８を黄色固体として得た。粗生成物を、更に精製することなく次のステップで使用した。
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３９）の調製。
粗化合物３８（５．５ｇ、８．６ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（２３ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液を室温で１０分間撹拌し、真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含む０～７５％アセトニトリル－水）によって精製した。純粋な画分を合わせ、濃縮し、４．０ｇの生成物アミン３９を黄色油状物として得た（７．５ｍｍｏｌ、３ステップで収率６６％）。
（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（アセトキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４０）の調製。
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｌ－バリン（３．１ｇ、９．２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（３．９ｍＬ、２２．２ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（３．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。得られた溶液を室温で３０分間撹拌し、次いでアミン３９（４．０ｇ、７．５ｍｍｏｌ）と合わせた。反応混合物を１６時間撹拌し、真空中で濃縮した。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、０～１００％）によって精製し、化合物４０（４．５ｇ、５．２ｍｍｏｌ、収率７０％）を白色固体として得た。
（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（アセトキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４１）の調製。
無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のアルコール４０（４．５ｇ、５．２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（４．５ｍＬ、２６．１ｍｍｏｌ、５当量）の混合物に、ビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（７．９ｇ、２６．１ｍｍｏｌ、５当量）を加えた。得られた混合物を室温で２４時間撹拌し、真空下で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィー（０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル－水０～７０％）によって精製し、４－ニトロフェニルカーボネート生成物４１を白色固体として得た（３．９ｇ、収率７３％）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １０２７．３［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ５１Ｈ５４Ｎ４Ｏ１９についての計算値ｍ／ｚ １０２７．３。
４－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－３－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ブタン酸（４２）の調製。
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中のｐ－ニトロフェニルカーボネート４１（３８０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１当量）及び４－（メチルアミノ）ブタン酸（５５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、１．２５当量）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（１９０μＬ、１．１１ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。得られた混合物を１６時間撹拌し、真空下で濃縮し、残渣をＴＨＦ（２ｍＬ）に再溶解させた。ＴＨＦ溶液（ｓｏｌｔｉｕｏｎ）に、室温で２ｍＬの１ＭのＬｉＯＨ水溶液を加え、ＨＰＬＣ分析によって加水分解が完了したと判断されるまで２時間撹拌した。反応混合物（ｍｉｔｕｒｅ）を１ＭのＨＣｌ（２ｍＬ）でクエンチし、ＤＭＦ（１ｍＬ）で希釈し、逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル－水０～７５％ＭｅＣＮ）によって精製した。純粋な画分を収集し、減圧下で濃縮し、凍結乾燥させて、化合物４２を白色固体として得た（１６０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、２ステップで収率７０％）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６１５．３［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ２７Ｈ４２Ｎ４Ｏ１２についての計算値ｍ／ｚ ６１５．３。
４－（（（（４－（（２Ｓ，５Ｓ，１８Ｒ）－５－イソプロピル－２－メチル－４，７，１７，２０－テトラオキソ－１８－（スルホメチル）－２２－（２－（（１，２，２－トリメチルヒドラジンエイル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）－１０，１３－ジオキサ－３，６，１６，１９－テトラアザドコサンアミド）－３－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ブタン酸（４３）の調製。
化合物３２（９７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（４０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、０．８５当量）、続いてＤＩＰＥＡ（６３μＬ、０．３６ｍｍｏｌ、３当量）を室温で加えた。得られた混合物を１時間撹拌し、次いで、ＤＭＦ中の化合物４２の０．１Ｍ溶液（１．２２ｍＬ、０．１２ｍｍｏｌ、１当量）と合わせた。ＨＰＬＣ分析によって判断される場合に全ての出発物質が消費されるまで、反応混合物を３０分間撹拌した。混合物を逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル－水０～７５％ＭｅＣＮ）によって直接的に精製した。純粋な画分を収集し、凍結乾燥させ、生成物４３を白色固体として得た（１０７ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、収率６７％）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １３９１．６［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ６５Ｈ８６Ｎ１０Ｏ２２Ｓについての計算値ｍ／ｚ １３９１．６。
（２Ｓ，５Ｓ，１８Ｒ）－１－（（４－（（（（４－（（（Ｓ）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３２Ｒ，３３Ｒ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジンアナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－１－オキソプロパン－２－イル）（メチル）アミノ）－４－オキソブチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）メチル）－２－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）フェニル）アミノ）－１８－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジンエイル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパンアミド）－５－イソプロピル－２－メチル－１，４，７，１７－テトラオキソ－１０，１３－ジオキサ－３，６，１６－トリアザノナデカン－１９－スルホン酸（４４）の調製。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物４３（３５ｍｇ、２５μｍｏｌ）及びマイタンシン１７（１６ｍｇ、２５μｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（１９ｍｇ、５１μｍｏｌ、２当量）を室温で加え、続いてＤＩＰＥＡ（１３μＬ、７６μｍｏｌ、３当量）を加えた。ＨＰＬＣ分析によって判断される場合に全ての出発物質が消費されるまで、反応混合物を３０分間撹拌した。次いで、ピペルジン（４９μＬ、０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を室温で１回のショットで、上述の溶液に直接添加し、反応混合物を３０分間撹拌した。混合物を分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル－水０～７５％ＭｅＣＮ）によって精製した。純粋な画分を合わせ、凍結乾燥させ、化合物４４を白色固体として得た（２１ｍｇ、１２μｍｏｌ、収率４８％）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １８００．７［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ８２Ｈ１１８ＣｌＮ１３Ｏ２８Ｓについての計算値１８００．８。
４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－３－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）ベンジル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシ－５－メチル－１－オキソヘプタン－４－イル）（メチル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）（メチル）カルバメート（４５）の調製。
モノメチルアウリスタチンＡ２（５０ｍｇ、７０μｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を、ＨＯＡｔ（９．５ｍｇ、７０μｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（３６μＬ、２０９μｍｏｌ）を用い、室温で処理した。この混合物に、化合物４１（７２ｍｇ、７０μｍｏｌ、１当量）を固体として一度に室温で添加した。ＬＣＭＳ分析によって判断される場合に全ての出発物質が消費されるまで、反応混合物を４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をＴＨＦ（２ｍＬ）に再溶解させた。ＴＨＦ溶液（ｓｏｌｔｉｕｏｎ）を、１ＭのＬｉＯＨ水溶液（２ｍＬ）を用い、室温で処理し、加水分解が完了するまで２時間撹拌した。反応混合物（ｍｉｔｕｒｅ）を１ＭのＨＣｌ（２ｍＬ）でクエンチし、ＤＭＦ（１ｍＬ）で希釈し、逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル－水０～７５％ＭｅＣＮ）によって精製した。純粋な画分を合わせ、減圧下で濃縮し、凍結乾燥させて、生成物４５を白色固体として得た（６８ｍｇ、５６μｍｏｌ、収率８０％）。
（２Ｓ，５Ｓ，１８Ｒ）－１－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）－２－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）フェニル）アミノ）－１８－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジンエイル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパンアミド）－５－イソプロピル－２－メチル－１，４，７，１７－テトラオキソ－１０，１３－ジオキサ－３，６，１６－トリアザノナデカン－１９－スルホン酸（４６）の調製。
カルボン酸３２（５０ｍｇ、６３μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（２ｍＬ）に、ＨＡＴＵ（２４ｍｇ、６３μｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（３３μＬ、１８９μｍｏｌ）を室温で加えた。得られた混合物を１時間撹拌し、化合物４５（６８ｍｇ、６３μｍｏｌ）と合わせた。ＨＰＬＣ分析によって判断される場合に全ての出発物質が消費されるまで、反応混合物を５時間撹拌した。次いで、ピペルジン（１１０μＬ、２０当量）を室温で１回のショットで、上述の溶液に加え、反応混合物を３０分間撹拌し、溶液が酸性になるまでｐＨ４．７の０．５Ｍの酢酸緩衝液で希釈し、分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、０．０５％のＴＦＡを含むアセトニトリル水０～７５％のＭｅＣＮ）によって精製した。純粋な画分を収集し、凍結乾燥させ、化合物４６を白色固体として得た（４７ｍｇ、収率４３％）。）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １７６９．９［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ８４Ｈ１３２Ｎ１４Ｏ２５Ｓについての計算値１７６９．９。
実施例２
バイオコンジュゲート化、精製、及びＨＰＬＣ分析
方法
Ｃ末端アルデヒドタグ化抗体（１５ｍｇ／ｍＬ）を、０．８５ｍＭ（８モル当量薬物：抗体）でリンカーペイロード３０、３３、４４、及び４６に、０．８５％ＤＭＡを含有する２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５（２０／５０緩衝液）中、３７℃で７２時間かけてコンジュゲートした。遊離薬物を、３０ｋＤのＭＷＣＯ ０．５ｍＬのＡｍｉｃｏｎスピン濃縮器を使用して除去した。試料をスピン濃縮器に添加し、１５，０００×ｇで７分間遠心分離し、次いで４５０μＬの２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５で希釈し、再び遠心分離した。このプロセスを１０回繰り返した。最終生成物のＤＡＲを決定するために、ＡＤＣを、移動相Ａ：１．５Ｍの硫酸アンモニウム、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０、及び移動相Ｂ：２５％のイソプロパノール、１８．７５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０を用いた分析ＨＩＣ（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７）によって、試験した。凝集を測定するために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ６．８の移動相を用いた分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。
結果
重鎖Ｃ末端（ＣＴ）にアルデヒドタグを含有するように修飾されたαＨＥＲ２（トラスツズマブ）及びαＣＤ７９ｂ（ポラツズマブ）抗体を、それぞれ、マイタンシンを有するリンカーペイロード３０及びＭＭＡＥを有するリンカーペイロード３３にコンジュゲートした。これらの反応は、高収率であり、ほぼ定量的なコンジュゲート化効率及び９５％を超える全収率を有していた。得られたＡＤＣは、１．７９～１．８９の薬物対抗体比（ＤＡＲ）を有しており、主にモノマーであった。図３～図１０は、ＨＩＣによって決定されるＤＡＲ及びＳＥＣによって決定されるモノマー完全性に関して、代表的なＡＤＣを示す。
重鎖Ｃ末端（ＣＴ）にアルデヒドタグを含有するように修飾されたαＨＥＲ２（トラスツズマブ）、αＴＲＯＰ－２（サシツズマブ）、及び抗ＦＩＴＣ抗体を、それぞれ、マイタンシンを有するリンカーペイロード４４及びＭＭＡＥを有するリンカーペイロード４６にコンジュゲートした。これらの反応は、一般に高収率であった。得られたＡＤＣは、１．１５～１．７９の薬物対抗体比（ＤＡＲ）を有しており、主にモノマーであった。図１９～３０は、ＰＬＲＰによって決定されるＤＡＲ及びＳＥＣによって決定されるモノマー完全性に関して、代表的なＡＤＣを示す。
実施例３
インビトロ細胞傷害性
方法
ＣＤ７９ｂ陽性Ｂ細胞リンパ腫細胞株（Ｇｒａｎｔａ ５１９及びＲａｍｏｓ－ＲＡ）、ＨＥＲ２＋胃がん及び乳がん細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７及びＳＫＢＲ３）、並びにＴＲＯＰ－２＋膵臓がん及び乳がん細胞株（ＢｘＰＣ３及びＭＤＡ－ＭＢ－４６８）を、ＤＳＭＺ及びＡＴＣＣ細胞バンクから入手した。供給業者に推奨されるように、細胞を成長培地中で維持した。プレーティングの２４時間前に、細胞を継代させ、対数相成長を確実にした。プレーティング当日に、１００μＬの通常成長培地中で、５０００個の細胞／ウェルを９６ウェルプレートに播種した。細胞を、様々な濃度で２０μＬの希釈分析物で処理し、プレートを５％ＣＯ２の雰囲気下、３７℃でインキュベートした。５日後、１００μＬ／ウェルのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５プレートリーダーを使用して発光を測定した。データ分析には、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用した。
結果
ガラクトシド修飾二重切断可能なリンカー及びグルコシド修飾二重切断可能なリンカーは、抗原陽性細胞株に対して強力な（ナノモル未満の）インビトロ細胞傷害性を示し、遊離ペイロード及び単一切断可能なリンカー又はグルクロニド修飾二重切断可能なリンカーを保有するＡＤＣに匹敵する活性を有していた（図１２～図１８及び図３１～図３６）。
本発明は、その具体的な実施形態に関して説明されてきたが、本発明の真の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々な変更が行われてもよく、同等物が置き換えられてもよいことを当業者は理解するはずである。加えて、本発明の客観的な趣旨及び範囲に対して、特定の状況、材料、物質の組成物、プロセス、プロセスステップ又はステップを採用するために多くの変更を行うことができる。全てのそのような修正は、本明細書に添付される特許請求の範囲内であることが意図される。

Claims (51)

  1. コンジュゲートであって、
    抗体と、
    薬物と、
    前記抗体を前記薬物に連結し、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃからなる群から選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を含む、切断可能なリンカーと、を含む、コンジュゲート。
  2. 前記コンジュゲートが、式（Ｉ）のコンジュゲートであり、
    Figure 2023551203000078
     式中、
    Ｚが、ＣＲ４又はＮであり、
    Ｘが、Ｏ又はＮＲ４であり、
    Ｒ１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
    Ｒ２及びＲ３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
    各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
    各Ｒ５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、及び置換アルキニルから選択され、
    各Ｒ６が、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
    ｋが、１～１０の整数であり、
    Ｒ７が、第２の酵素的に切断可能な部分を含み、
    Ｌ１が、第１のリンカーであり、
    Ｌ２が、第２のリンカーであり、
    Ｗ１が、前記薬物であり、
    Ｗ２が、前記抗体である、請求項１に記載のコンジュゲート。
  3. ｋが、２であり、
    前記コンジュゲートが、式（Ｉａ）のコンジュゲートである、請求項２に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000079
  4. 前記第２の酵素的に切断可能な部分が、ガラクトシドを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  5. 前記第２の酵素的に切断可能な部分が、グルコシドを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  6. 前記第２の酵素的に切断可能な部分が、マンノシドを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  7. 前記第２の酵素的に切断可能な部分が、フコシドを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  8. 前記第２の酵素的に切断可能な部分が、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  9. 前記第２の酵素的に切断可能な部分が、Ｏ－ＧａｌＮＡｃを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  10. 前記コンジュゲートが、式（Ｉｂ）のコンジュゲートである、請求項３に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000080
  11. 前記コンジュゲートが、式（Ｉｃ）のコンジュゲートである、請求項３に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000081
  12. 前記コンジュゲートが、式（Ｉｄ）のコンジュゲートである、請求項３に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000082
  13. 前記コンジュゲートが、式（Ｉｅ）のコンジュゲートである、請求項３に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000083
  14. 前記コンジュゲートが、式（Ｉｆ）のコンジュゲートである、請求項３に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000084
  15. 前記コンジュゲートが、式（Ｉｇ）のコンジュゲートである、請求項３に記載のコンジュゲート。
    Figure 2023551203000085
  16. Ｌ１が、
    －（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－
    を含み、
    式中、
    ａ、ｂ、ｃ、及びｄが、各々独立して、０又は１であり、
    Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
    Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
    各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
    各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項２～１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  17. Ｌ２が、
    －（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－
    を含み、
    式中、
    ｅ、ｆ、ｇ、及びｈが、各々独立して、０又は１であり、
    Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
    Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
    各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
    各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項２～１６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  18. Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル及び置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
    Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
    Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
    式中、
    （ＰＥＧ）ｎが、
    Figure 2023551203000086
     であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
    ＥＤＡが、以下の構造
    Figure 2023551203000087
     を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
    ４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
    Figure 2023551203000088
     であり、
    各Ｒ１２及びＲ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
    Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される、請求項１６に記載のコンジュゲート。
  19. Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、
    Ｔ２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ２が、－ＮＨ－であり、
    Ｔ３が、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、
    ｄが、０である、請求項１６～１８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  20. Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯ－であり、
    ｆ、ｇ、及びｈが、０である、請求項１６～１９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  21. Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯＮＲ１５－であり、
    Ｔ６が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ６が、－ＣＯ－であり、
    ｇ及びｈが、０である、請求項１６～１９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  22. 前記薬物が、細胞毒素、キナーゼ阻害剤、免疫刺激剤、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、オリゴヌクレオチド、アプタマー、サイトカイン、ステロイド、及びペプチドからなる群から選択される、請求項１～２１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  23. 前記薬物が、アウリスタチン、マイタンシン、及びデュオカルマイシンからなる群から選択される、請求項１～２１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  24. 前記薬物が、チューブリシンＭ、カリケアミシン、ＳＮ－３８、エキサテカン、ＳＴＡＴ３阻害剤、アルファ－アマニチン、オーロラキナーゼ阻害剤、ベロテカン、９－アミノカンプトテシン（９－ＡＣ）、及びアントラサイクリンからなる群から選択される、請求項１～２１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  25. 化合物であって、
    抗体を薬物に連結するための切断可能なリンカーを含み、前記切断可能なリンカーが、第１の酵素的に切断可能な部分、並びにガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃからなる群から選択されるグリコシドを含む第２の酵素的に切断可能な部分を含む、化合物。
  26. 前記化合物が、式（ＩＩ）の化合物であり、
    Figure 2023551203000089
     式中、
    Ｚが、ＣＲ４又はＮであり、
    Ｘが、Ｏ又はＮＲ４であり、
    Ｒ２及びＲ３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ２及びＲ３が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
    各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
    各Ｒ５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
    各Ｒ６が、独立して、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
    ｋが、１～１０の整数であり、
    Ｒ７が、前記第２の酵素的に切断可能な部分を含み、
    Ｌ１が、第１のリンカーであり、
    Ｌ２が、第２のリンカーであり、
    Ｗ１が、薬物である、請求項２５に記載の化合物。
  27. ｋが、２であり、
    前記化合物が、式（ＩＩａ）の化合物である、請求項２６に記載の化合物。
    Figure 2023551203000090
  28. 前記第２の切断可能な部分が、ガラクトシドを含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の化合物。
  29. 前記第２の切断可能な部分が、グルコシドを含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の化合物。
  30. 前記第２の切断可能な部分が、マンノシドを含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の化合物。
  31. 前記第２の切断可能な部分が、フコシドを含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の化合物。
  32. 前記第２の切断可能な部分が、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃを含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の化合物。
  33. 前記第２の切断可能な部分が、Ｏ－ＧａｌＮＡｃを含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の化合物。
  34. 前記化合物が、式（ＩＩｂ）の化合物である、請求項２７に記載の化合物。
    Figure 2023551203000091
  35. 前記化合物が、式（ＩＩｃ）の化合物である、請求項２７に記載の化合物。
    Figure 2023551203000092
  36. 前記化合物が、式（ＩＩｄ）の化合物である、請求項２７に記載の化合物。
    Figure 2023551203000093
  37. 前記化合物が、式（ＩＩｅ）の化合物である、請求項２７に記載の化合物。
    Figure 2023551203000094
  38. 前記化合物が、式（ＩＩｆ）の化合物である、請求項２７に記載の化合物。
    Figure 2023551203000095
  39. 前記化合物が、式（ＩＩｇ）の化合物である、請求項２７に記載の化合物。
    Figure 2023551203000096
  40. Ｌ１が、
    －（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－
    を含み、
    式中、
    ａ、ｂ、ｃ、及びｄが、各々独立して、０又は１であり、
    Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
    Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
    各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
    各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項２６～３９のいずれか一項に記載の化合物。
  41. Ｌ２が、
    －（Ｔ５－Ｖ５）ｅ－（Ｔ６－Ｖ６）ｆ－（Ｔ７－Ｖ７）ｇ－（Ｔ８－Ｖ８）ｈ－
    を含み、
    式中、
    ｅ、ｆ、ｇ、及びｈが、各々独立して、０又は１であり、
    Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、及びＴ８が、各々独立して、共有結合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
    Ｖ５、Ｖ６、Ｖ７、及びＶ８が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
    各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
    各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項２６～４０のいずれか一項に記載の化合物。
  42. Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル及び置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
    Ｔ２、Ｔ３、及びＴ４が、各々独立して、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
    Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、及びＶ４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
    式中、
    （ＰＥＧ）ｎが、
    Figure 2023551203000097
     であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
    ＥＤＡが、以下の構造
    Figure 2023551203000098
     を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
    ４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
    Figure 2023551203000099
     であり、
    各Ｒ１２及びＲ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
    Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される、請求項４０に記載の化合物。
  43. Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、
    Ｔ２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ２が、－ＮＨ－であり、
    Ｔ３が、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、
    ｄが、０である、請求項４０～４２のいずれか一項に記載の化合物。
  44. Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯ－であり、
    ｆ、ｇ、及びｈが、０である、請求項４０～４３のいずれか一項に記載の化合物。
  45. Ｔ５が、共有結合であり、Ｖ５が、－ＣＯＮＲ１５－であり、
    Ｔ６が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ６が、－ＣＯ－であり、
    ｇ及びｈが、０である、請求項４０～４３のいずれか一項に記載の化合物。
  46. 前記薬物が、細胞毒素、キナーゼ阻害剤、免疫刺激剤、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、オリゴヌクレオチド、アプタマー、サイトカイン、ステロイド、及びペプチドからなる群から選択される、請求項２５～４５のいずれか一項に記載の化合物。
  47. 前記薬物が、アウリスタチン、マイタンシン、及びデュオカルマイシンからなる群から選択される、請求項２５～４５のいずれか一項に記載の化合物。
  48. 前記薬物が、チューブリシンＭ、カリケアミシン、ＳＮ－３８、エキサテカン、ＳＴＡＴ３阻害剤、アルファ－アマニチン、オーロラキナーゼ阻害剤、ベロテカン、９－アミノカンプトテシン（９－ＡＣ）、及びアントラサイクリンからなる群から選択される、請求項２５～４５のいずれか一項に記載の化合物。
  49. 薬学的組成物であって、
    請求項１～２４のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、
    薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物。
  50. 対象にコンジュゲートを投与する方法であって、前記方法が、
    対象に、請求項１～２４のいずれか一項に記載のコンジュゲートを投与することを含む、方法。
  51. 対象においてがんを治療する方法であって、前記方法が、
    対象に、請求項１～２４のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む治療有効量の薬学的組成物を投与することを含み、前記投与することが、前記対象においてがんを治療するのに有効である、方法。
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