JP2023550310A - 虚血及び／または再灌流障害の治療／予防のためのｖｉｓｔａアゴニスト - Google Patents

Abstract

本発明は、虚血後再灌流によって引き起こされる障害を、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体またはＶＩＳＴＡ融合タンパク質の投与によって治療及び予防するための方法を提供する。本発明は、具体的には、虚血再灌流障害（ＩＲＩ）、並びに心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、固形臓器移植レシピエント、及び術後急性腎障害を含む、ＩＲＩと関連付けられた状態の、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体の投与による治療及び予防に関する。

Description

関連出願
本発明は、２０２０年１１月４日出願の米国仮出願第６３／１０９，５８４号の優先権を主張し、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明は、虚血再灌流障害、それと関連付けられた状態を治療または予防するための新しい療法、並びに特にそれらに罹患し易い患者、例えば、心筋梗塞を呈するか、またはそれを発症するリスクがある患者、心臓手術患者、脳卒中を呈するか、またはそれを発症するリスクがある患者、固形臓器移植レシピエント、特に死亡したドナーからの臓器を受けている患者、及び術後急性腎障害を有する患者を治療するための方法を提供する。

本発明は、虚血再灌流障害（ＩＲＩ）、並びに心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、固形臓器移植レシピエント、及び術後急性腎障害を含む、ＩＲＩと関連付けられた状態の治療及び予防に関する。

ＩＲＩは、無酸素事象を患った組織における血流回復後に起こる。虚血事象は、組織への酸素及び栄養素の欠乏を結果的にもたらし、代謝変化及び廃棄物の蓄積を結果的にもたらす。イオン恒常性の破壊は、アポトーシス及びネクローシスを介して細胞／組織の死に寄与する。血流の回復は、酸素ラジカルの突然の増加による追加の組織損傷をトリガする。

ＩＲＩは、身体全体で起こり得、心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、及び固形臓器移植を含む、様々な外傷から結果的に生じ得る。現在、ＩＲＩの治療のためのＦＤＡ承認された療法は存在しない。

ＳＴＥＭＩ心筋梗塞を経験している患者は、ＩＲＩのリスクが最も高い。急性心筋梗塞（ＡＭＩ）は、世界中の罹患率及び死亡率の主な原因である。血栓溶解療法または一次経皮的冠動脈介入のいずれかによるＡＭＩ後の適時の再灌流は、梗塞サイズを制限するために不可欠である^１。しかしながら、急速な再灌流は、心筋ＩＲＩのリスクを増加させ、再灌流誘導不整脈を結果的にもたらす。ＩＲＩは、最も効果的な治療選択肢が適時の再灌流であるため、急性ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）を呈する患者で最も一般的である。ＳＴＥＭＩ患者は、心筋障害及び死亡を結果的にもたらす、冠動脈の完全な閉塞を患う。年間で、米国では約７９０，０００人の患者、ＥＵ５では１６８．５万人の患者が、ＡＭＩを経験しており、そのうちの約２０％が、ＳＴＥＭＩとみなされている^{２、３、４}。米国及びＥＵ^４では、年間、約４９５，０００人の患者がＳＴＥＭＩを患っている。

急性腎障害（ＡＫＩ）は、心臓手術（心臓手術関連急性腎障害（ＣＳＡ－ＡＫＩ））後に起こり得る。術後ＡＫＩは、手術中の腎臓への血流の低減によって引き起こされる虚血状態に続いて、数時間から数日以内に発症する。心肺バイパス（ＣＰＢ）の使用を伴う開胸心臓血管手術を受けている患者は、ＩＲＩに罹患し易い。２０１８年には、米国で約１４０，０００人の患者が、単離冠動脈バイパス術（ＣＡＢＰ）（１２０，０００人の患者）またはＣＡＢＰを伴う弁置換（２０，０００人の患者）を伴う心臓手術を受けた^５。２０１４年には、ＥＵ５の約１２２，０００人の患者が、ＣＡＢＰを伴う心臓手術を受けた^６。心臓手術を受けているほとんどの患者におけるＡＫＩ発症率は低いが、高リスク患者では２２～３９％程度に高い場合がある^７。心臓手術患者の６０％超が、ＡＫＩの中程度から高いリスクを有する。米国及びＥＵ５の約１５７，０００人の患者がＣＳＡ－ＡＫＩを発症するリスクがある。ＣＳＡ－ＡＫＩは、患者の罹患率及び死亡率を２倍にし、重症症例は、最大５０％の死亡率を結果的にもたらし得る^７、８。ＡＫＩには特定の治療がなく、現在の治療選択肢は、入院及び透析を含む。

虚血性脳卒中を患っている患者は、ｔＰＡの投与後の再灌流後にＩＲＩに罹患し易くなる。年間で、米国では約７９５，０００人の患者、ＥＵ５では３００，０００人の患者が、脳卒中を経験している^９、１０。米国では脳卒中の有病率が顕著に増加しており、２０１２年から２０３０年にかけて２０．５％増加すると推定されている。２０３０年までに、更に３４０万人の米国の成人が脳卒中に罹患していることになる。脳卒中の約８７％は虚血性である^９。米国及びＥＵ５では、年間約９５５，０００人の患者が虚血性脳卒中を経験している。虚血性脳卒中の治療のために利用可能な唯一のＦＤＡ承認薬は、抗凝固因子、組換え組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）である。しかしながら、ｔＰＡは、頭蓋内出血のリスクに起因して、脳卒中の発症から３～４時間以内に患者に投与されなければならない。これに基づくと、治療開始の遅延（３時間超）に起因して、患者の３０％未満がｔＰＡによる治療を受ける^１１。ｔＰＡの適時投与は、再灌流によって患者の転帰を有意に改善するが、残念ながらＩＲＩによって追加の障害を引き起こし得る。

再灌流障害は、死亡したドナー移植を受けるレシピエントで特に問題があり、移植片生存率を低減させ、入院を延長し、透析を必要とし得る。移植片機能遅延（ＤＧＦ）は、移植後の最初の週に起こる急性腎障害に起因して起こる。死亡したドナーからの腎移植を受けている患者は、ＤＧＦを発症するリスクが高い^１２。生体ドナーは、腎機能及び併存疾患の不足について集中的にスクリーニングされる。脳死は、強度の炎症誘発状態を誘導し、これは、移植後の腎機能に影響し得る^１３。移植後の再灌流は、組織損傷に寄与する。ＤＧＦは、死亡したドナーから移植された腎臓の約３１％に影響する^１４。ＤＧＦに寄与する因子は、冷虚血の長さ及び温虚血性障害の程度を含む。また、罹患し易い患者は、２０１７年^１５に死亡したドナーからの腎臓で実施された腎移植が、米国で１５，０００件の腎移植、ＥＵで１２，０００件の腎移植を含んだため、増加している^１５。

それゆえに、上記に基づいて、虚血再灌流障害、及びそれと関連付けられた状態を治療及び予防するための方法、より具体的には、特にそれらに罹患し易い患者、例えば、心筋梗塞を呈するか、またはそれを発症するリスクがある患者、心臓手術患者、脳卒中の徴候を呈するか、またはそれを発症するリスクがある患者、固形臓器移植レシピエント、特に死亡したドナーからの臓器を受けている及び／または低下した移植片機能（ＤＧＦ）を呈する患者、並びに術後急性腎障害を呈するか、またはそのリスクがある患者を治療する効果的な方法が極度に必要とされている。

例示的な実施形態
１つの例示的な実施形態では、本発明は、虚血再灌流障害（ＩＲＩ）及び／またはＩＲＩと関連付けられる有害な副作用の治療及び／または予防を必要としている対象においてそれを行う方法であって、治療または予防有効量のＶＩＳＴＡアゴニストを投与することによる、方法を提供する。

いくつかの例示的な実施形態では、対象は、任意選択的に、死亡したドナーから固形臓器移植を受けるか、または受けており、ＶＩＳＴＡアゴニストが、移植前、移植中、または移植後に投与され、固形臓器が、任意選択的に、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈から任意選択的に選択される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＩＲ障害の前または後の、ＶＩＳＡアゴニスト、任意選択的に、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体の投与が、固形臓器障害、例えば、腎障害の影響を予防または緩和し、固形臓器、例えば、腎臓を保護する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、対象が、固形臓器移植を受けているか、または受けようとしており、治療が、移植片機能遅延（ＤＧＦ）を予防または改善する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、虚血後再灌流によって引き起こされる臓器への障害を予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、手術、任意選択的に、限定されるものではないが、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈を含む、主要な臓器に関与する手術、冠動脈バイパス、主要な血管の修復、肝臓切除、並びに腎臓、肝臓、心臓、肺、及び大動脈のうちの１つ以上の移植、のうちの１つ以上によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、手術中の心肺バイパス、脳卒中、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、固形臓器移植、術後急性腎障害、心肺バイパス手術、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷と関連付けられる虚血再灌流障害（ＩＲＩ）によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストは、酸素欠乏（虚血）の期間の後の組織への血液供給の復帰（再灌流）によって引き起こされる、虚血後再灌流によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療するアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体である。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、例えば、主要な外科手術、任意選択的に、心臓手術、肝移植、肝臓切除、腎移植、肺移植、大動脈手術、または主要な血管の修復を受けている対象において、ＩＲ障害に起因する術後臓器機能不全によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、任意選択的に固形臓器移植レシピエントにおいて、更に任意選択的に、腎臓ＩＲに起因して腎障害を発症し、肝臓、腸、及び肺機能不全のうちの１つ以上、及び／または敗血症の発症を示唆する炎症状態を更に発症する腎移植レシピエントにおいて、ＩＲＩと関連付けられる遠隔臓器障害を予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、任意選択的に心臓手術と関連付けられる急性腎障害（ＡＫＩ）を予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、主要な外科手術、任意選択的に、腎臓、肝臓、心臓、または大動脈に関与する外科手術と関連付けられる虚血性ＡＫＩを予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、ＩＲＩ関連多臓器機能不全及び／または全身炎症を予防または治療する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、大手術前、大手術中、及び／または大手術後に投与され、ＩＲ障害から保護する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、限定されるものではないが、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈を含む、主要な臓器に関与する手術、冠動脈バイパス、主要な血管の修復、肝臓切除、並びに腎臓、肝臓、及び肺の移植前、移植中、及び／または移植後に投与され、ＩＲ障害から保護する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、心肺バイパスを含む手術の前に投与される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、脳卒中、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、または外傷と診断されたか、またはその徴候を示す対象に投与され、そのような投与が、更なるＩＲ障害から保護及び／または更なるＩＲ障害を阻害する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、ＶＩＳＴＡ融合タンパク質、例えば、ＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質を含むか、またはアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体若しくは抗体断片を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＶＩＳＴＡ融合タンパク質、例えば、ヒトＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質を含むか、またはアゴニスト抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体若しくは抗体断片を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む可変軽鎖及び重鎖ポリペプチドを含む、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡまたは抗体断片を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つの可変軽鎖及び重鎖ポリペプチドを含む、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡまたは抗体断片を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、組織への酸素及び栄養素の欠乏、並びに代謝変化及び廃棄物の蓄積を結果的にもたらす無酸素事象及び虚血事象、任意選択的に心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、または固形臓器移植を患った組織における血流回復を含む、任意の状態のＩＲＩを治療または予防するために使用される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、ＳＴＥＭＩ心筋梗塞を経験する患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、心臓手術後の急性腎障害（ＡＫＩ）（心臓手術関連急性腎障害（ＣＳＡ－ＡＫＩ））を有するか、またはそのリスクがある患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、脳卒中の徴候を示すか、または脳卒中のリスクがある患者、特にｔＰＡの投与後の再灌流後にＩＲＩに罹患し易い虚血性脳卒中を患う患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、移植レシピエント、特に固形臓器移植における、並びにより具体的には、死亡したドナー移植を受けた患者及び／または移植片機能遅延（ＤＧＦ）を呈する患者における、ＩＲＩを治療または予防するために使用され、これは、移植片生存を促進する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体若しくはアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体断片、またはアゴニストＶＳＩＧ３融合タンパク質若しくはアゴニスト抗ＶＳＩＧ３抗体若しくはアゴニスト抗ＶＳＩＧ３抗体断片、またはアゴニストＰＳＧＬ１抗体、抗体断片若しくはＰＳＧＬ１融合タンパク質を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、ＬＰＳ誘導ＩＬ－１２ｐ４０、ＩＬ－６、ＣＸＣＬ２、及びＴＮＦのうちの少なくとも１つのレベルを低下させる。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストは、マクロファージ寛容誘導に関与するメディエーターの発現を増加させ、ここで、当該メディエーターは、場合により、ＩＲＧ１、ｍｉＲ２２１、Ａ２０、及びＩＬ－１０のうちの少なくとも１つを含み、及び／または場合によりＩＲＦ５、ＩＲＦ８、及びＮＦＫＢ１の少なくとも１つを含む、抗炎症プロファイルを駆動する抗炎症性転写因子の発現を増加させる。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、（ｉ）ＣＸＣＲ２及び／またはＣＸＣＬ１０のレベルを低減させるか、（ｉｉ）好中球／リンパ球比を低減させるか、（ｉｉｉ）ＦｃｇＲＩＩＩレベルを低減させるか、または前述の組み合わせである。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストは、マクロファージ寛容誘導に関与するメディエーターの発現を増加させ、ここで、当該メディエーターは、場合により、ＩＲＧ１、ｍｉＲ２２１、Ａ２０、及びＩＬ－１０のうちの少なくとも１つを含み、及び／または場合によりＩＲＦ５、ＩＲＦ８、及びＮＦＫＢ１の少なくとも１つを含む、抗炎症プロファイルを駆動する抗炎症性転写因子の発現を増加させる。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、方法はまた、ＰＤ－１アゴニスト、ＣＴＬＡ－４アゴニスト、ＴＮＦアンタゴニスト、任意選択的に抗ＴＮＦ抗体若しくはＥｍｂｒｅｌなどのＴＮＦ受容体融合体、抗ＩＬ－６若しくは抗ＩＬ－６Ｒ抗体などのＩＬ－６アンタゴニスト、コルチコステロイド、または他の抗炎症剤から任意選択的に選択される、別の活性の投与を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、ヒトＶＩＳＴＡに特異的に結合し、任意選択的に、可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドを含むアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗体のうちのいずれか１つと同じＣＤＲを含むか、または可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドを含むアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗体のうちのいずれか１つと同じＣＤＲを含み、当該抗体または抗体断片の可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドが、各々、図６の表に含まれる配列を有する同じ抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体の可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドに対して少なくとも９０％の配列同一性を有する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つと同じ配列を含む可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドを含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＶＩＳＴＡ融合ポリペプチド、例えば、ヒトＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質、及び／またはヒトＶＳＩＧ３融合ポリペプチド、例えば、ヒトＶＳＩＧ３－Ｉｇ融合タンパク質を含む。

ＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＦｃ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、少なくとも１つのエフェクター機能、例えば、ＦｃＲ結合、補体結合、グリコシル化、またはＡＤＣＣを変更（増加または減少）するように変異されている、ヒトＦｃ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、内因性ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域によって結合された全てまたは少なくとも１つのＦｃ受容体に結合するヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域を含む。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者における少なくとも１つのサイトカインまたは抗炎症性分子若しくは炎症誘発性分子、例えば、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ２、ＩＬ－６、ＣＲＰ、ガンマインターフェロン、ＩＬ－１、ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣのレベルが、治療前に検出される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者における当該サイトカインまたは炎症誘発性分子のレベルが、治療前に異常であることが検出され、確認される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者におけるＶＩＳＴＡのレベルが、治療の前及び／または後に検出される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者におけるＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ２、ＩＬ－６、ＣＲＰ、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣのうちの少なくとも１つのレベルが、治療の前及び／または後に検出される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者におけるＩＬ－６及び／またはＣＲＰ及び／またはＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣのうちのいずれかのレベルが、治療前に上昇することが検出され、確認される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、０．０１～５０００ｍｇ、１～１０００ｍｇ、１～５００ｍｇ、５ｍｇ～５０ｍｇ、または約１～２５ｍｇの範囲の用量で投与される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、ＶＩＳＴＡアゴニストが、２日若しくは３日毎、隔週、毎週、２週間若しくは３週間毎、または４週間毎に、静脈内または皮下注射を介して投与される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者が、別の抗炎症治療、任意選択的に、コルチコステロイド、吸入一酸化窒素（ＮＯ）、体外式膜型人工肺（静脈静脈または静脈動脈）、または別の免疫抑制剤、任意選択的に、サイモグロブリン、バシリキシマブ、ミコフェノール酸モフェチル、タクロリムス、リツキシマブなどの抗ＣＤ２０ ｍＡｂ、若しくはコルチコステロイドのうちの１つ以上を受ける。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者が、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４、またはＩＬ－６アンタゴニストなどの、チェックポイントタンパク質を標的とする別の生物学的薬剤、例えば、別の抗体で追加的に治療される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、及び／またはグリコシル化を変更するために修飾されたＦｃ領域を含有する。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、抗ＶＩＳＴＡ抗体が、ヒト化一本鎖抗体、またはキメラ抗体から選択され、抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、またはｓｃＦｖから選択される。

前述の例示的な実施形態のいずれかにおいて、患者が、脳卒中または心筋梗塞の発症または増加したリスクと相関する１つ以上のバイオマーカーを異常に発現し、当該バイオマーカーが、低密度リポタンパク質コレステロール、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｇＡ１ｃ）、Ｃ反応性タンパク、リポタンパク質関連ホスホリパーゼＡ２、尿中アルブミン排泄、ナトリウム利尿ペプチド、グリア線維性酸性タンパク質、Ｓ１００ｂ、ニューロン特異的エノラーゼ、ミエリン塩基性タンパク質、インターロイキン－６、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）－９、Ｄ－ダイマー、及びフィブリノゲンを任意選択的に含む。

虚血後再灌流に起因する腎障害を治療または予防するための抗ＶＩＳＴＡ抗体の有効性を評価する動物試験（雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（６～８週齢）で実施される）の試験デザインを示す。この試験では、雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（６～８週齢）を２つの群（ｎ＝６／群）に割り当て、抗ＶＩＳＴＡ（２５０μｇ／治療、腹腔内）または対照抗体（２５０μｇ／治療、腹腔内）で前処理し、これらから、ＩＲ障害の７２時間後に血漿試料を収集して、血漿クレアチニン及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）の測定によって腎機能不全の重症度を調べた。 図１に概略的に図示される動物試験の結果を示す。その結果は、血漿クレアチニン及びＢＵＮのレベルが、対照治療マウスと比較して、３０分間の腎ＩＲに供した抗ＶＩＳＴＡ治療マウスにおいて有意に低下したことを示す（図２Ａ～Ｂ、ｎ＝３）。 Ａ～Ｄは、治療された動物の形態学的評価の結果を示す。これらの評価では、ヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色は、各動物が受けた治療を認識していなかった経験豊富な腎病理学者によって実施された。図３Ａに示されるように、対照治療マウスにおいて、重度の腎尿細管壊死（図３Ａ、赤矢印）が観察されたが、一方、抗ＶＩＳＴＡ治療マウスにおいて、尿細管上皮細胞壊死（図３Ｂ、赤矢印）が有意に少なく、腎尿細管壊死全体が観察されなかった。更に、図３Ｃに示されるように、抗ＶＩＳＴＡで治療されたマウスは、対照治療マウス（図３Ｃ）と比較して、腎尿細管障害スコアの低下を示した（図３Ｃ）。また、図３Ｄに示されるように、腎ＩＲ後の腎炎症を、ＩＲの７２時間後のＨ＆Ｅ染色を使用した炎症性細胞浸潤の検出によって評価した。腎臓の炎症性浸潤スコアは、確立された炎症性細胞浸潤の等級付けスケール（０～３、炎症性浸潤スコア（図３Ｄ）に基づいた。図３Ｄに示されるように、抗ＶＩＳＴＡで治療されたマウスは、腎間質炎症スコアの低下を示した。 Ａ～Ｃは、同じ腎障害モデルにおいて、多くのＭＰＯ陽性染色細胞（図４Ａ、赤い矢印）が、対照治療マウス、特に糸球体において観察されたことを示す。対照的に、抗ＶＩＳＴＡ治療マウスにおいてＭＰＯ陽性染色細胞（図４Ｂ、赤矢印）はほとんど観察されず、糸球体においてＭＰＯ陽性染色細胞は観察されなかった。結果を定量化し、陽性ＭＰＯ陽性細胞の数／０．０５ｍｍ^２として表した（図４Ｃ）。 虚血及び再灌流障害に関与する可能性のある一連の事象を概略的に図示する。 例示的なアゴニスト抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のＣＤＲ及び可変重及び軽鎖ポリペプチド配列を含む。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 腎移植におけるＤＧＦを治療するためのＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する提案された臨床試験を概略的に説明する。 心臓手術関連急性腎障害、心筋梗塞、及び虚血性脳卒中を治療するためのＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する提案された臨床試験を概略的に説明する。 心筋梗塞を治療するためのＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する提案された臨床試験を概略的に説明する。 虚血性脳卒中を治療するためのＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する提案された臨床試験を概略的に説明する。

概要
本発明は、多くがＩＦＮＩ応答によって駆動される、ＩＬ－１α、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及び顆粒球単球コロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、ＩＰ－１０、及びその他のうちの１つ以上の先天性誘導サイトカイン及びケモカインの過剰発現によって媒介される炎症状態を治療することを対象とする。

本発明は、具体的には、虚血再灌流障害（ＩＲＩ）、並びに心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、固形臓器移植、及び術後急性腎障害を含む、ＩＲＩと関連付けられた状態の治療及び予防のためのＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する。

詳細な説明
本発明をより詳細に開示する前に、以下の定義が提供される。

定義
本明細書で使用される場合、「ＶＩＳＴＡ」または「ＶドメインＩｇサプレッサーＴ細胞活性化（ＶＩＳＴＡ）」は、免疫チェックポイントとして機能し、Ｃ１０ｏｒｆ５４遺伝子によってコードされるＩ型膜貫通タンパク質を指す。ＶＩＳＴＡは、骨髄由来サプレッサー細胞及び調節性Ｔ細胞などの腫瘍浸潤リンパ球において高レベルで産生され、抗体によるその遮断は、黒色腫及び扁平上皮細胞がんのマウスモデルにおける腫瘍成長の遅延を結果的にもたらす。ＨＩＶに感染した患者からの単球は、感染していない個体と比較してより高いレベルのＶＩＳＴＡを産生する。ＶＩＳＴＡレベルの増加は、免疫活性化の増加及びＣＤ４陽性Ｔ細胞の減少と相関していた。ＶＩＳＴＡは、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、及び他の哺乳動物形態のＶＩＳＴＡを更に含む。

本明細書で使用される場合、「ＶＩＳＴＡアゴニスト」は、ＶＩＳＴＡの発現を特異的かつ直接的に刺激する（促進する）、及び／またはＶＩＳＴＡの少なくとも１つの機能的活性、例えば、Ｔ細胞免疫（ＣＤ８^＋Ｔ細胞またはＣＤ４^＋Ｔ細胞免疫）に対するその抑制効果、及びＦｏｘｐ３発現に対するその抑制効果、及び／またはサイトカイン、抗炎症性及び炎症誘発性分子の発現に対するその抑制または促進効果、特に、特異的サイトカイン、活性化マーカー、及び他の免疫分子、例えば、発現がＴ細胞によるものであるか、若しくはＴ細胞によって調節されるものの発現に対するＶＩＳＴＡの調節（減少または増加）効果を促進または増加させる、任意の分子を指す。ＶＩＳＴＡは、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣなどの特定のサイトカインを含む特定の免疫分子の発現及び活性に対する効果を誘発する。本明細書におけるＶＩＳＴＡアゴニストは、具体的には、これらの分子のうちの１つ以上に対するＶＩＳＴＡの効果を直接促進する、ＶＩＳＴＡ融合タンパク質、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体、及びアゴニスト抗体断片を含む。また、ＶＳＩＧ３が、ＶＩＳＴＡのリガンドであることが報告されていることから（Ｊｉｎｇｈｕａ Ｗａｎｇ，Ｇｕｏｐｉｎｇ Ｗｕ，Ｂｒｉａｎ Ｍａｎｉｃｋ，Ｖｉｄａ Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｍａｒｋ Ｒｅｎｅｌｔ，Ｍｉｎｇ Ｂｉ，Ｊｕｎ Ｌｉ ａｎｄ Ｖａｓｓｉｌｉｏｓ Ｋａｌａｂｏｋｉｓ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍａｙ １，２０１７，１９８（１ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）１５４．１参照）、ＶＩＳＴＡに結合されるとその活性を促進するとき、本明細書のＶＩＳＴＡアゴニストは、これらの分子のうちの１つ以上に対するＶＩＳＴＡの効果を直接促進する化合物（ＶＳＩＧ３融合タンパク質、抗ＶＳＩＧ３抗体、及び抗体断片）を更に含む。ＩＧＳＦ１１とも称される本明細書のＶＳＩＧ－３は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、及びＶＳＩＧ－３の他の哺乳動物形態を含む。また、ＶＩＳＴＡアゴニストは、例えば、ＶＩＳＴＡの発現を促進する制御可能な状態または化合物の下で、対象において増加したＶＩＳＴＡ発現または量を提供する他の部分、例えば、ＶＩＳＴＡを発現するように操作された細胞を含む。更に、ＶＩＳＴＡアゴニストは、抗ＰＳＬＧ１抗体及び抗体断片、並びにＶＩＳＴＡ／ＰＳＧＬ１結合相互作用を刺激するＰＳＧＬ１融合タンパク質及び小分子を含む。この点に関して、ＰＳＧＬ１は、ＶＩＳＴＡの結合パートナーであることが報告されている（Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓによって出願されたＷＯ２０１８／１６９９９３、及びＲｏｂｅｒｔ Ｊ．Ｊｏｈｎｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，“ＶＩＳＴＡ ｉｓ ａｎ ａｃｉｄｉｃ ｐＨ－ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｌｉｇａｎｄ ｆｏｒ ＰＳＧＬ－１”，Ｎａｔｕｒｅ（２０１９）５７４：５６５－５７０参照）。

本明細書で使用される場合、「サイトカインストーム」または「高チロシン血症」または「サイトカイン放出症候群」または「ＣＲＳ」は、身体があまりにも多くのサイトカインをあまりにも早く血液中に放出する重度の免疫反応を指す。サイトカインは、正常な免疫応答において重要な役割を果たすが、大量のそれらが体内で一度に全て放出されることは有害であり得る。サイトカインストームは、感染症、自己免疫状態、または他の疾患の結果として起こり得る。それはまた、いくつかのタイプの免疫療法を用いた治療後にも起こり得る。徴候及び症状は、高熱、炎症（赤み及び腫脹）、並びに重度の疲労及び吐き気を含む。時には、サイトカインストームは、重篤であるか、または生命を脅かし、多臓器不全につながる場合がある。病因は、複雑であるが、局所及び全身レベルの両方で、炎症誘発性サイトカイン産生の調節制御の喪失を含む。病気は急速に進行し、死亡率は高い。例えば、ＣＯＶＩＤ－１９感染は、調節不全及び過剰なサイトカイン放出または「サイトカインストーム」と密接に関連付けられている。

本明細書で使用される場合、「改善された」、「改善」、及び他の文法的変形は、治療から結果的に生じる任意の有益な変化を含む。有益な変化は、患者の状態が治療の不在下であったであろうものよりも良好である任意の状況である。「改善された」は、望ましくない状態の予防、状態が悪化する速度の遅延、望ましくない状態の発症の遅延、及び望ましい状態に到達する速度の向上を含む。例えば、ＡＲＤＳ患者における改善は、炎症性サイトカインが予防、除去、または低減される量または速度の任意の向上として、炎症性サイトカインの任意の低下を包含する。別の例として、ＡＲＤＳ患者またはＡＲＤＳのリスクがある患者の改善は、状態及びサイトカイン媒介損傷または機能、例えば、肺機能の喪失の任意の予防、低下、遅延または低速化を包含する。

「抗体」または「Ａｂ」または「免疫グロブリン」という用語は、本明細書では最も広い意味で使用され、限定されるものではないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び／または抗体断片（「抗原結合抗体断片」とも称される）を含む、抗原と特異的に結合する様々な抗体構造を包含する。典型的には、フルサイズのＡｂ（無傷のＡｂとも称される）は、２対の鎖を含み、各対は、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含む。ＨＣは、典型的には、可変領域及び定常領域を含む。ＬＣはまた、典型的には、可変領域及び定常領域を含む。重鎖（ＶＨ）の可変領域は、典型的には、本明細書ではＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と称される（またはそれぞれＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３と称される）、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。ＨＣの定常領域は、典型的には、断片結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含み、これは、Ａｂのアイソタイプ、Ａｂが結合するＦｃ受容体のタイプ、したがって、Ａｂのエフェクター機能を決定する。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧＡ１、またはＩｇＧＡ２などの任意のアイソタイプが使用され得る。Ｆｃ受容体タイプとしては、限定されるものではないが、ＦｃａＲ（ＦｃａＲＩなど）、Ｆｃａ／ｍＲ、ＦｃｅＲ（ＦｃｅＲＩ、ＦｃｅＲＩＩなど）、ＦｃｇＲ（ＦｃｇＲＩ、ＦｃｇＲＩＩＡ、ＦｃｇＲＩＩＢ１、ＦｃｇＲＩＩＢ２、ＦｃｇＲＩＩＩＡ、ＦｃｇＲＩＩＩＢなど）、及びＦｃＲｎが挙げられ、それらの関連する下流効果は、当該技術分野で周知である。軽鎖（ＶＬ）の可変領域はまた、典型的には、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３（それぞれ、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３と称される）であるＣＤＲも含む。いくつかの実施形態では、抗原は、ＡＣＶＲ１Ｃ（ＡＬＫ７とも称される）である。抗体は、天然源または組換え源に由来する無傷の免疫グロブリンであり得る。抗原への特異的結合を可能にする構造を含む抗体の一部分は、Ａｂの「抗原結合断片」、「ＡＢドメイン」、「抗原結合領域」、または「ＡＢ領域」と称される。

Ｆｃ領域におけるある特定のアミノ酸修飾は、限定されるものではないが、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞捕食（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、及び半減期などの、Ａｂエフェクター機能及び特性を調節することが知られている（Ｗａｎｇ Ｘ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｅｌｌ．２０１８ Ｊａｎ；９（１）：６３－７３、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ Ｗ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２００６ Ａｕｇ １８；２８１（３３）：２３５１４－２４．Ｅｐｕｂ ２００６ Ｊｕｎ ２１、Ｍｏｎｎｅｔ Ｃ．ｅｔ ａｌ，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１５ Ｆｅｂ ４；６：３９．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１５．０００３９．ｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ２０１５）。変異は、対称的であっても非対称的であってもよい。特定の場合では、非対称変異（複数可）（すなわち、２つのＦｃ領域は同一ではない）を有するＦｃ領域を有する抗体は、ＡＤＣＣなどのより良好な機能を提供し得る（Ｌｉｕ Ｚ．ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２０１４ Ｆｅｂ ７；２８９（６）：３５７１－３５９０）。

ＩｇＧ１型Ｆｃは、任意選択的に、１つ以上のアミノ酸置換を含み得る。そのような置換としては、例えば、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｑ、Ｄ２６５Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｐ２３８Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｇ２３６欠失、Ｐ２３８Ａ、Ａ３２７Ｑ、Ａ３２７Ｇ、Ｐ３２９Ａ、Ｋ３２２Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ、Ｔ３９４Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｐ３３１Ｓ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、Ｐ３９６Ｌ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ、Ｌ２３４Ｙ、Ｌ２３５Ｑ、Ｇ２３６Ｗ、Ｓ２３９Ｍ、Ｈ２６８Ｄ、Ｄ２７０Ｅ、Ｋ３２６Ｄ、Ａ３３０Ｍ、Ｋ３３４Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｋ３２６Ｗ、Ｓ２３９Ｄ、Ｅ３３３Ｓ、Ｓ２６７Ｅ、Ｈ２６８Ｆ、Ｓ３２４Ｔ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、Ｓ４４０Ｙ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｌ３２８Ｆ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、及び／またはそれらの任意の組み合わせ（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）（Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ Ｗ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２００６ Ａｕｇ １８；２８１（３３）：２３５１４－２４．Ｅｐｕｂ ２００６ Ｊｕｎ ２１；Ｗａｎｇ Ｘ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｅｌｌ．２０１８ Ｊａｎ；９（１）：６３－７３）、または、例えば、Ｎ４３４Ａ、Ｑ４３８Ｒ、Ｓ４４０Ｅ、Ｌ４３２Ｄ、Ｎ４３４Ｌ、及び／またはそれらの任意の組み合わせ（ＥＵ番号に従う残基番号）が挙げられ得る。Ｆｃ領域は、１つ以上の追加のアミノ酸置換を更に含み得る。そのような置換は、限定されるものではないが、Ａ３３０Ｌ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１８、及び／またはそれらの任意の組み合わせを含み得る（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）。ＩｇＧ１型Ｆｃの具体的な例示的な置換の組み合わせとしては、限定されるものではないが、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ（「ＹＴＥ」バリアント）、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ａ（「ＬＡ」バリアント）、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（「ＬＳ」バリアント）、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ａ、Ｑ４３８Ｒ、及びＳ４４０Ｅ（「ＬＡ－ＲＥ」バリアント）、Ｌ４３２Ｄ及びＮ４３４Ｌ（「ＤＥＬ」バリアント）、並びにＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ４３２Ｄ、及びＮ４３４Ｌ（「ＬＡＬＡ－ＤＥＬ」バリアント）を含む（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）。

ＡｂがＩｇＧ２であるとき、Ｆｃ領域は、任意選択的に、１つ以上のアミノ酸置換を含み得る。そのような置換は、限定されるものではないが、Ｐ２３８Ｓ、Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｈ２６８Ａ、Ｈ２６８Ｑ、Ｈ２６８Ｅ、Ｖ３０９Ｌ、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｑ、Ａ３３０Ｓ、Ｐ３３１Ｓ、Ｃ２３２Ｓ、Ｃ２３３Ｓ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、及び／またはそれらの任意の組み合わせを含み得る（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）。Ｆｃ領域は、任意選択的に、１つ以上の追加のアミノ酸置換を更に含み得る。そのような置換は、限定されるものではないが、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、及び／またはそれらの任意の組み合わせを含み得る（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）。好ましくは、ＡｂがＩｇＧ２であるとき、Ｆｃ領域は、天然（修飾されていない）ＦｃＲ結合を含むことになる。

ＩｇＧ３型Ｆｃ領域は、任意選択的に、１つ以上のアミノ酸置換を含み得る。そのような置換は、限定されるものではないが、Ｅ２３５Ｙを含み得る（残基番号は、ＫａｂａｔにおけるＥＵインデックスに従う）。

ＩｇＧ４型Ｆｃ領域は、任意選択的に、１つ以上のアミノ酸置換を含み得る。そのような置換は、限定されるものではないが、Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｅ３１８Ａ、Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３６Ｅ、Ｓ２４１Ｐ、Ｌ２４８Ｅ、Ｔ３９４Ｄ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｑ、及び／またはそれらの任意の組み合わせを含み得る（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）。置換は、例えば、Ｓ２２８Ｐであり得る（残基番号は、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従う）。

いくつかの場合、ヒト様Ｆｃ領域のグリカンは、エフェクター機能を修飾するように操作され得る（例えば、Ｌｉ Ｔ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．２０１７ Ｍａｒ ２８；１１４（１３）：３４８５－３４９０．ｄｏｉ：１０．１０７３／ｐｎａｓ．１７０２１７３１１４．Ｅｐｕｂ ２０１７ Ｍａｒ １３参照）。

本明細書で使用される「抗体断片」または「Ａｂ断片」という用語は、ＩｇＧ及びそのサブクラス、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びＩｇＤを含む、任意のクラスまたはサブクラスであり得る無傷のまたは完全長Ａｂを含む、Ａｂの任意の部分または断片を指す。用語は、１つ以上のＡｂの１つ以上の部分または断片を使用して構築される分子を包含する。Ａｂ断片は、無傷の免疫グロブリンの免疫反応性部分であり得る。用語は、最も広義に使用され、無傷の抗体、並びに断片抗原結合（Ｆａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む一本鎖抗体断片、二重特異性抗体、及び単一ドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ）断片を含む、機能的（抗原結合）抗体断片を含む、ポリクローナル及びモノクローナル抗体を含む。用語はまた、イントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、及びヘテロ共役抗体、多特異性、例えば、二重特異性、抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、及び四重特異性抗体、タンデムｄｉ－ｓｃＦｖ、タンデムｔｒｉ－ｓｃＦｖなどの、遺伝子操作された及び／または別様に修飾された形態の免疫グロブリンも包含する。具体的な実施形態では、抗体断片は、ｓｃＦｖである。別途明記されない限り、「Ａｂ断片」という用語は、その機能的抗体断片を包含するものと理解されるべきである。抗原への特異的結合を可能にする構造を含むＡｂ断片の一部分は、Ａｂの「抗原結合Ａｂ断片」、「ＡＢドメイン」、「抗原結合領域」、またはＡｂ断片の「抗原結合領域」と称される。

Ａｂの「ヒト化」という用語は、ヒトにおいて天然に産生されるＡｂとの配列類似性を増加させるための、非ヒト起源のＡｂの修飾を指す。本明細書で使用される「ヒト化抗体」という用語は、Ａｂのヒト化を介して生成されるＡｂを指す。一般に、ヒト化または操作された抗体は、非ヒト、例えば、限定されるものではないが、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、または他の哺乳動物由来の１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらのヒトアミノ酸残基は、多くの場合、「移入」残基と称され、これは、典型的には、既知のヒト配列の「移入」可変、定常、または他のドメインから取得される。既知のヒトＩｇ配列、例えば、ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｅｎｔｒｅｚ／ｑｕｅｒｙ．ｆｃｇｉ、ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／ｐｈａｇｅ／ｈｄｂ．ｈｔｍｌが開示されており、各々が参照により完全に本明細書に組み込まれる。そのような移入配列は、当該技術分野で知られているように、免疫原性を低減するか、結合、親和性、結合活性、特異性、半減期、または任意の他の好適な特性を低減、増強、または修飾するために使用され得る。一般に、フレームワーク及び／または定常領域の非ヒト配列の一部または全部がヒトまたは他のアミノ酸で置換されている間、非ヒトまたはヒトＣＤＲ配列の一部または全部が維持される。抗体はまた、当業者に既知である三次元免疫グロブリンモデルを使用して、抗原に対する高い親和性及び他の好ましい生物学的特性を保持することによって、任意選択的にヒト化され得る。選択された候補免疫グロブリン配列の可能性のある三次元立体構造を例示し、表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらのディスプレイの精査は、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の可能性の高い役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響する残基の分析を可能にする。このように、標的抗原（複数可）に対する増加した親和性等の所望の抗体特徴が達成されるように、フレームワーク（ＦＲ）残基をコンセンサス及び移入配列から選択し、組み合わせられ得る。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合への影響に直接的に、かつ最も実質的に関与している。本発明の抗体のヒト化または操作は、限定されるものではないが、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４（１９８８））、Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）、Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１（１９８７）、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：４２８５（１９９２）、Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３）、米国特許第５，７２３，３２３号、同第５，９７６，８６２号、同第５，８２４５１４号、同第５，８１７４８３号、同第５，８１４４７６号、同第５，７６３，１９２号、同第５，７２３，３２３号、同第５，７６６，８８６号、同第５，７１４，３５２号、同第６，１８７，２８７号、同第６，２０４，０２３号、同第６，１８０，３７０号、同第５，６９３，７６２号、同第５，５３０，１０１号、同第５，５８５，０８９号、同第５，２２５，５３９号、同第４，８１６，５６７号に説明されるものなどの、任意の既知の方法を使用して実施され得、これらは、各々が、その中で引用された参考文献を含めて、参照により本明細書に完全に組み込まれる。

「単離された」生物学的成分（単離されたタンパク質、核酸、ベクター、または細胞など）は、成分であって、その環境または成分が天然由来である生物の細胞内の他の生物学的成分、例えば、他の染色体及び染色体外のＤＮＡ及びＲＮＡ、タンパク質、及び細胞器官から実質的に分離または精製された成分を指す。「単離された」核酸及びタンパク質は、標準精製方法によって精製された核酸及びタンパク質を含む。用語はまた、組換え技術によって調製された核酸及びタンパク質、並びに化学合成も包含する。単離された核酸またはタンパク質は、実質的に精製された形態で存在し得るか、または、例えば、宿主細胞などの非天然環境中に存在し得る。

「哺乳動物」という用語は、限定されるものではないが、マウス及びハムスターなどのげっ歯目、並びにウサギなどのウサギ目の哺乳動物を含む、任意の哺乳動物を指す。哺乳動物は、ネコ（猫）及びイヌ（犬）を含む食肉目からのものであってもよい。哺乳動物は、ウシ（牛）及びブタ（豚）を含む偶蹄目、またはウマ（馬）を含む奇蹄目からのものであってもよい。哺乳動物は、霊長目、セボイド目、またはサイモイド目（サル）、または真猿亜目（ヒト及び類人猿）であってもよい。

「核酸」及び「ポリヌクレオチド」という用語は、直鎖若しくは分枝鎖、一本鎖若しくは二本鎖、またはそれらのハイブリッドであるＲＮＡまたはＤＮＡを指す。用語はまた、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドを包含する。以下は、ポリヌクレオチドの非限定的な例である：遺伝子または遺伝子断片、エクソン、イントロン、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、リボザイム、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、分岐ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、任意の配列の単離されたＤＮＡ、任意の配列の単離されたＲＮＡ、核酸プローブ及びプライマー。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びヌクレオチド類似体などの修飾ヌクレオチド、ウラシル、他の糖並びにフルオリボース及びチオレートなどの連結基、かつヌクレオチド分岐を含み得る。ヌクレオチドの配列は、共役などによって、標識成分との重合化後に更に修飾され得る。この定義に含まれる他のタイプの修飾は、キャップ、類似体との天然由来のヌクレオチドのうちの１つ以上の置換、及びポリヌクレオチドをタンパク質、金属イオン、標識成分、他のポリヌクレオチドまたは固体支持体に結合させるための手段の導入である。ポリヌクレオチドは、化学合成によって得られるか、または微生物に由来し得る。

「遺伝子」という用語は、生物学的機能と関連付けられるポリヌクレオチドの任意のセグメントを指すために広く使用される。したがって、遺伝子は、ゲノム配列のようなイントロン及びエクソン、またはｃＤＮＡのような単なるコード配列及び／またはそれらの発現に必要な調節配列を含む。例えば、遺伝子はまた、ｍＲＮＡ若しくは機能的ＲＮＡを発現するか、または特定のタンパク質をコードする、核酸断片を指し、調節配列を含む。

「虚血」という用語は、血流（したがって酸素）が身体の一部で制限または低減される状態または条件を指す。例えば、心虚血は、心筋への血流及び酸素の低下に対する名称である。虚血（Ｉｓｃｈｅｍｉａまたはｉｓｃｈａｅｍｉａ）は、身体の任意の組織、筋肉群、または臓器への血液供給の制限を含み得、細胞代謝に（組織を生存させるために）必要な酸素の不足を引き起こす。虚血は、一般に、血管の問題によって引き起こされ、結果として、組織の損傷または機能不全、すなわち、低酸素症及び微小血管機能不全をもたらす。また、収縮（血管収縮、血栓症、または塞栓症など）から結果的に生じることがある、身体の所与の部分の局所的な低酸素症も含む。虚血は、酸素の不足のみならず、栄養素の利用可能性の低減、及び代謝廃棄物の不十分な除去も含む。虚血は、部分的（灌流不良）または完全閉塞であり得る。臓器への酸素化された血液の不十分な送達は、不十分な送達の原因を治療するか、またはそれを必要とする系の酸素需要を低減することのいずれかによって解決されなければならない。例えば、心筋虚血を有する患者は、心臓への血流が低下し、それが十分になるように、狭窄によって供給される新しいレベルの血液送達を満たすために、変時及び変力作用を低減する薬剤を処方される。

本明細書で使用される「薬学的に許容される賦形剤」、「薬学的賦形剤」、「賦形剤」、「薬学的に許容される担体」、「薬学的担体」、または「担体」という用語は、製剤中及び／または貯蔵を可能にするために薬学的組成物中で従来的に使用される化合物または材料を指す。製剤に含まれる賦形剤は、異なる目的を有することになる。一般的に使用される賦形剤の例としては、限定なしで、生理食塩水、緩衝食塩水、デキストロース、感染のための水、グリセロール、エタノール、及びそれらの組み合わせ、安定化剤、可溶化剤、及び界面活性剤、緩衝剤及び防腐剤、等張化剤、増量剤、及び潤滑剤が挙げられる。

「組換え」という用語は、天然には存在しないか、または天然には見られない配列で別のポリヌクレオチド、タンパク質、細胞などに連結されている、半合成または合成起源を有するポリヌクレオチド、タンパク質、細胞などを意味する。

「再灌流」という用語は、典型的には、心臓発作または脳卒中後に、臓器または組織への血流を回復させる作用を指す。

「再灌流障害」という用語は、典型的には、心臓発作または脳卒中後に、臓器または組織への血流を回復させることから結果的に生じる任意の障害を含む。例としては、低酸素性脳損傷、多臓器不全、急性腎障害、急性胸部症候群、肺高血圧症、持続勃起症、急性腎障害、高血圧症、糖尿病が挙げられる。

「ｓｃＦｖ」、「一本鎖Ｆｖ」、または「一本鎖可変断片」という用語は、軽鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片と、重鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片と、を含む、融合タンパク質を指し、軽鎖及び重鎖可変領域は、例えば、合成リンカー、例えば、短い可動性ポリペプチドリンカーを介して連続して連結され、一本鎖ポリペプチドとして発現することができ、ｓｃＦｖは、それが由来する無傷の抗体の特異性を保持する。指定されない限り、本明細書で使用される場合、ｓｃＦｖは、例えば、ポリペプチドのＮ末端及びＣ末端に関して、いずれかの順序でＶＬ及びＶＨ可変領域を有してもよく、ｓｃＦｖは、ＶＬ－リンカー－ＶＨを含んでもよく、またはＶＨ－リンカー－ＶＬを含んでもよい。リンカーは、フレームワーク配列の一部分を含み得る。ｓｃＦｖにおいて、重鎖可変ドメイン（ＨＣ Ｖ、ＨＣＶ、またはＶＨ）は、軽鎖可変ドメイン（ＬＣ Ｖ、ＬＣＶ、またはＶＬ）の上流に配置され得、２つのドメインは、リンカー（例えば、Ｇ４Ｓ Ｘ３リンカー）を介して任意選択的に連結され得る。あるいは、重鎖可変ドメインは、軽鎖可変ドメインの下流に配置され得、２つのドメインは、任意選択的に、リンカー（例えば、Ｇ４Ｓ Ｘ３リンカー）を介して連結され得る。

本明細書で使用される「対象」という用語は、任意の生物、好ましくは、哺乳動物であり得る。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトなどの霊長類である。いくつかの実施形態では、霊長類は、サルまたは類人猿である。対象は、男性または女性であり得、乳児、若年、青年、成人、及び老人の対象を含む任意の好適な年齢であり得る。いくつかの例では、患者または対象は、疾患及び／または毒性アウトカムを評価するための検証された動物モデルである。対象はまた、当該技術分野では「患者」とも称され得る。対象は、疾患を有してもよく、または健康であってもよい。

本明細書で使用する場合、「治療する」、「治療」、または「治療すること」という用語は、一般に、疾患若しくは状態の進行、重症度、及び／または持続時間を低減若しくは緩和するか、または疾患の１つ以上の状態若しくは症状（好ましくは、１つ以上の識別可能なもの）を緩和するための臨床処置を指す。他の実施形態では、「治療する」、「治療」、または「治療すること」は、結果的に、例えば、識別可能な症状の安定化によって、物理的に、例えば、物理的パラメータの安定化によって、生理学的に、またはその両方によって、疾患の進行の阻害をもたらし得る。追加的に、本明細書で使用される場合、「治療する」及び「予防する」という用語、並びにそこから生じる単語は、必ずしも１００％または完全な治癒または予防を意味するものではない。むしろ、当業者が潜在的な利益または治療効果を有すると認識する様々な程度の治療効果または予防効果が存在する。この点において、本発明の方法は、哺乳動物における疾患の任意の量の任意のレベルの治療または予防効果を提供することができる。更に、本発明の方法によって提供される治療または予防は、治療または予防される疾患の１つ以上の状態または症状の治療または予防を含み得る。また、本明細書の目的に対して、「予防」は、疾患の発症、またはその症状若しくは状態を遅延させることを包含し得る。

発明を実施するための形態
本発明は、免疫細胞、特にマクロファージの転写及びエピジェネティックリプログラミングを通じて、ＶＩＳＴＡが先天性炎症を負に調節するという、出願人による以前の発見に部分的に基づいている。出願人は、炎症誘発性刺激に対するマクロファージ応答を負に調節することによって、ＶＩＳＴＡアゴニストが機能的に及び転写的にマクロファージをリプログラムすることを実証した（本明細書では結果は示されていない）。特に、抗ＶＩＳＴＡ単独は、ＩＬ－１０、ｍｉＲ－２２１、ＩＲＧ１、Ａ２０、及びＭｅｒＴＫを含む、Ｍ２分極及びＬＰＳ耐性の両方に関与するメディエーターを誘導し、Ｍ１分極のメディエーターを抑制した（転写及びタンパク質レベルの両方におけるＩＲＦ５及びＩＲＦ８発現の低減）。これらの転写因子（ＴＦ）のＶＩＳＴＡ媒介性の低減は、ＩＬ－１２ファミリーメンバー、ＩＬ－６及びＴＮＦαを含む炎症性遺伝子の発現を減少させた。更に、抗ＶＩＳＴＡは、ＬＰＳ耐性の主要なメディエーターを上方調節し、エンドトキシンショックからのマウスの向上した生存率を結果的にもたらした。それに基づいて、ＶＩＳＴＡアゴニストは、特定の炎症状況、例えば、サイトカインストーム若しくはＣＲＳまたは敗血症、及び／あるいは急性または慢性呼吸器関連症候群及び呼吸器疾患に関連する炎症状況において、治療的関連性を有し得る。

本発明は、具体的には、ＩＲ障害前のアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体の投与が、腎障害の影響を緩和し、腎臓を保護するという本明細書における実証に基づいて、他の炎症状態、特に虚血再灌流障害（ＩＲＩ）及び虚血再灌流障害と関連付けられる他の状態の治療及び予防に関する。

したがって、一実施形態では、本発明は、虚血後再灌流によって引き起こされる臓器への障害を予防または治療する方法であって、治療有効量の抗ＶＩＳＴＡをそれを必要とする対象に投与することを含む、方法を提供する。そのような障害は、手術、ほとんどの場合、限定されるものではないが、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈を含む主要な臓器に関与する、冠動脈バイパス、主要な血管修復、肝臓切除、並びに腎臓、肝臓、及び肺の移植を含む手術によって引き起こされ得る。

本発明の背景で論じられたように、ＩＲ障害は、限定されるものではないが、手術中の心肺バイパス、脳卒中、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷を含む、他の原因を有し得る。したがって、本発明はまた、心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、固形臓器移植、術後急性腎障害、心肺バイパス手術、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷と関連付けられる虚血再灌流障害（ＩＲＩ）の治療及び予防に関する。

本発明は、特に、抗ＶＩＳＴＡ抗体の投与による虚血及び再灌流によって引き起こされる障害の治療及び予防に関する。虚血及び再灌流（ＩＲ）障害は、酸素欠乏（虚血）の期間後の組織への血液供給の復帰（再灌流）によって引き起こされる。虚血の間、血液によって通常供給される酸素及び栄養素の欠如がある。これは、正常な機能の予想される回復よりもむしろ、循環の復帰が炎症及び酸化的損傷を結果的にもたらす状態を生じさせる。

虚血またはその後の再灌流障害による低酸素症による細胞死は、体内の事実上全ての臓器に影響する主要な臨床的問題である。実際、ＩＲ障害に起因する術後臓器機能不全は、心臓手術、肝移植、肝臓切除、腎移植、肺移植、大動脈手術、及び主要な血管の修復を含む、主要な外科手術を受けているほぼ全ての患者に影響する深刻な脅威である。更に、虚血または再灌流による低酸素症に起因する１つの臓器の障害は、頻繁に、離れた臓器に影響する遠隔臓器障害と関連付けられる。例えば、腎ＩＲに起因する腎障害を発症する患者は、頻繁に、肝臓、腸、及び肺機能不全、並びに非常に高い死亡率（２５～８０％）につながる敗血症を発症する。ＩＲ障害はまた、結果的に患者が透析を必要とすることをもたらし得る。

腎ＩＲ障害は、急性腎障害（ＡＫＩ）の原因になることが多い。虚血性ＡＫＩは、腎臓のみならず、肝臓、心臓または大動脈にも関与する主要な外科手術を受けた患者の臨床的問題であり、非常に高い死亡率を伴う多臓器機能不全及び全身炎症につながり得る。

虚血組織の再灌流は、多くの場合、特に、組織全体にわたる拡散及び流体濾過の増加につながる毛細血管及び小動脈の浸透性の増加に起因して、微小血管障害と関連付けられる。活性化された内皮細胞は、再灌流後により多くの活性酸素種を産生するが、より少ない一酸化窒素を産生し、不均衡は、結果的に、その後の炎症反応をもたらす。炎症反応は、再灌流障害の損傷の部分的な原因となる。新たに復帰する血液によってエリアに運ばれる白血球は、組織損傷に応答して、インターロイキン及びフリーラジカルなどの炎症因子の宿主を放出する。回復した血流は、細胞内で酸素を再導入し、細胞タンパク質、ＤＮＡ、及び細胞膜を損傷させる。細胞の膜への損傷は、その後、より多くのフリーラジカルの放出を引き起こし得る。そのような反応種はまた、間接的に酸化還元シグナル伝達に作用して、アポトーシスをオンにし得る。白血球はまた、小さい毛細血管の内皮に結合し、それらを閉塞し、より多くの虚血につながる可能性がある。別の仮説は、通常、血液中に通常含有される種を酸化することによって損傷を回避するために、組織がフリーラジカルスカベンジャーを含有することである。虚血組織は、細胞障害の理由でこれらのスカベンジャーの機能を低下させたことになる。血流が再確立されると、血液中に含有される酸素種は、スカベンジャーの機能が低下しているため、虚血組織に損傷を与えることになる］。

再灌流障害は、脳卒中における低酸素性脳障害の生化学において主要な役割を果たす。同様の障害過程が、心停止の回復に伴う脳障害に関与している。虚血及び再灌流障害の繰り返される発作はまた、褥瘡及び糖尿病性足部潰瘍などの慢性創傷の形成及び治癒の失敗につながる因子であると考えられている。連続的な圧力は、血液供給を制限し、虚血を引き起こし、炎症は、再灌流中に起こる。この過程が繰り返されると、最終的には創傷を引き起こすのに十分に組織を損傷させる。

虚血再灌流障害の急性期の主な理由は、酸素欠乏、したがって、ミトコンドリア酸化的リン酸化によるＡＴＰ（細胞エネルギー通貨）の生成の停止である。虚血中の一般的なエネルギー欠乏に起因する組織損傷は、損傷が増強されたときに再灌流（酸素濃度の上昇）に続く。ミトコンドリア複合体Ｉは、組織虚血／再灌流に対して最も脆弱な酵素であると考えられているが、損傷の機序は、異なる組織で異なる。例えば、脳虚血／再灌流障害は、複合体Ｉの酸化還元依存性不活性化を介して媒介される。酸素欠乏は、ミトコンドリア複合体Ｉがその天然の補助因子であるフラビンモノヌクレオチド（ＦＭＮ）を失い、不活性になる状態につながることが見出された。酸素が存在するとき、酵素は、ユビキノンによるＮＡＤＨ酸化の生理学的反応を触媒し、呼吸鎖の下流に電子を供給する（複合体ＩＩＩ及びＩＶ）。虚血は、コハク酸レベルの劇的な上昇につながる。コハク酸の存在下で、ミトコンドリアは、コハク酸からの電子の画分が複合体ＩのＦＭＮの上流に向けられるように、逆電子伝達を触媒する。逆電子伝達は、結果的に、複合体ＩのＦＭＮの低減、ＲＯＳの生成の増加、その後の低減した補助因子（ＦＭＮＨ２）の喪失、及びミトコンドリアエネルギー産生の機能障害をもたらす。複合体Ｉ及びＩ／Ｒ障害によるＦＭＮ喪失は、ＦＭＮ前駆体であるリボフラビンの投与によって緩和され得る。

長期の虚血（６０分以上）では、ヒポキサンチンが、ＡＴＰ代謝の分解産物として形成される。酵素キサンチンデヒドロゲナーゼは、酸素のより高い可用性の結果として、キサンチンオキシダーゼとして逆に作用する。この酸化は、結果的に、分子酸素が高反応性の超酸化物及びヒドロキシルラジカルに変換されることをもたらす。キサンチンオキシダーゼはまた、尿酸を産生し、これは、プロオキシダント、及びペルオキシナイトライトなどの反応種のスカベンジャーの両方として作用し得る。再灌流中に産生された過剰な一酸化窒素は、超酸化物と反応して、潜在的な反応種のペルオキシナイトライトを産生する。そのようなラジカル及び反応性酸素種は、細胞膜脂質、タンパク質、及びグリコサミノグリカンを攻撃し、更なる損傷を引き起こす。それらはまた、酸化還元シグナル伝達によって特定の生物学的過程を開始し得る。また、再灌流は、高カリウム血症を引き起こし得る。更に、再灌流障害は、肝移植手術における主な懸念事項である。

以下の例に示されるように、本発明者らは、ＶＩＳＴＡシグナル伝達を刺激するために、及び潜在的にＩＲ障害に対して保護する手段として、抗ＶＩＳＴＡ抗体を使用することによって、腎ＩＲの文脈でＶＩＳＴＡの効果を研究した。本明細書では、ＩＲ障害の前に、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体の投与が、腎障害の影響を軽減し、腎臓を保護することを示す。

したがって、本発明の一実施形態は、虚血後再灌流によって引き起こされる臓器への障害を予防または治療する方法であって、治療有効量の抗ＶＩＳＴＡ抗体をそれを必要とする対象へ投与することを含む、方法を提供する。

特に、そのような障害は、手術、ほとんどの場合、限定されるものではないが、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈を含む主要な臓器に関与する手術、冠動脈バイパス、主要な血管修復、肝臓切除、並びに腎臓、肝臓、及び肺の移植などの他の原因から結果的に生じ得る。また、ＩＲ障害は、限定されるものではないが、手術中の心肺バイパス、脳卒中、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷を含む、他の原因によって媒介され得る。

したがって、本発明は、治療または予防有効量のＶＩＳＴＡアゴニスト、例えば、ＩＲＩ及びその副作用を治療または予防するのに有効なアゴニスト抗ＶＩＳＴＡアゴニスト抗体を投与することによる、ＩＲＩを含むか、またはＩＲＩのリスクがある対象の治療によって、これらの必要性に対処する。

そのようなＶＩＳＴＡアゴニストは、任意選択的に、前述のＶＩＳＴＡアゴニスト、例えば、ＶＩＳＴＡ融合タンパク質、例えば、ＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質のうちのいずれかを含み得るか、またはより典型的には、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体若しくは抗体断片を含むことになる。特に、そのようなＶＩＳＴＡアゴニストは、ヒトＶＩＳＴＡ融合タンパク質、例えば、ヒトＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質、またはアゴニスト抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体若しくは抗体断片を含み得る。いくつかの例示的な実施形態では、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡまたは抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む可変軽鎖及び重鎖ポリペプチドを含むことになる。いくつかの例示的な実施形態では、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡまたは抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つの可変軽鎖及び重鎖ポリペプチドを含むことになる。

本明細書に開示されるＶＩＳＴＡアゴニストは、組織への酸素及び栄養素の欠乏、並びに代謝変化及び廃棄物の蓄積を結果的にもたらす無酸素事象及び虚血事象を患った組織における血流回復を含む、任意の状態のＩＲＩを治療または予防するために使用されることになる。これは、特に、心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、及び固形臓器移植から結果的に生じるＩＲＩを含む。

また、本明細書に開示されるＶＩＳＴＡアゴニストは、急性ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）を呈する患者において、従来の治療選択肢が適時の再灌流であるため、ＩＲＩのリスクが高いＳＴＥＭＩ心筋梗塞を経験する患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用されることになる。

本明細書に開示されるＶＩＳＴＡアゴニストはまた、具体的には、心臓手術後の急性腎障害（ＡＫＩ）（心臓手術関連急性腎障害（ＣＳＡ－ＡＫＩ））を有するか、またはそのリスクがある患者におけるＩＲＩを治療または予防する際に使用されることになる。術後ＡＫＩは、手術中の腎臓への血流の低減によって引き起こされる虚血状態に続いて、数時間から数日以内に発症する。特に、本明細書に開示されるようなＶＩＳＴＡアゴニストは、心肺バイパス（ＣＰＢ）の使用を任意選択的に伴う開胸心臓血管手術を受ける患者に予防的に投与され得る。

また、本明細書に開示されるＶＩＳＴＡアゴニストは、脳卒中の徴候を示すか、または脳卒中のリスクがある患者、特にｔＰＡの投与後の再灌流後にＩＲＩに罹患し易い虚血性脳卒中を患う患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用されることになる。

本明細書に開示されるなお更なるＶＩＳＴＡアゴニストは、移植レシピエント、特に固形臓器移植における、並びにより具体的には、死亡したドナー移植を受けた患者及び／または移植片機能遅延（ＤＧＦ）を呈する患者における、ＩＲＩを治療または予防するために使用されることになる。前述のように、再灌流障害は、死亡したドナー移植を受けるレシピエントで特に問題があり、移植片生存率を低減させ、入院を延長し、透析を必要とし得る。

本発明による方法で使用するための少なくとも１つのＶＩＳＴＡアゴニストを含む薬学的組成物は、任意の薬学的に許容される賦形剤を含有し得る。賦形剤の例としては、限定されるものではないが、デンプン、糖、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、着色剤、剥離剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、保存剤、酸化防止剤、可塑剤、ゲル化剤、増粘剤、硬化剤（ｈａｒｄｅｎｅｒ）、硬化剤（ｓｅｔｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、懸濁化剤、界面活性剤、湿潤剤、担体、安定剤、及びそれらの組み合わせが挙げられる。

様々な実施形態では、本発明による薬学的組成物は、任意の投与経路を介して送達するために製剤化され得る。これは、例えば、エアロゾル、経鼻、経口、経粘膜、経皮、非経口、または経腸を含み得る。

「非経口」とは、一般に、眼窩内、点滴、動脈内、関節内、心臓内、皮内、筋肉内、腹腔内、肺内、脊髄内、胸骨内、髄腔内、子宮内、静脈内、くも膜下、嚢下、皮下、経粘膜、または経気管を含む、注射に関連する投与経路を指す。非経口経路を介して、組成物は、点滴または注射のための溶液または懸濁液の形態であってもよく、または凍結乾燥粉末としてであってもよい。非経口経路を介して、組成物は、点滴または注射のための溶液または懸濁液の形態であってもよい。経腸経路を介して、薬学的組成物は、錠剤、ゲルカプセル、糖被覆錠剤、シロップ、懸濁液、溶液、粉末、顆粒、乳剤、微粒子若しくはナノ球、または制御放出を可能にする脂質小胞若しくはポリマー小胞の形態であってもよい。典型的には、組成物は、注射によって投与される。これらの投与のための方法は、当業者に既知である。

本発明による薬学的組成物は、任意の薬学的に許容される担体を含有し得る。例えば、担体は、液体若しくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、若しくは封入材料、またはそれらの組み合わせであってもよい。

本発明を更に説明するために、以下の実施例が提供される。

実施例：サイトカインストームを予防するためのＶＩＳＴＡアゴニスト抗体の使用
材料及び方法
雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（６～８週齢）を２つの群（ｎ＝６／群）に割り当て、Ｄ－１、Ｄ０、及びＤ２において、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体（２５０μｇ／治療、腹腔内）または対照抗体（２５０μｇ／治療、腹腔内）で前処理した（図１）。血漿クレアチニン及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）の測定によって腎機能不全の重症度を試験するために、ＩＲ障害の７２時間後に血漿試料を収集した。血漿クレアチニン及びＢＵＮの上昇したレベルは、腎機能不全を示し、腎臓糸球体濾過が損なわれていること、すなわち、正常な糸球体濾過率よりも低く、腎臓損傷が起こっていることを示す。糸球体濾過率が低過ぎると、患者は、透析を必要とする。

結果
血漿クレアチニン及びＢＵＮのレベルが、対照治療マウスと比較して、３０分間の腎ＩＲに供した抗ＶＩＳＴＡ治療マウスにおいて有意に低下した（図２Ａ～Ｂ、ｎ＝３）。ヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色の形態的評価は、各動物が受けた治療を認識していなかった経験豊富な腎病理学者によって実施された。

対照治療マウスにおいて、重度の腎尿細管壊死（図３Ａ、赤矢印）が観察され、抗ＶＩＳＴＡ治療マウスにおいて、尿細管上皮細胞壊死（図３Ｂ、赤矢印）が有意に少なく、腎尿細管壊死全体が観察されなかった。

Ｊａｂｌｏｎｓｋｉら（１９８３）によって概説され、かつ前述されたように（Ｌｅｅら（２００７）、Ｌｅｅら（２００４）））、ＩＲ誘導損傷の組織病理学的評価のために、近位尿細管への壊死障害の確立された等級付けスケール（０～５、腎障害スコア）を使用した。アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体で治療されたマウスは、対照治療マウス（図３Ｃ）と比較して腎尿細管障害スコア（図３Ｃ）の低下を示した。

腎ＩＲ後の腎炎症もまた、ＩＲの７２時間後のＨ＆Ｅ染色を使用した炎症性細胞浸潤の検出によって評価した。腎臓の炎症性浸潤スコアは、確立された炎症性細胞浸潤の等級付けスケール（０～３、炎症性浸潤スコア（図３Ｄ）に基づいた。アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体で治療されたマウスは、腎間質炎症スコアの低下を示した。

ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）陽性細胞もまた、評価し、組織壊死のない５つのエリア（０．０５ｍｍ２／エリア）で定量化した。多くのＭＰＯ陽性染色細胞（図４Ａ、赤い矢印）が、対照治療マウス、特に糸球体において観察された。アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体治療マウスにおいてＭＰＯ陽性染色細胞（図４Ｂ、赤矢印）はほとんど観察されず、糸球体においてＭＰＯ陽性染色細胞は観察されなかった。結果を定量化し、陽性ＭＰＯ陽性細胞の数／０．０５ｍｍ^２として表した（図４Ｃ）。

これらの結果は、ＶＩＳＴＡアゴニストが、ＩＲＩ、及び本明細書で識別される移植及び他のＩＲＩ関連状態を含むＩＲＩと関連付けられた状態を治療または予防するために、治療的または予防的に使用され得ること、並びにそのような状態におけるＩＲＩの有害な副作用を予防または改善するために使用され得ることを実証する。

上記に関連して、図７～図１０は、それぞれ、腎臓移植におけるＤＧＦ、心臓手術関連急性腎障害、心筋梗塞、及び虚血性脳卒中を治療するためのＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する提案された臨床試験を概略的に説明する。

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ヒトＩｇＧ２重定常ポリペプチド及び核酸（ｃＤＮＡ）配列
１．ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＦＲＶＶＳＶＬＴＶＶＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＴＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＳＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＥＬＱＬＥＥＳＣＡＥＡＱＤＧＥＬＤＧＬＷＴＴＩＴＩＦＩＴＬＦＬＬＳＶＣＹＳＡＴＩＴＦＦＫＶＫＷＩＦＳＳＶＶＤＬＫＱＴＩＶＰＤＹＲＮＭＩＲＱＧＡ
２．ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＦＲＶＶＳＶＬＴＶＶＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＴＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＳＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
３．ＥＮＳＴ０００００３９０５４５．３
４．ＥＮＳＴ０００００６４１０９５．１
５．ＥＮＳＴ０００００６４１０９５．１
６．ＥＮＳＴ０００００３９０５４５．３

Claims (56)

1. 虚血再灌流障害（ＩＲＩ）及び／またはＩＲＩと関連付けられる有害な副作用の治療及び／または予防を必要としている対象においてそれを行う方法であって、治療または予防有効量のＶＩＳＴＡアゴニストを投与することによる、方法。
2. 前記対象が、任意選択的に死亡したドナーから、固形臓器移植を受けるか、または受けており、前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、移植前、移植中、または移植後に投与される、請求項１に記載の方法。
3. 前記固形臓器が、任意選択的に、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈から選択される、請求項２に記載の方法。
4. ＩＲ障害の前または後の、前記ＶＩＳＡアゴニスト、任意選択的に、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体の前記投与が、固形臓器障害、例えば、腎障害の影響を予防または緩和し、前記固形臓器、例えば、腎臓を保護する、請求項２または３に記載の方法。
5. 前記対象が、固形臓器移植を受けているか、または受けようとしており、前記治療が、移植片機能遅延（ＤＧＦ）を予防または改善する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
6. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、虚血後再灌流によって引き起こされる臓器への障害を予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
7. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、手術、任意選択的に、限定されるものではないが、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈を含む、主要な臓器に関与する手術、冠動脈バイパス、主要な血管の修復、肝臓切除、並びに腎臓、肝臓、心臓、肺、及び大動脈のうちの１つ以上の移植、のうちの１つ以上によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
8. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、手術中の心肺バイパス、脳卒中、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
9. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、固形臓器移植、術後急性腎障害、心肺バイパス手術、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、及び外傷と関連付けられる虚血再灌流障害（ＩＲＩ）によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
10. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、酸素欠乏（虚血）の期間の後の組織への血液供給の復帰（再灌流）によって引き起こされる、虚血後再灌流によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療するアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体であり、任意選択的に、前記抗体が、ヒトＩｇＧ２ ＦｃまたはヒトＩｇＧ２定常領域を含み、更に任意選択的に、前記ヒトＩｇＧ２ ＦｃまたはヒトＩｇＧ２定常領域が、ＦｃＲ欠損ではなく、すなわち、天然由来のヒトＩｇＧ２ Ｆｃ及びヒトＩｇＧ２ポリペプチドによって結合されるＣＤ３２またはＣＤ３２Ａを含むヒトＦｃＲに結合し、更に任意選択的に、前記ヒトＩｇＧ２が、天然（非修飾）ヒトＩｇＧ２定常領域を含むか、または本明細書に開示される配列（１）～（６）のいずれかの、若しくはそれらのいずれかによってコードされるアミノ酸配列を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
11. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、例えば、主要な外科手術、任意選択的に、心臓手術、肝移植、肝臓切除、腎移植、肺移植、大動脈手術、または主要な血管の修復を受けている対象において、ＩＲ障害に起因する術後臓器機能不全によって引き起こされるＩＲＩを予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
12. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、任意選択的に固形臓器移植レシピエントにおいて、更に任意選択的に、腎臓ＩＲに起因して腎障害を発症し、肝臓、腸、及び肺機能不全のうちの１つ以上、及び／または敗血症の発症を示唆する炎症状態を更に発症する腎移植レシピエントにおいて、ＩＲＩと関連付けられる遠隔臓器障害を予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
13. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、任意選択的に心臓手術と関連付けられる急性腎障害（ＡＫＩ）を予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
14. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、主要な外科手術、任意選択的に、腎臓、肝臓、心臓、または大動脈に関与する外科手術と関連付けられる虚血性ＡＫＩを予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
15. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、ＩＲＩ関連多臓器機能不全及び／または全身炎症を予防または治療する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
16. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、大手術前、大手術中、及び／または大手術後に投与され、ＩＲ障害から保護する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
17. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、限定されるものではないが、腎臓、肝臓、心臓、肺、腸、及び大動脈を含む、主要な臓器に関与する手術、冠動脈バイパス、主要な血管の修復、肝臓切除、並びに腎臓、肝臓、及び肺の移植前、移植中、及び／または移植後に投与され、ＩＲ障害から保護する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
18. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、心肺バイパスを含む手術の前に投与される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
19. 前記ＶＩＳＴＡアゴニスト、任意選択的にアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体が、脳卒中、肝虚血、腎虚血、大動脈閉塞、心筋閉塞、心停止、ショック、または外傷と診断されたか、またはその徴候を示す対象に投与され、そのような投与が、更なるＩＲ障害から保護及び／または更なるＩＲ障害を阻害する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
20. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、ＶＩＳＴＡ融合タンパク質、例えば、ＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質を含むか、またはアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体若しくは抗体断片を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
21. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＶＩＳＴＡ融合タンパク質、例えば、ヒトＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質を含むか、またはアゴニスト抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体若しくは抗体断片を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
22. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む可変軽鎖及び重鎖ポリペプチドを含む、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡまたは抗体断片を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
23. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つの前記可変軽鎖及び重鎖ポリペプチドを含む、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡまたは抗体断片を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
24. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、組織への酸素及び栄養素の欠乏、並びに代謝変化及び廃棄物の蓄積を結果的にもたらす無酸素事象及び虚血事象、任意選択的に心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、または固形臓器移植を患った組織における血流回復を含む、任意の状態のＩＲＩを治療または予防するために使用される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
25. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、ＳＴＥＭＩ心筋梗塞を経験する患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
26. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、心臓手術後の急性腎障害（ＡＫＩ）（心臓手術関連急性腎障害（ＣＳＡ－ＡＫＩ））を有するか、またはそのリスクがある患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
27. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、脳卒中の徴候を示すか、または脳卒中のリスクがある患者、特にｔＰＡの投与後の再灌流後にＩＲＩに罹患し易い虚血性脳卒中を患う患者におけるＩＲＩを治療または予防するために使用される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
28. 前記投与されるＶＩＳＴＡアゴニストが、移植レシピエント、特に固形臓器移植における、並びにより具体的には、移植片生存を促進するために、死亡したドナー移植を受けた患者及び／または移植片機能遅延（ＤＧＦ）を呈する患者、または前述の任意の組み合わせにおける、ＩＲＩを治療または予防するために使用される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
29. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体若しくはアゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体断片、またはアゴニストＶＳＩＧ３融合タンパク質若しくはアゴニスト抗ＶＳＩＧ３抗体若しくはアゴニスト抗ＶＳＩＧ３抗体断片、またはアゴニストＰＳＧＬ１抗体、抗体断片若しくはＰＳＧＬ１融合タンパク質、あるいは前述の任意の組み合わせを含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
30. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、ＬＰＳ誘導ＩＬ－１２ｐ４０、ＩＬ－６、ＣＸＣＬ２、及びＴＮＦのうちの少なくとも１つのレベルを低下させる、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
31. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、マクロファージ寛容誘導に関与するメディエーターの発現を増加させ、前記メディエーターが、ＩＲＧ１、ｍｉＲ２２１、Ａ２０、及びＩＬ－１０のうちの少なくとも１つを任意選択的に含む、及び／またはＩＲＦ５、ＩＲＦ８、及びＮＦＫＢ１のうちの少なくとも１つを任意選択的に含む抗炎症プロファイルを駆動する抗炎症転写因子の発現を増加させる、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
32. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、（ｉ）ＣＸＣＲ２及び／またはＣＸＣＬ１０のレベルを低減させるか、（ｉｉ）好中球／リンパ球比を低減させるか、（ｉｉｉ）ＦｃｇＲＩＩＩレベルを低減させるか、または前述の組み合わせである、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
33. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、マクロファージ寛容誘導に関与するメディエーターの発現を増加させ、前記メディエーターが、ＩＲＧ１、ｍｉＲ２２１、Ａ２０、及びＩＬ－１０のうちの少なくとも１つを任意選択的に含む、及び／またはＩＲＦ５、ＩＲＦ８、及びＮＦＫＢ１のうちの少なくとも１つを任意選択的に含む抗炎症プロファイルを駆動する抗炎症転写因子の発現を増加させる、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
34. ＰＤ－１アゴニスト、ＣＴＬＡ－４アゴニスト、ＴＮＦアンタゴニスト、任意選択的に抗ＴＮＦ抗体若しくはＥｍｂｒｅｌなどのＴＮＦ受容体融合体、抗ＩＬ－６若しくは抗ＩＬ－６Ｒ抗体などのＩＬ－６アンタゴニスト、コルチコステロイド、または他の抗炎症剤、あるいは前述の任意の組み合わせから任意選択的に選択される、別の活性の投与を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
35. 前記アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、ヒトＶＩＳＴＡに特異的に結合する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
36. 前記アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗体のうちのいずれか１つと同じＣＤＲを含む可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドを含む、請求項３５に記載の方法。
37. 前記アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗体のうちのいずれか１つと同じＣＤＲを含む可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドを含み、前記抗体または抗体断片の前記可変軽鎖及び前記可変重鎖ポリペプチドが、各々、図６の表に含まれる配列を有する同じ抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体の前記可変軽鎖及び前記可変重鎖ポリペプチドに対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
38. 前記アゴニスト抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、図６の表に含まれる配列を有する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体のうちのいずれか１つと同じ配列を含む可変軽鎖及び可変重鎖ポリペプチドを含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
39. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＶＩＳＴＡ融合ポリペプチド、例えば、ヒトＶＩＳＴＡ－Ｉｇ融合タンパク質、及び／またはヒトＶＳＩＧ３融合ポリペプチド、例えば、ヒトＶＳＩＧ３－Ｉｇ融合タンパク質、または前述の任意の組み合わせを含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
40. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＦｃ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
41. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
42. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、少なくとも１つのエフェクター機能、例えば、ＦｃＲ結合、補体結合、グリコシル化、またはＡＤＣＣを変更（増加または減少）するように変異されている、ヒトＦｃ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
43. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、内因性ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域によって結合された全てまたは少なくとも１つのＦｃ受容体に結合するヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域を含む、前述の請求項のいずれかに記載の方法。
44. 前記患者における少なくとも１つのサイトカインまたは抗炎症性分子若しくは炎症誘発性分子、例えば、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ２、ＩＬ－６、ＣＲＰ、ガンマインターフェロン、ＩＬ－１、ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣのレベルが、治療前に検出される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
45. 前記患者における前記サイトカインまたは炎症誘発性分子の前記レベルが、治療前に異常であることが検出され、確認される、請求項４４に記載の方法。
46. 前記患者における前記ＶＩＳＴＡのレベルが、治療の前及び／または後に検出される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
47. 前記患者におけるＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ２、ＩＬ－６、ＣＲＰ、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣのうちの少なくとも１つのレベルが、治療の前及び／または後に検出される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
48. 前記患者におけるＩＬ－６及び／またはＣＲＰ及び／またはＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１７、ＣＣＬ５／Ｒａｎｔｅｓ、ＣＣＬ３／ＭＩＰ－１アルファ、及びＣＸＣＬ１１／Ｉ－ＴＡＣのうちのいずれかの前記レベルが、治療前に上昇することが検出され、確認される、請求項４７に記載の方法。
49. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、０．０１～５０００ｍｇ、１～１０００ｍｇ、１～５００ｍｇ、５ｍｇ～５０ｍｇ、または約１～２５ｍｇの範囲の用量で投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
50. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、２日若しくは３日毎、隔週、毎週、２週間若しくは３週間毎、または４週間毎に、静脈内または皮下注射を介して投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
51. 前記患者が、別の抗炎症治療、任意選択的に、コルチコステロイド、吸入一酸化窒素（ＮＯ）、体外式膜型人工肺（静脈静脈または静脈動脈）、または別の免疫抑制剤、任意選択的に、サイモグロブリン、バシリキシマブ、ミコフェノール酸モフェチル、タクロリムス、リツキシマブなどの抗ＣＤ２０ ｍＡｂ、若しくはコルチコステロイドのうちの１つ以上を受ける、先行請求項のいずれかに記載の方法。
52. 前記患者が、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４、またはＩＬ－６アンタゴニストなどの、チェックポイントタンパク質を標的とする別の生物学的薬剤、例えば、別の抗体で追加的に治療される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
53. 前記抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗体断片が、エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、及び／またはグリコシル化を変更するために修飾されたＦｃ領域を含有する、先行請求項のいずれかに記載の方法。
54. 前記抗ＶＩＳＴＡ抗体が、ヒト化一本鎖抗体、またはキメラ抗体から選択され、前記抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、またはｓｃＦｖから選択される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
55. 前記患者が、脳卒中または心筋梗塞の発症または増加したリスクと相関する１つ以上のバイオマーカーを異常に発現し、前記バイオマーカーが、低密度リポタンパク質コレステロール、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｇＡ１ｃ）、Ｃ反応性タンパク、リポタンパク質関連ホスホリパーゼＡ２、尿中アルブミン排泄、ナトリウム利尿ペプチド、グリア線維性酸性タンパク質、Ｓ１００ｂ、ニューロン特異的エノラーゼ、ミエリン塩基性タンパク質、インターロイキン－６、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）－９、Ｄ－ダイマー、及びフィブリノゲンを任意選択的に含む、先行請求項のいずれかに記載の方法。
56. 前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、（ｉ）心筋梗塞、心臓手術、脳卒中、及び固形臓器移植から結果的に生じるＩＲＩ、（ｉｉ）ＳＴＥＭＩ心筋梗塞を経験する患者におけるＩＲＩ、（ｉｉｉ）心臓手術後に急性腎障害（ＡＫＩ）（心臓手術関連急性腎障害（ＣＳＡ－ＡＫＩ））を有するか、またはそのリスクがある患者におけるＩＲＩ、（ｉｖ）心肺バイパス（ＣＰＢ）の使用を任意選択的に伴う開胸心臓血管手術を受けている患者におけるＩＲＩ、脳卒中の徴候を示すか、または脳卒中のリスクがある患者、特にｔＰＡの投与後に再灌流後のＩＲＩに罹患し易い虚血性脳卒中を患う患者におけるＩＲＩ、（ｖ）移植レシピエント、特に固形臓器移植における、より具体的には、死亡したドナー移植を受ける患者及び／または移植片機能遅延（ＤＧＦ）を呈する患者におけるＩＲＩ、のうちのいずれかを治療または予防するために使用される、前述の請求項のいずれかに記載の方法。