JP2023529851A - Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤを処置するための組成物および方法 - Google Patents

Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤを処置するための組成物および方法 Download PDF

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Abstract

本開示は、ウイルスに以前に感染し、ウイルス感染後疲労症状、例えばＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを患う対象を処置するための組成物および方法に関する。該組成物および該方法は、治療用二本鎖ＲＮＡ ｔｄｓＲＮＡを含む、治療有効量の組成物を含む。【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本出願は、その全内容が参照によって本明細書に組み込まれる、２０２０年６月５日に出願された米国特許仮出願第６３／０３５６８１号、および２０２０年１２月１４日に出願された米国特許仮出願第６３／１２５１９５号の優先権の利益を主張する。
２０１９年の終わりに、中国武漢において、肺炎患者のクラスターの原因として新型コロナウイルスが同定された。それは、急激に拡散し、世界的なパンデミックになった。疾患は、新型コロナウイルス感染症２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）と名付けられ、病原体は、後にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と名付けられたコロナウイルスであることが発見された。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、βコロナウイルスファミリーのメンバーである。それは、ヒトに感染する７番目の公知のコロナウルスであり；これらのコロナウイルスのうちの４つ（２２９Ｅ、ＮＬ６３、ＯＣ４３、およびＨＫＵ１）は、風邪の軽い症状を引き起こす。他の３つのβコロナウイルス、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、重篤な症状、および死さえも引き起こし、それぞれ死亡率１０％、３７％、および５％である。米国では６０万人を超える人々が、世界中では３５０万人を超える人々が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染によって死亡した。
入院患者の８０％以上が、感染の急性期を経過した後も、ＣＯＶＩＤの少なくとも１つの長引く症状を報告した。さらに、多くの患者において、ＣＯＶＩＤの持続症状が、６週間、１２週間、または６ヶ月以上後まで残る。この障害／疾患は、ロングホーラーおよび他の名前で呼ばれる。現在、「Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ」が、障害／疾患を記載するために一般的に使用される（例えば、World Health Organization . 2020. Covid-19 Virtual Press Conference 21 August 2020. p.22を参照されたい。https://www. who. int/ docs/ default-source/coronaviruse/transcripts/covid-19-virtual-press-conference---21-august.pdf?sfvrsn=ada7ae85_0から入手可能；Mahase E. Covid-19: what Do We Know about “Long Covid”? BMJ. 2020; 370 https:// www. bmj. com/ content/ 370/ bmj.m2815 Accessed 31 July 2020も参照されたい）。
本開示は、Ｌｏｎｇ ＣｏｖｉｄまたはＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄの少なくとも１つの症状を処置するための組成物および方法を指す。
一実施形態は、ウイルスに以前に感染し、ウイルス感染後疲労を患い、ウイルス感染後長期症状を示す対象を処置するための方法であって、治療有効量のｔｄｓＲＮＡを含む組成物を対象に投与することを含む方法に関する。
一態様では、ウイルス感染後長期症状（例えばＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ）を有すると考えられる対象は、２つの状態を満たす。第１の状態は、対象が、重症疲労を含む疲労、疲労による運動または活動不能、および疲労による低運動耐容能からなる群から選択される少なくとも１つの症状を示す。第２の状態は、対象が、息切れまたは呼吸困難、持続性胸痛または胸部圧迫感、咳、心臓の動悸、下痢、嗅覚の部分または完全喪失、頻脈、脱毛、視界不良、手足の神経障害、味覚の部分または完全喪失、吐き気または嘔吐、耳詰まり、ドライアイ、身震いまたは震え、飛蚊症または閃光、発疹、耳鳴症または耳鳴り、味覚の変化、皮膚の乾燥または剥離、幻嗅、肋軟骨炎、血中酸素濃度低下、ＣＯＶＩＤ指先、鵞口瘡、呼吸困難、喉奥の痰、持続する喉の渇き、筋痙攣、高熱不耐性、異常低温、肺の低温火傷感、甲状腺腫または喉の詰まり、乾燥頭皮またはふけ、貧血、甲状腺隆起、乾燥症候群、赤眼、味覚異常、痰産生、食欲不振、空間識失調、筋肉痛、認知障害、ブレーンフォグ、集中障害、思考障害、寒気、汗、睡眠障害、筋肉または全身の痛み、集中または注目の困難、頭痛、睡眠困難、不安、記憶障害、めまい、関節痛、咽頭痛、寝汗、熱または寒気、鼻閉または鼻水、悲観、逆流または胸焼け、症状の変化、腹痛、腰痛、前屈による息切れまたは疲労、体重増加、こむら返り、通常以上の睡眠、上背部の痛み、神経感覚、鋭いおよび突然の胸痛、精神錯乱、感覚過敏、体重減少、後鼻漏、喉の渇き、高血圧、手足の膨張、口内痛または舌痛、頸筋痛、のぼせ、四肢の骨痛、皮膚灼熱感、後頭神経の基底部での過度の圧力、リンパ節の腫大、脳圧、腎臓痛、血圧のスパイク、手または手首の痛み、血管拡張、肋骨基底部における中背部痛、灼熱感、頭皮の痛み、顎痛、不整脈、唇の荒れまたは乾燥、足痛、目の麦粒腫または感染、低血圧、腎臓の問題または尿タンパク、尿路感染症、ホルモンの不均衡、激しい人格変化、過剰唾液分泌を伴う胃食道逆流性疾患、ヘルペス感染症、ＥＢＶ感染症、三叉神経痛、リンパ節周辺の首両側拍動、気絶、悲観、胸痛、鼻炎、および筋痛からなる群から選択される少なくとも４つの症状を示す。
第２の態様では、ウイルス感染後長期症状（例えば、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ）は、以下：（ａ）対象は、ＣＯＶＩＤ－１９を有する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在が以前に診断された、またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の血清抗体試験が陽性である；（ｂ）対象は、少なくとも３ヶ月間、慢性疲労症状（ＣＦＳ）の１９８８または１９９４ ＣＤＣ症例定義によって定義されるＣＦＳの診断に見合うが、ＣＦＳが（ａ）に先行しない；および（ｃ）対象は、連続３ヶ月またはそれ以上の病気の間、持続または再発する、少なくとも１つまたはそれ以上のＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状を同時発生し、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症候群が（ａ）に先行せず、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状が、疲労；労作後の倦怠感；頭痛；睡眠障害；記憶障害；集中障害；ブレーンフォグ；熱；寒気；咳；息切れ；呼吸困難；味覚の喪失；臭覚の喪失；および胸痛からなる群から選択される少なくとも１つであるとして示され、規定され得る。
好ましい実施形態では、ウイルス感染後疲労が、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤ（以前は、ＣＯＶＩＤ－１９感染後慢性疲労（ＰＣＣＦ）とも呼ばれた）であってもよく、ウイルス感染後長期症状が、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの症状である。
本開示の任意の態様では、対象は、抗ウイルス抗体に血清反応陽性であるかまたは抗ウイルス抗体に血清反応陰性であってよい。本開示の任意の態様では、対象は、投与工程中にウイルスに感染しなくてもよい。本開示の任意の態様では、対象は、投与工程中にウイルスに感染してもよい。本開示の任意の態様では、対象は、投与工程中にウイルス感染のために入院しなくてもよい。本開示の任意の態様では、対象は、ウイルスに感染する前に、ウイルス感染後疲労症状を有さなくてもよい（すなわち、ウイルス感染後疲労症状フリーである）。本開示の任意の態様では、対象は、ウイルスに感染する前に、少なくとも１年、２年、３年、４年、または５年間、ウイルス感染後疲労症状を有さなくてもよい（ウイルス感染後疲労症状フリーでもよい）。
本開示の任意の態様では、対象は、ウイルスに感染中または感染後に、ウイルス感染後疲労の症状を発症し得る。
本開示の任意の態様では、ウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２であり得る。例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、対象を、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ｂ感染症が処置された後、または対象においてＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が検出できないレベルでさえも、対象において続く病気およびＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状にさせる。
本開示の任意の態様では、ウイルスは、インフルエンザウイルス；アデノウイルス；ヘルペスウイルス；ライノウイルス；呼吸器合胞体ウイルス；コロナウイルス；エボラウイルス；西ナイルウイルス；ジカウイルス；Ｈ５型インフルエンザ；Ｈ７型インフルエンザ；Ｈ５Ｎ１型インフルエンザ；西ナイルウイルス；ジカウイルス；ヒトコロナウイルス２２９Ｅ（ＨＣｏＣ－２２９Ｅ）；ヒトコロナウイルスＯＣ４３（ＨＣｏＶ－ＯＣ４３）；重症急性呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）；ヒトコロナウイルスＮＬ６３（ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎコロナウイルス）；ヒトコロナウイルスＨＫＵ１；中東呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、新型コロナウイルス２０１２、ＨＣｏＶ－ＥＭＣ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２；Ａ型インフルエンザ；Ｂ型インフルエンザ；Ｈ１Ｎ１型インフルエンザ；Ｈ３Ｎ２型インフルエンザ；Ｈ７Ｎ９型インフルエンザ；Ｈ５Ｎ６型インフルエンザ；Ｈ１０Ｎ８型インフルエンザ；Ｈ９Ｎ２型インフルエンザ；Ｈ６Ｎ１型インフルエンザ；これらの変異体；これらの株；これらの突然変異体；これらの型；これらの亜型；これらの系統；これらの系統群；これらの亜系統群；およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
本開示の任意の態様では、ウイルス感染後長期症状は、感染時から投与工程まで、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、１年、２年、および２年以上からなる群から選択される期間続き得る。
本開示の任意の態様では、投与工程は、急性疾患の原発性ＣＯＶＩＤ－１９症状が消散された後に実施され得る。
本開示の任意の態様では、投与は、３０日、５０日、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、１年、２年、および２年以上からなる群から選択される期間、対象が感染した後に実施される。
本開示の任意の態様では、急性疾患のＣＯＶＩＤ－１９症状は、熱、寒気、咳、息切れ、呼吸困難、疲労、筋肉痛、全心痛、頭痛、味覚の喪失、臭覚の喪失、咽頭痛、充血、鼻水、吐き気、嘔吐、下痢、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
本開示の任意の態様では、組成物は、約２５ｍｇ～７００ｍｇのｔｄｓＲＮＡの投与量で投与され得る。
本開示の任意の態様では、組成物は、１日あたり１回投与、２日毎に１回投与、３日毎に１回投与、４日毎に１回投与、５日毎に１回投与、１週間に１回、１週間に２回、１週間に３回、２週間毎に１回、３週間毎に１回、４週間毎に１回、および１ヶ月に１回からなる群から選択される頻度で投与され得る。
本開示の任意の態様では、対象は、哺乳動物、例えばヒトであり得る。
本開示の任意の態様では、投与は、全身投与、適宜、静脈内投与により得る。
本開示の任意の態様では、投与は、静脈内投与；皮内投与；皮下投与；筋肉内投与；鼻腔内投与；腹腔内投与；頭蓋内投与；膀胱内投与；経口投与（口から、口からの呼吸により）；局所投与；吸入投与；エアロゾル投与；気道内投与；気管投与；気管支投与；滴下投与；気管支滴下；気管内投与；粘膜投与；乾燥粉末投与；噴霧投与；接触投与；スワブ投与；気管内沈着投与；気管支内沈着投与；気管支鏡沈着投与；肺内投与；鼻道投与；呼吸用固形投与；呼吸用液体投与；および乾燥粉末吸入投与からなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
本開示の任意の態様では、投与は、経鼻投与（肺気道投与）；経口および経鼻投与；または経鼻および静脈内投与により得る。
本開示の任意の態様では、投与は、気道組織；鼻組織；口腔組織；肺胞組織；咽頭組織；気管組織；気管支組織；気管分岐部組織；気管支組織；細気管支組織；肺組織；肺葉組織；肺胞組織；鼻道組織；鼻粘膜上皮組織；喉頭組織；気管支組織；吸入組織；およびこれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも１つの組織への投与であり得る。
本開示の任意の態様では、投与は、上皮細胞；気道上皮細胞；線毛細胞；杯細胞；無線毛細胞；基底細胞；肺細胞；鼻細胞；気管細胞；気管支細胞；気管支上皮細胞；肺胞上皮細胞；静脈洞細胞；およびこれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも１つの細胞への投与であり得る。
本開示の任意の態様では、投与は、ネブライザー；噴霧器；鼻腔用ポンプ；スクイーズボトル；鼻腔用スプレー；シリンジ噴霧器またはプランジャー噴霧器（接続した噴霧器またはノズルに圧力を提供するシリンジ）；鼻腔用エアロゾルデバイス；調節性粒子分散デバイス；鼻腔用エアロゾルデバイス；鼻腔用噴霧デバイス；圧力駆動ジェットネブライザー；超音波ネブライザー；呼吸による鼻腔用デリバリーデバイス；微粒化鼻腔用投薬デバイス；吸入器；粉体ディスペンサー；乾燥粉末発生器；エアロゾルライザー；肺内エアロゾルライザー；超小型エアロゾルライザー；噴霧剤ベースの定量噴霧式吸入器；乾燥粉末吸入デバイス；滴下デバイス；鼻腔内滴下デバイス；膀胱内滴下デバイス；スワブ；ピペット；鼻洗浄デバイス；鼻うがい；エアロゾルデバイス；定量エアロゾルデバイス；加圧投薬デバイス；粉末エアロゾル；スプレーエアロゾル；スプレーデバイス；定量スプレーデバイス；懸濁スプレーデバイス、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つのデリバリーシステム（デバイス）により得る。
本開示の任意の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＵ）ｎ （式１)；
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＧ）ｎ （式２)；
ｒＡｎ・ｒＵｎ （式３)；
ｒＩｎ・ｒＣｎ （式４)；および
堅牢ｄｓＲＮＡ（Ｒｕｇｇｅｄ ｄｓＲＮＡ） （式５)；
［式中、ｘは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、４～２９、１１～１４、および３０～３５からなる群から選択される少なくとも１つである］
からなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
全ての方法および全ての組成物を含む本開示の任意の態様では、ｔｄｓＲＮＡの型である堅牢ｄｓＲＮＡを含むｔｄｓＲＮＡは、以下の特徴を有し得る：ｔｄｓＲＮＡが、好ましくは、４０塩基対；５０塩基対；６０塩基対；７０塩基対；および８０塩基対からなる群から選択されるサイズより大きい、最少９０重量パーセントのｄｓＲＮＡを含有する。ｔｄｓＲＮＡが、１０，０００塩基対；９０００塩基対；８０００塩基対；および７０００塩基対からなる群から選択されるサイズより小さい、最少９０重量パーセントのｄｓＲＮＡを含有し得る。式１から式５の「ｎ」が、４０～４０，０００であり得る。ｔｄｓＲＮＡが、二重ＲＮＡ鎖のらせんの回転数約４～約４０００を有し得る。ｔｄｓＲＮＡが、約２５ｋＤａ～約２５００ｋＤａの分子量を有し得る。ｔｄｓＲＮＡが、分岐するＲＮＡ構造を持たない線状構造である。ｔｄｓＲＮＡが、安定化ポリマーと複合体形成している。安定化ポリマーが、ポリリジン；ポリリジン＋カルボキシメチルセルロース；ポリアルギニン；ポリアルギニン＋カルボキシメチルセルロース；カルボキシメチルセルロース；およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つである。一実施形態では、ｔｄｓＲＮＡが、ｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎまたはｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ３０Ｕ）ｎであり、式中、ｎが４０～５０，０００；５０～１０，０００；６０～９０００；７０～８０００；８０～７０００；または３８０～４５０である。
任意の実施形態では、組成物または組成物を含む方法は、組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも３０重量パーセントが線状構造である；組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも４０重量パーセントが線状構造である；組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも５０重量パーセントが線状構造である；組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも６０重量パーセントが線状構造である；組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも７０重量パーセントが線状構造である；組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも８０重量パーセントが線状構造である；または組成物中の全ｄｓＲＮＡの少なくとも９０重量パーセントが線状構造であるという特徴を有し得る。線状構造は、例えば、分岐もしくはＹ構造もループもない、線状核酸である。
好ましい実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、ｒＩｎ・リボ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ；および堅牢ｄｓＲＮＡ、またはｒＩｎ・リボ（Ｃ１２Ｕ）ｎ；および堅牢ｄｓＲＮＡを含み得る。
全ての方法および全ての組成物を含む、本開示の任意の態様では、堅牢ｄｓＲＮＡは以下の特徴を有し得る：堅牢ｄｓＲＮＡが、ｒ（Ｃ４－２９Ｕ）、ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ、またはr（Ｃ１２Ｕ）ｎから構成される一本鎖；およびｒ（Ｉ）から構成される逆鎖を有し；２つの鎖が、ウラシル塩基の位置で塩基対合せず、前記鎖が、部分的にハイブリダイズしている。堅牢ｄｓＲＮＡが、約２５０ｋＤａ～５００ｋＤａの分子量；堅牢ｄｓＲＮＡの各鎖が、約４００～８００塩基対長である；およびｔｄｓＲＮＡが、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数約３０～１００を有する、からなる群から選択される少なくとも１つを有し得る。堅牢ｄｓＲＮＡが、２つの鎖を有する二本鎖ＲＮＡであってよく、堅牢ｄｓＲＮＡの各鎖が、約３８０塩基～約４５０塩基の長さであり、堅牢ｄｓＲＮＡの一本鎖が、ポリ（リボシトシン４－２９ウラシル酸）を含み、堅牢ｄｓＲＮＡの逆鎖が、ポリ（リボイノシン酸）からなり、２つの鎖が、ウラシル塩基の位置で塩基対合せず、２つの鎖が、シトシン塩基の位置で塩基対合し、前記鎖が、部分的にハイブリダイズしている。
任意の態様では、方法は、対象にインターフェロンを投与する工程をさらに含み、ｔｄｓＲＮＡを投与する工程およびインターフェロンを投与する工程が任意の順序で実施される。
一態様は、本開示に記載される任意のｔｄｓＲＮＡを含む、対象においてウイルス感染後疲労を処置するかまたはその症状を緩和するための組成物に関する。例えば、ｔｄｓＲＮＡは、
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＵ）ｎ （式１)；
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＧ）ｎ （式２)；
ｒＡｎ・ｒＵｎ （式３)；
ｒＩｎ・ｒＣｎ （式４)；
堅牢ｄｓＲＮＡ （式５)；
［式中、ｘは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、４～２９、１１～１４、および３０～３５からなる群から選択される少なくとも１つである］
からなる群から選択される少なくとも１つであり得る。ウイルス感染後疲労は、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤであり得る。一実施形態では、組成物は、組換えまたは天然インターフェロン、Ａｌｆｅｒｏｎ、アルファ－インターフェロン種、組換えまたは天然インターフェロンアルファ、組換えまたは天然インターフェロンアルファ２ａ、組換えまたは天然インターフェロンベータ、組換えまたは天然インターフェロンベータ１ｂ、ならびに組換えおよび天然インターフェロンガンマからなる群から選択される少なくとも１つのインターフェロンをさらに含み得る。組成物は、本開示の任意の方法で使用され得る。例としては、組成物は、ｒＩｎ・リボ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎおよび堅牢ｄｓＲＮＡを含み得る；または、ｒＩｎ・リボ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎを含み得る。ウイルス感染後疲労は、本開示で議論した任意のウイルス、例えば上記のウイルスからであり得る。
本開示の様々な実施形態の例が提供される。実施形態の各パートまたはサブパートも、実施形態であると考えられるべきである。本開示の各実施形態は、本開示の１つまたはそれ以上の他の実施形態と組み合わされてもよく、組合せも本開示の実施形態である。本開示の任意のパートおよび任意の実施形態では、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔ）」、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」、「から基本的になる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」、または「から基本的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」は、互いに交換可能であり、これらの交換のそれぞれも本開示の実施形態である。本段落の上記に列挙した用語の１つの別のものとの交換は、それらが異なる意味を有する場合でさえも、想起され、実施形態である。本開示では、用語「疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）」は、用語「障害（ｄｉｓｏｒｄｅｒ）」によって置換されてもよく、用語「障害（ｄｉｓｏｒｄｅｒ）」は、用語「疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）」によって置換されてもよい。
上記の開示の様々な態様が、以下により詳細に記載される。
大幅な改善を示す患者の症状の経時的な図式概略図を描く。
１．概要
ＣＯＶＩＤ－１９は、新しく発見されたウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染によって引き起こされる最近出現した疾患である。ＣＯＶＩＤ－１９は、無症状から致死性までの広範な重症度スペクトルを現し得る。その壊滅的な死亡者数に加え、ＣＯＶＩＤ－１９は、少なくとも１つの長期の有害な影響－Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄも示す。Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄは、ＣＯＶＩＤ１９感染後疲労症状（Ｐｏｓｔ ＣＯＶＩＤ－１９ Ｆａｔｉｇｕｅ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ（「ＰＣＣＦ」）、Ｌｏｎｇ Ｈａｕｌ Ｃｏｖｉｄ、ロングホーラー症状などの多くの名前によって以前に言及されている。
本開示は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染後に長期間持続する症状のセットであるＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤを処置するための組成物および方法を記載する。Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤは、ＣＯＶＩＤ－１９ウイルス感染後疲労症状を指す。これらのＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤ症状は、ＣＯＶＩＤ－１９感染（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染）中または後に発症し、ＣＯＶＩＤ－１９の一次症状の一部または全てが治まったか、または重症度が低下した後でさえも持続する。ＣＯＶＩＤ－１９の一次症状としては、例えば、熱、寒気、咳、息切れ、呼吸困難、疲労、筋肉痛、全心痛、頭痛、味覚の喪失、臭覚の喪失、咽頭痛、充血、鼻水、吐き気、嘔吐、下痢が挙げられる。すなわち、これらのＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤ症状は、ＣＯＶＩＤ－１９患者の深刻な有害事象のリスクがもうなく、入院がもう必要ない後でさえも持続する。
例えば、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の後でさえも、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のレベルが減少しているかまたは非常に低い後でさえも、および対象が、検出可能なレベルのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスをもう示さない後でさえも、持続し得る。本発明者らは、ＣＯＶＩＤ－１９患者のサブセットが、余生にＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを患い、継続的な治療を必要とし得ることに注目した。
例えば、対象は、病因から退院し、抗体試験またはＰＣＲ（例えば、ＲＴ－ＰＣＲを含む）試験によって検出可能なレベルのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を有さず、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの症状を依然として有し得る。Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤ症状としては、例えば、筋肉痛、認知障害、疲労、重度の疲労、ブレーンフォグ、集中障害、思考障害、寒気、汗、および睡眠障害、ならびにＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤのない対象と比較してトレッドミル運動負荷（ＥＴＴ）の低下が挙げられる。これらの症状の一部は、ＣＯＶＩＤ－１９症状よりも重症ではなく、入院を必要としないが、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤを患う対象を十分に衰弱させ、働くことができないかまたはＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤの発症前と同様の生産性で働けなくさせることがある。Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤを有する対象は、活動的な生活様式を生きることができず、働くことができず、生きるのに必要な日常的なタスクを行うことができないことさえもある。
本発明者らは、ｔｄｓＲＮＡ（以下の節で記載する）は、それ自体または組成物の形態で、対象におけるＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤの１つまたはそれ以上の症状の低減に有効であることを見出した。好ましい実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、トレッドミル運動負荷（ＥＴＴ）の２５％の増加に有効である。理論に縛られることを望まないが、本発明者らは、ｔｄｓＲＮＡが、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤを有する対象の免疫系を調節することにより１つまたはそれ以上の症状を低減すると仮定する。
２．定義
「ＣＯＶＩＤ－１９」は、「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２」ウイルスの感染によって引き起こされる疾患である。これらの名前は、世界保健機関（ＷＨＯ）および国際ウイルス分類委員会（ＩＣＴＶ）によって標準化された。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、新規性および急速性により、世界中に拡散し、ＣＯＶＩＤ－１９、ＣＯＶＩＤ－１９ウイルス、２０１９－ｎＣｏＶ、新型コロナウイルス肺炎、武漢コロナウイルス、および重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）を含む、多くの名前がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に使用された。ＣＯＶＩＤ－１９の疾患を有する対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染し、反対に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した対象は、ＣＯＶＩＤ－１９疾患を有する。しかしながら、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した対象は、無症状かまたは全ての症状を発症しないこともある。
本開示は、特に、ｔｄｓＲＮＡに関する。ｔｄｓＲＮＡは、「治療用ｄｓＲＮＡ」または「治療用二本鎖ＲＮＡ」とも呼ばれ、これらの用語は同じ意味を有する。
「ｒ」および「リボ」は、同じ意味を有し、リボ核酸またはリボ核酸の構成要素であるヌクレオチドもしくはヌクレオシドを指す。
ＲＮＡは、ヌクレオチドと呼ばれる連結した単位の鎖からなる。本開示は、主にＲＮＡに関し、したがって、他に指定しない限り、表されたヌクレオチドおよび塩基は、ヌクレオチドまたは塩基のリボ形態を指す（すなわち、１つまたはそれ以上のリン酸基を有するリボヌクレオチド）。したがって、「Ａ」は、ｒＡまたはアデニンを指し、「Ｕ」は、ｒＵまたはウラシルを指し、「Ｃ」は、ｒＣまたはシトシンを指し、「Ｇ」は、ｒＧまたはグアニンを指し、「Ｉ」は、ｒＩまたはイノシンを指し、「ｒＮ」は、ｒＡ、ｒＵ、ｒＣ、ｒＧまたはｒＩを指す。これらのそれぞれ（すなわち、Ａ、Ｕ、Ｃ、Ｇ、Ｉ）は、それらが鎖（すなわちＲＮＡ）の一部であるかまたは遊離（ヌクレオシド、ヌクレオチド等）かにより、上記のように１つまたはそれ以上のリン酸基を有し得る。
「ｎ」は、正の数であり、ｓｓＲＮＡもしくはｄｓＲＮＡの長さ、またはｓｓＲＮＡもしくはｄｓＲＮＡの集団の平均の長さを指す。「ｎ」は、１つの核酸分子を指す場合、正の整数であり、核酸分子の集団の平均の長さである場合、任意の正の数であり得る。
ＲＮＡは、ヌクレオチドまたは塩基の比を有し得る。例えば、ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎは、平均１２Ｃ塩基またはＵ塩基毎のヌクレオチドまたはヌクレオチドを有する単一ＲＮＡ鎖を示す。別の例としては、ｒ（Ｃ１１－１４）ｎは、平均１２Ｃ塩基またはＵ塩基毎にヌクレオチドまたはヌクレオチドを有する単一ＲＮＡ鎖を示す。
式：例として、式「ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎ」は、リボＩｎ・リボ（Ｃ１２Ｕ）ｎ、ｒＩｎ・リボ（Ｃ１２Ｕ）ｎ、またはリボＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎとして表すことができ、２つの鎖を有する二本鎖ＲＮＡを指す。１つの鎖（ｒＩｎ）は、ｎ塩基長のポリリボ－イノシンである。他方の鎖は、ＣおよびＵ塩基の無作為配列のｓｓＲＮＡであり、無作為配列ｓｓＲＮＡはｎ塩基長であり、無作為配列ｓｓＲＮＡ中のＵ塩基に対するＣ塩基の比は約１２（すなわち、１Ｕに対して１２Ｃを意味する）である。用語「ｒ」および「リボ」は、本開示の式において同じ意味を有する。したがって、ｒＩ、リボＩ、ｒ（Ｉ）、およびリボ（Ｉ）は、イノシンのリボース形態である、同じ化学基を指す。同様に、ｒＣ、リボＣ、ｒ（Ｃ）、およびリボ（Ｃ）は全て、ＲＮＡの構成要素であるリボース形態のシチジンを指す。ｒＵ、リボＵ、ｒ（Ｕ）、およびリボ（Ｕ）は全て、ＲＮＡの構成要素であるリボース形態のウラシルを指す。
「・」記号は、ｄｓＲＮＡの１つの鎖が、同じｄｓＲＮＡの第２の鎖にハイブリダイズする（水素結合する）ことを示す。したがって、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎは、２つのｓｓＲＮＡを含む、二本鎖ＲＮＡである。１つのｓｓＲＮＡは、ポリ（Ｉ）であり、もう一方のｓｓＲＮＡは、ポリ（Ｃ１２Ｕ）である。本発明者らは、ハイブリダイズしている２つの鎖について言及するが、ミスマッチであるいくつかの塩基があるため、１００％の塩基が塩基対合を形成するわけではないことに注意すべきである。また、ｒＵがｒＩと塩基対合を形成せず、ならびにｒＣがｒＩと塩基対合を形成するため、ｒＵは、Ｕ塩基の位置で、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎの水力学的不安定性の中心を提供する。
別の例としては、式「ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ」は、１つの鎖のＵ塩基に対するＣ塩基の比が約１１～約１４である以外は同じｄｓＲＮＡを指す。すなわち、比は、１１、１２、１３もしくは１４または１１と１４の間の任意の値であり得る。例えば、鎖の半分がｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎであり、鎖の半分がｒ（Ｃ１３Ｕ）ｎである場合、式はｒ（Ｃ１２．５Ｕ）ｎである。
本開示のｄｓＲＮＡ（ｔｄｓＲＮＡ）およびｓｓＲＮＡは、限定された塩基の組成物のホモポリマー（例えば、全ての塩基が同じである一本鎖ＲＮＡ）またはヘテロポリマー（例えば、塩基が異なり得る一本鎖ＲＮＡ）である。ｔｄｓＲＮＡは、ｍＲＮＡではなく、構造がｍＲＮＡとは異なる。例えば、ｓｓＲＮＡおよびｄｓＲＮＡは、好ましくは、以下：（１）５’キャップ付加、（２）ポリアデニル化、（３）開始コドン、（４）終始コドン、異種タンパク質コード配列、および（５）スパイスシグナルの１つまたは全てを欠損する。
本明細書で使用される場合、用語「実質的に含まない（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ｆｒｅｅ）」は、物質の分析試験の文脈で操作上使用される。好ましくは、精製した物質は、１つまたはそれ以上の不純物を実質的に含まない。好ましい実施形態では、本開示のｔｄｓＲＮＡは、ｄＩ／ｄＩ ｄｓＲＮＡまたはｄＣｄＵ／ｄＣｄＵ ｄｓＲＮＡを実質的に含まない（例えば０％より多く～０．１％より少ない）か、または完全に含まない（０％）。言い換えると、ｔｄｓＲＮＡは、ポリマー１のホモ二量体またはポリマー２のホモ二量体を実質的に含まないか、または完全に含まない（０％）。この文脈での実質的に含まないは、０％より多いが１％より少ない、０．５％より少ない、０．２％より少ない、０．１％より少ない、または０．０１％より少ない（１）ｄＩ／ｄＩ（ポリマー１／ポリマー１）ｄｓＲＮＡ、ｄＣｄＵ／ｄＣｄＵ（ポリマー２／ポリマー２）ｄｓＲＮＡなどの夾雑物と考えられる。
用語「鼻腔内（ｉｎｔｒａｎａｓａｌ）」または「鼻腔内（ｉｎｔｒａｎａｓａｌｌｙ）」、「滴下（ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）」、「液体の滴下（ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ）」、「噴霧器を使用する滴下（ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ａ ｓｐｒａｙｅｒ）」は、本明細書で使用される場合、鼻粘膜、気道、肺またはこれらの組合せへの吸入による患者への活性化合物のデリバリー経路を指す。
本明細書で使用される場合、用語「ネブライザー」は、鼻を通して中枢神経系へと吸入されるミストの形態のｔｄｓＲＮＡなどの医薬を投与するために使用される薬物デリバリーデバイスを指す。ネブライザーは、酸素、圧縮空気、超音波パワー、機械的手段等を使用して、薬液および懸濁液を、デバイスから直接吸入され得る小さいエアロゾル滴へと粉砕し得る。
本明細書で使用される場合、用語「エアロゾル」は、気体および液体粒子の混合物を指し、自然発生のエアロゾルの最も良い例はミストであり、熱い周囲空気と混合された小さい蒸発水粒子が冷やされ、目に見える浮遊の水滴の細かい蒸気へと濃縮される場合に形成される。本開示の一実施形態では、エアロゾルは、エアロゾルスプレーまたは噴霧器によって産生され得る。本明細書で使用される場合、用語「エアロゾルスプレー（ａｅｒｏｓｏｌ ｓｐｒａｙ）」または「噴霧器（ｓｐｒａｙｅｒ）」は、液体粒子のエアロゾルミストを作成する分配装置の型を指す。これは、圧力下で液体を含有する缶または瓶によって使用される。容器のバルブが開かれると、液体は、小さな穴の外へ押し出され、エアロゾルまたはミストとして現れる。ガスが膨張しペイロードを押し出すと、一部の噴霧剤のみが缶内で蒸発し、均一の圧力を維持することができる。缶の外側では、噴霧剤の液滴が急速に蒸発し、ペイロードを非常に細かい粒子または液滴として懸濁させる。アトマイザーは、貯蔵ガスよりも手動ポンプによって圧力を保つ類似のデバイスである。
本記載の粒子、液滴、またはエアロゾル等は、液体懸濁液粒子または乾燥粒子であり得る。乾燥粒子は、それが産生されると、それが投与されると、および／またはそれが装置を出ると乾燥され得る。液体が速く蒸発する液体であり得るため、粒子、液滴、またはエアロゾルが液体として開始する場合でさえも、乾燥粒子であり得る。したがって、粒子、液滴、またはエアロゾルが対象に接触する時までには、それは乾燥されるであろう。また、例えば液体成分の急速な蒸発により、液体粒子、液滴、またはエアロゾルが対象に接触した後に乾燥されることも可能である。
用語「鼻腔内（ｉｎｔｒａｎａｓａｌ）」または「鼻腔内（ｉｎｔｒａｎａｓａｌｌｙ）」、「滴下（ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）」、「液体の滴下（ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ）」、「噴霧器を使用する滴下（ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ａ ｓｐｒａｙｅｒ）」は、本明細書で使用される場合、鼻粘膜、気道、肺またはこれらの組合せへの吸入による患者への活性化合物のデリバリー経路を指す。吸入は、口に通るか、または気管切開術の結果としてストーマを通る呼吸により得る。
活性成分または活性剤は、交換可能に使用され、少なくともｔｄｓＲＮＡを含む、本開示に記載の任意の活性成分または活性剤を含む。他の活性剤は、少なくともＡｌｆｅｒｏｎなどのインターフェロンを含む。
３．ｔｄｓＲＮＡ
本開示に記載の二本鎖ＲＮＡは、治療用二本鎖ＲＮＡであり、「ｔｄｓＲＮＡ」と略される。ｔｄｓＲＮＡは、少なくとも、式ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎのｔｄｓＲＮＡであるリンタトリモドを含む。ｔｄｓＲＮＡは、薬学的に許容される溶液中、例えばリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で保存されるかまたは投与され得る。
ｔｄｓＲＮＡは、本開示の任意の方法によって産生されるｔｄｓＲＮＡであってもよく、本明細書において「ｔｄｓＲＮＡ産物」または「ｔｄｓＲＮＡ」と呼ばれ、２つの用語は、同じ意味を有する。ｔｄｓＲＮＡは、任意の組合せで以下の式：
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＵ）ｎ （式１)
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＧ）ｎ （式２)
ｒＡｎ・ｒＵｎ（ポリＡ・ポリＵとも呼ばれる）（式３)
ｒＩｎ・ｒＣｎ （式４)
堅牢ｄｓＲＮＡ （式５)
の１つまたはそれ以上によって表され得る。
それぞれ、以下でさらに記載する。
ｔｄｓＲＮＡは、以下の式：
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＵ）ｎ （式１)
ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＧ）ｎ （式２)
［式中、ｘは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、４～２９（４から２９）、４～３０（４から３０）、４～３５（４から３５）、１１～１４（１１から１４）、３０～３５（３０から３５）からなる群から選択される少なくとも１つであり得る］
の１つまたはそれ以上によって表され得る。これらのうち、ｘ＝１２およびｘ＝１１～１４（ｘは１１～１４の間の任意の値でよい）が特に好ましい。
これらの式１から５、および他の式では、塩基の次に下付きがなく、デフォルトの値は「１」である。例えば、式ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎでは、「Ｕ」の後に下付きがなく、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎはｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ１）ｎと同じであり、式はｒ（Ｃ１２Ｕ１）ｎとして示される鎖に、ｒＵ塩基ごとに１２ｒＣ塩基があることを意味することが理解される。したがって、ｘは、ｔｄｓＲＮＡの１つの鎖の塩基の比でもある。ｔｄｓＲＮＡ鎖の長さは、小文字の「ｎ」として示される（例えば、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎ）。下付きのｎは、各個々の一本鎖核酸の長さでもある。ｔｄｓＲＮＡは二本鎖であるため、ｎは、二本鎖核酸の長さ－すなわち、ｔｄｓＲＮＡの長さでもある。例えば、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎは、特に、ｎの長さの各鎖を有する二本鎖ＲＮＡを示す。
別の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、以下の式：
ｒＡｎ・ｒＵｎ（ポリＡ・ポリＵとも呼ばれる）（式３)
ｒＩｎ・ｒＣｎ （式４)
を有し得る。
別の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、堅牢ｄｓＲＮＡ（式５）であり得る。
一実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、式１、式２、式３、式４、および式５からなる群から選択される少なくとも１つである。別の実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、式１および式２のみを含む。好ましい一実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、式１のみを含む。別の実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、式１および式５（堅牢ｄｓＲＮＡ）のみを含む。
別の態様では、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％のｔｄｓＲＮＡは、４００，０００ダルトンから２，５００，０００ダルトンの分子量を有し得る。用語、パーセント（％）が使用される場合、パーセントは、重量パーセントまたはモルパーセントであり得る。
別の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、第１のｓｓＲＮＡおよび第２のｓｓＲＮＡを含み、これらの第１のｓｓＲＮＡまたは第２のｓｓＲＮＡのそれぞれは、１つまたはそれ以上の鎖切断を含有し得る。
別の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、ＲＮＡの塩基の約９０％より多く、９５％より多く、９８％より多く、９９％より多く、または１００％が二本鎖構造内である特性を有する。
任意の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、例えば、ｔｄｓＲＮＡ、および薬学的に許容される賦形剤（担体）を含む治療組成物中であり得る。
ｔｄｓＲＮＡの一実施形態は、式ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎのｔｄｓＲＮＡである、リンタトリモドに関し、それは商標ＡＭＰＬＩＧＥＮ（登録商標）によっても示される。
好ましい実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、一般式ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎであり、米国特許第４０２４２２２号および同第４１３０６４１号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるか、または本開示に従って合成される。
ｔｄｓＲＮＡがｒＡｎ・ｒＵｎである場合、ｔｄｓＲＮＡはマッチされ得る（すなわち、ミスマッチ形態ではない）。
ｔｄｓＲＮＡ（例えば、リンタトリモド）は、広範な臨床および前臨床試験が行われている。それは、１００，０００を超える用量が投与される１２００を超える患者が登録されている臨床試験において良好な耐容性を示し、薬物関連死はなかった。２つのプラセボ対照、無作為化試験は、プラセボと比較して深刻な有害事象の増加を示さない。好ましい安全性プロファイルは、ｔｄｓＲＮＡの投与の腹腔内、静脈内、および鼻腔内経路で見られた。
３．１ ｔｄｓＲＮＡの長さ
ｔｄｓＲＮＡの長さは、ｔｄｓＲＮＡの１つの鎖の塩基またはｔｄｓＲＮＡの両鎖の塩基対によって表され得る。一部の実施形態では、塩基（例えばＵおよびＩ）の全てが塩基対構造にあるわけではないことが理解される。例えば、ｒＵ塩基ならびにｒＣ塩基はイノシンと対合しない。
ｔｄｓＲＮＡの長さは、（１）塩基または塩基対、（２）二本鎖ｔｄｓＲＮＡの重量である分子量（例えば、ダルトン）または（３）二本鎖ＲＮＡのらせんによって測定され得る。これらの測定は、容易に相互交換され得る。例えば、一般に、塩基対あたり約６２９ダルトンであると考えられる。
「ｎ」は、二本鎖核酸の塩基対（単数または複数）（単数であるか複数であるかに関わらずｂｐと略される）の単位の長さを表す。「ｎ」は、一本鎖ＲＮＡの塩基も表し得る。「ｂｐ」は単数または複数を表すため、塩基対の別の表現である「ｂｐｓ」と同じである。
ｔｄｓＲＮＡは、その長さ「ｎ」の以下の値（一本鎖については塩基または二本鎖については塩基対）：４～５０００、１０～５０、１０～５００、１０～４００００、４０～４００００、４０～５００００、４０～５００、５０～５００、１００～５００、３８０～４５０、４００～４３０、４００～８００、またはこれらの組合せを有し得る。分子量で表すと、ｔｄｓＲＮＡは、以下の値：３０ｋＤａ～３００ｋＤａ、２５０ｋＤａ～３２０ｋＤａ、２７０ｋＤａ～３００ｋＤａ、またはこれらの組合せを有し得る。らせんの回転数で表すと、ｔｄｓＲＮＡは、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数４．７～４６．７、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数３０～３８、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数３２～３６、またはこれらの組合せを有し得る。
長さは、二重鎖ＲＮＡの平均塩基対、平均分子量、または平均らせんの回転数であってもよく、整数または小数値をとり得る。
３．２ 堅牢ｄｓＲＮＡ（ｔｄｓＲＮＡの形態）
堅牢ｄｓＲＮＡは、ハイブリダイズしたポリ（リボイノシン酸）およびポリ（リボシトシン酸）鎖（すなわち、ｒＩｎ・ｒＣｎ鎖）を分離することができる条件下での変性に耐性があるｔｄｓＲＮＡである。堅牢ｄｓＲＮＡおよびそのような分子を調製する例示的な方法のさらなる説明については、米国特許第８７２２８７４号および同第９３１５５３８号（参照により組み込まれる）を参照されたい。
一態様では、堅牢ｄｓＲＮＡは、ハイブリダイズしたポリ（リボイノシン酸）およびポリ（リボシトシン酸）鎖を分離することができる条件下での変性に耐性がある単離された二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）であり、前記単離されたｄｓＲＮＡの単一鎖のみが、逆鎖と塩基対合しない１つまたはそれ以上のウラシルまたはグアニン塩基を含み、前記単一鎖が、ポリ（リボシトシン３０－３５ウラシル酸）から構成される。さらに、単一鎖は、ポリ（リボイノシン酸）から構成される逆鎖と部分的にハイブリダイズされ得る。別の態様では、堅牢ｄｓＲＮＡは、ハイブリダイズしたポリ（リボイノシン酸）およびポリ（リボシトシン酸）鎖を分離することができる条件下での変性に耐性がある単離された二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）であり得る。
別の態様では、堅牢ｄｓＲＮＡは、以下：ｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ４－２９Ｕ）ｎ、ｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎ、ｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ、ｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ３０Ｕ）ｎ、またはｒ（Ｉｎ）・ｒ（Ｃ３０－３５Ｕ）ｎの少なくとも１つを有する。別の態様では、堅牢ｄｓＲＮＡは、４ｂｐｓ～５０００ｂｐｓ、４０ｂｐｓ～５００ｂｐｓ、５０ｂｐｓ～５００ｂｐｓ、３８０ｂｐｓ～４５０ｂｐｓ、４００ｂｐｓ～４３０ｂｐｓ、３０ｋＤａ～３００ｋＤａ分子量、２５０ｋＤａ～３２０ｋＤａ分子量、２７０ｋＤａ～３００ｋＤａ分子量、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数４．７～４６．７、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数３０～３８、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数３２～３６、およびこれらの組合せのサイズを有し得る。
別の態様では、堅牢ｄｓＲＮＡは、ｔｄｓＲＮＡ調製物の５分ＨＰＬＣピークを単離することによって産生される。
３．３ 堅牢ｄｓＲＮＡ調製
一実施形態では、堅牢ｄｓＲＮＡを作成するための出発材料は、本開示の条件を使用してインビトロで調製したｄｓＲＮＡであり得る。例えば、米国特許第４０２４２２２号、同第４１３０６４１号、および同第５２５８３６９号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載の特別に形成されたｄｓＲＮＡは、一般に、堅牢ｄｓＲＮＡの選択後の出発材料として好適である。本開示に記載されるｔｄｓＲＮＡ（またはｔｄｓＲＮＡの調製物）も、出発材料として有用である。
出発材料を獲得後、堅牢ｄｓＲＮＡは、少なくとも、集団のうちのほとんどのｄｓＲＮＡ（１０重量％またはモル％より多い、２０重量％またはモル％より多い、３０重量％またはモル％より多い、４０重量％またはモル％より多い、５０重量％またはモル％より多い、６０重量％またはモル％より多い、７０重量％またはモル％より多い、８０重量％またはモル％より多い、９０重量％またはモル％より多い、９５重量％またはモル％より多い、または９８重量％またはモル％より多い）を変性する条件に、ｄｓＲＮＡの集団の部分的にハイブリダイズした鎖を供し、次いで、部分的にハイブリダイズしたままのｄｓＲＮＡを負または正（または両方）の選択に供することによって単離され得る。ｄｓＲＮＡの少なくとも部分的にハイブリダイズした鎖をアンフォールドする変性条件は、緩衝塩、ｐＨ、溶媒、温度、またはこれらの任意の組合せの適切な選択を含み得る。条件は、リボ核酸の二重鎖のアンフォールディングまたは融解の観察によって経験的に決定され得る。堅牢ｄｓＲＮＡの収率は、リボ核酸のより長い鎖の部分加水分解、次いで適切なサイズおよび変性に対する耐性の（部分的に）ハイブリダイズした鎖の選択によって改善され得る。
ｔｄｓＲＮＡとして機能する、堅牢ｄｓＲＮＡの純度は、したがって、合成後の集団中の全ＲＮＡと比較して約０．１～１０モル％より少ない（例えば、堅牢ｄｓＲＮＡは、少なくとも０．１モル％または０．１重量パーセントで存在するが、約１０モル％または１０重量パーセントより少ない）から、高純度に増加し得る。高純度は、２０重量％またはモル％より高い、３０重量％またはモル％より高い、４０重量％またはモル％より高い、５０重量％またはモル％より高い、６０重量％またはモル％より高い、７０重量％またはモル％より高い、８０重量％またはモル％より高い、９０重量％またはモル％より高い、９８重量％またはモル％より高い、または８０～９８重量％またはモル％の間であり得る。全ての重量％またはモル％は、同じ組成物中に存在する全ＲＮＡと比較される。
堅牢ｄｓＲＮＡを単離する別の方法は、クロマトグラフィーを用いる。解析、または分取高速液体クロマトグラフィー下で、堅牢ｄｓＲＮＡは調製物（例えば、上記の出発材料）から単離され、約４．５～６．５分、好ましくは４．５分と６分の間、および最も好ましくは５分のＨＰＬＣピークを有する、実質的に精製され、薬学的に活性な分子としてポリ（Ｉ）：ポリ（Ｃ１２Ｕ）ｎ（例えば、ポリ（Ｉ）：ポリ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ）を産生し得る。
堅牢ｄｓＲＮＡおよび堅牢ｄｓＲＮＡを作成する方法は、米国特許第８７２２８７４号および同第９３１５５３８号（参照により組み込まれる）に記載される。
３．４ 安定化ポリマー
記載される任意の実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、ポリリジン、ポリリジン＋カルボキシメチルセルロース（リジンカルボキシメチルセルロース）、ポリアルギニン、ポリアルギニン＋カルボキシメチルセルロース、またはこれらの組合せなどの安定化ポリマーと複合体形成され得る。これらの安定化ポリマーのいくつかは、例えば米国特許第７４３９３４９号に記載される。
３．５ 修飾骨格
ｔｄｓＲＮＡは、核酸の骨格に１つまたはそれ以上の変更を含み得る。例えば、形成されたｔｄｓＲＮＡは、ポリ（リボイノシン酸）ｒ（Ｉｎ）のリボシル骨格を修飾することにより、例えば、２’－Ｏ－メチルリボシル残基を含むことにより作成され得る。特別に形成されたｄｓＲＮＡはまた、分子の末端で修飾され、ヒンジ（複数可）を付加され、塩基対の翻訳スリップを防ぎ、それにより、溶媒またはヒト生体液中に存在する水性環境に特定の生物活性を与え得る。
４．追加薬剤
本開示のｔｄｓＲＮＡは、本明細書に記載される化合物中または多くの追加薬剤との組合せ中であり得る。
４．１ インターフェロン
組成物の１つの適宜成分は、インターフェロンである。本明細書で使用される場合、用語「インターフェロン」（「ＩＦＮ」と略される）は、合わせて１型および２型インターフェロンを指し、それらの欠失、挿入、または置換変異体、それらの生物学的活性断片、およびそれらの対立形質を含む。本明細書で使用される場合、インターフェロンは、合わせて１型および２型インターフェロンを指す。１型インターフェロンは、インターフェロンアルファ、ベータ、オメガおよびそれらの亜型を含む。ヒトインターフェロンアルファは、少なくとも１４個の同定された亜型を有するが、インターフェロンベータは３個の同定された亜型を有する。
インターフェロンは、インターフェロン、インターフェロン混合物、Ａｌｆｅｒｏｎ、アルファ－インターフェロン種、組換えまたは天然インターフェロンアルファ、組換えまたは天然インターフェロンアルファ２ａ、組換えまたは天然インターフェロンベータ、組換えまたは天然インターフェロンベータ１ｂ、組換えおよび天然インターフェロンガンマからなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
インターフェロンは、アルファ－インターフェロンでもよい。１つの好ましいアルファインターフェロンは、ＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）であり、米国で利用可能な唯一の認可された天然、複数種のα－インターフェロンである。逆相ＨＰＬＣ研究は、ＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）が、少なくとも７種のアルファインターフェロン（α２、α４、α８、α１０、α１６およびα１７）の一貫した混合物であることを示す。この自然発生源のインターフェロンは、遺伝子改変のインターフェロンとそれを区別するユニークな抗ウイルス特性を有する。高純度のＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）および７個のインターフェロン種の天然混合物としてのその利点は、種８ｂのようなその一部は、他の種、例えば、ＩＮＴＲＯＮ Ａ（登録商標）の唯一の成分である種２ｂよりも優れた抗ウイルス活性を有する。例えば、慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）およびＨＩＶ感染の処置における、優れた抗ウイルス活性、および他の利用可能な組換えインターフェロン、例えばＩＮＴＲＯＮ Ａ（登録商標）およびＲＯＦＥＲＯＮ Ａ（登録商標）と比較したＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）の耐容性が報告されている。
インターフェロンは、ヒト白血球細胞によって産生される少なくとも７種のアルファ－インターフェロンの混合物として精製されたインターフェロン種であり得る。７種は、例えば、インターフェロンアルファ２；インターフェロンアルファ４；インターフェロンアルファ７；インターフェロンアルファ８；インターフェロンアルファ１０；インターフェロンアルファ１６；およびインターフェロンアルファ１７であり得る。
成分の推奨される投与量は、患者の臨床状態および同様の状態を処置する医師の経験によるであろう。一般的なガイドラインとして、全身感染のために利用されるＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）の投与量は、週に３回、３ＩＵ／ポンド～１千万ＩＵ／ポンド（例えば、皮下注射）である。これまでの経験は、患者の体重の３ＩＵ／１ｂ．を超える投与量である。経口α－インターフェロン（ＡＬＦＥＲＯＮ ＬＤＯ（登録商標））は、５００～１００００ＩＵ／日の範囲の溶液として投与され、１５０ポンドのヒトに基づき算出され、これは１日あたり３．３～６６．０ＩＵ／１ｂ．である。好ましい一実施形態では、有益な結果は、４５０ＩＵを超えるα－インターフェロンの投与レベルで得られ、それは３ＩＵ／ポンド体重よりも大きかった。しかしながら、ヘルスケア提供者は、所望の抗ウイルス効果を達成する最適な用量および低用量の経口α－インターフェロン（または任意のインターフェロン）のスケジュールを決めることができる。
４．２ 担体または媒体
好適な薬剤は、鼻腔内粘膜デリバリーのための好適な担体または媒体を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「担体」は、薬学的に許容される固体または液体充填剤、希釈剤またはカプセル化材料を指す。一態様では、担体は、対象の気道および肺へのデリバリーを含む鼻腔内粘膜デリバリーのための好適な担体または媒体である。
水含有液体担体は、薬学的に許容される添加剤、例えば、酸性化剤、酸中和剤、抗菌防腐剤、抗酸化剤、緩衝剤、キレート剤、錯化剤、可溶化剤、保水剤、溶媒、懸濁および／または粘度増強剤、等張化剤、湿潤剤または他の生体適合性材料を含有し得る。上記のカテゴリーに列挙した成分の表は、U.S. Pharmacopeia National Formulary, 1857-1859, (1990)に見出すことができる。１つの一般に使用される薬学的に許容される担体は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。
４．３ 吸収促進剤
好適な薬剤は、任意の好適な吸収促進剤を含み得る。好適な吸収促進剤は、限定はされないが、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド、エタノール、プロピレングリコール、および２－ピロリドンを含む、親水性小分子から選択され得る。あるいは、長鎖両親媒性分子、例えば、デアシルメチルスルホキシド（ｄｅａｃｙｌ ｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）、アゾン（１－ドデシルアザシクロヘプタン－２－オンまたはラウロカプラム）、ラウリル硫酸ナトリウム、オレイン酸、および胆汁酸塩は、ｔｄｓＲＮＡの粘膜浸透を増強するために用いられ得る。さらなる態様では、界面活性剤（例えば、ポリソルベート）が、補助化合物、プロセシング剤、または製剤添加物として用いられ、ｔｄｓＲＮＡの鼻腔内デリバリーを増強する。
４．４ デリバリー増強剤
本明細書で使用される場合、用語「デリバリー増強剤」は、ｔｄｓＲＮＡまたは他の生物学的に活性な化合物（複数可）の、放出または可溶性（例えば、製剤デリバリー媒体から）、拡散速度、浸透能およびタイミング、取り込み、滞留時間、安定性、有効半減期、ピークまたは持続濃度レベル、クリアランス、および他の所望の鼻腔内デリバリー特性（例えば、デリバリーの部位、または血流などの活性の選択された標的部位で測定される）を増強する任意の薬剤を指す。
一態様では、鼻腔内デリバリーの増強は、したがって、例えばｔｄｓＲＮＡの拡散、輸送、持続性または安定性の増加、膜流動性の増加、細胞内または傍細胞透過を制御するカルシウムおよび他のイオンの利用能または作用の調節、粘膜成分（例えば、脂質）の可溶化、粘膜組織における非タンパク質およびタンパク質スルフヒドリルレベルの変化、粘膜表面を通過する水分流動の増加、上皮接合部の生理学の調節、粘膜上皮を覆う粘液の粘度の減少、粘膜繊毛のクリアランス速度の低下、および他のメカニズムによる、様々なメカニズムのいずれかによって生じ得る。
４．５ 粘液溶解または粘液除去剤
別の実施形態では、本製剤は、他の好適な薬剤、例えば粘液溶解および粘液除去剤も含み得る。用語「粘液溶解または粘液除去剤」は、本明細書で使用される場合、鼻腔内粘膜表面からの粘液を分解、薄めるかまたは除去し、鼻腔内投与されたｔｄｓＲＮＡを含む生物学的薬剤の吸収を促進するために寄与し得る任意の薬剤を指す。それらの作用のメカニズムに基づき、粘液溶解および粘液除去剤は、以下の群に分類され得ることが多い：ムチン糖タンパク質のタンパク質コアを切断するプロテアーゼ（例えば、プロナーゼ、パパイン）、ムコタンパク質ジスルフィド結合を分割するスルフヒドリル化合物、および粘液内の非共有結合を破壊する界面活性剤（例えば、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、Ｔｗｅｅｎ２０）。本文脈でのさらなる化合物としては、限定はされないが、胆汁酸塩および界面活性剤、例えば、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、およびリゾホスファチジルコリンが挙げられる。粘液粘度または付着を減らし、本開示の方法による鼻腔内デリバリーを増強する他の有効な薬剤は、例えば、単鎖脂肪酸、およびキレートによって作用する粘液溶解剤、例えばＮ－アシルコラーゲンペプチド、胆汁酸、およびサポニン（一部、粘膜層構造の維持において重要な役割を果たす、Ｃａ２＋および／またはＭｇ２＋をキレートすることによる後の機能）を含む。
４．６ 繊毛抑制剤
別の実施形態では、本製剤は、繊毛抑制剤を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「繊毛抑制剤」は、粘膜に沿って粘液の層を動かし、吸入粒子および微生物を除去することができる任意の薬剤を指す。本開示のこれらの態様内での使用のため、それらの活性が特異的または間接的のいずれかの前述の繊毛抑制因子が、適切な量（デリバリーの濃度、持続期間、および様式による）の繊毛抑制剤としての使用が成功するための全候補であり、それらは、投与の粘膜部位における粘膜繊毛クリアランスの一時的（すなわち可逆的）な減少または中断を生じ、許容できない有害事象なく、ｔｄｓＲＮＡおよび他の生物学的に活性な薬剤のデリバリーを増強する。
より詳細な態様内では、特定の繊毛抑制因子は、本明細書に開示されるｔｄｓＲＮＡ、および／または他の生物学的に活性な薬剤との組合せ製剤または協調投与プロトコルに用いられ得る。文献中で単離および特徴付けられた様々な細菌繊毛抑制因子は、本開示のこれらの実施形態内で用いられ得る。緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）由来の繊毛抑制因子は、フェナジン誘導体、ｐｙｏ化合物（２－アルキル－４－ヒドロキシキノリン）、およびラムノリピッド（ヘモリジンとしても公知）を含む。
４．７ 浸透または透過促進剤
別の実施形態では、本開示の鼻腔内粘膜治療および予防製剤は、粘膜バリアを通るｔｄｓＲＮＡの吸収、拡散、または浸透を促進する、任意の好適な浸透促進剤を補足され得る。浸透促進剤は、薬学的に許容される任意の促進剤であり得る。したがって、別の態様は、ｔｄｓＲＮＡならびに、サリチル酸ナトリウムおよびサリチル酸誘導体（アセチルサリチル酸、サリチル酸コリン、サリチルアミド等）、アミノ酸およびその塩（例えば、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、プロリン、ヒドロキシプロリン等のようなモノアミノカルボン酸、セリンのようなヒドロキシアミノ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等のような酸性アミノ酸、およびリジン等のような塩基性アミノ酸－それらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を含む）、およびＮ－アセチルアミノ酸（Ｎ－アセチルアラニン、Ｎ－アセチルフェニルアラニン、Ｎ－アセチルセリン、Ｎ－アセチルグリシン、Ｎ－アセチルリジン、Ｎ－アセチルグルタミン酸、Ｎ－アセチルプロリン、Ｎ－アセチルヒドロキシプロリン等）ならびにそれらの塩（アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩）から選択される１つまたはそれ以上の浸透促進剤を含む組成物に関する。
本開示の方法および組成物内の浸透促進剤として提供されるのは、一般に、乳化剤（例えば、オレイルリン酸ナトリウム、ラウリルリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルエステル等）、カプロン酸、乳酸、リンゴ酸およびクエン酸、ならびにそれらのアルカリ金属塩、ピロリドンカルボン酸、アルキルピロリドンカルボン酸エステル、Ｎ－アルキルピロリドン、プロリンアシルエステル等として使用される物質である。
別の実施形態では、本製剤は、他の好適な薬剤、例えば一酸化窒素供与剤も含み得る。本明細書で使用される場合、用語「一酸化窒素供与剤」は、一酸化窒素を放出することができる任意の好適な薬剤を指す。一酸化窒素の放出は、血管拡張作用を有し得る。一酸化窒素（ＮＯ）供与剤は、本明細書に開示のｔｄｓＲＮＡ、および他の生物学的に活性な薬剤の粘膜デリバリーを増強する膜浸透増強剤として選択され得る。様々なＮＯ供与剤は、当技術分野で公知であり、本開示の方法および製剤内で有効濃度で有用である。例示的なＮＯ供与剤としては、限定はされないが、ニトログリセリン、ニトロプルシド、ＮＯＣ５［３－（２－ヒドロキシ－１－（メチル－エチル）－２－ニトロソヒドラジノ）－１－プロパンアミン］、ＮＯＣ１２［Ｎ－エチル－２－（１－エチル－ヒドロキシ－２－ニトロソヒドラジノ）－エタンアミン］、ＳＮＡＰ［Ｓ－ニトロソ－Ｎ－アセチル－ＤＬ－ペニシラミン］、ＮＯＲＩおよびＮＯＲ４が挙げられる。本開示の方法および組成物内では、有効量の選択されたＮＯ供与体は、粘膜上皮へとまたは粘膜上皮を通過して、本明細書に開示のｔｄｓＲＮＡ、および／または他の生物学的に活性な薬剤と協調的に投与されるかまたは組み合わせて製剤化され得る。
本開示で有用な他の透過増強剤の非限定的な例は、様々な薬局方収載の食品医薬品局認定（ＧＲＡＳ）である単一長鎖エステルである。これらは、単一の脂肪族、非飽和または飽和（好ましくは完全に飽和されている）エステルを含むことができ、中程度の長さの鎖まで含有する。そのようなエステルの非限定的な例としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸オクチル等が挙げられる。増強剤は、医薬組成物中での使用に好適な型である。当業者は、粘膜と適合しないか、または刺激する物質を避けるべきであることも理解するであろう。
経鼻投与のため、増強剤は、鼻粘膜を通して送達される薬学的に活性な薬剤の浸透を増強するのに有効な濃度で、組成物中に存在する。使用する増強剤の量の決定に、様々な検討を考慮するべきである。そのような検討としては、例えば、達成された流動の量（膜を通過する通過速度）、ならびに製剤中の成分の安定性および適合性が挙げられる。増強剤は、一般に、組成物の約０．００１～約４０（ｗ／ｗ）％の量で使用される。特定の範囲は、約０．０１％～約３０（ｗ／ｗ）、約０．１～約２５％（ｗ／ｗ）、約１％～約１５％（ｗ／ｗ）、約５～１０％（ｗ／ｗ）を含む。あるいは、増強剤の量は、約１．０～約３％（ｗ／ｗ）または約１０～約２０％（ｗ／ｗ）の範囲であり得る。
水不溶性増強剤が通常固体物質であるエマルジョンの形成において、増強剤は好適な溶媒に溶解される。増強剤が、通常、水不混和性である液体物質である場合、増強剤の好適な溶媒は、適宜、使用されても使用されなくてもよい。ある特定の実施形態では、増強剤は、好適な溶媒（複数可）、例えばアルコール、油、グリセロール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ヘキサン、アセトン、フレオン、水、他の極性もしくは非極性溶媒、または混合物中に溶解、分散、懸濁、または可溶化され、次いで医薬単体と混合された有効量の所望の抗原を含む組成物に添加される。一部の場合では、増強剤が液体形態である場合、増強剤の「ニート」溶液は、抗原、医薬担体、および増強剤混合物に直接組み込まれ、増強剤の濃度は、約０．１％～約５０％（ｗ／ｗ）の範囲である。
任意の上記の透過増強剤は、特に、経鼻投与において有用である。
４．８ 血管拡張剤または血管収縮剤
別の実施形態では、本製剤は、他の好適な薬剤、例えば血管拡張剤も含み得る。本明細書で使用される場合、用語「血管拡張剤」は、血管作用性である任意の薬剤を指す。血管拡張剤は、本開示内で機能し、粘膜下血管系の構造および生理機能を調節することができ、ｔｄｓＲＮＡ、および他の生物学的に活性な薬剤の、粘膜上皮および／または特定の標的組織もしくは区画（例えば、全身循環）へのまたはそれらを通過する輸送速度を増加させる。本開示内の使用のための血管拡張剤は、典型的には、細胞質カルシウムの減少、一酸化窒素（ＮＯ）の増加によるか、またはミオシン軽鎖キナーゼの阻害により、粘膜下血管弛緩を引き起こす。それらは、一般に、９つのクラス：カルシウムアンタゴニスト、カリウムチャネルオープナー、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシン－ＩＩ受容体アンタゴニスト、アルファ－アドレナリンおよびイミダゾール受容体アンタゴニスト、ベータ－１－アドレナリンアゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、エイコサノイドおよびＮＯ供与体に分けられる。本開示のある特定の方法および組成物内では、選択された血管拡張剤は、有効量のｔｄｓＲＮＡおよび他の生物学的に活性な薬剤（複数可）と協調的に投与される（例えば、全身または鼻腔内、同時にまたは組合せに有効な時間的結合で）かまたは組み合わせて製剤化され、活性剤（複数可）の粘膜吸収を増強し、対象における標的組織または区画へと到達させ得る。
別の実施形態では、本製剤は、他の好適な薬剤、例えば血管収縮剤も含み得る。本明細書で使用される場合、用語「血管収縮剤」は、血管収縮を引き起こし得る任意の物質を指す。血管収縮剤（ｖａｓｏｃｏｎｓｔｒｉｃｔｏｒ ａｇｅｎｔｓ）は、血管収縮剤（ｖａｓｏｃｏｎｓｔｒｉｃｔｏｒｓ）、血管収縮剤（ｖａｓｏｐｒｅｓｓｏｒｓ）、昇圧剤（ｖａｓｏｐｒｅｓｓｏｒｓ）、または単純に「昇圧剤（ｐｒｅｓｓｏｒｓ）」とも呼ばれ得る。血管収縮剤は、通常、体血圧の上昇を引き起こし得るが、それらが特定の組織に投与される場合、局所的な血流が減少し得る。血管収縮の程度は、血管収縮剤の物質により、わずかまたは重度であり得る。多くの血管収縮剤は、瞳孔拡張も引き起こし得る。血管収縮剤は、任意の好適な物質、例えば、抗ヒスタミン剤、うっ血除去薬およびＡＤＨＤを処置するために使用される刺激薬を含み得る。好適な血管収縮剤は、Ｄｈｕｒｉａ，Ｈａｎｓｏｎら（Dhuria, Hanson, et al., 2009）によって以前に記載されている。
４．９ ＲＮＡｓｅ阻害剤および酵素阻害剤
一部の実施形態、例えば、経鼻ワクチンでは、本開示は、ｔｄｓＲＮＡに加えて、タンパク質、ペプチドまたは別の核酸のデリバリーを包含する。したがって、本開示の組成物は、酵素阻害剤を含有し得る。核酸、ペプチドおよびタンパク質生化学の研究者に周知であるように、これらのバイオポリマーは、微量で存在する場合でもバイオポリマーを急速に分解する酵素、例えばＲＮａｓｅおよびタンパク質分解酵素の存在に非常に感受性である傾向がある。一般的に用いられ、本開示に組み込まれ得る典型的な酵素阻害剤は、例えば、ロイペプチン、アプロチニン等であり得る。酵素阻害剤は、ヌクレアーゼ阻害剤、例えばＤＮａｓｅ阻害剤およびＲＮａｓｅ阻害剤も含む。ＲＮａｓｅ阻害剤は、ＲＮＡの酵素的な操作の予防策として一般に使用され、ＲＮａｓｅを阻害および調節する。これらは、多くの供給元、例えばＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（ＳＵＰＥＲａｓｅ、Ｉｎ ＲＮａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ、ＲＮａｓｅＯＵＴ、ＲＮＡｓｅｃｕｒｅ、およびＲＮａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）などから市販されている。
４．１０ 選択的輸送増強剤
別の実施形態では、本製剤は、他の好適な薬剤、例えば、選択的輸送増強剤も含み得る。本明細書で使用される場合、用語「選択的輸送増強剤」は、ｔｄｓＲＮＡおよび／またはワクチンを含む１つもしくはそれ以上の生物学的に活性な薬剤の輸送を促進する任意の薬剤を指す。本開示の組成物およびデリバリー方法は、１つまたはそれ以上の生物学的に活性な薬剤の輸送を促進する選択的輸送増強剤を組み込んでもよい。これらの輸送増強剤は、本明細書に開示のｔｄｓＲＮＡとの組合せ製剤または協調投与プロトコルにおいて用いられ、１つまたはそれ以上のさらなる生物学的に活性な薬剤（複数可）のデリバリーを協調的に増強し得る。あるいは、輸送増強剤は、さらなる生物学的に活性な薬剤のデリバリーを増強してもしなくても、ｔｄｓＲＮＡの粘膜デリバリーを直接増強する組合せ製剤または協調投与プロトコルで用いられ得る。
本開示のこの態様内で使用するための例示的な選択的輸送増強剤は、グリコシド、糖含有分子、および結合剤、例えばレクチン結合剤、および安定剤を含み得る。例えば、受容体媒介相互作用によって細胞表面の糖部分に結合する、様々な植物および細菌レクチンを含む、特定の「生体付着性」リガンドは、本開示内の生物学的に活性な薬剤の粘膜、例えば経鼻デリバリーを増強するための担体またはコンジュゲート輸送媒介因子として用いられ得る。本開示内での使用のためのある特定の生体付着性リガンドは、特別な細胞輸送プロセス（エンドサイトーシスまたはトランスサイトーシス）による付着性リガンドの選択的取り込みを誘発する、上皮標的細胞への生体シグナルの伝達を媒介するであろう。これらの輸送媒介因子は、したがって、「担体システム」として用いられ、１つもしくはそれ以上のｔｄｓＲＮＡまたは機能的に等価な断片タンパク質、類似体、模倣物、および他の生物学的に活性な薬剤（複数可）を粘膜上皮におよび／または粘膜上皮を通る選択的取り込みを刺激するかまたは指示する。これらのおよび他の選択的輸送増強剤は、本開示内の高分子生物製剤（特に、ペプチド、タンパク質、オリゴヌクレオチドおよびポリヌクレオチドベクター）の粘膜デリバリーを著しく増強する。
本開示の協調投与および処理方法および組合せ製剤内で有用である、さらなる鼻腔内粘膜デリバリー増強剤は、限定はされないが、混合ミセル、エナミン、一酸化窒素供与体（例えば、Ｓ－ニトロソ－Ｎ－アセチル－ＤＬ－ペニシラミン、ＮＯＲ１、ＮＯＲ４－－好ましくは、一酸化窒素捕捉剤、例えばカルボキシ－ＰＩＴＯまたはジクロフェナクナトリウムと共投与される）、サリチル酸ナトリウム、アセト酢酸のグリセロールエステル（例えば、グリセリル－１，３－ジアセト酢酸または１，２－イソプロピリデングリセリン－３－アセト酢酸）、および鼻腔内粘膜デリバリーに生理学的に適合性である、他の放出－拡散または上皮内もしくは経上皮浸透促進剤も挙げられ得る。他の吸収促進剤は、ｔｄｓＲＮＡの粘膜デリバリー、安定性、活性または経上皮浸透を増強する様々な担体、塩基および賦形剤から選択され得る。これらは、特に、シクロデキストリンおよびベータ－シクロデキストリン誘導体（例えば、２－ヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリンおよびヘプタキス（２，６－ジ－Ｏ－メチル－ベータ－シクロデキストリン）を含む。これらの化合物は、１つまたはそれ以上の活性成分とコンジュゲートされてもよく、さらに油性基剤中で製剤化されてもよく、鼻腔内粘膜製剤の生物学的利用能を増強する。鼻腔内粘膜デリバリーに適当なさらなる吸収増強剤は、モノおよびジグリセリド（例えば、カプリン酸ナトリウム－－ココナツ油の抽出物、ＣＡＰＭＵＬ）、およびトリグリセリド（例えば、アミロデキストリン、Ｅｓｔａｒａｍ ２９９、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１０）を含む、中鎖脂肪酸も含み得る。
４．１１ 安定化デリバリー媒体、担体、支持体または複合体形成種
別の実施形態では、本製剤は、他の好適な薬剤、例えば安定化デリバリー媒体、担体、支持体または複合体形成種も含み得る。本開示の協調投与方法および組合せ製剤は、有効な脂質または脂肪酸ベース担体、処理剤、またはデリバリー媒体を組込んでもよく、ｔｄｓＲＮＡまたは機能的に等価な断片タンパク質、類似体および模倣物、ならびに他の生物学的に活性な薬剤の粘膜デリバリーのための改善された製剤を提供し得る。例えば、粘膜デリバリーのための製剤および方法は、リポソーム、混合ミセル担体、またはエマルジョンと混合されたかまたはカプセル化されたか、またはそれらと協調して投与された、１つまたはそれ以上のこれらの活性剤、例えば、ペプチドまたはタンパク質を含み、粘膜デリバリーの際に、化学的および物理的な安定性を増強し、生物学的に活性な薬剤の半減期を増加し得る（例えば、タンパク質分解、化学改変および／または変性への感受性を低減させることによる）。
本開示のある特定の態様内では、生物学的に活性な薬剤の特別なデリバリーシステムは、リポソームまたはミセルとして公知の同じ脂質小胞を含み得る。これらは、典型的には、天然、生分解性、非毒性、非免疫原性脂質分子から作成され、ペプチドおよびタンパク質を含む薬物分子を、それらの膜内に、または膜上に、効率的に封入または結合し得る。核酸デリバリーシステムとしてのリポソームの誘引効果は、カプセル化されたｔｄｓＲＮＡが、小胞内のそれらの好ましい水性環境に留まり得るが、リポソーム膜が、ヌクレアーゼおよび他の不安定化因子に対してそれらを保護することによって増加される。
本開示内での使用のためのさらなるデリバリー媒体担体、支持体または複合体形成種は、長鎖および中鎖脂肪酸、ならびに脂肪酸を有する界面活性剤混合ミセルを含み得る。最も天然に存在するエステル形態の脂質は、粘膜表面を通過するそれら自身の輸送に関して、重要な意味を有する。付着した極性基を有する遊離の脂肪酸およびそれらのモノグリセリドは、混合ミセルの形態で、浸透増強剤として腸管バリアに作用することが実証された。遊離の脂肪酸（１２～２０炭素原子に変動する鎖長を有するカルボン酸）およびそれらの極性の誘導体の機能を改変するバリアのこの発見は、粘膜吸収増強剤としてのこれらの薬剤の適用への徹底的な研究を刺激した。
本開示の方法内での使用のため、長鎖脂肪酸、特に、膜融合脂質（不飽和脂肪酸およびモノグリセリド、例えばオレイン酸、リノレン酸、リノレン酸、モノオレイン等）は、本明細書に開示のｔｄｓＲＮＡ、および他の生物学的に活性な薬剤の粘膜デリバリーを増強する、有用な担体を提供する。中鎖脂肪酸（Ｃ６～Ｃ１２）およびモノグリセリドは、腸管薬物吸収における活性を増強し、本開示の粘膜デリバリー製剤および方法内での使用のために適応され得ることも示された。さらに、培地のナトリウム塩および長鎖脂肪酸は、生物学的に活性な薬剤の粘膜デリバリーのための有効なデリバリー媒体および吸収増強剤である。したがって、脂肪酸は、ナトリウム塩の可溶性形態に、または非毒性界面活性剤、例えば、ポリオキシエチル化水添ヒマシ油、タウロコール酸ナトリウム等の添加によって用いられ得る。本開示内で有用である、他の脂肪酸および混合ミセル調製物としては、限定はされないが、カプリル酸Ｎａ（Ｃ８）、カプリル酸Ｎａ（Ｃ１０）、ラウリル酸Ｎａ（Ｃ１２）またはオレイン酸Ｎａ（Ｃ１８）が挙げられ、胆汁酸塩、例えばグリココール酸およびタウロコール酸と組み合わされてもよい。
５．投与（デリバリー）
対象への投与または対象に投与することは、全身投与；静脈内投与；皮内投与；皮下投与；筋肉内投与；鼻腔内投与（肺気道投与）；鼻腔内投与および経口投与；腹腔内投与；頭蓋内投与；膀胱内投与；経口投与（口から、口からの呼吸により）；局所投与；吸入投与；エアロゾル投与；気道内投与；気管投与；気管支投与；滴下；気管支滴下；気管内投与；粘膜投与；乾燥粉末投与；噴霧投与；接触投与；スワブ投与；気管内沈着投与；気管支内沈着投与；気管支鏡沈着投与；肺内投与；鼻道投与；呼吸用固形投与；呼吸用液体投与；乾燥粉末吸入投与を含む、任意の公知の形態であり得る。
鼻腔内投与は、鼻道への投与；鼻粘膜上皮への投与；肺への投与；吸入による投与；喉頭への投与；気管支への投与；肺胞への投与；吸入による投与；経鼻滴下による投与；およびこれらの組合せであり得る。
投与することまたは投与は、気道組織；鼻組織；口腔組織；肺胞組織；咽頭組織；気管組織；気管支組織；気管分岐部組織；気管支組織；細気管支組織；肺組織；肺葉組織；肺胞組織；鼻道組織；鼻粘膜上皮組織；喉頭組織；気管支組織；吸入組織；上皮細胞；気道上皮細胞；線毛細胞；杯細胞；無線毛細胞；基底細胞；肺細胞；鼻細胞；気管細胞；気管支細胞；気管支上皮細胞；肺胞上皮細胞；および静脈洞細胞からなる群から選択される少なくとも１つの組織または細胞に投与することであり得る。
別の例としては、投与することは、ｔｄｓＲＮＡを含むデリバリーシステムまたは医療デバイスによって実施され得る。デリバリーシステムまたは医療デバイスは、ネブライザー；噴霧器；鼻腔用ポンプ；スクイーズボトル；鼻腔用スプレー；シリンジ噴霧器またはプランジャー噴霧器（接続した噴霧器またはノズルに圧力を提供するシリンジ）；鼻腔用エアロゾルデバイス；調節性粒子分散デバイス；鼻腔用噴霧デバイス；圧力駆動ジェットネブライザー；超音波ネブライザー；呼吸による鼻腔用デリバリーデバイス；微粒化鼻腔用投薬デバイス；吸入器；粉体ディスペンサー；乾燥粉末発生器；エアロゾルライザー；肺内エアロゾルライザー；超小型エアロゾルライザー；噴霧剤ベースの定量噴霧式吸入器；乾燥粉末吸入デバイス；滴下デバイス；鼻腔内滴下デバイス；膀胱内滴下デバイス；スワブ；ピペット；鼻洗浄デバイス；鼻うがい；エアロゾルデバイス；定量エアロゾルデバイス；加圧投薬デバイス；粉末エアロゾルデバイス；スプレーエアロゾルデバイス；スプレーデバイス；定量スプレーデバイス；懸濁スプレーデバイス；およびこれらの組合せであり得る。
本開示の組成物は、様々な形態、例えば、水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、および水中油中水型エマルジョンで存在し得る。ｔｄｓＲＮＡが他の薬剤と組み合わされる実施形態を含む、本開示の活性化合物は、化合物が親水性、親油性、または両親媒性であるかによって、連続もしくは分散相のいずれか、または両相で存在し得る。
本開示の組成物は、エマルジョンの形成を補助する使用のための乳化剤も含み得る。任意の好適な親水コロイド乳化剤、典型的には固体材料、または２つもしくはそれ以上のそのような乳化剤の混合物は、本開示の実施において使用され得る。親水コロイド乳化剤は、植物性誘導体、例えば、アカシア、トラガカント、アガー、ペクチン、およびカラゲナン；動物性誘導体、例えば、ゼラチン、ラノリン、コレステロール、およびレシチン；半合成剤、例えば、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロース；ならびに合成剤、例えば、アクリル乳化剤、例えば、カルボマーを含む。親水コロイド乳化剤は、エマルジョンの乳化した液滴の周りに親水コロイド（水和親液コロイド）を形成する。親水コロイドは、他の液滴を物理的に拒絶する、それぞれの乳化した液滴の周りの保護層として寄与し、したがって、オストワルド熟成（乳化した液滴の凝集する傾向）を妨げる。
反対に、他の乳化剤は、典型的には、乳化した液滴の周りに液晶層を形成することにより、乳化した液滴を保護する。乳化剤を形成する－液晶層を用いる組成物では、エマルジョンの油相の親水性－親油性バランス（ＨＬＢ）は、乳化剤のものと適合して安定なエマルジョンを形成しなければならず、１つまたはそれ以上のさらなる乳化剤（第２の乳化剤）が、エマルジョンをさらに安定化するために添加されなければならないことが多い。前述の液晶層は、標的物質との接触時に分散相の化合物の放出も妨げる。
液体組成物は、経鼻投与に特に好適である。
５．１ 投与経路
好ましい実施形態では、本開示の全て（投与、製剤、医薬、組成物、投与量）は、ヒトである対象へのそれらの適用に関連する、およびそれを少なくとも記載する。さらなる非ヒト対象は、以下に記載する。
本開示の１つまたはそれ以上の活性剤（例えばｔｄｓＲＮＡ）を含む医薬組成物は、局所もしくは全身経路、または当技術分野で公知の方法により、対象に投与され得る。好ましい経路は、年齢、状態、性別、または対象の健康状態；疾患の性質、症状の数および重症度、選択された活性成分、または他の生理条件の存在によって変わり得る。
最も好ましい方法は、静脈内投与；腹腔内投与；または鼻腔内投与（例えば、口または気道から－例えば気管切開術によって作成したストーマからの呼吸を含む）を含む。静脈内投与または腹腔内投与は、一般に、注射によって実施される。他の投与方法は、少なくとも、皮内投与；皮下投与；筋肉内投与；腹腔内投与；頭蓋内投与；膀胱内投与；経口投与（口から、口からの呼吸により）；局所投与；吸入投与；エアロゾル投与；気道内投与；気管投与；気管支投与；滴下投与；気管支滴下投与；気管内投与；粘膜投与；乾燥粉末投与；噴霧投与；接触投与；スワブ投与；気管内沈着投与；気管支内沈着投与；気管支鏡沈着投与；肺内投与；鼻道投与；呼吸用固形投与；呼吸用液体投与；乾燥粉末吸入投与；およびこれらの組合せを含む。１つより多くの活性成分（例えば、異なるｔｄｓＲＮＡ等）が投与され、活性成分は同じ経路または異なる経路によって投与され得ることに注意されたい。
投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）（投与すること（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ））の一部の形態は、１つまたはそれ以上の上記のカテゴリーによって記載され、一部の投与方法は別々にグループ分けされるか、または上位概念によって言及され得る。例えば、経腸投与は、経口投与、栄養チューブ投与、または注腸投与を指し；局所投与は、呼吸器系を通る吸入のためのネブライザーなどのデバイスにより、皮膚上または経皮的に作用する皮膚パッチにより、または坐薬法により得る。非経口投与は、皮下投与、静脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、または腹腔内投与；頬側投与、舌下投与、経粘膜投与；吸入投与、滴下投与、滴下投与、鼻腔内投与、滴下投与、または気管内投与の形態を取り得る。
経鼻投与は、気道を通る任意の投与を指し、別の用語では、肺気道投与である。経鼻投与は、口からの気道への投与（すなわち、口からの呼吸から、または気管切開術によって作成したストーマから）を含み得る。
経鼻投与は、気道の組織への投与を含む。これは、気道組織；鼻組織；口腔組織；肺胞組織；咽頭組織；気管組織；気管支組織；気管分岐部組織；気管支組織；細気管支組織；肺組織；肺葉組織；肺胞組織；鼻道組織；鼻粘膜上皮組織；喉頭組織；気管支組織；吸入組織；およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの組織を含む。経鼻投与は、細胞および組織、例えば、上皮細胞；気道上皮細胞；線毛細胞；杯細胞；無線毛細胞；基底細胞；肺細胞；鼻細胞；気管細胞；気管支細胞；気管支上皮細胞；肺胞上皮細胞；静脈洞細胞；およびこれらの組合せへの投与を含み得ることになる。
投与は、任意の公知のデリバリーシステムからでもあり得る。デリバリーシステムは、ピル、カプセル、注射、カニューレ、植え込み型薬物デポ、注入システム（例えば、インシュリンポンプに似たデバイス）；ネブライザー；噴霧器；鼻腔用ポンプ；スクイーズボトル；鼻腔用スプレー；シリンジ噴霧器、プランジャー噴霧器（接続した噴霧器またはノズルに圧力を提供するシリンジ）；鼻腔用エアロゾルデバイス；調節性粒子分散デバイス；鼻腔用エアロゾルデバイス；鼻腔用噴霧デバイス；圧力駆動ジェットネブライザー；超音波ネブライザー；呼吸による鼻腔用デリバリーデバイス；微粒化鼻腔用投薬デバイス；吸入器；粉体ディスペンサー；乾燥粉末発生器；エアロゾルライザー；肺内エアロゾルライザー；超小型エアロゾルライザー；噴霧剤ベースの定量噴霧式吸入器；乾燥粉末吸入デバイス；滴下デバイス；鼻腔内滴下デバイス；膀胱内滴下デバイス；スワブ；ピペット；鼻洗浄デバイス；鼻うがい；エアロゾルデバイス；定量エアロゾルデバイス；加圧投薬デバイス；粉末エアロゾル；スプレーエアロゾル；スプレーデバイス；定量スプレーデバイス；懸濁スプレーデバイス；およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
５．２ 製剤および投与量
投与のための製剤（すなわち、医薬組成物）は、ｔｄｓＲＮＡを有する薬学的に許容される担体を含み得る。
医薬担体は、本開示の組成物が溶解、分散、含浸、または懸濁される、好適な非毒性の媒体、例えば水または他の溶媒、脂肪質、セルロースおよびそれらの誘導体、タンパク質およびそれらの誘導体、コラーゲン、ゼラチン、ポリマー、接着剤、スポンジ、ファブリック等、ならびに、媒体中の薬物の良い可溶性または分散を提供するために添加される賦形剤を含む。そのような賦形剤は、非毒性界面活性剤、可溶化剤、乳化剤、キレート剤、結合剤、滑剤、軟化剤等を含み得る。薬学的に許容される担体は、例えば、水溶液、シロップ、エリキシル剤、粉末、粒剤、錠剤、およびカプセルであり、典型的には従来の賦形剤、例えば結合剤、充填剤、滑剤、崩壊剤、湿潤剤、懸濁剤、乳化剤、防腐剤、緩衝塩、香料、着色剤、および／または甘味剤を含有し得る。
液体担体は、本開示の組成物のための好適な媒体として寄与するのに有効な濃度で組成物中に存在し得る。一般に、担体は、組成物の約４０～約９８重量％、または約５０～約９８重量％の量で使用される。組成物の好ましい形態は、鼻腔用スプレーとしての使用のための組成物である。
液体担体は、水、または任意の他の好適な液体、溶媒、またはそれらの混合物であり得る。水は、調剤または薬剤の分野に熟達した当業者に公知であるように、特定の抗原が最適に送達されるｐＨを生じる好適な緩衝剤を含有するか、または他の担体、例えばグリセリン、プロピレングリコール、様々なサイズのポリエチレングリコール、アミノ酸修飾因子、例えばアルギニン等、および他の好適な可溶性賦形剤を含有してもよい。１つの好ましい液体担体は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。
ｔｄｓＲＮＡは、上記のｄｓＲＮＡの組合せまたは任意のサブセットであり得る［例えば式（１）から式（５）］。一態様では、ｔｄｓＲＮＡは、上記のｔｄｓＲＮＡの全ての例の組合せまたは上記の例の任意のサブセットを含み得ることが理解される。サブセットに関して、ｔｄｓＲＮＡの１つまたはそれ以上の特定の実施形態の特定の除外にも直面する。非限定的な例として、ｔｄｓＲＮＡは、以下のいずれかを含み得る：（Ａ）上記のｔｄｓＲＮＡの全ての例、（Ｂ）上記のｔｄｓＲＮＡの全ての例であるが、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎを除く、（Ｃ）堅牢ｄｓＲＮＡ、（Ｄ）ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎ、（Ｅ）上記のｔｄｓＲＮＡであるが、ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎを除き、堅牢ｄｓＲＮＡを除く、（Ｆ）ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１２Ｕ）ｎ、および堅牢ｄｓＲＮＡ；または（Ｇ）ｒＩｎ・ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎおよび堅牢ｄｓＲＮＡ。
５．３ 鼻腔用組成物
一実施形態では、鼻腔内デリバリーを増強するための組成物は、ｔｄｓＲＮＡと経鼻デリバリーのために調製された活性化合物の組合せを含む。ｔｄｓＲＮＡと活性化合物の組合せは、後続方法または同時方法で適用され得る。好ましい実施形態では、混合物は、水溶液の形態であろう。他の実施形態では、混合物は、粉末または混合物の乾燥、粉末、または凍結乾燥形態であろう。一部の実施形態では、これらの形態は、デリバリーの前に、再水和されるであろう。
５．４ 鼻腔用製剤
一態様では、本開示は、ｔｄｓＲＮＡの経鼻デリバリーのための製剤に関する。一態様では、ｔｄｓＲＮＡは、１つの活性化合物であり、任意の他の活性化合物を含まなくてもよい。別の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、１つまたはそれ以上のさらなる活性化合物と共投与され得る。
本明細書に記載のそれぞれの薬剤および化学物質は、それらの任意の組合せを含み、対象への経鼻投与を含む投与の任意の形態のために、ｔｄｓＲＮＡに添加され得る。
５．５ 医薬
別の態様では、ｔｄｓＲＮＡを含有する医薬（例えば、医薬組成物）が提供される。医薬の他の適宜成分は、１つまたはそれ以上の別々の容器（例えば、鼻腔用アプリケーターまたは注射用バイアル）に無菌的にパッケージされる賦形剤および媒体（例えば、注射用水性緩衝液または水）を含む。さらなる態様が、本開示および本明細書の請求項から明らかであろう。
５．６ 平均対象のための投与量
投与量は、一般に、本開示の別の節に記載されるように、対象に適用可能である。好ましい実施形態では、対象はヒトである。
対象のため、１日あたりのｔｄｓＲＮＡの用量は、０．１μｇ～１００００００μｇ、０．１μｇ～２５０００μｇ、０．４μｇ～４０００００μｇ、０．５μｇ～５０００μｇ、０．５ｍｇ～６０ｍｇ、５ｍｇ～４０ｍｇ、５ｍｇ～４００ｍｇ、１０ｍｇ～２０ｍｇ、１０ｍｇ～８００ｍｇ、２５ｍｇ～７００ｍｇ、２０ｍｇ～２００ｍｇ、５０ｍｇ～１５０ｍｇ、８０ｍｇ～１４０ｍｇ、およびこれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
対象は、体重が約１５０ポンド、または７０Ｋｇのヒトであり、体重あたりの適切な投与量が算出され得る。
５．７ １日あたりのキログラム中用量
別の態様では、ｔｄｓＲＮＡは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、０．１～１ｍｇ／ｋｇ、０.１～２ｍｇ／ｋｇ、０．１～３ｍｇ／ｋｇ、０．１～４ｍｇ／ｋｇ、０．１～５ｍｇ／ｋｇ、０．１～６ｍｇ／ｋｇ、０．１～７ｍｇ／ｋｇ、０．１～８ｍｇ／ｋｇ、０．１～１０ｍｇ／ｋｇ、０．１～２０ｍｇ／ｋｇ、０．２～３ｍｇ／ｋｇ、０．３～３ｍｇ／ｋｇ、０．４～３ｍｇ／ｋｇ、０．６～３ｍｇ／ｋｇ、および０．８～３ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される１日あたりの用量で投与される。
５．８ 単位用量あたりの量
ｔｄｓＲＮＡの単位用量あたりの量は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇから選択される少なくとも１つであり得る。
５．９ 特定の例
一実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、隔週で約１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。別の例としては、投与は、１日置きに５０～１４００ミリグラムであってもよく、１日あたり２５～７００ミリグラムの平均一日投与量になる。一実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、隔週で約０．５０ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。１日置きに５０～１４００ミリグラムは、１日あたり２５～７００ミリグラムの平均１日投与量になる。
５．１０ 投与頻度
ある特定の実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、１日あたり１回投与、２日ごとに１回投与、３日ごとに１回投与、４日ごとに１回投与、５日ごとに１回投与、週に４回投与、週に３回投与、週に２回投与、週に１回投与、２週間ごとに１回投与、３週間ごとに１回投与、４週間ごとに１回投与、および１ヶ月ごとに１回投与からなる群から選択される頻度で投与される。
５．１１ 投与数および投与期間
ある特定の実施形態では、ｔｄｓＲＮＡは、単回投与、２回投与、３回投与、４回投与、５回投与、または６回もしくはそれ以上の投与として投与される。他の実施形態では、投与量は、無期限に継続される。継続投与量は、同じ状況下で使用され、例えば、対象が既にインシュリンポンプを使用している場合、ｔｄｓＲＮＡはインシュリンと混合され得る。
投与期間は、通常約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０日、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、６ヶ月、９ヶ月または１年である。ある特定の実施形態では、ｔｄｓＲＮＡの複数（例えば２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上）用量が、処置を必要とする対象に投与される。一部の対象について、投与期間が１年、２年、３年、５年、１０年または継続的であり得ることが想定される。
５．１２ 経鼻投与量
ｔｄｓＲＮＡは、投与の任意の他の形態に関して、経鼻投与と同じ用量で投与され得る。経鼻投与の非限定的な特定の例（投与の任意の他の形態にも適用可能である）は、５μｇ～１０μｇ；１０μｇ～２０μｇ；２０μｇ～５０μｇ；５０μｇ～１００μｇ；１００μｇ～２００μｇ；２００μｇ～５００μｇ；５００μｇ～１０００μｇ；１０００μｇ～１５００μｇ；１５００μｇ～２０００μｇ；またはこれらの任意の組合せの用量を含む。
他に指定しない限り、「組成物（ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」、「組成物（ａ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」、または「組成物（ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」は、少なくとも本開示の組成物を含むか、または少なくともｔｄｓＲＮＡを含む。組成物は、安全性、安定性および可溶性を増強するために濾過および滅菌されてもよい。組成物は、デリバリー方法を増強するために製剤化され得る。例えば、製剤は、ｉ．ｖ．デリバリー、腹腔内デリバリーまたは経鼻デリバリーを増強するために製剤化され得る。
５．１３ 一般に適用可能であり、経鼻投与に特に適用可能である組成物および方法
一実施形態では、鼻腔内デリバリーを増強するための組成物は、ｔｄｓＲＮＡおよび適宜経鼻デリバリーのために調製された活性化合物を含む。ｔｄｓＲＮＡと活性化合物の組合せは、後続（順番）方法または同時（平行）方法で適用され得る。好ましい実施形態では、混合物は、水溶液の形態であろう。他の実施形態では、混合物は、粉末または混合物の乾燥、粉末、または凍結乾燥形態であろう。一部の実施形態では、これらの形態は、デリバリーの前に、再水和されるであろう。組成物は、固体、液体または任意の他の形態、例えばゲルおよびリポソームであり得る。
経鼻投与で使用される本開示の組成物（例えば、ｔｄｓＲＮＡ）は、鼻腔用組成物が考えられる。本開示の組成物は、経鼻投与に限定されない。すなわち、本開示の任意の組成物が、鼻腔用組成物として使用され得る。同様に、鼻腔用組成物は、任意の他の目的、例えば非経鼻投与のために使用され得る。
同時投与（平行投与とも呼ばれる）は、同時に２つまたはそれ以上の組成物の投与も含み得る。例えば、２つまたはそれ以上の別々の鼻腔用ノズルおよび噴霧器は、それぞれ同時投与のための異なる組成物を分配し得る。同時投与は、異なる形態の組成物も分配し得る。例えば、乾燥粉末および液体が、同時に別々の噴霧器で一緒に分配され得る。
本明細書に記載の薬剤および化学物質のそれぞれは、それらの任意の組合せを含み、経鼻的にまたはその他で、対象に、本開示の組成物（例えば、ｔｄｓＲＮＡ）と共に投与され得る。経鼻投与のための他の化合物の非限定的な例は、ＲＮＡ、ＤＮＡ、アジュバント、タンパク質、インターフェロン、またはそれらの一部を含む。
本発明者らは、ｔｄｓＲＡＮＡが固体として安定であるか、または水に溶解され、したがって、任意のさらなる成分、例えばリン酸緩衝生理食塩水が最適であることを認識する。他の成分は、本明細書に記載のさらなる成分から利益を得ることもある。
ある特定の実施形態では、治療剤は、タイトジャンクションを破壊する、例えば一過的に破壊する薬剤、例えばＥＧＴＡと共に投与される（米国特許第６８５５５４９号を参照）。
さらに、経鼻投与は、対象の嗅覚によって知覚され得るため、香りまたは経鼻許容性を改善するかまたは刺激を減少させる添加剤が添加され得る。これらは、緩衝液および、組成物が滅菌されない場合、防腐剤、例えば、ヒドロキシ安息香酸メチル、抗酸化剤、香料、揮発油、緩衝剤、および界面活性剤を含む。
５．１４ 組成物の特定の例
エアロゾル組成物は、本開示の液体および乾燥組成物によって作成され、吸入によって投与され得る。これらのエアロゾル組成物は、加圧許容噴霧剤、例えばジクロロフルオロメタン、プロパン、および窒素へと入れられ得る。組成物は、非加圧調製物、例えばネブライザーまたはアトマイザーのための医薬品として製剤化され得る。複数回投与用容器から投与される組成物のため、抗菌剤が添加され得る。
液体溶液は、経鼻投与を含む任意の投与に好適であり得る。液体組成物は、薬学的に許容される界面活性剤、懸濁剤、または乳化剤の添加ありかまたはなしのいずれかで、希釈剤、例えば水およびアルコール、例えばエタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、グリセリン、およびポリエチレンアルコールを含み得る。本開示の組成物は、薬学的に許容される界面活性剤、例えば石けんまたは洗浄剤、懸濁剤、例えばペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、もしくはカルボキシメチルセルロース、または乳化剤および他の医薬アジュバントの添加ありかまたはなしで、薬学的に許容される担体中の生理的に許容される希釈剤、例えば、水、生理食塩水、水性デキストロースおよび関連糖溶液、アルコール、例えばエタノール、イソプロパノール、またはヘキサデシルアルコール、グリコール、例えばプロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール、例えばポリ（エチレングリコール）４００、グリセリンケタール、例えば２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－メタノール、エーテル、オイル、脂肪酸、脂肪酸エステルもしくはグリセリド、またはアセチル化脂肪酸グリセリドを含む無菌液または液体の混合物中で投与され得る。
組成物は、乾燥、半乾燥、または液体粒子として製剤化され得る。微粒子医薬組成物は、分散または輸送を補助する担体と組み合わされてもよい。好適な担体、例えば糖（すなわち、デキストロース、ラクトース、スクロース、トレハロース、マンニトール）は、任意の好適な比率で活性化合物または化合物とブレンドされ得る。
組成物形態の特定の例は、少なくとも以下：液体のエアロゾル、呼吸用固体のエアロゾル懸濁液、乾燥粉末吸入剤、定量吸入剤、液体／液体懸濁液、エマルジョン、懸濁液、水中油型エマルジョン、および油中水型エマルジョンを含む。
粒子または液滴に関して、粒子または液滴は、固体、液体、または他の型の粒子、例えばゲル、リポソーム等であり得ると予想される。また、組成物は、１つの型の粒子として調剤され得るが、第２の型の粒子として対象に送達されると予想される。例えば、組成物は、粒子が対象に到達する時までに、液体が固体に変換されるように、高い蒸発率の液体粒子として調剤され得る。
ある特定のデバイスは、本開示の一部の組成物の調剤のために好適な様々な組成物の使用を必要とする。典型的には、各組成物は、用いられるデバイスの型に特異的であり、治療に有用な通常の希釈剤、アジュバントおよび／または担体に加えて、適切な噴霧剤物質の使用を含み得る。また、リポソーム、マイクロカプセルもしくは微粒子、包接体、または他の型の担体の使用が考えられる。化学的に改変されたシステムも、化学改変の型または用いたデバイスの型に応じて異なる組成物中で調製され得る。
ネブライザーによる使用に好適な組成物は、緩衝液および単糖（例えば、組成物の安定化および浸透圧の調節のため）も含み得る。担体は、典型的には、水（および最も好ましくは、滅菌、パイロゲンフリー水）または好ましくは、例えば、塩化ナトリウムの添加により体液と等張にするが、高張でもあり得る、希釈した水性アルコール溶液である。ネブライザー組成物は、エアロゾルの形成において、溶液の霧吹き作用によって引き起こされる誘導表面凝集を低減または防止する界面活性剤も含有し得る。添加剤は、組成物が滅菌されない場合、防腐剤、例えば、ヒドロキシ安息香酸メチル、抗酸化剤、香料、揮発油、緩衝剤、および界面活性剤を含んでもよい。
定量噴霧式吸入器による使用のための組成物は、一般に、界面活性剤を用いて噴霧剤中に懸濁された微粉（本開示の組成物）を含み得る。噴霧剤は、この目的のために用いられる任意の従来物質、例えば、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、および１，１，１，２－テトラフルオロエタン、またはこれらの組合せを含む、クロロフルオロカーボン、ハイドロクロロフルオロカーボン、ハイドロフルオロカーボン、またはハイドロカーボンであり得る。好適な界面活性剤は、ソルビタントリオレートおよびダイズレシチンを含む。オレイン酸は、界面活性剤としても有用であり得る。
粉末吸入器から分配するための組成物は、本明細書に記載の組成物を含有する微細乾燥粉末を含み、デバイスからの粉末の分散を促進する量、例えば、組成物の５０～９０重量％の充填剤、例えば、ラクトース、ソルビトール、スクロース、またはマンニトールも含み得る。組成物は、末梢の肺への最も有効なデリバリーのため、１０ｍｍ（またはミクロン）より小さい、最も好ましくは０．５～５ｍｍの平均粒子サイズを有する特定の形態で調製され得る。
経鼻（肺）投与の非限定的な特定の例は、少なくとも１つまたはそれ以上の投与方法、例えば、経口投与（口から、口からの呼吸により）；鼻腔内投与（例えば、点鼻薬により）；吸入投与；エアロゾル投与；気道内（例えば、気管または気管支）投与；気管支滴下；気管内投与；粘膜投与；乾燥粉末投与；呼吸投与；滴下投与を含む。
経鼻投与の別の例は、例えば、スプレーによる、スワブによる、気管内沈着、気管支内沈着および気管支鏡沈着、鼻うがい、鼻洗浄、一時的または継続的なデポ移植を含む、気道の任意の部位への任意の沈着を含む。
「吸入」による投与は、肺の気管支および肺胞への吸入時に、口または鼻および喉頭を通過し、中咽頭領域を通るのに十分小さいサイズの本開示の組成物を使用して実施され得る。一般に、サイズが約１～１０ミクロンの範囲の（より具体的には、サイズが約５ミクロンより小さい）粒子（液滴、液体または固体）が、呼吸用であり、吸入による投与に好適である。粒子は、固体または液体であり得る。一部の実施形態では、そのような調製物は、平均粒子サイズが４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３ミクロンである。
一部の実施形態では、吸入またはエアロゾルデリバリーのための調製物は、乾燥粉末として製剤化される。一部の実施形態では、吸入またはエアロゾルデリバリーのための調製物は、例えば、湿潤剤の包括により、湿潤粉末として製剤化され、一部の実施形態では、湿潤剤は、水、生理食塩水、または生理的ｐＨの他の液体からなる群から選択される少なくとも１つである。一部の実施形態では、粒子は、液体であり得る。
鼻腔内投与による投与は、大きなサイズで製剤化され、局所的に鼻上皮に送達されて処置する粒子によって実施され得る。鼻腔内投与のために使用される粒子または液滴は、一般に、吸入による投与のために使用されるものよりも大きい直径を有する。鼻腔内投与のため、１０～５００ミクロンの範囲の粒子サイズが、鼻腔内での保持を確実にするために好まれる。
一部の実施形態では、吸入のための粒子および鼻腔内投与のための粒子は、共に投与され得る。すなわち、１～５００ミクロンの粒子が使用される。一部の実施形態では、１～１０または１～１３ミクロンの粒子が、選択されるかまたは濃縮される。他の実施形態では、１０～５００ミクロン、または１５～５００ミクロンの粒子が、選択されるかまたは濃縮される。
本開示の組成物は、鼻腔または頬側口腔への複数の液滴として投与され得る。用量は、例えば、１～１００、１～５０、１～２０、１～１０、１～５滴であり得る。
一部の実施形態では、投与することは、定量した投与量の組成物を送達するデバイスの使用を含み得る。
本開示の組成物の液体粒子のエアロゾルは、任意の好適な手段、例えば、ネブライザー、圧力駆動ジェットネブライザー、超音波ネブライザー、または他の手段によって産生され得る。本開示の組成物を含む固体粒子のエアロゾルは、任意の固体粒子治療用エアロゾル発生器によって同様に産生され得る。固体粒子エアロゾル発生器の１つの例示的な型は、注入器である。注入による投与のために好適な組成物は、注入器によって送達され得るか、または嗅ぎタバコのように鼻腔へと取り込まれ得る、微粉砕された粉末を含む。注入器中、粉末（例えば、本明細書に記載の処置を実行するのに有効なそれらの定量した用量）は、典型的にはゼラチンまたはプラスチックで作成されたカプセルまたはカートリッジに含有され、インサイチュで貫通されるかまたは開かれ、粉末は吸入時にデバイスを通って引かれる空気によるかまたは手動ポンプによって送達される。注入器に用いられる粉末は、本開示の組成物単独または組成物および好適な粉末希釈剤、例えばラクトース、および適宜界面活性剤を含む粉末ブレンドのいずれかからなる。本開示の組成物は、典型的には、組成物の０．１％～１００％ ｗ／ｗを含む。
例示的なエアロゾル発生器の別の型は、定量噴霧式吸入器を含む。定量噴霧式吸入器は、加圧式エアロゾルディスペンサーであり、典型的には、液化噴霧剤中のｔｄｓＲＮＡの懸濁液または溶液組成物を含有する。これらのデバイスを使用する間、定量した容量、典型的には１０μｌ～２００μｌを送達し、ｔｄｓＲＮＡを含有する微粒子スプレーを産生するように適用されたバルブを通して組成物を吹き出す。好適な噴霧剤は、ある特定のクロロフルオロカーボン化合物、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンおよびこれらの混合物を含む。組成物は、１つまたはそれ以上の共溶媒、例えば、エタノール、界面活性剤、例えばオレイン酸またはソルビタントリオレート、抗酸化剤および好適な香料剤をさらに含有し得る。
投与の好ましい経路および様式は、レシピエントの状態および年齢、感染または状態の性質、および選択した活性成分によって変わるであろう。
６．経鼻投与デバイス
本開示の組成物を包含するデバイスまたはデリバリーシステムも実施形態である。
本開示の組成物は、任意の経鼻投与デバイスまたはデバイスの組合せによって送達され得る。組合せは、両方が、２つの異なるデバイスまたは２つのデバイスの特徴を有する１つのデバイスによって投与される組成物を指す。個々にまたは一緒に使用され得る好適なデバイスの非限定的な例は、ネブライザー；噴霧器（例えば、スプレーボトル、例えば“Ｎａｓａｌ Ｓｐｒａｙ Ｐｕｍｐ ｗ／Ｓａｆｅｔｙ Ｃｌｉｐ，Ｐｆｅｉｆｆｅｒ ＳＡＰ ＃６０５４８などのスプレーボトル；スクイーズボトル（例えば、ＡＳＴＥＬＩＮ(塩酸アゼラスチン、Ｍｅｄｐｏｉｎｔｅ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｉｎｃ．)およびＰＡＴＡＮＡＳＥ（塩酸オロパタジン、Ａｌｃｏｎ，Ｉｎｃ．）を含む鼻腔用スプレーのために一般的に使用されるボトル；鼻腔用ポンプスプレー（例えば、ＡＰＴＡＲ ＰＨＡＲＭＡ 鼻腔用スプレーポンプ）；調節性粒子分散デバイス（例えば、ＶＩＡＮＡＳＥ 電子アトマイザー)；鼻腔用エアロゾルデバイス（例えば、ＺＥＴＯＮＮＡ 鼻腔用エアロゾル）；鼻腔用噴霧デバイス（例えば、ＥＡＳＹＮＯＳＥ ネブライザー、圧力駆動ジェットネブライザー、または超音波ネブライザー）；粉末鼻腔用デリバリーデバイス（例えば、ＯＰＴＩＮＯＳＥ 呼吸による鼻腔用デリバリーデバイス）；微粒化鼻腔用投薬デバイス（例えば、ＬＭＡ ＭＡＤ ＮＡＳＡＬデバイス）；滴下デバイス；吸入デバイス（例えば、吸入器）；粉体ディスペンサー；乾燥粉末発生器；エアロゾルライザー（例えば、肺内エアロゾルライザーまたは超小型エアロゾルライザー、定量エアロゾル、粉末エアロゾル、スプレーエアロゾル）；スプレー；定量スプレー；定量吸入器（例えば、噴霧剤ベースの定量噴霧式吸入器）；乾燥粉末吸入デバイス；鼻腔内滴下デバイス；膀胱内滴下デバイス；気腹デバイスからなる群から選択される少なくとも１つを含む。
粘膜、例えば鼻、喉、および／または気管支の粘膜への適用のための適用デバイス（すなわち、吸入）。これは、スワブ、ピペットまたは鼻刺激、鼻うがい、または鼻洗浄のためのデバイスであり得る。
別の例は、シリンジ噴霧器またはプランジャー噴霧器である。これは、例えば、Ｌｕｅｒロックを介して、シリンジに接続した噴霧器ヘッド（またはノズル）であり得る。シリンジは、噴霧器ヘッドを流れる組成物に圧力をかけ、スプレーまたはエアロゾルを産生する。
６．１ 鼻腔用デバイスのより特定の例
エアロゾル：圧力下でパッケージされ、適切なバルブシステムの活性化時に放出される治療活性成分を含有する産物。エアロゾルとしての使用のため、溶液または懸濁液中の本開示の化合物は、好適な噴霧剤、例えば、従来のアジュバントと共に、プロパン、ブタン、またはイソブタンのような炭化水素噴霧剤と共に加圧型エアロゾル容器中にパッケージされ得る。本開示の物質は、エアロゾルで投与されてもよいが、ネブライザーまたはアトマイザーのような非加圧形態でもよい。
定量エアロゾル：各活性化時に均一な量のスプレーのデリバリーを可能にする、定量バルブを含む加圧型剤形。
粉末エアロゾル：適切なバルブシステムの活性化時に放出される、圧力下でパッケージされ、粉末の形態で治療活性成分を含有する産物。
スプレーエアロゾル：噴霧剤として圧縮ガスを利用し、湿式スプレーとして産物を吹き出すのに必要な力を提供するエアロゾル産物。
スプレー：空気または蒸気の噴出により液体が絶えず分けられる。鼻腔用スプレー薬産物は、非加圧型ディスペンサー中で溶液または賦形剤の混合物に溶解または懸濁された治療活性成分を含有する。
定量スプレー：各活性化時にスプレーの特定の量の分配を可能にするバルブからなる非加圧型剤形。
懸濁スプレー：液体媒体中に分散した固体粒子を含有し、粗大液滴の形態または微粉固体としての液体調製物。
市販のデバイスの一部の非限定的な特定の例は、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ．によって製造される、Ｕｌｔｒａｖｅｎｔネブライザー；Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ， Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ， Ｃｏｌｏ．によって製造される、Ａｃｏｒｎ ＩＩネブライザー；Ｇｌａｘｏ Ｉｎｃ．，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，Ｎ．Ｃ．によって製造される、Ｖｅｎｔｏｌｉｎ定量吸入器；およびＦｉｓｏｎｓ Ｃｏｒｐ．，Ｂｅｄｆｏｒｄ，Ｍａｓｓによって製造される、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ粉末吸入器である。
固体粒子エアロゾル発生器の１つの例示的な型は、注入器である。注入による投与のために好適な組成物は、注入器によって送達され得るか、または嗅ぎタバコのように鼻腔へと取り込まれ得る、微粉砕された粉末を含む。注入器中、粉末（例えば、本明細書に記載の処置を実行するのに有効なそれらの定量した用量）は、典型的にはゼラチンまたはプラスチックで作成されたカプセルまたはカートリッジに含有され、インサイチュで貫通されるかまたは開かれ、粉末は吸入時にデバイスを通って引かれる空気によるかまたは手動ポンプによって送達される。注入器に用いられる粉末は、活性成分単独または活性成分、好適な粉末希釈剤、例えばラクトース、および適宜界面活性剤を含む粉末ブレンドのいずれかからなる。活性成分は、典型的には、組成物の０．１％～１００％ ｗ／ｗを含む。
例示的なエアロゾル発生器の第２の型は、定量噴霧式吸入器を含む。定量噴霧式吸入器は、加圧式エアロゾルディスペンサーであり、典型的には、液化噴霧剤中の活性成分の懸濁液または溶液組成物を含有する。これらのデバイスを使用する間、定量した容量、典型的には１０～２００μｌを送達し、活性成分を含有する微粒子スプレーを産生するように適用されたバルブを通して組成物を吹き出す。好適な噴霧剤は、ある特定のクロロフルオロカーボン化合物、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンおよびこれらの混合物を含む。組成物は、１つまたはそれ以上の共溶媒、例えば、エタノール、界面活性剤、例えばオレイン酸またはソルビタントリオレート、抗酸化剤および好適な香料剤をさらに含有し得る。
一部のデバイスは、液体を分配し得るが、液体は、患者と接触する前に乾燥粉末へと変わるであろう液体を急速に蒸発し得ることに注意されたい。したがって、事実上、スプレーは乾燥粉末投与と考えることができる。
任意の列挙したデバイスは、本開示の投与デバイス実施形態に組み込まれ得る。
７．さらなる実施形態および特徴の検討
７．１ 対象または患者
本明細書で使用される場合、「対象」は、「患者」と同じ意味を有し、哺乳動物であり、好ましくは、ヒトである。ヒトに加えて、本開示の範囲内の哺乳動物のカテゴリーは、例えば、家畜、飼育動物、実験動物等を含む。家畜の一部の例は、ウシ、ブタ、ウマ、ヤギ等を含む。飼育動物の一部の例は、イヌ、ネコ等を含む。実験動物の一部の例は、霊長類、ラット、マウス、ウサギ、モルモット等を含む。対象の他の例は、任意の動物、例えば、ジャコウネコ、ブタ、ウシ、ウマ、ラクダ、ネコ、イヌ、齧歯類、トリ、コウモリ、ウサギ、フェレット、ミンク、ヘビ等を含む。本明細書で使用される場合、用語「患者」または「対象」は、交換可能に使用される。
７．２ デバイスおよびキット
別の態様では、本開示は、鼻腔内デリバリーのための治療用デバイスに関する、およびそれを含む。一実施形態では、治療用デバイスは、ｔｄｓＲＮＡの調製物、および適宜、別の生物学的に活性な薬剤、例えばワクチンまたは抗原を負荷した任意の好適なデバイスを含み得る。これらのデバイスは、以下により詳細に記載される。
７．３ さらなる方法および組成物
本開示の任意の態様では、方法は、抗ウイルス、インターフェロン、インターフェロン混合物、Ａｌｆｅｒｏｎ、アルファ－インターフェロン種、組換えまたは天然インターフェロンアルファ、組換えまたは天然インターフェロンアルファ２ａ、組換えまたは天然インターフェロンベータ、組換えまたは天然インターフェロンベータ１ｂ、および組換えまたは天然インターフェロンガンマからなる群から選択される１つまたはそれ以上の化合物または薬剤を対象に投与するさらなる工程を含み得る。
本明細書で使用される場合、用語「インターフェロン」（「ＩＦＮ」と略される）は、合わせて１型および２型インターフェロンを指し、それらの欠失、挿入、または置換変異体、それらの生物学的活性断片、およびそれらの対立形質を含む。本明細書で使用される場合、インターフェロンは、合わせて１型および２型インターフェロンを指す。１型インターフェロンは、インターフェロンアルファ、ベータ、オメガおよびそれらの亜型を含む。ヒトインターフェロンアルファは、少なくとも１４個の同定された亜型を有するが、インターフェロンベータは３個の同定された亜型を有する。
インターフェロンは、インターフェロン、インターフェロン混合物、Ａｌｆｅｒｏｎ、アルファ－インターフェロン種、組換えまたは天然インターフェロンアルファ、組換えまたは天然インターフェロンアルファ２ａ、組換えまたは天然インターフェロンベータ、組換えまたは天然インターフェロンベータ１ｂ、組換えおよび天然インターフェロンガンマからなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
インターフェロンは、アルファ－インターフェロンでもよい。１つの好ましいアルファインターフェロンは、ＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）であり、米国で利用可能な唯一の認可された天然、複数種のα－インターフェロンである。それは、初めての天然源、複数種のインターフェロンであり、少なくとも７種のα－インターフェロンの一貫した混合物である。インターフェロンは、好ましくは、少なくとも７種のヒトα－インターフェロンの天然のカクテルである。反対に、他の利用可能なα－インターフェロンは、ＤＮＡ組換え技術を使用して、細菌で作成された単一分子種のα－インターフェロンである。これらの単一分子種のα－インターフェロンは、グリコシル化工程が細菌プロセス中に実施されないため、重要な構造性炭水化物成分も欠損する。
組換え技術によって産生されるα－インターフェロンの種と違い、ＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）は、ヒト白血球細胞によって産生され、複数のα－インターフェロン種をグリコシル化することができる。逆相ＨＰＬＣ研究は、ＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）が、少なくとも７種のアルファインターフェロン（α２、α４、α７、α８、α１０、α１６およびα１７）の一貫した混合物であることを示す。この自然発生源のインターフェロンは、遺伝子改変のインターフェロンとそれを区別するユニークな抗ウイルス特性を有する。高純度のＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）および７個のインターフェロン種の天然混合物としてのその利点は、種８ｂのようなその一部は、他の種、例えば、ＩＮＴＲＯＮ Ａ（登録商標）の唯一の成分である種２ｂよりも大きな抗ウイルス活性を有する。例えば、慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）およびＨＩＶ感染の処置における、優れた抗ウイルス活性、および他の利用可能な組換えインターフェロン、例えばＩＮＴＲＯＮ Ａ（登録商標）およびＲＯＦＥＲＯＮ Ａ（登録商標）と比較したＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）の耐容性が報告されている。ＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）は、ｍｌあたり５００００００国際単位（ＩＵ）を含有する注射溶液として利用可能である。
インターフェロンは、ヒト白血球細胞によって産生される少なくとも７種のアルファ－インターフェロンの混合物として精製されたインターフェロン種であり得る。７種は、例えば、インターフェロンアルファ２；インターフェロンアルファ４；インターフェロンアルファ７；インターフェロンアルファ８；インターフェロンアルファ１０；インターフェロンアルファ１６；およびインターフェロンアルファ１７であり得る。
内服または任意の投与のため、α－インターフェロンは、例えば、経口、経鼻または頬側投与のための従来の方法で製剤化され得る。経口投与のための製剤は、水溶液、シロップ、エリキシル剤、粉末、粒剤、錠剤、およびカプセルを含み、典型的には従来の賦形剤、例えば結合剤、充填剤、滑剤、崩壊剤、湿潤剤、懸濁剤、乳化剤、防腐剤、緩衝塩、香料、着色剤、および／または甘味剤を含有する。α－インターフェロンは、本開示の投与の任意の方法によって投与され得る。好ましくは、投与は、経口、経鼻、非経口（注射を含む）または局所（経皮、頬側および舌下を含む）を含む好適な経路による。好ましい経路は、レシピエントの状態および年齢、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの性質および重症度、ならびに選択したｔｄｓＲＮＡによって変わるであろうことが理解される。
成分の推奨される投与量は、患者の臨床状態および同様の状態を処置する医師の経験によるであろう。一般的なガイドラインとして、全身感染のために利用されるＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（登録商標）の投与量は、週に３回、３ＩＵ／ポンド～１千万ＩＵ／ポンド（例えば、皮下注射）である。これまでの経験は、患者の体重の３ＩＵ／１ｂ．を超える投与量である。経口α－インターフェロン（ＡＬＦＥＲＯＮ ＬＤＯ（登録商標））は、５００～１０，０００ＩＵ／日の範囲の溶液として投与され、１５０ポンドのヒトに基づき算出され、これは１日あたり３．３～６６．０ＩＵ／１ｂ．である。好ましい一実施形態では、有益な結果は、４５０ＩＵを超えるα－インターフェロンの投与レベルで得られ、それは３ＩＵ／ポンド体重よりも大きかった。しかしながら、ヘルスケア提供者は、所望の抗ウイルス効果を達成する最適な用量および低用量の経口α－インターフェロン（または任意のインターフェロン）のスケジュールを決めることができる。
別の態様では、薬剤は、レムデシビル、クロロキノン、ヒドロキシクロロキノン、オセタミビル、ザナミビル、アバカビル、ジドブジン、ザルシタビン、ジダノシン、スタブジン、エファビレンツ、インジナビル、リトナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、リバビリン、インターロイキン、ＩＬ－２、ＰＤ－Ｌ１、抗ＰＤ－Ｌ１、チェックポイント阻害剤、ペラミビル、およびノイラミニダーゼ阻害剤からなる群から選択される少なくとも１つであり得る。
本開示の組成物および方法は、例えば、前述の段落を含む、本明細書に開示される任意の化合物／薬剤を含み得る。
７．４ 有効量：治療または予防有効量
組成物は、有効量で送達される。用語「有効量」は、例えば、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの症状を低減する、その症状の進行を停止するかまたはその症状を逆転させる、所望の生物学的効果を実現するのに必要または十分な量を指す。記載した試料投与量および投与方法に加えて、当業者は、実験を繰り返す必要なく、ｔｄｓＲＮＡの有効量を経験的に決定することができる。最大用量、すなわち、医学的判断による最高安全用量が使用されることが好ましい。
有効剤形、投与の様式、および投与量は、経験的に決定され、そのような決定は、当業者の範囲内であり得る。投与量は、投与の経路および様式、排出の速度、処置の期間、共投与される任意の他の薬物（例えば、抗ウイルス剤）の同一性、年齢、サイズ、哺乳動物の種（例えば、ヒト患者）、ならびに薬および獣医学の薬の当業者に周知の他の因子によって変わるであろうことが、当業者によって理解される。一般に、本明細書に開示の任意の活性剤またはそれを含有する組成物の好適な用量は、それは所望の効果をもたらすのに有効な最低用量である、活性剤（ｔｄｓＲＮＡ）または活性剤を含む組成物の量である。所望の効果は、ウイルス感染またはＬｏｎｇ－ＣＯＶＩＤの症状の重症度または期間を低減し得る。
８．他の態様
数値範囲を記載する本明細書では、範囲内の全ての値も記載されることが理解されるはずである（例えば、１から１０は、１と１０の間の全ての値ならびに２から１０、１から５、および３から８などの全ての中間の範囲も含む）。用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、本開示の操作またはその特許性に影響を及ぼさないと当業者が理解するであろう、数量の測定または変化性と関連する統計的不確実性を指し得る。
請求項の意味およびそれらの法的等価物の範囲内に入る全ての改変および置換は、それらの範囲内に含まれる。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」を列挙する請求項は、請求項の範囲内である他の要素の包含も可能にする。本開示は、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」の代わりに、移行句「から基本的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」（すなわち、それらが本開示の操作に重大な影響を及ぼさない場合、請求項の範囲内である他の要素の包含も可能にする）または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」（すなわち、通常、本開示と関連する不純物または取るに足らない活性以外に請求項に列挙した要素のみを可能にする）を列挙するそのような請求項によっても記載される。これら３つの移行句のいずれかが、本開示を請求するために使用され得る。
本明細書に記載される要素は、請求項に明確に列挙されない限り、請求した開示の限定として解釈されないはずである。したがって、許可された請求項は、請求項に読み込まれる明細書からの限定の代わりに法的保護の範囲の決定のための基礎である。対比として、先行技術は、請求される開示を見込むかまたは新規性を損ねるであろう特定の実施形態の及ぶ範囲で本開示から明確に除外される。
さらに、請求項の限定間または内に特定の関係がないことが、そのような関係が請求項に明確に列挙されない限り、意図される（例えば、製品クレームの成分のアレンジまたは方法クレームの工程の順番は、明確にそうであると言及しない限り、請求項の限定ではない）。本明細書に開示の個々の要素の全ての可能な組合せおよび並び換えは、本開示の態様であると考えられる。同様に、本開示の記載の一般化は、本開示の一部であると考えられる。
上記から、本開示がその精神または基本的な特徴から逸脱しない他の特定の形態に具体化され得ることは、当業者には明らかであろう。
本開示は、現在最も実際的および好ましい実施形態であると考えられるものと関連して記載されるが、本開示が開示した実施形態に限定されないが、反対に、添付の請求項の精神および範囲内に含まれる様々な改変および等価なアレンジをカバーすることが意図されることが理解される。
本開示では、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤは、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染）後の長期的な影響を指し、本発明者らの以前の論文および特許出願で使用した用語である、ＣＯＶＩＤ１９感染後疲労症候群（ＰＣＦＳ）またはＣＯＶＩＤ１９感染後慢性疲労（ＰＣＣＦ）と同じ意味を有する。用語は同じ意味を有する。
９．参照による組込み
本明細書で記載した全ての論文、特許出願、および特許は、それぞれの論文または特許が特におよび個々に参照により組み込まれると示された場合、その全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれる。これらの特許は、少なくとも、米国特許第４０２４２２２号、同第４１３０６４１号、同第５２５８３６９号、同第７４３９３４９号、同第８７２２８７４号および同第９３１５５３８号を含む。矛盾する場合、本明細書の任意の定義を含む本出願が優先する。
［実施例１］Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの治療を判断するための実験
本試験は、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤを有する患者におけるｔｄｓＲＮＡの安全性および有効性を評価するために実行された同等な並行コホートを用いた二重盲検試験である。Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの患者を、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体に対する血清反応陽性について検査する。加えて、患者を、ＰＣＲベースの検査（例えば、ＲＴＰＣＲ）によって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２について検査する。Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤ患者（本明細書では対象とも称される）の多くは、心機能の評価に一般的に使用される標準的なＢｒｕｃｅ最大下負荷運動プロトコルを身体的に実行できない。患者の安全上の理由から、高齢者向けに設計された、Ｂｒｕｃｅプロトコルとエネルギー要件が類似していた修正ＢｒｕｃｅのＭＥ／ＣＦＳプロトコルを使用する。主要エンドポイントは、運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）におけるベースラインから４０週までの変化である。
ＳＡＳ（バージョン９．２）統計ソフトウェア（Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いて、データを分析する。全ての統計分析は、両側で行った。トレッドミル運動負荷持続時間および垂直上昇を、両側スチューデントのｔ検定を使用して分析する。運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）を少なくとも２５％改善した患者の比率の比較を、カイ二乗検定を使用して分析した。試験参加者は、トレッドミルの傾斜において７つの３％の増分で０％から２１％までの漸進的増加を組み込んだ修正Ｂｒｕｃｅプロトコルを使用する運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）検査を受ける必要がある。運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）検査プロトコルは、完了した傾斜段階の各々について計算される垂直成分を有する。通常は部分的にしか完了していない、最後に試みた段階もまた、完成度に基づく計算に含まれる。ベースライン（治療前）から最大４０週（４０週間の治療）までの垂直上昇における増加を、各患者について計算し、「登った」垂直フィートとして表される。
［実施例２］追加のモニタリング基準
運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）に加えて、患者はＬｏｎｇ ＣＯＶＩＤについて、以下の基準に従って監視される。この基準の下で、患者は以下のような（ａ）および（ｂ）の両方で陽性でなければならない：
（ａ）では、患者は以下からの少なくとも１つの症状を有する必要がある：
●重症疲労を含む疲労、
●疲労による運動または活動不能、
●例えば、低運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）などの低運動耐容能。
（ｂ）では、患者は：息切れまたは呼吸困難、持続性胸痛または胸部圧迫感、咳、心臓の動悸、下痢、嗅覚の部分または完全喪失、頻脈、脱毛、視界不良、手足の神経障害、味覚の部分または完全喪失、吐き気または嘔吐、耳詰まり、ドライアイ、身震いまたは震え、飛蚊症または閃光、発疹、耳鳴症または耳鳴り、味覚の変化、皮膚の乾燥または剥離、幻嗅、肋軟骨炎、血中酸素濃度低下、ｃｏｖｉｄ指先、鵞口瘡、呼吸困難、喉奥の痰、持続する喉の渇き、筋痙攣、高熱不耐性、異常低温、肺の低温火傷感、甲状腺腫または喉の詰まり、乾燥頭皮またはふけ、貧血、甲状腺隆起、乾燥症候群、赤眼、味覚異常、痰産生、食欲不振、空間識失調、筋肉痛、認知障害、ブレーンフォグ、集中障害、思考障害、悪寒、汗、睡眠障害、筋肉または全身の痛み、集中または注目の困難、頭痛、睡眠困難、不安、記憶障害、めまい、関節痛、咽頭痛、寝汗、熱または悪寒、鼻閉または鼻水、悲観、逆流または胸焼け、症状の変化、腹痛、腰痛、前屈による息切れまたは疲労、体重増加、こむら返り、通常以上の睡眠、上背部の痛み、神経感覚、鋭いまたは突然の胸痛、精神錯乱、感覚過敏、体重減少、後鼻漏、喉の渇き、高血圧、手足の膨張、口内痛または舌痛、頸筋痛、のぼせ、四肢の骨痛、皮膚灼熱感、後頭神経の基底部での過度の圧力、リンパ節の腫大、脳圧、腎臓痛、血圧のスパイク、手または手首の痛み、血管拡張、肋骨基底部における中背部痛、灼熱感、頭皮の痛み、顎痛、不整脈、唇の荒れまたは乾燥、足痛、目の麦粒腫または感染、低血圧、腎臓の問題または尿タンパク、尿路感染症、ホルモンの不均衡、激しい人格変化、過剰唾液分泌を伴う胃食道逆流性疾患、ヘルペス感染症、ＥＢＶ感染症、三叉神経痛、リンパ節周辺の首両側拍動、気絶、悲観、胸痛、鼻炎、および筋痛からなる群から選択される少なくとも４つの症状を有する必要がある。
［実施例３］Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの治療を判断するための実験
この試験の目的は、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤに罹患している患者の症状を軽減するためのｔｄｓＲＮＡの有効性を評価することである。試験は、ｔｄｓＲＮＡの製剤を使用する、前向きな、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、並行群試験の形態である。以前にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症と診断された男性および女性患者（１８歳以上）が、この試験に含まれる。主な除外基準は、妊娠中および授乳中の女性、他の炎症性リウマチ性疾患（関節リウマチまたは膠原病など）、重度神経障害、臨床的に明確な内分泌障害、重度の心臓障害、腎臓障害もしくは肝臓障害および急性もしくは慢性感染症、甲状腺機能低下症、睡眠時無呼吸症および過眠症、ならびに薬剤の副作用などの医原性状態に罹患している患者を含む。
５０人の患者を、２つの試験コホートのうちの１つに無作為に割り当てる：プラセボ（２５人の患者；コホート１）またはｔｄｓＲＮＡ（２５人の患者；コホート２）。治療期間は８週間であり、この間、各患者はプラセボまたはｔｄｓＲＮＡ製剤の静脈内注射を受ける。試験の開始前に、各コホートにおける各患者は、患者内のプラセボ対照を提供するために、ＰＢＳ溶液のプラセボ注射を受け（－３日目）、患者に日誌の記入の完成を練習してもらい、患者が注射部位反応を正確に判断できるかどうかを評価する。
試験を進める意欲および能力がある患者に、各投与に関して、プラセボ（ＰＢＳ溶液、コホート１）またはＰＢＳ中のｔｄｓＲＮＡ（コホート２）を注射する。プラセボまたはｔｄｓＲＮＡの投与量は、約５ｍｇ／ｋｇを週に３回、８週間の期間にわたって投与されるものである。コホート１の場合、０．１ｍｌの標準容量のＰＢＳ溶液を注射する。コホート２の場合、０．１ｍｌの標準容量のｔｄｓＲＮＡを含有する懸濁液を注射する。ｔｄｓＲＮＡは、アンプリゲン（Ａｍｐｌｉｇｅｎ）、またはアンプリゲンと堅牢（Ｒｕｇｇｅｄ）ｄｓＲＮＡとの組み合わせであり得る。
各投与日に、また治療期終了時に、例えば、身体検査、尿検査、心電図、および血液学検査・生化学血液検査を使用して、定期的安全性評価を実施する。
Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤの症状を毎日記録するために、患者は標準化された日誌を記入し、言及されたパラメーターを毎日記録する（例えば、パラメーターのリストについては、実施例２を参照されたい）。適宜、治療をまた評価するために、運動トレッドミル耐容能（ＥＴＴ）検査を実施する。
［実施例４］Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有する患者を治療するためのｔｄｓＲＮＡの試験
この実施例は、現在形で書かれているが、一部の患者について、この試験は、ｔｄｓＲＮＡの初回投与が２０２１年１月頃に行われた後２１週に達していることを理解されたい。
リンタトリモド（Ｒｉｎｔａｔｏｌｉｍｏｄ）（アンプリゲン（登録商標））、ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ１２Ｕは、ｔｄｓＲＮＡの特定の形態である。二本鎖ＲＮＡは、インターフェロン、インターロイキンおよび腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）を含む、細胞免疫および抗ウイルス活性を媒介する分子であるリンホカインの調節物質として作用する。また、ｄｓＲＮＡは、抗ウイルスおよび免疫増強状態と関連する細胞内経路を直接活性化する。
ＣＯＶＩＤ－１９は、新たに発見されたウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染によって引き起こされる最近出現した疾患である。その壊滅的な死亡者数に加えて、ＣＯＶＩＤ－１９が、少なくとも１つの追加の長期的な悪影響－非常に衰弱させる長期的または永続的な徴候を伴うＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有することがますます明らかに分かってきている。１４３人の患者のある報告では、患者のおよそ５５％が、６０日後にもＣＯＶＩＤ－１９の３つ以上の症状を有していた。世論調査に対して１５００を超える回答があった同様な報告では、患者の１００％が、ＣＯＶＩＤ感染後に疲労感が続いている。加えて、５０％を超える患者が、今日の一般的な疲労および呼吸器系の問題ならびに筋肉や体の痛み、運動不能もしくは活動できないこと、頭痛、集中力もしくは集中の低下を含む６つの症状のうちの少なくとも１つを報告した。
この試験では、ｐｏｓｔ－ＣＯＶＩＤ疲労を示すＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者を試験し、彼らがｔｄｓＲＮＡ治療から恩恵を受けるかどうかを確認した。安全性の評価は、副次的目的である。カルノフスキーの一般全身状態スコア、ＳＦ－３６健康に関する問診票、多次元疲労調査（Ｍｕｌｔｉ－Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ Ｆａｔｉｇｕｅ Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ）、症状特異的重症度（Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｓｅｖｅｒｉｔｙ）、およびＣＯＶＩＤ－１９、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ／ロングホーラー（Ｌｏｎｇ Ｈａｕｌｅｒ’ｓ）の症状問診票を含むいくつかの生活の質および活動性の尺度もなされる。
進行中の試験は、ＣＦＳ患者をｔｄｓＲＮＡ（アンプリゲン（登録商標）とも呼ばれる、ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ１２Ｕ）で処置するための前向きの、オープンラベル、多施設試験である。ベースライン期間は、最長で１２週間であり、患者は：１）少なくとも最低２４週間、または患者が治療から臨床的に恩恵を受けている限り処置されるか、あるいは２）もしあれば、用量制限毒性が発生するまで処置される。この時点では、毒性の兆候はない。
試験パラメーターには：（１）カルノフスキーの一般全身状態スコア（ＫＰＳ）、（２）安全性評価（Ｓａｆｅｔｙ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｓ）、（３）ＳＦ－３６健康に関する問診票、（４）特定の症状重症度、（５）多次元疲労調査、（６）ＣＯＶＩＤ－１９症状問診票、および（７）Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ／ロングホーラー症状問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみに対する）が挙げられる。
Ｌｏｎｇ－ＣＯＶＩＤ症状を有する患者が登録される場合、組入れ基準は以下を含む：
（ａ）６ヶ月を超えて持続する慢性疲労症候群（ＣＦＳ）に関する１９８８年のＣＤＣ症例定義によって定義されるか、またはＣＦＳについての１９９４年のＣＤＣ症例定義によってのみ定義される慢性疲労症候群と診断されること（Ｆｕｋｕｄａ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ．１９９４；１２１：９５３－９５９）。類似した症状を示し得る他の臨床状態は除外された。
（ｂ）年齢範囲：＞１８歳、＜７０歳であること。
（ｃ）男性、または妊娠していないかもしくは授乳していない女性であること：女性は、妊娠の可能性がないこと（閉経後２年を経過しているか、もしくは卵管結紮術を含む避妊手術を受けているかのいずれか）、または有効な避妊法（避妊薬、避妊器具、ペッサリー）を使用している必要がある。あるいは、精管結紮術を受けている男性パートナー（男性パートナーが、顕微鏡検査による無精子症の記録を有するか、または精管結紮術後に性的行動があったにも関わらず、結果的に生じる妊娠なしに精管結紮術後２年以上経過しているとボランティアが報告をするならば、成功したと見なされる）を有する女性患者であること。閉経後２年未満の女性で、卵管結紮術を行い、避妊を行っている女性は、初回試験薬輸注の前４週間以内にベースラインにおいて血清妊娠検査が陰性でなければならない。４週間ごとに、また試験終了時に、血清または尿試験紙法のいずれかで、妊娠検査を行わなければならない。但し、尿検査結果が陽性であっても、血清妊娠検査を行う。妊娠可能な女性は、ベースライン時の妊娠検査の前４週間から最後の試験薬輸注後４週間まで、有効な避妊の手段を使用することに同意する。全ての男性患者は、試験薬投与時および最後の試験薬輸注後９０日まで、精子提供者にはならず、有効な避妊の手段を使用することに同意する。アンプリゲン（登録商標）服用中に生じたいかなる妊娠もＡＥとして報告され、ＡＴＭ ＩｍｍｕｎｏＴｅｃｈ Ｉｎｃ．に直ちに報告されねばならない。
（ｄ）≧２０かつ≦６０のカルノフスキーの一般全身状態スコア（ＫＰＳ）によって決定される生活の質の低下があること。ＫＰＳは、１０の単位で丸められねばならない。
（ｅ）この治験に参加する意思を示す文書のインフォームドコンセントを提供する能力があること。
（ｆ）ＡＮＡ陰性もしくは抗ｄｓ（二本鎖）ＤＮＡ陰性、リウマトイド因子陰性、および赤血球沈降速度（ＥＳＲ）の記録（ベースライン中、またはＣＦＳの発症後の過去に）があること。正常なＴ４（または対象が甲状腺機能正常であるという他の臨床検査値）のベースライン期間中の記録も必要である。
（ｇ）臨床検査室が、試験薬投与開始前２週間以内の政府承認の検査／キットによって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）感染の陰性を確認していること。
（ｈ）Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有する患者は、少なくとも３ヶ月間継続しなければならないこと、およびＣＯＶＩＤ―１９症状の発症前であってはならないことの疲労疾患の期間を除いて、１９８８年または１９９４年の慢性疲労症候群に関するＣＦＳ ＣＤＣ定義（ＣＦＳ ＣＤＣ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｆａｔｉｇｕｅ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（Ｃｒｉｔｅｒｉａ ４．１．１）を満たさねばならない。患者はまた、以下の、疾患の３ヶ月間以上連続する期間中に継続または再発する必要があり、ＣＯＶＩＤ－１９の症状（悪寒もしくは発熱、咳、息切れもしくは呼吸困難、味覚もしくは嗅覚の新たな喪失、または胸痛）の発症の前にあってはならない「ロングホーラー」症状のうちの少なくとも１つを有する必要がある。軽症のＣＯＶＩＤ－１９症状を有するか、またはＣＯＶＩＤ－１９症状を有さない多くの患者は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在について検査しなかったので、「ロングホーラー」とも呼ばれるＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有する多くの患者は、陽性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２検査結果の記録を有さないであろう。これらの症例では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２についての陽性血清抗体検査で十分であろう。
除外基準は以下を含む：（ａ）予定された治療および評価に戻ることができないこと。（ｂ）プロトコルまたは結果の実現もしくは解釈を困難あるいは安全でないものにする、慢性もしくは併発する急性医学的障害または疾患があること。（ｃ）妊娠または授乳中の女性であること（４．１．３を参照されたい）。（ｄ）インターフェロン、インターロイキン、もしくは他のサイトカインまたは治験薬による処置が試験薬の開始の６週間以内にあること。対象は、治験薬の中断の前に文書のインフォームドコンセントを供与しなければならない。
試験中には、以下の薬物が禁止される：（ａ）インターフェロン、インターロイキンもしくは他のサイトカイン。（ｂ）合衆国においていかなる使用に対しても未だ承認されていない治験薬および実験的薬剤。（ｃ）患者の健康のために必要であると考えられる他の薬物は、治験責任医師の同意のもとで投与されてもよい。治験責任医師には、試験期間中に、ＣＦＳに対して未承認のいかなる治療法の処方もその使用の推奨も行わないことが勧告される。全ての併用薬が、患者の症例報告フォーム／ｅＣＲＦに記録される。
投薬スケジュール：患者は、オープンラベルの静脈内（ＩＶ）ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ１２Ｕ（アンプリゲン（登録商標））を、週２回、少なくとも２４週間にわたって受ける（セクション３．０を参照されたい）。最初の２週間の間（１回目から４回目の投与まで）に、患者は、２００ｍｇ（８０ｍｌ）の用量のｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ１２Ｕ（アンプリゲン（登録商標））を受ける。この用量で忍容性が高い場合、用量は、３週目（５回目の投与）で４００ｍｇ（１６０ｍｌ）まで増加される。各用量レベルでの最初の輸注は、６０±５分間にわたって提供され、いかなる重大な輸注関連副作用（例えば、インフルエンザ様症状）もなく忍容性が高い場合には、次の輸注を４５±５分間にわたって提供し、忍容性が高い場合には、全ての残りの輸注を３５±５分間にわたって提供する。重大な輸注関連副作用が発生する場合、輸注時間を短縮せずに、その後忍容性が高くなったら、時間を長くして、輸注関連不耐性を軽減させる。また、患者は、潮紅（ｆｌｕｓｈｉｎｇ）またはそう痒などの重大な輸注関連副作用の可能性を低下させるために、輸注の前にベナドリルで処置されてもよい。アンプリゲンは、３０分未満で注入されない。
一般に薬剤に対する感受性の増加の既往歴を有するか、もしくは治験責任医師がアンプリゲンに対してより感受性であり得ると考える患者は、初回投与を低減した投与量および／または長くされた輸注時間で受けてもよい。その後の用量は、３５±５分間で提供される４００ｍｇの推奨される用量まで、またはもはや耐用性がなくなるまで調節されることになる。しかしながら、主任治験医師の裁量に基づいて、より低い用量および／または頻度が投与されてもよい。
重大な輸注関連副作用が、６０±５分間にわたって提供される輸注で継続する場合、完全（４００ｍｇ）用量の２５％まで（すなわち、１００ｍｇ）、５０％まで（すなわち、２００ｍｇ）、または７５％まで（すなわち、３００ｍｇ）もしくはそれ以上の投与量の低減が許容され、輸注時間は、輸注関連不耐用性を軽減するために長くされてもよい。また、アンプリゲンを再開中で、前の治療サイクル中に投与量レベルの低減を必要とした患者、または一般に薬剤に対する感受性の増加の既往歴を有するか、あるいは治験責任医師がアンプリゲンに対してより感受性であり得ると考える患者は、低減した投与量レベル（すなわち、＜２００ｍｇ）のアンプリゲンで再開して、最大の４００ｍｇの週２回にゆっくりと漸増されてもよい。
ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ１２Ｕ（アンプリゲン（登録商標））は、静注用のガラス瓶中の溶液として、２００ｍｇの用量（８０ｍｌ；２．５ｍｇ／ｍｌの濃度）で提供される。アンプリゲンは２℃～８℃の温度で保管する。
判定および評価
このセクションは、判定、手順、および試験中に実施される検査ならびに頻度を詳説する。
病歴：試験の登録前に完全な病歴を取り、ＣＦＳの診断を確認し、この試験に対する適格性を判断する。患者の自覚症状および有害な経験を、毎回の治験の来院時に記録する。
身体検査と徴候および症状（Ｓ／Ｓ）の治験責任医師の評価：徴候および症状の治験責任医師の評価を含む精密な身体検査を、ベースライン、１２週ごと、および終了時に実施する。バイタルサイン、心拍数および血圧を、各輸注の前後に取得する。
体重：患者の体重を、ベースライン、１２週ごと、および終了時に測定する。
化学パネル：化学パネルは、血清クレアチニン、電解質、および生化学的プロファイル（カルシウム、リン酸、グルコース、血中尿素窒素、尿酸、コレステロール、総タンパク質、アルブミン、［総］ビリルビン、アルカリホスファターゼ、血清乳酸脱水素酵素、ＳＧＯＴ、ＳＧＰＴ）からなる。化学パネルは、ベースラインで少なくとも１週間離して２回行い、次いで、４、８、１６および２４週目に１回行い、それ以降は８週間ごとに、また終了時に行う。２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす。毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする。
尿検査：尿検査を、ベースラインで１回、次いで、４、８、１６および２４週目に１回行い、それ以降は８週間ごとに、また終了時に行う。２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす。毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする。
凝固パネル：凝固バッテリー試験（ＰＴおよびＰＴＴ）を、ベースラインで１回、次いで、４、８、１６および２４週目に行い、それ以降は８週間ごとに、また終了時に行う。２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす。毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする。
血液学的パネル：全血球計算（ＣＢＣ）は、ヘマトクリット、ヘモグロビン、好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球を含む分類を有する総ＷＢＣ、血小板数を含む。全血球計算は、ベースラインで少なくとも１週間離して２回行い、次いで、４、８、１６および２４週目に１回行い、それ以降は８週間ごとに、また終了時に行う。２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす。毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする。
甲状腺機能パネル：甲状腺機能パネルは、ＴＳＨ、遊離Ｔ４、および遊離Ｔ３からなり、ベースラインで１回、２４週目、２４週ごと、および終了時に行われる。
Ｃ反応性タンパク：Ｃ反応性タンパクは、ベースラインで少なくとも１週間離して２回行い、次いで、４、８、１６および２４週目、それ以降は１２週間ごとに、また終了時に実施する。
直接クームスアッセイ（直接抗グロビンアッセイ）：直接クームスアッセイは、ベースラインで１回、次いで、２４週目、２４週間ごとに、また終了時に実施する。
妊娠検査：血清妊娠検査は、ベースライン時に（試験薬を開始する４週間以内）実施する。血清または尿試験紙妊娠検査のいずれかを、患者が試験薬剤を受けながら、妊娠の可能性がある全ての女性患者に対して、４週間ごとおよび終了時に実施する。尿試験紙検査が陽性であっても、血清検査を行う。（セクション４．１．３を参照されたい）。
カルノフスキーの一般全身状態スコア（ＫＰＳ）：ＫＰＳは、ベースライン時（少なくとも１週間離して、２回）、８週目、１６週目、２４週目、それ以降１２週ごと、また終了時（付録Ｅ）に、治験責任医師が評価し、記録する。ＫＰＳ問診票は、ベースラインで（少なくとも１週間離して、２回）、８週目、１６週目、２４週目、それ以降１２週ごと、また終了時に、試験参加者が完成する。
胸部Ｘ線（ＣＸＲ）：ＣＸＲ（ＰＡおよびラテラル）は、ベースライン時もしくは試験薬輸注を開始する１２週間以内、１２０週目および試験終了時に行う。
心電図（ＥＫＧ）：１２誘導ＥＫＧは、ベースラインで、１２週ごと、終了時また医療的に指示される場合に記録する。
冷凍保存用血清：２２ｍｌの血液試料を、ベースラインで２回（少なくとも２週間離して）、次いで８週目、１６週目、２４週目に、それ以降１２週ごと、また終了時に血清採取のために得る。試料を、将来可能性のある抗ｄｓＲＮＡ抗体検査および／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体検査のために保存する。
健康に関する問診票：Ｓｈｏｒｔ Ｆｏｒｍ－３６健康に関する問診票は、ベースラインで、１２週目、２４週目に、それ以降１２週ごとに、また終了時に完成する。
特定の症状重症度：特定の症状重症度に関する問診票は、ベースラインで、１２週目、２４週目に、それ以降１２週ごとに、また終了時に完成する。
多次元疲労調査：多次元疲労調査問診票は、ベースラインで、１２週目、２４週目に、それ以降１２週ごとに、また終了時に完成する。
ＣＯＶＩＤ－１９症状：ＣＯＶＩＤ－１９症状は、ベースライン時および毎週評価される。ＣＯＶＩＤ－１９の症状を発現する患者には検査を行い、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの存在が陽性である場合、処置を中断し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス検査が陰性であってもＣＯＶＩＤ－１９の症状が解消するまで経過観察される。ＣＯＶＩＤ－１９の症状の安全性追跡調査は、１ヶ月目は毎週実施し、次いで、それ以降は症状が解消されるまで毎月行われる。
ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のウイルス検査：鼻腔ぬぐい液試料（または別の現在許容される試料採取法）は、試験処置の開始前２週間以内のベースライン時に実施される。
Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ）：Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ／ロングホーラー症状問診票は、ベースライン時、それ以降は毎週また終了時に完成する。
治療を開始する前の１２週間の期間中に実施される前試験分析は、以下を含む：（１）病歴。（２）身体検査（徴候および症状の治験責任医師の評価を含む）。（３）体重。（４）化学パネル（少なくとも１週間離して２回）；試験処置を開始する前の４週間以内に１回。（５）血液学的パネル（少なくとも１週間離して２回）；試験処置を開始する前の４週間以内に１回。（６）甲状腺機能パネル（１回）。（７）Ｃ反応性タンパク（少なくとも１週間離して２回）；試験処置を開始する前の４週間以内に１回。（８）直接クームスアッセイ（直接抗グロビンアッセイ）。（９）ベースライン中またはＣＦＳの発症後の過去における；ＡＮＡ陰性もしくは抗ｄｓ（二本鎖）ＤＮＡ陰性、およびリウマトイド因子陰性の記録。（１０）ベースライン中またはＣＦＳの発症後の過去における；赤血球沈降速度（ＥＳＲ）の記録。（１１）尿検査。（１２）凝固パネル。（１３）妊娠検査（該当する場合、試験処置を開始する前の４週間以内）。（１４）ＫＰＳ（少なくとも１週間離して２回）（付録Ｅ）；試験処置を開始する前の４週間以内に１回。（１５）ＥＫＧ。（１６）胸部Ｘ線（ＰＡおよびラテラル）（試験薬輸注開始の１２週間以内に行われなければならない）。（１７）凍結保存用の血清（少なくとも２週間離して２回）。（１８）患者問診票（ＳＦ－３６、多次元疲労調査、特定の症状重症度、およびＰｏｓｔ－ＣＯＶＩＤ－１９慢性疲労（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ）（少なくとも１週間離して２回）；試験処置を開始する前の４週間以内に１回。（１９）試験エントリー時および試験処置を開始する前のＣＯＶＩＤ－１９症状。（２０）ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のウイルス検査、試験処置を開始する前の２週間以内に１回。
さらなる分析を以下のように実施する。
毎週：（ａ）ＣＯＶＩＤ－１９症状：ＣＯＶＩＤ－１９の症状を発現する患者には検査を行い、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの存在が陽性である場合、処置を中断し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス検査が陰性であってもＣＯＶＩＤ－１９の症状が解消するまで経過観察されねばならない。ＣＯＶＩＤ－１９の症状の安全性追跡調査は、１ヶ月目は毎週実施し、次いで、それ以降は症状が解消されるまで毎月行われる。（ｂ）Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ）。（ｃ）週に２回の試験薬投与。
４週間ごと：（ａ）化学パネル。（ｂ）血液学的パネル。（ｃ）凝固パネル。（ｄ）尿検査。（ｅ）妊娠検査（該当する場合）。
８週間ごと：（ａ）化学パネル。（ｂ）尿検査。（ｃ）凝固パネル。（ｄ）血液学的パネル。（ｅ）Ｃ反応性タンパク。（ｆ）凍結保存用血清。（ｇ）ＫＰＳ。（ｈ）妊娠検査（該当する場合）。
１２週間ごと：（ａ）身体検査（徴候および症状の治験責任医師の評価を含む）。（ｂ）体重。（ｃ）ＥＫＧ。（ｄ）妊娠検査（該当する場合）。（ｅ）患者問診票（ＳＦ－３６、多次元疲労調査、特定の症状重症度、およびＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ））。
１６週間ごと：（ａ）化学パネル。（ｂ）尿検査。（ｃ）凝固パネル。（ｄ）血液学的パネル。（ｅ）Ｃ反応性タンパク。（ｆ）凍結保存用血清。（ｇ）ＫＰＳ。（ｈ）妊娠検査（該当する場合）。
２０週間ごと：（ａ）妊娠検査（該当する場合）。
２４週間ごと：（ａ）身体検査（徴候および症状の治験責任医師の評価を含む）。（ｂ）体重。（ｃ）化学パネル。（ｄ）尿検査。（ｅ）凝固パネル。（ｆ）血液学的パネル。（ｇ）甲状腺機能パネル。（ｈ）Ｃ反応性タンパク。（ｉ）凍結保存用血清。（ｊ）直接クームスアッセイ（直接抗グロビンアッセイ）。（ｋ）妊娠検査（該当する場合）。（ｌ）ＫＰＳ。（ｍ）ＥＫＧ。（ｎ）患者問診票（ＳＦ－３６、多次元疲労調査、およびＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ））。
２４週後、それ以降毎週：（ａ）ＣＯＶＩＤ－１９症状：ＣＯＶＩＤ－１９の症状を発現する患者には検査を行い、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの存在が陽性である場合、処置を中断し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス検査が陰性であってもＣＯＶＩＤ－１９の症状が解消するまで経過観察されねばならない。ＣＯＶＩＤ－１９の症状の安全性追跡調査は、１ヶ月目は毎週実施し、次いで、それ以降は症状が解消されるまで毎月行われる。ＣＯＶＩＤ－１９症状の状態は、電話連絡を介して得られてもよい。（ｂ）Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ）。（ｃ）週に二度（２回）の試験薬投与。
２４週後、それ以降４週間ごと：（ａ）妊娠検査（該当する場合）。
２４週後、それ以降８週間ごと：（ａ）化学パネル（毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする）。（ｂ）尿検査（毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする）。（ｃ）凝固パネル（毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする）。（ｄ）血液学的パネル（毒性の証拠がある場合、毒性のない２４週の期間が存在するまで、頻度は８週ごとのそのままにする）。
２４週後、それ以降１２週間ごと：（ａ）身体検査（徴候および症状の治験責任医師の評価を含む）。（ｂ）体重。（ｃ）ＥＫＧ。（ｄ）ＫＰＳ。（ｅ）化学パネル（２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす）。（ｆ）尿検査（２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす）。（ｇ）凝固パネル（２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす）。（ｈ）血液学的パネル（２４週の期間中に臨床検査毒性の証拠が観察されない場合、検査の頻度を１２週ごとに減らす）。（ｉ）Ｃ反応性タンパク。（ｊ）凍結保存用の血清。（ｋ）患者問診票（ＳＦ－３６、多次元疲労調査、および特定の症状重症度）。
２４週後、それ以降２４週間ごと：（ａ）直接クームスアッセイ。（ｂ）甲状腺機能パネル。
２４週後、１２０週目に：（ａ）胸部Ｘ線（ＰＡおよびラテラル）。
試験の終了時に：（ａ）身体検査（徴候および症状の治験責任医師の評価を含む）。（ｂ）体重。（ｃ）化学パネル。（ｄ）尿検査。（ｅ）凝固パネル。（ｆ）血液学的パネル。（ｇ）甲状腺機能パネル。（ｈ）Ｃ反応性タンパク。（ｉ）凍結保存用の血清。（ｊ）直接クームスアッセイ（直接抗グロビンアッセイ）。（ｋ）妊娠検査（該当する場合）。（ｌ）ＫＰＳ。（ｍ）ＥＫＧ。（ｎ）胸部Ｘ線（ＰＡおよびラテラル）（試験時間が３ヶ月未満である場合、終了時胸部Ｘ線は必要ない）。（ｏ）ＣＯＶＩＤ－１９症状。（ｐ）患者問診票（ＳＦ－３６、多次元疲労調査、特定の症状重症度、およびＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみ））。
検査および評価の概略を、表Ｂに表示する。全ての評価、調査、および手順は、患者が項目を完成させるのに十分な時間を与えるために、＋／－１週間の限定された時間内を有する。
試験の要件を遵守できない患者は、試験から撤退する。撤退の理由としては、（１）追跡調査不能。（２）患者の自発的撤退／患者または保護者による撤退、（３）試験の要件の不遵守（すなわち、治験のために再来院しない）または禁止された併用薬剤の使用などのプロトコル違反。（４）患者が試験薬剤を服用することを妨げること、またはこの試験で許可されていない薬物の投与を必要とすることが治験責任医師によって決定された、重要な併発性疾患または手術などの医師の判断。（５）３もしくは４の毒性評価尺度または治験責任医師が試験薬剤に関連すると考える重篤な有害事象（ＳＡＥ）（付録Ａを参照されたい）などの有害事象。（６）有効性の欠如。（７）回復が挙げられ得るが、これらに限定されない。
処置の最初の２４週を完了する前に試験への参加を（自発的または非自発的に）中止した対象は、早期中止と見なされる。対象が、処置の最初の２４週後のいずれかの時点で中止する場合、対象は試験を完了したと見なされる。対象が２４週目で中止した場合、彼らは完了者と見なされる。
エンドポイントにおける統計的評価は、（１）カルノフスキーの一般全身状態スコア（ＫＰＳ）。（２）ＳＦ－３６、健康に関する問診票。（３）特定の症状の重症度。（４）多次元疲労調査。（５）ＣＯＶＩＤ－１９症状。（６）Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ問診票（Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者のみに対する）について実施される。
本発明者らは、ウィルコクソンの符号順位検定を使用して、進行する８週および／または１２週の間隔とベースラインとの間のＫＰＳの変化の中央値を分析する。ベースラインを共変量としたＡＮＯＶＡ分析も実施する。加えて、コクラン・アーミテージ検定を使用して、ベースラインと処置との間の差異を評価するために、分布分析を利用する。
処置間隔とベースラインとの間のＳＦ－３６、特定の症状重症度および多次元疲労調査における変化の分析は、パラメトリックなアプローチ（ｔ検定およびベースラインを共変量としたＡＮＯＶＡ）とノンパラメトリックな（ウィルコクソンの符号順位検定）アプローチの両方を利用する。度数分布は、コクラン・アーミテージ傾向性検定を利用する。
以前にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検査で陽性と出た後にこの試験に登録する患者、および試験登録時にＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有する患者は、別々に分析される。軽症のＣＯＶＩＤ－１９症状を有するか、またはＣＯＶＩＤ－１９症状を有さない多くの患者は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在について検査しなかったので、「ロングホーラー」とも呼ばれるＰＣＣＦを有する多くの患者は、陽性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２検査結果の記録を有さないであろう。これらの症例では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２についての陽性血清抗体検査で十分であろう。
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１９８８年の慢性疲労症候群（ＣＦＳ）のＣＤＣ症例定義
この定義は、慢性疲労症候群の疫学的および臨床的試験の基礎となることを意図している。これは、示唆する疾患を有する患者の評価するための有用なガイドであり得るが、それが個々の患者における慢性疲労症候群の診断を確認できないかまたは否定できないために、定義は十分に非特異的なままである。慢性疲労症候群は、除外診断のままであり、医師は疾患の過程を通して、他のより潜在的な病態によって症状が起きている可能性があるという高い疑いのレベルを維持し続けなければならない。ＣＦＳの症例は、
大基準１および２と、以下の小基準－－１１の症状基準のうちの＞６つに加えて３つの身体的基準のうちの＞２つ；もしくは１１の症状基準のうちの８つを満たす必要がある。
大基準
（１）同様の症状の以前の病歴がない人における持続性もしくは再発性の衰弱性疲労または易疲労感の急性もしくは亜急性の発症であり、安静にしても改善せず、少なくとも６ヶ月の期間にわたって平均的な毎日の活動を、患者の疾病前の活動レベルの５０％を下回るまで低減させるか損なうのに十分深刻であるものであること。
（２）病歴、身体検査、および適切な臨床検査所見：１）悪性腫瘍；２）自己免疫疾患；３）局所感染症（潜在性膿瘍など）４）慢性もしくは亜急性の細菌性疾患（心内膜炎、ライム病または結核など）、真菌性疾患（ヒストプラズマ症、ブラストミセス症、またはコクシジオイデス症など）、ならびに寄生虫病（トキソプラズマ症、アメーバ症、ジアルジア症、または蠕虫の感染など）；５）ＡＩＤＳもしくはＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）；６）慢性炎症性疾患（サルコイドーシス、ウェゲナー肉芽腫症、または慢性肝炎など）；７）神経筋疾患（多発性硬化症または重症筋無力症など）；８）内分泌疾患（甲状腺機能低下症、アジソン病、クッシング症候群、または真性糖尿病など）；９）常用薬もしくはその他の有毒物質（化学溶媒または重金属など）の副作用；１０）その他の慢性の肺疾患、心臓疾患、胃腸疾患、肝疾患、腎疾患、血液疾患、神経疾患、筋骨格疾患；または１１）ＣＦＳの発症に先行するうつ病に基づく、同様の症状を引き起こす他の臨床的状態が合理的に除外されることである。その他の考えられる原因についての推奨される最小限の臨床検査評価としては、以下の：１）全血球計算、分類、および血小板数；２）赤血球沈降速度；３）抗核抗体；４）血清電解質；５）グルコース；６）クレアチニン血中尿素窒素；７）カルシウム、リン；８）総ビリルビン、アルカリホスファターゼ、ＳＧＯＴ（ＡＳＴ）、ＳＧＰＴ（ＡＬＴ）；９）甲状腺刺激ホルモンレベル；１０）尿検査；ならびに１１）中間濃度ＰＰＤを含まねばならない。
小基準－症状基準
症状基準を満たすために、症状は、疲労感の増加の発症時にまたはその発症時後に開始している必要があり、また少なくとも６ヶ月の期間にわたって持続もしくは再発している必要がある（個々の症状は、同時に起こっていてもまたは起こっていなくてもよい）。これらの症状は、以下を含む：（１）軽度の発熱（測定される場合、華氏９９．４度～華氏１０１度の口腔温）および／または悪寒。注記：＞華氏１０１度の口腔温は、一般的に、ＣＦＳとは関連付けられず、他の原因について迅速な調査をしなければならない）。（２）喉の痛み。（３）前頸部もしくは後頸部または腋窩リンパ節の痛み。（４）原因不明の全身の筋力低下。（５）患者の病前状態では容易に耐容されていたレベルの運動後の長時間（≧２４時間）の全身疲労。（６）（重度の、または患者の病前状態で罹患した頭痛とは異なるパターンのタイプの）頭痛。（７）筋肉の不快感／筋肉痛。（８）関節の腫れもしくは発赤を伴わない移動性関節痛。（９）神経心理学的障害（物忘れ、過度の過敏症、混乱、めまい、思考困難、集中力低下、うつ病）。（１０）睡眠障害（過眠症、不眠症、入眠障害、早期覚醒）。（１１）最初は数時間から数日間かけて発症する主な複合症状の記述。
診察室で、少なくとも２回、少なくとも１ヶ月離して記録される身体的基準は、次を含む：（１）軽度の発熱（華氏９９．５度～華氏１０１度の口腔温、または華氏１００度～華氏１０１．５度の直腸温）。（２）非滲出性咽頭炎。（３）触診可能および／または圧痛を伴う、前方もしくは後方の頸部または腋窩リンパ節腫張（注記：直径＞２ｃｍのリンパ節は、その他の病因が示唆される。さらなる評価が必要である）。
１９９４年の慢性疲労症候群（ＣＦＳ）についての症例定義
組入れ基準は以下を含む：（１）新たに、もしくは限定されて発症し（すなわち、一生続くものではない）、行われている労作の結果ではなく、安静によって実質的に緩和されず、職業的、教育的、社会的、または個人的な活動の以前のレベルの大幅な減少をもたらす、原因不明の持続もしくは再発する慢性疲労があること。（２）以下の症状のうちの４つ以上が同時発生することであり、これらの全ては、疾患の６ヶ月以上の連続する期間中に持続または再発している必要があり、疲労の前から存在してはならないこと。（Ａ）短期記憶における実質的障害または集中力１、喉の痛み。（Ｂ）頸部もしくは腋窩リンパ節の圧痛、筋肉痛。（Ｃ）腫れもしくは発赤を伴わない多関節痛、新しいタイプ、パターンの頭痛、または重症度２の浅い睡眠。（Ｄ）２４時間を超えて続く運動後の倦怠感。
除外基準は、以下を含む：（１）未処置の甲状腺機能低下症、睡眠時無呼吸およびナルコレプシー、ならびに薬剤の副作用などの医原性状態などの、慢性疲労の存在を説明し得る、なんらかの活動性の医学的状態があること。（２）その臨床的疑いおよびその持続的活動性が慢性疲労疾患を説明し得る、以前に診断されたなんらかの医学的状態があること。そのような状態には、以前に処置された悪性腫瘍およびＢ型またはＣ型肝炎ウイルス感染の解消されない症例が挙げられ得る。（３）（３ａ）双極性感情障害。（３ｂ）あらゆるサブタイプの統合失調症。（３ｃ）あらゆるサブタイプの妄想障害。（３ｄ）あらゆるサブタイプの認知症。（３ｅ）神経性無食欲症。（３ｆ）神経性大食症を伴う、大うつ病障害の過去または現在のなんらかの診断があること。（４）慢性疲労の発症前２年以内およびその後のいかなる時点でのアルコールもしくはその他の薬物の乱用があること。（５）４５以上のボディマス指数によって定義される重度肥満症であること。
カルノフスキーの一般全身状態スケールおよび手順
カルノフスキーの一般全身状態スコア（ＫＰＳ）を決定するための一般手順
ＫＰＳは、作業活動および自立活動を含む、毎日の活動を実行するための患者の能力の全体的な評価である。ＫＰＳは、慢性疾患状態における効果的な治療介入に感度が良い。ベースラインにおける２回の評価後に、ＫＰＳは、試験中の８週目、１６週目、２４週目、それ以降１２週ごとに、患者が完成する問診票（添付された）および特定の徴候ならびに症状、基本的な機能達成（例えば、毎日の自立活動）、活動の変化、ならびに服用されている薬剤の変化の議論を含む面接に基づいて得られる。加えて、スコアの割り当ては、重要な他者（すなわち、患者の日常的なニーズを世話するために必要な配偶者、仲間または保護者）との議論を含んでもよい。ＫＰＳスコアは、主任治験医師によって割り当てられるか、または（彼／彼女）が不在の場合、各現場で１人だけさらに指定された個人によって割り当てられる。
カルノフスキーの一般全身状態スケールは、以下のように割り当てられる：
１００ 正常の活動；不満がない、疾患の証拠はない。
９０ 正常の活動を行うことができ、ほんの少しの疾患の徴候または症状。
８０ 正常の活動をするのに努力を伴う、いくらかの疾患の徴候または症状。
７０ 自分自身の世話はできるが、正常の活動を行うか、活動的な作業を行うことはできない。
６０ 自分に必要なことはできるが、時折、介助を必要とする。
５０ 日常的な世話のためにかなりの介助を必要とする。
４０ 身体障害のある状態；自立活動ができない、特別な世話および介助を必要とする。
３０ 死は差し迫っていないが、重度の身体障害のある寝たきり状態。
２０ 非常に重症；入院および／または看護ケアが必要；積極的な支持療法が必要。
１０ 瀕死；死期が切迫している。
０ 死。
ＬＯＮＧ ＣＯＶＩＤ／「ロングホーラー」とも呼ばれるの定義
１．患者は、臨床検査でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）に対して陽性と確認されることによって、またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の陽性血清抗体検査によってＣＯＶＩＤ－１９と診断されねばならない。
２．患者は、少なくとも３ヶ月間継続しなければならないこと、およびＣＯＶＩＤ―１９症状の発症前であってはならないことの疲労疾患の期間を除いて、１９８８年のＣＦＳについてのＣＤＣ症例定義によって定義されるか、または１９９４年のＣＦＳに関するＣＤＣ症例定義によって定義される慢性疲労症候群（ＣＦＳ）の診断を満たさねばならない。
３．以下の、その全てが、疾患の３ヶ月間以上連続する期間中に継続または再発する必要があり、ＣＯＶＩＤ－１９の症状の発症の前にあってはならない「ロングホーラー」症状のうちの少なくとも１つ以上の同時発生。
ロングホーラー症状は、少なくともこの試験については、以下を含む：（１）発熱もしくは悪寒。（２）咳。（３）息切れもしくは呼吸困難。（４）味覚もしくは嗅覚の新たな喪失。（５）胸痛。
ＣＯＶＩＤ－１９の診断は、ＣＦＳについてのＣＤＣ症例定義を満たしている患者を除外しない。軽症のＣＯＶＩＤ－１９症状を有するか、またはＣＯＶＩＤ－１９症状を有さない多くの患者は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在について検査しなかったので、「ロングホーラー」とも呼ばれるＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有する多くの患者は、陽性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２検査結果の記録を有さないであろう。これらの症例では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２についての陽性の血清抗体検査で十分であろう。
結果
本発明者らの試験は進行中であり、アンプリゲン（登録商標）の形態のｔｄｓＲＮＡの１回目の投与が、２０２１年１月に少なくとも行った。１２週後の我々の最初の所見を、表３ならびに図１で下記に示す。表３では、「ＰＣＣＦ症状」は、「Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状」と同じである。Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ問診票重症度は、以下の通りである：０はなしである。１～３は、軽度と見なされる。４～６は中等度と見なされ、７～１０は重度と見なされる。ベースライン時の質問は、＝２以上の値で行われた。データは、患者の試験データの概略に基づいている。１回目の投与は２０２１年１月４日に行われ、現在の投与量は、週に２回投与される４００ｍｇである。初回用量は、１週目および２週目に週に２回投与される１回の投与当たり２００ｍｇ（４００ｍｇ／対象／週）であった。この用量は、３週目から週に２回投与される１回の投与当たり４００ｍｇ（８００ｍｇ／対象／週）に漸増され、試験の１２週目に入った現在の投与量は、週に２回投与される１回の投与当たり４００ｍｇ（８００ｍｇ／対象／週）である。
Figure 2023529851000008
＊Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ問診票重症度は、以下の通りである：０はなしである。１～３は、軽度と見なされる。４～６は中等度と見なされ、７～１０は重度と見なされる。ベースライン時の質問は、＝２以上の値で行われた。
－統計分析を、上記データで実施し、この分析を、以下の表４に示す。
Figure 2023529851000009
全ての１１の症状についての０．０５未満のＰ値（両側）に基づくと、その結果は、１２週の治療後のＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ患者におけるＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状の有意な低減を示している。
いくつかの個々の症状の結果は、非常に劇的である。データから明らかなように、１２週目までに、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄの有害な症状は有意に減少した。処置前からのＢＳＬ平均を１２週目の値と比較すると、いくつかの大幅な改善が見られる。例えば、運動不能もしくは活動できないことは、１０から７に低下し、疲労は、９．５から６に低下し、集中力もしくは集中の低下は、６から３に低下し、頭痛は、５から３に低下し、頻脈は、４．５から２に低下し、吐き気もしくは嘔吐は、３．５から０に低下し、下痢は、２から１に低下し、喉の痛みは、２から１に低下した。全ての症状の平均は、４．７３から３に低下した。このデータは、ｔｄｓＲＮＡの投与が、ＬＯＮＧ Ｃｏｖｉｄ患者における少なくとも１つのＬＯＮＧ Ｃｏｖｉｄ症状の低減に対して有益な効果を有することを明確に示している。
［実施例５］ｔｄｓＲＮＡの経鼻投与
アンプリゲン（登録商標）は、自然免疫抗ウイルス応答を誘発する明確に定義された選択的Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）アゴニストである。アンプリゲンは、臨床試験およびコンパッショネート使用制度において、およそ１００，０００回分静脈内投与されている。その上、アンプリゲンのユニバーサルインフルエンザアジュバントとしての鼻腔内投与は、忍容性が高いことが見出されている。
ＴＬＲ３は、鼻および鼻咽頭を含むヒト気道上皮細胞において高レベルで発現される。ＴＬＲ３は、コロナウイルスを含む多くの呼吸器病原体に対する自然免疫応答を刺激するための病原体認識受容体として機能する。高度に特異的なＴＬＲ３アゴニストとして、アンプリゲンは、抗ウイルス活性および免疫調節活性の両方を及ぼすＩ型インターフェロンの産生を刺激する。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のヒト感染の経路は、主に、鼻上皮への侵入によるものと考えられている。アンプリゲンを一日おきに鼻腔内投与することによって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を、侵入の時点で阻止することができ、したがって、肺感染、またはＣＯＶＩＤ－１９疾患の中等症に進行する可能性ははるかに低くなると考えられる。これらの特性により、アンプリゲンは、ＣＯＶＩＤ－１９に対する早期治療戦略および（曝露後）の予防のために開発すべき有力な候補となっている。アンプリゲンは、ウイルスのタンパク質または特定の核酸配列に結合することによって作用しないために、病原性コロナウイルス（ＣｏＶ）または他の呼吸器ウイルスによる潜在的な将来の発生のために開発することもできる。
健康なボランティアにおいて一日おきに１３日間のアンプリゲンの繰り返し鼻腔内投与（７回投与）の安全性、忍容性、および生物活性を評価するために、第Ｉ相試験が進行中である。この試験は、ＣＯＶＩＤ－１９およびその他の肺ウイルス疾患に対する可能性のある治療方法としてのアンプリゲンのさらなる開発のために実施された。
組入れ基準は以下の通りであった：１．あらゆる義務付けられた試験手順の前にインフォームドコンセントに署名していること。２．１８～７０歳（スクリーニング時が含まれる）の年齢の男性または女性対象。３．１８～３２ｋｇ／ｍ２（スクリーニング時を含める）のボディマス指数（ＢＭＩ）および最低でも５０ｋｇの体重を有すること。４．参加者は、病歴、スクリーニング時に実施される身体検査、バイタルサイン、ＥＣＧおよび臨床検査評価によって確認されるように、治験責任医師の臨床の判断において健康である必要がある。５．対象が妊娠の可能性のある女性または男性である場合、試験処置の最後の投与後９０日まで、試験中に効果的な避妊を遵守する意思があること。６．治験責任医師と十分なコミュニケーションをとり、試験制限に準拠する意思があること。
除外基準は以下の通りであった：１．試験の実施を妨害する可能性があるか、またはその処置が妨害し得る、あるいは治験責任医師の意見において対象に許容できないリスクをもたらす活動性もしくは慢性の疾患または状態の証拠があること。２．臨床検査結果（肝臓および腎臓パネル、全血球計算、化学パネルならびに尿検査を含む）において、治験責任医師によって判断される、臨床的に重要な異常があること。３．スクリーニング時に、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、Ｃ型肝炎抗体（ＨＣＶａｂ）、または人免疫不全ウイルス抗体（ＨＩＶａｂ）が陽性であること。４．最初の処置を施す前の３日間の期間での気道感染（インフルエンザおよび風邪の症状を含む）またはいずれかの発熱性疾患（＞摂氏３８℃）があること。５．ベースラインでの鼻ぬぐい液に対する呼吸器パネルによって決定される呼吸器ウイルス感染の存在（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＰＣＲ検査の陽性を含む）。６．成人期に慢性呼吸器疾患（例えば、慢性閉塞性肺疾患、肺気腫、慢性鼻炎もしくは副鼻腔炎、喘息、または他の反応性気道疾患）の病歴があること。小児喘息および非活動性アレルギー性鼻炎（花粉症を含む）は、治験責任医師の判断で許容される。７．過去に頻繁に鼻血が出たこと。８．試験の実行に影響を与え得る重要な解剖学的な鼻の異常またはその他の鼻の異常（限定されないが、試験評価に影響を与える鼻中隔欠損、口蓋裂、鼻ポリープ、以前の鼻の焼灼または手術が含まれる）があること。９．免疫に欠陥がある（既知もしくは予想される免疫不全、疾患、または免疫系に影響を及ぼす薬剤の使用）か、または自己免疫障害の証拠（治験責任医師によって臨床的に関連すると見なされる）があること。１０．治験薬または治験医療機器に参加していること（以前の試験の最終投与がこの試験の初回投与前の９０日以内または５半減期以内であった）。１１．過去の中毒性物質（アルコール、違法薬物）の乱用、または現在の１週間に２１単位を超える飲酒、薬物乱用、鎮静剤、睡眠薬、精神安定剤、もしくは任意の他の中毒性物質の常用者であること。１２．スクリーニング時または投与前に薬物乱用が陽性であること。薬物検査が繰り返され得ること。１３．現在、またはこの１年にたばこ製品の日常的喫煙者であること。禁煙（偶発的喫煙）は、初回投与前２週間許容される。１４．初回投与前３０日以内に、全身ステロイド薬ならびに経鼻製剤を含む免疫調節薬の使用があること。１５．ＩＭＰ投与前の１週間以内の任意のワクチンを受けたか、または試験中にワクチン接種を受ける予定があること。１６．初回投与の６週間以内に、インターフェロン、インターロイキン、またはその他のサイトカインによる治療を受けたこと。１７．アンプリゲンまたはその賦形剤に対する既知の過敏症があること。１８．女性の場合、妊娠しているか、授乳しているか、または試験中に妊娠する計画があること。１９．薬物もしくはアルコール依存症または精神医学的疾患などの、治療の遵守、試験の実行または結果の解釈を妨害し得る任意の既知の要因、状態、または疾患があること。２０．ベル麻痺または顔面麻痺の他の形態の病歴があること。２１．スクリーニング前３ヶ月以内（男性）または４ヶ月以内（女性）に５００ｍＬを超える血液の提供もしくは献血をしたか、またはスクリーニングの１４日以内に血漿提供したか、または試験中に血液もしくは血液製剤を提供することを意図していること。
アンプリゲン（登録商標）の形態のｔｄｓＲＮＡを１日おきに鼻腔内投与することによって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が侵入の時点で阻止されることができ、したがって、肺感染、またはＣＯＶＩＤ－１９疾患の中等症に進行する可能性ははるかに低くなると考えられる。また、この実験は、ｔｄｓＲＮＡの鼻腔内投与の有効性を決定するであろう。
中間点における本発明者らの所見は、記載された投与量での有害事象はなく、ｔｄｓＲＮＡの投与は、全ての治験参加者において高い忍容性が示されていることである。

Claims (39)

  1. ウイルスに以前に感染し、ウイルス感染後疲労症状を患う対象を処置するための方法であって、治療有効量の、治療用二本鎖ＲＮＡ ｔｄｓＲＮＡを含む組成物を対象に投与することを含み、
    ｔｄｓＲＮＡが、
    ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＵ）ｎ （式１)；
    ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＧ）ｎ （式２)；
    ｒＡｎ・ｒＵｎ （式３)；
    ｒＩｎ・ｒＣｎ （式４)；および
    堅牢ｄｓＲＮＡ （式５)；
    ［式中、ｘは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、４～２９、４～３０、１４～３０、１５～３０、１１～１４、および３０～３５からなる群から選択される少なくとも１つの１つまたは複数である］
    からなる群から選択される少なくとも１つである、方法。
  2. ウイルスが、インフルエンザウイルス；アデノウイルス；ヘルペスウイルス；ライノウイルス；呼吸器合胞体ウイルス；コロナウイルス；エボラウイルス；西ナイルウイルス；ジカウイルス；Ｈ５型インフルエンザ；Ｈ７型インフルエンザ；Ｈ５Ｎ１型インフルエンザ、西ナイルウイルス；ジカウイルス；ヒトコロナウイルス２２９Ｅ（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ）；ヒトコロナウイルスＯＣ４３（ＨＣｏＶ－ＯＣ４３）；重症急性呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）；ヒトコロナウイルスＮＬ６３（ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎコロナウイルス）；ヒトコロナウイルスＨＫＵ１；中東呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、新型コロナウイルス２０１２、ＨＣｏＶ－ＥＭＣ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２；Ａ型インフルエンザ；Ｂ型インフルエンザ；Ｈ１Ｎ１型インフルエンザ；Ｈ３Ｎ２型インフルエンザ；Ｈ７Ｎ９型インフルエンザ；Ｈ５Ｎ６型インフルエンザ；Ｈ１０Ｎ８型インフルエンザ；Ｈ９Ｎ２型インフルエンザ；Ｈ６Ｎ１型インフルエンザ；これらの変異体；これらの株；これらの突然変異体；これらの型；これらの亜型；これらの系統；これらの系統群；およびこれらの亜系統群からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。
  3. ウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  4. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＢ．１．１．７変異体（別名２０Ｉ／５０１Ｙ．Ｖ１ 懸念される変異体（ＶＯＣ）２０２０１２／０１）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＢ．１．３５１変異体（別名２０Ｈ／５０１Ｙ．Ｖ２）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＰ．１変異体（別名２０Ｊ／５０１Ｙ．Ｖ３）；Ｂ．１．４２７、およびＢ．１．４２９からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項３、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  5. ウイルス感染後疲労が、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤである、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  6. 対象が、
    （１）
    重症疲労を含む疲労、
    疲労による運動または活動不能、および
    疲労による低運動耐容能
    からなる群から選択される少なくとも１つの症状；
    ならびに
    （２）
    息切れまたは呼吸困難、持続性胸痛または胸部圧迫感、咳、心臓の動悸、下痢、嗅覚の部分または完全喪失、頻脈、脱毛、視界不良、手足の神経障害、味覚の部分または完全喪失、吐き気または嘔吐、耳詰まり、ドライアイ、身震いまたは震え、飛蚊症または閃光、発疹、耳鳴症または耳鳴り、味覚の変化、皮膚の乾燥または剥離、幻嗅、肋軟骨炎、血中酸素濃度低下、ＣＯＶＩＤ指先、鵞口瘡、呼吸困難、喉奥の痰、持続する喉の渇き、筋痙攣、高熱不耐性、異常低温、肺の低温火傷感、甲状腺腫または喉の詰まり、乾燥頭皮またはふけ、貧血、甲状腺隆起、乾燥症候群、赤眼、味覚異常、痰産生、食欲不振、空間識失調、筋肉痛、認知障害、ブレーンフォグ、集中障害、思考障害、寒気、汗、睡眠障害、筋肉または全身の痛み、集中または注目の困難、頭痛、睡眠困難、不安、記憶障害、めまい、関節痛、咽頭痛、寝汗、熱または寒気、鼻閉または鼻水、悲観、逆流または胸焼け、症状の変化、腹痛、腰痛、前屈による息切れまたは疲労、体重増加、こむら返り、通常以上の睡眠、上背部の痛み、神経感覚、鋭いおよび突然の胸痛、精神錯乱、感覚過敏、体重減少、後鼻漏、喉の渇き、高血圧、手足の膨張、口内痛または舌痛、頸筋痛、のぼせ、四肢の骨痛、皮膚灼熱感、後頭神経の基底部での過度の圧力、リンパ節の腫大、脳圧、腎臓痛、血圧のスパイク、手または手首の痛み、血管拡張、肋骨基底部における中背部痛、灼熱感、頭皮の痛み、顎痛、不整脈、唇の荒れまたは乾燥、足痛、目の麦粒腫または感染、低血圧、腎臓の問題または尿タンパク、尿路感染症、ホルモンの不均衡、激しい人格変化、過剰唾液分泌を伴う胃食道逆流性疾患、ヘルペス感染症、ＥＢＶ感染症、三叉神経痛、リンパ節周辺の首両側拍動、気絶、悲観、胸痛、鼻炎、および筋痛
    からなる群から選択される少なくとも４つの症状
    を含む、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤ症状を示す、請求項５、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  7. 対象が、
    （ａ）対象は、ＣＯＶＩＤ－１９を有する、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在が以前に診断された、またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の血清抗体試験が陽性である；
    （ｂ）対象は、少なくとも３ヶ月間、慢性疲労症候群（ＣＦＳ）の１９８８または１９４４ ＣＤＣ症例定義によって定義されるＣＦＳの診断に見合うが、ＣＦＳが（ａ）に先行しない；
    （ｃ）対象は、連続３ヶ月またはそれ以上の病気の間、持続または再発する、少なくとも１つまたはそれ以上のＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状を同時発生し、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状が（ａ）に先行せず、Ｌｏｎｇ Ｃｏｖｉｄ症状が、疲労；労作後の倦怠感；頭痛；睡眠障害；記憶障害；集中障害；ブレーンフォグ；熱；寒気；咳；息切れ；呼吸困難；味覚の喪失；臭覚の喪失；および胸痛からなる群から選択される少なくとも１つである
    によって規定されるＬｏｎｇ Ｃｏｖｉｄを有する、請求項５、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  8. 対象が、
    抗ウイルス抗体に血清反応陽性である；
    抗ウイルス抗体に血清反応陰性である；
    投与工程中にウイルスに感染しない；
    投与工程中にウイルスに感染する；または
    投与工程中にウイルス感染のために入院しない、
    請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  9. 対象が、ウイルスに感染する前に、ウイルス感染後疲労症状を有さなかった、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  10. 対象が、ウイルスに感染する前に、少なくとも１年、２年、３年、４年、または５年間、ウイルス感染後疲労症状を有さなかった、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  11. 対象が、ウイルスに感染中または感染後に、ウイルス感染後疲労症状を発症する、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  12. ウイルス感染後疲労症状が、感染から投与工程まで、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、１年、２年、および２年以上からなる群から選択される期間続く、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  13. 対象が、哺乳動物、好ましくはウイルスの宿主、最も好ましくはヒトである、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  14. ｔｄｓＲＮＡの少なくとも９０ｗｔ％が、４０塩基対；５０塩基対；６０塩基対；７０塩基対；８０塩基対；および３８０塩基対からなる群から選択されるサイズより大きい；または、
    ｔｄｓＲＮＡの少なくとも９０ｗｔ％が、５０，０００塩基対；１０，０００塩基対；９０００塩基対；８０００塩基対；７０００塩基対；および４５０塩基対からなる群から選択されるサイズより小さい、
    請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  15. ｎが、４０～５０，０００；４０～４０，０００；５０～１０，０００；６０～９０００；７０～８０００；８０～７０００；および３８０～４５０からなる群から選択される値を有する数である、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  16. ｎが、４０～４０，０００である；
    ｔｄｓＲＮＡが、二重ＲＮＡ鎖のらせんの回転数約４～約４０００を有する；または
    ｔｄｓＲＮＡが、
    ２ｋＤａ～３０，０００ｋＤａ；
    ２５ｋＤａ～２５００ｋＤａ；および
    ２５０ｋＤａ～３２０ｋＤａ
    からなる群から選択される分子量を有する、
    請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  17. ｔｄｓＲＮＡが、
    ｒＩｎ・リボ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ；および
    堅牢ｄｓＲＮＡ
    を含む、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  18. 堅牢ｄｓＲＮＡが、
    ｒ（Ｃ４－２９Ｕ）ｎ、ｒ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ、またはr（Ｃ１２Ｕ）ｎから構成される一本鎖；および
    ｒ（Ｉ）から構成される逆鎖
    を有し、
    一本鎖および逆鎖が、ウラシル塩基の位置で塩基対合せず、
    一本鎖および逆鎖が、部分的にハイブリダイズしている、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  19. 堅牢ｄｓＲＮＡが、約２５０ｋＤａ～５００ｋＤａの分子量を有し；
    堅牢ｄｓＲＮＡの各鎖が、約４００～８００塩基対長であり；または
    堅牢ｔｄｓＲＮＡが、二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数約３０～１００もしくは３０～６０を有する、
    請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  20. ｔｄｓＲＮＡが、ハイブリダイズしたポリ（リボイノシン酸）およびポリ（リボシトシン酸）鎖（ｒＩｎ・ｒＣｎ）を分離することができる条件下での変性に耐性がある堅牢ｄｓＲＮＡである、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  21. 堅牢ｄｓＲＮＡが、熱ストレス下で酵素的に活性である単離された二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）であり、前記単離されたｄｓＲＮＡが、
    約２５０ＫＤａ～約５００ＫＤａの分子量、４００～８００塩基対、または二重鎖ＲＮＡのらせんの回転数３０～６０を有する各鎖、
    ポリ（リボシトシン４－２９ウラシル酸）から構成される一本鎖およびポリ（リボイノシン酸）から構成される逆鎖
    を含み、
    ２つの鎖が、ウラシル塩基の位置で塩基対合せず、
    ２つの鎖が、シトシン塩基の位置で塩基対合し、
    前記鎖が、部分的にハイブリダイズしている、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  22. ｔｄｓＲＮＡが、０．１～１２ｍｏｌ％堅牢ｄｓＲＮＡを含み、好ましくは、ｔｄｓＲＮＡが０．１～５ｍｏｌ％堅牢ｄｓＲＮＡを含む、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  23. 組成物が、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  24. ｔｄｓＲＮＡが、安定化ポリマーと複合体形成している、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  25. 安定化ポリマーが、
    ポリリジン；ポリリジンおよびカルボキシメチルセルロース；ポリアルギニン；ポリアルギニンおよびカルボキシメチルセルロース；ならびにこれらの組合せ
    からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項２４、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  26. 投与が、急性疾患の原発性ＣＯＶＩＤ－１９症状が消散された後に実施される、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  27. 急性疾患のＣＯＶＩＤ－１９症状が、熱、寒気、咳、息切れ、呼吸困難、疲労、筋肉痛、全心痛、頭痛、味覚の喪失、臭覚の喪失、咽頭痛、充血、鼻水、吐き気、嘔吐、下痢、およびこれらの組合せからなる群から選択される、請求項２６、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  28. 投与が、対象がウイルスに感染した後に、３０日、５０日、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、１年、２年、および２年以上からなる群から選択される期間、実施される、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  29. 投与が、全身投与；静脈内投与；皮内投与；皮下投与；筋肉内投与；鼻腔内投与（肺気道投与）；鼻腔内投与および経口投与；腹腔内投与；頭蓋内投与；膀胱内投与；経口投与（口から、口からの呼吸により）；局所投与；吸入投与；エアロゾル投与；気道内投与；気管投与；気管支投与；滴下投与；気管支滴下；気管内投与；粘膜投与；乾燥粉末投与；噴霧投与；接触投与；スワブ投与；気管内沈着投与；気管支内沈着投与；気管支鏡沈着投与；肺内投与；鼻道投与；呼吸用固形投与；呼吸用液体投与；および乾燥粉末吸入投与からなる群から選択される、少なくとも１つの投与方法である、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  30. 鼻腔内投与が、鼻道への投与；鼻粘膜上皮への投与；肺への投与；吸入による投与；咽頭への投与；気管支への投与；肺胞への投与；吸入による投与；および経鼻滴下による投与からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項２９、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  31. 投与が、気道組織；鼻組織；口腔組織；肺胞組織；咽頭組織；気管組織；気管支組織；気管分岐部組織；気管支組織；細気管支組織；肺組織；肺葉組織；肺胞組織；鼻道組織；鼻粘膜上皮組織；喉頭組織；気管支組織；吸入組織；上皮細胞；気道上皮細胞；線毛細胞；杯細胞；無線毛細胞；基底細胞；肺細胞；鼻細胞；気管細胞；気管支細胞；気管支上皮細胞；肺胞上皮細胞；および静脈洞細胞からなる群から選択される、少なくとも１つの組織または細胞への投与である、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  32. 投与が、ｔｄｓＲＮＡを含むデリバリーシステムによって実施される、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  33. デリバリーシステムまたは医療デバイスが、ネブライザー；噴霧器；鼻腔用ポンプ；スクイーズボトル；鼻腔用スプレー；シリンジ噴霧器またはプランジャー噴霧器（接続した噴霧器またはノズルに圧力を提供するシリンジ）；鼻腔用エアロゾルデバイス；調節性粒子分散デバイス；鼻腔用噴霧デバイス；圧力駆動ジェットネブライザー；超音波ネブライザー；呼吸による鼻腔用デリバリーデバイス；微粒化鼻腔用投薬デバイス；吸入器；粉体ディスペンサー；乾燥粉末発生器；エアロゾルライザー；肺内エアロゾルライザー；超小型エアロゾルライザー；噴霧剤ベースの定量噴霧式吸入器；乾燥粉末吸入デバイス；滴下デバイス；鼻腔内滴下デバイス；膀胱内滴下デバイス；スワブ；ピペット；鼻洗浄デバイス；鼻うがい；エアロゾルデバイス；定量エアロゾルデバイス；加圧投薬デバイス；粉末エアロゾルデバイス；スプレーエアロゾルデバイス；スプレーデバイス；定量スプレーデバイス；および懸濁スプレーデバイスからなる群から選択される少なくとも１つである、請求項３２、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  34. ｔｄｓＲＮＡが、１日あたり約２５ｍｇ～７００ｍｇのｔｄｓＲＮＡ；１日あたり２０ｍｇ～２００ｍｇのｔｄｓＲＮＡ；１日あたり５０ｍｇ～１５０ｍｇのｔｄｓＲＮＡ；または１日あたり８０ｍｇ～１４０ｍｇのｔｄｓＲＮＡの投与量で投与される、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  35. ｔｄｓＲＮＡが、１日あたり１回投与、２日毎に１回投与、３日毎に１回投与、４日毎に１回投与、５日毎に１回投与、１週間に１回投与、１週間に２回投与、１週間に３回投与、２週間毎に１回投与、３週間毎に１回投与、４週間毎に１回投与、および１ヶ月に１回投与からなる群から選択される頻度で投与される、請求項１、または前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
  36. ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＵ）ｎ （式１)；
    ｒＩｎ・ｒ（ＣｘＧ）ｎ （式２)；
    ｒＡｎ・ｒＵｎ （式３)；
    ｒＩｎ・ｒＣｎ （式４)；および
    堅牢ｄｓＲＮＡ （式５)；
    ［式中、ｘは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、４～２９、４～３０、１４～３０、１５～３０、１１～１４、および３０～３５からなる群から選択される少なくとも１つである］
    からなる群から選択される少なくとも１つを含む、対象においてウイルス感染後疲労を処置するまたはその症状を緩和するための組成物。
  37. ｔｄｓＲＮＡが、
    ｒＩｎ・リボ（Ｃ１１－１４Ｕ）ｎ；および
    堅牢ｄｓＲＮＡ
    からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項３６、または前記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
  38. ウイルス感染後疲労が、Ｌｏｎｇ ＣＯＶＩＤである、請求項３６、または前記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
  39. ウイルスが、インフルエンザウイルス；アデノウイルス；ヘルペスウイルス；ライノウイルス；呼吸器合胞体ウイルス；コロナウイルス；エボラウイルス；西ナイルウイルス；ジカウイルス；Ｈ５型インフルエンザ；Ｈ７型インフルエンザ；Ｈ５Ｎ１型インフルエンザ；西ナイルウイルス；ジカウイルス；ヒトコロナウイルス２２９Ｅ（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ）；ヒトコロナウイルスＯＣ４３（ＨＣｏＶ－ＯＣ４３）；重症急性呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）；ヒトコロナウイルスＮＬ６３（ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎコロナウイルス）；ヒトコロナウイルスＨＫＵ１；中東呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、新型コロナウイルス２０１２、ＨＣｏＶ－ＥＭＣ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２；Ａ型インフルエンザ；Ｂ型インフルエンザ；Ｈ１Ｎ１型インフルエンザ；Ｈ３Ｎ２型インフルエンザ；Ｈ７Ｎ９型インフルエンザ；Ｈ５Ｎ６型インフルエンザ；Ｈ１０Ｎ８型インフルエンザ；Ｈ９Ｎ２型インフルエンザ；Ｈ６Ｎ１型インフルエンザ；これらの変異体；これらの株；これらの突然変異体；これらの型；これらの亜型；これらの系統；これらの系統群；およびこれらの亜系統群からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項３６、または前記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6130206A (en) * 1980-07-07 2000-10-10 Hem Research, Inc. Treating viral infections associated with chronic fatigue with dsRNA
WO2005009337A2 (en) * 2003-05-16 2005-02-03 Hemispherx Biopharma Treating severe acute respiratory syndrome
JP5689413B2 (ja) * 2008-05-21 2015-03-25 ライニッシュ フリードリッヒ−ウィルヘルムズ−ユニバーシタット ボン 平滑末端を有する５’三リン酸オリゴヌクレオチドおよびその使用
US20110196020A1 (en) * 2008-10-10 2011-08-11 Carter William A Treatment of chronic fatigue syndrome using selective agonists of toll-like receptor 3 (tlr3)

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