JP2023524445A - 医薬製剤 - Google Patents

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Abstract

本明細書では、安定性の高濃度の二重特異性抗体コンストラクト製剤であって、様々な時点に貯蔵条件下で製剤中の二重特異性抗体コンストラクトの2%未満の高分子量種を有する製剤について記載される。本開示は、高濃度(即ち、10mg/mL超)の二重特異性抗体コンストラクト(例えば、BiTE(登録商標)分子)を含む安定性の製剤であって、製剤中のおよそ3%未満の二重特異性抗体コンストラクトが高分子量(HMW)種として存在する安定性の製剤を提供する。高濃度の抗体を含む製剤は、所望ではあるものの、貯蔵条件下で安定化させるのは概して困難である。驚くべきことに、予想されるより高濃度で二重特異性抗体コンストラクトを含む本開示による製剤は、保存剤若しくは安定剤の存在を必要とせずに、安定性であることが見出された。

Description

本開示は、安定性の高濃度の二重特異性抗体コンストラクト製剤の分野に含まれる。
参照による組み込み
参照によりその全体が組み込まれるのは、本明細書と同時に提出され、下記の:2021年4月28日に作製され、サイズが345,249バイトの「54911_Seqlisting.txt」と命名された、ASCII(テキスト)ファイルと同定された、コンピュータにより読み込み可能なヌクレオチド/アミノ酸の配列表である。
商業規模での精製プロセスの進歩により、現在では、組み換えタンパク質等のタンパク質系医薬品は、最初の製造時には高い純度で得ることができる。しかしながら、タンパク質は、辛うじて安定であるにすぎず、化学的にも物理的にも非常に劣化しやすい。化学的劣化とは、脱アミド、酸化、開裂、クリッピング/断片化、新たなジスルフィド架橋の形成、加水分解、異性化、又は脱グリコシル化等の共有結合を伴う修飾を指す。物理的劣化には、タンパク質のアンフォールディング、表面への望ましくない吸着、及び凝集が含まれる。これらの物理的及び化学的な不安定性への対処は、タンパク質医薬品の開発において最も難しい課題の1つである(Chi et al.,Pharm Res,Vol.20,No.9,Sept 2003,pp.1325-1336、Roberts,Trends Biotechnol.2014 Jul;32(7):372-80)。
例えばFc分子等の半減期延長形式を含む二重特異性T細胞エンゲージャー(BiTE(登録商標))等の半減期延長性抗体コンストラクトは、タンパク質凝集及び/又は他の劣化現象から保護されるべきである。BiTE(登録商標)分子のタンパク質凝集が問題となるのは、それが治療用タンパク質の生物学的活性を弱めることがあるためである。更に、BiTE(登録商標)分子の凝集は、最終生成物から凝集体を除去するために必要とされる綿密な精製工程により生成物収率を低下させる可能性がある。より最近では、凝集したタンパク質(ヒト化タンパク質又は完全なヒトタンパク質であっても)の存在により、患者は、活性タンパク質モノマーに対する免疫反応を起こすことになり、その結果、中和抗体及び薬物耐性の形成又は他の有害な副作用がもたらされるというリスクが顕著に増大する可能性があるといった懸念及びエビデンスも増加してきた(Mahler J Pharm Sci.2009 Sep;98(9):2909-34)。
[0005]
凝集は、高濃度の製剤において観察される主要なタイプの物理的不安定性である。凝集は、最初は天然の折り畳まれたタンパク質から高分子量種(HMW)への集合である。現時点では、タンパク質凝集体は、主に下流処理のポリッシング工程において不純物として除去される。しかしながら、高レベルのHMW種の場合には、顕著な量のHMW除去により、かなりの収率損失が生じるだけでなく、堅牢な下流プロセスの設計が困難なものとなる(Chi et al.,Pharm Res,Vol.20,No.9,Sept 2003,pp.1325-1336)。
Chi et al.,Pharm Res,Vol.20,No.9,Sept 2003,pp.1325-1336 Roberts,Trends Biotechnol.2014 Jul;32(7):372-80
本開示は、高濃度(即ち、10mg/mL超)の二重特異性抗体コンストラクト(例えば、BiTE(登録商標)分子)を含む安定性の製剤であって、製剤中のおよそ3%未満の二重特異性抗体コンストラクトが高分子量(HMW)種として存在する安定性の製剤を提供する。高濃度の抗体を含む製剤は、所望ではあるものの、貯蔵条件下で安定化させるのは概して困難である。驚くべきことに、予想されるより高濃度で二重特異性抗体コンストラクトを含む本開示による製剤は、保存剤若しくは安定剤の存在を必要とせずに、安定性であることが見出された。
幾つかの実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤である。幾つかの実施形態では、2.5%以下(例えば、2.5%、又は2.0%、又は1.9%、又は1.8%、又は1.7%、又は1.6%、又は1.5%、又は1.4%、又は1.3%、又は1.2%、又は1.1%、又は1.0%、又は0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、凍結乾燥製剤中のHMW種として存在する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のHMW種の量は、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に1%未満、(例えば、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~0.4%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、又は0.4%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のHMW種の量は、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に1%未満、(例えば、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、凍結乾燥製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。
幾つかの実施形態では、2%未満、(例えば、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1.4%、1.3%、1.2%、1.1%、1%、又は0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、凍結乾燥製剤中の低分子量(LMW)種として存在する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に、2%未満、(例えば、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1.4%、1.3%、1.2%、1.1%、1%、又は0.5%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に、製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、1カ月以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、1%未満、(例えば、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。
幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のインタクトなBiTE(登録商標)分子(即ち、メインピーク種)のパーセントは、製剤中の全タンパク質含量の95%超である。
幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、1カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも1カ月の貯蔵中に、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%、又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、3カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも3カ月の貯蔵中に、およそ0.0%~0.2%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、少なくとも6カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも6カ月の貯蔵中におよそ0.0%~0.4%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%)増加する。
幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、少なくとも1カ月、3カ月及び6カ月の約4℃での貯蔵後に、インタクトなBiTE(登録商標)分子のパーセントは、貯蔵中の期間中の全タンパク質含量の95%超である。
幾つかの実施形態では、製剤は、液体製剤である。幾つかの実施形態では、3%未満(例えば、2.5%、又は2%、又は1.5%、又は1%、又は0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、液体製剤中のHMW種として存在する。幾つかの実施形態では、液体製剤中のHMW種の量は、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は1カ年)の4℃での貯蔵後に3%未満(例えば、3%、2.5%、2%、1%、又は0.5%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は1カ年)の4℃での貯蔵後に、製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~1%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%、又は0.7%、又は0.8%、又は0.9%、又は1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、液体製剤中のHMW種の量は、5%未満(例えば、4.5%、又は4%、又は3.5%、又は3%、又は2.5%、又は2%、又は1.5%、又は1%、又は0.5%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、液体製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~5%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%、又は0.7%、又は0.8%、又は0.9%、又は1%、又は1.5%、又は2%、又は2.5%、又は3%、又は3.5%、又は4%、又は4.5%又は5%)増加する。
幾つかの実施形態では、2%未満、(例えば、1.9%、又は1.8%、又は1.7%、又は1.6%、又は1.5%、又は1.4%、又は1.3%、又は1.2%、又は1.1%、又は1%、又は0.9%、又は0.8%、又は0.7%、又は0.6%、又は0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、液体製剤中の低分子量(LMW)種として存在する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は12カ月)の4℃での貯蔵後に、液体製剤中のLMW種の量は、2%未満、(例えば、1.9%、又は1.8%、又は1.7%、又は1.6%、又は1.5%、又は1.4%、又は1.3%、又は1.2%、又は1%、又は0.5%、又は0.4%、又は0.3%、又は0.2%、又は0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は12カ月)の4℃での貯蔵後に、液体製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤中のLMW種の量は、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月、又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、7%未満、(例えば、6%、又は5%、又は4%、又は3%、又は2%、又は1%、又は0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月、又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%、又は0.8%、又は0.9%、又は1%、又は1.5%、又は2%、又は3%、又は5%、又は6%、又は7%)増加する。
幾つかの実施形態では、液体製剤中のインタクトなBiTE(登録商標)分子(即ち、メインピーク種)のパーセントは、製剤中の全タンパク質含量の96%超である。
幾つかの実施形態では、液体製剤は、1カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~0.4%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤は、3カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも3カ月の貯蔵中に、およそ0.0%~0.3%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%、又は0.3%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤は、6カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも6カ月の貯蔵中に、およそ0.0%~0.6%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤は、12カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも12カ月の貯蔵中に、およそ0.0%~0.2%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%)増加する。
幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、1カ月、3カ月、6カ月、及び12カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、インタクトなBiTE(登録商標)分子のパーセントは、全タンパク質含量の96%超である。
幾つかの実施形態では、抗体結合タンパク質は、標的細胞の表面抗原に結合する第1の結合ドメイン、T細胞の表面上のヒトCD3に結合する第2の結合ドメインを含む二重特異性抗体コンストラクトである。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、アミノからカルボキシルの順番で、ヒンジ-CH2ドメイン-CH3ドメイン-リンカー-ヒンジ-CH2ドメイン-CH3ドメインを含む第3のドメインを更に含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1及び第2の結合ドメインのそれぞれは、VH領域及びVL領域を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、単鎖抗体コンストラクトである。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、例えばCDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、CLDN18.2又はMUC17等の1つの標的細胞表面抗原に結合する。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、(a)配列番号24~29、(b)配列番号34~39、(c)配列番号78~83、(d)配列番号10~15、(e)配列番号46~51、(f)配列番号88~93、(g)配列番号67~72、(h)配列番号56~61、(i)配列番号112~117、(j)配列番号100~105、(k)配列番号148~153、配列番号157~162、配列番号166~171、若しくは配列番号175~180、(l)配列番号132~137、又は(m)配列番号123~128に示した1セットの6CDRを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号30、40、84、16若しくは17、52、94、73、62、118、154、163、172、181、106、138、143、又は129に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、又は100%同一)であるアミノ酸配列を含むVH領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号30、40、84、16若しくは17、52、94、73、62、118、154、163、172、181、106、138、143、又は129に示したアミノ酸配列を含むVHを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号31、41、85、18、19、53、95、74、63、119、155、164、173、182、107、139、144、又は130に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、又は100%同一)であるアミノ酸配列を含むVL領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号31、41、85、18、19、53、95、74、63、119、155、164、173、182、107、139、144、又は130に示したアミノ酸配列を含むVLを含む。
幾つかの実施形態では、第1の結合ドメインは、(a)配列番号30に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号31に示したVL領域;(b)配列番号40に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号41に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(c)配列番号84に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号85に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(d)配列番号16又は17に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号18又は19に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(e)配列番号52に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号53に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(f)配列番号94に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号95に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(g)配列番号73に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号74に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(h)配列番号62に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号63に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(i)配列番号118に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号119に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(j)配列番号154、163、172又は181に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号155、164、173又は182に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(k)配列番号106に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号107に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(l)配列番号138又は143に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号139又は144に示したアミノ酸配列を含むVL領域;又は(m)配列番号129に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号130に示したアミノ酸配列を含むVL領域を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号1~6に示した1セットの6CDRを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号7に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、又は100%同一)であるアミノ酸配列を含むVH領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号7に示したアミノ酸配列を含むVHを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号8に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、又は100%同一)であるアミノ酸配列を含むVL領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号8に示したアミノ酸配列を含むVLを含む。
幾つかの実施形態では、第2の結合ドメインは、(a)配列番号7に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号8に示したアミノ酸配列を含むVL領域を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号85のアミノ酸配列を含む抗CD19可変軽鎖ドメイン及び配列番号84のアミノ酸配列を含む抗CD19可変重鎖ドメインを含むCD19に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号86のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号87に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号41のアミノ酸配列を含む抗MSLN可変軽鎖ドメイン及び配列番号40のアミノ酸配列を含む抗MSLN可変重鎖ドメインを含むMSLNに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む第2の結合ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号42のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号43、44又は45に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号74のアミノ酸配列を含む抗DLL3可変軽鎖ドメイン及び配列番号73のアミノ酸配列を含む抗DLL3可変重鎖ドメインを含むDLL3に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号75のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号76又は77に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号63のアミノ酸配列を含む抗FLT3可変軽鎖ドメイン及び配列番号62のアミノ酸配列を含む抗FLT3可変重鎖ドメインを含むFLT3に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号64のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号65又は66に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号31のアミノ酸配列を含む抗EGFRvIII可変軽鎖ドメイン及び配列番号30のアミノ酸配列を含む抗EGFRvIII可変重鎖ドメインを含むEGFRvIIIに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号32のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号33に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号95のアミノ酸配列を含む抗BCMA可変軽鎖ドメイン及び配列番号94のアミノ酸配列を含む抗BCMA可変重鎖ドメインを含むBCMAに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号96のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号98又は配列番号97に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号119又は107のアミノ酸配列を含む抗PSMA可変軽鎖ドメイン及び配列番号118若しくは106のアミノ酸配列を含む抗PSMA可変重鎖ドメインを含むPSMAに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号120又は108のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号121、122、109、110又は111に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号18又は19のアミノ酸配列を含む抗CD33可変軽鎖ドメイン及び配列番号16又は17のアミノ酸配列を含む抗CD33可変重鎖ドメインを含むCD33に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号189又は190のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号20、21、22又は23に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号53のアミノ酸配列を含む抗CDH19可変軽鎖ドメイン及び配列番号52のアミノ酸配列を含む抗CDH19可変重鎖ドメインを含むCDH19に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号54のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号55に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号155、164、173又は182のアミノ酸配列を含む抗MUC17可変軽鎖ドメイン及び配列番号154、163、172、又は181のアミノ酸配列を含む抗MUC17可変重鎖ドメインを含むMUC17に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号156、165、174又は183に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号139又は144のアミノ酸配列を含む抗cldn18.2可変軽鎖ドメイン及び配列番号138又は143のアミノ酸配列を含む抗cldn18.2可変重鎖ドメインを含むcldn18.2に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号140又は145のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号141、142、146又は147に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号130のアミノ酸配列を含む抗CD70可変軽鎖ドメイン及び配列番号129のアミノ酸配列を含む抗CD70可変重鎖ドメインを含むCD70に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号131に示したアミノ酸配列を含む。
本開示の医薬製剤は、緩衝剤を含む。幾つかの実施形態では、緩衝剤は、酢酸塩、グルタミン酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸塩又はそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態では、緩衝剤は、製剤中に約5mM~約200mM(又は約10mM~約50mM)の範囲の濃度で存在する。
本開示の医薬製剤は、糖類を含む。幾つかの実施形態では、糖類は、単糖又は二糖である。幾つかの実施形態では、糖類は、糖アルコール(例えば、ソルビトール)である。幾つかの実施形態では、糖類は、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール又はそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態では、糖類は、製剤中に約1~約15(w/V)%(又は約9~約12(w/V)%又は約5~約12(w/V)%又は約7%~約12(w/V)%)の範囲の濃度で存在する。
本開示の医薬製剤は、界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート60、ポリソルベート80、ポロキサマー188、ポロキサマー407、トリトンX-100、ポリオキシエチレン、PEG3350、PEG4000、又はこれらの組み合わせである。幾つかの実施形態では、界面活性剤は、製剤中に0.004~約0.5(w/V)%(又は約0.001~約0.01(w/V)%、又は約0.001~約0.5(w/V)%又は約0.004~約0.01(w/V)%)の範囲の濃度で存在する。
幾つかの実施形態では、製剤は、約150~約500mOsmの範囲のモル浸透圧濃度を有する。幾つかの実施形態では、製剤は、500mOsm/L未満、450mOsm/L、400mOsm/L、又は350mOsm/Lのモル浸透圧濃度を有する。幾つかの実施形態では、製剤は、等張性に近く、例えば、250~350mOsm/Lである。
幾つかの実施形態では、医薬製剤は、10mMのグルタミン酸塩、9(w/V)%のスクロース及び0.01(w/V)%のポリソルベート80を含み、ここで医薬製剤のpHは、4.2である。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、製剤中に約10mg/mL~約100mg/mLの範囲の濃度で存在する。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、製剤中に10mg/mL、11mg/mL、12mg/mL、13mg/mL、14mg/mL、15mg/mL、16mg/mL、17mg/mL、18mg/mL、19mg/mL、20mg/mL、21mg/mL、22mg/mL、23mg/mL、24mg/mL、25mg/mL、30mg/mL、35mg/mL、40mg/mL、45mg/mL、又は50mg/mLの濃度で存在する。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体は、約1000μg~約200mgの範囲の量で製剤中に存在する。
幾つかの実施形態では、本開示の医薬製剤は、液体製剤である。
別の態様では、それを必要とする対象において癌を治療する方法であって、対象に本開示の製剤を投与する工程を含む方法が記載されている。
本明細書中の様々な実施形態は、様々な状況下で「含む」という語を使用して提示される一方、関連する実施形態はまた、「~からなる」又は「本質的に~からなる」という語を使用しても説明され得ると理解されるべきである。本開示は、ある特徴を「含む」と記載された実施形態が、その特徴「からなる」実施形態を含むことを意図する。用語「1つの(a)」又は「1つの(an)」は、1つ以上を指し、例えば、「1つの免疫グロブリン分子」は、1つ以上の免疫グロブリン分子を表すと理解されることに留意されたい。そのため、用語「1つの(a)」(又は「1つの(an)」)、「1つ以上」、及び「少なくとも1つの」は、本明細書で互換的に使用され得る。
値の範囲を記載するとき、記載されている特徴は、その範囲内に見出される個々の値であり得ることもまた理解されるべきである。例えば、「約pH4~約pH6のpH」は、限定されないが、pH4、4.2、4.6、5.1、5.5等、及びそのような値の間にある任意の値であり得る。更に、「約pH4~約pH6のpH」は、目的の製剤のpHが、保管中にpH4~pH6の範囲において2pH単位で変動するという意味で解釈されるべきではなく、むしろ、溶液のpHについてその範囲内で値を選んでもよく、pHはそのpH付近で緩衝されたままであることを意味する。
用語「約」が使用される場合、列挙された数に対してその列挙された数の5%、10%、15%又はそれ以上を加えるか又は減じることを意味する。意図される実際の変動は、文脈から決定できる。
本明細書に記載される範囲の何れかにおいて、範囲の端点は、その範囲に含まれる。しかしながら、この説明はまた、小さい方の端点及び/又は大きい方の端点が除外された同じ範囲も意図する。本発明の追加の特徴及び変形形態は、図面及び詳細な説明を含む本出願の全体から当業者には明らかであろうが、そのような特徴は全て本発明の態様として意図される。同様に、本明細書に記載される本発明の特徴を組み換えて、特徴の組み合わせが本発明の態様又は実施形態として上記に具体的に記載されているかどうかにかかわらず、本発明の態様としても意図される追加の実施形態にすることができる。また、本発明にとって不可欠なものとして本明細書で説明されているそのような限定のみがそのように見なされるべきであり;本明細書に不可欠なものとして説明されていない限定を欠く本発明の変形形態は、本発明の態様として意図される。
本明細書に記載の全ての参考文献は、その全体が参照により本明細書に援用される。
0、1カ月後及び3カ月後の時点tに、4℃での貯蔵条件下で、サイズ排除超高性能液体クロマトグラフィー(SE-UHPLC)によって評価した場合に、10mMのグルタミン酸塩、9(w/V)%のスクロース、0.01(w/V)%のポリソルベート80、pH4.2を含む凍結乾燥製剤中でそれぞれが20mg/mLのBiTE(登録商標)-I、BiTE(登録商標)-C、及びBiTE(登録商標)-Gの高分子量(HMW)種のパーセントを示しているグラフである。 0、1カ月後及び3カ月後の時点tに、4℃での貯蔵条件下で、サイズ排除超高性能液体クロマトグラフィー(SE-UHPLC)によって評価した場合に、10mMのグルタミン酸塩、9(w/v)%のスクロース、0.01(w/v)%のポリソルベート80、pH4.2を含む液体製剤中でそれぞれが20mg/mLでBiTE(登録商標)-I、BiTE(登録商標)-C、及びBiTE(登録商標)-Gの高分子量(HMW)種のパーセントを示しているグラフである。
現在の治療用バイオテクノロジー製品は、高品質であり、且つ組み換えヒトタンパク質及び抗体は、内在性のヒトタンパク質に類似しているものの、タンパク質の不安定性は、依然として重要な懸念事項である。当技術分野では、治療用タンパク質における安定性の増大且つ凝集の低減が極めて必要とされており、最適化された医薬製剤がこれを行うのに役立ち得る。
通常、本明細書に記載した抗体コンストラクトは、凍結乾燥製剤中に約1mg/ml(国際公開第2018/204907号パンフレット)又は多くとも8mg/mL(国際公開第2018/141910号パンフレット)の濃度で貯蔵及び/又は使用される。より高濃度では、一般に凝集の傾向が観察される。国際公開第2018/204907号パンフレットに記載された製剤には、二重特異性抗体コンストラクトの安定化に寄与した、0.5mg/mL~20mg/mLの抗体濃度を有する保存料(例えばクロロブタノール若しくはメチルパラベン、又はベンジルアルコール)が含まれる。幾つかの例では、安定性は、製剤のpHを低下させること等の他の手段によって達成される。例えば、国際公開第2018/141910号パンフレットは、二重特異性抗体コンストラクト(5mg/mL)を含み、低pH(即ち、pH4.0)を有する製剤が、より塩基性pH(例えば、pH6以上)で同一抗体濃度を有する製剤より安定性であることを開示している。したがって、低pHは製剤の安定性に寄与した。しかしながら、本明細書で説明するように、高濃度(例えば、20mg/mL)の二重特異性抗体コンストラクト製剤(液体及び凍結乾燥の両方)は、より酸性のpHを有する保存料又は他の安定剤の添加を必要とすることなく、様々な時点に4℃及び40℃の両方で、予想外に安定性(例えば、高分子量(HMW)種のパーセントが低かった)であった。本明細書に開示した安定性の高濃度の製剤は、例えば保存料又は安定剤として作用する他の成分等の医薬製剤中の非必須成分を排除するのが有益であるため、当技術分野における公知の製剤に比して好ましい。
本開示は、高濃度の二重特異性抗体コンストラクト(例えば、BiTE(登録商標)分子)を含む安定性の製剤であって、二重特異性抗体コンストラクトのおよそ2%未満が製剤中の高分子量(HMW)種として存在する安定性の製剤を提供する。
本開示の範囲内で、用語「安定性」又は「安定化」は、医薬製剤全体の安定性に関し、また特に活性成分(例えば、二重特異性単鎖抗体コンストラクト)自体の、具体的には製剤、充填、輸送、貯蔵及び投与中の安定性に関する。「安定性製剤」は、その中の二重特異性抗体コンストラクトが本質的にその物理的及び/又は化学的完全性並びに貯蔵後及びプロセス(例えば、凍結/解凍、機械的混合及び凍結乾燥等)中の生物学的活性を維持する製剤である。タンパク質の安定性は、高分子量(HMW)種の形成、酵素活性の消失、ペプチド断片の生成及び電荷プロファイルのシフトによって測定することができる。
本明細書で使用する用語「凝集」は、例えば、ファンデルワールス力又は化学結合を介する分子間の直接的な相互引力を指す。特に、凝集は、蓄積し、塊になっているタンパク質であると理解されている。凝集体は、非晶質凝集体及びオリゴマーを含む可能性があり、典型的には高分子量(HMW)種、即ち、非凝集分子である生成物分子よりも高分子量を有する分子と呼ばれる。
本明細書で使用する用語「(タンパク質)凝集体」は、通常、所望の既定の種(例えば、モノマー)ではなく、「オリゴマー」又は「マルチマー」等の高分子量のタンパク質種を包含する。この用語は、本明細書において用語「高分子量」種及び「HMW」と互換的に使用される。タンパク質凝集体は、通常、サイズ(小型(二量体)から大型の集合体(サブビジブル粒子又は更に目に見える粒子)の範囲であり、且つナノメートル~マイクロメートルの直径範囲)、形態(ほぼ球状~線維状)、タンパク質構造(天然対非天然/変性)、分子間結合の種類(共有結合対非共有結合)、可逆性及び可溶性の点で異なり得る。可溶性凝集体は、およそ1~100nmのサイズ範囲を占め、タンパク質微粒子は、顕微鏡下でないと見えない(約0.1~100.m)及び目に見える(>100.m)範囲を占める。前述の種類のタンパク質凝集体の全ては、通常、この用語に包含される。したがって、用語「(タンパク質)凝集体」は、2つ以上のタンパク質モノマーの物理的に会合した又は化学的に結合したあらゆる種類の非天然種を指す。
本明細書で使用する用語「低分子量(LMW)」種は、二重特異性抗体コンストラクトの断片を指す。
本明細書で使用する用語「医薬組成物」は、それを必要とする対象への投与に好適な組成物に関する。用語「対象」又は「個体」又は「動物」又は「患者」は、本明細書では互換的に使用され、そのために本発明の医薬組成物の投与が望ましい任意の対象、特に哺乳動物対象を指す。哺乳動物対象としては、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、ウシ、乳牛等が挙げられるが、好ましいのはヒトである。本開示の医薬製剤は、安定しており、且つ薬学的に許容されており、即ち、この医薬製剤が投与される対象において有意な望ましくない局所的作用又は全身的作用も引き起こすことなく所望の治療効果を発揮し得る。本発明の薬学的に許容される製剤は、無菌であり得る。具体的には、用語「薬学的に許容される」は、動物(より具体的にはヒト)での使用に関して規制当局又は他の一般に認識されている薬局方により承認されており、規制当局によって承認されているものには限定されないことを意味し得る。
幾つかの実施形態では、本開示は、少なくとも10mg/mLの量で、ヒトT細胞上のCD3に結合する二重特異性抗体コンストラクト、緩衝剤、糖類、及び界面活性剤を含み、製剤が4~6の範囲のpHを有する製剤について記載する。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、CD3並びにヒトCDH19、ヒトMSLN、ヒトDLL3、ヒトFLT3、ヒトEGFRvlll、ヒトBCMA、ヒトPSMA、ヒトCD33、ヒトCD19、ヒトCD70、ヒトCLDN18.2若しくはMUC17の1つに、悪性細胞をT細胞と一過性で連結して、それにより結合した悪性細胞のT細胞媒介性殺滅を誘導するような方法で、コエンゲージする。
この製剤の様々な態様について、下記で説明する。本明細書の節の見出しの使用は、単に読解の便宜のためであり、それ自体を限定することは意図されていない。本明細書全体は、統一された開示として見なされることが意図されており、本明細書で説明されている特徴の全ての組み合わせが企図されることを理解すべきである。
抗原結合タンパク質
「抗原結合タンパク質」は、特異的な標的抗原(CD3及び/若しくはCDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、CLDN18.2又はMUC17等)に結合するドメインを含むタンパク質である。抗原結合タンパク質は、抗原結合ドメインが、抗原結合タンパク質の抗原への結合を促進する立体構造をとることを可能にする骨格又はフレームワーク部分を含む。例示的な態様では、抗原結合タンパク質は、抗体若しくは免疫グロブリン、又は抗原結合抗体断片である。
用語「抗体」は、インタクトな抗原結合免疫グロブリンを指す。「抗体」は、1つのタイプの抗原結合タンパク質である。抗体は、IgG1、IgG2、IgG3又はIgG4の何れか1つを含むIgA、IgD、IgE、IgG又はIgMの抗体であり得る。様々な実施形態では、インタクトな抗体は、2つの全長重鎖及び2つの全長軽鎖を含む。抗体は、1つの可変領域及び1つの定常領域を有する。IgG形式において、1つの可変領域は、一般に、約100~110以上のアミノ酸であり、3つの相補性決定領域(CDR)を含み、抗原認識に主に関与し、且つ異なる抗原に結合する他の抗体間で実質的に変動する。1つの可変領域は、通常、少なくとも3つの重鎖又は軽鎖のCDRを含み(Kabat et al.,1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest,Public Health Service N.I.H.,Bethesda,Md.;Chothia and Lesk,1987,J.Mol.Biol.196:901-917;Chothia et al.,1989,Nature 342:877-883)、それらは、フレームワーク領域(Kabat et al.,1991によってフレームワーク領域1~4、FR1、FR2、FR3及びFR4と呼ばれている;Chothia and Lesk,1987、前掲も参照されたい)中にある。定常領域は、抗体が免疫系の細胞及び分子を動員することを可能にする。
幾つかの実施形態では、製剤の抗体は、二重特異性抗体、即ち、2つの異なる標的(例えば、CD3及び第2の異なる標的)に結合する抗体である。
本明細書で使用する用語「二重特異性」は、2つの異なる標的抗原に結合する抗体コンストラクトを指し、即ち、それは、第1の結合ドメイン、及び第2の結合ドメインを含むが、ここで第1の結合ドメインは、1つの抗原又は標的(例えば、標的細胞の表面抗原)に結合し、第2の結合ドメインは、別の抗原又は標的(例えば、CD3)に結合する。したがって、本開示による抗体コンストラクトは、2つの異なる抗原又は標的に対する特異性を含む。用語「標的細胞の表面抗原」は、細胞によって発現され、且つ本明細書に記載される抗体コンストラクトがアクセスできるようにその細胞表面に存在する抗原性構造を指す。それは、タンパク質、好ましくはタンパク質の細胞外部分又は糖質構造、好ましくは糖タンパク質等のタンパク質の糖質構造であり得る。それは、好ましくは腫瘍抗原である。本発明は、例えば三重特異性抗体コンストラクト等の多重特異性抗体コンストラクトも包含するが、後者は、3つの結合ドメイン、又は3つより多い(例えば、4つ、5つ...)の特異性を有するコンストラクトを包含する。
本明細書で理解される二重特異性抗体及び/又は抗体コンストラクトとしては、従来型の二重特異性免疫グロブリン(例えば、BsIgG)、付加された抗原結合ドメイン(例えば、軽鎖又は重鎖のアミノ末端若しくはカルボキシ末端が、単一ドメイン抗体又は対になった抗体可変ドメイン(例えば、Fv又はscFv)等の追加の抗原結合ドメインに連結される)を含むIgG、BsAb断片(例えば、二重特異性単鎖抗体)、二重特異性融合タンパク質(例えば、エフェクター部分に融合された抗原結合ドメイン)、及びBsAbコンジュゲートが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、様々な二重特異性形式を記載し、参照して本明細書に組み込まれるSpiess et al.,Molecular Immunology 67(2)Part A:97-106(2015)を参照されたい。二重特異性コンストラクトの例としては、ダイアボディ、単鎖ダイアボディ、タンデムscFv、二重特異性T細胞エンゲージャー(BiTE(登録商標))形式(リンカーによって結合される2つの単鎖可変断片(scFv)からなる融合タンパク質)及びFab2二重特異性体並びに全長抗体を含む改変されたコンストラクトが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、全てが明示的に本明細書に組み込まれるChames&Baty,2009,mAbs 1[6]:1-9;及びHolliger&Hudson,2005,Nature Biotechnology 23[9]:1126-1136;Wu et al.,2007,Nature Biotechnology 25[11]:1290-1297;Michaelson et al.,2009,mAbs 1[2]:128-141;国際公開第2009032782号パンフレット及び国際公開第2006020258号パンフレット;Zuo et al.,2000,Protein Engineering 13[5]:361-367;米国特許出願公開第20020103345号明細書;Shen et al.,2006,J Biol Chem 281[16]:10706-10714;Lu et al.,2005,J Biol Chem 280[20]:19665-19672;並びにKontermann,2012 MAbs 4(2):182を参照されたい。
幾つかの実施形態では、本明細書に記載した製剤は、標的細胞表面抗原に結合する第1の結合ドメイン、T細胞の表面上のヒトCD3に結合する第2の結合ドメイン、及び任意選択的にアミノからカルボキシルの順にヒンジ-CH2ドメイン-CH3ドメイン-リンカー-ヒンジ-CH2ドメイン-CH3ドメインを含む第3のドメインを含む二重特異性抗体コンストラクトである。幾つかの実施形態では、第1及び第2の結合ドメインのそれぞれは、VH領域及びVL領域を含む。
本明細書で使用する用語「結合ドメイン」は、標的分子(抗原)上の所定の標的エピトープ若しくは所定の標的部位、例えばCDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、CLDN18.2若しくはMUC17及びCD3にそれぞれに(特異的に)結合する/と相互作用する/を認識するドメインを指す。第1の結合ドメイン(例えばCDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、CLDN18.2若しくはMUC17を認識する)の構造及び機能、及び好ましくは第2の結合ドメイン(CD3を認識する)の構造及び/又は機能は、抗体の例えば全長又は完全免疫グロブリン分子の構造及び/又は機能に基づき、且つ/又は抗体又はその断片の可変重鎖(VH)ドメイン及び/又は可変軽鎖(VL)ドメインに由来する。好ましくは、第1の結合ドメインは、3つの軽鎖CDR(即ち、VL領域のCDR1、CDR2及びCDR3)及び/又は3つの重鎖CDR(即ち、VH領域のCDR1、CDR2及びCDR3)の存在によって特徴付けられる。第2の結合ドメインは、好ましくは、標的結合を可能にする抗体の最小限の構造要件も含む。より好ましくは、第2の結合ドメインは、少なくとも3つの軽鎖CDR(即ち、VL領域のCDR1、CDR2及びCDR3)並びに/又は3つの重鎖CDR(即ち、VH領域のCDR1、CDR2及びCDR3)を含む。第1及び/又は第2の結合ドメインは、既存の(モノクローナル)抗体から由来のCDR配列の骨格内への移植によってではなく、ファージディスプレイ法又はライブラリースクリーニング法により作製されるか又は得られると想定されている。
幾つかの実施形態では、標的細胞の表面抗原に結合する第1の結合ドメイン及び/又はCD3εに結合する第2の結合ドメインは、ヒト結合ドメインである。少なくとも1つのヒト結合ドメインを含む抗体及び抗体コンストラクトは、齧歯類(例えばマウス、ラット、ハムスター又はウサギ)等の非ヒト可変領域及び/又は定常領域を有する抗体又は抗体コンストラクトに伴う問題の一部を回避する。このような齧歯類由来タンパク質が存在すると、抗体又は抗体コンストラクトの迅速なクリアランスをもたらす可能性があるか、又は患者による抗体又は抗体コンストラクトに対する免疫反応を発生させる可能性がある。齧歯類由来抗体又は抗体コンストラクトの使用を避けるために、齧歯類が完全ヒト抗体を産生するようにヒト抗体機能を齧歯類に導入することにより、ヒト又は完全ヒト抗体/抗体コンストラクトを生成することができる。
幾つかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、単鎖抗体コンストラクトを含む。scFvは、可変重鎖、scFvリンカー、及び可変軽鎖ドメインを含む。任意選択により、可変軽鎖のC末端は、scFvリンカーのN末端に結合され、そのC末端は、可変重鎖のN末端に結合されるが(N-vh-リンカー-vl-C)、配置は切り換えることができる(N-vl-リンカー-vh-C)。又は、可変重鎖のC末端は、scFvリンカーのN末端に結合され、そのC末端は、可変軽鎖のN末端に結合されるが(N-vl-リンカー-vh-C)、配置は切り換えることができる(N-vh-リンカー-v-C)。したがって、scFvの描写及び説明において、どちらの向きのscFvも特定的に含まれる。
本開示の抗体コンストラクトの少なくとも2つの結合ドメイン及び可変ドメイン(VH/VL)は、ペプチドリンカー(スペーサーペプチド)を含んでいても含んでいなくてもよい。用語「ペプチドリンカー」は、本発明によれば、本開示の抗体コンストラクトの一方の(可変及び/又は結合)ドメイン及びもう一方の(可変及び/又は結合)ドメインのアミノ酸配列を相互に連結するアミノ酸配列を含む。ペプチドリンカーは、第3のドメインを本発明の抗体コンストラクトの他のドメインに融合するためにも使用され得る。そのようなペプチドリンカーの必須の技術的特徴は、それがいかなる重合活性も含まないことである。特に好適なペプチドリンカーは、それらの開示が参照により全体として本明細書に組み込まれる、米国特許第4,751,180号明細書及び同第4,935,233号明細書又は国際公開第88/09344号パンフレットに記載されたペプチドリンカーである。ペプチドリンカーを使用して、本明細書に記載した二重特異性抗体コンストラクトに他のドメイン、又はモジュール、又は領域(例えば、半減期延長ドメイン)を付加させることも可能である。
幾つかの実施形態では、第3のドメインは、第1の定常領域免疫グロブリンドメインを除外する抗体の定常領域を含むポリペプチドを指す、「Fc」又は「Fc領域」又は「Fcドメイン」を含む。したがって、「Fcドメイン」は、IgA、IgD、及びIgGの最後の2つの定常領域免疫グロブリンドメイン、IgE及びIgMの最後の3つの定常領域免疫グロブリンドメイン、及びこれらのドメインに対する可動性ヒンジN末端を指す。IgA及びIgMに関して、Fcは、J鎖を含み得る。IgGに関して、Fcドメインは、免疫グロブリンドメインCγ2及びCγ3(Cγ2及びCγ3)並びにCγ1(Cγ1)とCγ2(Cγ2)の間の下位のヒンジ領域を含む。二重特異性抗体コンストラクトは、好ましくはIgG抗体(IgG1、IgG2、IgG3、及びIgG4を含むがこれらに限定されない、幾つかのサブクラスを含む)である。Fc領域の境界は、異なる場合があるが、ヒトIgG重鎖Fc領域は、通常、残基C226又はP230からそのカルボキシル末端までを含むと定義され、付番は、Kabatに記載されるようなEUインデックスに従う。幾つかの実施形態では、アミノ酸の改変は、Fc領域に対してなされ、例えば、1つ以上のFcγR受容体又はFcRn受容体への結合を変化させる。
幾つかの実施形態では、本明細書に記載した製剤は、ヒトCD3及びヒトCDH19、又はヒトCD3及びヒトMSLN、又はヒトCD3及びヒトDLL3、又はヒトCD3及びヒトFLT3、又はヒトCD3及びヒトEGFRvIII、又はヒトCD3及びヒトBCMA、又はヒトCD3及びPSMA、又はヒトCD3及びヒトCD33、又はヒトCD3及びヒトCD19、ヒトCD3及びヒトCD70、又はヒトCD3及びヒトMUC17、又はヒトCD3及びヒトCLDN18.2に結合する二重特異性抗体コンストラクトを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、(a)配列番号24~29、(b)配列番号34~39、(c)配列番号78~83、(d)配列番号10~15、(e)配列番号46~51、(f)配列番号88~93、(g)配列番号67~72、(h)配列番号56~61、(i)配列番号112~117、(j)配列番号100~105、(k)配列番号148~153、配列番号157~162、又は配列番号166~171、若しくは配列番号175~180、(l)配列番号132~137、又は(m)配列番号123~128に示した1セットの6CDRを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番30、40、84、16、17、52、94、73、62、118、154、163、172、181、106、138、143、若しくは129に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、若しくは100%同一)であるアミノ酸配列を含むVH領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号30、40、84、16、17、52、94、73、62、118、154、163、172、181、106、138、143、若しくは129に示したアミノ酸配列を含むVHを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号31、41、85、18、19、53、95、74、63、119、155、164、173、182、107、139、144、若しくは130に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、若しくは100%同一)であるアミノ酸配列を含むVL領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第1の結合ドメインは、配列番号31、41、85、18、19、53、95、74、63、119、155、164、173、182、107、139、144、若しくは130に示したアミノ酸配列を含むVLを含む。
幾つかの実施形態では、第1の結合ドメインは、(a)配列番号30に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号31に示したVL領域;(b)配列番号40に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号41に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(c)配列番号84に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号85に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(d)配列番号16若しくは17に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号18若しくは19に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(e)配列番号52に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号53に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(f)配列番号94に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号95に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(g)配列番号73に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号74に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(h)配列番号62に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号63に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(i)配列番号118に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号119に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(j)配列番号154、163、172若しくは181に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号155、164、173若しくは182に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(k)配列番号106に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号107に示したアミノ酸配列を含むVL領域;(l)配列番号138若しくは143に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号139若しくは144に示したアミノ酸配列を含むVL領域;又は(m)配列番号129に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号130に示したアミノ酸配列を含むVL領域を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号1~6に示した1セットの6CDRを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号7に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、若しくは100%同一)であるアミノ酸配列を含むVH領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号7に示したアミノ酸配列を含むVHを含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号8に示したアミノ酸配列と少なくとも90%同一(例えば、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、若しくは100%同一)であるアミノ酸配列を含むVL領域を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第2の結合ドメインは、配列番号8に示したアミノ酸配列を含むVLを含む。
幾つかの実施形態では、第2の結合ドメインは、(a)配列番号7に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号8に示したアミノ酸配列を含むVL領域を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号85のアミノ酸配列を含む抗CD19可変軽鎖ドメイン及び配列番号84のアミノ酸配列を含む抗CD19可変重鎖ドメインを含むCD19に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号86のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号87に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号41のアミノ酸配列を含む抗MSLN可変軽鎖ドメイン及び配列番号40のアミノ酸配列を含む抗MSLN可変重鎖ドメインを含むMSLNに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号42のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号43、44又は45に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号74のアミノ酸配列を含む抗DLL3可変軽鎖ドメイン及び配列番号73のアミノ酸配列を含む抗DLL3可変重鎖ドメインを含むDLL3に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号75のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号76又は77に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号63のアミノ酸配列を含む抗FLT3可変軽鎖ドメイン及び配列番号62のアミノ酸配列を含む抗FLT3可変重鎖ドメインを含むFLT3に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号64のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号65又は66に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号31のアミノ酸配列を含む抗EGFRvIII可変軽鎖ドメイン及び配列番号30のアミノ酸配列を含む抗EGFRvIII可変重鎖ドメインを含むEGFRvIIIに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号32のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号33に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号95のアミノ酸配列を含む抗BCMA可変軽鎖ドメイン及び配列番号94のアミノ酸配列を含む抗BCMA可変重鎖ドメインを含むBCMAに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号96のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号98又は配列番号97に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号119又は107のアミノ酸配列を含む抗PSMA可変軽鎖ドメイン及び配列番号118又は106のアミノ酸配列を含む抗PSMA可変重鎖ドメインを含むPSMAに結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号120又は108のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号121、122、109、110又は111に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号18又は19のアミノ酸配列を含む抗CD33可変軽鎖ドメイン及び配列番号16又は17のアミノ酸配列を含む抗CD33可変重鎖ドメインを含むCD33に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号189又は190のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号20、21、22又は23に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号53のアミノ酸配列を含む抗CDH19可変軽鎖ドメイン及び配列番号52のアミノ酸配列を含む抗CDH19可変重鎖ドメインを含むCDH19に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号54のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号55に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号155、164、173又は182のアミノ酸配列を含む抗MUC17可変軽鎖ドメイン及び配列番号154、163、172、又は181のアミノ酸配列を含む抗MUC17可変重鎖ドメインを含むMUC17に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号156、165、174又は183に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号139又は144のアミノ酸配列を含む抗cldn18.2可変軽鎖ドメイン及び配列番号138又は143のアミノ酸配列を含む抗cldn18.2可変重鎖ドメインを含むcldn18.2に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。例えば、一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号140又は145のアミノ酸配列を含む第1の結合ドメイン、及び配列番号9のアミノ酸配列を含む第2の結合ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号141、142、146又は147に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号130のアミノ酸配列を含む抗CD70可変軽鎖ドメイン及び配列番号129のアミノ酸配列を含む抗CD70可変重鎖ドメインを含むCD70に結合する第1の結合ドメイン、配列番号7のアミノ酸配列を含む抗CD3可変重鎖ドメインを含む第2の結合ドメイン、及び配列番号8のアミノ酸配列を含む抗CD3可変軽鎖ドメインを含む。幾つかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号131に示したアミノ酸配列を含む。
幾つかの実施形態では、製剤は、約10mg~約50mg(又は約10mg~約20mg、又は約20mg~約50mg、又は約15mg~約20mg、又は約20mg~約55mg)の範囲の量で本明細書に記載した抗原結合タンパク質(例えば、二重特異性抗体コンストラクト)を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、又は約50mgの量で二重特異性抗体コンストラクトを含む。
幾つかの実施形態では、製剤は、約10mg/mL~約50mg/mL(又は約10mg/mL~約20mg/mL又は約15mg/mL~約20mg/mL)の量で二重特異性抗体コンストラクトを含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約10mg/mL、約11mg/mL、約12mg/mL、約13mg/mL、約14mg/mL、約15mg/mL、約16mg/mL、約17mg/mL、約18mg/mL、約19mg/mL、約20mg/mL、約25mg/mL、約30mg/mL、約35mg/mL、約40mg/mL、約45mg/mL又は約50mg/mLの濃度で二重特異性抗体コンストラクトを含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約20mg/mLの濃度で二重特異性抗体コンストラクトを含む。
緩衝剤
本発明の医薬製剤は、任意選択的に、酢酸塩、グルタミン酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸塩又はそれらの組み合わせであり得る緩衝剤を含む。
緩衝剤は、製剤のpHを制御するために利用されることが多い。幾つかの実施形態では、緩衝剤は、約4~6、約4~5、又は約4.2の製剤のpHを維持する濃度で添加される。製剤へのpHの影響は、加速安定性試験及び熱量測定スクリーニング試験等の幾つかの手法のうちの何れか1つ以上を使用して特徴付けることができる(Remmele R.L.Jr.,et al.,Biochemistry,38(16):5241-7(1999))。
製剤中に存在する緩衝系は、生理的に適合性があり且つ所望のpHを維持するように選択される。緩衝剤は、約0.1mM~約1000mM(1M)、又は約5mM~約200mM、又は約5mM~約100mM、又は約10mM~約50mMの濃度で存在し得る。好適な緩衝剤濃度は、約200mM以下の濃度を包含する。幾つかの実施形態では、製剤中の緩衝剤は、約190mM、約180mM、約170mM、約160mM、約150mM、約140mM、約130mM、約120mM、約110mM、約100mM、約80mM、約70mM、約60mM、約50mM、約40mM、約30mM、約20mM、約10mM、又は約5mMの濃度で存在する。幾つかの実施形態では、緩衝剤の濃度は、少なくとも0.1、0.5、0.7、0.8、0.9、1.0、1.2、1.5、1.7、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、700、又は900mMである。幾つかの実施形態では、緩衝剤の濃度は、1、1.2、1.5、1.7、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、60、70、80、又は90mMと100mMとの間である。幾つかの実施形態では、緩衝剤の濃度は、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、又は40mMと50mMとの間である。幾つかの実施形態では、緩衝剤の濃度は、約10mMである。
界面活性剤
本明細書に記載した医薬製剤は、界面活性剤を含む。典型的な界面活性剤としては、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート60、ポリソルベート80、ポロキサマー188、ポロキサマー407、トリトンX-100、ポリオキシエチレン、PEG3350、PEG4000、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。
本明細書で記載した医薬製剤は、個別に又は様々な比率の混合物として、少なくとも界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約0.001%~約5(w/v)%(又は約0.001~約0.5(w/v)%、又は約0.004~約0.5(w/v)%、又は約0.001~約0.01(w/v)%又は約0.004~約0.01(w/v)%)の濃度で界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、少なくとも0.001、少なくとも0.002、少なくとも0.003、少なくとも0.004、少なくとも0.005、少なくとも0.007、少なくとも0.01、少なくとも0.05、少なくとも0.1、少なくとも0.2、少なくとも0.3、少なくとも0.4、少なくとも0.5、少なくとも0.6、少なくとも0.7、少なくとも0.8、少なくとも0.9、少なくとも1.0、少なくとも1.5、少なくとも2.0、少なくとも2.5、少なくとも3.0、少なくとも3.5、少なくとも4.0、又は少なくとも4.5(w/v)%の濃度で界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約0.001(w/v)%~約0.5(w/v)%の濃度で界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約0.001~約0.01(w/v)%の濃度で界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約0.001~約0.01(w/v)%の濃度で界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約0.001%、約0.002%、約0.003%、約0.004%、約0.005%、約0.006%、約0.007%、約0.008%、約0.009%、約0.01%、約0.05%、約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%~約0.5(w/v)%の濃度で界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、製剤は、約0.001%~約0.01(w/v)%の濃度で組み入れられた界面活性剤を含む。幾つかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート80であり、ポリソルベート80は約0.01(w/v)%の濃度で存在する。
糖類
本明細書に記載した医薬製剤は、糖類を含む。幾つかの実施形態では、糖類は、単糖又は二糖である。幾つかの実施形態では、糖類は、グルコース、ガラクトース、フルクトース、キシロース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、ソルビトール、マンニトール若しくはキシリトール又はそれらの組み合わせである。
幾つかの実施形態では、医薬製剤は、約0.01%~約40(w/v)%、又は約0.001%~約20(w/v)%、又は約1%~約15%、又は約5%~約12%、又は約7%~約12(w/v)%の濃度で糖類を含む。幾つかの実施形態では、医薬製剤は、少なくとも0.5%、少なくとも1%、少なくとも2%、少なくとも3%、少なくとも4%、少なくとも5%、少なくとも6%、少なくとも7%、少なくとも8%、少なくとも9%、少なくとも10%、少なくとも11%、少なくとも12%、少なくとも13%、少なくとも14%、少なくとも15%、少なくとも16%、少なくとも17%、少なくとも18%、少なくとも19%、少なくとも20%、少なくとも30%又は少なくとも40(w/v)%の濃度で少なくとも糖類を含む。幾つかの実施形態では、医薬製剤は、約1%、約2%、約3%、約4%、約5%、約6%、約7%、約8%、約9%、約10%、約11%、約12%、約13%、約14%又は約15(w/v)%の濃度で少なくとも糖類を含む。幾つかの実施形態では、医薬製剤は、約1%~約15(w/v)%の濃度で少なくとも糖類を含む。さらなる別の実施形態では、医薬製剤は、約7%、約7.5%、約8%、約8.5%、約9%、約9.5%、約10%、約10.5%、約11%、約11.5%、又は約12(w/v)%の濃度で少なくとも糖類を含む。幾つかの実施形態では、医薬製剤は、約7%~約12(w/v)%の濃度で少なくとも糖類を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも糖類は、約9(w/v)%の濃度で製剤中に存在する。幾つかの実施形態では、糖類はスクロースであり、約9%~約12(w/v)%の範囲で製剤中に存在する。
好ましい実施形態では、医薬製剤は、10mMのグルタミン酸塩、9(w/v)%のスクロース及び0.01(w/v)%のポリソルベート80を含み、ここで医薬製剤のpHは、4.2である。幾つかの実施形態では、製剤は、凍結乾燥されている。
安定性
二重特異性抗体コンストラクト製剤の安定性は、幾つかの方法で定量することができる。幾つかの実施形態では、抗体製剤の安定性は、サイズ排除高性能液体クロマトグラフィー(SE-HPLC)、サイズ排除高性能液体クロマトグラフィー(SE-UHPLC)、カチオン交換高性能液体クロマトグラフィー(CE-HPLC)、動的光散乱法、分析的遠心分離法(AUC)、フィールドフローフラクショネーション(FFF)、等電点電気泳動法及びイオン交換クロマトグラフィー(IEX)によって特徴付けられる。幾つかの実施形態では、抗体製剤の安定性は、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動法(CE-SDS)及び/又はドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動法 (SDS-PAGE)によって測定される部分解離によって特徴付けられる。幾つかの実施形態では、製剤の安定性は、減少したキャピラリー電気泳動法-ドデシル硫酸ナトリウム(rCE-SDS)によって評価される。rCE-SDS法は、還元条件下で、重鎖(HC)、軽鎖(LC)、非グリコシル化HC(NGHC)、及びその他の微細なピーク種及び基を分離する。
幾つかの実施形態では、製剤の安定性は、二重特異性抗体コンストラクトの高分子量(HMW)種の量又は様々な時点の貯蔵条件下での二重特異性抗体コンストラクトのHMW種の量の増加速度によって特徴付けられる。幾つかの実施形態では、HMW種の量は、およそ4℃又は40℃で貯蔵した場合の1週間後、2週間後、1カ月後、3カ月後、6カ月後又は12カ月後に決定される。幾つかの実施形態では、HMW種の増加速度は、およそ4℃又は40℃で貯蔵した場合の1週間後、2週間後、1カ月後、3カ月後、6カ月後又は12カ月後に決定される。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのHMW種は、SE-UHPLCによって測定される。
二重特異性抗体コンストラクトの安定性、及び製剤が二重特異性抗体コンストラクトの安定性を維持する能力は、長期間(例えば、数週間又は数カ月)にわたって評価することができる。製剤の状況では、安定性製剤とは、その中の二重特異性抗体コンストラクトが本質的に、例えば、凍結/解凍、機械的混合及び凍結乾燥等その物理的及び/又は化学的完全性並びに貯蔵後及びプロセス中の生物学的活性を維持する製剤である。二重特異性抗体コンストラクトの安定性は、例えば、高分子量(HMW)凝集体の形成のレベル及び/又は速度、電荷プロファイルのシフト、及び粒径の変化によって評価することができる。
幾つかの実施形態では、本明細書で記載した、インタクトなBiTE(登録商標)分子若しくは主要種、又は高分子量(HMW)種(即ち、凝集体)、又は低分子量(LMW)種(即ち、断片)等の二重特異性抗体コンストラクトの任意の特定の種の相対的価値は、全生成物の各数値と関連して表示される。例えば、幾つかの実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤であり、及び二重特異性抗体コンストラクトの2.5%以下(例えば、2.5%、又は2%、又は1.9%、又は1.8%、又は1.7%、又は1.6%、又は1.5%、又は1.4%、又は1.3%、又は1.2%、又は1.1%、又は1%、又は0.5%)は、凍結乾燥製剤中のHMW種として存在する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のHMW種の量は、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に1%未満、(例えば、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~0.4%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、又は0.4%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のHMW種の量は、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に1%未満、(例えば、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に凍結乾燥製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのHMW種は、SE-UHPLCによって測定される。
幾つかの実施形態では、製剤の安定性は、二重特異性抗体コンストラクトの高分子量(LMW)種の量又は様々な時点の貯蔵条件下での二重特異性抗体コンストラクトのLMW種の量の増加速度によって特徴付けられる。幾つかの実施形態では、LMW種の量は、およそ4℃又は40℃で貯蔵した場合の1週間後、2週間後、1カ月後、3カ月後、6カ月後又は12カ月後に決定される。幾つかの実施形態では、LMW種の増加速度は、およそ4℃又は40℃で貯蔵した場合の1週間後、2週間後、1カ月後、3カ月後、6カ月後又は12カ月後に決定される。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのLMW種は、キャピラリー電気泳動法ドデシル硫酸ナトリウム(rCE-SDS)によって測定される。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのLMW種は、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)によって測定される。
幾つかの実施形態では、2%未満、(例えば、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1.4%、1.3%、1.2%、1.1%、1%、若しくは0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、凍結乾燥製剤中の低分子量(LMW)種として存在する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に2%未満、(例えば、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1.4%、1.3%、1.2%、1.1%、1%、若しくは0.5%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、又は6カ月)の4℃での貯蔵後に製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に1%未満、(例えば、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのLMW種は、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)によって測定される。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのLMW種は、還元キャピラリー電気泳動-ドデシル硫酸ナトリウム法(rCE-SDS)によって測定される。
幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のインタクトなBiTE(登録商標)分子(即ち、メインピーク種)のパーセントは、製剤中の全タンパク質含量の95%超である。
幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、1カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも1カ月の貯蔵中におよそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%、又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、3カ月の4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも3カ月の保管中におよそ0.0%~0.2%(例えば、0%、若しくは0.1%、若しくは0.2%)増加する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤は、少なくとも6カ月の4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも6カ月の貯蔵中におよそ0.0%~0.4%(例えば、0%、若しくは0.1%、若しくは0.2%、若しくは0.3%、若しくは0.4%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのHMW種は、SE-UHPLCによって測定される。
一実施形態では、凍結乾燥製剤は、1カ月、3カ月、6カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、インタクトなBiTE(登録商標)分子のパーセントは、貯蔵中の期間中の全タンパク質含量の95%超である。
幾つかの実施形態では、製剤は、液体製剤であり、並びに3%未満(例えば、2.5%、又は2%、又は1.5%、又は1%、又は0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、液体製剤中のHMW種として存在する。幾つかの実施形態では、液体製剤中のHMW種の量は、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は1カ年)の4℃での貯蔵後に、3%未満(例えば、3%、2.5%、2%、1%、又は0.5%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は1カ年)の4℃での貯蔵後に、液体製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~1%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%、又は0.7%、又は0.8%、又は0.9%、又は1%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤中のHMW種の量は、40℃での1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の貯蔵後に、5%(例えば、4.5%、又は4%、又は3.5%、又は3%、又は2.5%、又は2%、又は1.5%、又は1%、又は0.5%増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、液体製剤中のHMW種の量は、およそ0.1%~5%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%、又は0.7%、又は0.8%、又は0.9%、又は1%、又は1.5%、又は2%、又は2.5%、又は3%、又は3.5%、又は4%、又は4.5%又は5%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのHMW種は、SE-UHPLCによって測定される。
幾つかの実施形態では、2%未満(例えば、1.9%、又は1.8%、又は1.7%、又は1.6%、又は1.5%、又は1.4%、又は1.3%、又は1.2%、又は1.1%、又は1%、又は0.9%、又は0.8%、又は0.7%、又は0.6%、又は0.5%)の二重特異性抗体コンストラクトは、液体製剤中の低分子量(LMW)種として存在する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は12カ月)の4℃での貯蔵後に、液体製剤中のLMW種の量は、2%未満、(例えば、1.9%、又は1.8%、又は1.7%、又は1.6%、又は1.5%、又は1.4%、又は1.3%、又は1.2%、又は1%、又は0.5%、又は0.4%、又は0.3%、又は0.2%又は0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1カ月以上(例えば、1カ月、3カ月、6カ月、又は12カ月)の4℃での貯蔵後に、液体製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~0.7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%。又は0.7%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤中のLMW種の量は、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月、又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、7%未満、(例えば、6%、又は5%、又は4%、又は3%、又は2%、又は1%、又は0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%)増加する。幾つかの実施形態では、1週間以上(例えば、1週間、2週間、1カ月、又は3カ月)の40℃での貯蔵後に、凍結乾燥製剤中のLMW種の量は、およそ0.1%~7%(例えば、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%.若しくは0.7%、又は0.8%、又は0.9%、又は1%、又は1.5%、又は2%、又は3%、又は5%、又0.6%。又は7%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのLMW種は、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)によって測定される。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのLMW種は、rCE-SDSによって測定される。
幾つかの実施形態では、液体製剤中のインタクトなBiTE(登録商標)分子(即ち、メインピーク種)のパーセントは、製剤中の全タンパク質含量の96%超である。
幾つかの実施形態では、液体製剤は、1カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも1カ月の貯蔵中におよそ0.1%~0.4%(例えば、0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤は、3カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも3カ月の貯蔵中におよそ0.0%~0.3%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%、又は0.3%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤は、6カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも6カ月の貯蔵中におよそ0.0%~0.6%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%、又は0.3%、又は0.4%、又は0.5%、又は0.6%)増加する。幾つかの実施形態では、液体製剤は、12カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、製剤中のHMW種の量は、少なくとも12カ月の貯蔵中に、およそ0.0%~0.2%(例えば、0%、又は0.1%、又は0.2%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の二重特異性抗体コンストラクトのHMW種は、SE-UHPLCによって測定される。
一実施形態では、凍結乾燥製剤は、1カ月、3カ月、6カ月、及び12カ月の約4℃での貯蔵後に安定性であり、インタクトなBiTE(登録商標)分子のパーセントは、貯蔵中の期間中の全タンパク質含量の96%超である。
本明細書に記載した製剤の安定性は、更に電荷分布、例えば、抗体の電荷変化ピークの量における変化によって特徴付けられる。例えば、幾つかの実施形態では、製剤中の酸性ピーク(例えば、製剤中の相対的に低い等電点(pI)を有する電荷変化である脱アミド化)の量は、少なくとも1カ月(例えば、1カ月、3カ月、6カ月又は12カ月)にわたり4℃で貯蔵された場合に、2%未満(例えば、2%、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1.4%、1.3%、1.2%、1.1%、1.0%、0.9%、0.8%、0.7%、0.6%、0.5%以下)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の塩基性ピーク(例えば、製剤中の相対的に高いpIを有する電荷変化)の量は、少なくとも1カ月(例えば、1カ月、3カ月、6カ月又は12カ月)にわたり4℃で貯蔵された場合に、6%未満(例えば、6%、5%、4%、3%、2%又は1%)増加する。幾つかの実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤であり、製剤中の主要ピークの量は、少なくとも1カ月にわたり4℃で貯蔵された場合に、4%未満(例えば、4%、3.5%、3%、2.5%、2%、1%以下)減少する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中の主要ピークの量は、少なくとも3カ月にわたり4℃で貯蔵された場合に、6%未満(例えば、6%、5%、4%、3.5%、3%、2.5%、2%以下)減少する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中の主要ピークの量は、少なくとも6カ月にわたり4℃で貯蔵された場合に、9%未満(例えば、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3.5%、3%、2.5%、2%以下)減少する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中の主要ピークの量は、少なくとも12カ月にわたり4℃で貯蔵された場合に、9%未満(例えば、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3.5%、3%、2.5%、2%以下)減少する。
幾つかの実施形態では、製剤中の酸性ピークの量は、少なくとも1週間(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)にわたり40℃で貯蔵された場合に、30%未満(例えば、30%、25%、20%、15%、10%、9%、8%、7%、6%、4%、4%、3%、2%、1%以下)増加する。幾つかの実施形態では、製剤中の塩基性ピーク(例えば、相対的に高いpIを有する電荷変化)の量は、少なくとも1週間(例えば、1週間、2週間、1カ月又は3カ月)にわたり40℃で貯蔵された場合に、15%未満(例えば、15%、10%、9%、8%、7%、6%、4%、4%、3%、2%、又は1%以下)増加する。幾つかの実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤であり、製剤中のメインピークの量は、少なくとも1カ月にわたり4℃で貯蔵された場合に、4%未満(例えば、4%、3.5%、3%、2.5%、2%、1%以下)減少する。幾つかの実施形態では、凍結乾燥製剤中のメインピークの量は、少なくとも3カ月にわたり4℃で貯蔵された場合に、6%未満(例えば、6%、5%、4%、3.5%、3%、2.5%、2%以下)減少する。
製剤の治療上の使用
本明細書に記載した製剤は、治療、それを必要とする対象における癌を緩和するための治療における医薬製剤として有用である。用語「必要とする対象」又は「治療を必要とする」対象は、既にその障害を有する対象及びその障害を予防しようとする対象を含む。「必要とする対象」又は「患者」は、予防的治療又は治療的治療の何れかを受けるヒト及び他の哺乳動物対象を含む。「治療」という用語は、治療的治療及び予防的若しくは防止的手段の両方を指す。治療は、疾患、疾患の症状又は疾患素因を治癒させるか、治すか、軽減するか、緩和するか、変化させるか、矯正するか、改善するか、好転させるか又は影響を与えることを目的とした、疾患/障害、疾患/障害の症状又は疾患/障害の素因を有する患者の身体、単離された組織又は細胞に対する製剤の適用又は投与を含む。
本明細書で使用する用語「改善」は、本明細書に記載した抗原結合タンパク質を含む製剤のそれを必要とする対象への投与による、本明細書の以下に示す腫瘍又は癌若しくは転移性癌を有する患者の疾患状態のあらゆる好転を指す。このような好転はまた、患者の腫瘍又は癌又は転移性癌の進行を遅らせるか又は止めることであると見なすこともできる。本明細書で使用する用語「予防」は、本明細書に記載した抗原結合タンパク質(即ち、抗体コンストラクト)を含む組成物のそれを必要とする対象への投与による、本明細書の以下に示す腫瘍又は癌若しくは転移性癌を有する患者の発症又は再発の回避を意味する。
本開示は、癌を治療する方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の本明細書に記載した組み換えタンパク質又は医薬製剤と投与する工程を含む方法を提供する。所定の実施形態では、対象は、ヒトである。所定の実施形態では、癌は、固形腫瘍である。
幾つかの実施形態では、癌は、脳腫瘍、膀胱癌、乳癌、明細胞腎臓癌、子宮頸癌、結腸及び直腸癌、子宮内膜癌、胃癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、口唇及び口腔癌、肝臓癌、肺扁平上皮細胞癌、黒色腫、中皮腫、非小細胞肺癌(NSCLC)、非黒色腫皮膚癌、卵巣癌、口腔癌、膵臓癌、前立腺癌、腎細胞癌、小細胞肺癌(SCLC)、頭頸部の扁平上皮細胞癌(SCCHN)、トリプルネガティブ乳癌、又は甲状腺癌である。
幾つかの実施形態では、癌は、副腎皮質腫瘍、胞巣状軟部肉腫、癌腫、軟骨肉腫、大腸癌、類腱腫、線維形成小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、内胚葉洞腫瘍、類上皮型血管内皮腫、ユーイング肉腫、胚細胞腫瘍、肝芽腫、肝細胞癌、黒色腫、腎腫、神経芽細胞腫、非裂孔性軟部組織肉腫(NRSTS)、骨肉腫、傍脊椎肉腫、腎細胞癌、網膜芽腫、横紋筋肉腫、骨膜肉腫又はウィルムス腫瘍である。
幾つかの実施形態では、癌は、急性リンパ芽急性白血病(ALL)、急性骨髄性白血病(AML)、慢性リンパ球性白血病(CLL)、又は慢性骨髄性白血病(CML)である。
幾つかの実施形態では、癌は、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBCL)、濾胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫(HL)、マントル細胞リンパ腫(MCL)、多発性骨髄腫(MM)、骨髄異形成症候群(MDS)、非ホジキンリンパ腫(NHL)、又は小リンパ球性リンパ腫(SLL)である。
実際に、治療され得る癌としては、胞巣状軟部肉腫、骨肉腫、肛門、肛門管若しくは肛門直腸の癌、目の癌、肝内胆管の癌、関節の癌、頸部、胆嚢、若しくは胸膜の癌、鼻、鼻孔、若しくは中耳の癌、口腔の癌、外陰部の癌、食道癌、消化管カルチノイド腫瘍、咽頭癌、鼻咽頭、腹膜、胸膜、及び腸間膜の癌、咽頭癌、小腸癌、軟部組織癌、胃癌、精巣癌、尿管癌並びに膀胱癌が挙げられるが、これらに限定されない。
投与経路
好ましくは、医薬製剤は、非経口、例えば、静脈内、皮下、又は筋肉内投与される。非経口投与は、ボーラス注射等の注射、又は持続注入等の注入によって達成され得る。投与は、長期間放出のためのデポーを介して達成され得る。幾つかの実施形態では、製剤は、薬物製品の治療上の循環レベルを維持するために初回のボーラス後に持続注入によって静脈内投与される。幾つかの実施形態では、製剤は、1回用量として投与される。医薬製剤は、医療機器を用いて投与され得る。医薬製剤を投与するための医療機器の例は、米国特許第4,475,196号明細書;同第4,439,196号明細書;同第4,447,224号明細書;同第4,447,233号明細書;同第4,486,194号明細書;同第4,487,603号明細書;同第4,596,556号明細書;同第4,790,824号明細書;同第4,941,880号明細書;同第5,064,413号明細書;同第5,312,335号明細書;同第5,312,335号明細書;同第5,383,851号明細書;及び同第5,399,163号明細書に記載されている。
幾つかの実施形態では、製剤は、投与前に無菌水又は注射のために好適な希釈液を用いて再構成される、凍結乾燥製剤である。
本開示は、更に製剤の中断のない投与もまた企図している。非限定的な例として、中断のない又は実質的に中断のない、即ち、連続的な投与は、患者体内への治療薬の流入を調整するための、患者が装着した小型ポンプシステムによって実現され得る。本医薬製剤は、前記ポンプシステムを使用することによって投与され得る。そのようなポンプシステムは、一般に当技術分野で知られており、通常、注入する治療薬を含有するカートリッジの定期交換に依拠する。そのようなポンプシステムでカートリッジを交換する際、交換時以外には中断しない患者体内への治療薬の流入に一時的な中断が結果として生じる場合がある。そのような場合でも、カートリッジ交換前の投与段階及びカートリッジ交換後の投与段階は、依然として、ともにこのような治療薬の「中断のない投与」を構成する本発明の医薬的手段及び方法の意味の範囲内と見なされるであろう。
製剤の連続投与又は中断のない投与は、流体をレザバーから送り出すための流体送出機構及び送出機構を駆動するための駆動機構を含む、流体送達デバイス又は小型ポンプシステムによる静脈内又は皮下投与であり得る。皮下投与のためのポンプシステムは、患者の皮膚に穿通し、好適な製剤を患者の体内に送達するための針又はカニューレを含み得る。前記ポンプシステムを、静脈、動脈又は血管を問わず、患者の皮膚に直接固定又は装着することでポンプシステムと患者の皮膚とを直接接触させることが可能になる。このポンプシステムは、患者の皮膚に24時間~数日間装着することができる。レザバーの容量が小さい小型のポンプシステムの場合もある。非限定的な例として、投与される好適な医薬製剤のためのレザバーの容積は、0.1~50mlであり得る。
キット
さらなる態様として、本明細書に記載されるのは、対象への投与のためのそれらの使用を容易にする様式でパッケージ化された本明細書に記載される1つ以上の医薬組成物を含むキットである。一実施形態では、そのようなキットは、任意選択により容器に貼付されたラベルを伴って密封ボトル、容器、単回使用若しくは複数回使用用バイアル、プレフィルドシリンジ、又はプレフィルド注射デバイス等の容器にパッケージ化されるか、又は方法を実践する際の化合物又は製剤の使用を記載するパッケージに含まれる、本明細書に記載される化合物又は製剤(例えば、本明細書に記載される抗体を含む製剤)を含む。一態様では、製剤は、単位剤形にパッケージ化される。キットは更に、特定の投与経路に従って、製剤を投与するのに好適なデバイスを含んでもよい。好ましくは、キットは、本明細書に記載される抗体又は本明細書に記載される製剤の使用を記載するラベルを含有する。
本明細書に記載した医薬製剤は、様々な形態、例えば固体、液体、凍結、気体又は凍結乾燥の形態で製剤化することができ、とりわけ軟膏、クリーム、経皮パッチ、ゲル、粉末、錠剤、溶液、エアロゾル、顆粒剤、丸剤、懸濁液、エマルジョン剤、カプセル剤、シロップ剤、液体、エリキシル剤、抽出物、チンキ剤又は流エキス剤の形態であり得る。
一般に、本発明の医薬組成物に関して、即ち、意図される投与経路、送達形式及び所望の投与量に応じて、様々な保管形態及び/又は剤形が考えられる(例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences,22nd edition,Oslo,A.,Ed.,(2012)を参照されたい)。当業者であれば、このような特定の剤形の選択が、例えば、抗体の物理的状態、安定性、インビボでの放出速度及びインビボでのクリアランス速度に影響を及ぼし得ることを認識するであろう。
例えば、医薬製剤中の主なビヒクル又は担体は、本質的に水性又は非水性であり得る。好適なビヒクル又は担体は、注射用水、生理食塩水溶液又は人工脳脊髄液であり得、場合により非経口投与用製剤で一般的な他の材料が補充される。中性緩衝生理食塩水、又は血清アルブミンを混合した生理食塩水が、更なる例示的なビヒクルである。
実施例1-液体製剤及び凍結乾燥製剤の経時的な安定性
以下の製剤の安定性をサイズ排除高性能液体クロマトグラフィー(SE-HPLC)及びカチオン交換高性能液体クロマトグラフィー(CE-HPLC)によって評価した:
液体製剤:20mg/mLのBiTE(登録商標)分子、10mMのL-グルタミン酸、9(w/v)%のスクロース、0.01(w/v)%のポリソルベート80、pH4.2
凍結乾燥製剤:20mg/mLのBiTE(登録商標)分子、10mMのL-グルタミン酸、9(w/v)%のスクロース、0.01(w/v)%のポリソルベート80、pH4.2
下記の表1は、4℃で貯蔵した場合の時点0、1カ月後、3カ月後、6カ月後及び12カ月後にSE-HPLCによって評価した、凍結乾燥製剤及び液体製剤の高分子量(HMW)種のピーク、メインピーク(モノマー)及び低分子量(LMW)種のピーク(%)のデータを提供している。
Figure 2023524445000001
Figure 2023524445000002
下記の表2は、40℃で貯蔵した場合の時点0、1週間後、2週間後、1カ月後及び3カ月後にSE-HPLCによって評価した、凍結乾燥製剤及び液体製剤のピーク時の高分子量(HMW)種のピーク(%)、メイン(モノマー)ピーク及び低分子量(LMW)種のピークのデータを提供している。
Figure 2023524445000003
カチオン交換高性能液体クロマトグラフィー(CE-HPLC)もまた、様々な時点に4℃及び40℃で試験製剤中の様々なBiTE(登録商標)分子の荷電変化分布を評価するために実施した。以下の表3は、0、1カ月後、3カ月後、6カ月後及び12カ月後の4℃で貯蔵後のCE-HPLCによって評価した凍結乾燥製剤及び液体製剤についての%でのメインピーク、酸性ピーク及び塩基性ピークのデータを提供している。
Figure 2023524445000004
Figure 2023524445000005
下記の表4は、40℃で貯蔵した場合の時点0、1週間後、2週間後、1カ月後及び3カ月後にCE-HPLCによって評価した、凍結乾燥製剤及び液体製剤についての%でのメインピーク及び酸性ピーク及び塩基性ピークのデータを提供している。
Figure 2023524445000006
Figure 2023524445000007
還元キャピラリー電気泳動-ドデシル硫酸ナトリウム(rCE-SDS)法:タンパク質種は、アニオン性洗剤であるSDSに結合し、SDSゲルバッファーが充填された裸の溶融石英キャピラリー内に電気動力学的に注入される。電圧がキャピラリー全体に印加され、その下でSDSコーティングされたタンパク質が親水性ポリマーベース溶液中での移行におけるそれらの差によって分離される。タンパク質は、それらがUV検出窓を通過するにつれて光ダイオードアレイ(PDA)検出器によって検出される。純度は、リーチ成分の正確なピーク面積率を決定することによって評価される。rCE-SDS法は、還元条件下で、重鎖(HC)、軽鎖(LC)、非グリコシル化HC(NGHC)、及びその他の微細なピーク種及び基を分離する。
サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)は、ゲルを通しての濾過によるそれらのサイズに基づいて分子を分離する。ゲルは、特定のサイズ分布の孔を含有する球状ビーズから構成される。様々なサイズの分子が、このマトリックス内の孔に入るか又はこの孔から除外される場合に、分離が起こる。小分子はこの孔中に拡散し、そのサイズに従って、カラムを通る小分子の流れが遅延されるが、大分子は、この孔には入らず、カラムの空隙容量に溶出される。その結果、分子は、カラムを通過する際に、この分子のサイズに基づいて分離され、分子量(MW)の小さい順に溶出される。操作条件及びゲルの選択は、用途及び所望の解決策に依存する。
肉眼で見えない粒子の分析は、HIAC法によって実施される。液体サンプラーを装備した光掩蔽センサーを含有する電子式液体粒子計数システムは、所定の試験試料中の粒子の数及びそれらのサイズ範囲を定量する。粒子が光源と検出器との間の液体通路上にあるとき、それらは検出器上に落ちる光のビームを弱める、又は「曖昧にする」。粒子の濃度がこれらのセンサーの正常範囲内にある場合、これらの粒子は、1つずつ検出される。検出ゾーンを通る各粒子の通過は、光検出器上の入射光を減少させ、光検出器の電圧出力は瞬間的に低下させられる。電気パルスとしての電圧レジスター内の変化は、存在する粒子数への機器によって変換される。この方法は、非特異的であり、それらの起源とは無関係に粒子を測定する。
最後に、凍結乾燥製剤の含水量は、オーブンを用いた熱量測定によって決定された。カール・フィッシャー法の原理は、熱量滴定によって決定された試料中の含水量に基づく。水は、オーブン中の試料を加熱することによって放出される。乾燥空気又は窒素等の不活性ガスが蒸発した水分を滴定装置に運んだ。存在する水の量は、滴定中に生成したクーロン(電流/時間)の量を測定することによって決定される。全ての水が滴定によって消費されたとき、過剰のヨウ素が発生する。終点は、一定の強さの交流を2つのPt電極にかけることによって容積に関して示される。これは、最小限の量の遊離ヨウ素の存在下で大幅に低下する指標電極のPt線間の電圧差をもたらす。この電圧差を使用して、滴定の終点を決定する。BiTE(登録商標)-I、BiTE(登録商標)-C、及びBiTE(登録商標)-Gを含む凍結乾燥製剤の含水量を0、1カ月後、3カ月後、6カ月後及び1年後の時点に2~8℃で貯蔵した後に評価した。以下の表5に示したように、試験した凍結乾燥製剤は何れも試験した期間の全てにわたり1.70%より大きな含水率を有していなかった。
Figure 2023524445000008
結論
本実施例では、本明細書に記載した高濃度製剤が6カ月にわたり約4℃で貯蔵後に安定性であることを証明している。これらの安定性製剤では、HMW種の量はおよそ0.0%~0.4%の間で増加したが、他方少なくとも6カ月貯蔵した場合に、保存剤又は安定剤の存在を必要としなかった。

Claims (31)

  1. 少なくとも10mg/mLの量の二重特異性抗体コンストラクト、緩衝剤、糖類、及び界面活性剤を含む安定性医薬製剤であって、4~6の範囲のpHを有する製剤。
  2. 凍結乾燥されている、請求項1に記載の製剤。
  3. 4℃で3カ月まで安定性である、請求項1又は2に記載の製剤。
  4. 前記製剤は、4℃で3カ月後に2%未満の高分子量種を含む、請求項1~3の何れか一項に記載の製剤。
  5. 前記製剤は、4~5のpHを有する、請求項1~4の何れか一項に記載の製剤。
  6. 前記製剤は、4.2のpHを有する、請求項1~4の何れか一項に記載の製剤。
  7. 前記緩衝剤は、酢酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、乳酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フマル酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、又はリン酸緩衝剤である、請求項1~6の何れか一項に記載の製剤。
  8. 前記緩衝剤は、5~200mMの範囲の濃度で存在する、請求項1~7の何れか一項に記載の製剤。
  9. 前記緩衝剤は、10~50mMの範囲の濃度で存在する、請求項8に記載の製剤。
  10. 前記糖類は、単糖又は二糖である、請求項1~9の何れか一項に記載の製剤。
  11. 前記糖類は、グルコース、ガラクトース、フルクトース、キシロース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、ソルビトール、マンニトール又はキシリトールである、請求項1~10の何れか一項に記載の製剤。
  12. 前記糖類は、1~15(w/v)%の範囲の濃度で存在する、請求項1~11の何れか一項に記載の製剤。
  13. 前記糖類は、5~12(w/v)%の範囲の濃度で存在する、請求項12に記載の製剤。
  14. 前記糖類は、7~12(w/v)%の範囲の濃度で存在する、請求項12に記載の製剤。
  15. 前記界面活性剤は、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート60、ポリソルベート80、ポロキサマー188、トリトンX-100、ポリオキシエチレン、PEG3350、PEG4000、又はこれらの組み合わせである、請求項1~154の何れか一項に記載の製剤。
  16. 前記界面活性剤は、0.001%~0.5(w/v)%の範囲の濃度で存在する、請求項1~15の何れか一項に記載の製剤。
  17. 前記界面活性剤は、0.001(w/v)%~0.01(w/v)%の範囲の濃度で存在する、請求項16に記載の製剤。
  18. 前記二重特異性抗体コンストラクトは、10mg/mL~20mg/mLの範囲の濃度で存在する、請求項1~17の何れか一項に記載の製剤。
  19. 前記二重特異性抗体コンストラクトは、20mg/mLの量で存在する、請求項1~18の何れか一項に記載の製剤。
  20. 前記製剤は、10mMのグルタミン酸塩、9(w/v)%のスクロース及び0.01(w/v)%のポリソルベート80を含み、前記製剤のpHは、4.2である、請求項1~19の何れか一項に記載の製剤。
  21. 前記二重特異性抗体コンストラクトは、標的細胞表面抗原に結合する第1の結合ドメイン、T細胞の表面上のヒトCD3に結合する第2の結合ドメインを含む、請求項1~20の何れか一項に記載の製剤。
  22. 前記二重特異性抗体コンストラクトは、アミノからカルボキシルの順で、ヒンジ-CH2ドメイン-CH3ドメイン-リンカー-ヒンジ-CH2ドメイン-CH3ドメインを含む第3のドメインを更に含む、請求項21に記載の製剤。
  23. 前記第1及び第2の結合ドメインのそれぞれは、VH領域及びVL領域を含む、請求項21に記載の製剤。
  24. 前記二重特異性抗体コンストラクトは、単鎖の抗体コンストラクトである、請求項21又は22に記載の製剤。
  25. 前記標的細胞表面抗原は、CDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFR、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、MUC17又はCLDN18.2である、請求項21~23の何れか一項に記載の製剤。
  26. 前記二重特異性抗体コンストラクトの前記第1の結合ドメインは、(a)配列番号24~29、(b)配列番号34~39、(c)配列番号78~83、(d)配列番号10~15、(e)配列番号46~51、(f)配列番号88~93、(g)配列番号67~72、(h)配列番号56~61、(i)配列番号112~117、(j)配列番号100~105、(k)配列番号148~153、配列番号157~162、又は配列番号166~171、若しくは配列番号175~180、(l)配列番号132~137、又は(m)配列番号123~128に示した1セットの6CDRを含む、請求項21~24の何れか一項に記載の製剤。
  27. 前記二重特異性抗体コンストラクトの前記第2の結合ドメインは、配列番号1~6に示した1セットの6CDRを含む、請求項21~25の何れか一項に記載の製剤。
  28. 請求項21~26の何れか一項に記載の製剤であって、前記第1の結合ドメインは:
    (a)配列番号30に示したアミノ酸配列を含むVH領域、及び配列番号31に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (b)配列番号40に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号41に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (c)配列番号84に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号85に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (d)配列番号16若しくは17に示したアミノ酸配列を含むVH領域、及び配列番号18若しくは19に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (e)配列番号52に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号53に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (f)配列番号94に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号95に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (g)配列番号73に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号74に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (h)配列番号62に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号63に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (i)配列番号118に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号119に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (j)配列番号154、163、172若しくは181に示したアミノ酸配列を含むVH領域、並びに配列番号155、164、173又は182に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (k)配列番号106に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号107に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    (l)配列番号138又は143に示したアミノ酸配列を含むVH領域、並びに配列番号139又は144に示したアミノ酸配列を含むVL領域;又は
    (m)配列番号129に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号130に示したアミノ酸配列を含むVL領域;
    を含む製剤。
  29. 前記第2の結合ドメインは、配列番号7に示したアミノ酸配列を含むVH領域及び配列番号8に示したアミノ酸配列を含むVL領域を含む、請求項21~27の何れか一項に記載の製剤。
  30. 前記二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号33、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号55、配列番号65、配列番号66、配列番号55、配列番号76、配列番号77、配列番号87、配列番号97、配列番号98、配列番号99、配列番号109、配列番号110、配列番号111、配列番号121、配列番号122、配列番号131、配列番号141、配列番号142、配列番号146、配列番号147、配列番号156、配列番号165、配列番号174、配列番号183、配列番号184、配列番号185、配列番号186、配列番号187又は配列番号188に示したアミノ酸配列を含む、請求項21~28の何れか一項に記載の製剤。
  31. それを必要とする対象における癌を治療する方法であって、請求項1~29の何れか一項に記載の前記製剤を前記対象に投与する工程を含む、方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US4751180A (en) 1985-03-28 1988-06-14 Chiron Corporation Expression using fused genes providing for protein product
US4935233A (en) 1985-12-02 1990-06-19 G. D. Searle And Company Covalently linked polypeptide cell modulators
AU612370B2 (en) 1987-05-21 1991-07-11 Micromet Ag Targeted multifunctional proteins
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
CA2409991A1 (en) 2000-05-24 2001-11-29 Imclone Systems Incorporated Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production
WO2006020258A2 (en) 2004-07-17 2006-02-23 Imclone Systems Incorporated Novel tetravalent bispecific antibody
CA2697922A1 (en) 2007-08-28 2009-03-12 Biogen Idec Ma Inc. Compositions that bind multiple epitopes of igf-1r
RU2017137740A (ru) * 2012-11-01 2019-02-11 Эббви Инк. Анти-vegf/dll4-иммуноглобулины с двойными вариабельными доменами и их применения
JOP20190189A1 (ar) 2017-02-02 2019-08-01 Amgen Res Munich Gmbh تركيبة صيدلانية ذات درجة حموضة منخفضة تتضمن بنيات جسم مضاد يستهدف الخلية t
BR112019022751A2 (pt) 2017-05-05 2020-05-19 Amgen Inc composição farmacêutica compreendendo construtos de anticorpos biespecíficos para armazenamento e administração melhorados

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