JP2023520881A - 農薬アジュバント - Google Patents

Abstract

イリシコリンおよびラメリコール酸無水物から選択されたアジュバントおよび農薬活性を含む新規な農薬製剤を記載する。配合物を形成するのに適した濃縮物も提供される。イリシコリンおよびラメリコール酸無水物は、濃縮物および農薬製剤中のアジュバントを提供する。アジュバントとしての上記イリシコリンおよびラメリコール酸無水物の農薬製剤における使用も提供される。また、配合物を作製し、配合物を用いて土壌を処理する方法も提供されている。Ｃｏｓｍｏｓｐｏｒａ ｓｐ．株ＲＫＤＯ１７４７の培養から、イリシコリンおよびラメリコール酸無水物を得る方法についても記載した。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年４月３日出願の「ＡＧＲＯＣＨＥＭＩＣＡＬ ＡＤＪＵＶＡＮＴＳ」と題する米国仮出願第６３／００４，８７５号の優先権を主張し、その内容は、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本発明は、一般に、農薬活性処方のための微生物から得られるアジュバント、および１以上の農薬活性を有するアジュバントを含む農薬製剤中のアジュバントを提供する方法に関する。本発明はまた、作物を前記製剤で処理することを含む。

アジュバントは、一般に、農薬活性の生物学的活性または有効性を改善することができる化学物質または化学物質の混合物として定義される。アジュバント自身は害虫を防除したり殺したりすることはない。代わりに、これらの添加剤は、標的生物内の分子標的（細胞壁、イオンチャネル、構造タンパク質、酵素など）と相互作用したり、農薬製剤の特性（拡散、保持、浸透、液滴サイズなど）を変更したりする可能性があり、それによって、生物に作用する農薬の生物学的活性を改善する。アジュバントとして使用される化合物の典型的なタイプは、小分子、界面活性剤、乳化剤、油および塩を含むことができる。アジュバントは、典型的には、処理された植物における活性の転位を阻害しない。さらに、アジュバントは植物に対して望ましくない植物毒性作用を生じさせてはならない。

菌類は陸上環境に広く分布しており、農業生産性に対する大きな課題となっている。未確認の真菌感染は収穫前および収穫後の８０％を超える可能性がある。このような損失を減少させ、増大する食糧需要を満たすために、真菌性農業害虫を防除するための殺菌剤の使用は、農業害虫管理システムの重要な構成要素であり、今後も引き続き重要である。

農業害虫、特に真菌害虫と闘うための新しい戦略を開発する必要がある。１つの戦略は、農産物生産性に対する真菌害虫の影響を防止または低減するために、野外および温室作物での使用に既に承認されている既存の殺真菌剤の有効性を改善する、安全で無毒性の化学物質であるアジュバントを開発することである。これらのアジュバントは、野外または収穫後の害虫の防除を改善し、それによって生産性を高めることができる。また、望ましいレベルの害虫防除を達成するために必要な殺菌剤の量を減らし、持続可能な生産性の向上を達成する目標に貢献するかもしれない。

本発明は、化合物が活性の改善された効力を含む所望のアジュバントを提供し得る場合に、農薬活性と組み合わせた農薬製剤中の化合物の使用を提供することを目的とする。本発明はまた、アジュバントを含む農薬濃縮物および希釈製剤の使用を提供することを目的とする。

本発明はまた、化合物が既存のアジュバントと同等または改善されたアジュバント特性を提供し得る農薬製剤中の化合物を提供することを目的とする。

本発明はまた、アジュバントとしての化合物の使用、および農薬製剤中のアジュバントを提供するのに使用するための該化合物を含む製剤を提供することを目的とする。

本発明の第１の態様によれば、以下を含む農薬製剤が提供される：
ｉ）式（Ｉ）に従って、イリシコリンＨ、ヒドロキシルイリシコリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコール酸無水物から選択されるアジュバント：

式中：
Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルに表し；
Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表し；
Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表す；及び
ｉｉ）少なくとも１つの農薬活性物質。

本発明の第２の態様によれば、第１の態様の農薬製剤を製造するのに適した濃縮製剤が提供され、前記濃縮製剤は以下を含む：
ｉ）式（Ｉ）に従って、イリシコリンＨ、ヒドロキシルイリシコリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコール酸無水物から選択されるアジュバント：

式中：
Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルに表し；
Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表し；
Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表す；及び
ｉｉ）少なくとも１つの農薬活性物質。

本発明の第３の態様によれば、式（Ｉ）に従って、イリシコリンＨ、ヒドロキシルシイリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコール無水物から選択される化合物の使用が、少なくとも１つの農薬活性を含む農薬製剤中のアジュバントとして提供される：

式中：
Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルに表し；
Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１からＣ_４アルコキシルを表し；
Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１からＣ_４アルコキシルを表す。

本発明の第４の態様によれば、害虫を防除するために植生を処理する方法であって、第１の態様の製剤又は第２の態様の希釈濃縮物を、前記植生又は前記植生の直接の環境のいずれかに適用することを含む方法が提供される。

本発明の第５の態様によれば、以下の工程を含む、第１の態様によるアジュバントを得る方法が提供される：
コスモスポラ属種（Ｃｏｓｍｏｓｐｏｒａ ｓｐ）ＲＫＤＯ１７４７からの第１の態様による殺菌剤アジュバントの代謝合成を促進する条件下で培地中で該コスモスポラ属種を培養し、及び
培養培地からの合成アジュバントを精製する。

本発明の第６の態様によれば、コスモスポラ属種であるＲＫＤＯ１７４７株、農業研究サービス培養コレクション（ＮＲＲＬ）受託番号ＮＲＲＬ－６７９１０からなる生物が提供される。

本発明の第７の態様によれば、第１の態様による、コスモスポラ属種株であるＲＫＤＯ１７４７株、農業研究サービス培養コレクション（ＮＲＲＬ）受託番号ＮＲＬ－６７９１０からなる微生物から得られる抽出物であって、該抽出物は、イリシコリンＨ、ヒドロキシルシイリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコリン無水物のうちの少なくとも１つを含む、抽出物が提供される。

本発明の第８の態様によれば、第６の態様の生物を前記植生または前記植生の直接の環境のいずれかに適用することを含む、害虫を防除するための植生の処理方法が提供される。

本発明の第９の態様によれば、第６の態様による第１の態様または生物によるアジュバントを含む種子被覆組成物が提供される。

本発明の第１０の態様によれば、式（Ｉ）によるラメリコール酸無水物が提供される：

式中：
Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^５はヒドロキシルであり、Ｒ^２はメチルである；又は
Ｒ^１、Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２及びＲ^３はメチルである；又は
Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^１はメチルである；又は
Ｒ^３、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４およびＲ^１はメチルである；又は
Ｒ^４及びＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシルである；又は
Ｒ^３とＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４、及びＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシルである。

本明細書で定義される化合物は、少なくとも１つの農薬活性を有する農薬製剤中で使用される場合、所望のアジュバント特性を提供することが見出されている。重要なことに、同定されたクラスの化合物、ラメリコール酸無水物およびイリコリンは、内因性殺虫活性を示さない。

本明細書で使用される場合、「例えば（for example）」、「例えば（for instance）」、「そのような」、または「含んでいる」という用語は、より一般的な主題事項をさらに明確にする例を導入することを意味する。別段の規定がない限り、これらの実施例は、本開示に例示される用途を理解するための補助としてのみ提供され、いかなる態様においても限定することを意図されない。

置換基（例えば、「Ｃ_１～Ｃ_４アルキル」）中の炭素原子の数を記載する場合、数は、任意の分岐基に存在する任意の炭素原子を含めて、置換基中に存在する炭素原子の総数を指すことが理解される。さらに、例えば脂肪酸中の炭素原子数を記載する場合、これは、カルボン酸における炭素原子、および任意の分枝基中に存在する炭素原子の総数を指す。

上記イリシコリン化合物は、イリシコリンＨ、ヒドロキシルシイリンコリンＨ、またはイリシコリンＩから選択される。好ましくは、上記イリシコリン化合物は、イリシコリンＨである。

上記イリシコリン化合物は、アジュバントであると理解され、全体を通じてそのような化合物と称される。

イリシコリンＨの構造は５－（４－ヒドロキシルフェニル）－２－ピリドンであり、二環デカリン系を有する。イリシコリンＨ化合物は、式（Ａ）の構造を有する化合物を指すことが理解される。

ヒドロキシル－イリシコリンＨの構造は、さらにヒドロキシル基を有するイリシコリンＨと同じである。ヒドロキシル－イルシコリンＨ化合物は、式（Ｂ）の構造を有する化合物を指すことが理解される。

イリシコリンＩの構造は、二環状デカリン系のさらなるバリエーションである。イリシコリンＩ化合物は、式（Ｃ）の構造を有する化合物を指すことが理解される。

本発明のアジュバントはまた、ラメリコール酸無水物から選択することができる。アジュバントは、好ましくはラメリコール酸無水物から選択されることが理解される。

ラメリコール酸無水物は、式（Ｉ）の構造を有するものから選択される：

式中：
Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルに表し；
Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表し；
Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表す。

本明細書で使用される「Ｃ_１～Ｃ_４アルキル」という用語は、別段の定義がない限り、１～４個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖である飽和炭化水素ラジカルを指す。Ｒ^１からＲ^６のいずれかがＣ_１～Ｃ_４アルキルを表す場合、該アルキルは、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチルなどから独立して選択され得る。好ましくは、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルはメチルまたはエチルである。より好ましくは、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルはメチルである。

本明細書で使用される「Ｃ_１～Ｃ_４アルコキシル」という用語は、別段の定義がない限り、構造－Ｏ－Ａｌｋを有するアルコキシラジカルを形成し、酸素を介して隣接するラジカルに結合する酸素に結合したアルキル基を指し、ここで、Ａｌｋは本明細中で定義されるＣ_１～Ｃ_４アルキル基を表す。

Ｒ^２、Ｒ^５、およびＲ^６のいずれかがＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表す場合、前記アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、ブトキシ、プロパノキシなどから独立して選択され得る。好ましくは、Ｃ_１～Ｃ_４アルコキシルはメトキシまたはエトキシである。より好ましくは、Ｃ_１～Ｃ_４アルコキシルはメトキシである。

好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、以下のものから選択される：
Ｒ^１は、独立して水素またはメチルを表し；
Ｒ^２は、独立して水素またはメチル、好ましくはメチルを表し；
Ｒ^３およびＲ^４は、独立して水素またはメチルを表し、好ましくは両方が水素であるか、または一方が水素であり、他方がメチルであり；
Ｒ^５およびＲ^６は、独立して水素またはヒドロキシルを表し、好ましくは両方が水素であるか、または一方が水素であり、他方がヒドロキシルである。

より好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、以下のものから選択される：
Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２はメチルである；又は
Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^５はヒドロキシルであり、Ｒ^２はメチルである；又は
Ｒ^１、Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２およびＲ^３はメチルである；又は
Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^１はメチルである；又は
Ｒ^３、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４、及びＲ^１はメチルである；又は
Ｒ^４およびＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシル基である；又は
Ｒ^３及びＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４、及びＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシル基である。

特に、以下から選択されるラメリコール酸無水物が好ましい：

発酵に用いられる生物はコスモスポラ属に属する糸状菌である。コスモスポラ属種の特定の菌株であるＲＫＤＯ１７４７は、新規アジュバントの製造に特に有用であることが見出されており、この株は、米国イリノイ州ペオリアの農業研究サービス培養コレクション（ＮＲＲＬ）において、ブダペスト条約の下で寄託の主題とされている。

種 菌株 受入番号 受託日付
コスモスポラ属種 ＲＫＤＯ１７４７ ６７９１０ ２０２０年１月１０日

ＮＲＲＬ－６７９１０は、本発明の殺菌剤アジュバント活性を提供する際に特に好ましい。

イリシコリン、またはラメリコール酸無水物は、それぞれ、コスモスポラ属種、特にＲＫＤＯ１７４７の培養物から形成および抽出することができる。所望の化合物は、微生物代謝産物を一般的に回収するために典型的に使用される任意の手段によって、培養液または真菌バイオマスから抽出および精製することができる。例えば、各種イオン交換樹脂、非イオン性吸着樹脂、ゲル濾過クロマトグラフィー、活性炭、アルミナおよびシリカゲルなどの吸着剤によるクロマトグラフィー、又は高速液体クロマトグラフィーによる分離法、晶析、減圧濃縮、もしくは凍結乾燥が含まれ、この手段は、単独で、またはそれらの適切な組み合わせで、または繰り返し使用できることを意味する。

コスモスポラ属種であるＲＫＤＯ１７４７の培養は、天然源から、または農業研究サービス培養コレクション（ＮＲＲＬ）のような培養コレクションから入手することができる。コスモスポラ属種の分離株であるＲＫＤＯ１７４７は、真菌学の分野で公知の方法によって培養することができる。

本発明の化合物を製造する手段として、生産生物は、炭素源、窒素源、および無機塩を適切に含有する限り、任意の適切な合成媒体または天然媒体上で増殖させることができる。必要に応じて、培地にビタミンおよび他の栄養物質を適切に添加してもよい。

一般的な炭素源としては、グルコース、マルトース、フルクトース、スクロース、デンプンなどの糖類、グリセロール、マンニトールなどのアルコール類、グリシン、アラニン、アスパラギンなどのアミノ酸類、大豆油やオリーブ油などの油類及び脂肪類などが挙げられるが、これらに限定されない。窒素源の例としては、大豆粉末、コーンスティープリカー、牛肉抽出物、ペプトン、酵母抽出物、アミノ酸混合物および魚粉のような有機窒素含有化合物、ならびにアンモニウム塩および硝酸塩のような無機窒素化合物が挙げられる。同様に、無機塩の形態の微量栄養素、例えば、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸銅、塩化マンガン、硫酸亜鉛、塩化コバルト、および様々なリン酸塩を使用することができる。

微生物の増殖および本発明の化合物の効果的な生産を可能にする範囲内で、微生物を適切な培養温度で増殖させることができる。好ましい培養温度は１０～３２℃、より好ましくは２０～２５℃であり、培養開始時のｐＨは約４～６であることが好ましい。培養期間は、一般に約１日から数週間である。

培養は、本発明の化合物の生成量が回収に適した量に達したとき、好ましくはそれが最大量に達したときに終了することができる。培養方法としては、固相培養や通常の撹拌培養など、通常使用される方法まで、任意の方法を適切に用いることができる。

例えば、コスモスポラ属種の分離株であるＲＫＤＯ１７４７は、栄養素含有（例えば、ＹＭ（酵母麦芽抽出物）寒天上にプレートすることができ、観察可能なコロニーが現れるまで室温で数日間インキュベートすることができる。寒天上の個々のコスモスポラ属種であるＲＫＤＯ１７４７コロニーは、イリシコリンまたはラメリコール酸無水物の産生についてアッセイすることができる。

所望の分子を産生するこれらのコロニーを用いて、液体培地（例えば、ＹＭブロス培地）を接種することができ、これを適切な条件下（例えば、室温で数日間．振とうしながら）で培養して、種子接種材料を得ることができる。種子接種材料を使用して、より大きな液体培養物（例えば、ジャガイモデキストロースブロス）を開始することができ、これは、約室温で数日間（例えば、４～２８日間）インキュベートして、コスモスポラ属種培養物を拡大させることができる。

イリシコリンおよびラメリコール酸無水物は、液体培地（例えば、ジャガイモデキストロースブロス）に排出されることが見出されている。イリシコリンおよびラメリコール酸無水物は、酢酸エチルおよび水を含む液体：液体抽出、ならびに化合物を吸収性樹脂（Ｄｉａｉｏｎ（商標）ＨＰ２０など）に結合させ、樹脂を水で洗浄し、次に、適切な溶媒（メタノールまたはエタノールなど）を用いてラメリコール酸無水物およびイリシコリンを溶出することを使用して、発酵ブロスから単離することができる。シリコリンとラメリコール酸無水物の極性の違いにより、個々の化合物は、フラッシュクロマトグラフィー及び逆相固定相（Ｃ－１８など）などのクロマトグラフィーを用いて容易に分離することができる。

得られた抽出されたイリシコリンおよびラメリコール酸無水物を精製し、個々の均質化合物として使用することができる。別の実施形態では、抽出された物質は、第１の態様によるイリシコリンとラメリコール酸無水物との組み合わせであってもよく、農薬製剤において組み合わせて使用してもよい。

他の実施形態では、イリシコリンおよびラメリコール酸無水物は、他の利用可能な資源、典型的には他の真菌から得ることができる。

イリシコリンまたはラメリコール酸無水物は、合成技術によって製造することもできる。ラメリコール酸無水物およびその誘導体は、科学文献に記載されている市販の材料および合成方法を用いて、有機化学の当業者による化学合成によって製造することができる。ラメリコール酸無水物に構造的に関連し、出発物質として用いることができる市販の物質には、例えば、１，８－ナフタレンジカルボン酸、１，８－ナフタル酸無水物、アセナフテン、および５－ブロモアセナフテンが挙げられるが、これらに限定されない。ナフタレンベースの出発物質を使用して、カルボン酸官能基は、芳香族官能化反応を完了する前に、必要に応じて、標準的な保護基化学を使用して保護することができる。

ラメリコール無水物のアリールメチル基は、Ｆｒｉｅｄｅｌ－Ｃｒａｆｔｓアルキル化のような芳香族求電子置換によって導入することができる。フェノール基は、続いて、例えば塩素または臭素を使用する求電子芳香族ハロゲン化によって導入され得、次に、水酸化ナトリウムを使用する求核芳香族置換によって導入され得る。アリールメトキシ基、例えばラメリコール無水物ＩｂおよびＩｃに見られるものを導入するために、ナトリウムメトキシドを用いる求核芳香族置換を実施することができる。ヒドロキシルおよびカルボン酸官能基の保護および脱保護は、例えば、無水酢酸を用いる１，８－ジカルボン酸反応中間体の脱水によって起こり得る無水物部分の生成を可能にするために必要に応じて完了することができる。ラメリコール酸無水物の合成は、アセナフテンまたはその誘導体を出発物質として用いることも考えられる。このアプローチでは、エチレンブリッジの酸化によって無水物部分を導入することができる。この酸化に先立って、メチル、メトキシ、および／またはヒドロキシル官能基は、上述したような求電子的および求核的芳香族置換を含むが、これらに限定されない、利用可能な種々の合成手段によって導入することができる。しかしながら、これらの反応は、芳香族官能化反応の所望の結果に依存して、芳香族配向効果を調節するために、エチレンブリッジの酸化後に完了することもできる。

生体触媒または化学酵素的方法論はまた、酸化により無水物部分を合成する前にアセナフテンの芳香族位置を官能化するために利用することができる。これらの反応段階は、メチル、メトキシ、および／またはヒドロキシル官能基の位置が変化するラメリコール酸無水物Ｉａ－Ｉｃまたは他の誘導体を導くことができる。

アジュバント自体の特性は、アジュバントを含む農薬製剤に対して同じ利点を提供すると理解される。従って、アジュバント自体の特性の利点を有する、本発明のアジュバントを含む場合、農薬製剤が提供される。

殺虫剤および殺菌剤を含む農薬活性化合物は、活性化合物を植物／標的生物に取り込むことを可能にする製剤を必要とする。

本明細書で使用される「農薬製剤」という用語は、活性農薬を含む組成物を指し、濃縮物およびスプレー製剤を含む全ての形態の組成物を含むことを意図している。具体的に記載されていない場合、本発明の農薬製剤は、濃縮物、希釈濃縮物、またはスプレー可能な製剤の形態であってもよい。

本発明のアジュバントは、少なくとも１つの農薬活性を含む農薬製剤を形成するために、他の成分と組み合わせることができる。

従って、農薬活性化合物は、乳化可能濃縮物（ＥＣ）、乳化濃縮物（ＥＷ）、懸濁濃縮物（ＳＣ）、可溶性液体（ＳＬ）、油性懸濁濃縮物（ＯＤ）、および／または懸濁エマルジョン（ＳＥ）として処方することができる。

ＥＣ製剤およびＳＬ製剤においては、活性化合物は溶解形態で存在し得るが、ＯＤ、ＳＣ、ＥＷ、またはＳＥ製剤においては、活性化合物は固体または乳化液体として存在し得る。

本発明のアジュバントは、特に、ＥＣ、ＥＷ、ＳＣ、ＳＬ、ＯＤ、またはＳＥ処方において使用を見出すことが想定される。

農薬濃縮物は、水性または非水性であってもよく、水（または水性液体）で希釈して対応するスプレー製剤を形成するように設計された農薬組成物である。前記組成物は、液体形態（例えば、溶液、エマルジョン、または分散液）および固体形態（特に、水分散性固体形態）のもの（例えば、顆粒または粉末）を含む。

スプレー製剤は、植物またはその環境に適用することが望ましいすべての成分を含む水性農薬製剤である。スプレー製剤は、所望の成分（水以外）を含有する濃縮物の単純希釈、または個々の成分の混合、または濃縮物を希釈し、さらに個々の成分または成分の混合物を加える組み合わせによって調製することができる。典型的には、このような最終用途の混合は、配合物がスプレーされるタンク内で、または別法として、スプレータンクを充填するための保持タンク内で行われる。このような混合および混合物は、典型的には、タンク混合およびタンク混合物と呼ばれる。

従って、アジュバントは、農薬活性化合物の製剤（インカン／組み込み製剤）に組み込まれてもよく、またはスプレー液の濃縮製剤（タンクミックス）の希釈後に添加されてもよい。投与ミスを避け、農薬製品の適用中の使用者の安全性を改善するために、アジュバントを製剤に組み込むことが有利である。これにより、タンクミックス製品の包装材料を不必要に使用することもなくなる。

顧客のニーズに応じて、このようにして形成された濃縮物は、典型的には９５重量％までの農薬活性物質を含むことができる。前記濃縮物は、使用のために希釈され、約０．５重量％～約１重量％の農業化学的活性濃度を有する希釈組成物となる。前記希釈組成物（例えば、スプレー塗布速度が１０～５００ ｌ．ｈａ^－１のスプレー製剤）において、農薬活性濃度は、スプレーされた全製剤の約０．００１重量％～約１重量％の範囲であり得る。

本発明のアジュバントは、典型的には、製剤中の活性農薬の量に比例する量で使用される。農薬製剤の濃縮物においては、アジュバントの割合は、液体担体中の成分の溶解度に依存する。典型的には、そのような濃縮物中のアジュバントの濃度は、１重量％～９９重量％である。好ましくは、そのような濃縮物中のアジュバントの濃度は、１重量％～７０重量％である。より好ましくは、このような濃縮物中のアジュバントの濃度は、３重量％～５０重量％である。

例えばスプレー製剤を形成するための希釈に際して、アジュバントは、典型的には、スプレー製剤の０．０１重量％～２重量％、より通常は０．０３重量％～０．５重量％の濃度で存在する。さらに好ましくは、アジュバントはスプレー製剤の０．１２重量％～０．４重量％の濃度で存在する。

農薬組成物中の活性農薬に対するアジュバントの比は、好ましくは約１：４０～約１：１である。より好ましくは、アジュバントの農薬製剤中の活性農薬に対する比は、約１：２０～約１：１である。さらに好ましくは、アジュバントの農薬製剤中の活性農薬に対する比は、約１：５～１：１である。この比の範囲は、一般に、濃縮製剤（例えば、アジュバントが分散性液体濃縮物または分散性固体顆粒製剤に含まれる場合）およびスプレー製剤において維持される。

濃縮物（固体または液体）が活性農薬および／またはアジュバントの供給源として使用される場合、濃縮物は、典型的には、スプレー製剤を形成するために希釈される。希釈は、１～１０，０００、特に１０～１，０００倍の水濃縮物の総重量でスプレー製剤を形成することができる。

農薬活性が水性最終用途製剤中に固体粒子として存在する場合、ほとんどの場合、主に活性農薬の粒子として存在する。しかしながら、所望であれば、活性農薬は、固体担体、例えば、シリカまたは珪藻土上に支持され得、これは、上記のような固体担体、充填剤または希釈剤材料であり得る。

スプレー製剤は、典型的には、中程度の酸性（例えば、約３）から中程度のアルカリ性（例えば、約１０）、特に中性（例えば、約５から８）の範囲内のｐＨを有する。より濃縮された製剤は同様の程度の酸性／アルカリ性を有するが、それらは大部分が非水性であるため、ｐＨは必ずしもこれの適切な尺度ではない。

農薬製剤は、モノプロピレングリコールのような溶媒（水以外）、植物油またはスプレー油のような鉱油（非界面活性剤アジュバントとしてのスプレー製剤に含まれる油）を含むことができ、これらは第１アジュバントおよび補助アジュバントと関連する。そのような溶媒は、アジュバントのための溶媒として、および／または湿潤剤、例えば、プロピレングリコールとして含まれ得る。使用される場合、そのような溶媒は、典型的には、５重量％～５００重量％、望ましくは１０重量％～１００重量％の量のアジュバントに含まれる。このような組み合わせは、塩化アンモニウムおよび／または安息香酸ナトリウムのような塩、および／または尿素、特にゲル阻害剤を含むこともできる。

別の実施形態では、本発明のアジュバント、または第６の態様の生物のいずれかを、種子に塗布するのに適した種子塗布組成物に含めることができる。好ましくは、本発明のアジュバントは、種子被覆組成物に含まれ得る。

アジュバントは、組成物の全重量に基づいて、０．５～２５重量％、好ましくは２～１８重量％、より好ましくは５～１５重量％、特に８～１２重量％の範囲の濃度で、種子被覆組成物中に適切に存在する。

被覆は、フィルム被覆、ペレット化、および包接、または当技術分野で公知のこれらの技術の組み合わせを含み得る。本発明は、好ましくはフィルム被覆に対して、全ての前記被覆タイプに適用されることが想定される。

本発明の種子被覆組成物は、従来の方法で種子に適用することができる。

種子はプライミングされてもよいし、プライミングされていなくてもよい（発芽速度を改善するための処理、例えば、オスモプライミング、ハイドロプライミング、マトリックスプライミングに付されていてもよい）。

一実施形態において、種子には、本発明の種子被覆組成物、例えばポリマーのような結合剤を含むプライマー層を塗布する前に、人工層が設けられていない。従って、種子被覆組成物は、好ましくは、種子の天然外表面に直接塗布される。それにもかかわらず、種子被覆組成物を塗布する前に、種子表面が表面処理を受けている可能性がある。

好ましくは、種子被覆組成物は、液体組成物および／またはエマルジョンおよび／または分散および／またはラテックス組成物として適用され、その後、固化され（硬化および／または乾燥されたものを含む）、種子被覆を形成する。本出願で使用される用語「液体被覆組成物」は、懸濁液、エマルジョン、および／または分散液、好ましくは分散液の形態の被覆組成物を含むことを意味する。

種子を被覆するために、従来の被覆手段を用いることができる。種々の被覆機械が当業者に利用可能である。いくつかの周知の技術には、ドラムコーター、流動床技術、回転コーター（一体乾燥を伴うまたは伴わない）、および噴出床の使用が含まれる。適切には、種子被覆組成物は、ロータリーコータ、ロータリードライコータ、パンコータまたは連続処理装置によって種子に塗布される。

種子被覆組成物は、例えば、種子被覆組成物のフィルム被覆、スプレー塗布、浸漬またはブラシ塗布によって塗布することができる。好ましくは、この方法は、種子被覆組成物を塗布してフィルムまたは種子被覆層を形成することを含む。種子被覆は、典型的には、種子の表面に、堅固に付着した透湿性被覆を形成することを含む。この方法は、典型的には、播種前に液体種子被覆組成物を種子に塗布することを含む。

追加のフィルム被覆層は、化粧品、被覆率、活性剤、栄養素、およびより速い乾燥、種子の流れ、耐久性などの加工改良を含むが、これらに限定されない追加の利点を提供するために、本発明の被覆層の上部に任意に塗布されてもよい。

農薬配合物または種子被覆組成物はまた、所望により他の成分を含んでもよい。これらの他の構成要素は、以下を含むものから選択することができる。
●ポリビニルピロリドン；ポリビニルアルコール；カルボキシメチルセルロース；アラビアゴム；糖類、例えばスクロースまたはソルビトール；デンプン；エチレン－酢酸ビニルコポリマー、スクロースおよびアルギン酸塩のような、高い結合剤濃度で低粘度溶液を与えるために容易に水溶性である結合剤。
●カーボンブラック；タルク；珪藻土；カオリン；アルミニウム、カルシウムまたはステアリン酸マグネシウム；三リン酸ナトリウム；四ホウ酸ナトリウム；硫酸ナトリウム；ナトリウム、アルミニウムおよび混合ケイ酸ナトリウム；ならびに安息香酸ナトリウムのような希釈剤、吸収剤または担体；
●崩壊剤、例えば、界面活性剤、水中で膨潤する材料、例えば、カルボキシメチルセルロース、コロジオン、ポリビニルピロリドンおよび微結晶セルロース膨潤剤；塩、例えば、酢酸ナトリウムまたはカリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸塩またはセスキ炭酸塩、硫酸アンモニウムおよびリン酸水素二カリウム；
●アルコールエトキシレートおよびアルコールエトキシレート／プロポキシレート湿潤剤のような湿潤剤；
●スルホン化ナフタレンホルムアルデヒド縮合物のような分散剤及びポリアクリル骨格上にキャップされたポリエチレングリコール側鎖を有するコーム共重合体のようなアクリル共重合体；
●アルコールエトキシレート、ＡＢＡブロックコポリマー、またはヒマシ油エトキシレートのような乳化剤；
●発泡防止剤、例えばポリシロキサン発泡防止剤、典型的には製剤の０．００５重量％～１０重量％の量；
●市販の水溶性または混和性ガム、例えばキサンタンガムおよび／またはセルロース、例えばカルボキシメチル、エチルまたはプロピルセルロースなどの粘度調整剤；および／または
●保存剤及び／又は有機酸のような抗菌剤、又はそれらのエステル若しくは塩、例えばアスコルビルパルミテート、ソルビン酸カリウムのようなソルビン酸カリウム、安息香酸及びメチル並びにプロピル４－ヒドロキシル安息香酸プロピル、プロピオン酸ナトリウム、例えばフェノール、例えば２－フェニルフェノール；１，２－ベンゾイソチアゾリン－３－オン；又はホルムアルデヒド、例えばパラホルムアルデヒド；又は無機物質、例えば硫酸及びその塩、典型的には製剤の０．０１重量％～１重量％の量。

本発明による農薬配合物または種子被覆組成物はまた、乳化剤系の一部を形成する界面活性剤物質のような成分を含んでもよい。前記界面活性剤は、界面活性剤分散剤を含み得る。本発明の範囲外の他のアジュバント、例えば界面活性剤アジュバントを、本発明の組成物および製剤に含め、本発明で使用することができる。例としては、アルキル多糖類（より適切にはアルキルオリゴ糖と呼ばれる）；脂肪アミンエトキシレート、例えばココナッツアルキルアミン２ＥＯ；およびアルキル（またはアルケニル）無水コハク酸の誘導体、特にＰＣＴ出願ＷＯ９４／００５０８およびＷＯ９６／１６９３０に記載されているものが挙げられる。

製剤／組成物は、１つ以上の生物学的に活性な成分（植物増強剤、特に植物保護製品（ＰＰＰとも呼ばれる）を含む）を含み得る。活性成分、特に植物増強剤の適切な例は、抗菌剤、殺菌剤、殺虫剤（insecticidal agent）、殺線虫剤、軟体動物駆除剤、生物製剤、殺ダニ剤または殺ダニ剤、殺虫剤（pesticide）、および殺生物剤である。さらに考えられる有効成分には、消毒剤、微生物、殺鼠剤、除草剤（weed killer）（除草剤（herbicide））、誘引剤、（トリ）忌避剤、植物成長調整剤（ジベレリン酸、オーキシンまたはサイトカイニンなど）、栄養素（硝酸カリウム、硫酸マグネシウム、鉄キレートなど）、植物ホルモン、ミネラル、植物エキス、発芽促進剤、フェロモン、生物製剤などが含まれる。

本発明による配合物または種子被覆組成物に使用するのに適した農薬活性物質は、全て室温で固体または液体であり得る農薬活性化合物である。本発明のアジュバントは、全てのタイプの農薬活性に広く適用可能であると考えられる。

農薬活性剤とは、本発明の文脈において、植物保護剤、より特定の化学物質であり、医薬、農業、林業、および蚊の防除のような分野で使用される生物の異なる形態を死滅させることができる殺生物剤を指す。殺生物剤のグループの下には、いわゆる植物成長調節剤も含まれている。

本発明の農薬製剤または種子被覆組成物に使用するための殺生物剤は、典型的には、２つのサブグループに分けられる。
●抗真菌剤（ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ）、除草剤、殺虫剤、鎮痛剤、軟体動物駆除剤、減毒剤及び殺鼠剤などの農薬；
●殺菌剤（ｇｅｒｍｉｃｉｄｅ）、抗生物質、抗菌薬、抗ウイルス薬、抗真菌薬、抗原虫薬、抗寄生虫薬などの抗菌薬。

特に、殺虫剤、殺菌剤、または除草剤から選択される殺生物剤が特に好ましい。

「農薬」という用語は、有害動植物を予防し、破壊し、忌避し、または緩和することを目的とする物質またはその混合物を意味するものと理解される。農薬は、昆虫、植物病原体、雑草、軟体動物、鳥類、哺乳類、魚類、線虫類（回虫）およびヒトと食物を競い合い、財産を破壊し、疾病を拡大し、または有害である微生物を含む害虫に対して使用される化学物質または生物剤（ウイルスまたは細菌など）であり得る。以下の実施例では、本発明の農薬組成物に適した農薬を示す。

殺菌剤は、真菌の化学的制御である。殺菌剤は、庭や農作物に菌が広がるのを防ぐために使われる化学物質です。殺真菌剤は、真菌感染症と闘うためにも使用される。殺菌剤は接触性でも全身性でもよい。接触殺菌剤は、葉の表面に保持されている殺菌剤と接触すると、真菌を死滅させる。全身性殺真菌剤は植物組織に吸収され、宿主に侵入しようとすると真菌を死滅させる。

本発明によれば、適切な殺菌剤の例は、（３－エトキシプロピル）臭化水銀、２－メトキシエチル塩化水銀、２－フェニルフェノール、硫酸８－ヒドロキシキノリン、８－フェニル水銀オキシキノリン、アシベンゾラー、アシルアミノ酸殺菌剤、アシペタック、アルジモルフ、脂肪族窒素殺菌剤、アリルアルコール、アミド殺菌剤、アンプロピルホス、アニラジン、アニリド殺菌剤、抗生物質殺菌剤、芳香族殺菌剤、オーレオファンギン、アザコナゾール、アジチラム、アゾキシストロビン、多硫化バリウム、ベナラキシル－Ｍ、ベノダニル、ベノミル、ベンキノックス、ベンタルロン、ベンチアバリカルブ、塩化ベンザルコニウム、ベンザマクリル、ベンズアミド系殺菌剤、ベンザモルフ、ベンズアニリド系殺菌剤、ベンズイミダゾール系殺菌剤、ベンズイミダゾール前駆体系殺菌剤、ベンズイミダゾリルカルバメート系殺菌剤、ベンゾヒドロキサム酸、ベンゾチアゾール系殺菌剤、ベトキサジン、ビナパクリル、ビフェニル、ビテルタノール、ビチオノール、ブラストサイジン－Ｓ、ボルドー混合物、ボスカリド、架橋ジフェニル殺菌剤、ブロムコナゾール、ブピリメート、ブルゴーニュ混合物、ブチオベート、ブチルアミン、ポリスルフィドカルシウム、キャプタフォール、キャプタン、カルバメート殺菌剤、カルバモルフ、カルバニル酸殺菌剤、カルベンダジム、カルボキシン、カルプロパミド、カルボン、チェシャント混合物、キノメチオネート、クロベンチアゾン、クロラニホルメタン、クロラニル、クロルフェナゾール、クロルジニトロナフタレン、クロロネブ、クロルピクリン、クロルタロニル、クロルキノックス、クロゾリネート、シクロピロックス、クリバゾール、クロトリマゾール、コナゾール殺菌剤、コナゾール殺菌剤（イミダゾール）、コナゾール殺菌剤（トリアゾール）、酢酸銅（ＩＩ）、炭酸銅（ＩＩ）、塩基性、銅殺菌剤、水酸化銅、ナフテン酸銅、オレイン酸銅、オキシ塩化銅、硫酸銅（ＩＩ）、硫酸銅、塩基性、クロム酸亜鉛銅、クレゾール、クフラネブ、キュプロバム、亜酸化銅、シアゾファミド、シクラフラミド、環状ジチオカルバメート系殺菌剤、シクロヘキシミド、シフルフェナミド、シモキサニル、シペンダゾール、シプロコナゾール、シプロジニル、ダゾメット、ＤＢＣＰ、デバカルブ、デカフェンチン、デヒドロ酢酸、ジカルボキシミド系殺菌剤、ジクロフルアニド、ジクロン、ジクロロフェン、ジクロロフェニル、ジカルボキシイミド殺菌剤、ジクロゾリン、ジクロブトラゾール、ジクロシメット、ジクロメジン、ジクロラン、ジエトフェンカルブ、ピロ炭酸ジエチル、ジフェノコナゾール、ジフルメトリム、ジメチリモール、ジメトモルフ、ジモキシストロビン、ジニコナゾール、ジニトロフェノール殺菌剤、ジノブトン、ジノカプ、ジノクトン、ジノペントン、ジノスルホン、ジノテルボン、ジフェニルアミン、ジピリチオン、ジスルフィラム、ジタリンホス、ジチアノン、ジチオカルバメート殺菌剤、ＤＮＯＣ、ドデモルフ、ドディシン、ドジン、ドナトジン、ドラゾキソロン、エディフェンホス、エポキシコナゾール、エタコナゾール、エテム、エタボクサム、エチリモール、エトキシキン、エチル水銀２，３－ジヒドロキシプロピルメルカプチド、酢酸エチル水銀、臭化エチル水銀、塩化エチル水銀、リン酸エチル水銀、エトリジアゾール、ファモキサドン、フェンナミドン、フェナパニル、フェナリモール、フェンブコナゾール、フェンフラム、フェンヘキサミド、フェニトロパン、フェノキサニル、フェンピクロニル、フェンプロピジン、フェンプロピモルフ、フェンチン、フェルバム、フェリムゾン、フルアジナム、フルジオキソニル、フルメトオーバー、フルオピコリド、フルオロイミド、フルトリマゾール、フルオキサストロビン、フルキンコナゾール、フルシラゾール、フルスルファミド、フルトラニル、フルトリアフォール、フォルペット、ホルムアルデヒド、ホセチル、フベリダゾール、フララキシル、フラメトピル、フラミド殺菌剤、フラニリド殺菌剤、フルカルバニル、フルコナゾール、フルコナゾールシス、フルフラール、フルメシクロックス、フロファネート、グリオジン、グリセオフルビン、グアザチン、ハラクリネート、ヘキサクロロベンゼン、ヘキサクロロブタジエン、ヘキサクロロフェン、ヘキサコナゾール、ヘキシルチオホス、ヒドラルガフェン、ヒメキサゾール、イマザリル、イミベンコナゾール、イミダゾール殺菌剤、イミノクタジン、無機殺菌剤、無機水銀殺菌剤、ヨードメタン、イプコナゾール、イプロベンホス、イプロジオン、イプロバリカルブ、イソプロチオラン、イソバレディオン、カスガマイシン、クレソキシムメチル、石灰硫黄、マンコッパー、マンゼブ、マネブ、メベニル、メカルビンジド、メパニピリム、メプロニル、塩化第二水銀、酸化第二水銀、塩化第一水銀、水銀殺菌剤、メタラキシル、メタラキシル－Ｍ、メタム、メタゾキソロン、メトコナゾール、メタスルホカルブ、メトフロキサム、臭化メチル、イソチオシアン酸メチル、安息香酸メチル水銀、メチル水銀ジシアンジアミド、メチル水銀ペンタクロロフェノキシド、メチラム、メトミノストロビン、メトラフェノン、メトスルフォバックス、ミルネブ、モルホリン系殺菌剤、ミクロブタニル、ミクロゾリン、Ｎ－（エチル水銀）－ｐ－トルエンスルホンアニリド、ナバム、ナタマイシン、ニトロスチレン、ニトロタールイソプロピル、ヌアリモール、ＯＣＨ、オクチリノン、オフレース、有機水銀系殺菌剤、有機リン系殺菌剤、有機スズ系殺菌剤、オリサストロビン、オキサジキシル、オキサチイン系殺菌剤、オキサゾール系殺菌剤、オキシン銅、オクスポコナゾール、オキシカルボキシン、ペフラゾエート、ペンコナゾール、ペンシクロン、ペンタクロロフェノール、ペンチオピラド、フェニル水銀尿素、酢酸フェニル水銀、塩化フェニル水銀、ピロカテコールのフェニル水銀誘導体、硝酸フェニル水銀、サリチル酸フェニル水銀、フェニルスルファミド殺菌剤、ホスジフェン、フタリド、フタルイミド殺菌剤、ピコキシストロビン、ピペラリン、ポリカルバメート、ポリマージチオカルバメート殺菌剤、ポリオキシン、ポリオキソリム、ポリスルフィド殺菌剤、アジ化カリウム、ポリスルフィドカリウム、チオシアン酸カリウム、プロベナゾール、プロクロラズ、プロシミドン、プロパモカルブ、プロピコナゾール、プロピネブ、プロキナジド、プロチオカルブ、プロチオコナゾール、ピラカルボリド、ピラクロストロビン、ピラゾール殺菌剤、ピラゾホス、ピリジン殺菌剤、ピリジニトリル、ピリフェノクス、ピリメタニル、ピリミジン系殺菌剤、ピロキロン、ピロキシクロル、ピロキシフィル、ピロール系殺菌剤、キナセトール、キナザミド、キンコナゾール、キノリン系殺菌剤、キノン系殺菌剤、キノキサリン系殺菌剤、キノキシフェン、キントゼン、ラベンザゾール、サリチルアニリド、シルチオファム、シメコナゾール、アジ化ナトリウム、オルトフェニルフェノキシドナトリウム、ペンタクロロフェノキシドナトリウム、ポリスルフィドナトリウム、スピロキサミン、ストレプトマイシン、ストロビルリン殺菌剤、スルホンアニリド殺菌剤、硫黄、スルトロペン、ＴＣＭＴＢ、テブコナゾール、テクロフタラム、テクナゼン、テコラム、テトラコナゾール、チアベンダゾール、チアジフルオル、チアゾール系殺菌剤、チチョフェン、チフルザミド、チオカルバメート系殺菌剤、チオクロルフェンフィム、チオメルサール、チオファネート、チオファネートメチル、チオフェン系殺菌剤、チオキノックス、チラム、チアジニル、チ、ミドオキシチブトルクロホスメチル、トルナフテート、トリルフルアニド、酢酸トリル水銀、トリアジメフォン、トリアジメノール、トリアミホス、トリアリモール、トリアズブチル、トリアジン系殺菌剤、トリアゾール系殺菌剤、トリアゾキシド、酸化トリブチルスズ、トリクラミド、トリシクラゾール、トリフロキシストロビン、トリフルミゾール、トリフォリン、トリチコナゾール、未分類の殺菌剤、ウンデシレン酸、ウニコナゾール、尿素殺菌剤、バリダマイシン、バリナミド殺菌剤、ビンクロゾリン、ザリラミド、ナフテン酸亜鉛、ジネブ、ジラム、ゾキサミド、およびそれらの混合物を含む。

除草剤は、不要な植物を死滅させるために使用される殺虫剤である。選択的除草剤は、特定の標的を殺しながら、所望の作物を比較的害されないままにする。これらのうちのいくつかは雑草の成長を妨げることによって作用し、しばしば植物ホルモンに基づいている。廃土を除去するために使用される除草剤は、非選択的であり、接触するすべての植物物質を死滅させる。除草剤は、農業や芝生の景観管理に広く使用されている。これらは、高速道路や鉄道の維持管理のための総合植生管理（ＴＶＣ）プログラムに適用される。森林、牧草地システム、野生生物の生息地として用意されている地域の管理では、少量が使用されている。

適切な除草剤は、例えば、アリールオキシカルボン酸、例えばＭＣＰＡ、アリールオキシフェノキシプロピオン酸塩、例えばクロジナホップ、シクロヘキサンジオンオキシム、例えばセトキシジム、ヒドロキシベンゾニトリル、例えばブロモキシニル、スルホニル尿素、例えばニコスルフロン、トリアゾロピリミジン、例えばペノクススラム、トリケチオン、例えばメソトリオン、メトリブジン、ヘキサキシノン、またはアトラジンなどのトリアジン除草剤；クロルスルフロンなどのスルホニル尿素除草剤；レナシル、ブロマシル、テルバシルなどのウラシル；リニュロン、ジウロン、シデュロン、またはネブロンなどの尿素除草剤；アラクロール、またはメトラクロールなどのアセトアニリド除草剤；ベンチオカルブ、トリアレートなどのチオカルバメート系除草剤；オキサジアゾンなどのオキサジアゾロン除草剤；イソキサゾリドン除草剤、フェノキシ酢酸；フルアジホップ、アシフルオルフェン、ビフェノックス、またはオキシフルオルフェンなどのジフェニルエーテル除草剤；トリフルラリンなどのジニトロアニリン除草剤；グルホシネート塩およびエステルならびにグリホセート塩およびエステルなどの有機ホスホネート除草剤；および／またはブロモキシニルなどのジハロベンゾニトリル除草剤、またはイオキシニル、安息香酸除草剤、パラコートなどのジピリジリウム除草剤；クロマゾン、カルフェントラゾン、サフルフェナシル、ピロキサスルフォンなどの他の除草剤を含む群から選択することができる。

特に好ましい除草剤は、２，４－ジクロロフェノキシ酢酸（２，４－Ｄ）、アトラジン、安息香酸としてのジカンバ、グリホセート、グルホシネート、イミダゾリノンとしてのイマザピック、クロロアセトアミドとしてのメトラクロール、ピリジンカルボン酸としてのピクロラム、クロピラリド、およびトリクロピルまたは合成オーキシン、それらのそれぞれの水溶性塩およびエステル、ならびにそれらの混合物から選択され得る。

殺虫剤は、あらゆる発生形態の昆虫に対して使用される殺虫剤であり、昆虫の卵および幼虫に対して使用される殺虫剤および幼虫剤を含む。殺虫剤は、農業、医療、工業、家庭で使用されている。

適切な殺虫剤には、例えば、カンフェクロール、ＤＤＴ、ヘキサクロロシクロヘキサン、γ－ヘキサクロロシクロヘキサン、メトキシクロール、ペンタクロロフェノール、ＴＤＥ、アルドリン、クロルデン、クロルデコン、ディルドリン、エンドスルファン、エンドリンなどの塩素化殺虫剤、ヘプタクロル、マイレックスおよびそれらの混合物；例えば、アセフェート、アジンホスメチル、ベンスリド、クロレトキシホス、クロルピリホス、クロルピリホスメチル、ダイアジノン、ジクロルボス（ＤＤＶＰ）、ジクロトホス、ジメトエート、ジスルフォトン、エトプロップ、フェナミホス、フェニトロチオンなどの有機リン化合物、フェンチオン、フォスチアゼート、マラチオン、メタミドホス、メチダチオン、メチルパラチオン、メビンホス、ナレド、オメトエート、オキシデメトンメチル、パラチオン、フォレート、フォサロン、ホスメット、ホステブピリム、ピリミホスメチル、プロフェノホス、テルブホス、テトラクロルビンホス、トリブホス、トリクロルフォンおよびそれらの混合物；例えば、アルジカルブ、カルボフラン、カルバリル、メソミル、２－（１－メチルプロピル）フェニルメチルカルバメートおよびそれらの混合物などのカルバメート；ピレスロイド、例えば、アレスリン、ビフェントリン、デルタメトリン、ペルメトリン、レスメトリン、スミトリン、テトラメトリン、トラロメトリン、トランスフルトリンおよびその混合物；例えば、デリス（ロテノン）、除虫菊、ニーム（アザディラクチン）、ニコチン、カフェインおよびそれらの混合物などの植物毒素由来化合物；イミダクロプリドなどのネオニコチノイド；アバメクチン、エママクチン；インドキサカルブなどのオキサジアジン；および／またはリナキシピルなどのアントラニルジアミドから選択されるものが含まれ得る。

殺虫剤はダニを死滅させる殺虫剤です。抗生物質系の殺虫剤、カルバメート系の殺虫剤、ホルムアミジン系の殺虫剤、ダニ増殖調節剤、有機塩素系、ペルメトリン、有機リン系の殺虫剤はすべてこのカテゴリーに属する。軟体動物駆除剤は、ガ、ナメクジ、カタツムリなどの軟体動物の駆除に使用される殺虫剤です。これらの物質には、メタアルデヒド、メチオカーブおよび硫酸アルミニウムが含まれる。線虫駆除剤は、寄生性線虫（線虫門）を死滅させるために使用される化学農薬の一種である。

最も好ましくは、本発明の農薬配合物または種子被覆組成物中に存在する活性物質は、トリアゾール系殺菌剤、ストロビルリン系殺菌剤、またはそれらの組み合わせから選択される。特に、テブコナゾール、フルトリアフォール、カルベンダジム、アゾキシストロビン、クレゾキシム－メチル、シプロコナゾール、またはピラクロストロビン。

栄養素は、農薬に加えて、または代替として存在してもよい。このような製剤／組成物において、栄養素は典型的には乾燥形態である。

栄養素は、好ましくは、固相栄養素であってもよい。固体栄養素は、本発明において、融点が２０℃（標準圧力）を超える物質を意味するものとして理解されるべきである。固体栄養素はまた、不溶性の栄養成分、すなわち、水への溶解度が、添加後に濃縮物中に有意な固形分が存在するような栄養成分を含む。

栄養素とは、植物の成長を促進または改善するために望ましいまたは必要な化学元素および化合物をいう。適切な栄養素は、一般に、多量栄養素または微量栄養素として記載される。本発明による濃縮物中で使用するのに適した栄養素は、すべて栄養化合物である。

微量栄養素は、通常、微量金属または微量元素を指し、しばしば低用量で適用される。適切な微量栄養素には、亜鉛、ホウ素、塩素、銅、鉄、モリブデン、およびマンガンから選択される微量元素が含まれる。微量栄養素は、可溶性形態であってもよく、または不溶性固体として含まれてもよく、塩またはキレート化されてもよい。

多量体は、典型的には、窒素、リン、およびカリウムを含むものを指し、硫酸アンモニウムなどの肥料、および水質改良剤を含む。好適な多量栄養素には、肥料および他の窒素、リン、カリウム、カルシウム、マグネシウム、硫黄含有化合物、および水質改良剤が含まれる。

適切な肥料には、窒素、リン、カリウムまたは硫黄のような栄養素を提供する無機肥料が含まれる。肥料は、比較的低濃度で希釈された製剤中に、またはより高濃度の溶液として含まれてもよく、この溶液は、非常に高濃度で、固形肥料および溶液を含んでもよい。

栄養素の含有は、特定の栄養素に依存し、微量栄養素は、典型的には、より低い濃度で含有され、一方、多量栄養素は、典型的には、より高い濃度で含有されることが想定される。

生体刺激成分は、作物植物の成長を促進するために、配合物または種子被覆組成物に添加され得る。生体刺激成分は、１つ以上の生体刺激剤を含み得るか、またはそれらから構成され得る。

有用な生体刺激剤の例としては、植物成長ホルモンおよび植物成長調節剤、例えば、サイトカイニン、オーキシン、ジベレリン、エチレン、アブシジン酸が挙げられるが、これらに限定されない。他の生体刺激剤には、タンパク質加水分解物誘導体、海藻抽出物、アミノ酸、植物抽出物、キトサン誘導体、生体高分子、無機化合物、腐植物質、微生物接種材料および微生物産物、またはそれらの混合物が含まれる。

本発明のアジュバントは、それが含まれる農薬製剤のアジュバントを提供し、特に、殺菌剤アジュバンシーを提供する用途を見出すことができる。

本明細書中で使用される場合、「アジュバント」または「アジュバント」という用語は、農薬製剤に添加されると、農薬の所望の効果を改善する化合物を指す。アジュバントは、活性物質の性能の改善によって、希釈剤、混合物、活性物質、または標的に影響を与えることができる。アジュバントを使用して、農薬が機能する領域に農薬を付着させ、農薬が侵入することを可能にする葉表面の表皮層を変化させ、および／または農薬製剤中の活性農薬に対して標的農薬を感作させることができる。

特定のアジュバンシー効果には、界面活性剤、乳化剤（分散剤および懸濁剤）、油、乳化可能な油、相溶化剤、緩衝剤およびコンディショニング剤、消泡剤、沈着剤、ドリフト制御剤、増粘剤、展着剤（湿潤剤）、ステッカー（ビルダーおよび増量剤）、植物浸透剤、トランスロケーター、土壌浸透剤、安定剤（ＵＶフィルター）、および／または活性農薬に対する害虫感作が含まれる場合がある。

好ましくは、本発明のアジュバントは、タンク添加用に製剤化されたアジュバント、または農薬濃縮物中に直接製剤化されたアジュバント中の唯一の成分または主官能化剤としての使用を見出すことができる。

殺菌剤単独（例えば、ピラクロストロビン）のボトリチス・シネレアに対する活性との関連でのアジュバント活性の尺度として、阻害パーセント（アジュバントおよび殺真菌剤）を阻害パーセント（殺真菌剤）で除した値を、より高い所望の値で定義することができる。したがって、１の値は、殺菌剤単独に対するアジュバント／殺菌剤の組合せの同等の活性を表すが、１を超える値は、殺菌剤単独よりもアジュバント／殺菌剤の組合せによるより高い活性を表すであろう。本発明のアクティブは、１より大きい値を有することができる。好ましくは、本発明の活性剤は、１．５より大きい、最も好ましくは２より大きい値を有する。

本明細書に記載されるすべての特徴は、任意の組み合わせで、上記の態様のいずれかと組み合わせることができる。

本発明をより容易に理解するために、以下の説明を例として参照する。

記載されているすべての試験および物理的特性は、本明細書に別段の記載がない限り、または参照されている試験方法および手順に別段の記載がない限り、大気圧および室温（すなわち、２０～２５℃）で測定されていることが理解される。

形成及び抽出
真菌Ｃｏｓｍｏｓｐｏｒａ ｓｐ．ＲＫＤＯ１７４７の培養抽出物のバイオアッセイ誘導分画は、ラメリコール酸無水物およびシリコリンの単離につながった。分離株ＲＫＤＯ１７４７をＹＭ（イーストエキスモルトエキス）カンテン培地で培養し、２２℃で１４日間インキュベートした。８個のコロニー外植片（約３ｍｍ^３）を用いて、滅菌５０ｍＬ試験管に１５ｍＬのＹＭブロスを接種し、２００ＲＰＭ、２２℃で５日間．振とうし、種子接種材料を作製した。種培養を用いて、三角フラスコ中で調製した滅菌米発酵培地（１％玄米および２．５％ｍＬ ＹＮＢブロス（０．６７％ＹＮＢ粉末、０．５％ショ糖））を接種した。

２２℃で２１日後、１容量の酢酸エチルで発酵物を抽出し、１７５ＲＰＭで６０分間．振とうした。抽出物をＷｈａｔｍａｎ ＃３濾紙を通して濾過することにより清澄化し、溶媒を減圧下で除去した後、化学的精製を行った。

ＲＫＤＯ１７４７発酵抽出物をＳｉｌａｓｅｐ Ｃ１８フラッシュカートリッジ（４３ｇ Ｃ－１８）上で、１０％ＭｅＯＨ：９０％Ｈ_２Ｏ～１００％ＭｅＯＨの勾配を用いて、Ｔｅｌｅｄｙｎｅ Ｎｅｘｔｇｅｎ ３００^＋ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ上で２０分間分画した。ＳＥＤＥＸ ８０ＬＴ ＥＬＳＤおよびサーモフォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）検出器を備えたＴｈｅｒｍｏ Ｅｘａｃｔｉｖｅ Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（ＥＳＩ－ＭＳ）と組み合わせたＴｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｃｃｅｌａ ＵＨＰＬＣ上で画分を分析した。ラメリコール酸無水物またはイリシコリンを含有する画分を、蒸発光散乱検出器（Ｗａｔｅｒｓ ２４２４）および質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ ３１００）を備えたＷａｔｅｒｓ ＨＰＬＣシステム上で、逆相Ｃ－１８ ＨＰＬＣ（Ｋｉｎｅｔｅｘ ５μｍ Ｃ１８カラム、１０×２５０ｍｍ）を用いて精製した。ラメリコール酸無水物の初期精製は、流速３ｍＬ／分の６０％ＭｅＣＮ水溶液のアイソクラティック溶出で行い、イリチコリンＨを８０％ＭｅＣＮ水溶液のアイソクラティック溶出で溶離した。

質量分析とＮＭＲ分析を組み合わせて、ラメリコール無水物とイリシコリンＨの構造を解明した。ＮＭＲスペクトルは、^１Ｈおよび^１３Ｃについて、それぞれ４００ＭＨｚおよび１５０ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩＩ ４００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計で記録した。スペクトルは、残存するユータール化されていない溶媒ピークを参照した。

ｍ／ｚ ２６１．０３９６［Ｍ＋Ｈ］^＋およびｍ／ｚ ４３４．２３２７［Ｍ＋Ｈ］^＋に相当する代謝産物のＮＭＲ解析は文献データと一致し、それぞれラメリコール無水物（Ｉａ）およびイルシコリンＨ（Ａ）としての構造を確認した。残りの４種類の代謝物（ｍ／ｚ ２７５．０５５３（Ｉｃ）、２７７．０３４２（Ｉｂ）、２８９．０７０７（ＩｄおよびＩｅ）および３０５．０６５７（Ｉｆ ＆ Ｉｇ）［Ｍ＋Ｈ］^＋）は、さらなるヒドロキシルおよび／またはメトキシ置換を含むさらなる置換ラメリコール酸無水物に対応した。

ラメリコール無水物（Ｉａ）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ２．７８（ｓ、３Ｈ）、６．３５（ｓ、Ｈ）、６．７８（ｓ、Ｈ）ｐｐｍ；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃ_１３Ｈ_８Ｏ_６［Ｍ＋Ｈ］＋について計算値２６１．０３９４、実測値２６１．０３９６。
ラメリコール無水物２７７（Ｉｂ）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ２．８４（ｓ、３Ｈ）、６．７８（ｓ、Ｈ）ｐｐｍ；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃ_１３Ｈ_８Ｏ_７［Ｍ＋Ｈ］＋について計算値２７７．０３４３、実測値２７７．０３４２。
ラメリコール無水物２７５（Ｉｃ）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ２．６７（ｓ、３Ｈ）、３．９６（ｓ、Ｈ）、６．３５（ｓ、Ｈ）、６．６２（ｓ、Ｈ）ｐｐｍ；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃ_１４Ｈ_１０Ｏ_６［Ｍ＋Ｈ］＋について計算値２７５．０５５０、実測値２７５．０５５３。
ラメリコール無水物２８９（ＩｄおよびＩｅ）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ２．９６（ｓ、３Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、６．７９（ｓ、Ｈ）、６．３４（ｓ、Ｈ）ｐｐｍ；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃ_１５Ｈ_１２Ｏ_６［Ｍ＋Ｈ］＋について計算値２８９．０７０７、実測値２８９．０７０８。
ラメリコール無水物３０５（ＩｆおよびＩｇ）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ２．６６（ｓ、３Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）、６．３７（ｓ、Ｈ）ｐｐｍ；ｚ：Ｃ_１５Ｈ_１２Ｏ_７［Ｍ＋Ｈ］＋について計算値３０５．０６５６、実測値３０５．０６５７。

補助的な例
「阻害率」および「倍率変化」というパラメータは、ａｄを表すものと理解され、次のように計算される。
阻害パーセント－阻害パーセントは、殺菌剤および／またはアジュバントが、ビヒクルで処理した対照と比較して、２２℃で４８時間インキュベートした後、微生物の目に見える増殖を阻害する量を表すと理解される。これは、次の式を使用して計算される。
［（Θ_Ｃ－Θ_Ｔ）／Θ_Ｃ］×１００％
ここで、
Θ_Ｃ＝溶媒（溶媒処理対照）を添加した寒天上で増殖したコロニーの直径、および
τ＝適切なビヒクル（すなわち、水ＥｔＯＨ、ＭｅＯＨ、ＭｅＣＮ、ＤＭＳＯなどの溶媒）中に製剤化された殺菌剤および／またはアジュバントを添加した寒天上で増殖したコロニーの直径。

倍数変化－倍数変化は、殺菌剤単独と比較して、微生物を阻害する際のアジュバント／殺菌剤の組み合わせの尺度である。これは、アジュバントが殺菌剤単独と比較してどのように機能するかを示す。これは、次の式を使用して計算される。
ＩＮＨ_ＡＦ／ＩＮＨ_Ｆ
ここで、
殺真菌剤およびアジュバントで処理した場合の真菌増殖のＩＮＨ_ＡＦ＝阻害パーセント、および
ＩＮＨ_Ｆ＝殺真菌剤単独で処置した場合の真菌増殖阻害パーセント。

実施例－ピラクロストロビンによる補助療法
Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ（ＡＴＣＣ ９０４７９）をジャガイモデキストロース寒天（ＰＤＡ）上で７日間、日周ＵＶサイクル（１２時間ＵＶ光と１２時間暗）で培養した。胞子を緩衝滅菌生理食塩水（０．９％生理食塩水、１％Ｔｗｅｅｎ ８０）中で回収し、血球計数器を用いて計数した。胞子懸濁液を８．５×１０^６胞子／ｍＬの最終濃度に調整して、標準化接種材料を作製した。

アジュバント試験のための菌糸フラグメントを調製するために、８．５×１０^４胞子を用いて、１５０×２５ｍｍの試験管中に１０ｍＬのジャガイモデキストロースブロスを接種した。チューブを２２０ＲＰＭ、２２℃で４８時間インキュベートした。培養物から菌糸断片を作製するために、培養物を約２０個の滅菌した直径５ｍｍのガラスビーズを含む５０ｍＬプラスチック製円錐管に移し、５分間ボルテックスした後、チューブを５分間放置して大きな菌糸塊を沈降させ、次に菌糸断片を含む上層を除去し、増殖阻害アッセイのための接種材料として使用した。

殺菌剤およびアジュバントをメタノールに溶解し、溶融ＰＤＡ（約５０℃）に加え、次に、寒天を１２ウェルマルチウェルプレート（１ｍＬ／ウェル）のウェルに分布させた。プレートを室温に冷却し、菌糸接種物１０μＬを各ウェルの中心に添加した。プレートを２２℃で４８時間インキュベートし、デジタルキャリパーを用いてコロニー直径を測定した。生物学的増殖対照は菌糸および媒体（０．０７％メタノール）からなり、陰性対照は培地および媒体（０．０７％メタノール）であった。

本発明のアジュバント活性の結果を表１に示す。Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａに対するピラクロストビンのアジュバント活性は、試験した各化合物で観察され、最も顕著なのは、０．１μｇ／ｍＬのピラクロストロビン単独と比較して殺菌活性が７．５９および６．１０倍増加したラメリコール無水物２８９（ＩｄおよびＩｅ）および３０５（ＩｆおよびＩｇ）であった。ラメリコール酸無水物２８９（ＩｄおよびＩｅ）、ラメリコール酸無水物３０５（ＩｆおよびＩｇ）およびイリシコリンＨ（Ａ）は、試験した濃度のいずれにおいても、それ自体に固有の殺菌活性を示さなかった。

殺真菌活性に対するアジュバントの効果は、増殖阻害の倍増として表される。１の値は殺菌活性の増加がないことを示す。１未満の値は殺真菌活性の減少を示し、１より大きい値は殺真菌活性の増加を示す。

実施例－細胞毒性
ラメリコール酸無水物およびイリシコリンＨの細胞毒性を、アフリカミドリザルＶｅｒｏ腎細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－８１）に対してｉｎ ｖｉｔｒｏで評価した。１０％ウシ胎児血清（ＶＷＲ＃ＣＡ９５０４３－９７６）、１００μＵペニシリン、およびＴ７５ｃｍ^２細胞培養フラスコ中の０．１ｍｇ／ｍＬストレプトマイシンを補充したイーグル最小必須培地（Ｓｉｇｍａ Ｍ５６５０）１５ｍＬ中で細胞を増殖させ、維持した。細胞を、５％ＣＯ_２の加湿雰囲気中、３７℃で２４時間インキュベートした。培養培地は２～３日ごとに更新し、細胞は８０％コンフルエントを超えてはならなかった。

８０％コンフルエントで、細胞をカウントし、希釈し、９０μＬの増殖培地中でウェル当たり１０，０００細胞の細胞密度で９６ウェル細胞培養プレート（ＶＷＲ＃２９４４２－０５４）に平板培養した。プレートを３７℃で５％ ＣＯ_２の加湿雰囲気中で２４時間インキュベートし、細胞をプレートに付着させた後、処理した。２４時間後、アジュバントをＤＭＳＯに溶解し、連続希釈し、１μｇ／ｍＬから１２８μｇ／ｍＬの範囲の最終濃度でウェルに添加した。ＤＭＳＯをウェル中の最終濃度１％のビヒクルとして使用した。

プレートを３７℃で５％ ＣＯ_２の加湿雰囲気中で２４時間インキュベートした後、アラマブルー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を培養容量の１０％で各ウェルに添加した。蛍光は、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈプレートリーダーを用いて、励起５６０／１２、発光５９０ｎｍで、アラマーブルー添加後０時間および４時間でモニターした。最終測定値から時間ゼロ発光５９０ｎｍ測定値を差し引いた後、ビヒクル対照ウェルに対する細胞生存率の推定パーセンテージを計算した。

ラメリコール無水物２８９（ＩｄおよびＩｅ）、ラメリコール無水物３０５（ＩｆおよびＩｇ）、およびイルシコリンＨ（Ａ）は、試験された最高濃度（１２８ｍｇ／ｍＬ）でＶｅｒｏ細胞に対して細胞毒性を示さなかったことから、アジュバントは試験された濃度で哺乳動物細胞に対して毒性がないことが示された。

実施例－Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａに対する他の殺菌剤とのアジュバンシー
ラメリコール酸無水物アジュバント（Ｉａ）の機能的特性化を拡大するために、殺菌剤耐性行動委員会（ＦＲＡＣコードリスト２０１８）によって分類される６つの異なる殺菌剤グループに属する７つの殺菌剤と組み合わせて試験した。Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａに対する殺真菌活性に対するアジュバント－殺真菌剤併用の効果を表２に示す。

数字は、殺真菌剤およびアジュバントビヒクル単独で処理された真菌試験微生物と比較した真菌増殖阻害の倍数変化を示す。ｎ．ｔ．は試験しなかったことを示す。

アジュバント（Ｉａ）は、７種類の殺真菌剤のうち６種類と共に、Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａに対する殺真菌活性を１６～４５倍増加させた。マンコゼブでは最も低い効果が観察されたが、この場合でも殺真菌効果の１．９～３．１倍の増加が観察された。

これらの結果は、ラメリコール無水物アジュバント（Ｉａ）が、異なる作用モードを有する異なる化学クラスに属する多数の殺菌剤に適用可能なアジュバント効果を提供することを明確に示している。

アジュバント単独ではＢ．ｃｉｎｅｒｅａの増殖を阻害しなかったことから、この改善された対照は相加的な殺真菌効果によるものではなく、このことは真菌の増殖に影響を及ぼさないことを示している。

実施例－他の真菌に対する他の殺真菌剤との補助剤
活性の生物学的スペクトルを評価するために、ラメリコール無水物アジュバント（Ｉａ）を、５つの異なる属に属する６つの異なる真菌試験微生物に対する７つの殺真菌剤と組み合わせて試験した。

（Ｉａ）のアジュバント効果を評価する前に、各試験菌に対する各殺菌剤の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を、減菌濃度を含む寒天プレート上での発育を測定することにより決定した。

ＭＩＣが決定されたら、４μｇ／ｍＬに固定した（Ｉａ）濃度および真菌の増殖を１０～２０％阻害する濃度の各殺真菌剤を用いて、アジュバント試験を実施した。

結果を表３に示す。

真菌標的は、ＦＴ１－Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、ＦＴ２－Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ、ＦＴ３－Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｉｎｆｅｃｔｏｒｉｕｍ、ＦＴ４－Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ、ＦＴ５－Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ、ＦＴ６－Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｐである。

数字は、殺真菌剤およびアジュバントビヒクルのみで処理された真菌試験微生物と比較した真菌増殖阻害の倍数変化を示す。値１は殺真菌活性に影響がないことを示し、値＞１は殺真菌活性の改善を示します。ｎ．ｔ．試験しなかったことを示す。

アジュバント活性は、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉに対するジメトモルフ（１．６３倍の増加）、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍに対するピラクロストロビン（１．６３倍の増加）、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｉｎｆｅｃｔｏｒｉｕｍに対するマンコゼブ、ジメトモルフ、プロチオコナゾール、およびピラクロストロビン（それぞれ２．４５、１．２５、１．５０、１．１８倍の増加）で観察された。Ｐ．ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉに対するピリメタニル、マンゼブ、ジメトモルフ、プロチオコナゾール、イプロジオン、ピラクロストロビン、およびキャプタンでは、それぞれ１．３１倍、１．６３倍、１．８５倍、１．５２倍、１．６５倍、１．２７倍、１．１７倍増加、マンコゼブ、ジメトモルフ、プロチオコナゾール、およびイプロジオンに対するＡ．ｆｌａｖｕｓ（それぞれ２．０１、１．２７、１．２８、１．７２倍の増加）、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｐ．に対するピリメタニル（１．６７倍の増加）。

これらの結果は、ラメリコール無水物アジュバント（Ｉａ）が、異なる化学構造および作用様式を有する複数の殺菌剤と組み合わせて、いくつかの真菌種の制御を改善することができ、従って、本明細書に記載されるアジュバントの実用的応用をさらに広げることができることを実証する。

実施例－植物毒性
植物の安全は、アジュバントの適用が植物の健康に悪影響を及ぼさないように、殺菌剤アジュバントの重要な特徴である。ラメリコール酸無水物の安全な使用レベルを決定するために、植物毒性試験をダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ，ｃｖ Ａｌｅｘａ）で実施した。

９ｃｍ×９ｃｍのプラスチックポット中でＬｅｖｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｍ３堆肥中にＢｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ ＧｌｙｃｉＭａｘ）を接種した単一種子を播種してダイズ植物を成長させた。ガラスハウスの温度は、昼間は２２±２℃、夜間は１９±２℃に設定した。光周期は１４時間に設定した。

ＳＯＮ－Ｔ電球からダイズ植物に補助照明を与えた。アザミウマ（Ｂｉｏｌｉｎｅ－Ａｍｂｌｙｓｅｉｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ）の損傷を予防するために生物学的コントロールを用いた。

すべての植物は良好な水分状態に維持されていた。Ｖ４期（６週間）に達したダイズ植物にアジュバント処理を施した。塗布直後に葉面の処理を保持するために、ポットラックから作製したプラットフォーム上に葉を置いた。フレームは、葉が上部に平らに配置されるのを可能にするのに十分な高さに積み重ねられた。積層されたカードシートをフレームの上部にテープで留め、リーフの支持体を形成した。

大豆植物では、１つの完全に膨張した三枚葉の中心葉を、マイクロポアテープで注意深く縁をテープで下ろすことによって平らに保持した。

２つの調製物、酢酸エチルによる固体米の発酵を抽出して調製したイリコリンおよびラメリコール酸無水物を含有する粗発酵抽出物、ならびにラメリコール酸無水物３０５を含有する精製画分（ＩｆおよびＩｇ）について植物毒性を評価した。これらの材料は、上記のように調製された。

被験物質を１０ｍｇ／ｍＬの濃度の２０％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯに溶解し、２％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯ濃度を維持しながら０．０５～１ｇ／Ｌの希釈系列を調製した。

陽性植物毒性対照はＳｙｎｐｅｒｏｎｉｃ Ａ１１（１ｇ／Ｌ；Ｃｒｏｄａから入手可能）であったが、陰性対照はＡｔｐｌｕｓ ＵＥＰ－１００（１ｇ／Ｌ；Ｃｒｏｄａから入手可能）であった。

処置は葉の部位に無作為に割り付け、微細チップマーカーペンを用いてマークした。任意の希釈速度に対して、全ての処理は単一の葉に適合することができた。各処理希釈には、別々の植物上の合計８個の反復葉を使用した。処理は１０μＬ滴として葉に適用した。プラント上部の照明は、処理中に消灯し、液滴が完全に乾燥するまでオンにしなかった。

植物毒性をスコア化し、処理後１日目（ＤＡＴ）、７日目および１４日目に植物の植物毒性組織損傷を評価した。

結果を表４に示す。

植物毒性尺度０～３：
０－損傷／壊死なし；１－滴によって濡れた領域にわずかなスポット様壊死；２－環状壊死；３－拡大壊死。

粗抽出物およびラメリコール酸無水物３０５の観察された植物毒性は、０．２５ｍｇ／Ｌ／スポットまで試験した場合、０．４未満であった。このことは、植物毒性作用が軽微であり、滴によって濡れたスポットに限定されていることを示している。０．１ｍｇ／ｍＬ以下では、いずれの試験試料にも植物毒性作用は認められなかった。予想されたように、Ａｔｐｌｕｓ ＵＥＰ－１００は、わずかに植物毒性作用を示したにすぎず、１４ＤＡＴしか発現しなかった。

これらの結果は、Ｃｏｓｍｏｓｐｏｒａ ｓｐ．から調製したアジュバント調製物の適用が実証された。ＲＫＤＯ １７４７は、０．２５ｇ／Ｌ未満の濃度で適用した場合、大豆組織に損傷を与えず、粗抽出物およびラメリコール酸無水物３０５試料にそれぞれ０．１または０．０５ｇ／Ｌで適用した場合、植物毒性作用を示さなかった。ラメリコール酸無水物のアジュバント活性は、一般に、０．０１ｇ／Ｌ未満の濃度で得られるので、アジュバント活性を得るのに必要な速度は、植物毒性作用が観察される速度よりもかなり低い。本発明は、例示としてのみ説明される上記実施形態の詳細に限定されるものではないことを理解されたい。多くのバリエーションが可能である。

Claims (14)

1. 以下：
   ｉ）式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、
   Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルに表し；
   Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表し；
   Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；および
   Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表す］
   による、イリシコリンＨ、ヒドロキシルイリシコリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコール酸無水物から選択されるアジュバント；及び
   ｉｉ）少なくとも一の農薬活性物質
   を含む農薬製剤。
2. アジュバントが、式（Ｉ）によるラメリコール酸無水物である、請求項１に記載の製剤。
3. 式（Ｉ）の化合物が、
   Ｒ^１は、独立して水素またはメチルを表し；
   Ｒ^２は、独立して水素またはメチルを表し；
   Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはメチルを表し；および
   Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素またはヒドロキシルを表す
   化合物から選択される、請求項２に記載の製剤。
4. 式（Ｉ）の化合物が、
   Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、およびＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２はメチルであり；
   Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、およびＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^５はヒドロキシルであり、Ｒ^２はメチルであり；
   Ｒ^１、Ｒ^４、Ｒ^５、およびＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２とＲ^３はメチルであり；
   Ｒ^４、Ｒ^５、およびＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^１はメチルであり；
   Ｒ^３、Ｒ^５、およびＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４、およびＲ^１はメチルであり；
   Ｒ^４とＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシル基であり；
   Ｒ^３とＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４、およびＲ^１はメチル、Ｒ^６はヒドロキシル基である、
   化合物から選択される、請求項２または３のいずれかに記載の製剤。
5. ラメリコール酸無水物が、以下：
   

   

   

   から選択される、請求項２～４のいずれか１項に記載の製剤。
6. 請求項１～５のいずれか一項に記載の農薬製剤を製造するのに適した濃縮製剤であって、前記濃縮製剤は、
   ｉ）式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、
   Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
   Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表し；
   Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；。
   Ｒ^５とＲ^６は，独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表す］
   による、イリシコリンＨ、ヒドロキシルイリシコリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコール酸無水物から選択されるアジュバント；及び
   ｉｉ）少なくとも一の農薬活性物質
   を含む、上記濃縮製剤。
7. 少なくとも１つの農薬活性を含む農薬製剤中のアジュバントとして、式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、
   Ｒ^１は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
   Ｒ^２は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１～Ｃ_４アルコキシルを表し；
   Ｒ^３とＲ^４は、独立して水素またはＣ_１～Ｃ_４アルキルを表し；
   Ｒ^５とＲ^６は、独立して水素、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、ヒドロキシル、またはＣ_１からＣ_４アルコキシルを表す］
   による、イリシコリンＨ、ヒドロキシルシイルコリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコール無水物から選択される化合物の使用。
8. 植物を処理して害虫を防除する方法であって、請求項１～５のいずれかに記載の製剤又は請求項６に記載の希釈濃縮製剤を、前記植生又は前記植生の直接の環境のいずれかに適用することを含む方法。
9. 請求項１～５のいずれか１項に記載のアジュバントを得る方法であって、以下の工程：
   コスモスポラ属種（Ｃｏｓｍｏｓｐｏｒａ ｓｐ）ＲＫＤＯ１７４７からの第１の態様による殺菌剤アジュバントの代謝合成を促進する条件下で培地中で該コスモスポラ属種を培養する工程、及び
   培養培地からの合成アジュバントを精製する工程
   を含む方法。
10. コスモスポラ属種ＲＫＤＯ１７４７株、Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＮＲＲＬ）受託番号ＮＲＲＬ－６７９１０からなる生物。
11. コスモスポラ属種ＲＫＤＯ１７４７株、Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＮＲＲＬ）受託番号ＮＲＲＬ－６７９１０からなる生物から得られた抽出物であって、請求項１～５のいずれか１項に記載のイリシコリンＨ、ヒドロキシルシイリンＨ、イリシコリンＩ、またはラメリコリン無水物のうちの少なくとも１つを含む抽出物。
12. 害虫を防除するために植生を処理する方法であって、請求項１０に記載の生物を前記植生または前記植生の直接の環境のいずれかに適用することを含む方法。
13. 請求項１～５のいずれか１項に記載のアジュバント、または請求項１０に記載の生物を含む種子被覆組成物。
14. 式（Ｉ）：
    

    

    ［式中、
    Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^５はヒドロキシルであり、Ｒ^２はメチルである；又は
    Ｒ^１、Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２及びＲ^３はメチルである；又は
    Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^１はメチルである；又は
    Ｒ^３、Ｒ^５、及びＲ^６はすべて水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４およびＲ^１はメチルである；又は
    Ｒ^４及びＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシルである；又は
    Ｒ^３とＲ^５は水素であり、Ｒ^２、Ｒ^４、及びＲ^１はメチルであり、Ｒ^６はヒドロキシルである］
    によるラメリコール酸無水物。