JP2022550450A - 神経毒性を処置するための方法および材料 - Google Patents

Abstract

本文書は、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する哺乳動物を処置するための方法および材料に関する。たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含む組成物）を、神経毒性を有する哺乳動物に投与して、哺乳動物を処置することが可能である。

Description

関連出願の相互参照
本出願は２０１９年１０月２日に出願された米国特許出願第６２／９０９，６９４号の利益を主張するものである。先行出願の開示は本出願の開示の一部とみなされる（かつ参照により本出願の開示に組み込まれる）。

本文書は、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する哺乳動物を処置するための方法および材料に関する。たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含む組成物）を、哺乳動物を処置するのに有効な量で神経毒性を有する哺乳動物に投与することが可能である。

多発性骨髄腫の主要臨床試験において、ボルテゾミブ（ＢＴＺ）単独または併用療法は、全奏功率の向上、病勢進行までの時間の延長、全生存率の上昇などの臨床的に重要な恩恵をもたらすことが示された（Chen et al., 2011 Curr Cancer Drug Targets 11(3):239-253; Knopf et al., 2014 Clin Lymphoma Myeloma Leuk 14(5):380-388; Aguiar et al., 2017 Crit Rev Oncol Hematol 113:196-212; and Sun et al., 2017 Biosci Rep 37(4):BSR20170304）。

しかしながら、化学療法剤誘発性末梢神経毒性（ＣＩＰＮ）は化学療法抗がん剤による重篤な副作用である（Argyriou et al., 2012 Crit Rev Oncol Hematol 82:51-77; Cavaletti et al., 2010 Nat Rev Neurol 6:657-666; Grisold et al., 2012 Neurol Oncol 14(Suppl 4):45-54; and Flatters et al., 2017 Br J Anaesth 119:737-749）。ＣＩＰＮは、運動ニューロンおよび感覚ニューロンに悪影響を及ぼし、神経線維の変性を引き起こす（Carozzi et al., 2013 PLoS One 8:e72995; Cavaletti et al., 2007 Exp Neurol 204:317-325; Gilardini et al., 2012 Neurotoxicol 33:1-7; and Quartu et al., 2014 Biomed Res Int 2014:180428）。化学療法の１カ月以内に、がん患者の６８％がＣＩＰＮを発症する（Seretny et al., 2014 Pain 155:2461-2470）。現在の薬物療法は、ＣＩＰＮの病態生理をターゲットにしておらず、障害を逆転させることはできない（Starobova et al., 2017 Front Mol Neurosci 10:174; and Hershman et al., 2014 J Clin Oncol 32:1941-1967）。

化学療法剤を用いた処置中にＣＩＰＮを処置することおよび／または予防することは、依然として満たされない医療ニーズのままである。

本文書は、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または神経毒性を発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性を伴う化学療法剤の投与が予定または予想される哺乳動物）を処置するための方法および材料を提供するものである。たとえば、１種または複数の（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を、神経毒性を有する哺乳動物に投与して、哺乳動物を処置することが可能である。いくつかの場合では、神経毒性を有する、または神経毒性を発現するリスクのある哺乳動物に、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与して、哺乳動物を処置することが可能である。

ＣＸ－８９９８は、Ｔ型カルシウムチャネルの活性を低減することができ、ヒトなどの哺乳動物に使用しても安全なＴ型カルシウムチャネルの強力かつ高選択的な電位活性化型負性アロステリック調節因子である（Egan et al., 2013 Hum Psychopharmacol. 28(2):124-133; and Papapetropoulos et al., 2018 Mov Disord. 33(S2):S14 (abstract 29)）。本明細書で実証されるように、ＣＸ－８９９８とＢＴＺとの共処置（たとえば、両方の投与）はインビトロでのヒト多発性骨髄腫細胞株に対するＢＴＺ活性、またはインビボでの多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ－８２２６細胞に対するＢＴＺ活性を妨害しなかった。本明細書で実証されるように、ＣＸ－８９９８とＢＴＺとの共処置はＢＴＺ誘発性神経毒性を逆転させた。たとえば、ＣＸ－８９９８（１０および３０ｍｇ／ｋｇ）とＢＴＺとの共処置は、ＢＴＺ誘発性プロテアソーム阻害を妨害することなく、ＢＴＺ誘発性神経伝導速度（ＮＣＶ）低下を逆転させた。たとえば、ＣＸ－８９９８（３０ｍｇ／ｋｇ）とＢＴＺの共処置は、ＢＴＺ誘発性β－チューブリン重合および神経線維喪失を低減した。神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を低減するまたは除去する能力を有することは、化学療法の神経毒性副作用を低減または除去しつつ、化学療法の治療的恩恵（たとえば、抗がん効果）を最大限にする、唯一かつ未実現の機会を与える。たとえば、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を低減するまたは除去する能力は、不十分ながん処置および／または生存期間の短縮をもたらし得る任意の用量の減少または終了を必要とすることなく、患者が化学療法に耐えることを可能にすることができる。

一般に、本文書の一態様は、神経毒性を有する哺乳動物を処置するための方法を特徴とする。方法は、哺乳動物における神経毒性の症状を低減するために、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子またはその塩を含む有効量の組成物を哺乳動物に投与することを含むか、または本質的にそれからなることが可能である。方法は、哺乳動物が神経毒性を有すると特定することを含むことも可能である。哺乳動物はヒトでもよい。神経毒性は化学療法剤誘発性神経毒性でもよい。上記化学療法剤誘発性神経毒性はボルテゾミブ誘発性神経毒性でもよい。神経毒性を有する哺乳動物は、その化学療法剤を投与されて、哺乳動物内のがんを処置したことがある可能性がある。がんは、多発性骨髄腫、マントル細胞リンパ腫、白血病、消化管がん、肺がん、精巣がん、卵巣がん、脳腫瘍、子宮がん、前立腺がん、骨がん、乳がん、または膀胱がんでもよい。症状は、疼痛、四肢脱力、四肢痺れ、痒み、知覚障害、麻痺、無嗅覚、下垂症、慢性咳嗽、運動機能障害、記憶喪失、視力低下、頭痛、認知障害、脳症、認知症、気分障害、便秘、性機能障害、膀胱性尿閉、出血、またはそれらの任意の組合せでもよい。Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は負性調節因子でもよい。負性調節因子は負性アロステリック調節因子でもよい。Ｔ型カルシウムチャネル調節因子はＴ型カルシウムチャネル活性を低減することができる。Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は、ＣＸ－８９９８を含むことができる。ＣＸ－８９９８は塩の形態でもよい。Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は、ＣＸ－８９９８の代謝産物を含むことができる。ＣＸ－８９９８の代謝産物は、

、またはそれらの任意の組合せの構造を有することができる。ＣＸ－８９９８の代謝産物は塩の形態でもよい。Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は、ＣＸ－８９９８および１種または複数のＣＸ－８９９８の代謝産物を含むことができる。組成物は、約１０ｎＭ～約１０００ｎＭのＴ型カルシウムチャネル調節因子を含むことができる。組成物は、哺乳動物に対するＴ型カルシウムチャネル調節因子を約３ｍｇ／ｋｇ哺乳動物の体重～約３０ｍｇ／ｋｇ哺乳動物の体重含むことができる。組成物は経口投与され得る。

別段に定義されていない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様または同等の方法および材料を使用して本発明を実施することができるが、好適な方法および材料について以下に記載する。本明細書で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許およびその他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾が生じた場合は、定義を含めて本明細書が優先される。さらに、材料、方法および実施例は例示に過ぎず、限定することを意図していない。

本発明の１つまたは複数の実施形態の詳細を、添付図面および以下の説明に記載する。本発明の他の特徴、目的、および利点は、説明および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかになるであろう。

ＣＸ－８９９８によるＢＴＺ抗がん活性の妨害。（図１Ａ）様々な濃度のＣＸ－８９９８の存在下または非存在下で、ＩＣ_５０（それぞれ６±０．５ｎＭ、４±１．７ｎＭ、および２．５±０．６ｎＭ）のＢＴＺで７２時間インビトロで処理した多発性骨髄腫細胞株（ＭＣＬ）ＭＭ．１Ｓ、ＲＰＭＩ８３３６、およびＵ２６６Ｂ１の生存率。（図１Ｂ）ＲＰＭＩ８２２６異種移植片を担持するヌードマウスの相対的体重。（図１Ｃ）ＲＰＭＩ８２２６異種移植片を担持するヌードマウスの腫瘍体積。（図１Ｄ）ラットから単離されたＰＢＭＣにおけるプロテアソーム阻害率。 （上記の通り。） （上記の通り。） 尾部神経伝導速度。ＢＴＺ誘発性ＣＩＰＮのラットモデルにおける第１段階（ベースラインおよび４週間）および第２段階（５週間および８週間）中の筋電図検査により尾部神経から得られた伝導速度。 坐骨神経伝導速度。ＢＴＺ誘発性ＣＩＰＮのラットモデルにおける第１段階（ベースラインおよび４週間）および第２段階（５週間および８週間）中の筋電図検査により坐骨神経から得られた伝導速度。 機械的閾値（ＭＴ）。ＢＴＺ誘発性ＣＩＰＮのラットモデルにおける第１段階（ベースラインおよび４週間）および第２段階（５週間および８週間）中の動的知覚計テストを使用して測定した機械的アロディニアの評価。 β－チューブリン重合、坐骨神経線維密度、および組織病理学。（図５Ａ）ＣＸ－８９９８の存在下または非存在下で、ＢＴＺで８週間処置した後に採取した坐骨神経組織のタンパク質抽出物におけるβ－チューブリン重合率。（図５Ｂ）ＣＸ－８９９８の存在下または非存在下で、ＢＴＺで８週間処置した後に採取した後肢からの足裏の無毛の皮膚の切片で定量した１ｍｍあたりの神経線維の数。（図５Ｃ）図５Ｂで定量した組織試料の代表画像。

本文書は、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または神経毒性を発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性を伴う化学療法剤の投与が予定または予想される哺乳動物）を処置するための方法および材料を提供するものである。たとえば、１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を、神経毒性を有する哺乳動物に投与して、哺乳動物を処置することが可能である。いくつかの場合では、神経毒性を有する、または神経毒性を発現するリスクのある哺乳動物に、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子および／またはその１種または複数の代謝産物を投与して、哺乳動物を処置することが可能である。

いくつかの場合では、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）に１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を投与して、神経毒性の１種または複数の症状を低減するまたは除去することが可能である。たとえば、本明細書に記載のように１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を哺乳動物に投与して、神経毒性の１種または複数の症状の重症度を、たとえば、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５パーセント以上低減させることができる。いくつかの場合では、神経毒性の症状は、遅延症状（たとえば、神経毒性が発現した後、数時間、数日、または数週間検出されないことがある）となることがある。本明細書に記載の方法により低減または除去することができる神経毒性の症状の例としては、限定されないが、疼痛、脱力（たとえば、四肢脱力）、痺れ（たとえば、四肢痺れ）、痒み、知覚障害、麻痺、無嗅覚、下垂症、慢性咳嗽、運動機能障害、記憶喪失、視力低下、頭痛、認知障害、脳症、認知症、気分障害、便秘、性機能障害、膀胱性尿閉、および／または出血が挙げられる。

神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある任意の適切な哺乳動物（たとえば、ヒト）は、本明細書に記載のようにＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することにより処置することが可能である。いくつかの場合では、神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物はその哺乳動物が神経毒性を発現しやすくなる疾患または障害を有することがある。本明細書に記載のように処置することが可能である神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物の例としては、限定されないが、ヒト、サルなどの非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、マウス、およびラットが挙げられる。いくつかの場合では、神経毒性を有する、または発現するリスクのあるヒトは、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子をヒトに投与することにより処置することが可能である。

任意の適切な神経毒性は、本明細書に記載のようにＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することにより処置することが可能である。神経毒性は、神経系の任意の適切な部位に影響を与える（たとえば、損傷を与える）可能性がある。いくつかの場合では、神経毒性は中枢神経系（ＣＮＳ）に存在し得る。いくつかの場合では、神経毒性は末梢神経系（ＰＮＳ）に存在し得る。いくつかの場合では、神経毒性はＣＮＳとＰＮＳの両方に存在し得る。神経毒性は、神経系にあらゆる種類の損傷を与える可能性がある。いくつかの場合では、神経毒性は神経組織（たとえば、１つまたは複数のニューロン）に対する可逆的な損傷を含むことができる。たとえば、神経毒性は、神経系の正常な活動を変化させることができる（たとえば、１つまたは複数のニューロンの機能を破壊することができる）。いくつかの場合では、神経毒性は、神経組織（たとえば、１つまたは複数のニューロン）への永久的な損傷を含むことができる。たとえば、神経毒性は、１つまたは複数のニューロンを死滅させるか、または機能を低下させることができる。いくつかの場合では、神経毒性は特定の物質への曝露により誘発される。神経毒性の原因としては、限定されないが、薬物療法（たとえば、化学療法）、放射線治療、重金属（たとえば、鉛および水銀）への曝露、糖尿病、ウイルス感染、神経損傷、遺伝性遺伝子状態（hereditary genetic conditions）、農薬への曝露、溶剤（例えば、工業溶剤および洗浄溶剤）への曝露、カビ、食品、食品添加物および毒素（例えば、自然発生毒素および人工毒素）への曝露が挙げられる。いくつかの場合では、神経毒性は化学療法剤により誘発される（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）。化学療法剤誘発性神経毒性では、神経毒性は任意の化学療法剤により引き起こされ得る。哺乳動物（たとえば、ヒト）に投与したときに神経毒性を引き起こす可能性のある化学療法剤の例としては、限定されないが、プロテアソーム阻害剤（たとえば、ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、ＣＨＥＭＯＢＯＲＴ（商標）、およびＢＯＲＴＥＣＡＤ（商標）などのＢＴＺ）、エポチロン、ビンカアルカロイド、タキサン、免疫調節薬、アントラサイクリン、シクロホスファミドおよびプラチナ系治療薬が挙げられる。化学療法剤誘発性神経毒性では、化学療法は、任意の種類のがんを有する哺乳動物（たとえば、ヒト）に実施され得る。いくつかの場合では、がんは１種または複数の固形腫瘍を含み得る。いくつかの場合では、がんは血液がんでもよい。いくつかの場合では、がんは、原発性がん、転移性がん、または再発性がんでもよい。化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある化学療法剤で処置され得るがんの例としては、限定されないが、多発性骨髄腫、マントル細胞リンパ腫、白血病、消化管がん、肺がん、精巣がん、卵巣がん、脳腫瘍、子宮がん、前立腺がん、骨がん、乳がん、および膀胱がんが挙げられる。いくつかの場合では、多発性骨髄腫（たとえば、再発した多発性骨髄腫）を有し、化学療法剤誘発性（たとえば、ＢＴＺ誘発性）神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）は、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を哺乳動物に投与することにより処置することが可能である。

いくつかの場合では、神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）を処置するための方法は、哺乳動物が神経毒性を有する、または発現するリスクがあると特定することを含むことも可能である。哺乳動物が神経毒性を有する、または発現するリスクがあると特定するために任意の適切な方法を使用することができる。哺乳動物が神経毒性を有すると特定するために、たとえば、神経学的検査（たとえば、筋力、協調性、感覚、記憶および思考などの認知機能、ならびに視覚および発声などの神経学的検査）、神経学的画像化（たとえば、磁気共鳴画像化（ＭＲＩ））、神経または皮膚生検、および／または筋電図検査（例えば、神経伝導速度）を使用することができる。哺乳動物が神経毒性を発現するリスクがあると（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性を発症しやすいと）特定するために、たとえば、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある化学療法剤（たとえば、ＢＴＺ）の現在の投与、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある化学療法剤（たとえば、ＢＴＺ）の予定された投与、年齢（たとえば、高齢の患者はリスクが高い）、ウイルス感染（たとえば、ヘルペス）、喫煙歴、傍腫瘍性抗体、クレアチニンクリアランスが低下した腎機能障害、既存の神経障害症状（たとえば、糖尿病、遺伝性神経障害、および／または神経毒への以前の曝露による）を使用することができる。

神経毒性（たとえば、化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクがあると特定されると、哺乳動物（たとえば、ヒト）に１種もしくは複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与する、または自己投与するように指示することが可能である。

Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は、Ｔ型カルシウムチャネルを阻害することのできる任意の分子（たとえば、低分子、核酸、ポリペプチド、またはそれらの組合せ）でもよい。Ｔ型カルシウムチャネルは、電位活性化カルシウム３（Ｃａｖ３）チャネルとも呼ばれ得る。いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子はＴ型カルシウムチャネル拮抗剤でもよい。たとえば、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子はＴ型カルシウムチャネル（たとえば、Ｔ型カルシウムチャネルのサブユニット）の発現を阻害（たとえば、低減または除去）することができる。いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子はＴ型カルシウムチャネルの活性を阻害（たとえば、低減または除去）することができる（たとえば、チャネルに結合すること、またはそうでなければチャネルの活性を阻害もしくは遮断することを通して）。本明細書では、用語「ＣＸ－８９９８」は、構造アナログが本明細書に記載のＣＸ－８９９８の医薬機能（たとえば、用量依存的な振戦の低減、発作の低減および／もしくは除去、ならびに／または疼痛の低減および／もしくは除去）を維持するという条件でＣＸ－８９９８の構造アナログも指し得る。同様に、ＣＸ－８９９８の代謝産物は、構造アナログが本明細書に記載のＣＸ－８９９８の代謝産物の医薬機能を維持するという条件でＣＸ－８９９８の代謝産物の構造アナログも指し得る。いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子がＣＸ－８９９８であるとき、ＣＸ－８９９８は、ＣＸ－８９９８の代謝産物の１種または複数の代謝産物に代謝され得る（たとえば、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子の哺乳動物への投与後に哺乳動物により代謝される）。ＣＸ－８９９８の化学名としては、限定されないが、（Ｒ）－２－（４－イソプロピルフェニル）－Ｎ－（１－（５－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）ピリジン－２－イル）エチル）アセトアミドおよび２－（４－イソプロピルフェニル）－Ｎ－｛１Ｒ）－１－（５－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）ピリジン－２－イル）エチル｝アセトアミド塩酸塩が挙げられる。本発明の例示的なＴ型カルシウムチャネル調節因子としては、限定されないが、ＣＸ－８９９８（ＭＫ－８９９８とも呼ばれる）、ＣＸ－８９９８の代謝産物、ＣＸ－５３９５、およびＣＸ－６５２６が挙げられる。いくつかの場合では、神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）はＣＸ－８９９８を哺乳動物に投与することにより処置することが可能である。ＣＸ－８９９８の化学構造は、以下に示す通りである。

ＣＸ－８９９８の例示的な代謝産物の化学構造は、以下に示す通りである。

Ｔ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）は任意の適切な形態でもよい。いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は塩基の形態（たとえば、化合物の遊離塩基形態）でもよい。いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は塩の形態（たとえば、化合物の塩形態）でもよい。ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などのＴ型カルシウムチャネル調節因子が塩である場合では、塩は任意の適切な塩でもよい。たとえば、ＣＸ－８９９８塩としては、任意の適切な酸（たとえば、塩酸、クエン酸、臭化水素酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、フマル酸、および酒石酸）で形成した塩などが挙げられ得る。たとえば、ＣＸ－８９９８はＣＸ－８９９８塩酸塩（たとえば、ＣＸ－８９９８－ＨＣｌ）でもよい。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８塩は重水素化され得る。

いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）は他の箇所で記載されている通りでもよい（たとえば、２０１９年１０月３日に出願された表題「Ｔｒｅａｔｉｎｇ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｔｒｅｍｏｒ Ｕｓｉｎｇ （Ｒ）－２－（４－Ｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｅｎｙｌ）－Ｎ－（１－（５－（２，２，２－Ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｅｔｈｏｘｙ）ｐｙｒｉｄｉｎ－２－ｙｌ）ｅｔｈｙｌ）ａｃｅｔａｍｉｄｅ」の国際特許出願を参照されたい）。

いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）は血液脳関門を通過することができる。たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物は血液脳関門を通過することができる（たとえば、脳脊髄液（ＣＳＦ）および／またはＣＮＳに存在することができる）。いくつかの場合では、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は血液脳関門を通過することができない。

Ｔ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）は選択的調節因子でもよい。この文脈での「選択的」とは、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子が、他の電位活性化カルシウムチャネルと比較して、Ｔ型カルシウムチャネルを調節する際により強力であることを意味する。たとえば、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は、他の種類のカルシウムチャネル（たとえば、Ｌ型カルシウムチャネル、Ｐ型カルシウムチャネル、Ｎ型カルシウムチャネル、およびＲ型カルシウムチャネル）と比較して、Ｔ型カルシウムチャネルを調節する際により強力でもよい。たとえば、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子は、他の種類のイオンチャネル標的（たとえば、塩素チャネル、カリウムチャネル、およびナトリウムチャネル）と比較して、Ｔ型カルシウムチャネルを調節する際により強力でもよい。選択性は、任意の適切な方法を使用して決定することができる。たとえば、選択性は、第１の種類のイオンチャネル（たとえば、Ｔ型カルシウムチャネル）を阻害する際のＴ型カルシウム調節因子のＩＣ_５０と第２の種類のイオンチャネル（たとえば、ナトリウムチャネル）を阻害する際のそのＩＣ_５０とを比較することにより決定することができる。第１の種類のチャネルを阻害するＩＣ_５０が第２の種類のチャネルを阻害するＩＣ_５０よりも低い場合、Ｔ型カルシウム調節因子は選択的であると考えることができる。０．１（以下）のＩＣ_５０比は１０倍（以上）の選択性を示す。０．０１（以下）のＩＣ_５０比は１００倍（以上）の選択性を示す。０．００１（以下）のＩＣ_５０比は１０００倍（以上）の選択性を示す。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などのＴ型カルシウムチャネル調節因子は、他の種類のイオンチャネルと比較して、２倍以上、１０倍以上、１００倍以上、または１０００倍以上のＴ型カルシウムに対する選択性を有し得る。たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などのＴ型カルシウムチャネル調節因子は、他のイオンチャネルに対して１００倍を超える選択性を有し得る。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などのＴ型カルシウムチャネル調節因子は、Ｃａｖ３アイソフォームのいずれか（たとえば、Ｃａｖ３．１、Ｃａｖ３．２、および／またはＣａｖ３．３）に選択的に拮抗し得る。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などのＴ型カルシウムチャネル調節因子は、Ｃａｖ３アイソフォームの３つすべて（たとえば、Ｃａｖ３．１、Ｃａｖ３．２、およびＣａｖ３．３）に選択的に拮抗し得る。

いくつかの場合では、１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）は、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）への投与のための組成物（たとえば、薬学的に許容される組成物）に製剤化することが可能である。たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子は、１種または複数の薬学的に許容される担体（添加物）、賦形剤、および／または希釈剤と共に製剤化することが可能である。いくつかの場合では、薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤は、天然に存在しない薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤でもよい。いくつかの場合では、薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤は、合成の薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤でもよい。本明細書に記載の組成物中に使用することができる薬学的に許容される担体、賦形剤、および希釈剤の例としては、限定されないが、スクロース、ラクトース、デンプン（たとえば、デンプングリコール酸塩）、セルロース、セルロース誘導体（たとえば、微結晶性セルロースなどの変性セルロース、ならびにヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）およびセルロースエーテルであるヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）などのセルロースエーテル）、キシリトール、ソルビトール、マンニトール、ゼラチン、ポリマー（たとえば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、架橋ポリビニルピロリドン（クロスポビドン）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、および架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロースナトリウム））、酸化チタン、アゾ色素、シリカゲル、ヒュームドシリカ、タルク、炭酸マグネシウム、植物性ステアリン、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸、抗酸化剤（たとえば、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、パルミチン酸レチニル、およびセレン）、クエン酸、クエン酸ナトリウム、パラベン（たとえば、メチルパラベンおよびプロピルパラベン）、ペトロラタム、ジメチルスルホキシド、鉱油、血清タンパク質（たとえば、ヒト血清アルブミン）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、水、塩または電解質（たとえば、生理食塩水、プロタミン硫酸塩、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、および亜鉛塩）、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリアクリル酸塩、ろう、羊毛脂、レシチン、およびコーン油が挙げられる。

１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を含む組成物は、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）への任意の種類の投与のために設計することが可能である。たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含む組成物は、神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物への経口または非経口（たとえば、限定されないが、皮下、筋肉内、静脈内、皮内、脳内、髄腔内、または腹腔内（ｉ．ｐ．）注射）投与のために設計することが可能である。経口投与に適した組成物としては、限定されないが、液体、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、ゲル、および顆粒が挙げられる。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物を含む組成物は、即時放出性経口剤形でもよい。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物を含む組成物は、制御（たとえば、遅延および／または持続）放出性経口剤形でもよい。いくつかの場合では、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物を含む組成物は、少なくとも即時放出のために設計された第１の成分および制御放出のために設計された第２の成分を有する経口剤形でもよい。非経口投与に適した組成物としては、限定されないが、水性および非水性の無菌注射溶液が挙げられ、これは抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を意図するレシピエントの血液と等張にする溶質を含み得る。

１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を含む組成物を、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）に任意の適切な量（たとえば、任意の適切な用量）で投与することが可能である。たとえば、本明細書に記載の組成物は、神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物に有効量の１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を送達するように製剤化することが可能である。有効量は、投与経路、対象の年齢および全般的健康状態、賦形剤の使用、他の薬剤の使用などの他の治療的処置との共使用の可能性、および処置を行う医師の判断に応じて様々でもよい。１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含む組成物の有効量は、哺乳動物に顕著な毒性（たとえば、神経組織以外の細胞への損傷（細胞毒性）、組織への損傷、および／または臓器への損傷（肝毒性など））を生じることなく、本明細書に記載の神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物を処置することのできる任意の量でもよい。たとえば、有効量のＣＸ－８９９８は約１０ｎＭ～約１０００ｎＭ（たとえば、約１０ｎＭ～約９００ｎＭ、約１０ｎＭ～約８００ｎＭ、約１０ｎＭ～約７００ｎＭ、約１０ｎＭ～約６００ｎＭ、約１０ｎＭ～約５００ｎＭ、約１０ｎＭ～約４００ｎＭ、約１０ｎＭ～約３００ｎＭ、約１０ｎＭ～約２００ｎＭ、約１０ｎＭ～約１００ｎＭ、約１０ｎＭ～約５０ｎＭ、約５０ｎＭ～約１０００ｎＭ、約１０ｎＭ～約１０００ｎＭ、約１００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約２００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約３００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約４００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約５００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約６００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約７００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約９００ｎＭ～約１０００ｎＭ、約１００ｎＭ～約９００ｎＭ、約２００ｎＭ～約８００ｎＭ、約３００ｎＭ～約７００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約１００ｎＭ～約３００ｎＭ、約３００ｎＭ～約５００ｎＭ、約５００ｎＭ～約７００ｎＭ、または約７００ｎＭ～約９００ｎＭ）でもよい。いくつかの場合では、有効量のＣＸ－８９９８は約１０ｎＭ、約３０ｎＭ、約１００ｎＭ、約３００ｎＭ、または約１０００ｎＭでもよい。たとえば、有効量のＣＸ－８９９８は、１日あたり処置される哺乳動物の体重１ｋｇあたり約１０マイクログラム（μｇ／ｋｇ）～約１０００μｇ／ｋｇ（たとえば、１日あたり約１０μｇ／ｋｇ～約９００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約８００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約７００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約６００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約５００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約４００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約３００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約２００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約１００μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ～約５０μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約２００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約３００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約４００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約５００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約６００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約７００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約８００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約９００μｇ／ｋｇ～約１０００μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ～約９００μｇ／ｋｇ、約７５μｇ／ｋｇ～約８００μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ～約６００μｇ／ｋｇ、約２００μｇ／ｋｇ～約７００μｇ／ｋｇ、約３００μｇ／ｋｇ～約６００μｇ／ｋｇ、約４００μｇ／ｋｇ～約５００μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ～約２００μｇ／ｋｇ、約２００μｇ／ｋｇ～約３００μｇ／ｋｇ、約３００μｇ／ｋｇ～約４００μｇ／ｋｇ、約４００μｇ／ｋｇ～約５００μｇ／ｋｇ、約５００μｇ／ｋｇ～約６００μｇ／ｋｇ、約６００μｇ／ｋｇ～約７００μｇ／ｋｇ、約７００μｇ／ｋｇ～約８００μｇ／ｋｇ、または約８００μｇ／ｋｇ～約９００μｇ／ｋｇ体重）でもよい。いくつかの場合では、有効量のＣＸ－８９９８は１日あたり約１００μｇ／ｋｇ、約３００μｇ／ｋｇ、または約６００μｇ／ｋｇでもよい。有効量は、処置に対する哺乳動物の反応に応じて、一定に維持することも、またはスライディングスケールもしくは変動用量として調整することも可能である。特定の用途に使用される実際の有効量には、様々な要因が影響する可能性がある。たとえば、投与頻度、処置期間、複数の処置剤の使用、投与経路、および／または処置されている哺乳動物における神経毒性の重症度によって、実際に投与する有効量の増加または減少が必要となる場合がある。

１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を含む組成物を、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）に任意の適切な頻度で投与することが可能である。投与頻度は、哺乳動物に顕著な毒性（たとえば、神経組織以外の細胞への損傷（細胞毒性）、組織への損傷、および／または臓器への損傷（肝毒性など））を生じることなく、神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物を処置することのできる任意の頻度でもよい。たとえば、投与頻度は、１日複数回程度（たとえば、ＢＩＤ）～１日１回程度、１日１回程度～１週間に１回程度、１週間に１回程度～１カ月に１回程度、１カ月に２回程度～１カ月に１回程度でもよい。投与頻度は、処置期間中、一定に維持することも、または可変であることも可能である。有効量と同様に、特定の用途に使用される実際の投与頻度には、様々な要因が影響する可能性がある。たとえば、有効量、処置期間、複数の処置剤の使用、および／または投与経路によって、投与頻度の増加または減少が必要となる場合がある。

１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を含む組成物を、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）に任意の適切な期間投与することが可能である。１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含む組成物を投与するまたは使用するのに効果的な期間は、哺乳動物に顕著な毒性（たとえば、神経組織以外の細胞への損傷（細胞毒性）、組織への損傷、および／または臓器への損傷（肝毒性など））を生じることなく、神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物を処置することのできる任意の期間でもよい。たとえば、効果的な期間は、数日～数週間、数週間～数カ月、数カ月～数年、数年～一生と様々でもよい。いくつかの場合では、効果的な期間は約１０年～約一生の期間の範囲でもよい。特定の処置に使用される実際の効果的な期間には、複数の要因が影響する可能性がある。たとえば、効果的な期間は、投与頻度、有効量、複数の処置剤の使用、および／または投与経路によって、様々でもよい。

いくつかの場合では、１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を含む組成物は、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）を処置するのに有効な組成物中に、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を唯一の活性成分として含むことができる。

いくつかの場合では、１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物）を含む組成物は、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）を処置するのに有効な組成物中に、１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）の追加の活性剤（たとえば、治療剤）を含むことができる。

いくつかの場合では、本明細書に記載のようにＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することにより処置を受けている、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）はまた、１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）の追加の治療剤で処置することも可能である。本明細書に記載の１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子と併用される治療剤は、任意の適切な治療剤でもよい。いくつかの場合では、神経毒性の処置に使用される治療剤は、神経毒性の１種または複数の症状を低減するまたは除去することが可能な薬剤でもよい。神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物を処置するために、本明細書に記載の１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子と併用することができる治療剤の例としては、限定されないが、ステロイド（たとえば、コルチコステロイド）、鎮痛薬（たとえば、アセトアミノフェン、イブプロフェンおよびナプロキセンなどの非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ならびにヒドロコドン、ヒドロモルホン、メタドン、モルヒネ、およびオキシコドンなどのオピオイド）、抗てんかん剤、および抗うつ剤（たとえば、セロトニン－ノルエピネフリン再取込み阻害剤（ＳＮＲＩ）、選択的セロトニン再取込み阻害剤（ＳＳＲＩ）、三環系抗うつ薬、およびモノアミン酸化酵素阻害剤（ＭＡＯＩ））が挙げられる。いくつかの場合では、１種または複数の追加の治療剤を、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子と共に（たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含み、１種または複数の追加の治療剤を含む組成物において）投与することが可能である。いくつかの場合では、１種または複数の追加の治療剤を、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子とは独立して投与することが可能である。１種または複数の追加の治療剤を、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子とは独立して投与するとき、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を先に投与し、１種または複数の追加の治療剤を次に投与することが可能であり、またはその逆も可能である。

いくつかの場合では、本明細書に記載の神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）を処置する（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することによる）ための方法は、哺乳動物に神経毒性を処置するのに有効な１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）の追加の処置（たとえば、治療的介入）を受けさせて哺乳動物を処置することを含むことも可能である。神経毒性を有する、または発現するリスクのある哺乳動物を処置するために、本明細書に記載のように使用することができる追加の処置の例としては、限定されないが、酸素療法（たとえば、高圧酸素療法）、作業療法、物理療法、手術、および瞑想が挙げられる。いくつかの場合では、神経毒性の１種または複数の症状を処置するのに有効な１種または複数の追加の処置は、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子の投与と同時に実施することができる。いくつかの場合では、神経毒性の１種または複数の症状を処置するのに有効な１種または複数の追加の処置は、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子の投与の前および／または後に実施することができる。

いくつかの場合では、本明細書に記載のようにＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することにより処置を受けている、神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）に、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数（たとえば、１種、２種、３種、４種、５種以上）の化学療法剤を投与するか、または投与を予定することができる。哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある、本明細書に記載の１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子と併用することができる化学療法剤は、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある任意の適切な化学療法剤でもよい。哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある化学療法剤の例としては、限定されないが、プロテアソーム阻害剤（たとえば、ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、ＣＨＥＭＯＢＯＲＴ（商標）、およびＢＯＲＴＥＣＡＤ（商標）などのＢＴＺ）、エポチロン、ビンカアルカロイド、タキサン、免疫調節薬、アントラサイクリン、シクロホスファミドおよびプラチナ系治療薬が挙げられる。たとえば、がんを有し、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤を投与されている、または投与が予定されている哺乳動物に、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することもできる（たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子と共処置することができる）。本明細書では、共処置または共投与は、処置の過程における２種以上の治療剤（たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子、および哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤）の投与を含み得る。いくつかの場合では、２種以上の治療剤の共投与は、２種以上の治療剤の同時投与または実質的な同時投与を含み得る。たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤の投与から数秒または数分以内（たとえば、約０分～約５分間隔）に投与することが可能である。いくつかの場合では、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤を、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子と共に（たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を含み、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤を含む組成物において）投与することが可能である。いくつかの場合では、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤を、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子とは独立して投与することが可能である。たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤の投与から数分、数時間、数日、または数週間以内に投与することが可能である。哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤を、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子とは独立して投与するとき、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を先に投与し、哺乳動物に投与したときに化学療法剤誘発性神経毒性を引き起こす可能性のある１種または複数の化学療法剤を次に投与することが可能であり（たとえば、１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を予防的に投与することが可能であり）、またはその逆も可能である。

いくつかの場合では、本明細書に記載の神経毒性（たとえば、ＢＴＺ誘発性神経毒性などの化学療法剤誘発性神経毒性）を有する、または発現するリスクのある哺乳動物（たとえば、ヒト）を処置する（たとえば、ＣＸ－８９９８またはその代謝産物などの１種または複数のＴ型カルシウムチャネル調節因子を投与することによる）ための方法は、処置されている哺乳動物をモニターすることを含むことも可能である。哺乳動物における神経毒性の重症度をモニターするために任意の適切な方法を使用することができる。哺乳動物における神経毒性の重症度をモニターするために、たとえば、神経学的検査（たとえば、筋力、協調性、感覚、記憶および思考などの認知機能、ならびに視覚および発声などの神経学的検査）、神経学的画像化（たとえば、ＭＲＩ）、神経または皮膚生検、および／または筋電図検査（例えば、神経伝導速度）を使用することができる。いくつかの場合では、本明細書に記載の方法は、他の種類の毒性（たとえば、神経組織以外の細胞への損傷（細胞毒性）、組織への損傷、および／または臓器への損傷（肝毒性および腎毒性など））について、本明細書に記載のように処置されている哺乳動物をモニターすることを含むことも可能である。毒性がある場合、そのレベルは、特定の組成物の既知の量を投与する前および後の哺乳動物の臨床徴候および症状を評価することにより決定することができる。哺乳動物に投与される特定の組成物の有効量は、所望の結果ならびに哺乳動物の反応および毒性のレベルに従って調整され得ることに留意されたい。

本発明を以下の実施例でさらに説明するが、これらは特許請求の範囲に記載された本発明の範囲を限定するものではない。

[実施例１]
ＣＸ－８９９８によるボルテゾミブ誘発性神経毒性の逆転
本実施例は、選択的Ｔ型カルシウムチャネル調節因子であるＣＸ－８９９８の、ボルテゾミブ（ＢＴＺ）細胞毒性の妨害および化学療法剤誘発性末梢神経毒性（ＣＩＰＮ）の逆転について評価する。

方法
インビトロ研究
化学物質および薬物
ＲＰＭＩ（Ｒｏｓｗｅｌｌ Ｐａｒｋ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）１６４０培地、ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）、ＨＥＰＥＳ（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）、重炭酸ナトリウム、およびピルビン酸ナトリウムはＥｕｒｏＣｌｏｎｅ ＳｐＡ（Ｐｅｒｏ、Ｉｔａｌｙ）から購入した。ウシ胎児血清（ＦＢＳ）はＨｙｃｌｏｎｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ（Ｌｏｇａｎ、ＵＴ、ＵＳＡ）から入手した。その他の化学物質はすべてＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）から入手した。ＢＴＺはＬＣ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ、ＵＳＡ）から入手し、ＣＸ－８９９８はＣａｖｉｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｃｈａｒｌｏｔｔｅｓｖｉｌｌｅ、ＶＡ、ＵＳＡ）から提供された。ＢＴＺ（２．６ｍＭ）およびＣＸ－８９９８（１０ｍＭ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、培養培地で希釈した。

ヒト多発性骨髄腫細胞株
ＭＭ．１ＳおよびＵ２６６Ｂ１細胞はＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｓａｎ Ｇｉｏｖａｎｎｉ、Ｉｔａｌｙ）から入手した。すべての細胞株は、１０％ＦＢＳ、ペニシリンおよびストレプトマイシンを補った２ｍＭのＬ－グルタミンを含むＲＰＭＩ培地で浮遊培養で維持された。ＭＭ．１Ｓ細胞培地には１．５ｇ／Ｌの重炭酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、および１ｍＭのピルビン酸ナトリウムが補われた。細胞は浮遊細胞用７５ｃｍ^２培養フラスコ（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｉｎｃ．Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ、ＵＳＡ）で、３７℃、５％ＣＯ_２および９５％空気で培養した。

インビトロでのＢＴＺ細胞毒性研究
スルホローダミンＢアッセイ（ＳＲＢ）によりＢＴＺの細胞増殖阻害効果（細胞生存率）を測定した。細胞を９６ウェルプレート（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｍｉｌａｎｏ、Ｉｔａｌｙ）に１００００細胞／ウェルでプレーティングした。２４時間後、細胞をＢＴＺ（０．０５～２５０ｎＭ）に７２時間曝露した。インキュベーション後、ＢＴＺを培養培地で試験用の用量範囲に希釈した。細胞をトリクロロ酢酸で１時間固定した。細胞をＳＲＢの１％酢酸溶液で１５分間染色した。結合していない色素を１％酢酸で５回洗浄することにより取り除いた。結合した色素をトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩基の溶液で溶解し、５４０ｎＭで内容物の吸光度を測定した。増殖阻害は、細胞のＤＭＳＯ対照吸光度に対するパーセンテージとして表し、薬物添加前の吸光度で補正した。ＢＴＺによる対照に対する細胞生存率の５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（バージョン４．０、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｌａ Ｊｏｌｌａ、ＣＡ、ＵＳＡ）を用いて非線形最小二乗曲線あてはめで算出した。

インビトロでの併用（ＢＴＺとＣＸ－８９９８）妨害研究
３種のヒトＭＭＣ（ＲＰＭＩ８２２６，ＭＭ．１Ｓ，Ｕ２６６Ｂ１）をＩＣ_５０濃度のＢＴＺ単独または５つの濃度（１０、３０、１００、３００、１０００ｎＭ）のＣＸ－８９９８との併用に７２時間曝露した。これらのＣＸ－８９９８の濃度（２桁以上）は、以前の細胞培養実験に基づいた。５つの濃度のＣＸ－８９９８単独およびＤＭＳＯ（対照）単独でのインキュベーションも実施した。３種の細胞株それぞれの増殖阻害をＳＲＢアッセイにより測定し、各濃度の薬物または薬物の併用について、対照に対する平均±ＳＤ細胞生存率として表した（対照値１００％）。各薬物または薬物の併用と対照との細胞生存率の差は、非線形最小二乗法により解析し、ｐ＜０．０５で統計的に有意とした。

インビボ研究
インビボでのＢＴＺおよび併用（ＢＴＺとＣＸ－８９９８）抗腫瘍（妨害）研究
マウスの飼育および管理は、ＵＳＤＡ（Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ）動物福祉法およびＳＴＡＲＴ ＩＡＣＵＣ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）の規定に準拠した。プロトコルはＳＴＡＲＴ ＩＡＣＵＣにより調査され承認された。マウスはＳｅａｌｓａｆｅ（登録商標）Ｐｌｕｓ換気ケージ（Ｔｅｃｈｎｉｐｌａｓｔ、Ｗｅｓｔ Ｃｈｅｓｔｅｒ、ＰＡ、ＵＳＡ）に個別に収容され、Ｔｅｋｌａｄ ２９１９（Ｅｎｖｉｇｏ、Ｓｏｍｅｒｓｅｔ、ＮＪ、ＵＳＡ）、放射線照射、１９％タンパク質、９％脂質、および４％繊維のマウス用食料を与えられた。マウスは制御された環境条件（温度２２＋／－２℃）、相対湿度５５＋／－１０％、および１２時間明暗サイクル（午前７時～午後７時）で維持された。

Ｓｏｕｔｈ Ｔｅｘａｓ Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（ＳＴＡＲＴ）（Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ、ＴＸ、ＵＳＡ）が本研究を実施した。ＢＴＺおよびＢＴＺとＣＸ－８９９８の併用は、ＳＴＡＲＴ細胞ベース異種移植（ＳＴＡＲＴ ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ、ＳＴＡＲＴ－ＣＢＸ）無胸腺ヌードマウス（Ｃｒｌ：ＮＵ（ＮＣｒ）－Ｆｏｘｎ１^ｎｕ）のヒト骨髄腫腫瘍モデルで抗腫瘍活性について試験された。ＲＰＭＩ－８２２６細胞を、６～１２週齢の雌無胸腺ヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ、ＵＳＡ）３２匹に皮下注射（１０^５細胞）した。腫瘍体積（ＴＶ）が１２５～２５０ｍｍ^３に達した時点で研究を開始した。ＴＶは触知できる塊をデジタルノギスで測定することにより推定し、幅^２×長さ×０．５２の式で単位ｍｍ^３で表した。マウスを平均ＴＶにより各８匹ずつの４群に層別化した：腫瘍媒体対照（０．５％塩化メチレンおよび１％Ｔｗｅｅｎ８０を経口によって毎日１回１８日間）、非腫瘍対照（２８日間処置なし）、腫瘍ＢＴＺ（１ｍｇ／ｋｇのＢＴＺ静脈内注射を週２回２８日間）、腫瘍ＢＴＺおよびＣＸ－８９９８（１ｍｇ／ｋｇのＢＴＺ静脈内注射を週２回２８日間、および３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８を経口によって毎日１回２８日間）。３０ｍｇ／ｋｇの用量は、前臨床安全性研究で許容され、２８日間治療範囲を超える曝露をもたらすと予想されたものであった。体重、ＴＶおよび動物観察は、媒体対照マウスは１８日目（終了）まで週２回、他の３群はそれぞれ２８日目（終了）まで週２回収集した。平均±ＳＤ体重およびＴＶは、１８日目はクラスカル・ウォリス検定およびダン多重比較検定で、２８日目はマン・ホイットニー検定で解析し、ｐ＜０．０５で統計的に有意とした。

インビボでのＢＴＺおよび併用（ＢＴＺとＣＸ－８９９８）ＣＩＰＮ逆転研究
ウィスターラット研究のための飼育および管理は、ミラノ・ビコッカ大学のガイドラインに従い、国内（Ｄ．Ｌ．ｎ．２６／２０１４）および国際的な規定および方針（指令２０１０／６３／ＥＵ）に準拠した。ラットは、妨害研究でのヌードマウスと同様の環境条件下で、１ケージあたり２～３匹収容された。プロトコル（４７１２３／１４）は、ミラノ・ビコッカ大学倫理委員会により承認された。

１０～１１週齢のウィスター雌ラット（ｎ＝５２）（Ｅｎｖｉｇｏ、Ｃｏｒｒｅｚｚａｎｏ、Ｉｔａｌｙ）を利用した。本研究は４週間ずつの２段階に分けられた。第１段階では、ラットを２群に無作為抽出した：第１群はＢＴＺ（ｎ＝４４）を０．２ｍｇ／ｋｇで週３回４週間尾静脈を介して静脈内に受け、第２群（ｎ＝８）は無処置（対照）とした。体重は、ベースライン（１日目）～２８日目までの第１段階中に定期的に測定した。ベースラインおよび第１段階の終わり（２８日目）に、尾部神経および坐骨神経の神経伝導速度（ＮＣＶ）を実施し、動的知覚計テスト（ＤＡＴ）によって後肢の機械的閾値（ＭＴ）を測定した。その後、次の段階のためにＢＴＺラットを４群に再度無作為抽出した。第２段階では、１つの群（ｎ＝８）は無処置のまま（対照）、第２群（ｎ＝８）はＢＴＺを０．２ｍｇ／ｋｇで週３回４週間受け、残りの３群（各ｎ＝１２）はＢＴＺを０．２ｍｇ／ｋｇで週３回４週間と、ＣＸ－８９９８を３、１０、または３０ｍｇ／ｋｇで強制経口により毎日４週間との共処置を受けた。ＣＸ－８９９８の用量は、先行の前臨床試験に基づいて予想される治療範囲内およびそれを上回る十分に許容される範囲の曝露をもたらした。体重はベースライン（２８日目）～５６日目（終了）まで定期的に測定した。４群すべてにおいて、ベースラインならびに３５および５６日目にＮＣＶおよびＭＴを測定した。１、２８、３５、および５６日目に、ＢＴＺの投与から１時間後に、プロテアソーム測定のために血液試料を回収した。終了時に、坐骨神経をβ－チューブリン重合用に入手し、皮膚試料を表皮内神経線維（ＩＥＮＦ）密度および組織病理学用に入手した。平均±ＳＥＭ体重、平均±ＳＥＭ ＮＣＶ、平均±ＳＥＭ ＭＴ、平均±ＳＥＭ ＩＥＮＦ密度、平均±ＳＥＭ β－チューブリン重合および平均±ＳＥＭプロテアソーム阻害の差は、４週間の処置期間終了時の対照群とＢＴＺ群との比較にはマン・ホイットニー検定で、５週間および８週間の時点でのすべての群間での比較にはクラスカル・ウォリス検定およびダン多重比較検定で解析し、ｐ＜０．０５で統計的に有意とした。

ＣＩＰＮ逆転研究の評価方法
ＮＣＶ
ＮＣＶ（メートル／秒）は筋電図検査ツール（Ｍｙｔｏ ２、ＡＢＮ Ｎｅｕｒｏ、Ｆｉｒｅｎｚｅ、Ｉｔａｌｙ）を用いて尾部神経および坐骨神経から得た。尾部ＮＣＶは、記録針電極を尾部の遠位に、刺激針電極を記録点の近位５ｃｍと１０ｃｍに配置することにより測定した。神経刺激後の２箇所で記録された電位のピーク潜時を測定し、ＮＣＶを算出した。坐骨ＮＣＶは、針記録電極を足首の骨の近くに、かつ刺激電極を大腿の近くに配置することにより測定した。ピーク潜時を尾部神経と同様に記録し、ＮＣＶを算出した。ＮＣＶは温度管理された施設（２２±２℃）で標準的な条件下で実施され、ラットにはバイタルサインをモニターしながらイソフルラン麻酔をかけた。

ＤＡＴ
ＭＴはＤＡＴ装置（Ｍｏｄｅｌ ３７４５０、Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｃｏｍｅｒｉｏ、Ｉｔａｌｙ）を使用して評価した。順化後、後肢の足裏表面にサーボ制御の尖った金属製フィラメント（直径０．５ｍｍ）を配置し、２０秒以内に最大５０グラムの段階的な穿刺圧をかけた。この圧力は自発的な後肢の引き抜き反応を引き起こし、それを記録してＭＴ指標として表した。ＭＴは２分毎に各側交互に３回収集し、平均値を出した。ＭＴの平均値は、各ラットにより許容される最大圧力（グラム）を表した。各動物の機械的刺激への曝露は３０秒に制限された。

プロテアソーム阻害アッセイ
末梢血単核球（ＰＢＭＣ）は、Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙｐａｑｕｅ密度分離で分離した。細胞を溶解溶液（５０ｍＭのＨｅｐｅｓ、５ｍＭのＥＤＴＡ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、および１％Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００の水溶液）に加え、抽出した。ライセートは４℃、１３５００ｒｐｍで１５分間回転させた。タンパク質抽出物をプロテアーゼ阻害剤およびホスファターゼ阻害剤を含まない溶解バッファー（１０％グリセロール、２５ｍＭのＴＲＩＳ－ＨＣｌ ｐＨ７．５、１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００、５ｍＭのＥＤＴＡ ｐＨ８、および１ｍＭのＥＧＴＡ ｐＨ８）に可溶化し、４℃、１４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。タンパク質濃度は、Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ（登録商標）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｋｉｔ（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ、ＵＳＡ）を用いてブラッドフォードアッセイにより評価した。蛍光定量的アッセイによりプロテアソーム活性を評価し、タンパク質抽出物をＮ－スクシニル－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｔｙｒ－７－アミド－４－メチルクマリン基質（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｍｉｌａｎｏ、Ｉｔａｌｙ）と２時間インキュベートした。プロテアソーム活性は、試薬中で切断された基質から発生する相対光単位として検出された。各反応からの蛍光（Ｆ）を蛍光光度計（Ｗａｌｌａｃ １４２０ ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ ｃｏｕｎｔｅｒ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｉｔａｌｉａ ＳＰＡ、Ｍｏｎｚａ、Ｉｔａｌｙ）を使用して評価した。プロテアソーム活性（ＰＡ）は％ＰＡ＝（Ｆ ＢＴＺ－Ｆ 基質）／（Ｆ 対照－Ｆ 基質）として算出し、阻害は１００×（１－ＰＡ）として表した。

組織試料の採取
５６日目に動物をＣＯ２吸入により安楽死させ、組織試料を１群あたり４匹のラットから入手した。右坐骨神経はβ－チューブリン重合アッセイ用に液体窒素で凍結し、足裏の無毛の皮膚試料はＩＥＮＦ密度用に採取した。

β－チューブリン重合アッセイ
坐骨神経からのタンパク質抽出物は、新たに加えられたプロテアーゼ阻害剤およびホスファターゼ阻害剤を含む溶解バッファー（１０ｍＭのオルトバナジン酸ナトリウム、４ｍＭのフッ化フェニルメチルスルホニル、１％アプロチニン、および２０ｍＭのピロリン酸ナトリウム）以外はプロテアソームアッセイと同様に処理した。タンパク質抽出物を遠心分離（４℃、１４０００ｒｐｍで１０分間）し、可溶性（Ｓ）の遊離チューブリン画分と重合（Ｐ）画分とを分離した。上清を回収し、重合チューブリンのペレットを０．５％デオキシコール酸ナトリウムが補われた（Ｓ画分と等量の）体積の溶解バッファー中で２０秒間超音波処理することにより再懸濁した。タンパク質のアリコート（１０μｇ）を１３％ＳＤＳ－ＰＡＧＥに載せ、電気泳動後、ニトロセルロースフィルターに移した。マウス抗β－チューブリン抗体を使用して、免疫ブロット解析を実施した。一次抗体とのインキュベーション後、メンブレンを洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｉｔａｌｉａ ＳＰＡ、Ｍｏｎｚａ、Ｉｔａｌｙ）と共にインキュベートした。検出にはＥＣＬ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｓｙｓｔｅｍ（Ａｍｅｒｓｈａｍ ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｅｕｒｏｐｅ ＧｍｂＨ、Ｍｉｌａｎｏ、Ｉｔａｌｙ）を使用した。バンド強度はＧｅｌ Ｌｏｇｉｃ １００ Ｉｍａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ、Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ、ＮＹ、ＵＳＡ）を用いて定量化した。最終的な平均値は三連の実験から得られ、データは対照と比較した処置ラットのＰ／Ｐ＋Ｓのパーセンテージとして表された。

ＩＥＮＦ密度
後肢からの足裏の無毛の皮膚試料（５ｍｍ）を２％ＰＬＰ（パラホルムアルデヒド－リジン－過ヨウ素酸ナトリウム）中で４℃、２４時間固定し、一晩凍結保護した。試料をクライオスタットで連続的に切断して、２０μｍの切片を得た。各足蹠から３つの切片を無作為に選び、自由浮遊プロトコル（free-floating protocol）を使用して、ビオチン化抗ラビットＩｇＧおよびＶｅｃｔｏｒ ＳＧ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｋｉｔ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ）を併用したウサギポリクローナル抗タンパク質遺伝子産物９．５（ＰＧＰ ９．５；ＧｅｎｅＴｅｘ、Ｉｒｖｉｎｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）で免疫染色した。盲検化された観察者が顕微鏡ビデオカメラを用い、高倍率の光学顕微鏡下で、各切片の免疫陽性ＩＥＮＦの総数を数えた。真皮－表皮表面を横切る個々の繊維を数えた。表皮内の二次分岐は除外した。表皮の長さを測定し、他の場所で記載されたように（Canta et al., 2016 Neurobiol Aging45:136-148）ＩＥＮＦ／ミリメートルの線密度を生成した。

結果
インビトロでのＢＴＺ細胞毒性研究およびインビトロでの併用（ＢＴＺとＣＸ－８９９８）細胞毒性妨害研究
ＢＴＺは３種のＭＣＬにおいて濃度依存的な細胞増殖の阻害（細胞毒性）を引き起こした。ＢＴＺのＩＣ_５０値は、ＭＭ．１Ｓ、ＲＰＭＩ８２２６、およびＵ２６６Ｂ１細胞株でそれぞれ６±０．５ｎＭ、４±１．７ｎＭ、および２．５±０．６ｎＭであった。

ＢＴＺ単独（ＭＭ．１Ｓ、ＲＰＭＩ８２２６、およびＵ２６６Ｂ１細胞株でそれぞれ６、４、および２．５ｎＭのＩＣ_５０濃度）は、ＤＭＳＯ対照と比較して、３種のＭＣＬの細胞生存率を有意に減少させた（ｐ＜０．００１）（図１Ａ）。ＣＸ－８９９８（１０～１０００ｎＭ）とＢＴＺとの併用は、ＤＭＳＯ対照と比較して、３種のＭＣＬの細胞生存率を有意に減少させ（ｐ＜０．００１）、ＢＴＺ単独と比較して同様の減少を示した（図１Ａ）。ＣＸ－８９９８（全濃度）単独は、いずれのＭＣＬにおいても細胞生存率を減少させず、ＤＭＳＯ対照の細胞生存率と比較して同様のレベルの細胞生存を示した（図１Ａ）。

インビボでの併用（ＢＴＺとＣＸ－８９９８）抗腫瘍妨害研究
ＣＸ－８９９８のＢＴＺ抗腫瘍活性に対するインビボでの影響を、ＲＰＭＩ－８２２９ヒトＭＣＬ異種移植片を担持するヌードマウスにおいて評価した。ベースライン（０日目）～１８日目まで、体重増加率は媒体対照群で明らかとなり（腫瘍異種移植片の増殖と一致）、非腫瘍対照群（通常の動物の成長）ではそれほどでもなかった（図１Ｂ）。１ｍｇ／ｋｇのＢＴＺ単独または３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用での処置では、処置の初めの２週間の間に一過性の体重減少が見られ、１８日目および２８日目には体重増加が見られなかった。これは、このモデルにおけるＢＴＺの既知の抗腫瘍効果および許容性プロファイルに一致する（図１Ｂ）。

１８日目には、ＢＴＺ単独およびＣＸ－８９９８との併用の両方で、媒体対照マウスと比較してＴＶが有意に減少した（それぞれｐ＜０．００１およびｐ＜０．０５）（図１Ｃ）。ＢＴＺ単独で処置したマウスでは１８日目～２８日目までＴＶが増加する傾向にあったが、ＣＸ－８９９８との併用ではＴＶが減少する傾向にあり、２群間の差は終了時に統計的に有意（ｐ＜０．０１）に達した（図１Ｃ）。全体として、インビトロでの細胞生存データならびにインビボでのＴＶおよび体重増加データは収束し、ＣＸ－８９９８がＢＴＺの抗腫瘍活性および許容性を妨害しないことが支持された。

インビボでの併用（ＢＴＺとＣＸ－８９９８）ＣＩＰＮ逆転研究
ＢＴＺ誘発性神経毒性のラットモデルにおいて、ＣＸ－８９９８のＣＩＰＮ逆転に対する効果を２段階研究デザインを使用して評価した。第１段階の終了時（４週目）では、雌ウィスターラットのＢＴＺ群と対照群とで平均±ＳＥＭ体重（グラム）に統計的に有意差は見られなかった。再度無作為抽出し、さらに１週間または４週間（それぞれ５週目および８週目）処置した後では、体重変化はＢＴＺ群、３、１０、および３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８と併用したＢＴＺ群、ならびに対照群間で有意差は見られなかった。ＢＴＺ単独およびＣＸ－８９９８との併用での処置は、良好に許容された。２匹の動物で死亡が確認され、それぞれ、ＢＴＺと３ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用、およびＢＴＺと１０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用であった。

ＢＴＺ処置により、４週目の循環ＰＢＭＣにおける平均±ＳＥＭプロテアソーム活性率は、ベースラインと比較して有意に阻害された（ｐ＜０．０５）（図１Ｄ）。５週目および８週目において、プロテアソーム活性はＢＴＺおよびＢＴＺとＣＸ－８９９８のすべての併用により同様に阻害された（図１Ｄ）。ＭＣＬのインビトロおよびインビボ研究と一致して、これらのデータは、ＣＸ－８９９８の共投与がＢＴＺの抗プロテアソーム活性を妨害しないことを示唆している。

ＣＸ－８９９８の生理的および行動的エンドポイントに対する影響
ＮＣＶの低下および機械的アロディニアは、ラットにおけるＢＴＺ誘発性神経毒性に特徴的である（Cavaletti et al., 2007 Exp Neurol 204:317-325; and Meregalli et al., 2010 EJP 14:343-350）。ベースライン（１日目）において、尾部神経（図２）および坐骨神経（図３）の平均±ＳＥＭ ＮＣＶ（メートル／秒）は、対照群とＢＴＺ単独群とで同様であった。処置後のすべての時点において、尾部および坐骨ＮＣＶは、尾部神経については４週目、５週目、および８週目に（それぞれｐ＜０．０１、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．００１）（図２）、坐骨神経については４週目および８週目に（それぞれｐ＜０．０１、ｐ＜０．０５）（図３）、対照群と比較してＢＴＺ処置により有意に低下した。５週目において、坐骨神経のＮＣＶは対照より数値的に小さくなったが、差は統計的に有意ではなかった（表１）。坐骨神経ＮＣＶ値の全体的な変動が大きいこと、５週目における１群あたりの動物数が少ないこと、および／または８週目に対して５週目におけるＮＣＶ低下に対するＢＴＺの絶対効果が低いことが、統計的有意性を欠く一因となった可能性がある。

８週目において、尾部神経のＮＣＶは、ＢＴＺ単独と比較して、ＢＴＺと併用した１０および３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８により有意に増加した（それぞれｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１）（図２）。坐骨神経のＮＣＶは、８週目において、ＢＴＺ単独と比較して、１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用群で有意な増加（ｐ＜０．０５）を示した（図３）。５週目において、ＢＴＺ単独と比較して、併用群では尾部神経または坐骨神経のＮＣＶに有意差は見られなかった（図２、３、表１）。尾部神経では、５週目において、ＢＴＺ単独と比較して、ＢＴＺとのすべての併用でＮＣＶが増加する数値傾向を示した（表１）。逆に、５週目の坐骨神経では、ＢＴＺ単独と比較して、すべての併用投与群でＮＣＶが低下する数値傾向が観察された（表１）。上記の要因に加え、ＣＸ－８９９８の処置期間が短いことが、５週目の時点で有意な処置効果が観察されない一因となった可能性がある。

ベースライン（１日目）において、後肢の平均±ＳＥＭ ＭＴ（グラム）は対照群とＢＴＺ単独群とで同程度であった（図４）。４週目において、ＭＴは対照ラットに対してＢＴＺにより有意に減少し（ｐ＜０．０００１）、機械的アロディニアの発現を示唆した（図４）。５週目および８週目において、ＢＴＺと３および３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用で処置したラットは、ＢＴＺ単独と比較してＭＴの増加傾向（機械的アロディニアの低減）を示したが、統計的に有意差はなかった（図４、表１）。

ＣＸ－８９９８の組織への影響の評価
ＩＥＮＦ密度の減少およびβ－チューブリン重合の増加は、ＢＴＺ誘発性神経毒性に関連する組織異常である（Cavaletti et al., 2007 Exp Neurol 204:317-325; and Meregalli et al., 2010 EJP 14:343-350）。

平均±ＳＥＭ β－チューブリン重合（％）は、対照と比較して、ＢＴＺ単独ならびに３および１０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８と併用したＢＴＺにより有意に増加した（ｐ＜０．０５）（図５Ａ）。この増加は、ＢＴＺを３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８と併用したとき、８週目にＢＴＺ単独と比較して逆転する傾向があったが、統計的有意性には至らなかった（図５Ａ、表１）。

ラット後肢組織試料中の平均±ＳＥＭ ＩＥＮＦ密度（１ミリメートルあたりの繊維の数）は、対照と比較して、ＢＴＺ単独により有意に減少し（ｐ＜０．００１）（図５Ｂ）、ＮＣＶ障害と一致した。３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８を共投与すると、８週目に、ＢＴＺ誘発性ＩＥＮＦ密度の減少を有意に逆転させた（ｐ＜０．０５）（図５Ｂ）。ＢＴＺと３ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用は、逆転傾向を示したがＢＴＺと比較して統計的有意性には至らず、１０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８の共投与は、８週目にＢＴＺと比較して、逆転は見られなかった（図５Ｂ、表１）。

後肢の足裏の無毛の皮膚における神経線維の定性的な光学顕微鏡による解析では、ＢＴＺ単独および３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＸ－８９９８と併用したＢＴＺと比較して、ＢＴＺと３０ｍｇ／ｋｇのＣＸ－８９９８との併用でより多くの神経線維（矢印）が認められたことが示唆された（図５Ｃ）。これらの神経線維の定性的な観察は、ＩＥＮＦ密度データと一致する。

これらの結果を合わせると、ＣＸ－８９９８はＢＴＺの細胞毒性に影響を与えることなく、ＣＩＰＮモデルの神経毒性を逆転させるために使用できることが実証された。

他の実施形態
本発明をその詳細な説明と合わせて説明したが、前述の説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を例証することを意図しており、限定することを意図していないことを理解されたい。他の態様、利点、および改変は、以下の特許請求の範囲内にある。

Claims (20)

1. 神経毒性を有する哺乳動物を処置するための方法であって、Ｔ型カルシウムチャネル調節因子またはその塩を含む有効量の組成物を前記哺乳動物に投与して、前記哺乳動物における前記神経毒性の症状を低減することを含む方法。
2. 前記哺乳動物が前記神経毒性を有すると特定することを含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記哺乳動物がヒトである、請求項１または２のいずれか１項に記載の方法。
4. 神経毒性が化学療法剤誘発性神経毒性である、請求項１から３のいずれか１項に記載の方法。
5. 前記化学療法剤誘発性神経毒性がボルテゾミブ誘発性神経毒性である、請求項４に記載の方法。
6. 前記神経毒性を有する哺乳動物が、前記化学療法剤を投与されて、前記哺乳動物内のがんを処置したことがある、請求項４または５のいずれか１項に記載の方法。
7. 前記がんが、多発性骨髄腫、マントル細胞リンパ腫、白血病、消化管がん、肺がん、精巣がん、卵巣がん、脳腫瘍、子宮がん、前立腺がん、骨がん、乳がん、および膀胱がんからなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
8. 前記症状が、疼痛、四肢脱力、四肢痺れ、痒み、知覚障害、麻痺、無嗅覚、下垂症、慢性咳嗽、運動機能障害、記憶喪失、視力低下、頭痛、認知障害、脳症、認知症、気分障害、便秘、性機能障害、膀胱性尿閉、および出血からなる群から選択される、請求項１から７のいずれか１項に記載の方法。
9. 前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子が負性調節因子である、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
10. 前記負性調節因子が負性アロステリック調節因子である、請求項９に記載の方法。
11. 前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子がＴ型カルシウムチャネル活性を低減する、請求項１から１０のいずれか１項に記載の方法。
12. 前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子がＣＸ－８９９８を含む、請求項１から１１のいずれか１項に記載の方法。
13. 前記ＣＸ－８９９８が塩の形態である、請求項１２に記載の方法。
14. 前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子がＣＸ－８９９８の代謝産物を含む、請求項１から１１のいずれか１項に記載の方法。
15. 前記ＣＸ－８９９８の代謝産物が、
    

    

    およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
16. 前記ＣＸ－８９９８の代謝産物が塩の形態である、請求項１５に記載の方法。
17. 前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子がＣＸ－８９９８および１種または複数のＣＸ－８９９８の代謝産物を含む、請求項１から１１のいずれか１項に記載の方法。
18. 前記組成物が約１０ｎＭ～約１０００ｎＭの前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子を含む、請求項１から１７のいずれか１項に記載の方法。
19. 前記組成物が、前記哺乳動物に対する前記Ｔ型カルシウムチャネル調節因子を、約３ｍｇ／ｋｇ前記哺乳動物の体重～約３０ｍｇ／ｋｇ前記哺乳動物の体重で含む、請求項１から１８のいずれか１項に記載の方法。
20. 前記組成物が経口投与される、請求項１から１９のいずれか１項に記載の方法。
    

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