JP2022547066A - 免疫結合体合成方法 - Google Patents

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    • A61K47/6889Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
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Abstract

本発明は、免疫結合体を製造する方法であって、該方法が1つ以上の式Iの化合物および式IIの抗体構築物を組み合わせて式IIIの免疫結合体を提供することを含む方法を提供する(式中、TAは、治療剤であり、Lは、リンカーであり、rは、1から50の整数であり、Arは、PEG、-SO2CX3、-NR3+、-NO2、-SO3R、-SO2R、-CN、-CX3、-PO3R2、-OPO3R2、【化1】JPEG2022547066000085.jpg4051およびそれらの塩から選択される置換基を含む芳香族部分であり、各Rは独立して、H、CX3、またはC1-C4アルキルであり、各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、Yは、CH2、PEG、または結合であり、nは、1から4の整数であり、PEGは、式:-(CH2CH2O)m-(CH2)p-(式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)。本発明はまた、前記方法から形成される免疫結合体および免疫結合体の組成物を提供する。【化2】JPEG2022547066000086.jpg23119【選択図】図1

Description

関連出願への相互参照
本出願は、2019年9月4日付で出願された米国仮特許出願62/895,801号、および2019年9月27日付で出願された米国仮特許出願62/907,136号の優先権を主張し、それらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
電子的に提出された資料の参照による組み込み
本明細書と同時に提出され、以下のように2020年9月3日に作成された「750533_ST25.txt,」と名付けられた1つの102,888バイトのASCII(Text)ファイルとして特定されるコンピュータ可読ヌクレオチド/アミノ酸配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
発明の背景
残念ながら、免疫系は、しばしば癌並びに他の疾患および状態の増殖および広まりを制御することができない。抗体および免疫治療剤は、癌および疾患の制御において免疫系を支援する効果的な治療法であると示されてきた。抗腫瘍抗体および治療剤の同時送達は、腫瘍を治療し、癌患者および他の対象についての治療オプションを拡大するのに効果的であり得る。さらに、抗体および治療剤(すなわち、免疫アゴニストまたは免疫アンタゴニスト)の同時送達は、ウイルス、細菌、または寄生虫によって引き起こされる感染症、および自己免疫疾患などの疾患、状態、および障害を治療するのに効果的であり得る。
抗体および免疫治療剤を同時に送達するための効果的な方法は、抗体および治療剤を結合させて免疫結合体を形成させることによる。そのような免疫結合体を製造するために使用することができるいくつかの方法がある。
免疫結合体を製造するために使用することができる方法の例は、当技術分野においてよく知られている。治療剤は、タンパク質修飾のためのさまざまな化学を使用して抗体に共有結合させることができ、ここで、連結部分は、タンパク質官能基(すなわち、アミノ酸側鎖)の反応性リンカー基を有する試薬との反応から生じる。多種多様なそのような試薬が、当技術分野において知られている。そのような試薬の例は、N-ヒドロキシスクシンイミジル(NHS)エステルおよびN-ヒドロキシスルホスクシンイミジル(スルホ-NHS)エステル(アミン反応性);カルボジイミド(アミンおよびカルボキシル反応性);ヒドロキシメチルホスフィン(アミン反応性);マレイミド(チオール反応性);N-ヨードアセトアミドなどのハロゲン化アセトアミド(チオール反応性);アリールアジド(一級アミン反応性);フッ素化アリールアジド(炭素-水素(C-H)挿入を介して反応性);ペンタフルオロフェニル(PFP)エステル(アミン反応性);テトラフルオロフェニル(TFP)エステル(アミン反応性);イミドエステル(アミン反応性);イソシアネート(ヒドロキシル反応性);ビニルスルホン(チオール、アミン、およびヒドロキシル反応性);ピリジルジスルフィド(チオール反応性);およびベンゾフェノン誘導体(C-H結合挿入を介して反応性)を含むが、これらに限定されない。さらなる試薬は、Hermanson,Bioconjugate Techniques 2nd Edition,Academic Press,2008中に記載されている試薬を含むが、これらに限定されない。
1つの特定の参考文献、すなわち、米国特許第8,741,291号(「‘291特許」)は、タンパク質またはペプチドの抗体への結合における使用のためのハロゲン化エステル(例えば、TFPおよびPFPエステル)を開示する。‘291特許は、結合法が、部位選択性の追加の利点を提供し、軽鎖カッパドメイン定常領域(CLκ)のK80(KabatナンバリングによるK188)の側鎖に少なくとも約50%の結合をもたらすことを説明する。しかしながら、‘291特許において開示される該方法は、小さなペプチドおよびタンパク質を超えて拡張されるとき、溶解性に関連する欠点(例えば、反応の速度、選択性、収率等)に見舞われ得る。
すなわち、免疫結合体を製造する新しい方法の必要性が残っている。本発明は、このおよび他の必要性に対処する。
本発明は、治療剤および抗体構築物の免疫結合体を製造する方法を提供する。該方法は、1つ以上の式I:
Figure 2022547066000002
の化合物またはその塩、および式II:
Figure 2022547066000003
の抗体構築物またはその塩
(ここで、式IIは、(Abが該抗体構築物の残部を表すように)該抗体構築物の1つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000004
を有する抗体構築物である)
を組み合わせて、
式III:
Figure 2022547066000005
(式中、TAは、治療剤であり、Lは、リンカーであり、rは、1から50の整数であり、Arは、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000006
およびそれらの塩から選択される置換基を含む芳香族部分であり、各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、
Yは、CH、PEG、または結合であり、nは、1から4の整数であり、PEGは、式:-(CHCHO)-(CH-(式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)
の免疫結合体またはその塩を提供することを含む。
本発明はまた、本発明の製造方法に従って製造される免疫結合体、並びにそのような免疫結合体を含む組成物を提供する。
本発明はさらに、治療有効量の本発明による免疫結合体または組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む、癌を治療するまたは予防する方法を提供する。
図1は、実施例2において記載される、スルホテトラフルオロフェニルエステル(S-TFPリンカーTA)を有する治療剤リンカー化合物およびテトラフルオロフェニルエステル(TFPリンカーTA)を有する治療剤リンカー化合物のDMA緩衝溶液中での加水分解安定性を示す、時間(時間)対面積(%)のグラフである。 図2は、実施例3において記載される、テトラフルオロフェニルエステル(TFP)、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル(NHS)、スルホテトラフルオロフェニルエステル(S-TFP)、およびスルホジクロロフェニルエステル(SDP)との結合から形成された免疫結合体についての、軽鎖(LC)、重鎖(HC)、および軽鎖のリジン188(LC K188)に結合した、パーセントで測定した結合プロファイルを示す棒グラフである。
発明の詳細な説明
全般
本発明は、免疫結合体を製造する方法であって、該方法が1つ以上の式I:
Figure 2022547066000007
の化合物またはその塩、および式II:
Figure 2022547066000008
の抗体構築物またはその塩
(ここで、式IIは、(Abが該抗体構築物の残部を表すように)該抗体構築物の1つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000009
を有する抗体構築物である)
を組み合わせて、
式III:
Figure 2022547066000010
(式中、
TAは、治療剤であり、
Lは、リンカーであり、
rは、1から50の整数であり、
Arは、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000011
およびそれらの塩から選択される置換基を含む芳香族部分であり、
各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、
各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、
Yは、CH、PEG、または結合であり、
nは、1から4の整数であり、
PEGは、式:
-(CHCHO)-(CH
(式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)
の免疫結合体またはその塩を提供することを含む方法を提供する。
本明細書において記載される免疫結合体を作製する方法の有効性は、治療剤をリンカーを介して抗体構築物に結合させることができる効率および/または選択性の観点から考えることができる。該方法を促進するために利用するエステル部分は、反応性、溶解性、および/または安定性の好ましい組合せを可能にして所望の免疫結合体または免疫結合体の組成物を提供する、特定の電子的および/または立体的特性を有する。
定義
本明細書において使用される用語「免疫結合体」は、本明細書において記載される天然に存在しない化学部分に共有結合している、抗体構築物、または抗体を指す。用語「免疫結合体」は、本明細書において互換的に使用される。
本明細書において使用される句「抗体構築物」は、抗原結合ドメインおよびFcドメインを含むポリペプチドを指す。抗体構築物は、抗体を含むかまたは抗体であり得る。
本明細書において使用される句「抗原結合ドメイン」は、特定の抗原(例えば、パラトープ)に、例えば、抗原と相互作用し、抗原結合タンパク質上に該抗原に対するその特異性および親和性を与えるアミノ酸残基を含有する抗原結合タンパク質のその部分に、特異的に結合する、タンパク質、またはタンパク質の部分を指す。
本明細書において使用される句「Fcドメイン」は、断片結晶化可能領域、または抗体のテール領域を指す。Fcドメインは、細胞表面上のFc受容体と相互作用する。
本明細書において使用される句「標的結合ドメイン」は、免疫結合体の抗原結合ドメインが結合する抗原とは異なる第2の抗原に特異的に結合する、タンパク質、またはタンパク質の部分を指す。標的結合ドメインは、FcドメインのC末端で抗体構築物に結合させることができる。
本明細書において使用される用語「抗体」は、抗原に特異的に結合しそれを認識する、免疫グロブリン遺伝子またはその断片に由来する抗原結合領域(相補性決定領域(CDR)を含む)を含むポリペプチドを指す。認識される免疫グロブリン遺伝子は、カッパ、ラムダ、アルファ、ガンマ、デルタ、イプシロン、およびミュー定常領域遺伝子、並びに多数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。「抗体」は、最も広い意味で使用され、具体的には、モノクローナル抗体(完全長モノクローナル抗体を含む)、ポリクローナル抗体、および多重特異性抗体(例えば、二重特異性抗体)を包含する。
例示的な免疫グロブリン(抗体)構造単位は、四量体を含む。各四量体は、2つの同一の対のポリペプチド鎖で構成されており、各対は、1つの「軽」鎖(約25kD)および1つの「重」鎖(約50~70kD)を有する。各鎖のN末端は、主に抗原認識に関与する約100から110個以上のアミノ酸の可変領域を定義付ける。用語可変軽鎖(V)および可変重鎖(V)は、それぞれこれらの軽および重鎖を指す。軽鎖は、カッパまたはラムダのいずれかとして分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロンとして分類され、これは次に免疫グロブリンクラスIgG、IgM、IgA、IgD、およびIgEをそれぞれ定義する。
IgG抗体は、4つのペプチド鎖で構成される約150kDaの大きな分子である。IgG抗体は、約50kDaの2つの同一のクラスのγ重鎖および約25kDaの2つの同一の軽鎖を含有し、四量体四次構造を形成する。2つの重鎖は、互いに、そしてそれぞれジスルフィド結合によって軽鎖に連結されている。得られる四量体は、一緒になってY字状形状を形成する2つの同一の半体を有する。枝の各端部は、同一の抗原結合部位を含有する。ヒトにおいては、血清中のそれらの豊富さの順に命名される4つのIgGサブクラス(IgG1、2、3、および4)が存在する(IgG1が最も豊富である)。典型的には、抗体の抗原結合領域は、結合の特異性および親和性において最も重要であろう。
二量体IgA抗体は、約320kDaである。IgAは、2つのサブクラス(IgA1およびIgA2)を有し、単量体並びに二量体の形態として産生され得る。IgA二量体形態(分泌型またはsIgA)が、最も豊富である。
抗体は、例えば、インタクトな免疫グロブリンとしてまたはさまざまなペプチダーゼでの分解によって産生される多数の十分に特徴付けられた断片として存在し得る。すなわち、例えば、ペプシンは、ヒンジ領域中のジスルフィド結合の下で抗体を分解して、それ自体がジスルフィド結合によってV-C1に接合した軽鎖であるFabの二量体であるF(ab)’を産生する。F(ab)’は、穏和な条件下で還元され、ヒンジ領域中のジスルフィド結合が切断され、それによって、F(ab)’二量体がFab’モノマーに変換され得る。Fab’モノマーは、本質的にヒンジ領域の部分を有するFabである(例えば、Fundamental Immunology(Paul,editor,7th edition,2012)を参照されたい)。さまざまな抗体断片は、インタクトな抗体の分解の観点から定義されるが、一方でそのような断片は、化学的にまたは組み換えDNA方法を使用してのいずれかで、改めて合成され得る。すなわち、本明細書において使用される用語抗体はまた、全抗体の修飾により産生される、組み換えDNA方法を使用して改めて合成される(例えば、単鎖Fv)、またはファージディスプレイライブラリーを使用して同定される(例えば、McCafferty et al.,Nature,348:552-554(1990)を参照されたい)抗体断片を含む。
本明細書において使用される用語「抗体断片」およびその全ての文法的変形は、インタクトな抗体の抗原結合部位または可変領域を含むインタクトな抗体の部分として定義され、ここで、該部分は、インタクトな抗体のFc領域の定常重鎖ドメイン(すなわち、抗体アイソタイプに依存して、CH2、CH3、およびCH4)を含まない。抗体断片の例は、限定されることなく、(1)単鎖Fv(scFv)分子;(2)1つの軽鎖可変ドメインのみを含有する単鎖ポリペプチド、または関連する重鎖部分を有さない、軽鎖可変ドメインの3つのCDRを含有するその断片;(3)1つの重鎖可変領域のみを含有する単鎖ポリペプチド、または関連する軽鎖部分を有さない、重鎖可変領域の3つのCDRを含有するその断片;(4)非ヒト種に由来する単一のIgドメインまたは他の特定の単一ドメイン結合モジュールを含むナノボディ;および(5)抗体断片から形成された多重特異性または多価構造体を含み、Fab、Fab’、Fab’-SH、F(ab’)、およびFv断片;ダイアボディ;隣接するアミノ酸残基の1つの中断されていない配列(本明細書においては、「単鎖抗体断片」または「単鎖ポリペプチド」として呼ばれる)からなる一次構造を有するポリペプチドである任意の抗体断片を含む。1つ以上の重鎖を含む抗体断片において、重鎖(複数可)は、インタクトな抗体の非Fc領域中に見出される任意の定常ドメイン配列(例えば、IgGアイソタイプにおけるCH1)を含有し得、および/またはインタクトな抗体において見出される任意のヒンジ領域配列を含有し得、および/またはヒンジ領域配列または重鎖(複数可)の定常ドメイン配列に融合したまたはその中に位置するロイシンジッパー配列を含有し得る。
本明細書において使用される、生物学的製品に関連する用語「バイオシミラー」は、臨床的に不活性な成分におけるわずかな違いにもかかわらず、該生物学的製品が参照製品に非常に類似しており、製品の安全性、純度、および効力の観点から該生物学的製品と該参照製品との間に臨床的に意味のある違いが何らないことを意味する。
本明細書において使用される用語「バイオベター」は、以前に承認された抗体構築物(例えば、トラスツズマブまたはペルツズマブ)の改良である承認された抗体構築物を指す。バイオベターは、以前に承認された抗体構築物に対して、1つ以上の修飾(例えば、変更されたグリカンプロファイル、または固有のエピトープ)を有し得る。
本明細書において使用される用語「エピトープ」は、パラトープとしても呼ばれる、抗体の抗原結合部位に結合する抗原上の任意の抗原決定基を意味する。エピトープ決定基は通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面集団からなり、通常、特定の三次元構造特性、並びに特定の電荷特性を有する。
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、本明細書においては互換的に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。該用語はまた、1つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工的な化学的模倣体であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマーおよび天然に存在しないアミノ酸ポリマーにも適用される。
本明細書において使用される句「治療剤」は、本明細書において記載される抗体構築物に共有結合している免疫調節剤を指す。すなわち、用語「治療剤」および「免疫調節剤」は、本明細書においては交換可能に使用することができる。治療剤は、抗体構築物に結合している間または対象への免疫結合体の投与に続く抗体構築物からの切断(例えば、酵素的切断)後に、免疫応答(すなわち、刺激または抑制)を引き出すことができる。治療剤は、免疫アゴニストまたはアンタゴニストであり得る。
本明細書において使用される句「パターン認識受容体」および用語「PRR」は、病原体関連分子パターン(PAMP)または損傷関連分子パターン(DAMP)を認識し、自然免疫における重要なシグナル伝達要素として作用する、保存された哺乳動物タンパク質のクラスの任意のメンバーを指す。パターン認識受容体は、膜結合型PRR、細胞質型PRR、および分泌型PRRに分類される。膜結合型PRRの例は、Toll様受容体(TLR)およびC型レクチン受容体(CLR)を含む。細胞質PRRの例は、NLRP3、Rig-I様受容体(RLR)、およびSTING(インターフェロン遺伝子の刺激因子)などのNOD様受容体(NLR)を含む。
本明細書において使用される句「Toll様受容体」および用語「TLR」は、病原体関連分子パターンを認識し、自然免疫における重要なシグナル伝達要素として作用する、高度に保存された哺乳動物タンパク質の1つのファミリーの任意のメンバーを指す。TLRポリペプチドは、ロイシンリッチ反復を有する細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、およびTLRシグナル伝達に関与する細胞内ドメインを含む、特徴的構造を共有する。
句「トール様受容体1」および用語「TLR1」は、公的に利用可能なTLR1配列、例えば、ヒトTLR1ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAY85643、またはネズミTLR1ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAG37302と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体2」および用語「TLR2」は、公的に利用可能なTLR2配列、例えば、ヒトTLR2ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAY85648、またはネズミTLR2ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAD49335と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体3」および用語「TLR3」は、公的に利用可能なTLR3配列、例えば、ヒトTLR3ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAC34134、またはネズミTLR3ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAK26117と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体4」および用語「TLR4」は、公的に利用可能なTLR4配列、例えば、ヒトTLR4ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAY82270、またはネズミTLR4ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAD29272と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体5」および用語「TLR5」は、公的に利用可能なTLR5配列、例えば、ヒトTLR5ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号ACM69034、またはネズミTLR5ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAF65625と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体6」および用語「TLR6」は、公的に利用可能なTLR6配列、例えば、ヒトTLR6ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号ABY67133、またはネズミTLR6ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAG38563と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体7」および用語「TLR7」は、公的に利用可能なTLR7配列、例えば、ヒトTLR7ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAZ99026、またはネズミTLR7ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAK62676と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体8」および用語「TLR8」は、公的に利用可能なTLR8配列、例えば、ヒトTLR8ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAZ95441、またはネズミTLR8ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAK62677と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体7/8」および用語「TLR7/8」は、TLR7アゴニストおよびTLR8アゴニストの両方である核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体9」および用語「TLR9」は、公的に利用可能なTLR9配列、例えば、ヒトTLR9ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAF78037、またはネズミTLR9ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAK28488と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体10」および用語「TLR10」は、公的に利用可能なTLR10配列、例えば、ヒトTLR10ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAK26744と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体11」および用語「TLR11」は、公的に利用可能なTLR11配列、例えば、ネズミTLR11ポリペプチドについてのGenBankアクセッション番号AAS83531と、少なくとも70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
「TLRアゴニスト」は、TLR(例えば、TLR7および/またはTLR8)に直接または間接的に結合して、TLRシグナル伝達を誘導する物質である。TLRシグナル伝達における検出可能などんな違いも、アゴニストがTLRを刺激するまたは活性化することを示すことができる。シグナル伝達の違いは、例えば、標的遺伝子の発現における、シグナル伝達成分のリン酸化における、NK-κBなどの下流要素の細胞内局在における、ある成分(IRAKなどの)の他のタンパク質若しくは細胞内構造との関連性における、またはキナーゼ(MAPKなどの)などの成分の生化学的活性における変化として、明白にされ得る。
本明細書において使用される用語「アミノ酸」は、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質に組み込まれ得る任意のモノマー単位を指す。アミノ酸は、天然に存在するα-アミノ酸およびそれらの立体異性体、並びに非天然の(天然に存在しない)アミノ酸およびそれらの立体異性体を含む。与えられたアミノ酸の「立体異性体」は、同じ分子式および分子内結合を有するが、結合および原子の異なる三次元配置を有する異性体(例えば、L-アミノ酸および対応するD-アミノ酸)を指す。
天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによってコードされるアミノ酸、並びに後に修飾されるそれらのアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ-カルボキシグルタメート、およびO-ホスホセリンである。天然に存在するα-アミノ酸は、限定されることなく、アラニン(Ala)、システイン(Cys)、アスパラギン酸(Asp)、グルタミン酸(Glu)、フェニルアラニン(Phe)、グリシン(Gly)、ヒスチジン(His)、イソロイシン(Ile)、アルギニン(Arg)、リジン(Lys)、ロイシン(Leu)、メチオニン(Met)、アスパラギン(Asn)、プロリン(Pro)、グルタミン(Gln)、セリン(Ser)、スレオニン(Thr)、バリン(Val)、トリプトファン(Trp)、チロシン(Tyr)、およびそれらの組合せを含む。天然に存在するα-アミノ酸の立体異性体は、限定されることなく、D-アラニン(D-Ala)、D-システイン(D-Cys)、D-アスパラギン酸(D-Asp)、D-グルタミン酸(D-Glu)、D-フェニルアラニン(D-Phe)、D-ヒスチジン(D-His)、D-イソロイシン(D-Ile)、D-アルギニン(D-Arg)、D-リジン(D-Lys)、D-ロイシン(D-Leu)、D-メチオニン(D-Met)、D-アスパラギン(D-Asn)、D-プロリン(D-Pro)、D-グルタミン(D-Gln)、D-セリン(D-Ser)、D-スレオニン(D-Thr)、D-バリン(D-Val)、D-トリプトファン(D-Trp)、D-チロシン(D-Tyr)、およびそれらの組合せを含む。
非天然の(天然に存在しない)アミノ酸は、限定されることなく、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する、L-またはD-配置のいずれかである、アミノ酸類似体、アミノ酸模倣体、合成アミノ酸、N-置換グリシン、およびN-メチルアミノ酸を含む。例えば、「アミノ酸類似体」は、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造(すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基に結合している炭素)を有するが、修飾された側鎖基または修飾されたペプチド骨格を有する非天然のアミノ酸、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムであり得る。「アミノ酸模倣体」は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する化学的化合物を指す。アミノ酸は、本明細書においては、一般に知られている3文字記号、またはIUPAC-IUB Biochemical Nomenclature Commissionにより推奨される1文字記号のいずれかによって参照され得る。
本明細書において使用される用語「免疫チェックポイント阻害剤」は、免疫チェックポイント分子の活性を阻害する任意のモジュレーターを指す。免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイント分子結合タンパク質、小分子阻害剤、抗体、抗体誘導体(Fc融合体、Fab断片およびscFvを含む)、抗体-薬物結合体、アンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNA、アプタマー、ペプチドおよびペプチド模倣体を含むが、これらに限定されない。
連結部分をタンパク質および他の物質に接続するための有用な結合は、アミド、アミン、エステル、カルバメート、尿素、チオエーテル、チオカルバメート、チオカーボネート、およびチオ尿素を含むが、これらに限定されない。「二価の」連結部分は、2つの官能基を連結するための2つの接続点を含有し;多価連結部分は、さらなる官能基を連結するための追加の接続点を有し得る。例えば、二価の連結部分は、二価のポリ(エチレングリコール)、二価のポリ(プロピレングリコール)、および二価のポリ(ビニルアルコール)などの二価のポリマー部分を含む。
本明細書において使用される用語「任意に存在する」を化学構造(例えば、「X」または「Y」)を指すために使用するとき、その化学構造が存在しない場合、該化学構造に対して元来なされる結合が隣接する原子に直接なされる。
本明細書において使用される用語「リンカー」は、化合物または物質中の2つ以上の部分を共有結合する官能基を指す。例えば、リンカーは、免疫結合体において治療剤を抗体構築物に共有結合するために役立ち得る。
本明細書において使用される用語「アルキル」は、示される炭素原子数を有する、直鎖のまたは分枝状の飽和脂肪族ラジカルを指す。アルキルは、C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C1-6、C1-7、C1-8、C1-9、C1-10、C2-3、C2-4、C2-5、C2-6、C3-4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6およびC5-6などの任意の数の炭素を含み得る。例えば、C1-6アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどを含むが、これらに限定されない。アルキルはまた、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどの、しかしこれらに限定されない最大30個の炭素原子を有するアルキル基を指し得る。アルキル基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換アルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、およびアルコキシから選択される1つ以上の基で置換され得る。用語「アルキレン」は、二価のアルキルラジカルを指す。
本明細書において使用される用語「ヘテロアルキル」は、1つ以上の炭素原子が、任意におよび独立してN、O、およびSから選択されるヘテロ原子で置換されている、本明細書において記載されるアルキル基を指す。用語「ヘテロアルキレン」は、二価のヘテロアルキルラジカルを指す。
本明細書において使用される用語「シクロアルキル」は、3から12個の環原子または示された原子数を含有する、飽和若しくは部分的に不飽和の単環式、縮合二環式、または架橋多環式環集合体を指す。シクロアルキルは、C3-6、C4-6、C5-6、C3-8、C4-8、C5-8、C6-8、C3-9、C3-10、C3-11、およびC3-12などの任意の数の炭素を含み得る。飽和単環式炭素環式環は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロオクチルを含む。飽和二環式および多環式炭素環式環は、例えば、ノルボルナン、[2.2.2]ビシクロオクタン、デカヒドロナフタレン、およびアダマンタンを含む。シクロアルキル基はまた、環中に1つ以上の二重または三重結合を有し、部分的に不飽和であり得る。部分的に不飽和である代表的な炭素環式基は、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン(1,3-および1,4-異性体)、シクロヘプテン、シクロヘプタジエン、シクロオクテン、シクロオクタジエン(1,3-、1,4-および1,5-異性体)、ノルボルネン、およびノルボルナジエンを含むが、これらに限定されない。
不飽和炭素環式基はまた、アリール基を含む。用語「アリール」は、任意の適切な数の環原子および任意の適切な数の環を有する芳香環系を指す。アリール基は、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、または16個の環原子、並びに6から10個、6から12個、または6から14個の環員などの任意の適切な数の環原子を含み得る。アリール基は、単環式であり得、縮合して二環式若しくは三環式基を形成し得、または結合によって連結してビアリール基を形成し得る。代表的なアリール基は、フェニル、ナフチル、およびビフェニルを含む。他のアリール基は、メチレン連結基を有するベンジルを含む。いくつかのアリール基は、フェニル、ナフチル、またはビフェニルなどの6から12個の環員を有する。他のアリール基は、フェニルまたはナフチルなどの6から10個の環員を有する。アリール基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換アリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される1つ以上の基で置換され得る。
「二価の」シクロアルキルは、分子または物質中の2つの部分を共有結合で連結するための2つの接続点を有する炭素環式基を指す。シクロアルキル基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換シクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される1つ以上の基で置換され得る。
本明細書において使用される用語「複素環」は、ヘテロシクロアルキル基およびヘテロアリール基を指す。「ヘテロアリール」は、それ自体または別の置換基の一部として、5から16個の環原子を含有する単環式または縮合二環式若しくは三環式芳香環集合体を指し、ここで、環原子の1から5個は、N、O、またはSなどのヘテロ原子である。追加のヘテロ原子もまた、有用であり得、B、Al、Si、およびPを含むが、これらに限定されない。ヘテロ原子は、酸化されて、-S(O)-およびS(O)-などの部分を形成し得るが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は、3から6、4から6、5から6、3から8、4から8、5から8、6から8、3から9、3から10、3から11、または3から12個の環員などの任意の数の環原子を含み得る。1、2、3、4、若しくは5個の、または1から2、1から3、1から4、1から5、2から3、2から4、2から5、3から4、若しくは3から5個などの任意の適切な数のヘテロ原子が、ヘテロアリール基中に含まれ得る。ヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン(1,2,3-、1,2,4-および1,3,5-異性体)、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、およびイソオキサゾールなどの基を含み得る。ヘテロアリール基はまた、フェニル環などの芳香環系に縮合して、インドールおよびイソインドールなどのベンゾピロール、キノリンおよびイソキノリンなどのベンゾピリジン、ベンゾピラジン(キノキサリン)、ベンゾピリミジン(キナゾリン)、フタラジンおよびシンノリンなどのベンゾピリダジン、ベンゾチオフェン、およびベンゾフランを含むがこれらに限定されない員を形成し得る。他のヘテロアリール基は、ビピリジンなどの、結合によって連結されたヘテロアリール環を含む。ヘテロアリール基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換ヘテロアリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される1つ以上の基で置換され得る。
本明細書において使用される用語「芳香族部分」は、本明細書において提供される開示によって特定されるように置換されてきた、本明細書において記載されるアリールまたはヘテロアリール基を指す。
ヘテロアリール基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、ピロールは、1-、2-および3-ピロールを含み、ピリジンは、2-、3-および4-ピリジンを含み、イミダゾールは、1-、2-、4-および5-イミダゾールを含み、ピラゾールは、1-、3-、4-および5-ピラゾールを含み、トリアゾールは、1-、4-および5-トリアゾールを含み、テトラゾールは、1-および5-テトラゾールを含み、ピリミジンは、2-、4-、5-および6-ピリミジンを含み、ピリダジンは、3-および4-ピリダジンを含み、1,2,3-トリアジンは、4-および5-トリアジンを含み、1,2,4-トリアジンは、3-、5-および6-トリアジンを含み、1,3,5-トリアジンは、2-トリアジンを含み、チオフェンは、2-および3-チオフェンを含み、フランは、2-および3-フランを含み、チアゾールは、2-、4-および5-チアゾールを含み、イソチアゾールは、3-、4-および5-イソチアゾールを含み、オキサゾールは2-、4-および5-オキサゾールを含み、イソオキサゾールは、3-、4-および5-イソオキサゾールを含み、インドールは1-、2-および3-インドールを含み、イソインドールは、1-および2-イソインドールを含み、キノリンは、2-、3-および4-キノリンを含み、イソキノリンは、1-、3-および4-イソキノリンを含み、キナゾリンは2-および4-キノゾリンを含み、シンノリンは3-および4-シンノリンを含み、ベンゾチオフェンは、2-および3-ベンゾチオフェンを含み、ベンゾフランは、2-および3-ベンゾフランを含む。
「ヘテロシクロアルキル」は、それ自体または別の置換基の一部として、3から12個の環員および1から4個のN、O、およびSのヘテロ原子を有する飽和環系を指す。追加のヘテロ原子もまた、有用であり得、B、Al、Si、およびPを含むが、これらに限定されない。ヘテロ原子は、酸化されて、-S(O)-およびS(O)-などの部分を形成し得るが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキル基は、3から6、4から6、5から6、3から8、4から8、5から8、6から8、3から9、3から10、3から11、または3から12個の環員などの任意の数の環原子を含み得る。1、2、3、若しくは4個の、または1から2、1から3、1から4、2から3、2から4、若しくは3から4個などの任意の適切な数のヘテロ原子が、ヘテロシクロアルキル基中に含まれ得る。ヘテロシクロアルキル基は、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、アゾカン、キヌクリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン(1,2-、1,3-および1,4-異性体)、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、オキサン(テトラヒドロピラン)、オキセパン、チイラン、チエタン、チオラン(テトラヒドロチオフェン)、チアン(テトラヒドロチオピラン)、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、ジオキソラン、ジチオラン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサン、またはジチアンなどの基を含み得る。ヘテロシクロアルキル基はまた、芳香族または非芳香族環系に縮合して、インドリンを含むがこれに限定されない員を形成し得る。ヘテロシクロアルキル基は、非置換でありまたは置換され得る。「置換ヘテロシクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ(=O)、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される1つ以上の基で置換され得る。
ヘテロシクロアルキル基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、アジリジンは、1-または2-アジリジンであり得、アゼチジンは、1-または2-アゼチジンであり得、ピロリジンは、1-、2-または3-ピロリジンであり得、ピペリジンは、1-、2-、3-または4-ピペリジンであり得、ピラゾリジンは、1-、2-、3-または4-ピラゾリジンであり得、イミダゾリジンは、1-、2-、3-または4-イミダゾリジンであり得、ピペラジンは、1-、2-、3-または4-ピペラジンであり得、テトラヒドロフランは、1-または2-テトラヒドロフランであり得、オキサゾリジンは、2-、3-、4-または5-オキサゾリジンであり得、イソオキサゾリジンは、2-、3-、4-または5-イソオキサゾリジンであり得、チアゾリジンは、2-、3-、4-または5-チアゾリジンであり得、イソチアゾリジンは、2-、3-、4-または5-イソチアゾリジンであり得、モルホリンは、2-、3-または4-モルホリンであり得る。
本明細書において使用される用語「ハロ」および「ハロゲン」は、それ自体または別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を指す。
本明細書において使用される用語「カルボニル」は、それ自体または別の置換基の一部として、-C(O)-、すなわち、カルボニルを有する部分中、酸素に二重結合し、2つの他の基に結合した炭素原子を指す。
本明細書において使用される用語「アミノ」は、各R基がHまたはアルキルである、-NR部分を指す。アミノ部分は、イオン化され、対応するアンモニウムカチオンを形成し得る。
本明細書において使用される用語「ヒドロキシ」は、-OH部分を指す。
本明細書において使用される用語「シアノ」は、窒素原子に三重結合した炭素原子(すなわち、-C≡N部分)を指す。
本明細書において使用される用語「カルボキシ」は、-C(O)OH部分を指す。カルボキシ部分は、イオン化され、対応するカルボキシレ-トアニオンを形成し得る。
本明細書において使用される用語「アミド」は、-NRC(O)RまたはC(O)NR部分を指し、ここで、各R基は、Hまたはアルキルである。
本明細書において使用される用語「ニトロ」は、-NO部分を指す。
本明細書において使用される用語「オキソ」は、化合物に二重結合している酸素原子(すなわち、O=)を指す。
本明細書において使用される句「塩」または「薬学的に許容される塩」は、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から誘導される塩を含むことを意図する。一般に、そのような塩は、水中若しくは有機溶媒中、または該2つの混合物中で、これらの化合物の遊離の酸または塩基形態を、それぞれ、化学量論量の適切な塩基または酸と反応させることによって製造することができる。例えば、無機酸(例えば、塩酸、硫酸、リン酸、または臭化水素酸)、有機酸(例えば、シュウ酸、マロン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メチルスルホン酸、またはベンジルスルホン酸)、無機塩基(例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、または水酸化アンモニウム)、有機塩基(例えば、メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリス(ヒドロキシメチル)メチルアミン、グアニジン、コリン、またはシンコニン)、またはアミノ酸(例えば、リジン、アルギニン、またはアラニン)を使用することができる。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が、典型的に利用される。適切な塩のリストは、Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th ed.,Mack Publishing Company,Easton,PA,1990,p.1445、およびJournal of Pharmaceutical Science,66:2-19(1977)中に見出される。例えば、適切な塩は、アルカリ金属(例えば、ナトリウムまたはカリウム)、アルカリ土類金属(例えば、カルシウム)、およびアンモニウムの塩であり得る。
本明細書において使用される用語「治療する(treat)」、「治療(treatment)」、および「治療すること(treating)」は、軽減;寛解;症状の減少、または症状、傷害、病的状態、若しくは状態を患者にとってより忍容可能なものにすること;症状の進行速度の低減;症状または状態の頻度または持続時間の軽減;または、いくつかの状況では、症状の発症の予防;などの、任意の客観的または主観的パラメーターを含む、傷害、病的状態、状態、または症状(例えば、認知障害)の治療または改善における成功の任意の兆候を指す。症状の治療または改善は、例えば、身体検査の結果を含む、任意の客観的または主観的パラメーターに基づき得る。
本明細書において使用される用語「癌」は、固形癌、リンパ腫、および白血病を含む状態を指す。異なるタイプの癌の例は、肺癌(例えば、非小細胞肺癌またはNSCLC)、卵巣癌、前立腺癌、結腸直腸癌、肝臓癌(すなわち、肝細胞癌)、腎癌(すなわち、腎細胞癌)、膀胱癌、乳癌、甲状腺癌、胸膜癌、膵臓癌、子宮癌、子宮頸癌、精巣癌、肛門癌、胆管癌、消化管カルチノイド腫瘍、食道癌、胆嚢癌、虫垂癌、小腸癌、胃(stomach)(胃(gastric))癌、中枢神経系の癌、皮膚癌(例えば、メラノーマ)、絨毛癌、頭頸部癌、血液癌、骨形成性肉腫、線維肉腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、メラノーマ、B細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、小細胞リンパ腫、大細胞リンパ腫、単球性白血病、骨髄性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、および多発性骨髄腫を含むが、これらに限定されない。他のタイプの癌は、本明細書において提供される開示から容易に明らかであるであろう。
本明細書において使用される「疾患または状態」は、自己免疫疾患、炎症、敗血症、アレルギー、喘息、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、免疫不全、または感染症によって引き起こされるかまたは関連する(典型的には感染性病原体、例えば、ウイルス、細菌、真菌、または寄生虫によって引き起こされる)任意の疾患または状態を指す。
本明細書において使用される句「有効量」および「治療有効量」は、そのために物質が投与される1つ以上の治療効果を生む免疫結合体などの物質の用量を指す。特定の用量は、治療の目的に依存し、既知の技術を使用して当業者により確認可能であろう(例えば、Lieberman,Pharmaceutical Dosage Forms(volumes 1-3,1992);Lloyd,The Art,Science and Technology of Pharmaceutical Compounding(1999);Pickar,Dosage Calculations(1999);Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics,11th Edition,2006,Brunton,ed.,McGraw-Hill;およびRemington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Edition,2005,Hendrickson,Ed.,Lippincott,Williams & Wilkinsを参照されたい)。
本明細書において使用される用語「対象」は、霊長類(例えば、ヒト)、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス等を含むが、これらに限定されない哺乳動物などの動物を指す。特定の実施態様においては、対象は、ヒトである。
本明細書において使用される用語「投与すること」は、非経口、静脈内、腹腔内、筋肉内、腫瘍内、病巣内、鼻腔内、若しくは皮下投与、経口投与、坐剤としての投与、局所的接触、髄腔内投与、または遅延放出用装置、例えば、ミニ浸透圧ポンプの対象への移植を指す。
数値を修飾するために本明細書において使用される用語「約」および「周辺」は、その明示的な値を取り囲む比較的近い範囲を示す。「X」が値である場合、「約X」または「X周辺」は、0.9Xから1.1X、例えば0.95Xから1.05Xまたは0.99Xから1.01Xの値を示すであろう。「約X」または「X周辺」への任意の言及は、少なくとも値X、0.95X、0.96X、0.97X、0.98X、0.99X、1.01X、1.02X、1.03X、1.04X、および1.05Xを具体的に示す。すなわち、「約X」および「X周辺」は、例えば「0.98X」の特許請求の範囲限定についての書面による説明のサポートを教示するおよび提供することを意図する。
結合方法
免疫結合体を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩(ここで、式IIは、該抗体構築物の1つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000012
を有する本明細書において記載される抗体構築物である)を組み合わせて、式IIIの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む:ここで、TAは、本明細書において記載される治療剤であり、Lは、本明細書において記載されるリンカーであり、rは、1から50の整数であり、Arは、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000013
およびそれらの塩から選択される第1の置換基を含む芳香族部分であり、各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、各Xは独立して、水素またはハロゲン(例えば、-F、-Cl、-Br、または-I)であり、Yは、CH、PEG、または結合であり、nは、1から4の整数(例えば、1、2、3、または4)であり、PEGは、式:-(CHCHO)-(CH-(式中、pは、1から5の整数(例えば、1、2、3、4、または5)であり、mは、2から50(例えば、2から25、2から10、または2から6)の整数である)を有する。
Arは、本明細書において記載される芳香族部分である。従って、Arは、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000014
およびそれらの塩から選択される第1の置換基を含む、任意のアリールまたはヘテロアリール基であり得る。いくつかの実施態様においては、Arは、記載される第1の置換基を含む、フェニル、ベンゾフラニル、インドイル、またはベンゾイミダゾイル基である。特定の実施態様においては、Arは、記載される第1の置換基を含むフェニル基である。
芳香族部分は、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000015
およびそれらの塩から選択される第1の置換基を含み、各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、各Xは独立して、水素またはハロゲン(例えば、-F、-Cl、-Br、または-I)であり、Yは、CH、PEG、または結合であり、nは、1から4の整数(例えば、1、2、3、または4)であり、PEGは、式:-(CHCHO)-(CH-(式中、pは、1から5の整数(例えば、1、2、3、4、または5)であり、mは、2から50(例えば、2から25、2から10、または2から6)の整数である。いくつかの実施態様においては、第1の置換基は、-NO、-SOR、-CN、およびそれらの塩から選択される。特定の実施態様においては、第1の置換基は、-SOHまたはその塩である。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分(Ar)は、-F、-Cl、-Br、-I、-CR、-OR、-C(O)R、-C(O)OR、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000016
それらの塩、およびそれらの組合せから選択される1つ以上の追加の置換基をさらに含み、ここで、各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、各Xは独立して、水素またはハロゲン(例えば、-F、-Cl、-Br、または-I)であり、Yは、CH、PEG、または結合であり、nは、1から4の整数(例えば、1、2、3、または4)であり、PEGは、式:-(CHCHO)-(CH-(式中、pは、1から5の整数(例えば、1、2、3、4、または5)であり、mは、2から50(例えば、2から25、2から10、または2から6)の整数である)を有する。芳香族部分は、任意の数の追加の置換基をさらに含み得る。例えば、芳香族部分は、1から10個(例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10個)の追加の置換基、1から4個(例えば、1、2、3、または4個)の追加の置換基、または2から4個(例えば、2、3、または4個の)の追加の置換基をさらに含み得る。特定の実施態様においては、1つ以上の追加の置換基は、-F、-Cl、-Br、-I、-NO、-SOH、-CN、およびそれらの塩から選択される。好ましい実施態様においては、1つ以上の追加の置換基は、-F、-Cl、-Br、および-Iから選択される。
いくつかの実施態様においては、Arは、以下の式Ar1からAr90:
Figure 2022547066000017
Figure 2022547066000018
Figure 2022547066000019
Figure 2022547066000020
Figure 2022547066000021
Figure 2022547066000022
Figure 2022547066000023
Figure 2022547066000024
Figure 2022547066000025
またはそれらの塩の1つである。特定の実施態様においては、Arは、式Ar32、Ar59、またはそれらの塩(例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、またはアンモニウム塩)である。
いくつかの実施態様においては、該方法は、少なくとも約33モル%(例えば、少なくとも約35モル%、少なくとも約36モル%、少なくとも約37モル%、少なくとも約38モル%、少なくとも約39モル%、少なくとも約40モル%、少なくとも約41モル%、少なくとも約42モル%、少なくとも約43モル%、少なくとも約44モル%、少なくとも約45モル%、少なくとも約46モル%、少なくとも約47モル%、少なくとも約48モル%、少なくとも約49モル%、または少なくとも約50モル%)の1つ以上の式Iの化合物、またはその塩が、式IIの抗体構築物、またはその塩に結合するまで、該1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および該式IIの抗体構築物、またはその塩を組み合わせて、式IIIの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む。特定の実施態様においては、該方法は、少なくとも約40モル%の1つ以上の式Iの化合物、またはその塩が、式IIの抗体構築物、またはその塩に結合するまで、該1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および該式IIの抗体構築物、またはその塩を、水溶液中で組み合わせて、式IIIの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む。他の実施態様においては、該方法は、少なくとも約50モル%の1つ以上の式Iの化合物、またはその塩が、式IIの抗体構築物、またはその塩に結合するまで、該1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および該式IIの抗体構築物、またはその塩を、水溶液中で組み合わせて、式IIIの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む。
いくつかの実施態様においては、該方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、少なくとも約1時間(例えば、少なくとも約2時間、少なくとも約3時間、少なくとも約4時間、少なくとも約5時間、少なくとも約6時間、少なくとも約8時間、少なくとも約10時間、少なくとも約12時間、少なくとも約16時間、少なくとも約20時間、少なくとも約24時間、または少なくとも約48時間)の期間組み合わせることを含む。あるいは、またはさらに、該方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約48時間以下(例えば、約36時間以下、約30時間以下、約24時間以下、約21時間以下、約18時間以下、約15時間以下、または約12時間以下)の期間組み合わせることを含む。すなわち、該方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、前述のエンドポイントの任意の2つによって境界される期間組み合わせることを含み得る。例えば、該方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約1時間から約48時間、約1時間から約36時間、約1時間から約30時間、約1時間から約24時間、約1時間から約21時間、約1時間から約18時間、約1時間から約15時間、約1時間から約12時間、約2時間から約24時間、約2時間から約15時間、約2時間から約12時間、約3時間から約24時間、約3時間から約12時間、約4時間から約24時間、約5時間から約15時間、約6時間から約48時間、約6時間から約36時間、約6時間から約30時間、約6時間から約24時間、約6時間から約21時間、約6時間から約18時間、約6時間から約15時間、または約6時間から約12時間の期間組み合わせることを含み得る。
いくつかの実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、アルカリ性水溶液(すなわち、pH7超)中で組み合わせることを含む。特定の実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約7.5から約9、例えば、約7.6から約9、約7.7から約9、約7.8から約9、約7.9から約9、約8.0から約9、約8から約8.9、約8から約8.8、約8から約8.7、約8から約8.6、約8.1から約8.6、約8.2から約8.6、約8.2から約8.5、または約8.2から約8.4のpHで緩衝されるアルカリ性水溶液中で組み合わせることを含む。従って、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約7.5、約7.6、約7.7、約7.8、約7.9、約8、約8.1、約8.2、約8.3、約8.4、約8.5、約8.6、約8.7、約8.8、約8.9、または約9のpHで緩衝される水溶液中で組み合わせることを含み得る。好ましい実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約8から約8.3のpHで緩衝される水溶液中で組み合わせることを含む。
式IIの抗体構築物、またはその塩、および1つ以上の式Iの化合物、またはその塩は、水溶液がアルカリ性pHを有するように、任意の適切な水溶液緩衝液中で組み合わせ得る。適切な水溶液緩衝液または第1の緩衝水溶液の例示的なリストは、TES緩衝生理食塩水、HEPES緩衝生理食塩水、DIPSO緩衝生理食塩水、MOBS緩衝生理食塩水、アセトアミドグリシン緩衝生理食塩水、TAPSO緩衝生理食塩水、TEA緩衝リン酸緩衝生理食塩水、POPSO緩衝生理食塩水、HEPPSO緩衝生理食塩水、EPS緩衝生理食塩水、HEPPS緩衝生理食塩水、トリシン緩衝生理食塩水、グリシンアミド緩衝生理食塩水、グリシルグリシン緩衝生理食塩水、HEPBS緩衝生理食塩水、ビシン緩衝生理食塩水、TAPS緩衝生理食塩水、AMPB緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ホウ酸塩緩衝生理食塩水、およびトリス緩衝生理食塩水である。好ましい実施態様においては、水溶液緩衝液または第1の緩衝水溶液は、ホウ酸塩緩衝生理食塩水である。別の好ましい実施態様においては、水溶液緩衝液または第1の緩衝水溶液は、リン酸緩衝生理食塩水である。
いくつかの実施態様においては、水溶液緩衝液または第1の緩衝水溶液は、可溶化剤をさらに含む。可溶化剤は、式Iの化合物またはその塩の溶解性を改善する任意の化合物(例えば、界面活性剤、分散剤、溶媒等)であり得る。例えば、可溶化剤は、ジメチルスルホキシド(DMSO)、ジメチルアセトアミド(DMA)、N-メチルピロリドン(NMP)、エチレングリコールジメチルエーテル、エタノール、メタノール、またはプロピレングリコールであり得る。好ましい実施態様においては、可溶化剤は、DMAである。
可溶化剤は、水性緩衝液または第1の緩衝水溶液中、任意の適切な量で存在し得る。例えば、可溶化剤は、水性緩衝液または第1の緩衝水溶液中、約0.1v/v%から約40v/v%、例えば、約0.1v/v%から約30v/v%、約0.1v/v%から約20v/v%、約1v/v%から約40v/v%、約1v/v%から約30v/v%、約1v/v%から約20v/v%、約5v/v%から約40v/v%、約5v/v%から約30v/v%、または約5v/v%から約20v/v%vの量で存在し得る。
いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、式IIIの免疫結合体またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。例えば、可溶化剤を使用する方法は、XEVO(商標) G2-XS TOF質量分析計(Waters Corporation)に接続したACQUITY(商標) UPLC Hクラスシステム(Waters Corporation)上のC4逆相カラムを使用する液体クロマトグラフィー質量分析によって決定される、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法よりも優れた、0.2以上(例えば、0.4以上、0.6以上、0.8以上、または1以上)の平均治療剤対抗体比を有する、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造することができる。
いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、式IIIの免疫結合体またはその塩の収率を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の収率を増加させる。例えば、可溶化剤を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法よりも、式IIIの免疫結合体、またはその塩の収率において、1%以上の増加(例えば、2%以上の増加、3%以上の増加、4%以上の増加、5%以上の増加、または10%以上の増加)を生み出すことができる。収率は、その多くは当業者に知られている、任意の適切な手段によって評価することができる。
式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、任意の適切な温度で水溶液中で組み合わせることを含む。いくつかの実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約0℃から約50℃、例えば、約0℃から約45℃、約0℃から約40℃、約5℃から約40℃、約10℃から約40℃、約15℃から約40℃、約20℃から約40℃、約25℃から約40℃、または約25℃から約35℃の温度で水溶液中で組み合わせることを含む。従って、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約1℃、約2℃、約3℃、約4℃、約5℃、約6℃、約7℃、約8℃、約9℃、約10℃、約11℃、約12℃、約13℃、約14℃、約15℃、約16℃、約17℃、約18℃、約19℃、約20℃、約21℃、約22℃、約23℃、約24℃、約25℃、約26℃、約27℃、約28℃、約29℃、約30℃、約31℃、約32℃、約33℃、約34℃、約35℃、約36℃、約37℃、約38℃、約39℃、約40℃、約41℃、約42℃、約43℃、約44℃、約45℃、約46℃、約47℃、約48℃、約49℃、または約50℃の温度で水溶液中で組み合わせることを含む。好ましい実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、1つ以上の式Iの化合物、またはその塩、および式IIの抗体構築物、またはその塩を、約30℃の温度で水溶液中で組み合わせることを含む。
いくつかの実施態様においては、本発明は、第1の緩衝水溶液中で、式IIIの免疫結合体、またはその塩を提供する。典型的には、第1の緩衝水溶液は、式IIの抗体構築物、またはその塩、および1つ以上の式Iの化合物、またはその塩を組み合わせる水溶液と同じである。しかしながら、第1の緩衝水溶液のpH、温度、および化学組成は、式IIIの免疫結合体、またはその塩を形成するための、式IIの抗体構築物、またはその塩、および1つ以上の式Iの化合物、またはその塩の組合せのため、該水溶液に対してわずかに変化し得ることは、当業者によって理解されるであろう。
任意の適切な当量数の1つ以上の式Iの化合物、またはその塩を、式IIの抗体構築物、またはその塩と組み合わせて、所望の治療剤対抗体比を達成することができる。従って、約0.1当量以上の1つ以上の式Iの化合物、またはその塩を、例えば、約0.5当量以上、約1当量以上、約1.5当量以上、約2当量以上、約2.5当量以上、約3当量以上、約3.5当量以上、約4当量以上、約4.5当量以上、約5当量以上、約5.5当量以上、約6当量以上、約6.5当量以上、約7当量以上、約7.5当量以上、約8当量以上、約8.5当量以上、約9当量以上、約9.5当量以上、約10当量以上、約11当量以上、約12当量以上、約13当量以上、約14当量以上、約15当量以上、約16当量以上、約17当量以上、約18当量以上、約19当量以上、または約20当量以上の式IIの抗体構築物、またはその塩と組み合わせ得る。あるいは、またはさらに、約50当量以下の1つ以上の式Iの化合物、またはその塩を、例えば、約45当量以下、約40当量以下、約35当量以下、約30当量以下、約25当量以下、約20当量以下、約18当量以下、約16当量以下、約14当量以下、約12当量以下、約10当量以下、約8当量以下、約6当量以下、または約4当量以下の式IIの抗体構築物、またはその塩と組み合わせ得る。すなわち、式IIの抗体構築物、またはその塩と組み合わせられる1つ以上の式Iの化合物、またはその塩の当量数は、前述のエンドポイントの任意の2つによって境界され得る。例えば、式IIの抗体構築物、またはその塩と組み合わせられる1つ以上の式Iの化合物、またはその塩の当量数は、約0.1から約50、約1から約50、約1から約40、約1から約30、約1から約20、約2から約50、約2から約40、約2から約30、約2から約20、約3から約50、約3から約40、約3から約30、約3から約20、約4から約50、約4から約40、約4から約30、約4から約20、約6から約30、約6から約20、約8から約40、約8から約20、約10から約50、約10から約20、約12から約50、約12から約30、約12から約20、約4から約16、約8から約12、約1から約4、約1から約6、約1から約8、約1から約12、約1から約16、約2から約4、約2から約6、約2から約8、または約2から約12であり得る。
いくつかの実施態様においては、該方法は、第1の緩衝水溶液および/または第2の緩衝水溶液中で、式IIIの免疫結合体、またはその塩を精製することをさらに含む。第1の緩衝水溶液および/または第2の緩衝水溶液中での式IIIの免疫結合体、またはその塩の精製は、任意の適切な手段によって行うことができる。例えば、第1の緩衝水溶液および/または第2の緩衝水溶液中の式IIIの免疫結合体、またはその塩を、カラムクロマトグラフィー(例えば、陰イオン交換クロマトグラフィー、陽イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、または混合モードクロマトグラフィー)、遠心分離、ろ過、または結晶化によって精製することができる。
いくつかの実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、式IIIの免疫結合体、またはその塩を、免疫結合体を合成したpHよりも低いpHで保存することを含む。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、免疫結合体は、中性(すなわち、約6.5から約7.5のpH)および/または酸性水溶液(すなわち、pH7未満)においてより安定であると考えられる。従って、式IIIの免疫結合体、またはその塩は、約7.5以下、例えば、約7.4以下、約7.3以下、約7.2以下、約7.1以下、約7以下、約6.9以下、約6.8以下、約6.7以下、約6.6以下、約6.5以下、約6.4以下、約6.3以下、約6.2以下、約6.1以下、または約6以下のpHで緩衝される第2の緩衝水溶液に緩衝液交換し得る。特定の実施態様においては、式IIIの免疫結合体、またはその塩は、アルカリ性の第1の緩衝水溶液中で合成し、酸性の第2の緩衝水溶液で保存する。
いくつかの実施態様においては、該方法は、式IIIの免疫結合体、またはその塩の第1の緩衝水溶液に対して緩衝液交換を実施して、約6から約7.5のpHで緩衝された第2の緩衝水溶液を提供することをさらに含む。特定の実施態様においては、該方法は、式IIIの免疫結合体、またはその塩の第1の緩衝水溶液に対して緩衝液交換を実施して、約7から約7.5のpHで緩衝された第2の緩衝水溶液を提供することをさらに含む。好ましい実施態様においては、該方法は、式IIIの免疫結合体、またはその塩の第1の緩衝水溶液に対して緩衝液交換を実施して、約7.2から約7.4のpHで緩衝された第2の緩衝水溶液を提供することをさらに含む。
式IIIの免疫結合体、またはその塩は、任意の適切な第2の水溶液緩衝液に緩衝液交換することができる。いくつかの実施態様においては、第2の水溶液緩衝液は、中性(すなわち、約6.5から約7.5のpH)または酸性水溶液(すなわち、pH7未満)である。適切な第2の水溶液緩衝液の例示的なリストは、MOPS緩衝生理食塩水、塩化コラミン緩衝生理食塩水、MOPSO緩衝生理食塩水、ACES緩衝生理食塩水、PIPES緩衝生理食塩水、ビストリスプロパン緩衝生理食塩水、ACES緩衝生理食塩水、ADA緩衝生理食塩水、ビストリスメタン緩衝生理食塩水、MES緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、クエン酸塩緩衝生理食塩水、およびBES緩衝生理食塩水である。好ましい実施態様においては、第2の水溶液は、リン酸緩衝生理食塩水で緩衝されている。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式Iの化合物またはその塩の溶解度を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物と比較して、水性緩衝液または第1の緩衝水溶液中への増加した溶解度を有する。例えば、式Iの化合物、またはその塩は、pH8.3で100mMホウ酸、50mM塩化ナトリウム、および1mMエチレンジアミン四酢酸を含有する緩衝液中の化合物の0.1M溶液の600nmでの吸光度によって測定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物に対して、濁度において1%以上低下(例えば、2%以上低下、3%以上低下、4%以上低下、または5%以上低下)し得る。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式Iの化合物またはその塩の安定性を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物と比較して、水性緩衝液または第1の緩衝水溶液における増加した安定性を有する。例えば、式Iの化合物、またはその塩は、蓋をしたガラスバイアル中で調製し、30℃で15分間インキュベートした、pH8.3で100mMホウ酸、50mM塩化ナトリウム、および1mMエチレンジアミン四酢酸を含有する緩衝液中の化合物の0.1M溶液の定量的HPLCによって測定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での、芳香族部分の代わりにスクシンイミドを使用した同一化合物に対して、分解において1%以上低下(例えば、2%以上低下、3%以上低下、4%以上低下、5%以上低下、または10%以上低下)し得る。
いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、芳香族部分によって提供される溶解性、安定性、および反応性の組合せ(すなわち、電子工学および/または立体障害の結果としての)は、プロセスの反応速度、式IIIの免疫結合体の治療剤対抗体比、式IIIの免疫結合体の収率、式IIIの免疫結合体の結合プロファイル(すなわち、治療剤/リンカーが結合する位置(アミノ酸残基))、および式IIIの免疫結合体の純度の1つ以上に有益に影響を与えると考えられる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、定常状態動力学近似を使用する、式IIIの免疫結合体、またはその塩の形成の速度(モル/L/秒)を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の形成の速度(モル/L/秒)を増加させる。例えば、式Iの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での定常状態動力学で測定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法に対して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の形成の速度(モル/L/秒)において1%以上増加(例えば、2%以上増加、3%以上増加、4%以上増加、または5%以上増加)し得る。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式IIIの免疫結合体またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。例えば、式Iの化合物、またはその塩を使用する方法は、XEVO(商標) G2-XS TOF質量分析計(Waters Corporation)に接続したACQUITY(商標) UPLC Hクラスシステム(Waters Corporation)上のC4逆相カラムを使用する液体クロマトグラフィー質量分析によって決定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法よりも優れた、0.2以上(例えば、0.4以上、0.6以上、0.8以上、または1以上)の平均治療剤対抗体比を有する、式IIIの免疫結合体、またはその塩を製造することができる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式IIIの免疫結合体またはその塩の収率を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の収率を増加させる。例えば、式Iの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法よりも、式IIIの免疫結合体、またはその塩の収率において、1%以上増加(例えば、2%以上増加、3%以上増加、4%以上増加、5%以上増加、または10%以上増加)し得る。収率は、その多くは当業者に知られている、任意の適切な手段によって評価することができる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式IIIの免疫結合体またはその塩の結合プロファイルを修飾する。より具体的には、芳香族部分は、抗体構築物の重鎖への結合の量を増加させることができる。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の抗体構築物の重鎖への結合の量を増加させる。例えば、式Iの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法に対して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の抗体構築物の重鎖への結合の量を、5%以上(例えば、10%以上、15%以上、または20%以上)増加させ得る。軽鎖(LC)および重鎖(HC)のペプチドマッピングは、XEVO(商標) G2-XS TOF質量分析計(Waters Corporation)に接続したACQUITY(商標) UPLC Hクラスシステム(Waters Corporation)上のC4逆相カラム上に還元サンプルを注入することによって行うことができる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式IIIの免疫結合体またはその塩の純度を増加させる。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、芳香族部分の増加した溶解度は、結合反応から形成される副生成物(すなわち、生じたアルコール)のより効率的な除去を可能にすると考えられている。従って、いくつかの実施態様においては、式Iの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式IIIの免疫結合体、またはその塩の純度を増加させる。例えば、式Iの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法に対して、式IIIの免疫結合体、またはその塩中に存在する検出可能な不純物の量を、カラムクロマトグラフィーの前に1%以上(例えば、2%以上、3%以上、4%以上、または5%以上)減少させ得る。純度は、当業者によって知られている任意の手段によって評価することができる。
免疫結合体
本明細書において記載される方法は、式III:
Figure 2022547066000026
(式中、TAは、本明細書において記載される治療剤であり、Lは、本明細書において記載されるリンカーであり、rは、1から50の整数であり、Abは、本明細書において記載される抗体構築物の部分である)の免疫結合体またはその塩を提供する。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの変数rによって定義される治療剤は、約1から約10、例えば、約1から約8、または約1から約6、または約1から約4の範囲である。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の数は、1、2、3、4、5、または6である。いくつかの実態態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の数は、2である。いくつかの場合においては、抗体構築物は、リンカーを介して単一の治療剤に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体構築物は、リンカーを介して2つ以上の治療剤(例えば、3つ以上、4つ以上、または5つ以上の治療剤)に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体構築物は、リンカーを介して1~8個の治療剤(例えば、1~5、1~3、2~8、2~5、2~3、または3~8個の治療剤)に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体構築物は、2~8個の治療剤(例えば、2~5、2~3、または3~8個の治療剤)に共有結合している。
本明細書において記載される方法は、式IIIの免疫結合体、または本明細書において記載される任意の他の免疫結合体を提供するが、一方で該方法はまた、複数の式IIIの免疫結合体、または本明細書において記載される任意の他の免疫結合体を含む組成物を提供することができることが、当業者に容易に理解されるであろう。換言すると、本明細書において記載される方法は一般に、免疫結合体あたりの治療剤の平均数(すなわち、式IIIの定義における変数rの平均)が約1から約50の範囲であるような免疫結合体の分布を提供する。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、例えば、約1から約10、約1から約8、または約1から約6、または約1から約4の範囲であり得る。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約0.8、1、1.2、1.4、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.6、2.8、3、3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、または4.2であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約4である。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約2である。
すなわち、本明細書において記載される方法はまた、複数の式III:
Figure 2022547066000027
(式中、TAは、本明細書において記載される治療剤であり、Lは、本明細書において記載されるリンカーであり、rは、約1から約50であり、Abは、本明細書において記載される抗体構築物の部分である)の免疫結合体またはその塩を含む組成物を提供することができる。
該方法は、抗体構築物の1つ以上のリジン残基で、リンカーを介して抗体構築物に結合した治療剤をもたらす。実施態様においては、抗体構築物がIgG抗体である場合、治療剤は、抗体の軽鎖、抗体の重鎖、またはそれらの組合せ上の1つ以上の位置でIgGに結合し得る。より具体的には、治療剤は、カバットナンバリングによる軽鎖のK103、K107、K149、K169、K183およびK188の1つ以上および/または重鎖のK30、K43、K65、K76、K136、K216、K217、K225、K293、K320、K323、K337、K395、およびK417の1つ以上で結合し得る。
抗体構築物がIgG抗体であるいくつかの実施態様においては、該方法は、1つ以上の位置(すなわち、リジン残基)でIgG抗体に結合した治療剤を有する複数の免疫結合体をもたらす。そのような場合においては、該方法は、複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし得、前記複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖に結合した、60%超の(例えば、65%超のまたは70%超の)治療剤を有する。抗体構築物がIgG抗体である好ましい実施態様においては、該方法は、複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし、前記複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖に結合した、65%超の治療剤を有する。抗体構築物がIgG抗体であるいくつかの実施態様においては、該方法は、複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし、前記複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖のK43、K65、およびK417の1つ以上に結合した、5%超の治療剤を有する。抗体構築物がIgG抗体である特定の実施態様においては、該方法は、複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし、前記複数の式IIIの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖のK43、K65、およびK417のそれぞれに結合した、5%超の治療剤を有する。
式IIIの免疫結合体の他の特徴(例えば、抗体構築物、治療剤、リンカー、および組成物)は、本明細書において提供される開示から容易に明らかであるであろう。
抗体構築物
一般に、本発明の免疫結合体は、(i)抗原結合ドメインおよび(ii)Fcドメインを含む抗体構築物を含む。いくつかの実施態様においては、抗体構築物はさらに、標的結合ドメインを含む。特定の実施態様においては、抗体構築物は、抗体である。特定の実施態様においては、抗体構築物は、融合タンパク質である。
免疫結合体中の抗体は、同種異系抗体であり得る。句「同種異系抗体」および用語「同種抗体」は、対象となる個体(例えば、腫瘍を有し、治療を求めている個体)に由来しないが、同じ種に由来する、または異なる種に由来するが、異種抗体(例えば、非自己)としての認識を低下させ、緩和し、または回避するように設計された抗体を指す。例えば、「同種異系抗体」は、ヒト化抗体であり得る。当業者は、異種抗体としての認識を回避するように非ヒト抗体を設計する方法について知っている。別途明記しない限り、本明細書において使用される「抗体」および「同種異系抗体」は、免疫グロブリンG(IgG)または免疫グロブリンA(IgA)を指す。
ヒト個体の癌細胞が、その同じヒトによって産生されなかった抗体(例えば、抗体が第2のヒト個体によって産生された、抗体がマウスなどの別の種によって産生された、抗体が別の種によって産生されたヒト化抗体であるなど)と接触される場合、その抗体は(第1の個体と比較して)同種異系であると考えられる。ヒト抗原(例えば、癌特異的抗原、癌細胞中および/または癌細胞上で豊富な抗原など)を認識するヒト化マウスモノクローナル抗体は、「同種抗体」(同種異系抗体)であると考えられる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、ポリクローナル同種異系IgG抗体である。いくつかの実施態様においては、抗体は、複数の結合特異性を有するポリクローナルIgG抗体の混合物で存在する。いくつかの実施態様においては、混合物の抗体は、異なる標的分子に特異的に結合し、いくつかの場合においては、混合物の抗体は、同じ標的分子の異なるエピトープに特異的に結合する。すなわち、抗体の混合物は、いくつかの場合においては、本発明の複数の免疫結合体を含み得る(例えば、治療剤は、混合物の抗体、例えば、ポリクローナルIgG抗体の混合物に共有結合し得、本発明の免疫結合体の混合物をもたらす)。抗体の混合物は、2人以上の個体(例えば、3人以上の個体、4人以上の個体、5人以上の個体、6人以上の個体、7人以上の個体、8人以上の個体、9人以上の個体、10人以上の個体等)からプールすることができる。いくつかの場合においては、プールした血清は、同種抗体の供給源として使用し、ここで、該血清は、その誰もが最初の個体ではない、任意の数の個体に由来し得る(例えば、血清は、2人以上の個体、3人以上の個体、4人以上の個体、5人以上の個体、6人以上の個体、7人以上の個体、8人以上の個体、9人以上の個体、10人以上の個体等からプールすることができる)。いくつかの場合においては、抗体は、使用前に血清から単離しまたは精製する。精製は、異なる個体からの抗体をプールする前にまたは後に行うことができる。
免疫結合体中の抗体が血清由来のIgGを含むいくつかの場合においては、抗体(すなわち、血清由来のIgG)のいくつか(例えば、0%超50%未満)、半分、ほとんど(50%超100%未満)、または全てについてさえ、標的抗原は不明であろう。しかしながら、そのような混合物は多種多様な標的抗原に特異的な多種多様な抗体を含有するので、混合物中の少なくとも1つの抗体が目的の標的抗原を認識するであろう可能性は高い。
いくつかの実施態様においては、抗体は、ポリクローナル同種異系IgA抗体である。いくつかの実施態様においては、抗体は、複数の結合特異性を有するポリクローナルIgA抗体の混合物で存在する。いくつかの場合においては、混合物の抗体は、異なる標的分子に特異的に結合し、いくつかの場合においては、混合物の抗体は、同じ標的分子の異なるエピトープに特異的に結合する。すなわち、抗体の混合物は、いくつかの場合においては、本発明の複数の免疫結合体を含み得る(例えば、治療剤は、混合物の抗体、例えば、ポリクローナルIgA抗体の混合物に共有結合し得、本発明の免疫結合体の混合物をもたらす)。抗体の混合物は、2人以上の個体(例えば、3人以上の個体、4人以上の個体、5人以上の個体、6人以上の個体、7人以上の個体、8人以上の個体、9人以上の個体、10人以上の個体等)からプールすることができる。いくつかの場合においては、プールした血清は、同種抗体の供給源として使用し、ここで、該血清は、その誰もが最初の個体ではない、任意の数の個体に由来し得る(例えば、血清は、2人以上の個体、3人以上の個体、4人以上の個体、5人以上の個体、6人以上の個体、7人以上の個体、8人以上の個体、9人以上の個体、10人以上の個体等からプールすることができる)。いくつかの場合においては、抗体は、使用前に血清から単離しまたは精製する。精製は、異なる個体からの抗体をプールする前にまたは後に行うことができる。
免疫結合体中の抗体が血清由来のIgAを含むいくつかの場合においては、抗体(すなわち、血清由来のIgA)のいくつか(例えば、0%超50%未満)、半分、ほとんど(50%超100%未満)、または全てについてさえ、標的抗原は不明であろう。しかしながら、そのような混合物は多種多様な標的抗原に特異的な多種多様な抗体を含有するので、混合物中の少なくとも1つの抗体が目的の標的抗原を認識するであろう可能性は高い。
いくつかの場合においては、免疫結合体中の抗体は、静脈内免疫グロブリン(IVIG)および/またはIVIG由来の(例えば、濃縮した、精製した、例えば、アフィニティー精製した)抗体を含む。IVIGは、多くの(例えば、場合によっては1,000超から60,000人の)正常で健康な献血者に由来する血漿(例えば、いくつかの場合においてはいずれの他のタンパク質も含まない)からプールされたIgG(免疫グロブリンG)を含む血液製品である。IVIGは、市販品として入手可能である。IVIGは、高い割合の天然のヒト単量体IVIGを含み、IgA含有量が低い。静脈内投与すると、IVIGは、いくつかの疾患状態を改善する。従って、米国食品医薬品局(FDA)は、(1)川崎病、(2)免疫介在性血小板減少症、(3)原発性免疫不全症、(4)造血幹細胞移植(20歳超の患者を対象とした)、(5)慢性B細胞リンパ性白血病、および(6)小児HIV 1型感染症を含む多くの疾患に対するIVIGの使用を承認した。2004年、FDAは、腎臓移植受容者が血液型(ABO不適合)または組織適合にかかわらず、任意の健康なドナーから生体ドナー腎臓を受け入れることができるように、腎臓移植受容者のためのCedars-Sinai IVIGプロトコルを承認した。IVIGのこれらのおよび他の一面は、例えば、米国特許出願公開第2010/0150942、2004/0101909、2013/0177574、2013/0108619、および2013/0011388に記載されており;これらは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
いくつかの場合においては、抗体は、定義されたサブクラス(例えば、IgG、IgG、IgG、IgG、IgA、またはIgA)のモノクローナル抗体である。抗体の組合せが使用される場合、抗体は同じサブクラス由来または異なるサブクラス由来であり得る。例えば、抗体は、IgG抗体であり得る。異なる相対比率での異なるサブクラスのさまざまな組合せが、当業者によって得られ得る。いくつかの場合においては、特定のサブクラスまたは異なるサブクラスの特定の組合せは、癌治療または腫瘍サイズの低減に特に効果的であり得る。従って、本発明のいくつかの実施態様は、抗体がモノクローナル抗体である免疫結合体を提供する。いくつかの実施態様においては、モノクローナル抗体は、ヒト化されている。
いくつかの実施態様においては、抗体は、癌細胞の抗原に結合する。例えば、抗体は、癌細胞の表面上に少なくとも10;100;1,000;10,000;100,000;1,000,000;2.5×10;5×10;または1×10コピー以上の量で存在する標的抗原に結合することができる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、非癌細胞上の対応する抗原よりも高い親和性で、癌または免疫細胞上の抗原に結合する。例えば、抗体は、非癌または非免疫細胞上の対応する野生型抗原の認識と比較して、癌または免疫細胞に見出される多型を含有する抗原を優先的に認識し得る。いくつかの場合においては、抗体は、非癌または非免疫細胞よりも高い活性で癌または免疫細胞に結合する。例えば、癌または免疫細胞は、より高密度の抗原を発現し得、すなわち、多価抗体の癌または免疫細胞へのより高い親和性の結合を提供し得る。
いくつかの場合においては、抗体は、非癌抗原に有意には結合しない(例えば、抗体は、標的癌抗原よりも少なくとも10、100、1,000、10,000、100,000、または1,000,000倍低い親和性(高いKd)で1つ以上の非癌抗原に結合する)。いくつかの場合においては、抗体が結合する標的癌抗原は、癌細胞上で豊富である。例えば、標的癌抗原は、対応する非癌細胞よりも少なくとも2、5、10、100、1,000、10,000、100,000、または1,000,000倍高いレベルで癌細胞の表面に存在し得る。いくつかの場合においては、対応する非癌細胞は、過剰増殖性またはいずれにしても癌性ではない同じ組織または起源の細胞である。一般に、癌細胞の抗原(標的抗原)に特異的に結合する対象IgG抗体は、他の利用可能な抗原と比較して、その特定の抗原に優先的に結合する。しかしながら、標的抗原は、他の細胞と比較して癌細胞に特異的である必要はなくまたは癌細胞中で豊富である必要さえない(例えば、標的抗原は他の細胞によって発現され得る)。すなわち、語句「癌細胞の抗原に特異的に結合する抗体」において、用語「特異的に」は、抗体の特異性を指し、その特定の細胞型における抗原の独自性を指すのではない。
いくつかの実施態様においては、免疫結合体中の抗体は、修飾されたFc領域を含有し、ここで、修飾は、1つ以上のFc受容体へのFc領域の結合を調節する。
いくつかの実施態様においては、抗体は、Fc領域において1つ以上の修飾(例えば、アミノ酸挿入、欠失、および/または置換)を含有し、これにより、Fc領域の突然変異を欠く天然抗体と比較して、1つ以上のFc受容体(例えば、FcγRI(CD64)、FcγRIIA(CD32A)、FcγRIIB(CD32B)、FcγRIIIA(CD16a)、および/またはFcγRIIIB(CD16b))への調節された結合(例えば、結合の増加または結合の減少)をもたらす。いくつかの実施態様においては、抗体は、抗体のFc領域のFcγRIIBへの結合を低下させるFc領域における1つ以上の修飾(例えば、アミノ酸挿入、欠失、および/または置換)を含有する。いくつかの実施態様においては、抗体は、Fc領域の突然変異を欠く天然抗体と比較して、FcγRI(CD64)、FcγRIIA(CD32A)、および/またはFcRγIIIA(CD16a)への同じ結合を維持または結合を増加させながら、抗体のFcγRIIBへの結合を低下させる抗体のFc領域における1つ以上の修飾(例えば、アミノ酸挿入、欠失、および/または置換)を含有する。いくつかの実施態様においては、抗体は、抗体のFc領域のFcγRIIBへの結合を増加させるFc領域における1つ以上の修飾を含有する。いくつかの実施態様においては、修飾は実質的に、抗体エフェクター機能を低下させるかまたは排除する。
いくつかの実施態様においては、調節された結合は、抗体の天然Fc領域と比較した抗体のFc領域における突然変異によって提供される。突然変異は、CH2ドメイン、CH3ドメイン、またはそれらの組合せにおいてあり得る。「天然Fc領域」は、「野生型Fc領域」と同義であり、天然に見出されるFc領域のアミノ酸配列と同一であるか、または天然抗体に見出されるFc領域のアミノ酸配列と同一であるアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトFc領域は、天然配列ヒトIgG1 Fc領域、天然配列ヒトIgG2 Fc領域、天然配列ヒトIgG3 Fc領域、および天然配列ヒトIgG4 Fc領域、並びにそれらの天然に存在する変異体を含む。天然配列Fcは、Fcのさまざまなアロタイプを含む(例えば、Jefferis et al.,mAbs,1(4):332-338(2009)を参照されたい)。
いくつかの実施態様においては、1つ以上のFc受容体への調節された結合をもたらすFc領域の突然変異は、以下の突然変異:SD(S239D)、SDIE(S239D/I332E)、SE(S267E)、SELF(S267E/L328F)、SDIE(S239D/I332E)、SDIEAL(S239D/I332E/A330L)、GA(G236A)、ALIE(A330L/I332E)、GASDALIE(G236A/S239D/A330L/I332E)、V9(G237D/P238D/P271G/A330R)、およびV11(G237D/P238D/H268D/P271G/A330R)の1つ以上、並びに/または以下のアミノ酸:E233、G237、P238、H268、P271、L328およびA330での1つ以上の突然変異を含み得る。Fc受容体結合を調節するための追加のFc領域修飾は、例えば、米国特許出願公開第2016/0145350号並びに米国特許第7,416,726号および第5,624,821号に記載されており、これらは本明細書において参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施態様においては、抗体のFc領域は、天然の非修飾Fc領域と比較して、Fc領域の変更されたグリコシル化パターンを有するように修飾される。
ヒト免疫グロブリンは、各重鎖のCγ2ドメインのAsn297残基でグリコシル化されている。このN-結合オリゴ糖は、コアの七糖であるN-アセチルグルコサミン4マンノース3(GlcNAc4Man3)から構成されている。エンドグリコシダーゼまたはPNGase Fでの七糖の除去は、活性化させるFcγRに対する抗体結合親和性を大幅に低下させ、減少したエフェクター機能につながり得る抗体Fc領域のコンフォメーション変化につながることが知られている。コア七糖は、しばしばガラクトース、二等分GlcNAc、フコース、またはシアル酸で修飾され、これらは、活性化させるおよび抑制性FcγRへのFcの結合に異なる影響を与える。さらに、α2,6-シアル化はインビボで抗炎症活性を増強するが、一方で脱フコシル化はFcγRIIIa結合の改善並びに抗体依存性細胞毒性および抗体依存性食作用の10倍の増加につながることが実証されてきた。従って、特定のグリコシル化パターンは、炎症性エフェクター機能を制御するために使用され得る。
いくつかの実施態様においては、グリコシル化パターンを変更するための修飾は、突然変異である。例えば、Asn297での置換。いくつかの実施態様においては、Asn297はグルタミンに変異している(N297Q)。FcγR調節シグナル伝達を調節する抗体で免疫応答を制御する方法は、例えば、米国特許第7,416,726号並びに米国特許出願公開第2007/0014795号および第2008/0286819号に記載されており、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、天然に存在しないグリコシル化パターンを有する操作されたFab領域を含有するように修飾されている。例えば、ハイブリドーマは、FcRγIIIa結合およびエフェクター機能の増加を可能にする特定の突然変異を有するアフコシル化mAb、脱シアル化mAbまたは脱グリコシル化Fcを分泌するように遺伝子操作され得る。いくつかの実施態様においては、抗体は、アフコシル化されるように操作されている。
いくつかの実施態様においては、抗体の全Fc領域は、抗体のFab領域が非天然Fc領域に接合されるように、異なるFc領域と交換されている。例えば、通常はIgG1 Fc領域を含むアテゾリズマブのFab領域は、IgG2、IgG3、IgG4、またはIgAに接合され得、または通常はIgG4 Fc領域を含むニボルマブのFab領域は、IgG1、IgG2、IgG3、IgA1、またはIgG2に接合され得る。いくつかの実施態様においては、非天然Fcドメインを有するFc修飾抗体はまた、記載されたFcドメインの安定性を調節する、IgG4 Fc内のS228P突然変異などの1つ以上のアミノ酸修飾を含む。いくつかの実施態様においては、非天然Fcドメインを有するFc修飾抗体はまた、FcRへのFc結合を調節する、本明細書に記載の1つ以上のアミノ酸修飾を含む。
いくつかの実施態様においては、Fc領域のFcRへの結合を調節する修飾は、天然の非修飾抗体と比較した場合、抗体のFab領域のその抗原への結合を変化させない。他の実施態様においては、Fc領域のFcRへの結合を調節する修飾はまた、天然の非修飾抗体と比較した場合、抗体のFab領域のその抗原への結合を増加させる。
いくつかの実施態様においては、Fc領域は、トランスフォーミング増殖因子ベータ1(TGFβ1)に結合することができるTGFβ1受容体、またはその断片の付着または包含によって修飾される。例えば、受容体は、TGFβ受容体II(TGFβRII)であり得る(その全体が本明細書中に組み込まれる米国特許第9,676,863号を参照されたい)。いくつかの実施態様においては、TGFβ受容体は、ヒトTGFβ受容体である。いくつかの実施態様においては、Fc領域(例えば、IgG)は、TGFβ受容体(例えば、TGFβRII)細胞外ドメイン(ECD;例えば、米国特許第9,676,863号の配列番号9のアミノ酸24~159)へのC末端融合を有する。「Fcリンカー」は、IgGをTGFβR細胞外ドメイン、例えば、GG Fcリンカーに付着させるために使用し得る。Fcリンカーは、標的への結合特異性を維持しながら、分子の適切な三次元折り畳みを可能にする、短くて柔軟なペプチドであり得る。いくつかの実施態様においては、TGFβ受容体のN末端は、Fc領域に融合している(Fcリンカーの有無にかかわらず)。いくつかの実施態様においては、免疫グロブリン重鎖のC末端は、TGFβ受容体に融合している(Fcリンカーの有無にかかわらず)。いくつかの実施態様においては、抗体重鎖のC末端リジン残基は、アラニンに変異している。いくつかの実施態様においては、抗体は、配列番号168を含む。
標的
いくつかの実施態様においては、抗原結合ドメインまたは抗体は、5T4、ABL、ABCF1、ACVR1、ACVR1B、ACVR2、ACVR2B、ACVRL1、ADORA2A、AFP、アグリカン、AGR2、AICDA、AIF1、AIGI、AKAP1、AKAP2、ALCAM、ALK、AMH、AMHR2、AHMR2、ANGPT1、ANGPT2、ANGPTL3、ANGPTL4、ANPEP、APC、APOCl、AR、アロマターゼ、ASPH、ATX、AX1、AXL、AZGP1(亜鉛-a-糖タンパク質)、B4GALNT1、B7、B7.1、B7.2、B7-H1、B7-H3、B7-H4、B7-H6、BAD、BAFF、BAG1、BAI1、BCR、BCL2、BCL6、BCMA、BDNF、BLNK、BLR1(MDR15)、BIyS、BMP1、BMP2、BMP3B(GDFIO)、BMP4、BMP6、BMP8、BMP10、BMPR1A、BMPR1B、BMPR2、BPAG1(プレクチン)、BRCA1、C19orflO(IL27w)、C3、C4A、C5、C5R1、CA6、CA9、CANT1、CAPRIN-1、CASP1、CASP4、CAV1、CCBP2(D6/JAB61)、CCL1(1-309)、CCLI1(エオタキシン)、CCL13(MCP-4)、CCL15(MIP-Id)、CCL16(HCC-4)、CCL17(TARC)、CCL18(PARC)、CCL19(MIP-3b)、CCL2(MCP-1)、MCAF、CCL20(MIP-3a)、CCL21(MEP-2)、SLC、エクソダス(exodus)-2、CCL22(MDC/STC-I)、CCL23(MPIF-I)、CCL24(MPIF-2/エオタキシン-2)、CCL25(TECK)、CCL26(エオタキシン-3)、CCL27(CTACK/ILC)、CCL28、CCL3(MIP-Ia)、CCL4(MIPIb)、CCL5(RANTES)、CCL7(MCP-3)、CCL8(mcp-2)、CCNA1、CCNA2、CCND1、CCNE1、CCNE2、CCR1(CKR1/HM145)、CCR2(mcp-IRB/RA)、CCR3(CKR3/CMKBR3)、CCR4、CCR5(CMKBR5/ChemR13)、CCR6(CMKBR6/CKR-L3/STRL22/DRY6)、CCR7(CKR7/EBI1)、CCR8またはCDw198(CMKBR8/TERI/CKR-L1)、CCR9(GPR-9-6)、CCRL1(VSHK1)、CCRL2(L-CCR)、CD13、CD164、CD19、CDH6、CDIC、CD2、CD20、CD21、CD200、CD22、CD23、CD24、CD27、CD28、CD29、CD3、CD33、CD35、CD37、CD38、CD3E、CD3G、CD3Z、CD4、CD40、CD40L、CD44、CD45RB、CD47、CD52、CD56、CD69、CD70、CD72、CD74、CD79A、CD79B、CD8、CD80、CD81、CD83、CD86、CD97、CD99、CD117、CD125、CD137、CD147、CD179b、CD223、CD279、CD152、CD274、CDH1(E-カドヘリン)、CDH1O、CDH12、CDH13、CDH18、CDH19、CDH2O、CDH3、CDH5、CDH7、CDH8、CDH9、CDH17、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK9、CDKN1A(p21Wap1/Cip1)、CDKN1B(p27Kip1)、CDKN1C、CDKN2A(p16INK4a)、CDKN2B、CDKN2C、CDKN3、CEA、CEACAM5、CEACAM6、CEBPB、CERI、CFC1B、CHGA、CHGB、キチナーゼ、CHST1O、CIK、CKLFSF2、CKLFSF3、CKLFSF4、CKLFSF5、CKLFSF6、CKLFSF7、CKLFSF8、CLDN3、CLDN6、CLDN7(クローディン-7)、CLDN18、CLEC5A、CLEC6A、CLEC11A、CLEC12A、CLEC14A、CLN3、CLU(クラステリン)、CMKLR1、CMKOR1(RDC1)、CNR1、C-MET、COL18A1、COLIA1、COL4A3、COL6A1、CR2、クリプト(Cripto)、CRP、CSF1(M-CSF)、CSF2(GM-CSF)、CSF3(GCSF)、CTAG1B(NY-ESO-1)、CTLA4、CTL8、CTNNB1(b-カテニン)、CTSB(カテプシンB)、CX3CL1(SCYD1)、CX3CR1(V28)、CXCL1(GRO1)、CXCL1O(IP-IO)、CXCLI1(1-TAC/IP-9)、CXCL12(SDF1)、CXCL13、CXCL14、CXCL16、CXCL2(GRO2)、CXCL3(GRO3)、CXCL5(ENA-78/LIX)、CXCL6(GCP-2)、CXCL9(MIG)、CXCR3(GPR9/CKR-L2)、CXCR4、CXCR6(TYMSTR/STRL33/ボンゾ(Bonzo))、CYB5、CYC1、CYSLTR1、DAB2IP、DES、DKFZp451J0118、DLK1、DNCL1、DPP4、E2F1、エンゲル(Engel)、エッジ(Edge)、フェネル(Fennel)、EFNA3、EFNB2、EGF、EGFR、ELAC2、ENG、Enola、ENO2、ENO3、ENPP3、EpCAM、EPHA1、EPHA2、EPHA3、EPHA4、EPHA5、EPHA6、EPHA7、EPHA8、EPHA9、EPHA10、EPHB1、EPHB2、EPHB3、EPHB4、EPHB5、EPHB6、EPHRIN-A1、EPHRIN-A2、EPHRINA3、EPHRIN-A4、EPHRIN-A5、EPHRIN-A6、EPHRIN-B1、EPHRIN-B2、EPHRIN-B3、EPHB4、EPG、ERBB2(HER-2)、ERBB3、ERBB4、EREG、ERK8、エストロゲン受容体、アール(Earl)、ESR2、F3(TF)、FADD、FAP、ファルネシルトランスフェラーゼ、FasL、FASNf、FCER1A、FCER2、FCGR3A、FGF、FGF1(aFGF)、FGF10、FGF1 1、FGF12、FGF12B、FGF13、FGF14、FGF16、FGF17、FGF18、FGF19、FGF2(bFGF)、FGF20、FGF21、FGF22、FGF23、FGF3(int-2)、FGF4(HST)、FGF5、FGF6(HST-2)、FGF7(KGF)、FGF8、FGF9、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FIGF(VEGFD)、FIL1(EPSILON)、FBL1(ZETA)、FLJ12584、FLJ25530、FLRT1(フィブロネクチン)、FLT1、FLT-3、FOLR1、FOLH1、FOS、FOSL1(FRA-1)、FR-アルファ、FY(DARC)、GABRP(GABAa)、GAGEB1、GAGEC1、GALNAC4S-6ST、GATA3、GD2、GD3、GDF5、GFI1、GFRA1、GGT1、GM-CSF、GNAS1、GNRH1、GPC1、GPC3、GPNB、GPR2(CCR10)、GPR31、GPR44、GPR81(FKSG80)、GRCC1O(C1O)、GRP、GSN(ゲルゾリン(Gelsolin))、GSTP1、GUCY2C、HAVCR1、HAVCR2、HDAC、HDAC4、HDAC5、HDAC7A、HDAC9、ヘッジホッグ、HER3、HGF、HIF1A、HIP1、ヒスタミンおよびヒスタミン受容体、HLA-A、HLA-DR、HLA-DRA、HLA-E、HM74、HMOXI、HSP90、HUMCYT2A、ICEBERG、ICOSL、ID2、IFN-a、IFNA1、IFNA2、IFNA4、IFNA5、EFNA6、BFNA7、IFNB1、IFNガンマ、IFNW1、IGBP1、IGF1、IGF1R、IGF2、IGFBP2、IGFBP3、IGFBP6、DL-1、ILIO、ILIORA、ILIORB、IL-1、IL1R1(CD121a)、IL1R2(CD121b)、IL-IRA、IL-2、IL2RA(CD25)、IL2RB(CD122)、IL2RG(CD132)、IL-4、IL-4R(CD123)、IL-5、IL5RA(CD125)、IL3RB(CD131)、IL-6、IL6RA、(CD126)、IR6RB(CD130)、IL-7、IL7RA(CD127)、IL-8、CXCR1(IL8RA)、CXCR2、(IL8RB/CD128)、IL-9、IL9R(CD129)、IL-10、IL10RA(CD210)、IL10RB(CDW210B)、IL-11、IL11RA、IL-12、IL-12A、IL-12B、IL-12RB1、IL-12RB2、IL-13、IL13RA1、IL13RA2、IL14、IL15、IL15RA、IL16、IL17、IL17A、IL17B、IL17C、IL17R、IL18、IL18BP、IL18R1、IL18RAP、IL19、ILIA、ILIB、ILIF10、ILIF5、IL1F6、ILIF7、IL1F8、DL1F9、ILIHYI、ILIR1、IL1R2、ILIRAP、ILIRAPLI、ILIRAPL2、ILIRL1、IL1RL2、ILIRN、IL2、IL20、IL20RA、IL21R、IL22、IL22R、IL22RA2、IL23、DL24、IL25、IL26、IL27、IL28A、IL28B、IL29、IL2RA、IL2RB、IL2RG、IL3、IL30、IL3RA、IL4、1L4、IL6ST(糖タンパク質130)、ILK、INHA、INHBA、INSL3、INSL4、IRAK1、IRAK2、ITGA1、ITGA2、ITGA3、ITGA6(α6インテグリン)、ITGAV、ITGB3、ITGB4(β4インテグリン)、JAG1、JAK1、JAK3、JTB、JUN、K6HF、KAI1、KDR、KIT、KITLG、KLF5(GC ボックス(Box) BP)、KLF6、KLK10、KLK12、KLK13、KLK14、KLK15、KLK3、KLK4、KLK5、KLK6、KLK9、KRT1、KRT19(ケラチン19)、KRT2A、KRTHB6(髪特有のII型ケラチン)、L1CAM、LAG3、LAMA5、LAMP1、LEP(レプチン)、Lewis Y抗原(“LeY”)、LILRB1、Lingo-p75、Lingo-Troy、LGALS3BP、LRRC15、LRP5、LRP6、LPS、LTA(TNF-b)、LTB、LTB4R(GPR16)、LTB4R2、LTBR、LY75、LYPD3、MACMARCKS、MAGまたはOMgp、MAGEA3、MAGEA6、MAP2K7(c-Jun)、MCP-1、MDK、MIB1、ミッドカイン、MIF、MISRII、MJP-2、MLSN、MK、MKI67(Ki-67)、MMP2、MMP9、MS4A1、MSMB、MT3(メタロチオネクチン-UI)、mTOR、MTSS1、MUC1(ムチン)、MUC16、MYC、MYD88、NCAM1、NCK2、NCR3LG1、ニュ-ロカン、NFKBI、NFKB2、NGFB(NGF)、NGFR、NgR-Lingo、NgRNogo66、(Nogo)、NgR-p75、NgR-Troy、NMEI(NM23A)、NOTCH、NOTCH1、NOTCH3、NOX5、NPPB、NROB1、NROB2、NRID1、NR1D2、NR1H2、NR1H3、NR1H4、NR112、NR113、NR2C1、NR2C2、NR2E1、NR2E3、NR2F1、NR2F2、NR2F6、NR3C1、NR3C2、NR4A1、NR4A2、NR4A3、NR5A1、NR5A2、NR6A1、NRP1、NRP2、NT5E、NTN4、NY-ESO1、ODZI、OPRDI、P2RX7、PAP、PART1、PATE、PAWR、P-カドヘリン、
PCA3、PCD1、PD-L1、PCDGF、PCNA、PDGFA、PDGFB、PDGFRA、PDGFRB、PECAMI、L1-CAM、peg-アスパラギナーゼ、PF4(CXCL4)、PGF、PGR、ホスファカン、PIAS2、PI3キナーゼ、PIK3CG、PLAU(uPA)、PLG、PLXDCI、PKC、PKC-ベータ、PPBP(CXCL7)、PPID、PR1、PRAME、PRKCQ、PRKD1、PRL、PROC、PROK2、PSAP、PSCA、PSMA、PTAFR、PTEN、PTHR2、PTGS2(COX-2)、PTK7、PTN、PVRIG、PVRL4、RAC2(P21Rac2)、RANK、RANKリガンド、RARB、RGS1、RGS13、RGS3、RNFI1O(ZNF144)、ロン(Ron)、ROBO2、ROR1、RXR、S100A2、SCGB 1D2(リポフィリンB)、SCGB2A1(マンマグロビン2)、SCGB2A2(マンマグロビン1)、SCYE1(内皮単球活性化サイトカイン)、SDF2、SERPENA1、SERPINA3、SERPINB5(マスピン)、SERPINEI(PAI-I)、SERPINFI、SHIP-1、SHIP-2、SHB1、SHB2、SHBG、SfcAZ、SLAMF7、SLC2A2、SLC33A1、SLC43A1、SLC44A4、SLC34A2、SLIT2、SLITRK6、SPP1、SPRR1B(Spr1)、ST6GAL1、ST8SIA1、STAB1、STATE、STEAP、STEAP2、SSTR2、TACSTD2、TB4R2、TBX21、TCP1O、TDGF1、TEK、TGFA、TGFB1、TGFB1I1、TGFB2、TGFB3、TGFBI、TGFBR1、TGFBR2、TGFBR3、THIL、THBS1(トロンボスポンジン-1)、THBS2、THBS4、THPO、TIE(Tie-1)、TIMP3、組織因子、TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、TLR11、TNF、TNF-a、TNFAIP2(B94)、TNFAIP3、TNFRSFI1A、TNFRSF1A、TNFRSF1B、TNFRSF21、TNFRSF5、TNFRSF6(Fas)、TNFRSF7、TNFRSF8、TNFRSF9、TNFSF1O(TRAIL)、TNFRSF10A、TNFRSF10B、TNFRSF12A、TNFRSF17、TNFSF1 1(TRANCE)、TNFSF12(APO3L)、TNFSF13(April)、TNFSF13B、TNFSF14(HVEM-L)、TNFRSF14(HVEM)、TNFSF15(VEGI)、TNFSF18、TNFSF4(OX40リガンド)、TNFSF5(CD40リガンド)、TNFSF6(FasL)、TNFSF7(CD27リガンド)、TNFSF8(CD30リガンド)、TNFSF9(4-1BBリガンド)、TOLLIP、Toll様受容体、TOP2A(トポイソメラーゼIia)、TP53、TPM1、TPM2、TRADD、TRAF1、TRAF2、TRAF3、TRAF4、TRAF5、TRAF6、TRKA、TREM1、TREM2、TROP2、TRPC6、TSLP、TWEAK、チロシナーゼ、uPAR、VEGF、VEGFB、VEGFC、バ-シカン、VHL C5、VLA-4、WT1、Wnt-1、XCL1(リンホタクチン)、XCL2(SCM-Ib)、XCRI(GPR5/CCXCR1)、YY1、ZFPM2、CLEC4C(BDCA-2、DLEC、CD303、CDH6、CLECSF7)、CLEC4D(MCL、CLECSF8)、CLEC4E(ミンクル(Mincle))、CLEC6A(デクチン-2)、CLEC5A(MDL-1、CLECSF5)、CLEC1B(CLEC-2)、CLEC9A(DNGR-1)、CLEC7A(デクチン-1)、CLEC11A、PDGFRa、SLAMF7、GP6(GPVI)、LILRA1(CD85I)、LILRA2(CD85H、ILT1)、LILRA4(CD85G、ILT7)、LILRA5(CD85F、ILT11)、LILRA6(CD85b、ILT8)、LILRB1、NCR1(CD335、LY94、NKp46)、NCR3(CD335、LY94、NKp46)、NCR3(CD337、NKp30)、OSCAR、TARM1、CD30、CD300C、CD300E、CD300LB(CD300B)、CD300LD(CD300D)、KIR2DL4(CD158D)、KIR2DS、KLRC2(CD159C、NKG2C)、KLRK1(CD314、NKG2D)、NCR2(CD336、NKp44)、PILRB、SIGLEC1(CD169、SN)、SIGLEC5、SIGLEC6、SIGLEC7、SIGLEC8、SIGLEC9、SIGLEC10、SIGLEC11、SIGLEC12、SIGLEC14、SIGLEC15(CD33L3)、SIGLEC16、SIRPA、SIRPB1(CD172B)、TREM1(CD354)、TREM2、KLRF1(NKp80)、17-1A、SLAM7、SLC39A6、MSLN、CTAG1B/NY-ESO-1、MAGEA3/A6、ATP5I(Q06185)、OAT(P29758)、AIFM1(Q9Z0X1)、AOFA(Q64133)、MTDC(P18155)、CMC1(Q8BH59)、PREP(Q8K411)、YMEL1(O88967)、LPPRC(Q6PB66)、LONM(Q8CGK3)、ACON(Q99KI0)、ODO1(Q60597)、IDHP(P54071)、ALDH2(P47738)、ATPB(P56480)、AATM(P05202)、TMM93(Q9CQW0)、ERGI3(Q9CQE7)、RTN4(Q99P72)、CL041(Q8BQR4)、ERLN2(Q8BFZ9)、TERA(Q01853)、DAD1(P61804)、CALX(P35564)、CALU(O35887)、VAPA(Q9WV55)、MOGS(Q80UM7)、GANAB(Q8BHN3)、ERO1A(Q8R180)、UGGG1(Q6P5E4)、P4HA1(Q60715)、HYEP(Q9D379)、CALR(P14211)、AT2A2(O55143)、PDIA4(P08003)、PDIA1(P09103)、PDIA3(P27773)、PDIA6(Q922R8)、CLH(Q68FD5)、PPIB(P24369)、TCPG(P80318)、MOT4(P57787)、NICA(P57716)、BASI(P18572)、VAPA(Q9WV55)、ENV2(P11370)、VAT1(Q62465)、4F2(P10852)、ENOA(P17182)、ILK(O55222)、GPNMB(Q99P91)、ENV1(P10404)、ERO1A(Q8R180)、CLH(Q68FD5)、DSG1A(Q61495)、AT1A1(Q8VDN2)、HYOU1(Q9JKR6)、TRAP1(Q9CQN1)、GRP75(P38647)、ENPL(P08113)、CH60(P63038)、およびCH10(Q64433)から選択される1つ以上の標的または抗原に結合する(例えば、から選択される抗原に特異的に結合する)ことができる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、抗PD-L1抗体、抗HER2抗体、抗EGFR抗体、および抗CEA抗体からなる群から選択される。抗体は、市販の抗体、そのバイオシミラー、またはそのバイオベターであり得る。
本発明のある実施態様は、PD-L1(配列番号1)を特異的に認識してそれに結合する抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。抗体構築物または抗原結合ドメインは、抗PD-L1抗体の抗原結合ドメインの1つ以上の可変領域(例えば、2つの可変領域)を含み得、各可変領域は、CDR1、CDR2、およびCDR3を含む。
本発明のある実施態様は、アテゾリズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号2のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号3のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号4のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号5のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号6のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号7のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号2~4の全て、(ii)配列番号5~7の全て、または(iii)配列番号2~7の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号2~7の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、アテゾリズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、アテゾリズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、アテゾリズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号8のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号9のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号10のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号11のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号12のアミノ配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号13のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号14のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号15のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号2~4および8~11の全て、(ii)配列番号5~7および12~15の全て;または(iii)配列番号2~7および8~15の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、アテゾリズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号44を含み得る。第2の可変領域は、配列番号45を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号44、配列番号45、または配列番号44および45の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号44~45の両方を含む。
本発明のある実施態様は、デュルバルマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号18のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号19のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号20のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号21のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号22のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号23のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号18~20の全て、(ii)配列番号21~23の全て、または(iii)配列番号18~23の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号18~23の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、デュルバルマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、デュルバルマブのフレームワーク領域を含む。この点について、デュルバルマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号24のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号25のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号26のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号27のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号28のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号29のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号30のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号31のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号18~20および24~26の全て、(ii)配列番号21~23および27~31の全て;または(iii)配列番号18~21および24~31の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、デュルバルマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号46を含み得る。第2の可変領域は、配列番号47を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号46、配列番号47、または配列番号46および47の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号46~47の両方を含む。
本発明のある実施態様は、アベルマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号30のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号31のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号32のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号33のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号34のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号35のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号30~32の全て、(ii)配列番号33~35の全て、または(iii)配列番号30~35の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号30~35の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、アベルマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、アベルマブのフレームワーク領域を含む。この点について、アベルマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号36のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号37のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号38のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号39のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号40のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号41のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号42のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号43のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号30~32および36~39の全て、(ii)配列番号33~35および40~43の全て;または(iii)配列番号30~35および36~43の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、アベルマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号48を含み得る。第2の可変領域は、配列番号49を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号48、配列番号49、または配列番号48および49の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号48~49の両方を含む。
本発明のある実施態様は、HER2(配列番号50)を特異的に認識してそれに結合する抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。抗体構築物または抗原結合ドメインは、抗HER2抗体の抗原結合ドメインの1つ以上の可変領域(例えば、2つの可変領域)を含み得、各可変領域は、CDR1、CDR2、およびCDR3を含む。
本発明のある実施態様は、トラスツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号51のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号52のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号53のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号54のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号55のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号56のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号51~53の全て、(ii)配列番号54~56の全て、または(iii)配列番号51~56の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号51~56の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、トラスツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、トラスツズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、トラスツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号57のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号58のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号59のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号60のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号61のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号62のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号63のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号64のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号51~53および57~60の全て、(ii)配列番号54~56および61~64の全て;または(iii)配列番号57~59および65~68の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、トラスツズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号65を含み得る。第2の可変領域は、配列番号66を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号65、配列番号66、または配列番号65および66の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、両方の配列番号65~66の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ペルツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号67のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号68のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号69のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号70のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号71のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号72のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号67~69の全て、(ii)配列番号70~72の全て、または(iii)配列番号67~72の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号67~72の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ペルツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ペルツズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、ペルツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号73のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号74のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号75のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号76のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、アミノ配列番号77の酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号78のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号79のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号80のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号67~69および73~76の全て、(ii)配列番号70~72および77~80の全て;または(iii)配列番号67~72および73~80の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ペルツズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号81を含み得る。第2の可変領域は、配列番号82を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号81、配列番号82、または配列番号81および82の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号81~82の両方を含む。
本発明のある実施態様は、CEA(配列番号83)を特異的に認識してそれに結合する抗体構築物または抗原結合ドメインを提供する。抗体構築物または抗原結合ドメインは、抗CEA抗体の抗原結合ドメインの1つ以上の可変領域(例えば、2つの可変領域)を含み得、各可変領域は、CDR1、CDR2、およびCDR3を含む。
本発明のある実施態様は、ラベツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号84のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号85のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号86のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号87のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号88のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号89のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号84~86の全て、(ii)配列番号87~89の全て、または(iii)配列番号84~89の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号84~89の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ラベツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ラベツズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、ラベツズマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号90のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号91のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号92のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号93のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号94のアミノ配酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号95のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号96のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号97のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号84~86および90~93の全て、(ii)配列番号87~89および94~97の全て;または(iii)配列番号84~89および90~97の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ラベツズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号98を含み得る。第2の可変領域は、配列番号99を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号98、配列番号99、または配列番号98および99の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号98~99の両方を含む。
本発明のある実施態様は、PR1A3のCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号100のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号101のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号102のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号103のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号104のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号105のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号100~102の全て、(ii)配列番号103~105の全て、または(iii)配列番号100~105の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号100~105の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、PR1A3のCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、PR1A3のフレームワーク領域を含む。この点について、PR1A3のCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号106のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号107のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号108のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号109のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号110のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号111のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号112のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号113のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号100~102および106~109の全て、(ii)配列番号103~105および110~113の全て;または(iii)配列番号100~103および106~113の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、PR1A3の一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号114を含み得る。第2の可変領域は、配列番号115を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号114、配列番号115、または配列番号114および115の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号114~115の両方を含む。
本発明のある実施態様は、MFE-23のCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号116のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号117のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号118のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号119のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号120のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号121のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号116~118の全て、(ii)配列番号119~121の全て、または(iii)配列番号116~121の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号116~121の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、MFE-23のCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、MFE-23のフレームワーク領域を含む。この点について、MFE-23のCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号122のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号123のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号124のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号125のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号126のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号127のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号128のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号129のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号116~118および122~125の全て、(ii)配列番号119~121および126~129の全て;または(iii)配列番号116~121および122~129の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、MFE-23の一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号130を含み得る。第2の可変領域は、配列番号131を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号130、配列番号131、または配列番号130および131の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号130~131の両方を含む。
本発明のある実施態様は、SM3EのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号132のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号133のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号134のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号135のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号136のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号137のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、(i)配列番号132~134の全て、(ii)配列番号135~137の全て、または(iii)配列番号132~137の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号132~137の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、SM3EのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、SM3Eのフレームワーク領域を含む。この点について、SM3EのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号138のアミノ酸配列(第1の可変領域のフレームワーク領域(「FR」)1)、配列番号139のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR2)、配列番号140のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR3)、配列番号141のアミノ酸配列(第1の可変領域のFR4)、配列番号142のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR1)、配列番号143のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR2)、配列番号144のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR3)、および配列番号145のアミノ酸配列(第2の可変領域のFR4)を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号132~134および138~53の全て、(ii)配列番号135~137および142~144の全て;または(iii)配列番号132~137および138~144の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、SM3Eの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号146を含み得る。第2の可変領域は、配列番号147を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号146、配列番号147、または配列番号146および147の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号146~147の両方を含む。
本発明のある実施態様は、抗EGFR抗体セツキシマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号148のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号149のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号150のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号151のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号152のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号153のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号148~150の全て、(ii)配列番号151~153の全て、または(iii)配列番号148~153の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号148~153の全てを含む。
本発明のある実施態様は、抗EGFR抗体パニツムマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体は、配列番号154のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号155のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号156のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号157のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号158のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号159のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号154~156の全て、(ii)配列番号157~159の全て、または(iii)配列番号154~159の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号154~159の全てを含む。
本発明のある実施態様は、抗EGFR抗体ネシツムマブのCDR領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号160のアミノ酸配列を含むCDR1(第1の可変領域のCDR1)、配列番号161のアミノ酸配列を含むCDR2(第1の可変領域のCDR2)、および配列番号162のアミノ酸配列を含むCDR3(第1の可変領域のCDR3)を含む第1の可変領域、並びに配列番号163のアミノ酸配列を含むCDR1(第2の可変領域のCDR1)、配列番号164のアミノ酸配列を含むCDR2(第2の可変領域のCDR2)、および配列番号165のアミノ酸配列を含むCDR3(第2の可変領域のCDR3)を含む第2の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、(i)配列番号160~162の全て、(ii)配列番号163~165の全て、または(iii)配列番号160~165の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号160~165の全てを含む。
本発明のある実施態様は、抗EGFR抗体セツキシマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第1の可変領域は、配列番号166を含み得る。第2の可変領域は、配列番号167を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体は、配列番号166、配列番号167、または配列番号166および167の両方を含む。好ましくは、抗体は、配列番号166~167の両方を含む。
抗体に加えて、代替タンパク質足場を、免疫結合体の一部として使用し得る。例えば、代替タンパク質足場は、治療剤/リンカーが該代替タンパク質足場のリジン残基に結合するように、式IIの抗体構築物を置き換え得る。句「代替タンパク質足場」は、非免疫グロブリン由来のタンパク質またはペプチドを指す。そのようなタンパク質およびペプチドは、一般にエンジニアリングに受け入れられ、所与の抗原に対する単一特異性、二重特異性、または多重特異性を付与するように設計することができる。代替タンパク質足場のエンジニアリングは、いくつかのアプローチを使用して行うことができる。既知の特異性の配列を足場の可変ループ上に移植する場合、ループ移植アプローチを使用することができる。配列のランダム化および突然変異誘発を使用して、変異体のライブラリーを開発することができ、これは、新規バインダーを特定するために、さまざまなディスプレイプラットフォーム(例えば、ファージディスプレイ)を使用してスクリーニングすることができる。部位特異的突然変異誘発もまた、同様のアプローチの一部として使用することができる。代替タンパク質足場は、最小の二次構造を有する小さなペプチドから、フルサイズの抗体と同様のサイズの大きなタンパク質にわたる、さまざまなサイズで存在する。足場の例は、シスチンノットミニタンパク質(ノッチンとしても知られる)、環状シスチンノットミニタンパク質(シクロチドとしても知られる)、アビマー、アフィボディ、ヒトフィブロネクチンの第10III型ドメイン、DARPins(設計されたアンキリンリピート)およびアンチカリン(リポカリンとしても知られる)を含むが、これらに限定されない。既知の特異性を有する天然に存在するリガンドはまた、所与の標的に対して新規の特異性を付与するように操作することができる。操作し得る天然に存在するリガンドの例は、EGFリガンドおよびVEGFリガンドを含む。操作されたタンパク質は、所望の結合戦略および特異性に依存して、単量体タンパク質または多量体のいずれかとして製造することができる。タンパク質エンジニアリング戦略を使用して、代替タンパク質足場をFcドメインに融合させることができる。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、FcRγ共役受容体に結合する。いくつかの実施態様においては、FcRγ共役受容体は、GP6(GPVI)、LILRA1(CD85I)、LILRA2(CD85H、ILT1)、LILRA4(CD85G、ILT7)、LILRA5(CD85F、ILT11)、LILRA6(CD85b、ILT8)、LILRB1、NCR1(CD335、LY94、NKp46)、NCR3(CD335、LY94、NKp46)、NCR3(CD337、NKp30)、OSCAR、およびTARM1からなる群から選択される。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、DAP12共役受容体に結合する。いくつかの実施態様においては、DAP12共役受容体は、CD300C、CD300E、CD300LB(CD300B)、CD300LD(CD300D)、KIR2DL4(CD158D)、KIR2DS、KLRC2(CD159C、NKG2C)、KLRK1(CD314、NKG2D)、NCR2(CD336、NKp44)、PILRB、SIGLEC1(CD169、SN)、SIGLEC5、SIGLEC6、SIGLEC7、SIGLEC8、SIGLEC9、SIGLEC10、SIGLEC11、SIGLEC12、SIGLEC14、SIGLEC15(CD33L3)、SIGLEC16、SIRPB1(CD172B)、TREM1(CD354)、およびTREM2からなる群から選択される。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、hemITAM含有受容体に結合する。いくつかの実施態様においては、hemITAM含有受容体は、KLRF1(NKp80)である。
いくつかの実施態様においては、抗体は、CLEC4C(BDCA-2、DLEC、CD303、CLECSF7)、CLEC4D(MCL、CLECSF8)、CLEC4E(ミンクル)、CLEC6A(デクチン-2)、CLEC5A(MDL-1、CLECSF5)、CLEC1B(CLEC-2)、CLEC9A(DNGR-1)、およびCLEC7A(デクチン-1)ら選択される1つ以上の標的に結合することができる。いくつかの実施態様においては、抗体は、CLEC6A(デクチン-2)またはCLEC5Aに結合することができる。いくつかの実施態様においては、抗体は、CLEC6A(デクチン-2)に結合することができる。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、ATP5I(Q06185)、OAT(P29758)、AIFM1(Q9Z0X1)、AOFA(Q64133)、MTDC(P18155)、CMC1(Q8BH59)、PREP(Q8K411)、YMEL1(O88967)、LPPRC(Q6PB66)、LONM(Q8CGK3)、ACON(Q99KI0)、ODO1(Q60597)、IDHP(P54071)、ALDH2(P47738)、ATPB(P56480)、AATM(P05202)、TMM93(Q9CQW0)、ERGI3(Q9CQE7)、RTN4(Q99P72)、CL041(Q8BQR4)、ERLN2(Q8BFZ9)、TERA(Q01853)、DAD1(P61804)、CALX(P35564)、CALU(O35887)、VAPA(Q9WV55)、MOGS(Q80UM7)、GANAB(Q8BHN3)、ERO1A(Q8R180)、UGGG1(Q6P5E4)、P4HA1(Q60715)、HYEP(Q9D379)、CALR(P14211)、AT2A2(O55143)、PDIA4(P08003)、PDIA1(P09103)、PDIA3(P27773)、PDIA6(Q922R8)、CLH(Q68FD5)、PPIB(P24369)、TCPG(P80318)、MOT4(P57787)、NICA(P57716)、BASI(P18572)、VAPA(Q9WV55)、ENV2(P11370)、VAT1(Q62465)、4F2(P10852)、ENOA(P17182)、ILK(O55222)、GPNMB(Q99P91)、ENV1(P10404)、ERO1A(Q8R180)、CLH(Q68FD5)、DSG1A(Q61495)、AT1A1(Q8VDN2)、HYOU1(Q9JKR6)、TRAP1(Q9CQN1)、GRP75(P38647)、ENPL(P08113)、CH60(P63038)、およびCH10(Q64433)から選択される1つ以上の標的に結合する(例えば、から選択されるある標的に特異的に結合する)ことができる。上記のリストにおいては、アクセッション番号を、括弧中に示している。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、CCR8、CDH1、CD19、CD20、CD29、CD30、CD38、CD40、CD47、EpCAM、MUC1、MUC16、EGFR、HER2、SLAMF7、およびgp75から選択される抗原に結合する。いくつかの実施態様においては、抗原は、CCR8、CD19、CD20、CD47、EpCAM、MUC1、MUC16、EGFR、およびHER2から選択される。いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、Tn抗原およびトムセン-フリーデンライヒ(Thomsen-Fiedenreich)抗原から選択される抗原に結合する。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、アバゴボマブ、アバタセプト(ORENCIA(商標)としても知られる)、アブシキシマブ(REOPRO(商標)、c7E3 Fabとしても知られる)、アダリムマブ(HUMIRA(商標)としても知られる)、アデカツムマブ、アレムツズマブ(CAMPATH(商標)、MabCampathまたはCampath-1Hとしても知られる)、アルツモマブ、アフェリモマブ、アナツモマブマフェナトックス、アネツムマブ、アンルキズマブ、アポリズマブ、アルシツモマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、アトロリムマブ、バピネウズマブ、バシリキシマブ(SIMULECT(商標)としても知られる)、バビツキシマブ、ベクツモマブ(LYMPHOSCAN(商標)としても知られる)、ベリムマブ(LYMPHO-STAT-B(商標)としても知られる)、ベルチリムマブ、ベシレソマブ、ベバシズマブ(AVASTIN(商標)としても知られる)、ビシロマブブラロバルビタル、ビバツズマブメルタンシン、カンパス、カナキヌマブ(ACZ885としても知られる)、カンツズマブメルタンシン、カプロマブ(PROSTASCINT(商標)としても知られる)、カツマキソマブ(REMOVAB(商標)としても知られる)、セデリズマブ(CIMZIA(商標)としても知られる)、セルトリズマブペゴル、セツキシマブ(ERBITUX(商標)としても知られる)、クレノリキシマブ、ダセツズマブ、ダクリキシマブ、ダクリズマブ(ZENAPAX(商標)としても知られる)、デノスマブ(AMG 162としても知られる)、デツモマブ、ドルリモマブアリトックス、ドルリキシズマブ、ダンツムバブ、デュリムルマブ(durimulumab)、デュルムルマブ(durmulumab)、エクロメキシマブ、エクリズマブ(SOLIRIS(商標)としても知られる)、エドマコマブ、エドレコロマブ(Mab17-1A、PANOREX(商標)としても知られる)、エファリズマブ(RAPTIVA(商標)としても知られる)、エフングマブ(MYCOGRAB(商標)としても知られる)、エロツズマブ、エルシリモマブ、エンリモマブペゴル、エピツモマブシツキセタン、エファリズマブ、エピツモマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、エルツマクソマブ(REXOMUN(商標)としても知られる)、エタネルセプト(ENBREL(商標)としても知られる)、エタラシズマブ(VITAXIN(商標)、ABEGRIN(商標)としても知られる)、エクスビビルマブ、ファノレソマブ(NEUTROSPEC(商標)としても知られる)、ファラリモマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ(HUZAF(商標)としても知られる)、ガリキシマブ、ガンテネルマブ、ガビリモマブ(ABXCBL(商標)としても知られる)、ゲムツズマブオゾガマイシン(MYLOTARG(商標)としても知られる)、ゴリムマブ(CNTO 148としても知られる)、ゴミリキシマブ、イバリズマブ(TNX-355としても知られる)、イブリツモマブチウキセタン(ZEVALIN(商標)としても知られる)、イゴボマブ、イムシロマブ、インフリキシマブ(REMICADE(商標)としても知られる)、イノリモマブ、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ(MDX-010、MDX-101としても知られる)、イラツムマブ、ケリキシマブ、ラベツズマブ、レマレソマブ、レブリリズマブ、レルデリムマブ、レキサツムマブ(HGS-ETR2、ETR2-ST01としても知られる)、レキシツムマブ、リビビルマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ、ルミリキシマブ、マパツムマブ(HGSETR1、TRM-1としても知られる)、マスリモマブ、マツズマブ(EMD72000としても知られる)、メポリズマブ(BOSATRIA(商標)としても知られる)、メテリムマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミツモマブ、モロリムマブ、モタビズマブ(NUMAX(商標)としても知られる)、ムロモナブ(OKT3としても知られる)、ナコロマブタフェナトックス、ナプツモマブエスタフェナトックス、ナタリズマブ(TYSABRI(商標)、ANTEGREN(商標)としても知られる)、ネバクマブ、ネレリモマブ、ニモツズマブ(THERACIM hR3(商標)、THERA-CIM-hR3(商標)、THERALOC(商標)としても知られる)、ノフェツモマブメルペンタン(VERLUMA(商標)としても知られる)、オビヌツズマブ、オクレリズマブ、オデュリモマブ、オファツムマブ、オマリズマブ(XOLAIR(商標)としても知られる)、オレゴボマブ(OVAREX(商標)としても知られる)、オテリキシズマブ、パギバキシマブ、パリビズマブ(SYNAGIS(商標)としても知られる)、パニツムマブ(ABX-EGF、VECTIBIX(商標)としても知られる)、パスコリズマブ、ペムツモマブ(THERAGYN(商標)としても知られる)、ペルツズマブ(2C4、OMNITARG(商標)としても知られる)、ペキセリズマブ、ピンツモマブ、プリリキシマブ、プリツムマブ、ラニビズマブ(LUCENTIS(商標)としても知られる)、ラキシバクマブ、レガビルマブ、レスリズマブ、リツキシマブ(RITUXAN(商標)、MabTHERA(商標)としても知られる)、ロベリズマブ、ルプリズマブ、サツモマブ、セビルマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ(MEDI-507としても知られる)、ソンツズマブ、スタムルマブ(MYO-029としても知られる)、スレソマブ(LEUKOSCAN(商標)としても知られる)、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、タプリツモマブパプトックス、テフィバズマブ(AUREXIS(商標)としても知られる)、テリモマブアリトックス、テネリキシマブ、テプリズマブ、チシリムマブ、トシリズマブ(ACTEMRA(商標)としても知られる)、トラリズマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ(HERCEPTIN(商標)としても知られる)、トレメリムマブ(CP-675,206としても知られる)、ツコツズマブセルモロイキン、ツビルマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ(CNTO 1275としても知られる)、バパリキシマブ、ベルツズマブ、ベパリモマブ、ビシリズマブ(NUVION(商標)としても知られる)、ボロシキシマブ(M200としても知られる)、ボツムマブ(HUMASPECT(商標)としても知られる)、ザルツムマブ、ザノリムマブ(HuMAX-CD4としても知られる)、ジラリムマブ、ゾリモマブアリトックス、ダラツムマブ、オララツマブ、ブレンツキシマブベドチン、アフィベルセプト、アバタセプト、ベラタセプト、アフィベルセプト、エタネルセプト、ロミプロスチム、SBT-040(米国2017/0158772中にリストされている配列から選択される。いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、オララツマブ、オビヌツズマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リツキシマブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、ダラツムマブ、エタネルセプト、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、イピリムマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、マツズマブ、およびエロツズマブからなる群から選択される。特定の実施態様においては、抗体構築物は、トラスツズマブである。
チェックポイント阻害剤
任意の適切な免疫チェックポイント阻害剤が、本明細書において開示される免疫結合体との共投与のために意図される。いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、1つ以上の免疫チェックポイントタンパク質の発現または活性を低下させる。別の実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、1つ以上の免疫チェックポイントタンパク質とそれらのリガンドとの間の相互作用を低下させる。免疫チェックポイント分子の発現および/または活性を減少させる阻害性核酸もまた、本明細書において開示される方法において使用することができる。
ほとんどのチェックポイント阻害剤は、チェックポイント阻害剤の使用が細胞を殺すことを意図しておらず、むしろシグナル伝達を遮断することを意図しているので、エフェクター機能を有しないように設計されている。本発明の免疫結合体は、骨髄免疫を活性化するために必要とされる「エフェクター機能」を追加し直すことができる。従って、ほとんどのチェックポイント阻害剤にとって、この発見は重要であろう。
いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、細胞毒性Tリンパ球抗原4(CTLA4、CD152としても知られる)、IgおよびITIMドメインを有するT細胞免疫受容体(TIGIT)、グルココルチコイド誘導TNFR関連タンパク質(GITR、TNFRSF18としても知られる)、誘導性T細胞共刺激(ICOS、CD278としても知られる)、CD96、ポリオウイルス受容体関連2(PVRL2、CD112Rとしても知られる、プログラム細胞死タンパク質1(PD-1、CD279としても知られる)、プログラム細胞死1リガンド1(PD-L1、B7-H3およびCD274としても知られる)、プログラム細胞死リガンド2(PD-L2、B7-DCおよびCD273としても知られる)、リンパ球活性化遺伝子-3(LAG-3、CD223としても知られる)、B7-H4、キラー免疫グロブリン受容体(KIR)、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー4(TNFRSF4、OX40およびCD134としても知られる)およびそのリガンドOX40L(CD252)、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ1(IDO-1)、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ2(IDO-2)、癌胎児性抗原関連細胞接着分子1(CEACAM1)、BおよびTリンパ球減衰剤(BTLA、CD272としても知られる)、T細胞膜タンパク質3(TIM3)、アデノシンA2A受容体(A2Ar)、並びにT細胞活性化のVドメインIgサプレッサー(VISTAタンパク質)である。いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、CTLA4、PD-1、またはPD-L1の阻害剤である。
いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、イピリムマブ(YERVOY(商標)としても知られる)ペムブロリズマブ(KEYTRUDA(商標)としても知られる)、ニボルマブ(OPDIVO(商標)としても知られる)、アテゾリズマブ(TECENTRIG(商標)としても知られる)、アベルマブ(BAVENCIO(商標)としても知られる)、およびデュルバルマブ(IMFINZI(商標)としても知られる)から選択される。いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、イピリムマブ(YERVOY(商標)としても知られる)、ペムブロリズマブ(KEYTRUDA(商標)としても知られる)、ニボルマブ(OPDIVO(商標)としても知られる)、およびアテゾリズマブ(TECENTRIG(商標)としても知られる)から選択される。
リンカー
リンカーが本明細書において記載されるエステルを使用して抗体構築物に結合し得るという条件で、任意の適切なリンカーを、本発明の文脈において使用することができる。
リンカーは、リンカーが抗体構築物および治療剤に共有結合するとき、抗体構築物および治療剤の機能が維持されるように、任意の適切な長さを有し得る。リンカーは、約3Å以上、例えば、約4Å以上、約5Å以上、約6Å以上、約7Å以上、約8Å以上、約9Å以上、約10Å以上、または約20Å以上の長さを有し得る。あるいは、またはさらに、リンカーは、約200Å以下、例えば、約150Å以下、約100Å以下、約90Å以下、約80Å以下、約70Å以下、約60Å以下、約50Å以下、約45Å以下、約40Å以下、約35Å以下、約30Å以下、約25Å以下、約20Å以下、または約15Å以下の長さを有し得る。すなわち、リンカーは、前述のエンドポイントの任意の2つによって境界される長さを有し得る。リンカーは、約3Åから約200Å、例えば、約3Åから約150Å、約3Åから約100Å、約3Åから約90Å、約3Åから約80Å、約3Åから約70Å、約3Åから約60Å、約3Åから約50Å、約3Åから約45Å、約3Åから約40Å、約3Åから約35Å、約3Åから約30Å、約3Åから約25Å、約3Åから約20Å、約3Åから約15Å、約5Åから約50Å、約5Åから約25Å、約5Åから約20Å、約10Åから約50Å、約10Åから約20Å、約5Åから約30Å、約5Åから約15Å、約20Åから約100Å、約20Åから約90Å、約20Åから約80Å、約20Åから約70Å、約20Åから約60Å、または約20Åから約50Åの長さを有し得る。特定の実施態様においては、リンカーは、約20Åから約100Åの長さを有する。
いくつかの実施態様においては、リンカーは、生理学的条件下で切断不能である。本明細書において使用される用語「生理学的条件」は、摂氏20~40度の温度範囲、大気圧(すなわち、1気圧)、約6~約8のpH、および1つ以上の生理学的酵素、プロテアーゼ、酸、および塩基を指す。
いくつかの実施態様においては、リンカーは、生理学的条件下で切断可能である。例えば、リンカーは、酵素的プロセスまたは代謝プロセスによって切断することができる。
いくつかの実施態様においては、リンカーは、ポリ(エチレングリコール)基を含む。特定の実施態様においては、リンカーは、少なくとも2つのエチレングリコール基(例えば、少なくとも3つのエチレングリコール基、少なくとも4つのエチレングリコール基、少なくとも5つのエチレングリコール基、少なくとも6つのエチレングリコール基、少なくとも7つのエチレングリコール基、少なくとも8つのエチレングリコール基、少なくとも9つのエチレングリコール基、少なくとも10個のエチレングリコール基、少なくとも11個のエチレングリコール基、少なくとも12個のエチレングリコール基、少なくとも13個のエチレングリコール基、少なくとも14個のエチレングリコール基、少なくとも15個のエチレングリコール基、少なくとも16個のエチレングリコール基、少なくとも17個のエチレングリコール基、少なくとも18個のエチレングリコール基、少なくとも19個のエチレングリコール基、少なくとも20個のエチレングリコール基、少なくとも21個のエチレングリコール基、少なくとも22個のエチレングリコール基、少なくとも23個のエチレングリコール基、少なくとも24個のエチレングリコール基、または少なくとも25個のエチレングリコール基を含む。特定の実施態様においては、リンカーは、ジ(エチレングリコール)基、トリ(エチレングリコール)基、若しくはテトラ(エチレングリコール)基、5つのエチレングリコール基、6つのエチレングリコール基、8つのエチレングリコール基、10個のエチレングリコール基、12個のエチレングリコール基、24個のエチレングリコール基、または25個のエチレングリコール基を含む。
いくつかの実施態様においては、リンカー(L)は、式:
Figure 2022547066000028
(式中、
Aは、任意に存在して、NRまたは式:
Figure 2022547066000029
であり、
Uは、任意に存在して、CH、C(O)、CHC(O)、またはC(O)CHであり、
およびWは独立して、水素、Ar、または式:
Figure 2022547066000030
であり、
Vは、任意に存在して、式:
Figure 2022547066000031
であり、
、m、およびmは独立して、m、m、およびmの少なくとも1つがゼロでない整数であることを除いて、0から25の整数であり、
、G、G、およびGは独立して、CH、C(O)、CHC(O)、C(O)CH、または結合であり、
Xは、任意に存在して、O、NR、CHR、SO、S、または1つ若しくは2つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または-CO-を通して連結しており、
、R、およびRは独立して、水素またはC-Cアルキルであり、
Arは、1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000032
は、接続点を表す)である。
特定の実施態様においては、リンカー(L)は、式:
Figure 2022547066000033
(式中、mは、1から25の整数であり、
各波線
Figure 2022547066000034
は、接続点を表す)である。
特定の実施態様においては、リンカー(L)は、式:
Figure 2022547066000035
(式中、
は、水素、Ar、または式:
Figure 2022547066000036
であり、
Vは、任意に存在して、式:
Figure 2022547066000037
であり、
、m、およびmは独立して、m、m、およびmの少なくとも1つがゼロでない整数であることを除いて、0から25の整数であり、
は、CH、C(O)、CHC(O)、C(O)CH、または結合であり、
Xは、任意に存在して、O、NR、CHR、SO、S、または1つ若しくは2つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または-CO-を通して連結しており、
、R、およびRは独立して、水素またはC-Cアルキルであり、
Arは、1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000038
は、接続点を表す)である。
特定の実施態様においては、リンカー(L)は、式:
Figure 2022547066000039
(式中、
Uは、任意に存在して、CH、C(O)、CHC(O)、またはC(O)CHであり、
は、水素、Ar、または式:
Figure 2022547066000040
であり、
、m、およびmは独立して、m、m、およびmの少なくとも1つがゼロでない整数であることを除いて、0から25の整数であり、
は、CH、C(O)、CHC(O)、C(O)CH、または結合であり、
Xは、任意に存在して、O、NR、CHR、SO、S、または1つ若しくは2つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または-CO-を通して連結しており、
、R、およびRは独立して、水素またはC-Cアルキルであり、
Arは、1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000041
は、接続点を表す)である。
特定の実施態様においては、リンカー(L)は、式:
Figure 2022547066000042
(式中、
は、1から25の整数であり、
各波線
Figure 2022547066000043
は、接続点を表す)である。
特定の実施態様においては、リンカー(L)は、式:
Figure 2022547066000044
(式中、
Aは、任意に存在して、NRまたは式:
Figure 2022547066000045
であり、
Uは、任意に存在して、CH、C(O)、CHC(O)、またはC(O)CHであり、
およびWは独立して、水素、Ar、または式:
Figure 2022547066000046
であり、
およびmは独立して、m、m、およびmの少なくとも1つがゼロでない整数であることを除いて、0から25の整数であり、
は、CH、C(O)、CHC(O)、C(O)CH、または結合であり、
Xは、任意に存在して、O、NR、CHR、SO、S、または1つ若しくは2つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または-CO-を通して連結しており、
、R、およびRは独立して、水素またはC-Cアルキルであり、
Arは、1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000047
は、接続点を表す)である。
いくつかの実施態様においては、Xは、ベンゼン、ナフタレン、ピロール、インドール、イソインドール、インドリジン、フラン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、チオフェン、ピリジン、アクリジン、ナフチリジン、キノロン、イソキノリン、イソオキサゾール、オキサゾール、ベンゾオキサゾール、イソチアゾール、チアゾール、ベンズチアゾール(benzthiazole)、イミダゾール、チアジアゾール、テトラゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、ベンズイミダゾール、プリン、ピラゾール、ピラジン、プテリジン、キノキサリン、フタラジン、キナゾリン、トリアジン、フェナジン、シンノリン、ピリミジン、ピリダジン、シクロヘキサン、デカヒドロナフタレン、ピロリジン、オクタヒドロインドール、オクタヒドロイソインドール、テトラヒドロフラン、オクタヒドロベンゾフラン、オクタヒドロベンゾチオフェン、テトラヒドロチオフェン、ピペリジン、テトラデカヒドロアクリジン、ナフチリジン、デカヒドロキノリン、デカヒドロイソキノリン、イソオキサゾリジン、オキサゾリジン、オクタヒドロベンゾオキサゾール、イソチアゾリジン、チアゾリジン、オクタヒドロベンゾチアゾール、イミダゾリジン、1,2,3-チアジアゾリジン、テトラゾリジン、1,2,3-トリアゾリジン、1,2,3-オキサジアゾリジン、オクタヒドロベンゾイミダゾール、オクタヒドロプリン、ピラゾリジン、ピペラジン、デクヒドロプテリジン(dechydropteridine)、デカヒドロキノキサリン、デクヒドロフタラジン(dechydrophthalazine)、デクヒドロキナゾリン(dechydroquinazoline)、1,3,5-トリアジナン、テトラデカヒドロフェナジン、デカヒドロシンノリン、ヘキサヒドロピリミジン、またはヘキサヒドロピリダジンから選択される1つ以上の二価の基である。いくつかの実施態様においては、Xの1つ以上の二価の基は、縮合している。いくつかの実施態様においては、Xの1つ以上の二価の基は、結合または-CO-を通して連結している。特定の実施態様においては、Xは、1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、またはそれらの組合せで置換され得る。
特定の実施態様においては、Xは、式:
Figure 2022547066000048
(式中、上記で参照した構造のいずれも、両方向で使用し得る)である。
Arは、任意に1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、若しくはそれらの組合せで置換された、アリールまたはヘテロアリール基である。Arは、本明細書において記載される任意の適切なアリールまたはヘテロアリール基であり得る。いくつかの実施態様においては、Arは、任意に1つ以上のハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素)、ニトリル、ヒドロキシル、C-Cアルキル基、若しくはそれらの組合せで置換された、Xの二価の基によって記載される一価のアリールまたはヘテロアリール基である。
変数m、m、およびmは独立して、0から25の整数である。典型的には、m、m、およびmの少なくとも1つは、m、m、およびmの少なくとも1つが1から25の整数であるように、ゼロでない整数である。特定の実施態様においては、m、m、およびmの少なくとも1つは、約2から約25(例えば、約2から約16、約6から約25、約6から約16、約8から約25、約8から約16、約6から約12、または約8から約12)の整数である。従って、いくつかの実施態様においては、本発明の免疫結合体は、下付き文字「m」、「m」および「m」で指定される、約2から約25個の(例えば、約2から約16、約6から約25、約6から約16、約8から約25、約8から約16、約6から約12、または約8から約12個の)エチレングリコール単位を含む。従って、本発明の免疫結合体は、少なくとも2つのエチレングリコール基(例えば、少なくとも3つのエチレングリコール基、少なくとも4つのエチレングリコール基、少なくとも5つのエチレングリコール基、少なくとも6つのエチレングリコール基、少なくとも7つのエチレングリコール基、少なくとも8つのエチレングリコール基、少なくとも9つのエチレングリコール基、または少なくとも10個のエチレングリコール基)を含み得る。従って、免疫結合体は、約2から約25個のエチレングリコール単位、例えば、約6から約25個のエチレングリコール単位、約6から約16個のエチレングリコール単位、約8から約25個のエチレングリコール単位、約8から約16個のエチレングリコール単位、約8から約12個のエチレングリコール単位、または約8から約12個のエチレングリコール単位を含み得る。特定の実施態様においては、免疫結合体は、ジ(エチレングリコール)基、トリ(エチレングリコール)基、テトラ(エチレングリコール)基、5つのエチレングリコール基、6つのエチレングリコール基、7つのエチレングリコール基、8つのエチレングリコール基、9つのエチレングリコール基、10個のエチレングリコール基、11個のエチレングリコール基、12個のエチレングリコール基、13個のエチレングリコール基、14個のエチレングリコール基、15個のエチレングリコール基、16個のエチレングリコール基、24個のエチレングリコール基、または25個のエチレングリコール基を含む。
いくつかの実施態様においては、リンカー(L)は、
-(PEP)-C(=O)-(PEG)-C(=O)-;
-NR-(PEG)-C(=O)-;
-(PEP)-C(=O)-(PEG)-NR-(PEG)-C(=O)-;
-(PEP)-C(=O)-(PEG)-N(R-(PEG)-C(=O)-;
-C(=O)-(PEG)-C(=O)-;
-C(=O)-CH(AA)-NR-C(=O)-(PEG)-C(=O)-;
-(PEP)-C(=O)-(PEG)-C(=O)-CH(AA)-NR-(PEG)-C(=O)-;
-C(=O)O-(C-C12アルキルジイル)-S-S-(PEG)-C(=O)-;
-C(=O)-(C-C12アルキルジイル)-S-S-(PEG)-C(=O)-;
-(PEG)-C(=O)-;
-(PEP)-C(=O)-(C-C12アルキルジイル)-C(=O)-;
-(MCgluc)-(C(=O)-(PEG)-OCH-(C-C20ヘテロアリールジイル)-CHCHOCHCH-C(=O)-;
-(PEP)-C(=O)-(CH-C(=O)-;および
-(PEP)-C(=O)-(CH
(式中、
PEGは、式:
-(CHCHO)-(CH-を有し;mは、1から5の整数であり、nは、2から50の整数であり;
PEPは、式:
Figure 2022547066000049
(式中、AAおよびAAは、アミノ酸側鎖から独立して選択され;
は、-CHO-C(=O)-で置換されおよび任意に
Figure 2022547066000050
で置換された、C-C20アリールジイルおよびC-C20ヘテロアリールジイルからなる群から選択される)を有し;
MCglucは、式:
Figure 2022547066000051
を有し;
ここで、アルキル、アルキルジイル、アリール、アリールジイルカルボシクリル、カルボシクリルジイル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルジイル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールジイルは、F、Cl、Br、I、-CN、-CH、-CHCH、-CH=CH、-C≡CH、-C≡CCH、-CHCHCH、-CH(CH、-CHCH(CH、-CHOH、-CHOCH、-CHCHOH、-C(CHOH、-CH(OH)CH(CH、-C(CHCHOH、-CHCHSOCH、-CHOP(O)(OH)、-CHF、-CHF、-CF、-CHCF、-CHCHF、-CH(CH)CN、-C(CHCN、-CHCN、-CHNH、-CHNHSOCH、-CHNHCH、-CHN(CH、-COH、-COCH、-COCH、-COC(CH、-COCH(OH)CH、-CONH、-CONHCH、-CON(CH、-C(CHCONH、-NH、-NHCH、-N(CH、-NHCOCH、-N(CH)COCH、-NHS(O)CH、-N(CH)C(CHCONH、-N(CH)CHCHS(O)CH、-NO、=O、-OH、-OCH、-OCHCH、-OCHCHOCH、-OCHCHOH、-OCHCHN(CH、-O(CHCHO)-(CHCOH、-O(CHCHO)H、-OP(O)(OH)、-S(O)N(CH、-SCH、-S(O)CH、および-S(O)Hから独立して選択される1つ以上の基で任意に置換されている)からなる群から選択される。
本明細書において記載されるリンカーのそれぞれは、別途指定されていない限り、両方向で使用することができる。しかしながら、特定の実施態様においては、本明細書において記載されるリンカーは、ページ上で左から右に読まれるとして解釈される。
治療剤
いくつかの実施態様においては、治療剤は、免疫応答を引き出す化合物(例えば、免疫アゴニストまたはアンタゴニスト)である。特定の実施態様においては、治療剤は、パターン認識受容体(「PRR」)アゴニストである。パターン認識受容体(PRR)を活性化することができる任意の治療剤を、本発明の免疫結合体中に組み込むことができる。本明細書において使用される用語「パターン認識受容体」および「PRR」は、病原体関連分子パターン(「PAMP」)または損傷関連分子パターン(「DAMP」)を認識し、自然免疫における重要なシグナル伝達要素として作用する、保存された哺乳動物タンパク質のクラスの任意のメンバーを指す。パターン認識受容体は、膜結合型PRR、細胞質型PRR、および分泌型PRRに分類される。膜結合型PRRの例は、Toll様受容体(「TLR」)およびC型レクチン受容体(「CLR」)を含む。細胞質PRRの例は、NLRP3、Rig-I様受容体(RLR)、およびSTING(インターフェロン遺伝子の刺激因子)などのNOD様受容体(NLR)を含む。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、複数の別個のPRR治療剤を有し得る。
本発明のいくつかの免疫結合体においては、治療剤は、TLRアゴニストである。TLRアゴニストは、TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、TLR11、またはそれらの任意の組合せ(例えば、TLR7/8アゴニスト)を含む。TLRを活性化することができる任意の治療剤を、本発明の免疫結合体において利用することができる。TLRは、脊椎動物における自然免疫応答の開始に関与するI型膜貫通タンパク質である。TLRは、細菌、ウイルス、および真菌からのさまざまな病原体関連分子パターンを認識し、侵入する病原体に対する第1の防御線として作用する。TLRは、細胞発現におけるおよびそれらが脊椎動物内で開始するシグナル伝達経路における違いのため、重複するがしかし別個の生物学的応答を引き出す。いったん(例えば、自然刺激または合成TLRアゴニストによって)関与すると、TLRは、アダプタータンパク質骨髄分化一次応答遺伝子88(MyD88)を介するNF-κBの活性化およびIL-1受容体関連キナーゼ(IRAK)のリクルートにつながる、シグナル伝達カスケードを開始する。IRAKのリン酸化は、次いで、TNF受容体関連因子(TRAF)6(TRAF6)のリクルートにつながり、それは、NF-κB阻害剤I-κBのリン酸化をもたらす。結果として、NF-κBは、細胞核に入り、そのプロモーターがサイトカインなどのNF-κB結合部位を含有する遺伝子の転写を開始する。TLRシグナル伝達についての調節の追加のモードは、TRAF6のTIRドメイン含有アダプター誘導インターフェロン-β(TRIF)依存性誘導並びにTRIFおよびTRAF3を介するMyD88非依存経路の活性化を含み、これは、インターフェロン応答因子(IRF)3(IRF3)のリン酸化につながる。同様に、MyD88依存経路もまた、IRF5およびIRF7を含むいくつかのIRFファミリーメンバーを活性化するが、一方でTRIF依存経路もまた、NF-κB経路を活性化する。
TLR2アゴニストの例は、N-α-パルミトイル-S-[2,3-ビス(パルミトイルオキシ)-(2RS)-プロピル]-L-システイン、パルミトイル-Cys((RS)-2,3-ジ(パルミトイルオキシ)-プロピル)(「Pam3Cys」)、例えば、Pam3Cys、Pam3Cys-Ser-(Lys)4(「Pam3Cys-SKKKK」および「PamCSK」としても知られる)、トリアシル脂質A(「OM-174」)、リポタイコ酸(「LTA」)、ペプチドグリカン、およびCL419(S-(2,3-ビス(パルミトイルオキシ)-(2RS)プロピル)-(R)-システイニルスペルミン)を含む剤を含むが、これらに限定されない。
TLR2/6アゴニストの例は、PamCSK(S-[2,3-ビス(パルミトイルオキシ)-(2RS)-プロピル]-[R]-システイニル-[S]-セリル-[S]-リジル-[S]-リジル-[S]-リジル-[S]-リジン×3CF3COOH)である。
TLR2/7アゴニストの例は、CL572(S-(2-ミリストイルオキシエチル)-(R)-システイニル4-((6-アミノ-2-(ブチルアミノ)-8-ヒドロキシ-9H-プリン-9-イル)メチル)アニリン)、CL413(S-(2,3-ビス(パルミトイルオキシ)-(2RS)プロピル)-(R)-システイニル-(S)-セリル-(S)-リジル-(S)-リジル-(S)-リジル-(S)-リジル4-((6-アミノ-2-(ブチルアミノ)-8-ヒドロキシ-9H-プリン-9-イル)メチル)アニリン)、およびCL401(S-(2,3-ビス(パルミトイルオキシ)-(2RS)プロピル)-(R)-システイニル4-((6-アミノ-2(ブチルアミノ)-8-ヒドロキシ-9H-プリン-9-イル)メチル)アニリン)を含む。
TLR3アゴニストの例は、ポリイノシン-ポリシチジル酸(ポリ(I:C))、ポリアデニル-ポリウリジル酸(ポリ(A:U)、およびポリ(I)-ポリ(C12U)を含む。
TLR4アゴニストの例は、リポ多糖(LPS)およびモノホスホリルリピッドA(MPLA)を含む。
TLR5アゴニストの例は、フラジェリンを含む。
TLR9アゴニストの例は、一本鎖CpGオリゴデオキシヌクレオチド(CpG ODN)を含む。刺激性CpG ODNの3つの主要なクラスは、構造的特徴並びにヒト末梢血単核細胞(PBMC)、特にB細胞および形質細胞様樹状細胞(pDC)に対する活性に基づいて特定されてきた。これらの3つのクラスは、クラスA(タイプD)、クラスB(タイプK)およびクラスCである。
Nod様受容体(NLR)アゴニストの例は、iE-DAPのアシル化誘導体、D-ガンマ-Glu-mDAP、L-Ala-ガンマ-D-Glu-mDAP、C18脂肪酸鎖を有するムラミルジペプチド、ムラミルジペプチド、ムラミルトリペプチド、およびN-グリコシル化ムラミルジペプチドを含む。
RIG-I様受容体(RLR)アゴニストの例は、5’ppp-dsrna(5’-pppGCAUGCGACCUCUGUUUGA-3’(配列番号169):3’-CGUACGCUGGAGACAAACU-5’(配列番号170))、およびポリ(デオキシアデニル-デオキシチミジル)酸(ポリ(dA:dT))を含む。
細胞質ゾルDNAおよび環状ジヌクレオチドと呼ばれる独特の細菌核酸などの追加の免疫刺激化合物は、細胞質ゾルDNAセンサーとして作用し得るSTINGによって認識することができる。ADU-100は、STINGアゴニストであり得る。STINGアゴニストの非限定的な例は、サイクリック[G(2’,5’)pA(2’,5’)p](2’2’-cGAMP)、サイクリック[G(2’,5’)pA(3’,5’)p](2’3’-cGAMP)、サイクリック[G(3’,5’)pA(3’,5’)p](3’3’-cGAMP)、サイクリックジアデニル酸一リン酸(c-di-AMP)、2’,5’-3’、5’-c-diAMP(2’3’-c-di-AMP)、サイクリックジグアニル酸一リン酸(c-di-GMP)、2’,5’-3’、5’-c-diGMP(2’3’-c-di-GMP)、サイクリックジイノシン一リン酸(c-di-IMP)、サイクリックジウリジン一リン酸(c-di-UMP)、KIN700、KIN1148、KIN600、KIN500、KIN100、KIN101、KIN400、KIN2000、またはSB-9200を含み、認識することができる。
特定の実施態様においては、治療剤は、TLR7および/またはTLR8アゴニストである。TLR7および/またはTLR8を活性化することができる任意の治療剤を、本発明の免疫結合体において利用することができる。TLR7アゴニストおよびTLR8アゴニストの例は、例えば、Vacchelli et al.(本明細書において参照によりその全体が本明細書に組み込まれるOncoImmunology,2(8):e25238(2013))およびCarson et al.(本明細書において参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第2013/0165455号)によって記載されている。TLR7およびTLR8は、いずれも単球および樹状細胞で発現している。ヒトにおいては、TLR7は、形質細胞様樹状細胞(pDC)およびB細胞においても発現している。TLR8は、ほとんど骨髄由来の細胞、すなわち単球、顆粒球、および骨髄樹状細胞において発現している。TLR7およびTLR8は、ウイルスの侵入に応答する手段として、細胞内の「外来」一本鎖RNAの存在を検出することができる。TLR8アゴニストでのTLR8発現細胞の治療は、高レベルのIL-12、IFN-γ、IL-1、TNF-α、IL-6、および他の炎症性サイトカインの産生をもたらし得る。同様に、TLR7アゴニストでのpDCなどのTLR7発現細胞の刺激は、高レベルのIFN-αおよび他の炎症性サイトカインの産生をもたらし得る。TLR7/TLR8の関与およびその結果としてのサイトカイン産生は、樹状細胞および他の抗原提示細胞を活性化し、腫瘍破壊につながる多様な自然および獲得免疫応答メカニズムを促進し得る。
本明細書において記載される方法は、疎水性治療剤に特に有用である。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、疎水性治療剤は、反応速度、パーセント収率、および結合選択性が影響を受け得るように溶解度を低下させると考えられている。すなわち、本明細書において提供されるエステル部分は、疎水性治療剤の溶解性の欠如に対抗することにおいて特に有用であり得る。そのようなものとして、いくつかの実施態様においては、治療剤(すなわち、リンカーがない場合の治療剤)は、約1超の、例えば、約1.5超の、約2超の、約2.5超の、約3超の、約3.5超の、約4超の、約4.5超の、または約5超のオクタノール/水分配、log(P)を有する。特定の実施態様においては、治療剤(すなわち、リンカーがない場合の治療剤)は、3超のオクタノール/水分配、log(P)を有する。好ましい実施態様においては、治療剤(すなわち、リンカーがない場合の治療剤)は、5超のオクタノール/水分配、log(P)を有する。
本明細書において提供される方法および免疫結合体に特に有用な治療剤は、例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第2019/0015516号;国際特許出願公開WO2018/112108;並びに米国仮特許出願62/861,117号、62/819,365号、および62/724,259号中に記載されている。
免疫結合体の製剤および投与
関連する一面においては、本発明は、上記の複数の免疫結合体を含む組成物を提供する。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約1から約50の範囲である。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、例えば、約1から約10、約1から約8、または約1から約6、または約1から約4の範囲であり得る。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約0.8、1、1.2、1.4、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.6、2.8、3、3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、または4.2であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約4である。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約2である。いくつかの場合においては、抗体は、単一の治療剤に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体は、リンカーを介して2つ以上の治療剤(例えば、3つ以上、4つ以上、または5つ以上の治療剤)に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体は、リンカーを介して1~8個の治療剤(例えば、1~5、1~3、2~8、2~5、2~3、または3~8個の治療剤)に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体は、2~8個の治療剤(例えば、2~5、2~3、または3~8個の治療剤)に共有結合している。抗体が複数の治療剤に共有結合しているいくつかの場合においては、付着した治療剤は同じでありまたは異なり得る。例えば、いくつかの場合においては治療剤の2つ以上が、同じであり得る(例えば、同じ治療剤の2つの異なる分子がそれぞれ、抗体上の異なる部位で該抗体に付着し得る)。いくつかの場合においては、抗体は、2つ以上の異なる治療剤(例えば、3つ以上、4つ以上、または5つ以上の異なる治療剤)に共有結合している。例えば、本発明の免疫結合体を生成するとき、1つ以上の抗体におけるアミノ酸側鎖が治療剤-リンカー化合物と反応し、それにより、2つ以上の異なる治療剤にそれぞれ共有結合している1つ以上の免疫結合体をもたらすように、1つ以上の抗体を、2つ以上の(例えば、3つ以上の、4つ以上の、または5つ以上の)異なる治療剤-リンカー化合物を含む混合物と組み合わせ得る。
いくつかの実施態様においては、組成物はさらに、1つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む。例えば、本発明の免疫結合体は、静脈内(IV)投与または器官の体腔若しくは内腔への投与などの非経口投与用に製剤化することができる。あるいは、免疫結合体は、腫瘍内に注入することができる。注射用製剤は、一般に、薬学的に許容される担体中に溶解した免疫結合体の溶液を含むであろう。使用することができる許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水および等張塩化ナトリウムであるRinger溶液がある。加えて、滅菌固定油は、従来、溶媒または懸濁媒体として使用され得る。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激固定油を使用することができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸も同様に、注射剤の調製に使用することができる。これらの溶液は無菌であり、一般に望ましくない物質を含まない。これらの製剤は、従来の周知の滅菌技術によって滅菌することができる。製剤は、おおよその生理学的条件に求められる、pH調整および緩衝剤、毒性調整剤、例えば、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウム等、などの薬学的に許容される補助物質を含有することができる。これらの製剤中の免疫結合体の濃度は、広く異なり得、選択される特定の投与モードおよび患者の必要性に従って、主として流体体積、粘度、体重などに基づいて選択されるであろう。特定の実施態様においては、注射用の溶液製剤中の免疫結合体の濃度は、約0.1%(w/w)から約10%(w/w)の範囲であろう。
本発明は、癌を治療するおよび/または予防する方法を提供する。該方法は、治療有効量の本明細書において記載される免疫結合体(例えば、本明細書において記載される組成物としての)を、それを必要とする対象、例えば、癌を有し、癌についての治療を必要としている対象に投与することを含む。いくつかの実施態様においては、癌は、免疫アンタゴニスト(例えば、免疫受容体アンタゴニスト)である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。いくつかの実施態様においては、癌は、免疫アゴニスト(例えば、免疫受容体アゴニスト)である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。
本発明は、疾患または状態(例えば、自己免疫疾患、ウイルス感染等)を治療するおよび/または予防する方法を提供する。該方法は、治療有効量の本明細書において記載される免疫結合体(例えば、本明細書において記載される組成物としての)を、それを必要とする対象、例えば、疾患または状態(例えば、自己免疫疾患、ウイルス感染等)を有し、該疾患または状態についての治療を必要としている対象に投与することを含む。いくつかの実施態様においては、疾患または状態は、免疫アンタゴニスト(例えば、免疫受容体アンタゴニスト)である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。いくつかの実施態様においては、疾患または状態は、免疫アゴニスト(例えば、免疫受容体アゴニスト)である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。本発明の免疫結合体は、例えば腫瘍抗原の過剰発現によって特徴付けられる、さまざまな過剰増殖性疾患または障害を治療するために使用し得ることが意図される。例示的な過剰増殖性障害は、良性のまたは悪性の固形腫瘍並びに白血病およびリンパ性悪性腫瘍などの血液学的障害を含む。
別の一面においては、薬剤としての使用のための免疫結合体が、提供される。特定の実施態様においては、本発明は、有効量の免疫結合体を個体に投与することを含む、該個体を治療する方法における使用のための免疫結合体を提供する。一つのそのような実施態様においては、該方法はさらに、有効量の、例えば、本明細書において記載される、少なくとも1つの追加の治療剤を個体に投与することを含む。
さらなる一面においては、本発明は、薬剤の製造または調製における免疫結合体の使用を提供する。一つの実施態様においては、薬剤は癌の治療のためであり、該方法は、有効量の該薬剤を癌を有する個体に投与することを含む。一つのそのような実施態様においては、該方法はさらに、有効量の、例えば、本明細書において記載される、少なくとも1つの追加の治療剤を個体に投与することを含む。
癌腫は、上皮組織に由来する悪性腫瘍である。上皮細胞は、身体の外面を覆い、内部の空洞を裏打ちし、腺組織の裏打ちを形成する。癌腫の例は、腺癌(乳房、膵臓、肺、前立腺、胃、胃食道接合部、および結腸の癌などの腺(分泌)細胞において始まる癌)副腎皮質癌;肝細胞癌;腎細胞癌;卵巣癌;上皮内癌;管癌;乳房の癌腫;基底細胞癌;扁平上皮癌;移行上皮癌;結腸癌;鼻咽頭癌;多房性嚢胞性腎細胞癌;オート麦細胞癌;大細胞肺癌;小細胞肺癌;非小細胞肺癌等を含むが、これらに限定されない。癌腫は、前立腺、膵臓、結腸、脳(通常は二次転移として)、肺、乳房、および皮膚において見出し得る。いくつかの実施態様においては、非小細胞肺癌を治療する方法は、PD-L1に結合することができる抗体構築物(例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、PD-L1に結合することができる抗体構築物(例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。いくつかの実施態様においては、トリプルネガティブ乳癌を治療する方法は、PD-L1に結合することができる抗体構築物(例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。
軟部組織腫瘍は、結合組織に由来する非常に多様なまれな腫瘍のグループである。軟部組織腫瘍の例は、胞巣状軟部肉腫;血管腫様線維性組織球腫;軟骨筋酸化線維腫;骨格軟骨肉腫;骨格外粘液型軟骨肉腫;明細胞肉腫;線維形成性小円形細胞腫瘍;隆起性皮膚線維肉腫;子宮内膜間質腫瘍;ユーイング肉腫;線維腫症(デスモイド);線維肉腫、乳児;消化管間質腫瘍;骨巨細胞腫瘍;腱鞘巨細胞腫;炎症性筋線維芽細胞腫瘍;子宮平滑筋腫;平滑筋肉腫;脂肪芽細胞腫;典型的な脂肪腫;紡錘細胞または多形性脂肪腫;非定型脂肪肉腫;軟骨性脂肪腫;高分化型脂肪肉腫;粘液性/円形細胞脂肪肉腫;多形性脂肪肉腫;粘液性悪性線維性組織球腫;高悪性度の悪性線維性組織球腫;粘液線維肉腫;悪性末梢神経鞘腫瘍;中皮腫;神経芽細胞腫;骨軟骨腫;骨肉腫;原始神経外胚葉性腫瘍;胞巣状横紋筋肉腫;胚性横紋筋肉腫;良性または悪性の神経鞘腫;滑膜肉腫;エヴァンの腫瘍;結節性筋膜炎;デスモイド型線維腫症;孤立性線維性腫瘍;隆起性皮膚線維肉腫(DFSP);血管肉腫;類上皮血管内皮腫;腱鞘巨細胞腫(TGCT);色素性絨毛結節性滑膜炎(PVNS);線維性骨異形成症;粘液線維肉腫;線維肉腫;滑膜肉腫;悪性末梢神経鞘腫瘍;神経線維腫;軟部組織の多形性腺腫;並びに線維芽細胞、筋線維芽細胞、組織球、血管細胞/内皮細胞、および神経鞘細胞に由来する新生物を含むが、これらに限定されない。
肉腫は、間葉起源の細胞において、例えば、軟骨、脂肪、筋肉、血管、線維組織、または他の結合若しくは支持組織を含む、骨においてまたは体の軟部組織において発生するまれなタイプの癌である。さまざまなタイプの肉腫は、癌が形成する場所に基づいている。例えば、骨肉腫は、骨において形成し、脂肪肉腫は、脂肪において形成し、横紋筋肉腫は、筋において形成する。肉腫の例は、アスキン腫瘍;ボトリオイデス肉腫;軟骨肉腫;ユーイング肉腫;悪性血管内皮腫;悪性神経鞘腫;骨肉腫;および軟部組織肉腫(例えば、肺胞軟部肉腫;血管肉腫;嚢胞肉腫フィロデス皮膚線維肉腫隆起(DFSP);デスモイド腫瘍;線維形成性小円形細胞腫瘍;類上皮肉腫;骨格外軟骨肉腫;骨格外骨肉腫;線維肉腫;消化管間質腫瘍(GIST);血管周囲細胞腫;血管肉腫(hemangiosarcoma)(より一般的には「血管肉腫(angiosarcoma)」として呼ばれる);カポジ肉腫;平滑筋肉腫;脂肪肉腫;リンパ管肉腫;悪性末梢神経鞘腫瘍(MPNST);神経線維肉腫;滑膜肉腫;および未分化多形性肉腫)を含むが、これらに限定されない。
奇形腫は、例えば、髪、筋肉、および骨を含む、いくつかの異なるタイプの組織(例えば、内胚葉、中胚葉、および外胚葉の3つの胚葉のいずれかおよび/または全てに由来する組織を含み得る)を含有し得る胚細胞腫瘍のタイプである。奇形腫は、女性における卵巣、男性における睾丸、および子供における尾骨において最も頻繁に発生する。
黒色腫は、メラノサイト(色素メラニンを作る細胞)において始まる癌の一形態である。黒色腫は、ほくろ(皮膚黒色腫)において始まり得るが、また目においてまたは腸においてなどの他の色素性組織においても始まり得る。
メルケル細胞癌は、通常、顔、頭または首上に肌色または青みがかった赤色の結節として現れるまれなタイプの皮膚癌である。メルケル細胞癌はまた、皮膚の神経内分泌癌とも呼ばれる。いくつかの実施態様においては、メルケル細胞癌を治療する方法は、PD-L1に結合することができる抗体構築物(例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。いくつかの実施態様においては、メルケル細胞癌は、投与が起こるときに転移した。
白血病は、骨髄などの造血組織において始まり、多数の異常な血球を産生し、血流に入らせる癌である。例えば、白血病は、通常は血流において成熟する骨髄由来細胞に由来し得る。白血病は、疾患がいかに速く発症し進行するか(例えば、急性対慢性)、および影響を受ける白血球のタイプ(例えば、骨髄対リンパ球)にちなんで名付けられる。骨髄性(myeloid)白血病はまた、骨髄性(myelogenous)または骨髄芽球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病はまた、リンパ芽球性またはリンパ球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病細胞は、リンパ節において集まり得、該リンパ節は、腫れ得る。白血病の例は、急性骨髄性白血病(AML)、急性リンパ芽球性白血病(ALL)、慢性骨髄性白血病(CML)、および慢性リンパ性白血病(CLL)を含むが、これらに限定されない。
リンパ腫は、免疫系の細胞において始まる癌である。例えば、リンパ腫は、通常はリンパ系において成熟する骨髄由来細胞に由来し得る。2つの基本的なリンパ腫のカテゴリーがある。リンパ腫の1つのカテゴリーは、リードシュテルンベルク細胞と呼ばれる細胞のタイプの存在によって特徴付けられる、ホジキンリンパ腫(HL)である。現在、6つの認識されたタイプのHLがある。ホジキンリンパ腫の例は、結節性硬化症の古典的ホジキンリンパ腫(CHL)、混合細胞性CHL、リンパ球枯渇CHL、リンパ球に富むCHL、および結節性リンパ球優勢HLを含む。
リンパ腫の他のカテゴリーは、免疫系細胞の癌の大きく多様なグループを含む、非ホジキンリンパ腫(NHL)である。非ホジキンリンパ腫はさらに、緩徐進行性の(ゆっくり増殖する)経過を有する癌および攻撃的な(速く増殖する)経過を有する癌に分けることができる。現在、61個の認識されたタイプのNHLがある。非ホジキンリンパ腫の例は、エイズ関連リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、血管免疫芽球性リンパ腫、芽球性NK細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、バーキット様リンパ腫(小型非分割細胞リンパ腫)、慢性リンパ球性白血病/小リンパ球性リンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、びまん性大B細胞リンパ腫、腸症型T細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、肝脾ガンマデルタT細胞リンパ腫、T細胞白血病、リンパ芽球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、鼻T細胞リンパ腫、小児リンパ腫、末梢T細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、形質転換リンパ腫、治療関連T細胞リンパ腫、およびワルデンストレームマクログロブリン血症を含むが、これらに限定されない。
脳腫瘍は、脳組織の任意の癌を含む。脳腫瘍の例は、神経膠腫(例えば、神経膠芽腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、上衣腫等)、髄膜腫、下垂体腺腫、および前庭神経鞘腫、原始神経外胚葉性腫瘍(髄芽腫)を含むが、これらに限定されない。
本発明の免疫結合体は、治療において単独でまたは他の薬剤と組み合わせてのいずれかで使用することができる。例えば、免疫結合体は、化学療法剤などの少なくとも1つの追加の薬物と共投与し得る。そのような併用療法は、併用投与(2つ以上の薬物または治療剤は、同じまたは別個の製剤中に含まれる)、および別個の投与(その場合においては、免疫結合体の投与は、追加の治療剤および/または薬物の投与の前に、同時に、および/または後に起こり得る)を包含する。免疫結合体はまた、放射線療法と組み合わせて使用することができる。
本発明の免疫結合体(および任意の追加の治療剤)は、非経口、肺内、および鼻腔内、並びに局所治療について望まれる場合は、病巣内投与を含む任意の適切な手段によって投与することができる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与を含む。投薬は、投与が短時間であるかまたは慢性であるかに部分的に依存して、任意の適切な経路によって、例えば、静脈内または皮下注射などの注射によってであり得る。本明細書においては、さまざまな時点にわたる単回のまたは複数回の投与、ボーラス投与、およびパルス注入を含むがこれらに限定されないさまざまな投薬スケジュールが意図されている。
アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターは、癌、特に乳癌、特にトリプルネガティブ(エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、および過剰のHER2タンパク質について試験陰性)乳癌、膀胱癌、およびメルケル細胞癌の治療において有用であることが知られている。本明細書において記載される免疫結合体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターと同じタイプの癌、特に乳癌、特にトリプルネガティブ(エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、および過剰のHER2タンパク質について試験陰性)乳癌、膀胱癌、およびメルケル細胞癌を治療するために使用することができる。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が乳癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。乳癌は、乳房における異なる領域に由来し得、多くの異なるタイプの乳癌が特徴付けられてきた。例えば、本発明の免疫結合体は、非浸潤性(in situ)腺管癌腫;浸潤性腺管癌腫(例えば、管状癌腫;髄様癌腫;粘液性癌腫;乳頭癌腫;または乳房の篩状癌腫);非浸潤性(in situ)小葉癌腫;浸潤性小葉癌腫;炎症性乳癌;および他の形態の乳癌を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、HER2に結合することができる抗体構築物(例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が胃癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。胃(Gastric)(胃(stomach))癌は、胃における異なる細胞に由来し得、腺癌、カルチノイド腫瘍、扁平上皮癌、小細胞癌、平滑筋肉腫、および胃腸間質腫瘍を含む、いくつかのタイプの胃癌が特徴付けられてきた。いくつかの実施態様においては、胃癌を治療する方法は、HER2に結合することができる抗体構築物(例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が胃食道接合部癌腫である、上記の癌を治療する方法を提供する。この癌腫は、食道が胃を肉にする(meats)領域において発生する。3つのタイプの胃食道接合部癌腫がある。タイプ1においては、癌は、上から下に胃食道接合部の中に増殖する。食道の下端の通常の裏打ちは、突然変異(バレット食道とも呼ばれる)によって置き換えられる。タイプ2においては、癌は、胃食道接合部でそれ自体で増殖する。タイプ3においては、癌は、胃から上向きに胃食道接合部の中に増殖する。いくつかの実施態様においては、胃食道接合部癌腫を治療する方法は、HER2に結合することができる抗体構築物(例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター)を含有する免疫結合体を投与することを含む。
本発明のいくつかの実施態様は、ラベツズマブ、PR1A3、MFE-23、SM3E、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターと同じタイプの癌、特に結腸癌、肺癌、腎癌、膵臓癌、胃癌、および食道癌、特にCEAを過剰発現する結腸癌、肺癌、腎癌、膵臓癌、胃癌、および食道癌を治療する方法を提供する。好ましい実施態様においては、本明細書において記載される免疫結合体は、結腸癌を治療するために使用し得る。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が頭頸部癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。頭頸部癌(並びに頭頸部扁平上皮細胞癌腫)は、口腔、咽頭および喉頭、唾液腺、副鼻腔、および鼻腔、並びに頸部上部のリンパ節の扁平上皮細胞癌腫によって特徴付けられるさまざまな癌を指す。頭頸部癌は、米国における全ての癌の約3から5パーセントを占める。これらの癌は、男性および50歳超の人においてより一般的である。タバコ(無煙タバコを含む)およびアルコールの使用は、頭頸部癌、特に、口腔、中咽頭、下咽頭および喉頭の癌について、最も重要な危険因子である。頭頸部癌の85%は、タバコの使用に関連している。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が乳癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。乳癌は、乳房の異なる領域に由来し得、多くの異なるタイプの乳癌が特徴付けられてきた。例えば、本発明の免疫結合体は、非浸潤性(in situ)腺管癌腫;浸潤性腺管癌腫(例えば、管状癌腫;髄様癌腫;粘液性癌腫;乳頭癌腫;または乳房の篩状癌腫)、非浸潤性(in situ)小葉癌腫;浸潤性小葉癌腫;炎症性乳癌;および他の形態の乳癌を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、EGFRに結合することができる抗体(例えば、セツキシマブ)を含有する免疫結合体を投与することを含む。
免疫結合体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターについて利用される投薬レジメンなどの任意の適切な投薬レジメンを使用して、それを必要とする対象に任意の治療有効量で投与される。例えば、該方法は、約100ng/kgから約50mg/kg(対象の体重に基づいて)の用量を対象に提供するように免疫結合体を投与することを含み得る。免疫結合体の用量は、約5mg/kgから約50mg/kg、約10μg/kgから約5mg/kg、または約100μg/kgから約1mg/kgの範囲であり得る。免疫結合体の用量は、約100、200、300、400、または500μg/kgであり得る。免疫結合体の用量は、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10mg/kgであり得る。免疫結合体の用量はまた、特定の結合体並びに治癒される癌の種類および重症度に応じて、これらの範囲外であり得る。投与頻度は、1週間あたり単回投与から複数回投与までの範囲であるか、またはより頻繁であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、1ヶ月あたり約1回から1週間あたり約5回投与される。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、1週間あたり1回投与される。
別の一面においては、本発明は、癌を予防する方法を提供する。該方法は、治療有効量の免疫結合体(例えば、上記の組成物としての)を、それを必要とする対象に投与することを含む。特定の実施態様においては、対象は予防されるべき特定の癌にかかりやすい。例えば、本方法は、約100ng/kgから約50mg/kg(対象の体重に基づいて)の用量を対象に提供するように免疫結合体を投与することを含み得る。免疫結合体の用量は、約5mg/kgから約50mg/kg、約10μg/kgから約5mg/kg、または約100μg/kgから約1mg/kgの範囲であり得る。免疫結合体の用量は、約100、200、300、400、または500μg/kgであり得る。免疫結合体の用量は、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10mg/kgであり得る。免疫結合体の用量はまた、特定の結合体並びに治療される癌の種類および重症度に応じて、これらの範囲外であり得る。投与頻度は、1週間あたり単回投与から複数回投与までの範囲であるか、またはより頻繁であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、1ヶ月あたり約1回から1週間あたり約5回投与される。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、1週間あたり1回投与される。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が乳癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。乳癌は、乳房の異なる領域に由来し得、多くの異なるタイプの乳癌が特徴付けられてきた。例えば、本発明の免疫結合体は、非浸潤性(in situ)乳管癌腫;浸潤性乳管癌腫(例えば、管状癌腫;髄様癌腫;粘液性癌腫;乳頭癌腫;または乳房の篩状癌腫);非浸潤性(in situ)小葉癌腫;浸潤性小葉癌腫;炎症性乳癌;およびトリプルネガティブ(エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、および過剰のHER2タンパク質について試験陰性)乳癌などの他の形態の乳癌を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、HER2(例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、バイオシミラー、またはそれらのバイオベター)またはPD-L1(例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、バイオシミラー、またはそれらのバイオベター)に結合することができる抗体構築物を含有する免疫結合体を投与することを含む。
いくつかの実施態様においては、癌は、TLR7および/またはTLR8によって誘導される炎症誘発性応答に感受性である。
実施態様
本明細書において記載される本主題の実施態様を含む一面は、1つ以上の他の面または実施態様と共に、単独でまたは組み合わせて、有益であるかもしれない。前述の説明を限定することなく、1~27と番号付けされた本開示の特定の非限定的な一面が以下に提供される。この開示を読むと当業者に明らかであろうように、個々に番号付けされた一面のそれぞれは、使用されるかもしれないし、先行するまたは後続する個々に番号付けされた一面の任意のものと組み合わせられるかもしれない。これは、全てのそのような一面の組合せのための支持を提供することが意図されるものであり、以下に明示的に提供される一面の組合せに限定されない。
1. 免疫結合体を製造する方法であって、該方法が1つ以上の式I:
Figure 2022547066000052
の化合物またはその塩、および式II:
Figure 2022547066000053
の抗体構築物またはその塩
(ここで、式IIは、該抗体構築物の1つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000054
を有する抗体構築物である)
を組み合わせて、
式III:
Figure 2022547066000055
(式中、
TAは、治療剤であり、
Lは、リンカーであり、
rは、1から50の整数であり、
Arは、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000056
およびそれらの塩から選択される第1の置換基を含む芳香族部分であり、
各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、
各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、
Yは、CH、PEG、または結合であり、
nは、1から4の整数であり、
PEGは、式:
-(CHCHO)-(CH
(式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)
の免疫結合体またはその塩を提供することを含む、方法。
2. Arが-F、-Cl、-Br、-I、-CR、-OR、-C(O)R、-C(O)OR、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
Figure 2022547066000057
(式中、各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、
各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、
Yは、CH、PEG、または結合であり、
nは、1から4までの整数であり、
PEGは、式:
-(CHCHO)-(CH
(式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)、
それらの塩、およびそれらの組合せから選択される1つ以上の追加の置換基をさらに含む、態様1の方法。
3. 第1の置換基が-NO、-SOH、-CN、およびそれらの塩から選択される、態様1または態様2の方法。
4. 第1の置換基が-SOHまたはその塩である、態様1~3のいずれか一つの方法。
5. 1つ以上の追加の置換基が-F、-Cl、-Br、-I、-NO、-SOH、-CN、およびそれらの塩から選択される、態様2~4のいずれか一つの方法。
6. 1つ以上の追加の置換基が-F、-Cl、-Br、および-Iから選択される、態様2~5のいずれか一つの方法。
7. Arが式:
Figure 2022547066000058
Figure 2022547066000059
Figure 2022547066000060
Figure 2022547066000061
Figure 2022547066000062
Figure 2022547066000063
Figure 2022547066000064
Figure 2022547066000065
Figure 2022547066000066
またはその塩である、態様1~6のいずれか一つの方法。
8. rが1から10の整数である、態様1~7のいずれか一つの方法。
9. rが1から4の整数である、態様1~8のいずれか一つの方法。
10. リンカーが少なくとも1つのエチレングリコール単位を含む、態様1~9のいずれか一つの方法。
11. リンカーが少なくとも5つのエチレングリコール単位を含む、態様1~10のいずれか一つの方法。
12. 治療剤が免疫アゴニストである、態様1~11のいずれか一つの方法。
13. 治療剤がTLRアゴニストである、態様1~11のいずれか一つの方法。
14. TLRアゴニストがTLR7アゴニスト、TLR8アゴニスト、およびTLR7/TLR8アゴニストからなる群から選択される、態様13の方法。
15. 治療剤が免疫アンタゴニストである、態様1~11のいずれか一つの方法。
16. 抗体構築物が抗体である、態様1~15のいずれか一つの方法。
17. 抗体がIgG1抗体である、態様16の方法。
18. 抗体構築物がCCR8、CDH1、CD19、CD20、CD24、CD29、CD30、CD38、CD40、CD47、EpCAM、MUC1、MUC16、MSLN、PD-L1、EGFR、VEGF、HER2、SLAMF7、PDGFRa、gp75、TROP2、PSMA、5T4、ANGPT2、ANPEP、B7H3、B7H4、BCMA、CA9、CD125、CD37、CD74、CLDN3、CLEC11A、CLEC5A、CLEC6A、CTAG1B、CTAL4、EPHA2、EPHA4、FGFR3、FOLR1、GD2、GPC3、GPNMB、HLA-DRA、IL-13、IL3RA2、KITLG、L1CAM、LAG3、Lewis-Y抗原、LILRB1、LRRC15、MAGEA3、MAGEA6、MUC1、MUC16、NOTCH、NRP1、NY-ESO-1、P2RX7、PCD1、PSCA、PVRIG、ROR1、SIGLEC10、SIGLEC11、SIGLEC12、SIGLEC14、SIGLEC15、SIGLEC5、SIGLEC6、SIGLEC7、SIGLEC8、SIGLEC9、SIRPA、SLAMF7、SLC39A6、TNFSF10、およびWT1からなる群から選択される抗原に結合する抗原結合ドメインを含む、態様1~17のいずれか一つの方法。
19. 態様1~18のいずれか一つの方法から製造される免疫結合体またはその塩。
20. 態様1~18のいずれか一つの方法から製造される複数の免疫結合体またはそれらの塩を含む組成物。
21. 治療有効量の態様19に記載の免疫結合体若しくはその塩または態様20に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、疾患または状態を治療するまたは予防する方法。
22. 治療有効量の態様19に記載の免疫結合体若しくはその塩または態様20に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、癌を治療するまたは予防する方法。
23. 疾患または状態が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様21の方法。
24. 疾患または状態が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様21の方法。
25. 癌が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様22の方法。
26. 癌が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様22の方法。
27. 癌がTLR7および/またはTLR8アゴニズムによって誘導される炎症誘発性応答に感受性である、態様22の方法。
以下の実施例は、本発明をさらに例示するが、もちろん、いかなる方法でもその範囲を制限するものとして解釈されるべきでない。
実施例1:cLogP計算
この実施例は、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP;Ar59)またはスルホ-ジクロロフェニルエステル(SDP;Ar32)を有する治療剤リンカー化合物が、S-TFP、SDP、およびTFPのcLogP計算によって証明されるように、テトラフルオロフェニルエステル(TFPエステル)を有する治療剤リンカー化合物よりも高い水溶性を有するはずであることを示す。
LogP値は、n-オクタノールと水との間の化合物分配係数の対数評価、すなわち、log(cオクタノール/c)を指す。すなわち負のLogP値は、化合物が水中に分配される可能性がより高いこと、すなわち、オクタノール中よりも水中に溶けやすいことを示す。cLogPは、その化学組成に基づいて化合物の親水性を評価するために利用する理論計算である。
TFP、S-TFP、およびSDPについてのcLogP値は、ChemDrow(商標)を使用して計算し、得られたcLogP値を、以下に示す。
Figure 2022547066000067
上に示されるように、TFPは正のcLogP値を有し、これは、TFPが疎水性であり、水よりもオクタノール中に分配される可能性がより高いことを示す。対照的に、S-TFPおよびSDPは負のcLogP値を有し、これは、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP)またはスルホ-ジクロロフェニルエステル(SDP)を有する治療剤リンカー化合物がテトラフルオロフェニルエステル(TFPエステル)を有する治療剤リンカー化合物よりも高い水溶性を有するはずであることを示す。さらに、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP)についてのcLogP値は、スルホ-ジクロロフェニルエステル(SDP)よりも負であり、これは、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP)を有する治療剤リンカー化合物がスルホテトラフルオロフェニルエステル(S-TFP)を有する治療剤リンカー化合物よりも高い水溶性を有するはずであることを示す。
実施例2:安定性分析
この実施例は、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP;Ar59)を有する治療剤リンカー化合物が、結合緩衝液中でのその加水分解不安定性によって証明されるように、テトラフルオロフェニルエステル(TFPエステル)を有する治療剤リンカー化合物よりも反応性が高いことを示す。
スルホ-テトラフルオロフェニルエステルを有する治療剤リンカー化合物(S-TFPリンカーTA)またはテトラフルオロフェニルエステルを有する治療剤リンカー化合物(TFPリンカーTA)の25mM溶液を、1mLバイアル中で106μLのジメチルアセトアミド(DMA)を対応する治療剤リンカー化合物に加えることによって調製した。得られた溶液を、室温で撹拌した。15μLのS-TFPリンカーTA溶液およびTFPリンカーTAを、0.9mLのホウ酸塩緩衝液(pH8.3)を含有する2つの別個のバイアルに加えた。得られた結合緩衝溶液を、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を使用して、0時間、2時間、5時間、および25時間時に別々にモニターした。S-TFPリンカーTAおよびTFPリンカーTAの相対量(面積%)を、図1中に示すように時間の関数としてプロットした。
図1中に提示するデータによって示されるように、TFPリンカーTAは、治療剤リンカー化合物の高い面積%によって証明されるように、測定した全ての時点でS-TFPリンカーTAよりも加水分解的に安定である。TFPリンカーTAはS-TFPリンカーTAよりも加水分解的に安定であるため、S-TFPリンカーTAは、TFPリンカーTAよりも反応性が高いはずである。
実施例3:結合プロファイル分析
この実施例は、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP;Ar59)およびスルホ-ジクロロフェニルエステル(SDP;Ar32)が、テトラフルオロフェニルエステル(TFPエステル)とは異なる結合プロファイルを提供することを示す。
トラスツズマブを、G-25 SEPHADEX(商標)脱塩カラム(Sigma-Aldrich)を使用して、pH8.3で100mMのホウ酸、50mMの塩化ナトリウム、1mMのエチレンジアミン四酢酸を含有する結合緩衝液中で緩衝液交換した。次いで、溶出液を、緩衝液を使用してそれぞれ6mg/mlに調整し、滅菌ろ過した。6mg/mlのトラスツズマブを、30℃に予熱し、エステルTFP、NHS、S-TFP、およびSDPのそれぞれで終端された8モル当量の治療剤/リンカー部分と急速に混合した。
Figure 2022547066000068
反応を30℃で16時間進行させ、得られた免疫結合体を、pH7.2のPBS中で平衡化した2つの連続するG-25脱塩カラムを通すことによって反応物から分離した。得られた免疫結合体を、50mM Tris中2mg/mlとなるように緩衝液交換し、最終容量を20μLとした。緩衝液交換した溶液に10μLの50mMストックジチオスレイトールを加え、得られた混合物をシェーカー上で37℃で60分間インキュベートした。軽鎖(LC)および重鎖(HC)のペプチドマッピングを、XEVO(商標)G2-XS TOF質量分析計(Waters Corporation)に接続したACQUITY(商標) UPLC Hクラスシステム(Waters Corporation)上のC4逆相カラム上に分解したサンプルを注入することによって行った。特定の結合残基、およびそれらの相対的な存在量を、サンプルをC4逆相カラム上に注入する前に、還元された免疫結合体をトリプシンでさらに分解することによって決定した。結合の結果を、図2中に提供する。
図2中に提示するデータによって実証されるように、S-TFPおよびSDPとの結合は、TFPとの結合と比較して、重鎖に対する選択性(すなわち、パーセント結合)における増加をもたらした。重鎖結合の量(すなわち、約65%から75%)は、NHSエステルとの結合と同様である。しかしながら、相対的な不安定性のため、NHS結合は、所望の免疫結合体収率が低下した。さらに、S-TFPおよびSDPは、LC K188での結合が大幅に低下した。
これらの結果は、実施例1および2の結論、すなわち、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP;Ar59)またはスルホ-ジクロロフェニルエステル(SDP;Ar32)を有する治療剤リンカー化合物がそれらの溶解性および/またはそれらの反応性の結果として有意に異なる反応性パターンを有するということを支持する。
実施例4:溶解度分析
この実施例は、スルホ-テトラフルオロフェニルエステル(S-TFP;Ar59)エステルとの結合から形成された免疫結合体の組成物の平均治療剤対抗体比に対する治療剤/リンカー部分の溶解度の効果を示す。
トラスツズマブを、G-25 SEPHADEX(商標)脱塩カラム(Sigma-Aldrich)を使用して、pH8.3で100mMのホウ酸、50mMの塩化ナトリウム、および1mMのエチレンジアミン四酢酸を含有する結合緩衝液中で緩衝液交換した。次いで、溶出液を、緩衝液を使用してそれぞれ6mg/mlのトラスツズマブに調整した。得られた混合物を、滅菌濾過し、30℃に予熱し、S-TFPで終端された8モル当量の治療剤/リンカー部分および特定のパーセント(すなわち、9v/v%または16v/v%)のジメチルアセトアミド(DMA)またはジメチルスルホキシド(DMSO)を含有する緩衝溶液と迅速に混合した。表1において概説するように、治療剤/リンカー部分溶液の濁度および得られた免疫結合体の治療剤対抗体比を測定した。
Figure 2022547066000069
表1において示す結果によって実証されるように、治療剤/リンカー部分の溶解度は、得られる免疫結合体の治療剤対抗体比に対して決定的な役割を果たす。表1における結果から明らかなように、溶解度が増加する(すなわち、濁度が減少する)につれて、平均治療剤対抗体比が増加する。
本明細書において引用される刊行物、特許出願、および特許を含む全ての参考文献は、それぞれの参考文献が参照により組み込まれることが個別にかつ具体的に示され、その全体が本明細書において記載されているかのように、同じ程度に参照により本明細書に組み込まれる。
本発明を説明する文脈における(特に、以下の特許請求の範囲の文脈における)用語「a」および「an」および「the」および「少なくとも1つの」並びに類似の指示対象の使用は、本明細書において別途示されない限りまたは文脈と明確に矛盾しない限り、単数および複数の両方をカバーするものと解釈されるべきである。1つ以上の項目のリストに伴われる用語「少なくとも1つ」(例えば、「AおよびBの少なくとも1つ」)の使用は、本明細書において別途示されない限りまたは文脈と明確に矛盾しない限り、列挙された項目から選択される1つの項目(A若しくはB)、または列挙された項目の2つ以上の任意の組合せ(AおよびB)を意味すると解釈されるべきである。用語「含む(comprising)」、「有する(having)」、「含む(including)」、および「含有する(containing)」は、別途記載のない限り、オープンエンド用語(すなわち、「含むが、限定されない」を意味する)として解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の列挙は、本明細書において別途示されない限り、単に、範囲内に入る各別個の値に個別に言及する簡略化方法として役立つことが意図され、それぞれの別個の値は、本明細書において個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。本明細書において記載される全ての方法は、本明細書において別途示されない限りまたは文脈によって明確に矛盾しない限り、任意の好適な順序で実施することができる。本明細書において提供される任意のおよび全ての実施例、または例示的な文言(例えば、「など」)の使用は、単に本発明をよりよく明確化することが意図されるものであり、別途特許請求の範囲で請求されない限り、本発明の範囲に制限を課すものではない。本明細書中のいかなる文言も、本発明の実施に必須の非請求のいかなる要素を示すものとしても解釈されるべきではない。
本発明者らに既知の本発明を実施するための最良の様式を含む、本発明の好ましい実施態様が、本明細書において記載されている。これらの好ましい実施態様の変形例は、前述の説明を読むと、当業者には明らかとなるであろう。本発明者らは、当業者が適宜そのような変形例を使用することを期待しており、本発明者らは、本明細書において具体的に記載されているのとは別の方法で本発明が実施されることを意図している。従って、この発明は、適用可能な法律によって認められるように本明細書に添付の特許請求の範囲に記載された主題の全ての修飾物および均等物を含む。さらに、本明細書において別途示されない限りまたは文脈によって明確に矛盾しない限り、その全ての可能な変形例における上記の要素の任意の組合せが、本発明に包含される。

Claims (27)

  1. 免疫結合体を製造する方法であって、該方法が1つ以上の式I:
    Figure 2022547066000070

    の化合物またはその塩、および式II:
    Figure 2022547066000071

    の抗体構築物またはその塩
    (ここで、式IIは、該抗体構築物の1つ以上のリジン残基を表す残基
    Figure 2022547066000072

    を有する抗体構築物である)
    を組み合わせて、
    式III:
    Figure 2022547066000073

    (式中、
    TAは、治療剤であり、
    Lは、リンカーであり、
    rは、1から50の整数であり、
    Arは、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
    Figure 2022547066000074

    およびそれらの塩から選択される第1の置換基を含む芳香族部分であり
    各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、
    各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、
    Yは、CH、PEG、または結合であり、
    nは、1から4の整数であり、
    PEGは、式:
    -(CHCHO)-(CH
    (式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)
    の免疫結合体またはその塩を提供することを含む、方法。
  2. Arが-F、-Cl、-Br、-I、-CR、-OR、-C(O)R、-C(O)OR、PEG、-SOCX、-NR 、-NO、-SOR、-SOR、-CN、-CX、-PO、-OPO
    Figure 2022547066000075

    (式中、各Rは独立して、H、CX、またはC-Cアルキルであり、
    各Xは独立して、水素またはハロゲンであり、
    Yは、CH、PEG、または結合であり、
    nは、1から4までの整数であり、
    PEGは、式:
    -(CHCHO)-(CH
    (式中、pは、1から5の整数であり、mは、2から50の整数である)を有する)、
    それらの塩、およびそれらの組合せから選択される1つ以上の追加の置換基をさらに含む、請求項1の方法。
  3. 第1の置換基が-NO、-SOH、-CN、およびそれらの塩から選択される、請求項1または請求項2の方法。
  4. 第1の置換基が-SOHまたはその塩である、請求項1~3のいずれか一項の方法。
  5. 1つ以上の追加の置換基が-F、-Cl、-Br、-I、-NO、-SOH、-CN、およびそれらの塩から選択される、請求項2~4のいずれか一項の方法。
  6. 1つ以上の追加の置換基が-F、-Cl、-Br、および-Iから選択される、請求項2~5のいずれか一項の方法。
  7. Arが式:
    Figure 2022547066000076

    Figure 2022547066000077

    Figure 2022547066000078

    Figure 2022547066000079

    Figure 2022547066000080

    Figure 2022547066000081

    Figure 2022547066000082

    Figure 2022547066000083

    Figure 2022547066000084

    またはその塩である、請求項1~6のいずれか一項の方法。
  8. rが1から10の整数である、請求項1~7のいずれか一項の方法。
  9. rが1から4の整数である、請求項1~8のいずれか一項の方法。
  10. リンカーが少なくとも1つのエチレングリコール単位を含む、請求項1~9のいずれか一項の方法。
  11. リンカーが少なくとも5つのエチレングリコール単位を含む、請求項1~10のいずれか一項の方法。
  12. 治療剤が免疫アゴニストである、請求項1~11のいずれか一項の方法。
  13. 治療剤がTLRアゴニストである、請求項1~11のいずれか一項の方法。
  14. TLRアゴニストがTLR7アゴニスト、TLR8アゴニスト、およびTLR7/TLR8アゴニストからなる群から選択される、請求項13の方法。
  15. 治療剤が免疫アンタゴニストである、請求項1~11のいずれか一項の方法。
  16. 抗体構築物が抗体である、請求項1~15のいずれか一項の方法。
  17. 抗体がIgG1抗体である、請求項16の方法。
  18. 抗体構築物がCCR8、CDH1、CD19、CD20、CD24、CD29、CD30、CD38、CD40、CD47、EpCAM、MUC1、MUC16、MSLN、PD-L1、EGFR、VEGF、HER2、SLAMF7、PDGFRa、gp75、TROP2、PSMA、5T4、ANGPT2、ANPEP、B7H3、B7H4、BCMA、CA9、CD125、CD37、CD74、CLDN3、CLEC11A、CLEC5A、CLEC6A、CTAG1B、CTAL4、EPHA2、EPHA4、FGFR3、FOLR1、GD2、GPC3、GPNMB、HLA-DRA、IL-13、IL3RA2、KITLG、L1CAM、LAG3、Lewis-Y抗原、LILRB1、LRRC15、MAGEA3、MAGEA6、MUC1、MUC16、NOTCH、NRP1、NY-ESO-1、P2RX7、PCD1、PSCA、PVRIG、ROR1、SIGLEC10、SIGLEC11、SIGLEC12、SIGLEC14、SIGLEC15、SIGLEC5、SIGLEC6、SIGLEC7、SIGLEC8、SIGLEC9、SIRPA、SLAMF7、SLC39A6、TNFSF10、およびWT1からなる群から選択される抗原に結合する抗原結合ドメインを含む、請求項1~17のいずれか一項の方法。
  19. 請求項1~18のいずれか一項の方法から製造される免疫結合体またはその塩。
  20. 請求項1~18のいずれか一項の方法から製造される複数の免疫結合体またはそれらの塩を含む組成物。
  21. 治療有効量の請求項19に記載の免疫結合体若しくはその塩または請求項20に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、疾患または状態を治療するまたは予防する方法。
  22. 治療有効量の請求項19に記載の免疫結合体若しくはその塩または請求項20に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、癌を治療するまたは予防する方法。
  23. 疾患または状態が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項21の方法。
  24. 疾患または状態が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項21の方法。
  25. 癌が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項22の方法。
  26. 癌が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項22の方法。
  27. 癌がTLR7および/またはTLR8アゴニズムによって誘導される炎症誘発性応答に感受性である、請求項22の方法。
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