JP2022547066A - 免疫結合体合成方法 - Google Patents

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Abstract

本発明は、免疫結合体を製造する方法であって、該方法が１つ以上の式Ｉの化合物および式ＩＩの抗体構築物を組み合わせて式ＩＩＩの免疫結合体を提供することを含む方法を提供する（式中、ＴＡは、治療剤であり、Ｌは、リンカーであり、ｒは、１から５０の整数であり、Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、【化１】JPEG2022547066000085.jpg4051およびそれらの塩から選択される置換基を含む芳香族部分であり、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、ｎは、１から４の整数であり、ＰＥＧは、式：－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－（式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）。本発明はまた、前記方法から形成される免疫結合体および免疫結合体の組成物を提供する。【化２】JPEG2022547066000086.jpg23119【選択図】図１

Description

関連出願への相互参照
本出願は、２０１９年９月４日付で出願された米国仮特許出願６２／８９５，８０１号、および２０１９年９月２７日付で出願された米国仮特許出願６２／９０７，１３６号の優先権を主張し、それらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
電子的に提出された資料の参照による組み込み
本明細書と同時に提出され、以下のように２０２０年９月３日に作成された「７５０５３３＿ＳＴ２５．ｔｘｔ，」と名付けられた１つの１０２，８８８バイトのＡＳＣＩＩ（Ｔｅｘｔ）ファイルとして特定されるコンピュータ可読ヌクレオチド／アミノ酸配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
発明の背景
残念ながら、免疫系は、しばしば癌並びに他の疾患および状態の増殖および広まりを制御することができない。抗体および免疫治療剤は、癌および疾患の制御において免疫系を支援する効果的な治療法であると示されてきた。抗腫瘍抗体および治療剤の同時送達は、腫瘍を治療し、癌患者および他の対象についての治療オプションを拡大するのに効果的であり得る。さらに、抗体および治療剤（すなわち、免疫アゴニストまたは免疫アンタゴニスト）の同時送達は、ウイルス、細菌、または寄生虫によって引き起こされる感染症、および自己免疫疾患などの疾患、状態、および障害を治療するのに効果的であり得る。
抗体および免疫治療剤を同時に送達するための効果的な方法は、抗体および治療剤を結合させて免疫結合体を形成させることによる。そのような免疫結合体を製造するために使用することができるいくつかの方法がある。
免疫結合体を製造するために使用することができる方法の例は、当技術分野においてよく知られている。治療剤は、タンパク質修飾のためのさまざまな化学を使用して抗体に共有結合させることができ、ここで、連結部分は、タンパク質官能基（すなわち、アミノ酸側鎖）の反応性リンカー基を有する試薬との反応から生じる。多種多様なそのような試薬が、当技術分野において知られている。そのような試薬の例は、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステルおよびＮ－ヒドロキシスルホスクシンイミジル（スルホ－ＮＨＳ）エステル（アミン反応性）；カルボジイミド（アミンおよびカルボキシル反応性）；ヒドロキシメチルホスフィン（アミン反応性）；マレイミド（チオール反応性）；Ｎ－ヨードアセトアミドなどのハロゲン化アセトアミド（チオール反応性）；アリールアジド（一級アミン反応性）；フッ素化アリールアジド（炭素－水素（Ｃ－Ｈ）挿入を介して反応性）；ペンタフルオロフェニル（ＰＦＰ）エステル（アミン反応性）；テトラフルオロフェニル（ＴＦＰ）エステル（アミン反応性）；イミドエステル（アミン反応性）；イソシアネート（ヒドロキシル反応性）；ビニルスルホン（チオール、アミン、およびヒドロキシル反応性）；ピリジルジスルフィド（チオール反応性）；およびベンゾフェノン誘導体（Ｃ－Ｈ結合挿入を介して反応性）を含むが、これらに限定されない。さらなる試薬は、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，２００８中に記載されている試薬を含むが、これらに限定されない。
１つの特定の参考文献、すなわち、米国特許第８，７４１，２９１号（「‘２９１特許」）は、タンパク質またはペプチドの抗体への結合における使用のためのハロゲン化エステル（例えば、ＴＦＰおよびＰＦＰエステル）を開示する。‘２９１特許は、結合法が、部位選択性の追加の利点を提供し、軽鎖カッパドメイン定常領域（ＣＬκ）のＫ８０（ＫａｂａｔナンバリングによるＫ１８８）の側鎖に少なくとも約５０％の結合をもたらすことを説明する。しかしながら、‘２９１特許において開示される該方法は、小さなペプチドおよびタンパク質を超えて拡張されるとき、溶解性に関連する欠点（例えば、反応の速度、選択性、収率等）に見舞われ得る。
すなわち、免疫結合体を製造する新しい方法の必要性が残っている。本発明は、このおよび他の必要性に対処する。
本発明は、治療剤および抗体構築物の免疫結合体を製造する方法を提供する。該方法は、１つ以上の式Ｉ：
Figure 2022547066000002
の化合物またはその塩、および式ＩＩ：
Figure 2022547066000003
の抗体構築物またはその塩
（ここで、式ＩＩは、（Ａｂが該抗体構築物の残部を表すように）該抗体構築物の１つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000004
を有する抗体構築物である）
を組み合わせて、
式ＩＩＩ：
Figure 2022547066000005
（式中、ＴＡは、治療剤であり、Ｌは、リンカーであり、ｒは、１から５０の整数であり、Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000006
およびそれらの塩から選択される置換基を含む芳香族部分であり、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、ｎは、１から４の整数であり、ＰＥＧは、式：－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－（式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）
の免疫結合体またはその塩を提供することを含む。
本発明はまた、本発明の製造方法に従って製造される免疫結合体、並びにそのような免疫結合体を含む組成物を提供する。
本発明はさらに、治療有効量の本発明による免疫結合体または組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む、癌を治療するまたは予防する方法を提供する。
図１は、実施例２において記載される、スルホテトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰリンカーＴＡ）を有する治療剤リンカー化合物およびテトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰリンカーＴＡ）を有する治療剤リンカー化合物のＤＭＡ緩衝溶液中での加水分解安定性を示す、時間（時間）対面積（％）のグラフである。 図２は、実施例３において記載される、テトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）、スルホテトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ）、およびスルホジクロロフェニルエステル（ＳＤＰ）との結合から形成された免疫結合体についての、軽鎖（ＬＣ）、重鎖（ＨＣ）、および軽鎖のリジン１８８（ＬＣ Ｋ１８８）に結合した、パーセントで測定した結合プロファイルを示す棒グラフである。
発明の詳細な説明
全般
本発明は、免疫結合体を製造する方法であって、該方法が１つ以上の式Ｉ：
Figure 2022547066000007
の化合物またはその塩、および式ＩＩ：
Figure 2022547066000008
の抗体構築物またはその塩
（ここで、式ＩＩは、（Ａｂが該抗体構築物の残部を表すように）該抗体構築物の１つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000009
を有する抗体構築物である）
を組み合わせて、
式ＩＩＩ：
Figure 2022547066000010
（式中、
ＴＡは、治療剤であり、
Ｌは、リンカーであり、
ｒは、１から５０の整数であり、
Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000011
およびそれらの塩から選択される置換基を含む芳香族部分であり、
各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、
ｎは、１から４の整数であり、
ＰＥＧは、式：
－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－
（式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）
の免疫結合体またはその塩を提供することを含む方法を提供する。
本明細書において記載される免疫結合体を作製する方法の有効性は、治療剤をリンカーを介して抗体構築物に結合させることができる効率および／または選択性の観点から考えることができる。該方法を促進するために利用するエステル部分は、反応性、溶解性、および／または安定性の好ましい組合せを可能にして所望の免疫結合体または免疫結合体の組成物を提供する、特定の電子的および／または立体的特性を有する。
定義
本明細書において使用される用語「免疫結合体」は、本明細書において記載される天然に存在しない化学部分に共有結合している、抗体構築物、または抗体を指す。用語「免疫結合体」は、本明細書において互換的に使用される。
本明細書において使用される句「抗体構築物」は、抗原結合ドメインおよびＦｃドメインを含むポリペプチドを指す。抗体構築物は、抗体を含むかまたは抗体であり得る。
本明細書において使用される句「抗原結合ドメイン」は、特定の抗原（例えば、パラトープ）に、例えば、抗原と相互作用し、抗原結合タンパク質上に該抗原に対するその特異性および親和性を与えるアミノ酸残基を含有する抗原結合タンパク質のその部分に、特異的に結合する、タンパク質、またはタンパク質の部分を指す。
本明細書において使用される句「Ｆｃドメイン」は、断片結晶化可能領域、または抗体のテール領域を指す。Ｆｃドメインは、細胞表面上のＦｃ受容体と相互作用する。
本明細書において使用される句「標的結合ドメイン」は、免疫結合体の抗原結合ドメインが結合する抗原とは異なる第２の抗原に特異的に結合する、タンパク質、またはタンパク質の部分を指す。標的結合ドメインは、ＦｃドメインのＣ末端で抗体構築物に結合させることができる。
本明細書において使用される用語「抗体」は、抗原に特異的に結合しそれを認識する、免疫グロブリン遺伝子またはその断片に由来する抗原結合領域（相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む）を含むポリペプチドを指す。認識される免疫グロブリン遺伝子は、カッパ、ラムダ、アルファ、ガンマ、デルタ、イプシロン、およびミュー定常領域遺伝子、並びに多数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。「抗体」は、最も広い意味で使用され、具体的には、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、および多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）を包含する。
例示的な免疫グロブリン（抗体）構造単位は、四量体を含む。各四量体は、２つの同一の対のポリペプチド鎖で構成されており、各対は、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤ）および１つの「重」鎖（約５０～７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、主に抗原認識に関与する約１００から１１０個以上のアミノ酸の可変領域を定義付ける。用語可変軽鎖（ＶＬ）および可変重鎖（ＶＨ）は、それぞれこれらの軽および重鎖を指す。軽鎖は、カッパまたはラムダのいずれかとして分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロンとして分類され、これは次に免疫グロブリンクラスＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥをそれぞれ定義する。
ＩｇＧ抗体は、４つのペプチド鎖で構成される約１５０ｋＤａの大きな分子である。ＩｇＧ抗体は、約５０ｋＤａの２つの同一のクラスのγ重鎖および約２５ｋＤａの２つの同一の軽鎖を含有し、四量体四次構造を形成する。２つの重鎖は、互いに、そしてそれぞれジスルフィド結合によって軽鎖に連結されている。得られる四量体は、一緒になってＹ字状形状を形成する２つの同一の半体を有する。枝の各端部は、同一の抗原結合部位を含有する。ヒトにおいては、血清中のそれらの豊富さの順に命名される４つのＩｇＧサブクラス（ＩｇＧ１、２、３、および４）が存在する（ＩｇＧ１が最も豊富である）。典型的には、抗体の抗原結合領域は、結合の特異性および親和性において最も重要であろう。
二量体ＩｇＡ抗体は、約３２０ｋＤａである。ＩｇＡは、２つのサブクラス（ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）を有し、単量体並びに二量体の形態として産生され得る。ＩｇＡ二量体形態（分泌型またはｓＩｇＡ）が、最も豊富である。
抗体は、例えば、インタクトな免疫グロブリンとしてまたはさまざまなペプチダーゼでの分解によって産生される多数の十分に特徴付けられた断片として存在し得る。すなわち、例えば、ペプシンは、ヒンジ領域中のジスルフィド結合の下で抗体を分解して、それ自体がジスルフィド結合によってＶＨ－ＣＨ１に接合した軽鎖であるＦａｂの二量体であるＦ（ａｂ）’２を産生する。Ｆ（ａｂ）’２は、穏和な条件下で還元され、ヒンジ領域中のジスルフィド結合が切断され、それによって、Ｆ（ａｂ）’２二量体がＦａｂ’モノマーに変換され得る。Ｆａｂ’モノマーは、本質的にヒンジ領域の部分を有するＦａｂである（例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ，ｅｄｉｔｏｒ，７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，２０１２）を参照されたい）。さまざまな抗体断片は、インタクトな抗体の分解の観点から定義されるが、一方でそのような断片は、化学的にまたは組み換えＤＮＡ方法を使用してのいずれかで、改めて合成され得る。すなわち、本明細書において使用される用語抗体はまた、全抗体の修飾により産生される、組み換えＤＮＡ方法を使用して改めて合成される（例えば、単鎖Ｆｖ）、またはファージディスプレイライブラリーを使用して同定される（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２－５５４（１９９０）を参照されたい）抗体断片を含む。
本明細書において使用される用語「抗体断片」およびその全ての文法的変形は、インタクトな抗体の抗原結合部位または可変領域を含むインタクトな抗体の部分として定義され、ここで、該部分は、インタクトな抗体のＦｃ領域の定常重鎖ドメイン（すなわち、抗体アイソタイプに依存して、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４）を含まない。抗体断片の例は、限定されることなく、（１）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子；（２）１つの軽鎖可変ドメインのみを含有する単鎖ポリペプチド、または関連する重鎖部分を有さない、軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含有するその断片；（３）１つの重鎖可変領域のみを含有する単鎖ポリペプチド、または関連する軽鎖部分を有さない、重鎖可変領域の３つのＣＤＲを含有するその断片；（４）非ヒト種に由来する単一のＩｇドメインまたは他の特定の単一ドメイン結合モジュールを含むナノボディ；および（５）抗体断片から形成された多重特異性または多価構造体を含み、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ断片；ダイアボディ；隣接するアミノ酸残基の１つの中断されていない配列（本明細書においては、「単鎖抗体断片」または「単鎖ポリペプチド」として呼ばれる）からなる一次構造を有するポリペプチドである任意の抗体断片を含む。１つ以上の重鎖を含む抗体断片において、重鎖（複数可）は、インタクトな抗体の非Ｆｃ領域中に見出される任意の定常ドメイン配列（例えば、ＩｇＧアイソタイプにおけるＣＨ１）を含有し得、および／またはインタクトな抗体において見出される任意のヒンジ領域配列を含有し得、および／またはヒンジ領域配列または重鎖（複数可）の定常ドメイン配列に融合したまたはその中に位置するロイシンジッパー配列を含有し得る。
本明細書において使用される、生物学的製品に関連する用語「バイオシミラー」は、臨床的に不活性な成分におけるわずかな違いにもかかわらず、該生物学的製品が参照製品に非常に類似しており、製品の安全性、純度、および効力の観点から該生物学的製品と該参照製品との間に臨床的に意味のある違いが何らないことを意味する。
本明細書において使用される用語「バイオベター」は、以前に承認された抗体構築物（例えば、トラスツズマブまたはペルツズマブ）の改良である承認された抗体構築物を指す。バイオベターは、以前に承認された抗体構築物に対して、１つ以上の修飾（例えば、変更されたグリカンプロファイル、または固有のエピトープ）を有し得る。
本明細書において使用される用語「エピトープ」は、パラトープとしても呼ばれる、抗体の抗原結合部位に結合する抗原上の任意の抗原決定基を意味する。エピトープ決定基は通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面集団からなり、通常、特定の三次元構造特性、並びに特定の電荷特性を有する。
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、本明細書においては互換的に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。該用語はまた、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工的な化学的模倣体であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマーおよび天然に存在しないアミノ酸ポリマーにも適用される。
本明細書において使用される句「治療剤」は、本明細書において記載される抗体構築物に共有結合している免疫調節剤を指す。すなわち、用語「治療剤」および「免疫調節剤」は、本明細書においては交換可能に使用することができる。治療剤は、抗体構築物に結合している間または対象への免疫結合体の投与に続く抗体構築物からの切断（例えば、酵素的切断）後に、免疫応答（すなわち、刺激または抑制）を引き出すことができる。治療剤は、免疫アゴニストまたはアンタゴニストであり得る。
本明細書において使用される句「パターン認識受容体」および用語「ＰＲＲ」は、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）または損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）を認識し、自然免疫における重要なシグナル伝達要素として作用する、保存された哺乳動物タンパク質のクラスの任意のメンバーを指す。パターン認識受容体は、膜結合型ＰＲＲ、細胞質型ＰＲＲ、および分泌型ＰＲＲに分類される。膜結合型ＰＲＲの例は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）およびＣ型レクチン受容体（ＣＬＲ）を含む。細胞質ＰＲＲの例は、ＮＬＲＰ３、Ｒｉｇ－Ｉ様受容体（ＲＬＲ）、およびＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子の刺激因子）などのＮＯＤ様受容体（ＮＬＲ）を含む。
本明細書において使用される句「Ｔｏｌｌ様受容体」および用語「ＴＬＲ」は、病原体関連分子パターンを認識し、自然免疫における重要なシグナル伝達要素として作用する、高度に保存された哺乳動物タンパク質の１つのファミリーの任意のメンバーを指す。ＴＬＲポリペプチドは、ロイシンリッチ反復を有する細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、およびＴＬＲシグナル伝達に関与する細胞内ドメインを含む、特徴的構造を共有する。
句「トール様受容体１」および用語「ＴＬＲ１」は、公的に利用可能なＴＬＲ１配列、例えば、ヒトＴＬＲ１ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＹ８５６４３、またはネズミＴＬＲ１ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＧ３７３０２と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体２」および用語「ＴＬＲ２」は、公的に利用可能なＴＬＲ２配列、例えば、ヒトＴＬＲ２ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＹ８５６４８、またはネズミＴＬＲ２ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＤ４９３３５と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体３」および用語「ＴＬＲ３」は、公的に利用可能なＴＬＲ３配列、例えば、ヒトＴＬＲ３ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＣ３４１３４、またはネズミＴＬＲ３ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＫ２６１１７と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体４」および用語「ＴＬＲ４」は、公的に利用可能なＴＬＲ４配列、例えば、ヒトＴＬＲ４ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＹ８２２７０、またはネズミＴＬＲ４ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＤ２９２７２と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体５」および用語「ＴＬＲ５」は、公的に利用可能なＴＬＲ５配列、例えば、ヒトＴＬＲ５ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＣＭ６９０３４、またはネズミＴＬＲ５ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＦ６５６２５と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体６」および用語「ＴＬＲ６」は、公的に利用可能なＴＬＲ６配列、例えば、ヒトＴＬＲ６ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＢＹ６７１３３、またはネズミＴＬＲ６ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＧ３８５６３と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体７」および用語「ＴＬＲ７」は、公的に利用可能なＴＬＲ７配列、例えば、ヒトＴＬＲ７ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＺ９９０２６、またはネズミＴＬＲ７ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＫ６２６７６と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体８」および用語「ＴＬＲ８」は、公的に利用可能なＴＬＲ８配列、例えば、ヒトＴＬＲ８ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＺ９５４４１、またはネズミＴＬＲ８ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＫ６２６７７と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体７／８」および用語「ＴＬＲ７／８」は、ＴＬＲ７アゴニストおよびＴＬＲ８アゴニストの両方である核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体９」および用語「ＴＬＲ９」は、公的に利用可能なＴＬＲ９配列、例えば、ヒトＴＬＲ９ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＦ７８０３７、またはネズミＴＬＲ９ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＫ２８４８８と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体１０」および用語「ＴＬＲ１０」は、公的に利用可能なＴＬＲ１０配列、例えば、ヒトＴＬＲ１０ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＫ２６７４４と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
句「トール様受容体１１」および用語「ＴＬＲ１１」は、公的に利用可能なＴＬＲ１１配列、例えば、ネズミＴＬＲ１１ポリペプチドについてのＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＳ８３５３１と、少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の配列同一性を共有する核酸またはポリペプチドを指す。
「ＴＬＲアゴニスト」は、ＴＬＲ（例えば、ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８）に直接または間接的に結合して、ＴＬＲシグナル伝達を誘導する物質である。ＴＬＲシグナル伝達における検出可能などんな違いも、アゴニストがＴＬＲを刺激するまたは活性化することを示すことができる。シグナル伝達の違いは、例えば、標的遺伝子の発現における、シグナル伝達成分のリン酸化における、ＮＫ－κＢなどの下流要素の細胞内局在における、ある成分（ＩＲＡＫなどの）の他のタンパク質若しくは細胞内構造との関連性における、またはキナーゼ（ＭＡＰＫなどの）などの成分の生化学的活性における変化として、明白にされ得る。
本明細書において使用される用語「アミノ酸」は、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質に組み込まれ得る任意のモノマー単位を指す。アミノ酸は、天然に存在するα－アミノ酸およびそれらの立体異性体、並びに非天然の（天然に存在しない）アミノ酸およびそれらの立体異性体を含む。与えられたアミノ酸の「立体異性体」は、同じ分子式および分子内結合を有するが、結合および原子の異なる三次元配置を有する異性体（例えば、Ｌ－アミノ酸および対応するＤ－アミノ酸）を指す。
天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによってコードされるアミノ酸、並びに後に修飾されるそれらのアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタメート、およびＯ－ホスホセリンである。天然に存在するα－アミノ酸は、限定されることなく、アラニン（Ａｌａ）、システイン（Ｃｙｓ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、プロリン（Ｐｒｏ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、バリン（Ｖａｌ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、およびそれらの組合せを含む。天然に存在するα－アミノ酸の立体異性体は、限定されることなく、Ｄ－アラニン（Ｄ－Ａｌａ）、Ｄ－システイン（Ｄ－Ｃｙｓ）、Ｄ－アスパラギン酸（Ｄ－Ａｓｐ）、Ｄ－グルタミン酸（Ｄ－Ｇｌｕ）、Ｄ－フェニルアラニン（Ｄ－Ｐｈｅ）、Ｄ－ヒスチジン（Ｄ－Ｈｉｓ）、Ｄ－イソロイシン（Ｄ－Ｉｌｅ）、Ｄ－アルギニン（Ｄ－Ａｒｇ）、Ｄ－リジン（Ｄ－Ｌｙｓ）、Ｄ－ロイシン（Ｄ－Ｌｅｕ）、Ｄ－メチオニン（Ｄ－Ｍｅｔ）、Ｄ－アスパラギン（Ｄ－Ａｓｎ）、Ｄ－プロリン（Ｄ－Ｐｒｏ）、Ｄ－グルタミン（Ｄ－Ｇｌｎ）、Ｄ－セリン（Ｄ－Ｓｅｒ）、Ｄ－スレオニン（Ｄ－Ｔｈｒ）、Ｄ－バリン（Ｄ－Ｖａｌ）、Ｄ－トリプトファン（Ｄ－Ｔｒｐ）、Ｄ－チロシン（Ｄ－Ｔｙｒ）、およびそれらの組合せを含む。
非天然の（天然に存在しない）アミノ酸は、限定されることなく、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する、Ｌ－またはＤ－配置のいずれかである、アミノ酸類似体、アミノ酸模倣体、合成アミノ酸、Ｎ－置換グリシン、およびＮ－メチルアミノ酸を含む。例えば、「アミノ酸類似体」は、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造（すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基に結合している炭素）を有するが、修飾された側鎖基または修飾されたペプチド骨格を有する非天然のアミノ酸、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムであり得る。「アミノ酸模倣体」は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する化学的化合物を指す。アミノ酸は、本明細書においては、一般に知られている３文字記号、またはＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎにより推奨される１文字記号のいずれかによって参照され得る。
本明細書において使用される用語「免疫チェックポイント阻害剤」は、免疫チェックポイント分子の活性を阻害する任意のモジュレーターを指す。免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイント分子結合タンパク質、小分子阻害剤、抗体、抗体誘導体（Ｆｃ融合体、Ｆａｂ断片およびｓｃＦｖを含む）、抗体－薬物結合体、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、ペプチドおよびペプチド模倣体を含むが、これらに限定されない。
連結部分をタンパク質および他の物質に接続するための有用な結合は、アミド、アミン、エステル、カルバメート、尿素、チオエーテル、チオカルバメート、チオカーボネート、およびチオ尿素を含むが、これらに限定されない。「二価の」連結部分は、２つの官能基を連結するための２つの接続点を含有し；多価連結部分は、さらなる官能基を連結するための追加の接続点を有し得る。例えば、二価の連結部分は、二価のポリ（エチレングリコール）、二価のポリ（プロピレングリコール）、および二価のポリ（ビニルアルコール）などの二価のポリマー部分を含む。
本明細書において使用される用語「任意に存在する」を化学構造（例えば、「Ｘ」または「Ｙ」）を指すために使用するとき、その化学構造が存在しない場合、該化学構造に対して元来なされる結合が隣接する原子に直接なされる。
本明細書において使用される用語「リンカー」は、化合物または物質中の２つ以上の部分を共有結合する官能基を指す。例えば、リンカーは、免疫結合体において治療剤を抗体構築物に共有結合するために役立ち得る。
本明細書において使用される用語「アルキル」は、示される炭素原子数を有する、直鎖のまたは分枝状の飽和脂肪族ラジカルを指す。アルキルは、Ｃ１－２、Ｃ１－３、Ｃ１－４、Ｃ１－５、Ｃ１－６、Ｃ１－７、Ｃ１－８、Ｃ１－９、Ｃ１－１０、Ｃ２－３、Ｃ２－４、Ｃ２－５、Ｃ２－６、Ｃ３－４、Ｃ３－５、Ｃ３－６、Ｃ４－５、Ｃ４－６およびＣ５－６などの任意の数の炭素を含み得る。例えば、Ｃ１－６アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどを含むが、これらに限定されない。アルキルはまた、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどの、しかしこれらに限定されない最大３０個の炭素原子を有するアルキル基を指し得る。アルキル基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換アルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、およびアルコキシから選択される１つ以上の基で置換され得る。用語「アルキレン」は、二価のアルキルラジカルを指す。
本明細書において使用される用語「ヘテロアルキル」は、１つ以上の炭素原子が、任意におよび独立してＮ、Ｏ、およびＳから選択されるヘテロ原子で置換されている、本明細書において記載されるアルキル基を指す。用語「ヘテロアルキレン」は、二価のヘテロアルキルラジカルを指す。
本明細書において使用される用語「シクロアルキル」は、３から１２個の環原子または示された原子数を含有する、飽和若しくは部分的に不飽和の単環式、縮合二環式、または架橋多環式環集合体を指す。シクロアルキルは、Ｃ３－６、Ｃ４－６、Ｃ５－６、Ｃ３－８、Ｃ４－８、Ｃ５－８、Ｃ６－８、Ｃ３－９、Ｃ３－１０、Ｃ３－１１、およびＣ３－１２などの任意の数の炭素を含み得る。飽和単環式炭素環式環は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロオクチルを含む。飽和二環式および多環式炭素環式環は、例えば、ノルボルナン、［２．２．２］ビシクロオクタン、デカヒドロナフタレン、およびアダマンタンを含む。シクロアルキル基はまた、環中に１つ以上の二重または三重結合を有し、部分的に不飽和であり得る。部分的に不飽和である代表的な炭素環式基は、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン（１，３－および１，４－異性体）、シクロヘプテン、シクロヘプタジエン、シクロオクテン、シクロオクタジエン（１，３－、１，４－および１，５－異性体）、ノルボルネン、およびノルボルナジエンを含むが、これらに限定されない。
不飽和炭素環式基はまた、アリール基を含む。用語「アリール」は、任意の適切な数の環原子および任意の適切な数の環を有する芳香環系を指す。アリール基は、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６個の環原子、並びに６から１０個、６から１２個、または６から１４個の環員などの任意の適切な数の環原子を含み得る。アリール基は、単環式であり得、縮合して二環式若しくは三環式基を形成し得、または結合によって連結してビアリール基を形成し得る。代表的なアリール基は、フェニル、ナフチル、およびビフェニルを含む。他のアリール基は、メチレン連結基を有するベンジルを含む。いくつかのアリール基は、フェニル、ナフチル、またはビフェニルなどの６から１２個の環員を有する。他のアリール基は、フェニルまたはナフチルなどの６から１０個の環員を有する。アリール基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換アリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される１つ以上の基で置換され得る。
「二価の」シクロアルキルは、分子または物質中の２つの部分を共有結合で連結するための２つの接続点を有する炭素環式基を指す。シクロアルキル基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換シクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される１つ以上の基で置換され得る。
本明細書において使用される用語「複素環」は、ヘテロシクロアルキル基およびヘテロアリール基を指す。「ヘテロアリール」は、それ自体または別の置換基の一部として、５から１６個の環原子を含有する単環式または縮合二環式若しくは三環式芳香環集合体を指し、ここで、環原子の１から５個は、Ｎ、Ｏ、またはＳなどのヘテロ原子である。追加のヘテロ原子もまた、有用であり得、Ｂ、Ａｌ、Ｓｉ、およびＰを含むが、これらに限定されない。ヘテロ原子は、酸化されて、－Ｓ（Ｏ）－およびＳ（Ｏ）２－などの部分を形成し得るが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は、３から６、４から６、５から６、３から８、４から８、５から８、６から８、３から９、３から１０、３から１１、または３から１２個の環員などの任意の数の環原子を含み得る。１、２、３、４、若しくは５個の、または１から２、１から３、１から４、１から５、２から３、２から４、２から５、３から４、若しくは３から５個などの任意の適切な数のヘテロ原子が、ヘテロアリール基中に含まれ得る。ヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３－、１，２，４－および１，３，５－異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、およびイソオキサゾールなどの基を含み得る。ヘテロアリール基はまた、フェニル環などの芳香環系に縮合して、インドールおよびイソインドールなどのベンゾピロール、キノリンおよびイソキノリンなどのベンゾピリジン、ベンゾピラジン（キノキサリン）、ベンゾピリミジン（キナゾリン）、フタラジンおよびシンノリンなどのベンゾピリダジン、ベンゾチオフェン、およびベンゾフランを含むがこれらに限定されない員を形成し得る。他のヘテロアリール基は、ビピリジンなどの、結合によって連結されたヘテロアリール環を含む。ヘテロアリール基は、置換されまたは非置換であり得る。「置換ヘテロアリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される１つ以上の基で置換され得る。
本明細書において使用される用語「芳香族部分」は、本明細書において提供される開示によって特定されるように置換されてきた、本明細書において記載されるアリールまたはヘテロアリール基を指す。
ヘテロアリール基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、ピロールは、１－、２－および３－ピロールを含み、ピリジンは、２－、３－および４－ピリジンを含み、イミダゾールは、１－、２－、４－および５－イミダゾールを含み、ピラゾールは、１－、３－、４－および５－ピラゾールを含み、トリアゾールは、１－、４－および５－トリアゾールを含み、テトラゾールは、１－および５－テトラゾールを含み、ピリミジンは、２－、４－、５－および６－ピリミジンを含み、ピリダジンは、３－および４－ピリダジンを含み、１，２，３－トリアジンは、４－および５－トリアジンを含み、１，２，４－トリアジンは、３－、５－および６－トリアジンを含み、１，３，５－トリアジンは、２－トリアジンを含み、チオフェンは、２－および３－チオフェンを含み、フランは、２－および３－フランを含み、チアゾールは、２－、４－および５－チアゾールを含み、イソチアゾールは、３－、４－および５－イソチアゾールを含み、オキサゾールは２－、４－および５－オキサゾールを含み、イソオキサゾールは、３－、４－および５－イソオキサゾールを含み、インドールは１－、２－および３－インドールを含み、イソインドールは、１－および２－イソインドールを含み、キノリンは、２－、３－および４－キノリンを含み、イソキノリンは、１－、３－および４－イソキノリンを含み、キナゾリンは２－および４－キノゾリンを含み、シンノリンは３－および４－シンノリンを含み、ベンゾチオフェンは、２－および３－ベンゾチオフェンを含み、ベンゾフランは、２－および３－ベンゾフランを含む。
「ヘテロシクロアルキル」は、それ自体または別の置換基の一部として、３から１２個の環員および１から４個のＮ、Ｏ、およびＳのヘテロ原子を有する飽和環系を指す。追加のヘテロ原子もまた、有用であり得、Ｂ、Ａｌ、Ｓｉ、およびＰを含むが、これらに限定されない。ヘテロ原子は、酸化されて、－Ｓ（Ｏ）－およびＳ（Ｏ）２－などの部分を形成し得るが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキル基は、３から６、４から６、５から６、３から８、４から８、５から８、６から８、３から９、３から１０、３から１１、または３から１２個の環員などの任意の数の環原子を含み得る。１、２、３、若しくは４個の、または１から２、１から３、１から４、２から３、２から４、若しくは３から４個などの任意の適切な数のヘテロ原子が、ヘテロシクロアルキル基中に含まれ得る。ヘテロシクロアルキル基は、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、アゾカン、キヌクリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン（１，２－、１，３－および１，４－異性体）、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、オキサン（テトラヒドロピラン）、オキセパン、チイラン、チエタン、チオラン（テトラヒドロチオフェン）、チアン（テトラヒドロチオピラン）、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、ジオキソラン、ジチオラン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサン、またはジチアンなどの基を含み得る。ヘテロシクロアルキル基はまた、芳香族または非芳香族環系に縮合して、インドリンを含むがこれに限定されない員を形成し得る。ヘテロシクロアルキル基は、非置換でありまたは置換され得る。「置換ヘテロシクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、アルキル、およびアルコキシから選択される１つ以上の基で置換され得る。
ヘテロシクロアルキル基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、アジリジンは、１－または２－アジリジンであり得、アゼチジンは、１－または２－アゼチジンであり得、ピロリジンは、１－、２－または３－ピロリジンであり得、ピペリジンは、１－、２－、３－または４－ピペリジンであり得、ピラゾリジンは、１－、２－、３－または４－ピラゾリジンであり得、イミダゾリジンは、１－、２－、３－または４－イミダゾリジンであり得、ピペラジンは、１－、２－、３－または４－ピペラジンであり得、テトラヒドロフランは、１－または２－テトラヒドロフランであり得、オキサゾリジンは、２－、３－、４－または５－オキサゾリジンであり得、イソオキサゾリジンは、２－、３－、４－または５－イソオキサゾリジンであり得、チアゾリジンは、２－、３－、４－または５－チアゾリジンであり得、イソチアゾリジンは、２－、３－、４－または５－イソチアゾリジンであり得、モルホリンは、２－、３－または４－モルホリンであり得る。
本明細書において使用される用語「ハロ」および「ハロゲン」は、それ自体または別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を指す。
本明細書において使用される用語「カルボニル」は、それ自体または別の置換基の一部として、－Ｃ（Ｏ）－、すなわち、カルボニルを有する部分中、酸素に二重結合し、２つの他の基に結合した炭素原子を指す。
本明細書において使用される用語「アミノ」は、各Ｒ基がＨまたはアルキルである、－ＮＲ３部分を指す。アミノ部分は、イオン化され、対応するアンモニウムカチオンを形成し得る。
本明細書において使用される用語「ヒドロキシ」は、－ＯＨ部分を指す。
本明細書において使用される用語「シアノ」は、窒素原子に三重結合した炭素原子（すなわち、－Ｃ≡Ｎ部分）を指す。
本明細書において使用される用語「カルボキシ」は、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ部分を指す。カルボキシ部分は、イオン化され、対応するカルボキシレ－トアニオンを形成し得る。
本明細書において使用される用語「アミド」は、－ＮＲＣ（Ｏ）ＲまたはＣ（Ｏ）ＮＲ２部分を指し、ここで、各Ｒ基は、Ｈまたはアルキルである。
本明細書において使用される用語「ニトロ」は、－ＮＯ２部分を指す。
本明細書において使用される用語「オキソ」は、化合物に二重結合している酸素原子（すなわち、Ｏ＝）を指す。
本明細書において使用される句「塩」または「薬学的に許容される塩」は、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から誘導される塩を含むことを意図する。一般に、そのような塩は、水中若しくは有機溶媒中、または該２つの混合物中で、これらの化合物の遊離の酸または塩基形態を、それぞれ、化学量論量の適切な塩基または酸と反応させることによって製造することができる。例えば、無機酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、または臭化水素酸）、有機酸（例えば、シュウ酸、マロン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メチルスルホン酸、またはベンジルスルホン酸）、無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、または水酸化アンモニウム）、有機塩基（例えば、メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、グアニジン、コリン、またはシンコニン）、またはアミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、またはアラニン）を使用することができる。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が、典型的に利用される。適切な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９９０，ｐ．１４４５、およびＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６：２－１９（１９７７）中に見出される。例えば、適切な塩は、アルカリ金属（例えば、ナトリウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム）、およびアンモニウムの塩であり得る。
本明細書において使用される用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、および「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、軽減；寛解；症状の減少、または症状、傷害、病的状態、若しくは状態を患者にとってより忍容可能なものにすること；症状の進行速度の低減；症状または状態の頻度または持続時間の軽減；または、いくつかの状況では、症状の発症の予防；などの、任意の客観的または主観的パラメーターを含む、傷害、病的状態、状態、または症状（例えば、認知障害）の治療または改善における成功の任意の兆候を指す。症状の治療または改善は、例えば、身体検査の結果を含む、任意の客観的または主観的パラメーターに基づき得る。
本明細書において使用される用語「癌」は、固形癌、リンパ腫、および白血病を含む状態を指す。異なるタイプの癌の例は、肺癌（例えば、非小細胞肺癌またはＮＳＣＬＣ）、卵巣癌、前立腺癌、結腸直腸癌、肝臓癌（すなわち、肝細胞癌）、腎癌（すなわち、腎細胞癌）、膀胱癌、乳癌、甲状腺癌、胸膜癌、膵臓癌、子宮癌、子宮頸癌、精巣癌、肛門癌、胆管癌、消化管カルチノイド腫瘍、食道癌、胆嚢癌、虫垂癌、小腸癌、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））癌、中枢神経系の癌、皮膚癌（例えば、メラノーマ）、絨毛癌、頭頸部癌、血液癌、骨形成性肉腫、線維肉腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、小細胞リンパ腫、大細胞リンパ腫、単球性白血病、骨髄性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、および多発性骨髄腫を含むが、これらに限定されない。他のタイプの癌は、本明細書において提供される開示から容易に明らかであるであろう。
本明細書において使用される「疾患または状態」は、自己免疫疾患、炎症、敗血症、アレルギー、喘息、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、免疫不全、または感染症によって引き起こされるかまたは関連する（典型的には感染性病原体、例えば、ウイルス、細菌、真菌、または寄生虫によって引き起こされる）任意の疾患または状態を指す。
本明細書において使用される句「有効量」および「治療有効量」は、そのために物質が投与される１つ以上の治療効果を生む免疫結合体などの物質の用量を指す。特定の用量は、治療の目的に依存し、既知の技術を使用して当業者により確認可能であろう（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｕｍｅｓ １－３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；Ｇｏｏｄｍａｎ ＆ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００６，Ｂｒｕｎｔｏｎ，ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００５，Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓを参照されたい）。
本明細書において使用される用語「対象」は、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス等を含むが、これらに限定されない哺乳動物などの動物を指す。特定の実施態様においては、対象は、ヒトである。
本明細書において使用される用語「投与すること」は、非経口、静脈内、腹腔内、筋肉内、腫瘍内、病巣内、鼻腔内、若しくは皮下投与、経口投与、坐剤としての投与、局所的接触、髄腔内投与、または遅延放出用装置、例えば、ミニ浸透圧ポンプの対象への移植を指す。
数値を修飾するために本明細書において使用される用語「約」および「周辺」は、その明示的な値を取り囲む比較的近い範囲を示す。「Ｘ」が値である場合、「約Ｘ」または「Ｘ周辺」は、０．９Ｘから１．１Ｘ、例えば０．９５Ｘから１．０５Ｘまたは０．９９Ｘから１．０１Ｘの値を示すであろう。「約Ｘ」または「Ｘ周辺」への任意の言及は、少なくとも値Ｘ、０．９５Ｘ、０．９６Ｘ、０．９７Ｘ、０．９８Ｘ、０．９９Ｘ、１．０１Ｘ、１．０２Ｘ、１．０３Ｘ、１．０４Ｘ、および１．０５Ｘを具体的に示す。すなわち、「約Ｘ」および「Ｘ周辺」は、例えば「０．９８Ｘ」の特許請求の範囲限定についての書面による説明のサポートを教示するおよび提供することを意図する。
結合方法
免疫結合体を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩（ここで、式ＩＩは、該抗体構築物の１つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000012
を有する本明細書において記載される抗体構築物である）を組み合わせて、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む：ここで、ＴＡは、本明細書において記載される治療剤であり、Ｌは、本明細書において記載されるリンカーであり、ｒは、１から５０の整数であり、Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000013
およびそれらの塩から選択される第１の置換基を含む芳香族部分であり、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、各Ｘは独立して、水素またはハロゲン（例えば、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、または－Ｉ）であり、Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、ｎは、１から４の整数（例えば、１、２、３、または４）であり、ＰＥＧは、式：－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－（式中、ｐは、１から５の整数（例えば、１、２、３、４、または５）であり、ｍは、２から５０（例えば、２から２５、２から１０、または２から６）の整数である）を有する。
Ａｒは、本明細書において記載される芳香族部分である。従って、Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000014
およびそれらの塩から選択される第１の置換基を含む、任意のアリールまたはヘテロアリール基であり得る。いくつかの実施態様においては、Ａｒは、記載される第１の置換基を含む、フェニル、ベンゾフラニル、インドイル、またはベンゾイミダゾイル基である。特定の実施態様においては、Ａｒは、記載される第１の置換基を含むフェニル基である。
芳香族部分は、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000015
およびそれらの塩から選択される第１の置換基を含み、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、各Ｘは独立して、水素またはハロゲン（例えば、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、または－Ｉ）であり、Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、ｎは、１から４の整数（例えば、１、２、３、または４）であり、ＰＥＧは、式：－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－（式中、ｐは、１から５の整数（例えば、１、２、３、４、または５）であり、ｍは、２から５０（例えば、２から２５、２から１０、または２から６）の整数である。いくつかの実施態様においては、第１の置換基は、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＣＮ、およびそれらの塩から選択される。特定の実施態様においては、第１の置換基は、－ＳＯ３Ｈまたはその塩である。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分（Ａｒ）は、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＲ３、－ＯＲ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000016
それらの塩、およびそれらの組合せから選択される１つ以上の追加の置換基をさらに含み、ここで、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、各Ｘは独立して、水素またはハロゲン（例えば、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、または－Ｉ）であり、Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、ｎは、１から４の整数（例えば、１、２、３、または４）であり、ＰＥＧは、式：－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－（式中、ｐは、１から５の整数（例えば、１、２、３、４、または５）であり、ｍは、２から５０（例えば、２から２５、２から１０、または２から６）の整数である）を有する。芳香族部分は、任意の数の追加の置換基をさらに含み得る。例えば、芳香族部分は、１から１０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個）の追加の置換基、１から４個（例えば、１、２、３、または４個）の追加の置換基、または２から４個（例えば、２、３、または４個の）の追加の置換基をさらに含み得る。特定の実施態様においては、１つ以上の追加の置換基は、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｈ、－ＣＮ、およびそれらの塩から選択される。好ましい実施態様においては、１つ以上の追加の置換基は、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、および－Ｉから選択される。
いくつかの実施態様においては、Ａｒは、以下の式Ａｒ１からＡｒ９０：
Figure 2022547066000017
Figure 2022547066000018
Figure 2022547066000019
Figure 2022547066000020
Figure 2022547066000021
Figure 2022547066000022
Figure 2022547066000023
Figure 2022547066000024
Figure 2022547066000025
またはそれらの塩の１つである。特定の実施態様においては、Ａｒは、式Ａｒ３２、Ａｒ５９、またはそれらの塩（例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、またはアンモニウム塩）である。
いくつかの実施態様においては、該方法は、少なくとも約３３モル％（例えば、少なくとも約３５モル％、少なくとも約３６モル％、少なくとも約３７モル％、少なくとも約３８モル％、少なくとも約３９モル％、少なくとも約４０モル％、少なくとも約４１モル％、少なくとも約４２モル％、少なくとも約４３モル％、少なくとも約４４モル％、少なくとも約４５モル％、少なくとも約４６モル％、少なくとも約４７モル％、少なくとも約４８モル％、少なくとも約４９モル％、または少なくとも約５０モル％）の１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩が、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩に結合するまで、該１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および該式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を組み合わせて、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む。特定の実施態様においては、該方法は、少なくとも約４０モル％の１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩が、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩に結合するまで、該１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および該式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、水溶液中で組み合わせて、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む。他の実施態様においては、該方法は、少なくとも約５０モル％の１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩が、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩に結合するまで、該１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および該式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、水溶液中で組み合わせて、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を提供することを含む。
いくつかの実施態様においては、該方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、少なくとも約１時間（例えば、少なくとも約２時間、少なくとも約３時間、少なくとも約４時間、少なくとも約５時間、少なくとも約６時間、少なくとも約８時間、少なくとも約１０時間、少なくとも約１２時間、少なくとも約１６時間、少なくとも約２０時間、少なくとも約２４時間、または少なくとも約４８時間）の期間組み合わせることを含む。あるいは、またはさらに、該方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約４８時間以下（例えば、約３６時間以下、約３０時間以下、約２４時間以下、約２１時間以下、約１８時間以下、約１５時間以下、または約１２時間以下）の期間組み合わせることを含む。すなわち、該方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、前述のエンドポイントの任意の２つによって境界される期間組み合わせることを含み得る。例えば、該方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約１時間から約４８時間、約１時間から約３６時間、約１時間から約３０時間、約１時間から約２４時間、約１時間から約２１時間、約１時間から約１８時間、約１時間から約１５時間、約１時間から約１２時間、約２時間から約２４時間、約２時間から約１５時間、約２時間から約１２時間、約３時間から約２４時間、約３時間から約１２時間、約４時間から約２４時間、約５時間から約１５時間、約６時間から約４８時間、約６時間から約３６時間、約６時間から約３０時間、約６時間から約２４時間、約６時間から約２１時間、約６時間から約１８時間、約６時間から約１５時間、または約６時間から約１２時間の期間組み合わせることを含み得る。
いくつかの実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、アルカリ性水溶液（すなわち、ｐＨ７超）中で組み合わせることを含む。特定の実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約７．５から約９、例えば、約７．６から約９、約７．７から約９、約７．８から約９、約７．９から約９、約８．０から約９、約８から約８．９、約８から約８．８、約８から約８．７、約８から約８．６、約８．１から約８．６、約８．２から約８．６、約８．２から約８．５、または約８．２から約８．４のｐＨで緩衝されるアルカリ性水溶液中で組み合わせることを含む。従って、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約７．５、約７．６、約７．７、約７．８、約７．９、約８、約８．１、約８．２、約８．３、約８．４、約８．５、約８．６、約８．７、約８．８、約８．９、または約９のｐＨで緩衝される水溶液中で組み合わせることを含み得る。好ましい実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約８から約８．３のｐＨで緩衝される水溶液中で組み合わせることを含む。
式ＩＩの抗体構築物、またはその塩、および１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩は、水溶液がアルカリ性ｐＨを有するように、任意の適切な水溶液緩衝液中で組み合わせ得る。適切な水溶液緩衝液または第１の緩衝水溶液の例示的なリストは、ＴＥＳ緩衝生理食塩水、ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水、ＤＩＰＳＯ緩衝生理食塩水、ＭＯＢＳ緩衝生理食塩水、アセトアミドグリシン緩衝生理食塩水、ＴＡＰＳＯ緩衝生理食塩水、ＴＥＡ緩衝リン酸緩衝生理食塩水、ＰＯＰＳＯ緩衝生理食塩水、ＨＥＰＰＳＯ緩衝生理食塩水、ＥＰＳ緩衝生理食塩水、ＨＥＰＰＳ緩衝生理食塩水、トリシン緩衝生理食塩水、グリシンアミド緩衝生理食塩水、グリシルグリシン緩衝生理食塩水、ＨＥＰＢＳ緩衝生理食塩水、ビシン緩衝生理食塩水、ＴＡＰＳ緩衝生理食塩水、ＡＭＰＢ緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ホウ酸塩緩衝生理食塩水、およびトリス緩衝生理食塩水である。好ましい実施態様においては、水溶液緩衝液または第１の緩衝水溶液は、ホウ酸塩緩衝生理食塩水である。別の好ましい実施態様においては、水溶液緩衝液または第１の緩衝水溶液は、リン酸緩衝生理食塩水である。
いくつかの実施態様においては、水溶液緩衝液または第１の緩衝水溶液は、可溶化剤をさらに含む。可溶化剤は、式Ｉの化合物またはその塩の溶解性を改善する任意の化合物（例えば、界面活性剤、分散剤、溶媒等）であり得る。例えば、可溶化剤は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、エチレングリコールジメチルエーテル、エタノール、メタノール、またはプロピレングリコールであり得る。好ましい実施態様においては、可溶化剤は、ＤＭＡである。
可溶化剤は、水性緩衝液または第１の緩衝水溶液中、任意の適切な量で存在し得る。例えば、可溶化剤は、水性緩衝液または第１の緩衝水溶液中、約０．１ｖ／ｖ％から約４０ｖ／ｖ％、例えば、約０．１ｖ／ｖ％から約３０ｖ／ｖ％、約０．１ｖ／ｖ％から約２０ｖ／ｖ％、約１ｖ／ｖ％から約４０ｖ／ｖ％、約１ｖ／ｖ％から約３０ｖ／ｖ％、約１ｖ／ｖ％から約２０ｖ／ｖ％、約５ｖ／ｖ％から約４０ｖ／ｖ％、約５ｖ／ｖ％から約３０ｖ／ｖ％、または約５ｖ／ｖ％から約２０ｖ／ｖ％ｖの量で存在し得る。
いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、式ＩＩＩの免疫結合体またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。例えば、可溶化剤を使用する方法は、ＸＥＶＯ（商標） Ｇ２－ＸＳ ＴＯＦ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に接続したＡＣＱＵＩＴＹ（商標） ＵＰＬＣ Ｈクラスシステム（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）上のＣ４逆相カラムを使用する液体クロマトグラフィー質量分析によって決定される、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法よりも優れた、０．２以上（例えば、０．４以上、０．６以上、０．８以上、または１以上）の平均治療剤対抗体比を有する、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造することができる。
いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、式ＩＩＩの免疫結合体またはその塩の収率を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、可溶化剤は、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の収率を増加させる。例えば、可溶化剤を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での可溶化剤なしの方法よりも、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の収率において、１％以上の増加（例えば、２％以上の増加、３％以上の増加、４％以上の増加、５％以上の増加、または１０％以上の増加）を生み出すことができる。収率は、その多くは当業者に知られている、任意の適切な手段によって評価することができる。
式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、任意の適切な温度で水溶液中で組み合わせることを含む。いくつかの実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約０℃から約５０℃、例えば、約０℃から約４５℃、約０℃から約４０℃、約５℃から約４０℃、約１０℃から約４０℃、約１５℃から約４０℃、約２０℃から約４０℃、約２５℃から約４０℃、または約２５℃から約３５℃の温度で水溶液中で組み合わせることを含む。従って、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約１℃、約２℃、約３℃、約４℃、約５℃、約６℃、約７℃、約８℃、約９℃、約１０℃、約１１℃、約１２℃、約１３℃、約１４℃、約１５℃、約１６℃、約１７℃、約１８℃、約１９℃、約２０℃、約２１℃、約２２℃、約２３℃、約２４℃、約２５℃、約２６℃、約２７℃、約２８℃、約２９℃、約３０℃、約３１℃、約３２℃、約３３℃、約３４℃、約３５℃、約３６℃、約３７℃、約３８℃、約３９℃、約４０℃、約４１℃、約４２℃、約４３℃、約４４℃、約４５℃、約４６℃、約４７℃、約４８℃、約４９℃、または約５０℃の温度で水溶液中で組み合わせることを含む。好ましい実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩、および式ＩＩの抗体構築物、またはその塩を、約３０℃の温度で水溶液中で組み合わせることを含む。
いくつかの実施態様においては、本発明は、第１の緩衝水溶液中で、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を提供する。典型的には、第１の緩衝水溶液は、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩、および１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩を組み合わせる水溶液と同じである。しかしながら、第１の緩衝水溶液のｐＨ、温度、および化学組成は、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を形成するための、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩、および１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩の組合せのため、該水溶液に対してわずかに変化し得ることは、当業者によって理解されるであろう。
任意の適切な当量数の１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩を、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩と組み合わせて、所望の治療剤対抗体比を達成することができる。従って、約０．１当量以上の１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩を、例えば、約０．５当量以上、約１当量以上、約１．５当量以上、約２当量以上、約２．５当量以上、約３当量以上、約３．５当量以上、約４当量以上、約４．５当量以上、約５当量以上、約５．５当量以上、約６当量以上、約６．５当量以上、約７当量以上、約７．５当量以上、約８当量以上、約８．５当量以上、約９当量以上、約９．５当量以上、約１０当量以上、約１１当量以上、約１２当量以上、約１３当量以上、約１４当量以上、約１５当量以上、約１６当量以上、約１７当量以上、約１８当量以上、約１９当量以上、または約２０当量以上の式ＩＩの抗体構築物、またはその塩と組み合わせ得る。あるいは、またはさらに、約５０当量以下の１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩を、例えば、約４５当量以下、約４０当量以下、約３５当量以下、約３０当量以下、約２５当量以下、約２０当量以下、約１８当量以下、約１６当量以下、約１４当量以下、約１２当量以下、約１０当量以下、約８当量以下、約６当量以下、または約４当量以下の式ＩＩの抗体構築物、またはその塩と組み合わせ得る。すなわち、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩と組み合わせられる１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩の当量数は、前述のエンドポイントの任意の２つによって境界され得る。例えば、式ＩＩの抗体構築物、またはその塩と組み合わせられる１つ以上の式Ｉの化合物、またはその塩の当量数は、約０．１から約５０、約１から約５０、約１から約４０、約１から約３０、約１から約２０、約２から約５０、約２から約４０、約２から約３０、約２から約２０、約３から約５０、約３から約４０、約３から約３０、約３から約２０、約４から約５０、約４から約４０、約４から約３０、約４から約２０、約６から約３０、約６から約２０、約８から約４０、約８から約２０、約１０から約５０、約１０から約２０、約１２から約５０、約１２から約３０、約１２から約２０、約４から約１６、約８から約１２、約１から約４、約１から約６、約１から約８、約１から約１２、約１から約１６、約２から約４、約２から約６、約２から約８、または約２から約１２であり得る。
いくつかの実施態様においては、該方法は、第１の緩衝水溶液および／または第２の緩衝水溶液中で、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を精製することをさらに含む。第１の緩衝水溶液および／または第２の緩衝水溶液中での式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の精製は、任意の適切な手段によって行うことができる。例えば、第１の緩衝水溶液および／または第２の緩衝水溶液中の式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を、カラムクロマトグラフィー（例えば、陰イオン交換クロマトグラフィー、陽イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、または混合モードクロマトグラフィー）、遠心分離、ろ過、または結晶化によって精製することができる。
いくつかの実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造する方法は、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を、免疫結合体を合成したｐＨよりも低いｐＨで保存することを含む。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、免疫結合体は、中性（すなわち、約６．５から約７．５のｐＨ）および／または酸性水溶液（すなわち、ｐＨ７未満）においてより安定であると考えられる。従って、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩は、約７．５以下、例えば、約７．４以下、約７．３以下、約７．２以下、約７．１以下、約７以下、約６．９以下、約６．８以下、約６．７以下、約６．６以下、約６．５以下、約６．４以下、約６．３以下、約６．２以下、約６．１以下、または約６以下のｐＨで緩衝される第２の緩衝水溶液に緩衝液交換し得る。特定の実施態様においては、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩は、アルカリ性の第１の緩衝水溶液中で合成し、酸性の第２の緩衝水溶液で保存する。
いくつかの実施態様においては、該方法は、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の第１の緩衝水溶液に対して緩衝液交換を実施して、約６から約７．５のｐＨで緩衝された第２の緩衝水溶液を提供することをさらに含む。特定の実施態様においては、該方法は、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の第１の緩衝水溶液に対して緩衝液交換を実施して、約７から約７．５のｐＨで緩衝された第２の緩衝水溶液を提供することをさらに含む。好ましい実施態様においては、該方法は、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の第１の緩衝水溶液に対して緩衝液交換を実施して、約７．２から約７．４のｐＨで緩衝された第２の緩衝水溶液を提供することをさらに含む。
式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩は、任意の適切な第２の水溶液緩衝液に緩衝液交換することができる。いくつかの実施態様においては、第２の水溶液緩衝液は、中性（すなわち、約６．５から約７．５のｐＨ）または酸性水溶液（すなわち、ｐＨ７未満）である。適切な第２の水溶液緩衝液の例示的なリストは、ＭＯＰＳ緩衝生理食塩水、塩化コラミン緩衝生理食塩水、ＭＯＰＳＯ緩衝生理食塩水、ＡＣＥＳ緩衝生理食塩水、ＰＩＰＥＳ緩衝生理食塩水、ビストリスプロパン緩衝生理食塩水、ＡＣＥＳ緩衝生理食塩水、ＡＤＡ緩衝生理食塩水、ビストリスメタン緩衝生理食塩水、ＭＥＳ緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、クエン酸塩緩衝生理食塩水、およびＢＥＳ緩衝生理食塩水である。好ましい実施態様においては、第２の水溶液は、リン酸緩衝生理食塩水で緩衝されている。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式Ｉの化合物またはその塩の溶解度を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物と比較して、水性緩衝液または第１の緩衝水溶液中への増加した溶解度を有する。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩は、ｐＨ８．３で１００ｍＭホウ酸、５０ｍＭ塩化ナトリウム、および１ｍＭエチレンジアミン四酢酸を含有する緩衝液中の化合物の０．１Ｍ溶液の６００ｎｍでの吸光度によって測定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物に対して、濁度において１％以上低下（例えば、２％以上低下、３％以上低下、４％以上低下、または５％以上低下）し得る。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式Ｉの化合物またはその塩の安定性を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物と比較して、水性緩衝液または第１の緩衝水溶液における増加した安定性を有する。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩は、蓋をしたガラスバイアル中で調製し、３０℃で１５分間インキュベートした、ｐＨ８．３で１００ｍＭホウ酸、５０ｍＭ塩化ナトリウム、および１ｍＭエチレンジアミン四酢酸を含有する緩衝液中の化合物の０．１Ｍ溶液の定量的ＨＰＬＣによって測定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での、芳香族部分の代わりにスクシンイミドを使用した同一化合物に対して、分解において１％以上低下（例えば、２％以上低下、３％以上低下、４％以上低下、５％以上低下、または１０％以上低下）し得る。
いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、芳香族部分によって提供される溶解性、安定性、および反応性の組合せ（すなわち、電子工学および／または立体障害の結果としての）は、プロセスの反応速度、式ＩＩＩの免疫結合体の治療剤対抗体比、式ＩＩＩの免疫結合体の収率、式ＩＩＩの免疫結合体の結合プロファイル（すなわち、治療剤／リンカーが結合する位置（アミノ酸残基））、および式ＩＩＩの免疫結合体の純度の１つ以上に有益に影響を与えると考えられる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、定常状態動力学近似を使用する、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の形成の速度（モル／Ｌ／秒）を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の形成の速度（モル／Ｌ／秒）を増加させる。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での定常状態動力学で測定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法に対して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の形成の速度（モル／Ｌ／秒）において１％以上増加（例えば、２％以上増加、３％以上増加、４％以上増加、または５％以上増加）し得る。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式ＩＩＩの免疫結合体またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の平均治療剤対抗体比を増加させる。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩を使用する方法は、ＸＥＶＯ（商標） Ｇ２－ＸＳ ＴＯＦ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に接続したＡＣＱＵＩＴＹ（商標） ＵＰＬＣ Ｈクラスシステム（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）上のＣ４逆相カラムを使用する液体クロマトグラフィー質量分析によって決定したとき、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法よりも優れた、０．２以上（例えば、０．４以上、０．６以上、０．８以上、または１以上）の平均治療剤対抗体比を有する、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩を製造することができる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式ＩＩＩの免疫結合体またはその塩の収率を増加させる。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の収率を増加させる。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法よりも、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の収率において、１％以上増加（例えば、２％以上増加、３％以上増加、４％以上増加、５％以上増加、または１０％以上増加）し得る。収率は、その多くは当業者に知られている、任意の適切な手段によって評価することができる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式ＩＩＩの免疫結合体またはその塩の結合プロファイルを修飾する。より具体的には、芳香族部分は、抗体構築物の重鎖への結合の量を増加させることができる。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の抗体構築物の重鎖への結合の量を増加させる。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分としてテトラフルオロフェニルを有する同一の化合物を使用する方法に対して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の抗体構築物の重鎖への結合の量を、５％以上（例えば、１０％以上、１５％以上、または２０％以上）増加させ得る。軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）のペプチドマッピングは、ＸＥＶＯ（商標） Ｇ２－ＸＳ ＴＯＦ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に接続したＡＣＱＵＩＴＹ（商標） ＵＰＬＣ Ｈクラスシステム（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）上のＣ４逆相カラム上に還元サンプルを注入することによって行うことができる。
いくつかの実施態様においては、芳香族部分は、式ＩＩＩの免疫結合体またはその塩の純度を増加させる。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、芳香族部分の増加した溶解度は、結合反応から形成される副生成物（すなわち、生じたアルコール）のより効率的な除去を可能にすると考えられている。従って、いくつかの実施態様においては、式Ｉの化合物、またはその塩は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法と比較して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩の純度を増加させる。例えば、式Ｉの化合物、またはその塩を使用する方法は、他の点では同一の反応パラメーターの下での芳香族部分の代わりにスクシンイミドを有する同一の化合物を使用する方法に対して、式ＩＩＩの免疫結合体、またはその塩中に存在する検出可能な不純物の量を、カラムクロマトグラフィーの前に１％以上（例えば、２％以上、３％以上、４％以上、または５％以上）減少させ得る。純度は、当業者によって知られている任意の手段によって評価することができる。
免疫結合体
本明細書において記載される方法は、式ＩＩＩ：
Figure 2022547066000026
（式中、ＴＡは、本明細書において記載される治療剤であり、Ｌは、本明細書において記載されるリンカーであり、ｒは、１から５０の整数であり、Ａｂは、本明細書において記載される抗体構築物の部分である）の免疫結合体またはその塩を提供する。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの変数ｒによって定義される治療剤は、約１から約１０、例えば、約１から約８、または約１から約６、または約１から約４の範囲である。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の数は、１、２、３、４、５、または６である。いくつかの実態態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の数は、２である。いくつかの場合においては、抗体構築物は、リンカーを介して単一の治療剤に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体構築物は、リンカーを介して２つ以上の治療剤（例えば、３つ以上、４つ以上、または５つ以上の治療剤）に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体構築物は、リンカーを介して１～８個の治療剤（例えば、１～５、１～３、２～８、２～５、２～３、または３～８個の治療剤）に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体構築物は、２～８個の治療剤（例えば、２～５、２～３、または３～８個の治療剤）に共有結合している。
本明細書において記載される方法は、式ＩＩＩの免疫結合体、または本明細書において記載される任意の他の免疫結合体を提供するが、一方で該方法はまた、複数の式ＩＩＩの免疫結合体、または本明細書において記載される任意の他の免疫結合体を含む組成物を提供することができることが、当業者に容易に理解されるであろう。換言すると、本明細書において記載される方法は一般に、免疫結合体あたりの治療剤の平均数（すなわち、式ＩＩＩの定義における変数ｒの平均）が約１から約５０の範囲であるような免疫結合体の分布を提供する。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、例えば、約１から約１０、約１から約８、または約１から約６、または約１から約４の範囲であり得る。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約０．８、１、１．２、１．４、１．６、１．８、２、２．２、２．４、２．６、２．８、３、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、または４．２であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約４である。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約２である。
すなわち、本明細書において記載される方法はまた、複数の式ＩＩＩ：
Figure 2022547066000027
（式中、ＴＡは、本明細書において記載される治療剤であり、Ｌは、本明細書において記載されるリンカーであり、ｒは、約１から約５０であり、Ａｂは、本明細書において記載される抗体構築物の部分である）の免疫結合体またはその塩を含む組成物を提供することができる。
該方法は、抗体構築物の１つ以上のリジン残基で、リンカーを介して抗体構築物に結合した治療剤をもたらす。実施態様においては、抗体構築物がＩｇＧ抗体である場合、治療剤は、抗体の軽鎖、抗体の重鎖、またはそれらの組合せ上の１つ以上の位置でＩｇＧに結合し得る。より具体的には、治療剤は、カバットナンバリングによる軽鎖のＫ１０３、Ｋ１０７、Ｋ１４９、Ｋ１６９、Ｋ１８３およびＫ１８８の１つ以上および／または重鎖のＫ３０、Ｋ４３、Ｋ６５、Ｋ７６、Ｋ１３６、Ｋ２１６、Ｋ２１７、Ｋ２２５、Ｋ２９３、Ｋ３２０、Ｋ３２３、Ｋ３３７、Ｋ３９５、およびＫ４１７の１つ以上で結合し得る。
抗体構築物がＩｇＧ抗体であるいくつかの実施態様においては、該方法は、１つ以上の位置（すなわち、リジン残基）でＩｇＧ抗体に結合した治療剤を有する複数の免疫結合体をもたらす。そのような場合においては、該方法は、複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし得、前記複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖に結合した、６０％超の（例えば、６５％超のまたは７０％超の）治療剤を有する。抗体構築物がＩｇＧ抗体である好ましい実施態様においては、該方法は、複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし、前記複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖に結合した、６５％超の治療剤を有する。抗体構築物がＩｇＧ抗体であるいくつかの実施態様においては、該方法は、複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし、前記複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖のＫ４３、Ｋ６５、およびＫ４１７の１つ以上に結合した、５％超の治療剤を有する。抗体構築物がＩｇＧ抗体である特定の実施態様においては、該方法は、複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩を含む組成物をもたらし、前記複数の式ＩＩＩの免疫結合体、またはそれらの塩は、リンカーを介して重鎖のＫ４３、Ｋ６５、およびＫ４１７のそれぞれに結合した、５％超の治療剤を有する。
式ＩＩＩの免疫結合体の他の特徴（例えば、抗体構築物、治療剤、リンカー、および組成物）は、本明細書において提供される開示から容易に明らかであるであろう。
抗体構築物
一般に、本発明の免疫結合体は、（ｉ）抗原結合ドメインおよび（ｉｉ）Ｆｃドメインを含む抗体構築物を含む。いくつかの実施態様においては、抗体構築物はさらに、標的結合ドメインを含む。特定の実施態様においては、抗体構築物は、抗体である。特定の実施態様においては、抗体構築物は、融合タンパク質である。
免疫結合体中の抗体は、同種異系抗体であり得る。句「同種異系抗体」および用語「同種抗体」は、対象となる個体（例えば、腫瘍を有し、治療を求めている個体）に由来しないが、同じ種に由来する、または異なる種に由来するが、異種抗体（例えば、非自己）としての認識を低下させ、緩和し、または回避するように設計された抗体を指す。例えば、「同種異系抗体」は、ヒト化抗体であり得る。当業者は、異種抗体としての認識を回避するように非ヒト抗体を設計する方法について知っている。別途明記しない限り、本明細書において使用される「抗体」および「同種異系抗体」は、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）または免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）を指す。
ヒト個体の癌細胞が、その同じヒトによって産生されなかった抗体（例えば、抗体が第２のヒト個体によって産生された、抗体がマウスなどの別の種によって産生された、抗体が別の種によって産生されたヒト化抗体であるなど）と接触される場合、その抗体は（第１の個体と比較して）同種異系であると考えられる。ヒト抗原（例えば、癌特異的抗原、癌細胞中および／または癌細胞上で豊富な抗原など）を認識するヒト化マウスモノクローナル抗体は、「同種抗体」（同種異系抗体）であると考えられる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、ポリクローナル同種異系ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施態様においては、抗体は、複数の結合特異性を有するポリクローナルＩｇＧ抗体の混合物で存在する。いくつかの実施態様においては、混合物の抗体は、異なる標的分子に特異的に結合し、いくつかの場合においては、混合物の抗体は、同じ標的分子の異なるエピトープに特異的に結合する。すなわち、抗体の混合物は、いくつかの場合においては、本発明の複数の免疫結合体を含み得る（例えば、治療剤は、混合物の抗体、例えば、ポリクローナルＩｇＧ抗体の混合物に共有結合し得、本発明の免疫結合体の混合物をもたらす）。抗体の混合物は、２人以上の個体（例えば、３人以上の個体、４人以上の個体、５人以上の個体、６人以上の個体、７人以上の個体、８人以上の個体、９人以上の個体、１０人以上の個体等）からプールすることができる。いくつかの場合においては、プールした血清は、同種抗体の供給源として使用し、ここで、該血清は、その誰もが最初の個体ではない、任意の数の個体に由来し得る（例えば、血清は、２人以上の個体、３人以上の個体、４人以上の個体、５人以上の個体、６人以上の個体、７人以上の個体、８人以上の個体、９人以上の個体、１０人以上の個体等からプールすることができる）。いくつかの場合においては、抗体は、使用前に血清から単離しまたは精製する。精製は、異なる個体からの抗体をプールする前にまたは後に行うことができる。
免疫結合体中の抗体が血清由来のＩｇＧを含むいくつかの場合においては、抗体（すなわち、血清由来のＩｇＧ）のいくつか（例えば、０％超５０％未満）、半分、ほとんど（５０％超１００％未満）、または全てについてさえ、標的抗原は不明であろう。しかしながら、そのような混合物は多種多様な標的抗原に特異的な多種多様な抗体を含有するので、混合物中の少なくとも１つの抗体が目的の標的抗原を認識するであろう可能性は高い。
いくつかの実施態様においては、抗体は、ポリクローナル同種異系ＩｇＡ抗体である。いくつかの実施態様においては、抗体は、複数の結合特異性を有するポリクローナルＩｇＡ抗体の混合物で存在する。いくつかの場合においては、混合物の抗体は、異なる標的分子に特異的に結合し、いくつかの場合においては、混合物の抗体は、同じ標的分子の異なるエピトープに特異的に結合する。すなわち、抗体の混合物は、いくつかの場合においては、本発明の複数の免疫結合体を含み得る（例えば、治療剤は、混合物の抗体、例えば、ポリクローナルＩｇＡ抗体の混合物に共有結合し得、本発明の免疫結合体の混合物をもたらす）。抗体の混合物は、２人以上の個体（例えば、３人以上の個体、４人以上の個体、５人以上の個体、６人以上の個体、７人以上の個体、８人以上の個体、９人以上の個体、１０人以上の個体等）からプールすることができる。いくつかの場合においては、プールした血清は、同種抗体の供給源として使用し、ここで、該血清は、その誰もが最初の個体ではない、任意の数の個体に由来し得る（例えば、血清は、２人以上の個体、３人以上の個体、４人以上の個体、５人以上の個体、６人以上の個体、７人以上の個体、８人以上の個体、９人以上の個体、１０人以上の個体等からプールすることができる）。いくつかの場合においては、抗体は、使用前に血清から単離しまたは精製する。精製は、異なる個体からの抗体をプールする前にまたは後に行うことができる。
免疫結合体中の抗体が血清由来のＩｇＡを含むいくつかの場合においては、抗体（すなわち、血清由来のＩｇＡ）のいくつか（例えば、０％超５０％未満）、半分、ほとんど（５０％超１００％未満）、または全てについてさえ、標的抗原は不明であろう。しかしながら、そのような混合物は多種多様な標的抗原に特異的な多種多様な抗体を含有するので、混合物中の少なくとも１つの抗体が目的の標的抗原を認識するであろう可能性は高い。
いくつかの場合においては、免疫結合体中の抗体は、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）および／またはＩＶＩＧ由来の（例えば、濃縮した、精製した、例えば、アフィニティー精製した）抗体を含む。ＩＶＩＧは、多くの（例えば、場合によっては１，０００超から６０，０００人の）正常で健康な献血者に由来する血漿（例えば、いくつかの場合においてはいずれの他のタンパク質も含まない）からプールされたＩｇＧ（免疫グロブリンＧ）を含む血液製品である。ＩＶＩＧは、市販品として入手可能である。ＩＶＩＧは、高い割合の天然のヒト単量体ＩＶＩＧを含み、ＩｇＡ含有量が低い。静脈内投与すると、ＩＶＩＧは、いくつかの疾患状態を改善する。従って、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）は、（１）川崎病、（２）免疫介在性血小板減少症、（３）原発性免疫不全症、（４）造血幹細胞移植（２０歳超の患者を対象とした）、（５）慢性Ｂ細胞リンパ性白血病、および（６）小児ＨＩＶ １型感染症を含む多くの疾患に対するＩＶＩＧの使用を承認した。２００４年、ＦＤＡは、腎臓移植受容者が血液型（ＡＢＯ不適合）または組織適合にかかわらず、任意の健康なドナーから生体ドナー腎臓を受け入れることができるように、腎臓移植受容者のためのＣｅｄａｒｓ－Ｓｉｎａｉ ＩＶＩＧプロトコルを承認した。ＩＶＩＧのこれらのおよび他の一面は、例えば、米国特許出願公開第２０１０／０１５０９４２、２００４／０１０１９０９、２０１３／０１７７５７４、２０１３／０１０８６１９、および２０１３／００１１３８８に記載されており；これらは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
いくつかの場合においては、抗体は、定義されたサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、またはＩｇＡ２）のモノクローナル抗体である。抗体の組合せが使用される場合、抗体は同じサブクラス由来または異なるサブクラス由来であり得る。例えば、抗体は、ＩｇＧ１抗体であり得る。異なる相対比率での異なるサブクラスのさまざまな組合せが、当業者によって得られ得る。いくつかの場合においては、特定のサブクラスまたは異なるサブクラスの特定の組合せは、癌治療または腫瘍サイズの低減に特に効果的であり得る。従って、本発明のいくつかの実施態様は、抗体がモノクローナル抗体である免疫結合体を提供する。いくつかの実施態様においては、モノクローナル抗体は、ヒト化されている。
いくつかの実施態様においては、抗体は、癌細胞の抗原に結合する。例えば、抗体は、癌細胞の表面上に少なくとも１０；１００；１，０００；１０，０００；１００，０００；１，０００，０００；２．５×１０６；５×１０６；または１×１０７コピー以上の量で存在する標的抗原に結合することができる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、非癌細胞上の対応する抗原よりも高い親和性で、癌または免疫細胞上の抗原に結合する。例えば、抗体は、非癌または非免疫細胞上の対応する野生型抗原の認識と比較して、癌または免疫細胞に見出される多型を含有する抗原を優先的に認識し得る。いくつかの場合においては、抗体は、非癌または非免疫細胞よりも高い活性で癌または免疫細胞に結合する。例えば、癌または免疫細胞は、より高密度の抗原を発現し得、すなわち、多価抗体の癌または免疫細胞へのより高い親和性の結合を提供し得る。
いくつかの場合においては、抗体は、非癌抗原に有意には結合しない（例えば、抗体は、標的癌抗原よりも少なくとも１０、１００、１，０００、１０，０００、１００，０００、または１，０００，０００倍低い親和性（高いＫｄ）で１つ以上の非癌抗原に結合する）。いくつかの場合においては、抗体が結合する標的癌抗原は、癌細胞上で豊富である。例えば、標的癌抗原は、対応する非癌細胞よりも少なくとも２、５、１０、１００、１，０００、１０，０００、１００，０００、または１，０００，０００倍高いレベルで癌細胞の表面に存在し得る。いくつかの場合においては、対応する非癌細胞は、過剰増殖性またはいずれにしても癌性ではない同じ組織または起源の細胞である。一般に、癌細胞の抗原（標的抗原）に特異的に結合する対象ＩｇＧ抗体は、他の利用可能な抗原と比較して、その特定の抗原に優先的に結合する。しかしながら、標的抗原は、他の細胞と比較して癌細胞に特異的である必要はなくまたは癌細胞中で豊富である必要さえない（例えば、標的抗原は他の細胞によって発現され得る）。すなわち、語句「癌細胞の抗原に特異的に結合する抗体」において、用語「特異的に」は、抗体の特異性を指し、その特定の細胞型における抗原の独自性を指すのではない。
いくつかの実施態様においては、免疫結合体中の抗体は、修飾されたＦｃ領域を含有し、ここで、修飾は、１つ以上のＦｃ受容体へのＦｃ領域の結合を調節する。
いくつかの実施態様においては、抗体は、Ｆｃ領域において１つ以上の修飾（例えば、アミノ酸挿入、欠失、および／または置換）を含有し、これにより、Ｆｃ領域の突然変異を欠く天然抗体と比較して、１つ以上のＦｃ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２Ａ）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２Ｂ）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、および／またはＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ））への調節された結合（例えば、結合の増加または結合の減少）をもたらす。いくつかの実施態様においては、抗体は、抗体のＦｃ領域のＦｃγＲＩＩＢへの結合を低下させるＦｃ領域における１つ以上の修飾（例えば、アミノ酸挿入、欠失、および／または置換）を含有する。いくつかの実施態様においては、抗体は、Ｆｃ領域の突然変異を欠く天然抗体と比較して、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２Ａ）、および／またはＦｃＲγＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）への同じ結合を維持または結合を増加させながら、抗体のＦｃγＲＩＩＢへの結合を低下させる抗体のＦｃ領域における１つ以上の修飾（例えば、アミノ酸挿入、欠失、および／または置換）を含有する。いくつかの実施態様においては、抗体は、抗体のＦｃ領域のＦｃγＲＩＩＢへの結合を増加させるＦｃ領域における１つ以上の修飾を含有する。いくつかの実施態様においては、修飾は実質的に、抗体エフェクター機能を低下させるかまたは排除する。
いくつかの実施態様においては、調節された結合は、抗体の天然Ｆｃ領域と比較した抗体のＦｃ領域における突然変異によって提供される。突然変異は、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、またはそれらの組合せにおいてあり得る。「天然Ｆｃ領域」は、「野生型Ｆｃ領域」と同義であり、天然に見出されるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一であるか、または天然抗体に見出されるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一であるアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域は、天然配列ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ領域、および天然配列ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域、並びにそれらの天然に存在する変異体を含む。天然配列Ｆｃは、Ｆｃのさまざまなアロタイプを含む（例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，１（４）：３３２－３３８（２００９）を参照されたい）。
いくつかの実施態様においては、１つ以上のＦｃ受容体への調節された結合をもたらすＦｃ領域の突然変異は、以下の突然変異：ＳＤ（Ｓ２３９Ｄ）、ＳＤＩＥ（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ）、ＳＥ（Ｓ２６７Ｅ）、ＳＥＬＦ（Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆ）、ＳＤＩＥ（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ）、ＳＤＩＥＡＬ（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ）、ＧＡ（Ｇ２３６Ａ）、ＡＬＩＥ（Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ）、ＧＡＳＤＡＬＩＥ（Ｇ２３６Ａ／Ｓ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ）、Ｖ９（Ｇ２３７Ｄ／Ｐ２３８Ｄ／Ｐ２７１Ｇ／Ａ３３０Ｒ）、およびＶ１１（Ｇ２３７Ｄ／Ｐ２３８Ｄ／Ｈ２６８Ｄ／Ｐ２７１Ｇ／Ａ３３０Ｒ）の１つ以上、並びに／または以下のアミノ酸：Ｅ２３３、Ｇ２３７、Ｐ２３８、Ｈ２６８、Ｐ２７１、Ｌ３２８およびＡ３３０での１つ以上の突然変異を含み得る。Ｆｃ受容体結合を調節するための追加のＦｃ領域修飾は、例えば、米国特許出願公開第２０１６／０１４５３５０号並びに米国特許第７，４１６，７２６号および第５，６２４，８２１号に記載されており、これらは本明細書において参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施態様においては、抗体のＦｃ領域は、天然の非修飾Ｆｃ領域と比較して、Ｆｃ領域の変更されたグリコシル化パターンを有するように修飾される。
ヒト免疫グロブリンは、各重鎖のＣγ２ドメインのＡｓｎ２９７残基でグリコシル化されている。このＮ－結合オリゴ糖は、コアの七糖であるＮ－アセチルグルコサミン４マンノース３（ＧｌｃＮＡｃ４Ｍａｎ３）から構成されている。エンドグリコシダーゼまたはＰＮＧａｓｅ Ｆでの七糖の除去は、活性化させるＦｃγＲに対する抗体結合親和性を大幅に低下させ、減少したエフェクター機能につながり得る抗体Ｆｃ領域のコンフォメーション変化につながることが知られている。コア七糖は、しばしばガラクトース、二等分ＧｌｃＮＡｃ、フコース、またはシアル酸で修飾され、これらは、活性化させるおよび抑制性ＦｃγＲへのＦｃの結合に異なる影響を与える。さらに、α２，６－シアル化はインビボで抗炎症活性を増強するが、一方で脱フコシル化はＦｃγＲＩＩＩａ結合の改善並びに抗体依存性細胞毒性および抗体依存性食作用の１０倍の増加につながることが実証されてきた。従って、特定のグリコシル化パターンは、炎症性エフェクター機能を制御するために使用され得る。
いくつかの実施態様においては、グリコシル化パターンを変更するための修飾は、突然変異である。例えば、Ａｓｎ２９７での置換。いくつかの実施態様においては、Ａｓｎ２９７はグルタミンに変異している（Ｎ２９７Ｑ）。ＦｃγＲ調節シグナル伝達を調節する抗体で免疫応答を制御する方法は、例えば、米国特許第７，４１６，７２６号並びに米国特許出願公開第２００７／００１４７９５号および第２００８／０２８６８１９号に記載されており、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、天然に存在しないグリコシル化パターンを有する操作されたＦａｂ領域を含有するように修飾されている。例えば、ハイブリドーマは、ＦｃＲγＩＩＩａ結合およびエフェクター機能の増加を可能にする特定の突然変異を有するアフコシル化ｍＡｂ、脱シアル化ｍＡｂまたは脱グリコシル化Ｆｃを分泌するように遺伝子操作され得る。いくつかの実施態様においては、抗体は、アフコシル化されるように操作されている。
いくつかの実施態様においては、抗体の全Ｆｃ領域は、抗体のＦａｂ領域が非天然Ｆｃ領域に接合されるように、異なるＦｃ領域と交換されている。例えば、通常はＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含むアテゾリズマブのＦａｂ領域は、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、またはＩｇＡに接合され得、または通常はＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含むニボルマブのＦａｂ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＡ１、またはＩｇＧ２に接合され得る。いくつかの実施態様においては、非天然Ｆｃドメインを有するＦｃ修飾抗体はまた、記載されたＦｃドメインの安定性を調節する、ＩｇＧ４ Ｆｃ内のＳ２２８Ｐ突然変異などの１つ以上のアミノ酸修飾を含む。いくつかの実施態様においては、非天然Ｆｃドメインを有するＦｃ修飾抗体はまた、ＦｃＲへのＦｃ結合を調節する、本明細書に記載の１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
いくつかの実施態様においては、Ｆｃ領域のＦｃＲへの結合を調節する修飾は、天然の非修飾抗体と比較した場合、抗体のＦａｂ領域のその抗原への結合を変化させない。他の実施態様においては、Ｆｃ領域のＦｃＲへの結合を調節する修飾はまた、天然の非修飾抗体と比較した場合、抗体のＦａｂ領域のその抗原への結合を増加させる。
いくつかの実施態様においては、Ｆｃ領域は、トランスフォーミング増殖因子ベータ１（ＴＧＦβ１）に結合することができるＴＧＦβ１受容体、またはその断片の付着または包含によって修飾される。例えば、受容体は、ＴＧＦβ受容体ＩＩ（ＴＧＦβＲＩＩ）であり得る（その全体が本明細書中に組み込まれる米国特許第９，６７６，８６３号を参照されたい）。いくつかの実施態様においては、ＴＧＦβ受容体は、ヒトＴＧＦβ受容体である。いくつかの実施態様においては、Ｆｃ領域（例えば、ＩｇＧ）は、ＴＧＦβ受容体（例えば、ＴＧＦβＲＩＩ）細胞外ドメイン（ＥＣＤ；例えば、米国特許第９，６７６，８６３号の配列番号９のアミノ酸２４～１５９）へのＣ末端融合を有する。「Ｆｃリンカー」は、ＩｇＧをＴＧＦβＲ細胞外ドメイン、例えば、Ｇ４Ｓ４Ｇ Ｆｃリンカーに付着させるために使用し得る。Ｆｃリンカーは、標的への結合特異性を維持しながら、分子の適切な三次元折り畳みを可能にする、短くて柔軟なペプチドであり得る。いくつかの実施態様においては、ＴＧＦβ受容体のＮ末端は、Ｆｃ領域に融合している（Ｆｃリンカーの有無にかかわらず）。いくつかの実施態様においては、免疫グロブリン重鎖のＣ末端は、ＴＧＦβ受容体に融合している（Ｆｃリンカーの有無にかかわらず）。いくつかの実施態様においては、抗体重鎖のＣ末端リジン残基は、アラニンに変異している。いくつかの実施態様においては、抗体は、配列番号１６８を含む。
標的
いくつかの実施態様においては、抗原結合ドメインまたは抗体は、５Ｔ４、ＡＢＬ、ＡＢＣＦ１、ＡＣＶＲ１、ＡＣＶＲ１Ｂ、ＡＣＶＲ２、ＡＣＶＲ２Ｂ、ＡＣＶＲＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＦＰ、アグリカン、ＡＧＲ２、ＡＩＣＤＡ、ＡＩＦ１、ＡＩＧＩ、ＡＫＡＰ１、ＡＫＡＰ２、ＡＬＣＡＭ、ＡＬＫ、ＡＭＨ、ＡＭＨＲ２、ＡＨＭＲ２、ＡＮＧＰＴ１、ＡＮＧＰＴ２、ＡＮＧＰＴＬ３、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＰＥＰ、ＡＰＣ、ＡＰＯＣｌ、ＡＲ、アロマターゼ、ＡＳＰＨ、ＡＴＸ、ＡＸ１、ＡＸＬ、ＡＺＧＰ１（亜鉛－ａ－糖タンパク質）、Ｂ４ＧＡＬＮＴ１、Ｂ７、Ｂ７．１、Ｂ７．２、Ｂ７－Ｈ１、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、Ｂ７－Ｈ６、ＢＡＤ、ＢＡＦＦ、ＢＡＧ１、ＢＡＩ１、ＢＣＲ、ＢＣＬ２、ＢＣＬ６、ＢＣＭＡ、ＢＤＮＦ、ＢＬＮＫ、ＢＬＲ１（ＭＤＲ１５）、ＢＩｙＳ、ＢＭＰ１、ＢＭＰ２、ＢＭＰ３Ｂ（ＧＤＦＩＯ）、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ８、ＢＭＰ１０、ＢＭＰＲ１Ａ、ＢＭＰＲ１Ｂ、ＢＭＰＲ２、ＢＰＡＧ１（プレクチン）、ＢＲＣＡ１、Ｃ１９ｏｒｆｌＯ（ＩＬ２７ｗ）、Ｃ３、Ｃ４Ａ、Ｃ５、Ｃ５Ｒ１、ＣＡ６、ＣＡ９、ＣＡＮＴ１、ＣＡＰＲＩＮ－１、ＣＡＳＰ１、ＣＡＳＰ４、ＣＡＶ１、ＣＣＢＰ２（Ｄ６／ＪＡＢ６１）、ＣＣＬ１（１－３０９）、ＣＣＬＩ１（エオタキシン）、ＣＣＬ１３（ＭＣＰ－４）、ＣＣＬ１５（ＭＩＰ－Ｉｄ）、ＣＣＬ１６（ＨＣＣ－４）、ＣＣＬ１７（ＴＡＲＣ）、ＣＣＬ１８（ＰＡＲＣ）、ＣＣＬ１９（ＭＩＰ－３ｂ）、ＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）、ＭＣＡＦ、ＣＣＬ２０（ＭＩＰ－３ａ）、ＣＣＬ２１（ＭＥＰ－２）、ＳＬＣ、エクソダス（ｅｘｏｄｕｓ）－２、ＣＣＬ２２（ＭＤＣ／ＳＴＣ－Ｉ）、ＣＣＬ２３（ＭＰＩＦ－Ｉ）、ＣＣＬ２４（ＭＰＩＦ－２／エオタキシン－２）、ＣＣＬ２５（ＴＥＣＫ）、ＣＣＬ２６（エオタキシン－３）、ＣＣＬ２７（ＣＴＡＣＫ／ＩＬＣ）、ＣＣＬ２８、ＣＣＬ３（ＭＩＰ－Ｉａ）、ＣＣＬ４（ＭＩＰＩｂ）、ＣＣＬ５（ＲＡＮＴＥＳ）、ＣＣＬ７（ＭＣＰ－３）、ＣＣＬ８（ｍｃｐ－２）、ＣＣＮＡ１、ＣＣＮＡ２、ＣＣＮＤ１、ＣＣＮＥ１、ＣＣＮＥ２、ＣＣＲ１（ＣＫＲ１／ＨＭ１４５）、ＣＣＲ２（ｍｃｐ－ＩＲＢ／ＲＡ）、ＣＣＲ３（ＣＫＲ３／ＣＭＫＢＲ３）、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５（ＣＭＫＢＲ５／ＣｈｅｍＲ１３）、ＣＣＲ６（ＣＭＫＢＲ６／ＣＫＲ－Ｌ３／ＳＴＲＬ２２／ＤＲＹ６）、ＣＣＲ７（ＣＫＲ７／ＥＢＩ１）、ＣＣＲ８またはＣＤｗ１９８（ＣＭＫＢＲ８／ＴＥＲＩ／ＣＫＲ－Ｌ１）、ＣＣＲ９（ＧＰＲ－９－６）、ＣＣＲＬ１（ＶＳＨＫ１）、ＣＣＲＬ２（Ｌ－ＣＣＲ）、ＣＤ１３、ＣＤ１６４、ＣＤ１９、ＣＤＨ６、ＣＤＩＣ、ＣＤ２、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２００、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、ＣＤ３Ｚ、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４４、ＣＤ４５ＲＢ、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７２、ＣＤ７４、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ８、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８３、ＣＤ８６、ＣＤ９７、ＣＤ９９、ＣＤ１１７、ＣＤ１２５、ＣＤ１３７、ＣＤ１４７、ＣＤ１７９ｂ、ＣＤ２２３、ＣＤ２７９、ＣＤ１５２、ＣＤ２７４、ＣＤＨ１（Ｅ－カドヘリン）、ＣＤＨ１Ｏ、ＣＤＨ１２、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ１８、ＣＤＨ１９、ＣＤＨ２Ｏ、ＣＤＨ３、ＣＤＨ５、ＣＤＨ７、ＣＤＨ８、ＣＤＨ９、ＣＤＨ１７、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ９、ＣＤＫＮ１Ａ（ｐ２１Ｗａｐ１／Ｃｉｐ１）、ＣＤＫＮ１Ｂ（ｐ２７Ｋｉｐ１）、ＣＤＫＮ１Ｃ、ＣＤＫＮ２Ａ（ｐ１６ＩＮＫ４ａ）、ＣＤＫＮ２Ｂ、ＣＤＫＮ２Ｃ、ＣＤＫＮ３、ＣＥＡ、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＥＡＣＡＭ６、ＣＥＢＰＢ、ＣＥＲＩ、ＣＦＣ１Ｂ、ＣＨＧＡ、ＣＨＧＢ、キチナーゼ、ＣＨＳＴ１Ｏ、ＣＩＫ、ＣＫＬＦＳＦ２、ＣＫＬＦＳＦ３、ＣＫＬＦＳＦ４、ＣＫＬＦＳＦ５、ＣＫＬＦＳＦ６、ＣＫＬＦＳＦ７、ＣＫＬＦＳＦ８、ＣＬＤＮ３、ＣＬＤＮ６、ＣＬＤＮ７（クローディン－７）、ＣＬＤＮ１８、ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＬＥＣ６Ａ、ＣＬＥＣ１１Ａ、ＣＬＥＣ１２Ａ、ＣＬＥＣ１４Ａ、ＣＬＮ３、ＣＬＵ（クラステリン）、ＣＭＫＬＲ１、ＣＭＫＯＲ１（ＲＤＣ１）、ＣＮＲ１、Ｃ－ＭＥＴ、ＣＯＬ１８Ａ１、ＣＯＬＩＡ１、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ６Ａ１、ＣＲ２、クリプト（Ｃｒｉｐｔｏ）、ＣＲＰ、ＣＳＦ１（Ｍ－ＣＳＦ）、ＣＳＦ２（ＧＭ－ＣＳＦ）、ＣＳＦ３（ＧＣＳＦ）、ＣＴＡＧ１Ｂ（ＮＹ－ＥＳＯ－１）、ＣＴＬＡ４、ＣＴＬ８、ＣＴＮＮＢ１（ｂ－カテニン）、ＣＴＳＢ（カテプシンＢ）、ＣＸ３ＣＬ１（ＳＣＹＤ１）、ＣＸ３ＣＲ１（Ｖ２８）、ＣＸＣＬ１（ＧＲＯ１）、ＣＸＣＬ１Ｏ（ＩＰ－ＩＯ）、ＣＸＣＬＩ１（１－ＴＡＣ／ＩＰ－９）、ＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ１）、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＬ２（ＧＲＯ２）、ＣＸＣＬ３（ＧＲＯ３）、ＣＸＣＬ５（ＥＮＡ－７８／ＬＩＸ）、ＣＸＣＬ６（ＧＣＰ－２）、ＣＸＣＬ９（ＭＩＧ）、ＣＸＣＲ３（ＧＰＲ９／ＣＫＲ－Ｌ２）、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ６（ＴＹＭＳＴＲ／ＳＴＲＬ３３／ボンゾ（Ｂｏｎｚｏ））、ＣＹＢ５、ＣＹＣ１、ＣＹＳＬＴＲ１、ＤＡＢ２ＩＰ、ＤＥＳ、ＤＫＦＺｐ４５１Ｊ０１１８、ＤＬＫ１、ＤＮＣＬ１、ＤＰＰ４、Ｅ２Ｆ１、エンゲル（Ｅｎｇｅｌ）、エッジ（Ｅｄｇｅ）、フェネル（Ｆｅｎｎｅｌ）、ＥＦＮＡ３、ＥＦＮＢ２、ＥＧＦ、ＥＧＦＲ、ＥＬＡＣ２、ＥＮＧ、Ｅｎｏｌａ、ＥＮＯ２、ＥＮＯ３、ＥＮＰＰ３、ＥｐＣＡＭ、ＥＰＨＡ１、ＥＰＨＡ２、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＡ４、ＥＰＨＡ５、ＥＰＨＡ６、ＥＰＨＡ７、ＥＰＨＡ８、ＥＰＨＡ９、ＥＰＨＡ１０、ＥＰＨＢ１、ＥＰＨＢ２、ＥＰＨＢ３、ＥＰＨＢ４、ＥＰＨＢ５、ＥＰＨＢ６、ＥＰＨＲＩＮ－Ａ１、ＥＰＨＲＩＮ－Ａ２、ＥＰＨＲＩＮＡ３、ＥＰＨＲＩＮ－Ａ４、ＥＰＨＲＩＮ－Ａ５、ＥＰＨＲＩＮ－Ａ６、ＥＰＨＲＩＮ－Ｂ１、ＥＰＨＲＩＮ－Ｂ２、ＥＰＨＲＩＮ－Ｂ３、ＥＰＨＢ４、ＥＰＧ、ＥＲＢＢ２（ＨＥＲ－２）、ＥＲＢＢ３、ＥＲＢＢ４、ＥＲＥＧ、ＥＲＫ８、エストロゲン受容体、アール（Ｅａｒｌ）、ＥＳＲ２、Ｆ３（ＴＦ）、ＦＡＤＤ、ＦＡＰ、ファルネシルトランスフェラーゼ、ＦａｓＬ、ＦＡＳＮｆ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＥＲ２、ＦＣＧＲ３Ａ、ＦＧＦ、ＦＧＦ１（ａＦＧＦ）、ＦＧＦ１０、ＦＧＦ１ １、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１２Ｂ、ＦＧＦ１３、ＦＧＦ１４、ＦＧＦ１６、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、ＦＧＦ１９、ＦＧＦ２（ｂＦＧＦ）、ＦＧＦ２０、ＦＧＦ２１、ＦＧＦ２２、ＦＧＦ２３、ＦＧＦ３（ｉｎｔ－２）、ＦＧＦ４（ＨＳＴ）、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６（ＨＳＴ－２）、ＦＧＦ７（ＫＧＦ）、ＦＧＦ８、ＦＧＦ９、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＩＧＦ（ＶＥＧＦＤ）、ＦＩＬ１（ＥＰＳＩＬＯＮ）、ＦＢＬ１（ＺＥＴＡ）、ＦＬＪ１２５８４、ＦＬＪ２５５３０、ＦＬＲＴ１（フィブロネクチン）、ＦＬＴ１、ＦＬＴ－３、ＦＯＬＲ１、ＦＯＬＨ１、ＦＯＳ、ＦＯＳＬ１（ＦＲＡ－１）、ＦＲ－アルファ、ＦＹ（ＤＡＲＣ）、ＧＡＢＲＰ（ＧＡＢＡａ）、ＧＡＧＥＢ１、ＧＡＧＥＣ１、ＧＡＬＮＡＣ４Ｓ－６ＳＴ、ＧＡＴＡ３、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧＤＦ５、ＧＦＩ１、ＧＦＲＡ１、ＧＧＴ１、ＧＭ－ＣＳＦ、ＧＮＡＳ１、ＧＮＲＨ１、ＧＰＣ１、ＧＰＣ３、ＧＰＮＢ、ＧＰＲ２（ＣＣＲ１０）、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ４４、ＧＰＲ８１（ＦＫＳＧ８０）、ＧＲＣＣ１Ｏ（Ｃ１Ｏ）、ＧＲＰ、ＧＳＮ（ゲルゾリン（Ｇｅｌｓｏｌｉｎ））、ＧＳＴＰ１、ＧＵＣＹ２Ｃ、ＨＡＶＣＲ１、ＨＡＶＣＲ２、ＨＤＡＣ、ＨＤＡＣ４、ＨＤＡＣ５、ＨＤＡＣ７Ａ、ＨＤＡＣ９、ヘッジホッグ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＩＦ１Ａ、ＨＩＰ１、ヒスタミンおよびヒスタミン受容体、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＭ７４、ＨＭＯＸＩ、ＨＳＰ９０、ＨＵＭＣＹＴ２Ａ、ＩＣＥＢＥＲＧ、ＩＣＯＳＬ、ＩＤ２、ＩＦＮ－ａ、ＩＦＮＡ１、ＩＦＮＡ２、ＩＦＮＡ４、ＩＦＮＡ５、ＥＦＮＡ６、ＢＦＮＡ７、ＩＦＮＢ１、ＩＦＮガンマ、ＩＦＮＷ１、ＩＧＢＰ１、ＩＧＦ１、ＩＧＦ１Ｒ、ＩＧＦ２、ＩＧＦＢＰ２、ＩＧＦＢＰ３、ＩＧＦＢＰ６、ＤＬ－１、ＩＬＩＯ、ＩＬＩＯＲＡ、ＩＬＩＯＲＢ、ＩＬ－１、ＩＬ１Ｒ１（ＣＤ１２１ａ）、ＩＬ１Ｒ２（ＣＤ１２１ｂ）、ＩＬ－ＩＲＡ、ＩＬ－２、ＩＬ２ＲＡ（ＣＤ２５）、ＩＬ２ＲＢ（ＣＤ１２２）、ＩＬ２ＲＧ（ＣＤ１３２）、ＩＬ－４、ＩＬ－４Ｒ（ＣＤ１２３）、ＩＬ－５、ＩＬ５ＲＡ（ＣＤ１２５）、ＩＬ３ＲＢ（ＣＤ１３１）、ＩＬ－６、ＩＬ６ＲＡ、（ＣＤ１２６）、ＩＲ６ＲＢ（ＣＤ１３０）、ＩＬ－７、ＩＬ７ＲＡ（ＣＤ１２７）、ＩＬ－８、ＣＸＣＲ１（ＩＬ８ＲＡ）、ＣＸＣＲ２、（ＩＬ８ＲＢ／ＣＤ１２８）、ＩＬ－９、ＩＬ９Ｒ（ＣＤ１２９）、ＩＬ－１０、ＩＬ１０ＲＡ（ＣＤ２１０）、ＩＬ１０ＲＢ（ＣＤＷ２１０Ｂ）、ＩＬ－１１、ＩＬ１１ＲＡ、ＩＬ－１２、ＩＬ－１２Ａ、ＩＬ－１２Ｂ、ＩＬ－１２ＲＢ１、ＩＬ－１２ＲＢ２、ＩＬ－１３、ＩＬ１３ＲＡ１、ＩＬ１３ＲＡ２、ＩＬ１４、ＩＬ１５、ＩＬ１５ＲＡ、ＩＬ１６、ＩＬ１７、ＩＬ１７Ａ、ＩＬ１７Ｂ、ＩＬ１７Ｃ、ＩＬ１７Ｒ、ＩＬ１８、ＩＬ１８ＢＰ、ＩＬ１８Ｒ１、ＩＬ１８ＲＡＰ、ＩＬ１９、ＩＬＩＡ、ＩＬＩＢ、ＩＬＩＦ１０、ＩＬＩＦ５、ＩＬ１Ｆ６、ＩＬＩＦ７、ＩＬ１Ｆ８、ＤＬ１Ｆ９、ＩＬＩＨＹＩ、ＩＬＩＲ１、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬＩＲＡＰ、ＩＬＩＲＡＰＬＩ、ＩＬＩＲＡＰＬ２、ＩＬＩＲＬ１、ＩＬ１ＲＬ２、ＩＬＩＲＮ、ＩＬ２、ＩＬ２０、ＩＬ２０ＲＡ、ＩＬ２１Ｒ、ＩＬ２２、ＩＬ２２Ｒ、ＩＬ２２ＲＡ２、ＩＬ２３、ＤＬ２４、ＩＬ２５、ＩＬ２６、ＩＬ２７、ＩＬ２８Ａ、ＩＬ２８Ｂ、ＩＬ２９、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ２ＲＢ、ＩＬ２ＲＧ、ＩＬ３、ＩＬ３０、ＩＬ３ＲＡ、ＩＬ４、１Ｌ４、ＩＬ６ＳＴ（糖タンパク質１３０）、ＩＬＫ、ＩＮＨＡ、ＩＮＨＢＡ、ＩＮＳＬ３、ＩＮＳＬ４、ＩＲＡＫ１、ＩＲＡＫ２、ＩＴＧＡ１、ＩＴＧＡ２、ＩＴＧＡ３、ＩＴＧＡ６（α６インテグリン）、ＩＴＧＡＶ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ４（β４インテグリン）、ＪＡＧ１、ＪＡＫ１、ＪＡＫ３、ＪＴＢ、ＪＵＮ、Ｋ６ＨＦ、ＫＡＩ１、ＫＤＲ、ＫＩＴ、ＫＩＴＬＧ、ＫＬＦ５（ＧＣ ボックス（Ｂｏｘ） ＢＰ）、ＫＬＦ６、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ１５、ＫＬＫ３、ＫＬＫ４、ＫＬＫ５、ＫＬＫ６、ＫＬＫ９、ＫＲＴ１、ＫＲＴ１９（ケラチン１９）、ＫＲＴ２Ａ、ＫＲＴＨＢ６（髪特有のＩＩ型ケラチン）、Ｌ１ＣＡＭ、ＬＡＧ３、ＬＡＭＡ５、ＬＡＭＰ１、ＬＥＰ（レプチン）、Ｌｅｗｉｓ Ｙ抗原（“ＬｅＹ”）、ＬＩＬＲＢ１、Ｌｉｎｇｏ－ｐ７５、Ｌｉｎｇｏ－Ｔｒｏｙ、ＬＧＡＬＳ３ＢＰ、ＬＲＲＣ１５、ＬＲＰ５、ＬＲＰ６、ＬＰＳ、ＬＴＡ（ＴＮＦ－ｂ）、ＬＴＢ、ＬＴＢ４Ｒ（ＧＰＲ１６）、ＬＴＢ４Ｒ２、ＬＴＢＲ、ＬＹ７５、ＬＹＰＤ３、ＭＡＣＭＡＲＣＫＳ、ＭＡＧまたはＯＭｇｐ、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥＡ６、ＭＡＰ２Ｋ７（ｃ－Ｊｕｎ）、ＭＣＰ－１、ＭＤＫ、ＭＩＢ１、ミッドカイン、ＭＩＦ、ＭＩＳＲＩＩ、ＭＪＰ－２、ＭＬＳＮ、ＭＫ、ＭＫＩ６７（Ｋｉ－６７）、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＳ４Ａ１、ＭＳＭＢ、ＭＴ３（メタロチオネクチン－ＵＩ）、ｍＴＯＲ、ＭＴＳＳ１、ＭＵＣ１（ムチン）、ＭＵＣ１６、ＭＹＣ、ＭＹＤ８８、ＮＣＡＭ１、ＮＣＫ２、ＮＣＲ３ＬＧ１、ニュ－ロカン、ＮＦＫＢＩ、ＮＦＫＢ２、ＮＧＦＢ（ＮＧＦ）、ＮＧＦＲ、ＮｇＲ－Ｌｉｎｇｏ、ＮｇＲＮｏｇｏ６６、（Ｎｏｇｏ）、ＮｇＲ－ｐ７５、ＮｇＲ－Ｔｒｏｙ、ＮＭＥＩ（ＮＭ２３Ａ）、ＮＯＴＣＨ、ＮＯＴＣＨ１、ＮＯＴＣＨ３、ＮＯＸ５、ＮＰＰＢ、ＮＲＯＢ１、ＮＲＯＢ２、ＮＲＩＤ１、ＮＲ１Ｄ２、ＮＲ１Ｈ２、ＮＲ１Ｈ３、ＮＲ１Ｈ４、ＮＲ１１２、ＮＲ１１３、ＮＲ２Ｃ１、ＮＲ２Ｃ２、ＮＲ２Ｅ１、ＮＲ２Ｅ３、ＮＲ２Ｆ１、ＮＲ２Ｆ２、ＮＲ２Ｆ６、ＮＲ３Ｃ１、ＮＲ３Ｃ２、ＮＲ４Ａ１、ＮＲ４Ａ２、ＮＲ４Ａ３、ＮＲ５Ａ１、ＮＲ５Ａ２、ＮＲ６Ａ１、ＮＲＰ１、ＮＲＰ２、ＮＴ５Ｅ、ＮＴＮ４、ＮＹ－ＥＳＯ１、ＯＤＺＩ、ＯＰＲＤＩ、Ｐ２ＲＸ７、ＰＡＰ、ＰＡＲＴ１、ＰＡＴＥ、ＰＡＷＲ、Ｐ－カドヘリン、
ＰＣＡ３、ＰＣＤ１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＣＤＧＦ、ＰＣＮＡ、ＰＤＧＦＡ、ＰＤＧＦＢ、ＰＤＧＦＲＡ、ＰＤＧＦＲＢ、ＰＥＣＡＭＩ、Ｌ１－ＣＡＭ、ｐｅｇ－アスパラギナーゼ、ＰＦ４（ＣＸＣＬ４）、ＰＧＦ、ＰＧＲ、ホスファカン、ＰＩＡＳ２、ＰＩ３キナーゼ、ＰＩＫ３ＣＧ、ＰＬＡＵ（ｕＰＡ）、ＰＬＧ、ＰＬＸＤＣＩ、ＰＫＣ、ＰＫＣ－ベータ、ＰＰＢＰ（ＣＸＣＬ７）、ＰＰＩＤ、ＰＲ１、ＰＲＡＭＥ、ＰＲＫＣＱ、ＰＲＫＤ１、ＰＲＬ、ＰＲＯＣ、ＰＲＯＫ２、ＰＳＡＰ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＥＮ、ＰＴＨＲ２、ＰＴＧＳ２（ＣＯＸ－２）、ＰＴＫ７、ＰＴＮ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ４、ＲＡＣ２（Ｐ２１Ｒａｃ２）、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫリガンド、ＲＡＲＢ、ＲＧＳ１、ＲＧＳ１３、ＲＧＳ３、ＲＮＦＩ１Ｏ（ＺＮＦ１４４）、ロン（Ｒｏｎ）、ＲＯＢＯ２、ＲＯＲ１、ＲＸＲ、Ｓ１００Ａ２、ＳＣＧＢ １Ｄ２（リポフィリンＢ）、ＳＣＧＢ２Ａ１（マンマグロビン２）、ＳＣＧＢ２Ａ２（マンマグロビン１）、ＳＣＹＥ１（内皮単球活性化サイトカイン）、ＳＤＦ２、ＳＥＲＰＥＮＡ１、ＳＥＲＰＩＮＡ３、ＳＥＲＰＩＮＢ５（マスピン）、ＳＥＲＰＩＮＥＩ（ＰＡＩ－Ｉ）、ＳＥＲＰＩＮＦＩ、ＳＨＩＰ－１、ＳＨＩＰ－２、ＳＨＢ１、ＳＨＢ２、ＳＨＢＧ、ＳｆｃＡＺ、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ３３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ３４Ａ２、ＳＬＩＴ２、ＳＬＩＴＲＫ６、ＳＰＰ１、ＳＰＲＲ１Ｂ（Ｓｐｒ１）、ＳＴ６ＧＡＬ１、ＳＴ８ＳＩＡ１、ＳＴＡＢ１、ＳＴＡＴＥ、ＳＴＥＡＰ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＳＴＲ２、ＴＡＣＳＴＤ２、ＴＢ４Ｒ２、ＴＢＸ２１、ＴＣＰ１Ｏ、ＴＤＧＦ１、ＴＥＫ、ＴＧＦＡ、ＴＧＦＢ１、ＴＧＦＢ１Ｉ１、ＴＧＦＢ２、ＴＧＦＢ３、ＴＧＦＢＩ、ＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＧＦＢＲ３、ＴＨＩＬ、ＴＨＢＳ１（トロンボスポンジン－１）、ＴＨＢＳ２、ＴＨＢＳ４、ＴＨＰＯ、ＴＩＥ（Ｔｉｅ－１）、ＴＩＭＰ３、組織因子、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＮＦ、ＴＮＦ－ａ、ＴＮＦＡＩＰ２（Ｂ９４）、ＴＮＦＡＩＰ３、ＴＮＦＲＳＦＩ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６（Ｆａｓ）、ＴＮＦＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＳＦ１Ｏ（ＴＲＡＩＬ）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＳＦ１ １（ＴＲＡＮＣＥ）、ＴＮＦＳＦ１２（ＡＰＯ３Ｌ）、ＴＮＦＳＦ１３（Ａｐｒｉｌ）、ＴＮＦＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＳＦ１４（ＨＶＥＭ－Ｌ）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＨＶＥＭ）、ＴＮＦＳＦ１５（ＶＥＧＩ）、ＴＮＦＳＦ１８、ＴＮＦＳＦ４（ＯＸ４０リガンド）、ＴＮＦＳＦ５（ＣＤ４０リガンド）、ＴＮＦＳＦ６（ＦａｓＬ）、ＴＮＦＳＦ７（ＣＤ２７リガンド）、ＴＮＦＳＦ８（ＣＤ３０リガンド）、ＴＮＦＳＦ９（４－１ＢＢリガンド）、ＴＯＬＬＩＰ、Ｔｏｌｌ様受容体、ＴＯＰ２Ａ（トポイソメラーゼＩｉａ）、ＴＰ５３、ＴＰＭ１、ＴＰＭ２、ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ１、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ３、ＴＲＡＦ４、ＴＲＡＦ５、ＴＲＡＦ６、ＴＲＫＡ、ＴＲＥＭ１、ＴＲＥＭ２、ＴＲＯＰ２、ＴＲＰＣ６、ＴＳＬＰ、ＴＷＥＡＫ、チロシナーゼ、ｕＰＡＲ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＢ、ＶＥＧＦＣ、バ－シカン、ＶＨＬ Ｃ５、ＶＬＡ－４、ＷＴ１、Ｗｎｔ－１、ＸＣＬ１（リンホタクチン）、ＸＣＬ２（ＳＣＭ－Ｉｂ）、ＸＣＲＩ（ＧＰＲ５／ＣＣＸＣＲ１）、ＹＹ１、ＺＦＰＭ２、ＣＬＥＣ４Ｃ（ＢＤＣＡ－２、ＤＬＥＣ、ＣＤ３０３、ＣＤＨ６、ＣＬＥＣＳＦ７）、ＣＬＥＣ４Ｄ（ＭＣＬ、ＣＬＥＣＳＦ８）、ＣＬＥＣ４Ｅ（ミンクル（Ｍｉｎｃｌｅ））、ＣＬＥＣ６Ａ（デクチン－２）、ＣＬＥＣ５Ａ（ＭＤＬ－１、ＣＬＥＣＳＦ５）、ＣＬＥＣ１Ｂ（ＣＬＥＣ－２）、ＣＬＥＣ９Ａ（ＤＮＧＲ－１）、ＣＬＥＣ７Ａ（デクチン－１）、ＣＬＥＣ１１Ａ、ＰＤＧＦＲａ、ＳＬＡＭＦ７、ＧＰ６（ＧＰＶＩ）、ＬＩＬＲＡ１（ＣＤ８５Ｉ）、ＬＩＬＲＡ２（ＣＤ８５Ｈ、ＩＬＴ１）、ＬＩＬＲＡ４（ＣＤ８５Ｇ、ＩＬＴ７）、ＬＩＬＲＡ５（ＣＤ８５Ｆ、ＩＬＴ１１）、ＬＩＬＲＡ６（ＣＤ８５ｂ、ＩＬＴ８）、ＬＩＬＲＢ１、ＮＣＲ１（ＣＤ３３５、ＬＹ９４、ＮＫｐ４６）、ＮＣＲ３（ＣＤ３３５、ＬＹ９４、ＮＫｐ４６）、ＮＣＲ３（ＣＤ３３７、ＮＫｐ３０）、ＯＳＣＡＲ、ＴＡＲＭ１、ＣＤ３０、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３００Ｅ、ＣＤ３００ＬＢ（ＣＤ３００Ｂ）、ＣＤ３００ＬＤ（ＣＤ３００Ｄ）、ＫＩＲ２ＤＬ４（ＣＤ１５８Ｄ）、ＫＩＲ２ＤＳ、ＫＬＲＣ２（ＣＤ１５９Ｃ、ＮＫＧ２Ｃ）、ＫＬＲＫ１（ＣＤ３１４、ＮＫＧ２Ｄ）、ＮＣＲ２（ＣＤ３３６、ＮＫｐ４４）、ＰＩＬＲＢ、ＳＩＧＬＥＣ１（ＣＤ１６９、ＳＮ）、ＳＩＧＬＥＣ５、ＳＩＧＬＥＣ６、ＳＩＧＬＥＣ７、ＳＩＧＬＥＣ８、ＳＩＧＬＥＣ９、ＳＩＧＬＥＣ１０、ＳＩＧＬＥＣ１１、ＳＩＧＬＥＣ１２、ＳＩＧＬＥＣ１４、ＳＩＧＬＥＣ１５（ＣＤ３３Ｌ３）、ＳＩＧＬＥＣ１６、ＳＩＲＰＡ、ＳＩＲＰＢ１（ＣＤ１７２Ｂ）、ＴＲＥＭ１（ＣＤ３５４）、ＴＲＥＭ２、ＫＬＲＦ１（ＮＫｐ８０）、１７－１Ａ、ＳＬＡＭ７、ＳＬＣ３９Ａ６、ＭＳＬＮ、ＣＴＡＧ１Ｂ／ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＭＡＧＥＡ３／Ａ６、ＡＴＰ５Ｉ（Ｑ０６１８５）、ＯＡＴ（Ｐ２９７５８）、ＡＩＦＭ１（Ｑ９Ｚ０Ｘ１）、ＡＯＦＡ（Ｑ６４１３３）、ＭＴＤＣ（Ｐ１８１５５）、ＣＭＣ１（Ｑ８ＢＨ５９）、ＰＲＥＰ（Ｑ８Ｋ４１１）、ＹＭＥＬ１（Ｏ８８９６７）、ＬＰＰＲＣ（Ｑ６ＰＢ６６）、ＬＯＮＭ（Ｑ８ＣＧＫ３）、ＡＣＯＮ（Ｑ９９ＫＩ０）、ＯＤＯ１（Ｑ６０５９７）、ＩＤＨＰ（Ｐ５４０７１）、ＡＬＤＨ２（Ｐ４７７３８）、ＡＴＰＢ（Ｐ５６４８０）、ＡＡＴＭ（Ｐ０５２０２）、ＴＭＭ９３（Ｑ９ＣＱＷ０）、ＥＲＧＩ３（Ｑ９ＣＱＥ７）、ＲＴＮ４（Ｑ９９Ｐ７２）、ＣＬ０４１（Ｑ８ＢＱＲ４）、ＥＲＬＮ２（Ｑ８ＢＦＺ９）、ＴＥＲＡ（Ｑ０１８５３）、ＤＡＤ１（Ｐ６１８０４）、ＣＡＬＸ（Ｐ３５５６４）、ＣＡＬＵ（Ｏ３５８８７）、ＶＡＰＡ（Ｑ９ＷＶ５５）、ＭＯＧＳ（Ｑ８０ＵＭ７）、ＧＡＮＡＢ（Ｑ８ＢＨＮ３）、ＥＲＯ１Ａ（Ｑ８Ｒ１８０）、ＵＧＧＧ１（Ｑ６Ｐ５Ｅ４）、Ｐ４ＨＡ１（Ｑ６０７１５）、ＨＹＥＰ（Ｑ９Ｄ３７９）、ＣＡＬＲ（Ｐ１４２１１）、ＡＴ２Ａ２（Ｏ５５１４３）、ＰＤＩＡ４（Ｐ０８００３）、ＰＤＩＡ１（Ｐ０９１０３）、ＰＤＩＡ３（Ｐ２７７７３）、ＰＤＩＡ６（Ｑ９２２Ｒ８）、ＣＬＨ（Ｑ６８ＦＤ５）、ＰＰＩＢ（Ｐ２４３６９）、ＴＣＰＧ（Ｐ８０３１８）、ＭＯＴ４（Ｐ５７７８７）、ＮＩＣＡ（Ｐ５７７１６）、ＢＡＳＩ（Ｐ１８５７２）、ＶＡＰＡ（Ｑ９ＷＶ５５）、ＥＮＶ２（Ｐ１１３７０）、ＶＡＴ１（Ｑ６２４６５）、４Ｆ２（Ｐ１０８５２）、ＥＮＯＡ（Ｐ１７１８２）、ＩＬＫ（Ｏ５５２２２）、ＧＰＮＭＢ（Ｑ９９Ｐ９１）、ＥＮＶ１（Ｐ１０４０４）、ＥＲＯ１Ａ（Ｑ８Ｒ１８０）、ＣＬＨ（Ｑ６８ＦＤ５）、ＤＳＧ１Ａ（Ｑ６１４９５）、ＡＴ１Ａ１（Ｑ８ＶＤＮ２）、ＨＹＯＵ１（Ｑ９ＪＫＲ６）、ＴＲＡＰ１（Ｑ９ＣＱＮ１）、ＧＲＰ７５（Ｐ３８６４７）、ＥＮＰＬ（Ｐ０８１１３）、ＣＨ６０（Ｐ６３０３８）、およびＣＨ１０（Ｑ６４４３３）から選択される１つ以上の標的または抗原に結合する（例えば、から選択される抗原に特異的に結合する）ことができる。
いくつかの実施態様においては、抗体は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、および抗ＣＥＡ抗体からなる群から選択される。抗体は、市販の抗体、そのバイオシミラー、またはそのバイオベターであり得る。
本発明のある実施態様は、ＰＤ－Ｌ１（配列番号１）を特異的に認識してそれに結合する抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。抗体構築物または抗原結合ドメインは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメインの１つ以上の可変領域（例えば、２つの可変領域）を含み得、各可変領域は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。
本発明のある実施態様は、アテゾリズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号２～４の全て、（ｉｉ）配列番号５～７の全て、または（ｉｉｉ）配列番号２～７の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号２～７の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、アテゾリズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、アテゾリズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、アテゾリズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号８のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号９のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号１０のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号１１のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号１２のアミノ配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号１３のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号１４のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号１５のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号２～４および８～１１の全て、（ｉｉ）配列番号５～７および１２～１５の全て；または（ｉｉｉ）配列番号２～７および８～１５の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、アテゾリズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号４４を含み得る。第２の可変領域は、配列番号４５を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号４４、配列番号４５、または配列番号４４および４５の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号４４～４５の両方を含む。
本発明のある実施態様は、デュルバルマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号１８～２０の全て、（ｉｉ）配列番号２１～２３の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１８～２３の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１８～２３の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、デュルバルマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、デュルバルマブのフレームワーク領域を含む。この点について、デュルバルマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号２４のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号２５のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号２６のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号２７のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号２８のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号２９のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号３０のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号３１のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１８～２０および２４～２６の全て、（ｉｉ）配列番号２１～２３および２７～３１の全て；または（ｉｉｉ）配列番号１８～２１および２４～３１の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、デュルバルマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号４６を含み得る。第２の可変領域は、配列番号４７を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号４６、配列番号４７、または配列番号４６および４７の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号４６～４７の両方を含む。
本発明のある実施態様は、アベルマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号３２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号３３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号３５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号３０～３２の全て、（ｉｉ）配列番号３３～３５の全て、または（ｉｉｉ）配列番号３０～３５の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号３０～３５の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、アベルマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、アベルマブのフレームワーク領域を含む。この点について、アベルマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号３６のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号３７のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号３８のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号３９のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号４０のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号４１のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号４２のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号４３のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号３０～３２および３６～３９の全て、（ｉｉ）配列番号３３～３５および４０～４３の全て；または（ｉｉｉ）配列番号３０～３５および３６～４３の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、アベルマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号４８を含み得る。第２の可変領域は、配列番号４９を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号４８、配列番号４９、または配列番号４８および４９の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号４８～４９の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ＨＥＲ２（配列番号５０）を特異的に認識してそれに結合する抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。抗体構築物または抗原結合ドメインは、抗ＨＥＲ２抗体の抗原結合ドメインの１つ以上の可変領域（例えば、２つの可変領域）を含み得、各可変領域は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。
本発明のある実施態様は、トラスツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号５３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号５４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号５６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号５１～５３の全て、（ｉｉ）配列番号５４～５６の全て、または（ｉｉｉ）配列番号５１～５６の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号５１～５６の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、トラスツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、トラスツズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、トラスツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号５７のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号５８のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号５９のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号６０のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号６１のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号６２のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号６３のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号６４のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号５１～５３および５７～６０の全て、（ｉｉ）配列番号５４～５６および６１～６４の全て；または（ｉｉｉ）配列番号５７～５９および６５～６８の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、トラスツズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号６５を含み得る。第２の可変領域は、配列番号６６を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号６５、配列番号６６、または配列番号６５および６６の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、両方の配列番号６５～６６の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ペルツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号６９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号６７～６９の全て、（ｉｉ）配列番号７０～７２の全て、または（ｉｉｉ）配列番号６７～７２の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号６７～７２の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ペルツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ペルツズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、ペルツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号７３のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号７４のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号７５のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号７６のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、アミノ配列番号７７の酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号７８のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号７９のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号８０のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号６７～６９および７３～７６の全て、（ｉｉ）配列番号７０～７２および７７～８０の全て；または（ｉｉｉ）配列番号６７～７２および７３～８０の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ペルツズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号８１を含み得る。第２の可変領域は、配列番号８２を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号８１、配列番号８２、または配列番号８１および８２の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号８１～８２の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ＣＥＡ（配列番号８３）を特異的に認識してそれに結合する抗体構築物または抗原結合ドメインを提供する。抗体構築物または抗原結合ドメインは、抗ＣＥＡ抗体の抗原結合ドメインの１つ以上の可変領域（例えば、２つの可変領域）を含み得、各可変領域は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。
本発明のある実施態様は、ラベツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号８４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号８６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号８７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号８８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号８９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号８４～８６の全て、（ｉｉ）配列番号８７～８９の全て、または（ｉｉｉ）配列番号８４～８９の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号８４～８９の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ラベツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ラベツズマブのフレームワーク領域を含む。この点について、ラベツズマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号９０のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号９１のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号９２のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号９３のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号９４のアミノ配酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号９５のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号９６のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号９７のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号８４～８６および９０～９３の全て、（ｉｉ）配列番号８７～８９および９４～９７の全て；または（ｉｉｉ）配列番号８４～８９および９０～９７の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ラベツズマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号９８を含み得る。第２の可変領域は、配列番号９９を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号９８、配列番号９９、または配列番号９８および９９の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号９８～９９の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ＰＲ１Ａ３のＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号１００～１０２の全て、（ｉｉ）配列番号１０３～１０５の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１００～１０５の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１００～１０５の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ＰＲ１Ａ３のＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ＰＲ１Ａ３のフレームワーク領域を含む。この点について、ＰＲ１Ａ３のＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号１０６のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号１０７のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号１０８のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号１０９のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号１１０のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号１１１のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号１１２のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号１１３のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１００～１０２および１０６～１０９の全て、（ｉｉ）配列番号１０３～１０５および１１０～１１３の全て；または（ｉｉｉ）配列番号１００～１０３および１０６～１１３の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ＰＲ１Ａ３の一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号１１４を含み得る。第２の可変領域は、配列番号１１５を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１１４、配列番号１１５、または配列番号１１４および１１５の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号１１４～１１５の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ＭＦＥ－２３のＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号１１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号１１６～１１８の全て、（ｉｉ）配列番号１１９～１２１の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１１６～１２１の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１１６～１２１の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ＭＦＥ－２３のＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ＭＦＥ－２３のフレームワーク領域を含む。この点について、ＭＦＥ－２３のＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号１２２のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号１２３のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号１２４のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号１２５のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号１２６のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号１２７のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号１２８のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号１２９のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１１６～１１８および１２２～１２５の全て、（ｉｉ）配列番号１１９～１２１および１２６～１２９の全て；または（ｉｉｉ）配列番号１１６～１２１および１２２～１２９の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ＭＦＥ－２３の一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号１３０を含み得る。第２の可変領域は、配列番号１３１を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１３０、配列番号１３１、または配列番号１３０および１３１の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号１３０～１３１の両方を含む。
本発明のある実施態様は、ＳＭ３ＥのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物は、（ｉ）配列番号１３２～１３４の全て、（ｉｉ）配列番号１３５～１３７の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１３２～１３７の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１３２～１３７の全てを含む。
本発明のある実施態様においては、ＳＭ３ＥのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、ＳＭ３Ｅのフレームワーク領域を含む。この点について、ＳＭ３ＥのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインはさらに、配列番号１３８のアミノ酸配列（第１の可変領域のフレームワーク領域（「ＦＲ」）１）、配列番号１３９のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ２）、配列番号１４０のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ３）、配列番号１４１のアミノ酸配列（第１の可変領域のＦＲ４）、配列番号１４２のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ１）、配列番号１４３のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ２）、配列番号１４４のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ３）、および配列番号１４５のアミノ酸配列（第２の可変領域のＦＲ４）を含む。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１３２～１３４および１３８～５３の全て、（ｉｉ）配列番号１３５～１３７および１４２～１４４の全て；または（ｉｉｉ）配列番号１３２～１３７および１３８～１４４の全てを含み得る。
本発明のある実施態様は、ＳＭ３Ｅの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号１４６を含み得る。第２の可変領域は、配列番号１４７を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１４６、配列番号１４７、または配列番号１４６および１４７の両方を含む。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号１４６～１４７の両方を含む。
本発明のある実施態様は、抗ＥＧＦＲ抗体セツキシマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１４８～１５０の全て、（ｉｉ）配列番号１５１～１５３の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１４８～１５３の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１４８～１５３の全てを含む。
本発明のある実施態様は、抗ＥＧＦＲ抗体パニツムマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体は、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１５９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１５４～１５６の全て、（ｉｉ）配列番号１５７～１５９の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１５４～１５９の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１５４～１５９の全てを含む。
本発明のある実施態様は、抗ＥＧＦＲ抗体ネシツムマブのＣＤＲ領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第１の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第１の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第１の可変領域のＣＤＲ３）を含む第１の可変領域、並びに配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（第２の可変領域のＣＤＲ１）、配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（第２の可変領域のＣＤＲ２）、および配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（第２の可変領域のＣＤＲ３）を含む第２の可変領域を含み得る。この点について、抗体構築物または抗原結合ドメインは、（ｉ）配列番号１６０～１６２の全て、（ｉｉ）配列番号１６３～１６５の全て、または（ｉｉｉ）配列番号１６０～１６５の全てを含み得る。好ましくは、抗体構築物または抗原結合ドメインは、配列番号１６０～１６５の全てを含む。
本発明のある実施態様は、抗ＥＧＦＲ抗体セツキシマブの一方のまたは両方の可変領域を含む抗体構築物または抗原結合ドメインを利用する。この点について、第１の可変領域は、配列番号１６６を含み得る。第２の可変領域は、配列番号１６７を含み得る。従って、本発明のある実施態様においては、抗体は、配列番号１６６、配列番号１６７、または配列番号１６６および１６７の両方を含む。好ましくは、抗体は、配列番号１６６～１６７の両方を含む。
抗体に加えて、代替タンパク質足場を、免疫結合体の一部として使用し得る。例えば、代替タンパク質足場は、治療剤／リンカーが該代替タンパク質足場のリジン残基に結合するように、式ＩＩの抗体構築物を置き換え得る。句「代替タンパク質足場」は、非免疫グロブリン由来のタンパク質またはペプチドを指す。そのようなタンパク質およびペプチドは、一般にエンジニアリングに受け入れられ、所与の抗原に対する単一特異性、二重特異性、または多重特異性を付与するように設計することができる。代替タンパク質足場のエンジニアリングは、いくつかのアプローチを使用して行うことができる。既知の特異性の配列を足場の可変ループ上に移植する場合、ループ移植アプローチを使用することができる。配列のランダム化および突然変異誘発を使用して、変異体のライブラリーを開発することができ、これは、新規バインダーを特定するために、さまざまなディスプレイプラットフォーム（例えば、ファージディスプレイ）を使用してスクリーニングすることができる。部位特異的突然変異誘発もまた、同様のアプローチの一部として使用することができる。代替タンパク質足場は、最小の二次構造を有する小さなペプチドから、フルサイズの抗体と同様のサイズの大きなタンパク質にわたる、さまざまなサイズで存在する。足場の例は、シスチンノットミニタンパク質（ノッチンとしても知られる）、環状シスチンノットミニタンパク質（シクロチドとしても知られる）、アビマー、アフィボディ、ヒトフィブロネクチンの第１０ＩＩＩ型ドメイン、ＤＡＲＰｉｎｓ（設計されたアンキリンリピート）およびアンチカリン（リポカリンとしても知られる）を含むが、これらに限定されない。既知の特異性を有する天然に存在するリガンドはまた、所与の標的に対して新規の特異性を付与するように操作することができる。操作し得る天然に存在するリガンドの例は、ＥＧＦリガンドおよびＶＥＧＦリガンドを含む。操作されたタンパク質は、所望の結合戦略および特異性に依存して、単量体タンパク質または多量体のいずれかとして製造することができる。タンパク質エンジニアリング戦略を使用して、代替タンパク質足場をＦｃドメインに融合させることができる。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、ＦｃＲγ共役受容体に結合する。いくつかの実施態様においては、ＦｃＲγ共役受容体は、ＧＰ６（ＧＰＶＩ）、ＬＩＬＲＡ１（ＣＤ８５Ｉ）、ＬＩＬＲＡ２（ＣＤ８５Ｈ、ＩＬＴ１）、ＬＩＬＲＡ４（ＣＤ８５Ｇ、ＩＬＴ７）、ＬＩＬＲＡ５（ＣＤ８５Ｆ、ＩＬＴ１１）、ＬＩＬＲＡ６（ＣＤ８５ｂ、ＩＬＴ８）、ＬＩＬＲＢ１、ＮＣＲ１（ＣＤ３３５、ＬＹ９４、ＮＫｐ４６）、ＮＣＲ３（ＣＤ３３５、ＬＹ９４、ＮＫｐ４６）、ＮＣＲ３（ＣＤ３３７、ＮＫｐ３０）、ＯＳＣＡＲ、およびＴＡＲＭ１からなる群から選択される。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、ＤＡＰ１２共役受容体に結合する。いくつかの実施態様においては、ＤＡＰ１２共役受容体は、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３００Ｅ、ＣＤ３００ＬＢ（ＣＤ３００Ｂ）、ＣＤ３００ＬＤ（ＣＤ３００Ｄ）、ＫＩＲ２ＤＬ４（ＣＤ１５８Ｄ）、ＫＩＲ２ＤＳ、ＫＬＲＣ２（ＣＤ１５９Ｃ、ＮＫＧ２Ｃ）、ＫＬＲＫ１（ＣＤ３１４、ＮＫＧ２Ｄ）、ＮＣＲ２（ＣＤ３３６、ＮＫｐ４４）、ＰＩＬＲＢ、ＳＩＧＬＥＣ１（ＣＤ１６９、ＳＮ）、ＳＩＧＬＥＣ５、ＳＩＧＬＥＣ６、ＳＩＧＬＥＣ７、ＳＩＧＬＥＣ８、ＳＩＧＬＥＣ９、ＳＩＧＬＥＣ１０、ＳＩＧＬＥＣ１１、ＳＩＧＬＥＣ１２、ＳＩＧＬＥＣ１４、ＳＩＧＬＥＣ１５（ＣＤ３３Ｌ３）、ＳＩＧＬＥＣ１６、ＳＩＲＰＢ１（ＣＤ１７２Ｂ）、ＴＲＥＭ１（ＣＤ３５４）、およびＴＲＥＭ２からなる群から選択される。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、ｈｅｍＩＴＡＭ含有受容体に結合する。いくつかの実施態様においては、ｈｅｍＩＴＡＭ含有受容体は、ＫＬＲＦ１（ＮＫｐ８０）である。
いくつかの実施態様においては、抗体は、ＣＬＥＣ４Ｃ（ＢＤＣＡ－２、ＤＬＥＣ、ＣＤ３０３、ＣＬＥＣＳＦ７）、ＣＬＥＣ４Ｄ（ＭＣＬ、ＣＬＥＣＳＦ８）、ＣＬＥＣ４Ｅ（ミンクル）、ＣＬＥＣ６Ａ（デクチン－２）、ＣＬＥＣ５Ａ（ＭＤＬ－１、ＣＬＥＣＳＦ５）、ＣＬＥＣ１Ｂ（ＣＬＥＣ－２）、ＣＬＥＣ９Ａ（ＤＮＧＲ－１）、およびＣＬＥＣ７Ａ（デクチン－１）ら選択される１つ以上の標的に結合することができる。いくつかの実施態様においては、抗体は、ＣＬＥＣ６Ａ（デクチン－２）またはＣＬＥＣ５Ａに結合することができる。いくつかの実施態様においては、抗体は、ＣＬＥＣ６Ａ（デクチン－２）に結合することができる。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、ＡＴＰ５Ｉ（Ｑ０６１８５）、ＯＡＴ（Ｐ２９７５８）、ＡＩＦＭ１（Ｑ９Ｚ０Ｘ１）、ＡＯＦＡ（Ｑ６４１３３）、ＭＴＤＣ（Ｐ１８１５５）、ＣＭＣ１（Ｑ８ＢＨ５９）、ＰＲＥＰ（Ｑ８Ｋ４１１）、ＹＭＥＬ１（Ｏ８８９６７）、ＬＰＰＲＣ（Ｑ６ＰＢ６６）、ＬＯＮＭ（Ｑ８ＣＧＫ３）、ＡＣＯＮ（Ｑ９９ＫＩ０）、ＯＤＯ１（Ｑ６０５９７）、ＩＤＨＰ（Ｐ５４０７１）、ＡＬＤＨ２（Ｐ４７７３８）、ＡＴＰＢ（Ｐ５６４８０）、ＡＡＴＭ（Ｐ０５２０２）、ＴＭＭ９３（Ｑ９ＣＱＷ０）、ＥＲＧＩ３（Ｑ９ＣＱＥ７）、ＲＴＮ４（Ｑ９９Ｐ７２）、ＣＬ０４１（Ｑ８ＢＱＲ４）、ＥＲＬＮ２（Ｑ８ＢＦＺ９）、ＴＥＲＡ（Ｑ０１８５３）、ＤＡＤ１（Ｐ６１８０４）、ＣＡＬＸ（Ｐ３５５６４）、ＣＡＬＵ（Ｏ３５８８７）、ＶＡＰＡ（Ｑ９ＷＶ５５）、ＭＯＧＳ（Ｑ８０ＵＭ７）、ＧＡＮＡＢ（Ｑ８ＢＨＮ３）、ＥＲＯ１Ａ（Ｑ８Ｒ１８０）、ＵＧＧＧ１（Ｑ６Ｐ５Ｅ４）、Ｐ４ＨＡ１（Ｑ６０７１５）、ＨＹＥＰ（Ｑ９Ｄ３７９）、ＣＡＬＲ（Ｐ１４２１１）、ＡＴ２Ａ２（Ｏ５５１４３）、ＰＤＩＡ４（Ｐ０８００３）、ＰＤＩＡ１（Ｐ０９１０３）、ＰＤＩＡ３（Ｐ２７７７３）、ＰＤＩＡ６（Ｑ９２２Ｒ８）、ＣＬＨ（Ｑ６８ＦＤ５）、ＰＰＩＢ（Ｐ２４３６９）、ＴＣＰＧ（Ｐ８０３１８）、ＭＯＴ４（Ｐ５７７８７）、ＮＩＣＡ（Ｐ５７７１６）、ＢＡＳＩ（Ｐ１８５７２）、ＶＡＰＡ（Ｑ９ＷＶ５５）、ＥＮＶ２（Ｐ１１３７０）、ＶＡＴ１（Ｑ６２４６５）、４Ｆ２（Ｐ１０８５２）、ＥＮＯＡ（Ｐ１７１８２）、ＩＬＫ（Ｏ５５２２２）、ＧＰＮＭＢ（Ｑ９９Ｐ９１）、ＥＮＶ１（Ｐ１０４０４）、ＥＲＯ１Ａ（Ｑ８Ｒ１８０）、ＣＬＨ（Ｑ６８ＦＤ５）、ＤＳＧ１Ａ（Ｑ６１４９５）、ＡＴ１Ａ１（Ｑ８ＶＤＮ２）、ＨＹＯＵ１（Ｑ９ＪＫＲ６）、ＴＲＡＰ１（Ｑ９ＣＱＮ１）、ＧＲＰ７５（Ｐ３８６４７）、ＥＮＰＬ（Ｐ０８１１３）、ＣＨ６０（Ｐ６３０３８）、およびＣＨ１０（Ｑ６４４３３）から選択される１つ以上の標的に結合する（例えば、から選択されるある標的に特異的に結合する）ことができる。上記のリストにおいては、アクセッション番号を、括弧中に示している。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、ＣＣＲ８、ＣＤＨ１、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＥｐＣＡＭ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＳＬＡＭＦ７、およびｇｐ７５から選択される抗原に結合する。いくつかの実施態様においては、抗原は、ＣＣＲ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ４７、ＥｐＣＡＭ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＥＧＦＲ、およびＨＥＲ２から選択される。いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、Ｔｎ抗原およびトムセン－フリーデンライヒ（Ｔｈｏｍｓｅｎ－Ｆｉｅｄｅｎｒｅｉｃｈ）抗原から選択される抗原に結合する。
いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、アバゴボマブ、アバタセプト（ＯＲＥＮＣＩＡ（商標）としても知られる）、アブシキシマブ（ＲＥＯＰＲＯ（商標）、ｃ７Ｅ３ Ｆａｂとしても知られる）、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（商標）としても知られる）、アデカツムマブ、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（商標）、ＭａｂＣａｍｐａｔｈまたはＣａｍｐａｔｈ－１Ｈとしても知られる）、アルツモマブ、アフェリモマブ、アナツモマブマフェナトックス、アネツムマブ、アンルキズマブ、アポリズマブ、アルシツモマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、アトロリムマブ、バピネウズマブ、バシリキシマブ（ＳＩＭＵＬＥＣＴ（商標）としても知られる）、バビツキシマブ、ベクツモマブ（ＬＹＭＰＨＯＳＣＡＮ（商標）としても知られる）、ベリムマブ（ＬＹＭＰＨＯ－ＳＴＡＴ－Ｂ（商標）としても知られる）、ベルチリムマブ、ベシレソマブ、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（商標）としても知られる）、ビシロマブブラロバルビタル、ビバツズマブメルタンシン、カンパス、カナキヌマブ（ＡＣＺ８８５としても知られる）、カンツズマブメルタンシン、カプロマブ（ＰＲＯＳＴＡＳＣＩＮＴ（商標）としても知られる）、カツマキソマブ（ＲＥＭＯＶＡＢ（商標）としても知られる）、セデリズマブ（ＣＩＭＺＩＡ（商標）としても知られる）、セルトリズマブペゴル、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（商標）としても知られる）、クレノリキシマブ、ダセツズマブ、ダクリキシマブ、ダクリズマブ（ＺＥＮＡＰＡＸ（商標）としても知られる）、デノスマブ（ＡＭＧ １６２としても知られる）、デツモマブ、ドルリモマブアリトックス、ドルリキシズマブ、ダンツムバブ、デュリムルマブ（ｄｕｒｉｍｕｌｕｍａｂ）、デュルムルマブ（ｄｕｒｍｕｌｕｍａｂ）、エクロメキシマブ、エクリズマブ（ＳＯＬＩＲＩＳ（商標）としても知られる）、エドマコマブ、エドレコロマブ（Ｍａｂ１７－１Ａ、ＰＡＮＯＲＥＸ（商標）としても知られる）、エファリズマブ（ＲＡＰＴＩＶＡ（商標）としても知られる）、エフングマブ（ＭＹＣＯＧＲＡＢ（商標）としても知られる）、エロツズマブ、エルシリモマブ、エンリモマブペゴル、エピツモマブシツキセタン、エファリズマブ、エピツモマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、エルツマクソマブ（ＲＥＸＯＭＵＮ（商標）としても知られる）、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標）としても知られる）、エタラシズマブ（ＶＩＴＡＸＩＮ（商標）、ＡＢＥＧＲＩＮ（商標）としても知られる）、エクスビビルマブ、ファノレソマブ（ＮＥＵＴＲＯＳＰＥＣ（商標）としても知られる）、ファラリモマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ（ＨＵＺＡＦ（商標）としても知られる）、ガリキシマブ、ガンテネルマブ、ガビリモマブ（ＡＢＸＣＢＬ（商標）としても知られる）、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（商標）としても知られる）、ゴリムマブ（ＣＮＴＯ １４８としても知られる）、ゴミリキシマブ、イバリズマブ（ＴＮＸ－３５５としても知られる）、イブリツモマブチウキセタン（ＺＥＶＡＬＩＮ（商標）としても知られる）、イゴボマブ、イムシロマブ、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）としても知られる）、イノリモマブ、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ（ＭＤＸ－０１０、ＭＤＸ－１０１としても知られる）、イラツムマブ、ケリキシマブ、ラベツズマブ、レマレソマブ、レブリリズマブ、レルデリムマブ、レキサツムマブ（ＨＧＳ－ＥＴＲ２、ＥＴＲ２－ＳＴ０１としても知られる）、レキシツムマブ、リビビルマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ、ルミリキシマブ、マパツムマブ（ＨＧＳＥＴＲ１、ＴＲＭ－１としても知られる）、マスリモマブ、マツズマブ（ＥＭＤ７２０００としても知られる）、メポリズマブ（ＢＯＳＡＴＲＩＡ（商標）としても知られる）、メテリムマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミツモマブ、モロリムマブ、モタビズマブ（ＮＵＭＡＸ（商標）としても知られる）、ムロモナブ（ＯＫＴ３としても知られる）、ナコロマブタフェナトックス、ナプツモマブエスタフェナトックス、ナタリズマブ（ＴＹＳＡＢＲＩ（商標）、ＡＮＴＥＧＲＥＮ（商標）としても知られる）、ネバクマブ、ネレリモマブ、ニモツズマブ（ＴＨＥＲＡＣＩＭ ｈＲ３（商標）、ＴＨＥＲＡ－ＣＩＭ－ｈＲ３（商標）、ＴＨＥＲＡＬＯＣ（商標）としても知られる）、ノフェツモマブメルペンタン（ＶＥＲＬＵＭＡ（商標）としても知られる）、オビヌツズマブ、オクレリズマブ、オデュリモマブ、オファツムマブ、オマリズマブ（ＸＯＬＡＩＲ（商標）としても知られる）、オレゴボマブ（ＯＶＡＲＥＸ（商標）としても知られる）、オテリキシズマブ、パギバキシマブ、パリビズマブ（ＳＹＮＡＧＩＳ（商標）としても知られる）、パニツムマブ（ＡＢＸ－ＥＧＦ、ＶＥＣＴＩＢＩＸ（商標）としても知られる）、パスコリズマブ、ペムツモマブ（ＴＨＥＲＡＧＹＮ（商標）としても知られる）、ペルツズマブ（２Ｃ４、ＯＭＮＩＴＡＲＧ（商標）としても知られる）、ペキセリズマブ、ピンツモマブ、プリリキシマブ、プリツムマブ、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（商標）としても知られる）、ラキシバクマブ、レガビルマブ、レスリズマブ、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（商標）、ＭａｂＴＨＥＲＡ（商標）としても知られる）、ロベリズマブ、ルプリズマブ、サツモマブ、セビルマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ（ＭＥＤＩ－５０７としても知られる）、ソンツズマブ、スタムルマブ（ＭＹＯ－０２９としても知られる）、スレソマブ（ＬＥＵＫＯＳＣＡＮ（商標）としても知られる）、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、タプリツモマブパプトックス、テフィバズマブ（ＡＵＲＥＸＩＳ（商標）としても知られる）、テリモマブアリトックス、テネリキシマブ、テプリズマブ、チシリムマブ、トシリズマブ（ＡＣＴＥＭＲＡ（商標）としても知られる）、トラリズマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（商標）としても知られる）、トレメリムマブ（ＣＰ－６７５，２０６としても知られる）、ツコツズマブセルモロイキン、ツビルマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ（ＣＮＴＯ １２７５としても知られる）、バパリキシマブ、ベルツズマブ、ベパリモマブ、ビシリズマブ（ＮＵＶＩＯＮ（商標）としても知られる）、ボロシキシマブ（Ｍ２００としても知られる）、ボツムマブ（ＨＵＭＡＳＰＥＣＴ（商標）としても知られる）、ザルツムマブ、ザノリムマブ（ＨｕＭＡＸ－ＣＤ４としても知られる）、ジラリムマブ、ゾリモマブアリトックス、ダラツムマブ、オララツマブ、ブレンツキシマブベドチン、アフィベルセプト、アバタセプト、ベラタセプト、アフィベルセプト、エタネルセプト、ロミプロスチム、ＳＢＴ－０４０（米国２０１７／０１５８７７２中にリストされている配列から選択される。いくつかの実施態様においては、抗体構築物は、オララツマブ、オビヌツズマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リツキシマブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、ダラツムマブ、エタネルセプト、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、イピリムマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、マツズマブ、およびエロツズマブからなる群から選択される。特定の実施態様においては、抗体構築物は、トラスツズマブである。
チェックポイント阻害剤
任意の適切な免疫チェックポイント阻害剤が、本明細書において開示される免疫結合体との共投与のために意図される。いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、１つ以上の免疫チェックポイントタンパク質の発現または活性を低下させる。別の実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、１つ以上の免疫チェックポイントタンパク質とそれらのリガンドとの間の相互作用を低下させる。免疫チェックポイント分子の発現および／または活性を減少させる阻害性核酸もまた、本明細書において開示される方法において使用することができる。
ほとんどのチェックポイント阻害剤は、チェックポイント阻害剤の使用が細胞を殺すことを意図しておらず、むしろシグナル伝達を遮断することを意図しているので、エフェクター機能を有しないように設計されている。本発明の免疫結合体は、骨髄免疫を活性化するために必要とされる「エフェクター機能」を追加し直すことができる。従って、ほとんどのチェックポイント阻害剤にとって、この発見は重要であろう。
いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、細胞毒性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ４、ＣＤ１５２としても知られる）、ＩｇおよびＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体（ＴＩＧＩＴ）、グルココルチコイド誘導ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ、ＴＮＦＲＳＦ１８としても知られる）、誘導性Ｔ細胞共刺激（ＩＣＯＳ、ＣＤ２７８としても知られる）、ＣＤ９６、ポリオウイルス受容体関連２（ＰＶＲＬ２、ＣＤ１１２Ｒとしても知られる、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１、ＣＤ２７９としても知られる）、プログラム細胞死１リガンド１（ＰＤ－Ｌ１、Ｂ７－Ｈ３およびＣＤ２７４としても知られる）、プログラム細胞死リガンド２（ＰＤ－Ｌ２、Ｂ７－ＤＣおよびＣＤ２７３としても知られる）、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ－３、ＣＤ２２３としても知られる）、Ｂ７－Ｈ４、キラー免疫グロブリン受容体（ＫＩＲ）、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー４（ＴＮＦＲＳＦ４、ＯＸ４０およびＣＤ１３４としても知られる）およびそのリガンドＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ１（ＩＤＯ－１）、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ２（ＩＤＯ－２）、癌胎児性抗原関連細胞接着分子１（ＣＥＡＣＡＭ１）、ＢおよびＴリンパ球減衰剤（ＢＴＬＡ、ＣＤ２７２としても知られる）、Ｔ細胞膜タンパク質３（ＴＩＭ３）、アデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２Ａｒ）、並びにＴ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（ＶＩＳＴＡタンパク質）である。いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１、またはＰＤ－Ｌ１の阻害剤である。
いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（商標）としても知られる）ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（商標）としても知られる）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（商標）としても知られる）、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＧ（商標）としても知られる）、アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ（商標）としても知られる）、およびデュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩ（商標）としても知られる）から選択される。いくつかの実施態様においては、免疫チェックポイント阻害剤は、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（商標）としても知られる）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（商標）としても知られる）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（商標）としても知られる）、およびアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＧ（商標）としても知られる）から選択される。
リンカー
リンカーが本明細書において記載されるエステルを使用して抗体構築物に結合し得るという条件で、任意の適切なリンカーを、本発明の文脈において使用することができる。
リンカーは、リンカーが抗体構築物および治療剤に共有結合するとき、抗体構築物および治療剤の機能が維持されるように、任意の適切な長さを有し得る。リンカーは、約３Å以上、例えば、約４Å以上、約５Å以上、約６Å以上、約７Å以上、約８Å以上、約９Å以上、約１０Å以上、または約２０Å以上の長さを有し得る。あるいは、またはさらに、リンカーは、約２００Å以下、例えば、約１５０Å以下、約１００Å以下、約９０Å以下、約８０Å以下、約７０Å以下、約６０Å以下、約５０Å以下、約４５Å以下、約４０Å以下、約３５Å以下、約３０Å以下、約２５Å以下、約２０Å以下、または約１５Å以下の長さを有し得る。すなわち、リンカーは、前述のエンドポイントの任意の２つによって境界される長さを有し得る。リンカーは、約３Åから約２００Å、例えば、約３Åから約１５０Å、約３Åから約１００Å、約３Åから約９０Å、約３Åから約８０Å、約３Åから約７０Å、約３Åから約６０Å、約３Åから約５０Å、約３Åから約４５Å、約３Åから約４０Å、約３Åから約３５Å、約３Åから約３０Å、約３Åから約２５Å、約３Åから約２０Å、約３Åから約１５Å、約５Åから約５０Å、約５Åから約２５Å、約５Åから約２０Å、約１０Åから約５０Å、約１０Åから約２０Å、約５Åから約３０Å、約５Åから約１５Å、約２０Åから約１００Å、約２０Åから約９０Å、約２０Åから約８０Å、約２０Åから約７０Å、約２０Åから約６０Å、または約２０Åから約５０Åの長さを有し得る。特定の実施態様においては、リンカーは、約２０Åから約１００Åの長さを有する。
いくつかの実施態様においては、リンカーは、生理学的条件下で切断不能である。本明細書において使用される用語「生理学的条件」は、摂氏２０～４０度の温度範囲、大気圧（すなわち、１気圧）、約６～約８のｐＨ、および１つ以上の生理学的酵素、プロテアーゼ、酸、および塩基を指す。
いくつかの実施態様においては、リンカーは、生理学的条件下で切断可能である。例えば、リンカーは、酵素的プロセスまたは代謝プロセスによって切断することができる。
いくつかの実施態様においては、リンカーは、ポリ（エチレングリコール）基を含む。特定の実施態様においては、リンカーは、少なくとも２つのエチレングリコール基（例えば、少なくとも３つのエチレングリコール基、少なくとも４つのエチレングリコール基、少なくとも５つのエチレングリコール基、少なくとも６つのエチレングリコール基、少なくとも７つのエチレングリコール基、少なくとも８つのエチレングリコール基、少なくとも９つのエチレングリコール基、少なくとも１０個のエチレングリコール基、少なくとも１１個のエチレングリコール基、少なくとも１２個のエチレングリコール基、少なくとも１３個のエチレングリコール基、少なくとも１４個のエチレングリコール基、少なくとも１５個のエチレングリコール基、少なくとも１６個のエチレングリコール基、少なくとも１７個のエチレングリコール基、少なくとも１８個のエチレングリコール基、少なくとも１９個のエチレングリコール基、少なくとも２０個のエチレングリコール基、少なくとも２１個のエチレングリコール基、少なくとも２２個のエチレングリコール基、少なくとも２３個のエチレングリコール基、少なくとも２４個のエチレングリコール基、または少なくとも２５個のエチレングリコール基を含む。特定の実施態様においては、リンカーは、ジ（エチレングリコール）基、トリ（エチレングリコール）基、若しくはテトラ（エチレングリコール）基、５つのエチレングリコール基、６つのエチレングリコール基、８つのエチレングリコール基、１０個のエチレングリコール基、１２個のエチレングリコール基、２４個のエチレングリコール基、または２５個のエチレングリコール基を含む。
いくつかの実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、式：
Figure 2022547066000028
（式中、
Ａは、任意に存在して、ＮＲ１または式：
Figure 2022547066000029
であり、
Ｕは、任意に存在して、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、またはＣ（Ｏ）ＣＨ２であり、
Ｒ１およびＷは独立して、水素、Ａｒ、または式：
Figure 2022547066000030
であり、
Ｖは、任意に存在して、式：
Figure 2022547066000031
であり、
ｍ１、ｍ２、およびｍ３は独立して、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つがゼロでない整数であることを除いて、０から２５の整数であり、
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３、およびＧ４は独立して、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２、または結合であり、
Ｘは、任意に存在して、Ｏ、ＮＲ４、ＣＨＲ４、ＳＯ２、Ｓ、または１つ若しくは２つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または－ＣＯ－を通して連結しており、
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は独立して、水素またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
Ａｒは、１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000032
は、接続点を表す）である。
特定の実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、式：
Figure 2022547066000033
（式中、ｍ１は、１から２５の整数であり、
各波線
Figure 2022547066000034
は、接続点を表す）である。
特定の実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、式：
Figure 2022547066000035
（式中、
Ｒ１は、水素、Ａｒ、または式：
Figure 2022547066000036
であり、
Ｖは、任意に存在して、式：
Figure 2022547066000037
であり、
ｍ１、ｍ２、およびｍ３は独立して、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つがゼロでない整数であることを除いて、０から２５の整数であり、
Ｇ４は、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２、または結合であり、
Ｘは、任意に存在して、Ｏ、ＮＲ４、ＣＨＲ４、ＳＯ２、Ｓ、または１つ若しくは２つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または－ＣＯ－を通して連結しており、
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は独立して、水素またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
Ａｒは、１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000038
は、接続点を表す）である。
特定の実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、式：
Figure 2022547066000039
（式中、
Ｕは、任意に存在して、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、またはＣ（Ｏ）ＣＨ２であり、
Ｒ１は、水素、Ａｒ、または式：
Figure 2022547066000040
であり、
ｍ１、ｍ２、およびｍ３は独立して、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つがゼロでない整数であることを除いて、０から２５の整数であり、
Ｇ４は、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２、または結合であり、
Ｘは、任意に存在して、Ｏ、ＮＲ４、ＣＨＲ４、ＳＯ２、Ｓ、または１つ若しくは２つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または－ＣＯ－を通して連結しており、
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は独立して、水素またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
Ａｒは、１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000041
は、接続点を表す）である。
特定の実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、式：
Figure 2022547066000042
（式中、
ｍ１は、１から２５の整数であり、
各波線
Figure 2022547066000043
は、接続点を表す）である。
特定の実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、式：
Figure 2022547066000044
（式中、
Ａは、任意に存在して、ＮＲ１または式：
Figure 2022547066000045
であり、
Ｕは、任意に存在して、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、またはＣ（Ｏ）ＣＨ２であり、
Ｒ１およびＷは独立して、水素、Ａｒ、または式：
Figure 2022547066000046
であり、
ｍ１およびｍ２は独立して、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つがゼロでない整数であることを除いて、０から２５の整数であり、
Ｇ４は、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２、または結合であり、
Ｘは、任意に存在して、Ｏ、ＮＲ４、ＣＨＲ４、ＳＯ２、Ｓ、または１つ若しくは２つの二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基であり、複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基が存在するとき、該複数の二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、連結してまたは縮合しており、ここで、連結した二価のシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基は、結合または－ＣＯ－を通して連結しており、
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は独立して、水素またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
Ａｒは、１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、若しくはそれらの組合せで任意に置換された、アリールまたはヘテロアリール基であり、
各波線
Figure 2022547066000047
は、接続点を表す）である。
いくつかの実施態様においては、Ｘは、ベンゼン、ナフタレン、ピロール、インドール、イソインドール、インドリジン、フラン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、チオフェン、ピリジン、アクリジン、ナフチリジン、キノロン、イソキノリン、イソオキサゾール、オキサゾール、ベンゾオキサゾール、イソチアゾール、チアゾール、ベンズチアゾール（ｂｅｎｚｔｈｉａｚｏｌｅ）、イミダゾール、チアジアゾール、テトラゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、ベンズイミダゾール、プリン、ピラゾール、ピラジン、プテリジン、キノキサリン、フタラジン、キナゾリン、トリアジン、フェナジン、シンノリン、ピリミジン、ピリダジン、シクロヘキサン、デカヒドロナフタレン、ピロリジン、オクタヒドロインドール、オクタヒドロイソインドール、テトラヒドロフラン、オクタヒドロベンゾフラン、オクタヒドロベンゾチオフェン、テトラヒドロチオフェン、ピペリジン、テトラデカヒドロアクリジン、ナフチリジン、デカヒドロキノリン、デカヒドロイソキノリン、イソオキサゾリジン、オキサゾリジン、オクタヒドロベンゾオキサゾール、イソチアゾリジン、チアゾリジン、オクタヒドロベンゾチアゾール、イミダゾリジン、１，２，３－チアジアゾリジン、テトラゾリジン、１，２，３－トリアゾリジン、１，２，３－オキサジアゾリジン、オクタヒドロベンゾイミダゾール、オクタヒドロプリン、ピラゾリジン、ピペラジン、デクヒドロプテリジン（ｄｅｃｈｙｄｒｏｐｔｅｒｉｄｉｎｅ）、デカヒドロキノキサリン、デクヒドロフタラジン（ｄｅｃｈｙｄｒｏｐｈｔｈａｌａｚｉｎｅ）、デクヒドロキナゾリン（ｄｅｃｈｙｄｒｏｑｕｉｎａｚｏｌｉｎｅ）、１，３，５－トリアジナン、テトラデカヒドロフェナジン、デカヒドロシンノリン、ヘキサヒドロピリミジン、またはヘキサヒドロピリダジンから選択される１つ以上の二価の基である。いくつかの実施態様においては、Ｘの１つ以上の二価の基は、縮合している。いくつかの実施態様においては、Ｘの１つ以上の二価の基は、結合または－ＣＯ－を通して連結している。特定の実施態様においては、Ｘは、１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、またはそれらの組合せで置換され得る。
特定の実施態様においては、Ｘは、式：
Figure 2022547066000048
（式中、上記で参照した構造のいずれも、両方向で使用し得る）である。
Ａｒは、任意に１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、若しくはそれらの組合せで置換された、アリールまたはヘテロアリール基である。Ａｒは、本明細書において記載される任意の適切なアリールまたはヘテロアリール基であり得る。いくつかの実施態様においては、Ａｒは、任意に１つ以上のハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）、ニトリル、ヒドロキシル、Ｃ１－Ｃ４アルキル基、若しくはそれらの組合せで置換された、Ｘの二価の基によって記載される一価のアリールまたはヘテロアリール基である。
変数ｍ１、ｍ２、およびｍ３は独立して、０から２５の整数である。典型的には、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つは、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つが１から２５の整数であるように、ゼロでない整数である。特定の実施態様においては、ｍ１、ｍ２、およびｍ３の少なくとも１つは、約２から約２５（例えば、約２から約１６、約６から約２５、約６から約１６、約８から約２５、約８から約１６、約６から約１２、または約８から約１２）の整数である。従って、いくつかの実施態様においては、本発明の免疫結合体は、下付き文字「ｍ１」、「ｍ２」および「ｍ３」で指定される、約２から約２５個の（例えば、約２から約１６、約６から約２５、約６から約１６、約８から約２５、約８から約１６、約６から約１２、または約８から約１２個の）エチレングリコール単位を含む。従って、本発明の免疫結合体は、少なくとも２つのエチレングリコール基（例えば、少なくとも３つのエチレングリコール基、少なくとも４つのエチレングリコール基、少なくとも５つのエチレングリコール基、少なくとも６つのエチレングリコール基、少なくとも７つのエチレングリコール基、少なくとも８つのエチレングリコール基、少なくとも９つのエチレングリコール基、または少なくとも１０個のエチレングリコール基）を含み得る。従って、免疫結合体は、約２から約２５個のエチレングリコール単位、例えば、約６から約２５個のエチレングリコール単位、約６から約１６個のエチレングリコール単位、約８から約２５個のエチレングリコール単位、約８から約１６個のエチレングリコール単位、約８から約１２個のエチレングリコール単位、または約８から約１２個のエチレングリコール単位を含み得る。特定の実施態様においては、免疫結合体は、ジ（エチレングリコール）基、トリ（エチレングリコール）基、テトラ（エチレングリコール）基、５つのエチレングリコール基、６つのエチレングリコール基、７つのエチレングリコール基、８つのエチレングリコール基、９つのエチレングリコール基、１０個のエチレングリコール基、１１個のエチレングリコール基、１２個のエチレングリコール基、１３個のエチレングリコール基、１４個のエチレングリコール基、１５個のエチレングリコール基、１６個のエチレングリコール基、２４個のエチレングリコール基、または２５個のエチレングリコール基を含む。
いくつかの実施態様においては、リンカー（Ｌ）は、
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－ＮＲ５－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－ＮＲ５－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－Ｎ＋（Ｒ５）２－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－Ｃ（＝Ｏ）－ＣＨ（ＡＡ１）－ＮＲ５－Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－ＣＨ（ＡＡ１）－ＮＲ５－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－（Ｃ１－Ｃ１２アルキルジイル）－Ｓ－Ｓ－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１－Ｃ１２アルキルジイル）－Ｓ－Ｓ－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＰＥＧ）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１－Ｃ１２アルキルジイル）－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＭＣｇｌｕｃ）－（Ｃ（＝Ｏ）－（ＰＥＧ）－ＯＣＨ２－（Ｃ１－Ｃ２０ヘテロアリールジイル）－ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２－Ｃ（＝Ｏ）－；
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｍ－Ｃ（＝Ｏ）－；および
－（ＰＥＰ）－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｍ－
（式中、
ＰＥＧは、式：
－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）ｍ－を有し；ｍは、１から５の整数であり、ｎは、２から５０の整数であり；
ＰＥＰは、式：
Figure 2022547066000049
（式中、ＡＡ１およびＡＡ２は、アミノ酸側鎖から独立して選択され；
Ｒ６は、－ＣＨ２Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－で置換されおよび任意に
Figure 2022547066000050
で置換された、Ｃ６－Ｃ２０アリールジイルおよびＣ１－Ｃ２０ヘテロアリールジイルからなる群から選択される）を有し；
ＭＣｇｌｕｃは、式：
Figure 2022547066000051
を有し；
ここで、アルキル、アルキルジイル、アリール、アリールジイルカルボシクリル、カルボシクリルジイル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルジイル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールジイルは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＣＮ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ＝ＣＨ２、－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ（ＣＨ３）２、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、－ＣＨ２ＯＨ、－ＣＨ２ＯＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、－Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＣＨ３）２、－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＨ、－ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、－ＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨＦ２、－ＣＦ３、－ＣＨ２ＣＦ３、－ＣＨ２ＣＨＦ２、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＮ、－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＮ、－ＣＨ２ＣＮ、－ＣＨ２ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、－ＣＨ２ＮＨＣＨ３、－ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯＣＨ３、－ＣＯ２ＣＨ３、－ＣＯ２Ｃ（ＣＨ３）３、－ＣＯＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、－ＣＯＮＨ２、－ＣＯＮＨＣＨ３、－ＣＯＮ（ＣＨ３）２、－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、－ＮＨ２、－ＮＨＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）２、－ＮＨＣＯＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）ＣＯＣＨ３、－ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、－Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、－ＮＯ２、＝Ｏ、－ＯＨ、－ＯＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、－ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、－Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈ、－Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨ、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＣＨ３）２、－ＳＣＨ３、－Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、および－Ｓ（Ｏ）３Ｈから独立して選択される１つ以上の基で任意に置換されている）からなる群から選択される。
本明細書において記載されるリンカーのそれぞれは、別途指定されていない限り、両方向で使用することができる。しかしながら、特定の実施態様においては、本明細書において記載されるリンカーは、ページ上で左から右に読まれるとして解釈される。
治療剤
いくつかの実施態様においては、治療剤は、免疫応答を引き出す化合物（例えば、免疫アゴニストまたはアンタゴニスト）である。特定の実施態様においては、治療剤は、パターン認識受容体（「ＰＲＲ」）アゴニストである。パターン認識受容体（ＰＲＲ）を活性化することができる任意の治療剤を、本発明の免疫結合体中に組み込むことができる。本明細書において使用される用語「パターン認識受容体」および「ＰＲＲ」は、病原体関連分子パターン（「ＰＡＭＰ」）または損傷関連分子パターン（「ＤＡＭＰ」）を認識し、自然免疫における重要なシグナル伝達要素として作用する、保存された哺乳動物タンパク質のクラスの任意のメンバーを指す。パターン認識受容体は、膜結合型ＰＲＲ、細胞質型ＰＲＲ、および分泌型ＰＲＲに分類される。膜結合型ＰＲＲの例は、Ｔｏｌｌ様受容体（「ＴＬＲ」）およびＣ型レクチン受容体（「ＣＬＲ」）を含む。細胞質ＰＲＲの例は、ＮＬＲＰ３、Ｒｉｇ－Ｉ様受容体（ＲＬＲ）、およびＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子の刺激因子）などのＮＯＤ様受容体（ＮＬＲ）を含む。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、複数の別個のＰＲＲ治療剤を有し得る。
本発明のいくつかの免疫結合体においては、治療剤は、ＴＬＲアゴニストである。ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、またはそれらの任意の組合せ（例えば、ＴＬＲ７／８アゴニスト）を含む。ＴＬＲを活性化することができる任意の治療剤を、本発明の免疫結合体において利用することができる。ＴＬＲは、脊椎動物における自然免疫応答の開始に関与するＩ型膜貫通タンパク質である。ＴＬＲは、細菌、ウイルス、および真菌からのさまざまな病原体関連分子パターンを認識し、侵入する病原体に対する第１の防御線として作用する。ＴＬＲは、細胞発現におけるおよびそれらが脊椎動物内で開始するシグナル伝達経路における違いのため、重複するがしかし別個の生物学的応答を引き出す。いったん（例えば、自然刺激または合成ＴＬＲアゴニストによって）関与すると、ＴＬＲは、アダプタータンパク質骨髄分化一次応答遺伝子８８（ＭｙＤ８８）を介するＮＦ－κＢの活性化およびＩＬ－１受容体関連キナーゼ（ＩＲＡＫ）のリクルートにつながる、シグナル伝達カスケードを開始する。ＩＲＡＫのリン酸化は、次いで、ＴＮＦ受容体関連因子（ＴＲＡＦ）６（ＴＲＡＦ６）のリクルートにつながり、それは、ＮＦ－κＢ阻害剤Ｉ－κＢのリン酸化をもたらす。結果として、ＮＦ－κＢは、細胞核に入り、そのプロモーターがサイトカインなどのＮＦ－κＢ結合部位を含有する遺伝子の転写を開始する。ＴＬＲシグナル伝達についての調節の追加のモードは、ＴＲＡＦ６のＴＩＲドメイン含有アダプター誘導インターフェロン－β（ＴＲＩＦ）依存性誘導並びにＴＲＩＦおよびＴＲＡＦ３を介するＭｙＤ８８非依存経路の活性化を含み、これは、インターフェロン応答因子（ＩＲＦ）３（ＩＲＦ３）のリン酸化につながる。同様に、ＭｙＤ８８依存経路もまた、ＩＲＦ５およびＩＲＦ７を含むいくつかのＩＲＦファミリーメンバーを活性化するが、一方でＴＲＩＦ依存経路もまた、ＮＦ－κＢ経路を活性化する。
ＴＬＲ２アゴニストの例は、Ｎ－α－パルミトイル－Ｓ－［２，３－ビス（パルミトイルオキシ）－（２ＲＳ）－プロピル］－Ｌ－システイン、パルミトイル－Ｃｙｓ（（ＲＳ）－２，３－ジ（パルミトイルオキシ）－プロピル）（「Ｐａｍ３Ｃｙｓ」）、例えば、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｐａｍ３Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－（Ｌｙｓ）４（「Ｐａｍ３Ｃｙｓ－ＳＫＫＫＫ」および「Ｐａｍ３ＣＳＫ４」としても知られる）、トリアシル脂質Ａ（「ＯＭ－１７４」）、リポタイコ酸（「ＬＴＡ」）、ペプチドグリカン、およびＣＬ４１９（Ｓ－（２，３－ビス（パルミトイルオキシ）－（２ＲＳ）プロピル）－（Ｒ）－システイニルスペルミン）を含む剤を含むが、これらに限定されない。
ＴＬＲ２／６アゴニストの例は、Ｐａｍ２ＣＳＫ４（Ｓ－［２，３－ビス（パルミトイルオキシ）－（２ＲＳ）－プロピル］－［Ｒ］－システイニル－［Ｓ］－セリル－［Ｓ］－リジル－［Ｓ］－リジル－［Ｓ］－リジル－［Ｓ］－リジン×３ＣＦ３ＣＯＯＨ）である。
ＴＬＲ２／７アゴニストの例は、ＣＬ５７２（Ｓ－（２－ミリストイルオキシエチル）－（Ｒ）－システイニル４－（（６－アミノ－２－（ブチルアミノ）－８－ヒドロキシ－９Ｈ－プリン－９－イル）メチル）アニリン）、ＣＬ４１３（Ｓ－（２，３－ビス（パルミトイルオキシ）－（２ＲＳ）プロピル）－（Ｒ）－システイニル－（Ｓ）－セリル－（Ｓ）－リジル－（Ｓ）－リジル－（Ｓ）－リジル－（Ｓ）－リジル４－（（６－アミノ－２－（ブチルアミノ）－８－ヒドロキシ－９Ｈ－プリン－９－イル）メチル）アニリン）、およびＣＬ４０１（Ｓ－（２，３－ビス（パルミトイルオキシ）－（２ＲＳ）プロピル）－（Ｒ）－システイニル４－（（６－アミノ－２（ブチルアミノ）－８－ヒドロキシ－９Ｈ－プリン－９－イル）メチル）アニリン）を含む。
ＴＬＲ３アゴニストの例は、ポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリ（Ｉ：Ｃ））、ポリアデニル－ポリウリジル酸（ポリ（Ａ：Ｕ）、およびポリ（Ｉ）－ポリ（Ｃ１２Ｕ）を含む。
ＴＬＲ４アゴニストの例は、リポ多糖（ＬＰＳ）およびモノホスホリルリピッドＡ（ＭＰＬＡ）を含む。
ＴＬＲ５アゴニストの例は、フラジェリンを含む。
ＴＬＲ９アゴニストの例は、一本鎖ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ ＯＤＮ）を含む。刺激性ＣｐＧ ＯＤＮの３つの主要なクラスは、構造的特徴並びにヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、特にＢ細胞および形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）に対する活性に基づいて特定されてきた。これらの３つのクラスは、クラスＡ（タイプＤ）、クラスＢ（タイプＫ）およびクラスＣである。
Ｎｏｄ様受容体（ＮＬＲ）アゴニストの例は、ｉＥ－ＤＡＰのアシル化誘導体、Ｄ－ガンマ－Ｇｌｕ－ｍＤＡＰ、Ｌ－Ａｌａ－ガンマ－Ｄ－Ｇｌｕ－ｍＤＡＰ、Ｃ１８脂肪酸鎖を有するムラミルジペプチド、ムラミルジペプチド、ムラミルトリペプチド、およびＮ－グリコシル化ムラミルジペプチドを含む。
ＲＩＧ－Ｉ様受容体（ＲＬＲ）アゴニストの例は、５’ｐｐｐ－ｄｓｒｎａ（５’－ｐｐｐＧＣＡＵＧＣＧＡＣＣＵＣＵＧＵＵＵＧＡ－３’（配列番号１６９）：３’－ＣＧＵＡＣＧＣＵＧＧＡＧＡＣＡＡＡＣＵ－５’（配列番号１７０））、およびポリ（デオキシアデニル－デオキシチミジル）酸（ポリ（ｄＡ：ｄＴ））を含む。
細胞質ゾルＤＮＡおよび環状ジヌクレオチドと呼ばれる独特の細菌核酸などの追加の免疫刺激化合物は、細胞質ゾルＤＮＡセンサーとして作用し得るＳＴＩＮＧによって認識することができる。ＡＤＵ－１００は、ＳＴＩＮＧアゴニストであり得る。ＳＴＩＮＧアゴニストの非限定的な例は、サイクリック［Ｇ（２’，５’）ｐＡ（２’，５’）ｐ］（２’２’－ｃＧＡＭＰ）、サイクリック［Ｇ（２’，５’）ｐＡ（３’，５’）ｐ］（２’３’－ｃＧＡＭＰ）、サイクリック［Ｇ（３’，５’）ｐＡ（３’，５’）ｐ］（３’３’－ｃＧＡＭＰ）、サイクリックジアデニル酸一リン酸（ｃ－ｄｉ－ＡＭＰ）、２’，５’－３’、５’－ｃ－ｄｉＡＭＰ（２’３’－ｃ－ｄｉ－ＡＭＰ）、サイクリックジグアニル酸一リン酸（ｃ－ｄｉ－ＧＭＰ）、２’，５’－３’、５’－ｃ－ｄｉＧＭＰ（２’３’－ｃ－ｄｉ－ＧＭＰ）、サイクリックジイノシン一リン酸（ｃ－ｄｉ－ＩＭＰ）、サイクリックジウリジン一リン酸（ｃ－ｄｉ－ＵＭＰ）、ＫＩＮ７００、ＫＩＮ１１４８、ＫＩＮ６００、ＫＩＮ５００、ＫＩＮ１００、ＫＩＮ１０１、ＫＩＮ４００、ＫＩＮ２０００、またはＳＢ－９２００を含み、認識することができる。
特定の実施態様においては、治療剤は、ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニストである。ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８を活性化することができる任意の治療剤を、本発明の免疫結合体において利用することができる。ＴＬＲ７アゴニストおよびＴＬＲ８アゴニストの例は、例えば、Ｖａｃｃｈｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．（本明細書において参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＯｎｃｏＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２（８）：ｅ２５２３８（２０１３））およびＣａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（本明細書において参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１３／０１６５４５５号）によって記載されている。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８は、いずれも単球および樹状細胞で発現している。ヒトにおいては、ＴＬＲ７は、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）およびＢ細胞においても発現している。ＴＬＲ８は、ほとんど骨髄由来の細胞、すなわち単球、顆粒球、および骨髄樹状細胞において発現している。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８は、ウイルスの侵入に応答する手段として、細胞内の「外来」一本鎖ＲＮＡの存在を検出することができる。ＴＬＲ８アゴニストでのＴＬＲ８発現細胞の治療は、高レベルのＩＬ－１２、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、および他の炎症性サイトカインの産生をもたらし得る。同様に、ＴＬＲ７アゴニストでのｐＤＣなどのＴＬＲ７発現細胞の刺激は、高レベルのＩＦＮ－αおよび他の炎症性サイトカインの産生をもたらし得る。ＴＬＲ７／ＴＬＲ８の関与およびその結果としてのサイトカイン産生は、樹状細胞および他の抗原提示細胞を活性化し、腫瘍破壊につながる多様な自然および獲得免疫応答メカニズムを促進し得る。
本明細書において記載される方法は、疎水性治療剤に特に有用である。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、疎水性治療剤は、反応速度、パーセント収率、および結合選択性が影響を受け得るように溶解度を低下させると考えられている。すなわち、本明細書において提供されるエステル部分は、疎水性治療剤の溶解性の欠如に対抗することにおいて特に有用であり得る。そのようなものとして、いくつかの実施態様においては、治療剤（すなわち、リンカーがない場合の治療剤）は、約１超の、例えば、約１．５超の、約２超の、約２．５超の、約３超の、約３．５超の、約４超の、約４．５超の、または約５超のオクタノール／水分配、ｌｏｇ（Ｐ）を有する。特定の実施態様においては、治療剤（すなわち、リンカーがない場合の治療剤）は、３超のオクタノール／水分配、ｌｏｇ（Ｐ）を有する。好ましい実施態様においては、治療剤（すなわち、リンカーがない場合の治療剤）は、５超のオクタノール／水分配、ｌｏｇ（Ｐ）を有する。
本明細書において提供される方法および免疫結合体に特に有用な治療剤は、例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１９／００１５５１６号；国際特許出願公開ＷＯ２０１８／１１２１０８；並びに米国仮特許出願６２／８６１，１１７号、６２／８１９，３６５号、および６２／７２４，２５９号中に記載されている。
免疫結合体の製剤および投与
関連する一面においては、本発明は、上記の複数の免疫結合体を含む組成物を提供する。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約１から約５０の範囲である。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、例えば、約１から約１０、約１から約８、または約１から約６、または約１から約４の範囲であり得る。免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約０．８、１、１．２、１．４、１．６、１．８、２、２．２、２．４、２．６、２．８、３、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、または４．２であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約４である。いくつかの実施態様においては、免疫結合体あたりの治療剤の平均数は、約２である。いくつかの場合においては、抗体は、単一の治療剤に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体は、リンカーを介して２つ以上の治療剤（例えば、３つ以上、４つ以上、または５つ以上の治療剤）に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体は、リンカーを介して１～８個の治療剤（例えば、１～５、１～３、２～８、２～５、２～３、または３～８個の治療剤）に共有結合している。いくつかの場合においては、抗体は、２～８個の治療剤（例えば、２～５、２～３、または３～８個の治療剤）に共有結合している。抗体が複数の治療剤に共有結合しているいくつかの場合においては、付着した治療剤は同じでありまたは異なり得る。例えば、いくつかの場合においては治療剤の２つ以上が、同じであり得る（例えば、同じ治療剤の２つの異なる分子がそれぞれ、抗体上の異なる部位で該抗体に付着し得る）。いくつかの場合においては、抗体は、２つ以上の異なる治療剤（例えば、３つ以上、４つ以上、または５つ以上の異なる治療剤）に共有結合している。例えば、本発明の免疫結合体を生成するとき、１つ以上の抗体におけるアミノ酸側鎖が治療剤－リンカー化合物と反応し、それにより、２つ以上の異なる治療剤にそれぞれ共有結合している１つ以上の免疫結合体をもたらすように、１つ以上の抗体を、２つ以上の（例えば、３つ以上の、４つ以上の、または５つ以上の）異なる治療剤－リンカー化合物を含む混合物と組み合わせ得る。
いくつかの実施態様においては、組成物はさらに、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む。例えば、本発明の免疫結合体は、静脈内（ＩＶ）投与または器官の体腔若しくは内腔への投与などの非経口投与用に製剤化することができる。あるいは、免疫結合体は、腫瘍内に注入することができる。注射用製剤は、一般に、薬学的に許容される担体中に溶解した免疫結合体の溶液を含むであろう。使用することができる許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水および等張塩化ナトリウムであるＲｉｎｇｅｒ溶液がある。加えて、滅菌固定油は、従来、溶媒または懸濁媒体として使用され得る。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激固定油を使用することができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸も同様に、注射剤の調製に使用することができる。これらの溶液は無菌であり、一般に望ましくない物質を含まない。これらの製剤は、従来の周知の滅菌技術によって滅菌することができる。製剤は、おおよその生理学的条件に求められる、ｐＨ調整および緩衝剤、毒性調整剤、例えば、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウム等、などの薬学的に許容される補助物質を含有することができる。これらの製剤中の免疫結合体の濃度は、広く異なり得、選択される特定の投与モードおよび患者の必要性に従って、主として流体体積、粘度、体重などに基づいて選択されるであろう。特定の実施態様においては、注射用の溶液製剤中の免疫結合体の濃度は、約０．１％（ｗ／ｗ）から約１０％（ｗ／ｗ）の範囲であろう。
本発明は、癌を治療するおよび／または予防する方法を提供する。該方法は、治療有効量の本明細書において記載される免疫結合体（例えば、本明細書において記載される組成物としての）を、それを必要とする対象、例えば、癌を有し、癌についての治療を必要としている対象に投与することを含む。いくつかの実施態様においては、癌は、免疫アンタゴニスト（例えば、免疫受容体アンタゴニスト）である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。いくつかの実施態様においては、癌は、免疫アゴニスト（例えば、免疫受容体アゴニスト）である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。
本発明は、疾患または状態（例えば、自己免疫疾患、ウイルス感染等）を治療するおよび／または予防する方法を提供する。該方法は、治療有効量の本明細書において記載される免疫結合体（例えば、本明細書において記載される組成物としての）を、それを必要とする対象、例えば、疾患または状態（例えば、自己免疫疾患、ウイルス感染等）を有し、該疾患または状態についての治療を必要としている対象に投与することを含む。いくつかの実施態様においては、疾患または状態は、免疫アンタゴニスト（例えば、免疫受容体アンタゴニスト）である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。いくつかの実施態様においては、疾患または状態は、免疫アゴニスト（例えば、免疫受容体アゴニスト）である治療剤に起因する免疫応答に感受性である。本発明の免疫結合体は、例えば腫瘍抗原の過剰発現によって特徴付けられる、さまざまな過剰増殖性疾患または障害を治療するために使用し得ることが意図される。例示的な過剰増殖性障害は、良性のまたは悪性の固形腫瘍並びに白血病およびリンパ性悪性腫瘍などの血液学的障害を含む。
別の一面においては、薬剤としての使用のための免疫結合体が、提供される。特定の実施態様においては、本発明は、有効量の免疫結合体を個体に投与することを含む、該個体を治療する方法における使用のための免疫結合体を提供する。一つのそのような実施態様においては、該方法はさらに、有効量の、例えば、本明細書において記載される、少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを含む。
さらなる一面においては、本発明は、薬剤の製造または調製における免疫結合体の使用を提供する。一つの実施態様においては、薬剤は癌の治療のためであり、該方法は、有効量の該薬剤を癌を有する個体に投与することを含む。一つのそのような実施態様においては、該方法はさらに、有効量の、例えば、本明細書において記載される、少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを含む。
癌腫は、上皮組織に由来する悪性腫瘍である。上皮細胞は、身体の外面を覆い、内部の空洞を裏打ちし、腺組織の裏打ちを形成する。癌腫の例は、腺癌（乳房、膵臓、肺、前立腺、胃、胃食道接合部、および結腸の癌などの腺（分泌）細胞において始まる癌）副腎皮質癌；肝細胞癌；腎細胞癌；卵巣癌；上皮内癌；管癌；乳房の癌腫；基底細胞癌；扁平上皮癌；移行上皮癌；結腸癌；鼻咽頭癌；多房性嚢胞性腎細胞癌；オート麦細胞癌；大細胞肺癌；小細胞肺癌；非小細胞肺癌等を含むが、これらに限定されない。癌腫は、前立腺、膵臓、結腸、脳（通常は二次転移として）、肺、乳房、および皮膚において見出し得る。いくつかの実施態様においては、非小細胞肺癌を治療する方法は、ＰＤ－Ｌ１に結合することができる抗体構築物（例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、ＰＤ－Ｌ１に結合することができる抗体構築物（例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。いくつかの実施態様においては、トリプルネガティブ乳癌を治療する方法は、ＰＤ－Ｌ１に結合することができる抗体構築物（例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。
軟部組織腫瘍は、結合組織に由来する非常に多様なまれな腫瘍のグループである。軟部組織腫瘍の例は、胞巣状軟部肉腫；血管腫様線維性組織球腫；軟骨筋酸化線維腫；骨格軟骨肉腫；骨格外粘液型軟骨肉腫；明細胞肉腫；線維形成性小円形細胞腫瘍；隆起性皮膚線維肉腫；子宮内膜間質腫瘍；ユーイング肉腫；線維腫症（デスモイド）；線維肉腫、乳児；消化管間質腫瘍；骨巨細胞腫瘍；腱鞘巨細胞腫；炎症性筋線維芽細胞腫瘍；子宮平滑筋腫；平滑筋肉腫；脂肪芽細胞腫；典型的な脂肪腫；紡錘細胞または多形性脂肪腫；非定型脂肪肉腫；軟骨性脂肪腫；高分化型脂肪肉腫；粘液性／円形細胞脂肪肉腫；多形性脂肪肉腫；粘液性悪性線維性組織球腫；高悪性度の悪性線維性組織球腫；粘液線維肉腫；悪性末梢神経鞘腫瘍；中皮腫；神経芽細胞腫；骨軟骨腫；骨肉腫；原始神経外胚葉性腫瘍；胞巣状横紋筋肉腫；胚性横紋筋肉腫；良性または悪性の神経鞘腫；滑膜肉腫；エヴァンの腫瘍；結節性筋膜炎；デスモイド型線維腫症；孤立性線維性腫瘍；隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）；血管肉腫；類上皮血管内皮腫；腱鞘巨細胞腫（ＴＧＣＴ）；色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）；線維性骨異形成症；粘液線維肉腫；線維肉腫；滑膜肉腫；悪性末梢神経鞘腫瘍；神経線維腫；軟部組織の多形性腺腫；並びに線維芽細胞、筋線維芽細胞、組織球、血管細胞／内皮細胞、および神経鞘細胞に由来する新生物を含むが、これらに限定されない。
肉腫は、間葉起源の細胞において、例えば、軟骨、脂肪、筋肉、血管、線維組織、または他の結合若しくは支持組織を含む、骨においてまたは体の軟部組織において発生するまれなタイプの癌である。さまざまなタイプの肉腫は、癌が形成する場所に基づいている。例えば、骨肉腫は、骨において形成し、脂肪肉腫は、脂肪において形成し、横紋筋肉腫は、筋において形成する。肉腫の例は、アスキン腫瘍；ボトリオイデス肉腫；軟骨肉腫；ユーイング肉腫；悪性血管内皮腫；悪性神経鞘腫；骨肉腫；および軟部組織肉腫（例えば、肺胞軟部肉腫；血管肉腫；嚢胞肉腫フィロデス皮膚線維肉腫隆起（ＤＦＳＰ）；デスモイド腫瘍；線維形成性小円形細胞腫瘍；類上皮肉腫；骨格外軟骨肉腫；骨格外骨肉腫；線維肉腫；消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；血管周囲細胞腫；血管肉腫（ｈｅｍａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）（より一般的には「血管肉腫（ａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）」として呼ばれる）；カポジ肉腫；平滑筋肉腫；脂肪肉腫；リンパ管肉腫；悪性末梢神経鞘腫瘍（ＭＰＮＳＴ）；神経線維肉腫；滑膜肉腫；および未分化多形性肉腫）を含むが、これらに限定されない。
奇形腫は、例えば、髪、筋肉、および骨を含む、いくつかの異なるタイプの組織（例えば、内胚葉、中胚葉、および外胚葉の３つの胚葉のいずれかおよび／または全てに由来する組織を含み得る）を含有し得る胚細胞腫瘍のタイプである。奇形腫は、女性における卵巣、男性における睾丸、および子供における尾骨において最も頻繁に発生する。
黒色腫は、メラノサイト（色素メラニンを作る細胞）において始まる癌の一形態である。黒色腫は、ほくろ（皮膚黒色腫）において始まり得るが、また目においてまたは腸においてなどの他の色素性組織においても始まり得る。
メルケル細胞癌は、通常、顔、頭または首上に肌色または青みがかった赤色の結節として現れるまれなタイプの皮膚癌である。メルケル細胞癌はまた、皮膚の神経内分泌癌とも呼ばれる。いくつかの実施態様においては、メルケル細胞癌を治療する方法は、ＰＤ－Ｌ１に結合することができる抗体構築物（例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。いくつかの実施態様においては、メルケル細胞癌は、投与が起こるときに転移した。
白血病は、骨髄などの造血組織において始まり、多数の異常な血球を産生し、血流に入らせる癌である。例えば、白血病は、通常は血流において成熟する骨髄由来細胞に由来し得る。白血病は、疾患がいかに速く発症し進行するか（例えば、急性対慢性）、および影響を受ける白血球のタイプ（例えば、骨髄対リンパ球）にちなんで名付けられる。骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病はまた、骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）または骨髄芽球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病はまた、リンパ芽球性またはリンパ球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病細胞は、リンパ節において集まり得、該リンパ節は、腫れ得る。白血病の例は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、および慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない。
リンパ腫は、免疫系の細胞において始まる癌である。例えば、リンパ腫は、通常はリンパ系において成熟する骨髄由来細胞に由来し得る。２つの基本的なリンパ腫のカテゴリーがある。リンパ腫の１つのカテゴリーは、リードシュテルンベルク細胞と呼ばれる細胞のタイプの存在によって特徴付けられる、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）である。現在、６つの認識されたタイプのＨＬがある。ホジキンリンパ腫の例は、結節性硬化症の古典的ホジキンリンパ腫（ＣＨＬ）、混合細胞性ＣＨＬ、リンパ球枯渇ＣＨＬ、リンパ球に富むＣＨＬ、および結節性リンパ球優勢ＨＬを含む。
リンパ腫の他のカテゴリーは、免疫系細胞の癌の大きく多様なグループを含む、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である。非ホジキンリンパ腫はさらに、緩徐進行性の（ゆっくり増殖する）経過を有する癌および攻撃的な（速く増殖する）経過を有する癌に分けることができる。現在、６１個の認識されたタイプのＮＨＬがある。非ホジキンリンパ腫の例は、エイズ関連リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、血管免疫芽球性リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、バーキット様リンパ腫（小型非分割細胞リンパ腫）、慢性リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、びまん性大Ｂ細胞リンパ腫、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、肝脾ガンマデルタＴ細胞リンパ腫、Ｔ細胞白血病、リンパ芽球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、鼻Ｔ細胞リンパ腫、小児リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、形質転換リンパ腫、治療関連Ｔ細胞リンパ腫、およびワルデンストレームマクログロブリン血症を含むが、これらに限定されない。
脳腫瘍は、脳組織の任意の癌を含む。脳腫瘍の例は、神経膠腫（例えば、神経膠芽腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、上衣腫等）、髄膜腫、下垂体腺腫、および前庭神経鞘腫、原始神経外胚葉性腫瘍（髄芽腫）を含むが、これらに限定されない。
本発明の免疫結合体は、治療において単独でまたは他の薬剤と組み合わせてのいずれかで使用することができる。例えば、免疫結合体は、化学療法剤などの少なくとも１つの追加の薬物と共投与し得る。そのような併用療法は、併用投与（２つ以上の薬物または治療剤は、同じまたは別個の製剤中に含まれる）、および別個の投与（その場合においては、免疫結合体の投与は、追加の治療剤および／または薬物の投与の前に、同時に、および／または後に起こり得る）を包含する。免疫結合体はまた、放射線療法と組み合わせて使用することができる。
本発明の免疫結合体（および任意の追加の治療剤）は、非経口、肺内、および鼻腔内、並びに局所治療について望まれる場合は、病巣内投与を含む任意の適切な手段によって投与することができる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与を含む。投薬は、投与が短時間であるかまたは慢性であるかに部分的に依存して、任意の適切な経路によって、例えば、静脈内または皮下注射などの注射によってであり得る。本明細書においては、さまざまな時点にわたる単回のまたは複数回の投与、ボーラス投与、およびパルス注入を含むがこれらに限定されないさまざまな投薬スケジュールが意図されている。
アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターは、癌、特に乳癌、特にトリプルネガティブ（エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、および過剰のＨＥＲ２タンパク質について試験陰性）乳癌、膀胱癌、およびメルケル細胞癌の治療において有用であることが知られている。本明細書において記載される免疫結合体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターと同じタイプの癌、特に乳癌、特にトリプルネガティブ（エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、および過剰のＨＥＲ２タンパク質について試験陰性）乳癌、膀胱癌、およびメルケル細胞癌を治療するために使用することができる。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が乳癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。乳癌は、乳房における異なる領域に由来し得、多くの異なるタイプの乳癌が特徴付けられてきた。例えば、本発明の免疫結合体は、非浸潤性（ｉｎ ｓｉｔｕ）腺管癌腫；浸潤性腺管癌腫（例えば、管状癌腫；髄様癌腫；粘液性癌腫；乳頭癌腫；または乳房の篩状癌腫）；非浸潤性（ｉｎ ｓｉｔｕ）小葉癌腫；浸潤性小葉癌腫；炎症性乳癌；および他の形態の乳癌を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、ＨＥＲ２に結合することができる抗体構築物（例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が胃癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。胃（Ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（ｓｔｏｍａｃｈ））癌は、胃における異なる細胞に由来し得、腺癌、カルチノイド腫瘍、扁平上皮癌、小細胞癌、平滑筋肉腫、および胃腸間質腫瘍を含む、いくつかのタイプの胃癌が特徴付けられてきた。いくつかの実施態様においては、胃癌を治療する方法は、ＨＥＲ２に結合することができる抗体構築物（例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が胃食道接合部癌腫である、上記の癌を治療する方法を提供する。この癌腫は、食道が胃を肉にする（ｍｅａｔｓ）領域において発生する。３つのタイプの胃食道接合部癌腫がある。タイプ１においては、癌は、上から下に胃食道接合部の中に増殖する。食道の下端の通常の裏打ちは、突然変異（バレット食道とも呼ばれる）によって置き換えられる。タイプ２においては、癌は、胃食道接合部でそれ自体で増殖する。タイプ３においては、癌は、胃から上向きに胃食道接合部の中に増殖する。いくつかの実施態様においては、胃食道接合部癌腫を治療する方法は、ＨＥＲ２に結合することができる抗体構築物（例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、それらのバイオシミラー、またはそれらのバイオベター）を含有する免疫結合体を投与することを含む。
本発明のいくつかの実施態様は、ラベツズマブ、ＰＲ１Ａ３、ＭＦＥ－２３、ＳＭ３Ｅ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターと同じタイプの癌、特に結腸癌、肺癌、腎癌、膵臓癌、胃癌、および食道癌、特にＣＥＡを過剰発現する結腸癌、肺癌、腎癌、膵臓癌、胃癌、および食道癌を治療する方法を提供する。好ましい実施態様においては、本明細書において記載される免疫結合体は、結腸癌を治療するために使用し得る。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が頭頸部癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。頭頸部癌（並びに頭頸部扁平上皮細胞癌腫）は、口腔、咽頭および喉頭、唾液腺、副鼻腔、および鼻腔、並びに頸部上部のリンパ節の扁平上皮細胞癌腫によって特徴付けられるさまざまな癌を指す。頭頸部癌は、米国における全ての癌の約３から５パーセントを占める。これらの癌は、男性および５０歳超の人においてより一般的である。タバコ（無煙タバコを含む）およびアルコールの使用は、頭頸部癌、特に、口腔、中咽頭、下咽頭および喉頭の癌について、最も重要な危険因子である。頭頸部癌の８５％は、タバコの使用に関連している。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が乳癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。乳癌は、乳房の異なる領域に由来し得、多くの異なるタイプの乳癌が特徴付けられてきた。例えば、本発明の免疫結合体は、非浸潤性（ｉｎ ｓｉｔｕ）腺管癌腫；浸潤性腺管癌腫（例えば、管状癌腫；髄様癌腫；粘液性癌腫；乳頭癌腫；または乳房の篩状癌腫）、非浸潤性（ｉｎ ｓｉｔｕ）小葉癌腫；浸潤性小葉癌腫；炎症性乳癌；および他の形態の乳癌を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、ＥＧＦＲに結合することができる抗体（例えば、セツキシマブ）を含有する免疫結合体を投与することを含む。
免疫結合体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、それらのバイオシミラー、およびそれらのバイオベターについて利用される投薬レジメンなどの任意の適切な投薬レジメンを使用して、それを必要とする対象に任意の治療有効量で投与される。例えば、該方法は、約１００ｎｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重に基づいて）の用量を対象に提供するように免疫結合体を投与することを含み得る。免疫結合体の用量は、約５ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇ、または約１００μｇ／ｋｇから約１ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。免疫結合体の用量は、約１００、２００、３００、４００、または５００μｇ／ｋｇであり得る。免疫結合体の用量は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｍｇ／ｋｇであり得る。免疫結合体の用量はまた、特定の結合体並びに治癒される癌の種類および重症度に応じて、これらの範囲外であり得る。投与頻度は、１週間あたり単回投与から複数回投与までの範囲であるか、またはより頻繁であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、１ヶ月あたり約１回から１週間あたり約５回投与される。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、１週間あたり１回投与される。
別の一面においては、本発明は、癌を予防する方法を提供する。該方法は、治療有効量の免疫結合体（例えば、上記の組成物としての）を、それを必要とする対象に投与することを含む。特定の実施態様においては、対象は予防されるべき特定の癌にかかりやすい。例えば、本方法は、約１００ｎｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重に基づいて）の用量を対象に提供するように免疫結合体を投与することを含み得る。免疫結合体の用量は、約５ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇ、または約１００μｇ／ｋｇから約１ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。免疫結合体の用量は、約１００、２００、３００、４００、または５００μｇ／ｋｇであり得る。免疫結合体の用量は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｍｇ／ｋｇであり得る。免疫結合体の用量はまた、特定の結合体並びに治療される癌の種類および重症度に応じて、これらの範囲外であり得る。投与頻度は、１週間あたり単回投与から複数回投与までの範囲であるか、またはより頻繁であり得る。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、１ヶ月あたり約１回から１週間あたり約５回投与される。いくつかの実施態様においては、免疫結合体は、１週間あたり１回投与される。
本発明のいくつかの実施態様は、癌が乳癌である、上記の癌を治療する方法を提供する。乳癌は、乳房の異なる領域に由来し得、多くの異なるタイプの乳癌が特徴付けられてきた。例えば、本発明の免疫結合体は、非浸潤性（ｉｎ ｓｉｔｕ）乳管癌腫；浸潤性乳管癌腫（例えば、管状癌腫；髄様癌腫；粘液性癌腫；乳頭癌腫；または乳房の篩状癌腫）；非浸潤性（ｉｎ ｓｉｔｕ）小葉癌腫；浸潤性小葉癌腫；炎症性乳癌；およびトリプルネガティブ（エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、および過剰のＨＥＲ２タンパク質について試験陰性）乳癌などの他の形態の乳癌を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様においては、乳癌を治療する方法は、ＨＥＲ２（例えば、トラスツズマブ、ペルツズマブ、バイオシミラー、またはそれらのバイオベター）またはＰＤ－Ｌ１（例えば、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、バイオシミラー、またはそれらのバイオベター）に結合することができる抗体構築物を含有する免疫結合体を投与することを含む。
いくつかの実施態様においては、癌は、ＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８によって誘導される炎症誘発性応答に感受性である。
実施態様
本明細書において記載される本主題の実施態様を含む一面は、１つ以上の他の面または実施態様と共に、単独でまたは組み合わせて、有益であるかもしれない。前述の説明を限定することなく、１～２７と番号付けされた本開示の特定の非限定的な一面が以下に提供される。この開示を読むと当業者に明らかであろうように、個々に番号付けされた一面のそれぞれは、使用されるかもしれないし、先行するまたは後続する個々に番号付けされた一面の任意のものと組み合わせられるかもしれない。これは、全てのそのような一面の組合せのための支持を提供することが意図されるものであり、以下に明示的に提供される一面の組合せに限定されない。
１． 免疫結合体を製造する方法であって、該方法が１つ以上の式Ｉ：
Figure 2022547066000052
の化合物またはその塩、および式ＩＩ：
Figure 2022547066000053
の抗体構築物またはその塩
（ここで、式ＩＩは、該抗体構築物の１つ以上のリジン残基を表す残基
Figure 2022547066000054
を有する抗体構築物である）
を組み合わせて、
式ＩＩＩ：
Figure 2022547066000055
（式中、
ＴＡは、治療剤であり、
Ｌは、リンカーであり、
ｒは、１から５０の整数であり、
Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000056
およびそれらの塩から選択される第１の置換基を含む芳香族部分であり、
各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、
ｎは、１から４の整数であり、
ＰＥＧは、式：
－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－
（式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）
の免疫結合体またはその塩を提供することを含む、方法。
２． Ａｒが－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＲ３、－ＯＲ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
Figure 2022547066000057
（式中、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、
ｎは、１から４までの整数であり、
ＰＥＧは、式：
－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－
（式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）、
それらの塩、およびそれらの組合せから選択される１つ以上の追加の置換基をさらに含む、態様１の方法。
３． 第１の置換基が－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｈ、－ＣＮ、およびそれらの塩から選択される、態様１または態様２の方法。
４． 第１の置換基が－ＳＯ３Ｈまたはその塩である、態様１～３のいずれか一つの方法。
５． １つ以上の追加の置換基が－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｈ、－ＣＮ、およびそれらの塩から選択される、態様２～４のいずれか一つの方法。
６． １つ以上の追加の置換基が－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、および－Ｉから選択される、態様２～５のいずれか一つの方法。
７． Ａｒが式：
Figure 2022547066000058
Figure 2022547066000059
Figure 2022547066000060
Figure 2022547066000061
Figure 2022547066000062
Figure 2022547066000063
Figure 2022547066000064
Figure 2022547066000065
Figure 2022547066000066
またはその塩である、態様１～６のいずれか一つの方法。
８． ｒが１から１０の整数である、態様１～７のいずれか一つの方法。
９． ｒが１から４の整数である、態様１～８のいずれか一つの方法。
１０． リンカーが少なくとも１つのエチレングリコール単位を含む、態様１～９のいずれか一つの方法。
１１． リンカーが少なくとも５つのエチレングリコール単位を含む、態様１～１０のいずれか一つの方法。
１２． 治療剤が免疫アゴニストである、態様１～１１のいずれか一つの方法。
１３． 治療剤がＴＬＲアゴニストである、態様１～１１のいずれか一つの方法。
１４． ＴＬＲアゴニストがＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、およびＴＬＲ７／ＴＬＲ８アゴニストからなる群から選択される、態様１３の方法。
１５． 治療剤が免疫アンタゴニストである、態様１～１１のいずれか一つの方法。
１６． 抗体構築物が抗体である、態様１～１５のいずれか一つの方法。
１７． 抗体がＩｇＧ１抗体である、態様１６の方法。
１８． 抗体構築物がＣＣＲ８、ＣＤＨ１、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＥｐＣＡＭ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＭＳＬＮ、ＰＤ－Ｌ１、ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ、ＨＥＲ２、ＳＬＡＭＦ７、ＰＤＧＦＲａ、ｇｐ７５、ＴＲＯＰ２、ＰＳＭＡ、５Ｔ４、ＡＮＧＰＴ２、ＡＮＰＥＰ、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４、ＢＣＭＡ、ＣＡ９、ＣＤ１２５、ＣＤ３７、ＣＤ７４、ＣＬＤＮ３、ＣＬＥＣ１１Ａ、ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＬＥＣ６Ａ、ＣＴＡＧ１Ｂ、ＣＴＡＬ４、ＥＰＨＡ２、ＥＰＨＡ４、ＦＧＦＲ３、ＦＯＬＲ１、ＧＤ２、ＧＰＣ３、ＧＰＮＭＢ、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＩＬ－１３、ＩＬ３ＲＡ２、ＫＩＴＬＧ、Ｌ１ＣＡＭ、ＬＡＧ３、Ｌｅｗｉｓ－Ｙ抗原、ＬＩＬＲＢ１、ＬＲＲＣ１５、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥＡ６、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＮＯＴＣＨ、ＮＲＰ１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、Ｐ２ＲＸ７、ＰＣＤ１、ＰＳＣＡ、ＰＶＲＩＧ、ＲＯＲ１、ＳＩＧＬＥＣ１０、ＳＩＧＬＥＣ１１、ＳＩＧＬＥＣ１２、ＳＩＧＬＥＣ１４、ＳＩＧＬＥＣ１５、ＳＩＧＬＥＣ５、ＳＩＧＬＥＣ６、ＳＩＧＬＥＣ７、ＳＩＧＬＥＣ８、ＳＩＧＬＥＣ９、ＳＩＲＰＡ、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＣ３９Ａ６、ＴＮＦＳＦ１０、およびＷＴ１からなる群から選択される抗原に結合する抗原結合ドメインを含む、態様１～１７のいずれか一つの方法。
１９． 態様１～１８のいずれか一つの方法から製造される免疫結合体またはその塩。
２０． 態様１～１８のいずれか一つの方法から製造される複数の免疫結合体またはそれらの塩を含む組成物。
２１． 治療有効量の態様１９に記載の免疫結合体若しくはその塩または態様２０に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、疾患または状態を治療するまたは予防する方法。
２２． 治療有効量の態様１９に記載の免疫結合体若しくはその塩または態様２０に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、癌を治療するまたは予防する方法。
２３． 疾患または状態が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様２１の方法。
２４． 疾患または状態が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様２１の方法。
２５． 癌が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様２２の方法。
２６． 癌が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、態様２２の方法。
２７． 癌がＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニズムによって誘導される炎症誘発性応答に感受性である、態様２２の方法。
以下の実施例は、本発明をさらに例示するが、もちろん、いかなる方法でもその範囲を制限するものとして解釈されるべきでない。
実施例１：ｃＬｏｇＰ計算
この実施例は、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ；Ａｒ５９）またはスルホ－ジクロロフェニルエステル（ＳＤＰ；Ａｒ３２）を有する治療剤リンカー化合物が、Ｓ－ＴＦＰ、ＳＤＰ、およびＴＦＰのｃＬｏｇＰ計算によって証明されるように、テトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰエステル）を有する治療剤リンカー化合物よりも高い水溶性を有するはずであることを示す。
ＬｏｇＰ値は、ｎ－オクタノールと水との間の化合物分配係数の対数評価、すなわち、ｌｏｇ（ｃオクタノール／ｃ水）を指す。すなわち負のＬｏｇＰ値は、化合物が水中に分配される可能性がより高いこと、すなわち、オクタノール中よりも水中に溶けやすいことを示す。ｃＬｏｇＰは、その化学組成に基づいて化合物の親水性を評価するために利用する理論計算である。
ＴＦＰ、Ｓ－ＴＦＰ、およびＳＤＰについてのｃＬｏｇＰ値は、ＣｈｅｍＤｒｏｗ（商標）を使用して計算し、得られたｃＬｏｇＰ値を、以下に示す。
Figure 2022547066000067
上に示されるように、ＴＦＰは正のｃＬｏｇＰ値を有し、これは、ＴＦＰが疎水性であり、水よりもオクタノール中に分配される可能性がより高いことを示す。対照的に、Ｓ－ＴＦＰおよびＳＤＰは負のｃＬｏｇＰ値を有し、これは、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ）またはスルホ－ジクロロフェニルエステル（ＳＤＰ）を有する治療剤リンカー化合物がテトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰエステル）を有する治療剤リンカー化合物よりも高い水溶性を有するはずであることを示す。さらに、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ）についてのｃＬｏｇＰ値は、スルホ－ジクロロフェニルエステル（ＳＤＰ）よりも負であり、これは、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ）を有する治療剤リンカー化合物がスルホテトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ）を有する治療剤リンカー化合物よりも高い水溶性を有するはずであることを示す。
実施例２：安定性分析
この実施例は、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ；Ａｒ５９）を有する治療剤リンカー化合物が、結合緩衝液中でのその加水分解不安定性によって証明されるように、テトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰエステル）を有する治療剤リンカー化合物よりも反応性が高いことを示す。
スルホ－テトラフルオロフェニルエステルを有する治療剤リンカー化合物（Ｓ－ＴＦＰリンカーＴＡ）またはテトラフルオロフェニルエステルを有する治療剤リンカー化合物（ＴＦＰリンカーＴＡ）の２５ｍＭ溶液を、１ｍＬバイアル中で１０６μＬのジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）を対応する治療剤リンカー化合物に加えることによって調製した。得られた溶液を、室温で撹拌した。１５μＬのＳ－ＴＦＰリンカーＴＡ溶液およびＴＦＰリンカーＴＡを、０．９ｍＬのホウ酸塩緩衝液（ｐＨ８．３）を含有する２つの別個のバイアルに加えた。得られた結合緩衝溶液を、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用して、０時間、２時間、５時間、および２５時間時に別々にモニターした。Ｓ－ＴＦＰリンカーＴＡおよびＴＦＰリンカーＴＡの相対量（面積％）を、図１中に示すように時間の関数としてプロットした。
図１中に提示するデータによって示されるように、ＴＦＰリンカーＴＡは、治療剤リンカー化合物の高い面積％によって証明されるように、測定した全ての時点でＳ－ＴＦＰリンカーＴＡよりも加水分解的に安定である。ＴＦＰリンカーＴＡはＳ－ＴＦＰリンカーＴＡよりも加水分解的に安定であるため、Ｓ－ＴＦＰリンカーＴＡは、ＴＦＰリンカーＴＡよりも反応性が高いはずである。
実施例３：結合プロファイル分析
この実施例は、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ；Ａｒ５９）およびスルホ－ジクロロフェニルエステル（ＳＤＰ；Ａｒ３２）が、テトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰエステル）とは異なる結合プロファイルを提供することを示す。
トラスツズマブを、Ｇ－２５ ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）脱塩カラム（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、ｐＨ８．３で１００ｍＭのホウ酸、５０ｍＭの塩化ナトリウム、１ｍＭのエチレンジアミン四酢酸を含有する結合緩衝液中で緩衝液交換した。次いで、溶出液を、緩衝液を使用してそれぞれ６ｍｇ／ｍｌに調整し、滅菌ろ過した。６ｍｇ／ｍｌのトラスツズマブを、３０℃に予熱し、エステルＴＦＰ、ＮＨＳ、Ｓ－ＴＦＰ、およびＳＤＰのそれぞれで終端された８モル当量の治療剤／リンカー部分と急速に混合した。
Figure 2022547066000068
反応を３０℃で１６時間進行させ、得られた免疫結合体を、ｐＨ７．２のＰＢＳ中で平衡化した２つの連続するＧ－２５脱塩カラムを通すことによって反応物から分離した。得られた免疫結合体を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ中２ｍｇ／ｍｌとなるように緩衝液交換し、最終容量を２０μＬとした。緩衝液交換した溶液に１０μＬの５０ｍＭストックジチオスレイトールを加え、得られた混合物をシェーカー上で３７℃で６０分間インキュベートした。軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）のペプチドマッピングを、ＸＥＶＯ（商標）Ｇ２－ＸＳ ＴＯＦ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に接続したＡＣＱＵＩＴＹ（商標） ＵＰＬＣ Ｈクラスシステム（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）上のＣ４逆相カラム上に分解したサンプルを注入することによって行った。特定の結合残基、およびそれらの相対的な存在量を、サンプルをＣ４逆相カラム上に注入する前に、還元された免疫結合体をトリプシンでさらに分解することによって決定した。結合の結果を、図２中に提供する。
図２中に提示するデータによって実証されるように、Ｓ－ＴＦＰおよびＳＤＰとの結合は、ＴＦＰとの結合と比較して、重鎖に対する選択性（すなわち、パーセント結合）における増加をもたらした。重鎖結合の量（すなわち、約６５％から７５％）は、ＮＨＳエステルとの結合と同様である。しかしながら、相対的な不安定性のため、ＮＨＳ結合は、所望の免疫結合体収率が低下した。さらに、Ｓ－ＴＦＰおよびＳＤＰは、ＬＣ Ｋ１８８での結合が大幅に低下した。
これらの結果は、実施例１および２の結論、すなわち、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ；Ａｒ５９）またはスルホ－ジクロロフェニルエステル（ＳＤＰ；Ａｒ３２）を有する治療剤リンカー化合物がそれらの溶解性および／またはそれらの反応性の結果として有意に異なる反応性パターンを有するということを支持する。
実施例４：溶解度分析
この実施例は、スルホ－テトラフルオロフェニルエステル（Ｓ－ＴＦＰ；Ａｒ５９）エステルとの結合から形成された免疫結合体の組成物の平均治療剤対抗体比に対する治療剤／リンカー部分の溶解度の効果を示す。
トラスツズマブを、Ｇ－２５ ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）脱塩カラム（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、ｐＨ８．３で１００ｍＭのホウ酸、５０ｍＭの塩化ナトリウム、および１ｍＭのエチレンジアミン四酢酸を含有する結合緩衝液中で緩衝液交換した。次いで、溶出液を、緩衝液を使用してそれぞれ６ｍｇ／ｍｌのトラスツズマブに調整した。得られた混合物を、滅菌濾過し、３０℃に予熱し、Ｓ－ＴＦＰで終端された８モル当量の治療剤／リンカー部分および特定のパーセント（すなわち、９ｖ／ｖ％または１６ｖ／ｖ％）のジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含有する緩衝溶液と迅速に混合した。表１において概説するように、治療剤／リンカー部分溶液の濁度および得られた免疫結合体の治療剤対抗体比を測定した。
Figure 2022547066000069
表１において示す結果によって実証されるように、治療剤／リンカー部分の溶解度は、得られる免疫結合体の治療剤対抗体比に対して決定的な役割を果たす。表１における結果から明らかなように、溶解度が増加する（すなわち、濁度が減少する）につれて、平均治療剤対抗体比が増加する。
本明細書において引用される刊行物、特許出願、および特許を含む全ての参考文献は、それぞれの参考文献が参照により組み込まれることが個別にかつ具体的に示され、その全体が本明細書において記載されているかのように、同じ程度に参照により本明細書に組み込まれる。
本発明を説明する文脈における（特に、以下の特許請求の範囲の文脈における）用語「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」および「少なくとも１つの」並びに類似の指示対象の使用は、本明細書において別途示されない限りまたは文脈と明確に矛盾しない限り、単数および複数の両方をカバーするものと解釈されるべきである。１つ以上の項目のリストに伴われる用語「少なくとも１つ」（例えば、「ＡおよびＢの少なくとも１つ」）の使用は、本明細書において別途示されない限りまたは文脈と明確に矛盾しない限り、列挙された項目から選択される１つの項目（Ａ若しくはＢ）、または列挙された項目の２つ以上の任意の組合せ（ＡおよびＢ）を意味すると解釈されるべきである。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、および「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」は、別途記載のない限り、オープンエンド用語（すなわち、「含むが、限定されない」を意味する）として解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の列挙は、本明細書において別途示されない限り、単に、範囲内に入る各別個の値に個別に言及する簡略化方法として役立つことが意図され、それぞれの別個の値は、本明細書において個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。本明細書において記載される全ての方法は、本明細書において別途示されない限りまたは文脈によって明確に矛盾しない限り、任意の好適な順序で実施することができる。本明細書において提供される任意のおよび全ての実施例、または例示的な文言（例えば、「など」）の使用は、単に本発明をよりよく明確化することが意図されるものであり、別途特許請求の範囲で請求されない限り、本発明の範囲に制限を課すものではない。本明細書中のいかなる文言も、本発明の実施に必須の非請求のいかなる要素を示すものとしても解釈されるべきではない。
本発明者らに既知の本発明を実施するための最良の様式を含む、本発明の好ましい実施態様が、本明細書において記載されている。これらの好ましい実施態様の変形例は、前述の説明を読むと、当業者には明らかとなるであろう。本発明者らは、当業者が適宜そのような変形例を使用することを期待しており、本発明者らは、本明細書において具体的に記載されているのとは別の方法で本発明が実施されることを意図している。従って、この発明は、適用可能な法律によって認められるように本明細書に添付の特許請求の範囲に記載された主題の全ての修飾物および均等物を含む。さらに、本明細書において別途示されない限りまたは文脈によって明確に矛盾しない限り、その全ての可能な変形例における上記の要素の任意の組合せが、本発明に包含される。

Claims (27)

  1. 免疫結合体を製造する方法であって、該方法が１つ以上の式Ｉ：
    Figure 2022547066000070
    の化合物またはその塩、および式ＩＩ：
    Figure 2022547066000071
    の抗体構築物またはその塩
    （ここで、式ＩＩは、該抗体構築物の１つ以上のリジン残基を表す残基
    Figure 2022547066000072
    を有する抗体構築物である）
    を組み合わせて、
    式ＩＩＩ：
    Figure 2022547066000073
    （式中、
    ＴＡは、治療剤であり、
    Ｌは、リンカーであり、
    ｒは、１から５０の整数であり、
    Ａｒは、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
    Figure 2022547066000074
    およびそれらの塩から選択される第１の置換基を含む芳香族部分であり
    各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
    各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、
    Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、
    ｎは、１から４の整数であり、
    ＰＥＧは、式：
    －（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－
    （式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）
    の免疫結合体またはその塩を提供することを含む、方法。
  2. Ａｒが－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＲ３、－ＯＲ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＰＥＧ、－ＳＯ２ＣＸ３、－ＮＲ３ ＋、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｒ、－ＳＯ２Ｒ、－ＣＮ、－ＣＸ３、－ＰＯ３Ｒ２、－ＯＰＯ３Ｒ２、
    Figure 2022547066000075
    （式中、各Ｒは独立して、Ｈ、ＣＸ３、またはＣ１－Ｃ４アルキルであり、
    各Ｘは独立して、水素またはハロゲンであり、
    Ｙは、ＣＨ２、ＰＥＧ、または結合であり、
    ｎは、１から４までの整数であり、
    ＰＥＧは、式：
    －（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－（ＣＨ２）ｐ－
    （式中、ｐは、１から５の整数であり、ｍは、２から５０の整数である）を有する）、
    それらの塩、およびそれらの組合せから選択される１つ以上の追加の置換基をさらに含む、請求項１の方法。
  3. 第１の置換基が－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｈ、－ＣＮ、およびそれらの塩から選択される、請求項１または請求項２の方法。
  4. 第１の置換基が－ＳＯ３Ｈまたはその塩である、請求項１～３のいずれか一項の方法。
  5. １つ以上の追加の置換基が－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＮＯ２、－ＳＯ３Ｈ、－ＣＮ、およびそれらの塩から選択される、請求項２～４のいずれか一項の方法。
  6. １つ以上の追加の置換基が－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、および－Ｉから選択される、請求項２～５のいずれか一項の方法。
  7. Ａｒが式：
    Figure 2022547066000076
    Figure 2022547066000077
    Figure 2022547066000078
    Figure 2022547066000079
    Figure 2022547066000080
    Figure 2022547066000081
    Figure 2022547066000082
    Figure 2022547066000083
    Figure 2022547066000084
    またはその塩である、請求項１～６のいずれか一項の方法。
  8. ｒが１から１０の整数である、請求項１～７のいずれか一項の方法。
  9. ｒが１から４の整数である、請求項１～８のいずれか一項の方法。
  10. リンカーが少なくとも１つのエチレングリコール単位を含む、請求項１～９のいずれか一項の方法。
  11. リンカーが少なくとも５つのエチレングリコール単位を含む、請求項１～１０のいずれか一項の方法。
  12. 治療剤が免疫アゴニストである、請求項１～１１のいずれか一項の方法。
  13. 治療剤がＴＬＲアゴニストである、請求項１～１１のいずれか一項の方法。
  14. ＴＬＲアゴニストがＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、およびＴＬＲ７／ＴＬＲ８アゴニストからなる群から選択される、請求項１３の方法。
  15. 治療剤が免疫アンタゴニストである、請求項１～１１のいずれか一項の方法。
  16. 抗体構築物が抗体である、請求項１～１５のいずれか一項の方法。
  17. 抗体がＩｇＧ１抗体である、請求項１６の方法。
  18. 抗体構築物がＣＣＲ８、ＣＤＨ１、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＥｐＣＡＭ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＭＳＬＮ、ＰＤ－Ｌ１、ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ、ＨＥＲ２、ＳＬＡＭＦ７、ＰＤＧＦＲａ、ｇｐ７５、ＴＲＯＰ２、ＰＳＭＡ、５Ｔ４、ＡＮＧＰＴ２、ＡＮＰＥＰ、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４、ＢＣＭＡ、ＣＡ９、ＣＤ１２５、ＣＤ３７、ＣＤ７４、ＣＬＤＮ３、ＣＬＥＣ１１Ａ、ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＬＥＣ６Ａ、ＣＴＡＧ１Ｂ、ＣＴＡＬ４、ＥＰＨＡ２、ＥＰＨＡ４、ＦＧＦＲ３、ＦＯＬＲ１、ＧＤ２、ＧＰＣ３、ＧＰＮＭＢ、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＩＬ－１３、ＩＬ３ＲＡ２、ＫＩＴＬＧ、Ｌ１ＣＡＭ、ＬＡＧ３、Ｌｅｗｉｓ－Ｙ抗原、ＬＩＬＲＢ１、ＬＲＲＣ１５、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥＡ６、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＮＯＴＣＨ、ＮＲＰ１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、Ｐ２ＲＸ７、ＰＣＤ１、ＰＳＣＡ、ＰＶＲＩＧ、ＲＯＲ１、ＳＩＧＬＥＣ１０、ＳＩＧＬＥＣ１１、ＳＩＧＬＥＣ１２、ＳＩＧＬＥＣ１４、ＳＩＧＬＥＣ１５、ＳＩＧＬＥＣ５、ＳＩＧＬＥＣ６、ＳＩＧＬＥＣ７、ＳＩＧＬＥＣ８、ＳＩＧＬＥＣ９、ＳＩＲＰＡ、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＣ３９Ａ６、ＴＮＦＳＦ１０、およびＷＴ１からなる群から選択される抗原に結合する抗原結合ドメインを含む、請求項１～１７のいずれか一項の方法。
  19. 請求項１～１８のいずれか一項の方法から製造される免疫結合体またはその塩。
  20. 請求項１～１８のいずれか一項の方法から製造される複数の免疫結合体またはそれらの塩を含む組成物。
  21. 治療有効量の請求項１９に記載の免疫結合体若しくはその塩または請求項２０に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、疾患または状態を治療するまたは予防する方法。
  22. 治療有効量の請求項１９に記載の免疫結合体若しくはその塩または請求項２０に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、癌を治療するまたは予防する方法。
  23. 疾患または状態が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項２１の方法。
  24. 疾患または状態が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項２１の方法。
  25. 癌が免疫アンタゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項２２の方法。
  26. 癌が免疫アゴニストである治療剤に起因する免疫応答に感受性である、請求項２２の方法。
  27. 癌がＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニズムによって誘導される炎症誘発性応答に感受性である、請求項２２の方法。
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