JP2022536122A - 腫瘍関連抗原特異的ｔ細胞応答 - Google Patents

腫瘍関連抗原特異的ｔ細胞応答 Download PDF

Info

Publication number
JP2022536122A
JP2022536122A JP2021572597A JP2021572597A JP2022536122A JP 2022536122 A JP2022536122 A JP 2022536122A JP 2021572597 A JP2021572597 A JP 2021572597A JP 2021572597 A JP2021572597 A JP 2021572597A JP 2022536122 A JP2022536122 A JP 2022536122A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
seq
tumor
acid sequence
mhc
active
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2021572597A
Other languages
English (en)
Other versions
JPWO2020247859A5 (ja
Inventor
ジェイ． フルー、クラウス
ジー． ハンセン、スコット
ジェイ． ピッカー、ルイス
Original Assignee
オレゴン ヘルス アンド サイエンス ユニバーシティ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by オレゴン ヘルス アンド サイエンス ユニバーシティ filed Critical オレゴン ヘルス アンド サイエンス ユニバーシティ
Publication of JP2022536122A publication Critical patent/JP2022536122A/ja
Publication of JPWO2020247859A5 publication Critical patent/JPWO2020247859A5/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001152—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
    • A61K39/001153—Wilms tumor 1 [WT1]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001166—Adhesion molecules, e.g. NRCAM, EpCAM or cadherins
    • A61K39/001168—Mesothelin [MSLN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001193—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; PAP or PSGR
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
    • A61K39/4632—T-cell receptors [TCR]; antibody T-cell receptor constructs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/464403—Receptors for growth factors
    • A61K39/464406—Her-2/neu/ErbB2, Her-3/ErbB3 or Her 4/ ErbB4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464452—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
    • A61K39/464453—Wilms tumor 1 [WT1]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464466—Adhesion molecules, e.g. NRCAM, EpCAM or cadherins
    • A61K39/464468—Mesothelin [MSLN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464493—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; Prostatic acid phosphatase [PAP]; Prostate-specific G-protein-coupled receptor [PSGR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
    • A61K2039/572—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 cytotoxic response
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/605—MHC molecules or ligands thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
    • A61K2039/804—Blood cells [leukemia, lymphoma]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
    • A61K2039/852—Pancreas
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
    • A61K2039/884—Vaccine for a specifically defined cancer prostate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16111—Cytomegalovirus, e.g. human herpesvirus 5
    • C12N2710/16141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本開示は、がんの治療のための免疫応答を生じさせる抗原および方法に関する。本開示はまた、がんの治療または予防のためにＭＨＣ－Ｉａ、ＭＨＣ－ＩＩおよび／またはＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法に関する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年７月２５日に出願された米国仮特許出願第６２／８７８，５１１号の利益を主張し、また２０１９年６月７日に出願された米国仮特許出願第６２／８５８，７５６号の利益を主張するものであるが、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
連邦政府による資金提供を受けた研究開発に関する声明
本発明は、国立がん研究所によって授与された助成金番号Ｒ ４４ ＣＡ １８０１７７－０３の下で政府の支援を受けてなされた。政府は、本発明においてある一定の権利を有する。
電子的に提出された配列表の参照
本出願と共に提出されたＡＳＣＩＩテキストファイル（名称４１５３＿０１２ＰＣ０２＿ＳＬ＿ＳＴ２５；サイズ：３，５９１バイト；作成日２０２０年５月２７日）における電子的に提出された配列表の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に基づくワクチン、ならびに他のヘルペスウイルスに基づくワクチンは、感染性疾患およびがんに対する本発明者らの言わば武器なるものへの近い将来の有望な追加策として見込まれている。これらのヘルペスウイルスに基づくベクターは、それらがそれらの異種コード化病原体（またはがん）標的抗原に対して誘導する高レベルのＴ細胞免疫だけでなく、免疫の耐久性およびその「即時エフェクター」品質においても独特である。
多くの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）は、がん細胞によって異常に発現される自己抗原である。ＴＡＡ特異的Ｔ細胞応答を誘発するための主な課題は、自己抗原として、ＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣ－ＩＩに関連してこれらの抗原に由来するペプチドを強く認識する「カノニカル」Ｔ細胞が、負の選択によって免疫レパートリから除去されることである。したがって、有効ながんワクチンは、低親和性ＴＣＲを発現することによって、またはＭＨＣに低親和性で結合するペプチドを認識することによって、負の選択を回避した「非カノニカル」Ｔ細胞を刺激することによって免疫寛容を破壊すると見込まれる。現在利用可能なすべてのＴ細胞誘導ワクチン、例えばＤＮＡ、ＲＮＡ、ポックスベクター、アデノベクター、またはアルファウイルス系は、カノニカルＴ細胞を誘発するように設計されている。結果として、当技術分野では、腫瘍関連抗原に対する免疫寛容を破壊することができる治療アプローチが依然として要望されている。
本開示は、対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる方法であって、腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量で腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターを対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、方法に関する。
本開示はまた、対象においてがんを治療する方法であって、腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量で腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、方法に関する。
本開示はまた、対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる際に使用するための腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターに関し、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
本開示はまた、対象におけるがんの治療で使用するための腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターに関し、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
本開示はまた、対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる際に使用するための医薬品の製造における腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターの使用に関し、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
本開示はまた、がんの治療のための医薬品の製造における腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターの使用に関し、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
本開示はまた、対象において腫瘍ウイルスにより引き起こされるがんを治療する方法であって、腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない、方法に関する。
本開示はまた、対象において腫瘍ウイルスにより引き起こされるがんを治療する方法であって、腫瘍ウイルス抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない、方法に関する。
本開示はまた、対象のがんの治療に使用するための腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターに関し、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない。
本開示はまた、がんの治療のための医薬品の製造における腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターの使用に関し、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない。
一部の実施形態において、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％は、ＭＨＣ－Ｅもしくはそのオーソログ、またはＭＨＣ－ＩＩもしくはそのオーソログによって拘束される。別の実施形態では、ＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、または少なくとも７５％が、ＭＨＣ－Ｅまたはそのオーソログによって拘束される。別の実施形態では、ＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の１０％未満が、ＭＨＣクラスｌａまたはそのオーソログによって拘束される。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅによって拘束されたＣＤ８＋Ｔ細胞の一部は、ベクターで免疫が付与された他の対象の少なくとも９０％が共有するペプチドを認識する。
一部の実施形態では、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号５に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号６に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号８に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号９に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号１３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号１４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。
一部の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩによって拘束されたＣＤ８＋Ｔ細胞の一部は、ベクターで免疫化された他の対象の少なくとも９０％が共有するペプチドを認識する。
一部の実施形態では、ペプチドは、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩエピトープは、配列番号２に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩエピトープは、配列番号３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩエピトープは、配列番号４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩエピトープは、配列番号７に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。
本開示はまた、ＭＨＣ－Ｅ腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを第１の対象に投与するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法に関する。
本開示はまた、ＭＨＣ－Ｅ腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを既に投与されている第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法に関する。
一部の実施形態では、組換えＣＭＶベクターは、組換えヒトＣＭＶベクターまたは組換えアカゲザルＣＭＶベクターである。
一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がんおよび子宮頸がんからなる群から選択されるがんに関連する。別の実施形態では、腫瘍関連抗原は、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリンおよびＨｅｒ－２、またはそれらのオーソログからなる群から選択される。
一部の実施形態において、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
一部の実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞は、特異的なＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。別の実施形態では、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号５に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号６に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。一部の実施形態では、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質エピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号８に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号９に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号１３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号１４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。
一部の実施形態では、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞は、特異的なＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。別の実施形態では、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号５に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号６に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質エピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号８に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号９に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号１３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、配列番号１４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。
一部の実施形態では、第１のＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって同定される。
一部の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。
一部の実施形態では、第１の対象は、ヒトまたは非ヒト霊長類である。別の実施形態では、第１の対象は非ヒト霊長類であり、第２の対象はヒトであり、この場合第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。
一部の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲはキメラＣＤ８＋ＴＣＲである。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターを第１の対象に投与することは、ＣＭＶベクターを第１の対象に静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、または経口投与することを含む。別の実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療または予防するために第２の対象に投与される。別の実施形態では、がんは、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がん、または子宮頸がんである。
本開示はまた、ＭＨＣ－ＩＩ腫瘍ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の方法であって、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを第１の対象に投与するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法に関する。
本開示はまた、ＭＨＣ－ＩＩ腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを既に投与されている第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法に関する。
一部の実施形態では、少なくとも１つの組換えＣＭＶベクターは、組換えヒトＣＭＶベクターまたは組換えアカゲザルＣＭＶベクターである。
一部の実施形態では、少なくとも１つの組換えＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８タンパク質またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１３０タンパク質またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４６またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４７またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＳ１１タンパク質またはそのオーソログを発現しない。別の実施形態では、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、ＵＬ１４７、またはＵＳ１１をコードする核酸配列における突然変異は、点突然変異、フレームシフト突然変異、切断突然変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。
一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がんまたは子宮頸がんに関連する。別の実施形態では、腫瘍関連抗原は、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリンもしくはＨｅｒ－２、またはそれらのオーソログである。
一部の実施形態において、前記腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）を含む。一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
一部の実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。
一部の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号２に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号７に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。
一部の実施形態では、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。
一部の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号２に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。別の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、配列番号７に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。
一部の実施形態では、第１のＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって同定される。
一部の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。
一部の実施形態では、第１の対象は、ヒトまたは非ヒト霊長類である。別の実施形態では、第２の対象は、ヒトまたは非ヒト霊長類である。
一部の実施形態では、第１の対象は非ヒト霊長類であり、第２の対象はヒトであり、この場合第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲはキメラＣＤ８＋ＴＣＲである。別の実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターを第１の対象に投与することは、ＣＭＶベクターを第１の対象に静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、または経口投与することを含む。別の実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療するために第２の対象に投与される。別の実施形態では、がんは、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がん、または子宮頸がんである。
一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞が生成される。別の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療または予防するために対象に投与される。別の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するために対象に投与される。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療または予防するための医薬品の製造で使用される。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するために対象に投与される。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、対象において宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するのに使用される。いくつかの態様では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するための医薬品の製造で使用される。
本開示はまた、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体によって認識され得る、長さが約８～約１５アミノ酸の単離されたＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩスーパートープペプチドに関し、前記スーパートープは腫瘍関連抗原を含む。
一部の実施形態において、前記ペプチドは、ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１３）である。
本開示はまた、腫瘍関連抗原に対する免疫寛容の克服を必要とする対象において、腫瘍関連抗原に対する免疫寛容を克服する方法であって、腫瘍関連抗原を発現するサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）ベクターの有効量を前記対象に投与するステップを含む方法に関する。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターは、ヒトＣＭＶベクターまたはアカゲザルＣＭＶベクターである。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１３０またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４６またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４７またはそのオーソログを発現しない。別の実施形態では、ＣＭＶベクターは、ＵＬ２３８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列に１つ以上の突然変異が存在するため、活性ＵＬ１２８、活性ＵＬ１３０、活性ＵＬ１４６、もしくは活性ＵＬ１４７、またはそれらのオーソログを発現しない。別の実施形態では、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における突然変異は、点突然変異、フレームシフト突然変異、切断突然変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失のうちの１つ以上である。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターはアカゲザルＣＭＶ株６８－１である。
一部の実施形態では、ＣＭＶベクターは、活性ＵＬ８２タンパク質またはそのオーソログを発現しない。別の実施形態では、ＣＭＶベクターは、ＵＬ８２をコードする核酸配列に１つ以上の突然変異が存在するため、活性ＵＬ８２タンパク質、またはそのオーソログを発現しない。別の実施形態では、ＵＬ８２をコードする核酸配列における突然変異は、点突然変異、フレームシフト突然変異、切断突然変異、およびＵＬ８２をコードする核酸配列のすべての欠失のうちの１つ以上である。
一部の実施形態では、腫瘍関連抗原は、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がんまたは子宮頸がんに由来する。別の実施形態では、腫瘍関連抗原は、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリン、またはＨｅｒ－２である。
一部の実施形態では、有効量は、対象において腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量を含む。
一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、または少なくとも５０％が、ＭＨＣ－Ｉまたはそのオーソログによって拘束される。
一部の実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞から特定され、前記ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－Ｉ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する。別の実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって同定される。一部の実施形態において、対象はヒトである。
がん抗原ＰＡＰを発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＰＡＰ）およびＳＩＶ ｇａｇ抗原を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＳＩＶｇａｇ）を接種した６匹のアカゲザル（ＲＭ）において誘発された平均Ｔ細胞応答頻度を示す図である。ＲＭのうちの３匹に、がん抗原ＷＴ１を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＷＴ１）を追加的に共接種し、他の３匹に、がん抗原ＭＳＬＮを発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＭＳＬＮ）を共接種した。ＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された各時点での細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）によって各抗原について重複ペプチドプールを使用して末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）において測定した。平均応答頻度を示す。 がん抗原ＨＥＲ２を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＨＥＲ２）を接種した６匹の雌ＲＭで誘発された平均Ｔ細胞応答頻度を示す図である。ＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された各時点での細胞内サイトカイン染色によってＨＥＲ２について重複ペプチドプールを使用して末梢血単核細胞において測定した。平均応答頻度を示す。 ＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８のＥ６タンパク質およびＥ７タンパク質の融合タンパク質を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＨＰＶ）（実線）またはＲｈＣＭＶ株６８－１．２（６８－１．２／ＨＰＶ）（破線）のいずれかを接種した８匹の雌ＲＭにおいて誘発された平均Ｔ細胞応答頻度を示す図である。ＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された各時点でＩＣＳによってＨＰＶ抗原について重複ペプチドプールを使用してＰＢＭＣで測定した。個々の応答頻度を示す。 ６８－１／ＨＰＶで免疫化したＲＭ由来のＣＤ８＋Ｔ細胞によるＨＰＶ抗原のＭＨＣ－Ｅ依存的認識を示す図である。４匹の雌ＲＭに、ＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８のＥ６タンパク質およびＥ７タンパク質の融合タンパク質を発現する６８－１を接種した（図３参照）。Ｔ細胞応答を、ＴＮＦαおよびＩＦＮγについてＩＣＳによって測定した。ＴＮＦα産生およびＩＦＮγ産生の両方により応答するＣＤ８＋Ｔ細胞は、右上象限に現れる。ＶＭＡＰＲＴＬＬＬ（配列番号１）（ＶＬ９）は、ＭＨＣ－Ｅリガンドペプチドである。 ６８－１／ＰＡＰで免疫化したＲＭ由来のＣＤ８＋Ｔ細胞によるＰＡＰのＭＨＣ－Ｅ依存的認識を示す図である。ＣＤ８＋Ｔ細胞を単離し、ＭＨＣ－Ｅを発現するＫ５６２細胞と、ＭＨＣ－ＥおよびＰＡＰまたはＭＨＣ－ＥおよびＨＰＶ融合タンパク質を発現するＫ５６２細胞と共インキュベートした。Ｔ細胞応答を、ＴＮＦαおよびＩＦＮγについてＩＣＳによって測定した。ＴＮＦα産生およびＩＦＮγ産生の両方により応答するＣＤ８＋Ｔ細胞は、右上象限に現れる。ＶＭＡＰＲＴＬＬＬ（配列番号１）（ＶＬ９）は、ＭＨＣ－Ｅリガンドペプチドである。 ６８－１／ＰＡＰおよび６８－１／ＷＴ１で免疫化したＲＭ由来のＣＤ８＋Ｔ細胞によるＰＡＰおよびＷＴ１のＭＨＣ－Ｅ依存的認識を示す図である。６匹の雄ＲＭに６８－１／ＰＡＰおよび６８－１／ＷＴ１を共接種した。ＣＤ８＋Ｔ細胞を単離し、ＭＨＣ－Ｅを発現するＫ５６２細胞と、ＭＨＣ－ＥおよびＰＡＰまたはＭＨＣ－ＥおよびＷＴ１を発現するＫ５６２細胞と共インキュベートした。Ｔ細胞応答を、ＴＮＦαおよびＩＦＮγについてＩＣＳによって測定した。 ＰＢＭＣ中のＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された時点でＴＮＦαおよびＩＦＮγについて重複ペプチドプールを使用してＩＣＳによって測定したことを示す図である。メモリーＴ細胞の中で、ＰＡＰ特異的Ｔ細胞の頻度を示す。 ＰＡＰ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のＭＨＣ拘束分析を示す図である。個々のペプチドに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、ＰＡＰ配列に沿った四角として示す。ＭＨＣ－Ｉ特異的抗体Ｗ６／３２によってブロックされたペプチド応答はＭＨＣ－Ｉ拘束を示し、ＭＨＣ－ＩＩ特異的ペプチドＣＬＩＰによってブロックされたペプチド応答はＭＨＣ－ＩＩ拘束を示し、ＭＨＣ－Ｅ特異的ペプチドによってブロックされたペプチド応答はＭＨＣ－Ｅ拘束を示す。ブロッキング試薬の存在下でまだ試験されていないペプチドも示されている。灰色の四角：拘束保留；白色の四角：従来型ＭＨＣ－Ｉａ拘束；ドット入り四角；非従来型ＭＨＣ－Ｅ拘束；ダッシュ入り四角：非従来型ＭＨＣ－ＩＩ拘束；黒色の四角：ブロッキング不確定。 ＰＡＰ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＷＴ１特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞、およびＭＳＬＮ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のペプチドマッピングを示す図である。個々のペプチドに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、配列に沿った四角として示す。ブロッキング試薬の存在下でまだ試験されていないペプチド。すべての６８－１／ＰＡＰ動物において応答をもたらした「スーパートープ」ペプチドを四角で囲む：灰色のダッシュ入り四角：ＭＨＣ－ＩＩまたはＭＨＣ－Ｅスーパートープ、黒色の四角：ＭＨＣ－ＩＩスーパートープ（図８の結果に基づく）、黒色ダッシュ入り四角：ＭＨＣ－Ｅスーパートープ（図８の結果に基づく）。 ＷＴ１特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のＭＨＣ拘束分析を示す図である。個々のペプチドに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、ＷＴ１配列に沿った四角として示す。ＭＨＣ－Ｉ特異的抗体Ｗ６／３２によってブロックされたペプチド応答、ＭＨＣ－ＩＩ特異的ペプチドＣＬＩＰによってブロックされたペプチド応答、ＭＨＣ－Ｅ特異的ペプチドによってブロックされたペプチド応答、ブロッキング試薬の存在下でまだ試験されていないペプチド。以下の「スーパートープ」ペプチドは、すべての６８－１／ＷＴ１免疫化動物において応答をもたらした：＃３、＃１３、＃１４、＃５８。３匹の動物で得られた結果は、これらのスーパートープのすべてが拘束されたＭＨＣ－Ｅであることを示唆している。灰色の四角：拘束保留；黒色の四角：従来型ＭＨＣ－ＩＡ拘束；白色の四角；非従来型ＭＨＣ－ＩＥ拘束；ダッシュ入り四角：非従来型ＭＨＣ－ＩＩ拘束；ドット入り四角：ブロッキング不確定。
Ｉ．用語
特に明記しない限り、技術用語は慣用的な用法に従って使用される。
本明細書で引用されるすべての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、および受託番号／データベース配列（ポリヌクレオチド配列およびポリペプチド配列の両方を含む）は、個々の刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、または受託番号／データベース配列が参照によりそのように組み込まれることが具体的かつ個別に示されているのと同程度に、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書に記載の方法および材料と類似または同等の方法および材料を本開示の実施または試験に使用することができるが、適切な方法および材料を以下に記載する。さらに、材料、方法、および実施例は例を示したものにすぎず、限定することを意図するものではない。本開示の様々な実施形態の検討を容易にするために、特定の用語について以下の説明を提供する。
文脈上他の意味に解釈すべき場合を除いて、本明細書および特許請求の範囲全体を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という単語ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などのその変形は、オープンで包括的な意味で、すなわち「限定されないが、～を含む」と解釈されるべきである。「～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ～）」は、本明細書に開示される他の成分および実質的な方法工程の微量元素を上回る元素を除外することを意味するものとする。「～から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ～）」という語は、特定の材料もしくは工程、または特許請求の範囲の発明の基本的な特徴に実質的に影響を及ぼさないものに特許請求の範囲を限定する。例えば、本明細書で規定された元素から本質的になる組成物から、単離および精製方法からの微量汚染物質、ならびにリン酸緩衝生理食塩水、防腐剤などの医薬的に許容され得る担体は排除されない。同様に、タンパク質がタンパク質の長さの最大２０％に寄与し、タンパク質の活性に実質的に影響を及ぼさない（例えば、タンパク質の活性を変化させる割合は５０％以下である）追加のアミノ酸を含む場合、タンパク質は特定のアミノ酸配列から本質的になる。各移行句によって規定される実施形態は、本発明の範囲内に含まれる。
約：本明細書で使用される場合、「約」という用語は、規定された値の１％、５％、１０％または２０％以内であることを意味し得る。
抗原：本明細書で使用される場合、「抗原」または「免疫原」という用語は、対象において免疫応答を誘導することができる物質、典型的にはタンパク質を指すために互換的に使用される。この用語はまた、（直接的に、またはタンパク質をコードするヌクレオチド配列もしくはベクターを対象に投与することによって）対象に投与されると、タンパク質が、そのタンパク質に対する体液型および／または細胞型の免疫応答を誘発することができるという意味で免疫学的に活性のあるタンパク質を指す。
抗原特異的Ｔ細胞：特定の抗原を認識するＣＤ８＋リンパ球またはＣＤ４＋リンパ球。概して、抗原特異的Ｔ細胞は、ＭＨＣ分子によって提示される特定の抗原に特異的に結合するが、同じＭＨＣによって提示される他の抗原には結合しない。
投与：本明細書で使用される場合、「投与」という用語は、何らかの有効な経路によって、有効量の外因性抗原を含むＣＭＶベクターを含む組成物などの薬剤を対象に提供または与えることを意味する。具体例としての投与経路には、注射（例えば、皮下、筋肉内、皮内、腹腔内、および静脈内）、経口、舌下、直腸、経皮、鼻腔内、膣および吸入経路が挙げられるが、これらに限定されない。
有効量：本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体、またはＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する異種抗原またはトランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞を含むＣＭＶベクターなどの、状態もしくは疾患の徴候もしくは症状を軽減もしくは排除する、または抗原に対する免疫応答を誘導するなどの所望の応答を生じさせるのに十分である薬剤の量を指す。いくつかの例において、「有効量」は、障害または疾患のいずれかの１つ以上の症状および／または根本原因を（予防を含め）治療する量である。有効量は、特定の疾患または状態の１つ以上の徴候または症状、例えば感染性疾患またはがんに関連する１つ以上の徴候または症状の発症を防止する量を含む治療有効量であり得る。
異種抗原：本明細書で使用される場合、「異種抗原」という用語は、ＣＭＶに由来しない任意のタンパク質またはその断片を指す。異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍関連抗原、宿主自己抗原、または他の何らかの抗原であり得る。
過剰増殖性疾患：細胞の制御されない増殖を特徴とする疾患または障害。過剰増殖性疾患には、限定されないが、悪性腫瘍および非悪性腫瘍が含まれる。
免疫寛容：本明細書で使用される場合、「免疫寛容」は、免疫応答を誘導する可能性を有する物質に対する免疫系の不応答性の状態を指す。個体自身の抗原、例えば腫瘍関連抗原に対する自己寛容は、中枢性寛容機構と末梢性寛容機構の両方によって達成される。
エピトープ：本明細書で使用される場合、「エピトープ」は、対立遺伝子特異的モチーフまたは他の配列、例えばＮ末端反復配列を含むもので、前記モチーフを含むペプチドがＭＨＣ分子に結合し、細胞傷害性Ｔリンパ球（「ＣＴＬ」）応答、またはエピトープが由来する抗原に対するＢ細胞応答（例えば抗体産生）を誘導することになる。
一部の実施形態において、エピトープは、当技術分野で既知のニューラルネットまたは多項式決定など、配列モチーフまたは他の方法を使用して特定される。典型的には、アルゴリズムを使用してペプチドの「結合閾値」を決定し、ある特定の親和性で結合する高い確率をもたらし、免疫原性となるスコアを有するペプチドを選択する。アルゴリズムは、特定の位置における特定のアミノ酸のＭＨＣ結合に対する効果、特定の位置における特定のアミノ酸の抗体結合に対する効果、またはモチーフ含有ペプチドにおける特定の置換基の結合に対する効果のいずれかに基づく。エピトープの関連の中で、「保存された残基」は、ペプチドにおける特定の位置でのランダムな分布によって予想されるよりも有意に高い頻度で現れる残基である。一部の実施形態では、保存された残基は、ＭＨＣ構造がエピトープとの接触点を提供し得る残基である。
突然変異：本明細書で使用される場合、「突然変異」という用語は、正常配列、共通配列または「野生型」配列との核酸またはポリペプチド配列の何らかの差異を指す。突然変異体は、突然変異を含む何らかのタンパク質または核酸配列である。さらに、突然変異を有する細胞または生物を突然変異体と称することもあり得る。いくつかのタイプのコード配列突然変異には、点突然変異（個々のヌクレオチドまたはアミノ酸の差異）、サイレント突然変異（アミノ酸変化をもたらさないヌクレオチドの差異）、欠失（遺伝子のコード配列全体およびそれ以下の欠失を含め、１つ以上のヌクレオチドまたはアミノ酸が欠損している場合の差異）、フレームシフト突然変異（３で割り切れない数のヌクレオチドの欠失がアミノ酸配列の変化をもたらす場合の差異）が含まれる。アミノ酸の差異をもたらす突然変異はまた、アミノ酸置換突然変異と呼ばれることもある。アミノ酸置換突然変異は、アミノ酸配列の特定の位置での野生型との比較におけるアミノ酸変化によって説明され得る。
ヌクレオチド配列または核酸配列：「ヌクレオチド配列」および「核酸配列」という用語は、限定されないが、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、ＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド、または合成核酸を含む、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）配列またはリボ核酸（ＲＮＡ）配列を指す。核酸は、一本鎖、または部分的もしくは完全な二本鎖（デュプレックス）であり得る。デュプレックス核酸は、ホモデュプレックスまたはヘテロデュプレックスであり得る。
機能し得るように連結された：「機能し得るように連結された」という用語が本明細書で使用される場合、第１の核酸配列が第２の核酸配列に影響を及ぼすように第１の核酸配列が配置されているとき、第１の核酸配列は第２の核酸配列と機能し得るように連結されている。機能し得るように連結されたＤＮＡ配列は、連続していてもよく、またはそれらはある距離をおいて機能し得る。
プロモーター：本明細書で使用される場合、「プロモーター」という用語は、核酸の転写を指示するいくつかの核酸制御配列のいずれかを指し得る。典型的には、真核生物プロモーターは、転写の開始部位の近くに必要な核酸配列を含み、例えばポリメラーゼＩＩ型プロモーターの場合、ＴＡＴＡエレメントまたは１つ以上の転写因子によって認識される何らかの他の特定のＤＮＡ配列を含む。プロモーターによる発現は、エンハンサーエレメントまたはリプレッサーエレメントによってさらに調節され得る。プロモーターの数多くの例が利用可能であり、当業者に周知である。特定のポリペプチドをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターを含む核酸は、発現ベクターと呼ばれ得る。
組換え（の）：本明細書で使用される場合、核酸またはポリペプチドに関する場合の「組換え」という用語は、天然に存在しない配列を有するか、または配列の２つ以上の他の方法で分離されたセグメントの人工的な組合せによって作製される配列を有するものを指し、例えば異種抗原を含むＣＭＶベクターがある。この人工的な組合せは、多くの場合、化学合成によって、またはより一般的には、例えば遺伝子工学技術による核酸の単離されたセグメントの人工的な操作によって達成される。組換えポリペプチドはまた、ポリペプチドの天然供給源ではない宿主生物に移入された組換え核酸（例えば、異種抗原を含むＣＭＶベクターを形成するポリペプチドをコードする核酸）を含む、組換え核酸を使用して作製されたポリペプチドを指し得る。
機能し得るように連結された：本明細書で使用される場合、「機能し得るように連結された」という語が意味するところでは、コード配列と核酸制御配列またはプロモーターが、コード配列の発現または転写および／または翻訳を核酸制御配列の影響下または制御下に置くような形で共有結合されている場合にそれらは「機能し得るように連結された」と言われる。「核酸制御配列」は、限定されないが、プロモーター、エンハンサー、ＩＲＥＳ、イントロン、およびそれに機能し得るように連結された核酸配列またはコード配列の発現を指示する本明細書に記載される他のエレメントなど、いずれかの核酸エレメントであり得る。開示された腫瘍関連抗原を発現させるために、腫瘍関連抗原のタンパク質コード配列は、タンパク質の転写および翻訳を指示する調節配列または核酸制御配列に「機能し得るように連結された」状態であるべきである。
医薬的に許容され得る担体：本明細書で使用される場合、使用される「医薬的に許容され得る担体」は慣用的なものである。Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、イーストン、ペンシルベニア、１９９５年、第１９版には、本明細書に開示される組成物の医薬送達に適した組成物および製剤が記載されている。一般に、担体の性質は、採用されている特定の投与様式次第で異なることになる。例えば、非経口製剤は、通常、水、生理食塩水、平衡塩類溶液、水性デキストロース、グリセロールなどの医薬的および生理学的に許容され得る流体を賦形剤として含む注射用流体を含む。固体組成物（例えば、粉末、丸剤、錠剤またはカプセル剤の形態）の場合、慣用的非毒性固体担体は、例えば、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプンまたはステアリン酸マグネシウムを含み得る。生物学的に中性の担体に加えて、投与される医薬組成物は、少量の非毒性補助物質、例えば湿潤剤または乳化剤、保存剤およびｐＨ緩衝剤など、例えば酢酸ナトリウムまたはソルビタンモノラウレートを含有し得る。
ポリヌクレオチド：本明細書で使用される場合、「ポリヌクレオチド」という用語は、リボ核酸（ＲＮＡ）またはデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）のポリマーを指す。ポリヌクレオチドは４つの塩基、すなわちアデニン、シトシン、グアニンおよびチミン／ウラシル（ウラシルはＲＮＡで使用される）から構成される。核酸からのコード配列は、核酸によってコードされるタンパク質の配列を示す。
ポリペプチド：「タンパク質」、「ペプチド」、「ポリペプチド」、および「アミノ酸配列」という用語は、本明細書では互換的に使用され、あらゆる長さのアミノ酸残基のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖または分枝状であり得、修飾アミノ酸またはアミノ酸類似体を含み得、アミノ酸以外の化学部分によって中断されていてもよい。この用語はまた、天然に修飾されているか、または介入、例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識もしくは生物活性成分とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作もしくは修飾によって修飾されたアミノ酸ポリマーを包含する。
タンパク質のオーソログは、典型的には、デフォルトパラメータに設定されたＡＬＩＧＮを使用して、特定のタンパク質のアミノ酸配列との完全長アラインメントにわたってカウントされた７５％を超える配列同一性を有することを特徴とする。参照配列に対してさらに高い類似性を有するタンパク質は、この方法によって評価した場合、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％の配列同一性など、同一性パーセンテージの増加を示すことになる。さらに、配列同一性を、開示されたペプチドの特定のドメインの全長にわたって比較することができる。
プロモーター：本明細書で使用される場合、「プロモーター」という用語は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩの開始部位の周りに集中しており、本開示のタンパク質コード配列に機能し得るように連結されたときに、コードされたタンパク質の発現を誘導する一群の転写制御モジュールを指す。本開示の導入遺伝子の発現は、限定されないが、テトラサイクリンなどの抗生物質、エクジソンなどのホルモン、または重金属などの何らかの特定の外部刺激因子にさらされた場合にのみ転写を開始する、構成的プロモーターまたは誘導性プロモーターの制御下にあり得る。プロモーターはまた、特定の細胞型、組織または臓器に特異的であり得る。多くの適切なプロモーターおよびエンハンサーが当技術分野では既知であり、いずれかのかかる適切なプロモーターまたはエンハンサーが、本開示の導入遺伝子の発現のために使用され得る。例えば、適切なプロモーターおよび／またはエンハンサーは、真核生物プロモーターデータベース（ＥＰＤＢ）から選択され得る。
配列同一性／類似性：本明細書で使用される場合、２つもしくはそれ以上の核酸配列または２つもしくはそれ以上のアミノ酸配列の間の同一性／類似性は、配列間の同一性または類似性に関して表される。配列同一性は、同一性パーセントという観点で測定され得、パーセンテージが高いほど、配列の同一性はより高くなる。配列類似性は、（保存的アミノ酸置換を考慮に入れた）同一性または類似性のパーセンテージという観点で測定され、パーセンテージが高いほど、配列はより類似している。かなりの量の配列同一性を有し、互いに同一または同様に機能するポリペプチドまたはそのタンパク質ドメイン（例えば、異なる種またはタンパク質の機能またはその規模を変化させないタンパク質の変異形態において同じ機能を果たすタンパク質）は、「ホモログ」と呼ばれ得る。
配列同一性または相同性は、配列ギャップを最小化しながら重複および同一性を最大化するように整列させたときに配列を比較することによって決定される。特に、配列同一性は、いくつかの数学的アルゴリズムのいずれかを使用して決定され得る。２つの配列の比較に使用される数学的アルゴリズムの非限定的な例は、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｕｌ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９３；９０：５８７３－５８７７の場合と同様に修正された、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｕｌ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９０；８７：２２６４－２２６８のアルゴリズムである。
比較のための配列のアラインメント方法は当技術分野で周知である。様々なプログラムおよびアライメントアルゴリズムは、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔｅｒｍａｎ、Ａｄｖ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ ２、４８２（１９８１）；ＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ４８、４４３（１９７０）；ＰｅａｒｓｏｎおよびＬｉｐｍａｎ、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８５、２４４４（１９８８）；ＨｉｇｇｉｎｓおよびＳｈａｒｐ、Ｇｅｎｅ ７３、２３７－２４４（１９８８）；ＨｉｇｇｉｎｓおよびＳｈａｒｐ、ＣＡＢＩＯＳ ５、１５１－１５３（１９８９）；Ｃｏｒｐｅｔら、Ｎｕｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ １６、１０８８１－１０８９０（１９８８）；Ｈｕａｎｇら、Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｐｐ Ｂｉｏｓｃｉ、８、１５５－１６５（１９９２）；ならびにＰｅａｒｓｏｎら、Ｍｅｔｈ Ｍｏｌ Ｂｉｏ ２４、３０７－３３１（１９９４）に記載されている。さらに、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２１５、４０３－４１０（１９９０）は、配列アラインメント方法および相同性計算の詳細な考察を提示している。
ＮＣＢＩ Ｂａｓｉｃ Ｌｏｃａｌ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ Ｓｅａｒｃｈ Ｔｏｏｌ（ＢＬＡＳＴ）（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、（１９９０）前出）は、配列解析プログラムｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｎ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎおよびｔｂｌａｓｔｘと関連させて使用するために、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｂｕｉｌｄｉｎｇ ３８Ａ、Ｒｏｏｍ ８Ｎ８０５、ベセスダ、メリーランド２０８９４）およびインターネット上を含むいくつかの情報源から入手可能である。さらなる情報は、ＮＣＢＩのウェブサイトで見つけることができる。
ＢＬＡＳＴＮは核酸配列を比較するために使用され、ＢＬＡＳＴＰはアミノ酸配列を比較するために使用される。２つの比較された配列が相同性を共有する場合、指定された出力ファイルは、それらの相同性領域を整列させた配列として提示することになる。２つの比較された配列が相同性を共有しない場合、指定された出力ファイルは、整列させた配列を提示しないことになる。
整列が完了すると、マッチの数は、同一のヌクレオチドまたはアミノ酸残基が両方の配列に存在する位置の数を数えることによって決定される。配列同一性パーセントは、マッチの数を、同定された配列に示された配列の長さまたは連結された長さ（例えば、同定された配列に示された配列からの１００個の連続するヌクレオチドまたはアミノ酸残基）で割った後、得られた値に１００を掛けることによって決定される。例えば、１１５４個のヌクレオチドを有する試験配列と整列させた場合に１１６６のマッチを有する核酸配列は、試験配列と７５．０％同一である（１１６６÷１５５４×１００＝７５．０）。配列同一性パーセント値は、小数点第一位を四捨五入する。例えば、７５．１１、７５．１２、７５．１３、および７５．１４は７５．１に切り捨てられ、７５．１５、７５．１６、７５．１７、７５．１８、および７５．１９は７５．２に切り上げられる。長さの値は常に整数となる。別の例では、以下のように同定された配列からの２０個の連続するヌクレオチドと合致する２０ヌクレオチド領域を含む標的配列は、その同定された配列と７５％の配列同一性を共有する領域を含む（すなわち、１５÷２０×１００＝７５）。
約３０アミノ酸を超えるアミノ酸配列の比較のために、デフォルトパラメータに設定されたデフォルトＢＬＯＳＵＭ６２マトリックスを使用して、Ｂｌａｓｔ ２配列関数が使用される、（ギャップ存在コストは１１、残基あたりのギャップコストは１）。ホモログは、典型的には、ＮＣＢＩ Ｂａｓｉｃ Ｂｌａｓｔ ２．０、ｇａｐｐｅｄ ｂｌａｓｔｐをｎｒデータベース、ｓｗｉｓｓｐｒｏｔデータベース、および特許配列データベースなどのデータベースと共に使用して、アミノ酸配列との完全長アラインメントにわたってカウントされた少なくとも７０％の配列同一性を有することを特徴とする。ｂｌａｓｔｎプログラムで検索されたクエリは、ＤＵＳＴ（ＨａｎｃｏｃｋおよびＡｒｍｓｔｒｏｎｇ、Ｃｏｍｐｕｔ Ａｐｐｌ Ｂｉｏｓｃｉ １０、６７－７０（１９９４）でフィルターにかけられた。他のプログラムはＳＥＧを使用する。さらに、手動アライメントを行ってもよい。さらに高い類似性を有するタンパク質は、この方法によって評価した場合、タンパク質に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％の配列同一性など、同一性パーセンテージの増加を示すことになる。
短いペプチド（約３０未満のアミノ酸）をアラインメントする場合、アラインメントは、デフォルトパラメータ（オープンギャップ９、伸長ギャップ１のペナルティ）に設定されたＰＡＭ３０マトリックスを採用して、Ｂｌａｓｔ２配列関数を使用して行われる。参照配列に対してさらに高い類似性を有するタンパク質は、この方法によって評価した場合、タンパク質に対して少なくとも約６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％の配列同一性など、同一性パーセンテージの増加を示すことになる。配列同一性について配列全体よりも短いものが比較されている場合、ホモログは、典型的には、１０～２０アミノ酸の短いウィンドウにわたって少なくとも７５％の配列同一性を有することになり、参照配列に対するそれらの同一性に応じて、少なくとも８５％、９０％、９５％または９８％の配列同一性を有し得る。そのような短いウィンドウにわたって配列同一性を決定するための方法は、ＮＣＢＩウェブサイトに記載されている。
２つの核酸分子が密接に関連していることの１つの指標は、上記のように、２つの分子がストリンジェントな条件下で互いにハイブリダイズすることである。それにもかかわらず、高度の同一性を示さない核酸配列は、遺伝暗号の縮重のために、同一または類似した（保存された）アミノ酸配列をコードし得る。核酸配列の変化は、この縮重を使用して行われ、すべてが実質的に同じタンパク質をコードする複数の核酸分子を生成し得る。そのような相同性核酸配列は、例えば、タンパク質をコードする核酸と少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％の配列同一性を有することができる。
対象：本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、ヒトと非ヒト哺乳動物の両方を含むカテゴリーである、生きている多細胞脊椎動物である生物を指す。「対象」という用語は、非ヒト霊長類およびヒトを含むすべての動物を含むが、「動物」は、ヒトを除くすべての脊椎動物種を含み、「脊椎動物」は、動物（「動物」は本明細書で使用されている通り）およびヒトを含むすべての脊椎動物を含む。そして、当然のことながら、「動物」のサブセットは「哺乳動物」であり、本明細書の目的の場合、ヒトを除くすべての哺乳動物を含む。
スーパートープ：本明細書で使用される場合、「スーパートープ」または「スーパートープペプチド」という用語は、ＭＨＣハプロタイプとは関係なく、すなわち所与のＭＨＣ－Ｉ、ＭＨＣ－ＩＩ、またはＭＨＣ－Ｅ対立遺伝子の存在下または非存在下で、ヒト集団の約９０％超においてＴ細胞によって認識されるエピトープまたはペプチドを指す。
腫瘍関連抗原：本明細書で使用される場合、「腫瘍関連抗原」という用語は、がん細胞によって異常に発現される自己抗原を指す。ＴＡＡには、（ｉ）がん細胞で発現される生殖細胞系／精巣抗原、（ｉｉ）成体組織で発現されない細胞系統分化抗原、または（ｉｉｉ）がん細胞で過剰発現される抗原が含まれる。腫瘍関連抗原は、比較的腫瘍細胞に限定され、免疫応答を誘導するものであればいかなるタンパク質でもあり得る。しかしながら、多くの腫瘍関連抗原は宿主（自己）タンパク質であるため、典型的には宿主免疫系によって抗原性として見なされることはない。腫瘍関連抗原はまた、がん細胞によって異常に発現され得る。腫瘍関連抗原はまた、がん細胞で発現される生殖細胞系／精巣抗原、成体組織では発現されない細胞系統分化抗原、またはがん細胞で過剰発現される抗原であり得る。
腫瘍ウイルス：本明細書で使用される場合、「腫瘍ウイルス」、「がんウイルス」または「オンコウイルス」という用語は、場合によっては（例えば、慢性的感染の後、免疫系が損なわれた個体などにおいて）がんの発症を誘導するウイルスを指す。
治療：本明細書で使用される場合、「治療」という用語は、疾患または病理学的状態の徴候または症状を改善する介入を指す。本明細書で使用される場合、疾患、病理学的状態または症状に関連する「治療」、「治療する」および「治療している」という用語はまた、治療の何らかの観察可能な有益な効果を指す。有益な効果は、例えば、感受性対象における疾患の臨床症状の発症の遅延、疾患の一部または全部の臨床症状の重症度の低下、疾患の進行の遅延、疾患の再発数の減少、対象の全体的な健康もしくは健全性の改善、または特定の疾患に特異的な当技術分野で周知の他のパラメータによって証明され得る。予防的治療は、病変を発症するリスクを低下させる目的で、疾患の徴候を示さないかまたは初期の徴候のみを示す対象に施される治療である。治療的治療は、疾患の徴候および症状が発生した後に対象に施される治療である。
ワクチン：疾患または他の病理学的状態に対する能動免疫などの免疫を付与するために、ヒトなどの哺乳動物に投与することができる免疫原性組成物。ワクチンは予防的または治療的に使用することができる。したがって、ワクチンを使用して、疾患（腫瘍または病理学的感染など）を発症する可能性を低下させるか、または疾患もしくは状態の症状の重症度を低下させるか、疾患もしくは状態（腫瘍または病理学的感染など）の進行を制限するか、または疾患もしくは状態（腫瘍など）の再発を制限することができる。特定の実施形態において、ワクチンは、異種抗原、例えば肺、前立腺、卵巣、乳房、結腸、子宮頸部、肝臓、腎臓、骨または黒色腫の腫瘍に由来する腫瘍関連抗原を発現する複製欠損ＣＭＶである。
ベクター：特定の配列の核酸分子をベクターに組み込み、次いで前記ベクターを宿主細胞に導入し、それによって形質転換宿主細胞を作製することができる。ベクターは、複製起点などの、宿主細胞内での複製を可能にする核酸配列を含み得る。ベクターはまた、１つ以上の選択マーカー遺伝子および核酸発現を指示するプロモーターエレメントを含む、当技術分野で既知の他の遺伝子エレメントを含み得る。ベクターは、ＣＭＶベクターなどのウイルスベクターであり得る。ウイルスベクターは、複製欠損ウイルスを含む野生型または弱毒化ウイルスから構築され得る。
本開示のウイルスの発現を可能にするいずれのベクターも、本開示に従って使用され得る。特定の実施形態において、開示されたウイルスは、コードされた異種抗原（例えば、腫瘍ウイルス抗原、ＨＩＶ抗原、腫瘍関連抗原、および抗体）を製造するためにインビトロで（例えば、無細胞発現系を使用して）および／またはインビトロで増殖させた培養細胞で使用され得、次いで、タンパク質性ワクチンの製造などの様々な用途に使用され得る。前述の用途の場合、インビトロおよび／または培養細胞におけるウイルスの発現を可能にするものであればいかなるベクターでも使用することができる。本開示に従って使用されるベクターは、本開示の抗原が発現され得るように、プロモーターまたはエンハンサーなどの適切な遺伝子調節領域を含み得る。
ＩＩ．がんの治療および予防の方法
がんを治療または予防する方法が本明細書では開示されている。該方法は、少なくとも１つの腫瘍関連抗原または腫瘍ウイルス抗原を含む有効量の少なくとも１つの組換えＣＭＶベクターを対象に投与することを含む。一部の実施形態において、該方法はまた、ＭＨＣ－Ｅ拘束Ｔ細胞受容体を含むＴ細胞の投与を含む。
動物実験は、ＣＭＶワクチンが、ａ）高頻度のリンパ系外Ｔ細胞応答（いわゆるエフェクターメモリーＴ細胞）を誘導および維持し、ｂ）ＣＭＶ陽性宿主に重複感染し、そしてｃ）宿主から宿主への拡散が不十分になった場合でも免疫原性を維持しているといった点で、ＣＭＶワクチンは独特であることを実証している。さらに、動物モデルにおける実験は、動物ＣＭＶに由来するワクチンベクターが感染性疾患およびがんに対する防御免疫応答を誘導することを示している（米国特許出願公開第２００８０１９９４９３号明細書、米国特許出願公開第２０１００１４２８２３号明細書、米国特許出願公開第２０１３０１３６７６８号明細書、および米国特許出願公開第２０１４０１４１０３８号明細書）。特に注目すべきは、アカゲザルＣＭＶ（ＲｈＣＭＶ）ベクター化サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）ワクチンが、非ヒト霊長類においてＡＩＤＳを予防することができるだけでなく、最終的にこれらの動物をＳＩＶから治癒させることができたという知見である（Ｈａｎｓｅｎ Ｓ Ｇら、Ｎａｔｕｒｅ ５０２、１００－１０４（２０１３））。
腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）特異的Ｔ細胞を誘発するための主な課題は、自己抗原として、ＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣ－ＩＩの状況においてこれらの抗原に由来するペプチドを強く認識する「カノニカル」Ｔ細胞が、負の選択によって免疫レパートリから除去されてしまうことである。したがって、がんワクチンは、低親和性ＴＣＲを発現することによって、またはＭＨＣに低親和性で結合するペプチドを認識することによって、負の選択を回避した「非カノニカル」Ｔ細胞を刺激することによって免疫寛容を破壊しなければならない。現在利用可能なすべてのＴ細胞誘導ワクチン、例えばＤＮＡ、ＲＮＡ、ポックスベクター、アデノベクター、またはアルファウイルス系は、カノニカルＴ細胞を誘発するように設計されている。結果として、これらのベクターは免疫寛容を破壊することが困難である。さらに、抗ベクター免疫は、免疫を増強するための同じベクターの反復使用を妨げることで、複雑な異種プライム／ブーストワクチンレジメンをもたらすか、または寛容破壊チェックポイント阻害剤と組み合わされる必要がある。例えば、ＰＲＯＳＴＶＡＣは、ＰＳＡ（前立腺特異抗原）を発現する前立腺がんに対するポックスウイルス系ワクチンである。免疫化レジメンは、ワクシニアウイルスによって発現されるＰＳＡによる１回の免疫化とそれに続くＰＳＡをコードする鶏痘ウイルスによる６回のブースター免疫化を必要とする。この努力にもかかわらず、ＰＲＯＳＴＶＡＣは、総ＣＤ８＋Ｔ細胞の約０．０３％を占めるＣＤ８＋Ｔ細胞しか誘発することができなかった。その結果、第ＩＩＩ相臨床試験は無駄であるため中止した。
一部の実施形態において、本方法は、腫瘍関連抗原に関連するがんの治療を提供する。一部の実施形態では、治療は、免疫応答がＴＡＡに対して引き起こされるように、対象における寛容の破壊から生じる。
一部の実施形態では、がんは病原体によって引き起こされる。一部の実施形態では、病原体は腫瘍ウイルスであり、抗原は腫瘍ウイルスに由来するタンパク質である。腫瘍ウイルスには、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒトポリオーマウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス、メルケル細胞ポリオーマウイルスおよびエプスタイン・バールウイルスが含まれるが、これらに限定されない。一部の実施形態において、腫瘍ウイルス抗原は、ＨＰＶ株１６由来のＥ６およびＥ７またはＨＰＶ株１８由来のＥ６およびＥ７である。一部の実施形態において、腫瘍ウイルス抗原は、ＨＰＶ由来のＥ６およびＥ７の融合体である。腫瘍ウイルス抗原は、腫瘍ウイルスの何らかの部分に由来するタンパク質であり得る。例えば、一部の実施形態では、腫瘍ウイルス抗原は、コア、エンベロープ、表面またはポリメラーゼタンパク質に由来し得る。
腫瘍関連抗原としては、限定されないが、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）；ウィルムス腫瘍抑制タンパク質（ＷＴ１）；メソテリン（ＭＳＬＮ）；Ｈｅｒ－２（ＨＥＲ２）；ＨＰＶ１６株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ６；ＨＰＶ１６株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ７；ＨＰＶ１８株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ６；ＨＰＶ１８株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ７；ＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８由来のヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７の融合タンパク質；ムチン１（ＭＵＣ１）；ＬＭＰ２；上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）；ｐ５３；ニューヨーク食道１（ＮＹ－ＥＳＯ－１）；前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）；ＧＤ２、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）；Ｔ細胞１によって認識されるメラノーマ抗原ａ／メラノーマ抗原（ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１）；Ｒａｓ；ｇｐ１００、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、Ｂｃｒ－ａｂｌ；サバイビン；前立腺特異抗原（ＰＳＡ）；ヒトテロメラーゼ逆転写酵素（ｈＴＥＲＴ）；ＥｐｈＡ２；ＭＬ－ＩＡＰ；アルファ－フェトプロテイン（ＡＦＰ）；ＥｐＣＡＭ；ＥＲＧ；ＮＡ１７；ＰＡＸ３；ＡＬＫ；アンドロゲン受容体（ＡＲ）；サイクリンＢ１；ＭＹＣＮ；ＲｈｏＣ；チロシン関連タンパク質２（ＴＲＰ－２）；ＧＤ３；フコシルＧＭ１；ＰＳＣＡ；ｓＬｅ（ａ）；ＣＹＰ１Ｂ１；ＰＬＣＡ１；ＧＭ３；ＢＯＲＩＳ；Ｔｎ；ＧｌｏｂｏＨ；Ｅｔｓバリアント遺伝子６／急性骨髄性白血病１遺伝子ＥＴＳ（ＥＴＶ６－ＡＭＬ）；ＮＹ－ＢＲ－１；ＲＧＳ５；扁平上皮性腫瘍拒絶抗原または３（ＳＡＲＴ３）；ＳＴｎ；炭酸脱水酵素ＩＸ；ＰＡＸ５；ＯＹ－ＴＥＳ１；精子タンパク質１７；ＬＣＫ；ＨＭＷＭＡＡ；ＡＫＡＰ－４；ＳＳＸ２；Ｂ７Ｈ３；レグマイン；Ｔｉｅ２；Ｐａｇｅ４；ＶＥＧＦＲ２；ＭＡＤ－ＣＴ－１；ＦＡＰ；ＰＤＧＦＲ；ＭＡＤ－ＣＴ－２；Ｆｏｓ関連抗原１；ＴＡＧ－７２；９Ｄ７；ＥｐｈＡ３；テロメラーゼ；ＳＡＰ－１；ＢＡＧＥファミリー；ＣＡＧＥファミリー；ＧＡＧＥファミリー；ＭＡＧＥファミリー；ＳＡＧＥファミリー；ＸＡＧＥファミリー；メラノーマの優先的に発現される抗原（ＰＲＡＭＥ）；メラノコルチン１受容体（ＭＣ１Ｒ）；β－カテニン；ＢＲＣＡ１／２；ＣＤＫ４；慢性骨髄性白血病６６（ＣＭＬ６６）；およびＴＧＦ－βが挙げられる。ある実施形態において、宿主自己抗原には、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリンまたはＨｅｒ－２が挙げられる。
一部の実施形態において、該方法は、がんの予防または治療に関するものである。がんには、限定されないが、急性リンパ芽球性白血病；急性骨髄性白血病；副腎皮質がん；ＡＩＤＳ関連がん；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；肛門がん；虫垂がん；星状細胞腫、小児小脳または大脳；基底細胞がん腫；胆管がん、肝外；膀胱がん；骨がん、骨肉腫／悪性線維性組織球腫；脳幹神経膠腫；脳腫瘍；脳腫瘍、小脳星状細胞腫；脳腫瘍、脳星状細胞腫／悪性神経膠腫；脳腫瘍、上衣腫；脳腫瘍、髄芽腫；脳腫瘍、テント上原始神経外胚葉腫瘍；脳腫瘍、視経路および視床下部神経膠腫；乳がん；気管支腺腫／カルチノイド；バーキットリンパ腫；カルチノイド腫瘍、小児期；カルチノイド腫瘍、胃腸；原発不明がん腫；中枢神経系リンパ腫、原発性；小脳星状細胞腫、小児期；脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、小児期；子宮頸がん；小児がん；慢性リンパ性白血病；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄増殖性障害；結腸がん；皮膚Ｔ細胞リンパ腫；線維形成性小円形細胞腫瘍；子宮内膜がん；上衣腫；食道がん；腫瘍のユーイングファミリーにおけるユーイング肉腫；頭蓋外胚細胞腫瘍、小児期；性腺外生殖細胞腫瘍；肝外胆管がん；眼がん、眼内黒色腫；眼がん、網膜芽細胞腫；胆嚢がん；胃（胃）がん；胃腸カルチノイド腫瘍；消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；生殖細胞腫瘍：頭蓋外、性腺外または卵巣；妊娠性栄養膜腫瘍；脳幹の神経膠腫；神経膠腫、小児脳星状細胞腫；神経膠腫、小児の視経路および視床下部；胃カルチノイド；毛状細胞白血病；頭頸部がん；心臓がん；肝細胞（肝臓）がん；ホジキンリンパ腫；下咽頭がん；視床下部および視経路神経膠腫、小児期；眼内黒色腫；膵島細胞がん腫（膵内分泌部）；カポジ肉腫；腎臓がん（腎細胞がん）；喉頭がん；白血病；白血病、急性リンパ芽球性（急性リンパ性白血病とも呼ばれる）；白血病、急性骨髄性（急性骨髄性白血病とも呼ばれる）；白血病、慢性リンパ性（慢性リンパ性白血病とも呼ばれる）；白血病、慢性骨髄性（慢性骨髄性白血病とも呼ばれる）；白血病、有毛細胞；唇および口腔がん；肝臓がん（原発性）；肺がん、非小細胞；肺がん、小細胞；リンパ腫；リンパ腫、ＡＩＤＳ関連；リンパ腫、バーキット；リンパ腫、皮膚Ｔ細胞；リンパ腫、ホジキン；リンパ腫、非ホジキン（ホジキンリンパ腫を除くすべてのリンパ腫の古い分類）；リンパ腫、原発性中枢神経系；マーカス・ホイットル（Ｍａｒｃｕｓ Ｗｈｉｔｔｌｅ）、致死性疾患；マクログロブリン血症、ワルデンシュトレーム（Ｗａｌｄｅｎｓｔｒｉｍ）；骨の悪性線維性組織球腫／骨肉腫；髄芽腫、小児期；黒色腫；黒色腫、眼内（眼）；メルケル細胞がん腫；中皮腫、成人悪性腫瘍；中皮腫、小児期；原発不明の転移性扁平上皮頸部がん；口腔がん；多発性内分泌腫瘍症候群、小児期；多発性骨髄腫／形質細胞新生物；菌状息肉症；骨髄異形成症候群；骨髄異形成／骨髄増殖性疾患；骨髄性白血病、慢性；骨髄性白血病、成人急性；骨髄性白血病、小児急性；骨髄腫、多発（骨－骨髄のがん）；骨髄増殖性障害、慢性；鼻腔および副鼻腔がん；鼻咽頭がん腫；神経芽細胞腫；非ホジキンリンパ腫；非小細胞肺がん；口腔がん；口腔咽頭がん；骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫；卵巣がん；卵巣上皮がん（表面上皮間質腫瘍）；卵巣胚細胞腫瘍；卵巣低悪性度腫瘍；膵臓がん；膵臓がん、膵島細胞；副鼻腔がんおよび鼻腔がん；副甲状腺がん；陰茎がん；咽頭がん；褐色細胞腫；松果体星状細胞腫；松果体胚細胞腫；松果体芽腫およびテント上原始神経外胚葉腫瘍、小児期；下垂体腺腫；形質細胞新生物／多発性骨髄腫；胸膜肺芽腫；原発性中枢神経系リンパ腫；前立腺がん；直腸がん；腎細胞がん腫（腎臓がん）；腎盂および尿管、移行細胞がん；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫、小児期；唾液腺がん；肉腫、ユーイングファミリーの腫瘍；肉腫、カポジ；肉腫、軟組織；肉腫、子宮；セザリー症候群；皮膚がん（非黒色腫）；皮膚がん（黒色腫）；皮膚がん腫、メルケル細胞；肺小細胞がん；小腸がん；軟組織肉腫；扁平上皮がん腫－皮膚がん（非黒色腫）参照；潜在性原発性転移性扁平上皮頸部がん；胃がん；テント上原始神経外胚葉腫瘍、小児期；Ｔ細胞リンパ腫、皮膚（菌状息肉症およびセザリー症候群）；精巣がん；咽喉がん；胸腺腫、小児期；胸腺腫および胸腺がん腫；甲状腺がん；甲状腺がん、小児期；腎盂および尿管の移行上皮がん；栄養膜腫瘍、妊娠性；未知の原発部位、成人のがん腫；未知の原発部位、小児期のがん；尿管および腎盂、移行細胞がん；尿道がん；子宮がん、子宮内膜；子宮肉腫；膣がん；視経路および視床下部神経膠腫、小児期；外陰がん；ワルデンシュトレームマクログロブリン血症；およびウィルムス腫瘍（腎臓がん）が含まれる。
一部の実施形態において、該方法は、腫瘍ウイルス陽性がんの治療または予防に関するものである。一部の実施形態において、該方法は、対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる方法に関するものである。
一部の実施形態において、本開示の方法は、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７をコードする核酸配列またはそのホモログ、またはそのオーソログ（他の種に感染するＣＭＶの相同遺伝子）における突然変異の存在により、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質を発現しないＣＭＶベクターの投与を提供する。いくつかの他の実施形態において、ベクターは、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、ＵＬ１４７およびＵＳ１１またはそれらのホモログ、またはそれらのオーソログ（他の種に感染するＣＭＶの相同遺伝子）をコードする核酸配列に突然変異が存在するため、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、活性ＵＬ１４７タンパク質および活性ＵＳ１１タンパク質を発現しない。突然変異は、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、活性ＵＬ１４７タンパク質、または活性ＵＳ１１タンパク質の発現の欠如をもたらすものであればいかなる突然変異でもあり得る。前述の突然変異には、点突然変異、フレームシフト突然変異、タンパク質をコードする配列の全体よりも短い配列の欠失（切断突然変異）、またはタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失、または任意の他の突然変異が含まれ得る。具体例としてのベクターは、米国特許第９，７８３，８２３号および同第９，８６２，９７２号、および米国特許出願公開第２０１８／０２９８４０４号明細書に記載されており、これらは参照により本明細書に組み込まれる。
さらなる例において、ＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、ＵＬ１４７タンパク質またはＵＳ１１タンパク質の発現を阻害するアンチセンスもしくはＲＮＡｉ配列（ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡ）を含むベクター中の核酸配列の存在により、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質を発現しないか、またはベクターは活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、活性ＵＬ１４７タンパク質、および活性ＵＳ１１タンパク質を発現しない。突然変異および／またはアンチセンスおよび／またはＲＮＡｉを任意の組合せで使用して、活性ＵＬ１２８、活性ＵＬ１３０、活性ＵＬ１４６、活性ＵＬ１４７、または活性ＵＳ１１を欠くＣＭＶベクターを生成することができる。
一部の実施形態において、ベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％がＭＨＣ－Ｅによって提示されるエピトープを指向したものであることを特徴とする。さらなる例では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９５％がＭＨＣ－Ｅによって拘束される。一部の実施形態では、ＭＨＣ－Ｅによって拘束されたＣＤ８＋Ｔ細胞は、ベクターで免疫が付与された他の対象の少なくとも９０％が共有するペプチドを認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｅによって提示されるスーパートープに対するものである。一部の実施形態において、このベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％がＭＨＣ－ＩＩによって提示されるエピトープを指向したものであることを特徴とする。さらなる例では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９５％がＭＨＣ－ＩＩによって拘束される。一部の実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩによって拘束されたＣＤ８＋Ｔ細胞は、ベクターで免疫が付与された他の対象の少なくとも９０％が共有するペプチドを認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩによって提示されるスーパートープに対するものである。
一部の実施形態において、本方法は、ヒトのＵＬ１２８－１３０およびＵＬ１４６－１４７欠失ＨＣＭＶベクター、またはアカゲザルのＲｈＣＭＶ株６８－１ベクター、またはカニクイザルのＵＬ１２８－１３０およびＵＬ１４６－１４７欠失ＣｙＣＭＶベクターのいずれかによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞からのＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。一部の実施形態では、本方法は、ＭＨＣ－ＥスーパートープまたはＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。一部の実施形態において、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＰＡＰ、ＷＴ１、ＭＳＬＮ、ＨＥＲ２、１６株由来のＨＰＶ Ｅ６およびＥ７、１８株由来のＨＰＶ Ｅ６およびＥ７、またはＨＰＶ Ｅ６／Ｅ７融合タンパク質に由来するペプチドを含む。
一部の実施形態において、ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩのスーパートープペプチドは、ＰＡＰに対応するアミノ酸配列（ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ）（配列番号２）；（ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ）（配列番号３）；（ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ）（配列番号４）；（ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ）（配列番号５）；（ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ）（配列番号６）；または（ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ）（配列番号７）と少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する。一部の実施形態において、ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩのスーパートープペプチドは、ＷＴ１に対応するアミノ酸配列（ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ）（配列番号８）（ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ）（配列番号９）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。一部の実施形態において、ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩのスーパートープペプチドは、ＭＳＬＮに対応するアミノ酸配列（ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ）（配列番号１０）；（ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ）（配列番号１１）；または（ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ）（配列番号１２）と少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する。
一部の実施形態において、本方法は、ヒトのＵＬ１２８－１３０およびＵＬ１４６－１４７欠失ＨＣＭＶベクター、またはアカゲザルのＲｈＣＭＶ株６８－１ベクター、またはカニクイザルのＵＬ１２８－１３０およびＵＬ１４６－１４７欠失ＣｙＣＭＶベクターのいずれかによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞からのＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、このＣＤ８＋Ｔ細胞受容体はＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。
一部の実施形態では、本方法は、特異的ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。一部の実施形態において、特異的ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、ＰＡＰ、ＷＴ１、ＭＳＬＮ、ＨＥＲ２、１６株由来のＨＰＶ Ｅ６およびＥ７、１８株由来のＨＰＶ Ｅ６およびＥ７、またはＨＰＶ Ｅ６／Ｅ７融合タンパク質に由来するペプチドを含む。
一部の実施形態において、組換えＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８および活性ＵＬ１３０、ならびに不活性ＵＳ１１を発現する。一部の実施形態において、このベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％がＭＨＣ－Ｉによって提示されるエピトープを指向したものであることを特徴とする。さらなる例では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９５％がＭＨＣ－Ｉによって拘束される。
一部の実施形態において、本方法は、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体はＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態では、Ｔ細胞受容体はヒトまたはサルのＴ細胞に由来する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。
一部の実施形態では、組換えＣＭＶベクターは、がんを予防または治療するために投与される。一部の実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、中皮腫、悪性中皮腫、腎臓がん、子宮頸がん、中咽頭がん、肛門がん、陰茎がん、膣がん、外陰がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん腫、または胚細胞性腫瘍である。
一部の実施形態では、組換えＣＭＶベクターは、腫瘍ウイルス陽性がんを予防または治療するために投与される。一部の実施形態では、腫瘍ウイルス陽性がんは、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、中皮腫、悪性中皮腫、腎臓がん、子宮頸がん、中咽頭がん、肛門がん、陰茎がん、膣がん、外陰がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん腫、または胚細胞性腫瘍である。
腫瘍ウイルスという用語には、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒトポリオーマウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス、メルケル細胞ポリオーマウイルス、およびエプスタイン・バールウイルスが含まれるが、これらに限定されない。一部の実施形態において、腫瘍ウイルス抗原は、ＨＰＶ株１６由来のＥ６およびＥ７またはＨＰＶ株１８由来のＥ６およびＥ７である。一部の実施形態において、腫瘍ウイルス抗原は、ＨＰＶ由来のＥ６およびＥ７の融合体である。腫瘍ウイルス抗原は、腫瘍ウイルスの何らかの部分に由来するタンパク質であり得る。例えば、一部の実施形態では、腫瘍ウイルス抗原は、コア、エンベロープ、表面またはポリメラーゼタンパク質に由来し得る。
対象において少なくとも１つの腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる方法も本明細書に開示されている。該方法は、少なくとも１つの腫瘍関連抗原を含む有効量の組換えＣＭＶベクターを対象に投与することを含む。一部の実施形態において、ＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、または活性ＵＳ１１タンパク質を発現しない核酸配列を有することを特徴とする。
一部の実施形態において、ベクターは、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、もしくはＵＳ１１またはそのホモログ、またはそのオーソログ（他の種に感染するＣＭＶの相同遺伝子）をコードする核酸配列に突然変異が存在するため、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、または活性ＵＳ１１タンパク質を発現しない。突然変異は、活性タンパク質の発現の欠如をもたらすものであればいかなる突然変異でもあり得る。前述の突然変異には、点突然変異、フレームシフト突然変異、タンパク質をコードする配列の全体よりも短い配列の欠失（切断突然変異）、またはタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失、または任意の他の突然変異が含まれ得る。
いくつかのさらなる例において、ベクターは、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、またはＵＳ１１タンパク質の発現を阻害するアンチセンスもしくはＲＮＡｉ配列（ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡ）を含むベクター中の核酸配列の存在により、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、または活性ＵＳ１１タンパク質を発現しない。突然変異および／またはアンチセンスおよび／またはＲＮＡｉを任意の組合せで使用して、活性ＵＬ１２８、活性ＵＬ１３０、または活性ＵＳ１１を欠くＣＭＶベクターを生成することができる。
一部の実施形態において、本方法は、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体はＭＨＣ－Ｉ異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。
ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を作製する方法も本明細書に開示されている。この方法は、第１の対象（または動物）に、ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量でＣＭＶベクターを投与することを含む。ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１３０タンパク質もしくはそのオーソログ、または活性ＵＬ１４６タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１４７タンパク質もしくはそのオーソログを発現しない。抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍関連抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。一部の実施形態において、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。
一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、ＰＡＰに対応するアミノ酸配列（ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ）（配列番号２）；（ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ）（配列番号３）；（ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ）（配列番号４）；（ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ）（配列番号５）；（ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ）（配列番号６）；または（ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ）（配列番号７）と少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する。一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、ＷＴ１に対応するアミノ酸配列（ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ）（配列番号８）（ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ）（配列番号９）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、ＭＳＬＮに対応するアミノ酸配列（ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ）（配列番号１０）；（ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ）（配列番号１１）；または（ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ）（配列番号１２）と少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する。
この方法は、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含む組換えＣＭＶベクターを、ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で第１の対象に投与することをさらに含み、ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそのオーソログを発現しない。一部の実施形態において、本方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み得、第１のＣＤ８＋ＴＣＲはＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを第２の対象から単離することをさらに含み得る。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを発現ベクターでトランスフェクトすることを含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体腫瘍関連抗原を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞が生成され得る。
本方法は、第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離することを含み、前記第１の対象には、ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含む組換えＣＭＶベクターが投与されており、ＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそのオーソログを発現しない。一部の実施形態において、本方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み、第１のＣＤ８＋ＴＣＲはＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを第２の対象から単離することをさらに含む。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを発現ベクターでトランスフェクトすることを含み、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞が生成される。
発現ベクターによるトランスフェクションのための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。
一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
一部の実施形態において、本方法は、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体はＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。一部の実施形態では、本方法は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。一部の実施形態において、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＰＡＰ、ＷＴ１、ＭＳＬＮ、ＨＥＲ２、およびＨＰＶ１６またはＨＰＶ１８のＥ６またはＥ７のうちの１つ以上に由来するペプチドを含む。
また、（ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを第１の対象に投与するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲをＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体腫瘍関連抗原を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法によって調製されるＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するトランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞が開示されている。
また、（ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを既に投与されている第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲをＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法によって調製されるＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するトランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞が開示されている。
ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１３０タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１４６タンパク質もしくはそのオーソログ、または活性ＵＬ１４７タンパク質もしくはそのオーソログを発現しない。発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む。異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。
一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
一部の実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。
がん、病原性感染症、または免疫疾患もしくは障害などの疾患を治療する方法も本明細書に開示されており、この方法は、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む。ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む、宿主自己抗原または組織特異的抗原に対する免疫応答を誘導する方法も本明細書に開示されている。また、がんを治療または予防するための医薬品の製造におけるＣＤ８＋Ｔ細胞の使用も本明細書で開示されている。対象において宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するための医薬品の製造におけるＣＤ８＋Ｔ細胞の使用も本明細書で開示されている。
ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を作製する方法も本明細書に開示されている。この方法は、腫瘍抗原を発現する核酸を含む組換えＣＭＶベクターを、ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で第１の対象に投与することを含み、ＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれらのオーソログを発現しない。一部の実施形態において、本方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み得、第１のＣＤ８＋ＴＣＲはＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを第２の対象から単離することをさらに含み得る。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを発現ベクターでトランスフェクトすることを含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞が生成される。
一部の実施形態において、本方法は、第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離することを含み、第１の対象には、ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含む組換えＣＭＶベクターが投与されており、ＣＭＶベクターは、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれらのオーソログを発現しない。一部の実施形態において、本方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み、第１のＣＤ８＋ＴＣＲはＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを第２の対象から単離することをさらに含む。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを発現ベクターでトランスフェクトすることを含み、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞が生成される。
ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１３０タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１４６タンパク質もしくはそのオーソログ、または活性ＵＬ１４７タンパク質もしくはそのオーソログタンパク質もしくはそのオーソログを発現しない。抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍関連抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。一部の実施形態において、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。一部の実施形態では、宿主自己抗原は、がん細胞によって異常発現される腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）であり得る。ＴＡＡには、ｉ）がん細胞で発現される生殖細胞系／精巣抗原、ｉｉ）成体組織で発現されない細胞系統分化抗原、またはｉｉｉ）がん細胞で過剰発現される抗原が含まれるが、これらに限定されない。一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
一部の実施形態において、本方法は、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体はＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。
一部の実施形態では、本方法は、特異的ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。一部の実施形態において、特異的ＭＨＣ－ＩＩスーパートープは、ＰＡＰ、ＷＴ１、ＭＳＬＮ、ＨＥＲ２、１６株由来のＨＰＶ Ｅ６もしくはＥ７、１８株由来のＨＰＶ Ｅ６およびＥ７、またはＨＰＶ Ｅ６／Ｅ７融合タンパク質に由来するペプチドを含む。
また、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを第１の対象に投与するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲをＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法によって調製されるＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するトランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞が開示されている。
また、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを既に投与されている第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離するステップと、（ｂ）ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲをＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、（ｄ）第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法によって調製されるＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するトランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞が開示されている。
一部の実施形態において、腫瘍関連抗原は、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む。
ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１３０タンパク質もしくはそのオーソログ、および活性ＵＬ１４６タンパク質もしくはそのオーソログ、活性ＵＬ１４７タンパク質もしくはそのオーソログを発現しない。発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む。異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。一部の実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。がん、病原性感染症、または免疫疾患もしくは障害などの疾患を治療する方法も本明細書に開示されており、この方法は、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む。ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む、宿主自己抗原または組織特異的抗原に対する免疫応答を誘導する方法も本明細書に開示されている。
ＭＨＣ－Ｉ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を作製する方法も本明細書に開示されている。この方法は、第１の対象（または動物）に、ＭＨＣ－Ｉ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量でＣＭＶベクターを投与することを含む。ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質またはそのオーソログ、活性ＵＬ１３０タンパク質またはそのオーソログ、活性ＵＬ１４６タンパク質またはそのオーソログ、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそのオーソログを発現する。抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍関連抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。一部の実施形態において、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。
一部の実施形態において、本方法は、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体はＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。一部の実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって同定される。
一部の実施形態では、本方法は、特異的ＭＨＣ－Ｉエピトープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。一部の実施形態において、特異的ＭＨＣ－Ｉエピトープは、ＰＡＰ、ＷＴ１、ＭＳＬＮ、ＨＥＲ２、１６株由来のＨＰＶ Ｅ６またはＥ７、１８株由来のＨＰＶ Ｅ６またはＥ７、およびＨＰＶ Ｅ６／Ｅ７融合タンパク質のうちの１つ以上を含む。
一部の実施形態において、この方法は、がん、病原性感染症、または免疫疾患もしくは障害などの疾患を治療するために、１つ以上のトランスフェクトＴ細胞を第１または第２の対象に投与することをさらに含み得る。一部の実施形態において、この方法は、腫瘍関連抗原に対する免疫応答を誘導するために、１つ以上のトランスフェクトＴ細胞を第１または第２の対象に投与することをさらに含み得る。
本明細書に開示されているＣＭＶベクターは、組換えＣＭＶウイルスまたはベクターと、医薬的に許容され得る担体または希釈剤とを含有する免疫原性組成物、免疫学的組成物、またはワクチン組成物として使用され得る。組換えＣＭＶウイルスまたはベクター（またはその発現産物）を含有する免疫学的組成物は、局所的または全身的な免疫学的応答を誘発する。応答は防御的であり得るが、防御的である必要はない。組換えＣＭＶウイルスまたはベクター（またはその発現産物）を含有する免疫原性組成物も同様に、防御的であり得るが防御的である必要はない局所的または全身的免疫学的応答を誘発する。ワクチン組成物は、局所的または全身的な防御応答を誘発する。したがって、「免疫学的組成物」および「免疫原性組成物」という用語は、（２つの用語が防御的組成物であり得るので）「ワクチン組成物」を含む。
本明細書に開示されている組換えＣＭＶベクターは、ヒトサイトメガロウイルスベクター、アカゲザルサイトメガロウイルスベクター、またはカニクイザルベクターであり得る。
本明細書に開示されている組換えＣＭＶベクターは、組換えＣＭＶウイルスまたはベクターおよび医薬的に許容され得る担体または希釈剤を含む免疫原性組成物、免疫学的組成物、またはワクチン組成物を対象に投与することを含む、対象において免疫学的応答を誘導する方法において使用され得る。
本明細書に開示されている組換えＣＭＶベクターは、組換えＣＭＶウイルスまたはベクター、および医薬的に許容され得る担体または希釈剤を含有する治療用組成物において使用され得る。本明細書に開示されているＣＭＶベクターは、腫瘍関連抗原をコードする配列を含むＤＮＡをＣＭＶゲノムの必須または非必須領域に挿入することによって調製され得る。この方法は、ＣＭＶゲノムから１つ以上の領域を欠失させることをさらに含み得る。この方法は、インビボ組換えを含み得る。したがって、この方法は、ＣＭＶゲノムの一部と相同なＤＮＡ配列に隣接する異種ＤＮＡを含むドナーＤＮＡの存在下において細胞適合性培地中でＣＭＶ ＤＮＡを細胞にトランスフェクトすることを含み得、それによって異種ＤＮＡがＣＭＶのゲノムに導入され、次いで、場合によりインビボ組換えによって改変されたＣＭＶを回収することも含み得る。この方法はまた、ＣＭＶ ＤＮＡを切断して切断されたＣＭＶ ＤＮＡを得ること、異種ＤＮＡを切断されたＣＭＶ ＤＮＡに連結してハイブリッドＣＭＶ－異種ＤＮＡを得ること、ハイブリッドＣＭＶ－異種ＤＮＡで細胞をトランスフェクトすること、次いで場合により異種ＤＮＡの存在によって改変されたＣＭＶを回収してもよいことを含み得る。インビボ組換えが含まれるため、結果的にこの方法はまた、ＣＭＶにとって外来のポリペプチドをコードするＣＭＶに天然には存在しないドナーＤＮＡを含むプラスミドも提供し、ドナーＤＮＡは、ＣＭＶの必須または非必須領域からのＤＮＡがドナーＤＮＡに隣接するように、ＣＭＶゲノムの必須または非必須領域とそれ以外は共線状であるＣＭＶ ＤＮＡのセグメント内にある。異種ＤＮＡをＣＭＶに挿入することで、そのＤＮＡの安定した組込みおよびその発現をもたらす任意の配向で組換えＣＭＶを生成することができる。
組換えＣＭＶベクター中の異種抗原をコードするＤＮＡはまた、プロモーターを含み得る。プロモーターは、ヒトＣＭＶ（ＨＣＭＶ）、アカゲザルＣＭＶ（ＲｈＣＭＶ）、マウス、または他のＣＭＶプロモーターなどの内因性サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターを含むヘルペスウイルスなどのいずれの供給源に由来し得る。プロモーターはまた、ＥＦ１αプロモーターなどの非ウイルスプロモーターであり得る。プロモーターは切断型転写活性プロモーターであり得、これは、ウイルスによって提供されるトランス活性化タンパク質でトランス活性化された領域と、切断型転写活性プロモーターが由来する完全長プロモーターの最小プロモーター領域とを含む。プロモーターは、最小プロモーターおよび上流調節配列に対応するＤＮＡ配列の会合体から構成され得る。最小プロモーターは、ＣＡＰ部位＋ＡＴＡボックス（転写の基本レベルの最小配列；転写の非調節レベル）から構成され、「上流制御配列」は、複数の場合もある上流エレメントおよび複数の場合もあるエンハンサー配列から構成される。さらに、用語「切断型（の）」は、完全長プロモーターが完全な状態では存在していないこと、すなわち、完全長プロモーターの一部が除去されていることを示す。また、切断型プロモーターは、ＭＣＭＶまたはＨＣＭＶなどのヘルペスウイルス、例えばＨＣＭＶ－ＩＥまたはＭＣＭＶ－ＩＥに由来し得る。塩基対に基づくと、完全長プロモーターから最大４０％、さらには最大９０％のサイズ縮小があり得る。プロモーターはまた、改変された非ウイルスプロモーターであり得る。ＨＣＭＶプロモーターに関しては、米国特許第５，１６８，０６２号明細書および第５，３８５，８３９号明細書を参照されたい。細胞から発現させるためにプラスミドＤＮＡで細胞をトランスフェクトすることに関しては、Ｆｅｉｇｎｅｒら（１９９４）、Ｊ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９、２５５０－２５６１に記載されている。また、様々な感染症に対するワクチン接種の簡単で効果的な方法としてのプラスミドＤＮＡの直接注射に関しては、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５９：１７４５－４９、１９９３を参照されたい。したがって、ベクターがベクターＤＮＡの直接注入によって使用され得ることは、本開示の範囲内に含まれる。
また、切断型転写活性プロモーターを含む組換えウイルスまたはプラスミドに挿入され得る発現カセットも開示されている。発現カセットは、機能的切断型ポリアデニル化シグナル、例えば、切断されているが機能的であるＳＶ４０ポリアデニル化シグナルをさらに含み得る。天然ではより大きなシグナルが提供されることを考慮すると、切断型ポリアデニル化シグナルが機能的であることは実に驚くべきことである。切断型ポリアデニル化シグナルは、ＣＭＶなどの組換えウイルスの挿入サイズ制限問題に対処している。発現カセットはまた、それが挿入されるウイルスまたは系に関連する異種ＤＮＡを含み得、ＤＮＡは、本明細書に記載の異種ＤＮＡであり得る。
ワクチンまたは免疫学的組成物に使用するための抗原については、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ（第２４版、１９８２年）、例えばワクチンの定義（ワクチン製剤に使用される抗原のリストについて）も参照されたい。そのような抗原またはそれらの抗原からの目的のエピトープが使用され得る。腫瘍関連抗原に関して、当業者であれば、過度の実験を行うことなく、ペプチドまたはポリペプチドのアミノ酸および対応するＤＮＡ配列の知識から、ならびに特定のアミノ酸の性質（例えば、サイズ、電荷など）およびコドン辞書から、腫瘍関連抗原およびそのコードＤＮＡを選択し得るはずである。
抗原のＴエピトープを決定する１つの方法は、エピトープマッピングを含む。腫瘍関連抗原の重複ペプチドは、オリゴペプチド合成によって生成される。次いで、個々のペプチドを、Ｔ細胞活性化を誘導するそれらの能力について試験する。このアプローチは、Ｔ細胞がＭＨＣ分子と複合体形成した短い線状ペプチドを認識するので、Ｔ細胞エピトープのマッピングに特に有用であった。
腫瘍関連抗原に対する免疫応答は、一般に以下のように生じる：Ｔ細胞は、タンパク質がより小さなペプチドに切断され、別の細胞の表面に位置する「主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）」と呼ばれる複合体中に提示されたときのみ、タンパク質を認識する。ＭＨＣ複合体にはクラスＩおよびクラスＩＩの２つのクラスがあり、各クラスは多くの異なる対立遺伝子から構成される。異なる種、および個々の対象は、異なるタイプのＭＨＣ複合体対立遺伝子を有し、それらは異なるＭＨＣタイプを有すると言われる。ＭＨＣクラスＩ分子の１つのタイプは、ＭＨＣ－Ｅ（ヒトにおけるＨＬＡ－Ｅ、ＲＭにおけるＭａｍｕ－Ｅ、マウスにおけるＱａ－ｌｂ）と呼ばれる。他のＭＨＣ－Ｉ分子とは異なり、ＭＨＣ－Ｅは、哺乳動物種内および哺乳動物種間で高度に保存されている。
腫瘍関連抗原をコードする配列を含むＤＮＡは、それ自体がＣＭＶベクターにおける発現を駆動するためのプロモーターを含み得るか、またはＤＮＡは腫瘍関連抗原のコードＤＮＡに限定され得ることが知られている。この構築物は、内因性ＣＭＶプロモーターに対して、プロモーターに機能し得るように連結され、それによって発現されるような配向で配置され得る。さらに、腫瘍関連抗原をコードするＤＮＡの複数のコピー、または強いもしくは初期プロモーターもしくは初期および後期のプロモーターの使用、またはそれらの任意の組合せは、発現を増幅または増加させるために行われ得る。したがって、腫瘍関連抗原をコードするＤＮＡは、ＣＭＶ内因性プロモーターに対して適切に配置され得るか、またはそれらのプロモーターは、腫瘍関連抗原をコードするＤＮＡと共に別の位置に挿入されるように転座され得る。２つ以上の腫瘍関連抗原をコードする核酸をＣＭＶベクターにパッケージングすることができる。
開示されたＣＭＶベクターを含有する医薬組成物および他の組成物がさらに開示されている。前述の医薬組成物および他の組成物は、当技術分野で知られている任意の投与手順で使用されるように製剤化され得る。前述の医薬組成物は、非経口経路（皮内、筋肉内、皮下、静脈内など）を介して投与され得る。投与はまた、粘膜経路、例えば、経口、経鼻、生殖器などを介してもよい。
開示されている医薬組成物は、当業者に周知の標準的な技術に従って調製され得る。前述の組成物は、特定の患者の種族または種、年齢、性別、体重および状態、ならびに投与経路などの要因を考慮して、当業者に周知の投与量および技術によって投与され得る。組成物は、単独で投与されてもよく、または他のＣＭＶベクターと、または他の免疫学的組成物、抗原性組成物もしくはワクチン組成物もしくは治療用組成物と同時投与または逐次投与されてもよい。前述の他の組成物は、精製された天然の抗原もしくはエピトープまたは組換えＣＭＶベクターもしくは別のベクター系による発現からの抗原もしくはエピトープを含み得、上記要因を考慮して投与される。
組成物の例としては、懸濁液、シロップまたはエリキシルなど、開口部、例えば経口、経鼻、肛門、生殖器、例えば膣などを経た投与のための液体調製物、および滅菌懸濁液またはエマルジョンなど、非経口、皮下、皮内、筋肉内または静脈内投与（例、注射可能液投与）のための調製物が挙げられる。前述の組成物において、組換え体は、滅菌水、生理食塩水、グルコースなどの適切な担体、希釈剤、または賦形剤と混合した状態であり得る。
抗原性組成物、免疫学的組成物またはワクチン組成物は、典型的には、アジュバントと、所望の応答を誘発するためのある一定量のＣＭＶベクターまたは発現産物とを含み得る。ヒトへの適用では、ミョウバン（リン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウム）が典型的なアジュバントである。研究および獣医学用途で使用されるサポニンおよびその精製成分Ｑｕｉｌ Ａ、フロイント完全アジュバントおよび他のアジュバントは、ヒトワクチンにおいてそれらを使用する可能性を制限する毒性を有する。化学的に規定された調製物、例えばムラミルジペプチド、モノホスホリルリピドＡ、リン脂質コンジュゲート、例えばＧｏｏｄｍａｎ－Ｓｎｉｔｋｏｆｆら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：４１０－４１５（１９９１）に記載されたもの、Ｍｉｌｌｅｒら、Ｊ Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７６：１７３９－１７４４（１９９２）に記載されたプロテオリポソーム内でのタンパク質の封入、およびＮｏｖａｓｏｍｅ脂質小胞（Ｍｉｃｒｏ Ｖｅｓｃｕｌａｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．、Ｎａｓｈｕａ、Ｎ．Ｈ．）などの脂質小胞へのタンパク質の封入も使用することができる。
組成物は、非経口（例えば、筋肉内、皮内または皮下）投与または開口部投与、例えば、舌周囲（例えば、経口）投与、胃内投与、口腔内、肛門内、膣内などを含む粘膜投与による免疫化のための単一剤形に包装されてもよい。また同様に、有効な投薬量および投与経路は、組成物の性質、発現産物の性質、組換えＣＭＶが直接使用される場合は発現レベル、および宿主の種族または種、年齢、性別、体重、状態および性質などの既知の要因、ならびにＬＤ５０および既知であり過度の実験を必要としない他のスクリーニング手順によって決定される。発現産物の投与量は、数マイクログラム～数百マイクログラム、例えば５μｇ～５００μｇの範囲であり得る。ＣＭＶベクターは、これらの投与量レベルでの発現を達成するために任意の適切な量で投与され得る。非限定的な例では、ＣＭＶベクターは少なくとも１０２ｐｆｕの量で投与され得、すなわち、ＣＭＶベクターは、少なくともこの量で投与され得るか、または約１０２ｐｆｕ～約１０７ｐｆｕの範囲の量で投与され得る。他の適切な担体または希釈剤は、保存剤の有無にかかわらず、水または緩衝生理食塩水であり得る。ＣＭＶベクターは、投与時に再懸濁するために凍結乾燥されてもよく、または溶解状態であってもよい。
本開示のタンパク質およびそれらをコードする核酸が、本明細書で具体例として示され、記載された正確な配列とは異なり得ることは言うまでもない。したがって、本開示は、配列が本開示の方法に従って機能する限り、示された配列に対する欠失、付加、切断および置換を考慮に入れている。これに関して、置換は、一般に、本質的に保存的であり、すなわち、アミノ酸の一ファミリー内で起こる置換である。例えば、アミノ酸は一般に４つのファミリー：（１）酸性－アスパルタートおよびグルタマート、（２）塩基性－リジン、アルギニンおよびヒスチジン、（３）非極性－アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニンおよびトリプトファン、（４）非荷電極性－グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニンおよびチロシンに分けられる。フェニルアラニン、トリプトファン、およびチロシンは、芳香族アミノ酸として分類されることがある。イソロイシンもしくはバリンによるロイシンの単独置換、またはその逆、グルタマートによるアスパルタートの単独置換またはその逆、セリンによるトレオニンの単独置換またはその逆、または構造的に関連するアミノ酸によるアミノ酸の同様の保存的置換は、生物学的活性に大きな影響を及ぼさないことが合理的に予測可能である。したがって、記載されたタンパク質と実質的に同じアミノ酸配列を有するが、タンパク質の免疫原性に実質的な影響を及ぼすことがない軽微なアミノ酸置換を有するタンパク質は、本開示の範囲内に含まれる。
本開示のヌクレオチド配列は、コドン最適化されていてもよく、例えば、コドンは、ヒト細胞における使用のために最適化されていてもよい。例えば、いかなるウイルスまたは細菌配列でもそのように改変され得る。ＨＩＶおよび他のレンチウイルスを含む多くのウイルスでは、多数の稀少コドンが用いられており、これらのコドンを所望の対象で一般的に使用されるコドンに対応するように改変することによって、Ａｎｄｒｅら、Ｊ Ｖｉｒｏｌ．７２：１４９７－１５０３、１９９８に記載されているように腫瘍関連抗原の発現増強が達成され得る。
ＣＭＶベクターおよびその中に含まれる糖タンパク質の機能的および／または抗原的に等価なバリアントおよび誘導体をコードするヌクレオチド配列が検討される。これらの機能的に等価なバリアント、誘導体およびフラグメントは、抗原活性を保持する能力を示す。例えば、コードされたアミノ酸配列を変化させないＤＮＡ配列の変化、ならびにアミノ酸残基の保存的置換、１つまたは少数のアミノ酸の欠失または付加、およびアミノ酸類似体によるアミノ酸残基の置換をもたらす変化は、コードされたポリペプチドの特性に大幅な影響を与えることはないものである。保存的アミノ酸置換は、グリシン／アラニン、バリン／イソロイシン／ロイシン、アスパラギン／グルタミン、アスパラギン酸／グルタミン酸、セリン／トレオニン／メチオニン、リジン／アルギニン、およびフェニルアラニン／チロシン／トリプトファンである。一部の実施形態において、バリアントは、目的の抗原、エピトープ、免疫原、ペプチドまたはポリペプチドと少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の相同性または同一性を有する。
本開示の様々な組換えヌクレオチド配列ならびに抗体および／または抗原は、標準的な組換えＤＮＡおよびクローニング技術を使用して作製される。そのような技術は当業者に周知である。例えば、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）を参照されたい。
本明細書に記載されたＣＭＶベクターは、宿主から宿主への伝播を妨げることができ、それにより、ウイルスが、免疫無防備状態の対象またはＣＭＶ感染の結果として合併症に直面し得る他の対象に感染することができないようにする突然変異を含み得る。本明細書に記載のＣＭＶベクターはまた、免疫優性エピトープおよび非免疫優性エピトープの提示ならびに非カノニカルＭＨＣ拘束をもたらす突然変異を含み得る。しかしながら、本明細書に記載のＣＭＶベクターにおける突然変異は、ＣＭＶに以前に感染したことがある対象を再感染させるベクターの能力に影響を及ぼさない。前述のＣＭＶ突然変異は、例えば、米国特許出願公開第２０１３－０１３６７６Ｓ号明細書、第２０１０－０１４２Ｓ２３号明細書、２０１４－０１４１０３Ｓ号明細書、およびＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１３Ｓ２０９号に記載されており、これらはすべて参照により本明細書に組み込まれる。
開示されたＣＭＶベクターは、例えば、高いパーセンテージのＣＤ８＋Ｔ細胞応答がＭＨＣ－Ｅ、ＭＨＣ－ＩＩ、またはＭＨＣ－Ｉ（またはそのホモログもしくはオーソログ）によって拘束されていることを特徴とする免疫応答を含む、ＣＤ８＋免疫応答を含む免疫原性応答を生じさせることを目的とする場合、インビボで投与され得る。例えば、いくつかの例では、ＲｈＣＭＶを使用した免疫原性組成物およびワクチンの前臨床試験を行うために、アカゲザルなどの実験動物において、開示されたＣＭＶベクターを使用することが望ましい場合がある。他の例では、臨床試験における場合およびＨＣＭＶを使用する免疫原性組成物の実際の臨床使用のためなど、開示されたＣＭＶベクターをヒト対象で使用することが望ましいことになる。
そのようなインビボ適用のために、開示されたＣＭＶベクターは、医薬的に許容され得る担体をさらに含む免疫原性組成物の一成分として投与される。一部の実施形態において、本開示の免疫原性組成物は、腫瘍関連抗原、腫瘍ウイルス抗原、または宿主自己抗原を含む異種抗原に対する免疫応答を刺激するのに有用であり、がんの予防、改善または治療のための腫瘍関連抗原、腫瘍ウイルス抗原、または宿主自己抗原に対する予防用または治療用ワクチンの１つ以上の成分として使用され得る。本開示の核酸およびベクターは、遺伝子ワクチン、すなわち本開示の抗原をコードする核酸をヒトなどの対象に送達するためのワクチンを提供するために特に有用であり、その結果、抗原が対象において発現されることで免疫応答が誘発される。
免疫化スケジュール（またはレジメン）は、動物（ヒトを含む）について周知であり、特定の対象および免疫原性組成物について容易に決定され得る。したがって、免疫原を対象に１回または複数回投与することもあり得る。好ましくは、免疫原性組成物の個別の投与の間に設定された時間間隔がおかれる。この間隔は、対象ごとに異なるが、典型的には、１０日間～数週間の範囲であり、多くの場合、２週間、４週間、６週間または８週間である。ヒトの場合、間隔は典型的には２～６週間である。本開示の特に有利な実施形態では、間隔はより長く、有利には約１０週間、１２週間、１４週間、１６週間、１８週間、２０週間、２２週間、２４週間、２６週間、２８週間、３０週間、３２週間、３４週間、３６週間、３８週間、４０週間、４２週間、４４週間、４６週間、４８週間、５０週間、５２週間、５４週間、５６週間、５８週間、６０週間、６２週間、６４週間、６６週間、６８週間、または７０週間である。免疫化レジメンには、典型的には免疫原性組成物の１～６回の投与が含まれるが、わずか１回または２回または４回の投与が含まれることもある。免疫応答を誘導する方法はまた、免疫原と共にアジュバントを投与することを含み得る。場合によっては、年１回、年２回または他の長い間隔（５～１０年）のブースター免疫化により初期免疫化プロトコルが補完され得る。本方法はまた、様々なプライム－ブーストレジメンを含む。これらの方法では、１回以上のプライミング免疫化の後に１回以上のブースティング免疫化が続く。実際の免疫原性組成物は、各免疫化について同じであっても異なっていてもよく、免疫原性組成物のタイプ（例、タンパク質または発現ベクターを含む）、経路、および免疫原の製剤も変化し得る。例えば、発現ベクターがプライミングステップおよびブースティングステップに使用される場合、それは同じ型または異なる型（例えば、ＤＮＡまたは細菌もしくはウイルス発現ベクター）のいずれであってもよい。一つの有用なプライムブーストレジメンでは、４週間間隔で２回のプライミング免疫化が行われ、続いて最後のプライミング免疫化の４週間後および８週間後に２回のブースティング免疫化が行われる。プライミングレジメンおよびブースティングレジメンを実現させるために本開示のＤＮＡ発現ベクター、細菌発現ベクターおよびウイルス発現ベクターを使用して包含されるいくつかの順列および組合せが存在することも、当業者には自明の理であるはずである。ＣＭＶベクターは、異なる病原体に由来する異なる抗原を発現しながら繰り返し使用され得る。
実施例１：ＣＭＶワクチンは免疫寛容を克服することができる
アカゲザルサイトメガロウイルス（ＲｈＣＭＶ）６８－１株に基づくワクチンベクターは、古典的なＭＨＣ－Ｉａ分子の代わりに、ＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩの状況でＳＩＶ、ＴＢまたはマラリアのペプチドを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発する（Ｈａｎｓｅｎら、２０１９．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ｖｅｃｔｏｒｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｋｎｏｗｌｅｓｉ ａｎｔｉｇｅｎｓ ｉｎｄｕｃｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｈａｔ ｄｅｌａｙ ｐａｒａｓｉｔｅｍｉａ ｕｐｏｎ ｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｋｎｏｗｌｅｓｉ抗原を発現するサイトメガロウイルスベクターは、スポロゾイト攻撃時に寄生虫血症を遅延させる免疫応答を誘導する）、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ １４：ｅ ０２１０２５２；Ｈａｎｓｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１３；Ｈａｎｓｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１６）。
いくつかの要因により、ＨＬＡ－Ｅはがん免疫療法のための特に魅力的な標的となっており、その要因には以下のことが含まれる：（ａ）いくつかのがんでは、がん細胞がＨＬＡ－Ｅをアップレギュレーションすることが報告されている（Ｋａｍｉｙａ、２０１９、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ）。ＨＬＡ－Ｅは阻害性ＮＫＧ２Ａ受容体のリガンドであるので、これはＮＫ細胞回避を切り抜けるがん細胞の選択の結果であり得る。（ｂ）正常組織（内皮細胞およびいくつかの免疫細胞を除く）がＨＬＡ－Ｅを発現するレベルは低い。（ｃ）がん細胞は、おそらくＴ細胞制御から逃れるための手段として、古典的ＨＬＡ分子を発現するレベルが低くなるように選択されることが多い。（ｄ）高度に多形性である古典的ＨＬＡ分子とは異なり、ＨＬＡ－Ｅは高度に保存されている。したがって、ＨＬＡ－Ｅ拘束ＴＣＲは、トランスジェニックＴ細胞に普遍的に適用され得る。
ＣＭＶに基づくベクターは、がん免疫療法として２つの方法で、すなわちヒトにおけるがんワクチンとして直接的に、または非ヒト霊長類においてＭＨＣ－Ｅ拘束ＴＣＲを誘発するための賦形剤として間接的に使用され得る。しかしながら、両方のアプローチは、（ａ）ＣＭＶががん抗原に対してＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発することができること、および（ｂ）がん細胞ががん抗原を提示することができることについての実証を必要とする。がん抗原は自己抗原であることが多いため、免疫寛容を被ることになる。ポックスベクター（例、ＰＲＯＳＴＶＡＣ）が臨床試験でうまくいかず、有効な前立腺抗原特異的免疫応答を誘発するためにチェックポイント阻害抗体と組み合わせる必要がある可能性が高いという事実が具体的に示すように（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｏｎｃｌｉｖｅ．ｃｏｍ／ｗｅｂ－ｅｘｃｌｕｓｉｖｅｓ／ｐｒｏｓｔｖａｃ－ｍｉｓｓｅｓ－ｐｈａｓｅ－ｉｉｉ－ｇｏａｌ－ｉｎ－ｐｒｏｓｔａｔｅ－ｃａｎｃｅｒ）、免疫寛容の破壊はほとんどのベクター系にとって困難である。さらに、ＨＬＡ－Ｅは、単一ペプチドＶＬ９（それ自体が多形ＨＬＡ分子のシグナルペプチドに由来する）に対する高度に選択的な受容体であると考えられており、どのようにして共通して他のペプチドがＨＬＡ－Ｅにロードされるかは知られていない。
がん抗原に関連してＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するＣＭＶの能力を評価するために、がん抗原を発現する６８．１株ベクターを作製し、アカゲザル（ＲＭ）に投与した。ＲｈＣＭＶ株６８－１は、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のＲｈＣＭＶホモログが欠損している。ベクターは、以下の挿入体：１）アカゲザルＰＡＰ、２）ヒトＷＴ１ Ａｇ、３）ヒトＭＳＬＮ、４）ヒトＨＥＲ２、および５）ＨＰＶ １６／１８ Ｅ６＋Ｅ７のうちの１つを発現するように設計された。
６匹の雄ＲＭに、がん抗原前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ、アカゲザル）を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＰＡＰ）を接種した。対照として、ＲＭにもＳＩＶ ｇａｇ抗原（６８－１／ＳＩＶｇａｇ）を接種した。６匹のＲＭのうち３匹に、がん抗原ウィルムス腫瘍抑制タンパク質（ＷＴ１、ヒト）を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＷＴ１）をさらに共接種し、他の３匹のＲＭに、がん抗原メソテリン（ＭＳＬＮ、ヒト）を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＭＳＬＮ）をさらに共接種した。各ＲＭは１４０日目にブースティング免疫を得て、すべてのサルはこの時点ですべての抗原を受けた。ＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された各時点での細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）によって各抗原について重複ペプチドプールを使用して末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）において測定した。感染したＲＭは、各抗原に対する高頻度Ｔ細胞応答を誘発することができた（図１）。これらの結果は、ＣＭＶに基づくワクチンが免疫寛容を克服し、自己抗原およびウイルスがん遺伝子に対するＴ細胞応答を誘発することができることを実証しているので、非常に重要である。重要なことに、Ｔ細胞が自己反応性であるという事実にもかかわらず、負の副作用は観察されなかった。
次に、６匹の雌ＲＭに、がん抗原ＨＥＲ２（ヒト）を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＨＥＲ２）を接種した。ＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された各時点でＩＣＳによってＨＥＲ２について重複ペプチドプールを使用してＰＢＭＣで測定した。図２に示すように、感染したＲＭは、ＨＥＲ２に対する高頻度のＴ細胞応答を誘発することができた（図２）。
４匹の雌ＲＭにＲｈＣＭＶ株６８－１（６８－１／ＨＰＶ）を接種し、４匹の雌ＲＭにＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８のＥ６タンパク質およびＥ７タンパク質の融合タンパク質を発現するＲｈＣＭＶ株６８－１．２（６８－１．２／ＨＰＶ）を接種した。ＲｈＣＭＶ株６８－１．２は、Ｌｉｌｊａ ＡＥおよびＳｈｅｎｋ Ｔ、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０５、１９９５０－１９９５５（２００８）に記載されているように、ＵＬ１２８～１３０について「修復されている」。ベクターは、１つを発現するように設計されており、ＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、図３に示された各時点でＩＣＳによってＨＰＶ抗原について重複ペプチドプールを使用してＰＢＭＣで測定した。図３に示すように、接種されたＲＭはすべて、ＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８のＥ６およびＥ７がん遺伝子に対する高頻度Ｔ細胞応答を誘発することができた。６８－１株は、ＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅによって拘束されたＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発したが、６８－１．２株は、ＭＨＣ－Ｉによって拘束されたＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発した。
実施例２：がん細胞はＨＬＡ－Ｅを介してがん抗原を提示することができる
上記で作製したＴ細胞がこれらの抗原を発現するがん細胞を認識することができるかどうかをさらに判定するために、ＭＨＣ－Ｅを発現するＫ５６２（ヒト慢性骨髄性白血病）細胞とインキュベートしたＣＤ８＋Ｔ細胞からのＴ細胞応答を測定した。Ｋ５６２細胞は他のＭＨＣ分子を発現しないので、Ｔ細胞へのペプチド提示はＭＨＣ－Ｅが介在することになる。
４匹の雌ＲＭに、ＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８のＥ６タンパク質およびＥ７タンパク質の融合タンパク質を発現する６８－１（６８－１／ＨＰＶ）を接種した。ＣＤ８＋Ｔ細胞を単離し、ＭＨＣ－Ｅ、またはＭＨＣ－ＥおよびＨＰＶの同じ融合タンパク質のいずれかを発現するＫ５６２細胞と共インキュベートした。Ｔ細胞応答を、ＴＮＦαおよびＩＦＮγについての細胞内サイトカイン染色によって測定した（図４）。ＴＮＦα産生およびＩＦＮγ産生の両方により応答するＣＤ８＋Ｔ細胞は、右上象限に現れる。ＨＰＶ融合タンパク質でトランスフェクトしたＭＨＣ－Ｅ発現Ｋ５６２細胞（Ｋ５６２－Ｅ）は、６８－１／ＨＰＶで免疫化した４匹のＲＭのうちの２匹からのＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識された。ＭＨＣ－Ｅによるペプチド提示は、ＭＨＣ－Ｅに対する高親和性リガンドであるペプチドＶＭＡＰＲＴＬＬＬ（ＶＬ９）（配列番号１）を付加することによってさらに実証された。ＶＬ９の付加により、ＣＤ８＋Ｔ細胞応答は阻害された。これは、ＲＭで誘発されたＴＣＲがヒトＭＨＣ－Ｅ提示ペプチドを認識できることを実証している。
次に、ＣＭＶベクターが、アカゲザルＰＡＰなどの宿主自己抗原を発現するがん細胞を認識することができるＴ細胞を生成することができるかどうかを判定した。３匹の雄ＲＭに６８－１／ＰＡＰを接種した。ＣＤ８＋Ｔ細胞を単離し、ＭＨＣ－Ｅを発現するＫ５６２細胞ならびにＭＨＣ－ＥおよびＰＡＰまたはＭＨＣ－ＥおよびＨＰＶ Ｅ６－Ｅ７融合タンパク質を発現するＫ５６２細胞と共インキュベートした。Ｔ細胞応答を、ＴＮＦαおよびＩＦＮγについての細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）によって測定した（図５）。ＴＮＦα産生およびＩＦＮγ産生の両方により応答するＣＤ８＋Ｔ細胞は、右上象限に現れる。ＰＡＰ特異的ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＭＨＣ－ＥリガンドペプチドＶＭＡＰＲＴＬＬＬ（ＶＬ９）（配列番号１）によりブロックされた。ＰＡＰでトランスフェクトされたＫ５６２－Ｅは、６８－１／ＰＡＰで免疫化したＲＭから単離したＣＤ８＋Ｔによって認識されたが、ＨＰＶ融合タンパク質でトランスフェクトされたＫ５６２－Ｅ細胞は認識されなかったことから、特異的認識が実証された。ＶＬ９の付加により、ＰＡＰ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答が阻害されたことから、認識にＭＨＣ－Ｅが介在することが実証された。
第２の実験では、６匹の雄ＲＭに６８－１／ＰＡＰおよび６８－１／ＷＴ１を共接種した。ＣＤ８＋Ｔ細胞を単離し、ＭＨＣ－Ｅを発現するＫ５６２細胞ならびにＭＨＣ－ＥおよびＰＡＰ（アカゲザル）またはＭＨＣ－ＥおよびＷＴ１（ヒト）を発現するＫ５６２細胞と共インキュベートした。Ｔ細胞応答を、ＴＮＦαおよびＩＦＮγについての細胞内サイトカイン染色によって測定した（図６）。ＴＮＦα産生およびＩＦＮγ産生の両方により応答するＣＤ８＋Ｔ細胞は、右上象限に現れる。ＰＡＰまたはＷＴ１でトランスフェクトされたＫ５６２－Ｅは、６８－１／ＰＡＰおよび６８－１／ＷＴ１で免疫化された６匹のＲＭ由来のＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識された。
これらの実験では、ＭＨＣ－ＥおよびＴＡＡの両方を発現するがん細胞は、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される
結果は、ＣＭＶに基づくがんワクチンが、免疫寛容が直面する課題のいくつかを克服すること、すなわち、
（ｉ）抗ベクター免疫は、挿入された抗原に対するＴ細胞応答を誘発するＣＭＶベクターの能力に影響を及ぼさないこと（Ｈａｎｓｅｎら、２０１０．Ｅｖａｓｉｏｎ ｏｆ ＣＤ８＋Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｓｕｐｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２８：１０２－１０６．）、および
（ｉｉ）ＣＭＶベクターは、外来抗原に対して誘発された場合と類似した頻度でＴＡＡに対してＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発すること
を立証している。したがって、ＣＭＶに基づくワクチンは、免疫寛容を破壊するのに非常に優れている。免疫寛容の破壊は、２つの方法：（ａ）ＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の非カノニカルＭＨＣ－Ｉ拘束エピトープ（例、６８－１．２／ＰＡＰ）への誘導、または（ｂ）ＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の非従来型エピトープ（６８－１に基づくベクター）への誘導で起こり得る。この点は、ＵＳ１１を欠くＣＭＶに基づくベクターがＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発しなかったという観察結果によってさらに説明される。対照的に、ＵＳ１１欠失により、非自己抗原に対するカノニカル、すなわち免疫優性エピトープを認識するＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発するベクターがもたらされる（Ｈａｎｓｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１０、Ｈａｎｓｅｎ ＰｌｏｓＯＮＥ ２０１９）。ＵＳ１１欠失ベクターがＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を自己抗原に対して誘発できないことについての最も可能性の高い説明は、これらのＴ細胞が胸腺で排除されていることである（＝中枢性寛容）。中枢性寛容は、他のワクチンおよびベクター系が、ＣＤ８＋Ｔ細胞を非カノニカルまたはサブドミナントのＭＨＣ－Ｉ拘束エピトープに対して誘発することができず、ＣＤ８＋Ｔ細胞をＭＨＣ－ＩＩまたはＭＨＣ－Ｅ拘束エピトープに対して誘発することができないため、ＣＭＶとの比較においてがん抗原に対してＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発するのに劣る理由である可能性が高い。ＭＨＣ－Ｅはがん細胞においてアップレギュレーションされることが多いが、ＭＨＣ－Ｉはダウンレギュレーションされることから、ＭＨＣ－Ｅの標的化は特に有効である可能性が高い。ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞をがん抗原に対して誘発することができる他のベクター系は現在のところ存在しない。
実施例３：ＭＨＣ－ＩＩスーパートープおよびＭＨＣ－Ｅスーパートープの特定
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現トランスジェニックＴ細胞（ＣＡＲ－Ｔ細胞）は、いくつかのがん、特に白血病の治療に革命をもたらした。ほとんどの場合、ＣＡＲは、がん細胞の表面タンパク質（例、Ｂ細胞リンパ腫についてはＣＤ２０）を認識する抗体由来結合ドメインを含む。しかしながら、トランスジェニックＴ細胞の拒絶を回避するために、すべての患者に対して新しいＣＡＲ－Ｔ細胞が作製され、その結果、この治療は非常に費用がかかることになる。すべての患者において使用することができる市販のＣＡＲ－Ｔ細胞は開発中であるが、これまでのところ臨床使用について承認されているものはない。
ＣＡＲ－Ｔ細胞は、所与の抗原を発現するすべての細胞を排除することができるので（例えば、すべてのＢ細胞がＣＤ２０を発現する）、それらは、患者を免疫抑制状態にする、または免疫疾患合併症に罹患させるという副作用を有し得る。操作されたＴＣＲ－Ｔ細胞、すなわち、ＭＨＣに関連して腫瘍特異的ペプチドを認識するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）についてトランスジェニックであるＴ細胞により、前述の副作用を低減し得る別の治療アプローチが提供される。しかしながら、いかなる所与のＴＣＲでも、特異的ＭＨＣ／ペプチド複合体のみを認識することになる。ＭＨＣは多形性が高いので、操作されたＴＣＲの使用は、操作されたＴＣＲ－Ｔ細胞の厳しい制限である、正確なＭＨＣ対立遺伝子を有する個体に制限される。対照的に、ＭＨＣ－Ｅはヒト集団の中で非多形性であるため、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＴＣＲは「普遍的」である（すなわち、それはどのヒトにも使用され得る）。実際のところ、ＭＨＣ－Ｅは非ヒト霊長類とヒトとの間で保存されているため、ＲＭで誘発されたＴＣＲは、ヒトＭＨＣ－ＥおよびＨＬＡ－Ｅ／提示ペプチドを認識する。したがって、ＲＭで生成されたＭＨＣ－Ｅ拘束ＴＡＡ特異的ＴＣＲを使用して、普遍的な既製品化されたヒトＴＣＲ Ｔ細胞を生成することができる。そのようなＴ細胞を特定するための重要なステップは、ＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープの特定である。特定されたスーパートープペプチドを使用して、活性化Ｔ細胞中のＴＣＲを特定することができる。
ＵＳ１１ホモログＲｈ１８９の欠失により、「カノニカル」ＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答が誘発される、すなわち、ペプチド／ＭＨＣ－Ｉ複合体に対する高い親和性でのＭＨＣ－ＩおよびＴ細胞受容体を発現するＣＤ８＋Ｔ細胞への高親和性ペプチド結合の結果として、従来のワクチンとの関連において免疫優性であるペプチドがもたらされることが示されている。この特性を利用して、アカゲザルＰＡＰをコードし、そのうちの１つが活性Ｒｈ１８９をコードしない３つの異なる構築物：６８－１．２／ＰＡＰ（ＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発すると予想される）、６８－１／ＰＡＰ（ＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発すると予想される）、および６８－１／ＰＡＰΔＲｈ１８９（ＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅ拘束ＣならびにカノニカルＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発すると予想される）を調製した。
８匹の雄ＲＭに、６８－１．２／ＰＡＰ、６８－１／ＰＡＰ、または６８－１／ＰＡＰΔＲｈ１８９（ＵＳ１１）のいずれかを接種した。ＰＢＭＣ中のＣＤ４＋Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、示された時点でＴＮＦαおよびＩＦＮγについて重複ペプチドプールを使用してＩＣＳによって測定した（図７）。メモリーＴ細胞の中のＰＡＰ特異的Ｔ細胞の頻度が図７に示されており、免疫化ＲＭが高頻度のＴ細胞応答を誘発したことを示している。
次に、ＰＡＰ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の拘束分析を行った（図８）。個々のペプチドに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、ＰＡＰ配列に沿った四角として示す。ＭＨＣ－Ｉ特異的抗体Ｗ６／３２によってブロックされた（ペプチドＶＬ９によってはブロックされなかった）ペプチド応答を白色の四角で示す。ＭＨＣ－ＩＩ特異的ペプチドＣＬＩＰによってブロックされたペプチド応答をダッシュ入り四角で示す。ＭＨＣ－Ｅ特異的ペプチドによってブロックされたペプチド応答をドット入り四角で示す。予想通り、６８－１．２／ＰＡＰ免疫化動物由来のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｉによって排他的に拘束されたが、６８－１／ＰＡＰ免疫化動物の場合は、ＭＨＣ－ＩＩまたはＭＨＣ－Ｅによって拘束された。興味深いことに、Ｒｈ１８９／ＵＳ１１の欠失は、ウイルス抗原について観察されたように、「カノニカル」ＭＨＣ－Ｉ拘束応答のさらなる誘導をもたらさなかった（Ｈａｎｓｅｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１３）。しかしながら、この観察結果は、ＰＡＰが「中枢性」免疫寛容を受けていること、すなわち、高親和性ＴＣＲを発現するＣＤ８＋Ｔ細胞が胸腺における負の選択によって排除されることと一致している。この結果はまた、６８－１．２／ＰＡＰによって誘発されるＭＨＣ－Ｉ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞が「非カノニカル」であること、すなわち、サブドミナントエピトープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞であることを示唆している。
ＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束スーパートープを特定するために、６８－１ ＲｈＣＭＶ／ＰＡＰ、６８－１ ＲｈＣＭＶ／ＷＴ１（実施例１参照）、および６８－１ ＲｈＣＭＶ／ＭＳＮＬ（実施例１参照）で免疫化した６匹すべての動物について、拘束分析を実施した（図９、図１０、ブロッキング試薬の存在下で試験した後の６８－１ ＲｈＣＭＶ／ＷＴ１の結果を示す図である）。図９および図１０では、個々のペプチドに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答がＴＡＡ配列に沿った四角として示され、スーパートープのペプチドが括弧内に示されている。四角の色は、スーパートープがＭＨＣ－Ｅ拘束されているか、ＭＨＣ－ＩＩ拘束されているか、または拘束がまだ判定されていないかを示す。スーパートープのペプチドおよびそれらの配列を表１に列挙する。
Figure 2022536122000001
ＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープペプチドは、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＴＣＲを特定するために使用することができ、ＭＨＣ－ＩＩ拘束スーパートープペプチドは、ＭＨＣ－ＩＩ拘束ＴＣＲを特定するために使用することができる。
連邦政府による資金提供を受けた研究開発に関する声明
本発明は、国立がん研究所によって授与された助成金番号Ｒ ４４ ＣＡ １８０１７７－０３および国防総省によって授与された助成金番号Ｗ８１ＸＷＨ－１９－１－０３５８の下で政府の支援を受けてなされた。政府は、本発明においてある一定の権利を有する。

Claims (161)

  1. 対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる方法であって、腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量で腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターを対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、方法。
  2. 対象においてがんを治療する方法であって、腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量で腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、方法。
  3. 対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる際に使用するための前記腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターであって、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、ＣＭＶベクター。
  4. 対象におけるがんの治療で使用するための腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターであって、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、ＣＭＶベクター。
  5. 対象において腫瘍関連抗原に対する免疫応答を生じさせる際に使用するための医薬品の製造における前記腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターの使用であって、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、使用。
  6. がんの治療のための医薬品の製造における腫瘍関連抗原をコードするＣＭＶベクターの使用であって、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現せず、前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む、使用。
  7. 対象において腫瘍ウイルスにより引き起こされるがんを治療する方法であって、腫瘍ウイルス抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含み、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない、方法。
  8. 対象のがんの治療に使用するための腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターであって、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しないＣＭＶベクター。
  9. がんの治療のための医薬品の製造における腫瘍ウイルス抗原をコードするＣＭＶベクターの使用であって、前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質、および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない、使用。
  10. 前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  11. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  12. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  13. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  14. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  15. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  16. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  17. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  18. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  19. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  20. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  21. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  22. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  23. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む請求項１～６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  24. 前記ＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％が、ＭＨＣ－Ｅもしくはそのオーソログ、またはＭＨＣ－ＩＩもしくはそのオーソログによって拘束されている請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  25. 前記ＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、または少なくとも７５％が、ＭＨＣ－Ｅまたはそのオーソログによって拘束されている請求項２４に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  26. 前記ＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の１０％未満が、ＭＨＣ－クラスｌａまたはそのオーソログによって拘束されている請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  27. ＭＨＣ－Ｅによって拘束された前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の一部が、前記ベクターで免疫化された他の対象の少なくとも９０％が共有するエピトープを認識する請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  28. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、前立腺酸性ホスファターゼに由来するペプチドを含む請求項１～６および１０～２７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  29. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質に由来するペプチドを含む請求項１～６および１０～２７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  30. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号５に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項２８に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  31. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号６に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項２８に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  32. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号８に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項２９に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  33. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号９に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項２９に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  34. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号１３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項２９に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  35. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号１４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項２９に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  36. ＭＨＣ－ＩＩによって拘束された前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の一部が、前記ベクターで免疫化された他の対象の少なくとも９０％が共有するエピトープを認識する請求項２４に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  37. 前記エピトープが、前立腺酸性ホスファターゼに由来するペプチドを含む請求項３６に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  38. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号２に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項３７に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  39. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項３７に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  40. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項３７に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  41. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞によって認識される前記エピトープが、配列番号７に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項３７に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  42. ＭＨＣ－Ｅ腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
    （ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを第１の対象に投与するステップと、
    （ｂ）ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、
    （ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、
    （ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体腫瘍関連抗原を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法。
  43. ＭＨＣ－Ｅ腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
    （ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍関連抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを既に投与されている第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離するステップと、
    （ｂ）ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、
    （ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、
    （ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－Ｅ／腫瘍関連抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法。
  44. 前記組換えＣＭＶベクターが、組換えヒトＣＭＶベクターまたは組換えアカゲザルＣＭＶベクターである請求項４２～４３のいずれかに記載の方法。
  45. 前記腫瘍関連抗原が、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がんおよび子宮頸がんに関連する請求項４２～４４のいずれかに記載の方法。
  46. 前記腫瘍関連抗原が、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリンおよびＨｅｒ－２、またはそれらのオーソログである請求項４２～４５のいずれか一項記載の方法。
  47. 前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む請求項４６に記載の方法。
  48. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  49. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  50. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  51. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  52. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  53. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  54. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  55. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  56. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  57. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  58. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  59. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  60. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む請求項４７のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  61. 前記第１のＣＤ８＋Ｔ細胞が、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する請求項４２～６０のいずれか一項に記載の方法。
  62. 前記特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む請求項６１に記載の方法。
  63. 前記特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質エピトープに由来するペプチドを含む請求項６１に記載の方法。
  64. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号５に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項４２～６２のいずれか一項に記載の方法。
  65. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号６に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項４２～６２のいずれか一項に記載の方法。
  66. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号８に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項４２～６３のいずれか一項に記載の方法。
  67. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号９に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項４２～６３のいずれか一項に記載の方法。
  68. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号１３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項４２～６３のいずれか一項に記載の方法。
  69. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号１４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項４２～６３のいずれか一項に記載の方法。
  70. 前記第２のＣＤ８＋Ｔ細胞が、特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する請求項４２～６９のいずれか一項に記載の方法。
  71. 前記特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む請求項７０に記載の方法。
  72. 前記特異的ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質に由来するペプチドを含む請求項７０に記載の方法。
  73. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号５に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項７１に記載の方法。
  74. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号６に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項７１に記載の方法。
  75. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号８に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項７２に記載の方法。
  76. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号９に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項７２に記載の方法。
  77. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号１３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項７２に記載の方法。
  78. 前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、配列番号１４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項７２に記載の方法。
  79. 前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲがＤＮＡまたはＲＮＡの配列決定によって同定される請求項４２～７８のいずれか一項に記載の方法。
  80. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である請求項４２～７９のいずれか一項に記載の方法。
  81. 前記第１の対象および／または前記第２の対象がヒトまたは非ヒト霊長類である請求項４２～８０のいずれか一項に記載の方法。
  82. 前記第１の対象が非ヒト霊長類であり、前記第２の対象がヒトであり、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである請求項４２～８１のいずれか一項に記載の方法。
  83. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む請求項４２～８１のいずれか一項に記載の方法。
  84. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む請求項４２～８３のいずれか一項に記載の方法。
  85. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である請求項４２～８４のいずれか一項に記載の方法。
  86. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲがキメラＣＤ８＋ＴＣＲである請求項４２～８５のいずれか一項に記載の方法。
  87. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む請求項４２～８６のいずれか一項に記載の方法。
  88. 前記ＣＭＶベクターを前記第１の対象に投与するステップが、前記ＣＭＶベクターを前記第１の対象に静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、または経口投与することを含む請求項４２～８７のいずれか一項に記載の方法。
  89. がんを治療または予防するために、前記トランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与するステップをさらに含む請求項４２～８８のいずれか一項に記載の方法。
  90. 前記がんが、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がん、および子宮頸がんである請求項５４に記載の方法。
  91. ＭＨＣ－ＩＩ腫瘍ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の方法であって、
    （ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを第１の対象に投与するステップと、
    （ｂ）ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、
    （ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、
    （ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法。
  92. ＭＨＣ－ＩＩ腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
    （ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを生成するのに有効な量で、腫瘍抗原を発現する核酸を含み、活性ＵＬ１２８タンパク質、活性ＵＬ１３０タンパク質、活性ＵＬ１４６タンパク質および活性ＵＬ１４７タンパク質またはそれぞれのオーソログを発現しない組換えＣＭＶベクターを既に投与されている第１の対象からＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットを単離するステップと、
    （ｂ）ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の第１のセットから特定するステップと、
    （ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の第２のセットを単離するステップと、
    （ｄ）前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に機能し得るように連結されたプロモーターとを含む発現ベクターにより１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞の前記第２のセットをトランスフェクトして、ＭＨＣ－ＩＩ／腫瘍抗原ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成するステップと、を含む方法。
  93. 前記少なくとも１つの組換えＣＭＶベクターが、組換えヒトＣＭＶベクターまたは組換えアカゲザルＣＭＶベクターである請求項９１～９２のいずれかに記載の方法。
  94. 前記少なくとも１つの組換えＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８タンパク質またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１３０タンパク質またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４６またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４７またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＳ１１タンパク質またはそのオーソログを発現しない請求項９１または９３に記載の方法。
  95. ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、ＵＬ１４７、またはＵＳ１１をコードする核酸配列における突然変異が、点突然変異、フレームシフト突然変異、切断突然変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失のうちの１つ以上である請求項９１～９４のいずれか一項に記載の方法。
  96. 前記腫瘍関連抗原が、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がん、および子宮頸がんに関連する請求項９１～９５のいずれか一項に記載の方法。
  97. 前記腫瘍関連抗原が、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリン、およびＨｅｒ－２、またはそれぞれのオーソログである請求項９６に記載の方法。
  98. 前記腫瘍関連抗原が、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；またはＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む請求項９７に記載の方法。
  99. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  100. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  101. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  102. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  103. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  104. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  105. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  106. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  107. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  108. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  109. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  110. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  111. 前記腫瘍関連抗原が、前記アミノ酸配列ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）を含む請求項９８のいずれか一項に記載の方法、使用するためのＣＭＶベクター、または製造における使用。
  112. 前記第１のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する請求項９１～１１１のいずれか一項に記載の方法。
  113. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む請求項６２に記載の方法。
  114. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号２に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１３のいずれか一項に記載の方法。
  115. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１３のいずれか一項に記載の方法。
  116. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１３のいずれか一項に記載の方法。
  117. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号７に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１３のいずれか一項に記載の方法。
  118. 前記第２のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する請求項９１～１１７のいずれか一項に記載の方法。
  119. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、前立腺酸性ホスファターゼエピトープに由来するペプチドを含む請求項１１８に記載の方法。
  120. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号２に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１８のいずれか一項に記載の方法。
  121. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号３に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１８のいずれか一項に記載の方法。
  122. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号４に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１８のいずれか一項に記載の方法。
  123. 前記ＭＨＣ－ＩＩスーパートープが、配列番号７に対応するアミノ酸配列に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する請求項１１８のいずれか一項に記載の方法。
  124. 前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲがＤＮＡまたはＲＮＡの配列決定によって同定される請求項９１～１２３のいずれか一項に記載の方法。
  125. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である請求項９１～１２４のいずれか一項に記載の方法。
  126. 前記第１の対象および／または前記第２の対象がヒトまたは非ヒト霊長類である請求項９１～１２５のいずれか一項に記載の方法。
  127. 前記第２の対象がヒトまたは非ヒト霊長類である請求項９１～１２６のいずれか一項に記載の方法。
  128. 前記第１の対象が非ヒト霊長類であり、前記第２の対象がヒトであり、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである請求項９１～１２７のいずれか一項に記載の方法。
  129. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む請求項９１～１２７のいずれか一項に記載の方法。
  130. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む請求項９１～１２７のいずれか一項に記載の方法。
  131. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である請求項９１～１３０のいずれか一項に記載の方法。
  132. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲがキメラＣＤ８＋ＴＣＲである請求項９１～１３１のいずれか一項に記載の方法。
  133. 前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２βおよびＣＤＲ３βを含む請求項９１～１３２のいずれか一項に記載の方法。
  134. 前記ＣＭＶベクターを前記第１の対象に投与するステップが、前記ＣＭＶベクターを前記第１の対象に静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、または経口投与することを含む請求項９１～１３３のいずれか一項に記載の方法。
  135. がんを治療するために、前記トランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与することをさらに含む請求項９１～１３４のいずれか一項に記載の方法。
  136. 前記がんが、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がん、および子宮頸がんである請求項１３５に記載の方法。
  137. 請求項４２～１３６のいずれかに記載の方法によって生成されたＣＤ８＋Ｔ細胞。
  138. がんの治療または予防を必要とする対象においてがんを治療または予防する方法であって請求項１３７に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞を前記対象に投与することを含む方法。
  139. 対象のがんの治療または予防に使用するための請求項１３７に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。
  140. がんを治療または予防するための医薬品の製造における請求項１３７に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞の使用。
  141. 宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって請求項１３７に記載の前記ＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む方法。
  142. 対象において宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するのに使用するための請求項１３７に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。
  143. 宿主自己抗原に対する免疫応答を誘導するための医薬品の製造における請求項１３７に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞の使用。
  144. ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体によって認識され得る、長さが約８～約１５アミノ酸の単離されたＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩスーパートープペプチドであって、スーパートープが腫瘍関連抗原を含む、スーパートープペプチド。
  145. 前記ペプチドが、アミノ酸配列ＡＲＡＡＳＬＳＬＧＦＬＦＬＬＦ（配列番号２）；ＫＥＬＫＦＶＴＬＶＦＲＨＧＤＲ（配列番号３）；ＱＬＴＱＬＧＭＥＱＨＹＥＬＧＥ（配列番号４）；ＬＮＥＳＹＫＨＥＱＶＹＩＲＳＴ（配列番号５）；ＮＨＭＫＲＡＴＱＭＰＳＹＫＫＬ（配列番号６）；ＭＶＬＬＦＩＨＩＲＲＧＰＣＷＱ（配列番号７）；ＶＰＥＰＡＳＱＨＴＬＲＳＧＰＧ（配列番号８）；ＳＡＥＲＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧ（配列番号９）；ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫＷＥＬＥＡ（配列番号１０）；ＰＦＴＹＥＱＬＤＶＬＫＨＫＬＤ（配列番号１１）；ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１２）；ＬＱＧＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥＰＱ（配列番号１３）；およびＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳＬＧＥＱＱ（配列番号１４）からなる群から選択される請求項１４４に記載のスーパートープペプチド。
  146. 腫瘍関連抗原に対する免疫寛容の克服を必要とする対象において、腫瘍関連抗原に対する免疫寛容を克服する方法であって、前記腫瘍関連抗原を発現するサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）ベクターの有効量を前記対象に投与することを含む方法。
  147. 前記ＣＭＶベクターが、ヒトＣＭＶベクターまたはアカゲザルＣＭＶベクターである請求項１４６に記載の方法。
  148. 前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ１２８またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１３０またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４６またはそのオーソログを発現せず、活性ＵＬ１４７またはそのオーソログを発現しない請求項１４６に記載の方法。
  149. 前記ＣＭＶベクターが、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列に１つ以上の突然変異が存在するため、活性ＵＬ１２８、活性ＵＬ１３０、活性ＵＬ１４６、もしくは活性ＵＬ１４７、またはそれぞれのオーソログを発現しない請求項１４６に記載の方法。
  150. ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする前記核酸配列における前記突然変異が、点突然変異、フレームシフト突然変異、切断突然変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失のうちの１つ以上である請求項１４９に記載の方法。
  151. 前記ＣＭＶベクターがアカゲザルＣＭＶ株６８－１である請求項１４６～１４９のいずれかに記載の方法。
  152. 前記ＣＭＶベクターが、活性ＵＬ８２タンパク質またはそのオーソログを発現しない請求項１４６～１５１のいずれか一項に記載の方法。
  153. 前記ＣＭＶベクターが、ＵＬ８２をコードする前記核酸配列に１つ以上の突然変異が存在するため、活性ＵＬ８２タンパク質、またはそのオーソログを発現しない請求項１５２に記載の方法。
  154. ＵＬ８２をコードする前記核酸配列における前記突然変異が、点突然変異、フレームシフト突然変異、切断突然変異、およびＵＬ８２をコードする前記核酸配列のすべての欠失のうちの１つ以上である請求項１５３に記載の方法。
  155. 前記腫瘍関連抗原が、前立腺がん、腎臓がん、中皮腫、乳がん、および子宮頸がんに由来する請求項１４５～１５４のいずれか一項に記載の方法。
  156. 前記腫瘍関連抗原が、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリン、またはＨｅｒ－２である請求項１４５～１５５のいずれか一項記載の方法。
  157. 前記有効量が、前記対象において前記腫瘍関連抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量を含む請求項１４５～１５６のいずれか一項に記載の方法。
  158. 前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、または少なくとも５０％が、ＭＨＣ－Ｉまたはそのオーソログによって拘束される請求項１５６に記載の方法。
  159. 前記ＣＭＶベクターによって誘発された前記ＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み、前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｉ／腫瘍抗原由来ペプチド複合体を認識する請求項１５６に記載の方法。
  160. 前記ＣＤ８＋ＴＣＲがＤＮＡまたはＲＮＡの配列決定によって同定される請求項１５８または１５９に記載の方法。
  161. 前記対象がヒトである請求項１４５～１５９のいずれか一項に記載の方法。
JP2021572597A 2019-06-07 2020-06-05 腫瘍関連抗原特異的ｔ細胞応答 Pending JP2022536122A (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962858756P 2019-06-07 2019-06-07
US62/858,756 2019-06-07
US201962878511P 2019-07-25 2019-07-25
US62/878,511 2019-07-25
PCT/US2020/036481 WO2020247859A2 (en) 2019-06-07 2020-06-05 Tumor-associated antigen-specific t cell responses

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022536122A true JP2022536122A (ja) 2022-08-12
JPWO2020247859A5 JPWO2020247859A5 (ja) 2023-06-12

Family

ID=73653372

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021572597A Pending JP2022536122A (ja) 2019-06-07 2020-06-05 腫瘍関連抗原特異的ｔ細胞応答

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20220257740A1 (ja)
EP (1) EP3980071A4 (ja)
JP (1) JP2022536122A (ja)
CN (1) CN114206385A (ja)
WO (1) WO2020247859A2 (ja)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023115459A1 (zh) * 2021-12-23 2023-06-29 青岛华赛伯曼医学细胞生物有限公司 一种肿瘤抗原/mhc-i复合物及其制备方法和用途

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU1744600A (en) * 1998-11-24 2000-06-13 Thomas Jefferson University Detection of t cell stimulating tumor antigens
DK2207564T3 (en) * 2007-10-18 2017-01-16 Bavarian Nordic As USE OF VAT FOR TREATMENT OF PROSTATACANCES
US20110318380A1 (en) * 2008-10-01 2011-12-29 Dako Denmark A/S MHC Multimers in Cancer Vaccines and Immune Monitoring
PT3351636T (pt) * 2010-05-14 2020-09-24 Univ Oregon Health & Science Vectores de hcmv e rhcmv recombinantes codificadores de um antigénio heterólogo isolado a partir de um vírus paramyxoviridae e seus usos
AU2016219317A1 (en) * 2015-02-10 2017-08-31 Oregon Health & Science University Methods and compositions useful in generating non canonical CD8+ T cell responses
CA3005136A1 (en) * 2015-11-20 2017-05-26 Oregon Health & Science University Cmv vectors comprising microrna recognition elements
CA3028827A1 (en) * 2016-06-22 2017-12-28 Aeras Recombinant cytomegalovirus vectors as vaccines for tuberculosis
MA46588A (fr) * 2016-10-18 2021-04-14 Univ Oregon Health & Science Vecteurs de cytomégalovirus déclenchant des lymphocytes t limités par des molécules e de complexe majeur d'histocompatibilité

Also Published As

Publication number Publication date
WO2020247859A2 (en) 2020-12-10
US20220257740A1 (en) 2022-08-18
WO2020247859A3 (en) 2021-02-04
EP3980071A2 (en) 2022-04-13
CN114206385A (zh) 2022-03-18
EP3980071A4 (en) 2023-10-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11305015B2 (en) Cytomegalovirus vectors eliciting T cells restricted by major histocompatibility complex E molecules
Ji et al. Targeting human papillomavirus type 16 E7 to the endosomal/lysosomal compartment enhances the antitumor immunity of DNA vaccines against murine human papillomavirus type 16 E7-expressing tumors
US20200368333A1 (en) Cmv vectors comprising microrna recognition elements
Velders et al. Defined flanking spacers and enhanced proteolysis is essential for eradication of established tumors by an epitope string DNA vaccine
AU2016352572A1 (en) Arenavirus particles as cancer vaccines
KR20210050558A (ko) 질환의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 백신
US20220307054A1 (en) Modulation of t cell responses by ul18 of human cytomegalovirus
JP2022536122A (ja) 腫瘍関連抗原特異的ｔ細胞応答
JP2024505274A (ja) ワクチン接種中のｔ細胞プライミングの強化において使用されるウイルスコンストラクト
OA20580A (en) Modulation of T cell responses by UL18 of human cytomegalovirus.
EA046730B1 (ru) Модуляция т-клеточных ответов посредством ul18 цитомегаловируса человека
JP2005526511A (ja) ワクチン
JP2022535458A (ja) Ｂ型肝炎ウイルス特異的なｔ細胞応答
EA042630B1 (ru) Цитомегаловирусные векторы, выбирающие t-клетки, ограниченные по молекулам главного комплекса гистосовместимости e
OA19584A (en) Cytomegalovirus vectors eliciting T cells restricted by major histocompatibility complex E molecules

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220209

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230602

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20230602

A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20240529

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20240611

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20240830