JP2022527569A - 治療剤の標的化送達のための多価リガンドクラスター - Google Patents

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Abstract

標的化リガンドクラスターおよびそれらを調製する方法が記載される。標的化リガンドクラスターは、没食子酸のフェノール性ヒドロキシル基に結合している第１のリンカー、および第１のリンカーのそれぞれに結合している１つまたは複数の標的化リガンドを含み得る。標的化リガンドクラスターは、没食子酸のカルボン酸に結合している第２のリンカー、および第２のリンカーに結合している保護基、ホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのうちの少なくとも１つも含み得る。【選択図】図３

Description

関連する出願
本出願は、２０１９年３月２１日に出願した米国特許仮出願第６２／８２１，６２８号および２０１９年１２月２３日に出願した米国特許仮出願第６２／９５２，６０７号の米国特許法１１９条（ｅ）に基づく利益を主張し、それぞれの開示は全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、組成物、および治療分子送達におけるこれらの使用方法に部分的に関する。
オリゴヌクレオチドは、高分子量でポリアニオン性のクラスの化合物である。これらは、一般に、非常に低い膜透過性を有する。ゆえに標的リガンドは、ｉｎ ｖｉｖｏ送達組織特異性および細胞取り込みを向上させるために、多くの場合にオリゴヌクレオチド化合物にコンジュゲートされる。一部の場合には、多価リガンドクラスターが、標的化組織への送達を向上させるのに単一リガンドより有利である。例えば、多価Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）リガンドクラスターは、アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）に個別のＧａｌＮＡｃリガンドより有意に高い結合親和性を有し、ゆえに治療オリゴヌクレオチドを肝臓に送達するのに高い効率を有する。ＡＳＧＰＲは、肝細胞において有意に発現し、受容体エンドサイトーシスを介する効率的な取り込みを媒介することができる。Ｎ－アセチルガラクトサミンリガンドおよびリガンドクラスターは、肝細胞へのオリゴヌクレオチド薬物の送達を促進することができる。
本発明の態様によると、式２の標的化リガンドクラスターを含む化合物が提供される：
Figure 2022527569000002
［式中、リンカーＡは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＡの一方の末端はＧａｌＮＡｃ標的化リガンドに結合し、他方の末端はエーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し、リンカーＢは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＢの一方の末端はホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのリン原子に結合し、他方の末端はアミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し、Ｒａは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、イソプロピル基を含み、またはＲａは窒素原子を介してＲｂと連結して環を形成し、Ｒｂは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、イソプロピル基を含み、またはＲｂは窒素原子を介してＲａと連結して環を形成し、Ｒｃは、亜リン酸およびリン酸保護基、または２－シアノエチル基を含む］。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＡは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＡは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む。ある特定の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む。一部の実施形態では、リン酸保護基は、メチル、アリル、２－シアノエチル、４－シアノ－２－ブテニル、２－シアノ－１，１－ジメチルエチル、２－（トリメチルシリル）エチル、２－（Ｓ－アセチルチオ）エチル、２－（Ｓ－ピバロイルチオ）エチル、２－（４－ニトロフェニル）エチル、２，２，２－トリクロロエチル、２，２，２－トリクロロ－１，１－ジメチルエチル、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロピル、フルオレニル－９－メチル、２－クロロフェニル、４－クロロフェニル、および２，４－ジクロロフェニルのうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＡは、
Figure 2022527569000003
の１つまたは複数を含み、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である。ある特定の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、
Figure 2022527569000004
の１つまたは複数を含み、
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、Ｒ１は、Ｈ、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、シクロプロピルを含み、またはＲ１は、炭素原子を介してＲ２と連結して３～６員環を形成し、Ｒ２は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルを含み、またはＲ２は、炭素原子を介してＲ１と連結して３～６員環を形成する。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、
Figure 2022527569000005
の１つまたは複数を含み、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは没食子酸を含み、独立して選択されるリンカーＡの少なくとも１つは、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドも含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉである。
本発明の別の態様によると、上述の化合物の任意の実施形態を含む組成物が提供される。一部の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。
本発明の別の態様によると、上述の標的化リガンドクラスターの任意の実施形態を含む組成物が提供される。ある特定の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。
本発明の別の態様によると、式３の構造を含む化合物が提供される：
Figure 2022527569000006
［式中、Ｘは、酸素（Ｏ）および硫黄（Ｓ）のうちの少なくとも１つであり、Ｙは、Ｏ、Ｓ、およびＮＨのうちの少なくとも１つであり、リンカーＡは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＡの一方の末端はＧａｌＮＡｃ標的化リガンドに結合し、他方の末端はエーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し、リンカーＢは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＢの一方の末端はホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのリン原子に結合し、他方の末端はアミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合している。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、一本鎖ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、リボザイム、プラスミド、免疫刺激核酸、アンタゴミル、およびアプタマーのうちの少なくとも１つを含む。ある特定の実施形態では、独立して選択されるリンカーＡは、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＡは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む。ある特定の実施形態では、独立して選択されるリンカーＡは、
Figure 2022527569000007
の１つまたは複数を含み、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、
Figure 2022527569000008
の１つまたは複数を含み、
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、Ｒ１は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルを含み、またはＲ１は、炭素原子を介してＲ２と連結して３～６員環を形成し、Ｒ２は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルを含み、またはＲ２は、炭素原子を介してＲ１と連結して３～６員環を形成する。一部の実施形態では、独立して選択されるリンカーＢは、
Figure 2022527569000009
の１つまたは複数を含み、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である］。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは没食子酸を含み、独立して選択されるリンカーＡの少なくとも１つは、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。一部の実施形態では、化合物は、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉである。
本発明の別の態様によると、上述の化合物の任意の実施形態を含む組成物が提供される。一部の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。
本発明の別の態様によると、式１の標的化クラスターを含む化合物が提供される：
Figure 2022527569000010
［式中、ＴＬは、Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニルガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイルガラクトサミン、およびＮ－イソ－ブタノイルガラクトサミンが含まれるが、これらに限定されない１つまたは複数の標的化リガンドであり、１つまたは複数のＴＬは、同じ標的化リガンドクラスターの１つまたは複数の他のＴＬと異なっていてもよく、リンカーＡは独立して選択され、１つまたは複数の二官能性スペーサーを含み、リンカーＡの一方の末端は標的化リガンドに結合し、他方の末端はエーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し、リンカーＢは独立して選択され、二官能性スペーサーを含み、リンカーＢの一方の末端はホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドに結合し、他方の末端はアミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し、Ｗは、Ｈ、保護基、ホスホラミダイト、またはオリゴヌクレオチドである］。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＡ～Ｉの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＪ～ＷＷの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは没食子酸を含み、独立して選択されるリンカーＡの少なくとも１つは、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドも含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む。
本発明の別の態様によると、上述の化合物の任意の実施形態を含む組成物が提供される。一部の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。
本発明の別の態様によると、上述の標的化リガンドクラスターの任意の実施形態を含む組成物が提供される。ある特定の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。
本発明の別の態様によると、没食子酸に由来する構造モチーフ、没食子酸の各ヒドロキシル基のリンカー、および没食子酸のアミド基のリンカーを含む標的化リガンドクラスターが提供され、リンカーの少なくとも１つは、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。一部の実施形態では、標的化クラスターは、標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドも含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＡ～Ｉのうちの１つとして記載される化合物を含む。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つとして記載される化合物を含む。
本発明の別の態様によると、没食子酸のフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している１つまたは複数の独立して選択される第１のリンカーと、第１のリンカーのそれぞれに結合している１つまたは複数の独立して選択される標的化リガンドと、没食子酸のカルボン酸に結合している第２のリンカーと、第２のリンカーに結合している保護基およびホスホラミダイトのうちの少なくとも１つとを含む、標的化リガンドクラスターが提供される。一部の実施形態では、第１のリンカーは、エーテル結合を介してフェノール性ヒドロキシル基に結合している。一部の実施形態では、１つまたは複数の標的化リガンドは、Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニルガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイルガラクトサミン、およびＮ－イソ－ブタノイルガラクトサミンのうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、第２のリンカーは、アミド結合を介してカルボン酸に結合している。ある特定の実施形態では、第１のリンカーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、１つまたは複数のヘテロ原子、１つまたは複数の脂肪族複素環、１つまたは複数のヘテロアリール、１つまたは複数のアミノ酸、１つまたは複数のヌクレオチド、および１つまたは複数の糖類のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、第２のリンカーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、１つまたは複数のヘテロ原子、１つまたは複数の脂肪族複素環、１つまたは複数のヘテロアリール、１つまたは複数のアミノ酸、１つまたは複数のヌクレオチド、および１つまたは複数の糖類のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、３つの第１のリンカーは、没食子酸の異なるフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＡ～Ｉのうちの少なくとも１つを含む。ある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＪ～ＷＷのうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドも含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む。
本発明の別の態様によると、上述の標的化リガンドクラスターの任意の実施形態を含む組成物が提供される。ある特定の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。
本発明の別の態様によると、標的化リガンドクラスターを調製する方法であって、没食子酸にエステル化反応を実施して、没食子酸のｔｅｒｔ－ブチルエステルを含む第１の化合物を生成するステップと、ＳＮ２反応または光延反応を実施して、没食子酸エステルのフェノール性ヒドロキシ基にリンカーＡを結合して、第２の化合物を生成するステップと、第２の化合物にグリコシル化反応を実施して、第３の化合物を生成するステップと、第３の化合物に脱保護反応を実施して、第４の化合物を生成するステップと、第４の化合物にアミドカップリング反応を実施して、第５の化合物を生成するステップと、第５の化合物にリン酸化反応を実施するステップとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、本方法は、核酸分子を標的化リガンドクラスターに結合し、それによってリガンドクラスター／核酸複合体を形成するステップも含む。ある特定の実施形態では、リガンドクラスター／核酸複合体は、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む。
本発明の別の態様によると、標的化リガンドクラスター／核酸複合体が提供され、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、ａ）没食子酸のフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している１つまたは複数の独立して選択される第１のリンカーを含む標的化リガンドクラスター、ｂ）第１のリンカーのそれぞれに結合している１つまたは複数の独立して選択される標的化リガンド、ｃ）没食子酸のカルボン酸に結合している第２のリンカー、およびｄ）第２のリンカーに結合している保護基およびホスホラミダイトのうちの少なくとも１つを含み、標的化リガンドクラスターは核酸と結合して、標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する。一部の実施形態では、３つの第１のリンカーが、没食子酸の異なるフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している。一部の実施形態では、２つ以上の独立して選択される第１のリンカーがあり、１つまたは複数が、それぞれ他の第１のリンカーと同じである。ある特定の実施形態では、２つまたは３つの第１のリンカーが他の第１のリンカーと異なっている。一部の実施形態では、核酸はＲＮＡ分子、必要に応じてｓｉＲＮＡ分子を含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む。
本発明の別の態様によると、リガンドＡ～Ｉのいずれか１つとして記載される化合物が提供される。
本発明の別の態様によると、１つまたは複数のリガンドＡ～Ｉを含む組成物が提供される。ある特定の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体も含む。
本発明の別の態様によると、１つまたは複数のリガンドJ～ＷＷを含む組成物が提供される。一部の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体も含む。
本発明の別の態様によると、任意の上述の標的化リガンドクラスターの実施形態を含む組成物が提供され、標的化リガンドクラスターはｓｉＲＮＡにコンジュゲートされている。ある特定の実施形態では、この組成物は薬学的に許容される担体も含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む。一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡにコンジュゲートしている標的化リガンドクラスターは、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉのうちの１つを含む。
本発明の別の態様によると、細胞における標的遺伝子の発現を低減する方法であって、標的遺伝子を発現することができる細胞を、任意の上述の標的化リガンドクラスターの実施形態と接触させることを含み、標的化リガンドクラスターが、標的遺伝子の発現を低減するｓｉＲＮＡを含む方法が提供される。ある特定の実施形態では、細胞は、肝臓細胞、心臓細胞、腎臓細胞、免疫系細胞、筋肉細胞、または神経細胞である。一部の実施形態では、細胞はｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞である。一部の実施形態では、細胞はｉｎ ｖｉｖｏ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は対象の中にある。一部の実施形態では、対象はヒトである。一部の実施形態では、接触させることは、組成物を対象に投与することを含む。ある特定の実施形態では、細胞および／または対象における標的遺伝子の発現は、疾患または状態に関連し、標的遺伝子の発現を低減することは、疾患または状態を処置することである。
本発明の別の態様によると、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉの１つとして記載される化合物が提供される。
本発明の別の態様によると、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉの１つまたは複数を含み、薬学的に許容される担体も含む組成物が提供される。
リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 リガンドＡ～ＷＷとして記載される標的化リガンドクラスターの実施形態を提供する。Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの構造の実施形態が、リガンドＡ～リガンドＩとして確認される標的化リガンドクラスターで示されている。 ある特定の研究で使用された配列および配列修飾を示す。示されているセンス鎖は、ＡＡＣＵＣＡＡＵＡＡＡＧＵＧＣＵＵＵＧＡＡ（配列番号１）およびＬ＊ａａｃｕｃａＡｕＡＡＡｇｕｇｃｕｕｕｇ＊ａ＊ａ（配列番号２）である。示されているアンチセンス鎖は、ＵＵＣＡＡＡＧＣＡＣＵＵＵＡＵＵＧＡＧＵＵＵＣ（配列番号３）およびｕ＊Ｕ＊ｃａａＡｇＣＡｃｕｕｕＡｕＵｇａｇｕｕ＊ｕ＊ｃ（配列番号４）である。配列において、小文字は２’－ＭｅＯヌクレオチドを示し、大文字は２’－Ｆヌクレオチドを示し、星印（＊）はホスホロチオエートを示し、「Ｌ」は標的リガンドを示す。 ＰＢＳ処置群に正規化された、Ｍｉｔｏ－ＧａｌＮＡｃコンジュゲートｓｉＲＮＡ処置群における血漿中の残存ＦＸＩＩのパーセンテージを示す棒グラフを提供する。グラフは、３つの時点：ＧａｌＮａＣコンジュゲートｓｉＲＮＡ処置を投与した５日、１４日および３０日後の血漿中の残存ＦＸＩＩのパーセントを示す。投与された９個のＧａｌＮＡｃコンジュゲートｓｉＲＮＡは、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、およびＭＩＴＯ－Ｉであり、５日目（左側の棒）、１４日目（中央の棒）および３０日目（右側の棒）のデータがそれぞれ示されている。
本開示は、ｓｉＲＮＡが含まれるが、これに限定されないオリゴヌクレオチド剤を送達する足場として没食子酸を使用する化合物を提供する。本開示は、没食子酸を足場として使用する、目的の作用剤にコンジュゲートされ得る、および目的の作用剤の細胞への送達を促進することができる化合物を作製および使用する方法も提供する。本発明の一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターが調製され、核酸剤（または、他の目的の作用剤）に連結される。本明細書で使用される場合、用語「標的化リガンドクラスター／核酸複合体」は、核酸に連結されている本発明の標的化リガンドクラスターを意味し、その非限定的な例は、ｓｉＲＮＡである。本発明の一部の態様では、標的化リガンドクラスターは、本明細書に記載されているように調製され、１つまたは複数の核酸剤に連結され、こうして標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成し、この複合体が細胞と接触して、１つまたは複数の核酸剤が、接触された細胞内に送達される。本明細書で使用される場合、用語「標的化リガンドクラスター」および「リガンドクラスター」は、交換可能に使用され得る。本発明は、部分的には、没食子酸に由来する構造モチーフを有する化合物を含み、これはまた、没食子酸を足場として使用する化合物と本明細書において呼ばれる。本発明のそのような化合物のある特定の実施形態を１つまたは複数の目的の作用剤に連結して、目的の作用剤の細胞および／または対象への送達に使用することができる。一部の実施形態では、治療剤が、本発明の組成物および方法の実施形態を使用して細胞および／または対象に送達される。
定義
特定されない限り、以下の用語は以下の意味を有する。
「コンジュゲート」または「コンジュゲート基」は、オリゴヌクレオチドまたは他のオリゴマーに結合した原子または原子の基を意味する。一般にコンジュゲート基は、これらが結合している化合物の、薬物動態、薬物力学、結合、吸収、細胞分布、細胞取り込み、電荷、および／またはクリアランス特性が含まれるが、これらに限定されない１つまたは複数の特性を修飾する。
「連結された」は、２つの分子の接続に言及するとき、２つの分子が共有結合によって直接的もしくは間接的に連結していること、または２つの分子が非共有結合（例えば、水素結合もしくはイオン結合）を介して会合していることを意味する。化合物Ａが化合物Ｂに直接的に連結している例は、Ａ－Ｂと表すことができる。化合物Ａが化合物Ｂに間接的に連結している例は、Ａ－Ｃ－Ｂと表すことができ、ここで化合物Ａは化合物Ｃを介して化合物Ｂに間接的に連結している。２つ以上の中間化合物が、化合物の間接的な連結の状況に存在し得ることが理解される。一部の実施形態では、用語「連結された」が非共有結合を介した２つの分子の会合を指す場合、２つの異なる分子の会合は、生理学的に許容される緩衝剤（例えば、リン酸緩衝食塩水）中で１×１０－４Ｍ未満（例えば、１×１０－５Ｍ未満、１×１０－６Ｍ未満、または１×１０－７Ｍ未満）のＫｎを有する。
「核酸」は、モノマーヌクレオチドから構成される分子を指す。核酸は、リボ核酸（ＲＮＡ）、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、一本鎖核酸（ｓｓＤＮＡ）、二本鎖核酸（ｄｓＤＮＡ）、低分子干渉リボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、およびマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）を含む。核酸は、単一分子内にこれらのエレメントの任意の組合せも含み得る。核酸は、天然の核酸、非天然の核酸、または天然と非天然の核酸の組合せを含み得る。核酸は、ヌクレオチド配列またはポリヌクレオチドと本明細書において呼ばれることもある。
「オリゴマー」は、５個まで、１０個まで、１５個まで、２０個まで、または２０個を超えるヌクレオチドまたはヌクレオチド塩基対を含有するヌクレオチド配列である。一部の実施形態では、オリゴマーは、細胞内の発現標的核酸または標的遺伝子のコード配列に少なくとも部分的に相補的である核酸塩基配列を有する。一部の実施形態では、オリゴマーは、遺伝子を発現する細胞に送達されると、基礎遺伝子の発現を阻害することができる。遺伝子発現は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで阻害され得る。本発明の方法および複合体に含まれ得るオリゴマーの非限定的な例は、オリゴヌクレオチド、一本鎖オリゴヌクレオチド、一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、一本鎖ｓｉＲＮＡ、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、リボザイム、干渉ＲＮＡ分子、ダイサー基質、アンチセンスオリゴヌクレオチド、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、リボザイム、プラスミド、免疫刺激核酸、アンタゴミル、およびアプタマーである。
「オリゴヌクレオチド」は、連結したヌクレオチドのポリマーを意味し、ヌクレオチドはそれぞれ独立して修飾され得る、または非修飾であり得る。
「一本鎖オリゴヌクレオチド」は、一本鎖オリゴマーを意味し、本発明のある特定の実施形態では、一本鎖オリゴヌクレオチドは、標的ｍＲＮＡに少なくとも部分的に相補的である配列、すなわち、哺乳動物の生理学的条件下（または、同等のｉｎ ｖｉｔｒｏ条件下）で水素結合を介して標的ｍＲＮＡとハイブリダイズすることができる配列を含んでもよい。一部の実施形態では、一本鎖オリゴヌクレオチドは一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
「ｓｉＲＮＡ」は、低分子干渉ＲＮＡまたはサイレンシングＲＮＡである。ｓｉＲＮＡは、二本鎖ＲＮＡ分子のクラスであり、２０～２５個の（または、より短い）塩基対の長さであってもよく、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路内で作動するマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）に類似している。ｓｉＲＮＡは、転写後のｍＲＮＡを分解し、翻訳を防止することによって、ｓｉＲＮＡに相補的なヌクレオチド配列を有する特定の遺伝子の発現を干渉する。ｓｉＲＮＡは、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）を誘導してメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を切断することによって、遺伝子発現を停止させるように細胞内で作用する。
特定の官能基および化学用語の定義が、下記により詳細に記載される。本発明の目的において、化学エレメントは、Ｐｅｒｉｏｄｉｃ Ｔａｂｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ、ＣＡＳ版、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃｓ、第７５版、表紙裏に従って確認され、特定の官能基は、一般に、それに記載されたように定義される。加えて、有機化学の一般原則、ならびに特定の官能性部分および反応性は、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｔｈｏｍａｓ Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ、１９９９；ＳｍｉｔｈおよびＭａｒｃｈ Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第５版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、２００１；Ｌａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８９；Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ、Ｓｏｍｅ Ｍｏｄｅｒｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、１９８７に記載されている。
特に記述のない限り、本明細書に描写される構造は、１つまたは複数の同位体濃縮原子の存在だけが異なる化合物を含むことも意図される。例えば、重水素もしくはトリチウムによる水素の置き換え、または１３Ｃもしくは１４Ｃによる炭素の置き換えだけが異なる描写構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。そのような化合物は、例えば、分析ツールとして、生物学的アッセイにおけるプローブとして、または本発明による治療剤として有用であり得る。
式中、隣接して結合している部分の立体化学が特定されない場合は単結合である、非存在もしくは単結合である、および／または単もしくは二重結合である。
値の範囲が列挙される場合には、範囲内の各値および部分範囲が包含されることが意図される。例えば、「Ｃ１～６」は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ１～６、Ｃ１～５、Ｃ１～４、Ｃ１～３、Ｃ１～２、Ｃ２～６、Ｃ２～５、Ｃ２～４、Ｃ２～３、Ｃ３～６、Ｃ３～５、Ｃ３～４、Ｃ４～６、Ｃ４～５、およびＣ５～６を包含することが意図される。
用語「精製された」、「実質的に精製された」、および「単離された」は、本発明に有用な化合物が、化合物が天然の状態で通常会合する他の異なる化合物を含まないものであることを指し、これにより化合物は、所定の試料または組成物の少なくとも０．５重量％、１重量％、５重量％、１０重量％、２０重量％、５０重量％、７５重量％、８０重量％、８５重量％、９０重量％、９５重量％、９６重量％、９７重量％、９８重量％、９９重量％、９９．５重量％、９９．９重量％の質量を構成する。一実施形態では、これらの用語は、所定の試料または組成物の少なくとも９５重量％、９８重量％、９９重量％、または９９．９重量％の質量を構成する化合物を指す。
用語「脂肪族」は、飽和および不飽和、非芳香族、直鎖（例えば、非分岐鎖）、分岐鎖、非環式および環式（例えば、炭素環式）の炭化水素を両方とも含み、これらは必要に応じて１つまたは複数の官能基で置換されている。当業者に理解されるように、「脂肪族」には、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、およびシクロアルキニル部分が本明細書に含まれることが意図されるが、これらに限定されない。ゆえに用語「アルキル」には、直鎖、分岐鎖、および環式のアルキル基が含まれる。他の一般的用語、例えば「アルケニル」、「アルキニル」などに類似の慣用例が当てはまる。さらに、用語「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」などは、置換基および非置換基を両方とも包含する。ある特定の実施形態では、「脂肪族」は、１～２０個の炭素原子を有する脂肪族基（環式、非環式、置換、非置換、分岐鎖、または非分岐鎖）を示すために使用される。脂肪族基の置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「アルキル」は、単一水素原子の除去によって１～２０個の炭素原子を含有する炭化水素部分に由来する、飽和、直鎖、または分岐鎖炭化水素基を指す。一部の実施形態では、本発明に用いられるアルキル基は、１～２０個の炭素原子を含有する。別の実施形態では、用いられるアルキル基は、１～１５個の炭素原子を含有する。別の実施形態では、用いられるアルキル基は、１～１０個の炭素原子を含有する。別の実施形態では、用いられるアルキル基は、１～８個の炭素原子を含有する。別の実施形態では、用いられるアルキル基は、１～５個の炭素原子を含有する。アルキル基の例には、メチル（例えば、非置換メチル（Ｍｅ））、エチル（例えば、非置換エチル（Ｅｔ））、プロピル（例えば、非置換プロピル（Ｐｒ））、ｎ－プロピル、イソプロピル、ブチル（例えば、非置換ブチル（Ｂｕ））、ｎ－ブチル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｓｅｃ－ペンチル、イソ－ペンチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、ネオペンチル、ｎ－ヘキシル、ｓｅｃ－ヘキシル、ｎ－ヘプチル、ｎ－オクチル、ｎ－デシル、ｎ－ウンデシル、ドデシルなどが含まれるが、これらに限定されず、これらは１つまたは複数の置換基を有していてもよい。アルキル基の置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「アルケニル」は、単一水素原子の除去によって少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を有する直鎖または分岐鎖炭化水素部分に由来する一価基を示す。ある特定の実施形態では、本発明に用いられるアルケニル基は、２～２０個の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、本発明に用いられるアルケニル基は、２～１５個の炭素原子を含有する。別の実施形態では、用いられるアルケニル基は、２～１０個の炭素原子を含有する。なお他の実施形態では、アルケニル基は、２～８個の炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、アルケニル基は、２～５個の炭素原子を含有する。アルケニル基には、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１－メチル－２－ブテン－１－イルなどが含まれ、これらは１つまたは複数の置換基を有していてもよい。アルケニル基の置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「アルキニル」は、単一水素原子の除去によって少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を有する直鎖または分岐鎖炭化水素に由来する一価基を指す。ある特定の実施形態では、本発明に用いられるアルキニル基は、２～２０個の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、本発明に用いられるアルキニル基は、２～１５個の炭素原子を含有する。別の実施形態では、用いられるアルキニル基は、２～１０個の炭素原子を含有する。なお他の実施形態では、アルキニル基は、２～８個の炭素原子を含有する。なお他の実施形態では、アルキニル基は、２～５個の炭素原子を含有する。代表的なアルキニル基には、エチニル、２－プロピニル（プロパルギル）、１－プロピニルなどが含まれるが、これらに限定されず、これらは１つまたは複数の置換基を有していてもよい。アルキニル基の置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。例示的な炭素原子の置換基には、ハロゲン、－－ＣＮ、－－ＮＯ２、－－Ｎ３、－－ＳＯ２Ｈ、－－ＳＯ３Ｈ、－－ＯＨ、－－ＯＲａａ、－－ＯＮ（Ｒｂｂ）２、－－Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｎ（Ｒｂｂ）３ ＋Ｘ．－、－－Ｎ（ＯＲｃｃ）Ｒｂｂ、－－ＳＨ、－－ＳＲａａ、－－ＳＳＲｃｃ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＣＯ２Ｈ、－－ＣＨＯ、－－Ｃ（ＯＲｃｃ）２、－－ＣＯ２Ｒａａ、－－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＯＣＯ２Ｒａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、－－ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、－－ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、－－ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、－－Ｃ（ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＮＲｂｂＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、－－ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、－－ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＳＯ２Ｒａａ、－－ＳＯ２ＯＲａａ、－－ＯＳＯ２Ｒａａ、－－Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－Ｓｉ（Ｒａａ）３、－－ＯＳｉ（Ｒａａ）３－－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、－－Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ、－－ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲａａ、－－ＳＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、－－ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、－－ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、－－ＳＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｂｂ）２）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｂｂ）２）２、－－ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、－－ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｂｂ）２）２、－－Ｐ（Ｒｃｃ）２、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）２、－－Ｐ（Ｒｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－Ｐ（Ｒｃｃ）４、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）４、－－ＯＰ（Ｒｃｃ）２、－－ＯＰ（Ｒｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－ＯＰ（ＯＲｃｃ）２、－－ＯＰ（ＯＲｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－ＯＰ（Ｒｃｃ）４、－－ＯＰ（ＯＲｃｃ）４、－－Ｂ（Ｒａａ）２、－－Ｂ（ＯＲｃｃ）２、－－ＢＲａａ（ＯＲｃｃ）、Ｃ１～１０アルキル、Ｃ１～１０ペルハロアルキル、Ｃ２～１０アルケニル、Ｃ２～１０アルキニル、ヘテロＣ１～１０アルキル、ヘテロＣ２～１０アルケニル、ヘテロＣ２～１０アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１４員ヘテロシクリル、Ｃ６～１４アリール、および５～１４員ヘテロアリールが含まれるが、これらに限定されず、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基で独立して置換され、Ｘ－は対イオンであり、または炭素原子の２つのジェミナル水素は、基＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮ（Ｒｂｂ）２、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、＝ＮＮＲｂｂＳ（＝Ｏ）２Ｒａａ、＝ＮＲｂｂ、もしくは＝ＮＯＲｃｃで置き換えられ、それぞれの場合にＲａａは、Ｃ１～１０アルキル、Ｃ１～１０ペルハロアルキル、Ｃ２～１０アルケニル、Ｃ２～１０アルキニル、ヘテロＣ１～１０アルキル、ヘテロＣ２～１０アルケニル、ヘテロＣ２～１０アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１４員ヘテロシクリル、Ｃ６～１４アリール、および５～１４員ヘテロアリールから独立して選択され、または２つのＲａａ基は、連結して３～１４員ヘテロシクリルもしくは５～１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基で独立して置換され、それぞれの場合にｅは、水素、－－ＯＨ、－－ＯＲａａ、－－Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＣＮ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＣＯ２Ｒａａ、－－ＳＯ２Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＳＯ２Ｒｃｃ、－－ＳＯ２ＯＲｃｃ、－－ＳＯＲａａ、－－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、－－Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｃｃ）２）２、Ｃ１～１０アルキル、Ｃ１～１０ペルハロアルキル、Ｃ２～１０アルケニル、Ｃ２～１０アルキニル、ヘテロＣ１～１０アルキル、ヘテロＣ２～１０アルケニル、ヘテロＣ２～１０アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１４員ヘテロシクリル、Ｃ６～１４アリール、および５～１４員ヘテロアリールから独立して選択され、または２つのＲｂｂ基は、連結して３～１４員ヘテロシクリルもしくは５～１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基で独立して置換され、Ｘ－は対イオンであり、それぞれの場合にＲｃｃは、水素、Ｃ１～１０アルキル、Ｃ１～１０ペルハロアルキル、Ｃ２～１０アルケニル、Ｃ２～１０アルキニル、ヘテロＣ１～１０アルキル、ヘテロＣ２～１０アルケニル、ヘテロＣ２～１０アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１４員ヘテロシクリル、Ｃ６～１４アリール、および５～１４員ヘテロアリールから独立して選択され、または２つのＲｃｃ基は、連結して３～１４員ヘテロシクリルもしくは５～１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基で独立して置換され、それぞれの場合にＲｄｄは、ハロゲン、－－ＣＮ、－－ＮＯ２、－－Ｎ３、－－ＳＯ２Ｈ、－－ＳＯ３Ｈ、－－ＯＨ、－－ＯＲｅｅ、－－ＯＮ（Ｒｆｆ）２、－－Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－Ｎ（Ｒｆｆ）３ ＋Ｘ－、－－Ｎ（ＯＲｅｅ）Ｒｆｆ、－－ＳＨ、－－ＳＲｅｅ、－－ＳＳＲｅｅ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、－－ＣＯ２Ｈ、－－ＣＯ２Ｒｅｅ、－－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、－－ＯＣＯ２Ｒｅｅ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、－－ＮＲｆｆＣＯ２Ｒｅｅ、－－ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－Ｃ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、－－ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｒｅｅ、－－ＯＣ（＝

ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、－－Ｃ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－ＮＲｆｆＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－ＮＲｆｆＳＯ２Ｒｅｅ、－－ＳＯ２Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－ＳＯ２Ｒｅｅ、－－ＳＯ２ＯＲｅｅ、－－ＯＳＯ２Ｒｅｅ、－－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、－－Ｓｉ（Ｒｅｅ）３、－－ＯＳｉ（Ｒｅｅ）３、－－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｅｅ、－－Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、－－ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｅｅ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｅｅ）２、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６ペルハロアルキル、Ｃ２～６アルケニル、Ｃ２～６アルキニル、ヘテロＣ１～６アルキル、ヘテロＣ２～６アルケニル、ヘテロＣ２～６アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ６～１０アリール、５～１０員ヘテロアリールから独立して選択され、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｇｇ基で独立して置換され、または２つのジェミナルＲｄｄ置換基は、連結して＝Ｏもしくは＝Ｓを形成することができ、Ｘ－は対イオンであり、それぞれの場合にＲｅｅは、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６ペルハロアルキル、Ｃ２～６アルケニル、Ｃ２～６アルキニル、ヘテロＣ１～６アルキル、ヘテロＣ２～６アルケニル、ヘテロＣ２～６アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、Ｃ６～１０アリール、３～１０員ヘテロシクリル、および３～１０員ヘテロアリールから独立して選択され、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｇｇ基で独立して置換され、それぞれの場合にＲｆｆは、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６ペルハロアルキル、Ｃ２～６アルケニル、Ｃ２～６アルキニル、ヘテロＣ１～６アルキル、ヘテロＣ２～６アルケニル、ヘテロＣ２～６アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ６～１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールから独立して選択され、または２つのＲｆｆ基は、連結して３～１０員ヘテロシクリルもしくは５～１０員ヘテロアリール環を形成し、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、または５つのＲｇｇ基で独立して置換され、それぞれの場合にＲｇｇは、ハロゲン、－－ＣＮ、－－ＮＯ２、－－Ｎ３、－－ＳＯ２Ｈ、－－ＳＯ３Ｈ、－－ＯＨ、－－ＯＣ１～６アルキル、－－ＯＮ（Ｃ１～６アルキル）２、－－Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－Ｎ（Ｃ１～６アルキル）３ ＋Ｘ－、－－ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）２ ＋Ｘ－、－－ＮＨ２（Ｃ１～６アルキル）＋Ｘ－、－－ＮＨ３ ＋Ｘ－、－－Ｎ（ＯＣ１～６アルキル）（Ｃ１～６アルキル）、－－Ｎ（ＯＨ）（Ｃ１～６アルキル）、－－ＮＨ（ＯＨ）、－－ＳＨ、－－ＳＣ１～６アルキル、－－ＳＳ（Ｃ１～６アルキル）、－－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～６アルキル）、－－ＣＯ２Ｈ、－－ＣＯ２（Ｃ１～６アルキル）、－－ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１～６アルキル）、－－ＯＣＯ２（Ｃ１～６アルキル）、－－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）、－－ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ１～６アルキル）、－－Ｎ（Ｃ１～６アルキル）Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～６アルキル）、－－ＮＨＣＯ２（Ｃ１～６アルキル）、－－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）、－－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、－－Ｃ（＝ＮＨ）Ｏ（Ｃ１～６アルキル）、－－ＯＣ（＝ＮＨ）（Ｃ１～６アルキル）、－－ＯＣ（＝ＮＨ）ＯＣ１～６アルキル、－－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）、－－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、－－ＯＣ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）、－－ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ２、－－ＮＨＣ（ＮＨ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、－－ＮＨＳＯ２（Ｃ１～６アルキル）、－－ＳＯ２Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、－－ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）、－－ＳＯ２ＮＨ２、－－ＳＯ２Ｃ１～６アルキル、－－ＳＯ２ＯＣ１～６アルキル、－－ＯＳＯ２Ｃ１～６アルキル、－－ＳＯＣ１～６アルキル、－－Ｓｉ（Ｃ１～６アルキル）３、－－ＯＳｉ（Ｃ１～６アルキル）３、－－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）２、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ（Ｃ１～６アルキル）、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ２、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ（Ｃ１～６アルキル）、－－Ｃ（＝Ｓ）ＳＣ１～６アルキル、－－ＳＣ（＝Ｓ）ＳＣ１～６アルキル、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣ１～６アルキル）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｃ１－６アルキル）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｃ１～６アルキル）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣ１～６アルキル）２、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６ペルハロアルキル、Ｃ２～６アルケニル、Ｃ２～６アルキニル、ヘテロＣ１～６アルキル、ヘテロＣ２～６アルケニル、ヘテロＣ２～６アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、C６～１０アリール、３～１０員ヘテロシクリル、５～１０員ヘテロアリールから独立して選択され、または２つのジェミナルＲｇｇ置換基は、連結して＝Ｏもしくは＝Ｓを形成することができ、Ｘ－は対イオンである。
用語「アミノ」は、式（－－ＮＨ２）の基を指す。「置換アミノ」は、一置換アミン（－－ＮＨＲｈ）または二置換アミン（－－ＮＲｈ ２）のいずれかを指し、Ｒｈ置換基は、安定した部分の形成を生じる本明細書に記載されている任意の置換基である（例えば、適切なアミノ保護基、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、アミノ、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。ある特定の実施形態では、二置換アミノ基（－－ＮＲｈ ２）のＲｈ置換基は、５～６員複素環式環を形成する。
用語「アルコキシ」は、式（－－ＯＲｉ）の「置換ヒドロキシル」を指し、Ｒｉは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたアルキル基であり、酸素部分が親分子に直接結合している。
用語「アルキルチオキシ」は、式（－－ＳＲｒ）の「置換チオール」を指し、Ｒｒは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたアルキル基であり、硫黄部分が親分子に直接結合している。
用語「アルキルアミノ」は、式（－－ＮＲｈ ２）の「置換アミノ」を指し、Ｒｈは、独立して水素、または必要に応じて置換されている本明細書に定義されたアルキル基であり、窒素部分が親分子に直接結合している。
用語「アリール」は、３～２０個の環原子を有する安定した単環式または多環式環系を指し、その全ての環原子は炭素であり、置換されていても、非置換であってもよい。本発明のある特定の実施形態では、「アリール」は、１、２、または３つの芳香族環を有する単環式、二環式、または三環式Ｃ４～Ｃ２０芳香族環系を指し、フェニル、ビフェニル、ナフチルなどが含まれるが、これらに限定されず、これらは１つまたは複数の置換基を有していてもよい。アリールの置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「アリールアルキル」は、アリール置換アルキル基を指し、用語「アリール」および「アルキル」は、本明細書に定義されており、アリール基はアルキル基に結合し、これが親分子に結合している。例示的なアリールアルキル基は、ベンジルおよびフェネチルである。
用語「アリールオキシ」は、式（－－ＯＲｉ）の「置換ヒドロキシル」を指し、Ｒｉは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたアリール基であり、酸素部分が親分子に直接結合している。
用語「アリールアミノ」は、式（－－ＮＲｈ ２）の「置換アミノ」を指し、Ｒｈは、独立して水素、または必要に応じて置換されている本明細書に定義されたアリール基であり、窒素部分が親分子に直接結合している。
用語「アリールチオキシ」は、式（－－ＳＲｒ）の「置換チオール」を指し、Ｒｒは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたアリール基であり、硫黄部分が親分子に直接結合している。
用語「ハロ」および「ハロゲン」は、フッ素（フルオロ、－－Ｆ）、塩素（クロロ、－－Ｃｌ）、臭素（ブロモ、－－Ｂｒ）、およびヨウ素（ヨード、－－Ｉ）から選択される原子を指す。
用語「ヘテロ脂肪族」は、本明細書に定義された脂肪族部分を指し、飽和および不飽和、非芳香族、直鎖（例えば、非分岐鎖）、分岐鎖、非環式、環式（例えば、炭素環式）、または多環式の炭化水素を両方とも含み、これらは必要に応じて１つまたは複数の官能基で置換され、１つまたは複数の酸素、硫黄、窒素、リン、またはケイ素原子を、例えば、炭素原子の代わりに含有する。ある特定の実施形態では、ヘテロ脂肪族部分は、１つまたは複数の置換基により１つまたは複数の水素原子を独立して置き換えることによって置換される。当業者に理解されるように、「ヘテロ脂肪族」には、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、およびヘテロシクロアルキニル部分が本明細書に含まれることが意図されるが、これらに限定されない。ゆえに用語「ヘテロ脂肪族」には、用語「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルケニル」、「ヘテロアルキニル」などが含まれる。さらに、用語「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルケニル」、「ヘテロアルキニル」などは、置換された基および非置換である基の両方を包含する。ある特定の実施形態では、「ヘテロ脂肪族」は、１～２０個の炭素原子を有するヘテロ脂肪族基（環式、非環式、置換、非置換、分岐鎖、または非分岐鎖）を示すために使用される。ヘテロ脂肪族基の置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、スルフィニル、スルホニル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「ヘテロアルキル」は、本明細書に定義されたアルキル部分を指し、１つまたは複数の酸素、硫黄、窒素、リンまたはケイ素原子を、例えば、炭素原子の代わりに含有する。
用語「ヘテロアルケニル」は、本明細書に定義されたアルケニル部分を指し、１つまたは複数の酸素、硫黄、窒素、リンまたはケイ素原子を、例えば、炭素原子の代わりに含有する。
用語「ヘテロアルキニル」は、本明細書に定義されたアルキニル部分を指し、１つまたは複数の酸素、硫黄、窒素、リンまたはケイ素原子を、例えば、炭素原子の代わりに含有する。
用語「ヘテロアルキルアミノ」は、式（－－ＮＲｈ ２）の「置換アミノ」を指し、Ｒｈは、独立して水素、または必要に応じて置換されている本明細書に定義されたヘテロアルキル基であり、窒素部分が親分子に直接結合している。
用語「ヘテロアルキルオキシ」は、式（－－ＯＲｉ）の「置換ヒドロキシル」を指し、Ｒｉは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたヘテロアルキル基であり、酸素部分が親分子に直接結合している。
用語「ヘテロアルキルチオキシ」は、式（－－ＳＲｒ）の「置換チオール」を指し、Ｒｒは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたヘテロアルキル基であり、硫黄部分が親分子に直接結合している。
用語「カルボシクリル」または「炭素環式」は、３～１４個の環炭素原子（「Ｃ３～１４カルボシクリル」）および０個のヘテロ原子を非芳香族環系に有する非芳香族環式炭化水素基の基を指す。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、３～１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～１０カルボシクリル」）。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、３～８個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～８カルボシクリル」）。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、３～７個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～７カルボシクリル」）。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、３～６個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～６カルボシクリル」）。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、４～６個の環炭素原子を有する（「Ｃ４～６カルボシクリル」）。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、５～６個の環炭素原子を有する（「Ｃ５～６カルボシクリル」）。一部の実施形態では、カルボシクリル基は、５～１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ５～１０カルボシクリル」）。例示的なＣ３～６カルボシクリル基には、限定されることなく、シクロプロピル（Ｃ３）、シクロプロペニル（Ｃ３）、シクロブチル（Ｃ４）、シクロブテニル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、シクロペンテニル（Ｃ５）、シクロヘキシル（Ｃ６）、シクロヘキセニル（Ｃ６）、シクロヘキサジエニル（Ｃ６）などが含まれる。例示的なＣ３～８カルボシクリル基には、限定されることなく、上述のＣ３～６カルボシクリル基、ならびにシクロヘプチル（Ｃ７）、シクロヘプテニル（Ｃ７）、シクロヘプタジエニル（Ｃ７）、シクロヘプタトリエニル（Ｃ７）、シクロオクチル（Ｃ８）、シクロオクテニル（Ｃ８）、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル（Ｃ７）、ビシクロ［２．２．２］オクタニル（Ｃ８）などが含まれる。例示的なＣ３～１０カルボシクリル基には、限定されることなく、上述のＣ３～８カルボシクリル基、ならびにシクロノニル（Ｃ９）、シクロノネニル（Ｃ９）、シクロデシル（Ｃ１０）、シクロデセニル（Ｃ１０）、オクタヒドロ－１Ｈ－インデニル（Ｃ９）、デカヒドロナフタレニル（Ｃ１０）、スピロ［４．５］デカニル（Ｃ１０）などが含まれる。前述の例が例示しているように、ある特定の実施形態では、カルボシクリル基は、単環式（「単環式カルボシクリル」）または多環式（例えば、二環式系（「二環式カルボシクリル」）もしくは三環式系（「三環式カルボシクリル」）などの、縮合、架橋、もしくはスピロ環系を含む）のいずれかであり、飽和であり得る、あるいは１つまたは複数の炭素－炭素二重または三重結合を含有し得る。「カルボシクリル」には、上記に定義されたカルボシクリル環が１つまたは複数のアリールまたはヘテロアリール基に縮合し、結合点がカルボシクリル環にある環系も含まれ、そのような場合、炭素の数は、炭素環式環系の炭素の数を指定し続ける。特定されない限り、それぞれの場合にカルボシクリル基は、独立して非置換である（「非置換カルボシクリル」）、または１つもしくは複数の置換基で置換されている（「置換カルボシクリル」）。ある特定の実施形態では、カルボシクリル基は、非置換Ｃ３～１４カルボシクリルである。ある特定の実施形態では、カルボシクリル基は、置換Ｃ３～１４カルボシクリルである。
一部の実施形態では、「カルボシクリル」は、３～１４個の環炭素原子を有する単環式飽和カルボシクリル基（「Ｃ３～１４シクロアルキル」）である。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、３～１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～１０シクロアルキル」）。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、３～８個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～８シクロアルキル」）。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、３～６個の環炭素原子を有する（「Ｃ３～６シクロアルキル」）。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、４～６個の環炭素原子を有する（「Ｃ４～６シクロアルキル」）。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、５～６個の環炭素原子を有する（「Ｃ５～６シクロアルキル」）。一部の実施形態では、シクロアルキル基は、５～１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ５～１０シクロアルキル」）。Ｃ５～６シクロアルキル基の例には、シクロペンチル（Ｃ５）およびシクロヘキシル（Ｃ５）が含まれる。Ｃ３～６シクロアルキル基の例には、前述のＣ５～６シクロアルキル基、ならびにシクロプロピル（Ｃ３）およびシクロブチル（Ｃ４）が含まれる。Ｃ３～８シクロアルキル基の例には、前述のＣ３～６シクロアルキル基、ならびにシクロヘプチル（Ｃ７）およびシクロオクチル（Ｃ８）が含まれる。特定されない限り、それぞれの場合にシクロアルキル基は、独立して非置換である（「非置換シクロアルキル」）、または１つもしくは複数の置換基で置換されている（「置換シクロアルキル」）。ある特定の実施形態では、シクロアルキル基は、非置換Ｃ３～１４シクロアルキルである。ある特定の実施形態では、シクロアルキル基は、置換Ｃ３～１４シクロアルキルである。
用語「複素環式」、「複素環」、または「ヘテロシクリル」は、環式ヘテロ脂肪族基を指す。複素環式基は、非芳香族、部分不飽和、または完全飽和の３～１２員環系を指し、原子が３～８個のサイズの単環、ならびに二環式系および三環式系を含み、これらは、非芳香族環に縮合した芳香族５または６員のアリールまたはヘテロアリール基を含んでもよい。これらの複素環式環には、酸素、硫黄、および窒素から独立して選択される１～３個のヘテロ原子を有するものが含まれ、窒素および硫黄ヘテロ原子は、必要に応じて酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は、必要に応じて四級化されていてもよい。ある特定の実施形態では、複素環式という用語は、非芳香族５、６もしくは７員環、または多環式基を指し、環原子の少なくとも１個は、Ｏ、ＳおよびＮから選択されるヘテロ原子であり（窒素および硫黄ヘテロ原子は、必要に応じて酸化されていてもよい）、残りの環原子は炭素であり、基は、環原子のいずれかを介して分子の残りの部分に連結される。ヘテロシクリル基には、酸素、硫黄、および窒素から独立して選択される１～３個のヘテロ原子を有する縮合５、６、または７員環を含む二環式または三環式の基が含まれるが、これらに限定されず、（ｉ）各５員環は０～２つの二重結合を有し、各６員環は０～２つの二重結合を有し、各７員環は０～３つの二重結合を有し、（ｉｉ）窒素および硫黄ヘテロ原子は、必要に応じて酸化されていてもよく、（ｉｉｉ）窒素ヘテロ原子は、必要に応じて四級化されていてもよく、（ｉｖ）上記の複素環式環のいずれかは、アリールまたはヘテロアリール環に縮合されていてもよい。例示的な複素環には、アザシクロプロパニル、アザシクロブタニル、１，３－ジアザチジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、アゾカニル、チアラニル、チエタニル、テトラヒドロチオフェニル、ジチオラニル、チアシクロヘキサニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロプラニル、ジオキサニル、オキサチオラニル、モルホリニル、チオキサニル、テトラヒドロナフチルなどが含まれ、これらは１つまたは複数の置換基を有していてもよい。置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、スルフィニル、スルホニル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「ヘテロアリール」は、３～２０個の環原子を有する安定した芳香族単環式または多環式環系を指し、１個の環原子は、Ｓ、Ｏ、およびＮから選択され、０、１または２個の環原子は、Ｓ、Ｏ、およびＮから独立して選択される追加のヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素であり、基は、環原子のいずれかを介して分子の残りの部分に連結される。例示的なヘテロアリールには、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジニル（ピリジル）、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、テトラジニル、ピイロリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、インダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キノリジニル、シンノリニル、キナゾリニル、フタラジニル、ナフトリジニル、キノキサリニル、チオフェニル、チアナフテニル、フラニル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、チアゾリニル、イソチアゾリル、チアジアゾリニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアジオリル、オキサジアジオリルなどが含まれるが、これらに限定されず、これらは１つまたは複数の置換基を有していてもよい。ヘテロアリールの置換基には、安定した部分の形成を生じる、本明細書に記載されているいずれかの置換基が含まれるが、これらに限定されない（例えば、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、スルフィニル、スルホニル、オキソ、イミノ、チオオキソ、シアノ、イソシアノ、アミノ、アジド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、ハロ、脂肪族アミノ、ヘテロ脂肪族アミノ、アルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、アルキルアリール、アリールアルキル、脂肪族オキシ、ヘテロ脂肪族オキシ、アルキルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、脂肪族チオキシ、ヘテロ脂肪族チオキシ、アルキルチオキシ、ヘテロアルキルチオキシ、アリールチオキシ、ヘテロアリールチオキシ、アシルオキシなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。
用語「ヘテロアリールアミノ」は、（－－ＮＲｈ ２）の「置換アミノ」を指し、Ｒｈは、独立して水素、または必要に応じて置換されている本明細書に定義されたヘテロアリール基であり、窒素部分が親分子に直接結合している。
用語「ヘテロアリールオキシ」は、式（－－ＯＲｉ）の「置換ヒドロキシル」を指し、Ｒｉは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたヘテロアリール基であり、酸素部分が親分子に直接結合している。
用語「ヘテロアリールチオキシ」は、式（－－ＳＲｒ）の「置換チオール」を指し、Ｒｒは、必要に応じて置換されている本明細書に定義されたヘテロアリール基であり、硫黄部分が親分子に直接結合している。
用語「ヒドロキシル」または「ヒドロキシル」は、基－－ＯＨを指す。用語「置換ヒドロキシル」または「置換ヒドロキシル」は、その延長線上で、親分子に直接結合している酸素原子が、水素以外の基で置換されているヒドロキシル基を指し、－－ＯＲａａ、－－ＯＮ（Ｒｂｂ）２、－－ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、－－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＯＣＯ２Ｒａａ、－－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、－－ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、－－ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＯＳＯ２Ｒａａ、－－ＯＳｉ（Ｒａａ）３、－－ＯＰ（Ｒｃｃ）２、－－ＯＰ（Ｒｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－ＯＰ（ＯＲｃｃ）２、－－ＯＰ（ＯＲｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、および－－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｂｂ））２から選択される基が含まれ、ここでＸ－、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本明細書に定義された通りである。
用語「イミノ」は、安定した部分の形成を生じる、Ｒｆが水素、または本明細書に記載されている任意の置換基に相当する式（＝ＮＲｆ）の基を指す（例えば、適切なアミノ保護基、脂肪族、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アシル、アミノ、ヒドロキシル、アルキルアリール、アリールアルキルなどであり、それぞれ、さらに置換されていても、いなくてもよい）。ある特定の実施形態では、イミノは＝ＮＨを指し、Ｒｆは水素である。
用語「ニトロ」は、式（－－ＮＯ２）の基を指す。
用語「オキソ」は、式（＝Ｏ）の基を指す。
「保護基」は、当該技術においてよく知られており、全体が参照により本明細書に組み込まれるＧｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．ＷｕｔｓおよびＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、第４版、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、２００６に詳細に記載されているものが含まれる。
窒素原子は、原子価が許容する限り置換されても、非置換であってもよく、第一級、第二級、第三級および第四級窒素原子が含まれる。例示的な窒素原子の置換基には、水素、－－ＯＨ、－－ＯＲａａ、－－Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＣＮ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＣＯ２Ｒａａ、－－ＳＯ２Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＳＯ２Ｒｃｃ、－－ＳＯ２ＯＲｃｃ、－－ＳＯＲａａ、－－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、－－Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｃｃ）２）２、Ｃ１～１０アルキル、Ｃ１～１０ペルハロアルキル、Ｃ２～１０アルケニル、Ｃ２～１０アルキニル、ヘテロＣ１～１０アルキル、ヘテロＣ２～１０アルケニル、ヘテロＣ２～１０アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１４員ヘテロシクリル、Ｃ６～１４アリール、および５～１４員ヘテロアリールが含まれるが、これらに限定されず、またはＮ原子に結合した２つのＲｃｃ基は、連結して３～１４員ヘテロシクリルもしくは５～１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、または５つのＲｄｄ基で独立して置換され、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ、およびＲｄｄは、上記に定義された通りである。
ある特定の実施形態では、窒素原子に存在する置換基は、窒素保護基である（本明細書において、「アミノ保護基」とも呼ばれる）。窒素保護基には、－－ＯＨ、－－ＯＲａａ、－－Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＣＯ２Ｒａａ、－－ＳＯ２Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－ＳＯ２Ｒｃｃ、－－ＳＯ２ＯＲｃｃ、－－ＳＯＲａａ、－－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、－－Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、Ｃ１～１０アルキル（例えば、アラルキル、ヘテロアラルキル）、Ｃ２～１０アルケニル、Ｃ２～１０アルキニル、ヘテロＣ１～１０アルキル、ヘテロＣ２～１０アルケニル、ヘテロＣ２～１０アルキニル、Ｃ３～１０カルボシクリル、３～１４員ヘテロシクリル、Ｃ６～１４アリール、および５～１４員ヘテロアリール基が含まれるが、これらに限定されず、ここで各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アラルキル、アリール、およびヘテロアリールは、０、１、２、３、４、または５つのＲｄｄ基で独立して置換され、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ、およびＲｄｄは、本明細書に定義された通りである。窒素保護基は、当該技術においてよく知られており、参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、第３版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、１９９９に詳細に記載されているものが含まれる。
例えば、アミド基（例えば、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）などの窒素保護基には、ホルムアミド、アセトアミド、クロロアセトアミド、トリクロロアセトアミド、トリフルオロアセトアミド、フェニルアセトアミド、３－フェニルプロパンアミド、ピコリンアミド、３－ピリジルカルボキサミド、Ｎ－ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、ベンズアミド、ｐ－フェニルベンズアミド、ｏ－ニトフェニルアセトアミド、ｏ－ニトロフェノキシアセトアミド、アセトアセトアミド、（Ｎ’－ジチオベンジルオキシアシルアミノ）アセトアミド、３－（ｐ－ヒドロキシフェニル）プロパンアミド、３－（ｏ－ニトロフェニル）プロパンアミド、２－メチル－２－（ｏ－ニトロフェノキシ）プロパンアミド、２－メチル－２－（ｏ－フェニルアゾフェノキシ）プロパンアミド、４－クロロブタンアミド、３－メチル－３－ニトロブタンアミド、ｏ－ニトロシンアミド（nitrocinnamide）、Ｎ－アセチルメチオニン誘導体、ｏ－ニトロベンズアミド、およびｏ－（ベンゾイルオキシメチル）ベンズアミドが含まれるが、これらに限定されない。
カルバメート基（例えば、－－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａａ）などの窒素保護基には、メチルカルバメート、エチルカルバメート、９－フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、９－（２－スルホ）フルオレニルメチルカルバメート、９－（２，７－ジブロモ）フルオロエニルメチルカルバメート、２，７－ジ－ｔ－ブチル－［９－（１０，１０－ジオキソ－１０，１０，１０，１０－テトラヒドロチオキサンチル）］メチルカルバメート（ＤＢＤ－Ｔｍｏｃ）、４－メトキシフェナシルカルバメート（Ｐｈｅｎｏｃ）、２，２，２－トリクロロエチルカルバメート（Ｔｒｏｃ）、２－トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、２－フェニルエチルカルバメート（ｈＺ）、１－（１－アダマンチル）－１－メチルエチルカルバメート（Ａｄｐｏｃ）、１，１－ジメチル－２－ハロエチルカルバメート、１，１－ジメチル－２，２－ジブロモエチルカルバメート（ＤＢ－ｔ－ＢＯＣ）、１，１－ジメチル－２，２，２－トリクロロエチルカルバメート（ＴＣＢＯＣ）、１－メチル－１－（４－ビフェニリル）エチルカルバメート（Ｂｐｏｃ）、１－（３，５－ジ－ｔ－ブチルフェニル）－１－メチルエチルカルバメート（ｔ－Ｂｕｍｅｏｃ）、２－（２’－および４’－ピリジル）エチルカルバメート（Ｐｙｏｃ）、２－（Ｎ，Ｎ－ジシクロヘキシルカルボキサミド）エチルカルバメート、ｔ－ブチルカルバメート（ＢＯＣまたはＢｏｃ）、１－アダマンチルカルバメート（Ａｄｏｃ）、ビニルカルバメート（Ｖｏｃ）、アリルカルバメート（Ａｌｌｏｃ）、１－イソプロピルアリルカルバメート（Ｉｐａｏｃ）、シンナミルカルバメート（Ｃｏｃ）、４－ニトロシンナミルカルバメート（Ｎｏｃ）、８－キノリルカルバメート、Ｎ－ヒドロキシピペリジニルカルバメート、アルキルジチオカルバメート、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、ｐ－メトキシベンジルカルバメート（Ｍｏｚ）、ｐ－ニトベンジルカルバメート、ｐ－ブロモベンジルカルバメート、ｐ－クロロベンジルカルバメート、２，４－ジクロロベンジルカルバメート、４－メチルスルフィニルベンジルカルバメート（Ｍｓｚ）、９－アントリルメチルカルバメート、ジフェニルメチルカルバメート、２－メチルチオエチルカルバメート、２－メチルスルホニルエチルカルバメート、２－（ｐ－トルエンスルホニル）エチルカルバメート、［２－（１，３－ジチアニル）］メチルカルバメート（Ｄｍｏｃ）、４－メチルチオフェニルカルバメート（Ｍｔｐｃ）、２，４－ジメチルチオフェニルカルバメート（Ｂｍｐｃ）、２－ホスホニオエチルカルバメート（Ｐｅｏｃ）、２－トリフェニルホスホニオイソプロピルカルバメート（Ｐｐｏｃ）、１，１－ジメチル－２－シアノエチルカルバメート、ｍ－クロロ－ｐ－アシルオキシベンジルカルバメート、ｐ－（ジヒドロキシボリル）ベンジルカルバメート、５－ベンゾイソオキサゾリルメチルカルバメート、２－（トリフルオロメチル）－６－クロモニルメチルカルバメート（Ｔｃｒｏｃ）、ｍ－ニトロフェニルカルバメート、３，５－ジメトキシベンジルカルバメート、ｏ－ニトロベンジルカルバメート、３，４－ジメトキシ－６－ニトロベンジルカルバメート、フェニル（ｏ－ニトロフェニル）メチルカルバメート、ｔ－アミルカルバメート、Ｓ－ベンジルチオカルバメート、ｐ－シアノベンジルカルバメート、シクロブチルカルバメート、シクロヘキシルカルバメート、シクロペンチルカルバメート、シクロプロピルメチルカルバメート、ｐ－デシルオキシベンジルカルバメート、２，２－ジメトキシアシルビニルカルバメート、ｏ－（Ｎ，Ｎ－ジメチルカルボキサミド）ベンジルカルバメート、１，１－ジメチル－３－（Ｎ，Ｎ－ジメチルカルボキサミド）プロピルカルバメート、１，１－ジメチルプロピニルカルバメート、ジ（２－ピリジル）メチルカルバメート、２－フラニルメチルカルバメート、２－ヨードエチルカルバメート、イソボリンルカルバメート、イソブチルカルバメート、イソニコチニルカルバメート、ｐ－（ｐ’－メトキシフェニルアゾ）ベンジルカルバメート、１－メチルシクロブチルカルバメート、１－メチルシクロヘキシルカルバメート、１－メチル－１－シクロプロピルメチルカルバメート、１－メチル－１－（３，５－ジメトキシフェニル）エチルカルバメート、１－メチル－１－（ｐ－フェニルアゾフェニル）エチルカルバメート、１－メチル－１－フェニルエチルカルバメート、１－メチル－１－（４－ピリジル）エチルカルバメート、フェニルカルバメート、ｐ－（フェニルアゾ）ベンジルカルバメート、２，４，６－トリ－ｔ－ブチルフェニルカルバメート、４－（トリメチルアンモニウム）ベンジルカルバメート、ならびに２，４，６－トリメチルベンジルカルバメートが含まれるが、これらに限定されない。
スルホンアミド基（例えば、－－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒａａ）などの窒素保護基には、ｐ－トルエンスルホンアミド（Ｔｓ）、ベンゼンスルホンアミド、２，３，６－トリメチル－４－メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｒ）、２，４，６－トリメトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｂ）、２，６－ジメチル－４－メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｐｍｅ）、２，３，５，６－テトラメチル－４－メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｅ）、４－メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｂｓ）、２，４，６－トリメチルベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｓ）、２，６－ジメトキシ－４－メチルベンゼンスルホンアミド（ｉＭｄｓ）、２，２，５，７，８－ペンタメチルクロマン－６－スルホンアミド（Ｐｍｃ）、メタンスルホンアミド（Ｍｓ）、ベータ－トリメチルシリルエタンスルホンアミド（ＳＥＳ）、９－アントラセンスルホンアミド、４－（４’，８’－ジメトキシナフチルメチル）ベンゼンスルホンアミド（ＤＮＭＢＳ）、ベンジルスルホンアミド、トリフルオロメチルスルホンアミド、およびフェナシルスルホンアミドが含まれるが、これらに限定されない。
他の窒素保護基には、フェノチアジニル－（１０）－アシル誘導体、Ｎ’－ｐ－トルエンスルホニルアミノアシル誘導体、Ｎ’－フェニルアミノチオアシル誘導体、Ｎ－ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、Ｎ－アセチルメチオニン誘導体、４，５－ジフェニル－３－オキサゾリン－２－オン、Ｎ－フタルイミド、Ｎ－ジチアスクシンイミド（Ｄｔｓ）、Ｎ－２，３－ジフェニルマレイミド、Ｎ－２，５－ジメチルピロール、Ｎ－１，１，４，４－テトラメチルジシリルアザシクロペンタン付加物（ＳＴＡＢＡＳＥ）、５置換１，３－ジメチル－１，３，５－トリアザシクロヘキサン－２－オン、５置換１，３－ジベンジル－１，３，５－トリアザシクロヘキサン－２－オン、１置換３，５－ジニトロ－４－ピリドン、Ｎ－メチルアミン、Ｎ－アリルアミン、Ｎ－［２－（トリメチルシリル）エトキシ］メチルアミン（ＳＥＭ）、Ｎ－３－アセトキシプロピルアミン、Ｎ－（１－イソプロピル－４－ニトロ－２－オキソ－３－ピロリン（pyroolin）－３－イル）アミン、第四級アンモニウム塩、Ｎ－ベンジルアミン、Ｎ－ジ（４－メトキシフェニル）メチルアミン、Ｎ－５－ジベンゾスベリルアミン、Ｎ－トリフェニルメチルアミン（Ｔｒ）、Ｎ－［（４－メトキシフェニル）ジフェニルメチル］アミン（ＭＭＴｒ）、Ｎ－９－フェニルフルオレニルアミン（ＰｈＦ）、Ｎ－２，７－ジクロロ－９－フルオレニルメチレンアミン、Ｎ－フェロセニルメチルアミノ（Ｆｃｍ）、Ｎ－２－ピコリルアミノＮ’－オキシド、Ｎ－１，１－ジメチルチオメチレンアミン、Ｎ－ベンジリデンアミン、Ｎ－ｐ－メトキシベンジリデンアミン、Ｎ－ジフェニルメチレンアミン、Ｎ－［（２－ピリジル）メシチル］メチレンアミン、Ｎ－－（Ｎ’，Ｎ’－ジメチルアミノメチレン）アミン、Ｎ，Ｎ’－イソプロピリデンジアミン、Ｎ－ｐ－ニトロベンジリデンアミン、Ｎ－サリチリデンアミン、Ｎ－５－クロロサリチリデンアミン、Ｎ－（５－クロロ－２－ヒドロキシフェニル）フェニルメチレンアミン、Ｎ－シクロヘキシリデンアミン、Ｎ－（５，５－ジメチル－３－オキソ－１－シクロヘキセニル）アミン、Ｎ－ボラン誘導体、Ｎ－ジフェニルボロン酸（diphenylborinic acid）誘導体、Ｎ－［フェニル（ペンタアシルクロム－またはタングステン）アシル］アミン、Ｎ－銅キレート、Ｎ－亜鉛キレート、Ｎ－ニトロアミン、Ｎ－ニトロソアミン、アミンＮ－オキシド、ジフェニルホスフィンアミド（Ｄｐｐ）、ジメチルチオホスフィンアミド（Ｍｐｔ）、ジフェニルチオホスフィンアミド（Ｐｐｔ）、ジアルキルホスホルアミデート、ジベンジルホスホルアミデート、ジフェニルホスホルアミデート、ベンゼンスルフェンアミド、ｏ－ニトロベンゼンスルフェンアミド（Ｎｐｓ）、２，４－ジニトロベンゼンスルフェンアミド、ペンタクロロベンゼンスルフェンアミド、２－ニトロ－４－メトキシベンゼンスルフェンアミド、トリフェニルメチルスルフェンアミド、および３－ニトロピリジンスルフェンアミド（Ｎｐｙｓ）が含まれるが、これらに限定されない。
ある特定の実施形態では、酸素原子に存在する置換基は、酸素保護基である（本明細書において、「ヒドロキシル保護基」とも呼ばれる）。酸素保護基には、－－Ｒａａ、－－Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＣＯ２Ｒａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＳＯ２Ｒａａ、－－Ｓｉ（Ｒａａ）３、－Ｐ（Ｒｃｃ）２、－－Ｐ（Ｒｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）２、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、および－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｂｂ）２）２が含まれるが、これらに限定されず、ここで、Ｘ－、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本明細書に定義された通りである。酸素保護基は、当該技術においてよく知られており、参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、第３版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、１９９９に詳細に記載されているものが含まれる。例示的な酸素保護基には、メチル、メトキシルメチル（ＭＯＭ）、メチルチオメチル（ＭＴＭ）、ｔ－ブチルチオメチル、（フェニルジメチルシリル）メトキシメチル（ＳＭＯＭ）、ベンジルオキシメチル（ＢＯＭ）、ｐ－メトキシベンジルオキシメチル（ＰＭＢＭ）、（４－メトキシフェノキシ）メチル（ｐ－ＡＯＭ）、グアイアコールメチル（ＧＵＭ）、ｔ－ブトキシメチル、４－ペンテニルオキシメチル（ＰＯＭ）、シロキシメチル、２－メトキシエトキシメチル（ＭＥＭ）、２，２，２－トリクロロエトキシメチル、ビス（２－クロロエトキシ）メチル、２－（トリメチルシリル）エトキシメチル（ＳＥＭＯＲ）、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、３－ブロモテトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、１－メトキシシクロヘキシル、４－メトキシテトラヒドロピラニル（ＭＴＨＰ）、４－メトキシテトラヒドロチオピラニル、４－メトキシテトラヒドロチオピラニルＳ，Ｓ－ジオキシド、１－［（２－クロロ－４－メチル）フェニル］－４－メトキシピペリジン－４－イル（ＣＴＭＰ）、１，４－ジオキサン－２－イル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロ－７，８，８－トリメチル－４，７－メタノベンゾフラン－２－イル、１－エトキシエチル、１－（２－クロロエトキシ）エチル、１－メチル－１－メトキシエチル、１－メチル－１－ベンジルオキシエチル、１－メチル－１－ベンジルオキシ－２－フルオロエチル、２，２，２－トリクロロエチル、２－トリメチルシリルエチル、２－（フェニルセレニル）エチル、ｔ－ブチル、アリル、ｐ－クロロフェニル、ｐ－メトキシフェニル、２，４－ジニトロフェニル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ－メトキシベンジル、３，４－ジメトキシベンジル、ｏ－ニトロベンジル、ｐ－ニトロベンジル、ｐ－ハロベンジル、２，６－ジクロロベンジル、ｐ－シアノベンジル、ｐ－フェニルベンジル、２－ピコリル、４－ピコリル、３－メチル－２－ピコリルＮ－オキシド、ジフェニルメチル、ｐ，ｐ’－ジニトロベンズヒドリル、５－ジベンゾスベリル、トリフェニルメチル、アルファ－ナフチルジフェニルメチル、ｐ－メトキシフェニルジフェニルメチル、ジ（ｐ－メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（ｐ－メトキシフェニル）メチル、４－（４’－ブロモフェナシルオキシフェニル）ジフェニルメチル、４，４’，４’’－トリス（４，５－ジクロロフタルイミドフェニル）メチル、４，４’，４’’－トリス（レブリノイルオキシフェニル）メチル、４，４’，４’’－トリス（ベンゾイルオキシフェニル）メチル、３－（イミダゾール－１－イル）ビス（４’，４’’－ジメトキシフェニル）メチル、１，１－ビス（４－メトキシフェニル）－１’－ピレニルメチル、９－アントリル、９－（９－フェニル）キサンテニル、９－（９－フェニル－１０－オキソ）アントリル、１，３－ベンゾジチオラン－２－イル、ベンゾイソチアゾリルＳ，Ｓ－ジオキシド、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、ジメチルイソプロピルシリル（ＩＰＤＭＳ）、ジエチルイソプロピルシリル（ＤＥＩＰＳ）、ジメチルテキシルシリル、ｔ－ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔ－ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリベンジルシリル、トリ－ｐ－キシリルシリル、トリフェニルシリル、ジフェニルメチルシリル（ＤＰＭＳ）、ｔ－ブチルメトキシフェニルシリル（ＴＢＭＰＳ）、ホルメート、ベンゾイルホルメート、アセテート、クロロアセテート、ジクロロアセテート、トリクロロアセテート、トリフルオロアセテート、メトキシアセテート、トリフェニルメトキシアセテート、フェノキシアセテート、ｐ－クロロフェノキシアセテート、３－フェニルプロピオネート、４－オキソペンタノエート（レブリネート）、４，４－（エチレンジチオ）ペンタノエート（レブリノイルジチオアセタール）、ピバロエート、アダマントエート、クロトネート、４－メトキシクロトネート、ベンゾエート、ｐ－フェニルベンゾエート、２，４，６－トリメチルベンゾエート（メシトエート）、メチルカーボネート、９－フルオレニルメチルカーボネート（Ｆｍｏｃ）、エチルカーボネート、２，２，２－トリクロロエチルカーボネート（Ｔｒｏｃ）、２－（トリメチルシリル）エチルカーボネート（ＴＭＳＥＣ）、２－（フェニルスルホニル）エチルカーボネート（Ｐｓｅｃ）、２－（トリフェニルホスホニオ）エチルカーボネート（Ｐｅｏｃ）、イソブチルカーボネート、ビニルカーボネート、アリルカーボネート、ｔ－ブチルカーボネート（ＢＯＣまたはＢｏｃ）、ｐ－ニトロフェニルカーボネート、ベンジルカーボネート、ｐ－メトキシベンジルカーボネート、３，４－ジメトキシベンジルカーボネート、ｏ－ニトロベンジルカーボネート、ｐ－ニトロベンジルカーボネート、Ｓ－ベンジルチオカーボネート、４－エトキシ－１－ナフチル（napththyl）カーボネート、メチルジチオカーボネート、２－ヨードベンゾエート、４－アジドブチレート、４－ニトロ－４－メチルペンタノエート、ｏ－（ジブロモメチル）ベンゾエート、２－ホルミルベンゼンスルホネート、２－（メチルチオメトキシ）エチル、４－（メチルチオメトキシ）ブチレート、２－（メチルチオメトキシメチル）ベンゾエート、２，６－ジクロロ－４－メチルフェノキシアセテート、２，６－ジクロロ－４－（１，１，３，３－テトラメチルブチル）フェノキシアセテート、２，４－ビス（１，１－ジメチルプロピル）フェノキシアセテート、クロロジフェニルアセテート、イソブチレート、モノスクシノエート、（Ｅ）－２－メチル－２－ブテノエート、ｏ－（メトキシアシル）ベンゾエート、ａ－ナフトエート、ニトレート、アルキルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホスホロジアミデート、アルキルＮ－フェニルカルバメート、ボレート、ジメチルホスフィノチオイル、アルキル２，４－ジニトロフェニルスルフェネート、スルファート、メタンスルホネート（メシレート）、ベンジルスルホネート、およびトシレート（Ｔｓ）が含まれるが、これらに限定されない。
ある特定の実施形態では、硫黄原子に存在する置換基は、硫黄保護基である（本明細書において、「チオール保護基」とも呼ばれる）。硫黄保護基には、－－Ｒａａ、－－Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＣＯ２Ｒａａ、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、－－Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、－－Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、－－ＳＯ２Ｒａａ、－－Ｓｉ（Ｒａａ）３、－Ｐ（Ｒｃｃ）２、－－Ｐ（Ｒｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）２、－－Ｐ（ＯＲｃｃ）３ ＋Ｘ－、－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、－－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、および－－Ｐ（＝Ｏ）（Ｎ（Ｒｂｂ）２）２が含まれるが、これらに限定されず、ここで、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本明細書に定義された通りである。硫黄保護基は、当該技術においてよく知られており、参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、第３版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、１９９９に詳細に記載されているものが含まれる。
「対イオン」または「アニオン性対イオン」は、電子的中性を維持するために陽性荷電基に会合した陰性荷電基である。アニオン性対イオンは、一価であり得る（すなわち、１つの形式陰電荷を含む）。アニオン性対イオンは、多価であり（すなわち、２つ以上の形式陰電荷を含み）、例えば、二価または三価であり得る。対イオンの例には、ハロゲン化物イオン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ＮＯ３ －、ＣｌＯ４ －、ＯＨ－、Ｈ２ＰＯ４ －、ＨＣＯ３ －、ＨＳＯ４ －、スルホン酸イオン（例えば、メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、１０－ショウノウスルホン酸塩、ナフタレン－２－スルホン酸塩、ナフタレン－１－スルホン酸－５－スルホン酸塩、エタン－１－スルホン酸－２－スルホン酸塩など）、カルボン酸イオン（例えば、酢酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、グリセリン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩など）、ＢＦ４ －、ＰＦ４ －、ＰＦ６ －、ＡｓＦ６ －、ＳｂＦ６ －、Ｂ［３，５－（ＣＦ３）２Ｃ６Ｈ３］４］－、Ｂ（Ｃ６Ｆ５）４ －、ＢＰｈ４ －、Ａｌ（ＯＣ（ＣＦ３）３）４ －、およびカルボランアニオン（例えば、ＣＢ１１Ｈ１２ －または（ＨＣＢ１１Ｍｅ５Ｂｒ６）－）が含まれる。多価であり得る例示的な対イオンには、ＣＯ３ ２－、ＨＰＯ４ ２－、ＰＯ４ ３－、Ｂ４Ｏ７ ２－、ＳＯ４ ２－、Ｓ２Ｏ３ ２－、カルボン酸アニオン（例えば、酒石酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、マロン酸塩、グルコン酸塩、コハク酸塩、グルタル酸塩、アジピン酸塩、ピメリン酸塩、スベリン酸塩、アゼライン酸塩、セバシン酸塩、サリチル酸塩、フタル酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩など）およびカルボランが含まれる。
用語「互変異性体」または「互変異性」は、水素原子の少なくとも１回の形式的移動（formal migration）および原子価の少なくとも１回の変化（例えば、単結合から二重結合、三重結合から単結合、またはこれらの逆）によっても生じる２つ以上の相互転換可能な化合物を指す。互変異性体の正確な比は、温度、溶媒およびｐＨを含むいくつかの要素によって決まる。互変異性化（すなわち、互変異性対をもたらす反応）は、酸または塩基により触媒され得る。例示的な互変異性化には、ケト－エノール、アミド－イミド、ラクタム－ラクチム、エナミン－イミンおよびエナミン－（異なるエナミン）の互変異性化が含まれる。
用語「多形体」は、化合物（またはその塩、水和物もしくは溶媒和物）の結晶形態を指す。全ての多形体は、同じ元素組成を有する。異なる結晶形態は、通常、異なるＸ線回折パターン、赤外線スペクトル、融点、密度、硬度、結晶形状、光学および電気的特性、安定性、ならびに溶解性を有する。再結晶溶媒、結晶化速度、保管温度および他の要素によって、１種類の結晶形が優位を占めることがある。化合物の様々な多形体を、異なる条件下での結晶化により調製することができる。
次の略語が全体を通して使される：Ｎ－アセチル－ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）；薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）；液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）；高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）；ジクロロエタン（ＤＣＥ）；ジクロロメタン（ＤＣＭ）；トリメチルシリルトリフロオロメタンスルホネート（ＴＭＳＯＴｆ）；Ｎ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）；ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）；酢酸エチル（ＥＡ）；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）；アセトニトリル（ＡＣＮ）；２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）；ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）；孔径制御ガラス（controlled pore glass）（ＣＰＧ）；５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（ＥＴＴ）；フェニルアセチルジスルフィド（ＰＡＤＳ）；トリメチルアミン（ＴＥＡ）；ヘキサフルオロイソプロパノール（ＨＦＩＰ）；ヘキシルアミン（ＨＡ）；リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）；およびイオン対逆相（ＩＰ－ＲＰ）。
標的化リガンドクラスター
式１
本発明の少なくとも一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは式１の一般的な構造を有する：
Figure 2022527569000011
［式中、ＴＬは、これらに限定されないが：Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニルガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイルガラクトサミン、およびＮ－イソ－ブタノイルガラクトサミンを含む１つまたは複数の標的化リガンドであり；１つまたは複数のＴＬは、同じ標的化リガンドクラスターの１つまたは複数の他のＴＬと異なっていてもよく；
リンカーＡは１つまたは複数の二官能性スペーサーであり、リンカーＡの一方の末端は標的化リガンドに結合し、他方の末端は、エーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し；
リンカーＢは二官能性スペーサーであり、リンカーＢの一方の末端は、ホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドに結合し、他方の末端は、アミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し；
Ｗは、Ｈ、保護基、ホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドである］。
式２
少なくとも一部の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスターは、以下の式２の一般的な構造を含む：
Figure 2022527569000012
［式中、リンカーＡは少なくとも１つのスペーサーであり、リンカーＡの一方の末端はＧａｌＮＡｃ標的化リガンドに結合し、他方の末端は、エーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＡは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含んでいてもよく；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＡは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含み；
リンカーＢは少なくとも１つのスペーサーであり、リンカーＢの一方の末端は、ホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのリン原子に結合し、他方の末端は、アミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含んでいてもよく；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含み；
Ｒａは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキルであってもよいか、またはＲａは、窒素原子を介してＲｂと連結して環を形成していてもよく；少なくとも一部の実施形態では、Ｒａはイソプロピル基であってもよく；
Ｒｂは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキルであってもよいか、またはＲｂは、窒素原子を介してＲａと連結して環を形成していてもよく；少なくとも一部の実施形態では、Ｒｂはイソプロピル基であってもよく；少なくとも一部の実施形態では、Ｒｃは、ホスファイトおよびホスフェート保護基であってもよく；少なくとも一部の実施形態では、ホスフェート保護基は、メチル、アリル、２－シアノエチル、４－シアノ－２－ブテニル、２－シアノ－１，１－ジメチルエチル、２－（トリメチルシリル）エチル、２－（Ｓ－アセチルチオ）エチル、２－（Ｓ－ピバロイルチオ）エチル、２－（４－ニトロフェニル）エチル、２，２，２－トリクロロエチル、２，２，２－トリクロロ－１，１－ジメチルエチル、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロピル、フルオレニル－９－メチル、２－クロロフェニル、４－クロロフェニル、および２，４－ジクロロフェニルのうちの少なくとも１つを含んでいてもよく；少なくとも一部の実施形態では、Ｒｃは、２－シアノエチル基であってもよい］。
少なくとも一部の実施形態では、リンカーＡは：
Figure 2022527569000013
［式中、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよく；
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよい］
のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい。
少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは：
Figure 2022527569000014
［式中、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよく；
Ｒ１は、Ｈ、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、シクロプロピルであってもよいか、またはＲ１は、炭素原子を介してＲ２と連結して３～６員環を形成していてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルであってもよいか、またはＲ２は、炭素原子を介してＲ１と連結して３～６員環を形成してもよい］
のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい。
少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは：
Figure 2022527569000015
のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい
［式中、ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよく；
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよい］。
式３
少なくとも一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターを含む本発明の化合物は以下の式３の一般的な構造を含む：
Figure 2022527569000016
［式中、オリゴヌクレオチドは、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、一本鎖ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、リボザイム、プラスミド、免疫刺激核酸、アンタゴミル、およびアプタマーのうちの少なくとも１つを含み；
Ｘは、酸素（Ｏ）および硫黄（Ｓ）のうちの少なくとも１つであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓ、およびＮＨのうちの少なくとも１つであり；
リンカーＡは少なくとも１つのスペーサーであり、リンカーＡの一方の末端はＧａｌＮＡｃ標的化リガンドに結合し、他方の末端は、エーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＡは、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含んでいてもよく；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＡは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含み；
リンカーＢは少なくとも１つのスペーサーであり、リンカーＢの一方の末端は、ホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのリン原子に結合し、他方の末端は、アミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含んでいてもよく；少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む］。
少なくとも一部の実施形態では、リンカーＡは：
Figure 2022527569000017
［式中、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよく；
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよい］
のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい。
少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは：
Figure 2022527569000018
［式中、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよく；
Ｒ１は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルであってもよいか、またはＲ１は、炭素原子を介してＲ２と連結して３～６員環を形成していてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルであってもよいか、またはＲ２は、炭素原子を介してＲ１と連結して３～６員環を形成してもよい］
のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい。
少なくとも一部の実施形態では、リンカーＢは：
Figure 2022527569000019
［式中、ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよく；ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であってもよい］
のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい。
本発明の標的化リガンドクラスターに含まれる各リンカーＡは、独立して選択してもよく、（１）標的化リガンドクラスター中のリンカーＡは互いに全て同じであること、（２）標的化リガンドクラスター中のリンカーＡのうちの２つは互いに同じであり、１つはその２つと異なること；または（３）標的化リガンドクラスター中の３つのリンカーＡはそれぞれ他と異なることを意味することは理解されるであろう。２つ以上のリンカーＢを含む本発明の標的化リガンドクラスターにおいて、各リンカーＢは独立して選択され、（４）標的化リガンドクラスター中の全てのリンカーＢは互いに同じであること、（５）標的化リガンドクラスター中のリンカーＢのうちの２つまたはそれを超えるものは互いに同じであり、少なくとも１つのリンカーＢは、その２つまたはそれを超えるものとは異なること、または（６）標的化リガンドクラスター中の各リンカーＢは、標的化リガンドクラスター中の他の全てのリンカーＢとは異なることを意味することは理解されるであろう。「第１のリンカー」および「リンカーＡ」という用語は、本明細書において同じ意味で使用してもよい。「第２のリンカー」および「リンカーＢ」という用語は、本明細書において同じ意味で使用してもよい。本明細書で使用される場合、「標的化リガンドクラスター」および「リガンドクラスター」という用語は、区別せずに使用してもよい。
本発明のＧａｌＮＡｃホスホラミダイト標的化リガンドクラスターの実施形態は、標準的なオリゴヌクレオチド合成および脱保護方法を用いて使用してもよいことが現在実証されている。ＧａｌＮＡｃ標的化リガンドクラスターを含むオリゴヌクレオチドは、ＧａｌＮＡｃ基のアセチル保護基を除去する標準的な手順を使用して脱保護してもよい。本発明の方法のある特定の実施形態は、オリゴヌクレオチドを本発明のＧａｌＮＡｃ標的化リガンドクラスターにコンジュゲートさせること含む。本発明の方法の一部の実施形態では、保護されたＧａｌＮＡｃ標的化リガンドホスホラミダイトがコンジュゲーション方法において使用され、そのような方法は、効率的なコンジュゲートに使用することができ、高収率および高純度レベルのコンジュゲートされた生成物をもたらす。本明細書における様々な例は、ＧａｌＮＡＣホスホラミダイト標的化リガンドクラスターを含む。本発明の一部の実施形態では、標的化リガンドクラスターは、本明細書において示されるリガンドＡ～ＷＷに示すようなホスホラミダイトを含んでいてもよい。リガンドＡ、リガンドＢ、リガンドＣ、リガンドＤ、リガンドＥ、リガンドＦ、リガンドＧ、リガンドＨ、リガンドＩ、リガンドＪ、リガンドＫ、リガンドＬ、リガンドＭ、リガンドＮ、リガンドＯ、リガンドＰ、リガンドＱ、リガンドＲ、リガンドＳ、リガンドＴ、リガンドＵ、リガンドＶ、リガンドＷ、リガンドＸ、リガンドＹ、リガンドＺ、リガンドＪＪ、リガンドＫＫ、リガンドＬＬ、リガンドＭＭ、リガンドＮＮ、リガンドＯＯ、リガンドＰＰ、リガンドＱＱ、リガンドＲＲ、リガンドＳＳ、リガンドＴＴ、リガンドＵＵ、リガンドＶＶ、およびリガンドＷＷが本明細書において示される。これらの４０個のリガンドは、リガンドＡ～ＷＷと本明細書において称される場合があり、またはサブセットは、様々なリガンド番号を示すことによっておよび／もしくは１つまたは複数の個体リガンド番号を示すことによって参照してもよい。
本明細書において他の箇所で記載されているように、式１または式２の標的化リガンドクラスターは、オリゴヌクレオチド化合物に結合させてもよい。本発明の標的化リガンドクラスターおよびオリゴヌクレオチドの結合を記載する場合、「結合された」、「結合」、および「結合する」という用語は、用語：「コンジュゲートされた」、「コンジュゲート」、および「コンジュゲートする」；ならびに「連結された」、「連結している」、および「連結」とそれぞれ本明細書において区別せずに使用してもよい。
本発明の標的化リガンドクラスターの一部の実施形態は、リガンドＡ～ＷＷとして本明細書において示される（図１）。本発明の組成物および／または方法のある特定の実施形態では、標的化リガンドクラスターはリガンドＡ～ＷＷ（これは本明細書において「化合物Ａ～ＷＷ」とも称される場合がある）のうちの１つを含み、これが核酸分子におよび／または核酸を含む化合物に結合される。一部の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスターは少なくとも１つの核酸分子に結合され、得られた複合体は、本明細書において「標的化リガンドクラスター／核酸複合体」と称される場合がある。本発明の一部の実施形態では、標的化リガンドクラスター／核酸複合体中に含まれる核酸分子はオリゴヌクレオチドを含む。本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の一般式は式３として本明細書において示され、これはオリゴヌクレオチドに結合された標的化リガンドクラスターを示す。本発明のリガンドクラスター／核酸複合体の非限定的な例としては：ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、およびＭＩＴＯ－Ｉがある。
本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の一部の実施形態では、ＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡを含むｓｉＲＮＡを含む。本発明の標的化リガンドクラスターは、ＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡ以外のｓｉＲＮＡ分子にコンジュゲートされていてもよいことは理解されるであろう。ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｉＲＮＡに標的とされる遺伝子に基づいて、本発明の標的化リガンドクラスターとコンジュゲートさせるために選択してもよい。したがって、細胞および／または対象における例えば「タンパク質Ａ」の発現を減少させることが目的である場合、ｓｉＲＮＡを選択し、本発明の標的化リガンドクラスターに結合させ、細胞および／または対象に投与してもよい。選択されたｓｉＲＮＡはタンパク質Ａ遺伝子の発現を減少させることができるため、ｓｉＲＮＡの選択は少なくとも部分的であってもよく、その遺伝子は選択されたｓｉＲＮＡの「標的遺伝子」と称してもよい。本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の実施形態は、細胞および／または対象に投与され、機能性ｓｉＲＮＡを細胞および／または対象に送達することができ、結果として生じたｓｉＲＮＡの存在がｓｉＲＮＡの標的遺伝子の発現を減少させる。
１つまたは複数のＰＥＧリンカーを含む化合物
本発明の少なくとも一部の実施形態では、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は、本明細書の式１における「リンカーＡ」および／または「リンカーＢ」として使用してもよい。リンカーＡは、式１の単一の化合物が、単一のＰＥＧリンカーＡ、２つの異なるＰＥＧリンカーＡ、または３つの異なるＰＥＧリンカーＡを有することができるように個々に選択してもよい。さらに、様々な分子量のＰＥＧを使用してもよく、１つのＰＥＧリンカーＡは、同じ化合物の第２のＰＥＧリンカーＡと同じ（または類似の）または異なる分子量を有していてもよい。
上記の様々な例示化合物において示されるように（式１を参照として使用すると）、ＰＥＧは、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合するＰＥＧによって、ＴＬを没食子酸に結合させることができる。すなわち、本発明の少なくとも一部の実施形態では、酸素のみが、ＰＥＧと没食子酸の芳香族官能基との間に位置することができる。特定の非限定的な例では、本発明の少なくとも一部の実施形態では、窒素原子（または窒素含有官能基）は、ＰＥＧと没食子酸の芳香族官能基との間に位置することはできない。
合成
本開示による化合物の、本明細書において合成とも称される調製は様々なステップを含んでいてもよい。本発明の少なくとも一部の実施形態では、調製はエステル化反応から始まる。本発明の少なくとも一部の実施形態では、エステル化反応に続いて求核置換（ＳＮ２）反応、次いで続いてグリコシル化反応、次いで続いて（例えば、ｔ－ブチルエステルの）脱保護反応が行われる。本発明の少なくとも一部の実施形態では、脱保護反応に続いてアミドカップリング反応が行われる。本発明の少なくとも一部の実施形態では、アミドカップリング反応に続いてリン酸化反応が行われる。当業者であれば、前述の例示的な調製方法は、使用される出発および中間材料に応じて変更してもよいことを理解するであろう。
合成スキーム１
一般式２（以下および例１において示される）に基づいて本発明の化合物を調製するための方法の実施形態は「合成スキーム１」として同定される。合成スキーム１、ならびに足場として没食子酸を使用する標的化リガンドクラスターの実施形態を調製および使用するために使用してもよい追加の合成方法のさらなる詳細は、例１において提供される。本明細書における例は、本発明の標的化リガンドクラスターのある特定の実施形態を調製するための合成方法も示し、例えば、リガンドＡ～ＷＷを含む本発明のリガンドを調製するための合成方法の実施形態は、本明細書において例の項に示される。
合成スキーム１は、一般式１を有する標的化リガンドクラスターを調製するための合成手段を示す。合成スキーム１に示す化合物および中間体は、割り当てられたローマ数字（ｉ）～（ｖｉｉ）で同定される。化合物および／または中間体は、ローマ数字の代わりにアラビア数字を用いて本明細書において他の箇所で同定してもよく、ローマ数字（ｉ）～（ｖｉｉ）を有する化合物の特性の説明も、対応するアラビア数字が付された化合物および／または中間体にそれぞれ適用されることは理解されるであろう。
Figure 2022527569000020
合成スキーム２
一般式１を含む化合物を調製するための方法の実施形態は以下の合成において図示され、「スキーム２」として同定される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製しても、示された手順を使用して作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。詳細に関しては例を参照されたい。例えば、合成スキーム２において、化合物６は、合成スキーム１において示される「化合物（ｉｖ）」に対応し、化合物７は合成スキーム１において示される「化合物（ｖ）」に対応する。
Figure 2022527569000021
合成スキーム３
一般式１を含む化合物を調製するための方法の実施形態は以下の合成において図示され、「スキーム３」として同定される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製しても、示された手順を使用して作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。さらなる詳細に関しては例を参照されたい。合成スキーム３において、化合物６’は、合成スキーム１で示す「化合物（ｉｖ）」に対応し、化合物７’は、合成スキーム１において示される「化合物（ｖ）」に対応する。
Figure 2022527569000022
合成スキーム４
一般式１を含み、「化合物Ａ」として本明細書において示す化合物を調製するための方法の実施形態は以下の合成において図示され、「スキーム４」として同定される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製しても、示された手順を使用して作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。以下に示される合成スキーム４は化合物７から開始し、この化合物は、合成スキーム２で示すように調製してもよい。詳細に関しては例を参照されたい。
Figure 2022527569000023
調製および使用のある特定の要素
本発明の標的化リガンドクラスターのある特定の実施形態は、オリゴヌクレオチド剤を細胞、組織、および器官に送達するために調製し、使用してもよい。送達することができる作用剤の非限定的な例としては、治療剤、例えばｓｉＲＮＡがある。本発明の標的化リガンドクラスターを使用する送達方法は、本発明の標的リガンドクラスターにコンジュゲートされたｓｉＲＮＡおよび他の作用剤をｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで細胞に送達するために使用することができる。本発明の標的化リガンドクラスターは、作用剤、例えばこれらに限定されないが、核酸を含む作用剤を細胞に送達するための送達ビヒクルとして使用することができる。本明細書で使用される場合、「標的化リガンドクラスター／核酸複合体」という用語は、核酸を含む作用剤に連結された本明細書において記載される標的化リガンドクラスターを意味する。本発明の一部の実施形態では、核酸はｓｉＲＮＡである。
本発明の一部の態様では、標的化リガンドクラスターは、対象における細胞に作用剤を送達するために使用してもよい。標的化リガンドクラスター／核酸剤を対象に投与する手段は当技術分野で既知の方法を含んでいてもよい。非限定的な例として、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、直接注射することによってまたは注入ポンプを使用することによってｉｎ ｖｉｖｏで局所的に送達してもよい。本発明の一部の態様では、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は医薬組成物の状態であり、薬剤と称してもよい。一部の実施形態では、本発明の薬剤は、対象における疾患状況の症状を阻止するか、出現をモジュレートするか、処置するか、または軽減するのに有効な量で対象に投与される。
細胞および対象
本明細書で使用される場合、対象は、これらに限定されないが、イヌ、ネコ、ウマ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、齧歯動物、および霊長類、例えば、サルを含むヒトまたは脊椎哺乳動物を意味するべきである。したがって、本発明は、ヒトおよび非ヒト対象における疾患または状態を処置するために使用してもよい。例えば、本発明の方法および組成物は、獣医用途ならびにヒト用阻止および処置レジメンにおいて使用してもよい。ある特定の実施形態では、対象は家畜である。
「対象」という用語は任意の動物を指す。ある特定の実施形態では、対象は哺乳動物である。ある特定の実施形態では、対象はヒト（例えば、男性、女性、または子供）である。ヒトはどちらの性別であってもよく、発達の任意の段階であってもよい。ある特定の実施形態では、対象は処置されることになる状態または疾患と診断されている。他の実施形態では、対象は状態または疾患を発症するリスクがある。ある特定の実施形態では、対象は実験動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ブタ、または霊長類）である。実験動物は、遺伝子操作されていてもよい。
送達の評価
本発明のある特定の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は細胞に送達され、それと接触される。本発明の一部の実施形態では、接触される細胞は培養物中にあり、他の実施形態では、接触される細胞は対象中にある。本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体と接触させてもよい細胞のタイプとしては、これらに限定されるものではないが：肝臓細胞、筋肉細胞、心臓細胞、循環細胞、神経細胞、グリア細胞、脂肪細胞（ｆａｔ ｃｅｌｌｓ）、皮膚細胞、造血細胞、上皮細胞、免疫系細胞、内分泌細胞、外分泌細胞、内皮細胞、精子、卵母細胞、筋肉細胞、脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ）、腎臓細胞、肝細胞、または膵臓細胞がある。一部の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体と接触される細胞は肝臓細胞である。
本発明の一部の実施形態では、生物学的試料を得、本発明の標的化リガンドクラスターを使用して核酸の送達に関して評価してもよい。「生物学的試料」という用語は、組織試料（例えば、組織切片および組織の針生検材料）；細胞試料（例えば、細胞学的塗抹標本（例えば、Ｐａｐまたは血液塗抹標本）または顕微解剖によって得られた細胞の試料）；生物全体の試料（例えば、酵母または細菌の試料）；または細胞フラクション、フラグメントまたは小器官（例えば、細胞を溶解し、これらの構成要素を遠心分離または他の方法によって分離することで得られる）を含む任意の試料を指す。生物学的試料の他の例としては、血液、血清、尿、精液、糞便、脳脊髄液、間質液、粘膜、涙液、汗、膿、生検組織（例えば、外科的生検または針生検によって得られる）、乳頭吸引液、母乳、膣液、唾液、スワブ（例えば、頬側スワブ）、または最初の生物学的試料由来の生体分子を含む任意の材料がある。
投与および処置
本発明のある特定の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、対象において核酸を細胞に送達するための標的化リガンドクラスターの使用を含む方法において対象に投与してもよい。一部の実施形態では、核酸は、オリゴヌクレオチドであり、一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは阻害剤ＲＮＡ、または送達時にｓｉＲＮＡの標的遺伝子の発現を減少させるように選択されたｓｉＲＮＡ分子を含む。本発明のある特定の実施形態は、対象の細胞における遺伝子の発現と関連する疾患または状態を処置する方法であって、標的化リガンドクラスター／核酸複合体の投与が遺伝子の発現を減少させ、対象における疾患または状態を処置する方法を含む。本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の投与は、所定の方法を使用して行ってもよい。
本明細書で使用される場合、「投与する」、「投与すること」、または「投与」という用語は、埋込、吸収、摂取、注射、吸入、または本発明の化合物もしくはその医薬組成物を導入する別のものを指す。「処置」、「処置する」、および「処置すること」という用語は、本明細書において記載される「病理学的状態」（例えば、疾患、障害、もしくは状態、またはこれらの１つもしくは複数の徴候または症候）を逆転させること、軽減すること、発症を遅延させること、または進行を阻害することを指す。一部の実施形態では、処置は、疾患または状態の１つまたは複数の徴候または症候が発症した後かまたは観察された後に投与してもよい。他の実施形態では、処置は、疾患または状態の徴候または症候の非存在下で投与してもよい。例えば、処置は、症候の発症前に（例えば、症候歴を考慮しておよび／または遺伝的または他の感受性因子を考慮して）感受性が強い個体に投与してもよい。処置は、例えば再発を遅延させるかまたは阻止するために、症候が解消した後も続けてもよい。「状態」、「病理学的状態」、「疾患」、および「障害」という用語は区別せずに使用される。
投薬量
本開示の標的化リガンドクラスター／核酸複合体を使用して送達してもよい医薬および医薬組成物に関する投薬量レベルは、所定の実験により当業者によって判定してもよい。少なくとも一部の実施形態では、単位用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ体重の間のｓｉＲＮＡを含んでいてもよい。あるいは、用量は、１０ｍｇ／ｋｇから２５ｍｇ／ｋｇ体重、または１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ体重、または０．０５ｍｇ／ｋｇから５ｍｇ／ｋｇ体重、または０．１ｍｇ／ｋｇから５ｍｇ／ｋｇ体重、または０．１ｍｇ／ｋｇから１ｍｇ／ｋｇ体重、または０．１ｍｇ／ｋｇから０．５ｍｇ／ｋｇ体重、または０．５ｍｇ／ｋｇから１ｍｇ／ｋｇ体重であってもよい。臨床試験は治療的組成物に関する投薬量レベルを評価するために通常使用される。
本発明の標的化リガンドクラスターを含む医薬組成物は、無菌の注射可能な水性懸濁液または溶液であっても、凍結乾燥形態であってもよい。本開示の医薬組成物および医薬は、薬学的に有効な用量で対象に投与してもよい。
投与方法
本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体のための様々な投与経路が利用可能である。選択される特定の送達様式は、処置される特定の状態および治療的有効性に必要な投薬量に依存することになる。本発明の方法は、一般的に言えば、医学的に許容される任意の投与様式を使用して行ってもよく、臨床的に許容することができない有害効果をもたらすことなく有効なレベルの処置をもたらす任意の様式を意味する。本発明の一部の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、経口、経腸、経粘膜、経皮、および／または非経口経路で投与してもよい。「非経口」という用語は、皮下、髄腔内、静脈内、筋肉内、腹腔内、および胸骨内注射、または注入技術を含む。他の経路としては、これらに限定されるものではないが、（例えば、胃鼻管を介した）鼻、皮膚、膣、直腸、および舌下がある。本発明の送達経路は、髄腔内、脳室内、または頭蓋内を含んでいてもよい。本発明の一部の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、遅延放出マトリックス内に配置してもよく、マトリックスを対象に配置することによって投与してもよい。
本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、製剤の状態で投与してもよく、その製剤は、薬学的に許容される濃度の塩、緩衝剤、保存剤、適合する担体、アジュバント、および必要に応じて他の治療的成分を通常含み得る薬学的に許容される溶液の状態で投与される場合がある。本発明の方法によれば、標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、医薬組成物の状態で投与してもよい。一般的に、医薬組成物は、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体および薬学的に許容される担体を含む。薬学的に許容される担体は当業者に周知であり、所定の方法を使用して選択し、利用してもよい。本明細書で使用される場合、薬学的に許容される担体は、活性成分の生物活性の有効性、例えば、送達される核酸、例えば、それが向けられる疾患または状態を阻止および／または処置するためのｓｉＲＮＡの能力に干渉しない非毒性材料を意味する。
薬学的に許容される担体は、希釈剤、フィラー、塩、緩衝液、安定化剤、可溶化剤および当技術分野において周知の他の材料を含んでいてもよい。例示的な薬学的に許容される担体は、米国特許第５，２１１，６５７号に記載されており、他のものは当業者であれば既知である。そのような調製物は、塩、緩衝剤、保存剤、適合する担体、および必要に応じて他の治療剤を通常含んでいてもよい。薬において使用される場合、塩は薬学的に許容されるべきであるが、薬学的に許容されない塩は、薬学的に許容されるその塩を調製するために好都合に使用してもよく、発明の範囲から除外されるものではない。
「薬学的に許容される塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などを示すことなくヒトおよび他の動物の組織との接触における使用に好適な塩を指し、妥当な利点／リスク比率に見合ったものである。薬学的に許容される塩は当技術分野において周知である。例えば、Ｂｅｒｇｅらは、J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19において薬学的に許容される塩を詳細に記載しており、これは参照により本明細書に組み込まれるものとする。本発明の化合物の薬学的に許容される塩としては、好適な無機および有機の酸および塩基由来のものがある。塩は、化合物の最終的な単離および精製中にまたは遊離塩基の形態の適切な化合物と好適な酸とを反応させることによって個別に調製してもよい。薬理学的におよび薬学的に許容される塩としては、これらに限定されるものではないが、以下の酸：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、クエン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸などから調製されるものがある。また、薬学的に許容される塩は、アルカリ金属またはアルカリ土類塩、例えば、ナトリウム、カリウムまたはカルシウム塩として調製される場合がある。
代表的な酸付加物塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、Ｌ－アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、ジグルコン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、ゲンチシン酸塩、グルタル酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、ＤＬ－マンデル酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、ホスホン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ピログルタミン酸塩、コハク酸塩、スルホン酸塩、酒石酸塩、Ｌ－酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラトルエンスルホン酸塩（ｐ－トシル酸塩）、およびウンデカン酸塩がある。また、本明細書において開示される化合物における塩基性基は、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物；ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミル硫酸化物；デシル、ラウリル、ミリスチル、およびステリルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物；およびベンジルおよびフェネチル臭化物で四級化されていてもよい。治療上許容される塩を形成するために用いてもよい酸の例としては、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸；および有機酸、例えば、シュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸がある。
本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、医薬組成物、例えば本明細書において記載されるものの状態で投与してもよい。本発明の医薬組成物は、通常加溶媒分解反応によって溶媒と結合した本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体を含んでいてもよい。この物理的結合としては水素結合があり得る。従来の溶媒としては、水、メタノール、エタノール、酢酸、ＤＭＳＯ、ＴＨＦ、ジエチルエーテルなどがある。本発明の化合物は、例えば結晶形態の状態で調製してもよく、溶媒和物であってもよい。好適な溶媒和物としては、薬学的に許容される溶媒和物があり、さらに化学量論の溶媒和物と非化学量論の溶媒和物の両方を含む。ある特定の場合では、溶媒和物は、例えば、１つまたは複数の溶媒分子が結晶固体の結晶格子中に組み込まれている場合に単離することができるであろう。「溶媒和物」は溶液相と単離可能な溶媒和物の両方を包含する。代表的な溶媒和物としては、水和物、エタノール付加物（ethanolates）、およびメタノール付加物（methanolates）がある。
「水和物」という用語は、水と結合した化合物を指す。典型的には、化合物の水和物中に含まれる水分子の数は、水和物における化合物分子の数に対して明確な比率である。したがって、化合物の水和物は、例えば一般式ＲｘＨ２Ｏによって表してもよく、ここでＲは化合物であり、ｘは０を超える数である。所与の化合物は、例えば、一水和物（ｘは１である）、低水和物（ｘは０を超え、１より小さい数である、例えば、半水和物（Ｒ．０．５Ｈ２Ｏ））、および多水和物（ｘは１を超える数、例えば、二水和物（Ｒ．２Ｈ２Ｏ）および六水和物（Ｒ．６Ｈ２））を含む２つ以上のタイプの水和物が形成される場合がある。
投与
本発明の一部の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、組織に直接投与してもよい。直接的な組織投与は、直接注射することによってまたは他の当技術分野で既知の手段によって達成してもよい。本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は１回で投与しても、あるいは複数回の投与で投与してもよい。複数回投与される場合、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は異なる経路を介して投与してもよい。例えば、最初の（または最初の数回の）投与は、罹患した組織または臓器に直接的行ってもよく、同時に後の投与は、全身的に行ってもよい。
本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、全身的に投与することが望ましい場合、注射による、例えばボーラス注射または連続注入による非経口投与用に製剤化してもよい。注射用製剤は、単位投薬量形態で、例えば、保存剤が添加されているかまたは添加されていないかにかかわらず、アンプルでまたは複数回用量容器で提示してもよい。医薬組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁剤、溶液またはエマルションのような形態をとっていてもよく、製剤化用剤、例えば懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤を含んでいてもよい。
非経口投与のための調製物としては、無菌の水性または非水性溶液剤、懸濁剤、およびエマルション剤がある。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、例えばオリーブ油、および注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルである。水性担体としては、生理食塩水および緩衝媒体を含む、水、アルコール／水溶液、エマルションまたは懸濁剤がある。非経口ビヒクルとしては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸ナトリウム加リンゲル、または固定油がある。静脈内ビヒクルとしては、流体および栄養素補充液、電解質補充液（例えば、リンゲルデキストロースがベースのもの）などがある。保存剤および他の添加物、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート化剤、および不活性ガスなども存在していてもよい。低用量は、他の投与形態、例えば静脈内投与から得られることになる。対象における応答が、適用された最初の用量で不十分であるという場合、患者の耐容性が可能な範囲で高用量（または異なるより局在化された送達経路による事実上の高用量）を用いてもよい。１つまたは複数の本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の適切な全身性または局在性レベルを達成するために必要に応じて１日あたり複数回の用量を使用して、所望のレベルの核酸、例えば所望のレベルのｓｉＲＮＡを得てもよい。
非生分解性と生分解性の両方の高分子マトリックスは、１つまたは複数の本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体を細胞および／または対象に送達するために使用することができる。一部の実施形態では、マトリックスは、生分解性であってもよい。マトリックスポリマーは、天然または合成ポリマーであってもよい。ポリマーは、放出が所望される期間、一般的におおよそ数時間から数年またはそれより長い時間に基づいて選択してもよい。典型的には、数時間から３から１２か月の間の範囲の期間にわたって放出を使用することができる。ポリマーは必要に応じて、水中でその重量の最大約９０％を吸収することができるヒドロゲルの形態であり、さらに、必要に応じて多価イオンまたは他のポリマーと架橋されている。
本発明のある特定の実施形態では、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体は、高分子マトリックスが拡散されることによる、または分解されることによる生体内分解性埋込体を使用して送達してもよい。そのような使用のための例示的な合成ポリマーは当技術分野において周知である。生分解性ポリマーおよび非生分解性ポリマーを使用して、当業者に既知の方法を使用して本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体のうちの１つまたは複数を送達してもよい。そのような方法をまた使用して、１つまたは複数の本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体を送達して処置してもよい。追加の好適な送達系としては、徐放、遅延放出または持続放出送達系があり得る。そのような系は、本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の繰り返し投与を回避することができ、対象および医療提供者にとっての利便性が高まる。多くのタイプの放出送達系が利用可能であり、当業者であれば既知である（例えば、：米国特許第５，０７５，１０９号；同第４，４５２，７７５号；同第４，６７５，１８９号；同第５，７３６，１５２号；同第３，８５４，４８０号；同第５，１３３，９７４号；および同第５，４０７，６８６号を参照のこと（これらそれぞれの教示は参照により本明細書に組み込まれるものとする））。さらに、ポンプベースのハードウェア送達系を使用してもよく、その一部は埋込体に適応される。
長期持続放出埋込体の使用は、対象の予防的処置に、および本発明の標的化リガンドクラスターを使用して送達されるｓｉＲＮＡを用いて阻止および／または処置されることになる再発性疾患または状態を発症するリスクがある対象に特に好適であり得る。長期放出は、本明細書で使用される場合、埋込体が少なくとも３０日、６０日、９０日またはそれを超える日数の間治療的レベルの活性成分を送達するように構築され、配置されていることを意味する。長期持続放出埋込体は当業者であれば周知であり、上述の放出システムの一部を含む。
１つまたは複数の本発明の標的化リガンドクラスター／核酸複合体の治療用製剤は、所望の純度を有する標的化リガンドクラスター／核酸複合体と、必要に応じて薬学的に許容される担体、賦形剤または安定化剤［Remington’s Pharmaceutical Sciences 21stedition, (2006)］とを混合することによって凍結乾燥製剤または水性溶液の形態に調製して、保存してもよい。許容される担体、賦形剤、または安定化剤は、用いられる投薬量および濃度でレシピエントに対して非毒性であり、その許容される担体、賦形剤、または安定化剤としては、これらに限定されるものではないが：緩衝液、例えば、ホスフェート、シトレート、および他の有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリシン；単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノース、またはデキストリンを含む他の炭水化物；キレート化剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；および／または非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）がある。
本開示のｓｉＲＮＡコンジュゲート（本明細書において標的化リガンドクラスター／核酸複合体とも称される）は、医薬組成物として製剤化してもよい。医薬組成物は、単独でまたは他の作用剤と組み合わせて医薬として使用してもよい。本開示のｓｉＲＮＡコンジュゲートはまた、個別にまたは付随して（例えば、組合せ単位用量として）投与される他の治療的化合物と組み合わせて投与してもよい。少なくとも一部の実施形態では、本開示は、生理学的に／薬学的に許容される賦形剤、例えば、安定化剤、保存剤、希釈剤、緩衝剤などの中に本開示による１つまたは複数のｓｉＲＮＡコンジュゲートを含む医薬組成物を含む。
本発明の医薬組成物は、単独で、互いに組み合わせて、および／または他の薬物療法または疾患もしくは状態を呈する対象に投与される他の処置レジメンと組み合わせて投与してもよい。本発明の実施形態において使用される医薬組成物は、好ましくは無菌であり、核酸、例えばｓｉＲＮＡが向けられる疾患または状態を阻止または処置するために有効な量の標的化リガンドクラスター／核酸複合体を含む。
対象に投与される場合に疾患または状態を処置するのに十分な本発明の医薬組成物の用量は、異なるパラメーターに従って、特に使用される投与様式および対象の状況に従って選択してもよい。他の因子は所望の処置期間を含んでいてもよい。対象における応答が、適用された最初の用量で不十分である場合、患者の耐容性が可能な範囲で高用量（または異なるより局在化された送達経路による事実上の高用量）を用いてもよい。本発明の一部の実施形態では、所定の手段を使用して、例えば臨床試験において判定されている投薬量が使用される。
実施例
本明細書において記載される本発明をより深く理解することができるように、以下の例が示される。本出願において記載する実施例は、本明細書において提供される方法および組成物を例示するために提供され、その範囲を限定するとして決して解釈されるものではない。
スキーム１ 標的化リガンドクラスターの実施形態の合成
一般式２を含む標的化リガンドクラスター化合物を調製するための方法の実施形態は、「スキーム１」として同定される以下の合成において図示される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。以下の方法を使用して、一般式２を含む標的化リガンドクラスター化合物を調製した。
一般的な合成材料および方法
没食子酸（スキーム１における化合物（ｉ））から出発し、Leiro, V.; et al. J. Mater. Chem. B, 2017, 5, 4901に記載されている手順を使用して、没食子酸［化合物（ｉｉ）］のｔｅｒｔ－ブチルエステルを合成しており、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。
化合物（ｉｉｉ）は、化合物（ｉｉ）およびリンカーＡ誘導体を好適な脱離基と、標準的なＳＮ２反応条件（例えば、触媒量のＫＩの存在下および非プロトン性溶媒中、塩基としてのＫ２ＣＯ３）下で反応させることによって合成することができる。
化合物（ｉｖ）は、化合物（ｉｉｉ）を、ＧａｌＮＡｃ（例えば、（３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）－５－（アセトキシメチル）－２－メチル－３ａ，６，７，７ａ－テトラヒドロ－５Ｈ－ピラノ［３，２－ｄ］オキサゾール－６，７－ジイルジアセテート）由来のグリコシル化前駆体で、ルイス酸またはブレンステッド酸（例えば、１０－（Ｒ）－カンファースルホン酸）の存在下で処置することによって調製することができる。
ｔＢｕエステル基の脱保護は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）またはギ酸で処置することによって、ＧａｌＮＡｃ部分に影響を与えることなく行うことができる。したがって、化合物（ｖｉ）を酸（ＴＦＡまたはギ酸）で処置すると、化合物（ｖ）を得ることができる。
化合物（ｖ）とアミノアルコール（リンカーＢ）との間のアミドカップリング反応によって化合物（ｖｉ）を生成することができる。
最後に、ホスホラミド化合物（ｖｉｉ）は、化合物（ｖｉ）を、２－シアノエチルＮ，Ｎ－ジイソプロピルクロロホスホラミダイトおよび触媒量の１Ｈ－テトラゾールで処置することによって合成してもよい。化合物（ｖｉｉ）を使用して、標準的な固相オリゴヌクレオチド合成条件下でＧａｌＮＡｃリガンドクラスターコンジュゲートオリゴヌクレオチドを合成してもよい。
Figure 2022527569000024
スキーム２－標的化リガンドクラスターの実施形態の合成および特性評価
一般式１を含む化合物を調製するための方法の実施形態は以下の合成において図示され、「スキーム２」として同定される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。以下の方法を使用して一般式１を含む標的化リガンドクラスター化合物を調製した。
Figure 2022527569000025
合成スキーム３－標的化リガンドクラスターの実施形態の合成および特性評価
一般式１を含む化合物を調製するための方法の実施形態は以下の合成において図示され、「スキーム３」として同定される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。以下の方法を使用して一般式１を含む標的化リガンドクラスター化合物を調製した。
Figure 2022527569000026
合成スキーム４－標的化リガンドクラスターの実施形態の合成および特性評価
以下の合成スキームを使用して、一般式１を含む化合物「Ａ」の化合物の実施形態を調製した。合成スキーム４は「スキーム４」として同定される。出発材料および中間体は、市販の供給源から購入しても、既知の手順から作製してもよいか、または他に示される。反応スキームのステップを行う順序は変更してもよい。以下の方法を使用して一般式１を含む標的化リガンドクラスター化合物を調製した。
Figure 2022527569000027
化合物２の調製
Figure 2022527569000028
ＤＣＥ（２５０ｍＬ）中の化合物１（２５．０ｇ、６４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＭＳＯＴｆ（１７．１ｇ、７７．１ｍｍｏｌ、１３．９ｍＬ）をＮ２雰囲気下０℃で滴加した。混合物を２０℃で４０時間撹拌した。ＴＬＣによって、化合物１はほぼ残っておらず、１つの新規のスポットが形成されたことが示された（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５１）。反応物を、ＮａＨＣＯ３（１０００ｍＬ）を添加することによってクエンチし、ＤＣＭ（１０００ｍＬ＊３）で抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１００／１から６０／１）で精製して、化合物２を得た。この反応をさらに３回繰り返し、これらの４回のランからの最終生成物を合わせて、合計４５．０グラムの化合物２（１３７ｍｍｏｌ、収率５３．２％）を淡黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 5.97 (d, J=7.03 Hz, 1 H), 5.43 (t, J=3.01 Hz, 1 H), 4.89 (dd, J=7.40, 3.39 Hz, 1 H), 4.18 - 4.24 (m, 1 H), 4.14 - 4.18 (m, 1 H), 4.05 - 4.11 (m, 1 H), 3.97 (td, J=7.15, 1.25 Hz, 1 H), 2.08 - 2.11 (m, 3 H), 2.04 (s, 6 H), 2.03 (d, J=1.25 Hz, 3 H).
化合物４の調製
Figure 2022527569000029
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の、化合物３（２０．０ｇ、１１８ｍｍｏｌ、４７．６ｍＬ）、２－メチルプロパン－２－オール（１７．４ｇ、２３５ｍｍｏｌ、２２．５ｍＬ）の溶液に、ＤＩＣ（２２．３ｇ、１７６ｍｍｏｌ、２７．３ｍＬ）を添加し、０℃で１時間撹拌した。次いでＤＭＡＰ（１．４４ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、さらに２０℃で１７時間撹拌した。ＴＬＣ（酢酸エチル：石油エーテル＝１：１、Ｒｆ＝０．２５）によって、大部分の化合物３は消費され、極性が低い１つの主要な新規のスポットが検出されたことが示された。反応混合物を、ＨＣｌ（１Ｎ、１００ｍＬ）を添加することによって中和し、次いでＥＡ（５００ｍＬ＊３）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶出液は０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製して、化合物４（９．００ｇ、３９．８ｍｍｏｌ、収率３３．８％）を淡黄色液状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.18 (br s, 2 H), 8.83 (br s, 1 H), 6.88 (s, 2 H), 1.49 (s, 9 H).
化合物５の調製
Figure 2022527569000030
ＤＭＳＯ（６０．０ｍＬ）中の化合物４（２．００ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４．８９ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）、およびＫＩ（４４０ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を７０℃に加熱した。次いで２－（２－（２－ブロモエトキシ）エトキシ）エタン－１－オール（７．５３ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、混合物をＮ２雰囲気下、７０℃で４時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、所望のｍ／ｚ（計算値ＭＷ：６２２．７０、実測値ｍ／ｚ：５６７．２［（Ｍ－ｔ－Ｂｕ）＋Ｈ］＋、６４０．３［（Ｍ＋Ｈ２Ｏ）＋Ｈ］＋）を有する１つの主要ピークが検出されたことが示された。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（中性条件）で精製して、化合物５（３．５０ｇ、５．６２ｍｍｏｌ、収率６３．６％）を茶色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.17 (s, 2 H), 4.58 (t, J=5.44 Hz, 3 H), 4.08 - 4.16 (m, 6 H), 3.73 - 3.78 (m, 4 H), 3.65 - 3.69 (m, 2 H), 3.58 - 3.63 (m, 4 H), 3.52 - 3.57 (m, 6 H), 3.45 - 3.51 (m, 8 H), 3.39 - 3.43 (m, 6 H), 1.53 (s, 9 H).
化合物６の調製
Figure 2022527569000031
無水ＤＣＥ（１５０ｍＬ）中の化合物２（９．５２ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）の溶液を、４Åモレキュラーシーブとともに２０℃で５分間撹拌した。次いで化合物５（４．５０ｇ、７．２３ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を３０分間継続した。［（１Ｒ，４Ｓ）－７，７－ジメチル－２－オキソ－ノルボルナン－１－イル］メタンスルホン酸（６．０４ｇ、２６．０２ｍｍｏｌ、３．６ｅｑ）をＮ２雰囲気下、１０分にわたって滴加した。混合物を５０℃で２時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物５は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６１０．６１、実測値ｍ／ｚ：８０５．９［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６１１．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。反応混合物を珪藻土に通して濾過した。濾液を、ＮａＨＣＯ３（３００ｍＬ）を添加することによってクエンチし、ＤＣＭ（３００ｍＬ＊３）で抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶出液は０～１０％メタノール／ジクロロメタン＠１００ｍＬ／分）で精製して、化合物６（１０．３ｇ、６．４０ｍｍｏｌ、収率８８．５％）を淡黄色固形物として得た。
化合物７の調製
Figure 2022527569000032
ＤＣＭ（１７．５ｍＬ）中の化合物６（３．４３ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（２７．０ｇ、２３６ｍｍｏｌ、１７．５ｍＬ）を添加した。混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物６は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１５５４．５０、実測値ｍ／ｚ：７７８．４［Ｍ／２＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。反応混合物を減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物７（４．８０ｇ、３．０９ｍｍｏｌ、収率４８．３％）を白色固形物として得た。
化合物８Ａの調製
Figure 2022527569000033
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７（５００ｍｇ、３２２μｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（６５．１ｍｇ、６４３μｍｏｌ、８９．５μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１０３ｍｇ、３２２μｍｏｌ）および４－アミノシクロヘキサノール（３７．１ｍｇ、３２２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６５１．６６、実測値ｍ／ｚ：８２６．５［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６５２．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ａ（４２０ｍｇ、２５４μｍｏｌ、収率７９．１％）を白色固形物として得た。
リガンドＡの調製
Figure 2022527569000034
反応準備：化合物８Ａを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（４．００ｍＬ）中の化合物８Ａ（４２０ｍｇ、２５４μｍｏｌ）の溶液に、化合物９（１５３ｍｇ、５０９μｍｏｌ、１６２μＬ）および２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、６２２μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５３）によって、化合物８Ａは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れた。得られた混合物をＤＣＭ（１５ｍＬ＊３）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加した。得られた混合物を撹拌し、濾過した。固形物をＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＡ（２１０ｍｇ、１１３μｍｏｌ、収率４４．６％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.15 (br d, J=7.78 Hz, 1 H), 7.79 (d, J=9.29 Hz, 3 H), 7.17 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.26 Hz, 3 H), 4.97 (dd, J=11.17, 3.39 Hz, 3 H), 4.55 (d, J=8.53 Hz, 3 H), 4.14 (br t, J=4.52 Hz, 4 H), 3.98 - 4.08 (m, 12 H), 3.83 - 3.92 (m, 4 H), 3.64 - 3.82 (m, 13 H), 3.45 - 3.63 (m, 24 H), 2.77 (t, J=5.77 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.76 (d, J=1.25 Hz, 9 H), 1.54 - 1.74 (m, 6 H), 1.16 (d, J=6.78 Hz, 11 H). 31P NMR: δ ppm 145.70.
化合物８Ｂの調製
Figure 2022527569000035
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７（５００ｍｇ、３２２μｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（６５．１ｍｇ、６４３μｍｏｌ、８９．５μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１０３ｍｇ、３２２μｍｏｌ）および４－アミノシクロヘキサノール（３７．１ｍｇ、３２２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６５１．５５、実測値ｍ／ｚ：８２６．５［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６５２．６［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｂ（３９５ｍｇ、２３９μｍｏｌ、収率７４．４％）を白色固形物として得た。
リガンドＢの調製
Figure 2022527569000036
反応準備：化合物８Ｂを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（３．００ｍＬ）中の化合物８Ｂ（２８８ｍｇ、１７４μｍｏｌ）の溶液に化合物９（１０５ｍｇ、３４９μｍｏｌ、１１１μＬ）を添加し、２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、４２６μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５１）によって、化合物８Ｂは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＢ（２３５ｍｇ、１２７μｍｏｌ、収率７２．８％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.06 (br d, J=7.53 Hz, 1 H), 7.80 (br d, J=9.29 Hz, 3 H), 7.14 (s, 2 H), 5.21 (d, J=2.76 Hz, 3 H), 4.97 (dd, J=11.17, 2.89 Hz, 3 H), 4.55 (d, J=8.53 Hz, 3 H), 4.14 (br s, 4 H), 3.98 - 4.08 (m, 11 H), 3.83 - 3.93 (m, 3 H), 3.73 - 3.82 (m, 9 H), 3.64 - 3.72 (m, 4 H), 3.46 - 3.63 (m, 24 H), 2.76 (t, J=5.90 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.76 (s, 9 H), 1.41 (br s, 4 H), 1.14 (br d, J=6.53 Hz, 12 H). 31P NMR: δ ppm 144.77.
化合物８Ｃの調製
Figure 2022527569000037
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７（５００ｍｇ、３２２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（６５．１ｍｇ、６４３μｍｏｌ、８９．５μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１０３ｍｇ、３２２μｍｏｌ）およびピペリジン－４－オール（３２．５ｍｇ、３２２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６３７．６３、実測値ｍ／ｚ：８１９．５［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６３７．６［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｃ（３９０ｍｇ、２３８μｍｏｌ、収率７４．０％）を白色固形物として得た。
リガンドＣの調製
Figure 2022527569000038
反応準備：化合物８Ｃを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（４．００ｍＬ）中の化合物８Ｃ（３９０ｍｇ、２３８μｍｏｌ）の溶液に化合物９（１４４ｍｇ、４７６μｍｏｌ、１５１μＬ）を添加し、２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、５８２μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５１）によって、化合物８Ｃは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＣ（２７０ｍｇ、１４７μｍｏｌ、収率６１．７％）を白色固形物として得た。1H NMR: (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.79 (br d, J=9.03 Hz, 3 H), 6.66 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.26 Hz, 3 H), 4.97 (dd, J=11.17, 3.39 Hz, 3 H), 4.53 - 4.58 (m, 3 H), 4.10 (br d, J=4.77 Hz, 5 H), 3.97 - 4.07 (m, 12 H), 3.82 - 3.93 (m, 4 H), 3.71 - 3.80 (m, 9 H), 3.65 - 3.70 (m, 3 H), 3.54 - 3.62 (m, 12 H), 3.52 (dt, J=5.27, 2.89 Hz, 12 H), 2.76 (t, J=5.77 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.75 - 1.79 (m, 9 H), 1.57 (br s, 2 H), 1.09 - 1.17 (m, 14 H). 31P NMR: δ ppm 145.39.
化合物８Ｄの調製
Figure 2022527569000039
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７（５００ｍｇ、３２２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（６５．１ｍｇ、６４３μｍｏｌ、８９．５μＬ）を添加し、次いでＴＢＴＵ（１０３ｍｇ、３２２μｍｏｌ）および６－アミノヘキサン－１－オール（３７．７ｍｇ、３２２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６５３．６７、実測値ｍ／ｚ：８２７．４［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６５４．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｄ（４２０ｍｇ、２５４μｍｏｌ、収率７９．０％）を白色固形物として得た。
リガンドＤの調製
Figure 2022527569000040
反応準備：化合物８Ｄを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（４．００ｍＬ）中の化合物８Ｄ（４２０ｍｇ、２５４μｍｏｌ）の溶液に、化合物９（１５３ｍｇ、５０８μｍｏｌ、１６１μＬ）を添加し、２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、６２１μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５１）によって、化合物８Ｄは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＤ（２７０ｍｇ、１４６μｍｏｌ、収率５７．３％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.34 (br s, 1 H), 7.80 (d, J=9.29 Hz, 3 H), 7.16 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.51 Hz, 3 H), 4.97 (dd, J=11.17, 3.39 Hz, 3 H), 4.55 (d, J=8.53 Hz, 3 H), 4.13 (br d, J=5.02 Hz, 4 H), 4.00 - 4.07 (m, 11 H), 3.83 - 3.93 (m, 4 H), 3.74 - 3.82 (m, 8 H), 3.66 (br t, J=4.52 Hz, 3 H), 3.58 - 3.63 (m, 1 H), 3.59 (br d, J=4.77 Hz, 7 H), 3.46 - 3.57 (m, 18 H), 2.75 (t, J=5.90 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.87 - 1.90 (m, 1 H), 1.76 (s, 9 H), 1.46 - 1.59 (m, 4 H), 1.34 (br s, 4 H), 1.09 - 1.16 (m, 12 H). 31P NMR: δ ppm 146.28.
化合物８Ｅの調製
Figure 2022527569000041
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７（５００ｍｇ、３２２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（６５．１ｍｇ、６４３μｍｏｌ、８９．５μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１０３ｍｇ、３２２μｍｏｌ）および２－（２－アミノエトキシ）エタノール（３３．８ｍｇ、３２２μｍｏｌ、３２．２μＬ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６４１．６２、実測値ｍ／ｚ：８２１．４［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６４１．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｅ（４１４ｍｇ、２５２．１９μｍｏｌ、収率７８．４１％）を白色固形物として得た。
リガンドＥの調製
Figure 2022527569000042
反応準備：化合物８Ｅを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（４．００ｍＬ）中の化合物８Ｅ（４１４ｍｇ、２５２μｍｏ）の溶液に化合物９（１５２ｍｇ、５０４μｍｏｌ、１６０μＬ）を添加し、２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、６１６μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５２）によって、化合物８Ｅは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、２０℃未満で濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＥ（２１３ｍｇ、１１６μｍｏｌ、収率４５．９％）を白色固形物として得た。1H NMR: (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.45 (br t, J=5.50 Hz, 1 H), 7.80 (d, J=9.13 Hz, 3 H), 7.18 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.13 Hz, 3 H), 4.97 (dd, J=11.26, 3.25 Hz, 3 H), 4.55 (d, J=8.50 Hz, 3 H), 4.10 - 4.18 (m, 4 H), 3.96 - 4.09 (m, 11 H), 3.83 - 3.93 (m, 3 H), 3.64 - 3.82 (m, 13 H), 3.46 - 3.62 (m, 28 H), 2.73 (t, J=5.69 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.76 (s, 9 H), 1.11 (t, J=6.00 Hz, 12 H). 31P NMR: δ ppm 147.28.
化合物８Ｆの調製
Figure 2022527569000043
ＴＨＦ（７．００ｍＬ）中の化合物７（７００ｍｇ、４５０μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（９１．１ｍｇ、９０１μｍｏｌ、１２５μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１４５ｍｇ、４５０μｍｏｌ）および２－［２－（２－アミノエトキシ）エトキシ］エタノール（６７．２ｍｇ、４５０μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１６８５．６７、実測値ｍ／ｚ：８４３．５［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１６８５．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊２５ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊３０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｆ（６４０ｍｇ、３８０μｍｏｌ、収率８４．３％）を白色固形物として得た。
リガンドＦの調製
Figure 2022527569000044
反応準備：化合物８Ｆを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（６．００ｍＬ）中の化合物８Ｆ（５４０ｍｇ、３２０μｍｏｌ）の溶液に化合物９（１９３ｍｇ、６４１μｍｏｌ、２０３μＬ）を添加し、次いで２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、７８３μＬ）を反応混合物に滴加した。混合物をＮ２雰囲気下、１０～１５ ０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５３）によって、化合物８Ｆは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＦ（４１２ｍｇ、２１８μｍｏｌ、収率６８．２％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.46 (br t, J=5.44 Hz, 1 H), 7.80 (d, J=9.26 Hz, 3 H), 7.18 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.38 Hz, 3 H), 4.97 (dd, J=11.26, 3.38 Hz, 3 H), 4.55 (d, J=8.50 Hz, 3 H), 4.13 (br t, J=4.38 Hz, 4 H), 3.98 - 4.07 (m, 11 H), 3.83 - 3.92 (m, 3 H), 3.73 - 3.82 (m, 8 H), 3.71 (td, J=4.19, 2.38 Hz, 2 H), 3.64 - 3.69 (m, 3 H), 3.46 - 3.62 (m, 33 H), 2.75 (t, J=5.94 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.76 (s, 9 H), 1.19 (br d, J=6.38 Hz, 2 H), 1.12 (dd, J=6.69, 4.19 Hz, 10 H). 31P NMR: δ ppm 147.35.
化合物５’の調製
Figure 2022527569000045
ＤＭＳＯ（４０．０ｍＬ）中の化合物４（２．００ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）の溶液にＫ２ＣＯ３（４．８９ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）およびＫＩ（４４０ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を添加し、温度が７０℃に加温されるまで撹拌した。次いで２－（２－ブロモエトキシ）エタノール（５．９８ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物を７０℃で４時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物４は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：４９０．５４、実測値ｍ／ｚ：４９１．２［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（中性条件）で精製して、化合物５’（３．４０ｇ、６．９３ｍｍｏｌ、収率７８．４％）を淡茶色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d): δ ppm 7.29 (s, 2 H), 3.86 - 3.91 (m, 4 H), 3.80 - 3.85 (m, 2 H), 3.71 - 3.78 (m, 6 H), 3.63 - 3.69 (m, 6 H), 1.67 (s, 9 H).
化合物６’の調製
Figure 2022527569000046
無水ＤＣＥ（１２０ｍＬ）中の化合物２（１２．１ｇ、３６．７ｍｍｏｌ）を４Åモレキュラーシーブとともに２０℃で５分間撹拌した。化合物５’（３．００ｇ、６．１２ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を３０分間継続した。次いで［（１Ｒ，４Ｓ）－７，７－ジメチル－２－オキソ－ノルボルナン－１－イル］メタンスルホン酸（５．１１ｇ、２２．０ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、１０分にわたって滴加した。混合物を５０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン／メタノール＝１０：１、Ｒｆ＝０．３６［ブロモクレゾールグリーン］）によって、化合物５’は消費され、わずかに残っており、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。ＴＬＣによれば、反応物は清浄であった。残渣をＮａＨＣＯ３（３００ｍＬ）およびＤＣＭ（３００ｍＬ＊３）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ジクロロメタン：（ジクロロメタン／メタノール＝１０：１）＝０：１００）で精製して、化合物６’（８．８０ｇ、５．９５ｍｍｏｌ、収率９７．３％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d): δ ppm 7.26 (s, 2 H), 7.24 - 7.26 (m, 1 H), 6.82 (d, J=9.54 Hz, 1 H), 6.69 (d, J=8.78 Hz, 2 H), 5.33 - 5.37 (m, 3 H), 5.22 (dd, J=11.04, 3.26 Hz, 2 H), 5.12 (dd, J=11.29, 3.26 Hz, 1 H), 4.83 (d, J=8.53 Hz, 1 H), 4.77 (d, J=8.53 Hz, 2 H), 4.07 - 4.26 (m, 15 H), 3.92 - 4.03 (m, 6 H), 3.78 - 3.91 (m, 7 H), 3.67 - 3.77 (m, 8 H), 2.14 - 2.18 (m, 9 H), 2.03 - 2.06 (m, 9 H), 1.96 - 2.00 (m, 9 H), 1.87 - 1.95 (m, 9 H), 1.59 (s, 9 H).
化合物７’の調製
Figure 2022527569000047
ＤＣＭ（４３．０ｍＬ）中の化合物６’（８．６０ｇ、５．８２ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（６６．２ｇ、５８１ｍｍｏｌ、４３．０ｍＬ）を０℃下で添加した。混合物を２０ ０～２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物６’は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１４２２．３４、実測値ｍ／ｚ：７１１．８［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１４２２．４［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。反応混合物を減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物７’（４．６０ｇ、３．２３ｍｍｏｌ、収率５５．６％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.78 - 7.86 (m, 2 H), 7.78 - 7.86 (m, 1 H), 7.22 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.26 Hz, 3 H), 4.94 - 5.01 (m, 3 H), 4.53 - 4.59 (m, 3 H), 4.07 - 4.16 (m, 6 H), 4.02 (s, 9 H), 3.84 - 3.93 (m, 4 H), 3.72 - 3.83 (m, 7 H), 3.65 - 3.69 (m, 2 H), 3.56 - 3.65 (m, 10 H), 2.10 (s, 9 H), 1.96 - 2.02 (m, 1 H), 1.99 (s, 8 H), 1.86 - 1.91 (m, 9 H), 1.76 (s, 9 H).
化合物８Ｇの調製
Figure 2022527569000048
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７’（５００ｍｇ、３５２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（７１．１ｍｇ、７０３μｍｏｌ、９７．９μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１１３ｍｇ、３５２μｍｏｌ）および４－アミノシクロヘキサノール（４０．５ｍｇ、３５２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７’は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１５１９．５０、実測値ｍ／ｚ：７６０．４［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１５１９．４［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｇ（４３０ｍｇ、２８３μｍｏｌ、収率８０．５％）を白色固形物として得た。
リガンドＧの調製
Figure 2022527569000049
反応準備：化合物８Ｇを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（４．００ｍＬ）中の化合物８Ｇ（４３０ｍｇ、２８３μｍｏｌ）の溶液に、化合物９（１７１ｍｇ、５６６μｍｏｌ、１８０μＬ）および２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、６９２μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５２）によって、化合物８Ｇは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＧ（３７０ｍｇ、２１５μｍｏｌ、収率７６．０％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.13 - 8.19 (m, 1 H), 8.16 (br d, J=7.53 Hz, 1 H), 7.78 - 7.86 (m, 3 H), 7.18 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.51 Hz, 3 H), 4.98 (dd, J=11.29, 3.26 Hz, 3 H), 4.53 - 4.60 (m, 3 H), 4.13 (br t, J=4.39 Hz, 4 H), 3.99 - 4.07 (m, 12 H), 3.86 - 3.94 (m, 3 H), 3.71 - 3.86 (m, 10 H), 3.53 - 3.69 (m, 14 H), 2.77 (t, J=5.90 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.77 (s, 9 H), 1.54 - 1.73 (m, 6 H), 1.16 (d, J=6.78 Hz, 12 H), 1.10 (s, 2 H). 31P NMR: δ ppm 145.74.
化合物８Ｈの調製
Figure 2022527569000050
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７’（５００ｍｇ、３５２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（７１．１ｍｇ、７０３μｍｏｌ、９７．９μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１１３ｍｇ、３５２μｍｏｌ）および２－［２－（２－アミノエトキシ）エトキシ］エタノール（５２．４ｍｇ、３５２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７’は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１５５３．５２、実測値ｍ／ｚ：７７７．３［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１５５４．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｈ（４５８ｍｇ、２９５μｍｏｌ、収率８３．９％）を白色固形物として得た。
リガンドＨの調製
Figure 2022527569000051
反応準備：化合物８Ｈを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（４．７０ｍＬ）中の化合物８Ｈ（４５８ｍｇ、２９５μｍｏｌ）の溶液に化合物９（１７８ｍｇ、５９０μｍｏｌ、１８７μＬ）および２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、７２１μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５２）によって、化合物８Ｈは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＨ（２５０ｍｇ、１４３μｍｏｌ、収率４８．４％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.36 (br s, 1 H), 7.77 - 7.88 (m, 3 H), 7.17 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.26 Hz, 3 H), 4.93 - 5.02 (m, 3 H), 4.52 - 4.62 (m, 3 H), 4.12 (br t, J=4.52 Hz, 4 H), 4.03 (s, 12 H), 3.86 - 3.94 (m, 3 H), 3.78 - 3.85 (m, 3 H), 3.70 - 3.77 (m, 5 H), 3.52 - 3.69 (m, 16 H), 3.22 (br d, J=6.78 Hz, 2 H), 2.75 (t, J=5.90 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.76 (s, 9 H), 1.47 - 1.58 (m, 4 H), 1.33 (br s, 4 H), 1.06 - 1.19 (m, 12 H). 31P NMR: δ ppm 147.36.
化合物８Ｉの調製
Figure 2022527569000052
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の化合物７’（５００ｍｇ、３５２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ３Ｎ（７１．１ｍｇ、７０３μｍｏｌ、９７．９μＬ）を添加した。次いでＴＢＴＵ（１１３ｍｇ、３５２μｍｏｌ）および６－アミノヘキサン－１－オール（４１．２ｍｇ、３５２μｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物をＮ２雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳによって、化合物７’は完全に消費され、所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピーク（計算値ＭＷ：１５２１．５２、実測値ｍ／ｚ：７６１．３［Ｍ／２＋Ｈ］＋、１５２２．５［Ｍ＋Ｈ］＋）が検出されたことが示された。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ、２＊５０ｍＬ）で洗浄し、有機相をＮａＨＣＯ３（２＊５０ｍＬ）の飽和溶液、水（３＊５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）で精製して、化合物８Ｉ（４７３ｍｇ、３１１μｍｏｌ、収率８８．４％）を白色固形物として得た。
リガンドＩの調製
Figure 2022527569000053
反応準備：化合物８Ｉを無水ＭｅＣＮ（共沸蒸留）で５回乾燥させた。ＭｅＣＮおよびＤＣＭを、球状の４Åモレキュラーシーブで一晩乾燥させた。
０℃のＤＣＭ（５．００ｍＬ）中の化合物８Ｉ（４７３ｍｇ、３１１μｍｏｌ）の溶液に化合物９（１８７ｍｇ、６２２μｍｏｌ、１９７μＬ）および２Ｈ－テトラゾール（０．４５Ｍ、６９１μＬ）をＮ２雰囲気下で滴下した。次いで混合物を０～１５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メチルアルコール＝１０：１、Ｒｆ＝０．５３）によって、化合物８Ｉは完全に消費され、１つの新規のスポットが形成されたことが示された。混合物を－２０～－１０℃に冷却し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（８ｍＬ）に０～５℃でゆっくりと注ぎ入れ、ＤＣＭ（１０ｍＬ＊２）で洗浄し、分離後、水性層をＤＣＭ（１５ｍＬ）で抽出し、次いで有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、温度を２０℃未満に維持しながら濃縮した。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解し、撹拌したＭＴＢＥ ２０ｍＬ（－１０℃）に室温で滴加し、撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ＊３）で洗浄し、高真空で乾燥させた。この精製手順をさらに２回繰り返して、リガンドＩ（３５０ｍｇ、２０３μｍｏｌ、収率６５．４％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.36 (br s, 1 H), 7.77 - 7.88 (m, 3 H), 7.17 (s, 2 H), 5.21 (d, J=3.26 Hz, 3 H), 4.93 - 5.02 (m, 3 H), 4.52 - 4.62 (m, 3 H), 4.12 (br t, J=4.52 Hz, 4 H), 4.03 (s, 12 H), 3.86 - 3.94 (m, 3 H), 3.78 - 3.85 (m, 3 H), 3.70 - 3.77 (m, 5 H), 3.52 - 3.69 (m, 16 H), 3.22 (br d, J=6.78 Hz, 2 H), 2.75 (t, J=5.90 Hz, 2 H), 2.10 (s, 9 H), 1.99 (s, 9 H), 1.89 (s, 9 H), 1.76 (s, 9 H), 1.47 - 1.58 (m, 4 H), 1.33 (br s, 4 H), 1.06 - 1.19 (m, 12 H). 31P NMR: δ ppm 146.32.
ＧａｌＮＡｃクラスターコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡの合成
各リガンドＡ～Ｉに関して実験を行い、それぞれがＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡにコンジュゲートさせたＧａｌＮＡｃクラスターとしての役割を果たした。
方法
センスおよびアンチセンス鎖の合成および精製
全てのセンスおよびアンチセンス鎖を、ホスホラミダイト中間体を使用した標準的な固相オリゴヌクレオチド合成技術に基づいて合成した。ＡＫＴＡオリゴパイロットプラス１０シンセサイザー（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用した。合成は、制御された多孔ガラス（Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＣＰＧ、ロード：３６．２μｍｏｌ／ｇ、１０００Å）で作製された固体支持体で行った。全ての２’－修飾ホスホラミダイトは市販の供給源から購入した。特に、以下の２’－Ｆおよび２’－Ｏ－メチルホスホラミダイトを使用した：ＤＭＴ－２’－Ｆ－Ｂｚ－ｄＡホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－Ｆ－ｄＵホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－Ｆ－ｉｂｕ－ｄＧホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－Ｆ－Ａｃ－ｄＣホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－ＯＭｅ－Ｂｚ－Ａホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－ＯＭｅ－Ｕホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－ＯＭｅ－ｉｂｕ－Ｇホスホラミダイト、ＤＭＴ－２’－ＯＭｅ－Ａｃ－Ｃホスホラミダイト。アミダイトを無水アセトニトリル（１００ｍＭ）中に溶解し、モレキュラーシーブ（３Å）で乾燥させた。ＥＴＴ（５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール、アセトニトリル中６００ｍＭ）を活性化剤として使用した。センスおよびアンチセンス鎖の合成を３μｍｏｌ規模で行った。固相合成サイクルを表１に示す。
Figure 2022527569000054
ＧａｌＮＡｃリガンドクラスターのＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡのセンス鎖へのカップリングは、不活性雰囲気下、グローブボックス中、手動で行った。無水アセトニトリル（３ｍＬ）中のＣＰＧ支持センス鎖（３μｍｏｌ）をモレキュラーシーブ（３Å）で３０分間乾燥させた。無水アセトニトリル（１ｍＬ、モレキュラーシーブ（３Å）で３０分間乾燥させた）および活性化因子（ＥＴＴ、０．５ｍＬ、アセトニトリル中０．６Ｍ、モレキュラーシーブ（３Å）によって３０分間乾燥させた）中のリガンドクラスター（２４μｍｏｌ、８ｅｑ．）を添加した。反応混合物を室内温度で１．５時間振とうした。溶媒を、シリンジによってＣＰＧから除去した。得られたＣＰＧ支持樹脂をＰＡＤＳ（ピリジン／アセトニトリル１／１、ｖ／ｖ中０．１６Ｍ）を用いて２０℃で処置した。反応混合物を２０℃で２０分間保持した。ＣＰＧ支持体を濾過することによってアセトニトリル（５ｍＬ×４）で洗浄して、ＣＰＧ支持体上に対応するセンス鎖を生成した。
ＣＰＧ支持センスまたはアンチセンス鎖（３μｍｏｌ）をアセトニトリル（５ｍＬ）中の２０％（ｖ／ｖ）ジエチルアミンで、２０℃で１０分間処置した。樹脂を濾過によってアセトニトリル（５ｍＬ×３）で洗浄した。ＣＰＧ支持体を、１：１の体積の４０％メチルアミン水溶液および３５％水酸化アンモニウム溶液（１．５ｍＬ）で、６５℃で１０分間処置した。混合物を濾過し、濾液を、遠心真空濃縮器を用いて４０℃で濃縮した。粗製オリゴヌクレオチド生成物を白色固形物として得た。
粗製オリゴヌクレオチドを、Ｄｕｒａｓｈｅｌｌ Ｃ１８（Ｌ）カラム１０×１００ｍｍ、粒子サイズ５μｍを使用したＨＰＬＣで精製した。移動相ＡはＭｉｌｌｉ Ｑ水中の２２０ｍＭ ＨＦＩＰおよび８．８ｍＭ ＴＥＡ、ｐＨ７．５であり、移動相Ｂはメタノールであった。勾配は移動相Ｂ １６分で５％から２９％であり、流速は３．５ｍＬ／分であった。カラム温度は５０℃を保持した。
センスおよびアンチセンス鎖のアニールおよびｓｉＲＮＡの精製
センス鎖と、等モルのアンチセンスセンス鎖とを、ホスフェート緩衝食塩水（ｐＨ７．４）中で混合して二本鎖を形成した。アニール温度を２０℃で設定した。オリゴヌクレオチドの濃度は３μｍｏｌ／４００μｌ １×ＰＢＳであった。アニール溶液をＨＰＬＣでモニターした。
二本鎖を、Ｄｕｒａｓｈｅｌｌ Ｃ１８（Ｌ）カラム１０×１００ｍｍ、粒子サイズ５μｍを使用したＩＰ－ＲＰ ＨＰＬＣで精製した。移動相Ａは、５％アセトニトリルを含むＭｉｌｌｉ Ｑ水中の１００ｍＭ ＨＦＩＰおよび２０ｍＭ ＨＡであり、移動相Ｂはアセトニトリル中の２０％Ｍｉｌｌｉ Ｑ水であった。勾配は移動相Ｂ １８分で１８％から３５％であり、流量は４ｍＬ／分であった。カラム温度は１７℃で設定した。所望の二本鎖を含むフラクションを収集し、凍結乾燥して、最終生成物を得た。
ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡ
凝固因子ＸＩＩ（ＦＸＩＩ）ｓｉＲＮＡの配列およびヌクレオチド修飾は文献（Ｌｉｕら、（２０１９）ＲＮＡ ２５、２５５－２６３）から採用した。センス鎖：Ｌ＊ａａｃｕｃａＡｕＡＡＡｇｕｇｃｕｕｕｇ＊ａ＊ａ（配列番号２）；アンチセンス鎖：ｕ＊Ｕ＊ｃａａＡｇＣＡｃｕｕｕＡｕＵｇａｇｕｕ＊ｕ＊ｃ（配列番号４）（５’から３’までの大文字および小文字は、２－デオキシ－２－フルオロ（２’－Ｆ）、および２’－Ｏ－メチル（２’－ＯＭｅ）リボ糖修飾をそれぞれ示し；（＊）はホスホロチオエート連結（ＰＳ）を示す）。ＬはＭｉｔｏ ＧａｌＮＡｃリガンドクラスターを示す。ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡを合成するために使用されるＭｉｔｏ ＧａｌＮＡｃホスホラミダイトの代表的な構造を図１に示し、調製され、試験された代表的なＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡに関する情報を表２に示す。研究において使用されたｓｉＲＮＡ配列に関する情報を図２に提供する。
Figure 2022527569000055
マウスにおけるＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡ試験
導入
凝固因子ＸＩＩ（ＦＸＩＩ）をモデルとして使用して、ｓｉＲＮＡの、細胞、組織、および対象への送達を評価した。本発明の標的化リガンド複合体の異なる実施形態をＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡにコンジュゲートさせ、ｉｎ ｖｉｖｏで投与する実験を行った。ｓｉＲＮＡの効果を、投与後周期的にモニターした。モニタリングの１つの手段は、ＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡにコンジュゲートされた標的化リガンド複合体のうちの１つが投与されたマウスから採取した血清中のＦＸＩＩレベルを判定することであった。
方法
標的化リガンドクラスター／核酸複合体
Ｍｉｔｏ－ＡからＭｉｔｏ－Ｉとして示される標的化リガンドクラスター／核酸複合体はそれぞれｓｉＲＮＡにコンジュゲートされた異なる標的化リガンドクラスターを含む。標的化リガンドクラスター／核酸複合体はＭｉｔｏ ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡと称した。本研究における標的化リガンドクラスターは：リガンドＡ、リガンドＢ、リガンドＣ、リガンドＤ、リガンドＥ、リガンドＦ、リガンドＧ、リガンドＨ、およびリガンドＩであった（各構造に関しては図１を参照のこと）。実験で使用された各Ｍｉｔｏ ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡは、本明細書において実施例３１に記載したＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡにコンジュゲートされたＭｉｔｏ－Ａ～Ｍｉｔｏ－Ｉのうちの１つを含んでおり、本明細書において：Ｍｉｔｏ－Ａ、Ｍｉｔｏ－Ｂ、Ｍｉｔｏ－Ｃ、Ｍｉｔｏ－Ｄ、Ｍｉｔｏ－Ｅ、Ｍｉｔｏ－Ｆ、Ｍｉｔｏ－Ｇ、Ｍｉｔｏ－Ｈ、およびＭｉｔｏ－Ｉと称する。複合体に関するさらなる情報は本明細書において他の箇所で提供される。
Ｉｎ ｖｉｖｏ試験
実験を行って、ｉｎ ｖｉｖｏでのＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡの効果を評価した。雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｓ）に、単回用量のＰＢＳ、またはＰＢＳ中に３ｍｇ／ｋｇで製剤化されたＭｉｔｏ ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡを皮下（Ｓ．Ｃ．）で投与した（１群当たりｎ＝３）。Ｍｉｔｏ－Ａ～Ｍｉｔｏ－Ｉを含む複合体を調製し、試験した。投与後、５、１４、および３０日目に、血漿試料を採取した。血漿中のＦＸＩＩレベルを、製造業者の取扱説明書に従って、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ製のＥＬＩＳＡキットを使用して評価した。次いでＭｉｔｏ ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＦＸＩＩ ｓｉＲＮＡ（Ｍｉｔｏ－Ａ～Ｍｉｔｏ－Ｉ）で処置された群に関して計算された血漿ＦＸＩＩ濃度を、ＰＢＳ処置された群の平均に対して正規化した。複合体Ｍｉｔｏ－ＡからＭｉｔｏ－Ｉにそれぞれに含まれるリガンドＡ～Ｉの構造は、図１において提供される。
Figure 2022527569000056
表３および図３はｉｎ ｖｉｖｏ試験からのデータを提供する。結果は、投与後、５日目、１４日目、および３０日目において採取された血清におけるＦＸＩＩ残量のパーセントを示す。データは、Ｍｉｔｏ－ＡからＭｉｔｏ－Ｉをそれぞれ投与した後に得られた。結果は、１００％のままであったＦＸＩＩのＰＢＳレベルと比較して、Ｍｉｔｏ－Ａ～Ｍｉｔｏ－Ｉの全てに関して血漿におけるＦＸＩＩに有意な減少を示した。研究の結果は、標的化リガンドクラスターが、機能ｓｉＲＮＡの効果的なｉｎ ｖｉｖｏでの送達をもたらしたことを実証した。
等価物
本発明のいくつかの実施形態を本明細書において記載し、示してきたが、当業者であれば、機能を実行しおよび／または本明細書において記載される結果および／または利点のうちの１つまたは複数を得るための様々な他の手段および／または構造を容易に想定することになり、それぞれのそのような変形および／または改変は本発明の範囲内であるとみなされる。より一般的には、当業者であれば、本明細書において記載される全てのパラメーター、寸法、材料、および配置は例示的であることを意味し、実際のパラメーター、寸法、材料、および／または配置は、本発明の教示が使用される特定の適用に依存するであろうことを容易に理解するであろう。当業者であれば、本明細書において記載される本発明の具体的な実施形態に対する多くの等価物を認識するか、または所定の実験のみを使用して確認することができるであろう。したがって、前述の実施形態はほんの一例として提示されており、添付の特許請求の範囲およびその等価物の範囲内であることは理解されるべきであり；本発明は、特に記載され、請求される以外の他のもので行ってもよい。本発明は、本明細書において記載される個々の特徴、系、物品、材料、および／または方法をそれぞれ対象とする。さらに、２つまたはそれを超えるそのような特徴、系、物品、材料、および／または方法の任意の組合せは、そのような特徴、系、論文、材料、および／または方法が相互に矛盾しない場合、本発明の範囲内に含まれる。
全ての定義は、本明細書において定義され、使用される場合、辞書の定義、参照により組み込まれる文書内の定義、および／または定義された用語の通常の意味を制御するように理解されるべきである。
不定冠詞「ａ」および「ａｎ」は、明細書および特許請求の範囲において本明細書で使用される場合、相反することが明らかに示されない限り、「少なくとも１つ」を意味すると理解されるべきである。
「および／または」という句は、明細書および特許請求の範囲において本明細書で使用される場合、そのように連結された要素の「いずれかまたは両方」を意味し、すなわち、要素は一部の場合には結合的に存在し、他の場合では分離的に存在することが理解されるべきである。「および／または」という節によって具体的に同定された要素以外の他の要素は、相反することが明らかに示されない限り、具体的に同定されたこれらの要素に関連するかどうかにかかわらず、必要に応じて存在していてもよい。
本出願において挙げられるまたは参照される全ての参考文献、特許および特許出願ならびに刊行物は、その内容が参照により本明細書に組み込まれるものとする。

Claims (78)

  1. 式２の標的化リガンドクラスターを含む化合物
    Figure 2022527569000057
     であって、式中、
    リンカーＡは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＡの一方の末端はＧａｌＮＡｃ標的化リガンドに結合し、他方の末端はエーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し、
    リンカーＢは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＢの一方の末端はホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのリン原子に結合し、他方の末端はアミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し、
    Ｒａは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、イソプロピル基を含み、またはＲａは窒素原子を介してＲｂと連結して環を形成し、
    Ｒｂは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、イソプロピル基を含み、またはＲｂは窒素原子を介してＲａと連結して環を形成し、
    Ｒｃは、亜リン酸およびリン酸保護基、または２－シアノエチル基を含む、化合物。
  2. 独立して選択されるリンカーＡが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の化合物。
  3. 独立して選択されるリンカーＡが、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む、請求項１に記載の化合物。
  4. 独立して選択されるリンカーＢが、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の化合物。
  5. 独立して選択されるリンカーＢが、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む、請求項１に記載の化合物。
  6. リン酸保護基が、メチル、アリル、２－シアノエチル、４－シアノ－２－ブテニル、２－シアノ－１，１－ジメチルエチル、２－（トリメチルシリル）エチル、２－（Ｓ－アセチルチオ）エチル、２－（Ｓ－ピバロイルチオ）エチル、２－（４－ニトロフェニル）エチル、２，２，２－トリクロロエチル、２，２，２－トリクロロ－１，１－ジメチルエチル、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロピル、フルオレニル－９－メチル、２－クロロフェニル、４－クロロフェニル、および２，４－ジクロロフェニルのうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の化合物。
  7. 独立して選択されるリンカーＡが、
    Figure 2022527569000058
     の１つまたは複数を含み、
    ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり；ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である、請求項１に記載の化合物。
  8. 独立して選択されるリンカーＢが、
    Figure 2022527569000059
     の１つまたは複数を含み、
    ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、
    Ｒ１が、Ｈ、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、シクロプロピルを含み、またはＲ１が、炭素原子を介してＲ２と連結して３～６員環を形成し、
    Ｒ２が、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルを含み、またはＲ２が、炭素原子を介してＲ１と連結して３～６員環を形成する、請求項１に記載の化合物。
  9. 独立して選択されるリンカーＢが、
    Figure 2022527569000060
     の１つまたは複数を含み、
    ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり；ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である、請求項１に記載の化合物。
  10. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む、請求項１に記載の化合物。
  11. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む、請求項１に記載の化合物。
  12. 標的化リガンドクラスターが没食子酸を含み、独立して選択されるリンカーＡの少なくとも１つが、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む、請求項１に記載の化合物。
  13. 標的化リガンドクラスターが、標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドをさらに含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する、請求項１に記載の化合物。
  14. 標的化リガンドクラスター／核酸複合体が、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉである、請求項１３に記載の化合物。
  15. 請求項１から１４のいずれか一項に記載の化合物を含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  16. 式３の構造を含む化合物
    Figure 2022527569000061
     であって、式中、
    Ｘは、酸素（Ｏ）および硫黄（Ｓ）のうちの少なくとも１つであり、
    Ｙは、Ｏ、Ｓ、およびＮＨのうちの少なくとも１つであり、
    リンカーＡは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＡの一方の末端はＧａｌＮＡｃ標的化リガンドに結合し、他方の末端はエーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し、
    リンカーＢは独立して選択され、少なくとも１つのスペーサーを含み、リンカーＢの一方の末端はホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドのリン原子に結合し、他方の末端はアミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合する、化合物。
  17. オリゴヌクレオチドが、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、一本鎖ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、リボザイム、プラスミド、免疫刺激核酸、アンタゴミル、およびアプタマーのうちの少なくとも１つを含む、請求項１６に記載の化合物。
  18. 独立して選択されるリンカーＡが、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む、請求項１６に記載の化合物。
  19. 独立して選択されるリンカーＡが、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む、請求項１６に記載の化合物。
  20. 独立して選択されるリンカーＢが、ＰＥＧ、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、およびアラルキニル基のうちの少なくとも１つを含む、請求項１６に記載の化合物。
  21. 独立して選択されるリンカーＢが、１つまたは複数のヘテロ原子、脂肪族複素環、ヘテロアリール、アミノ酸、ヌクレオチド、および糖類を含む、請求項１６に記載の化合物。
  22. 独立して選択されるリンカーＡが、
    Figure 2022527569000062
     の１つまたは複数を含み、
    ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり；ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である、請求項１６に記載の化合物。
  23. 独立して選択されるリンカーＢが、下記：
    Figure 2022527569000063
     の１つまたは複数を含み、
    ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり、
    Ｒ１が、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルを含み、またはＲ１が、炭素原子を介してＲ２と連結して３～６員環を形成し、
    Ｒ２が、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、シクロプロピルを含み、またはＲ２が、炭素原子を介してＲ１と連結して３～６員環を形成する、請求項１６に記載の化合物。
  24. 独立して選択されるリンカーＢが、
    Figure 2022527569000064
     の１つまたは複数を含み、
    ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数であり；ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２の整数である、請求項１６に記載の化合物。
  25. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む、請求項１６に記載の化合物。
  26. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む、請求項１６に記載の化合物。
  27. 標的化リガンドクラスターが没食子酸を含み、独立して選択されるリンカーＡの少なくとも１つが、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む、請求項１６に記載の化合物。
  28. 化合物が、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉである、請求項１６に記載の化合物。
  29. 請求項１６から２８のいずれか一項に記載の化合物を含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  30. 式１の標的化リガンドクラスターを含む化合物
    Figure 2022527569000065
     であって、式中、
    ＴＬは、Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニルガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイルガラクトサミン、およびＮ－イソ－ブタノイルガラクトサミンが含まれるが、これらに限定されない１つまたは複数の標的化リガンドであり、
    １つまたは複数のＴＬは、同じ標的化リガンドクラスターの１つまたは複数の他のＴＬと異なっていてもよく、
    リンカーＡは独立して選択され、１つまたは複数の二官能性スペーサーを含み、リンカーＡの一方の末端は標的化リガンドに結合し、他方の末端はエーテル結合を介して没食子酸のフェノール性ヒドロキシ基に結合し、
    リンカーＢは独立して選択され、二官能性スペーサーを含み、リンカーＢの一方の末端はホスホラミダイトまたはオリゴヌクレオチドに結合し、他方の末端はアミド結合を介して没食子酸のカルボン酸に結合し、
    Ｗは、Ｈ、保護基、ホスホラミダイト、またはオリゴヌクレオチドである、化合物。
  31. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む、請求項３０に記載の化合物。
  32. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む、請求項３０に記載の化合物。
  33. 標的化リガンドクラスターが没食子酸を含み、独立して選択されるリンカーＡの少なくとも１つが、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む、請求項３０に記載の化合物。
  34. 標的化リガンドクラスターが、標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドをさらに含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する、請求項３０に記載の化合物。
  35. 標的化リガンドクラスター／核酸複合体が、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む、請求項３４に記載の化合物。
  36. 請求項３０から３５のいずれか一項に記載の化合物を含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  37. 没食子酸に由来する構造モチーフと、
    没食子酸の各ヒドロキシル基のリンカーと、
    没食子酸のアミド基のリンカーと
    を含み、リンカーの少なくとも１つが、没食子酸のヒドロキシル基の酸素に直接結合しているポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む、標的化リガンドクラスター。
  38. 標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドをさらに含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する、請求項３７に記載の標的化リガンドクラスター。
  39. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＡ～Ｉのうちの１つとして記載される化合物を含む、請求項３７に記載の標的化リガンドクラスター。
  40. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つとして記載される化合物を含む、請求項３７に記載の標的化リガンドクラスター。
  41. 没食子酸のフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している１つまたは複数の独立して選択される第１のリンカーと、
    第１のリンカーのそれぞれに結合している１つまたは複数の独立して選択される標的化リガンドと、
    没食子酸のカルボン酸に結合している第２のリンカーと、
    第２のリンカーに結合している保護基およびホスホラミダイトのうちの少なくとも１つと
    を含む標的化リガンドクラスター。
  42. 第１のリンカーが、エーテル結合を介してフェノール性ヒドロキシル基に結合している、請求項４０に記載の標的化リガンドクラスター。
  43. １つまたは複数の標的化リガンドが、Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニルガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイルガラクトサミン、およびＮ－イソ－ブタノイルガラクトサミンのうちの少なくとも１つを含む、請求項４０または４１に記載の標的化リガンドクラスター。
  44. 第２のリンカーが、アミド結合を介してカルボン酸に結合している、請求項４０から４２のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  45. 第１のリンカーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、１つまたは複数のヘテロ原子、１つまたは複数の脂肪族複素環、１つまたは複数のヘテロアリール、１つまたは複数のアミノ酸、１つまたは複数のヌクレオチド、および１つまたは複数の糖類のうちの少なくとも１つを含む、請求項４０から４３のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  46. 第２のリンカーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、１つまたは複数のヘテロ原子、１つまたは複数の脂肪族複素環、１つまたは複数のヘテロアリール、１つまたは複数のアミノ酸、１つまたは複数のヌクレオチド、および１つまたは複数の糖類のうちの少なくとも１つを含む、請求項４０から４４のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  47. ３つの第１のリンカーが、没食子酸の異なるフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している、請求項４０から４５のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  48. リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む、請求項４０から４６のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  49. リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む、請求項４０から４６のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  50. 標的化リガンドクラスターに結合したオリゴヌクレオチドをさらに含み、それによって標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する、請求項４０から４８のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター。
  51. 標的化リガンドクラスター／核酸複合体が、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む、請求項４０に記載の標的化リガンドクラスター。
  52. 請求項４０から５０のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスターを含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  53. 標的化リガンドクラスターを調製する方法であって、
    没食子酸にエステル化反応を実施して、没食子酸のｔｅｒｔ－ブチルエステルを含む第１の化合物を生成するステップと、
    ＳＮ２反応または光延反応を実施して、没食子酸エステルのフェノール性ヒドロキシ基にリンカーＡを結合して、第２の化合物を生成するステップと、
    第２の化合物にグリコシル化反応を実施して、第３の化合物を生成するステップと、
    第３の化合物に脱保護反応を実施して、第４の化合物を生成するステップと、
    第４の化合物にアミドカップリング反応を実施して、第５の化合物を生成するステップと、
    第５の化合物にリン酸化反応を実施するステップと
    を含む方法。
  54. 核酸分子を標的化リガンドクラスターに結合し、それによってリガンドクラスター／核酸複合体を形成するステップをさらに含む、請求項５２に記載の方法。
  55. 標的化リガンドクラスター／核酸複合体が、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む、請求項５３に記載の方法。
  56. ａ）没食子酸のフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している１つまたは複数の独立して選択される第１のリンカーを含む標的化リガンドクラスターと、
    ｂ）第１のリンカーのそれぞれに結合している１つまたは複数の独立して選択される標的化リガンドと、
    ｃ）没食子酸のカルボン酸に結合している第２のリンカーと、
    ｄ）第２のリンカーに結合している保護基およびホスホラミダイトのうちの少なくとも１つと
    を含み、標的化リガンドクラスターが核酸と結合して、標的化リガンドクラスター／核酸複合体を形成する、標的化リガンドクラスター／核酸複合体。
  57. ３つの第１のリンカーが、没食子酸の異なるフェノール性ヒドロキシル基にそれぞれ結合している、請求項５５に記載の標的化リガンドクラスター／核酸複合体。
  58. ２つ以上の独立して選択される第１のリンカーがあり、１つまたは複数がそれぞれ他の第１のリンカーと同じである、請求項５５または５６に記載の標的化リガンドクラスター／核酸複合体。
  59. ２つ、または３つの第１のリンカーが、他の第１のリンカーと異なる、請求項５５から５７のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター／核酸複合体。
  60. 核酸が、ＲＮＡ分子、必要に応じてｓｉＲＮＡ分子を含む、請求項５７または５８に記載の標的化リガンドクラスター／核酸複合体。
  61. ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物を含む、請求項５５から５９のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスター／核酸複合体。
  62. リガンドＡ～Ｉのいずれか１つとして記載される化合物。
  63. １つまたは複数の請求項６１に記載の化合物を含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  64. リガンドＪ～ＷＷのいずれか１つとして記載される化合物。
  65. １つまたは複数の請求項６３に記載の化合物を含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  66. ｓｉＲＮＡにコンジュゲートしている請求項１から１４および３０から３５のいずれか一項に記載の標的化リガンドクラスターを含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
  67. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＡ～Ｉのうちの１つを含む、請求項６５に記載の組成物。
  68. 標的化リガンドクラスターが、リガンドＪ～ＷＷのうちの１つを含む、請求項６５に記載の組成物。
  69. ｓｉＲＮＡにコンジュゲートしている標的化リガンドクラスターが、ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉのうちの１つを含む、請求項６５に記載の組成物。
  70. 細胞において標的遺伝子の発現を低減する方法であって、
    標的遺伝子を発現することができる細胞を、標的遺伝子の発現を低減するｓｉＲＮＡを含む請求項６５から６８のいずれか一項に記載の組成物と接触させるステップ
    を含む方法。
  71. 細胞が、肝臓細胞、心臓細胞、腎臓細胞、免疫系細胞、筋肉細胞、または神経細胞である、請求項６９に記載の方法。
  72. 細胞が、ｉｎ ｖｉｔｒｏの細胞である、またはｉｎ ｖｉｖｏにある、請求項６９または７０に記載の方法。
  73. 細胞が対象内にある、請求項６９から７１のいずれか一項に記載の方法。
  74. 対象がヒトである、請求項７２に記載の方法。
  75. 接触させるステップが、組成物を対象に投与するステップを含む、請求項７２または７３に記載の方法。
  76. 細胞における標的遺伝子の発現が、疾患または状態に関連し、標的遺伝子の発現を低減することが、疾患または状態を処置する、請求項６９から７４のいずれか一項に記載の方法。
  77. ＭＩＴＯ－Ａ、ＭＩＴＯ－Ｂ、ＭＩＴＯ－Ｃ、ＭＩＴＯ－Ｄ、ＭＩＴＯ－Ｅ、ＭＩＴＯ－Ｆ、ＭＩＴＯ－Ｇ、ＭＩＴＯ－Ｈ、またはＭＩＴＯ－Ｉとして記載される化合物。
  78. １つまたは複数の請求項７６に記載の化合物を含み、薬学的に許容される担体を必要に応じてさらに含む、組成物。
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WO2023045995A1 (en) * 2021-09-23 2023-03-30 Shanghai Argo Biopharmaceutical Co., Ltd. Multivalent Ligand Clusters with Diamine Scaffold for Targeted Delivery of Therapeutic Agents
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3854480A (en) 1969-04-01 1974-12-17 Alza Corp Drug-delivery system
US4675189A (en) 1980-11-18 1987-06-23 Syntex (U.S.A.) Inc. Microencapsulation of water soluble active polypeptides
US4452775A (en) 1982-12-03 1984-06-05 Syntex (U.S.A.) Inc. Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules
US5075109A (en) 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
US5211657A (en) 1988-11-07 1993-05-18 The United States Government As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Laminin a chain deduced amino acid sequence, expression vectors and active synthetic peptides
US5133974A (en) 1989-05-05 1992-07-28 Kv Pharmaceutical Company Extended release pharmaceutical formulations
US5407686A (en) 1991-11-27 1995-04-18 Sidmak Laboratories, Inc. Sustained release composition for oral administration of active ingredient
US5736152A (en) 1995-10-27 1998-04-07 Atrix Laboratories, Inc. Non-polymeric sustained release delivery system
MA45478A (fr) * 2016-04-11 2019-02-20 Arbutus Biopharma Corp Compositions de conjugués d'acides nucléiques ciblés
AU2017320582B2 (en) * 2016-09-02 2023-11-16 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc Targeting ligands

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