JP2022507641A - 生物学的溶液を凍結するデバイス及び方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本開示は、上述した問題を解決することを目的とする。
熱伝導表面(101)と、
前記生物学的溶液用の容器(109)を収容する窪みを有するホルダ(102)と、
前記ホルダ(102)を前記熱伝導表面(101)に押し付けるプレス手段(103)であって、前記容器(109)を前記熱伝導表面(101)との接触状態に配置し、前記熱伝導表面(101)からの熱を前記容器(109)に伝達しかつ制御下の氷核形成を可能にし、前記容器(109)を前記熱伝導表面(101)から引き離し、また前記容器(109)を前記熱伝導表面(101)との接触状態に再配置するよう構成された、該プレス手段(103)と、
を備え、
前記生物学的溶液の凍結はボトムアップジオメトリを有する。
デバイスを予冷却するステップと、
生物学的溶液を収納する容器(109)をホルダ(102)内に配置するステップと、
前記容器の底部(123)を熱伝導表面(101)に対してプレス手段(103)を用いて接触させるステップと、
前記容器(109)を前記熱伝導表面(101)との接触から引き離すステップと、
前記容器底部(123)を前記熱伝導表面(101)に対して前記プレス手段(103)を用いて再配置するステップと、
前記生物学的溶液の凍結がボトムアップジオメトリを有するよう制御した凍結速度を設定するステップと、
を備える。
デバイスを前記溶液の氷核形成温度より相当低い温度まで予冷却するステップであって、前記デバイスは、底部における熱伝導表面及びプレス手段を有するものである、該ステップと、
生物学的溶液を収納する容器をホルダ内に配置するステップであって、前記ホルダは、低熱伝導率材料より成るものである、該ステップと、
前記サンプルの総量における10%の分量が凍結するまで、前記容器を前記熱伝導表面に接触させるステップと、
前記容器と前記熱伝導表面との間の接触を中断するステップと、
前記生物学的溶液の凍結が均質になるよう所定凍結速度で前記容器を前記熱伝導表面に接触させるステップと、
最終的に前記溶液の全量が凍結するまで凍結させるステップと
を備える。
底部における熱伝導表面と、
容器のための少なくとも1つのキャビティを有し、低熱伝導率材料より成るホルダと、
前記容器を前記熱伝導表面との接触状態に配置し、前記熱伝導表面からの熱を前記容器に伝達させ、前記容器を前記熱伝導表面から引き離し、また前記容器を前記熱伝導表面に再接触させる、よう構成されたプレス手段と、
を備え、
前記熱伝導は前記容器の底部から実施して、制御された氷核形成を可能にする、該デバイスに関する。
上述したように、生物学的材料及び溶液のような繊細物質の凍結保存における1つの大きな限界は、凍結及び解凍現象に関連する非一貫性である。多くの変数が凍結における非一貫性に関与し、2つの大きな問題は自然対流及び氷核形成に関連していた。
熱伝導表面(101)を低温(例えば、-40℃より低い温度)に予冷却するステップと
ホルダ(102)内に少なくとも1つの容器(109)を配置し、またプレス手段(103)で前記ホルダ(102)をロックダウン位置に押し付けることによって熱伝導表面(101)内ですべての容器の底部を同時に接触させて、制御された氷核形成を可能にするステップと、
僅かな体積層(≦全量の20%)の氷核形成後に、プレス手段(103)をロックアップ位置にセットし、氷核形成後に液体分量が制御不能に凍結するのを回避するため、生物学的溶液を約0℃の温度に維持しつつ、0.1mm~15mmまでの空隙だけ熱伝導表面(101)から離間したスタンバイ位置をホルダ(102)がとるようにするステップと、
プレス手段(103)をロックダウン位置にセットし、ホルダ(102)を熱伝導表面(101)に押し付け、容器の底部(123)の冷熱伝導表面(101)に対する接触を促進するステップと、
デバイスを制御した凍結速度にセットし、一方向ボトムアップ凍結ジオメトリを促進するステップと、
を備える。
Claims (31)
- デバイスを溶液の核形成温度より実質的に低い温度まで予冷却するステップであり、前記デバイスは、底部における熱伝導表面及びプレス手段を有するものである、ステップと、
生物学的溶液を収納する容器をホルダ内に配置するステップであり、前記ホルダは、低熱伝導率材料を含む、ステップと、
サンプルの総量における10%の分量が凍結するまで、前記容器を前記熱伝導表面に接触させるステップと、
前記容器と前記熱伝導表面との間の接触を中断するステップと、
前記生物学的溶液の凍結が均質になるよう所定凍結速度で前記容器を前記熱伝導表面に接触させるステップと、
前記溶液の全量が凍結するまで凍結させるステップと、
を含む、サンプル溶液をボトムアップジオメトリ凍結し及び/又は核形成するための方法。 - 請求項1記載の方法において、複数のサンプルを含む、方法。
- 請求項1又は2記載の方法において、前記容器内における前記生物学的溶液の制御された凍結速度は、0.1℃/分~100℃/分、好適には0.5℃/分~10℃/分、より好適には1℃/分~5℃/分である、方法。
- 請求項1~3のうちいずれか1項記載の方法において、前記デバイスを予冷却するステップは、-20℃より低い、好適には-30℃より低い、より好適には-40℃より低い温度で実施する、方法。
- 請求項1~4のうちいずれか1項記載の方法において、前記容器と前記熱伝導表面との間における接触を中断するステップは、生物学的溶液を約0℃の温度に維持しつつ、前記容器を前記熱伝導表面から引き離し、好適には、0.1mm~15mmの空隙を生ずるよう配置することによって実施する、方法。
- 請求項1~5のうちいずれか1項記載の方法において、所定凍結速度で前記容器を前記熱伝導表面に接触させるステップは、前記ホルダを前記熱伝導表面に押し付けることで前記容器を前記熱伝導表面との接触状態に配置することによって実施する、方法。
- 請求項1~6のうちいずれか1項記載の方法において、前記生物学的溶液は、微生物、組織、生体細胞、幹細胞、初代細胞、細胞株、生ウイルス若しくは弱毒化ウイルス、核酸、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、生体分子、非ペプチド類似体、ペプチド、タンパク質、RNA分子、DNA分子、オリゴヌクレオチド、ウイルス粒子、又はそれらの組合せを有する、方法。
- 請求項1~7のうちいずれか1項記載の方法を実施するためのデバイスであって、
底部における熱伝導表面と、
容器のための少なくとも1つのキャビティを有し、低熱伝導率材料を含むホルダと、
前記容器を前記熱伝導表面との接触状態に配置し、前記熱伝導表面からの熱を前記容器に伝達させ、前記容器を前記熱伝導表面から引き離し、また前記容器を前記熱伝導表面に再接触させる、よう構成されたプレス手段と、
を備え、
前記熱伝導は前記容器の前記底部から実施して、制御された核形成を可能にする、デバイス。 - 請求項8記載のデバイスにおいて、前記プレス手段は、前記ホルダに対向して、均等分布圧力を前記ホルダに印加し、好適には、手動又は機械的な均等分布圧力を前記ホルダに印加する圧迫器を有する、デバイス。
- 請求項8又は9記載のデバイスにおいて、前記低熱伝導率材料は、プラスチック、セラミック、又は複合材である、デバイス。
- 請求項8~10のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、少なくとも1つの容器を備える、デバイス。
- 請求項8~11のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記プレス手段は、前記容器の一部分を前記熱伝導表面との接触状態に配置し、前記熱伝導表面からの熱を前記容器の一部分に伝達し、前記容器を前記熱伝導表面から引き離し、また前記容器の一部分を前記熱伝導表面との接触状態に再配置するよう構成され、好適には、前記容器の前記一部分は前記容器の前記底部である、デバイス。
- 請求項8~12のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記ホルダは、第1位置と第2位置との間で圧縮可能となるよう、ばね、タブ、又はピンから選択される圧縮可能手段を有し、前記第1位置は前記容器の前記底部を前記熱伝導表面との接触状態に配置し、また前記第2位置は前記容器の前記底部を前記熱伝導表面から離れる状態に配置する、デバイス。
- 請求項8~13のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記ホルダは、第1位置と第2位置との間で圧縮可能な圧縮可能ホルダであり、前記第1位置は前記容器の前記底部を前記熱伝導表面との接触状態に配置し、また前記第2位置は前記容器の前記底部を前記熱伝導表面から離れる状態に配置する、デバイス。
- 請求項8~14のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記ホルダは前記熱伝導表面の平坦形態に押し付けられる、デバイス。
- 請求項1~8のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記ホルダは、前記熱伝導表面の彫り込み形態に押し付けられ、好適には、前記熱伝導表面の彫り込み平坦形態は0.5~3mmにおける深さを有する陥凹である、デバイス。
- 請求項16記載のデバイスにおいて、前記熱伝導表面は、過剰な液体を除去するための、好適には、過剰な接触促進材料を除去するためのチャンネルを有する、デバイス。
- 請求項8~17のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、ヒンジ及び操作子を有するプレス手段フレームを備える、デバイス。
- 請求項8~18のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記熱伝導表面は、ステンレス鋼、銅、アルミニウム、又はそれらの組合せから選択される伝導材料で作成される、デバイス。
- 請求項8~19のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、冷却剤を貯蔵するための冷却剤リザーバを備える、デバイス。
- 請求項8~20のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記熱伝導表面を室温から断熱するための、またユーザーを保護するための断熱フレームを備える、デバイス。
- 請求項8~21のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、露出面積により一様な熱交換を得るためのフィン支持体を備える、デバイス。
- 請求項22記載のデバイスにおいて、冷却剤との接触面積を増大させるためのフィンを備える、デバイス。
- 請求項8~23のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記熱伝導表面と前記容器との間における残留空気を除去するための接触層を備える、デバイス。
- 請求項24記載のデバイスにおいて、前記接触層は液体、ペースト、ペーパー、又は粘着剤であり、好適には、前記接触層は0.1mm~3mmの高さを有する、デバイス。
- 請求項8~25のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記容器は1より大きい高さ/幅アスペクト比を有する、デバイス。
- 請求項8~26のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、容器壁及び前記容器の底部は異なる材料で作成される、デバイス。
- 請求項8~27のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、容器壁は、ポリマー、セラミック、ガラス、又は他の低熱伝導材料で作成される、デバイス。
- 請求項8~28のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記容器の前記底部は、ステンレス鋼、アルミニウム若しくはその他のような高伝導率材料で作成される、又はポリマー、ガラス若しくはその他のような低伝導材料を用いて造作される、デバイス。
- 請求項8~29のうちいずれか1項記載のデバイスにおいて、前記デバイスは凍結デバイスである、デバイス。
- 請求項1~7のうちいずれか1項記載の方法又は請求項8~30のうちいずれか1項記載のデバイスにより凍結される生物学的溶液。
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