JP2021121627A - Antiviral agent - Google Patents

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Abstract

To provide an anti-virus component having improved biological safety.SOLUTION: An antiviral agent contains proteoglycan, mucopolysaccharide, and at least one selected from the group consisting of carbohydrate chain-peptide separation materials of proteoglycan.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、抗ウイルス剤等に関する。 The present invention relates to antiviral agents and the like.

インフルエンザ、麻疹、水痘等の多くのウイルス性疾患は、身近な物品に付着したウイルス、飛沫感染、飛沫核感染等によって伝播する。これらの疾患に対しては各種治療薬、例えばインフルエンザに対する治療薬としてタミフル等が存在するものの、副作用、耐性ウイルスの出現リスク等を考慮すると、ウイルス不活化による予防方法の開発が極めて重要である。 Many viral diseases such as influenza, measles, and chickenpox are transmitted by viruses attached to familiar articles, droplet infections, droplet nuclear infections, and the like. Although there are various therapeutic agents for these diseases, such as Tamiflu as a therapeutic agent for influenza, it is extremely important to develop a preventive method by virus inactivation in consideration of side effects, the risk of appearance of resistant virus, and the like.

この予防の観点から、ウイルス消毒薬を用いて、身近な物品や身体に付着しているウイルスを不活化することが行われている。ただ、一般に、ウイルス消毒薬は組織障害作用を持ち、その使用にあたっては一定の制限がある。特に皮膚や粘膜表面への直接接触の可能性のあるような使用においては、使用法にはっきりした制限がある。 From the viewpoint of this prevention, virus disinfectants are used to inactivate viruses attached to familiar articles and the body. However, in general, virus disinfectants have a tissue-damaging effect, and there are certain restrictions on their use. There are clear restrictions on usage, especially in use where there is a possibility of direct contact with the skin or mucous membrane surface.

プロテオグリカンは、動物の細胞外マトリックスを構成する生体高分子の1種であり、それ故に生体に対する安全性は高いと考えられる。プロテオグリカンは、保水性が高く、また、創傷治癒作用、抗炎症作用等の多様な生理機能を有することが知られており、医薬品や実験試薬以外にも、化粧品や飲食品等の幅広い領域での利用が期待されている。また、生物組織からプロテオグリカンを抽出する際に、古くから食品保存液等として用いられてきた梅干し廃液を抽出溶媒として用いることにより、より安全性の高いプロテオグリカンを得ることが可能である(特許文献1)。 Proteoglycan is one of the biopolymers constituting the extracellular matrix of animals, and is therefore considered to be highly safe for living organisms. Proteoglycans are known to have high water retention and various physiological functions such as wound healing action and anti-inflammatory action, and are used in a wide range of fields such as cosmetics and foods and drinks in addition to pharmaceuticals and experimental reagents. Expected to be used. Further, when proteoglycan is extracted from biological tissue, it is possible to obtain more safe proteoglycan by using a plum-dried waste liquid which has been used as a food preservation liquid for a long time as an extraction solvent (Patent Document 1). ).

特開2016−113382号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 2016-113382

本発明は、生体に対する安全性がより高い抗ウイルス成分を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide an antiviral component having higher safety to a living body.

本発明者は、上記課題に鑑みて鋭意研究を行った結果、プロテオグリカン、ムコ多糖(例えば、グリコサミノグリカン等)、及びプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物からなる群より選択される少なくとも1種がウイルス不活化効果を有することを見出した。さらに、アメフラシ及びナマコから、特にナマコから得られたプロテオグリカン含有抽出物、及び該抽出物中のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物は、より高いウイルス不活化効果を有することを見出した。本発明者はこれらの知見に基づいてさらに研究を行うことにより、本発明を完成させるに至った。 As a result of diligent research in view of the above problems, the present inventor has at least one selected from the group consisting of proteoglycans, mucopolysaccharides (for example, glycosaminoglycans, etc.), and sugar chain-peptide isolates of proteoglycans. It was found that the species has a virus inactivating effect. Furthermore, they have found that proteoglycan-containing extracts obtained from sea cucumbers and sea cucumbers, especially sea cucumbers, and sugar chain-peptide isolates of proteoglycans in the extracts have a higher virus inactivating effect. The present inventor has completed the present invention by conducting further research based on these findings.

即ち、本発明は、下記の態様を包含する:
項1. プロテオグリカン、ムコ多糖、及びプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、抗ウイルス剤。
That is, the present invention includes the following aspects:
Item 1. An antiviral agent containing at least one selected from the group consisting of proteoglycans, mucopolysaccharides, and sugar chain-peptide isolates of proteoglycans.

項2. (A)生物組織のプロテオグリカン含有抽出物、及び(B)該抽出物中のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物からなる群より選択される少なくとも一種を含有
する、項1に記載の抗ウイルス剤。
Item 2. Item 2. The antiviral agent according to Item 1, which contains at least one selected from the group consisting of (A) a proteoglycan-containing extract of biological tissue and (B) a sugar chain-peptide isolate of proteoglycan in the extract. ..

項3. 前記抽出物の抽出溶媒が梅干し廃液(梅酢)である、項2に記載の抗ウイルス剤。 Item 3. Item 2. The antiviral agent according to Item 2, wherein the extraction solvent of the extract is umeboshi waste liquid (umezu).

項4. 前記生物組織が魚類、ナマコ、及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織である、項2又は3に記載の抗ウイルス剤。 Item 4. Item 2. The antiviral agent according to Item 2 or 3, wherein the biological tissue is at least one tissue selected from the group consisting of fish, sea cucumber, and Aplysia.

項5. 前記生物組織がナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織である、項2〜4のいずれかに記載の抗ウイルス剤。 Item 5. Item 2. The antiviral agent according to any one of Items 2 to 4, wherein the biological tissue is at least one tissue selected from the group consisting of sea cucumber and Aplysia.

項6. 前記生物組織がナマコ組織である、項2〜5のいずれかに記載の抗ウイルス剤。 Item 6. Item 2. The antiviral agent according to any one of Items 2 to 5, wherein the biological tissue is a sea cucumber tissue.

項7. ウイルス不活化用である、項1〜6のいずれかに記載の抗ウイルス剤。 Item 7. Item 2. The antiviral agent according to any one of Items 1 to 6, which is used for virus inactivation.

項8. (X)繊維、並びに(Y)該繊維に保持された、 (A1)ナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織のプロテオグリカン含有抽出物、及び (B1)該抽出物中のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物
からなる群より選択される少なくとも一種を含む、抗ウイルス用繊維。
Item 8. (X) Fiber, and (Y) a proteoglycan-containing extract of at least one tissue selected from the group consisting of (A1) sea cucumber and sea cucumber, and (B1) proteoglycan in the extract. An antiviral fiber comprising at least one selected from the group consisting of sugar chain-peptide isolates of sea cucumber.

項9. 前記繊維がさらに梅干し廃液(梅酢)のエタノール沈殿物を保持する、項8に記載の抗ウイルス用繊維。 Item 9. Item 8. The antiviral fiber according to Item 8, wherein the fiber further retains an ethanol precipitate of umeboshi waste liquid (umezu).

項10. 項8又は9に記載の繊維を含有する、抗ウイルス用繊維製品。 Item 10. An antiviral textile product containing the fiber according to item 8 or 9.

項11. ナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織を材料としてプロテオグリカンを抽出することを特徴とする、プロテオグリカン及びムコ多糖の製造方法。 Item 11. A method for producing proteoglycan and mucopolysaccharide, which comprises extracting proteoglycan from at least one tissue selected from the group consisting of sea cucumber and Aplysia.

項12. 抽出溶媒として梅干し廃液(梅酢)を用いる、項11に記載の製造方法。 Item 12. Item 2. The production method according to Item 11, wherein a umeboshi waste liquid (umezu) is used as an extraction solvent.

項13. 項11又は12に記載の方法によって得られ得る、プロテオグリカン及びムコ多糖。 Item 13. Proteoglycan and mucopolysaccharide obtained by the method according to Item 11 or 12.

項14. 項13に記載のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物。 Item 14. Item 3. The sugar chain-peptide isolate of the proteoglycan according to Item 13.

本発明によれば、生体に対する安全性がより高い、抗ウイルス剤を提供することができる。また、本発明によれば、ナマコ及び/又はアメフラシを原料とすることにより、ウイルス不活化効果がより高いプロテオグリカン含有抽出物、及びその糖鎖−ペプチド間分離物を提供することができ、さらにこれらを用いた抗ウイルス剤、抗ウイルス用繊維、抗ウイルス用繊維製品等を提供することができる。 According to the present invention, it is possible to provide an antiviral agent having higher safety to a living body. Further, according to the present invention, by using Namako and / or Amefurashi as a raw material, a proteoglycan-containing extract having a higher virus inactivating effect and a sugar chain-peptide isolate thereof can be provided. It is possible to provide an antiviral agent, an antiviral fiber, an antiviral fiber product, etc. using the above.

プロテオグリカンをセルロースアセテート膜電気泳動した結果を示す(試験例1)。HAがヒアルロン酸スタンダード溶液をスポットしたレーンを示し、ChSがコンドロイチン硫酸スタンダード溶液をスポットしたレーンを示し、ナマコが実施例2のプロテオグリカンの水溶液をスポットしたレーンを示し、アメフラシが実施例1のプロテオグリカンの水溶液をスポットしたレーンを示す。線で囲まれた領域は、バンドが存在すると認められた領域を示す。The result of cellulose acetate membrane electrophoresis of proteoglycan is shown (Test Example 1). HA shows the lanes spotted with the hyaluronic acid standard solution, ChS shows the lanes spotted with the chondroitin sulfate standard solution, sea cucumber shows the lanes spotted with the aqueous solution of the proteoglycan of Example 2, and Ameflaci shows the lanes of the proteoglycan of Example 1. The lane where the aqueous solution is spotted is shown. The area surrounded by the line indicates the area where the band is recognized to be present. ウイルス不活化試験1(単純ヘルペスウイルス1型;以下、HSV-1と略、実施例3)の結果を示す。縦軸は残存ウイルス感染価を示し、横軸はプロテオグリカンの濃度を示す。○は参考例1(魚類)のプロテオグリカンを用いた場合を示し、□は実施例1(アメフラシ)のプロテオグリカンを用いた場合を示し、△は実施例2(ナマコ)のプロテオグリカンを用いた場合を示す。The results of virus inactivation test 1 (herpes simplex virus type 1; hereinafter abbreviated as HSV-1, Example 3) are shown. The vertical axis shows the residual virus infectious titer, and the horizontal axis shows the concentration of proteoglycan. ○ indicates the case where the proteoglycan of Reference Example 1 (fish) was used, □ indicates the case where the proteoglycan of Example 1 (Amefurashi) was used, and △ indicates the case where the proteoglycan of Example 2 (sea cucumber) was used. .. ウイルス不活化試験1(HSV-1、実施例3)の結果を示す。縦軸は残存ウイルス感染価を示し、横軸はプロテオグリカンの濃度を示す。○は実施例2(ナマコ)のプロテオグリカンを用いた場合を示す。The results of virus inactivation test 1 (HSV-1, Example 3) are shown. The vertical axis shows the residual virus infectious titer, and the horizontal axis shows the concentration of proteoglycan. ◯ indicates the case where the proteoglycan of Example 2 (sea cucumber) was used. ウイルス不活化試験2(A型インフルエンザウイルスA0PR8株(H1N1)、実施例4)の結果を示す。縦軸は残存ウイルス感染価を示し、横軸はプロテオグリカンの濃度を示す。○は参考例1(魚類)のプロテオグリカンを用いた場合を示し、□は実施例1(アメフラシ)のプロテオグリカンを用いた場合を示し、△は実施例2(ナマコ)のプロテオグリカンを用いた場合を示し、■は実施例1(アメフラシ)のプロテオグリカンのβ脱離反応処理物を用いた場合を示し、▲は実施例2(ナマコ)のプロテオグリカンのβ脱離反応処理物を用いた場合を示す。The results of virus inactivation test 2 (influenza A virus A0PR8 strain (H1N1), Example 4) are shown. The vertical axis shows the residual virus infectious titer, and the horizontal axis shows the concentration of proteoglycan. ○ indicates the case where the proteoglycan of Reference Example 1 (fish) was used, □ indicates the case where the proteoglycan of Example 1 (Amefurashi) was used, and △ indicates the case where the proteoglycan of Example 2 (sea cucumber) was used. , ■ Indicates the case where the β-elimination reaction product of the proteoglycan of Example 1 (Amefurashi) was used, and ▲ indicates the case of using the β-elimination reaction product of the proteoglycan of Example 2 (Sea cucumber).

本明細書中において、「含有」及び「含む」なる表現については、「含有」、「含む」、「実質的にからなる」及び「のみからなる」という概念を含む。 In the present specification, the expressions "contains" and "contains" include the concepts of "contains", "contains", "substantially consists" and "consists of only".

1.抗ウイルス剤
本発明は、一態様として、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン、及びプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、抗ウイルス剤(本明細書において、「本発明の抗ウイルス剤」と示すこともある。)に関する。以下に、これについて説明する。
1. 1. Antiviral Agent The present invention, in one aspect, comprises an antiviral agent (as used herein), which comprises at least one selected from the group consisting of proteoglycans, glycosaminoglycans, and sugar chain-peptide isolates of proteoglycans. , "The antiviral agent of the present invention"). This will be described below.

1−1.プロテオグリカン
プロテオグリカンとしては、コアタンパク質にグリコサミノグリカンが結合してなる化合物であれば特に限定されない。プロテオグリカンとしては、例えばアグリカン、バイグリカン、バーシカン、ニューロカン、デコリン、ビグリカン、フィブロモデュリン、ルミカン、パールカン、シンデカン、セルグリシン、ブレビカン、ケラトカン、ミメカン、バーマカン、アグリン等、或いはこれらの分解物等が挙げられる。
1-1. Proteoglycan The proteoglycan is not particularly limited as long as it is a compound in which glycosaminoglycan is bound to a core protein. Examples of proteoglycans include aggrecan, biglycan, versican, neurocan, decorin, bigrican, fibromodurine, lumican, perlecan, cindecane, cerglycine, brevican, keratocan, mimecan, vermacan, agrin and the like, or decomposition products thereof. Can be mentioned.

プロテオグリカンが部分構造として有するグリコサミノグリカン鎖は、特に限定されない。該グリコサミノグリカン鎖としては、例えばコンドロイチン硫酸鎖、コンドロイチン鎖、ヘパリン、ヘパラン硫酸鎖、ケラタン硫酸鎖、デルマタン硫酸鎖等が挙げられる。また、これらのグリコサミノグリカン鎖は、分岐鎖としてフコース等の糖を含む鎖を有していてもよい。なお、この場合、分岐鎖を構成する糖残基数は1であってもよいし、2以上であってもよい。また、グリコサミノグリカン鎖を構成する糖残基(分岐鎖中のフコース残基等の糖残基も含む)は硫酸化されたものであってもよい。 The glycosaminoglycan chain that proteoglycan has as a partial structure is not particularly limited. Examples of the glycosaminoglycan chain include chondroitin sulfate chain, chondroitin chain, heparin, heparan sulfate chain, keratan sulfate chain, dermatan sulfate chain and the like. Further, these glycosaminoglycan chains may have a chain containing a sugar such as fucose as a branched chain. In this case, the number of sugar residues constituting the branched chain may be 1 or 2 or more. Further, the sugar residues constituting the glycosaminoglycan chain (including sugar residues such as fucose residues in the branched chain) may be sulfated.

プロテオグリカンの平均分子量は、特に限定されない。プロテオグリカンの平均分子量は、例えば10〜3000kDa、好ましくは120〜2000kDa、より好ましくは170〜1400kDa、さらに好ましくは210〜800kDa、よりさらに好ましくは250〜500kDaである。なお、プロテオグリカンの平均分子量は、試験例2のように、クロマトグラフィーを用いて分画し、プルランスタンダード等の分子量標品の保持時間と比較することにより、測定することができる。 The average molecular weight of proteoglycan is not particularly limited. The average molecular weight of proteoglycan is, for example, 10-3000 kDa, preferably 120-2000 kDa, more preferably 170-1400 kDa, still more preferably 210-800 kDa, still more preferably 250-500 kDa. The average molecular weight of proteoglycan can be measured by fractionating using chromatography and comparing with the retention time of a molecular weight standard such as pullulan standard as in Test Example 2.

プロテオグリカンは、生物組織のプロテオグリカン含有抽出物であることが好ましい。
該抽出物は、後述のグリコサミノグリカンを含有していてもよい。
The proteoglycan is preferably a proteoglycan-containing extract of biological tissue.
The extract may contain glycosaminoglycans, which will be described later.

生物組織のプロテオグリカン含有抽出物の製造方法としては、特に限定されず、例えば公知の方法に従った方法、或いは公知の方法に準じた方法を採用することができる。該製造方法の具体例としては、サケ等の魚類の軟骨からグアニジン塩酸溶液で抽出する方法(特開2001−172296号公報)、抽出溶媒として酢酸を用いる方法(特開2002−069097号公報)等が挙げられる。 The method for producing the proteoglycan-containing extract of biological tissue is not particularly limited, and for example, a method according to a known method or a method according to a known method can be adopted. Specific examples of the production method include a method of extracting from cartilage of fish such as salmon with a guanidine hydrochloric acid solution (Japanese Patent Laid-Open No. 2001-172296), a method of using acetic acid as an extraction solvent (Japanese Patent Laid-Open No. 2002-069097), and the like. Can be mentioned.

生物組織のプロテオグリカン含有抽出物は、人体に対する有害性がより低く、且つ不快臭がより低減されているという観点、さらにはより効率的に抗ウイルス性を発揮できるという観点から、抽出溶媒が梅干し廃液(梅酢)である抽出物であることが好ましい。該抽出物は、(a)生物組織から梅干し廃液(梅酢)でプロテオグリカンを抽出すること(工程a)を含む製造方法によって得ることができる。以下に該製造方法について説明する。 The proteoglycan-containing extract of biological tissue is less harmful to the human body, has less unpleasant odor, and can exert antiviral properties more efficiently. It is preferably an extract of (umeboshi). The extract can be obtained by a production method including (a) extraction of proteoglycan from biological tissue with umeboshi waste liquid (umezu) (step a). The manufacturing method will be described below.

生物組織は、プロテオグリカンを含有する生物組織である限り特に限定されない。プロテオグリカンを含有する生物組織としては、例えば軟骨、結合組織、健、角膜、心房、基底膜、脳、皮膚等があげられる。また、該生物組織の由来生物としては、特に制限されず、例えば魚類、アメフラシ、ナマコ、哺乳類等を広く挙げることができる。これらの生物の中でも、より高いウイルス不活化効果を有するプロテオグリカン含有抽出物を得ることができるという観点から、アメフラシ、ナマコ等が好ましく、ナマコがより好ましい。 The biological tissue is not particularly limited as long as it is a biological tissue containing proteoglycan. Examples of biological tissues containing proteoglycans include cartilage, connective tissue, healthy tissue, cornea, atrium, basement membrane, brain, and skin. The organism from which the biological tissue is derived is not particularly limited, and examples thereof include fish, Aplysia, sea cucumber, and mammals. Among these organisms, Aplysia, sea cucumber and the like are preferable, and sea cucumber is more preferable, from the viewpoint that a proteoglycan-containing extract having a higher virus inactivating effect can be obtained.

魚類としては、特に限定されず、硬骨魚類、軟骨魚類等が広く挙げられる。硬骨魚類としては、例えばタラ、マグロ、サケ、マス、カツオ、ヒラメ、ブリ等が挙げられ、軟骨魚類としては、例えばサメ、エイ等が挙げられる。魚類の組織としては、魚類軟骨が好ましい。該軟骨としては、特に制限されないが、頭部軟骨、中でも鼻軟骨が好ましい。また、魚類が食品製品等へ加工される際に頭部は通常廃棄されることから、頭部軟骨の入手コストは安く、大量に安定供給され得るという利点もある。 The fish are not particularly limited, and teleost fish, cartilaginous fish and the like are widely mentioned. Examples of teleost fish include cod, tuna, salmon, trout, bonito, flounder, yellowtail and the like, and examples of cartilaginous fish include shark, ray and the like. As the tissue of fish, fish cartilage is preferable. The cartilage is not particularly limited, but head cartilage, particularly nasal cartilage is preferable. In addition, since the head is usually discarded when fish are processed into food products, the cost of obtaining head cartilage is low, and there is an advantage that a large amount of cartilage can be stably supplied.

アメフラシは、無楯類に属する生物である限り特に制限されない。アメフラシとしては、例えばウツセミガイ属生物等のウツセミガイ科生物; アメフラシ属生物、トゲアメフラシ属生物、タツナミガイ属生物、ビワガタナメクジ属生物、フウセンウミウシ属生物、ウミナメクジ属生物、スカシウミナメクジ属生物、クサモチアメフラシ属生物、クロスジアメフラシ属生物等のアメフラシ科生物; 等が挙げられ、好ましくはアメフラシ科生物が挙げられ、より好ましくはアメフラシ属生物が挙げられ、さらに好ましくはAplysia kurodaiが挙げられる。 Aplysia is not particularly limited as long as it belongs to an innocent species. Examples of Aplysia include Aplysia, such as Aplysia; Aplysia, Aplysia, Aplysia, Aplysia, Biwagatanamekuji, Fusenumiushi, Uminamekuji, Sukashiuminamekuji, Kusamochi. Aplysia genus organisms, Aplysia genus organisms and the like; and the like, preferably Aplysia genus organisms, more preferably Aplysia kurodai, and more preferably Aplysia kurodai.

ナマコは、ナマコ綱に属する生物である限り特に制限されない。ナマコとしては、
イカリナマコ科生物、クルマナマコ科生物、キクモンナマコ科生物等の無足目生物; 、カウディナ科生物等の隠足目生物; クロナマコ科生物、シカクナマコ科生物、ミツマタナマコ科生物等の楯手目生物; カンテンナマコ科生物、クマナマコ科生物、クラゲナマコ科生物、エボシナマコ科生物、オニナマコ科生物等の板足目生物; フラスコナマコ科生物、イガグリキンコ科生物等の指手目生物; キンコ科生物、ジイガセキンコ科生物、グミモドキ科生物、スクレロダクティラ科生物、ウロコナマコ科生物等の樹手目生物; 等が挙げられ、好ましくは楯手目生物、板足目生物等が挙げられ、より好ましくは楯手目生物が挙げられ、さらに好ましくはシカクナマコ科生物が挙げられ、よりさらに好ましくはマナマコが挙げられる。
Sea cucumber is not particularly limited as long as it belongs to the class Sea cucumber. As a sea cucumber
Icarinaceae, Kurumanamako, Kikumonnamako and other non-legged organisms;, Kaudina and other hidden-eyed organisms; Plate-footed organisms such as caterpillars, bear caterpillars, jellyfish, ebonymaco, onina-mako; Tree-ordered organisms such as Gumimodokiaceae, Sclerodactylaceae, Urokonamako-family, etc.; These include, more preferably, the deer, and even more preferably, the manamaco.

アメフラシ及びナマコの組織を生物組織として採用する場合、アメフラシ及びナマコの体全体を用いてもよいし、プロテオグリカン含有量が低いと考えられる部位(内臓等)を除去したものを用いてもよい。また、生物組織は、余分に付着した固形脂肪がある場合は
それが除去されていることが好ましい。また、生物組織としては、抽出効率の観点からは、小片化したもの、破砕したもの等、溶媒接触面積がより広くなるように加工したものを用いることが好ましい。
When the tissues of Aplysia and sea cucumber are adopted as biological tissues, the whole body of Aplysia and sea cucumber may be used, or those in which the site (internal organs, etc.) considered to have a low proteoglycan content may be removed may be used. In addition, it is preferable that the biological tissue has excess solid fat attached, if any, removed. Further, as the biological tissue, from the viewpoint of extraction efficiency, it is preferable to use a tissue that has been processed so that the solvent contact area becomes wider, such as a fragmented tissue or a crushed tissue.

生物組織は1種単独でもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 The biological tissue may be one kind alone or a combination of two or more kinds.

梅干し廃液(梅酢)としては、特に制限されず、白梅干し廃液、赤梅干し廃液等が挙げられる。これらの中でも、プロテオグリカンへの着色を抑えるという観点からは、白梅干し廃液が好ましい。白梅干し廃液は、典型的には、梅干しの製造に際して、梅と食塩とを混合した後、上におもりを載せて数日間(1〜5日間)放置することにより得られる。梅干し廃液のpHは、特に制限されないが、例えば1.0〜4.0、好ましくは1.5〜3.0、より好ましくは1.5〜2.5であることができる。 The umeboshi effluent (ume vinegar) is not particularly limited, and examples thereof include white umeboshi effluent and red umeboshi effluent. Among these, white umeboshi waste liquid is preferable from the viewpoint of suppressing coloring of proteoglycan. The white umeboshi effluent is typically obtained by mixing ume and salt in the production of umeboshi, placing a weight on the umeboshi, and leaving it for several days (1 to 5 days). The pH of the umeboshi effluent is not particularly limited, but can be, for example, 1.0 to 4.0, preferably 1.5 to 3.0, and more preferably 1.5 to 2.5.

梅干し廃液は1種単独でもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 The umeboshi effluent may be used alone or in combination of two or more.

プロテオグリカンの抽出は、公知の抽出方法に従って行うことができる。例えば、生物組織と梅干し廃液とを混合した後、(好ましくは撹拌しながら)放置することにより行うことができる。 Extraction of proteoglycan can be performed according to a known extraction method. For example, it can be carried out by mixing the biological tissue and the umeboshi waste liquid and then leaving it to stand (preferably with stirring).

生物組織と梅干し廃液との重量比は、特に制限されないが、生物組織が梅干し廃液に浸漬する程度の重量比であることが好ましい。重量比(生物組織:梅干し廃液)は、具体的には、例えば1:1〜1:50、好ましくは1:2〜1:20、より好ましくは1:3〜1:10であることができる。 The weight ratio of the biological tissue to the umeboshi effluent is not particularly limited, but it is preferable that the weight ratio is such that the biological tissue is immersed in the umeboshi effluent. Specifically, the weight ratio (biological tissue: umeboshi waste liquid) can be, for example, 1: 1 to 1:50, preferably 1: 2 to 1:20, and more preferably 1: 3 to 1:10. ..

抽出時間は、プロテオグリカンを抽出できる限り特に限定されない。抽出時間は、例えば3〜72時間、好ましくは8〜48時間、より好ましくは12〜36時間、よりさらに好ましくは18〜30時間であることができる。抽出時間の上限が上記時間であれば、抽出成分中のプロテオグリカンの割合をより高めることができる。 The extraction time is not particularly limited as long as the proteoglycan can be extracted. The extraction time can be, for example, 3 to 72 hours, preferably 8 to 48 hours, more preferably 12 to 36 hours, even more preferably 18 to 30 hours. When the upper limit of the extraction time is the above time, the ratio of proteoglycan in the extraction component can be further increased.

抽出温度は、プロテオグリカンを抽出できる限り特に限定されない。抽出温度は、例えば10〜40℃、好ましくは15〜30℃であることができる。 The extraction temperature is not particularly limited as long as proteoglycan can be extracted. The extraction temperature can be, for example, 10-40 ° C, preferably 15-30 ° C.

上記工程aにより生物組織のプロテオグリカン含有抽出物が得られる。このプロテオグリカン含有抽出物をそのまま「プロテオグリカン」として利用することもできるし、以下の工程を経て得られたものを「プロテオグリカン」として利用することもできる。 The proteoglycan-containing extract of biological tissue is obtained by the above step a. This proteoglycan-containing extract can be used as it is as a "proteoglycan", or the product obtained through the following steps can be used as a "proteoglycan".

工程aに加えて、さらに(b)工程aで得られた抽出物から不溶物(抽出残渣)を除去すること(工程b)を行うことが好ましい。不溶物の除去方法としては特に限定されず、公知の方法、例えばろ過、遠心分離等を採用することができる。 In addition to step a, it is preferable to further (b) remove the insoluble matter (extraction residue) from the extract obtained in step a (step b). The method for removing the insoluble matter is not particularly limited, and known methods such as filtration and centrifugation can be adopted.

得られるプロテオグリカンの純度をより高めるために、上記工程a又は工程bの後に、精製を行ってもよい。精製方法としては、例えばアルコール沈殿、透析、カラム(好ましくは陰イオン交換カラム)クロマトグラフィー、アフニティーカラムクロマトグラフィー、限外ろ過法、電気透析法等が挙げられる。これらの中でも、より簡便であるという観点から、アルコール沈殿が好ましい。よって、工程a及びbに加えて、さらに(c)工程b後、アルコール沈殿によりプロテオグリカンを精製すること(工程c)を行うことがが好ましい。 In order to further increase the purity of the obtained proteoglycan, purification may be performed after the step a or step b. Examples of the purification method include alcohol precipitation, dialysis, column (preferably anion exchange column) chromatography, afnity column chromatography, ultrafiltration method, electrodialysis method and the like. Among these, alcohol precipitation is preferable from the viewpoint of being simpler. Therefore, in addition to steps a and b, it is preferable to further purify the proteoglycan by alcohol precipitation (step c) after step (c) b.

アルコール沈殿は、公知の方法に従って行うことができる。典型的には、工程bを経て得られたプロテオグリカン含有抽出物を、その1〜5倍量(好ましくは2〜4倍量)のア
ルコールと混合した後、一定時間放置することにより沈殿を形成させ、その後、遠心分離して得られたペレットを回収することにより行われる。
Alcohol precipitation can be performed according to a known method. Typically, the proteoglycan-containing extract obtained in step b is mixed with 1 to 5 times (preferably 2 to 4 times) the amount of alcohol, and then left for a certain period of time to form a precipitate. After that, it is carried out by collecting the pellets obtained by centrifugation.

アルコールは、プロテオグリカンを沈殿させることができる限り特に限定されない。アルコールとしては、例えばエタノール、イソプロパノール等が挙げられ、これらの中でも毒性がより低いという観点からはエタノールが好ましく挙げられる。アルコールは1種単独でもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 Alcohol is not particularly limited as long as it can precipitate proteoglycans. Examples of the alcohol include ethanol, isopropanol and the like, and among these, ethanol is preferably mentioned from the viewpoint of lower toxicity. The alcohol may be used alone or in combination of two or more.

アルコールには、塩が含まれていることが好ましい。塩としては、特に限定されず、アルコール沈殿に用いられる通常の塩、例えば塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、塩化リチウム、塩化マグネシウム等が挙げられる。塩は1種単独でもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。アルコール中の塩の濃度は、特に限定されず、アルコール沈殿において採用される通常の塩濃度、例えば塩化ナトリウムの場合はアルコールに対する飽和濃度であることができる。 The alcohol preferably contains a salt. The salt is not particularly limited, and examples thereof include ordinary salts used for alcohol precipitation, such as sodium chloride, sodium acetate, ammonium acetate, lithium chloride, magnesium chloride and the like. The salt may be used alone or in combination of two or more. The concentration of the salt in the alcohol is not particularly limited, and can be a normal salt concentration adopted in alcohol precipitation, for example, a saturated concentration with respect to alcohol in the case of sodium chloride.

沈殿を形成させるために放置する際の温度は、プロテオグリカンを沈殿させることができる限り特に限定されない。温度は、例えば−80℃〜室温程度、好ましくは0〜10℃程度であることができる。 The temperature at which the proteoglycan is left to form a precipitate is not particularly limited as long as the proteoglycan can be precipitated. The temperature can be, for example, about −80 ° C. to room temperature, preferably about 0 to 10 ° C.

沈殿を形成させるために放置する時間は、プロテオグリカンを沈殿させることができる限り特に限定されず、温度に応じて適宜設定される。時間は、温度が0〜10℃である場合であれば、例えば4〜24時間、好ましくは8〜16時間であることができる。 The time left to form the precipitate is not particularly limited as long as the proteoglycan can be precipitated, and is appropriately set according to the temperature. The time can be, for example, 4 to 24 hours, preferably 8 to 16 hours if the temperature is 0 to 10 ° C.

遠心力は、ペレットを形成させることができる限り特に限定されない。遠心力は、例えば700〜2500gであることができる。 Centrifugal force is not particularly limited as long as pellets can be formed. The centrifugal force can be, for example, 700-2500 g.

プロテオグリカンは、1種単独で用いることもできるし、任意の2種以上を組み合わせて用いることもできる。 The proteoglycan may be used alone or in combination of any two or more.

1−2.ムコ多糖
ムコ多糖としては、例えばコンドロイチン硫酸鎖、コンドロイチン鎖、ヘパリン、ヘパラン硫酸鎖、ケラタン硫酸鎖、デルマタン硫酸鎖、ムチン、アルギン酸等が挙げられる。これらのムコ多糖は、直鎖状であっても、分岐鎖状であってもよい。分岐鎖状のムコ多糖としては、例えば分岐型コンドロイチン硫酸等が挙げられる。
1-2. Mucopolysaccharide Examples of mucopolysaccharide include chondroitin sulfate chain, chondroitin chain, heparin, heparan sulfate chain, keratan sulfate chain, dermatan sulfate chain, mucin, alginic acid and the like. These mucopolysaccharides may be linear or branched. Examples of the branched-chain mucopolysaccharide include branched chondroitin sulfate and the like.

ムコ多糖は、上記「1−1.プロテオグリカン」の項における「生物組織のプロテオグリカン含有抽出物」に含まれるものであってもよい。 The mucopolysaccharide may be contained in the "proteoglycan-containing extract of biological tissue" in the above section "1-1. Proteoglycan".

ムコ多糖は、1種単独で用いることもできるし、任意の2種以上を組み合わせて用いることもできる。 The mucopolysaccharide may be used alone or in combination of any two or more.

本発明においては、ムコ多糖に加えて、さらにシアロ糖が含まれていてもよい。 In the present invention, sialosaccharide may be further contained in addition to mucopolysaccharide.

1−3.プロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物
プロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物とは、プロテオグリカンにおいて糖鎖の一部又は全部とペプチドとが分離してなる物である限り特に限定されない。該分離物は、通常、プロテオグリカン由来のペプチド(糖鎖が一部残っていてもよい)とプロテオグリカン由来の糖鎖を含有する。
1-3. Glycan-peptide isolate of proteoglycan The sugar chain-peptide isolate of proteoglycan is not particularly limited as long as a part or all of the sugar chain and the peptide are separated in the proteoglycan. The isolate usually contains a peptide derived from proteoglycan (a part of the sugar chain may remain) and a sugar chain derived from proteoglycan.

プロテオグリカンについては、「1.抗ウイルス剤」の項に記載の態様と同様である。 The proteoglycan is the same as that described in the section “1. Antiviral agent”.

プロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間の分離処理方法としては、特に限定されず、例えばβ脱離処理、酵素処理等が挙げられ、好ましくは酵素処理とβ脱離処理とを組み合わせた処理が挙げられる。 The method for separating the sugar chain and the peptide of proteoglycan is not particularly limited, and examples thereof include β-elimination treatment and enzyme treatment, and preferably a combination of enzyme treatment and β-elimination treatment.

酵素処理は、プロテオグリカンのコアタンパク質を分解できる酵素による処理であれば特に制限されない。使用する酵素としては、例えば公知のタンパク質分解酵素、具体的にはアクチナーゼ(特にアクチナーゼE)、キモトリプシン、スブチリシン、ペプシン、カテプシン、HIVプロテアーゼ、サーモリシン、パパイン、カスパーゼ等が挙げられる。 The enzymatic treatment is not particularly limited as long as it is treated with an enzyme capable of degrading the core protein of proteoglycan. Examples of the enzyme used include known proteolytic enzymes, specifically actinase (particularly actinase E), chymotrypsin, subtilisin, pepsin, cathepsin, HIV protease, thermolysin, papain, caspase and the like.

β脱離処理は、公知の方法に従って行うことができる。例えば、プロテオグリカン及び/又はその分解物を含む試料をアルカリ処理することによって行うことができる。アルカリ処理において、規定度は例えば0.05〜0.2Nであり、処理温度は例えば0〜10℃であり、時間は4〜24時間である。 The β-desorption treatment can be carried out according to a known method. For example, it can be carried out by treating a sample containing proteoglycan and / or a decomposition product thereof with an alkali. In the alkaline treatment, the normality is, for example, 0.05 to 0.2 N, the treatment temperature is, for example, 0 to 10 ° C., and the time is 4 to 24 hours.

酵素処理及びβ脱離処理を組み合わせる場合、その順序は特に制限されない。効率等の観点から、酵素処理の後にβ脱離処理をすることが好ましい。この場合、酵素処理とβ脱離処理との間に、必要に応じて、酵素失活処理、エタノール沈殿による沈殿回収工程を行うことが望ましい。 When the enzyme treatment and the β-elimination treatment are combined, the order is not particularly limited. From the viewpoint of efficiency and the like, it is preferable to perform β-elimination treatment after enzyme treatment. In this case, it is desirable to carry out an enzyme deactivation treatment and a precipitation recovery step by ethanol precipitation, if necessary, between the enzyme treatment and the β desorption treatment.

β脱離処理後は、精製することが好ましい。精製方法としては、例えばTCA沈殿、エタノール沈殿等が挙げられる。 After the β-elimination treatment, it is preferable to purify. Examples of the purification method include TCA precipitation and ethanol precipitation.

プロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物は、1種単独で用いることもできるし、任意の2種以上を組み合わせて用いることもできる。 The sugar chain-peptide isolate of proteoglycan may be used alone or in combination of any two or more.

1−4.用途
本発明の抗ウイルス剤の対象ウイルスとしては、特に制限されないが、例えばインフルエンザウイルス(例えばA型、B型等)、風疹ウイルス、エボラウイルス、コロナウイルス、麻疹ウイルス、水痘・帯状疱疹ウイルス、ヘルペスウイルス、ムンプスウイルス、アルボウイルス、RSウイルス、SARSウイルス、肝炎ウイルス(例えば、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス等)、黄熱ウイルス、エイズウイルス、狂犬病ウイルス、ハンタウイルス、デングウイルス、ニパウイルス、リッサウイルス等のエンベロープウイルス(エンベロープを有するウイルス); アデノウイルス、ノロウイルス、ロタウイルス、ヒトパピローマウイルス、ポリオウイルス、エンテロウイルス、コクサッキーウイルス、ヒトパルボウイルス、脳心筋炎ウイルス、ポリオウイルス、ライノウイルス等の非エンベロープウイルス(エンベロープを有さないウイルス)等が挙げられる。これらの中でも、好ましくはエンベロープウイルスが挙げられ、より好ましくはインフルエンザウイルス、ヘルペスウイルス等が挙げられる。
1-4. Uses The target virus of the antiviral agent of the present invention is not particularly limited, but for example, influenza virus (for example, type A, type B, etc.), ruin virus, ebora virus, corona virus, measles virus, varicella / herpes zoster virus, herpes. Virus, mumps virus, arbovirus, RS virus, SARS virus, hepatitis virus (for example, hepatitis B virus, hepatitis C virus, etc.), yellow fever virus, AIDS virus, mad dog disease virus, hunter virus, dengue virus, nipavirus, lissavirus, etc. Envelope virus (virus with envelope); non-enveloped virus such as adenovirus, norovirus, rotavirus, human papillomavirus, poliovirus, enterovirus, coxsackie virus, human parvovirus, encephalomyelitis virus, poliovirus, rhinovirus Viruses that do not exist) and the like. Among these, enveloped virus is preferable, and influenza virus, herpesvirus and the like are more preferable.

本発明の抗ウイルス剤は、抗ウイルス性を要する各種分野において広く使用することができる。本発明の抗ウイルス剤は、例えば工業、洗浄、医療、食品、日用品等の各種分野において使用することができる。本発明の抗ウイルス剤は、生体に適用する用途と、後述の物品に適用する用途とに分けられる。 The antiviral agent of the present invention can be widely used in various fields requiring antiviral properties. The antiviral agent of the present invention can be used in various fields such as industry, cleaning, medical care, food, and daily necessities. The antiviral agent of the present invention is divided into an application applied to a living body and an application applied to an article described later.

1−4−1.生体に適用する用途
生体に適用する用途としては、例えば医薬、化粧品、洗浄剤、食品組成物、口腔用組成物、健康増進剤、栄養補助剤(サプリメントなど)等が挙げられる。この場合の適用対象は特に限定されず、例えば、ヒト、サル、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウサギ、ブタ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、シカなどの種々の哺乳類動物などが挙げられる。
1-4-1. Applications to be applied to living organisms Examples of applications to be applied to living organisms include pharmaceuticals, cosmetics, detergents, food compositions, oral compositions, health promoters, nutritional supplements (supplements, etc.) and the like. The application target in this case is not particularly limited, and examples thereof include various mammals such as humans, monkeys, mice, rats, dogs, cats, rabbits, pigs, horses, cows, sheep, goats, and deer.

本発明の抗ウイルス剤を生体に適用することによって、有効成分が接触する部位において抗ウイルス効果(例えば、ウイルスの不活化)を発揮することができる。 By applying the antiviral agent of the present invention to a living body, an antiviral effect (for example, inactivation of a virus) can be exhibited at a site where the active ingredient comes into contact.

本発明の抗ウイルス剤の形態は、特に限定されず、本発明の抗ウイルス剤の用途に応じて、各用途において通常使用される形態をとることができる。 The form of the antiviral agent of the present invention is not particularly limited, and the form usually used in each use can be taken depending on the use of the antiviral agent of the present invention.

形態としては、用途が医薬である場合は、例えば貼付剤(プラスター剤、硬膏剤等のテープ剤(リザーバー型、マトリックス型等)、パップ剤、パッチ剤、マイクロニードル等)、軟膏剤、外用液剤(リニメント剤、ローション剤等)、スプレー剤(外用エアゾール剤、ポンプスプレー剤等)、クリーム剤、ゲル剤、点眼剤、眼軟膏剤、点鼻剤、坐剤、直腸用半固形剤、注腸剤等の非経口摂取に適した製剤形態(特に、外用製剤形態); 錠剤(口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む)、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤(ドリンク剤、懸濁剤、シロップ剤を含む)、ゼリー剤などの経口摂取に適した製剤形態(経口製剤形態)が挙げられ、外用製剤形態が好ましく挙げられる。 As for the form, when the use is pharmaceutical, for example, a patch (plaster agent, tape agent such as plaster (reservoir type, matrix type, etc.), pap agent, patch agent, microneedle, etc.), ointment agent, external liquid agent. (Liniment, lotion, etc.), spray (topical aerosol, pump spray, etc.), cream, gel, eye drops, eye ointment, nasal drops, suppositories, semi-solids for rectal, enema Pharmaceutical form suitable for parenteral ingestion of agents (particularly external pharmaceutical form); tablets (including medially disintegrating orally disintegrating tablets, chewable tablets, effervescent tablets, troches, jelly-like drops, etc.), rounds, granules, etc. , Fine granules, powders, hard capsules, soft capsules, dry syrups, liquids (including drinks, suspensions, syrups), jelly, etc. The form of an external preparation is preferably mentioned.

形態としては、用途が化粧品である場合は、例えば液剤、ジェル剤、クリーム剤、軟膏剤、スティック剤等が挙げられる。 When the use is cosmetics, examples of the form include liquids, gels, creams, ointments, sticks and the like.

形態としては、用途が健康増進剤、栄養補助剤(サプリメントなど)などである場合は、例えば錠剤(口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む)、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤(ドリンク剤、懸濁剤、シロップ剤を含む)、ゼリー剤などの経口摂取に適した製剤形態(経口製剤形態)、が挙げられる。 As for the form, when the use is a health promoter, a nutritional supplement (supplement, etc.), for example, a tablet (including an orally disintegrating tablet, a chewable tablet, an effervescent tablet, a troche agent, a jelly-like drop agent, etc.), Pharmaceutical forms suitable for oral ingestion such as pills, granules, fine granules, powders, hard capsules, soft capsules, dry syrups, liquids (including drinks, suspensions and syrups), jelly (including drinks, suspensions and syrups) Oral formulation form).

形態としては、用途が食品組成物の場合は、液状、ゲル状あるいは固形状の食品、例えばジュース、清涼飲料、茶、スープ、豆乳、サラダ油、ドレッシング、ヨーグルト、ゼリー、プリン、ふりかけ、育児用粉乳、ケーキミックス、粉末状または液状の乳製品、パン、クッキーなどが挙げられる。 In terms of form, when the application is a food composition, liquid, gel or solid foods such as juice, soft drinks, tea, soup, soy milk, salad oil, dressing, yogurt, jelly, pudding, sprinkle, milk powder for childcare. , Cake mixes, powdered or liquid dairy products, breads, cookies and the like.

形態としては、用途が口腔用組成物(医薬も包含する)である場合は、例えば液体(溶液、乳液、懸濁液など)、半固体(ゲル、クリーム、ペーストなど)、固体(錠剤、粒子状剤、カプセル剤、フィルム剤、混練物、溶融固体、ロウ状固体、弾性固体など)などの任意の形態、より具体的には、歯磨剤(練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、粉歯磨など)、洗口剤、含嗽剤、塗布剤、貼付剤、口中清涼剤、食品(例えば、チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、フィルム、トローチなど)などが挙げられる。 In terms of form, when the application is an oral composition (including pharmaceuticals), for example, a liquid (solution, emulsion, suspension, etc.), a semi-solid (gel, cream, paste, etc.), a solid (tablet, particle). Arbitrary forms such as gargles, capsules, films, kneaded products, molten solids, lozenges, elastic solids, etc., more specifically dentifrices (dentifrices, liquid dentifrices, liquid dentifrices, powdered dentifrices, etc.) ), Mouthwash, mouthwash, coating agent, patch, mouthwash, food (for example, chewing gum, tablet confectionery, candy, gummy, film, troche, etc.).

本発明の抗ウイルス剤は、必要に応じてさらに他の成分を含んでいてもよい。他の成分としては、例えば医薬、化粧品、食品組成物、口腔用組成物、健康増進剤、栄養補助剤(サプリメントなど)などに配合され得る成分である限り特に限定されるものではないが、例えば基剤、担体、溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、保湿剤、着色料、香料、キレート剤などが挙げられる。 The antiviral agent of the present invention may further contain other components, if necessary. The other ingredients are not particularly limited as long as they are ingredients that can be blended in, for example, pharmaceuticals, cosmetics, food compositions, oral compositions, health promoters, nutritional supplements (supplements, etc.), but for example. Bases, carriers, solvents, dispersants, emulsifiers, buffers, stabilizers, excipients, binders, disintegrants, lubricants, thickeners, moisturizers, colorants, fragrances, chelating agents, etc. ..

本発明の抗ウイルス剤の有効成分の含有量は、有効成分の種類、用途、使用態様、適用対象、適用対象の状態などに左右されるものであり、限定はされないが、例えば0.000001〜100重量%、好ましくは0.001〜50重量%とすることができる。 The content of the active ingredient of the antiviral agent of the present invention depends on the type, use, mode of use, application target, state of application target, etc. of the active ingredient, and is not limited, but is, for example, 0.000001 to 0.000001. It can be 100% by weight, preferably 0.001 to 50% by weight.

本発明の抗ウイルス剤の適用(例えば、投与、摂取、接種など)量は、所望の効果を発現する有効量であれば特に限定されず、通常は、有効成分の重量として、一般に一日あた
り0.1〜1000 mg/kg体重である。上記投与量は1日1回又は2〜3回に分けて投与するのが好ましく、年齢、病態、症状により適宜増減することもできる。
The amount of the antiviral agent of the present invention applied (for example, administration, ingestion, inoculation, etc.) is not particularly limited as long as it is an effective amount that exerts a desired effect, and is usually, as the weight of the active ingredient, generally per day. 0.1 to 1000 mg / kg body weight. The above dose is preferably administered once a day or divided into 2 to 3 times, and can be appropriately increased or decreased depending on the age, pathological condition, and symptom.

1−4−2.物品に適用する用途
物品に適用する用途としては、例えば物品のウイルス消毒薬等が挙げられる。この場合の適用対象は、特に制限されず、各種分野において用いられている工業製品やその原材料が挙げられる。工業製品の具体例としては、OA機器、家電、空調機器、掃除機、机、椅子、ソファー、ベンチ、窓、つり革、ハンドル、シート、自動改札機、自動券売機、自動販売機、扉、柵、手摺、食器、調理用具、包装フィルム、包装袋、瓶、ボトル、包装パック、シンク、便器、文房具、書籍、棚、歯ブラシ、鏡、フィルター、マスク、コート、ジャケット、ズボン、スカート、ワイシャツ、ニットシャツ、ブラウス、セーター、カーディガン、ナイトウエア、肌着、下着、オムツ、サポーター、靴下、タイツ、ストッキング、帽子、スカーフ、マフラー、襟巻き、ストール、手袋、服の裏地、服の芯地、服の中綿、作業着、ユニフォーム、学童用制服等の衣料、カーテン、アミ戸、布団地、布団綿、布団カバー、枕カバー、シーツ、マット、カーペット、タオル、ハンカチ、壁布、バンドエイド、包帯等、さらにはこれらの複合材料等が挙げられる。これらの中でも、繊維及び繊維製品以外の物品に適用することが好ましい。
1-4-2. Applications applied to articles Examples of applications applied to articles include virus disinfectants for articles. The application target in this case is not particularly limited, and examples thereof include industrial products used in various fields and their raw materials. Specific examples of industrial products include OA equipment, home appliances, air conditioning equipment, vacuum cleaners, desks, chairs, sofas, benches, windows, leather, handles, seats, automatic ticket gates, automatic ticket vending machines, vending machines, doors, etc. Fences, handrails, tableware, cooking utensils, packaging films, packaging bags, bottles, bottles, packaging packs, sinks, toiletries, stationery, books, shelves, toothbrushes, mirrors, filters, masks, coats, jackets, trousers, skirts, shirts, Knit shirts, blouses, sweaters, cardigans, nightwear, underwear, underwear, omelets, supporters, socks, tights, stockings, hats, scarves, mufflers, scarves, stalls, gloves, clothing linings, clothing cores, clothing Batting, work clothes, uniforms, school uniforms and other clothing, curtains, ami doors, duvets, duvet cotton, duvet covers, pillowcases, sheets, mats, carpets, towels, handkerchiefs, wall cloths, band aids, bandages, etc. Further, these composite materials and the like can be mentioned. Among these, it is preferable to apply it to articles other than textiles and textile products.

本発明の抗ウイルス剤を物品に適用することによって、有効成分が接触する部位において抗ウイルス効果(例えば、ウイルスの不活化)を発揮することができる。 By applying the antiviral agent of the present invention to an article, an antiviral effect (for example, inactivation of a virus) can be exerted at a site where the active ingredient comes into contact.

本発明の抗ウイルス剤の剤形は特に制限されず、その用途に応じて適宜選択することができる。剤形としては、例えば液剤、乳剤、懸濁剤、分散剤、エアゾール剤等の液剤; 水和剤、粉剤、粒剤、微粒剤、フロアブル剤等の固形又は半固形剤等が挙げられる。 The dosage form of the antiviral agent of the present invention is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the intended use. Examples of the dosage form include liquid preparations such as liquid preparations, emulsions, suspensions, dispersants and aerosols; solid or semi-solid preparations such as wettable powders, powders, granules, fine granules and flowable agents.

本発明の抗ウイルス剤は、必要に応じてさらに他の成分を含んでいてもよい。他の成分としては、例えば物品の消毒剤などに配合され得る成分である限り特に限定されるものではないが、例えば基剤、担体、溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、保湿剤、着色料、香料、キレート剤などが挙げられる。 The antiviral agent of the present invention may further contain other components, if necessary. The other components are not particularly limited as long as they can be blended in, for example, a disinfectant for articles, but for example, a base, a carrier, a solvent, a dispersant, an emulsifier, a buffer, a stabilizer, and an excipient. Examples include agents, binders, disintegrants, lubricants, thickeners, moisturizers, colorants, fragrances, chelating agents and the like.

本発明の抗ウイルス剤の有効成分の含有量は、有効成分の種類、用途、使用態様、適用対象、適用対象の状態などに左右されるものであり、限定はされないが、例えば0.000001〜100重量%、好ましくは0.001〜50重量%とすることができる。 The content of the active ingredient of the antiviral agent of the present invention depends on the type, use, mode of use, application target, state of application target, etc. of the active ingredient, and is not limited, but is, for example, 0.000001 to 0.000001. It can be 100% by weight, preferably 0.001 to 50% by weight.

2.繊維及び繊維製品
本発明は、一態様として、(X)繊維、並びに
(Y)該繊維に保持された、
(A1)ナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織のプロテオグリカン含有抽出物、及び
(B1)該抽出物中のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物
からなる群より選択される少なくとも一種(以下、「抗ウイルス成分」と示すこともある。)
を含む、抗ウイルス用繊維(本明細書において、「本発明の繊維」と示すこともある。)に関する。また、本発明は、本発明の繊維を含有する、抗ウイルス用繊維製品(本明細書において、「本発明の繊維製品」と示すこともある。)に関する。以下、これらについて説明する。
2. Fibers and Textile Products The present invention, in one aspect, comprises (X) fibers and (Y) held in the fibers.
(A1) A proteoglycan-containing extract of at least one tissue selected from the group consisting of sea cucumber and Aplysia, and (B1) at least selected from the group consisting of a sugar chain-peptide isolate of proteoglycan in the extract. A type (hereinafter, may be referred to as "antiviral component")
The present invention relates to an antiviral fiber (sometimes referred to as "the fiber of the present invention" in the present specification). The present invention also relates to an antiviral textile product containing the fiber of the present invention (in the present specification, it may be referred to as "the textile product of the present invention"). These will be described below.

プロテオグリカン含有抽出物(A1)、糖鎖−ペプチド間分離物(B1)、抗ウイルス等については、「1.抗ウイルス剤」の項に記載の態様と同様である。 The proteoglycan-containing extract (A1), the sugar chain-peptide isolate (B1), the antiviral, and the like are the same as those described in the section “1. Antiviral agent”.

繊維としては、特に制限されず、例えば植物繊維(例えば綿繊維、麻繊維、亜麻繊維、レーヨン繊維、ポリノジック繊維、キュプラ繊維、リヨセル繊維、アセテート繊維等)、動物繊維(例えば羊毛、絹、天蚕糸、モヘヤ、カシミア、キャメル、ラマ、アルパカ、ビキューナ、アンゴラ、蜘蛛糸等)、鉱物繊維(例えば温石綿、白石綿、青石綿、茶石綿、直閃石綿、透角閃石綿、陽起石綿等)等の天然繊維; 合成繊維(例えばナイロン繊維、ポリエステル繊維、アクリル繊維、ビニロン繊維、ポリオレフィン繊維、、ポリエチレン繊維、ポリプロピレン繊維、ポリウレタン繊維等)、再生繊維(例えばレーヨン、ポリノジック、キュプラ、リヨセル、アセテート等)、ガラス繊維(例えばグラスウール、グラスファイバー等)、炭素繊維(例えばPAN系炭素繊維、ピッチ系炭素繊維、カーボンナノチューブ等)、人造鉱物繊維(例えばロックウール、セラミックファイバー等)等の化学繊維等を広く用いることができる。 The fiber is not particularly limited, and is, for example, plant fiber (for example, cotton fiber, hemp fiber, flax fiber, rayon fiber, polynosic fiber, cupra fiber, lyocell fiber, acetate fiber, etc.), animal fiber (for example, wool, silk, natural silkworm thread). , Moheya, cashimia, camel, llama, alpaca, vicuna, angora, spider silk, etc.), mineral fibers (eg, warm asbestos, white asbestos, blue asbestos, brown asbestos, straight flash asbestos, transparent flash asbestos, positive asbestos, etc.) Natural fibers such as synthetic fibers (eg nylon fiber, polyester fiber, acrylic fiber, vinylon fiber, polyolefin fiber ,, polyethylene fiber, polypropylene fiber, polyurethane fiber, etc.), recycled fiber (eg rayon, polynosic, cupra, lyocell, acetate, etc. ), Glass fiber (for example, glass wool, glass fiber, etc.), carbon fiber (for example, PAN-based carbon fiber, pitch-based carbon fiber, carbon nanotube, etc.), artificial mineral fiber (for example, rock wool, ceramic fiber, etc.), etc. Can be widely used.

本発明の繊維は、上記各種繊維の混紡であってもよい。また、本発明の繊維には、上記繊維の一次加工品、例えば糸、紐、ロープ、織物、編物、不織布、紙等が包含される。 The fiber of the present invention may be a blend of the above-mentioned various fibers. In addition, the fibers of the present invention include primary processed products of the fibers, such as threads, strings, ropes, woven fabrics, knitted fabrics, non-woven fabrics, and papers.

上記繊維の中でも、気体(例えば空気、呼気等)中のウイルスをより効率的に捕捉し、人体(特に粘膜)に接触するウイルス或いは環境中のウイルスをより低減できるという観点から、不織布が好ましい。 Among the fibers, the non-woven fabric is preferable from the viewpoint of more efficiently capturing the virus in the gas (for example, air, exhaled breath, etc.) and further reducing the virus that comes into contact with the human body (particularly the mucous membrane) or the virus in the environment.

本発明の繊維は、抗ウイルス成分を保持する。保持の態様としては、特に限定されないが、抗ウイルス成分が直接繊維表面に吸着している態様、抗ウイルス成分が接着成分を介して間接的に繊維表面に吸着している態様、抗ウイルス成分が化学結合を介して繊維に結合している態様等が挙げられる。 The fibers of the present invention retain antiviral components. The mode of retention is not particularly limited, but an antiviral component is directly adsorbed on the fiber surface, an antiviral component is indirectly adsorbed on the fiber surface via an adhesive component, and an antiviral component is used. Examples thereof include a mode in which the virus is bonded to the fiber via a chemical bond.

本発明の繊維が保持する抗ウイルス成分の量は、特に限定されないが、繊維100質量部に対して、例えばプロテオグリカン0.01〜50質量部、好ましくは0.1〜20質量部、より好ましくは1〜10質量部である。 The amount of the antiviral component retained by the fiber of the present invention is not particularly limited, but is, for example, 0.01 to 50 parts by mass, preferably 0.1 to 20 parts by mass, more preferably 0.1 part by mass of proteoglycan with respect to 100 parts by mass of the fiber. 1 to 10 parts by mass.

本発明の繊維製品は、上記した本発明の繊維を含有し、且つ該繊維を加工して得られた繊維製品である限りにおいて、特に限定されず、本発明の繊維以外の他の繊維を含んでいてもよい。 The textile product of the present invention is not particularly limited as long as it contains the above-mentioned fibers of the present invention and is a textile product obtained by processing the fibers, and includes fibers other than the fibers of the present invention. You may be.

本発明の繊維製品が他の繊維を含んでいる場合、本発明の繊維の含有量は、より高い抗ウイルス能を発揮できるという観点から、本発明の繊維製品100質量%に対して、例えば30〜100質量%、好ましくは50〜100質量%、より好ましくは70〜100質量%、さらに好ましくは80〜100質量%、よりさらに好ましくは90〜100質量%、特に好ましくは95〜100質量%である。 When the textile product of the present invention contains other fibers, the content of the fibers of the present invention is, for example, 30 with respect to 100% by mass of the textile product of the present invention from the viewpoint that higher antiviral ability can be exhibited. ~ 100% by mass, preferably 50 to 100% by mass, more preferably 70 to 100% by mass, still more preferably 80 to 100% by mass, still more preferably 90 to 100% by mass, particularly preferably 95 to 100% by mass. be.

繊維製品の具体例としては、マスク、マスク用フィルター、空調機器(例えばエアコンディショナー、空気清浄機等)用フィルター、コート、ジャケット、ズボン、スカート、ワイシャツ、ニットシャツ、ブラウス、セーター、カーディガン、ナイトウエア、肌着、下着、オムツ、サポーター、靴下、タイツ、ストッキング、帽子、スカーフ、マフラー、襟巻き、ストール、手袋、服の裏地、服の芯地、服の中綿、作業着、ユニフォーム、学童用制服等の衣料、カーテン、アミ戸、布団地、布団綿、布団カバー、枕カバー、シーツ、マット、カーペット、タオル、ハンカチ、壁布、壁紙、フロア外張り、バンドエイド、包帯等が挙げられる。これらの中でも、気体(例えば空気、呼気等)中のウイルスをより効率的に捕捉し、人体(特に粘膜)に接触するウイルス或いは環境中のウイルスをより低減できるという観点から、好ましくはマスク、マスク用フィルター、空調機器(例えばエアコンディショナー、空気清浄機等)用フィルター等が挙げられる。 Specific examples of textile products include masks, mask filters, air conditioner filters (for example, air conditioners, air purifiers, etc.), coats, jackets, trousers, skirts, shirts, knit shirts, blouses, sweaters, cardigans, and nightwear. , Underwear, underwear, omelets, supporters, socks, tights, stockings, hats, scarves, mufflers, scarves, stalls, gloves, clothes linings, clothes cores, clothes batting, work clothes, uniforms, school uniforms, etc. Clothing, curtains, ami doors, duvets, duvet cotton, duvet covers, pillowcases, sheets, mats, carpets, towels, handkerchiefs, wall cloths, wallpaper, floor linings, band aids, bandages, etc. Among these, masks and masks are preferable from the viewpoint of more efficiently capturing viruses in gas (for example, air, exhaled breath, etc.) and further reducing viruses that come into contact with the human body (particularly mucous membranes) or viruses in the environment. Filters for air conditioners, filters for air conditioners (for example, air conditioners, air purifiers, etc.) and the like.

本発明の繊維及び本発明の繊維製品は、抗ウイルス成分を保持していることによって、抗ウイルス性が高められている。 The fiber of the present invention and the textile product of the present invention have enhanced antiviral properties by retaining an antiviral component.

このような本発明の繊維及び本発明の繊維製品は、繊維又は繊維製品に抗ウイルス成分を保持させることにより、或いはこれにより得られた繊維又は繊維製品を加工することにより製造することができる。この製造方法は、別の観点から、「繊維又は繊維製品の抗ウイルス加工方法」ということもできる。 Such fibers of the present invention and textile products of the present invention can be produced by causing the fibers or textile products to retain an antiviral component, or by processing the fibers or textile products obtained thereby. From another point of view, this production method can also be referred to as an "antiviral processing method for fibers or textile products".

抗ウイルス成分の保持は、公知の方法に従って行うことができる。抗ウイルス成分の保持は、例えば、繊維又は繊維製品と、抗ウイルス成分を含有する処理剤とを接触させる方法(より具体的には、例えば繊維又は繊維製品を、抗ウイルス成分を含有する処理剤を含む処理液中に浸漬する方法や、抗ウイルス成分を含有する処理剤を含む処理液を繊維又は繊維製品に噴霧する方法等)により行うことができる。なお、この処理剤は、繊維又は繊維製品の抗ウイルス性を高めることができるので、「繊維又は繊維製品の抗ウイルス性向上剤」ということもできる。該向上剤は、溶液状として、マスク使用者が適宜噴霧することにより、簡便に使用することができる。 Retention of the antiviral component can be performed according to a known method. Retention of the antiviral component is, for example, a method of contacting a fiber or textile product with a treatment agent containing the antiviral component (more specifically, for example, a fiber or textile product, a treatment agent containing the antiviral component. It can be carried out by a method of immersing in a treatment liquid containing the above, a method of spraying a treatment liquid containing a treatment agent containing an antiviral component onto a fiber or a textile product, etc.). Since this treatment agent can enhance the antiviral property of the fiber or textile product, it can also be referred to as an "antiviral property improver for the fiber or textile product". The improver can be easily used as a solution by being appropriately sprayed by the mask user.

処理液としては、処理剤が溶媒を含む場合はこれをそのまま、処理剤が溶媒を含まない場合はこれに適宜溶媒を添加したものを用いることができる。 As the treatment liquid, when the treatment agent contains a solvent, it can be used as it is, and when the treatment agent does not contain a solvent, a treatment liquid to which a solvent is appropriately added can be used.

処理液又は処理剤の溶媒としては、抗ウイルス成分を著しく変性させない溶媒である限りにおいて特に限定されないが、例えば水、水とアルコールの混合溶媒、接着成分等が挙げられる。これらの中でも、好ましくは水とアルコールの混合溶媒が挙げられ、より好ましくは水とエタノールの混合溶媒が挙げられる。該混合溶媒におけるアルコール濃度は、特に制限されないが、例えば10〜50%(v/v)、好ましくは15〜40%(v/v)である。なお、接着成分としては、例えばPVA(洗濯のり)等が挙げられる。 The solvent of the treatment liquid or the treatment agent is not particularly limited as long as it is a solvent that does not significantly denature the antiviral component, and examples thereof include water, a mixed solvent of water and alcohol, and an adhesive component. Among these, a mixed solvent of water and alcohol is preferable, and a mixed solvent of water and ethanol is more preferable. The alcohol concentration in the mixed solvent is not particularly limited, but is, for example, 10 to 50% (v / v), preferably 15 to 40% (v / v). Examples of the adhesive component include PVA (laundry starch) and the like.

処理液の量は、処理液が繊維又は繊維製品に浸透可能な限りにおいて特に限定されない。処理液の量は、繊維100質量部に対して、例えば1000〜100000質量部、好ましくは2000〜50000質量部、より好ましくは4000〜30000質量部である。 The amount of the treatment liquid is not particularly limited as long as the treatment liquid can permeate the fiber or the textile product. The amount of the treatment liquid is, for example, 1000 to 100,000 parts by mass, preferably 2000 to 50,000 parts by mass, and more preferably 4000 to 30000 parts by mass with respect to 100 parts by mass of the fiber.

処理液への浸漬時間は、処理液が繊維又は繊維製品に浸透可能な限りにおいて特に限定されず、繊維又は繊維製品の種類に応じて適宜設定することができる。 The immersion time in the treatment liquid is not particularly limited as long as the treatment liquid can permeate the fiber or the textile product, and can be appropriately set according to the type of the fiber or the textile product.

処理へ浸漬する際の温度は、処理液が繊維又は繊維製品に浸透可能な限りにおいて特に限定されず、例えば10〜40℃である。 The temperature at the time of immersion in the treatment is not particularly limited as long as the treatment liquid can permeate the fiber or the textile product, and is, for example, 10 to 40 ° C.

処理液へ浸漬した後は、繊維又は繊維製品に付着した溶媒を、乾燥処理等により除去することが望ましい。乾燥処理の条件は、溶媒の種類、量等に応じて適宜設定することができる。例えば、室温〜50℃程度で2〜8時間程度であってもよい。 After immersing in the treatment liquid, it is desirable to remove the solvent adhering to the fiber or the textile product by a drying treatment or the like. The conditions of the drying treatment can be appropriately set according to the type and amount of the solvent. For example, it may be about 2 to 8 hours at room temperature to about 50 ° C.

本発明の繊維及び本発明の繊維製品は、抗ウイルス用である。ここで、「抗ウイルス用」とは、気体中のウイルスを捕捉する目的(換言すれば、ウイルス捕捉用)、ウイルス感染性を低下させる目的、ウイルスの細胞吸着性を低下させる目的等の目的で用いられることを意味する。 The fibers of the present invention and the textile products of the present invention are for antiviral use. Here, "for antiviral" means for the purpose of capturing a virus in a gas (in other words, for capturing a virus), reducing virus infectivity, reducing virus cell adsorption, and the like. Means to be used.

3.プロテオグリカンの製造方法、プロテオグリカン、及びその糖鎖−ペプチド間分離物
本発明は、一態様として、ナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも
1種の組織を材料としてプロテオグリカンを抽出することを特徴とする、プロテオグリカンの製造方法、それにより得られたプロテオグリカン、及び該プロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物に関する。
3. 3. Method for Proteoglycan Production, Proteoglycan, and Separation between Sugar Chain and Peptide The present invention is characterized in that, as one embodiment, proteoglycan is extracted from at least one tissue selected from the group consisting of catfish and amefurashi. The present invention relates to a method for producing a proteoglycan, a proteoglycan obtained thereby, and a sugar chain-peptide isolate of the proteoglycan.

これらの態様等については、「1.抗ウイルス剤」の項に記載の態様等と同様である。 These aspects and the like are the same as those described in the section “1. Antiviral agent”.

以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in detail based on examples, but the present invention is not limited to these examples.

参考例1:梅干し廃液(梅酢)の調製
和歌山県産の完熟した南高梅(3 kg)と食塩(360 g)とを混合し、よく揉んだ。これ
を瓶に詰め、上におもりを載せて、3日間冷所で静置した。静置後、梅を取り除いた後に
得られた溶液を濾過し、630 mLの梅干し廃液を得た。この梅干し廃液のpHは2.1であった
Reference Example 1: Preparation of dried plum liquor (umezu) Ripe Nanko plum (3 kg) and salt (360 g) from Wakayama prefecture were mixed and kneaded well. This was bottled, a weight was placed on it, and it was allowed to stand in a cool place for 3 days. After standing, the solution obtained after removing the ume was filtered to obtain 630 mL of umeboshi effluent. The pH of this umeboshi effluent was 2.1.

参考例2:魚類軟骨からのプロテオグリカンの抽出
破砕された魚類軟骨(30g)と、参考例1で得られた梅干し廃液(600mL)とを混合し、室温にて緩やかに撹拌しながら24時間放置した。得られた混合液をろ紙でろ過して、不溶成分を除去した。得られたろ液に、食塩が飽和量溶解したエタノール(食塩飽和エタノール)(1.8L)を加えて混合した後、4℃にて12時間放置した。遠心分離(1300 g×10分間
)した後、ペレット(白色)を回収した。白色沈殿をエタノール(100mL)で洗浄後、風
乾して、1.03gのプロテオグリカンを得た。
Reference Example 2: Extraction of proteoglycan from fish cartilage Crushed fish cartilage (30 g) and umeboshi waste liquid (600 mL) obtained in Reference Example 1 were mixed and left at room temperature for 24 hours with gentle stirring. .. The obtained mixed solution was filtered through a filter paper to remove insoluble components. Ethanol (saturated salt ethanol) (1.8 L) in which a saturated amount of salt was dissolved was added to the obtained filtrate and mixed, and then left at 4 ° C. for 12 hours. After centrifugation (1300 g x 10 minutes), pellets (white) were collected. The white precipitate was washed with ethanol (100 mL) and air-dried to obtain 1.03 g of proteoglycan.

実施例1:アメフラシからのプロテオグリカンの抽出
Aplysia kurodai(アメフラシの一種)を採取した。2cm四方に切断したアメフラシ(2
頭)と、参考例1で得られた梅干し廃液(200mL)とを混合し、室温にて緩やかに撹拝し
ながら24時間放置した。得られた混合液をろ紙でろ過して、不溶成分を除去した。得られたろ液に、食塩が飽和量溶解したエタノール(食塩飽和エタノール)(600mL)を加えて
混合した後、4℃にて12時間放置した。遠心分離(1300 g×10分間)した後、ペレット(
白色)を回収した。白色沈殿をエタノール(20mL)で洗浄後、風乾して、1.12 gのプロテオグリカン含有抽出物を得た。
Example 1: Extraction of proteoglycan from Aplysia
Aplysia kurodai (a type of Aplysia kurodai) was collected. Aplysia cut into 2 cm squares (2)
(Head) and the umeboshi waste liquid (200 mL) obtained in Reference Example 1 were mixed and left to stand for 24 hours while gently stirring at room temperature. The obtained mixed solution was filtered through a filter paper to remove insoluble components. Ethanol (saturated salt ethanol) (600 mL) in which a saturated amount of salt was dissolved was added to the obtained filtrate and mixed, and then left at 4 ° C. for 12 hours. After centrifugation (1300 g x 10 minutes), pellets (1300 g x 10 minutes)
White) was collected. The white precipitate was washed with ethanol (20 mL) and air-dried to obtain 1.12 g of a proteoglycan-containing extract.

実施例2:ナマコからのプロテオグリカンの抽出
マナマコ(ナマコの一種)を採取した。2cm四方に切断したナマコ外皮(39g)と、参考例1で得られた梅干し廃液(200mL)とを混合し、室温にて緩やかに撹拝しながら24時間
放置した。得られた混合液をろ紙でろ過して、不溶成分を除去した。得られたろ液に、食塩が飽和量溶解したエタノール(食塩飽和エタノール)(600mL)を加えて混合した後、4℃にて12時間放置した。遠心分離(1300 g×10分間)した後、ペレット(灰色)を回収した。灰色沈殿をエタノール(20mL)で洗浄後、風乾して、150mgのプロテオグリカン含有
抽出物を得た。
Example 2: Extraction of proteoglycan from sea cucumber Apostichopus japonicus (a type of sea cucumber) was collected. The sea cucumber hull (39 g) cut into 2 cm squares and the umeboshi waste liquid (200 mL) obtained in Reference Example 1 were mixed and left to stand for 24 hours while gently stirring at room temperature. The obtained mixed solution was filtered through a filter paper to remove insoluble components. Ethanol (saturated salt ethanol) (600 mL) in which a saturated amount of salt was dissolved was added to the obtained filtrate and mixed, and then left at 4 ° C. for 12 hours. After centrifugation (1300 g x 10 minutes), pellets (gray) were collected. The gray precipitate was washed with ethanol (20 mL) and air dried to give a 150 mg proteoglycan-containing extract.

試験例1:プロテオグリカンの確認
実施例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物及び実施例2で得られたプロテオグリカン含有抽出物それぞれを水に溶解させ、0.1%プロテオグリカン水溶液を調製し、そのうち(5μL)と、別途調製したスタンダード溶液(ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸水溶液)を、泳動用緩衝液(0.1 Mギ酸−ピリジン緩衝液(pH 3.0))を予め浸透させたセル
ロースアセテート膜上にスポットした。次いでそのセルロースアセテート膜を泳動層にのせ1mA/cmにて15分間、電気泳動を行った。泳動後、セルロースアセテート膜をアルシア
ンブルー染色に供し、70%エタノールで脱色した後、染色バンドを目視で観察した。
Test Example 1: Confirmation of proteoglycan The proteoglycan-containing extract obtained in Example 1 and the proteoglycan-containing extract obtained in Example 2 were each dissolved in water to prepare a 0.1% proteoglycan aqueous solution, of which (5 μL) and , A separately prepared standard solution (hyaluronic acid, chondroitin sulfuric acid aqueous solution) was spotted on a cellulose acetate film pre-impregnated with a running buffer (0.1 M formic acid-pyridine buffer (pH 3.0)). Next, the cellulose acetate membrane was placed on a migration layer and electrophoresed at 1 mA / cm for 15 minutes. After the electrophoresis, the cellulose acetate film was subjected to Alcian blue staining, decolorized with 70% ethanol, and then the staining band was visually observed.

結果を図1に示す。詳細な解析をさらに進めた結果、ナマコのレーン及びアメフラシのレーンにおいて、一番上のバンドは、コンドロイチン硫酸系列の糖鎖を含むプロテオグリカン、及び/又はグリコサミノグリカン鎖を示すバンドであることが示唆された。また、真ん中のバンドは、プロテオグリカン複合体(例えば、コラーゲンとプロテオグリカンとの複合体)を示すバンドであることが示唆された。さらに、薄い一番下のバンドは、梅酢由来の成分を示すバンドであることが示唆された。 The results are shown in FIG. As a result of further detailed analysis, in the sea cucumber lane and Aplysia lane, the top band is a proteoglycan containing a chondroitin sulfate series sugar chain and / or a band showing a glycosaminoglycan chain. It was suggested. It was also suggested that the middle band is a band showing a proteoglycan complex (eg, a complex of collagen and proteoglycan). Furthermore, it was suggested that the thin bottom band is a band showing components derived from umezu.

試験例2:プロテオグリカンの分子量の同定
実施例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物及び実施例2で得られたプロテオグリカン含有抽出物それぞれを水に溶解させ、0.1%プロテオグリカン水溶液を調製し、このうち30μLを高速液体クロマトグラフィー分析に供した。分析条件は下記に示すとおりであ
る。
検出器:示差屈折率計RI-2031plus(日本分光)
カラム:TOSOH TSK-gel G5000PWXL
溶出液:0.2M-NaCl
流速:1 ml/min
カラムtemp.:40℃
ピークが観測された保持時間より、実施例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物又は実施例2で得られたプロテオグリカン含有抽出物の平均分子量は、いずれも約40万ダルトンであることが分かった。なお、平均分子量は、プルランスタンダード(shodex社製、P-82)を用いて算出した。
Test Example 2: Identification of Proteoglycan Molecular Weight The proteoglycan-containing extract obtained in Example 1 and the proteoglycan-containing extract obtained in Example 2 were each dissolved in water to prepare a 0.1% proteoglycan aqueous solution, of which 30 μL. Was subjected to high performance liquid chromatography analysis. The analysis conditions are as shown below.
Detector: Differential refractometer RI-2031plus (JASCO Corporation)
Column: TOSOH TSK-gel G5000PWXL
Eluent: 0.2M-NaCl
Flow velocity: 1 ml / min
Column temp .: 40 ℃
From the retention time when the peak was observed, it was found that the average molecular weight of the proteoglycan-containing extract obtained in Example 1 or the proteoglycan-containing extract obtained in Example 2 was about 400,000 daltons. The average molecular weight was calculated using Pullulan Standard (manufactured by shodex, P-82).

実施例3:ウイルス不活化試験1(HSV-1)
参考例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物、実施例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物、及び実施例2で得られたプロテオグリカン含有抽出物それぞれを、10mM
クエン酸緩衝液(pH 5.9)に撹拌溶解した。種々の濃度のプロテオグリカンを含有する10mM クエン酸緩衝液(pH 5.9)と、HSV-1(単純ヘルペスウイルス1型)とを、37℃20分間
保温した後の感染価を測定し、リン酸塩類緩衝液(ダルベッコのPBS)中で保温した時の
感染価を基準値(1.0)として基準化した。
Example 3: Virus inactivation test 1 (HSV-1)
Each of the proteoglycan-containing extract obtained in Reference Example 1, the proteoglycan-containing extract obtained in Example 1, and the proteoglycan-containing extract obtained in Example 2 was 10 mM.
The mixture was stirred and dissolved in citric acid buffer (pH 5.9). Infectious titers of 10 mM citrate buffer (pH 5.9) containing various concentrations of proteoglycan and HSV-1 (herpes simplex virus type 1) were measured after incubating at 37 ° C for 20 minutes, and phosphate buffered. The infectious titer when kept warm in the solution (Dalbeco's PBS) was standardized as the standard value (1.0).

結果を図2及び3に示す。参考例1(魚類)、実施例1(アメフラシ)、及び実施例2(ナマコ)のいずれのプロテオグリカン含有抽出物についても、ウイルス不活化効果があることが分かった。中でも、アメフラシ及びナマコのプロテオグリカン含有抽出物、特にナマコのプロテオグリカン含有抽出物が、より強いウイルス不活化効果があることが分かった。 The results are shown in FIGS. 2 and 3. It was found that any of the proteoglycan-containing extracts of Reference Example 1 (fish), Example 1 (Amefurashi), and Example 2 (sea cucumber) had a virus inactivating effect. Among them, it was found that the proteoglycan-containing extracts of Aplysia and sea cucumber, particularly the proteoglycan-containing extracts of sea cucumber, have a stronger virus inactivating effect.

実施例4:ウイルス不活化試験2(インフルエンザウイルスA0PR8 (H1N1))
参考例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物、実施例1で得られたプロテオグリカン含有抽出物、そのβ脱離反応処理物、実施例2で得られたプロテオグリカン含有抽出物、及びそのβ脱離反応処理物それぞれを、10mM クエン酸緩衝液(pH 5.9)に撹拌溶解し
た。種々の濃度のPGを含む10 mMクエン酸緩衝液(pH 5.9) 190μlにウイルス(インフル
エンザウイルスA0PR8 (H1N1))液10μlを加え、37℃20分間保温した後の感染価を測定し
、リン酸塩類緩衝液(ダルベッコのPBS)中で保温した時の感染価を基準値(1.0)として基準化した。
Example 4: Virus inactivation test 2 (influenza virus A0PR8 (H1N1))
The proteoglycan-containing extract obtained in Reference Example 1, the proteoglycan-containing extract obtained in Example 1, the β-elimination reaction product thereof, the proteoglycan-containing extract obtained in Example 2, and the β-elimination reaction thereof. Each treated product was stirred and dissolved in 10 mM citrate buffer (pH 5.9). Add 10 μl of virus (influenza virus A0PR8 (H1N1)) solution to 190 μl of 10 mM citrate buffer (pH 5.9) containing various concentrations of PG, incubate at 37 ° C for 20 minutes, measure the infectious titer, and measure phosphates. The infectious titer when kept warm in a buffer solution (Dalveco's PBS) was standardized as a reference value (1.0).

なお、β脱離反応処理物は以下のようにして得た:
(工程1:コアタンパク質の分解処理)実施例1で得られたプロテオグリカン50mgを、100 mM Tris-HCl(pH 8.0) 50 mM CaCl2含有緩衝液 10 mlに溶解した。アクチナーゼEを10mg 添加し、37℃にて48時間インキュベートした。
(工程2:タンパク質分解酵素の失活処理)100℃にて5分間加熱した後、10,000 r.p.m.にて15分間遠心分離を行い、上清を回収した。
(工程3:エタノール沈殿処理)得られた上清に3倍量の食塩飽和エタノールを添加し、4
℃にて12時間静置した。10,000 r.p.mにて15分間遠心分離を行い、沈殿を回収した。
(工程4:β脱離反応処理(アルカリ処理))その沈殿に0.1Nの水酸化ナトリウム水溶液5mLを加え溶解し、4℃にて15時間静置した。
(工程5:ペプチド成分の沈殿及び除去処理)氷浴中、2N塩酸を滴下し中和した後、トリ
クロロ酢酸25mgを添加し溶解後、氷浴中で10分間静置した。10,000 r.p.m.で20分間遠心
分離を行った。
(工程6:エタノール沈殿処理)回収した上清に3倍量の食塩飽和エタノールを添加し、4
℃にて静置した。10,000 r.p.m.で20分間遠心分離を行い、ペレット(白色沈殿物)を回
収した。白色沈殿をエタノールで洗浄後風乾し、27mgの白色粉末を得た。
The β-elimination reaction product was obtained as follows:
(Step 1: Decomposition treatment of core protein) 50 mg of proteoglycan obtained in Example 1 was dissolved in 10 ml of a buffer solution containing 100 mM Tris-HCl (pH 8.0) 50 mM CaCl 2. 10 mg of Actinase E was added, and the mixture was incubated at 37 ° C. for 48 hours.
(Step 2: Inactivation treatment of proteolytic enzyme) After heating at 100 ° C. for 5 minutes, centrifugation was performed at 10,000 rpm for 15 minutes, and the supernatant was collected.
(Step 3: Ethanol precipitation treatment) Add 3 times the amount of saturated ethanol to the obtained supernatant, and 4
The mixture was allowed to stand at ° C for 12 hours. Centrifugation was performed at 10,000 rpm for 15 minutes, and the precipitate was collected.
(Step 4: β-elimination reaction treatment (alkali treatment)) 5 mL of a 0.1 N sodium hydroxide aqueous solution was added to the precipitate to dissolve it, and the mixture was allowed to stand at 4 ° C. for 15 hours.
(Step 5: Precipitation and removal treatment of peptide components) After neutralizing by dropping 2N hydrochloric acid in an ice bath, 25 mg of trichloroacetic acid was added to dissolve the mixture, and the mixture was allowed to stand in an ice bath for 10 minutes. Centrifugation was performed at 10,000 rpm for 20 minutes.
(Step 6: Ethanol precipitation treatment) Add 3 times the amount of saturated ethanol to the collected supernatant, and 4
It was allowed to stand at ° C. Centrifugation was performed at 10,000 rpm for 20 minutes, and pellets (white precipitate) were collected. The white precipitate was washed with ethanol and air-dried to obtain 27 mg of white powder.

結果を図4に示す。参考例1(魚類)、実施例1(アメフラシ)、及び実施例2(ナマコ)のいずれのプロテオグリカン含有抽出物についても、ウイルス不活化効果があることが分かった。中でも、アメフラシ及びナマコのプロテオグリカン含有抽出物、特にナマコのプロテオグリカン含有抽出物が、より強いウイルス不活化効果があることが分かった。また、実施例1(アメフラシ)のプロテオグリカン含有抽出物については、β脱離反応処理することにより、ウイルス不活化効果が向上した。 The results are shown in FIG. It was found that any of the proteoglycan-containing extracts of Reference Example 1 (fish), Example 1 (Amefurashi), and Example 2 (sea cucumber) had a virus inactivating effect. Among them, it was found that the proteoglycan-containing extracts of Aplysia and sea cucumber, particularly the proteoglycan-containing extracts of sea cucumber, have a stronger virus inactivating effect. In addition, the proteoglycan-containing extract of Example 1 (Amefurashi) was subjected to β-elimination reaction treatment to improve the virus inactivating effect.

Claims (14)

プロテオグリカン、ムコ多糖、及びプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、抗ウイルス剤。 An antiviral agent containing at least one selected from the group consisting of proteoglycans, mucopolysaccharides, and sugar chain-peptide isolates of proteoglycans. (A)生物組織のプロテオグリカン含有抽出物、及び
(B)該抽出物中のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物
からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、請求項1に記載の抗ウイルス剤。
The antiviral according to claim 1, which contains at least one selected from the group consisting of (A) a proteoglycan-containing extract of biological tissue and (B) a sugar chain-peptide isolate of proteoglycan in the extract. Agent.
前記抽出物の抽出溶媒が梅干し廃液(梅酢)である、請求項2に記載の抗ウイルス剤。 The antiviral agent according to claim 2, wherein the extraction solvent of the extract is umeboshi waste liquid (umezu). 前記生物組織が魚類、ナマコ、及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織である、請求項2又は3に記載の抗ウイルス剤。 The antiviral agent according to claim 2 or 3, wherein the biological tissue is at least one tissue selected from the group consisting of fish, sea cucumber, and Aplysia. 前記生物組織がナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織である、請求項2〜4のいずれかに記載の抗ウイルス剤。 The antiviral agent according to any one of claims 2 to 4, wherein the biological tissue is at least one tissue selected from the group consisting of sea cucumber and Aplysia. 前記生物組織がナマコ組織である、請求項2〜5のいずれかに記載の抗ウイルス剤。 The antiviral agent according to any one of claims 2 to 5, wherein the biological tissue is a sea cucumber tissue. ウイルス不活化用である、請求項1〜6のいずれかに記載の抗ウイルス剤。 The antiviral agent according to any one of claims 1 to 6, which is used for virus inactivation. (X)繊維、並びに
(Y)該繊維に保持された、
(A1)ナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織のプロテオグリカン含有抽出物、及び
(B1)該抽出物中のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物
からなる群より選択される少なくとも一種
を含む、抗ウイルス用繊維。
(X) fiber, and (Y) held by the fiber,
(A1) A proteoglycan-containing extract of at least one tissue selected from the group consisting of sea cucumber and Aplysia, and (B1) at least selected from the group consisting of sugar chain-peptide isolates of proteoglycan in the extract. Antiviral fiber, including one.
前記繊維がさらに梅干し廃液(梅酢)のエタノール沈殿物を保持する、請求項8に記載の抗ウイルス用繊維。 The antiviral fiber according to claim 8, wherein the fiber further retains an ethanol precipitate of umeboshi waste liquid (umezu). 請求項8又は9に記載の繊維を含有する、抗ウイルス用繊維製品。 An antiviral textile product containing the fiber according to claim 8 or 9. ナマコ及びアメフラシからなる群より選択される少なくとも1種の組織を材料としてプロテオグリカンを抽出することを特徴とする、プロテオグリカン及びムコ多糖の製造方法。 A method for producing proteoglycan and mucopolysaccharide, which comprises extracting proteoglycan from at least one tissue selected from the group consisting of sea cucumber and Aplysia. 抽出溶媒として梅干し廃液(梅酢)を用いる、請求項11に記載の製造方法。 The production method according to claim 11, wherein a umeboshi waste liquid (umezu) is used as an extraction solvent. 請求項11又は12に記載の方法によって得られ得る、プロテオグリカン及びムコ多糖。 A proteoglycan and mucopolysaccharide obtained by the method according to claim 11 or 12. 請求項13に記載のプロテオグリカンの糖鎖−ペプチド間分離物。 The sugar chain-peptide isolate of the proteoglycan according to claim 13.
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