JP2021080219A

JP2021080219A - Ｍｍｐ２阻害作用を有する糖鎖付加ポリペプチド

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Publication number: JP2021080219A
Application number: JP2019210219A
Authority: JP
Inventors: 浩行柿沼; Hiroyuki Kakinuma; 啓子神夏磯; Keiko Kamigaso; 陽平小橋; Yohei Kobashi; 円川村; Madoka Kawamura; 真知林; Masatomo Hayashi; 章生金谷; Akio Kanetani; 洋文落合; Hirofumi Ochiai; 速人西條; Hayato Saijo
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2019-11-21
Filing date: 2019-11-21
Publication date: 2021-05-27

Abstract

【課題】糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、新規なＭＭＰ２阻害剤の提供。【解決手段】糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩：該糖鎖付加ポリペプチドは、下記式［１］（ここで、ＡＡ９は、Ser又はLysを表し、ＡＡ７は、Gly、D-Hse、Cys、D-Cys、Asn、又はLysを表し、ＡＡ６は、Asn、Cys、又はLysを表し、ＡＡ１は、Pro、β-homoPro、又はAibを表す。）で表されるアミノ酸配列を含み、かつ、ＭＭＰ２に対する親和性を有することを特徴とする。【選択図】なし

Description

本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼ２（以下、適宜に「ＭＭＰ２」と略記する。）を選択的に阻害する作用を有する、糖鎖にて修飾されたペプチド化合物に関する。

マトリックスメタロプロテアーゼは亜鉛を活性中心に持つエンドペプチダーゼであり、２４種類の遺伝子が知られている。ＭＭＰはコラーゲンやゼラチン等の細胞外マトリックスを分解することから、骨リモデリングや創傷治癒など生理現象のみならず、炎症や癌の進行などの病的過程にも関与している（非特許文献１参照）。
これまでにＭＭＰ阻害による抗癌作用に着目し、複数のＭＭＰ阻害剤の臨床試験が実施されたが、相対的に各種ＭＭＰサブタイプに対して非選択的な阻害作用が原因と考えられる骨格筋痛等の副作用や癌転移助長の可能性により断念されている（非特許文献２及び３参照）。
ＭＭＰ２の活性化は、癌細胞の浸潤ならびに転移において重要な働きをしていることが報告されている。癌細胞の浸潤及び転移は悪性腫瘍の予後に関わる重要な因子であり、ＭＭＰ２活性を抑制することは癌制御において有効な治療手段となり得る。ＭＭＰ２遺伝子欠損動物では、癌の増殖が抑制されており、ＭＭＰ２は癌の増殖に重要な役割を果たすことが報告されている（非特許文献４参照）。さらに、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、大腸癌、卵巣癌、前立腺癌、脳腫瘍、胃癌、肝細胞癌、頭頸部癌、メラノーマ、子宮癌、食道癌、腎細胞癌、肺癌、神経膠腫などの各種癌患者においてＭＭＰ２が病態進展に関連していることが報告されている（非特許文献５及び６参照）。一方で、ＭＭＰ２は非腫瘍性疾患においてもそれら病態の形成に関与していることが報告されている。
慢性腎臓病では、ＭＭＰ２が尿細管基底膜の構造を変換することによって尿細管の上皮間葉移行を引き起こして、尿細管萎縮、線維化ならびに腎機能低下を誘発することが報告されている（非特許文献７参照）。さらに、慢性腎臓病患者では血液中におけるＭＭＰ２濃度の上昇が認められている（非特許文献８及び９参照）。また、ＭＭＰ２遺伝子欠損動物では片側尿管結紮によって誘導される腎臓の線維化が抑制されることが報告されている（非特許文献１０及び１１参照）。このことから、慢性腎臓病の病態進展を制御するためにＭＭＰ２活性を抑制することは有効な治療手段となり得る。
特発性肺線維症では、肺胞上皮細胞、線維芽細胞及びマクロファージにおいてＭＭＰ２の発現亢進が認められており、特に急速な進展を伴う特発性肺線維症患者では肺胞洗浄液中のＭＭＰ２の発現亢進が認められている（非特許文献１２及び１３参照)。また非選択的ＭＭＰ阻害剤により、ブレオマイシン誘発肺線維症マウスの肺中コラーゲン含量を減少させる効果（非特許文献１４参照）や、ＴＧＦβによって誘発される肺実質線維芽細胞の形質転換を抑制する効果が報告されている（非特許文献１５参照）。このことから、特発性肺線維症の病態進展を制御するためにＭＭＰ２活性を抑制することは有効な治療手段となり得る。
さらに、多発性硬化症、脳梗塞、動脈硬化、腹部大動脈瘤、腹膜硬化症、心筋梗塞、急性腎障害、糖尿病性腎症、腎硬化症、糸球体腎炎、多発性嚢胞腎、多発性嚢胞肝、アルコール性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝疾患、胆汁うっ滞性肝損傷、慢性閉塞性肺疾患、間質性肺炎、糖尿病網膜症、加齢性黄斑変性、シェーグレン症候群、髄膜炎、筋ジストロフィー、強皮症、炎症性腸疾患、結核などの非腫瘍性疾患においてはＭＭＰ２との関連が示唆されている（非特許文献１６参照）。
これらのことから、ＭＭＰ２を選択的に阻害する手段を見出すことは、ＭＭＰ２が関与する疾患の有効な治療法を確立するための実現性の高いアプローチである。
さて、ＭＭＰ２阻害作用を有する低分子化合物として、ヒドロキサム酸やカルボン酸を亜鉛キレーターとして導入した化合物の報告がある。しかし、選択的ＭＭＰ２阻害作用を示すものは知られていない（例えば、非特許文献１７及び１８参照）。
また、１０個の天然アミノ酸からなるペプチド化合物「β−アミロイドプレカーサープロテイン由来の阻害ペプチド（ＡＰＰ−ＩＰ、ＩＩｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ）」が選択的ＭＭＰ２阻害作用を示すことが報告されている（非特許文献１９参照）。しかし、一般的には、ペプチド化合物は体内での代謝、排泄が早いことから、ペプチド化合物を投与しても、期待される薬理作用が持続しないことが知られている。そこで、前記の課題を解決するために、ペプチド誘導体に非天然アミノ酸を導入したり、ポリエチレングリコールで修飾したりされている（例えば、特許文献１又は２）。しかしながら、これまで、選択的ＭＭＰ２阻害作用を示すＡＰＰ−ＩＰを化学修飾し、阻害作用を有したまま生体内での安定化を達成した報告例は無い。

国際公開第ＷＯ１９９６／０２８４７５号パンフレット国際公開第ＷＯ２０１３／０３２０１１号パンフレット

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本発明の目的は、新規なＭＭＰ２阻害剤を提供することである。

天然アミノ酸からなる鎖状ペプチドＡＰＰ−ＩＰはＭＭＰ２に対して高い選択的阻害作用を有するが、生体内では容易に代謝を受けることが予想される。

本発明者らは、上記課題を達成すべく鋭意検討を重ねた結果、ＡＰＰ−ＩＰ誘導体に糖鎖を付加することにより、必要に応じてカルボキシ基で置換されているアルキルカルボニル基の導入することにより、式［１］で表されるアミノ酸配列等を含む糖鎖付加ポリペプチドが、ＭＭＰ２阻害作用を有したまま、課題である生体内での安定性が改善することを見出した。

以下、本発明を詳細に説明する。

すなわち、本発明の態様は、以下の通りである。

（１）本発明のひとつの態様は、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
下記式［１］

（ここで、前記式［１］中、
ＡＡ^９は、Ser又はLysを表し、
ここで、該Lysは下記式［２］で表される基で置換されてもよく；

ＡＡ^７は、Gly、D-Hse、Cys、D-Cys、Asn、又はLysを表し、
ＡＡ^６は、Asn、Cys、又はLysを表し、
ここで、該Lysは下記式［３］で表される基で置換されてもよく；

前記式［２］及び［３］中、
ＦＡ^９及びＦＡ^６は、独立して末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基を表し、
ＡＡ^９１及びＡＡ^６１は、独立してγ-Glu、Gly、Cys、又はLysを表し、
ＡＡ^９２及びＡＡ^６２は、独立してAdox、Cys、又はLysを表し、
ＡＡ^９３及びＡＡ^６３は、独立してAdox、Gly、Cys、又はLysを表し、
ＡＡ^９４及びＡＡ^６４は、独立してLys、Cys、又は単結合を表し、
ＡＡ^１は、Pro、β-homoPro、又はAibを表す。）
で表されるアミノ酸配列を含み；

また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでもよく、また、
ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでもよく、
ここで、ｍ^Ｎは１〜７の整数を表し、ｍ^Ｃは１〜７の整数を表し、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu、Arg、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸を表し、
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸は、Aib、Arg、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸を表し；

さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基、又は末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されてもよく、
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられてもよく；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１〜５個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１〜５個のアミノ酸は、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列中のアミノ酸であるＡＡ^９、ＡＡ^７、ＡＡ^６、ＡＡ^１；
前記式［２］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^９１、ＡＡ^９２、ＡＡ^９３、ＡＡ^９４；
前記式［３］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^６１、ＡＡ^６２、ＡＡ^６３、ＡＡ^６４；
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸；及び
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸
のいずれかに存在し、かつ、
ＭＭＰ２に対する親和性を有する
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（２）本発明の他の態様としては、
前記（１）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
(ｉ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた２〜５個のアミノ酸を含んでいる；又は

(ii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、
(ａ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、前記式［２］で表される基で置換されているLysである；
(ｂ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^６が、前記式［３］で表される基で置換されているLysである；又は
(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（３）本発明の他の態様としては、
前記（２）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
(ａ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、前記式［２］で表される基で置換されているLysである；
(ｂ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^６が、前記式［３］で表される基で置換されているLysである；又は
(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（４）本発明の他の態様としては、
前記（３）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
Ｎ末端側にさらに含んでもよい前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、γ-Glu、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり、
Ｃ末端側にさらに含んでもよいｍ^Ｃ個のアミノ酸が、Lys及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；

さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸が存在するのは、
前記式［１］で表されるアミノ酸であるＡＡ^６；
前記式［２］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^９２；
前記式［３］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^６２；
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸；及び
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸
のいずれかであり；
ここで、

(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［２］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はAib
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ１) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ２) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^６２が、Lys又はAdoxであり、
ＡＡ^６３が、Lys又はAdoxであり、
ＡＡ^６４が、Lys又は単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜３の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、Cys及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（５）本発明の他の態様としては、
前記（３）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Cysであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；

また、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノが、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（６）本発明の他の態様としては、
前記（３）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Lysであり、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Aib
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１４−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず、又は
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜４の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１４}アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（７）本発明の他の態様としては、
前記（３）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Lysであり、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Aib
であるアミノ酸配列を含み、
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず、
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ１) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ２) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１４}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^６２が、Lysであり、
ＡＡ^６３が、Lysであり、
ＡＡ^６４が、Lysであり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（８）本発明の他の態様としては、
前記（３）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asn又はLysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が単結合であり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoProである
ことを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（９）本発明の他の態様としては、
前記（３）又は（８）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ｉ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Asn−Asp−Ala−Leu−Met−Pro
であって；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
γ-Glu−Lys−Lys−Lys−をＮ末端側にさらに含んでおり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がHOOC−(CH₂)₁₄−(O=)C−で置換されており；

(ii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Lys−Asp−Ala−Leu−Met−β-homoPro
であって、
ここで、ＡＡ^６として表されるLysの側鎖のアミノ基は、HOOC−(CH₂)₁₄−(O=)C−Lys−Lys−Lys−で置換されており；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がアセチル基で置換されており；又は

(iii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Lys−Asp−Ala−Leu−Met−β-homoPro
であって；
ここで、ＡＡ^６として表されるLysの側鎖のアミノ基は、HOOC−(CH₂)₁₆−(O=)C−γ-Glu−Adox−Adox−で置換されており；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がアセチル基で置換されている；
ことを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（１０）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（９）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでおり；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸は、
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸のいずれかに存在し、

ここで、ｍ^Ｃは１である；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（１１）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１０）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸が、糖鎖付加Ａｓｎ又は糖鎖付加Ｃｙｓである
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（１２）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１１）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、付加する糖鎖が４個以上の糖からなる
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（１３）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１２）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、
糖鎖が下記式［４］

（ここで、前記式［４］中、
Ｌｉｎｋｅｒは、単結合又は式−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ１−を表し、
ｎ^１は、０〜５の整数を表し、
Ｒ^１及びＲ^２は同一に又は異なって、下記式群［５］で表される構造のいずれか

を表し、
Ｒ^３は水素原子又はベンジル基を表す。）
で表される糖鎖であることを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（１４）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１３）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、
前記式［４］で表される糖鎖中のＲ^１及びＲ^２が、同一に下記式［５−１］で表される構造

であることを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を提供することである。

（１５）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１４）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬を提供することである。

（１６）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１４）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するＭＭＰ２阻害剤を提供することである。

（１７）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１４）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する癌細胞の増殖、浸潤、又は転移の抑制剤を提供することである。

（１８）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１４）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維化抑制剤を提供することである。

（１９）本発明の他の態様としては、
前記（１）〜（１４）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する癌疾患及び臓器線維症、並びに癌疾患及び臓器線維症に関連する症状の予防薬又は治療薬を提供することである。

本発明の糖鎖付加ポリペプチド化合物は、ＭＭＰ２に対する選択的阻害作用を有しており、また、ＡＰＰ−ＩＰに比較して高い生体安定性を有する。また、本発明の糖鎖付加ポリペプチドは上記特徴を有することから、ＭＭＰ２が関与すると考えられる癌疾患及び臓器線維症、並びに癌疾患及び臓器線維症に関連する症状の予防薬又は治療に用いることができる。

本明細書中において、「アミノ酸」とは、広義にはアミノ基とカルボキシル基の両方の官能基を持つ有機化合物である。一方、狭義には（特に生化学の分野）、生体のタンパク質の構成ユニットとなる「α-アミノ酸」（該α-アミノ酸は、カルボキシ基が結合している炭素（α炭素）にアミノ基も結合しているアミノ酸のことである。）を指す。本明細書におけるアミノ酸として、例えば、天然タンパク原性Ｌ−アミノ酸；Ｄ−アミノ酸；アミノ酸変異体及び誘導体などの化学修飾されたアミノ酸；及びアミノ酸の特徴である当業界で公知の特性を有する化学的に合成された化合物などが挙げられる。

本明細書中において、「アミノ酸」を、例えば３文字表記や１文字表記等のように略さずに、その名称を記載する場合は、Ｌ体若しくはＤ体、又はその両方を含むアミノ酸を示す。
本明細書中において、「アミノ酸」を、３文字表記や１文字表記等によって略して記載する場合は、Ｌ体のアミノ酸を示す。「アミノ酸」の直前に「Ｌ」や「ｌ」を付して、Ｌ体のアミノ酸であることを明確にする場合もある。
本明細書中において、「アミノ酸」の直前に「Ｄ」や「ｄ」を付する場合は、Ｄ体のアミノ酸を示す。

アルキル鎖やポリエチレングリコールからなるアミノ酸の例としては、例えば、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ₂)ｎ^２−ＣＯＯＨ（式中、ｎ^２は整数であり、目的とするリンカー機能を阻害しない限り限定されるものではないが、好ましくは１〜１０の整数を示す。）やＨ_２Ｎ-(ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ)ｎ^３-(ＣＨ₂)ｎ^４-ＣＯＯＨ（式中、ｎ^３、ｎ^４は整数であり、目的とするリンカー機能を阻害しない限り限定されるものではないが、好ましくは１〜１０の整数を示す。）を挙げることができる。より具体的には、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ)_８−ＣＨ₂ＣＨ₂−ＣＯＯＨ、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ)_８−ＣＨ₂−ＣＯＯＨ、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ)_２−ＣＨ₂−ＣＯＯＨ（Ａｄｏｘ）等を挙げることができる。

本明細書中において、「非天然アミノ酸」とは、天然のタンパク質を構成しておらず、主に人工的に製造されたアミノ酸であり、前述のＤ−アミノ酸；アミノ酸変異体及び誘導体などの化学修飾されたアミノ酸；及びアミノ酸の特徴である当業界で公知の特性を有する化学的に合成された化合物を指す。非天然アミノ酸の例として、Ｄ−Ｃｙｓ、Ｄ−Ｓｅｒ等のＤ−アミノ酸；２−アミノイソ酪酸（以下、Ａｉｂと記載することもある；なお、以下、本明細書において「括弧書きの併記」は略記を示す。）などのα−メチルアミノ酸；β−ホモプロリン（β−Ｈｅｐ又はβ−ｈｏｍｏＰｒｏ）、ホモセリン（Ｈｓｅ又はｈｏｍｏＳｅｒ）、ホモシステイン（Ｈｃｙ又はｈｏｍｏＣｙｓ）など、側鎖に余分のメチレンを有するアミノ酸（「ホモ」アミノ酸）；及び側鎖中のカルボン酸官能基アミノ酸がスルホン酸基で置換されるアミノ酸（システイン酸など）が挙げられる。

本明細書中において、「β−Ａｓｐ」と記載されている場合は、下記式［Ａ−１］で表される構造に示す通り、側鎖のカルボキシを介して主鎖のアミド結合に関与するアスパラギン酸を意味する。同様に、「β−(d)−Ａｓｐ」、「γ−Ｇｌｕ」、「γ−(d)−Ｇｌｕ」と記載されている場合は、下記式［Ａ−２］〜式［Ａ−４］で表される構造を意味する。

本発明において、「ＡＰＰ−ＩＰ誘導体」とは、ＡＰＰ−ＩＰと構造上類似したペプチド及び／又はＡＰＰ−ＩＰと重複した構造を有するペプチド、例えば、ＡＰＰ−ＩＰのアミノ酸の１若しくは数個のアミノ酸が置き換えられたポリペプチド、ＭＭＰ２に対する阻害作用を有するＡＰＰ−ＩＰのフラグメント、伸長ＡＰＰ−ＩＰが挙げられる。
本明細書中において、例えば、
「糖鎖付加ポリペプチドであって；
前記式［１］で表されるアミノ酸配列を含み；
該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでもよく、また、
ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでもよく；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は置換されてもよく、
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、置き換えられてもよく；
そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられたアミノ酸を含んでおり、かつ、
ＭＭＰ２に対する親和性を有する
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド」が挙げられる。

本明細書中において、「アミノ酸の１若しくは数個のアミノ酸が置換された」とは、アミノ酸の置き換えにおいて、元のアミノ酸が他のアミノ酸で置き換えられており、ＭＭＰ２に対する阻害作用の明らかな低下又は消失を生じない置き換えをいう。

本明細書中において、「ＭＭＰ２に対する阻害作用を有するＡＰＰ−ＩＰのフラグメント」とは、ＡＰＰ−ＩＰのＮ末端及び／又はＣ末端から１個又はそれ以上のアミノ酸が欠失し、かつＭＭＰ２に対する阻害作用を有するポリペプチドである。

本明細書中において、「伸長ＡＰＰ−ＩＰ」とは、ＡＰＰ−ＩＰのＮ末端及び／又はＣ末端、さらには分岐ポリペプチドの側鎖に１個又はそれ以上のアミノ酸やリンカーが付加されたペプチドである。例えば、ＡＰＰ−ＩＰにつき、ｍ^Ｎ個（ここで、ｍ^Ｎは１〜７の整数を表す。）のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでもよく、また、
ｍ^Ｃ個（ここで、ｍ^Ｃは１〜７の整数を表す。）のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでもよい。前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、例えば、γ-Glu、Arg、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸を表し、
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸は、例えば、Aib、Arg、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸を表す。
本明細書中において、例えば、
「糖鎖付加ポリペプチドであって；
前記式［１］で表されるアミノ酸配列を含み；
該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでいる、及び/又は
ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでおり；かつ、
ＭＭＰ２に対する親和性を有する
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド」が挙げられる。

本明細書中において、「ｎ」はノルマルを、「ｉ」はイソを、「ｓ」はセカンダリーを、「ｔ」及び「ｔｅｒｔ」はターシャリーを、「ｃ」はシクロを、「ｏ」はオルトを、「ｍ」はメタを、「ｐ」はパラを示す。

本明細書中において、「Ｃ_１−４アルキル基」とは、炭素原子数が１〜４個である、直鎖状又は分岐状の飽和のアルキル基であり、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。

本明細書中において、「Ｃ_４−１８脂肪酸」とは、炭素原子数が４〜１８個である、直鎖状又は分岐状であって飽和又は不飽和の脂肪酸であり、例えば、ｎ−ブタン酸（酪酸）、ｎ−ペンタン酸、ピバル酸、パルミチン酸、ステアリン酸、Ｈ_３Ｃ−（ＣＨ_２）ｎ^５−ＣＯＯＨ（ここで、ｎ^５は２〜１６の整数を表す。）等が挙げられる。
本明細書中において、「Ｃ_２−１６アルキルカルボニル基」とは、炭素原子数が２〜１６個である、直鎖状又は分岐状であって飽和又は不飽和のアルキル基と、カルボニル基が結合した基を表す。例えば、エチルカルボニル（プロパノイル）、ｎ−プロピルカルボニル（ブチリル）、ｎ−ブチルカルボニル（バレリル）、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル（ピバロイル）、ｎ−ペンタデカニルカルボニル（パルミトイル）、Ｈ_３Ｃ−（ＣＨ_２）ｎ^６−ＣＯ−（ここで、ｎ^６は１〜１５の整数を表す。）等が挙げられる。
本明細書中において、「末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基」とは、前記の「Ｃ_２−１６アルキルカルボニル基」中のアルキル基において、カルボニル基が結合した末端とは反対の末端が、カルボキシ基で置換されているアルキルカルボニル基を表す。例えば、２位がカルボキシで置換されているエチルカルボニル、１０位がカルボキシで置換されているデカニルカルボニル、１２位がカルボキシで置換されているドデカニルカルボニル、１４位がカルボキシで置換されているテトラデカニルカルボニル、１５位がカルボキシで置換されているペンタデカニルカルボニル、１６位がカルボキシで置換されているヘキサデカニルカルボニル、ＨＯＯＣ−（ＣＨ_２）ｎ^７−ＣＯ−（ここで、ｎ^７は２〜１６の整数を表す。）等が挙げられる。

本発明中において、「アセチル基、Ｃ_２−１６アルキルカルボニル基、及び末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基からなる群から選ばれる１つの基で置換されているアミノ酸」とは、アミノ酸中のアミノ基が、アセチル基、Ｃ_２−１６アルキルカルボニル基、又は末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されているアミノ酸である。例えば、Ａｃ−Ｌｙｓ、Ａｃ−Ｃｙｓ、Ａｃ−Ａｒｇ、ＨＯＯＣ−（ＣＨ_２）ｎ^７−ＣＯ−Ｌｙｓ、ＨＯＯＣ−（ＣＨ_２）ｎ^７−ＣＯ−γＧｌｕ、（式中、ｎ^７は、前述の定義と同じである。）等が挙げられる。

なお、前述の「分岐ポリペプチド」とは、主鎖ポリペプチドに対して枝分かれしている側鎖ポリペプチドを有するポリペプチドである。枝分かれする箇所には、側鎖に官能基を有するアミノ酸が存在する。該アミノ酸の側鎖の官能基に対してアミノ酸が順次結合し、側鎖ポリペプチドを形成する。

本明細書中において、「脂溶性保護基」とは、例えば、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）基、ベンジル（Ｂｎ）基、アリル基、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）基、アセチル（Ａｃ）基等のカーボネート系又はアミド系の保護基を挙げることができる。アミノ酸に脂溶性保護基を導入するには、例えばＦｍｏｃを導入する場合には９−フルオレニルメチル−Ｎ−スクシニジルカーボネートと炭酸水素ナトリウムを加えて反応を行うことにより導入できる。反応は０〜５０℃、好ましくは室温で、約１〜５時間程度行うのが良い。

本明細書中において、「糖鎖付加アミノ酸」とは、糖鎖が付加した「アミノ酸」であり、ここで糖鎖とアミノ酸とは、リンカーを介して結合していてもよい。糖鎖とアミノ酸との結合部位に特に制限はないが、糖鎖の還元末端にアミノ酸が結合していることが好ましい。
糖鎖付加アミノ酸の種類に特に限定はない。糖鎖付加アミノ酸としては、糖鎖付加アスパラギン、糖鎖付加グルタミン、糖鎖付加セリン、糖鎖付加スレオニン、糖鎖付加システインが好ましく；糖鎖付加アスパラギン、糖鎖付加グルタミン、糖鎖付加システインがより好ましく；糖鎖付加Ａｓｎ、糖鎖付加Ｃｙｓがさらに好ましく、糖鎖付加Ｃｙｓが特に好ましい。
また、糖鎖付加アミノ酸が生体内に糖ペプチド（糖たんぱく質）として存在するものと同ー又は類似の構造を有するという観点からは、糖鎖付加アミノ酸は、Ｎ−結合型糖鎖のような糖鎖付加アスパラギン、Ｏ−結合型糖鎖のような糖鎖付加セリン及び糖鎖付加スレオニンが好ましく、糖鎖付加アスパラギンがより好ましい。
糖鎖とアミノ酸とがリンカーを介して結合している場合、リンカーとしては、当該分野において用いられているものを広く使用することができる。例えば、式−ＣＯ−（ＣＨ_２)ｎ^８−（式中、ｎ^８は整数であり、目的とするリンカー機能を阻害しない限り限定されるものではないが、好ましくは０〜４の整数を示す。）が挙げられる。

また、糖鎖とアミノ酸とがリンカーを介して結合している場合、リンカーとの結合容易性という観点からは、糖鎖付加アミノ酸のアミノ酸は、アスパラギン酸やグルタミン酸等の分子内に２つ以上のカルボキシ基を持つアミノ酸；リジン、アルギニン、ヒスチジン、トリプトファン等の分子内に２以上のアミノ基を持つアミノ酸；セリン、スレオニン、チロシン等の分子内に水酸基を持つアミノ酸；システイン等の分子内にチオール基を持つアミノ酸；アスパラギン、グルタミン等の分子内にアミド基を持つアミノ酸が好ましい。特に、反応性の観点からは、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、セリン、スレオニン、システイン、アスパラギン、グルタミンが好ましい。

本明細書中において、「糖鎖付加ポリペプチド」とは、ＡＰＰ−ＩＰ誘導体中の少なくとも１個のアミノ酸が、糖鎖付加アミノ酸で置き換えられていることを特徴とする。
本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおいて、ＡＰＰ−ＩＰ誘導体のＮ末端にさらに付加されるアミノ酸は、ＭＭＰ２に対する阻害作用を有する限り特に制限されないが、例えば、１以上７個以下の任意のアミノ酸を付加することができる。Ｎ末端にさらに付加されるアミノ酸としては、アセチル基、Ｃ_４−１８脂肪酸、及び末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基からなる群から選ばれる１つの基で置換されてもよいアミノ酸、又は糖鎖付加アミノ酸である。好ましいアミノ酸としては、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｃｙｓ等である。好ましい糖鎖付加アミノ酸としては、糖鎖付加Ａｓｎ又は糖鎖付加Ｃｙｓである。また、１以上７個以下の任意のアミノ酸は、その全てを糖鎖付加アミノ酸とすることもできる。
本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおいて、ＡＰＰ−ＩＰのＣ末端にさらに付加されるアミノ酸は、ＭＭＰ２に対する阻害作用を有する限り特に制限されないが、例えば、１以上７個以下の任意のアミノ酸を付加することができる。ＡＰＰ−ＩＰのＣ末端にさらに付加されるアミノ酸は、好ましくはＣｙｓ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、糖鎖付加アミノ酸であり、より好ましくは糖鎖付加Ｃｙｓである。また、１以上７個以下の任意のアミノ酸は、その全てを糖鎖付加アミノ酸とすることもできる。

本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおいて、糖鎖付加アミノ酸で置き換えられるアミノ酸の数は、生体内安定性やＭＭＰ２阻害作用、最終的な糖鎖付加ポリペプチドに存在するアミノ酸の個数や糖鎖付加前後の糖鎖付加ポリペプチドの分子量、等により適宜調節すればよい。例えば、１〜１０個で置き換えることが好ましく、１〜５個で置き換えることがより好ましく、１〜３個で置き換えることがさらに好ましい。簡便性の観点からは、１個の置き換えで所望の活性が得られるのであれば、１個の置き換えを選択することが好ましい。
また、糖鎖付加ポリペプチド中に複数の糖鎖を有する場合、糖鎖同士は糖鎖付加ポリペプチドのアミノ酸配列において、連続したアミノ酸に付加する（連続したアミノ酸を、糖鎖付加アミノ酸で置き換える）こともできるし、間隔をあけて、アミノ酸に付加する（間隔をあけて、アミノ酸を、糖鎖付加アミノ酸で置き換える）こともできる。

なお、本発明の任意の糖鎖付加ポリペプチドについて、糖鎖構造、糖鎖以外の構造、糖鎖の付加部位及び糖鎖の付加数が同一である場合に、糖鎖付加アミノ酸が、糖鎖付加Ａｓｎ（リンカーを介さない）の場合と糖鎖付加Ｃｙｓ（リンカーを介する）の場合で、本発明の糖鎖付加ポリペプチドの血中半減期に大きな違いはないと考えられる。

本発明中において「糖鎖」とは単位糖（単糖及び／又はその誘導体）が１つ以上結合してできた化合物をいう。単位糖が２つ以上結合する場合、各々の単位糖同士の間は、グリコシド結合による脱水縮合によって結合する。このような糖鎖としては、例えば、生体内に含有される単糖類及び多糖類（グルコース、ガラクトース、マンノース、フコース、キシロース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、Ｎ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、シアル酸並びにそれらの複合体及び誘導体）の他、分解された多糖、糖タンパク質、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン、糖脂質などの複合生体分子から分解又は誘導された糖鎖は直鎖型であっても分岐鎖型であってもよい。

本発明において、好ましい糖鎖は、ＡＰＰ−ＩＰ誘導体に付加された場合（糖鎖付加アミノ酸の形でＡＰＰ−ＩＰのアミノ酸と置換された場合）に、ＡＰＰ−ＩＰの生体での安定性を増大させたまま、ＭＭＰ２に対する選択的阻害作用を有することができる物である。
本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおける糖鎖は特に限定されず、生体内で複合糖質（糖ペプチド又は糖タンパク質、プロテオグリカン、糖脂質等）として存在する糖鎖であっても良いし、生体内で複合糖質として存在しない糖鎖であっても良い。
生体内で複合糖質として存在する糖鎖は、本発明の糖鎖付加ペプチドが生体内に投与されるという観点から好ましい。かかる糖鎖としては、生体内で糖ペプチド（又は糖タンパク質）としてペプチド（又はタンパク質）に結合している糖鎖であるＮ−結合型糖鎖、Ｏ−結合型糖鎖が挙げられる。好ましくは、Ｎ−結合型糖鎖が用いられる。Ｎ−結合型糖鎖としては、例えば、高マンノース（ハイマンノース）型、複合（コンプレックス）型、混成（ハイブリッド）型を挙げることができ、好ましくは、複合型が良い。

本発明で使用する好ましい複合型糖鎖としては、例えば、下記式［４］、

（ここで、前記式［４］中、Ｒ^１及びＲ^２は同一に又は異なって、下記式群［５］で表される構造のいずれか

を示し、Ｒ^３は水素原子、Ｃ_１−４アルキル基、又はベンジル基を示す。

本発明の一態様において、本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおける糖鎖は、例えば、５個以上、７個以上、特に９個以上、１１個以上の糖からなる糖鎖であることが好ましい。
本発明の好ましい一態様において、本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおける糖鎖は、５〜１１個、９〜１１個又は１１個の糖からなる糖鎖である。

本発明の好ましい一態様において、本発明の糖鎖付加ポリペプチドにおける糖鎖は、２本鎖の複合型糖鎖である。複合型糖鎖とは、２種類以上の単糖を含み、以下の式［６］に示す基本構造と、Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃで示されるラクトサミン構造を有することを特徴とする。

２本鎖複合型糖鎖とは、基本構造の末端の２つのマンノースに、それぞれ０〜３糖からなる１本鎖の糖鎖が結合しているものをいう。２本鎖複合型糖鎖としては、例えば、以下の式［７］に示すジシアロ糖鎖、
ジシアロ（ｄｉｓｉａｌｏ）

以下の式［８］に示す、末端シアル酸のカルボキシル基がベンジルエステル化された糖鎖、
ジベンジル−ジシアロ（ｄｉＢｎ−ｄｉｓｉａｌｏ）

以下の式［９］に示す、７糖からなるジグルクナック（ｄｉＧｌｃＮＡｃ）

を挙げることができる。

本明細書中において、塩は、酸付加塩又は塩基付加塩のいずれであってもよい。酸付加塩を形成するために通常用いられる酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸等の無機酸及びｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸等の有機酸である。塩基付加塩としては、水酸化アンモニウム又はアルカリ若しくはアルカリ土類金属水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩等の無機塩基から誘導された塩が挙げられる。特に、製薬学的に許容される塩が好ましい。

本発明の糖鎖付加ポリペプチドの好ましい態様を、以下に示す。

（Ｉ）本発明の糖鎖付加ポリペプチドのひとつの好ましい態様は、以下である：
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
下記式［１］

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１〜５個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１〜５個のアミノ酸は、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列中のアミノ酸であるＡＡ^９、ＡＡ^７、ＡＡ^６、ＡＡ^１；
前記式［２］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^９１、ＡＡ^９２、ＡＡ^９３、ＡＡ^９４；
前記式［３］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^６１、ＡＡ^６２、ＡＡ^６３、ＡＡ^６４；
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸；及び
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸
のいずれかに存在し、かつ、
ＭＭＰ２に対する親和性を有する
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（II）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
(ｉ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた２〜５個のアミノ酸を含んでいる；又は

(ii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、
(ａ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、前記式［２］で表される基で置換されているLysである；
(ｂ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^６が、前記式［３］で表される基で置換されているLysである；又は
(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（III）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（II）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
(ａ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、前記式［２］で表される基で置換されているLysである；
(ｂ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^６が、前記式［３］で表される基で置換されているLysである；又は
(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（IV）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
Ｎ末端側にさらに含んでもよい前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、γ-Glu、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり、
Ｃ末端側にさらに含んでもよいｍ^Ｃ個のアミノ酸が、Lys及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸である；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（Ｖ）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（VI）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸が存在するのは、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列中のアミノ酸であるＡＡ^７、ＡＡ^６、ＡＡ^１、
ここで、より好ましくは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列中のアミノ酸であるＡＡ^６；
前記式［２］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^９２；
前記式［３］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^６２；
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸；及び
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸
のいずれかである；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（VII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［２］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はAib
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ２) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^６２が、Lys又はAdoxであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^６２が、Lysであり、
ＡＡ^６３が、Lys又はAdoxであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^６３が、Lysであり、
ＡＡ^６４が、Lys又は単結合であり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^６４が、Lysであり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜３の整数であり、
そして、より好ましくは、ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、Cys及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり、
ここで、より好ましくは、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（VIII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（VII）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記（IV）〜（VI）に記載の態様のうちのいずれか１つとの組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であり；
より好ましくは、前記（IV）〜（VI）に記載の態様のうちのいずれか２つとの組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であり；
さらに好ましくは、前記（IV）〜（VI）に記載の全ての態様との組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（IX）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Cysであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoProであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^１が、Pro
であるアミノ酸配列を含み；

また、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されており、
ここで、より好ましくは、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_８−１４アルキルカルボニル基で置換されており、
さらに好ましくは、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１４}アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（Ｘ）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ｂ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１４−１６}アルキルカルボニル基であり、
ここで、より好ましくは、ＦＡ^５が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基又はＣ_１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^６として表されるLysが置換されている前記式［３］で表される基中の「ＡＡ^６１−ＡＡ^６２−ＡＡ^６３−ＡＡ^６４−」が、γ-Glu−Adox−Adox−単結合−及びLys−Lys−Lys−単結合−からなる群から選ばれる１つであり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず、又は
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
ここで、より好ましくは、ＡＡ^１が、Pro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜４の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１４}アルキルカルボニル基で置換されており、
ここで、より好ましくは、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、−γ-Glu−及び−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−からなる群から選ばれる１つであり、
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基で置換されており、
さらに好ましくは、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−である；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XI）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Lysであり、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１６}アルキルカルボニル基であり、
ここで、より好ましくは、ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Aib
であるアミノ酸配列を含み、
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず、
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ１) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１６}アルキルカルボニル基であり、
ここで、より好ましくは、ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１４−１６}アルキルカルボニル基であり、
さらに好ましくは、ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基又はＣ_１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoProであり、
ここで、より好ましくは、ＦＡ^６として表されるLysが置換されている前記式［３］で表される基中の「ＡＡ^６１−ＡＡ^６２−ＡＡ^６３−ＡＡ^６４−」が、γ-Glu−Adox−Adox−単結合−及びLys−Lys−Lys−単結合−からなる群から選ばれる１つ
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ２) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１４}アルキルカルボニル基であり、
ここで、より好ましくは、ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^６２が、Lysであり、
ＡＡ^６３が、Lysであり、
ＡＡ^６４が、Lysであり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoProであり、
ここで、より好ましくは、ＡＡ^１が、Pro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり、
ここで、より好ましくは、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、−γ-Glu−、−Lys−Lys−Lys−、−γ-Glu−Lys−Lys−、−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−、及び−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−Lys−Lys−Lys−からなる群から選ばれる１つであり、
さらに好ましくは、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（III）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asn又はLysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ここで、より好ましくは、ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１６}アルキルカルボニル基であり、
さらに好ましくは、ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が単結合であり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoProである；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XIII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（XII）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
(ｉ) ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
そして、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；又は
(ii) ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基又は末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されており、
ここで、より好ましくは、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基又は末端がカルボキシ基で置換されているＣ_８−１４アルキルカルボニル基で置換されており、
さらに好ましくは、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基又は末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１４}アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XIV）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（XIII）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
さらに、ＡＡ^６が、Asn又はLysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の「ＡＡ^６１−ＡＡ^６２−ＡＡ^６３−ＡＡ^６４−」が、γ-Glu−Adox−Adox−単結合−、Gly−Cys−Gly−単結合−、及びLys−Lys−Lys−単結合−からなる群から選ばれる１つであり；

また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
(ｉ) ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
そして、前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、−γ-Glu−、−γ-Glu−Lys−Lys−、−Lys−Lys−Lys−、−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−、及び−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−Lys−Lys−Lys−からなる群から選ばれる１つであり；又は
(ii) ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでいない；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XV）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（XII）又は（XIV）に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ｉ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Asn−Asp−Ala−Leu−Met−Pro
であって；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
−γ-Glu−Lys−Lys−Lys−をＮ末端側にさらに含んでおり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がHO₂C−(CH₂)₁₄−(O=)C−で置換されており；

(ii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Lys−Asp−Ala−Leu−Met−β-homoPro
であって、
ここで、ＡＡ^６として表されるLysの側鎖のアミノ基は、HO₂C−(CH₂)₁₄−(O=)C−Lys−Lys−Lys−で置換されており；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がアセチル基で置換されており；又は

(iii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Lys−Asp−Ala−Leu−Met−β-homoPro
であって；
ここで、ＡＡ^６として表されるLysの側鎖のアミノ基は、HO₂C−(CH₂)₁₆−(O=)C−γ-Glu−Adox−Adox−で置換されており；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がアセチル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XVI）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XV）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでおり；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸は、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸のいずれかに存在し、

ここで、ｍ^Ｎは１である；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XVII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XVI）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸が、糖鎖付加Ａｓｎ又は糖鎖付加Ｃｙｓであり；
より好ましくは、糖鎖付加Ｃｙｓである
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XVIII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XVII）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、付加する糖鎖が４個以上；
より好ましくは、付加する糖鎖が７個以上；
さらに好ましくは、付加する糖鎖が１１個以上；
の糖からなる
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XIX）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XVIII）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、
糖鎖が下記式［４］

を表し、
Ｒ^３は水素原子又はベンジル基を表す。）
で表される糖鎖であることを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XX）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XIX）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、
前記式［４］で表される糖鎖中のＲ^１及びＲ^２が、同一に下記式［５−１］で表される構造

であることを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XXI）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XI）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記（XVI）に記載の態様との組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であり；
より好ましくは、前記（XVI）及び（XVII）に記載の態様との組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であり；
より好ましくは、前記（XVI）、（XVII）、及び（XVIII）に記載の態様との組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であり；
特に好ましくは、前記（XVI）、（XVII）、及び（XX）に記載の態様との組み合わせである糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

（XXII）本発明の糖鎖付加ポリペプチドの他の好ましい態様は、以下である：
前記（Ｉ）〜（XXI）のいずれか１つに記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
ＭＭＰ２に対する阻害活性を有する
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。

本発明の化合物は、１０個のアミノ酸からなるポリペプチドを基本骨格とし、さらに糖鎖が付加されており、必要に応じてカルボキシ基で置換されているアルキルカルボニル基が導入されている化合物であり、その製薬学的に許容される塩でも良い。

製薬学的に許容される塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、硝酸塩のような鉱酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩のようなスルホン酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、安息香酸塩、マンデル酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、グルコン酸塩、リンゴ酸塩のような有機酸塩等の酸付加塩、グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩、又は、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のような無機塩若しくはアンモニウム塩、トリエチルアミン塩、ジイソプロピルアミン塩、シクロヘキシルアミン塩のような有機塩基との塩が挙げられる。なお、塩には、含水塩が含まれる。

本発明の化合物は、不斉中心を持つことがあり、その場合種々の光学異性体が存在する。したがって、本発明の化合物は、（Ｒ）及び（Ｓ）の別々の光学活性体として、及びラセミ体又は（ＲＳ）混合物として存在し得る。また、不斉中心を２個以上持つ化合物の場合には、さらにそれぞれの光学異性によるジアステレオマーも存在する。本発明の化合物は、これらすべての型を、任意の割合で含む混合物も含む。たとえば、ジアステレオマーは当業者によく知られた方法、たとえば分別結晶法等によって分離することができ、また、光学活性体はこの目的のためによく知られた有機化学的手法によって得ることができる。また、本発明の化合物には、ｃｉｓ体、ｔｒａｎｓ体などの幾何異性体が存在することがある。さらに、本発明の化合物は、互変異性を有し、種々の互変異性体が存在する。本発明の化合物は、それらの異性体、及びそれらの異性体を任意の割合で含んだ混合物も含む。
さらに、本発明の化合物又はその塩が水和物又は溶媒和物を形成する場合、それらも本発明の化合物又はその塩の範囲内に含まれる。

「マトリックスメタロプロテアーゼ２（ＭＭＰ２）」とは、亜鉛を活性中心に持つエンドペプチダーゼの１種である。
さて、前述のように、ＭＭＰ２はコラーゲンやゼラチン等の細胞外マトリックスを分解することから、細胞浸潤・遊走や転移などに関与しており、癌疾患や臓器線維症等の病態に関与している。
したがって、ＭＭＰ２を阻害することによって、癌疾患及び臓器線維症、並びに癌疾患及び臓器線維症に関連する症状を予防又は治療することができる。

本発明の化合物は、ＭＭＰ２を阻害する作用を有する。よって、本発明の化合物は、ＭＭＰ２阻害剤、又は癌疾患及び臓器線維症の予防薬又は治療薬の有効成分として用いることができる。
また、本発明の化合物は、癌疾患及び臓器線維症に関連する症状の予防薬又は治療薬の有効成分として用いることもできる。

ここで、「癌疾患」とは、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、大腸癌、卵巣癌、前立腺癌、脳腫瘍、胃癌、肝細胞癌、頭頸部癌、メラノーマ、子宮癌、食道癌、腎細胞癌、肺癌、神経膠腫等が挙げられる。また、「癌疾患に関連する症状」としては、新生細胞増加や腫瘍増殖に伴う痛み、体重減少、腫瘍随伴症候群等が挙げられる。
ここで、「臓器線維症」とは、慢性腎臓病、間質性肺炎、特発性肺線維症等が挙げられる。また、「臓器線維症に関連する症状」としては、慢性腎臓病における蛋白尿や腎機能異常等、間質性肺炎及び特発性肺線維症における労作時呼吸困難や乾性咳嗽等が挙げられる。

なお、本発明の化合物のＭＭＰ２を阻害する作用を評価するには、例えば、後述の本明細書の試験例に記載した方法など、公知の手法に従って行うことができる。

本発明に係る医薬について、含有する本発明の化合物であるＭＭＰ２を阻害する作用を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩は、単独に、又は薬学的或いは薬剤学的に許容される添加剤と共に投与することができる。

添加剤としては、常用の賦形剤又は希釈剤、そして、必要に応じて一般に使用される結合剤、崩壊剤、潤滑剤、被覆剤、糖衣剤、pH調整剤、溶解剤又は水性若しくは非水性溶媒を使用することができる。具体的には、水、乳糖、デキストロース、フラクトース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、デンプン、コーンスターチ、ガム、ゼラチン、アルギネート、ケイ酸カルシウム、リン酸カルシウム、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルキルパラヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、寒天、ペクチン、アラビアゴム、グリセリン、ゴマ油、オリーブ油、大豆油カカオバター、エチレングリコール、低粘度ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ−Ｌ）、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）等やその他常用されるものを挙げることができる。

本発明に係る医薬は、固体組成物、液体組成物及びその他の組成物のいずれの形態でもよく、必要に応じて最適のものが選択される。

本発明に係る医薬は、本発明の化合物に、前述の添加剤を添加し、常用の製剤技術によって、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、散剤、液剤、乳剤、懸濁剤、注射剤等に調製する事ができる。

また、本発明に係る医薬は、本発明の化合物と、α、β若しくはγ−シクロデキストリン又はメチル化シクロデキストリン等とで包接化合物を形成させて製剤化することができる。

本発明に係る医薬は、本発明の化合物と併用可能な化合物について、単一の製剤（配合剤）、又は別々に製剤化して得られる２種以上の製剤（併用剤）とすることができる。
これらの化合物を別々に製剤化して２種以上の製剤とする場合には、個々の製剤を同時又は一定の時間間隔を空けて投与することが可能である。この場合、どちらを先に投与しても構わない。当該２種以上の製剤は、１日にそれぞれ異なる回数で投与することもできる。また、当該２種以上の製剤は、異なる経路で投与することもできる。

これらの化合物を別々に製剤化して２種の製剤とする場合は、同時に、又は極めて短い間隔で投与する場合もあり、例えば、市販されている医薬の添付文書や販売パンフレット等の文書に、それぞれを併用する旨を記載するのが好ましい。
また、これらの有効成分を別々に製剤化して２種の製剤からなるキットの形態とすることも好ましい。

本発明の化合物をＭＭＰ２阻害剤などとして使用する場合は、投与形態は特に制限されず、本発明の化合物をそのまま経口投与又は非経口投与することができる。また、本発明の化合物を有効成分として含む剤として経口投与又は非経口投与してもよい。

また、本発明の化合物を癌疾患及び臓器線維症、並びに癌疾患及び臓器線維症に関連する症状の予防又は改善剤などとして使用する場合も、本発明の化合物をそのまま経口投与又は非経口投与することができる。また、本発明の化合物を有効成分として含む剤として経口投与又は非経口投与してもよい。

ここで、非経口投与としては、静脈内投与、皮下投与、又は経皮投与するのが好ましい。
また、非経口投与する場合の剤型としては、注射剤、点滴用剤、埋め込み剤、経皮吸収剤、経粘膜吸収剤、貼付剤等が挙げられ、マイクロスフェア製剤であってもよい。

本発明の化合物の投与量は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状などによっても異なるが、例えば、成人の患者に経口投与又は非経口投与する場合、通常１回量として０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜２００ｍｇであり、この量を、１日に１回〜３回、又は２日〜３日に１回投与するのが望ましい。

本発明の化合物の製剤の製造例を以下に示す。
製剤例１
以下の成分を含有する顆粒剤を製造する。
成分：一般式［１］で表される化合物、乳糖、コーンスターチ、ＨＰＣ−Ｌ。
一般式［１］で表される化合物と乳糖をふるいに通す。コーンスターチをふるいに通す。これらを混合機にて混合する。混合末にＨＰＣ−Ｌ水溶液を添加し、練合、造粒（押し出し造粒）した後、乾燥する。得られた乾燥顆粒を振動ふるいで篩過し顆粒剤を得る。

製剤例２
以下の成分を含有するカプセル充填用散剤を製造する。
成分：一般式［１］で表される化合物、乳糖、コーンスターチ、ステアリン酸マグネ
シウム。
一般式［１］で表される化合物と乳糖をふるいに通す。コーンスターチをふるいに通す。これらとステアリン酸マグネシウムを混合機にて混合し、散剤を得る。得られた散剤はカプセルに充填することができる。

製剤例３
以下の成分を含有するカプセル充填用顆粒剤を製造する。
成分：一般式［１］で表される化合物、乳糖、コーンスターチ、ＨＰＣ−Ｌ。
一般式［１］で表される化合物と乳糖をふるいに通す。コーンスターチをふるいに通す。これらを混合機にて混合する。混合末にＨＰＣ−Ｌ水溶液を添加し、練合、造粒した後、乾燥する。得られた乾燥顆粒を振動ふるいで篩過し整粒し、顆粒を得る。得られた顆粒はカプセルに充填することができる。

製剤例４
以下の成分を含有する錠剤を製造する。
成分：一般式［１］で表される化合物、乳糖、微結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ＣＭＣ−Ｎａ。
一般式［１］で表される化合物と乳糖と微結晶セルロース、ＣＭＣ−Ｎａをふるいに通し、混合する。混合末にステアリン酸マグネシウムを添加し、製剤用混合末を得る。本混合末を直打し錠剤を得る。

製剤例５
以下の成分を含有する注射剤を製造する。
成分：一般式［１］で表される化合物、精製卵黄レシチン、オレイン酸、精製大豆油、グリセリン、注射用水。
一般式［１］で表される化合物と精製卵黄レシチンとオレイン酸を精製大豆油に加え、溶解後、グリセリンを混合した注射用水を添加し、乳化機により乳化した。これに注射用水を添加し、アンプルに分注、封入、滅菌して注射剤とした。

本発明の糖鎖付加ポリペプチドは、当業者に公知のペプチド合成方法に、糖鎖付加工程を組み込むことで製造することができる。糖鎖付加に際してはトランスグルタミナーゼに代表される、酵素を利用する方法も用いることができるが、この場合、付加する糖鎖が大量に必要になる、最終工程後の精製が煩雑になる、糖鎖の付加位置及び付加可能な糖鎖が制限される、等の問題がある。

本発明の糖鎖付加ポリペプチドの簡便な製造方法であって、かつ、糖鎖の構造が均一である糖鎖付加ポリペプチドの安定した製造方法の具体例として、以下、糖鎖付加アミノ酸として糖鎖付加アスパラギンを使用し、固相合成、液相合成等の公知のペプチド合成方法を適用することにより、ＡＰＰ−ＩＰの任意のアミノ酸を糖鎖付加アスパラギンに置き換え、糖鎖付加ポリペプチドを製造する方法（後述のＣ法）を例示する。また、ＡＰＰ−ＩＰの任意のアミノ酸をシステインで置き換えたポリペプチドを公知のペプチド合成方法に従って製造し、その後、該ポリペプチド中のシステインに化学合成により糖鎖を付加し、糖鎖付加ポリペプチドを製造する方法（後述のＤ法）を例示する。
これらの製造方法を参考に、当業者であれば様々な糖鎖付加ポリペプチドを製造することが可能である。得られる糖鎖付加ポリペプチド及びその製造方法は、特に医薬品製造の分野において、非常に有用である。
なお、これらのＣ法及びＤ法は、２つ以上を組み合わせて行うことも可能である。

また、「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」をポリペプチドに導入する方法としては、アルカンジカルボン酸の一方のカルボキシ基を活性化し、アミノ酸側鎖のアミノ基、ポリペプチドの主鎖のＮ末端のアミノ基、又は分岐ポリペプチドの側鎖のＮ末端のアミノ基に脱水縮合することで導入可能である（後述のＢ法）。

前述のＢ法につき、Ｃ法又はＤ法を組み合わせることによって、又は両方を組み合わせることによって、糖鎖付加ポリペプチドであって、さらに「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」によって置換されているポリペプチドを得ることができる。

なお、Ｃ末端のカルボキシがカルバモイルで置き換えられたポリペプチドは、例えば「アミノ基で官能化されたＲｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ−ＰＥＧＡ樹脂」を用いることによって得ることができる。

また、Ｃ末端のカルボキシがピロリジンやプロリン等、窒素原子を含む飽和のヘテロシクリルカルボニルで置き換えられたポリペプチドは、樹脂から切り出したＣ末端がカルボキシであるポリペプチドに対して、液相合成で対応する窒素原子を含む飽和のヘテロ環を、常法に従って縮合（アミド結合）させることによって、得ることができる。

なお、Ｃ法は、国際公開第２００４／００５３３０号パンフレット（ＵＳ２００５２２２３８２）に、Ｄ法は、国際公開第２００５／０１００５３号パンフレット（ＵＳ２００７０６５４３）に、それぞれ記載されており、その開示は全体として本明細書に参照により組み込まれる。また、Ａ法及びＢ法において用いられる糖鎖構造が均一な糖鎖の製造に関しては、国際公開第２００３／００８４３１号パンフレット（ＵＳ２００４１８１０５４）、国際公開第２００４／０５８９８４号パンフレット（ＵＳ２００６２２８７８４）、国際公開第２００４／０５８８２４号パンフレット（ＵＳ２００６００９４２１）、国際公開第２００４／０７００４６号パンフレット（ＵＳ２００６２０５０３９）、国際公開第２００７／０１１０５５号パンフレット等に記載されており、その開示は全体として本明細書に参照により組み込まれる。

さて、本発明の実施例等は模式図を参照しつつ説明される場合があるが、模式図である場合、説明を明確にするために、誇張されて表現されている場合がある。
例えば、化合物の構造を表す際、前述の式［７］で表される糖鎖（ジシアロ糖鎖）は単に「disialo」、前述の式［８］で表される糖鎖（ジベンジル−ジシアロ糖鎖）は単に「diBn−disialo」、前述の式［９］で表される糖鎖（７糖からなるジグルクナック糖鎖）は単に「diGlcNAc」と表記することもある。

ポリペプチドを製造する方法（Ａ法）
通常、ポリペプチドは、例えば、以下に概略を示す固相合成によって製造することができる（スキーム１）。
スキーム１

（スキーム１中、
Ｈ−ＡＡ^ｍ−ＯＨは、Ｈ−ＡＡ^２−ＯＨ〜Ｈ−ＡＡ^１０−ＯＨで示されるアミノ酸を表し、
ｍ１は、２〜１０の整数を表し、
Ｍは、１〜９の整数を表す。）

（１）［工程１−１］
脂溶性保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸のカルボキシ基を樹脂（レジン）へ結合させ、生成物［１−ｃ］を得ることができる。この場合、アミノ酸のアミノ基を脂溶性保護基で保護しているので、アミノ酸同士の自己縮合は防止され、樹脂とアミノ酸とが反応して結合する。

（２）［工程１−２］
得られた生成物の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
（３）［工程１−３］
この遊離アミノ基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
（４）
上記（２）及び（３）の工程を１回以上繰り返すことにより、任意の数の任意のアミノ酸が連結した、Ｃ末端に樹脂を結合し、Ｎ末端に脂溶性保護基で保護されたアミノ基を有するポリペプチド［１−ｅ］を得ることができる。

（５）［工程１−４］
得られた生成物の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（６）［工程１−５］
この遊離アミノ基を、常法に従ってアセチル化する。
（７）［工程１−６］
最後に、酸を用いて樹脂との結合を切断することにより、所望のアミノ酸配列を有するポリペプチド［１−ｆ］を得ることができる。

ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含むポリペプチドは、Ａ法によって、樹脂に、１０個のアミノ酸を順次結合させた後、さらに「ｍ^Ｎ個のアミノ酸」を同様の方法にて順次結合させ、樹脂から切り出すことによって得ることができる。

ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含むポリペプチドは、Ｈ−ＡＡ^１−ＯＨを樹脂に結合する前に、「ｍ^Ｃ個のアミノ酸」を同様の方法にて順次結合させ、その後に１０個のアミノ酸を順次結合させ、樹脂から切り出すことによって得ることができる。

ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側に、ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含むポリペプチドは、前述の方法を組み合わせることにより、得ることができる。

「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」で置換されているポリペプチドを製造する方法（Ｂ−１法）
ポリペプチドのＮ末端が「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」で置換されているポリペプチドは、例えば、化合物［１−ｅ］を出発物質として、以下に概略を示す固相合成によって製造することができる（スキーム２）。

スキーム２

（スキーム２中、
ｙは、２〜１６の整数を表し、
Ｈ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨ、及びｍ１は、前述の定義と同じである。）

（１）［工程２−１］
スキーム１に記載方法又はこれに準ずる方法に従って得ることができる、生成物［１−ｅ］について、脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（２）［工程２−２］
この遊離アミノ基と、アルカンジカルボン酸の１つのカルボン酸を活性エステルとした化合物［２−ａ］とを縮合する。
（３）［工程２−３］
最後に、酸を用いて樹脂との結合を切断することにより、所望のアミノ酸配列を有する「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」で置換されているポリペプチド［２−ｃ］を得ることができる。
本工程は、工程１−６に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。

分岐ポリペプチドの側鎖のＮ末端が「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」で置換されているポリペプチドを製造する方法（Ｂ−２法）
分岐ポリペプチドの側鎖のＮ末端が「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」で置換されているポリペプチドは、例えば、化合物［１−ｅ’］を出発物質として、以下に概略を示す固相合成によって製造することができる（スキーム３）。

スキーム３

（スキーム３中、
Ｈ−ＡＡ^ｍ２−ＯＨは、存在しないか、Ｈ−ＡＡ^２−ＯＨ〜Ｈ−ＡＡ^８−ＯＨで示されるアミノ酸を表し、
ｍ２は、２〜８の整数を表し、
Ｌｉｎｋｅｒは、Ｃ_１−４アルカンジイルを表し、
ＦＧは、アミノ酸側鎖の官能基を表し、例えば、式−Ｏ−（式−ＯＨ）、式−Ｓ−（式−ＳＨ）、式−ＮＨ−（式−ＮＨ_２）、式−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−（式−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２）、式−ＣＯＯ−（式−ＣＯＯＨ）、式−ＣＯＮＨ−（式−ＣＯＮＨ_２）等を表し、
ＰＧ^１は、アミノ酸側鎖の官能基に対する保護基を表し、
Ｈ−ＡＡ^ｍ’−ＯＨは、Ｈ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨやＨ−ＡＡ^ｍ３−ＯＨで示されるアミノ酸を表し、
Ｈ−ＡＡ^ｍ３−ＯＨは、存在しないか、Ｈ−ＡＡ^３−ＯＨ〜Ｈ−ＡＡ^９−ＯＨで示されるアミノ酸を表し、
ｍ３は、３〜９の整数を表し、
Ｍ’は、１〜８の整数を表し、
Ｈ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨ、及びｍ１は、前述の定義と同じである。）

（１）［工程３−１］
スキーム１に記載方法又はこれに準ずる方法に従って得ることができる、生成物［１−ｅ’］について、そのＮ末端のアミノ基を保護する脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（２）［工程３−２］
この遊離アミノ基と、保護基・ＰＧ^１によって側鎖の官能基が保護されたアミノ酸［３−ａ］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。

（３）［工程３−３］
得られた生成物［３−ｂ］の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（４）［工程３−４］
この遊離アミノ基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸［１−ｄ’］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（５）
上記（３）及び（４）の工程を１回以上繰り返すことにより、任意の数の任意のアミノ酸が連結した、Ｃ末端に樹脂を結合し、Ｎ末端に脂溶性保護基で保護されたアミノ基を有するポリペプチド［３−ｃ］が得ることができる。

（６）［工程３−５］
得られたポリペプチド［３−ｃ］について、ポリペプチド主鎖のＮ末端のアミノ基を保護する脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（７）［工程３−６］
ポリペプチド主鎖Ｎ末端のアミノ基をアセチル化する。
本工程は、工程１−５に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。

（８）［工程３−７］
側鎖に官能基を有するアミノ酸の、側鎖官能基の保護基・ＰＧ^１を選択的に脱保護する。
（９）［工程３−８］
側鎖に官能基を有するアミノ酸の側鎖官能基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸［３−ｅ］とを縮合することで、生成物［３−ｆ］を得ることができる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。

（１０）［工程３−９］
得られた生成物の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（１１）［工程３−１０］
この遊離アミノ基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸［１−ｄ”］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（１２）
必要であれば、上記（１０）及び（１１）の工程を１回以上繰り返すことにより、任意の数の任意のアミノ酸が連結した、末端に樹脂を結合し、他端に遊離アミノ基を有する分岐ポリペプチド［３−ｇ］を得ることができる。

（１３）［工程３−１１］
得られた分岐ポリペプチド［３−ｇ］の側鎖のＮ末端のアミノ基を保護する脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（１４）［工程３−１２］
この遊離アミノ基と、アルカンジカルボン酸の１つのカルボン酸を、活性エステルとした化合物［２−ａ］と縮合する。
本工程は、工程２−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（１５）［工程３−１３］
最後に、酸を用いて樹脂との結合を切断することにより、所望のアミノ酸配列を有するポリペプチドであって、分岐ポリペプチドの側鎖のＮ末端が「末端がカルボキシで置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル」で置換されているポリペプチド［３−ｉ］を得ることができる。
本工程は、工程１−６に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。

分岐ポリペプチド中の側鎖を形成するアミノ酸としては、Ｌｙｓ、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ)_８−ＣＨ_２ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ)_８−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、Ｈ_２Ｎ−(ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ)_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ（Ａｄоｘ）等が好ましい。

糖鎖付加ポリペプチドを製造する方法（Ｃ法）
糖鎖付加ポリペプチドは、例えば、以下に概略を示す糖鎖付加アスパラギンを用いた固相合成によって製造することができ（スキーム４）。

スキーム４

（スキーム４中、
アミノ酸［４−ａ］は、アミノ基をＦｍｏｃによって保護されていて、さらにジシアロ糖鎖（ｄｉｓｉａｌｏ）で置換されているアスパラギンを表し、
Ｈ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨ、Ｈ−ＡＡ^ｍ２−ＯＨ、Ｈ−ＡＡ^ｍ３−ＯＨ、Ｈ−ＡＡ^ｍ’−ＯＨ、ｍ１、ｍ２、及びｍ３は、前述の定義と同じである。
なお、アミノ酸［４−ａ］は、下記式［１−ｈ’］で表される構造を有する。）

（１）［工程４−１］
スキーム１に記載方法又はこれに準ずる方法に従って得ることができる、生成物［１−ｅ’］について、Ｎ末端のアミノ基を保護する脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（２）［工程４−２］
この遊離アミノ基と、アミノ基をＦｍｏｃによって保護されていて、さらにジシアロ糖鎖（ｄｉｓｉａｌｏ）で置換されているアスパラギン［４−ａ］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。

（３）［工程４−３］
得られた生成物［４−ｂ］の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（４）［工程４−４］
この遊離アミノ基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸［１−ｄ’］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
（５）
上記（３）及び（４）の工程を１回以上繰り返すことにより、任意の数の任意のアミノ酸が連結した、Ｃ末端に樹脂を結合し、Ｎ末端に遊離アミノ基を有し、糖鎖で置換されているポリペプチド［４−ｃ］を得ることができる。

（６）［工程４−５］
得られたポリペプチド［４−ｃ］の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（７）［工程４−６］
この遊離アミノ基を、常法に従ってアセチル化する。
本工程は、工程１−５に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（８）［工程４−７］
そして、酸を用いて樹脂との結合を切断し、続いてシアル酸に結合したBn基を脱保護することにより、所望のアミノ酸配列を有するポリペプチド［４−ｄ］を得ることができる。

また、（３）及び（４）の工程で、脂溶性保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸［１−ｄ’］の代わりに、脂溶性保護基でアミノ基が保護された糖鎖付加アスパラギンを用いれば、任意の２ヶ所以上に糖鎖が付加されたポリペプチドを得ることができる。

なお、アミノ酸［４−ａ］が、Ｈ−ＡＡ^１−ＯＨやＨ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨで示されるアミノ酸に対して置き換わるポリペプチドについても、本方法に準じて所望のアミノ配列のポリペプチドを得ることができる。
また、アミノ酸［４−ａ］が、分岐ポリペプチドの側鎖を形成するアミノ酸に対して置き換わっているポリペプチドについても、本方法に準じて所望のアミノ配列のポリペプチドを得ることができる。

糖鎖付加ポリペプチドを製造する方法（Ｄ法）
糖鎖付加ポリペプチドは、一旦、置換されても良いポリペプチドを合成し、その後で合成したポリペプチド鎖へ糖鎖を付加する方法によっても製造することができる。具体的には、糖鎖を付加したい位置にシステインを含むポリペプチドを、固相合成法、液相合成法により合成して得ることによって製造することができる（スキーム５）。

スキーム５

（スキーム５中、
ＰＧ^２は、チオール基に対する保護基を表し、
アミノ酸［５−ａ］は、アミノ基をＦｍｏｃによって保護されていて、さらにチオール基をＰＧ^２によって保護されているシステインを表し、
ｎ^１は０〜５の整数を表し、
ＬＧは脱離基を表し、
Ｈ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨ、Ｈ−ＡＡ^ｍ２−ＯＨ、Ｈ−ＡＡ^ｍ３−ＯＨ、Ｈ−ＡＡ^ｍ’−ＯＨ、ｍ１、ｍ２、ｍ３、及びｄｉｓｉａｌｏは、前述の定義と同じである。）

（１）［工程５−１］
スキーム１に記載方法又はこれに準ずる方法に従って得ることができる、生成物［１−ｅ’］について、そのＮ末端のアミノ基を保護する脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（２）［工程５−２］
この遊離アミノ基と、保護基・ＰＧ^２によってチオール基が保護されたシステイン［５−ａ］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（３）［工程５−３］
得られた生成物［５−ｂ］の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（４）［工程５−４］
この遊離アミノ基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸［１−ｄ’］のカルボキシ基とを、アミド化反応させる。
本工程は、工程１−３に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（５）
上記（３）及び（４）の工程を１回以上繰り返すことにより、任意の数の任意のアミノ酸が連結した、Ｃ末端に樹脂を結合し、Ｎ末端に脂溶性保護基で保護されたアミノ基を有するポリペプチド［５−ｃ］が得ることができる。

（６）［工程５−５］
得られたポリペプチド［５−ｃ］について、システインの側鎖のチオール基の保護基・ＰＧ^２を選択的に脱保護する。
（７）［工程５−６］
この遊離チオール基に、ｄｉｓｉａｌｏで置換されている化合物［５−ｄ］を付加させ、任意の数の任意のアミノ酸が連結した、Ｃ末端に樹脂を結合し、Ｎ末端に脂溶性保護基で保護されたアミノ基を有し、糖鎖で置換されているポリペプチド［５−ｅ］を得ることができる。

（８）［工程５−７］
得られたポリペプチド［５−ｅ］の脂溶性保護基を脱離して遊離アミノ基を形成させる。
本工程は、工程１−２に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（９）［工程５−８］
この遊離アミノ基を、常法に従ってアセチル化する。
本工程は、工程１−５に記載した方法又はこれに準ずる方法により、行うことができる。
（１０）［工程５−９］
最後に、酸を用いて樹脂との結合を切断することにより、所望のアミノ酸配列を有するポリペプチド［５−ｆ］を得ることができる。

なお、アミノ酸［５−ａ］が、Ｈ−ＡＡ^１−ＯＨやＨ−ＡＡ^ｍ１−ＯＨで示されるアミノ酸に対して置き換わるポリペプチドについても、本方法に準じて所望のアミノ配列のポリペプチドを得ることができる。
また、アミノ酸［５−ａ］が、分岐ポリペプチドの側鎖を形成するアミノ酸に対して置き換わるポリペプチドについても、本方法に準じて所望のアミノ配列のポリペプチドを得ることができる。

樹脂（レジン）としては、通常、固相合成で使用する樹脂であればよく、例えば、塩素原子で官能化された２−クロロトリチルクロリド樹脂（メルク社製）や、アミノ基で官能化されたＡｍｉｎｏ−ＰＥＧＡ樹脂（メルク社製）、水酸基を有するＮｏｖａＳｙｎＴＧＴアルコール樹脂（メルク社製）、Ｗａｎｇ樹脂（メルク社製）、ＨＭＰＡ−ＰＥＧＡ樹脂（メルク社製）等を用いることができる。
また、Ａｍｉｎｏ−ＰＥＧＡ樹脂については、該樹脂とアミノ酸との間にリンカーを存在させてもよく、このようなリンカーとして、例えば、４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢酸（ＨＭＰＡ）、４−(４−ヒドロキシメチル−３−メトキシフェノキシ)−ブチル酢酸（ＨＭＰＢ）等を挙げることができる。
Ｃ末端のアミノ酸が樹脂にあらかじめ結合したＨ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＴｒｉｔｙｌＮｏｖａＰＥＧ樹脂（メルク社製）等も用いることができる。

また、Ｃ末端をアミド化する場合には、例えば、アミノ基で官能化されたＲｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ−ＰＥＧＡ樹脂（メルク社製）を用いることが好ましい。この樹脂とポリペプチドとの結合を酸によって切断することにより、ポリペプチドのＣ末端アミノ酸をアミド化することができる。

樹脂と脂溶性保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸との結合は、例えば、水酸基を有する樹脂や塩素原子で官能化された樹脂を使用するには、アミノ酸のカルボキシ基を樹脂へエステル結合させる。また、アミノ基で官能化された樹脂を使用する場合には、アミノ酸のカルボキシ基を樹脂にアミド結合により結合させる。
なお、２−クロロトリチルクロリド樹脂は、固相合成においてポリペプチド鎖を伸長する際、末端にあるシステインのラセミ化を防止することができる点において、好ましい。

アミノ酸としては全てのアミノ酸を用いることができ、例えば、天然アミノ酸である、Ｌ−セリン（Ｓｅｒ）、Ｌ−アスパラギン（Ａｓｎ）、Ｌ−バリン（Ｖａｌ）、Ｌ−ロイシン（Ｌｅｕ）、Ｌ−イソロイシン（Ｉｌｅ）、Ｌ−アラニン（Ａｌａ）、Ｌ−チロシン（Ｔｙｒ）、Ｌ−グリシン（Ｇｌｙ）、Ｌ−リジン（Ｌｙｓ）、Ｌ−アルギニン(Ａｒｇ）、Ｌ−ヒスチジン（Ｈｉｓ）、Ｌ−アスパラギン酸（Ａｓｐ）、Ｌ−グルタミン酸（Ｇｌｕ）、Ｌ−グルタミン（Ｇｌｎ）、Ｌ−スレオニン（Ｔｈｒ）、Ｌ−システイン（Ｃｙｓ）、Ｌ−メチオニン（Ｍｅｔ）、Ｌ−フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、Ｌ−トリプトファン（Ｔｒｐ）、Ｌ−プロリン（Ｐｒｏ）を挙げることができる。

また、上記天然アミノ酸のＤ体を使用することもできる。

非天然アミノ酸としては、例えば、β−ホモプロリン（β−Ｈｅｐ又はβ−ｈｏｍｏＰｒｏ）、ホモセリン（Ｈｓｅ又はｈｏｍｏＳｅｒ）、ホモシステイン（Ｈｃｙ又はｈｏｍｏＣｙｓ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）を挙げることができる。

脂溶性保護基としては、例えば、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）基、ベンジル基、アリル基、アリルオキシカルボニル基、アセチル基等の、カーボネート系又はアミド系の保護基等を挙げることができる。アミノ酸に脂溶性保護基を導入するには、例えば、Ｆｍｏｃ基を導入する場合には９−フルオレニルメチル−Ｎ−スクシニジルカーボネートと炭酸水素ナトリウムを加えて反応を行うことにより導入できる。反応は０〜５０℃、好ましくは室温で、約１〜５時間程度行うのが良い。

脂溶性保護基で保護したアミノ酸としては、市販のものも使用することができる。例えば、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを挙げることができる。
また、脂溶性保護基で保護したアミノ酸であって、側鎖に保護基を導入したものとして、例えば、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨを挙げることができる。

２−クロロトリチルクロリド樹脂を用いる場合、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、トリエチルアミン、ピリジン、２，４，６−コリジン等の塩基を用いることでエステル化を行うことができる。また、水酸基を有する樹脂を用いる場合、エステル化触媒として、例えば、１−（メシチレン−２−スルホニル）−３−ニトロ−１，２，４，−トリアゾール（ＭＳＮＴ）、ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）等の公知の脱水縮合剤を用いることができる。アミノ酸と脱水縮合剤との使用割合は、前者１当量に対して、後者が、通常１〜１０当量、好ましくは２〜５当量である。

エステル化反応は、例えば、固相カラムに樹脂を入れ、この樹脂を溶剤で洗浄し、その後アミノ酸の溶液を加えることにより行うのが好ましい。洗浄用容剤としては、例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、２−プロパノール、ジクロロメタン等を挙げることができる。アミノ酸を溶解する溶媒としては、例えば、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ＤＭＦ、ジクロロメタン等を挙げることができる。エステル化反応は０〜５０℃、好ましくは室温で、約１０分〜３０時間程度、好ましくは１５分〜２４時間程度行うのが良い。
この時固相上の未反応の水酸基を、無水酢酸等を用いてアセチル化してキャッピングすることも好ましい。

脂溶性保護基の脱離は、例えば、塩基で処理することにより行うことができる。塩基としては、例えば、ピペリジン、モルホリン等を挙げることができる。その際、溶媒の存在下で行うのが好ましい。溶媒としては、例えば、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、メタノール等を挙げることができる。

遊離アミノ基と、脂溶性保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸のカルボキシ基とのアミド化反応は、活性化剤及び溶媒の存在下行うのが好ましい。

活性化剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−エチル−３−（ジメチルアミノフロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ／ＨＣｌ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ジエチルシアノホスホネート（ＤＥＰＣ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリスピロリジノホスホニウム（ＤＩＰＣＩ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、ヒドロキシフタルイミド（ＨＯＰｈｔ）、ペンタフルオロフェノ−ル（Ｐｆｐ−ＯＨ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３，−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−５−クロロ−１Ｈ−ベンソトリアゾリウム３−オキドヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスホネート（ＨＡＴＵ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、３，４−ジヒドロ−３−ヒドロジ−４−オキサ−１，２，３−ベンゾトリアジン（Ｄｈｂｔ）等を挙げることができる。
活性化剤の使用量は、脂溶性の保護基でアミノ基が保護された任意のアミノ酸に対して、１〜２０当量、好ましくは１〜１０当量、さらに好ましくは、１〜５当量とするのが好ましい。
溶媒としては、例えばＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ジクロロメタン等を挙げることができる。反応は０〜５０℃、好ましくは室温で、約１０分〜３０時間程度、好ましくは１５分〜２４時間程度行うのが良い。脂溶性保護基の脱離は、上記と同様に行うことができる。

樹脂からポリペプチド鎖を切断するには酸で処理するのが好ましい酸としては、例えばトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、フッ化水素（ＨＦ）等を挙げることができる。

このようにして、所望の位置を糖鎖付加アスパラギンで置き換えた糖鎖付加ポリペプチドを得ることができる。

なお、本発明の一実施態様において、固相合成に用いる糖鎖付加アスパラギンにおける糖鎖上の非還元末端にシアル酸を含む場合には、酸処理によりシアル酸が切断されるのを防ぐために、当該シアル酸のカルボキシ基を、保護基により保護していることが好ましい。保護基としては、例えば、ベンジル基、アリル基、ジフェニルメチル基等を挙げることができる。保護基の導入及び保護基の脱離の方法は、公知の方法により行うことができる。また、保護基の脱離は、固相合成により製造された糖鎖付加ポリペプチドを樹脂から切断した後に行うことが好ましい。

また、糖鎖付加ポリペプチド中の複数個のシステインに、異なる糖鎖を付加する場合には、例えば、最初に糖鎖を導入するシステインを無保護とし、次に異なる糖鎖を導入するシステインを、ＳｔＢｕ等により保護しておくことで、異なる糖鎖を導入することができる。
具体的には、固相合成等によりポリペプチドを合成する際、第一の糖鎖を導入したいシステインを無保護とし、かつ、第二の糖鎖を導入したいシステインを、例えば、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）−ＯＨ等を用いて、保護基を有するシステインとする。その後、ＳｔＢｕ等の保護基を保持したまま、無保護のシステインへ糖鎖を導入する。次に、ＳｔＢｕ基等を脱保護することで、無保護となったシステインへ異なる糖鎖を導入することができる。なお、第一の糖鎖を導入したいシステイン及び第二の糖鎖を導入したいシステインは、１つ又は複数個とすることができる。

なお、ＳｔＢｕ基の脱保護は、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）、ジチオトレイト―ル（ＤＴＴ）、トリブチルホスフィン等の還元剤を用いて反応させることにより脱保護することができる。上記反応は、通常０〜８０℃、好ましくは５〜６０℃、より好ましくは１０〜３５℃で行うのが良い。反応時聞は、好ましくは、通常３０分〜５時間程度である。反応終了後は、適宜、公知の方法（例えば、高速液体カラムクロマトグラフィー（ＨＰＬＣ））で精製するのが良い。

異なる糖鎖を導入する際には、システインの脱保護工程における還元条件やＨＰＬＣ等の精製工程における酸性条件に対して、より安定な糖鎖から導入することが好ましい。特に、シアル酸含有糖鎖を導入する際には、シアル酸を有さない糖鎖又はシアル酸残基数が少ない糖鎖から、先に導入することが好ましい。

次に、糖鎖で置換されている化合物［５−ｄ］を、上記で得た無保護のシステインを含むポリペプチドと反応させることにより、糖鎖を無保護のシステインのチオール基と反応させ、ポリペプチドに結合させる。上記反応は、リン酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液、クエン酸緩衝液、又はこれらの混合溶液中において、通常０〜８０℃、好ましくは１０〜６０℃、より好ましくは１５〜３５℃で行うのが良い。反応時聞は、通常１０〜２４時間、好ましくは通常３０分〜５時間程度である。反応終了後は、適宜、公知の方法（例えば、ＨＰＬＣ）で精製するのが良い。
具体的には、糖鎖で置換されている化合物［５−ｄ］とシステイン含有ポリペプチドとをリン酸緩衝液中、室温で反応させる。反応終了後、ＨＰＬＣで精製することにより糖鎖付加システインで置換した糖鎖付加ポリペプチドを得ることができる。

また、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、メタノール、アセトニトリルといった有機溶媒と、上記の緩衝液との混合溶液中で反応を行うこともできる。このとき、有機溶媒の比率は、０〜９９％（ｖ／ｖ）の範囲で、上記緩衝液に添加することができる。緩衝液への溶解性が低い無保護のシステインを含むポリペプチドは、このような有機溶媒を添加することにより反応溶液への溶解性を向上させることができ、好ましい。
また、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、メタノール、アセトニトリルといった有機溶媒や、それらの混合溶液中で反応を行うこともできる。その際、塩基の存在下で行うのが好ましい。塩基としては、例えば、ＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ピリジン、２，４，６−コリジン等を挙げることができる。
また、グアニジン塩酸塩や尿素を緩衝溶液に加えた混合溶液中においても反応を行うことができる。なお、グアニジン塩酸塩や尿素は、最終濃度が１Ｍ〜８Ｍとなるように上記緩衝液に加えることができる。グアニジン塩酸塩や尿素の添加によっても、緩衝液への溶解性の低いポリペプチドの溶解性を向上させることができ、好ましい。

さらに、無保護のシステインを含むポリペプチドが、ジスルフィド結合を介した２量体を形成することを防止するために、ＴＣＥＰやＤＴＴを緩衝液に添加して反応させることもできる。ＴＣＥＰやＤＴＴは、最終濃度が１０μＭ〜１０ｍＭとなるように緩衝液に加えることができる。

また、糖鎖を目的のシステインへ結合させた後、Ａｃｍ等で保護されたシステインへの保護基を脱保護する。保護基がＡｃｍ基である場合は、水、メタノール、酢酸、又はこれらの混合溶液中において、ヨウ素、酢酸水銀（ＩＩ）、硝酸銀（Ｉ）、又は、酢酸銀（Ｉ）等を用いて反応させることにより脱保護することができる。

上記反応は、通常０〜８０℃、好ましくは５〜６０℃、より好ましくは１０〜３５℃で行うのが良い。反応時聞は、好ましくは、通常５分〜２４時間程度である。反応終了後は、ＤＴＴや塩酸等により処理した後、適宜、公知の方法（例えば、ＨＰＬＣ）で精製するのが良い。

このようにして、所望の位置を糖鎖付加システインで置換した糖鎖付加ポリペプチドを得ることができる。

本発明は、以下の実施例、及び試験例によってさらに詳しく説明されるが、これらは本発明を限定するものではなく、また、本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。

ＭＳ（マススペクトル）は以下の装置にて測定した。
ＰｌａｔｆｏｒｍＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）
ＬＣＭＳ−２０１０ＥＶ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）
ＬＣＭＳ−ＩＴ−ＴＯＦ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）
Ａｇｉｌｅｎｔ６１３０（Ａｇｉｌｅｎｔ）
Ａｇｉｌｅｎｔ６１５０（Ａｇｉｌｅｎｔ）
イオン化法としては、ＥＳＩ（ＥｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙＩｏｎｉｚａｔｉｏｎ、エレクトロスプレーイオン化）法、ＥＩ（ＥｌｅｃｔｒｏｎＩｏｎｉｚａｔｉｏｎ、電子イオン化法）、又は、ＥＳＩ及びＡＰＣＩ（ＡｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃＰｒｅｓｓｕｒｅＣｈｅｍｉｃａｌＩｏｎｉｚａｔｉｏｎ、大気圧化学イオン化）法とのデュアルイオン化法を用いた。データは実測値（ｆｏｕｎｄ）を記載した。通常、分子イオンピークが観測されるが、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（−Ｂｏｃ）を有する化合物の場合、フラグメントイオンとして、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルあるいはｔｅｒｔ−ブチルが脱離したピークが観測されることもある。また、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）を有する化合物の場合、フラグメントイオンとして、テトラヒドロピラニルが脱離したピークが観測されることもある。また、ヒドロキシ（−ＯＨ）を有する化合物の場合、フラグメントピークとしてＨ_２Ｏが脱離したピークが観測されることもある。塩の場合は、通常、フリー体の分子イオンピークもしくはフラグメントイオンピークが観測される。

実施例におけるＬＣ−ＭＳは以下の条件により測定した。
ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ１２９０Ｉｎｆｉｎｉｔｙ
ＭＳ：Ａｇｉｌｅｎｔ６１３０又は６１５０

［ＨＰＬＣ条件］
カラム：ＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＣＳＨＣ１８、１．７μｍ、２．１ｘ×５０ｍｍ（ＷＡＴＥＲＳ）
溶媒：Ａ液；０．１％ギ酸含有水、Ｂ液；０．１％ギ酸含有アセトニトリル

（方法Ａ）
グラジエント：０．００分（Ａ液／Ｂ液＝８０／２０）、１．２０分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）、１．４０分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）、１．４１分（Ａ液／Ｂ液＝８０／２０）、１．５０分（Ａ液／Ｂ液＝８０／２０）
（方法Ｂ）
グラジエント：０．００分（Ａ液／Ｂ液＝９５／５）、０．８０分（Ａ液／Ｂ液＝６０／４０）、１．０８分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）、１．３８分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）、１．４１分（Ａ液／Ｂ液＝９５／５）、１．５０分（Ａ液／Ｂ液＝８０／２０）
（方法Ｃ）
グラジエント：０．００分（Ａ液／Ｂ液＝７０／３０）、０．８０分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）、１．４０分（Ａ液／Ｂ液＝１／９９）、１．４２分（Ａ液／Ｂ液＝７０／３０）、１．５０分（Ａ液／Ｂ液＝７０／３０）

注入量：０．５μＬ、流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出法：ＵＶ２１０ｎｍ、２５４ｎｍ
ＥＬＳＤが付属する場合Ａｇｉｌｅｎｔ３８５−ＥＬＳＤ
ＭＳ条件
イオン化法：ＥＳＩ又はＥＳＩ／ＡＰＣＩマルチモード

実施例１

（実施例1-1）ペプチド合成
固相合成用カラムにFmoc-NH-SAL樹脂（100 μmol）を取り、DMFで洗浄後、Prelude（商標）ペプチド合成機を用いて、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、樹脂に結合した状態にある保護されたペプチドFmoc-Ile-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-(D-Cys(Trt))-Asn(Trt)-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Met-Pro-樹脂を合成した。縮合反応は、縮合剤としてHCTUを使用してDMF中で行った。縮合後、Fmoc保護基を、DMF中の20%のピペリジンで処理することにより除去した。その後、DMF：ピリジン：無水酢酸＝16:4:1を加え、室温で1時間振盪することによりN末端をアセチル化した。DMF及びジクロロメタンで洗浄後、TFA:水:トリイソプロピルシラン:エタンジチオール(=90:2.5:5:2.5)を加え、3時間室温で振盪した。これにより、アミノ酸側鎖の保護基を脱離させるとともに、ペプチドと樹脂とを切り離した。樹脂をろ過して除き、ろ液に冷却したジエチルエーテルを加え、無保護のCysを持つ粗ペプチド（110.0 mg）を沈殿として得た。

（実施例1-2）糖鎖修飾反応
実施例1-1に記載の方法で得られた粗ペプチド（25.0 mg, 22.2 μmol）と下記式［１０］で表される化合物「Disialo-AcBr」（52.0 mg, 22.2 μmol）を22 mMリン酸緩衝液（5.9 mL）に溶解し、室温で4時間反応させた。反応溶液をHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A: 0.1%TFA水 B: 0.09%TFA/10%水/90%アセトニトリル、グラジエント： A:B=79:21→75:25 24分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製し、前述の式［Ｉ−１］で表される化合物を含むフラクションを得た。得られたフラクションを凍結乾燥後、超純水に溶解しHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A:10 mM 酢酸アンモニウム水 B: 10 mM 酢酸アンモニウムを含む10%水/90%アセトニトリル、グラジエント： A:B=85:15→70:30 30分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製した後、凍結乾燥を行い、前述の式［Ｉ−１］で表される化合物（39.0 mg, 11.4 μmol, 収率51%）を得た。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₃₆H₂₁₇N₁₉O₇₈S₂: [M+2H]²⁺ 1715.7, [M+3H]³⁺ 1144.1, [M+4H]⁴⁺ 853.3; found: 1716.2, 1144.1, 858.4.

実施例２

（実施例2-1）シアル酸のカルボキシル基がベンジルエステル化された糖ペプチドの合成
固相合成用カラムにRink Amide PEGA樹脂（100 μmol）を取り、DMFで洗浄後、Prelude（商標）ペプチド合成機を用いて、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、樹脂に結合した状態にある保護されたペプチドFmoc-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Met-Pro-樹脂を合成した。縮合反応は、縮合剤としてHCTUを使用してDMF中で行った。Fmoc保護基を、DMF中の20%のピペリジンで処理することにより除去した後、DMFで洗浄した。この樹脂に、下記式［１２］で表される化合物「diBn-Disialo-Asn-Fmoc」（411 mg, 150 μmol）のDMF/DMSO（1:1、3.3 mL）溶液を加え、TBTUを縮合剤に用いて終夜縮合反応を行った。DMFで洗浄後、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、樹脂に結合した状態にある保護されたペプチドを合成した。糖鎖縮合後の縮合反応は、縮合剤としてDICを使用してDMF中で行った。縮合後、樹脂をDMF及びジクロロメタンで洗浄し、TFA:水:トリイソプロピルシラン:エタンジチオール(=90:2.5:5:2.5)を加え、室温で3時間振盪した。樹脂をろ過して除き、ろ液に冷却したジエチルエーテルを加え、粗ペプチド（166 mg, 47.3 μmol）を沈殿として得た。得られた粗ペプチドの一部を水に溶解しHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A:0.1%TFA水 B:0.09%TFA/10%水/90%アセトニトリル、グラジエント： A:B=75:25→65:35 20分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製し、シアル酸のカルボキシル基がベンジルエステル化された糖ペプチド（72.9 mg, 20.8 μmol）を得た。

（実施例2-2）Bn基の脱保護
上記2.1.に記載の方法で得られた糖ペプチド（72.9 mg, 20.8 μmol）を超純水 (5.0 mL)に溶解させ、氷冷した。100 mMの水酸化ナトリウム水溶液（5.0 mL）を添加後、氷冷下、60分間反応させた。反応後、200 mMの酢酸水溶液（4.0 mL）で反応溶液を中和し、この溶液をHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A: 10 mM 酢酸アンモニウム水 B: 10 mM 酢酸アンモニウムを含む10%水/90%アセトニトリル、グラジエント： A:B=87:13→80:20 20分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製した。目的物を含むフラクションを凍結乾燥した後、凍結乾燥粉末を超純水（5.0 mL）に溶解し、透析膜（spectra/por7 pre-treated RC Tubing MWCO: 1 kDa）を用いて、24時間水に対して透析を行った。透析膜内液を凍結乾燥し、前述の式［Ｉ−２］で表される化合物（41.2 mg, 12.4 μmol, 収率60%）を得た。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₃₃H₂₁₂N₁₈O₇₇S: [M+2H]²⁺ 1664.2, [M+3H]³⁺ 1109.8, [M+4H]⁴⁺ 832.6; found: 1664.7, 1109.8, 832.6.

実施例３

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３］で表される化合物（75.6 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₂₇H₃₆₄N₂₈O₁₄₂S₃: [M+3H]³⁺ 1951.7, [M+4H]⁴⁺ 1464.0, [M+5H]⁵⁺ 1171.4; found: 1952.1, 1464.3, 1171.7.

実施例４

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４］で表される化合物（158.3 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₁₄H₅₀₅N₃₅O₂₀₄S₄: [M+4H]⁴⁺ 2041.2, [M+5H]⁵⁺ 1633.2, [M+6H]⁶⁺ 1361.2; found: 2041.6, 1633.5, 1361.4.

実施例５

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５］で表される化合物（80.3 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₃₆H₂₁₄N₁₈O₇₇S₂: [M+2H]²⁺ 1687.1, [M+3H]³⁺ 1125.1; found: 1687.1, 1125.0.

実施例６

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−６］で表される化合物（120.8 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₂₇H₃₆₄N₂₈O₁₄₂S₃: [M+3H]³⁺ 1951.7, [M+4H]⁴⁺ 1464.0, [M+5H]⁵⁺ 1171.4; found: 1952.0, 1464.0, 1171.6.

実施例７

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−７］で表される化合物（103.7 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₂₇H₃₆₄N₂₈O₁₄₂S₃: [M+3H]³⁺ 1951.7, [M+4H]⁴⁺ 1464.0, [M+5H]⁵⁺ 1171.4; found: 1952.1, 1464.3, 1171.6.

実施例８

固相合成用カラムにWang樹脂（100 μmol）を取り、Fmoc-Aib-OH（162 mg, 0.50 mmol），MSNTを縮合剤に用いて結合させた。この後、（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。次いで（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−８］で表される化合物（52.0 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₄₂H₂₂₆N₂₀O₈₁S₂: [M+2H]²⁺ 1787.2, [M+3H]³⁺ 1191.8, [M+4H]⁴⁺ 894.1; found: 1787.7, 1191.8, 894.3.

実施例９

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−９］で表される化合物（56.4 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₄₂H₂₂₇N₂₁O₈₀S₂: [M+2H]²⁺ 1786.7, [M+3H]³⁺ 1191.5, [M+4H]⁴⁺ 893.9; found: 1787.2, 1191.4, 894.1.

実施例１０

固相合成用カラムに２−クロロトリチルクロリド樹脂（200 μmol）を取り、Fmoc-Cys(Trt)-OH（136 mg, 0.24 mmol）をDIPEA存在下で結合させた。この後、（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。次いで（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−１０］で表される化合物（59.5 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₄₂H₂₂₆N₂₀O₈₁S₂: [M+2H]²⁺ 1787.2, [M+3H]³⁺ 1191.8, [M+4H]⁴⁺ 894.1; found: 1787.7, 1191.8, 894.3.

実施例１１

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−１１］で表される化合物（58.0 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₄₂H₂₂₇N₂₁O₈₀S₂: [M+2H]²⁺ 1786.7, [M+3H]³⁺ 1191.5, [M+4H]⁴⁺ 893.9; found: 1787.2, 1191.5, 893.8.

実施例１２

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−１２］で表される化合物（171 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₄₀₃H₆₅₀N₄₂O₂₆₇S₅: [M-4H]^4- 2627.4, [M-5H]^5- 2101.7; found: 2627.8, 2102.0.

実施例１３

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−１３］で表される化合物（160.3 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₄₀₃H₆₅₀N₄₂O₂₆₇S₅: [M-4H]^4- 2627.4, [M-5H]^5- 2101.7; found: 2627.8, 2102.0.

実施例１４

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−１４］で表される化合物（167 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₄₉₂H₇₉₄N₅₀O₃₃₀S₆: [M-4H]^4- 3218.9, [M-5H]^5- 2574.9, [M-6H]^6- 2145.6, [M-7H]^7- 1838.9; found: 3219.5, 2575.2, 2145.8, 1839.1.

実施例１５

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−１５］で表される化合物（143 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₁₈H₅₁₂N₃₆O₂₀₆S₄: [M-3H]^3- 2753.0, [M-4H]^4- 2064.5, [M-5H]^5- 1651.4, [M-6H]^6- 1376.0; found: 2753.4, 2064.8, 1651.5, 1376.4.

実施例１７

実施例４に記載の方法で得られた無保護のCysを持つペプチド（36.5 mg, 26.6 μmol）と、下記式［１２］で表されるDiBn-Disialo-AcBr（129 mg, 51.1 μmol）を65 mMリン酸緩衝液-DMSO（63/37，v/v）混合液（14 mL）に溶解し、室温で3時間反応させた。反応溶液をHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A:0.1%TFA水 B:0.09%TFA/10%水/90%アセトニトリル、グラジエント： A:B=74:26→65:35 15分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製し、前述の式［Ｉ−１７］で表される化合物を含むフラクションを得た。このフラクションを凍結乾燥後、10 mM 酢酸アンモニウム水（10 mL）に溶解しHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A:10mM 酢酸アンモニウム水 B: 10mM 酢酸アンモニウム水/90%アセトニトリル、グラジエント A:B=74:26→65:35 15分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製した後、減圧下濃縮を行った。濃縮液を透析膜（spectra/por dialysis-membrane MWCO:1 kDa）を用いて24時間水に対して透析を行った。透析膜内液を凍結乾燥し、前述の式［Ｉ−１７］で表される化合物（110 mg，12.6 μmol，収率47%）を得た。

ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₅₆H₅₄₁N₃₅O₂₀₄S₅: [M+3H]³⁺ 2901.4, [M+4H]⁴⁺ 2176.3，[M+5H]⁵⁺ 1741.2，[M+6H]⁶⁺ 1451.2; found: 2901.0, 2176.2, 1741.2，1451.1.

実施例１８

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。DiBn-Disialo-AcBrの代わりに下記式［１３］で表されるDiＧｌｃＮＡｃ-BrAcを用いたこと以外は、実施例１７と同様の方法で糖鎖修飾を行い、前述の式［Ｉ−１８］で表される化合物（118 mg）を合成した。

ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₆₇H₄₃₃N₃₅O₁₆₃S₅: [M+3H]³⁺ 2300.8, [M+4H]⁴⁺ 1725.9，[M+5H]⁵⁺ 1380.9; found: 2300.8, 1725.7, 1381.0.

実施例１９

DiＧｌｃＮＡｃ-BrAcの代わりにDiBn-Disialo-AcBrを用いたこと以外は実施例１８と同様にして、前述の式［Ｉ−１９］で表される化合物（109 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₅₆H₅₄₁N₃₅O₂₀₄S₄: [M+4H]⁴⁺ 2813.8，[M+5H]⁵⁺ 2250.6，[M+6H]⁶⁺ 1875.7，[M+7H]⁷⁺ 1607.9; found: 2813.9, 2250.9, 1876.1，1608.3.

実施例２０

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２０］で表される化合物（94.8 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₅₀H₅₇₇N₅₉O₂₁₀S₄: [M+4H]⁴⁺ 2275.4，[M+5H]⁵⁺ 1820.5，[M+6H]⁶⁺ 1517.3，[M+7H]⁷⁺ 1300.6; found: 2276.0, 1820.9, 1517.5，1300.7.

実施例２１

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２１］で表される化合物（104.9 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₅₀H₅₇₇N₄₇O₂₁₀S₄: [M+4H]⁴⁺ 2233.4，[M+5H]⁵⁺ 1786.9，[M+6H]⁶⁺ 1489.3，[M+7H]⁷⁺ 1276.6; found: 2234.0, 1787.2, 1489.6，1276.8.

実施例２２

（実施例1-1）と同様にFmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例1-2）と同様に、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２２］で表される化合物（45.8 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₅₀H₅₇₇N₄₇O₂₁₀S₄: [M+4H]⁴⁺ 2233.4，[M+5H]⁵⁺ 1786.9，[M+6H]⁶⁺ 1489.3，[M+7H]⁷⁺ 1276.6; found: 2233.8, 1787.2, 1489.6，1277.0.

実施例２３

（実施例23-1）ペプチド合成
固相合成用カラムにRink Amide PEGA樹脂（100 μmol）を取り、DMFで洗浄後、Prelude（商標）ペプチド合成機を用いて、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、樹脂に結合した状態にある保護されたペプチドFmoc-γGlu(OtBu)-Ile-Ser(OtBu)-Tyr(tBu)-Gly-Asn(Trt)-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Met-Pro-Cys(Trt)-Rink Amide PEGA樹脂を合成した。縮合反応は、縮合剤としてHCTUを使用してDMF中で行った。縮合後、Fmoc保護基を、DMF中の20%のピペリジンで処理することにより除去した。得られた樹脂に、Sebacic Acid（101.1 mg, 0.50 mmol）、HCTU（196.5 mg, 0.48 mmol）及びDIPEA（130.6 μL、0.75 mmol）のDMF溶液（3.1 mL）を加え10分間振盪した。DMF及びジクロロメタンで洗浄後、TFA:水:トリイソプロピルシラン:エタンジチオール(=90:2.5:5:2.5)を加え、室温で3時間振盪した。樹脂をろ過して除き、ろ液に冷却したジエチルエーテルを加え、無保護のCysを持つ粗ペプチド（99.4 mg, 66.4 μmol）を沈殿として得た。

（実施例23-2）糖鎖修飾反応
（実施例23-1）に記載の方法で得られた粗ペプチド（90.0 mg, 60.2 μmol）とDisialo-AcBr（212 mg，90.3 μmol）を33 mMリン酸緩衝液（15.8 mL）に溶解し、室温で２時間反応させた。反応溶液をHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A:0.1%TFA水 B:0.09%TFA/10%水/90%アセトニトリル、グラジエント： A:B=75:25→60:40 20分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製し、前述の式［Ｉ−２３］で表される化合物を含むフラクションを得た。このフラクションを凍結乾燥後、10 mM 酢酸アンモニウム水（10 mL）に溶解しHPLC［カラム: SHISEIDO CAPCELL PAK C18 UG-120（5 μm）、φ20x250 mm、流速：7.0 mL/分、展開溶媒 A:10mM 酢酸アンモニウム水 B: 10mM 酢酸アンモニウム水/90%アセトニトリル、グラジエント A:B=83:17→75:25 20分、直線濃度勾配溶出］を用いて精製した後、減圧下濃縮を行った。濃縮液を透析膜（spectra/por dialysis-membrane MWCO:1 kDa）を用いて24時間水に対して透析を行った。透析膜内液を凍結乾燥し、前述の式［Ｉ−２３］で表される化合物（46.7 mg, 12.4 μmol, 収率21%）を得た。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₅₁H₂₄₁N₂₁O₈₄S₂: [M+2H]²⁺ 1879.7, [M+3H]³⁺ 1253.5, [M+4H]⁴⁺ 940.4; found: 1880.3, 1253.5, 940.6.

実施例２４

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２４］で表される化合物（44.5 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₅₃H₂₄₁N₂₁O₈₄S₂: [M+2H]²⁺ 1893.8, [M+3H]³⁺ 1262.8, [M+4H]⁴⁺ 947.4; found: 1894.4, 1263.2, 947.4.

実施例２５

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２５］で表される化合物（61.2 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₅₅H₂₄₉N₂₁O₈₄S₂: [M+2H]²⁺ 1907.8, [M+3H]³⁺ 1272.2, [M+4H]⁴⁺ 954.4; found: 1908.3, 1272.2, 954.6.

実施例２６

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２６］で表される化合物（71.2 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₅₇H₂₅₃N₂₁O₈₄S₂: [M+2H]²⁺ 1921.8, [M+3H]³⁺ 1281.5, [M+4H]⁴⁺ 961.4; found: 1922.3, 1281.9, 961.9.

実施例２７

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２７］で表される化合物（48.3 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₅₉H₂₅₇N₂₁O₈₅S₂: [M+2H]²⁺ 1943.8, [M+3H]³⁺ 1296.2, [M+4H]⁴⁺ 972.4; found: 1943.7, 1296.2, 972.5.

実施例２８

（実施例28-1）ペプチド合成
固相合成用カラムにRink Amide PEGA樹脂（100 μmol）を取り、DMFで洗浄後、Prelude（商標）ペプチド合成機を用いて、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、樹脂に結合した状態にある保護されたペプチドFmoc-Ile-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Gly-Lys(ivDde)-Asp(OtBu)-Ala-Leu-Met-(β-homoPro)-Cys(Trt)-Rink Amide PEGA樹脂を合成した。縮合反応は、縮合剤としてHCTUを使用してDMF中で行った。縮合後、Fmoc保護基を、DMF中の20%のピペリジンで処理することにより除去した。DMF及びジクロロメタンで洗浄後、DMF：ピリジン：無水酢酸＝16:4:1を加え、室温で1時間撹拌することでＮ末端をアセチル化した。DMF及びジクロロメタンで洗浄後、ivDde保護基をDMF中の10%のヒドラジンで処理することにより除去した。この後、Fmoc-Adox-OH、Fmoc-Adox-OH、Fmoc-Glu-OtBu、及びTetradecanedioic acidを順次伸長させた。DMF及びジクロロメタンで洗浄後、TFA:水:トリイソプロピルシラン:エタンジチオール(=90:2.5:5:2.5)を加え、室温で3時間振盪した。ろ液に冷却したジエチルエーテルを加え、粗ペプチド（240 mg, 126 μmol）を沈殿として得た。

（実施例28-2）糖鎖修飾反応（実施例28-1）に記載の方法で得られた粗ペプチド（217 mg, 114 μmol）を用いたこと以外は（実施例23-2）と同様の方法で糖鎖修飾反応を行い、前述の式［Ｉ−２８］で表される化合物（217 mg, 51.9 μmol、収率46%）を得た。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₂H₂₈₁N₂₃O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2087.9, [M+3H]³⁺ 1392.3, [M+4H]⁴⁺ 1044.7; found: 2088.5, 1392.6, 1044.7.

実施例２９

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−２９］で表される化合物（156 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₂H₂₈₁N₂₃O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2087.9, [M+3H]³⁺ 1392.3, [M+4H]⁴⁺ 1044.7; found: 2088.5, 1392.3, 1044.7.

実施例３０

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３０］で表される化合物（103 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₆₁H₄₂₅N₃₁O₁₅₃S₃: [M+3H]³⁺ 2180.9, [M+4H]⁴⁺ 1635.9, [M+5H]⁵⁺ 1308.9; found: 2181.2, 1635.9, 1309.1.

実施例３１

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３１］で表される化合物（103 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₃₄₈H₅₆₆N₃₈O₂₁₅S₄: [M+4H]⁴⁺ 2213.1, [M+5H]⁵⁺ 1770.7，[M+6H]⁶⁺ 1475.1; found: 2213.7, 1771.1, 1475.9.

実施例３２

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３２］で表される化合物（177 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₂H₂₈₀N₂₄O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2094.4, [M+3H]³⁺ 1396.6, [M+4H]⁴⁺ 1047.7; found: 2094.9, 1396.9, 1048.0.

実施例３３

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３３］で表される化合物（160 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₀H₂₇₇N₂₃O₈₉S₂: [M+2H]²⁺ 2065.9, [M+3H]³⁺ 1377.6, [M+4H]⁴⁺ 1033.4; found: 2066.5, 1377.9, 1033.7.

実施例３４

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３４］で表される化合物（146 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₅₉H₄₂₁N₃₁O₁₅₂S₃: [M+3H]³⁺ 2166.2, [M+4H]⁴⁺ 1624.9, [M+5H]⁵⁺1300.1; found: 2166.6, 1625.2, 1300.4.

実施例３５

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３５］で表される化合物（167 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₅₉H₂₅₈N₂₂O₈₃S₂: [M+2H]²⁺ 1935.3, [M+3H]³⁺ 1290.5, [M+4H]⁴⁺ 968.2; found: 1935.9, 1290.5, 968.5.

実施例３６

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３６］で表される化合物（154 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₄H₂₈₅N₂₃O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2101.9, [M+3H]³⁺ 1401.6, [M+4H]⁴⁺ 1051.5; found: 2102.5, 1402.0, 1051.7.

実施例３７

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３７］で表される化合物（128 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₃H₂₈₄N₂₄O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2102.4, [M+3H]³⁺ 1401.9, [M+4H]⁴⁺ 1051.7; found: 2103.0, 1402.3, 1052.0.

実施例３８

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３８］で表される化合物（248 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₆₃H₄₂₉N₃₁O₁₅₃S₃: [M+3H]³⁺ 2190.2, [M+4H]⁴⁺ 1642.9, [M+5H]⁵⁺1314.5; found: 2190.6, 1643.2, 1314.8.

実施例３９

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−３９］で表される化合物（248 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₂₆₀H₄₂₅N₃₁O₁₅₂S₃: [M+3H]³⁺ 2171.5, [M+4H]⁴⁺ 1628.9, [M+5H]⁵⁺1303.3; found: 2172.3, 1629.2, 1303.6.

実施例４０

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４０］で表される化合物（172 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₅H₂₈₉N₂₇O₈₇S₂: [M+2H]²⁺ 2113.9, [M+3H]³⁺ 1409.6, [M+4H]⁴⁺ 1057.5, [M+5H]⁵⁺ 846.2; found: 2114.5, 1410.0, 1057.8, 846.4.

実施例４１

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４１］で表される化合物（174 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₃H₂₈₆N₂₆O₈₆S₂: [M+2H]²⁺ 2085.4, [M+3H]³⁺ 1390.6, [M+4H]⁴⁺ 1043.2; found: 2086.0, 1391.0, 1043.5.

実施例４２

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４２］で表される化合物（143 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₆₀H₂₆₀N₂₂O₈₃S₂: [M+2H]²⁺ 1942.3, [M+3H]³⁺ 1295.2, [M+4H]⁴⁺ 971.7; found: 1942.9, 1295.6, 971.9.

実施例４３

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４３］で表される化合物（146 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₃H₂₈₃N₂₃O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2094.9, [M+3H]³⁺ 1396.9, [M+4H]⁴⁺ 1047.9; found: 2095.5, 1397.3, 1048.2.

実施例４４

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４４］で表される化合物（133 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₀H₂₇₉N₂₅O₈₆S₂: [M+2H]²⁺ 2056.9, [M+3H]³⁺ 1371.6, [M+4H]⁴⁺ 1028.9; found: 2057.5, 1371.9, 1029.2.

実施例４５

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４５］で表される化合物（143 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₆₈H₂₇₈N₂₆O₈₄S₂: [M+2H]²⁺ 2035.4, [M+3H]³⁺ 1357.3, [M+4H]⁴⁺ 1018.2; found: 2036.0, 1357.6, 1018.5.

実施例４６

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４６］で表される化合物（173 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₅H₂₉₂N₂₆O₈₄S₂: [M+2H]²⁺ 2084.4, [M+3H]³⁺ 1390.0, [M+4H]⁴⁺ 1042.7; found: 2085.1, 1390.3, 1043.0.

実施例４７

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４７］で表される化合物（128 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₁H₂₈₀N₂₄O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2088.4, [M+3H]³⁺ 1392.6, [M+4H]⁴⁺ 1044.7; found: 2089.0, 1392.9, 1045.0.

実施例４８

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４８］で表される化合物（171 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₆₁H₂₆₂N₂₂O₈₃S₂: [M+2H]²⁺ 1949.3, [M+3H]³⁺ 1299.9, [M+4H]⁴⁺ 975.2; found: 1949.9, 1300.2, 975.4.

実施例４９

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−４９］で表される化合物（130 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₆₀H₂₆₁N₂₃O₈₃S₂: [M+2H]²⁺ 1949.8, [M+3H]³⁺ 1300.2, [M+4H]⁴⁺ 975.4; found: 1950.4, 1300.2, 975.7.

実施例５０

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５０］で表される化合物（162 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₆H₂₈₉N₂₃O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2115.9, [M+3H]³⁺ 1410.9, [M+4H]⁴⁺ 1058.5; found: 2116.5, 1411.3, 1058.7.

実施例５１

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５１］で表される化合物（153 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₅H₂₈₈N₂₄O₉₀S₂: [M+2H]²⁺ 2116.4, [M+3H]³⁺ 1411.3, [M+4H]⁴⁺ 1058.7; found: 2117.0, 1411.6, 1059.0.

実施例５２

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５２］で表される化合物（95.5 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₉₃H₃₂₅N₃₃O₉₀S₂: [M+3H]³⁺ 1538.0, [M+4H]⁴⁺ 1153.8, [M+5H]⁵⁺ 923.2; found: 1538.1, 1153.8, 923.3.

実施例５３

（実施例23-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５３］で表される化合物（215 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₇₄H₂₈₃N₂₇O₈₇S₂: [M+3H]³⁺ 1404.9, [M+4H]⁴⁺ 1054.0, [M+5H]⁵⁺ 843.4; found: 1405.3, 1054.3, 843.6.

実施例５４

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５４］で表される化合物（100 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₉₈H₃₃₅N₃₃O₉₀S₂: [M+3H]³⁺ 1561.4，[M+4H]⁴⁺ 1171.3，[M+5H]⁵⁺ 937.2，[M+6H]⁶⁺ 781.2; found: 1561.5, 1171.3, 937.5，781.2.

実施例５５

（実施例28-1）と同様に、Fmoc法によるペプチド固相合成法にて、無保護のCysを持つペプチドを合成した。（実施例23-2）と同様の方法で、このペプチドにDisialo-AcBrを反応させることで、前述の式［Ｉ−５５］で表される化合物（143 mg）を合成した。
ESI-MS: (m/z) calcd for C₁₉₇H₃₃₃N₃₃O₉₀S₂: [M+3H]³⁺ 1556.7，[M+4H]⁴⁺ 1167.8，[M+5H]⁵⁺ 934.4; found: 1556.8, 1167.8, 934.5

以下に、実施例の製造方法と高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析における保持時間を示す。

ＨＰＬＣ条件A
カラム名：ＳＨＩＳＥＩＤＯＵＧ−１２０（４．６ｍｍΦ ｘ２５０ｍｍ）
溶離液Ａ：０．１％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ
溶離液Ｂ：０．０９％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ/アセトニトリル＝１/９
条件A−１：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝８０/２０（０分）−６５/３５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−２：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝８５/１５（０分）−７０/３０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−３：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝８５/１５（０分）−７５/２５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−４：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝９５/５（０分）−５０/５０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−５：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝９０/１０（０分）−５０/５０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−６：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝９０/１０（０分）−３０/７０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−７：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝８０/２０（０分）−５０/５０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−８：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝９０/１０（０分）−６０/４０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−９：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝８０/２０（０分）−５/９５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−１０：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝８５/１５（０分）−３５/６５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件A−１１：溶離液Ａ/溶離液Ｂ＝９０/１０（０分）−３５/６５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
流速：０．７ｍｌ/分
カラム温度：３５℃

ＨＰＬＣ条件Ｂ
カラム名：ＳＨＩＳＥＩＤＯＵＧ−１２０（４．６ｍｍΦ ｘ２５０ｍｍ）
溶離液Ｃ：１０ｍM酢酸アンモニウム含有Ｈ_２Ｏ
溶離液Ｄ：１０ｍM酢酸アンモニウム含有Ｈ_２Ｏ/アセトニトリル＝１/９
条件Ｂ−１：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８５/１５（０分）−７０/３０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−２：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９０/１０（０分）−７５/２５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−３：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９５/５（０分）−８５/１５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−４：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８５/１５（０分）−３０/７０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−５：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９５/５（０分）−７２．５/２７．５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−６：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９５/５（０分）−７０/３０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−７：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９５/５（０分）−６０/４０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−８：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８０/２０（０分）−６０/４０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−９：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９０/１０（０分）−７０/３０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１０：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９２/８（０分）−７４．５/２５．５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１１：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９５/５（０分）−７７．５/２２．５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１２：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝９０/１０（０分）−７２．５/２７．５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１３：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８７/１３（０分）−６７/３３（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１４：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８４/１６（０分）−６４/３６（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１５：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８０/２０（０分）−５５/４５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１６：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８５/１５（０分）−６５/３５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１７：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝７５/２５（０分）−５５/４５（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
条件Ｂ−１８：溶離液Ｃ/溶離液Ｄ＝８５/１５（０分）−６０/４０（３０分）（ｌｉｎｅａｒｇｒａｄｉｅｎｔ）
流速：０．７ｍｌ/分
カラム温度：３５℃

本発明化合物のＭＭＰ２の阻害作用を、以下の試験例１に記載した方法により測定した。

試験例１：本発明の各化合物の、ヒトＭＭＰ２に対する阻害作用評価試験
各化合物のヒトＭＭＰ２阻害作用を、基質としてMOCAc-Pro-Leu-Gly-Leu-A2pr(Dnp)-Ala-Arg-NH₂を用いた酵素アッセイによって測定した。１００ μg/mLのヒトのリコンビナントＭＭＰ２酵素と１ mmol/L 4-Aminophenylmercuric acetateを反応液［５０ mmol/L Tris-HCl（pH ７．５）、１５０ mmol/L NaCl、１０ mmol/L CaCl₂、０．０５％ Brij L23］中で混和し、３７℃で６０分間反応させた。反応により活性化したヒトＭＭＰ２を最終濃度７ ng/mLとなるよう、９６ウェルマイクロプレートに注いだ。更に種々の濃度に希釈した本発明の各化合物を添加し、室温で１５分間静置した。次いで、MOCAc-Pro-Leu-Gly-Leu-A2pr(Dnp)-Ala-Arg-NH₂を最終濃度１６ μmol/Lとなるよう添加し、酵素反応を開始した。室温で1時間反応させた後、蛍光強度（Ex ３２０ nm/Em ４００ nm）をマイクロプレートリーダーで測定した。測定した蛍光値を用いて酵素阻害率（％）を下記の式に従って算出し、各発明化合物の５０％阻害濃度(IC₅₀値)を算出した。
酵素阻害率（％）＝［１−（Ａ−Ｂ）/（Ｃ−Ｂ）］＊１００
Ａ：化合物添加時の蛍光値
Ｂ：化合物および酵素非添加時の蛍光値
Ｃ：化合物非添加時の蛍光値

各発明化合物のヒトＭＭＰ２酵素活性に対する阻害作用の結果を表２に示す。

また、本発明の各化合物のヒトＭＭＰ１、３、７、８、９、１２、１３、又は１４に対する阻害作用については、試験例１に記載の方法又はこれに準じる方法にて、測定することができる。

試験例２血清中の安定性
ジメチルスルホキシドで溶解させた本発明化合物溶液を、ヒト又はマウス血清に添加し、３７℃で３時間あるいは４時間インキュベーションした。所定時間後にアセトニトリル/メタノール (9/1)の溶液で反応を停止させ、液体クロマトグラフィー質量分析計(LC-MS/MS)で測定した。

ヒト又はマウスの血清中における、３時間あるいは４時間後の本発明化合物の残存率（％）を表３に示す。

試験例３薬物動態データ
方法：マウスに被験物質30 mg/kgを単回皮下投与後、所定時間(15、30分、1、2、4、8及び24時間)に尾静脈から約40 μLを採血した。予めEDTA-2K水溶液が添加されたチューブに採取した血液を移し、速やかに氷冷後、遠心分離（5,600×g，4℃，6分）することで血漿を調製した。除タンパク法にて、血漿を前処理し、遠心分離（3,639×g、4℃、10分）後、上清をLC-MS/MSに注入することで、血漿中濃度を測定した。

マウスのおける薬物動態パラメーターを、表４に示す。

本発明の糖鎖付加ポリペプチドは優れてＭＭＰ２を選択的に阻害する作用を有し、本発明により癌疾患及び臓器線維症、並びに癌疾患及び臓器線維症に関連する症状の予防又は治療に有効な医薬品を提供するが可能となり、患者の負担を軽減し、医薬品産業の発達に寄与することが期待される。

Claims

糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
下記式［１］

（ここで、前記式［１］中、
ＡＡ^９は、Ser又はLysを表し、
ここで、該Lysは下記式［２］で表される基で置換されてもよく；

ＡＡ^７は、Gly、D-Hse、Cys、D-Cys、Asn、又はLysを表し、
ＡＡ^６は、Asn、Cys、又はLysを表し、
ここで、該Lysは下記式［３］で表される基で置換されてもよく；

前記式［２］及び［３］中、
ＦＡ^９及びＦＡ^６は、独立して末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基を表し、
ＡＡ^９１及びＡＡ^６１は、独立してγ-Glu、Gly、Cys、又はLysを表し、
ＡＡ^９２及びＡＡ^６２は、独立してAdox、Cys、又はLysを表し、
ＡＡ^９３及びＡＡ^６３は、独立してAdox、Gly、Cys、又はLysを表し、
ＡＡ^９４及びＡＡ^６４は、独立してLys、Cys、又は単結合を表し、
ＡＡ^１は、Pro、β-homoPro、又はAibを表す。）
で表されるアミノ酸配列を含み；

また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでもよく、また、
ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでもよく、
ここで、ｍ^Ｎは１〜７の整数を表し、ｍ^Ｃは１〜７の整数を表し、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu、Arg、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸を表し、
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸は、Aib、Arg、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸を表し；

さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基、又は末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されてもよく、
該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられてもよく；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１〜５個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１〜５個のアミノ酸は、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列中のアミノ酸であるＡＡ^９、ＡＡ^７、ＡＡ^６、ＡＡ^１；
前記式［２］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^９１、ＡＡ^９２、ＡＡ^９３、ＡＡ^９４；
前記式［３］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^６１、ＡＡ^６２、ＡＡ^６３、ＡＡ^６４；
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸；及び
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸
のいずれかに存在し、かつ、
ＭＭＰ２に対する親和性を有する
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
(ｉ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた２〜５個のアミノ酸を含んでいる；又は
(ii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、
(ａ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、前記式［２］で表される基で置換されているLysである；
(ｂ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^６が、前記式［３］で表される基で置換されているLysである；又は
(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項２に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
(ａ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、前記式［２］で表される基で置換されているLysである；
(ｂ) 前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^６が、前記式［３］で表される基で置換されているLysである；又は
(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項３に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
Ｎ末端側にさらに含んでもよい前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、γ-Glu、Lys、及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり、
Ｃ末端側にさらに含んでもよいｍ^Ｃ個のアミノ酸が、Lys及びCysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸が存在するのは、
前記式［１］で表されるアミノ酸であるＡＡ^６；
前記式［２］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^９２；
前記式［３］で表される基中のアミノ酸であるＡＡ^６２；
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸；及び
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸
のいずれかであり；

ここで、
(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［２］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はAib
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ１) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ２) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^６２が、Lys又はAdoxであり、
ＡＡ^６３が、Lys又はAdoxであり、
ＡＡ^６４が、Lys又は単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜３の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、Cys及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において；
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項３に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Cysであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；

また、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノが、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項３に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Lysであり、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Aib
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１４−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず、又は
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸が、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜４の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１４}アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項３に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ａ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Lysであり、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^９が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１２−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^９１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^９２が、Adoxであり、
ＡＡ^９３が、Adoxであり、
ＡＡ^９４が、単結合であり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Aib
であるアミノ酸配列を含み、
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず、
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ１) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている、前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１６}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が、単結合であり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；

(ｂ２) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Lysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_{１３−１４}アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Gluであり、
ＡＡ^６２が、Lysであり、
ＡＡ^６３が、Lysであり、
ＡＡ^６４が、Lysであり、
ＡＡ^１が、β-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが３であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、それぞれLysであり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、アセチル基で置換されており；又は

(ｃ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Gly又はD-Hseであり、
ＡＡ^６が、Asnであり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoPro
であるアミノ酸配列を含み；
また、該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおり、
ここで、ｍ^Ｎが１〜７の整数であり、
前記ｍ^Ｎ個のアミノ酸は、γ-Glu及びLysからなる群から独立してそれぞれ選ばれるアミノ酸であり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基は、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_１４アルキルカルボニル基で置換されている；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項３に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ＡＡ^９が、Serであり、
ＡＡ^７が、Glyであり、
ＡＡ^６が、Asn又はLysであって、
該Lysが置換されている前記式［３］で表される基中の
ＦＡ^６が、末端がカルボキシ基で置換されているＣ_２−１６アルキルカルボニル基であり、
ＡＡ^６１が、γ-Glu又はLysであり、
ＡＡ^６２が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６３が、Adox又はLysであり、
ＡＡ^６４が単結合であり、
ＡＡ^１が、Pro又はβ-homoProである
ことを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項３又は８に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドのＣ末端側のカルボキシ基は、カルバモイル基で置き換えられており；
該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり；

(ｉ) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Asn−Asp−Ala−Leu−Met−Pro
であって；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
γ-Glu−Lys−Lys−Lys−をＮ末端側にさらに含んでおり；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がHOOC−(CH₂)₁₄−(O=)C−で置換されており；

(ii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Lys−Asp−Ala−Leu−Met−β-homoPro
であって、
ここで、ＡＡ^６として表されるLysの側鎖のアミノ基は、HOOC−(CH₂)₁₄−(O=)C−Lys−Lys−Lys−で置換されており；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がアセチル基で置換されており；又は

(iii) 該糖鎖付加ポリペプチドは、前記式［１］で表されるアミノ酸配列が、
Ile−Ser−Tyr−Gly−Lys−Asp−Ala−Leu−Met−β-homoPro
であって；
ここで、ＡＡ^６として表されるLysの側鎖のアミノ基は、HOOC−(CH₂)₁₆−(O=)C−γ-Glu−Adox−Adox−で置換されており；
また、前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｎ個のアミノ酸をＮ末端側にさらに含んでおらず；
さらに、該糖鎖付加ポリペプチドのＮ末端側のアミノ基がアセチル基で置換されている；
ことを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１〜９のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；

該糖鎖付加ポリペプチドは、
前記式［１］で表されるアミノ酸配列において、
ｍ^Ｃ個のアミノ酸をＣ末端側にさらに含んでおり；

そして、該糖鎖付加ポリペプチドは、
糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸を含んでおり、
該糖鎖付加アミノ酸で置き換えられた１個のアミノ酸は、
前記ｍ^Ｃ個のアミノ酸のいずれかに存在し、

ここで、ｍ^Ｃは１である；
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸が、糖鎖付加Ａｓｎ又は糖鎖付加Ｃｙｓである
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、付加する糖鎖が４個以上の糖からなる
ことを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、
糖鎖が下記式［４］

（ここで、前記式［４］中、
Ｌｉｎｋｅｒは、単結合又は式−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ１−を表し、
ｎ^１は、０〜５の整数を表し、
Ｒ^１及びＲ^２は同一に又は異なって、下記式群［５］で表される構造のいずれか

を表し、
Ｒ^３は水素原子又はベンジル基を表す。）
で表される糖鎖であることを特徴とする、
糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩であって；
前記各糖鎖付加アミノ酸において、
前記式［４］で表される糖鎖中のＲ^１及びＲ^２が、同一に下記式［５−１］で表される構造

であることを特徴とする、糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩。
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬。
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するＭＭＰ２阻害剤。
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の糖鎖付加ポリペプチド又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有する癌疾患及び臓器線維症、並びに癌疾患及び臓器線維症に関連する症状の予防薬又は治療薬。