JP2021019541A - 抗原特異的ｔ細胞の製造方法 - Google Patents

抗原特異的ｔ細胞の製造方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2021019541A
JP2021019541A JP2019138480A JP2019138480A JP2021019541A JP 2021019541 A JP2021019541 A JP 2021019541A JP 2019138480 A JP2019138480 A JP 2019138480A JP 2019138480 A JP2019138480 A JP 2019138480A JP 2021019541 A JP2021019541 A JP 2021019541A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
cells
antigen
cancer
pharmaceutical composition
specific
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2019138480A
Other languages
English (en)
Other versions
JP7337373B2 (ja
JP2021019541A5 (ja
Inventor
裕 安井
Yutaka Yasui
裕 安井
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Thyas Co Ltd
Original Assignee
Thyas Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Thyas Co Ltd filed Critical Thyas Co Ltd
Priority to JP2019138480A priority Critical patent/JP7337373B2/ja
Priority to CN202010718800.2A priority patent/CN112300991A/zh
Priority to US16/937,451 priority patent/US20210030796A1/en
Priority to EP20187830.3A priority patent/EP3771744A1/en
Publication of JP2021019541A publication Critical patent/JP2021019541A/ja
Publication of JP2021019541A5 publication Critical patent/JP2021019541A5/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7337373B2 publication Critical patent/JP7337373B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/464838—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • C12N5/0638—Cytotoxic T lymphocytes [CTL] or lymphokine activated killer cells [LAK]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0645—Macrophages, e.g. Kuepfer cells in the liver; Monocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K2035/124—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells the cells being hematopoietic, bone marrow derived or blood cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/2302—Interleukin-2 (IL-2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/2315—Interleukin-15 (IL-15)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/40—Regulators of development
    • C12N2501/48—Regulators of apoptosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/70—Enzymes
    • C12N2501/73—Hydrolases (EC 3.)
    • C12N2501/734—Proteases (EC 3.4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/998—Proteins not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/999—Small molecules not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16211—Lymphocryptovirus, e.g. human herpesvirus 4, Epstein-Barr Virus
    • C12N2710/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/20011—Papillomaviridae
    • C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)

Abstract

【課題】抗原に対して特異性を有するT細胞を製造する方法、該方法により製造された抗原特異的T細胞および該抗原特異的T細胞を含有する医薬組成物の提供。【解決手段】細胞傷害阻害剤を含む培地中で単核球を刺激する工程を含むことを特徴とする、抗原特異的T細胞を製造する方法、該方法から得られた抗原特異的T細胞、該抗原特異的T細胞を含有する医薬組成物、および該医薬組成物を含むがんまたはウイルス感染症を予防または治療するためのキット。【選択図】なし

Description

本発明は、抗原に対して特異性を有するT細胞を製造する方法、該方法により製造された抗原特異的T細胞および該抗原特異的T細胞を含有する医薬組成物に関する。
T細胞は、細菌もしくはウイルス等の外来病原体またはがん細胞等の異常な細胞に対する免疫応答において中心的な役割を果たしている。このため、T細胞の機能低下は、病原体感染やがんの発生に寄与すると考えられている。T細胞の機能低下に起因する疾患に対して、T細胞の補充や再生は、疾患の病態改善や治療に極めて有効な手段となり得る。
がんや感染症に対する治療法として、T細胞を体外で増幅して患者に戻す治療法が行われている。上記治療法を行うためには、目的の抗原に対する特異性を持つT細胞が必要である。がんに特異的なT細胞は末梢血中にも存在するが、腫瘍に浸潤しているT細胞はがんに対する特異性が高い。
末梢血中、および腫瘍組織に浸潤しているT細胞の中でも、目的の抗原に対する特異性を持つT細胞はごくわずかである。このため、目的の抗原に特異性を持つT細胞を得るためには、目的の抗原ペプチドやタンパクによる刺激で増幅培養する必要がある。しかしながら、目的の抗原に特異性を持つT細胞の増幅効率は低く、得られる細胞数は少ないため、治療効果も限られる。このため、目的の抗原に特異的なT細胞を効率よく増幅・分離する方法の開発が待望される。
本発明者は、目的の抗原に特異的なT細胞を効率よく増幅・分離する方法を見出すべく鋭意研究を行った。そして、本発明者は、細胞傷害阻害剤を含む培地中で単核球を刺激することにより目的の抗原に特異的なT細胞を効率よく増幅・分離する方法を見出した。そして、さらに検討を重ね、本発明の完成に到った。
本発明の目的は、以下の発明により達成される。
（１）
細胞傷害阻害剤を含む培地中で単核球を刺激する工程を含むことを特徴とする、抗原特異的T細胞を製造する方法。
（２）
細胞傷害阻害剤がパーフォリン阻害剤またはグランザイム阻害剤である、（１）に記載の方法。
（３）
パーフォリン阻害剤が、Concanamycin A、SN34960、Diarylthiophenes、Ethylene glycol bis (β-aminoethylether)- N,N,N',N'-tetraacetic acid (EGTA)、Ethylenediaminetetraacetic acid（EDTA）、1,2-bis-(o-Aminophenoxy)-ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid（BAPTA）、N-(2-Hydroxyethyl)ethylenediamine-N,N’
,N-triacetic acid（HEDTA）およびNitrilotriacetic acid（NTA）からなる群より選ばれる1種以上である、（２）に記載の方法。
（４）
パーフォリン阻害剤が、Concanamycin Aである、（３）に記載の方法。
（５）
単核球が、リンパ球である、（１）〜（４）のいずれかに記載の方法。
（６）
単核球が、末梢血、腫瘍から単離された、（１）〜（５）のいずれかに記載の方法。
（７）
抗原が、腫瘍関連抗原または変異抗原、またはウイルス抗原である、（１）〜（６）のいずれかに記載の方法。
（８）
腫瘍関連抗原または変異抗原が、ペプチド性がん抗原である、（７）に記載の方法。
（９）
ウイルス抗原が、不活化HBVまたはそのウイルス由来のタンパク質、または、不活化HPVまたはそのウイルス由来のタンパク質である、（７）に記載の方法。
（１０）
抗原を用いて、単核球を刺激する、（１）〜（９）のいずれかに記載の方法。
（１１）
抗原が、GPC3、WT1、XAGE１、LMP2およびネオアンチゲンからなる群より選択される1種類以上のペプチド性がん抗原、または、EBV LMP1、EBV LMP2、EBNA（EBV nuclear antigen）、HPV E1、HPV E2、HPV E6、HPV E7、HBV HBs、HBV HBc、HBV HBe、HCV core、HCV NS3、HCV NS3/4A、HCV E1、HCV E2、HCV NS5A、HIV gag、HIV pol、HIV nef、HIV env、CMV pp65、Influenza M1、HTLV-1 Ta およびHBZからなる群より選択される1種類以上のウイルス抗原である、（１）〜（１０）のいずれかに記載の方法。
（１２）
（１）〜（１１）のいずれかに記載の方法から得られた、抗原特異的T細胞。
（１３）
（１２）に記載の抗原特異的T細胞を含有する、医薬組成物。
（１４）
がんのまたはウイルス感染症の予防または治療のための、（１３）に記載の医薬組成物。
（１５）
がんが、卵巣がん、肝芽腫、肝がん、胃がん、食道がん、膵臓がん、腎細胞がん、乳がん、悪性黒色腫、非小細胞肺がん、子宮頸がん、膠芽腫、前立腺がん、神経芽腫瘍、慢性リンパ性白血病、甲状腺乳頭がん、大腸がん、およびB細胞非ホジキンリンパ腫からなる群より選択される、（１４）に記載の医薬組成物。
（１６）
ウイルス感染症が、B型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、C型肝炎ウイルス、EBウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトサイトメガロウイルス（CMV）、インフルエンザウイルスおよびヒトT細胞白血病ウイルス（HTLV）からなる群より選択されるウイルス感染症である、（１４）に記載の医薬組成物。
（１７）
（１３）〜（１６）のいずれかに記載の医薬組成物を含む、がんまたはウイルス感染症を予防または治療するためのキット。
（１８）
（１３）〜（１６）のいずれかに記載の医薬組成物を含む、がんまたはウイルス感染症の予防剤または治療剤。
（１９）
（１３）〜（１６）のいずれかに記載の医薬組成物を患者に投与することを特徴とする、がんまたはウイルス感染症の予防または治療方法。
（２０）
抗原特異的T細胞を患者に投与することを特徴とする、がんまたはウイルス感染症の予防または治療方法であって、
末梢血から単核球を単離する工程、
単離された単核球を、細胞傷害阻害剤を含む培地中で、刺激する工程、および
刺激して得られた単核球から、抗原特異的T細胞を分離する工程
を含む、がんまたはウイルス感染症の予防または治療方法。
（２１）
抗原特異的T細胞を含む、医薬組成物であって、
該T細胞が、
(1)CD3およびCD45が陽性であり、
(2)増殖性を有し、
抗原刺激による活性化に伴い、
(3)IFN-γとGranzyme Bを放出する
ことを特徴とする、医薬組成物。
（２２）
前記医薬組成物における、全T細胞数に対する抗原特異的T細胞の細胞数の割合が１０％以上であることを特徴とする、（２１）に記載の医薬組成物。
（２３）
前記抗原特異的T細胞の細胞数が、１×１０３個以上である、（２２）に記載の医薬組成物。
本発明により、目的の抗原に特異性を持つT細胞は、目的の抗原ペプチドやタンパクで刺激した際に、活性化マーカーを発現することで同定可能である。
本発明により、増幅培養後の活性化マーカー発現細胞（CD137）の割合および細胞数が増加した。活性化マーカーとしては、CD137（4-1BB）、IFN-g、CD107a等が用いられる。
本発明により、目的の抗原に特異性を持つT細胞を効率的に得られることで、必要な原料（末梢血や腫瘍）の量を減らすことが可能である。
本発明により、目的の抗原に特異性を持つT細胞を効率的に得られることで、移植細胞数を増やすことができ、治療効果の向上も期待できる。
本発明により、得られる目的の抗原に特異性を持つT細胞を用いて、iPS細胞を介して再生T細胞を効率よく製造することができる。
図１は、抗原ペプチド刺激により活性化したT細胞の割合を示す。健常人末梢血単核球2検体において、EBV-LMP2Aペプチド（ウイルス抗原）で活性化したCD137+T細胞の割合が、Concanamycin A（CMA）添加により増加していることが判明した。 図２は、抗原ペプチド刺激により活性化したT細胞の細胞数を示す。健常人末梢血単核球2検体において、EBV-LMP2Aペプチドで活性化したCD137+T細胞の細胞数が、CMA添加により増加していることが判明した。 図３は、抗原ペプチド刺激により活性化したT細胞の割合を示す。白血病患者末梢血単核球2検体において、CMA 1μMを添加した培地中でWT1（がん関連抗原）ペプチドで活性化することにより、CD137を発現するT細胞が誘導されている。
本発明は、目的の抗原特異的T細胞を効率よく製造する方法を提供する。該方法は、細胞傷害阻害剤を含む培地中で単核球を刺激する工程を含むことを特徴とする。
本発明は、具体的に末梢血から単核球を単離する工程、
単離された単核球を、細胞傷害阻害剤を含む培地中で、刺激する工程、および
刺激して得られた単核球から、抗原特異的T細胞を分離する工程
を含む、抗原特異的T細胞の製造方法を提供する。
本発明において、T細胞は哺乳動物由来であることが好ましく、ヒト（がん患者また非がん患者）由来であることがより好ましい。前記がん患者また非がん患者は、がんワクチンを投与されたことがあるか、現在投与されているか、または今後投与される予定の患者が好ましい。投与されるがんワクチンは、１種類またはそれ以上投与されてもよい。T細胞としては、特に限定されないが、例えば、αβT細胞、γδT細胞、ヘルパーT細胞、レギュラトリーT細胞、細胞傷害性T細胞、およびナチュラルキラー（NK）T細胞が挙げられる。また、T細胞の採取源としては、侵襲性が低いことから末梢血が好ましいが、それに限定されない。その他の好ましい採取源として、がん組織もしくは腫瘍組織もしくはその他の組織もしくは臓器、または血液、臍帯血、リンパ液、組織液（組織間液、細胞間液および間質液）、体腔液（腹水、胸水、心嚢液、脳脊髄液、関節液および眼房水）、鼻汁、尿等の体内のすべての採取源が挙げられる。本発明の一態様において、好ましいT細胞は、腫瘍組織由来T細胞である。腫瘍組織由来T細胞は、通常、腫瘍浸潤T細胞である。
「がんワクチン」とは、がんもしくは腫瘍特異的タンパク質またはペプチドであって、がんまたは腫瘍関連抗原に由来し、がんまたは腫瘍特異的免疫応答を誘導するためのワクチン抗原を含む組成物である。がんもしくは腫瘍に特異的な抗原であるがん組織またはタンパク質もしくはペプチドで抗原パルスされた樹状細胞等の細胞ワクチン、投与された生体内で抗原を発現するウイルスDNAまたはRNAワクチン、および、増殖を抑制したがんもしくは腫瘍細胞およびこれらの破砕物もしくは溶解物を含む組成物も「がんワクチン」に含まれる。さらに、細菌菌体、細菌抽出物およびβグルカン等の非特異的免疫賦活剤、ならびにアデノウイルス等の腫瘍溶解性ウイルスも「がんワクチン」に含まれる。通常、がんワクチンは、ワクチン抗原が誘導する特異的免疫応答を増強するためのアジュバントを含んでいる。がんワクチンに含まれるワクチン抗原は、生体に投与された後、抗原提示細胞（主として樹状細胞およびマクロファージ）に貪食され、その細胞内部で処理されて、8〜30残基程度のアミノ酸からなるエピトープペプチドとなり、主要組織適合遺伝子複合体（major histocompatibility complex：MHC）クラスIまたはクラスIIと結合した複合体として、抗原提示細胞の表面で提示される。エピトープペプチドの長さは、MHCクラスIの場合はアミノ酸8〜11残基、またMHCクラスIIの場合はアミノ酸13〜30残基である。細胞傷害性T細胞およびヘルパーT細胞の表面に発現するT細胞受容体（TCR）は、それぞれMHCクラスI／ペプチド複合体またはMHCクラスII／ペプチド複合体を特異的に認識する。その結果、これらT細胞は活性化されて抗腫瘍効果を発揮する。即ち、細胞傷害性T細胞はワクチン抗原に含まれているものと同じエピトープペプチドを提示するがん細胞を認識・破壊し、ヘルパーT細胞はインターフェロン（IFN）-γやインターロイキン（IL）-2等のサイトカインおよびケモカインの分泌を通じて細胞傷害性T細胞の働きを増強する。ヘルパーT細胞には、CD40リガンド（CD40L）／CD40経路を介して抗原提示細胞の抗原提示能力やB細胞の抗原特異的免疫グロブリン（Ig）G抗体産生を増強する働きもある。
本発明において、該方法により製造されたT細胞とは、細胞表面にT細胞受容体（T cell receptor：TCR）と呼ばれる抗原受容体を発現している細胞を指す。
本発明の抗原特異性を有するT細胞は、どのような抗原または組織に対しても作用することが可能である。特に、本発明のT細胞をT細胞補充療法に用いる場合は、採取したT細胞が、治療対象のがん、腫瘍、腫瘍関連抗原もしくはその変異抗原またはウイルス抗原等に対する特異性を有することが好ましい。
上記の腫瘍関連抗原またはその変異抗原としては、各腫瘍に特異的または非特異的に発現するWT1、GPC3、XAGE1、MUC1、MUC5AC、MUC6、EGFRvIII、HER-2/neu、MAGE A3、MAGE A1、テロメラーゼ、PRAME、SSX2/4、PSCA、CTLA-4、gp100、GD2、GD3、フコシルGM1、GM3、sLe (a)、糖脂質F77、メソテリン、PD-L1、trp1、trp2、CD19、CD20、CD22、ROR1、CD33、c-Met、p53、p53変異体、NY-ESO-1、PSMA、ETV6-AML、CEA、PSA、AFP、hTERT、EpCAM、ALK、アンドロゲン受容体、EphA2、CYP1B1、OY-TES-1、MAD-CT-2、MelanA/MART1、サバイビン、Ras、Ras変異体、ERG、bcr-abl、XBP１、ならびに、遺伝子変異およびスプライス異常による新規腫瘍抗原（Neoantigen）等の腫瘍関連抗原が挙げられるが、これらに限定されない。またウイルス抗原としては、不活化HBVおよびHPV等の不活化ウイルス、ならびに、各種ウイルス由来のタンパク質であるEBV LMP1、EBV LMP2、EBNA（EBV nuclear antigen）、HPV E1、HPV E2、HPV E6、HPV E7、HBV HBs、HBV HBc、HBV HBe、HCV core、HCV NS3、HCV NS3/4A、HCV E1、HCV E2、HCV NS5A、HIV gag、HIV pol、HIV nef、HIV env、CMV pp65、Influenza M1、HTLV-1 Ta およびHBZ（HTLV-1 bZIP factor）等のウイルス抗原が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、タンパク質抗原である場合には、これをペプチド断片化したものであってもよい。
本発明の一態様において、T細胞を製造する工程は、１種以上の腫瘍関連抗原またはウイルス抗原と接触させることにより活性化し、増殖したT細胞を分離する工程を含む。T細胞を腫瘍関連抗原またはウイルス抗原と接触させると、T細胞受容体による腫瘍関連抗原またはウイルス抗原の認識および共刺激シグナルを受けることにより、T細胞は活性化する。接触させる方法としては、例えば、腫瘍関連抗原あるいはウイルス抗原、または腫瘍関連抗原あるいはウイルス抗原を含む生体組織もしくはその破砕物もしくはその溶解物を添加した培養液を用いて、抗原提示細胞およびT細胞を含む末梢血単核球の培養を行う。培養液中には、細胞傷害阻害剤を加えることにより、効率的に目的のT細胞を増幅させることが可能である。
本発明で用いた細胞傷害阻害剤としては、例えば、パーフォリン阻害剤（例えばConcanamycin A、SN34960、Diarylthiophenes、Ethylene glycol bis (β-aminoethylether)-N, N, N’, N’-tetraacetic acid (EGTA)、Ethylenediaminetetraacetic acid（EDTA）、1,2-bis-(o-Aminophenoxy)-ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid（BAPTA）、N-(2-Hydroxyethyl)ethylenediamine-N,N′,N′-triacetic acid（HEDTA）、Nitrilotriacetic Acid（NTA）等）またはグランザイム阻害剤（例えば、VTI-1002、Z-AAD-CH2Cl、Granzyme B inhibitor I、Granzyme B inhibitor II、Granzyme B inhibitor IV、Caspase-8 Inhibitor I, Cell-Permeable、Caspase-8 inhibitor II等）等が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明において培地に添加された細胞傷害阻害剤の培養液中の濃度は、0.1μM〜100μMであり、好ましくは、0.5μM〜50μMであり、より好ましくは、1μM〜5μMである。細胞傷害阻害剤は、培養液に添加されてから拡散し、細胞内に取り込まれ、その効果が最大に発揮されるまでに多少の時間を要する。T細胞の刺激を行う例えば、1〜2時間前に細胞傷害阻害剤を培養液に添加しておくことが望ましい。1〜2時間の後、ペプチド抗原などのT細胞刺激物を培養液に添加することで、細胞傷害を阻害したままT細胞を活性化させることが可能となる。
細胞傷害性T細胞はHLAクラスI分子に提示された抗原を認識し、特異的な細胞傷害性を示すことで、ウイルスが感染した細胞やがん化した細胞を排除している。抗原特異的なT細胞を体外で増幅するためには、目的の抗原ペプチドやタンパクによる刺激が必要である。特に末梢血に対してT細胞の増幅培養を行う場合、添加した抗原ペプチドやタンパクは樹状細胞等の抗原提示細胞により抗原提示され、T細胞に活性化シグナルを入れることで、抗原特異的に活性化したT細胞は増幅することができる。抗原提示に用いられるHLAクラスI分子は体内のほぼ全ての細胞に発現しており、T細胞自身も発現している。
抗原ペプチドやタンパクを用いて特異的なT細胞の増幅を行う際も、T細胞の活性化と同時に、抗原を提示した細胞の傷害も起きていることが予想される。抗原提示細胞が少ない場合には、T細胞同士で抗原提示が起こることにより、T細胞同士の傷害性が起きていることが予想される。
本発明により、目的の抗原ペプチドやタンパクを用いた刺激によりT細胞を活性化させ増幅させる機序を阻害することなく、T細胞同士の傷害を阻害することで、特異的T細胞の増幅効率が向上した。また、抗原ペプチドやタンパクを用いたT細胞の増幅培養の際に、パーフォリンの阻害剤であるConcanamycin Aを添加することにより、T細胞の活性化と増幅を阻害することなく、T細胞同士の傷害を抑制することが可能になった。
本発明の一態様において、パーフォリンの阻害剤であるConcanamycin Aが培養液に添加されたことは好ましい。目的の抗原ペプチドやタンパクを用いた刺激によりT細胞を活性化させ増幅させる機序を阻害することなく、T細胞同士の傷害を阻害することで、特異的T細胞の増幅効率が向上した。また、抗原ペプチドやタンパクを用いたT細胞の増幅培養の際に、パーフォリンの阻害剤であるConcanamycin Aを添加することにより、T細胞の活性化と増幅を阻害することなく、T細胞同士の傷害を抑制することが可能になった。
活性化したT細胞は細胞膜表面にCD137分子やIFN-γ等の機能性分子を発現する。これらの機能性分子に対して、蛍光タンパク質または磁気ビーズにより標識した特異的抗体で染色し、フローサイトメーターを用いたソーティング、または磁石を用いた分離により、目的の抗原特異T細胞を製造することができる。
本発明において、「抗原特異」とは、T細胞が抗原エピトープまたはペプチド配列を特異的に認識しつつ、T細胞としては、標的とする組織または抗原に対する免疫反応を示すことである。
本発明の一態様において、標的とする抗原に対する抗原特異T細胞の製造方法としては、例えば、抗原タンパク質またはペプチドをT細胞と接触させ、T細胞を活性化し、増殖したT細胞を分離する方法が挙げられる。この方法においては、抗原提示細胞を含む単核球分画を培養し、抗原タンパク質またはペプチドを培養液中に添加する。繰り返して抗原タンパク質またはペプチドとT細胞を接触させることにより、反応性のT細胞は増殖し、T細胞全体に対する割合が上昇する。一方、添加した抗原タンパク質またはペプチドに反応しないT細胞は活性化されることがなく、in vitroでの培養中に徐々に割合が低下し、最終的には死滅する。このため、一定期間の培養後には、培養液中に添加した抗原タンパク質またはペプチドに特異的な反応性を有するT細胞が単離して得られる。
本発明の一態様において、T細胞の製造方法として、T細胞を活性化後、CD137発現T細胞を選択する方法およびIFN-γ産生T細胞を選択する方法が挙げられる。これらの方法においては、CD137またはIFN-γに特異的な抗体を結合させた上で、磁気ビーズを用いた磁気的分離または蛍光標識を用いたフローサイトメーターによる選択的な分離に供することもできる。IFN-γ産生細胞を二重特異性抗体（T細胞およびIFN-γに対する二重特異性抗体）で捕捉する系を使用してもよい。さらに、本発明の別の実施態様において、抗原ペプチド‐HLA（human leukocyte antigen、ヒト白血球抗原）複合体のオリゴマーが結合するT細胞を選択する方法も挙げられる。この方法では、特定のHLA型およびそのHLAが提示可能な標的抗原ペプチドの複合体からなるオリゴマーを蛍光色素で標識し、オリゴマーが結合した細胞を、フローサイトメーターを用いてソーティングすることにより、標的とする抗原に対する特異性を有するT細胞を得ることができる。T細胞を製造するに当たり、これらの方法は、単独または組み合わせて使用してもよい。
本発明の一態様において、抗原特異性の程度は、好ましくは、原料の抗原特異性を有するT細胞の30％以上であり、より好ましくは40％以上、さらに好ましくは50％以上である。
本発明の一態様において、製造されたT細胞は、好ましくは、T細胞補充療法に使用される。本発明において、T細胞補充療法とは、T細胞を生体に補充する治療法を意味し、本発明の一態様において、T細胞補充療法としては、好ましくは、T細胞の輸注、腫瘍内注入、動注、門脈注等を含む細胞移植による治療法が挙げられる。
本発明によって得られるT細胞をT細胞補充療法に使用する場合において、同種的な移植である場合、拒絶反応を起こしにくいという観点から、T細胞を採取されるがん患者または非がん患者は、がん治療のために本発明によって得られたT細胞を投与されるがん患者と、HLAの型が一致していることが好ましい。また、本発明によって得られたT細胞が投与されるがん患者と、T細胞を採取されるがん患者とは同一人であることがより好ましい。即ち、自家的な移植によるがん治療がより好ましい。
本発明のT細胞を含む医薬組成物は、全T細胞数に対する抗原特異的T細胞の細胞数の割合が好ましくは１０％以上、より好ましくは２０％以上、最も好ましくは３０％以上である。
本発明のT細胞を含む医薬組成物は、抗原特異的T細胞の細胞数が、好ましくは１×１０３個以上、より好ましくは１×１０４個以上、最も好ましくは１×１０５個以上である。
本発明の医薬組成物は、薬学的に許容される添加剤を含んでいてもよい。該添加剤としては、例えば、細胞培養液、リン酸緩衝食塩水等が挙げられる。
本発明のT細胞を含む医薬組成物は、がんまたはウイルス感染症の予防または治療対象を処置するために使用することができる。本発明の一態様には、本発明の医薬組成物を用いるがんまたはウイルス感染症の予防または治療方法が含まれる。
がんとしては、卵巣がん、肝芽腫、肝がん、胃がん、食道がん、膵臓がん、腎細胞がん、乳がん、悪性黒色腫、非小細胞肺がん、子宮頸がん、膠芽腫、前立腺がん、神経芽腫瘍、慢性リンパ性白血病、甲状腺乳頭がん、大腸がん、およびB細胞非ホジキンリンパ腫等のがんが挙げられるが、これらに限定されない。
ウイルス感染症が、B型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、C型肝炎ウイルス、EBウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトサイトメガロウイルス（CMV）、インフルエンザウイルスおよびヒトT細胞白血病ウイルス（HTLV）等のウイルス感染症が挙げられるが、これらに限定されない。
次に実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらよって限定されるものではない。
24ウェルプレートで播種し直す。培地に0.3〜3μMのConcanamycin Aを添加し、37℃、5%CO2で2時間インキュベート後、10μg/mlのEBV LMP2Aペプチドを添加し、37℃、5%CO2で24時間培養を行う。健常人末梢血から分離された単核球（PBMC）2x106 cellsを10% FBS、200 U IL-2、20μg/ml IL-15入りのMEM-alpha培地に浮遊させ、10μg/mlのEBV LMP2Aペプチドを添加する。37℃、5%CO2で培養を開始する。細胞の増幅速度に合わせ、2〜5日ごとに培地交換、およびウェル分けを行い、12日間培養する。12日目に細胞を回収し、2x106 cells/well/24ウェルプレートで播種し直す。培地に0.3〜3μMのConcanamycin Aを添加し、37℃、5%CO2で2時間インキュベート後、10μg/mlのEBV LMP2Aペプチドを添加し、37℃、5%CO2で24時間培養を行う。24時間後に、CD8-PerCP/Cy5.5抗体およびCD137-PE抗体を用いて細胞を染色し、フローサイトメーター(BD FACS Aria II)を用いて解析を行った。
上記のように、本発明は、本発明の実施の形態によって記載したが、この開示の一部をなす記述および図面は、本発明を限定するものであると理解すべきではない。この開示から、当業者には様々な代替実施の形態、実施例および運用技術が明らかとなる。本発明の技術的範囲は、上記の説明から妥当な特許請求の範囲に係る発明特定事項によってのみ定められるものであり、実施段階においては、その要旨を逸脱しない範囲で変形して具体化できる。

Claims (23)

  1. 細胞傷害阻害剤を含む培地中で単核球を刺激する工程を含むことを特徴とする、抗原特異的T細胞を製造する方法。
  2. 細胞傷害阻害剤がパーフォリン阻害剤またはグランザイム阻害剤である、請求項１に記載の方法。
  3. パーフォリン阻害剤が、Concanamycin A、SN34960、Diarylthiophenes、Ethylene glycol bis (β-aminoethylether)-N, N, N’, N’-tetraacetic acid (EGTA)、Ethylenediaminetetraacetic acid（EDTA）、1,2-bis-(o-Aminophenoxy)-ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid（BAPTA）、N-(2-Hydroxyethyl)ethylenediamine-N,N′,N′-triacetic acid（HEDTA）およびNitrilotriacetic Acid（NTA）からなる群より選択される1種以上である、請求項２に記載の方法。
  4. パーフォリン阻害剤が、Concanamycin Aである、請求項３に記載の方法。
  5. 単核球が、リンパ球である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
  6. 単核球が、末梢血、腫瘍から単離された、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
  7. 抗原が、腫瘍関連抗原または変異抗原、またはウイルス抗原である、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
  8. 腫瘍関連抗原またはその変異抗原が、ペプチド性がん抗原である、請求項７に記載の方法。
  9. ウイルス抗原が、不活化HBVまたはそのウイルス由来のタンパク質、または、不活化HPVまたはそのウイルス由来のタンパク質である、請求項７に記載の方法。
  10. 抗原を用いて、単核球を刺激する、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
  11. 抗原が、GPC3、WT1、XAGE１、LMP2およびネオアンチゲンからなる群より選択される1種類以上のペプチド性がん抗原、または、EBV LMP1、EBV LMP2、EBNA（EBV nuclear antigen）、HPV E1、HPV E2、HPV E6、HPV E7、HBV HBs、HBV HBc、HBV HBe、HCV core、HCV NS3、HCV NS3/4A、HCV E1、HCV E2、HCV NS5A、HIV gag、HIV pol、HIV nef、HIV env、CMV pp65、Influenza M1、HTLV-1 Ta およびHBZからなる群より選択される1種類以上のウイルス抗原である、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
  12. 請求項１〜１１のいずれかに記載の方法から得られた、抗原特異的T細胞。
  13. 請求項１２に記載の抗原特異的T細胞を含有する、医薬組成物。
  14. がんのまたはウイルス感染症の予防または治療のための、請求項１３に記載の医薬組成物。
  15. がんが、卵巣がん、肝芽腫、肝がん、胃がん、食道がん、膵臓がん、腎細胞がん、乳がん、悪性黒色腫、非小細胞肺がん、子宮頸がん、膠芽腫、前立腺がん、神経芽腫瘍、慢性リンパ性白血病、甲状腺乳頭がん、大腸がん、およびB細胞非ホジキンリンパ腫からなる群より選択される、請求項１４に記載の医薬組成物。
  16. ウイルス感染症が、B型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、C型肝炎ウイルス、EBウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトサイトメガロウイルス（CMV）、インフルエンザウイルスおよびヒトT細胞白血病ウイルス（HTLV）からなる群より選択されるウイルス感染症である、請求項１４に記載の医薬組成物。
  17. 請求項１３〜１６のいずれかに記載の医薬組成物を含む、がんまたはウイルス感染症を予防または治療するためのキット。
  18. 請求項１３〜１６のいずれかに記載の医薬組成物を含む、がんまたはウイルス感染症の予防剤または治療剤。
  19. 請求項１３〜１６のいずれかに記載の医薬組成物を患者に投与することを特徴とする、がんまたはウイルス感染症の予防または治療方法。
  20. 抗原特異的T細胞を患者に投与することを特徴とする、がんまたはウイルス感染症の予防または治療方法であって、
    末梢血から単核球を単離する工程、
    単離された単核球を、細胞傷害阻害剤を含む培地中で、刺激する工程、および
    刺激して得られた単核球から、抗原特異的T細胞を分離する工程
    を含む、がんまたはウイルス感染症の予防または治療方法。
  21. 抗原特異的T細胞を含む、医薬組成物であって、
    該T細胞が、
    (1)CD3およびCD45が陽性であり、
    (2)増殖性を有し、
    抗原刺激による活性化に伴い、
    (3)IFN-γとGranzyme Bを放出する
    ことを特徴とする、医薬組成物。
  22. 前記医薬組成物における、全T細胞数に対する抗原特異的T細胞の細胞数の割合が１０％以上であることを特徴とする、請求項２１に記載の医薬組成物。
  23. 前記抗原特異的T細胞の細胞数が、1×１０３個以上である、請求項２２に記載の医薬組成物。
JP2019138480A 2019-07-29 2019-07-29 抗原特異的ｔ細胞の製造方法 Active JP7337373B2 (ja)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019138480A JP7337373B2 (ja) 2019-07-29 2019-07-29 抗原特異的ｔ細胞の製造方法
CN202010718800.2A CN112300991A (zh) 2019-07-29 2020-07-23 抗原特异性t细胞的制造方法
US16/937,451 US20210030796A1 (en) 2019-07-29 2020-07-23 Method for producing antigen-specific t cells
EP20187830.3A EP3771744A1 (en) 2019-07-29 2020-07-27 A method for producing antigen-specific t cells

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019138480A JP7337373B2 (ja) 2019-07-29 2019-07-29 抗原特異的ｔ細胞の製造方法

Publications (3)

Publication Number Publication Date
JP2021019541A true JP2021019541A (ja) 2021-02-18
JP2021019541A5 JP2021019541A5 (ja) 2022-04-04
JP7337373B2 JP7337373B2 (ja) 2023-09-04

Family

ID=71833194

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2019138480A Active JP7337373B2 (ja) 2019-07-29 2019-07-29 抗原特異的ｔ細胞の製造方法

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20210030796A1 (ja)
EP (1) EP3771744A1 (ja)
JP (1) JP7337373B2 (ja)
CN (1) CN112300991A (ja)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116731964A (zh) * 2022-05-26 2023-09-12 苏州尔生生物医药有限公司 用于预防或治疗癌症的特异性t细胞及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070003531A1 (en) * 2005-06-30 2007-01-04 University Of Connecticut Methods for improving immunotherapy by enhancing survival of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes
WO2017179720A1 (ja) * 2016-04-15 2017-10-19 国立大学法人京都大学 Ｃｄ８陽性ｔ細胞を誘導する方法
WO2019086711A1 (en) * 2017-11-06 2019-05-09 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Method for expansion of lymphocytes

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL112820A0 (en) * 1994-03-07 1995-05-26 Merck & Co Inc Coordinate in vivo gene expression
US7326692B2 (en) * 2001-11-14 2008-02-05 The University Of Chicago Induction of immunity using inhibitors of granzymes
WO2008121461A2 (en) * 2007-02-26 2008-10-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Vaccine for activating helper function of cd8+ tcells
AU2008301240B2 (en) * 2007-09-20 2014-07-31 St Vincent's Hospital Sydney Limited A method for identifying antigen-specific regulatory T cells
US20110082091A1 (en) * 2009-09-28 2011-04-07 Theramab Gmbh Method for Preclinical Testing of Immunomodulatory Drugs
EP2566518A4 (en) * 2010-05-07 2013-12-25 Baylor Res Inst THROUGH DENDRITIC CELL IMMUNE RECEPTORS MEDIATED CROSS-PRIMING OF HUMAN CD8 + T CELLS
JP6408219B2 (ja) * 2010-08-20 2018-10-17 イミュノバティブ セラピーズ，リミテッド Ｔｈ１特性と細胞溶解性を発現する細胞
CN102847144B (zh) * 2012-09-20 2015-12-09 上海星华生物医药科技有限公司 一种提高机体免疫功能的细胞类生物药物、及其制备方法和应用
CN102847143B (zh) * 2012-09-20 2016-08-03 上海星华生物医药科技有限公司 异基因过继性细胞免疫治疗血液系统疾病的细胞类生物药物及制备方法
WO2015066262A1 (en) * 2013-11-04 2015-05-07 Trustees Of Dartmouth College Methods for preventing toxicity of adoptive cell therapy
CN107106578B (zh) * 2014-08-12 2020-12-25 香港大学 治疗厄泼斯坦-巴尔病毒相关疾病的双膦酸盐化合物和γδT细胞-介导的疗法
AU2016256911B2 (en) * 2015-05-07 2022-03-31 Agenus Inc. Anti-OX40 antibodies and methods of use thereof
CA3006859A1 (en) * 2015-12-17 2017-06-22 Psioxus Therapeutics Limited Group b adenovirus encoding an anti-tcr-complex antibody or fragment
MX2018007295A (es) * 2016-01-11 2019-03-28 Armo Biosciences Inc Interleucina 10 en la produccion de linfocitos t cd8+especificos para el antigeno y metodos de uso de estos.
JP7334043B2 (ja) * 2016-06-27 2023-08-28 イェダ リサーチ アンド ディベロップメント カンパニー リミテッド メモリーｔ細胞から作られるベト細胞
CA3068387A1 (en) * 2016-06-28 2018-01-04 Geneius Biotechnology, Inc. T cell compositions for immunotherapy
EP3607053A4 (en) * 2017-03-29 2021-04-07 Taipei Medical University ANTIGEN-SPECIFIC T-CELLS AND USES THEREOF
SG10201705285SA (en) * 2017-06-27 2019-01-30 Agency Science Tech & Res Antisense oligonucleotides

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070003531A1 (en) * 2005-06-30 2007-01-04 University Of Connecticut Methods for improving immunotherapy by enhancing survival of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes
WO2017179720A1 (ja) * 2016-04-15 2017-10-19 国立大学法人京都大学 Ｃｄ８陽性ｔ細胞を誘導する方法
WO2019086711A1 (en) * 2017-11-06 2019-05-09 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Method for expansion of lymphocytes

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHRISTIAN K. MILLER ET AL.: "Diarylthiophenes as inhibitors of the pore-forming protein perforin.", BIOORG. MED. CHEM. LETT., vol. 26, no. 2, JPN6023011594, 15 January 2016 (2016-01-15), pages 355 - 360, XP029380274, ISSN: 0005111658, DOI: 10.1016/j.bmcl.2015.12.003 *
MICHAEL WEI-CHIH SU ET AL.: "Fratricide of CD8+ cytotoxic T lymphocytes is dependent on cellular activation and perforin-mediated", EUR. J. IMMUNOL., vol. 34, no. 9, JPN6023011595, September 2004 (2004-09-01), pages 2459 - 2470, XP055758133, ISSN: 0005111657, DOI: 10.1002/eji.200425096 *

Also Published As

Publication number Publication date
US20210030796A1 (en) 2021-02-04
JP7337373B2 (ja) 2023-09-04
CN112300991A (zh) 2021-02-02
EP3771744A1 (en) 2021-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20220064584A1 (en) Delivery of biomolecules to immune cells
JP5816627B2 (ja) 抗原特異的ｔ細胞の増殖のための方法
JP2023123437A (ja) ガンマデルタｔ細胞およびその使用
AU2006288348A1 (en) Method for activation treatment of antigen-presenting cell
JP6697076B2 (ja) ウイルス抗原特異的ｔ細胞の濃縮および拡大方法
JPWO2020027094A1 (ja) ｉＰＳ細胞を介して再生Ｔ細胞集団を製造する方法
US10385315B2 (en) Cells expressing Th1 characteristics and cytolytic properties
Shimasaki et al. Engineering of natural killer cells for clinical application
US20210030796A1 (en) Method for producing antigen-specific t cells
WO2021157685A1 (ja) ヒトＴ細胞由来ｉＰＳ細胞由来の細胞傷害性Ｔ細胞
WO2020251046A1 (ja) 医薬組成物
EP2575867A1 (en) Novel interferon-alpha-producing bone marrow dendritic cells
JP2022513584A (ja) サイトカインを分泌するように改変されたｐｄｃ株
US20200297829A1 (en) Integrative Immunotherapy for Cancer Treatment
WO2021085624A1 (ja) 腫瘍の治療及び／又は予防のための組成物
US20100247502A1 (en) Tumor/b-cell hybrid cells and uses thereof
CN105695404B (zh) 一种cik淋巴细胞的扩增激活方法
KR20170113961A (ko) Ｂ 세포 백신 및 이의 용도

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220325

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20220325

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230327

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230524

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230724

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230727

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20230804

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20230816

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7337373

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150