JP2021007632A - 光照射型美容機器 - Google Patents
光照射型美容機器 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021007632A JP2021007632A JP2019122880A JP2019122880A JP2021007632A JP 2021007632 A JP2021007632 A JP 2021007632A JP 2019122880 A JP2019122880 A JP 2019122880A JP 2019122880 A JP2019122880 A JP 2019122880A JP 2021007632 A JP2021007632 A JP 2021007632A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- light
- irradiation
- amount
- light irradiation
- minutes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000003796 beauty Effects 0.000 title claims abstract description 34
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 34
- 230000006735 deficit Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 26
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 15
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 15
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 12
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 9
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 8
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 6
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 6
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 6
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 5
- 108010058734 transglutaminase 1 Proteins 0.000 description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 4
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 4
- 101000851054 Homo sapiens Elastin Proteins 0.000 description 4
- 101001013150 Homo sapiens Interstitial collagenase Proteins 0.000 description 4
- 102000003918 Hyaluronan Synthases Human genes 0.000 description 4
- 108090000320 Hyaluronan Synthases Proteins 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100033601 Collagen alpha-1(I) chain Human genes 0.000 description 3
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 3
- 102100033167 Elastin Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 101000687673 Homo sapiens Small integral membrane protein 6 Proteins 0.000 description 3
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 3
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 3
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 3
- 102100030944 Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase K Human genes 0.000 description 3
- 108010029483 alpha 1 Chain Collagen Type I Proteins 0.000 description 3
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 3
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-L (R)-2-Hydroxy-3-(phosphonooxy)-propanal Natural products O=C[C@H](O)COP([O-])([O-])=O LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-L 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-N D-glyceraldehyde 3-phosphate Chemical compound O=C[C@H](O)COP(O)(O)=O LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 206010016807 Fluid retention Diseases 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 238000009015 Human TaqMan MicroRNA Assay kit Methods 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 238000001126 phototherapy Methods 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].COC1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 101000989028 Homo sapiens Hyaluronan synthase 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001123834 Homo sapiens Neprilysin Proteins 0.000 description 1
- 101000653235 Homo sapiens Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase K Proteins 0.000 description 1
- 101710197055 Hyaluronan synthase 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100028782 Neprilysin Human genes 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-AXMZSLBLSA-N azane;(2z)-3-ethyl-2-[(z)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N\N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-AXMZSLBLSA-N 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000013043 cell viability test Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005175 epidermal keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 1
- 102000054289 human ELN Human genes 0.000 description 1
- 102000047235 human HAS3 Human genes 0.000 description 1
- 102000053148 human MMP1 Human genes 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004237 neck muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Radiation-Therapy Devices (AREA)
Abstract
Description
該光照射エネルギー量を制御する手段は、照射部位における光照射エネルギー量を38J/cm2以下に制限する、光照射型美容機器を提供する。
ヒト三次元培養表皮に光照射し、細胞生存率試験を実施した。材料、試験方法及び結果を以下に説明する。
ヒト三次元培養表皮(LabCyte EPI−MODEL24、J−TEC社製)は、アッセイ培地(J−TEC社製)を用い、CO2インキュベータ(CO2濃度5%、37℃)内で培養した。
1)ハロゲンランプ(ウシオ電機社製)
出力:600W、100V
色温度:2800K
発光波長:300〜2400nm
2)光学フィルター(伊藤光学社製「カットフィルター」(商品名))
透過波長:800nm以上
1)EPI−MODEL24の説明書に従いウェルプレートに培地を加え、ヒト三次元培養表皮を移し、CO2インキュベータ内で15時間培養後、PBS(―)で洗浄した。
2)ハロゲンランプと細胞を入れたディッシュとの間に光学フィルターを設置した。ディッシュ内の細胞に対し、光学フィルターを介して光照射した。ハロゲンランプからディッシュまでの距離は40cmとした。照射は連続して行い、照射時間は計9種類(0分、1分、2分、4分、8分、15分)とした。
3)分光分布および放射照度の測定を行うことにより、照射光(波長300〜2400nm)の照射部位(照射距離40cm)における照射エネルギーを決定したところ、1秒当たり80mJ/cm2であった。照射時間を照射エネルギーに換算した結果を以下の表に示す。
5)培養終了後、MTT溶液(0.5mg/mL培地)を加えたヒト三次元培養表皮を移して3時間CO2インキュベータ内で培養した。
6)3時間後、2−プロパノール(Wako社製)を加えたマイクロチューブに、ピンセットで取り出した培養表皮片を移した。
7)15時間以上遮光冷蔵で不溶性ホルマザンを抽出した。
8)マイクロチューブ内の色素を均一分散した後、96ウェルプレートに移し、マイクロプレートリーダーを用いて570nm及び650nmの吸光度(OD570、OD650)を測定した。また、ブランクには2−プロパノールを用いた。
各ウェルのOD570から、それぞれのOD650を差し引いた。算出した光照射の吸光度(OD570−OD650)から、ブランクの値(OD570−OD650)を差し引いた。それらの値を用いて、0分の光照射に対する各照射時間の細胞生存率を以下の式に従い算出した。
細胞生存率(%)=(照射時間1〜4分の測定値/ 照射時間0分の測定値)×100
測定値:(A−B)−(C−D)
A:照射時間0〜4分の570nmでの吸光度
B:照射時間0〜4分の650nmでの吸光度
C:ブランクの570nmでの吸光度
D:ブランクの650nmでの吸光度
ヒト三次元培養表皮の細胞増殖率に及ぼす光照射の影響を図2に示した。
ハロゲンランプの電源を12秒周期でON/OFFさせて、光を間欠的に照射したこと以外は実施例1と同様にして、ヒト三次元培養表皮の細胞増殖率試験を実施した。ヒト三次元培養表皮の細胞増殖率に及ぼす光照射の影響を図3に示した。
皮膚の保湿機能に関わる遺伝子の発現に対する光照射の効果を、リアルタイムPCR法により評価した。材料、試験方法及び結果を以下に説明する。
ヒト由来表皮角化細胞株「HaCaT」細胞を、CO2インキュベータ(CO2濃度5%、37℃)を用いて培養した。
10.0%(v/v)のFetal Bovine Serum(FBS、Hyclone社製)、及び1.0%(v/v)の抗真菌剤(Antibiotic−Antimycotic 100X、Invitrogen社製)を含むDulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM、Wako社製)を用いた。
1)ハロゲンランプ(岩崎電機社製)
出力:600W、100V
色温度:2800K
発光波長:300〜2400nm
2)光学フィルター(渋谷光学社製「CM030」)
透過波長:800nm以上
TaqMan Assay(Applied Biosystems社製)を用いて遺伝子発現解析を実施した。
1)皮膚のバリア機能に関わる CE 形成や成熟を促進する酵素をコードするトランスグルタミナーゼ1遺伝子である、Human Transglutaminase−1(TGM1,Assay ID. Hs00165929_m1)
2)表皮細胞で産生され、皮膚の水分保持に関与するヒアルロン酸合成酵素3をコードする遺伝子である、Human Hyaluronan Synthase 3(HAS3,Assay ID. Hs00193436_m1)
Human Glyceraldehyde 3 Phosphate Dehydrogenase (GAPDH, Assay ID. Hs02786624_g1)
光照射を含め、試験に関わる操作は別途記載のないかぎり室温で実施した。
1)ディッシュに8×104cells/mLの「HaCaT」細胞を播種し、CO2インキュベータ内で24時間培養した。
2)細胞の培地を除去し、PBS(−)で洗浄、置換した。
3)ハロゲンランプと細胞を入れたディッシュとの間に光学フィルターを設置した。ディッシュ内の細胞に対し、光学フィルターを介して光照射した。ハロゲンランプからディッシュまでの距離は40cmとした。照射は連続して行い、照射時間は計5種類(0分、0.25分、0.5分、1分、2分)とした。
放射照度測定を行うことにより、照射光(波長300〜2400nm)の照射部位(照射距離40cm)における照射エネルギーを決定したところ、1秒当たり91mJ/cm2であった。照射時間を照射エネルギーに換算した結果を以下の表に示す。
PureLinkTM RNA mini Kit(商品名、Invitrogen社製)を用い、説明書に従いRNAを抽出及び精製した。その後、Tris―EDTA Buffer(pH8.0)により希釈して、RNA濃度を10μg/mLに調整した。
1)SuperScript(商品名) IV VILO(商品名) Master Mix with ezDNase(Invitrogen社製)を用いて、説明書に従いcDNAを合成した。
2)PCRプレートに10μLのTaqMan(商品名) Fast Advanced Master Mix(Biosystems社製)、1μLのTaqMan Gene Expressior、7μLのUltraPure(商品名) Distilled Water(Invitrogen社製)及び2μLのcDNAを加えた。
3)Real−Time qPCRを行い、照射時間0〜2分における各遺伝子の蛍光シグナルが任意の閾値に達する時のサイクル数であるThreshold Cycle(Ct)値を算出した。内部標準遺伝子によりCt値を補正し、ΔCt値とした。光未照射のΔCt値によりΔCt値を補正し、これをΔΔCt値とした。ΔΔCt法によって1サイクルあたりの検出差を2倍量とし、2−ΔΔCtに代入して照射時間0分の遺伝子発現量を1とした場合の光照射時の遺伝子発現量を評価した。
TGM1及びHAS3に関し、照射時間0分の発現量を1とした時の光照射時の発現量を、図4及び図5に示した。
トランスグルタミナーゼ1遺伝子の発現により、肌のバリア機能や水分保持が維持向上する。
ヒアルロン酸合成酵素3遺伝子の発現により、表皮中のヒアルロン酸産生が増加し、水分量が保たれ保湿機能が維持される。
抗老化に関わる遺伝子の発現に対する光照射の効果を、リアルタイムPCR法により評価した。材料、試験方法及び結果を以下に説明する。
ヒト新生児由来の真皮線維芽細胞株「NB1RGB」細胞を、CO2インキュベータ(CO2濃度5%、37℃)を用いて培養した。
10.0%(v/v)のFetal Bovine Serum (FBS、Hyclone社製)、及び1.0%(v/v)の抗真菌剤(Antibiotic−Antimycotic 100X、Invitrogen社製)を含むEagle’s minimal Essential Medium(EMEM、Wako社製)を用いた。
実施例3と同様
TaqMan Assay(Applied Biosystems社製)を用いて遺伝子発現解析を実施した。
1)真皮線維芽細胞によって産生され、皮膚のハリ弾力に関与するI型コラーゲンをコードする遺伝子である、Human Collagen Type 1 Alpha 1(COL1A1,Assay ID. Hs00164004_m1)
2)皮膚のハリ弾力に関与するコラーゲンの分解酵素をコードする遺伝子である、Human Matrix Metallopeptidase 1(MMP1,Assay ID. Hs00899658_m1)
3)真皮線維芽細胞によって産生され、皮膚のハリ弾力に関与するエラスチンをコードする遺伝子である、Human Elastin(ELN,Assay ID. Hs00355783_m1)。
4)皮膚のハリ弾力に関与するエラスチンの分解酵素をコードする遺伝子である、Human Membrane Metalloendopeptidase(MME,Assay ID. Hs00153510_m1)。
Human Glyceraldehyde 3 Phosphate Dehydrogenase (GAPDH,Assay ID. Hs02786624_g1)
実施例3と同様
COL1A1、MMP1、ELN及びMMEに関し、照射時間0分の発現量を1とした時の光照射後の発現量を、図6、図7、図8及び図9に示した。
I型コラーゲン遺伝子の発現により、肌の弾力や強度に関与するコラーゲンが真皮線維芽細胞から産生される。さらにコラーゲン分解酵素遺伝子が抑制され、より肌に弾力を与えハリのある肌を保つ。
エラスチン遺伝子の発現により、肌の弾力を維持しコラーゲンを支えるエラスチンが真皮線維芽細胞から産生される。さらにエラスチン分解酵素遺伝子が抑制され、より肌に弾力やしなやかさを与え、ハリのある肌を保つ。
抗老化成分であるヒアルロン酸の産生に対する光照射被験物質の効果を評価した。材料、試験方法及び結果を以下に説明する。
実施例4と同様
光照射を含め、試験に関わる操作は別途記載のないかぎり室温で実施した。
2)細胞の培地を除去し、PBS(−)で置換、洗浄した。
3)ハロゲンランプと細胞を入れたディッシュとの間に光学フィルターを設置した。ディッシュ内の細胞に対し、光学フィルターを介して光照射した。ハロゲンランプからディッシュまでの距離は40cmとした。照射は連続して行い、照射時間は計5種類(0分、0.25分、0.5分、1分、2分)とした。
4)放射照度測定を行うことにより、照射光(波長300〜2400nm)の照射部位(照射距離40cm)における照射エネルギーを決定したところ、1秒当たり91mJ/cm2であった。照射時間を照射エネルギーに換算した結果を以下の表に示す。
1)培地を除去、およびPBS(−)洗浄後、テトラゾリウム塩WST−8含有培地を加えてCO2インキュベータ内で2時間培養した。
2)培養終了後、ウェルプレートに培養上清を分取し、マイクロプレートリーダーを用いて水溶性WST−8ホルマザンの極大吸収波長である450nmの吸光度(OD450)を測定した。
3)照射時間0〜2分のOD450からブランクを減算し、照射時間0分 の OD450 を 100%として細胞賦活作用(%)を算出した。
ヒアルロン酸産生促進作用評価は、サンドイッチELISA(Enzyme−Linked ImmunoSorbent Assay)で評価した。
1)高吸着型プレートにHyaluronan binding protein(HABP)溶液を静置固定後、余分なHABP溶液を除去、洗浄した。
2)Bovine Serum Albumin(BSA)溶液を加え、4℃で17時間静置後、BSA溶液を除去し、プレートを洗浄、乾燥させた。
3)照射時間0〜2分の真皮繊維芽細胞の培養上清を0.5MのNaCl、0.02%のTween20および1%のBSAを含有するPBS(−)で適宜希釈し、プレートに添加し2時間静置した。
4)洗浄後、100μLのビオチン標識HABP溶液を加え30分静置、洗浄後、ストレプトアビジン標識HRP(horseradish peroxidase)溶液を加え、30分静置した。
5)洗浄後、2,2’−azinobis(3−ethylbenzothiazoline−6−sulfonic acid)diammonium salt (ABTS)を加えて10分静置した。
6)405nmの吸光度(OD405)を測定し、照射時間0分のOD405を100%として、光照射のヒアルロン酸産生率を算出した。
7)照射時間0〜2分のOD405を、細胞賦活作用評価で測定したブランク減算後のOD450で除して細胞あたりのヒアルロン酸産生率を求めた。照射時間0分の細胞あたりのヒアルロン酸産生率を100%として光照射によるヒアルロン酸産生率を算出した。
照射時間0分のヒアルロン酸産生量を100%とした場合の光照射によるヒアルロン酸産生量を図10に示した。照射時間0分の細胞あたりのヒアルロン酸産生量を100%とした場合の光照射による細胞あたりのヒアルロン酸産生量を図11に示した。
ヒアルロン酸産生が増加することで、コラーゲンやエラスチンの間に水分を抱え込み、真皮に水分を保持してハリのある肌を保つ。
2…光学フィルター
3…照射光
Claims (3)
- 可視光線を含む広波長帯域の光線を放射する光源と、該光源から放射される光線のうちの特定の波長成分を選択的に透過させる光学フィルターと、光照射エネルギー量を制御する手段とを備え、
該光照射エネルギー量を制御する手段は、照射部位における光照射エネルギー量を38J/cm2以下に制限する、光照射型美容機器。 - 前記該光照射エネルギー量を制御する手段は、照射部位における光照射エネルギー量を3〜38J/cm2に制御する、請求項1に記載の光照射型美容機器。
- 前記光源は、電極における色温度が摂氏3000度未満であるハロゲンランプである請求項1又は2に記載の光照射型美容機器。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019122880A JP7510748B2 (ja) | 2019-07-01 | 光照射型美容機器 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019122880A JP7510748B2 (ja) | 2019-07-01 | 光照射型美容機器 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021007632A true JP2021007632A (ja) | 2021-01-28 |
JP7510748B2 JP7510748B2 (ja) | 2024-07-04 |
Family
ID=
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005519692A (ja) * | 2002-03-12 | 2005-07-07 | パロマー・メディカル・テクノロジーズ・インコーポレーテッド | 毛の成長の管理のための方法及び装置 |
JP2005312641A (ja) * | 2004-04-28 | 2005-11-10 | Scandinavia Corp | 美容機器 |
JP2006511275A (ja) * | 2002-12-20 | 2006-04-06 | パロマー・メディカル・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | アクネ及び他の毛胞障害の光線治療装置 |
JP2011500258A (ja) * | 2007-10-22 | 2011-01-06 | ラディアンシー インク. | ハンドヘルド皮膚治療装置 |
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005519692A (ja) * | 2002-03-12 | 2005-07-07 | パロマー・メディカル・テクノロジーズ・インコーポレーテッド | 毛の成長の管理のための方法及び装置 |
JP2006511275A (ja) * | 2002-12-20 | 2006-04-06 | パロマー・メディカル・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | アクネ及び他の毛胞障害の光線治療装置 |
JP2005312641A (ja) * | 2004-04-28 | 2005-11-10 | Scandinavia Corp | 美容機器 |
JP2011500258A (ja) * | 2007-10-22 | 2011-01-06 | ラディアンシー インク. | ハンドヘルド皮膚治療装置 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Danno et al. | Near‐infrared irradiation stimulates cutaneous wound repair: laboratory experiments on possible mechanisms | |
JP4739202B2 (ja) | 熱傷、創傷、および関連皮膚疾患の光力学治療のためのシステムおよび方法 | |
Demidova‐Rice et al. | Low‐level light stimulates excisional wound healing in mice | |
Fushimi et al. | Green light emitting diodes accelerate wound healing: characterization of the effect and its molecular basis in vitro and in vivo | |
Seaton et al. | Investigation of the mechanism of action of nonablative pulsed‐dye laser therapy in photorejuvenation and inflammatory acne vulgaris | |
WO2004075985A3 (en) | Cosmetic or therapeutic methods and apparatus | |
GB2415387A (en) | A method of cosmetically treating skin using electromagnetic radiation with a wavelength between 900nm and 1500nm | |
Asai et al. | The long-term effects of red light-emitting diode irradiation on the proliferation and differentiation of osteoblast-like MC3T3-E1 cells | |
Matsuda et al. | Suppression of UV-induced wrinkle formation by induction of HSP70 expression in mice | |
Fronza et al. | Assessment of the systemic effects of low-level laser therapy (LLLT) on thyroid hormone function in a rabbit model | |
Merigo et al. | Green laser light irradiation enhances differentiation and matrix mineralization of osteogenic cells | |
Kim et al. | Epithelial–mesenchymal interaction during photodynamic therapy-induced photorejuvenation | |
Lee et al. | Low-level light therapy with 410 nm light emitting diode suppresses collagen synthesis in human keloid fibroblasts: An in vitro study | |
Tedesco et al. | Low level energy photodynamic therapy for skin processes and regeneration | |
Maligieri et al. | Differing energy densities with laser 670 nm InGaP controls inflammation and collagen reorganization in burns | |
Halevy et al. | Infrared (780 nm) low level laser therapy for wound healing: in vivo and in vitro studies | |
KR20160057501A (ko) | 비타민d 생성을 위한 자외선 방출 장치 | |
JP2021007632A (ja) | 光照射型美容機器 | |
JP7510748B2 (ja) | 光照射型美容機器 | |
EP3138606A1 (en) | Kit for lipolysis by means of light radiation | |
EP2560568B1 (en) | Combined energy and topical composition application for regulating the condition of mammalian skin | |
CN115461035A (zh) | 用于通过将照射和包含烟酰胺的组合物的施加组合进行美容处理的方法及相关设备 | |
JP6214849B2 (ja) | L−アミノ酸オキシダーゼを活性化する緑色光の使用 | |
Levenberg et al. | Treatment of wrinkles and acne scars using the TriFractional, a novel fractional radiofrequency technology—clinical and histological results | |
Vandiver et al. | Aging skin and non-surgical procedures: a basic science overview |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220426 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20230322 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230328 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230525 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230829 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231025 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20240206 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240328 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240618 |