JP2020533966A5

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Info

Publication number: JP2020533966A5
Application number: JP2020510102A
Authority: JP
Filing date: 2018-08-09
Publication date: 2021-09-16

Claims

インフルエンザウイルス表面タンパク質を産生するように遺伝子改変されたマイセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）Ｃ１であって、少なくとも１つのＣ１調節配列に作動可能に連結された前記インフルエンザウイルス表面タンパク質をコードする核酸配列を含む発現構築物を含み、前記インフルエンザウイルス表面タンパク質が、その外部ドメインおよび膜貫通ドメインを含みかつ前記Ｃ１中で膜結合タンパク質として発現される、Ｃ１。
前記インフルエンザウイルス表面タンパク質が、ヘマグルチニン（ＨＡ）であり、
前記発現構築物が、前記ＨＡをコードする核酸配列にインフレームで連結されたＣ１シグナルペプチドをコードする核酸配列をさらに含む、
請求項１に記載のＣ１。
前記ＨＡの亜型が、インフルエンザＡ−Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ１２、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５およびＨ１６、ならびにインフルエンザＢ亜型からなる群から選択される、請求項２に記載のＣ１。
前記ＨＡの亜型が、インフルエンザＡ亜型Ｈ１、Ｈ２およびＨ３、ならびにインフルエンザＢ亜型から選択される、ヒトに感染する亜型である、請求項２に記載のＣ１。
前記少なくとも１つのＣ１調節配列が、Ｃ１プロモーターを含む、請求項１に記載のＣ１。
前記Ｃ１プロモーターが、ｈｅｘ１（ウォロニンボディ）プロモーター、ｃｂｈ１（セロビオヒドロラーゼ１）プロモーター、ｃｈｉ１（キチナーゼ１）プロモーターおよびｂｇｌプロモーターからなる群から選択されるか、または前記Ｃ１プロモーターが、合成プロモーターである、
請求項５に記載のＣ１。
前記Ｃ１シグナルペプチドが、Ｇｌａ１（グルコアミラーゼ１、Ｃ１）、ＧｌａＡ（グルコアミラーゼＡ、アスペルギルス）およびＣｂｈ１（セロビオヒドロラーゼ１、Ｃ１）からなる群から選択されるタンパク質に由来するシグナルペプチドである、請求項２に記載のＣ１。
前記発現構築物が、ＨＡに融合されたＣｂｈ１シグナルペプチドをコードする核酸配列に作動可能に連結されたｈｅｘ１プロモーターを含む、請求項１に記載のＣ１。
前記インフルエンザウイルス表面タンパク質が、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）である、請求項１に記載のＣ１。
前記ＮＡの亜型が、インフルエンザＡ−Ｎ１、Ｎ２、Ｎ３、Ｎ４、Ｎ５、Ｎ６、Ｎ７、Ｎ８およびＮ９ならびにインフルエンザＢ亜型からなる群から選択される、請求項９に記載のＣ１。
前記ＮＡの亜型が、インフルエンザＡ亜型Ｎ１およびＮ２ならびにインフルエンザＢ亜型から選択される、ヒトに感染する亜型である、請求項９に記載のＣ１。
前記発現構築物が、ＮＡをコードする核酸配列に作動可能に連結されたｈｅｘ１プロモーターを含む、請求項９に記載のＣ１。
前記Ｃ１株が、野生型Ｃ１（寄託番号ＶＫＭＦ−３５００Ｄ）、ＵＶ１３−６（寄託番号ＶＫＭＦ−３６３２Ｄ）、ＮＧ７Ｃ−１９（寄託番号ＶＫＭＦ−３６３３Ｄ）、ＵＶ１８−２５（寄託番号ＶＫＭＦ−３６３１Ｄ）、Ｗ１Ｌ＃１００Ｉ（ｐｒｔ−Δａｌｐ１Δｃｈｉ１Δａｌｐ２Δｐｙｒ５）（寄託番号ＣＢＳ１４１１５３）、ＵＶ１８−１００ｆ（ｐｒｔ−Δａｌｐ１、Δｐｙｒ５）（寄託番号ＣＢＳ１４１１４７）、Ｗ１Ｌ＃１００Ｉ（ｐｒｔ−Δａｌｐ１Δｃｈｉ１Δｐｙｒ５）（寄託番号ＣＢＳ１４１１４９）、およびＵＶ１８−１００ｆ（ｐｒｔ−Δａｌｐ１Δｐｅｐ４Δａｌｐ２、Δｐｒｔ１Δｐｙｒ５）（寄託番号ＣＢＳ１４１１４３）からなる群から選択される、請求項１に記載のＣ１。
インフルエンザウイルス表面タンパク質を産生するための方法であって、前記インフルエンザウイルス表面タンパク質を発現するのに好適な条件下で請求項１に記載のマイセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）Ｃ１を培養すること、および前記インフルエンザウイルス表面タンパク質を回収することを含む、方法。
マイセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）Ｃ１中で膜結合インフルエンザウイルス表面タンパク質を発現させるための発現構築物であって、インフルエンザウイルス表面タンパク質をコードする核酸配列に作動可能に連結された少なくとも１つのＣ１調節配列を含み、前記インフルエンザウイルス表面タンパク質が、その外部ドメインおよび膜貫通ドメインを含む、発現構築物。
請求項１に記載の改変されたマイセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）Ｃ１によって産生される実質的に純粋な、組換えインフルエンザウイルス表面タンパク質であって、純度８０％以上に精製されならびに活性でかつ免疫原性であり、かつワクチンとして使用される場合に防御免疫応答を誘導する、インフルエンザウイルス表面タンパク質。
請求項１に記載の改変されたマイセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）Ｃ１によって産生されるインフルエンザウイルス表面タンパク質を含む、インフルエンザワクチン組成物。
追加のアジュバントを含まない、請求項１７に記載のワクチン組成物。