JP2020065506A - 核酸結合因子 - Google Patents
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Abstract
Description
(B)前記ポリペプチドとは別に、さらに、機能性物質を含む、
項1に記載の核酸結合因子。
本明細書中において、「含有」及び「含む」なる表現については、「含有」、「含む」、「実質的にからなる」及び「のみからなる」という概念を含む。
本発明は、その一態様において、不活性チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼのDNA結合ドメインを含むポリペプチド(本明細書において、「本発明のポリペプチド」と示すこともある。)を含む、核酸結合因子(本明細書において、「本発明の核酸結合因子」と示すこともある。)に関する。以下、これについて説明する。
(a)配列番号1〜5のいずれかに示されるアミノ酸配列において不活性化変異が導入されてなるアミノ酸配列(例えば、配列番号6〜10のいずれかに示されるアミノ酸配列)からなるタンパク質、又は
(b)配列番号1〜5のいずれかに示されるアミノ酸配列において不活性化変異が導入されてなるアミノ酸配列(例えば、配列番号6〜10のいずれかに示されるアミノ酸配列)と70%以上(好ましくは80%以上、より好ましくは90%以上、さらに好ましくは95%以上、よりさらに好ましくは97%以上、特に好ましくは99%以上)の同一性を有するアミノ酸配列を有するタンパク質、
である。変異としては、例えば置換、欠失、付加、挿入等が挙げられ、好ましくは置換が挙げられ、より好ましくは保存的置換が挙げられる。変異アミノ酸の数は、好ましくは1又は複数個、より好ましくは1〜8個、さらに好ましくは1〜4個、よりさらに好ましくは1個である。
た時に核内へ移動し、目的の遺伝子を発現させるために利用することができる。
本発明は、その一態様において、本発明のポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド(本明細書において、「本発明のポリヌクレオチド」と示すこともある。)に関する。以下、これについて説明する。
本発明は、その一態様において、本発明のポリヌクレオチドを含む、細胞(本明細書において、「本発明の細胞」と示すこともある。)に関する。
本発明は、その一態様において、本発明の核酸結合因子、本発明のポリヌクレオチド、及び本発明の細胞からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、試薬(本明細書において、「本発明の試薬」と示すこともある。)に関する。
特に断りの無い限り、後述の試験例では以下に示す材料と方法を採用した。
1-1-1.野生型チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼ配列
野生型I-OnuIアミノ酸配列
SRRESINPWILTGFADAEGSFLLRIRNNNKSSVGYSTELGFQITLHNKDKSILENIQSTWKVGVIANSGDNAVSLKVTRFEDLKVIIDHFEKYPLITQKLGDYMLFKQAFCVMENKEHLKINGIKELVRIKAKLNWGLTDELKKAFPEIISKERSLINKNIPNFKWLAGFTSGEGCFFVNLIKSKSKLGVQVQLVFSITQHIKDKNLMNSLITYLGCGYIKEKNKSEFSWLDFVVTKFSDINDKIIPVFQENTLIGVKLEDFEDWCKVAKLIEEKKHLTESGLDEIKKIKLNMNKGRVF(配列番号1)。
STSDNNGNIKINPWFLTGFIDGEGCFRISVTKINRAIDWRVQLFFQINLHEKDRALLESIKDYLGVGKIHISGKNLVQYRIQTFDELTILIKHLKEYPLVSKKRADFELFNTAHKLIKNNEHLNKEGINKLVSLKASLNLGLSESLKLAFPNVISATRLTDFTVNIPDPHWLSGFASAEGCFMVGIAKSSASSTGYQVYLTFILTQHVRDENLMKCLVDYFNWGRLARKRNVYEYQVSKFSDVEKLLSFFDKYPILGEKAKDLQDFCSVSDLMKSKTHLTEEGVAKIRKIKEGMNRGR(配列番号2)。
STLESKLNPSYISGFVDGEGSFMLTIIKDNKYKLGWRVVCRFVISLHKKDLSLLNKIKEFFDVGNVFLMTKDSAQYRVESLKGLDLIINHFDKYPLITKKQADYKLFKMAHNLIKNKSHLTKEGLLELVAIKAVINNGLNNDLSIAFPGINTILRPDTSLPQILNPFWLSGFVDAEGCFSVVVFKSKTSKLGEAVKLSFILTQSNRDEYLIKSLIEYLGCGNTSLDPRGTIDFKVTNFSSIKDIIVPFFIKYPLKGNKNLDFTDFCEVVRLMENKSHLTKEGLDQIKKIRNRMNTNRK(配列番号3)。
NTSSSFNPWFLTGFSDAECSFSILIQANSKYSTGWRIKPVFAIGLHKKDNELLKRIQSYLGVGKIHIHGKDSIQFRIDSPKELEVIINHFENYPLVTAKQADYTLFKKALDVIKNKEHLSQKGLLKLVGIKASLNLGLNGSLKEAFPNWEELQIDRPSYVNKGIPDPNWISGFASGDSSFNVKISNSPTSLLNKRVQLRFGIGLNIREKALIQYLVAYFDLSDNLKNIYFDLNSARFEVVKFSDITDKIIPFFDKYSIQGKKSQDYQNFKEVADIIKSKNHLTSEGFQEILDIKASMNK(配列番号4)。
MINLKNNIEYLNWYICGLVDAEGSFGVNVVKHATNKTGYAVLTYFELAMNSKDKQLLELIKKTFDLECNIYHNPSDDTLKFKVSNIEQIVNKIIPFFEKYTLFSQKRGDFILFCKVVELIKNKEHLTLNGLMKILSIKAAMNLGLSENLKKEFPGCLSVKRPEFGLSNLNKRWLAGFIEGEACFFVSIYNSPKSKLGKAVQLVFKITQHIRDKILIESIVELLNCGRVEVRKSNEACDFTVTSIKEIENYIIPFFNEYPLIGQKLKNYEDFKLIFDMMKTKDHLTEEGLSKIIEIKNKMNTNRI(配列番号5)。
不活性I-OnuI(E22A)(E178A)アミノ酸配列
SRRESINPWILTGFADAAGSFLLRIRNNNKSSVGYSTELGFQITLHNKDKSILENIQSTWKVGVIANSGDNAVSLKVTRFEDLKVIIDHFEKYPLITQKLGDYMLFKQAFCVMENKEHLKINGIKELVRIKAKLNWGLTDELKKAFPEIISKERSLINKNIPNFKWLAGFTSGAGCFFVNLIKSKSKLGVQVQLVFSITQHIKDKNLMNSLITYLGCGYIKEKNKSEFSWLDFVVTKFSDINDKIIPVFQENTLIGVKLEDFEDWCKVAKLIEEKKHLTESGLDEIKKIKLNMNKGRVF(配列番号6)。
STSDNNGNIKINPWFLTGFIDGAGCFRISVTKINRAIDWRVQLFFQINLHEKDRALLESIKDYLGVGKIHISGKNLVQYRIQTFDELTILIKHLKEYPLVSKKRADFELFNTAHKLIKNNEHLNKEGINKLVSLKASLNLGLSESLKLAFPNVISATRLTDFTVNIPDPHWLSGFASAAGCFMVGIAKSSASSTGYQVYLTFILTQHVRDENLMKCLVDYFNWGRLARKRNVYEYQVSKFSDVEKLLSFFDKYPILGEKAKDLQDFCSVSDLMKSKTHLTEEGVAKIRKIKEGMNRGR(配列番号7)。
STLESKLNPSYISGFVDGAGSFMLTIIKDNKYKLGWRVVCRFVISLHKKDLSLLNKIKEFFDVGNVFLMTKDSAQYRVESLKGLDLIINHFDKYPLITKKQADYKLFKMAHNLIKNKSHLTKEGLLELVAIKAVINNGLNNDLSIAFPGINTILRPDTSLPQILNPFWLSGFVDAAGCFSVVVFKSKTSKLGEAVKLSFILTQSNRDEYLIKSLIEYLGCGNTSLDPRGTIDFKVTNFSSIKDIIVPFFIKYPLKGNKNLDFTDFCEVVRLMENKSHLTKEGLDQIKKIRNRMNTNRK(配列番号8)。
NTSSSFNPWFLTGFSDAACSFSILIQANSKYSTGWRIKPVFAIGLHKKDNELLKRIQSYLGVGKIHIHGKDSIQFRIDSPKELEVIINHFENYPLVTAKQADYTLFKKALDVIKNKEHLSQKGLLKLVGIKASLNLGLNGSLKEAFPNWEELQIDRPSYVNKGIPDPNWISGFASGASSFNVKISNSPTSLLNKRVQLRFGIGLNIREKALIQYLVAYFDLSDNLKNIYFDLNSARFEVVKFSDITDKIIPFFDKYSIQGKKSQDYQNFKEVADIIKSKNHLTSEGFQEILDIKASMNK(配列番号9)。
MINLKNNIEYLNWYICGLVDAAGSFGVNVVKHATNKTGYAVLTYFELAMNSKDKQLLELIKKTFDLECNIYHNPSDDTLKFKVSNIEQIVNKIIPFFEKYTLFSQKRGDFILFCKVVELIKNKEHLTLNGLMKILSIKAAMNLGLSENLKKEFPGCLSVKRPEFGLSNLNKRWLAGFIEGAACFFVSIYNSPKSKLGKAVQLVFKITQHIRDKILIESIVELLNCGRVEVRKSNEACDFTVTSIKEIENYIIPFFNEYPLIGQKLKNYEDFKLIFDMMKTKDHLTEEGLSKIIEIKNKMNTNRI(配列番号10)。
不活性I-SceI(D44N)(D145A)
MKNIKKNQVMNLGPNSKLLKEYKSQLIELNIEQFEAGIGLILGNAYIRSRDEGKTYCMQFEWKNKAYMDHVCLLYDQWVLSPPHKKERVNHLGNLVITWGAQTFKHQAFNKLANLFIVNNKKTIPNNLVENYLTPMSLAYWFMDAGGKWDYNKNSTNKSIVLNTQSFTFEEVEYLVKGLRNKFQLNCYVKINKNKPIIYIDSMSYLIFYNLIKPYLIPQMMYKLPNTISSETFLK(配列番号11)。
MHNNENVSGISAYLLGLIIGAGGLYKLKYKGNRSEYRVVITQKSENLIKQHIAPLMQFLIDELNVKSKIQIVKGDTRYELRVSSKKLYYYFANMLERIRLFNMREQIAFIKGLYVAAGDKTLKRLRIWNKNKALLEIVSRWLNNLGVRNTIHLDDHRHGVYVLNISLRDRIKFVHTILSSHLNPLPPE(配列番号12)。
I-OnuI認識配列
TTTCCACTTATTCAACCTTTTA(配列番号13)。
AGGTACCCTTTAAACCTACTAA(配列番号14)。
GCTCCTCATAATCCTTATCAAG(配列番号15)。
TAGCCCACAATATTAAGGCCAT(配列番号16)。
AGTAGTGAAGTATGTTATTTAA(配列番号17)。
TAGGGATAACAGGGTAAT(配列番号18)。
GCCTTGCCGGGTAAGTTCCGGCGCG(配列番号19)。
Notchコア配列
GYLPCVGSNPCYNQGTCEPTSENPFYRCLCPAKFNGLLCHILDYSFTGGAGRDIPPPQIEEACELPECQVDAGNKVCNLQCNNHACGWDGGDCSLNFNDPWKNCTQSLQCWKYFSDGHCDSQCNSAGCLFDGFDCQLTEGQCNPLYDQYCKDHFSDGHCDQGCNSAECEWDGLDCAEHVPERLAAGTLVLVVLLPPDQLRNNSFHFLRELSHVLHTNVVFKRDAQGQQMIFPYYGHEEELRKHPIKRSTVGWATSSLLPGTSGGRQRRELDPMDIRGSIVYLEIDNRQCVQSSSQCFQSATDVAAFLGALASLGSLNIPYKIEAVKSEPVEPPLPSQLHLMYVAAAAFVLLFFVGCGVLLSRKRRRQ(配列番号20)。
DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSS(配列番号21)。
MSRLDKSKVINSALELLNEVGIEGLTTRKLAQKLGVEQPTLYWHVKNKRALLDALAIEMLDRHHTHFCPLEGESWQDFLRNNAKSFRCALLSHRDGAKVHLGTRPTEKQYETLENQLAFLCQQGFSLENALYALSAVGHFTLGCVLEDQEHQVAKEERETPTTDSMPPLLRQAIELFDHQGAEPAFLFGLELIICGLEKQLKCESG(配列番号22)。
不活性化メガヌクレアーゼを用いた人工転写因子の遺伝子発現調整能を評価するため、以下に示す人工転写因子を作成した。図1Aに人工転写因子の例を示す。N末より、HAタグ配列、核移行シグナル(NLS)、不活性メガヌクレアーゼ、転写制御ドメイン、タンパク質分解配列からなる。ここでは、転写制御ドメインに転写活性化ドメイン(VP48)を使用した人工転写因子を作成し、後述の試験例でその転写誘導活性を評価した。
キメラNotch受容体は、N末からCD8α由来シグナル配列(MALPVTALLLPLALLLHAARP(配列番号29))、c-myc遺伝子由来mycタグ配列(EQKLISEEDL(配列番号30))、抗CD19抗体由来scFv(配列番号21)、Notchコア配列(配列番号20)、不活性I-OnuI配列(配列番号6)、3xヘルペスウイルス由来転写誘導ドメイン(PADALDDFDLDMx3(配列番号27))、マウスオルニチンデカルボキシラーゼ由来タンパク質不安定化配列(HGFPPEVEEQAAGTLPMSCAQESGMDRHPAACASARINV(配列番号28))を制限サイトの挿入によって連結させたタンパク質の遺伝子として合成した。またキメラNotch受容体はN末にコザック配列を付加した状態として、哺乳類細胞用遺伝子発現ベクターpcDNA3のCMVプロモーターの下流に導入した。また、比較対象として、不活性化I-OnuI配列をtTA(TetRに転写誘導ドメインを付加した人工転写因子(配列番号22))に置換したキメラNotch受容体も作成した。
不活性化メガヌクレアーゼを用いた人工転写因子とこれを組み込んだキメラNotch受容体による転写誘導活性を評価するため、以下に示すレポータープラスミドを作成した。図1Bにレポーターの例を示す。メガヌクレアーゼのターゲット配列を1つおよび7つ含む配列の下流にCMVミニプロモーターを置き、その下流にレポーター遺伝子を据えることにより、不活性化メガヌクレアーゼを用いた人工転写因子の結合依存的にレポーター遺伝子が発現される。ここでは、レポーター遺伝子にルシフェラーゼを使用した。
実験にはヒト胎児腎由来株化細胞であるHEK293T細胞、ハムスター腎由来株化細胞であるBHK細胞、ヒトリンパ種であるRaji細胞を使用した。HEK293T細胞およびBHK細胞は5%の仔ウシ血清を添加したDMEM(high glucose)を用いて培養し、Raji細胞は10%の仔ウシ血清を添加したRPMI1640培地を用いて培養を行った。また、細胞はCO2濃度5%の条件の下、CO2インキュベーター内で培養を行った。
HEK293細胞およびBHK細胞への遺伝子導入には、トランスフェクション試薬(リポフェクトアミン2000)を使用した。HEK293T細胞およびBHK細胞は、Nunc F96 MicroWell White Polystyrene Plateに1x10^4 cell/100μL/wellとなるように蒔き、翌日、トランスフェクション試薬を用いて13ngのレポータープラスミド、13ngの人工転写因子発現プラスミド、43ngのキメラNotch受容体発現プラスミドを単独もしくは組み合わせて各wellに添加した。
キメラNotch受容体がリンパ腫を認知してレポーター遺伝子を発現させる能力を調べるためには、キメラNotch受容体とレポーター系を細胞にノックインしなければならない。しかし、ここではキメラNotch受容体の機能を簡便に評価するために、BHK細胞へキメラNotch受容体とレポーター系を一過性に発現させ、その細胞にRaji細胞を接触させる方法を用いた。具体的には、レポータープラスミドとキメラNotch受容体発現プラスミドをBHK細胞に導入した翌日、Raji細胞を1x10^4 cell/100μL/wellとなるように添加した。
トランスフェクションを行ったHEK293T細胞およびBHK細胞の培地にルシフェリン溶液(最終濃度100μM)とHEPES緩衝液を添加した。その後、ルシフェラーゼによる発光をマイクロプレートリーダー(SH9000Lab、CORONA社製)により測定した。
2-1.不活性化メガヌクレアーゼを用いた人工転写因子によるレポーター遺伝子の転写誘導
HEK293T細胞にメガヌクレアーゼI-AaBMI、I-CpaMI、I-LtrWI、I-OnuI、I-SceIの認識配列を7個持つレポータープラスミドを単独で発現させた場合に対し、それぞれ対応するメガヌクレアーゼの不活性化体からなる人工転写因子の発現プラスミドを共発現させた場合のレポーター転写活性を調べた(図2)。その結果、メガヌクレアーゼの中でも特に研究が行われており、試薬としても販売されている酵母由来I-SceIを人工転写因子に用い、I-SceIの認識配列をレポーターに用いたI-SceI系では140倍の転写誘導活性が得られた。一方、チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼI-AaBMIを人工転写因子に用い、I-AaBMIの認識配列をレポーターに用いたI-AaBMI系では1140倍の転写誘導活性が得られ、同チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼI-CpaMIを人工転写因子に用い、I-CpaMIの認識配列をレポーターに用いたI-CpaMI系では256倍、同チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼI-LtrWIIを人工転写因子に用い、I-LtrWIの認識配列をレポーターに用いたI-LtrWI系では278倍、チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼI-OnuIを人工転写因子に用い、I-OnuIの認識配列をレポーターに用いたI-OnuI系では、1410倍の転写誘導活性が得られた。また、I-SceIと同様に多くの研究が行われている古細菌由来メガヌクレアーゼI-DmoIを人工転写因子に用い、I-DmoIの認識配列をレポーターに用いたI-DmoI系では、転写誘導活性が全く確認できなかった(図3)。これらの結果から、チャワンタケ亜門由来のメガヌクレアーゼを核酸結合因子として、特に人工転写因子に応用する方法が特に有用であると考えられた。
Notch受容体を改変することにより、リンパ腫を特異的に認識して、任意の遺伝子の発現を誘導できるキメラNotch受容体を作成することができる(特表2018-506293)。キメラNotch受容体をT細胞へノックインすることにより、癌細胞をより正確に認識し、攻撃できるキメラ抗原受容体発現T細胞を作成できることが動物実験で確かめられているため、リンパ腫の治療をより安全に実施できると期待できる(PMID:27693353)。
Claims (15)
- 不活性チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼのDNA結合ドメインを含むポリペプチドを含む、核酸結合因子。
- (A)前記ポリペプチドがさらに機能性ドメインを含む、及び/又は
(B)前記ポリペプチドとは別に、さらに、機能性物質を含む、
請求項1に記載の核酸結合因子。 - (A)前記ポリペプチドがさらに機能性ドメインを含む、請求項1又は2に記載の核酸結合因子。
- 前記チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼが、I-OnuI、I-AaBMI、I-PanMI、I-CpaMI、及びI-LtrWIからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項1〜3のいずれかに記載の核酸結合因子。
- 前記チャワンタケ亜門由来メガヌクレアーゼが、I-OnuI、I-AaBMI、及びI-PanMIからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項1〜4のいずれかに記載の核酸結合因子。
- 前記機能性ドメインが、転写促進活性、転写抑制活性、メチルトランスフェラーゼ活性、脱メチル化酵素活性、アセチルトランスフェラーゼ活性、脱アセチル化酵素活性、キナーゼ活性、ホスファターゼ活性、ユビキチンリガーゼ活性、脱ユビキチン化活性、アデニル化活性、脱アデニル化活性、SUMO化活性、脱SUMO化活性、リボシル化活性、脱リボシル化活性、ミリストイル化活性、脱ミリストイル化活性、DNA修復活性、DNA編集活性、DNA損傷活性、脱アミノ化活性、ジスムターゼ活性、アルキル化活性、脱プリン活性、酸化活性、ピリミジンダイマー形成活性、インテグラーゼ活性、ヌクレアーゼ活性、トランスポサーゼ活性、リコンビナーゼ活性、ポリメラーゼ活性、リガーゼ活性、ヘリカーゼ活性、光回復酵素活性、及びグリコシラーゼ活性からなる群より選択される少なくとも1種の活性を有するドメインである、請求項2又は3に記載の核酸結合因子。
- 前記機能性物質が標識物質及び担体からなる群より選択される少なくとも1種である、請求項2に記載の核酸結合因子。
- 転写因子である、請求項1〜7のいずれかに記載の核酸結合因子。
- 前記DNA結合ドメインがホモDNA結合ドメイン又はキメラDNA結合ドメインである、請求項1〜8のいずれかに記載の核酸結合因子。
- 請求項1〜9のいずれかに記載の核酸結合因子が含むポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。
- 前記ポリペプチドの発現カセットを含む、請求項10に記載のポリヌクレオチド。
- 請求項10又は11に記載のポリヌクレオチドを含む、細胞。
- 請求項1〜9のいずれかに記載の核酸結合因子、請求項10又は11に記載のポリヌクレオチド、及び請求項12に記載の細胞からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、試薬。
- 前記核酸結合因子を外来性核酸へ結合させるための、請求項13に記載の試薬。
- 前記外来性核酸が転写制御配列を含む、請求項14に記載の試薬。
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011519558A (ja) * | 2008-04-28 | 2011-07-14 | プレシジョン バイオサイエンシズ,インク. | 合理的に設計されたdna結合タンパク質とエフェクタードメインとの融合分子 |
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Non-Patent Citations (1)
Title |
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STRUCTURE, vol. 24, JPN6022032597, 2016, pages 862 - 873, ISSN: 0004844997 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114456235A (zh) * | 2022-02-24 | 2022-05-10 | 中国海洋大学 | 牙鲆T淋巴细胞表面标志分子CD8α抗体及其制备方法和应用 |
CN114456235B (zh) * | 2022-02-24 | 2023-05-16 | 中国海洋大学 | 牙鲆T淋巴细胞表面标志分子CD8α抗体及其制备方法和应用 |
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