JP2019208502A - Lifestyle-related disease improvement or prevention food composition - Google Patents

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JP2019208502A
JP2019208502A JP2019098377A JP2019098377A JP2019208502A JP 2019208502 A JP2019208502 A JP 2019208502A JP 2019098377 A JP2019098377 A JP 2019098377A JP 2019098377 A JP2019098377 A JP 2019098377A JP 2019208502 A JP2019208502 A JP 2019208502A
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隆司 藤田
Takashi Fujita
隆司 藤田
利孝 岡田
Toshitaka Okada
利孝 岡田
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Toyo Hakko Co Ltd
Ritsumeikan Trust
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Abstract

To provide a food composition that has an excellent action for improving or preventing lifestyle-related disease, action for improving or preventing liver and kidney fibrosis, action for improving liver function, and action for improving or preventing acne.SOLUTION: Provided is a food composition for improving or preventing lifestyle-related disease, food composition for improving or preventing liver and/or kidney fibrosis, food composition for improving liver function, and food composition for improving or preventing acne, containing at least one selected from the group consisting of hydroxy-isoflavone and salt thereof as an active ingredient.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、生活習慣病の改善又は予防用食品組成物、肝臓及び腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物、肝機能改善用食品組成物、並びにニキビの改善又は予防用食品組成物に関する。   The present invention relates to a food composition for improving or preventing lifestyle-related diseases, a food composition for improving or preventing fibrosis of the liver and kidneys, a food composition for improving liver function, and a food composition for improving or preventing acne. .

近年、食生活の欧米化により、脂肪摂取量が上昇し、脂質異常症、高血圧、糖尿病、肥満などの生活習慣病が増加している。一般的に、生活習慣病の発生や予後に関する要因として、生活習慣、遺伝、環境が挙げられる。そして、生活習慣としては、食生活、運動習慣、休養、喫煙、飲酒などが挙げられる。   In recent years, with the westernization of dietary habits, fat intake has increased, and lifestyle-related diseases such as dyslipidemia, hypertension, diabetes and obesity are increasing. In general, lifestyle factors, heredity, and environment are factors related to the occurrence and prognosis of lifestyle-related diseases. And lifestyle habits include eating habits, exercise habits, rest, smoking, drinking alcohol and the like.

特許文献1では、高濃度にイソフラボンを含む原料を発酵させることで、ヒドロキシイソフラボンを効率的に製造することができること、得られたヒドロキシイソフラボンは優れた抗グリケーション作用を奏することが報告されている。特許文献1で製造されたヒドロキシイソフラボンは、8位がヒドロキシル化されたダイゼイン、ゲニステイン、グリシテインなどのイソフラボンである。   In Patent Document 1, it is reported that hydroxyisoflavone can be efficiently produced by fermenting a raw material containing isoflavone at a high concentration, and that the obtained hydroxyisoflavone exhibits an excellent anti-glycation action. . The hydroxyisoflavone produced in Patent Document 1 is an isoflavone such as daidzein, genistein, or glycitein that is hydroxylated at the 8-position.

また、特許文献2では、このようなヒドロキシイソフラボンを含む発酵イソフラボンが、未発酵のイソフラボンと比べて顕著に優れた脱毛防止作用を示す上に、環境ホルモン作用を示さないことが報告されている。特許文献2では脱毛防止作用が主に調査されており、それ以外の効果については具体的には示されていない。   Patent Document 2 reports that fermented isoflavones containing such hydroxyisoflavones exhibit a markedly superior hair loss preventing action as compared to unfermented isoflavones and do not exhibit an environmental hormone action. Patent Document 2 mainly investigates the hair loss prevention action, and does not specifically show other effects.

また、非特許文献1には、大豆イソフラボンが糖尿病などの各種疾患に対する効果について記載されており、大豆イソフラボンに含まれるゲニステインがβ細胞増殖に対する作用、インスリン分泌に対する作用などの糖尿病に対する効果を有することが記載されている。しかしながら、一般的に、血清インスリン濃度の上昇は、「膵臓への負担増加」を意味する。   Non-Patent Document 1 describes the effect of soy isoflavone on various diseases such as diabetes, and genistein contained in soy isoflavone has an effect on diabetes such as an action on β-cell proliferation and an action on insulin secretion. Is described. However, in general, an increase in serum insulin concentration means “an increased burden on the pancreas”.

特許第5318339号公報Japanese Patent No. 5318339 特開2018−52928号公報JP-A-2018-52928

BIOMEDICAL REPORTS 1: 697-701, 2013BIOMEDICAL REPORTS 1: 697-701, 2013

本発明は、優れた生活習慣病の改善又は予防作用、肝臓及び腎臓の線維化の改善又は予防作用、肝機能改善作用、並びにニキビの改善又は予防作用を有する食品組成物を提供することを目的とする。   An object of the present invention is to provide a food composition having an excellent effect of improving or preventing lifestyle-related diseases, an effect of improving or preventing fibrosis of the liver and kidney, an effect of improving liver function, and an effect of improving or preventing acne. And

本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、ヒドロキシイソフラボンを含む発酵イソフラボンを、マウスに経口摂取させることで、高脂肪食による体重、血糖値、血清コレステロール値及び血清トリグリセリド値の上昇を抑制すること、更に糖尿病モデルマウスにおいて血糖値及びHbA1c値の上昇を抑制することを見出し、これは生活習慣病に対して著効を有することを示すものである。さらに、発酵イソフラボンにより肝臓及び腎臓の線維化が改善されることを見出した。また、マウスの肝機能に関わる血液検査結果から、発酵イソフラボンにより肝機能が改善されることを見出した。その上、発酵イソフラボンは、皮脂線細胞において炎症性サイトカインのTNFAの発現を抑制することが示されたので、これはニキビ(ざ瘡)に対して著効を有することを示すものである。   As a result of intensive studies to achieve the above object, the present inventors have orally ingested a fermented isoflavone containing hydroxyisoflavone into mice so that the body weight, blood glucose level, serum cholesterol level and serum triglyceride by high fat diet It was found that the increase of the blood glucose level and the increase of the blood glucose level and the HbA1c level were suppressed in the diabetes model mouse, and this shows that it has a significant effect on lifestyle-related diseases. Furthermore, it has been found that fermented isoflavones improve liver and kidney fibrosis. In addition, from the blood test results related to the liver function of mice, it was found that the liver function was improved by fermented isoflavones. In addition, fermented isoflavones have been shown to suppress the expression of the inflammatory cytokine TNFA in sebaceous cells, indicating that it has a marked effect on acne.

本発明は、これら知見に基づき、更に検討を重ねて完成されたものであり、次の生活習慣病の改善又は予防用食品組成物、肝臓及び/又は腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物、肝機能改善用食品組成物、並びにニキビの改善又は予防用食品組成物を提供するものである。   The present invention has been completed based on these findings, and has been completed. A food composition for improving or preventing the following lifestyle-related diseases, a food composition for improving or preventing fibrosis of the liver and / or kidneys. , A food composition for improving liver function, and a food composition for improving or preventing acne.

項1.下記式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とする生活習慣病の改善又は予防用食品組成物。 Item 1. A food composition for improving or preventing lifestyle-related diseases comprising at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by the following formulas (1) to (5) and salts thereof as an active ingredient.

項2.前記生活習慣病が、糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、肥満、及び
脂肪肝からなる群から選択される少なくとも1種である、項1に記載の食品組成物。
項3.式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とする肝臓及び/又は腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物。
項4.式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とする肝機能改善用食品組成物。
項5.式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とするニキビの改善又は予防用食品組成物。
項6.イソフラボン含有組成物の発酵物を有効成分とする、項1〜5のいずれか一項に記載の食品組成物。
Item 2. Item 2. The food composition according to Item 1, wherein the lifestyle-related disease is at least one selected from the group consisting of diabetes, insulin resistance, dyslipidemia, obesity, and fatty liver.
Item 3. A food composition for improving or preventing fibrosis of the liver and / or kidney, comprising at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts thereof as an active ingredient.
Item 4. A food composition for improving liver function comprising as an active ingredient at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts thereof.
Item 5. A food composition for improving or preventing acne comprising, as an active ingredient, at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts thereof.
Item 6. Item 6. The food composition according to any one of Items 1 to 5, wherein the fermented product of the isoflavone-containing composition is an active ingredient.

ヒドロキシイソフラボン及びこれを含む発酵イソフラボンは、顕著に優れた生活習慣病の改善又は予防作用、肝臓及び腎臓の線維化の改善又は予防作用、肝機能改善作用、並びにニキビの改善又は予防作用を有するので、生活習慣病の改善又は予防用食品組成物、肝臓及び/又は腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物、肝機能改善用食品組成物、並びにニキビの改善又は予防用食品組成物の有効成分として有用である。   Hydroxyisoflavones and fermented isoflavones containing them have remarkably excellent effects of improving or preventing lifestyle-related diseases, improving or preventing liver and kidney fibrosis, improving liver function, and improving or preventing acne. Effectiveness of food composition for improving or preventing lifestyle-related diseases, food composition for improving or preventing fibrosis of liver and / or kidney, food composition for improving liver function, and food composition for improving or preventing acne Useful as an ingredient.

その上、ヒドロキシイソフラボン及びこれを含む発酵イソフラボンは、炎症作用及び環境ホルモン様作用を示さないため安全性において優れている。また、ヒドロキシイソフラボン及びこれを含む発酵イソフラボンは、天然由来成分であるので安全性が高い。   Moreover, hydroxyisoflavones and fermented isoflavones containing them are excellent in safety because they do not show inflammatory effects and environmental hormone-like effects. Moreover, since hydroxy isoflavone and fermented isoflavone containing this are natural origin components, they are highly safe.

HFD試験におけるddYマウスの(A)体重推移、(B)血糖値推移、(C)血清トリグリセリド値推移、(D)血清コレステロール値推移を示すグラフである。n=5-7、データは平均値±標準誤差値である。It is a graph which shows (A) weight transition, (B) blood glucose level transition, (C) serum triglyceride level transition, (D) serum cholesterol level transition of ddY mice in the HFD test. n = 5-7, data are average values ± standard error values. HFD試験におけるddYマウスの剖検の結果を示す写真である。It is a photograph which shows the result of autopsy of the ddY mouse | mouth in a HFD test. HFD試験におけるddYマウスの肝臓の病理解析の結果を示す写真である。It is a photograph which shows the result of the pathological analysis of the liver of a ddY mouse | mouth in a HFD test. HFD試験におけるddYマウスの(A, B, C)脂肪組織の病理解析の結果を示す写真、(D)脂肪細胞直径(μm)を示すグラフである。直径測定は、1匹当たり異なる5枚の切片を用いて、1枚の切片から60〜100の細胞直径を計測し、求めた。*:P<0.05 vs HFD. データは平均±標準誤差値を示す。It is the photograph which shows the result of the pathological analysis of the (A, B, C) adipose tissue of the ddY mouse | mouth in a HFD test, (D) The graph which shows a fat cell diameter (micrometer). Diameter measurement was performed by measuring 60 to 100 cell diameters from one section using five different sections per animal. *: P <0.05 vs HFD. Data show mean ± standard error. HFD試験におけるddYマウスの肝臓の病理解析の結果(HE染色、アザン染色、PAS染色)を示す写真である。倍率は対物レンズの倍率を示す。It is a photograph showing the results (HE staining, Azan staining, PAS staining) of the pathological analysis of the liver of ddY mice in the HFD test. The magnification indicates the magnification of the objective lens. HFD試験におけるddYマウスの腎臓の病理解析の結果(アザン染色、PAS染色)を示す写真である。倍率は対物レンズの倍率を示す。It is a photograph showing the results of pathological analysis of kidneys of ddY mice in the HFD test (Azan staining, PAS staining). The magnification indicates the magnification of the objective lens. C57/BL6Nマウスの(A) HFD試験の体重推移、(B) OGTT試験の結果を示すグラフである。n=5、データは平均値±標準誤差値である。It is a graph which shows the weight transition of the (A) HFD test of a C57 / BL6N mouse, and (B) the result of an OGTT test. n = 5, data are mean ± standard error values. KK-Ayマウスの(A)体重推移、(B)血糖値推移、(C) HbA1c値推移を示すグラフである。n=5、データは平均値±標準誤差値である。It is a graph which shows (A) weight transition, (B) blood glucose level transition, and (C) HbA1c level transition of KK-Ay mice. n = 5, data are mean ± standard error values. 低容量ストレプトゾトシン(STZ)誘導糖尿病モデルマウスの(A)血糖値推移、(B)体重推移を示すグラフである。CRL-: STZ投与をしていないでCRF-1を給餌した群、CRL+: STZを投与しCRF-1を給餌した群、Unifine: STZを投与し2%Unifineを混餌したCRF-1を給餌した群。n=5、データは平均値±標準誤差値である。It is a graph which shows (A) blood glucose level transition and (B) weight transition of a low volume streptozotocin (STZ) induction diabetes model mouse. CRL-: group not fed STZ but fed CRF-1, CRL +: group fed STZ and fed CRF-1, Unifine: fed STRF and fed CRF-1 mixed with 2% Unifine group. n = 5, data are mean ± standard error values. 3T3-L1脂肪細胞をUnifineの存在下又は非存在下で分化条件に供し、経時的に顕微鏡観察した結果を示す写真である。n=6It is a photograph which shows the result of having used 3T3-L1 adipocyte for the differentiation condition in the presence or absence of Unifine, and having observed with the microscope over time. n = 6 SZ-95皮脂腺細胞のUnifine存在下又は非存在下における炎症性サイトカインTNFAのmRNA発現量を示すグラフである。n=6、データは平均値±標準誤差値である。It is a graph which shows the mRNA expression level of inflammatory cytokine TNFA in the presence or absence of Unifine of SZ-95 sebaceous gland cells. n = 6, data are mean ± standard error values. Glycolysis rateアッセイの結果を示すグラフである。CRL:コントロール、Iso:未発酵イソフラボン、Uni: Unifine。n=4、データは平均値±標準誤差値である。**:P<0.01 vs CRLIt is a graph which shows the result of Glycolysis rate assay. CRL: Control, Iso: Unfermented isoflavone, Uni: Unifine. n = 4, data are average values ± standard error values. **: P <0.01 vs CRL

以下、本発明について詳細に説明する。   Hereinafter, the present invention will be described in detail.

なお、本明細書において「含む(comprise)」とは、「本質的にからなる(essentially consist of)」という意味と、「のみからなる(consist of)」という意味をも包含する。   In the present specification, “comprise” includes the meaning of “essentially consist of” and the meaning of “consist of”.

本発明の生活習慣病の改善又は予防用食品組成物、肝臓及び/又は腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物、肝機能改善用食品組成物、並びにニキビの改善又は予防用食品組成物は、下記式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とすることを特徴とする。   Food composition for improving or preventing lifestyle-related diseases of the present invention, food composition for improving or preventing liver and / or kidney fibrosis, food composition for improving liver function, and food composition for improving or preventing acne Is characterized by having at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by the following formulas (1) to (5) and salts thereof as an active ingredient.

式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩
式(1)で表されるヒドロキシイソフラボンは、ダイゼインの誘導体であって、8位(A環の8位)炭素にヒドロキシル基を備える化合物である。
Hydroxyisoflavones represented by the formulas (1) to (5) and salts thereof Hydroxyisoflavones represented by the formula (1) are derivatives of daidzein, which are hydroxyl groups at the 8-position (8-position of the A ring) carbon. It is a compound provided with.

式(2)で表されるヒドロキシイソフラボンは、ゲニステインの誘導体であって、8位(A環の8位)炭素にヒドロキシル基を備える化合物である。   The hydroxyisoflavone represented by the formula (2) is a derivative of genistein, which is a compound having a hydroxyl group at the 8-position carbon (8-position of the A ring).

式(3)で表されるヒドロキシイソフラボンは、グリシテインの誘導体であって、8位(A環の8位)炭素にヒドロキシル基を備える化合物である。   The hydroxyisoflavone represented by the formula (3) is a derivative of glycitein and is a compound having a hydroxyl group at the 8-position (8-position of the A ring) carbon.

式(4)で表されるヒドロキシイソフラボンは、ダイゼインの誘導体であって、6位(A環の6位)炭素にヒドロキシル基を備える化合物である。   The hydroxyisoflavone represented by the formula (4) is a derivative of daidzein and is a compound having a hydroxyl group at the 6-position (6-position of the A ring) carbon.

式(5)で表されるヒドロキシイソフラボンは、ダイゼインの誘導体であって、3'位(B環の3位)炭素にヒドロキシル基を備える化合物である。   The hydroxyisoflavone represented by the formula (5) is a derivative of daidzein and is a compound having a hydroxyl group at the 3′-position (3-position of ring B) carbon.

上記のようなヒドロキシイソフラボンは、イソフラボン配糖体(以下では配糖体と称することもある)からイソフラボンアグリコン(以下ではアグリコンと称することもある)を生成し、更に、このアグリコンをヒドロキシル化して得ることができる。ここで、ダイジン、グリシチン、ゲニスチンなどはA環7位に糖が結合した配糖体であり、この配糖体から糖を解離させることでダイゼイン、ゲニステイン、グリシテインなどのアグリコンが生成する。本明細書におけるイソフラボン類とは、イソフラボン配糖体、イソフラボンアグリコン及びヒドロキシイソフラボンを意味する。   The hydroxyisoflavone as described above is obtained by generating an isoflavone aglycone (hereinafter also referred to as an aglycone) from an isoflavone glycoside (hereinafter also referred to as a glycoside), and further hydroxylating the aglycone. be able to. Here, daidzin, glycitin, genistin and the like are glycosides in which a sugar is bonded to the 7-position of the A ring, and aglycones such as daidzein, genistein, and glycitein are produced by dissociating the sugar from this glycoside. The isoflavones in the present specification mean isoflavone glycosides, isoflavone aglycones and hydroxyisoflavones.

式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボンの塩としては、例えば、ナトリウム、マグネシウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩;メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン等の有機塩基との塩;リジン、オルニチン、アルギニン等の塩基性アミノ酸との塩及びアンモニウム塩が挙げられる。当該塩は、酸付加塩であってもよく、かかる塩としては、具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸;ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、リンゴ酸、酒石酸、フマル酸、コハク酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等の有機酸;アスパラギン酸、グルタミン酸等の酸性アミノ酸との酸付加塩が挙げられる。また、式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボンには、その水和物、溶媒和物、結晶多形なども含まれる。   Examples of the salt of hydroxyisoflavone represented by the formulas (1) to (5) include inorganic salts such as sodium, magnesium, potassium, calcium and aluminum; salts with organic bases such as methylamine, ethylamine and ethanolamine; Examples thereof include salts with basic amino acids such as lysine, ornithine and arginine, and ammonium salts. The salt may be an acid addition salt. Specific examples of the salt include hydrochloric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid and other mineral acids; formic acid, acetic acid, Propionic acid, oxalic acid, malonic acid, malic acid, tartaric acid, fumaric acid, succinic acid, lactic acid, maleic acid, citric acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid and other organic acids; aspartic acid, glutamic acid and other acidic amino acids Examples include acid addition salts. The hydroxyisoflavones represented by the formulas (1) to (5) also include hydrates, solvates, crystal polymorphs, and the like.

本明細書において「式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種」(以下では、これを本発明のヒドロキシイソフラボンと称することもある)とは、式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及び式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボンの塩の10種類の化合物から選択される少なくとも1種の化合物のことを意味する。   In the present specification, “at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by the formulas (1) to (5) and salts thereof” (hereinafter, this may be referred to as the hydroxyisoflavone of the present invention). ) Means at least one compound selected from 10 kinds of compounds of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) Means that.

本発明における式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩としては、単離又は精製された状態でない物(粗精製物)、及び単離又は精製された物のいずれも使用することができる。   As the hydroxyisoflavones represented by the formulas (1) to (5) and salts thereof in the present invention, any of an isolated or purified product (crude product) and an isolated or purified product are used. Can be used.

本発明における式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩は、自家調製品又は市販品を問わず使用することができる。自家調製する方法をとしては、発酵により生合成する方法、及び化学的に合成する方法が挙げられる。本発明の式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩は、中でも、イソフラボン含有組成物を発酵させて製造することが好ましい。本発明では、式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩を含む、イソフラボン含有組成物の発酵物それ自体を使用することもできる。そのようなイソフラボン含有組成物の発酵物は、東洋発酵株式会社より「UNIFINE (登録商標)」として販売されている。   The hydroxyisoflavones and salts thereof represented by the formulas (1) to (5) in the present invention can be used regardless of whether they are self-prepared products or commercial products. Examples of the self-preparing method include a method of biosynthesis by fermentation and a method of chemical synthesis. The hydroxyisoflavones and salts thereof represented by the formulas (1) to (5) of the present invention are preferably produced by fermenting an isoflavone-containing composition. In the present invention, a fermented product of an isoflavone-containing composition containing the hydroxyisoflavones represented by the formulas (1) to (5) and salts thereof can be used. A fermented product of such an isoflavone-containing composition is sold as “UNIFINE (registered trademark)” by Toyo Fermentation Co., Ltd.

本発明におけるイソフラボン含有組成物は、イソフラボン類を含有する組成物のことであり、通常、イソフラボン配糖体及びイソフラボンアグリコン、特にイソフラボン配糖体を多く含有する。イソフラボン含有組成物に含まれるイソフラボン類の量は、特に制限されず、好ましくは10〜100質量%、より好ましくは25〜99質量%、更に好ましくは35〜90質量%、特に好ましくは40〜80質量%である。このようにイソフラボン含有組成物中のイソフラボン類の含有量が高い場合は、発酵によりヒドロキシイソフラボンを高濃度で得ることができる。   The isoflavone-containing composition in the present invention is a composition containing isoflavones, and usually contains a large amount of isoflavone glycosides and isoflavone aglycones, particularly isoflavone glycosides. The amount of the isoflavones contained in the isoflavone-containing composition is not particularly limited, preferably 10 to 100% by mass, more preferably 25 to 99% by mass, still more preferably 35 to 90% by mass, and particularly preferably 40 to 80%. % By mass. Thus, when the content of isoflavones in the isoflavone-containing composition is high, hydroxyisoflavone can be obtained at a high concentration by fermentation.

上記イソフラボン含有組成物としては、イソフラボン類が濃縮されて含有された植物抽出物が挙げられる。植物抽出物を得るための植物としては、豆科植物、バラ科植物、アヤメ科植物、桑科植物、ヒユ科植物などが挙げられ、これらの中では他の植物に比べてイソフラボン類の含有量が多いことから豆科植物が好ましい。   Examples of the isoflavone-containing composition include plant extracts containing concentrated isoflavones. Plants for obtaining plant extracts include leguminous plants, rose family plants, iris family plants, mulberry family plants, and amaranth family plants. Among them, the content of isoflavones compared to other plants Therefore, legumes are preferable.

イソフラボン含有組成物の発酵は、公知の方法、例えば、特許文献1(特許第5318339号公報)に記載の方法に従い実施することができる。   The fermentation of the isoflavone-containing composition can be carried out according to a known method, for example, the method described in Patent Document 1 (Japanese Patent No. 5318339).

本発明におけるイソフラボン含有組成物の発酵物としては、発酵により得られた状態のままの物、及び発酵後に抽出処理、濃縮処理、濾過処理、乾燥処理、滅菌処理、pH調整、脱臭処理、脱色処理等の処理を行った物のいずれも使用することができる。   As the fermented product of the isoflavone-containing composition in the present invention, a product as it is obtained by fermentation, and after fermentation, extraction treatment, concentration treatment, filtration treatment, drying treatment, sterilization treatment, pH adjustment, deodorization treatment, decolorization treatment Any of the processed materials can be used.

本発明のヒドロキシイソフラボン及びこれを含む発酵イソフラボンは、特許文献2(特開2018−52928号公報)に示されているように、炎症作用及び環境ホルモン様作用(性ホルモン作用、特にエストロゲン作用)を示さないため安全性において優れている。さらに、本発明のヒドロキシイソフラボン及びこれを含む発酵イソフラボンは、天然由来成分であるので安全性が高い。   The hydroxyisoflavone of the present invention and the fermented isoflavone containing the same have an inflammatory action and an environmental hormone-like action (sex hormone action, particularly estrogen action) as shown in Patent Document 2 (Japanese Patent Laid-Open No. 2018-52928). Since it is not shown, it is excellent in safety. Furthermore, since the hydroxyisoflavone of the present invention and the fermented isoflavone containing the same are naturally derived components, safety is high.

食品組成物としては哺乳動物(ヒトを含む)が摂取できるあらゆる飲食品が含まれ、例えば、乳製品;発酵食品(ヨーグルト、チーズ等);飲料類(コーヒー、ジュース、ココア、茶飲料、スポーツドリンク、栄養ドリンクのような清涼飲料、乳飲料、乳酸菌飲料、乳酸菌入り飲料、ヨーグルト飲料、炭酸飲料、日本酒、洋酒、果実酒のような酒等);スプレッド類(カスタードクリーム等);ペースト類(フルーツペースト等);洋菓子類(チョコレート、ドーナツ、パイ、シュークリーム、ガム、グミ、ゼリー、キャンデー、クッキー、ケーキ、プリン、ビスケット等);氷菓類(アイスクリーム、アイスキャンデー、シャーベット等);食品類(カレー、牛丼、雑炊、味噌汁、スープ、ミートソース、パスタ、漬物、ジャム、ハム、ソーセージ、ベーコン等);調味料類(ドレッシング、ふりかけ、旨味調味料、スープの素、味噌、醤油、ソース、ケチャップ、オイスターソース等)などが挙げられる。   The food composition includes all foods and drinks that can be consumed by mammals (including humans), such as dairy products; fermented foods (yogurt, cheese, etc.); beverages (coffee, juice, cocoa, tea drinks, sports drinks) , Soft drinks such as energy drinks, milk drinks, lactic acid bacteria drinks, drinks containing lactic acid bacteria, yogurt drinks, carbonated drinks, sakes such as sake, western liquor, fruit liquor); spreads (such as custard cream); pastes (fruit) Pastes (chocolate, donut, pie, cream puff, gum, gummi, jelly, candy, cookies, cake, pudding, biscuits, etc.); Ice confectionery (ice cream, popsicle, sorbet, etc.); Foods (curry) , Beef bowl, miso soup, miso soup, soup, meat sauce, pasta, pickles, jam, ham, sausage, bacon, etc.) Seasonings (dressing, sprinkle, umami seasoning, soup stock, miso, soy sauce, sauce, ketchup, oyster sauce, etc.).

食品組成物の製法も特に限定されず、適宜公知の方法に従うことができる。   The production method of the food composition is not particularly limited, and can be appropriately followed by a known method.

食品組成物としては、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、サプリメント、保健用食品、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品なども挙げられる。サプリメントとして使用する際の投与単位形態については特に限定されず適宜選択できるが、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、液剤、散剤等が挙げられる。   Examples of food compositions include health foods, functional foods, nutritional supplements, supplements, health foods, foods for specified health use, functional nutrition foods, and functional label foods. The dosage unit form for use as a supplement is not particularly limited and may be appropriately selected. Examples thereof include tablets, capsules, granules, liquids, and powders.

また、食品組成物としては、生活習慣病の改善又は予防作用、肝臓及び腎臓の線維化の改善又は予防作用、肝機能改善作用、及びニキビの改善又は予防作用を付与する添加剤についての意味も包含するものである。   In addition, as a food composition, there is also a meaning for an additive that imparts an action for improving or preventing lifestyle-related diseases, an action for improving or preventing fibrosis of the liver and kidney, an action for improving liver function, and an action for improving or preventing acne. It is included.

食品組成物には、必要に応じて、賦形剤、ビタミン類、ミネラル類、フラボノイド類、キノン類、ポリフェノール類、アミノ酸、核酸、必須脂肪酸、清涼剤、結合剤、甘味料、崩壊剤、滑沢剤、着色料、香料、安定化剤、防腐剤、徐放調整剤、界面活性剤、光沢剤、溶解剤、湿潤剤等を配合することができる。   The food composition may contain excipients, vitamins, minerals, flavonoids, quinones, polyphenols, amino acids, nucleic acids, essential fatty acids, cooling agents, binders, sweeteners, disintegrants, lubricants as necessary. A lot of additives, coloring agents, fragrances, stabilizers, preservatives, sustained release regulators, surfactants, brighteners, solubilizers, wetting agents and the like can be blended.

食品組成物に含まれる本発明のヒドロキシルイソフラボンの割合は、例えば、0.01〜99質量%、0.1〜80質量%、1〜70質量%などが挙げられる。   Examples of the proportion of the hydroxyl isoflavone of the present invention contained in the food composition include 0.01 to 99% by mass, 0.1 to 80% by mass, and 1 to 70% by mass.

食品組成物の摂取量は、摂取者の体重、年齢、性別、症状などの種々の条件に応じて適宜設定することができる。   The intake amount of the food composition can be appropriately set according to various conditions such as the body weight, age, sex, and symptoms of the intake person.

後述する実施例で示すように、本発明者らは、マウスに本発明のヒドロキシイソフラボンを経口摂取させることで、高脂肪食による体重、血糖値、血清コレステロール値及び血清トリグリセリド値の上昇を抑制し、更に糖尿病モデルマウスにおいて血糖値及びHbA1c値の上昇を抑制することを見出したことから、生活習慣病に対する改善又は予防作用が期待できる。さらに、本発明のヒドロキシイソフラボンの摂取により肝臓及び腎臓の線維化の改善が観察された。また、マウスの糖負荷試験では、本発明のヒドロキシイソフラボンの摂取により血糖値の低下が観察されたことから、インスリン抵抗性に対する効果が期待できる。さらに、マウスの肝機能及び脂質代謝に関わる血液検査結果から、本発明のヒドロキシイソフラボンによる肝機能及び脂質代謝の改善が観察された。その上、本発明のヒドロキシイソフラボンは、皮脂線細胞において炎症性サイトカインのTNFA (TNF-α)の発現を抑制することを見出したことから、ニキビ(ざ瘡)に対する改善又は予防作用が期待できる。   As shown in the examples described below, the present inventors orally ingested the hydroxyisoflavone of the present invention in mice, thereby suppressing an increase in body weight, blood glucose level, serum cholesterol level and serum triglyceride level due to a high fat diet. Furthermore, since it was found that the increase in blood glucose level and HbA1c level was suppressed in diabetes model mice, an improvement or prevention action against lifestyle-related diseases can be expected. In addition, improvement of liver and kidney fibrosis was observed by ingestion of the hydroxyisoflavone of the present invention. Moreover, in the glucose tolerance test of mice, a decrease in blood glucose level was observed by ingestion of the hydroxyisoflavone of the present invention, so that an effect on insulin resistance can be expected. Furthermore, the improvement of liver function and lipid metabolism by the hydroxyisoflavone of the present invention was observed from blood test results related to liver function and lipid metabolism in mice. Moreover, since the hydroxyisoflavone of the present invention has been found to suppress the expression of the inflammatory cytokine TNFA (TNF-α) in sebaceous cells, it can be expected to improve or prevent acne (acne).

そのため、本発明のヒドロキシイソフラボンは、顕著に優れた生活習慣病の改善又は予防作用、肝臓及び腎臓の線維化の改善又は予防作用、肝機能改善作用、並びにニキビの改善又は予防作用を有するので、生活習慣病の改善又は予防用食品組成物、肝臓及び/又は腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物、肝機能改善用食品組成物、並びにニキビの改善又は予防用食品組成物の有効成分として好適に使用することができる。   Therefore, the hydroxyisoflavone of the present invention has a markedly excellent improvement or prevention of lifestyle-related diseases, improvement or prevention of fibrosis of the liver and kidney, improvement of liver function, and improvement or prevention of acne. Active ingredient of food composition for improving or preventing lifestyle diseases, food composition for improving or preventing fibrosis of liver and / or kidney, food composition for improving liver function, and food composition for improving or preventing acne Can be suitably used.

ここで、生活習慣病としては、特に制限されず、例えば、糖尿病(特に2型糖尿病)、インスリン抵抗性、脂質異常症、肥満、脂肪肝などが挙げられる。   Here, the lifestyle-related diseases are not particularly limited, and examples thereof include diabetes (particularly type 2 diabetes), insulin resistance, dyslipidemia, obesity, fatty liver and the like.

以下、本発明を更に詳しく説明するため実施例を挙げる。しかし、本発明はこれら実施例等になんら限定されるものではない。   Examples are given below to illustrate the present invention in more detail. However, the present invention is not limited to these examples.

以下の実験で使用するUnifine (東洋発酵株式会社)は、イソフラボンを含む大豆エキスを麹菌で発酵した発酵素材であり、本発明の8-OH体イソフラボンを7.7%含有する物である。   Unifine (Toyo Fermentation Co., Ltd.) used in the following experiments is a fermentation material obtained by fermenting soybean extract containing isoflavone with koji mold, and contains 7.7% of the 8-OH isoflavone of the present invention.

<実験方法>
1.高脂肪食(HFD)試験
Unifineは、日本クレア株式会社(Tokyo, Japan)に依頼し、HFD-32に2%の濃度で混餌した。血糖値は、ニプロフリースタイルフリーダムライト(Nipro, Osaka, Japan)を用いて測定した。血清はヘマトクリット管を用いて血液を採取し、12,000rpm にて分離後、コレステロールワコー・トリグリセリドワコー(FUJIFILM Wako Pure Chemical, Osaka, Japan)を用いて、経時的に測定した。糖負荷試験(OGTT: oral glucose tolerancetest)は、同様に6週間のHFD負荷を行った後、300 mg/mlグルコースを100μl経口投与することにより行い、継時的に上述の血糖値測定を行った。
<Experiment method>
1. High fat diet (HFD) test
Unifine was commissioned by Japan Claire Co., Ltd. (Tokyo, Japan) and mixed with HFD-32 at a concentration of 2%. The blood glucose level was measured using Nipro Freestyle Freedom Light (Nipro, Osaka, Japan). Serum was collected using a hematocrit tube, separated at 12,000 rpm, and then measured over time using cholesterol wako triglyceride wako (FUJIFILM Wako Pure Chemical, Osaka, Japan). The glucose tolerance test (OGTT: oral glucose tolerance test) was similarly carried out by orally administering 300 mg / ml glucose after 100 weeks of HFD loading, and the blood glucose level was measured continuously. .

2.KK-Ayマウス試験
8週齢雄KK-Ayマウスは、日本クレア株式会社(Tokyo, Japan)より搬入した。1週間の馴化の後、普通食(CRF-1:オリエンタル酵母株式会社)を対照群として、CRF-1に2%のUnifineを混餌した試料を連日8週間摂取させ、体重及び平常時血糖値を測定した。HbA1c値は、8週間経過後、麻酔下で心採血を行い、抗凝固剤として10%EDTAを500μlの血液に対して10μl添加し、冷蔵保存した。これらのサンプルは、株式会社オリエンタルバイオサービスに依頼し、HbA1c値を測定した。
2. KK-Ay mouse test
Eight-week-old male KK-Ay mice were transferred from Nippon Claire Co., Ltd. (Tokyo, Japan). After acclimation for 1 week, with a normal diet (CRF-1: Oriental Yeast Co., Ltd.) as a control group, a sample of CRF-1 mixed with 2% Unifine was ingested daily for 8 weeks, and body weight and normal blood glucose level were measured. It was measured. Regarding the HbA1c value, after 8 weeks, heart blood was collected under anesthesia, 10 μl of 10% EDTA was added as an anticoagulant to 500 μl of blood, and stored refrigerated. These samples were requested from Oriental Bio Service Co., Ltd., and HbA1c values were measured.

3.低容量ストレプトゾトシン(STZ)誘導糖尿病モデルマウス試験
個体1匹あたり、100 mg/kgの濃度で15週齢BL6マウスにストレプトゾトシンを腹腔内注射した。平常時血糖値が300 mg/dl以上になることで、糖尿病の病態が形成されたと判断した。普通食(CRF-1)を対照群として、CRF-1に2%のUnifineを混餌した試料を連日摂取させ、体重及び平常時血糖値を測定した。
3. Low volume streptozotocin (STZ) -induced diabetes model mouse test Streptozotocin was injected intraperitoneally into BL6 mice at 15 weeks of age at a concentration of 100 mg / kg per individual. It was judged that a diabetic condition was formed when the normal blood glucose level was 300 mg / dl or higher. Using a normal diet (CRF-1) as a control group, a sample of CRF-1 mixed with 2% Unifine was ingested every day, and body weight and normal blood glucose level were measured.

4.3T3-L1脂肪細胞分化試験
マウス脂肪細胞前駆細胞は、10%牛胎児血清(FCS)及びペニシリン・ストレプトマイシン・アムホテリシンB (抗生物質溶液)を含むDMEMにて培養を行った。脂肪細胞への分化は、10μg/mlインスリン、2.5μMデキサメタゾン、10μg/ml 3-イソブチル-1-メチルキサンチン(IBMX)を終濃度として加えた培地に、40μg/mlのUnifineを含むように添加し、隔日に培地を交換して、経過観察を行った。
4. 3T3-L1 Adipocyte Differentiation Test Mouse adipocyte progenitor cells were cultured in DMEM containing 10% fetal calf serum (FCS) and penicillin / streptomycin / amphotericin B (antibiotic solution). For differentiation into adipocytes, add 10 μg / ml insulin, 2.5 μM dexamethasone, 10 μg / ml 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX) as a final concentration to contain 40 μg / ml Unifine. The culture medium was changed every other day and the follow-up was performed.

5.SZ-95皮脂腺細胞分化試験
SZ-95:ヒト皮脂腺細胞株は、デッサウ医療センター(ドイツ)から輸入し、Sebomed basal medium (Biochrom, Berlin, Germany)に、10%FCS、抗生物質溶液、ヒト組換え型EGF (Peprotech)(終濃度:5 ng/ml)を添加して培養した。10μg/ml大腸菌LPS (ナカライテスク株式会社, Kyoto, Japan)の刺激の有無の30分前に、40μg/mlのUnifineを含むように添加し、LPS添加の24時間後に、細胞をセパゾール(RNA抽出液)で可溶化した。
5. SZ-95 Sebaceous gland cell differentiation test
SZ-95: Human sebaceous gland cell line was imported from Dessau Medical Center (Germany), and sebomed basal medium (Biochrom, Berlin, Germany) was imported into 10% FCS, antibiotic solution, human recombinant EGF (Peprotech) (final). Concentration: 5 ng / ml) was added and cultured. 10 μg / ml E. coli LPS (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan) was added 30 minutes before or after stimulation to contain 40 μg / ml Unifine, and cells were separated by Sephazol (RNA extraction) 24 hours after LPS addition. Solution).

6.定量的PCR (qPCR)
常法によりtotal RNAを調製し、1 gを逆転写反応した。次に、Piko real system (Thermo fisher Scientific)を用いて、定量的PCR解析を行った。用いたプライマーペアは以下のとおりである。
hTNFA
5'-ATGAGCACTGAAAGCATGATCC-3' (配列番号1)
5'-GAGGGCTGATTAGAGAGAGGTC-3' (配列番号2)
hGAPDH
5'-ACCCACTCCTCCACCTTTG-3' (配列番号3)
5'-CTCTTGTGCTCTTGCTGGG-3' (配列番号4)
6). Quantitative PCR (qPCR)
Total RNA was prepared by a conventional method, and 1 g was reverse-transcribed. Next, quantitative PCR analysis was performed using Piko real system (Thermo fisher Scientific). The primer pairs used are as follows.
hTNFA
5'-ATGAGCACTGAAAGCATGATCC-3 '(SEQ ID NO: 1)
5'-GAGGGCTGATTAGAGAGAGGTC-3 '(SEQ ID NO: 2)
hGAPDH
5'-ACCCACTCCTCCACCTTTG-3 '(SEQ ID NO: 3)
5'-CTCTTGTGCTCTTGCTGGG-3 '(SEQ ID NO: 4)

7.フラックスアナライザー試験
C2C12細胞は、10%牛胎仔血清(fetal bovine serum: FBS)及び抗生物質を含むhigh glucose DMEM(ナカライテスク株式会社)により継代しながら培養を行った。
7). Flux analyzer test
C2C12 cells were cultured while being passaged with high glucose DMEM (Nacalai Tesque) containing 10% fetal bovine serum (FBS) and antibiotics.

専用の24穴プレートに30,000細胞の濃度でC2C12細胞を播種し、培養を行った。20μg/mlのUnifine (発酵イソフラボン)又は未発酵イソフラボンの存在下で、C2C12細胞を48時間前処理した。その後、細胞は、10 mMグルコース、1 mMピルビン酸、及び2 mMグルタミンが添加されたシーホース培地を用いてインキュベートした。Rotenone (Rot:Complex I阻害薬)、Antimycin A (AA:Complex III阻害薬)、2-deoxyglucose (2-DG:解糖系阻害薬)をそれぞれ終濃度1μM (Rot)、1μM (AA)、10 mM (2-DG)となるように調製し、Glycolysis rate assay kit用にプログラムしてフラックスアナライザー(Agilent Technologies)により解析を行った。   C2C12 cells were seeded at a concentration of 30,000 cells in a dedicated 24-well plate and cultured. C2C12 cells were pretreated for 48 hours in the presence of 20 μg / ml Unifine (fermented isoflavone) or unfermented isoflavone. The cells were then incubated with Seahorse medium supplemented with 10 mM glucose, 1 mM pyruvate, and 2 mM glutamine. Rotenone (Rot: Complex I inhibitor), Antimycin A (AA: Complex III inhibitor), 2-deoxyglucose (2-DG: glycolytic inhibitor), respectively, at final concentrations of 1 μM (Rot), 1 μM (AA), 10 Prepared to be mM (2-DG), programmed for Glycolysis rate assay kit, and analyzed with a flux analyzer (Agilent Technologies).

8.統計処理
有意差の検定はstudent's unpaird t-testを用いて、多検体比較はDunnet-test又はTukey-testを用いた。p<0.05の場合は有意であると判定した。
8). Statistical processing Student's unpaired t-test was used for the test of significant difference, and Dunnet-test or Tukey-test was used for multi-sample comparison. When p <0.05, it was determined to be significant.

<結果>
1.HFD試験
HFD試験の結果を図1〜4及び表1に示す。
<Result>
1. HFD test
The results of the HFD test are shown in FIGS.

HFD群は、普通食を給餌したNormal Diet:ND群に比べ、明確に体重増加、並びに平常時血糖値、平常時血清トリグリセリド値、及び血清コレステロール値のいずれのパラメーターも時間経過とともに増加したのに対して、HFDに混餌した2% Unifine (以下、HFD+Unifine群)は、顕著に体重増加を防止し、各パラメーターにおいて良好な成績を示した(図1)。   Compared to the Normal Diet: ND group fed the normal diet, the HFD group clearly gained weight, and the parameters of normal blood glucose, normal serum triglyceride, and serum cholesterol increased over time. On the other hand, 2% Unifine (hereinafter referred to as HFD + Unifine group) fed with HFD significantly prevented weight gain and showed good results in each parameter (FIG. 1).

また、それぞれの餌で6週間飼育した後、剖検した。その結果、体重に比例するように、HFD群ではND群に比べて明らかに内臓脂肪が形成されていたのに対して、HFD+Unifine群では腸間膜脂肪組織及び精巣上体脂肪組織のいずれも縮小していた(図2)。   In addition, each food was reared for 6 weeks and then necropsied. As a result, the visceral fat was clearly formed in the HFD group as compared with the ND group as compared with the body weight, whereas in the HFD + Unifine group, either the mesenteric adipose tissue or the epididymal adipose tissue. (Figure 2).

6週間のHFD試験を行った後、肝臓の一部は、病理解析に供した。ND群は正常な組織像を示したのに対して(図3A、D、G)、HFD群は肝組織内に白抜けした領域(脂肪)を多領域に観察した(図3B、E、H)。これに対し、HFD+Unifine群は、ND群と同様、ほぼ正常な組織像を認めた(図3C、F、I)。   After 6 weeks of HFD testing, a portion of the liver was subjected to pathological analysis. The ND group showed normal tissue images (FIGS. 3A, 3D, 3G), while the HFD group observed white areas (fats) in the liver tissue in multiple areas (FIGS. 3B, 3E, 3H). ). In contrast, in the HFD + Unifine group, almost normal tissue images were recognized as in the ND group (FIGS. 3C, F, and I).

6週間のHFD試験を行った後、脂肪組織の一部は、病理解析に供した。ND群は正常な組織像を示したのに対して(図4A)、HFD群は肥大化した脂肪細胞を多領域に観察した(図4B)。これに対し、HFD+Unifine群は、ND群ほどは改善していなかったが、脂肪細胞の直径測定試験により、有意に小型化した(図4C、D)。   After 6 weeks of HFD testing, a portion of the adipose tissue was subjected to pathological analysis. The ND group showed normal histology (FIG. 4A), whereas the HFD group observed enlarged adipocytes in multiple regions (FIG. 4B). In contrast, the HFD + Unifine group did not improve as much as the ND group, but was significantly reduced in size by the fat cell diameter measurement test (FIGS. 4C and 4D).

また、病理解析に供した肝臓の一部について、HE染色、アザン染色及びPSA染色を行った(図5)。HFD群において、アザン染色により、全体的に青色に染まっており、コラーゲンなどの膠原繊維質が増加していると考えられる。これに対して、HFD+Unifine群は青色に染色されていなかった。PAS染色は、グリコーゲンが染色されており、HFD群において、濃く染色された部分がまだらになり、薄く染色される縞状の像が認められ、HFD+Unifine群ではそれは認められなかった。   Moreover, HE staining, Azan staining, and PSA staining were performed on a part of the liver subjected to pathological analysis (FIG. 5). In the HFD group, it is dyed blue overall due to Azan staining, and it is thought that collagen fibers such as collagen are increasing. In contrast, the HFD + Unifine group was not stained blue. In PAS staining, glycogen was stained, and in the HFD group, the darkly stained portion became mottled, and a striped image that was lightly stained was observed, but not in the HFD + Unifine group.

腎臓の一部についても、病理解析に供し、アザン染色及びPAS染色を行った(図6)。HFD群において、アザン染色により、腎皮質側の腎糸球体が濃青色に染色されていたが、これはHFD+Unifine群においては観察されなかった。また、PAS染色から、HFD群のみ薄く染色された。   A part of the kidney was also subjected to pathological analysis and subjected to Azan staining and PAS staining (FIG. 6). In the HFD group, renal glomeruli on the renal cortex side were stained dark blue by Azan staining, but this was not observed in the HFD + Unifine group. Moreover, only the HFD group was stained lightly from PAS staining.

剖検時に心採血を行い、肝機能マーカーと脂質代謝マーカーについて、血液検査を行った。その結果、各肝機能検査値及び脂質代謝検査値は、HFDによって大きく悪化し、そこへUnifineが加わったことで大きく改善した(表1)。   Cardiac blood was collected at necropsy, and blood tests were performed for liver function markers and lipid metabolism markers. As a result, each liver function test value and lipid metabolism test value were greatly deteriorated by HFD, and it was greatly improved by the addition of Unifine (Table 1).

2.OGTT試験
上記HFD試験の結果から、発酵イソフラボンが抗糖尿病作用を有することが強く示唆されたので、次にOGTT試験を行った。結果を図7に示す。
2. OGTT Test Since the results of the above HFD test strongly suggested that fermented isoflavones have an anti-diabetic action, the OGTT test was performed next. The results are shown in FIG.

その結果、異なる2つのマウス種(ddYとC57/BL6N)で、同様にHFDは体重増加を示したのに対し、HFD+Unifine群は有意に体重増加を予防した(図7A)。この条件下で、Unifineは耐糖能を示し、糖負荷後30分の血糖値の最高血中濃度、及びその後の速やかな血糖値の低下を示した(図7B)。   As a result, in two different mouse species (ddY and C57 / BL6N), HFD similarly showed an increase in body weight, whereas the HFD + Unifine group significantly prevented an increase in body weight (FIG. 7A). Under this condition, Unifine showed glucose tolerance, showing a maximum blood glucose level 30 minutes after glucose loading, and then a rapid decrease in blood glucose level (FIG. 7B).

3.KK-Ayマウス試験
次に、2型糖尿病モデルであるKK-Ayマウスを用いて、Unifineの効果を調べた。Unifineは、通常食:CRF-1に2%の濃度で混餌し、8週間飼育した。結果を図8に示す。
3. KK-Ay mouse test Next, the effect of Unifine was examined using a KK-Ay mouse, which is a type 2 diabetes model. Unifine was fed on a normal diet: CRF-1 at a concentration of 2% and raised for 8 weeks. The results are shown in FIG.

KK-Ayマウスは、CRF-1により体重増加を認めたのに対し、Unifineを混餌したCRF-1で飼育すると、その増加は穏やかになった(図8A)。また、経時的に平常時血糖値を測定したところ、およそ1週間経過後ほどから顕著にCRF-1で飼育したマウスは高血糖を示したのに対し、Unifineを混餌したCRF-1で飼育するとほぼ200 mg/dl以下で推移した(図8B)。また、およそ1ヶ月前の血糖状態を反映するHbA1c値は、Unifineにより顕著に抑制された(図8C)。   In KK-Ay mice, weight gain was observed with CRF-1, whereas when bred with CRF-1 fed with Unifine, the increase became mild (FIG. 8A). In addition, when the normal blood glucose level was measured over time, the mice bred with CRF-1 markedly after about 1 week showed hyperglycemia, whereas when bred with CRF-1 mixed with Unifine, It changed at 200 mg / dl or less (FIG. 8B). Moreover, the HbA1c value reflecting the blood glucose state about one month ago was remarkably suppressed by Unifine (FIG. 8C).

4.低容量ストレプトゾトシン誘導糖尿病モデルマウス試験
低容量ストレプトゾトシン誘導糖尿病モデルマウスを用いて、Unifineの効果を調べた。Unifineは、通常食:CRF-1に2%の濃度で混餌し飼育した。結果を図9に示す。
4). Low Volume Streptozotocin-Induced Diabetes Model Mouse Test The effect of Unifine was examined using a low volume streptozotocin-induced diabetes model mouse. Unifine was fed with a normal diet: CRF-1 at a concentration of 2%. The results are shown in FIG.

経時的に平常時血糖値を測定したところ、STZ投与しCRF-1で飼育したマウスは高血糖を示したのに対し、STZ投与しUnifineを混餌したCRF-1で飼育すると血糖値は低下していた(図9A)。また、全ての群で64日間(およそ9週間)体重減少が認められないので、2型糖尿病と判断された(図9B)。   Normal blood glucose levels were measured over time. STZ-administered mice bred with CRF-1 showed hyperglycemia, whereas STZ-administered CRF-1 mixed with Unifine decreased blood glucose levels. (FIG. 9A). Moreover, since no weight loss was observed in all groups for 64 days (approximately 9 weeks), it was judged as type 2 diabetes (FIG. 9B).

5.培養細胞へのUnifineの効果
脂肪細胞分化試験及び皮脂腺細胞分化試験を行った。その結果を図10及び11に示す。
5. Effect of Unifine on cultured cells An adipocyte differentiation test and a sebaceous gland cell differentiation test were performed. The results are shown in FIGS.

脂肪細胞分化系では、Unifineは脂肪細胞分化を抑制した(図10)。そこで、皮脂腺細胞の炎症モデルを用いて調べたところ、LPSによって炎症性サイトカインであるTNFAの発現が著しく亢進し、これに対してUnifineは顕著に抑制作用を示した(図11)。   In the adipocyte differentiation system, Unifine suppressed adipocyte differentiation (FIG. 10). Then, when examined using an inflammation model of sebaceous gland cells, the expression of TNFA, which is an inflammatory cytokine, was remarkably increased by LPS, whereas Unifine showed a markedly inhibitory action (FIG. 11).

6.Glycolysis rateアッセイ
Glycolysis rateアッセイを行った。その結果を図12に示す。
6). Glycolysis rate assay
Glycolysis rate assay was performed. The result is shown in FIG.

Basal Glycolysisは、未発酵イソフラボンでは影響がなく、発酵イソフラボンにおいてのみ、ECARの上昇が認められ、glycoPER値は有意に亢進していた。また、Compensatory GlycolysisのglycoPER値も発酵イソフラボンにおいてのみ有意に亢進していた。   Basal Glycolysis had no effect on unfermented isoflavones, only in fermented isoflavones, an increase in ECAR was observed, and the glycoPER value was significantly increased. In addition, the glycoPER value of Compensatory Glycolysis was significantly increased only in fermented isoflavones.

Claims (6)

下記式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とする生活習慣病の改善又は予防用食品組成物。
A food composition for improving or preventing lifestyle-related diseases comprising at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by the following formulas (1) to (5) and salts thereof as an active ingredient.
前記生活習慣病が、糖尿病、インスリン抵抗性、脂質異常症、肥満、及び脂肪肝からなる群から選択される少なくとも1種である、請求項1に記載の食品組成物。   The food composition according to claim 1, wherein the lifestyle-related disease is at least one selected from the group consisting of diabetes, insulin resistance, dyslipidemia, obesity, and fatty liver. 式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とする肝臓及び/又は腎臓の線維化の改善又は予防用食品組成物。   A food composition for improving or preventing fibrosis of the liver and / or kidney, comprising at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts thereof as an active ingredient. 式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とする肝機能改善用食品組成物。   A food composition for improving liver function comprising as an active ingredient at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts thereof. 式(1)〜(5)で表されるヒドロキシイソフラボン及びそれらの塩からなる群から選択される少なくとも1種を有効成分とするニキビの改善又は予防用食品組成物。   A food composition for improving or preventing acne comprising, as an active ingredient, at least one selected from the group consisting of hydroxyisoflavones represented by formulas (1) to (5) and salts thereof. イソフラボン含有組成物の発酵物を有効成分とする、請求項1〜5のいずれか一項に記載の食品組成物。   The food composition according to any one of claims 1 to 5, comprising a fermented product of an isoflavone-containing composition as an active ingredient.
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