JP2018523153A - 構造化照明イメージを生成するためのシステムおよび方法 - Google Patents
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Abstract
Description
蛍光顕微鏡は、反射および吸収の代わりに、またはこれに加えて、蛍光を用いて有機または無機物質の特性を調べるのに使用される光学顕微鏡である。蛍光顕微鏡は、特定の波長の光を照射されたときに、特定の物質が可視光として検出可能なエネルギーを放射する現象に基づく。サンプルは、その自然の形態が蛍光発光性である(クロロフィルのような)か、蛍光染色で処理されるかのいずれかで有り得る。
Claims (22)
- 蛍光イメージングシステムにおいて取得される合成画像を生成する方法であって、
全合成共焦点画像を構築するために必要な、ピンホールマスクのサンプルに対する物理的位置を判定することと、
前記判定した物理的位置に対するランダム化された順序を制御モジュールで生成することと、
前記ランダム化された順序で前記判定した物理的位置にフォトマスクまたは前記サンプルを、前記制御モジュールの制御下で移動ステージを用いて移動することと、
前記サンプルを前記フォトマスクを介して励起光を用いて照明することと、
一組のデータポイントを生成するために、前記物理的位置のそれぞれにおいてセンサを用いて複数の画像をキャプチャすることと、
前記ランダム化された順序を用いて前記一組のデータポイントに基づいて合成画像を生成して、前記データポイントのうちの少なくともいくつかの輝度を測定することと、
前記一組のデータポイントのいくつかの前記輝度を、生成された画像における特定の観察されたイメージング効果を除去するために、このような特定の観察されたイメージング効果のモデルに基づいて調整することと、を含む方法。 - 前記複数の画像をキャプチャすることは、同一のキャプチャ設定を用いて前記複数の画像のそれぞれをキャプチャすることを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記キャプチャされた画像において背景エネルギーから信号エネルギーを識別することを更に含む、請求項1に記載の方法。
- 前記データポイントのうちの少なくともいくつかの前記輝度を測定することは、前記キャプチャプロセスの別個のステップにおいて前記データポイントの信号強度の低下を測定することを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記モデルは時間関数としての相対的輝度の曲線であり、前記データポイントのうちのいくつかの前記輝度を調整することは、前記曲線を前記データポイントに適合させることを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記観察されたイメージング効果は、蛍光退色を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記複数の画像をキャプチャすることは、電荷結合素子(CCD)またはCMOS素子を用いて前記複数の画像をキャプチャすることを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記複数の画像をキャプチャすることは、共焦点ピンホールまたはマスクの助けなしに、前記センサを用いて前記複数の画像をキャプチャすることを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記フォトマスクを移動することは、モータを用いて前記フォトマスクを移動することを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記モデルを前記複数の画像の一部のみに関連付けられたデータポイントに適用し、前記複数の画像の他のデータポイントに近似補正を行うことを更に含む、請求項1に記載の方法。
- 構造化照明イメージングシステムであって、
フォトマスクと、
サンプルの全合成画像を構築するために必要な、フォトマスクの前記サンプルに対する物理的位置を判定し、前記判定した物理的位置に対するランダム化された順序を生成するよう構成された制御モジュールと、
前記フォトマスクを介して励起光を用いて前記サンプルを照明するよう構成された照明源と、
前記制御モジュールによって生成された前記ランダム化された順序に従って前記フォトマスクを移動するよう構成された1つ以上のモータと、
前記サンプルの複数の画像をキャプチャして一組のデータポイントを生成するよう構成されたセンサと、
前記ランダム化された順序を用いて、前記一組のデータポイントに基づいて合成画像を生成するよう構成され、前記データポイントのうちの少なくともいくつかの輝度を測定し、生成された画像における特定の観察されたイメージング効果を除去するために、このような特定の観察されたイメージング効果のモデルに基づいて前記データポイントのうちのいくつかの前記輝度を調整する、画像生成モジュールと、を備える、システム。 - 前記同一のキャプチャ設定を用いて、前記複数の画像のそれぞれがキャプチャされる、請求項11に記載のシステム。
- 前記画像生成モジュールは、前記キャプチャされた画像における背景エネルギーから信号エネルギーを識別するよう構成される、請求項11に記載のシステム。
- 前記データポイントのうちの少なくともいくつかの前記輝度を測定することは、前記キャプチャプロセスの別個のステップにおいて前記データポイントの信号強度の低下を測定することを含む、請求項11に記載のシステム。
- 前記モデルは時間関数としての相対的輝度の曲線であり、前記画像生成モジュールは、前記曲線を前記データポイントに適合させることで前記データポイントのうちのいくつかの前記輝度を調整するよう構成される、請求項11に記載のシステム。
- 前記観察されたイメージング効果は蛍光退色を含む、請求項11に記載のシステム。
- 前記センサは電荷結合素子(CCD)またはCMOS素子を含む、請求項11に記載のシステム。
- 前記センサは、共焦点ピンホールまたはマスクの助けなしに、前記複数の画像をキャプチャするよう構成される、請求項11に記載のシステム。
- 前記モータは前記フォトマスクマスクを移動するよう構成される、請求項11に記載のシステム。
- 前記画像生成モジュールは、前記モデルを前記複数の画像の一部のみに関連付けられたデータポイントに適用し、前記複数の画像の他のデータポイントにおいて近似補正を行うよう構成される、請求項11に記載のシステム。
- 前記フォトマスクマスクは矩形マスクである、請求項11に記載のシステム。
- 前記フォトマスクが少なくとも1つのピンホールパターンを含む、請求項11に記載のシステム。
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