JP2018086005A - Tem−1診断用抗体 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】腫瘍内皮マーカー1(TEM−1)に特異的に結合する抗体、及びその抗原結合フラグメント、関連ポリヌクレオチド、発現ベクター、及び記載される抗体を発現する細胞である。該抗体、及びその抗原結合フラグメントを使用する方法、並びに関連キット。対象に由来する生体試料中のTEM−1の量を判定することと、このレベルを既知の標準又は参照試料中のTEM−1のレベルと比較することとを含む。
【選択図】図1
Description
本出願は、2012年3月30日に提出された米国出願第61/618,235号の利益を主張し、その内容は、参照することによりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に提供される開示は、TEM−1に特異的なラットモノクローナル抗体、並びに記載される抗体を産生及び使用する方法に関する。
本明細書では、TEM−1に特異的な単離された抗体及び抗原結合フラグメントが説明される。いくつかの実施形態において、抗体又は抗原結合フラグメントは、ラットIgG又はその誘導体である。いくつかの実施形態において、記載される抗体は、1×10−8M以下の解離定数でTEM−1に結合することができる。表1は、本明細書に記載される抗体の要約を提供する。
記載される抗体を使用する方法も開示される。例えば、これらの抗体は、血液若しくは血清等の生体試料中のTEM−1の存在を検出するため、血液若しくは血清等の生体試料中のTEM−1の量を定量化するため、TEM−1発現癌を診断するため、癌に罹患している対象を処置する方法を決定するため、又は対象における癌の進行を監視するために有用であり得る。いくつかの実施形態において、TEM−1発現癌は、黒色腫、肉腫、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、又は結腸癌であり得る。記載される方法は、対象が、MORAb−004による処置等のTEM−1発現癌の処置を受ける前に実行されてもよい。更に、記載される方法は、対象が、MORAb−004による処置等のTEM−1発現癌の処置を受けた後に実行されてもよい。この点において、本明細書に記載される方法は、抗体9G5及び15F8等のTEM−1に結合するためのMORAb−004と競合しない、1つ以上の抗体又はその抗原結合フラグメントを使用して実行されてもよい。
本明細書では、開示される抗体を含むキットが説明される。記載されるキットは、本明細書に提供される抗体を使用する方法、又は当業者に既知の他の方法を実行するために使用されてもよい。いくつかの実施形態において、記載されるキットは、本明細書に記載される抗体と、生体試料中のTEM−1の存在を検出する際に使用するための試薬と、を含んでもよい。したがって、記載されるキットは、本明細書に記載される抗体若しくはその抗体結合フラグメント(複数可)のうちの1つ以上と、使用中でないときに、抗体若しくはフラグメントを含有するための容器と、抗体若しくはその抗体結合フラグメントの使用のための説明書と、本明細書に記載されるように、固体支持体に固定される抗体若しくはフラグメント、又はその抗体若しくはフラグメントの検出可能に標識された形態と、を含んでもよい。
説明の態様に関する様々な用語は、本明細書及び特許請求の範囲全体で使用される。そのような用語は、別段の指示がない限り、当該技術分野におけるそれらの通常の意味が付与されるものとする。他の特異的に定義される用語は、本明細書に提供される定義と一致する様式で解釈されるものとする。
本明細書では、TEM−1に特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合フラグメントが記載される。抗体分子の一般構造は、重鎖及び軽鎖を含む抗原結合ドメインと、補体結合及び抗体受容体の結合を含む、多様な機能を果たすFcドメインと、を含む。
本明細書において、本明細書に記載される試料を抗体又はその抗原結合フラグメントと接触させることによって、生体試料中のTEM−1を検出するための方法が提供される。本明細書に記載されるように、試料は、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織と関連付けられない細胞(すなわち、遊離細胞)、組織(例えば、外科的に切除された腫瘍組織、細針吸引を含む生検)、組織学的調製物等に由来し得る。いくつかの実施形態において、記載される方法は、試料を以下と接触させることによって、生体試料中のTEM−1を検出することを含む:
(a)抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2、若しくはその抗原結合フラグメントのうちのいずれか1つ;
(b)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列及び軽鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列を含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;
(c)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖可変ドメインセグメント及び軽鎖可変ドメインセグメントを含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;又は
(d)受託番号PTA−12538、PTA−12545、PTA−12542、PTA−12546、PTA−12541、PTA−12539、PTA−12543、PTA−12540、PTA−12544、又はPTA−12547を有するATCCに寄託された細胞株のうちのいずれか1つによって産生される抗体のアミノ酸配列を有する抗体、若しくはその抗原結合フラグメント。
本明細書において、対象におけるTEM−1発現癌を診断するための方法が提供される。いくつかの実施形態において、TEM−1発現癌としては、黒色腫、肉腫、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、又は結腸癌が挙げられる。いくつかの実施形態において、上記のように、血液試料又は血清試料等の生体試料中のTEM−1を検出することは、試料が得られた対象中の癌を診断する能力を提供する。代替として、いくつかの実施形態において、組織学的試料、細針吸引試料、切除された腫瘍組織、循環細胞、循環腫瘍細胞等の他の試料を使用し、試料が得られた対象が癌を有するかどうかを評価してもよい。いくつかの実施形態において、試料が得られた対象が癌を有することは既に既知であり得るが、対象を苦しめている癌の種類が診断されていないか、又は予備的診断が不明であり得るため、対象から得られた生体試料中のTEM−1を検出することは、癌の診断を可能にするか、又は明確にすることができる。例えば、対象が癌を有することは既知であり得るが、対象の癌がTEM−1を発現するかどうかは既知でないか、又は不明であり得る。
(a)抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2、若しくはその抗原結合フラグメントのうちのいずれか1つ;
(b)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列及び軽鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列を含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;
(c)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖可変ドメインセグメント及び軽鎖可変ドメインセグメントを含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;又は
(d)受託番号PTA−12538、PTA−12545、PTA−12542、PTA−12546、PTA−12541、PTA−12539、PTA−12543、PTA−12540、PTA−12544、又はPTA−12547を有するATCCに寄託された細胞株のうちのいずれか1つによって産生される抗体のアミノ酸配列を有する抗体、若しくはその抗原結合フラグメント。
本明細書において、対象におけるTEM−1発現癌を監視するための方法が提供される。いくつかの実施形態において、TEM−1発現癌としては、黒色腫、肉腫、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、又は結腸癌が挙げられる。いくつかの実施形態において、記載される方法は、対象に由来する試験試料中に存在するTEM−1の量を判定することによって、TEM−1発現癌が進行しているか、退縮しているか、又は安定した状態であるかどうかを評価することと、観察されたTEM−1の量を、より早い時点で対象から類似の方法で得られた生体試料中のTEM−1の量と比較することと、を含み、試験試料及び早期試料中のTEM−1の量の差異は、癌が進行しているか、退縮しているか、又は安定した状態であるかどうかの指標を提供する。この点において、早期試料に対して観察された量に対し、TEM−1の量が増加した試験試料は、TEM−1発現癌の進行を示し得る。反対に、早期試料に対して観察された量に対し、TEM−1の量が減少した試験試料は、TEM−1発現癌の退縮を示し得る。したがって、早期試料に対して観察された量に対し、TEM−1の量の有意でない差異を伴う試験試料は、TEM−1発現癌の安定した疾患状態を示し得る。いくつかの実施形態において、対象に由来する生体試料中のTEM−1の量は、本明細書に記載される抗体等のTEM−1に特異的に結合する、抗体又はその抗原結合フラグメントと試料を接触させることによって評価される。TEM−1の存在について評価される試料は、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織と関連付けられない細胞(すなわち、遊離細胞)、組織(例えば、外科的に切除された腫瘍組織、細針吸引を含む生検)、組織学的調製物等に由来し得る。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。
(a)抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2、若しくはその抗原結合フラグメントのうちのいずれか1つ;
(b)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列及び軽鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列を含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;
(c)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖可変ドメインセグメント及び軽鎖可変ドメインセグメントを含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;又は
(d)受託番号PTA−12538、PTA−12545、PTA−12542、PTA−12546、PTA−12541、PTA−12539、PTA−12543、PTA−12540、PTA−12544、又はPTA−12547を有するATCCに寄託された細胞株のうちのいずれか1つによって産生される抗体のアミノ酸配列を有する抗体、若しくはその抗原結合フラグメント。
本明細書において、生体試料中のTEM−1を検出するためのキットが提供される。これらのキットは、本明細書に記載されるTEM−1特異的抗体又はその抗原結合フラグメントのうちの1つ以上、及びキットを使用するための説明書を含む。いくつかの実施形態において、記載されるキットに提供される抗体又は抗原結合フラグメントは、以下のうちの1つ以上であってもよい:
(a)抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2、若しくはその抗原結合フラグメントのうちのいずれか1つ;
(b)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列及び軽鎖CDR1、CDR2、及びCDR3アミノ酸配列を含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;
(c)表2に記載される抗体14G3、抗体9A5、抗体7D3、抗体7H12、抗体9G5、抗体10H8、抗体11D1、抗体15D10、抗体15F8、抗体16D2のうちのいずれか1つの重鎖可変ドメインセグメント及び軽鎖可変ドメインセグメントを含む、抗体、若しくはその抗原結合フラグメント;又は
(d)受託番号PTA−12538、PTA−12545、PTA−12542、PTA−12546、PTA−12541、PTA−12539、PTA−12543、PTA−12540、PTA−12544、又はPTA−12547を有するATCCに寄託された細胞株のうちのいずれか1つによって産生される抗体のアミノ酸配列を有する抗体、若しくはその抗原結合フラグメント。
TEM−1に特異的に結合する抗体を生成するために、3匹の8週齢雌ルイスラットを、マウスγ重鎖(rTEM−1−Fc)のFc部分に融合されたTEM−1の組み換え変形で免疫付与した(Tomkowicz,et al.,PNAS 104(46):17965〜70(2007))。ゼロ日目に、ラットは、完全なフロイント補助剤(Rockland Immunochemicals,Inc.,Gilbertsville,PA)との1:1(v:v)混合物として調製された100μgのrTEM−1−Fcで腹腔内に免疫付与された。14日目及びその後21日毎に、免疫付与されたラットは、不完全なフレウント補助剤(Rockland Immunochemicals Inc.)と1:1(v:v)で混合された50μgのrTEM−1−Fcの腹腔内注射を受けた。24日目及びその後21日毎に、試験血液を回収し、rTEM−1−His6に対する直接酵素結合イムノアッセイ(EIA)によって分析した。最高の抗原特異的力価を呈する動物から脾臓を採取し、脾臓細胞とSp2/0 Ag14骨髄腫細胞(ATCC,Rockville,MD)との電子融合(Hybrimune(商標)Model CEEF−50B Waveform Generator;Cellectis,Romainville,France)によってハイブリドーマを調製した。
実施例1に記載されるTEM−1特異的抗体の産生及び単離に続いて、実験を行い、抗体の結合特徴を判定した。最初に、TEM−1を発現することが知られている大動脈平滑筋細胞(「S」)(Invitrogen)又はTEM−1を発現しないヒト臍静脈上皮細胞(HUVEC)(「H」)(ScienCell)のいずれかからの還元及び変性された細胞溶解物を使用してウェスタンブロット分析を行った。簡潔に述べると、大動脈平滑筋細胞及びHUVECを、完全(商標)ミニプロテアーゼ阻害剤カクテル(Roche Diagnostics)+PMSF(100mM)が補充された1.1% OBG緩衝液(50mMトリス−HCl、ph 7.5、150mM NaCl、1.1% OBG)中に、氷上で15分間溶解し、次いで、13,000×gで15分間遠心分離し、細胞残渣を除去した。等量の総タンパク質(30μg)を、5% B−メルカプトエタノール+20mM DTTを含有するNuPAGE試料緩衝液(Invitrogen)に添加した。4〜12%ビス−トリスゲル(Invitrogen)上のSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)を使用して、タンパク質を分離し、PVDF膜に移した。記載されるラットTEM−1特異的抗体を使用し、4℃で終夜免疫ブロット法を行い、次いで、ヤギ抗ラットHRP共役抗体(Jackson Immunoresearch)で検出し、SuperSignal(登録商標)West Pico化学発光基質(Pierce)を使用して可視化した。Omega 12iC分子撮像システム(Ultra−Lum)を使用し、シグナルを可視化した。図1に示されるように、試験された抗体の大半は、還元及び変性されたTEM−1を検出することができ、これらの抗体が、構造依存性でないタンパク質のエピトープを認識することを示す。
正常なヒト対象又は黒色腫患者から得た血液試料を評価し、TEM−1がヒト血液中で検出され得るかを判定した。この研究のために、正常な健常ドナーからの血清を、タンパク質GセファロースFFビーズ(Amersham)で事前に清澄し、続いて遠心分離によってセファロースビーズを除去した。MORAb−004(2μg)を添加し、清澄された血清試料を終夜インキュベートすること、洗浄されたタンパク質Gセファロースビーズを血清/抗体混合液に添加すること、及びその混合液を更に2時間ロッキングすることによって、TEM−1を免疫沈降させた。インキュベーション後、試料を遠心分離し、上清を除去した。次いで、完全な(商標)ミニプロテアーゼ阻害剤カクテル(Roche Diagnstics)+PMSF(100nM)が補充された冷たい溶解緩衝液50mMトリス−HCl、pH 7.5、150mM NaCl、1.1% OBGで試料を3回洗浄した。5% β−メルカプトエタノールを含有する4X NuPAGE試料緩衝液(Invitrogen)を使用してタンパク質を溶出し、10分間沸騰させた。4〜12%ビス−トリスゲル(Invitrogen)上のSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)を使用して、タンパク質を分離し、PVDF膜に移した。ウサギ抗TEM−1抗体を使用して免疫ブロット法を行い、ヤギ抗ウサギHRP共役抗体(Jackson Immunoresearch)で検出し、SuperSignal(登録商標)West Pico化学発光基質(Pierce)を使用して可視化した。Omega 12iC分子撮像システム(Ultra−Lum)を使用し、シグナルを可視化した。図3は、TEM−1が、正常な対象及び黒色腫患者の両方のヒト血液に由来する試料中で容易に検出され得ることを示す。
TEM−1特異的抗体MORAb−004の存在下でのTEM−1の検出のために、電子化学発光(ECL)アッセイが開発された。このアッセイは、検出のために、ビオチン標識された(20:1)抗TEM−1抗体9G5を捕捉抗体として、及びスルホ−TAG標識された(20:1)抗TEM−1抗体15F8を利用する。アッセイ緩衝液中で16pg/mLに5倍滴定された250ng/mL組み換えCHO TEM−1 Fc融合タンパク質(Morphotek,Inc.)で調製された7つの標準キャリブレーターを使用し、アッセイ緩衝液(0.1%トリトンX−100を含むPBS中1%カゼイン)中で1:10に希釈された試料及び対照を定量化した。PBS中の1%カゼイン中に0.5μg/mLビオチン標識された抗TEM−1抗体及び0.5μg/mLスルホ−TAG抗TEM−1抗体を含有する100μLの複合混合液を、ポリプロピレンマイクロプレート上でMORAb−004の存在下又は不在下で調製された50μLの各標準、対照、及び試料に添加し、その混合液を周辺温度で1時間攪拌しながらインキュベートすることによって、アッセイを実行した。複合形成中に、Mesoscale Discovery(Gaithersburg,MD)標準ストレプトアビジンプレートを、150μL/ウェルのPBS中1%カゼインで1時間、周辺温度で攪拌しながらブロックした。ブロッキング緩衝液を除去した後、50μLの複合試料を、ストレプトアビジンプレート上の重複ウェル中で1時間、周辺温度で攪拌しながらインキュベートした。0.1% Tween 20を含む1XPBSでプレートを3回洗浄し、150μL/ウェルの1Xリード緩衝液Tを添加し、次いで、MSDセクター撮像装置2400で読み取った。表8は、ECLアッセイがMORAb−004の存在下又は不在下でTEM−1を検出する能力を示す。
血液中のTEM−1の濃度が、癌を有する対象を示すかどうかを評価するために、研究を行った。正常な対象又は癌を有することが知られている対象から血液試料を得て、実施例4に記載されるように、血漿又は血清中のTEM−1の濃度を判定した。図5に示されるように、血清TEM−1濃度は、癌を有することが知られていない対象に対して観察されたレベルと比較したとき、病期黒色腫を有する患者において上昇した。より広範囲の研究において、50人の正常な個体、95人の結腸癌患者、36人の黒色腫患者、及び34人の肉腫患者からの血漿試料中のTEM−1の濃度を判定し、上昇したTEM−1濃度が疾患と相関するかどうかを評価した。統計分析(ペアワイズt検定)は、癌患者の血漿TEM−1レベルは、正常な個体中のTEM−1の血漿レベルとは統計的に有意に異なることを実証する(表11及び図6)。
Claims (122)
- 配列番号1のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号2のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号3のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号5のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号6のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号7のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項1に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号4のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項1に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号8のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項1に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号1のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号2のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号3のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号4のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号5のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号6のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項5又は請求項6に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12538を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号9のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号10のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号11のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号13のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号14のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号15のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項9に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号12のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項9に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号16のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項9に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号9のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号10のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号11のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号13のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号14のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号15のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項13又は請求項14に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12545を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号17のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号18のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号19のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号21のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号22のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号23のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項17に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号20のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項17に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号24のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項17に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号17のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号18のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号19のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号21のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号22のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号23のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項21又は請求項22に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12542を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号25のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号26のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号27のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号29のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号30のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号31のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項25に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号28のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項25に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号32のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項25に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号25のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号26のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号27のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号30のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号31のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項29又は請求項30に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12546を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号33のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号34のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号35のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号37のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号38のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号39のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項33に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号36のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項33に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号40のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項33に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号33のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号34のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号35のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号37のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号38のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号39のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項37又は請求項38に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12541を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号41のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号42のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号43のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号45のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号46のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号47のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項41に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号44のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項41に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号48のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項41に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号41のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号42のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号43のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号45のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号46のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号47のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項45又は請求項46に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12539を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号49のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号50のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号51のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号53のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号54のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号55のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項49に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号52のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項49に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号56のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項49に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号49のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号50のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号51のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号53のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号54のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号55のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項53又は請求項54に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12543を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号57のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号58のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号59のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号61のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号62のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号63のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項57に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号60のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項57に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号64のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項57に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号57のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号58のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号59のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号61のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号62のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号63のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項61又は請求項62に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12540を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号65のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号66のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号67のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号69のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号70のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号71のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項65に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号68のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項65に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号72のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項65に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号65のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号66のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号67のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号69のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号70のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号71のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項69又は請求項70に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12544を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 配列番号73のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1と、配列番号74のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR2と、配列番号75のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR3と、配列番号77のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1と、配列番号78のアミノ酸配列を有する重鎖CDR2と、配列番号79のアミノ酸配列を有する重鎖CDR3と、を含む、TEM−1に特異的に結合する、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、ラット抗体である、請求項73に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号76のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、請求項73に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- 配列番号80のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、請求項73に記載の単離された抗体又は抗原結合フラグメント。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体軽鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR1が、配列番号73のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR2が、配列番号74のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記軽鎖CDR3が、配列番号75のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- TEM−1に特異的に結合する抗体の、抗体重鎖又はその抗原結合フラグメントをコードする、単離されたポリヌクレオチド配列であって、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR1が、配列番号77のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR2が、配列番号78のアミノ酸配列を含み、前記コードされた抗体の前記重鎖CDR3が、配列番号79のアミノ酸配列を含む、上記単離されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項77又は請求項78に記載の単離されたポリヌクレオチド配列を含む、組み換え細胞。
- TEM−1に特異的に結合する単離された抗体であって、受託番号PTA−12547を有するATCCに寄託された細胞株によって産生される、上記抗体。
- 1×10−8M以下の解離定数でTEM−1に結合することができる、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、又は80のいずれか一項に記載の単離された抗体。
- 生体試料中のTEM−1を検出する方法であって、前記試料を、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに曝露することと、TEM−1を検出することと、を含む、上記方法。
- 前記生体試料が、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織と関連付けられない細胞、組織、外科的に切除された腫瘍組織、生検、細針吸引試料、又は組織学的調製物に由来する、請求項82に記載の方法。
- 前記生体試料が、哺乳類に由来する、請求項83に記載の方法。
- 前記生体試料が、ヒトに由来する、請求項83に記載の方法。
- 対象におけるTEM−1発現癌を診断する方法であって、
a.前記対象の生体試料を、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに曝露することと、
b.前記抗体又はその抗原結合フラグメントによって結合される前記試料中に存在するTEM−1の量を定量化することと、
c.前記試料中に存在するTEM−1の量を、既知の標準又は参照試料と比較することと、
d.前記対象のTEM−1レベルが、癌と関連付けられるTEM−1のレベル内にあるかどうかを判定することと、
を含む、上記方法。 - 前記生体試料が、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織と関連付けられない細胞、組織、外科的に切除された腫瘍組織、生検、細針吸引試料、又は組織学的調製物に由来する、請求項86に記載の方法。
- 前記癌が、黒色腫、肉腫、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、又は結腸癌である、請求項86に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、早期TEM−1発現癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項86に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、中期TEM−1発現癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項86に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、末期TEM−1発現癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項86に記載の方法。
- 対象におけるTEM−1発現癌を処置する方法であって、
a.前記対象の生体試料を、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに曝露することと、
b.前記抗体又はその抗原結合フラグメントによって結合される前記試料中に存在するTEM−1の量を定量化することと、
c.前記試料中に存在するTEM−1の量を、既知の標準又は参照試料と比較することと、
d.前記対象のTEM−1レベルが、癌と関連付けられるTEM−1のレベル内にあるかどうかを判定することと、
e.前記判定の結果を転送して、前記癌の処置を促進することと、
を含む、上記方法。 - 前記生体試料が、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織と関連付けられない細胞、組織、外科的に切除された腫瘍組織、生検、細針吸引試料、又は組織学的調製物に由来する、請求項92に記載の方法。
- 前記癌が、黒色腫、肉腫、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、又は結腸癌である、請求項92に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、早期TEM−1発現癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項92に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、中期TEM−1発現癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項92に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、末期TEM−1発現癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項92に記載の方法。
- 前記処置が、TEM−1に特異的に結合する抗体の投与を含む、請求項92に記載の方法。
- 前記抗体が、MORAb−004である、請求項98に記載の方法。
- 対象におけるTEM−1発現癌を監視する方法であって、
a.前記対象の生体試料を、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに曝露することと、
b.前記抗体又はその抗原結合フラグメントによって結合される前記試料中に存在するTEM−1の量を定量化することと、
c.前記試料中に存在するTEM−1の量を、
i.既知の標準若しくは参照試料、又は
ii.早期時点で前記対象から得られる生体試料
のいずれかと比較することと、
d.前記対象のTEM−1レベルが、癌の進行、退縮、又は安定疾患を示すかどうかを判定することと、
を含む、上記方法。 - 前記生体試料が、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織と関連付けられない細胞、組織、外科的に切除された腫瘍組織、生検、細針吸引試料、又は組織学的調製物に由来する、請求項100に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、癌を含まないと特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項100に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、早期癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項100に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、中期癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項100に記載の方法。
- 前記既知の標準又は参照試料が、末期癌を有すると特定される対象に由来するTEM−1レベルを含む、請求項100に記載の方法。
- 前記癌が、黒色腫、肉腫、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、又は結腸癌である、請求項100〜105のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、前記対象がTEM−1発現癌のための処置を受ける前又は後に実行される、請求項100〜106のいずれか一項に記載の方法。
- 前記TEM−1発現癌のための処置が、MORAb−004の投与を含む、請求項107に記載の方法。
- 前記対象の生体試料を、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに曝露する工程が、前記対象の前記生体試料を、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の第2の抗体又はその抗原結合フラグメントに曝露することを更に含む、請求項82〜108のいずれか一項に記載の方法。
- 前記第2の抗体が、前記第1の抗体とは異なる、請求項109に記載の方法。
- 前記抗体又は抗体フラグメントが標識される、請求項82〜108のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標識が、放射線標識、蛍光標識、エピトープタグ、ビオチン、発色団標識、ECL標識、又は酵素である、請求項111に記載の方法。
- TEM−1が、細胞に結合されるか、又は結合されない、請求項82〜108のいずれか一項に記載の方法。
- 前記試料中のTEM−1の存在が、ウェスタンブロット、免疫組織化学、フローサイトメトリー、ラジオイムノアッセイ、免疫沈降、電気化学発光イムノアッセイ(ECLIA)、又はELISAを使用して検出される、請求項82〜108のいずれか一項に記載の方法。
- 前記抗体又はその抗原結合フラグメントが、MORAb−004と結合するために競合しない、請求項82〜108のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントによって結合されるTEM−1のエピトープに結合することができる、単離された抗体又はその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体が、検出可能に標識される、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の単離された抗体。
- 前記検出可能な標識が、放射線標識、蛍光標識、エピトープタグ、ビオチン、発色団標識、ECL標識、又は酵素である、請求項117に記載の方法。
- 前記標識が、ルテニウム、111In−DOTA、111In−ジエチレントリアミンペンタ酢酸(DTPA)、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、及びβ−ガラクトシダーゼ、又はポリ−ヒスチジンである、請求項118に記載の抗体。
- 生体試料中のTEM−1の存在を検出するためのキットであって、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の少なくとも1つの抗体又はその抗原結合フラグメントと、使用中でないときに、前記抗体を含有するための容器と、前記抗体の使用のための説明書と、を含む、上記キット。
- 生体試料中のTEM−1の存在を検出するためのキットであって、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の少なくとも1つの抗体又はその抗原結合フラグメントを含み、前記含まれる抗体又はその抗原結合フラグメントが、固体支持体に固定される、上記キット。
- 生体試料中のTEM−1の存在を検出するためのキットであって、請求項1、8、9、16、17、24、25、32、33、40、41、48、49、56、57、64、65、72、73、若しくは80のいずれか一項に記載の少なくとも1つの抗体又はその抗原結合フラグメントを含み、前記含まれる抗体又はその抗原結合フラグメントが、検出可能に標識される、上記キット。
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