JP2017513490A - ガン及び様々な病態生理学的状態を処置するための方法において使用するためのApoO - Google Patents
ガン及び様々な病態生理学的状態を処置するための方法において使用するためのApoO Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017513490A JP2017513490A JP2016563136A JP2016563136A JP2017513490A JP 2017513490 A JP2017513490 A JP 2017513490A JP 2016563136 A JP2016563136 A JP 2016563136A JP 2016563136 A JP2016563136 A JP 2016563136A JP 2017513490 A JP2017513490 A JP 2017513490A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- apoo
- cells
- compound
- use according
- mitochondrial
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000004963 pathophysiological condition Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 41
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 30
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 74
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 65
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 61
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 51
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims abstract description 44
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 23
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 178
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims description 38
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 36
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 claims description 26
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 claims description 24
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 23
- 101001121099 Homo sapiens MICOS complex subunit MIC26 Proteins 0.000 claims description 19
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 17
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 16
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 16
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 claims description 12
- 230000006372 lipid accumulation Effects 0.000 claims description 12
- 102000044931 human ApoO Human genes 0.000 claims description 11
- 230000004129 fatty acid metabolism Effects 0.000 claims description 10
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 claims description 9
- 230000006540 mitochondrial respiration Effects 0.000 claims description 9
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 claims description 7
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 claims description 7
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 claims description 7
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 claims description 7
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 claims description 7
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 claims description 7
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 5
- 208000003098 Ganglion Cysts Diseases 0.000 claims description 4
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 claims description 4
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 claims description 4
- 208000005400 Synovial Cyst Diseases 0.000 claims description 4
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 201000009047 Chordoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000009798 Craniopharyngioma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008938 Rhabdoid tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 210000003443 bladder cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000219 ependymocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 201000002222 hemangioblastoma Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007538 neurilemmoma Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims description 2
- PLRACCBDVIHHLZ-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Chemical compound C1N(C)CCC(C=2C=CC=CC=2)=C1 PLRACCBDVIHHLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 208000013842 Anaplastic ganglioglioma Diseases 0.000 claims 1
- 101001135571 Mus musculus Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 2 Proteins 0.000 claims 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 claims 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 306
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 306
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 60
- 108010067028 Mitochondrial Permeability Transition Pore Proteins 0.000 description 45
- 230000000512 lipotoxic effect Effects 0.000 description 34
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 33
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 32
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 30
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 29
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 28
- 108010048028 Cyclophilin D Proteins 0.000 description 25
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 25
- 108010017236 ATP Translocases Mitochondrial ADP Proteins 0.000 description 24
- 102000004482 ATP Translocases Mitochondrial ADP Human genes 0.000 description 24
- 102100034943 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase F, mitochondrial Human genes 0.000 description 24
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 24
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 23
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 21
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 21
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 20
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 19
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 18
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 18
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 17
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 17
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 16
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 16
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 16
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 16
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 15
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 15
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 15
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 15
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 15
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 14
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 14
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 13
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 13
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 13
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 13
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 13
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 12
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 12
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 12
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 12
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 11
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 10
- 102100026636 MICOS complex subunit MIC26 Human genes 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 210000001112 cardioblast Anatomy 0.000 description 10
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 10
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 10
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 9
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 9
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 7
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 7
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 7
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 7
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 7
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 7
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 7
- 102000004082 Calreticulin Human genes 0.000 description 6
- 108090000549 Calreticulin Proteins 0.000 description 6
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000685660 Homo sapiens Long-chain fatty acid transport protein 4 Proteins 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 102100023113 Long-chain fatty acid transport protein 4 Human genes 0.000 description 6
- 102000004962 Voltage-dependent anion channels Human genes 0.000 description 6
- 108090001129 Voltage-dependent anion channels Proteins 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 6
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 6
- UGTJLJZQQFGTJD-UHFFFAOYSA-N Carbonylcyanide-3-chlorophenylhydrazone Chemical compound ClC1=CC=CC(NN=C(C#N)C#N)=C1 UGTJLJZQQFGTJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 5
- 108090000365 Cytochrome-c oxidases Proteins 0.000 description 5
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 5
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 5
- 230000004898 mitochondrial function Effects 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 5
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 5
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 5
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 5
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- 241000649044 Adeno-associated virus 9 Species 0.000 description 4
- 108010033604 Apoptosis Inducing Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000007272 Apoptosis Inducing Factor Human genes 0.000 description 4
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 4
- YPZRHBJKEMOYQH-UYBVJOGSSA-N FADH2 Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]([C@H](O)[C@@H]1O)O[C@@H]1COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C(NC(=O)NC2=O)=C2NC2=C1C=C(C)C(C)=C2 YPZRHBJKEMOYQH-UYBVJOGSSA-N 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 4
- 102000023984 PPAR alpha Human genes 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 4
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 4
- 210000001008 atrial appendage Anatomy 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 230000027721 electron transport chain Effects 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 230000037041 intracellular level Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 230000025608 mitochondrion localization Effects 0.000 description 4
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 4
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 4
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 4
- 230000010627 oxidative phosphorylation Effects 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 108091008725 peroxisome proliferator-activated receptors alpha Proteins 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 4
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 4
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 4
- MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N (1r,4s,5e,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,16s,18r,19s,20r,21e,25s,26r,27s,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trio Polymers O([C@@H]1CC[C@@H](/C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)O[C@H]([C@H]2C)[C@H]1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](C[C@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N 0.000 description 3
- MNULEGDCPYONBU-DJRUDOHVSA-N (1s,4r,5z,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,18r,19r,20s,21e,26r,27s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers O([C@H]1CC[C@H](\C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)C(C)C(=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]2C)C1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](CC(C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-DJRUDOHVSA-N 0.000 description 3
- MNULEGDCPYONBU-YNZHUHFTSA-N (4Z,18Z,20Z)-22-ethyl-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethylspiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2'-oxane]-3,9,13-trione Polymers CC1C(C2C)OC(=O)\C=C/C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)C\C=C/C=C\C(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-YNZHUHFTSA-N 0.000 description 3
- MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N (5e,5'r,7e,10s,11r,12s,14s,15r,16r,18r,19s,20r,21e,26r,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers C([C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]1C)[C@H]2C)\C=C\C=C\C(CC)CCC2OC21CC[C@@H](C)C(C[C@H](C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N 0.000 description 3
- MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers CC1C(C2C)OC(=O)C=CC(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)CC=CC=CC(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 3
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 3
- 102000049320 CD36 Human genes 0.000 description 3
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 3
- 108010011449 Long-chain-fatty-acid-CoA ligase Proteins 0.000 description 3
- 101710125126 MICOS complex subunit MIC26 Proteins 0.000 description 3
- 102000006404 Mitochondrial Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010058682 Mitochondrial Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000749 co-immunoprecipitation Methods 0.000 description 3
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 3
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 3
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 230000008437 mitochondrial biogenesis Effects 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 229930191479 oligomycin Natural products 0.000 description 3
- MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N oligomycin A Polymers O([C@H]1CC[C@H](/C=C/C=C/C[C@@H](C)[C@H](O)[C@@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)O[C@@H]([C@@H]2C)[C@@H]1C)CC)[C@@]12CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 3
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000005020 Acaciella glauca Species 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- 229930182536 Antimycin Natural products 0.000 description 2
- 229920003319 Araldite® Polymers 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 101150112561 CD36 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000002666 Carnitine O-palmitoyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 108010018424 Carnitine O-palmitoyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 102000004039 Caspase-9 Human genes 0.000 description 2
- 108090000566 Caspase-9 Proteins 0.000 description 2
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 2
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 102000005870 Coenzyme A Ligases Human genes 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 101150073133 Cpt1a gene Proteins 0.000 description 2
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 2
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101000685655 Homo sapiens Long-chain fatty acid transport protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 101001123331 Homo sapiens Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha Proteins 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102100023111 Long-chain fatty acid transport protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 2
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- 102100028960 Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha Human genes 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBFWDBGUSMGXPI-UHFFFAOYSA-N TG(17:0/17:0/17:0) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCC FBFWDBGUSMGXPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N Uranyl acetate Chemical compound O.O.O=[U]=O.CC(O)=O.CC(O)=O COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N antimycin Chemical compound OC1=C(C(O)=O)C(=O)C(C)=C2[C@H](C)[C@@H](C)OC=C21 CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002886 autophagic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 2
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 2
- 238000000055 blue native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000803 cardiac myoblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 2
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 description 2
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 201000010235 heart cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 2
- 208000024348 heart neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 230000007154 intracellular accumulation Effects 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 238000003068 pathway analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000001566 pro-viral effect Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 235000003499 redwood Nutrition 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXEZTIWVRVSYOK-UHFFFAOYSA-N 2-(3,6-diacetyloxy-2,7-dichloro-9h-xanthen-9-yl)benzoic acid Chemical compound C1=2C=C(Cl)C(OC(=O)C)=CC=2OC2=CC(OC(C)=O)=C(Cl)C=C2C1C1=CC=CC=C1C(O)=O PXEZTIWVRVSYOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JADYBWICRJWGBW-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(tetradecanoyloxy)propyl tetradecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCC JADYBWICRJWGBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- JGZVUTYDEVUNMK-UHFFFAOYSA-N 5-carboxy-2',7'-dichlorofluorescein Chemical compound C12=CC(Cl)=C(O)C=C2OC2=CC(O)=C(Cl)C=C2C21OC(=O)C1=CC(C(=O)O)=CC=C21 JGZVUTYDEVUNMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001655883 Adeno-associated virus - 1 Species 0.000 description 1
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 description 1
- 241000202702 Adeno-associated virus - 3 Species 0.000 description 1
- 241000580270 Adeno-associated virus - 4 Species 0.000 description 1
- 241001634120 Adeno-associated virus - 5 Species 0.000 description 1
- 241000972680 Adeno-associated virus - 6 Species 0.000 description 1
- 241001164823 Adeno-associated virus - 7 Species 0.000 description 1
- 241001164825 Adeno-associated virus - 8 Species 0.000 description 1
- 241000649045 Adeno-associated virus 10 Species 0.000 description 1
- 241000649046 Adeno-associated virus 11 Species 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010002368 Anger Diseases 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 description 1
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 description 1
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 description 1
- 108091032955 Bacterial small RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000051485 Bcl-2 family Human genes 0.000 description 1
- 108700038897 Bcl-2 family Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 101150100916 Casp3 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 1
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 1
- 108090000197 Clusterin Proteins 0.000 description 1
- 102000003780 Clusterin Human genes 0.000 description 1
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 238000011537 Coomassie blue staining Methods 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 208000032781 Diabetic cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000015782 Electron Transport Complex III Human genes 0.000 description 1
- 108010024882 Electron Transport Complex III Proteins 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010014967 Ependymoma Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 201000010915 Glioblastoma multiforme Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000713858 Harvey murine sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 101100077081 Homo sapiens APOO gene Proteins 0.000 description 1
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000685652 Homo sapiens Very long-chain acyl-CoA synthetase Proteins 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 description 1
- 206010048858 Ischaemic cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000713869 Moloney murine leukemia virus Species 0.000 description 1
- 241000713333 Mouse mammary tumor virus Species 0.000 description 1
- 241000204795 Muraena helena Species 0.000 description 1
- 101100025404 Mus musculus Myh6 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000005604 Myosin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 1
- 201000010133 Oligodendroglioma Diseases 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 108010079855 Peptide Aptamers Proteins 0.000 description 1
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 206010038997 Retroviral infections Diseases 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 206010042566 Superinfection Diseases 0.000 description 1
- 206010071436 Systolic dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 102000002933 Thioredoxin Human genes 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 108010051583 Ventricular Myosins Proteins 0.000 description 1
- 102100023048 Very long-chain acyl-CoA synthetase Human genes 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 235000021068 Western diet Nutrition 0.000 description 1
- 102100036973 X-ray repair cross-complementing protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710124921 X-ray repair cross-complementing protein 5 Proteins 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000003486 adipose tissue brown Anatomy 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 238000003766 bioinformatics method Methods 0.000 description 1
- 230000007321 biological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H bis[[2-(5-hydroxy-4,7-dioxo-1,3,2$l^{2}-dioxaplumbepan-5-yl)acetyl]oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000007675 cardiac surgery Methods 0.000 description 1
- 230000005961 cardioprotection Effects 0.000 description 1
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000030570 cellular localization Effects 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005465 channeling Effects 0.000 description 1
- 230000004915 chaperone-mediated autophagy Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- PPQNZVDOBYGOLY-BFGJSWSOSA-N cholesteryl heptadecanoate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCC)C1 PPQNZVDOBYGOLY-BFGJSWSOSA-N 0.000 description 1
- 229940060799 clarus Drugs 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000008828 contractile function Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000007418 data mining Methods 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 201000011304 dilated cardiomyopathy 1A Diseases 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000010218 electron microscopic analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010363 gene targeting Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005986 heart dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010020871 hypertrophic cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 238000002743 insertional mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004132 lipogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002311 liver mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- JBXYCUKPDAAYAS-UHFFFAOYSA-N methanol;trifluoroborane Chemical compound OC.FB(F)F JBXYCUKPDAAYAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000006677 mitochondrial metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000026326 mitochondrial transport Effects 0.000 description 1
- 238000007479 molecular analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000003990 molecular pathway Effects 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012120 mounting media Substances 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 210000003365 myofibril Anatomy 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000012285 osmium tetroxide Substances 0.000 description 1
- 229910000489 osmium tetroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- MNBKLUUYKPBKDU-BBECNAHFSA-N palmitoyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MNBKLUUYKPBKDU-BBECNAHFSA-N 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 210000003668 pericyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 229940100618 rectal suppository Drugs 0.000 description 1
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 230000035806 respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000027756 respiratory electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 210000005247 right atrial appendage Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 description 1
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 1
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 1
- 229940094937 thioredoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000010396 two-hybrid screening Methods 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 238000012762 unpaired Student’s t-test Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- A61K38/1716—Amyloid plaque core protein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
本発明は、ガン性細胞におけるアポトーシスを誘導するのに使用するための化合物であって、ApoO、その変異体又はフラグメント、それらの混合物及び前記ApoO、その変異体又はフラグメントをコードするベクターからなる群より選択される化合物に関する。本発明はさらに、病態生理学的状態を処置するのに使用するための化合物であって、ApoO活性又はApoO遺伝子発現のインヒビターである化合物に関する。
ガンの流行は過去数十年間で劇的に拡大し、紛れもなく、研究されている主要な現代病となった。ガンの病因に関する新たな遺伝学的側面は、ますます重要と認識されている。最近、ガンを患っている患者を処置するために、新規戦略が開発された。それらのうち、細胞周期の停止を誘導するために、又はアポトーシスを誘導するために、新規化学療法化合物が設計された。実際、アポトーシスの誘導は、患者を処置するための非常に有望な戦略となった。しかしながら、科学界は、現在の化学療法の周知の副作用を緩和し、ガンの処置において効率的な結果を提供する新たな化合物を強く必要としている。
定義
本明細書を通して、いくつかの用語が用いられ、以下の段落で定義される。
第1の態様では、本発明は、ガン性細胞におけるアポトーシスを誘導するのに使用するための化合物であって、ApoO、その変異体又はフラグメント、それらの混合物及び前記ApoO、その変異体又はフラグメントをコードするベクターからなる群より選択される化合物に関する。
配列番号10:YTTWCQETY;
配列番号11:QWGLDSYDY;及び
配列番号12:YDWGLRGY。
ヒトの心臓、マウスの肝臓及び心筋芽細胞(cardiac myobloasts)において実験することによって、本発明者らは、ApoOの過剰発現が高レベルのアポトーシス(これは、とりわけ、高いカスパーゼ3活性によって証明された)に関連していたことを見出した。したがって、本発明者らは、ApoOの過剰発現がアポトーシス率を増加させることを初めて明らかにした。
本発明の別の目的は、ガンを処置するための、より好ましくはガン細胞におけるアポトーシスを誘導するための化合物を含む治療組成物であって、前記化合物が、ApoO、その変異体又はフラグメント及びそれらの混合物及びからなる群より選択される治療組成物に関する。
アポリポタンパク質(Apo)は、リンパ系及び循環系を介して血漿脂質輸送プロセスを促進するリポタンパク質に結合することを初めて特性評価した。しかしながら、Apoについて、異なる予想外の機能も同定した。ApoEはAkt/PKBリン酸化を活性化し、ApoJは核に移行され得、DNA修復タンパク質Ku80に結合する。最終的に、Bcl2ファミリーメンバーと構造相同性を有するApoL6は、オートファジーなどの経路をレギュレーションする。
ヒト心臓サンプル。倫理委員会の承認後、参加前に、本研究における患者全員から、サンプル採取及び分子分析に関する書面による同意を得た。冠動脈バイパス手術前に、Department of Cardiology, Toulouse University Hospitalの医師が、患者を慎重に選択した。
全ての動物研究は、INSERM Institute Animal Facilityのガイドラインにしたがっており、INSERM I2MC UMR 1048の動物管理委員会によって承認された。French Ministry of Agricultureのガイドラインにしたがって、全ての動物手順を実施した。Toulouse I2MC animal facilityにおいて、明期12時間/日(6AM〜6PM)、周囲温度22+/−1℃の部屋で、動物を飼育した。
ヒトApoO(pTT−ApoO)を過剰発現させるために、プライマーhApoO5BamPTT(配列番号2)及びhApoO3BamPTT(配列番号3)を使用して、ApoOコード配列を増幅し、pTT発現ベクターのBamH1部位にクローニングした。プライマーSnapApoEcorV−F(配列番号4)及びSnapApoEcorV−R(配列番号5)を使用してpTT−ApoOのPCR増幅によって、pSNAP−ApoOを作製し、pSNAP-tag(登録商標)(Ozyme, Saint-Quentin-en-Yvelines, France)のEcoRV部位にクローニングした。hApoOpGEX1FBam(配列番号6)及びhApoOpGEX1RSma(配列番号7)を使用してpTT−ApoOのPCR増幅によって、pGEX2T−ApoOを構築し、pGEX2T(Promega, Charbonnieres-les-Bains)のBamHI/SmaI部位にクローニングした。本研究で使用した全てのプライマーは、Eurogentec France (Angers)によって合成された。使用した全ての制限酵素は、New England Biolabs (Ozyme, Saint-Quentin-en-Yvelines)製であった。ABI PRISM(登録商標)BigDye(商標)Terminator version 3.1 Ready反応サイクル配列決定キット(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)を使用してDNA二本鎖配列決定によって、発現ベクター内の全てApoO配列を確認し、ABI 3130XL DNA配列決定機器(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)にロードした。
H9c2は、European Collection of Cell Cultures (Salisbury, England)から入手した。1.5g/リットルの重炭酸ナトリウムを含有するように調整し、抗生物質−抗真菌溶液(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)及び10%ウシ胎児血清(FBS, AbCys s.a., Paris)を補充したダルベッコ改変イーグル培地(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)中で、H9c2細胞を培養した。細胞を直径10cmの組織培養皿上にプレーティングし、37℃、飽和湿度の5%CO2インキュベーターで成長させ、培地を2日ごとに交換した。エレクトロポレーションによってH9c2心筋芽細胞を安定トランスフェクションし、以前に公開されているように、トランスフェクタントのプールを選択した。
ApoO遺伝子発現をノックダウンするために使用したshRNA及びコントロールは、MISSION shRNA set; Sh2 = TRCN 72707; Sh4 = TRCN 72704; Sh5= TRCN 72705 (Sigma Aldrich, Saint-Quentin Fallavier)のものであり、安定トランスフェクタントのプールを作製することによって、推奨されるように使用した。空ベクター(shRNAインサートなし)コントロールもトランスフェクションしたが、有意な効果はなかった。
Harmancey, R. et al, western diet changes cardiac acyl-CoA composition in obese rats: a potential role for hepatic lipogenesis. J Lipid Res 51, 1380-1393, (2010)に記載されているように、膜調製を実施した。
Qiacube (Qiagen, Courtaboeuf)自動プロトコールによってRNeasyキット(Qiagen, Courtaboeuf)を使用して、全RNAを精製した。Experionキャピラリー電気泳動(Bio-Rad, Marnes La Coquette)によって、全RNAの完全性を確認した。RNA品質指数が8.5/10以上のサンプルを分析のために選択した。RiboGreen及びVictor(商標)X5 2030マルチラベルリーダー(Perkin Elmer, Courtaboeuf)を使用して、全RNAを正確に定量した。ChipShot(商標)ダイレクトラベリングキット(Promega, Charbonnieres-les-Bains)による蛍光標識のために、全RNAを使用した。標識RNAをパンゲノムラットガラスマイクロアレイにハイブリダイゼーションさせた。標準的なハイブリダイゼーションの後、Ventanaディスカバリーハイブリダイゼーション洗浄システム(Ventana Medical Systems SA, Illkirch)によってガラスアレイを洗浄し、GenPix 4000スキャナー(Molecular Devices France, St. Gregoire)を使用してスキャンした。X-dotリーダーソフトウェア(COSE, Paris)によって、スキャン画像を処理し、オペレーターがスポット検出を検証した。Toppgene及びIngenuity pathway analysisソフトウェア(Ingenuity systems, Redwood City, CA, USA)の両方を使用して、マイクロアレイデータを分析した。
Hickson-Bick et al, J Mol Cell Cardiol 32, 511-519, (2000)及びHirota, et al. Life Sci 79, 1312-1316, (2006)に記載されているように、パルミタートの調製及びカスパーゼ−3活性の測定を実施した。
i13 L 14−MHzリニアアレイトランスデューサーを備えるVivid 7 PRO心エコーシステム(GE Medical System, Velizy)を使用することによって、心エコー図検査を実施した。1〜2%イソフルラン(Baxter, Maurepas)によって軽度麻酔した胸部剃毛ラットを仰向け、トランスデューサーを左半胸郭上に置いて、画像を取得した。左心室の二次元傍胸骨長短軸画像を取得し、二次元ターゲットMモードトレーシングを掃引速度200mm/秒で記録した。American Society for Echocardiographyの推奨にしたがって、全ての測定を実施した。画像が軸上にあることを基準として、最先端の方法を、円形の左心室腔(2D画像)を有する3連続の心周期(n)に適用した。多大な努力を払って良好な画質を達成し、徐々に移動させてトランスデューサーを角張らせることによって、心臓の心内膜及び心外膜の境界を可視化した。式FS=(EDD−ESD)/EDD×100(式中、EDD及びESDは、それぞれ拡張末期径及び収縮末期径である)によって、左心室(LV)短縮(FS)のパーセント(LV収縮機能の尺度)を計算した。
ADIシステム(ADinstruments LTD, Oxford, UK)を使用して、表面心電図(ECG)を記録した。
フランスの法律及びINSERMの動物管理ガイドラインにしたがって、トランスジェニックマウスの研究を行った。マウスαMHCプロモーターを含有する5.5kbのBamHI−SalIフラグメントと、ヒトApoOコード配列を含有するSalI−HindIII cDNAフラグメントとから、αミオシン重鎖(αMHC)−ApoO導入遺伝子を構築した。αMHC−ApoO導入遺伝子をNotIで線状化し、電気溶出によって精製し、elutip-dカラム(Schleicher and Schuell)で濃縮し、B6D2/F1ハイブリッド雌の受精卵の核注入に使用した。次いで、マイクロインジェクションした卵母細胞を、B6CBA/F1ハイブリッド偽妊娠養母に再移植した。3つのトランスジェニックマウス系統を作製し、C57B6l6/Jマウスと交配した。QIAcube装置のDNAeasy血液組織キット(Qiagen, Courtaboeuf)を使用して、ゲノムDNAを抽出した。推奨されるようにプライマーrtiMHCP1F(配列番号8)及びrtiMHCP1R(配列番号9)並びにDynazyme II酵素(Ozyme, Saint-Quentin-en-Yvelines)を使用してPCRによって、子孫を追跡した。PCRをマウス1匹当たり少なくとも3回実施し、PCR産物をアクリルアミドゲル電気泳動によって分析した。
若干の修正を加えた以外は記載されているように、プラスミド50μgを含む等張NaCl 2mlを、20〜24gのマウスの尾静脈に6〜8秒間かけて単回水圧注入することによって、DNAを投与した。
以前に記載されているように、組織サンプルから単離した全RNAを品質チェック及び濃度コントロールした。製造業者のプロトコール(Ozyme, Saint-Quentin-en-Yvelines)にしたがってRNeasyカラム及びQIAcube自動装置を使用して、培養H9c2心筋芽細胞から全RNAを単離した。
オリゴは、Perlプライマーソフトウェアで設計し、Eurogentec Companyが合成した。MyiQ(商標)リアルタイムPCR装置(Bio-Rad)に記載されているように、SurePrimeキット試薬(MP Biomedicals, Illkirch)を使用して、リアルタイムPCRを実施した。SigmaStat3ソフトウェアを用いて、リアルタイムPCRを統計的に分析した。
OROBOROS Oxygraph-2k (Oroboros Instruments GmbH, Innsbruck, Austria)及び標準Oroboros手順を使用して、O2フローを測定した。CCCPの存在下における酸素消費量を、オリゴマイシンで測定したもので割ることによって、呼吸制御指数(RC)の計算を行った。RCは、呼吸とリン酸化との間の共役のタイトネスを示す。
Victor(商標)X5 2030マルチラベルリーダー(Perkin Elmer, Courtaboeuf)を用いて、製造業者(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)によって推奨されるように、5−(及び−6)−カルボキシ−2’,7’−ジクロロフルオレセインジアセタート(カルボキシ−DCFDA)を使用した。
カスパーゼ−3基質IV蛍光基質(VWR, Strasbourg)及びVictor(商標)X5 2030マルチラベルリーダー(Perkin Elmer, Courtaboeuf)を使用して、カスパーゼ−3アッセイを実施した。
Askari, B. et al., Diabetes 56, 1143-1152, (2007)に記載されているように、アシル−coAシンテターゼ活性を実施した。
シトクロムcオキシダーゼアッセイキットSigma Aldrich (Saint-Quentin-Fallavier)及びVictor(商標)X5 2030マルチラベルリーダー(Perkin Elmer, Courtaboeuf)を使用して、推奨されるように、シトクロムCオキシダーゼ活性を実施した。
Harlow, E et al., Cold spring Harbor Laboratory Press, (1999)に記載されているように、RIPA緩衝液中で、共免疫沈降(Co−IP)及びGSTプルダウンを実施した。
Falcon培養スライド(BD Biosciences, Le Pont de Claix)上で、Bodipy−パルミタート(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)の蛍光検出を実施した。サブコンフルエント細胞を、Bodipy−パルミタート1μMと共に2分間インキュベーションし、リン酸緩衝化生理食塩水(PBS)で2回洗浄し、4%ホルムアルデヒドを含有するPBSによって室温で15分間固定し、続いて、−20℃で5分間固定した。次いで、細胞をPBSで3回洗浄し、蛍光封入剤及びカバースリップで覆ってから、Zeiss LSM 510共焦点顕微鏡(Carl Zeiss Meditec France SAS, Le Pecq)上で分析した。
FAST-PREP (MP Biochemicals)用いてメタノール/5mM EGTA(2:1v/v)2ml中で、細胞又は組織をホモジナイズした。50μlを蒸発させ、乾燥ペレットをNaOH(0.1M)0.2mlに一晩溶解し、Bio-Radアッセイを用いてタンパク質を測定した。
内部標準:スティグマステロール3μg、1,3−ジミリスチン2μg、ヘプタデカン酸コレステリル3μg及びトリヘプタデカン酸グリセリル5μgの存在下、クロロホルム/メタノール/水(2.5:2.5:2.1、v/v/v)で脂質を抽出した。クロロホルム相を蒸発乾固した。SPEカラム(Macherey Nagel glass Chromabond pure silice, 200 mg)によって、中性脂質を分離した。クロロホルム2mlでカートリッジを洗浄した後、抽出物を、クロロホルム20□l中のカートリッジにアプライし、中性脂質をクロロホルム:メタノール溶液(90:10、v/v)2mlで溶出した。有機相を蒸発乾固し、酢酸エチル20μlに溶解した。Zebron-1 Phenomenex融合シリカキャピラリカラム(内径5m×0,32mm膜厚0.50μm)を使用してFOCUSサーモエレクトロンシステムの気液クロマトグラフィーによって、脂質抽出物1μlを分析した。キャリアガスとして水素(0.5bar)を使用して5℃/分の速度で、オーブン温度を200℃〜350℃にプログラムした。注入器及び検出器は、それぞれ315℃及び345℃であった。
内部標準トリヘプタデカン酸グリセリル2μgの存在下でホモジネートを乾燥させ、14%三フッ化ホウ素メタノール溶液(SIGMA)1ml及びヘキサン1ml中、55℃で1時間メチル基転移した。水1mlを抽出物に追加した後、FAMEをヘキサン3mlで抽出し、蒸発乾固し、酢酸エチル20μlに溶解した。Famewax RESTEK融合シリカキャピラリカラム(内径30m×0,32mm膜厚0.25μm)を使用してClarus 600 Perkin Elmerシステムの気液クロマトグラフィーによって、FAME(1μl)を分析した。2℃/分の速度で、オーブン温度を110℃〜220℃にプログラムし、キャリアガスは水素(0.5bar)であった。注入器及び検出器は、それぞれ225℃及び245℃であった。
哺乳動物MCL-1細胞溶解キット溶液(Sigma Aldrich, Saint-Quentin-Fallavier)を用いて、プロテアーゼインヒビターの混合物の存在下で、心臓組織又は肝臓組織を破砕した。製造業者のプロトコールにしたがって、手順を実施した。タンパク質60μgを10%ポリアクリルアミド−SDSゲルにロードし、0.45 μmニトロセルロース膜BA85 (Schleicher and Schuell, Ecquevilly, France)上にブロットした。ウエスタンブロットでは、ローディングコントロールとしてアクチンの代わりにリバーシブルポンソーS染色を使用した。MultiMarkマルチカラースタンダード(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)を使用して、タンパク質の分子量を決定した。0.1%Tween20及び3%脱脂粉乳を含むTBS(7mM Tris、pH7.5;150mM NaCl)中で、ニトロセルロース膜を2時間ブロッキングした。TBS−Tween0.1%中で、抗ApoO血清のハイブリダイゼーションを2時間実施した。TBS−Tween0.1%で3回洗浄した後、TBS−Tween0.1%+3%脱脂粉乳中で、西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲート(10−4希釈)を膜と共に2時間インキュベーションした。ブロットをTween−TBSで3回洗浄し、TBSで1回洗浄してから、製造業者のプロトコール(Fisher Scientific SAS, Illkirch, France)にしたがってSuperSignal West Pico化学発光基質を用いて、ハイブリダイゼーションを明らかにした。
全ての結果は、平均±SEとして示されている。ANOVAを使用して多重比較を分析し、続いて適切な場合にはStatview 4.5ソフトウェア(Abacus Concepts, Inc., Berkeley, CA)を使用してダネット事後検定によって分析した。対応のないスチューデントt検定を使用して、単一比較を実施し、0.05以下のp値を有意であるとみなした。
この結果は、ミトコンドリア機能不全と脂肪毒性との間の相互作用を識別し、マウス及びヒトの心臓における透過性遷移孔と脂質代謝との関連を初めて実証している。また、本発明者らは、ミトコンドリア機能及び脂質代謝の新たなシグナルレギュレーターとしてApoOの重要性を実証する。本発明者らが開発したApoOモデルは、ミトコンドリア心機能障害と脂質蓄積との間の最初の関連性を表す。
ヒト心臓のトランスクリプトームバイオインフォマティクス分析にしたがって、本発明者らは、ApoOを過剰発現する心筋芽細胞における酸化的リン酸化遺伝子の発現の有意な増加を測定した。この増加は、ApoOのN末端欠失及び心筋芽細胞のshApoO処理の両方によって減少した。本発明者らはまた、基礎酸素消費量の2倍の増加(これは、ApoOのミトコンドリア局在性に依存し、ApoO shRNA処理によって縮小した)を示したApoO−Tg心臓及びApoO細胞の両方において、シトクロムCオキシダーゼ活性(呼吸鎖の必須要素)の増加を見出した(図4A)。アンチマイシン(キノンサイクルのインヒビター)は、酸素消費をほぼ完全に阻害したが、これは、測定された呼吸の大部分がミトコンドリア性であることを示している(図4B)。ApoO細胞では、オリゴマイシンによって基礎酸素消費が部分的に阻害され、脱共役剤カルボニルシアニドm−クロロフェニルヒドラゾン(CCCP)の追加は、酸素消費量の2倍の増加をもたらしたが、これは、これらの細胞が高い電子伝達活性を有することを示唆している。呼吸共役(RC)の計算により、ApoO細胞では、RCが減少していることが確認された(図4C)。したがって、ApoOは、ミトコンドリア機能に対する2つの異なる効果(総呼吸の増加及びマイルドな脱共役)を有する。これらの効果はまた、細胞内の活性酸素種(ROS)の増加に関連していた(図4D)。本発明者らは、流体力学的in vivoトランスフェクションマウス肝臓由来の単離されたミトコンドリア(これは、酸素消費量の有意な増加を示した)を用いて、同等の結果を観察した。
公知の治療ターゲットであるミトコンドリア膜透過性遷移孔(MPTP)の適切なレギュレーションは、ミトコンドリア呼吸及び心臓ホメオスタシスに必須である。ApoOのミトコンドリア局在性、並びに適度なApoO過剰発現でミトコンドリア構造及び心機能に対して観察された効果を考慮して、本発明者らは、ApoOが、MPTP機能に関与するタンパク質と相互作用すると仮説した。MPTP構造は、まだ完全には決定されていない。当初、MPTPは、マトリックスにシクロフィリン−D(CypD)と、内膜にアデニンヌクレオチドトランスロカーゼ(ANT)と、外膜に電位依存性アニオンチャネル(VDAC)とを含むと提案された。最近、遺伝子ターゲティングマウス実験により、VDACはMPTPに不要であったことが示された。この細孔は、1.5kDa未満の分子及び代謝産物(プロトンを含む)のミトコンドリアへの自由な通過を可能にし、これがミトコンドリア脱共役につながる。ApoOはミトコンドリア内膜に局在するというコンピュータ予測と一致して、ブルーネイティブページ及びGSTプルダウン実験により、ApoOとシクロフィリン−D及び/又はANTとの間の相互作用が実証され(図5A及びB)、VDACとの相互作用が排除された。
エネルギー源として脂肪酸を使用するミトコンドリアが豊富な組織、例えば心臓及び褐色脂肪組織では、ApoOが高発現されている。したがって、本発明者らは、電子伝達鎖フラックスのApoO誘導性増加が、長鎖脂肪酸(LCFA)のミトコンドリア輸送を増加させると仮定した。LCFAをミトコンドリアに提供するために、細胞は、最終的には、原形質膜における脂肪酸取り込みを増加させるであろう。
MPTP開口は、プログラム細胞死のプロセスにおける重要な工程である。本発明者らは、ApoO過剰発現がアポトーシスを促進すると仮説し、ヒト心臓におけるApoO mRNAレベルとプロアポトーシス因子Baxとの間の正の相関関係を見出した(図9a)。ApoO−Tgマウス由来の心臓におけるApoO過剰発現が適度であっても、Bax発現及びカスパーゼ3活性(図9b〜c)は増強された。ApoOトランスフェクション肝臓を用いてin vivoで(図9d〜e)、及びApoO細胞を用いてin vitroでこれらの結果を確認したところ、Bax発現及びカスパーゼ−3活性の増加は、ApoO shRNA処理によって有意に低減した(図9f〜g)。また、TEMにより、ApoO細胞の原形質膜における小疱形成(これは、プロアポトーシス状態の指標である)が明らかになった。これらの細胞の機能ゲノミクス分析により、プログラム細胞死及び代謝経路のレギュレーションに関与する遺伝子の発現の大幅な増加が明らかになった。低用量のCsAによる処理は、基礎カスパーゼ−3活性及びBax発現の減少を示したApoO細胞を治癒した。実際、これらの細胞は、細胞体凝縮及び細胞質空胞変性の減少を含む特徴的な形態改善を示した。また、ApoO過剰発現は、漸増用量のパルミタートのアポトーシス効果を劇的に増幅し、コントロール細胞におけるカスパーゼ−3活性がやや増加した(図9h)。興味深いことに、パルミタート誘導性のカスパーゼ−3活性は、CsAによる処理によって有意に減少した(図9i)。ApoOは、シクロフィリンD及びANTをターゲティングし、MPTP開口をモデュレーションすることによってアポトーシス及び脂肪毒性を増加させ得る。これらの結果により、病的なApoO過剰発現とミトコンドリア機能不全(これは、最終的には、ミトコンドリア生合成をトリガーするはずである)の誘導との間の潜在的関連性が示唆された。したがって、心臓手術を受けた患者由来のヒト右心耳サンプル、及びApoO−Tgマウス由来の心臓では、ApoO及びPPAR−γコアクチベーター1α(PGC−1α)(ミトコンドリア生合成のマスターレギュレーター)の発現は密接に相関している。本発明者らは、ミトコンドリア合成の増加が、ApoO−Tg心臓及びApoO細胞で観察された自食作用胞及び多層体におけるミトコンドリアの変質及び分解をバランスすると仮定した(図10a〜d)。本発明者らは、ApoO誘導性のアポトーシス及びミトコンドリアの変質が、細胞死に至る悪循環へと細胞を誘導すると仮説した。本発明者らが線維形成及びアポトーシスの発生によって証明したように、この仮説により、ApoO−Tg心臓で観察された筋原線維及び心筋細胞の喪失が説明される。本発明者らの結果に基づいて、本発明者らは、ApoOが、図10eに示されているモデルにおける中心的分子であると提案する。
材料及び方法
U87神経膠芽腫の細胞培養及びトランスフェクション
U87は、European Collection of Cell Cultures (Salisbury, England). p y, g )から入手した。1.5g/リットルの重炭酸ナトリウムを含有するように調整し、抗生物質−抗真菌溶液(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)及び10%ウシ胎児血清(FBS, AbCys s.a., Paris)を補充したダルベッコ改変イーグル培地(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)中で、U87細胞を培養した。細胞を直径10cmの組織培養皿上にプレーティングし、37℃、飽和湿度の5%CO2インキュベーターで成長させ、培地を2日ごとに交換した。エレクトロポレーションによってU87神経膠芽腫を安定トランスフェクションし、以前に記載されているように(Smih et al 2002)、トランスフェクタントのプールを選択した。
プロテアーゼインヒビターの混合物の存在下で、培養細胞をRIPA緩衝液(0.15M塩化ナトリウム、1%NP−40、0.5%デオキシコール酸ナトリウム、0.1%SDS、50mM Tris、pH8)に再懸濁した。溶解物を6秒間超音波処理し、6,500×gで10分間遠心分離した。タンパク質20μgを12%ポリアクリルアミド−SDSゲルにロードし、0.45 μmニトロセルロース膜BA85 (Schleicher and Schuell, Ecquevilly, France)上にブロットした。ローディングコントロールとしてリバーシブルポンソーS染色を使用した。MultiMarkマルチカラースタンダード(Life Technologies SAS, Villebon sur Yvette)を使用して、タンパク質の分子量を決定した。0.1%Tween20及び3%脱脂粉乳を含むTBS(10mM Tris、pH8.8、150mM NaCl)中で、ニトロセルロース膜を2時間ブロッキングした。次いで、膜を所望の抗体とハイブリダイゼーションさせた。ApoOタンパク質を明らかにするために、膜を、TBS−Tween0.1%緩衝液を含む抗ApoO血清と共に4℃で一晩インキュベーションした。TBS−Tween0.1%で3回洗浄した後、TBS−Tween0.1%+3%脱脂粉乳中で、100,000倍希釈の西洋ワサビペルオキシダーゼ結合ウサギ抗体(Life Technologies SAS, Saint Aubin, France)を膜と共に2時間インキュベーションした。ブロットをTBS−Tween1%で3回洗浄し、TBSで1回洗浄してから、製造業者のプロトコール(Fisher Scientific SAS, Illkirch, France)にしたがってSuperSignal West Pico化学発光基質を用いて、ハイブリダイゼーションを明らかにした。製造業者のプロトコールにしたがって、カルレティキュリン(Epitomics, Burlingame, USA)抗体によるハイブリダイゼーション及び顕色を実施した。ImageJソフトウェアを用いて、タンパク質の免疫バンドのデンシトメトリーを定量した。
pTTのみ又はpTT−ApoOで予めトランスフェクションした神経膠芽腫を100μMパルミタートで一晩処理した。以前に記載されているように(Hickson−Bick et al. 2000; Hirota et al. 2006)、パルミタートの調製及びカスパーゼ−3活性のアッセイを実施した。カスパーゼ−3基質IV蛍光基質(VWR, Strasbourg)及びVictorTM X5 2030マルチラベルリーダー(Perkin Elmer, Courtaboeuf)を用いて、カスパーゼ−3活性を測定した。
本発明者らは、ApoOを過剰発現するU87トランスフェクタント細胞を開発した(図12)。U87は、本発明者らが本実験のためにEuropean Collection of Cell Culturesから入手したヒト初代神経膠芽腫細胞株である。
−コントロールU87細胞(pTT);及び
−ApoOを過剰発現するU87トランスフェクタント(pTT−ApoO)において、
カスパーゼ−3活性を測定及び比較した。
現在では、代謝調節障害は、ガン細胞の顕著な特徴であることが広く認められている。加えて、神経膠芽腫細胞は、浸潤性腫瘍の成長中にミトコンドリアのグルコース酸化を使用することが公知である。
本発明者らは、ApoOの発現をサイレンシングするショートヘアピンRNA(shApoO)で神経膠芽腫細胞を処理した後、酸素消費量を比較した。
加えて、本発明者らは、
−ApoOを発現しない神経膠芽腫細胞では、パルミタートの存在下であっても、脂質が蓄積しないのに対して;
−ApoOを発現する神経膠芽腫細胞では、パルミタートの存在下で、脂質が蓄積することを説明した。
最後に、本発明者らは、神経膠芽腫細胞におけるApoOの発現又は過剰発現が、異常ミトコンドリアの発生を誘導することを明らかにした。
本発明者らは、神経膠芽腫細胞において、ApoOを発現するAAV9を使用することによってApoOの過剰発現を誘導することの立証責任を果たした。AAV9は血液脳関門を通過することができるので、アデノ随伴ウイルス9の使用は、遺伝子を脳細胞に送達するのに非常に便利である。
Claims (18)
- ガン性細胞におけるアポトーシスを誘導するために使用するための化合物であって、ApoO、その変異体又はフラグメント、それらの混合物及び前記ApoO、その変異体又はフラグメントをコードするベクターからなる群より選択される、化合物。
- ガン性細胞におけるアポトーシスを誘導することによってガンを処置するために使用するための化合物であって、ApoO、その変異体又はフラグメント、それらの混合物及び前記ApoO、その変異体又はフラグメントをコードするベクターからなる群より選択される、化合物。
- 前記ガン性細胞が、高含量のミトコンドリアを有する細胞、好ましくは、少なくとも30体積%、好ましくは40体積%のミトコンドリアを含む細胞である、請求項1又は2に記載の使用のための化合物。
- 前記ガン性細胞が、心臓細胞、肝臓細胞、膀胱細胞、脳細胞、乳房細胞、結腸細胞、直腸細胞、子宮内膜細胞、腎細胞、血液細胞、表皮細胞、膵臓細胞、前立腺細胞及び甲状腺細胞からなる群より選択される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- 前記ガン性細胞が脳ガン細胞であり、前記脳ガンが、脊索腫、頭蓋咽頭腫、神経節細胞腫、神経節腫、未分化神経節膠腫、頸静脈小体、髄膜腫、松果体細胞腫、下垂体腺腫、神経鞘腫、神経膠腫、血管芽細胞腫及びラブドイド腫瘍を含む脳ガンから選択される、請求項4に記載の使用のための化合物。
- 前記ガン性細胞が、星状細胞、上衣細胞及び希突起膠細胞からなる群より選択される、請求項5に記載の使用のための化合物。
- 前記ガンが膠芽細胞腫である、請求項2〜6のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- ヒトApoO、好ましくは配列番号1に示されているヒトApoOである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- ApoOフラグメントであり、30〜190、好ましくは50〜130、より好ましくは70〜120アミノ酸の長さを有する、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- ApoOフラグメントであり、8〜190、好ましくは8〜100、より好ましくは8〜50アミノ酸の長さを有する、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- 配列番号10、配列番号11及び配列番号12に示されているフラグメントからなる群より選択されるApoOフラグメントである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- 配列番号12に示されているApoOフラグメントである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- ApoOフラグメントであり、ネイティブなApoOのN末端の少なくとも40アミノ酸を含む、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- MPTPと相互作用してMPTPが開口状態をとるようにし、それにより、ミトコンドリア脱共役を誘導する、請求項1〜13のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- CyPD又はANTと相互作用する、請求項14に記載の化合物。
- ミトコンドリア呼吸を増加させ、脂肪酸代謝を増加させ、前記ガン性細胞内の脂質蓄積を誘導する、請求項1〜15のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- 肥満、糖尿病、脂肪肝、膵炎及び甲状腺機能低下症からなる群より選択される病態生理学的状態を処置するための方法において使用するための化合物であって、ApoO活性又はApoO遺伝子発現のインヒビターである、化合物。
- 病態生理学的状態、好ましくは肥満、糖尿病、心筋症、筋障害、脂肪肝、膵炎及び/又は甲状腺機能低下症における脂質過負荷を軽減するための方法において使用するための化合物であって、ApoO活性又はApoO遺伝子発現のインヒビターである、化合物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP14305565.5 | 2014-04-16 | ||
EP14305565 | 2014-04-16 | ||
PCT/EP2015/058143 WO2015158760A1 (en) | 2014-04-16 | 2015-04-15 | ApoO FOR USE IN A METHOD FOR TREATING CANCER AND VARIOUS PATHOPHYSIOLOGICAL SITUATIONS |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017513490A true JP2017513490A (ja) | 2017-06-01 |
JP2017513490A5 JP2017513490A5 (ja) | 2018-05-31 |
JP6698031B2 JP6698031B2 (ja) | 2020-05-27 |
Family
ID=50513864
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016563136A Active JP6698031B2 (ja) | 2014-04-16 | 2015-04-15 | ガン及び様々な病態生理学的状態を処置するための方法において使用するためのApoO |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10272135B2 (ja) |
EP (2) | EP3131569B1 (ja) |
JP (1) | JP6698031B2 (ja) |
CA (1) | CA2945880A1 (ja) |
WO (1) | WO2015158760A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021049633A1 (ja) | 2019-09-11 | 2021-03-18 | 国立大学法人熊本大学 | 難治性遺伝性腎疾患アルポート症候群の根治療法のための薬剤 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012072681A1 (en) * | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) | Diagnostic and treatment of chronic heart failure |
WO2013183964A1 (ko) * | 2012-06-07 | 2013-12-12 | 한양대학교 산학협력단 | 폐암 진단 및 치료를 위한 표적 단백질 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
AUPP249298A0 (en) | 1998-03-20 | 1998-04-23 | Ag-Gene Australia Limited | Synthetic genes and genetic constructs comprising same I |
GB9927444D0 (en) | 1999-11-19 | 2000-01-19 | Cancer Res Campaign Tech | Inhibiting gene expression |
AU2001245793A1 (en) | 2000-03-16 | 2001-09-24 | Cold Spring Harbor Laboratory | Methods and compositions for rna interference |
TWM441048U (en) * | 2012-06-18 | 2012-11-11 | qing-huang Wang | Fan blade |
-
2015
- 2015-04-15 JP JP2016563136A patent/JP6698031B2/ja active Active
- 2015-04-15 US US15/304,160 patent/US10272135B2/en active Active
- 2015-04-15 CA CA2945880A patent/CA2945880A1/en not_active Abandoned
- 2015-04-15 WO PCT/EP2015/058143 patent/WO2015158760A1/en active Application Filing
- 2015-04-15 EP EP15716524.2A patent/EP3131569B1/en active Active
- 2015-04-15 EP EP19214261.0A patent/EP3639843A1/en not_active Withdrawn
-
2019
- 2019-03-11 US US16/298,360 patent/US20190209648A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012072681A1 (en) * | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) | Diagnostic and treatment of chronic heart failure |
WO2013183964A1 (ko) * | 2012-06-07 | 2013-12-12 | 한양대학교 산학협력단 | 폐암 진단 및 치료를 위한 표적 단백질 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
福田 一典: "代謝をターゲットにしたがん治療", 日本伝統獣医学会誌, vol. 第21巻,第2号, JPN6018051488, November 2013 (2013-11-01), pages p.42−49 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021049633A1 (ja) | 2019-09-11 | 2021-03-18 | 国立大学法人熊本大学 | 難治性遺伝性腎疾患アルポート症候群の根治療法のための薬剤 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3639843A1 (en) | 2020-04-22 |
WO2015158760A1 (en) | 2015-10-22 |
US10272135B2 (en) | 2019-04-30 |
US20190209648A1 (en) | 2019-07-11 |
US20170035842A1 (en) | 2017-02-09 |
EP3131569B1 (en) | 2020-05-27 |
EP3131569A1 (en) | 2017-02-22 |
CA2945880A1 (en) | 2015-10-22 |
JP6698031B2 (ja) | 2020-05-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Fan et al. | ECM1 prevents activation of transforming growth factor β, hepatic stellate cells, and fibrogenesis in mice | |
Dai et al. | MiR-21 protected against diabetic cardiomyopathy induced diastolic dysfunction by targeting gelsolin | |
Tian et al. | ANGPTL2 activity in cardiac pathologies accelerates heart failure by perturbing cardiac function and energy metabolism | |
KR102378462B1 (ko) | 비알코올성 간질환 동물 모델 및 비알코올성 간질환의 진단, 예방 또는 치료용 조성물 | |
Chen et al. | Knockdown of circROBO2 attenuates acute myocardial infarction through regulating the miR-1184/TRADD axis | |
Shen et al. | Reversal of prolonged obesity-associated cerebrovascular dysfunction by inhibiting microglial Tak1 | |
Tu et al. | Cardiolipin synthase 1 ameliorates NASH through activating transcription factor 3 transcriptional inactivation | |
Das et al. | Specific PKC βII inhibitor: one stone two birds in the treatment of diabetic foot ulcers | |
US20070167386A1 (en) | Remedy for cardiac failure containing ask1 inhibitor as active ingredient and method for screening the same | |
Du et al. | Protective Effect of miR‐204 on Doxorubicin‐Induced Cardiomyocyte Injury via HMGB1 | |
Shahzadi et al. | Nicotinamide riboside kinase-2 inhibits JNK pathway and limits dilated cardiomyopathy in mice with chronic pressure overload | |
Yu et al. | (Pro) renin receptor RNA interference silencing attenuates diabetic cardiomyopathy pathological process in rats | |
Hu et al. | PRDM16 exerts critical role in myocardial metabolism and energetics in type 2 diabetes induced cardiomyopathy | |
Marzano et al. | Genetic catalytic inactivation of GRK5 impairs cardiac function in mice via dysregulated p53 levels | |
US20190209648A1 (en) | ApoO FOR USE IN A METHOD FOR TREATING CANCER AND VARIOUS PATHOPHYSIOLOGICAL SITUATIONS | |
Avalle et al. | Liver-specific siRNA-mediated Stat3 or C3 knockdown improves the outcome of experimental autoimmune myocarditis | |
WO2017146227A1 (ja) | アトピー性皮膚炎モデル非ヒト動物及びその使用 | |
EP2646572B1 (en) | Diagnostic and treatment of chronic heart failure | |
US11235073B2 (en) | Method for treating or preventing heart failure | |
CN114344468B (zh) | NFAT的lncRNA非编码阻遏子在血管相关疾病的用途 | |
WO2018231025A2 (ko) | 면역세포 이동에 의한 질환의 치료제 및 이의 스크리닝 방법 | |
CN114306371B (zh) | Nron的表达促进剂在制备动脉粥样硬化斑块动物模型中的用途 | |
Zhang et al. | Targeted suppression of microRNA-33 in lesional macrophages using pH low-insertion peptides (pHLIP) improves atherosclerotic plaque regression | |
Ni et al. | HIF‐1α and adaptor protein LIM and senescent cell antigen‐like domains protein 1 axis promotes tubulointerstitial fibrosis by interacting with vimentin in angiotensin II‐induced hypertension | |
Li et al. | Recombinant EGFL7 Mitigated Pressure Overload-Induced Cardiac Remodeling by Blocking PI3K [... formula...]/AKT/[... formula...] Signaling in Macrophages |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20171030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20171030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180413 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180413 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190108 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190405 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191001 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200331 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200427 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6698031 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |