JP2017503849A - タンパク質誘導生体内細胞リプログラミングによる細胞転換に関する方法、システム、及び組成物 - Google Patents

タンパク質誘導生体内細胞リプログラミングによる細胞転換に関する方法、システム、及び組成物 Download PDF

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Abstract

必要とする対象者を治療する方法であって、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象者に投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含む方法が提供される。態様によれば、こうした方法は、腫瘍細胞等の癌細胞及び罹患組織の罹患細胞へのタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の送達をもたらすと共に、タンパク質誘導原位置細胞リプログラミングによる罹患細胞の正常細胞への生体内転換を、対象者へ核酸を投与することなくもたらす。【選択図】なし

Description

助成金について
本発明は、米国国立衛生研究所/米国国立癌研究所が授与したGrant No.1 R01 CA172480-01A1の下、政府の支援を受けて成されたものである。政府は、本発明に一定の権利を有する。
本発明は、必要とする対象者において病態を治療する方法、システム、及び組成物に関する。特定の態様において、本発明は、必要とする対象者において病態を治療する生体内での細胞転換のタンパク質誘導のための方法、システム、及び組成物に関する。
近年の医療の進歩にも拘わらず、疾患及び損傷を治療する方法及び組成物に対する必要性が引き続き存在している。
J. Sambrook and D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3rd Ed., 2001
本発明の態様により提供される、必要とする対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質(タンパク質形質導入試薬により修飾されたリプログラミングタンパク質(protein transduction reagent-modified reprogramming protein))を含む医薬組成物を対象者に投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含む。
本発明の態様により提供される、必要とする対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象に投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含み、対象者は、癌と、膵臓疾患又は損傷と、急性心筋梗塞、慢性心筋梗塞、及び心不全等の心臓疾患又は心臓損傷と、家族性高コレステロール血症(FH)、クリグラー・ナジャー症候群、及び遺伝性高チロシン血症I型等の肝臓損傷又は肝臓疾患と、アテローム性動脈硬化と、脊髄損傷、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、及びパーキンソン病等の神経疾患又は損傷と、関節炎と、関節疾患又は損傷と、血液疾患と、糖尿病と、肥満症と、筋肉疾患又は損傷と、軟骨疾患又は損傷と、乳房疾患又は損傷と、血管疾患又は損傷とからなる群から選択される疾患を有する。
本発明の態様により提供される、損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象者に投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含む。
癌を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象者に投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含む。
本発明の態様により提供される、癌を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogからなる群から選択されるタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を投与することを含む。
本発明の態様により提供される、癌を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを含む医薬組成物を投与することを含む。
本発明の態様により提供される、脳腫瘍又は乳癌を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogからなる群から選択される、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を投与することを含む。
本発明の態様により提供される、脳腫瘍又は乳癌を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを含む医薬組成物を投与することを含む。
本発明の態様により提供される、損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態を有する対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象者に投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含み、前記状態は、心臓疾患又は心臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5のうち一種類以上を含み、前記状態は、肝臓疾患又は肝臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を含み、前記状態は、肝臓疾患又は肝臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を含み、前記状態は、アテローム性動脈硬化であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ、及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1のうち1種以上を含み、前記状態は、神経変性疾患又は神経組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1の一方又は両方、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2及びタンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち1種以上を含み、前記状態は、血液の疾患又は障害であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4を含み、前記状態は、糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち1種以上を含み、前記状態は、肥満症であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPbのうち1種以上を含み、前記状態は、筋肉疾患又は筋肉損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾MyoDを含み、前記状態は、関節炎又は関節疾患若しくは損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち1種以上を含み、前記状態は、乳房疾患又は乳房組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1lのうち1種以上を含み、前記状態は、血管疾患又は血管損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18の一方又は両方を含む。
本発明の態様により提供される医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、タンパク質形質導入試薬修飾Tbox、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ、タンパク質形質導入試薬修飾PU.1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、タンパク質形質導入試薬修飾Pax4、タンパク質形質導入試薬修飾MafA、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16、タンパク質形質導入試薬修飾MyoD、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1l、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、タンパク質形質導入試薬修飾Gata2,タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18からなる群から選択される1種以上のタンパク質形質導入試薬-リプログラミングタンパク質を含む。
本発明の態様により提供される医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5からなる群から選択される2種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質と、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ、及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1と、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2と、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1と、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2と、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2及びタンパク質形質導入試薬修飾Ascl1と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4と、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPβと、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1lのうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち2種以上と、又はタンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18と、を含む。
本発明による方法は、腫瘍細胞等の癌細胞及び罹患組織の罹患細胞へのタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の送達を可能にする。
本発明の態様による方法は、タンパク質誘導原位置細胞リプログラミングによる罹患細胞の正常細胞への生体内転換を提供する。本発明の態様による方法は、タンパク質誘導原位置細胞リプログラミングによる癌細胞の正常細胞への生体内転換を提供する。
癌細胞又は罹患細胞を原位置にてリプログラミングし、癌細胞又は罹患細胞が位置していた組織において正常細胞に分化するように誘導される幹細胞又は過渡的タンパク質誘導多能性幹細胞とするための、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の使用が、本発明の態様により提供される。
癌細胞を殺すのではなく、代わりに、1種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の全身投与又は局所投与等の投与により癌細胞を非癌細胞に転換することにより、生体内で癌を治療する、癌を治療する方法が、本発明の態様により提供される。
図1Aは、QQフェリチンに対する9L脳腫瘍における血管透過性・滞留性亢進効果を示す9L頭蓋内腫瘍保持ラットの脳の代表MRI画像であり、静脈注射したQQフェリチンが、血管透過性・滞留性亢進効果により、9L脳腫瘍内に送達され、9L脳腫瘍保持ラットの脳腫瘍のネガMRI画像の強調を発生させたことを示す図である。 図1Bは、QQ修飾の無いフェリチンに対する9L脳腫瘍における血管透過性・滞留性亢進効果の不在を示す9L頭蓋内腫瘍保持ラットの脳の代表MRI画像であり、静脈注射したフェリチンが9L脳腫瘍内に到達せず、9L脳腫瘍保持ラットにおいて脳腫瘍のネガMRI画像の強調が観察されなかったことを示す図である。 図2Aは、QQフェリチンの尾静脈注射前の4T1乳房腫瘍を有するマウスの代表MRI画像を示す図である。 図2Bは、QQフェリチンの尾静脈注射後0.5時間の4T1乳房腫瘍を有するマウスの代表MRI画像を示す図である。 図2Cは、QQフェリチンの尾静脈注射後2時間の4T1乳房腫瘍を有するマウスの代表MRI画像を示す図である。 図2Dは、QQフェリチンの尾静脈注射後3.5時間の4T1乳房腫瘍を有するマウスの代表MRI画像を示す図である。 図2Eは、QQフェリチンの尾静脈注射後8時間の4T1乳房腫瘍を有するマウスの代表MRI画像を示す図である。 図2Fは、QQフェリチンの尾静脈注射後18時間の4T1乳房腫瘍を有するマウスの代表MRI画像を示す図である。 図3Aは、Ki67アッセイによりモニターしたU251細胞及びU251-piPSCの増殖を示すグラフである。 図3Bは、アルキル化剤テモゾロミドに対する患者由来初代ヒトGBM(12-14)細胞(四角)及びGBM(12-14)-piPSC(丸)の用量依存的化学療法薬感受性を示すグラフである。 図3Cは、カルボプラチンに対する9L細胞(四角)及び9L-piPSC(丸)の用量依存的化学療法薬感受性を示すグラフである。 図4Aは、E-カドヘリン(E-cad)、β-カテニン(β-cat)、ビメンチン(VMT)を含む、U251細胞及びU251-piPSCの幾つかの上皮及び間葉マーカーのウエスタンブロットを示す画像であり、細胞リプログラミング中の間葉上皮転換(MET)を示す図である。加えて、9L細胞の9L-piPSCへの細胞リプログラミングは、アストロサイトのマーカーであるグリア線維酸性タンパク質(GFAP)の発現増強を引き起こす。 図4Bは、本発明の態様による細胞リプログラミング後のU251細胞の腫瘍原性の減少が、U251細胞及びU251-piPSCの細胞移動に対するインビトロアッセイにより確認されたことを示すグラフであり、インビトロでのU251-piPSCの移動の有意な減少(p<0.01)を示す図である。 図4Cは、本発明の態様による細胞リプログラミング後のU251細胞の腫瘍原性の減少が、U251細胞及びU251-piPSCの浸潤に対するインビトロアッセイにより確認されたことを示すグラフであり、インビトロでのU251-piPSCによる浸潤の有意な減少(p<0.01)を示す図である。 図4Dは、親である4T1細胞及び67NR細胞の特性と比較した、4T1-piPSC及び67NR-piPSCの増殖の減少を示すグラフであり、インビトロでの4T1-piPSC及び67NR-piPSCへの細胞リプログラミング後の4T1細胞及び67NR細胞の腫瘍原性の有意な減少を示す図である。 図4Eは、親4T1細胞の特性と比較した、4T1-piPSCの乳房球体形成の減少を示すグラフであり、インビトロでの4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後の4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示す図である。 図4Fは、親4T1細胞の特性と比較した、4T1-piPSCの移動の減少を示すグラフであり、インビトロでの4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後の4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示す図である。 図4Gは、親4T1細胞の特性と比較した、4T1-piPSCの浸潤の減少を示すグラフであり、インビトロでの4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後の4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示す図である。 図5Aは、U251細胞の細胞形態の画像を示す図である。 図5Bは、U251-piPSCとの間接共培養を40乃至64時間行ったU251細胞の細胞形態の変化を示す画像であり、間葉上皮転換を示すと共にU251細胞に対するU251-piPSCの傍観者効果を実証する図である。 図5Cは、U251-piPSCと、U251-piPSC及びU251細胞の比を1:1としてU251-piPSCと間接共培養したU251細胞とにおける、増殖の有意な減少を示すグラフであり、共培養U251細胞の腫瘍原性の有意な減少を示すと共に傍観者効果の観察を裏付ける図である。 図5Dは、U251-piPSCと、1:1及び8:1の比(U251:U251-piPSC)でU251-piPSCと間接共培養したU251細胞とにおける、移動の有意な減少(p<0.005)を示すグラフであり、共培養U251細胞の腫瘍原性の有意な減少を示すと共に傍観者効果の観察を裏付ける図である。 図5Eは、U251-piPSCと、1:1及び8:1の比(U251:U251-piPSC)でU251-piPSCと間接共培養したU251細胞とにおける、浸潤の有意な減少(p<0.005)を示すグラフであり、共培養U251細胞の腫瘍原性の有意な減少を示すと共に傍観者効果の観察を裏付ける図である。 図5Fは、4T1-piPSCとの共培養を40時間行った4T1細胞における増殖の有意な減少を示すグラフであり、共培養4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示すと共に傍観者効果の観察を裏付ける図である。 図5Gは、4T1-piPSCとの共培養を40時間行った4T1細胞における移動の有意な減少を示すグラフであり、共培養4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示すと共に傍観者効果の観察を裏付ける図である 図5Hは、4T1-piPSCとの共培養を40時間行った4T1細胞における浸潤の有意な減少を示すグラフであり、共培養4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示すと共に傍観者効果の観察を裏付ける図である。 図6Aは、9L細胞又は9L-piPSCを頭蓋内移植したラット(n=10)における14日目の腫瘍体積(mm3)を示し、9L腫瘍の体積と比較した頭蓋内9L-piPSC腫瘍の体積の有意な減少を示すグラフであり、生体内での9L-piPSCへの細胞リプログラミング後の9L細胞の腫瘍原性の有意な減少を示す図である。 図6Bは、9L細胞及び9L-piPSCを皮下移植したラットにおける移植後25日目(n=6)の腫瘍重量(グラム)を示し、9L腫瘍の重量と比較した皮下9L-piPSC腫瘍の重量の有意な減少を示すグラフであり、生体内での9L-piPSCへの細胞リプログラミング後の9L細胞の生体内腫瘍原性の有意な減少を示す図である。 図6Cは、4T1及び4T1-piPSC移植後25日間の腫瘍体積を用いて測定した4T1及び4T1-piPSC腫瘍成長曲線を示すグラフであり、生体内での4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後の4T1細胞の有意な生体内での腫瘍の停滞を示す図である。 図6Dは、4T1及び4T1-piPSC移植後25日目の腫瘍重量を用いて測定した4T1及び4T1-piPSC腫瘍成長曲線を示すグラフであり、生体内での4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後の4T1細胞の有意な生体内での腫瘍の停滞を示す図である。 図6Eは、4T1細胞又は4T1-piPSCを移植したマウスにおける細胞移植後25日目の肺転移を示すグラフであり、生体内での4T1細胞の4T1-piPSCへの細胞リプログラミングにより生じた広範な生体内転移阻害を示す図であり、肺を200の領域に分割し、転移数を計数してy軸に示した。 図6Fは、4T1細胞及び4T1-piPSCを#4脂肪パッドに移植したマウスのカプラン・マイヤ生存率曲線であり、250日間の生存実験中の4T1-piPSCの有意な生存期間の延長を実証し、悪性癌細胞のpiPSCへの細胞リプログラミングが親癌細胞の腫瘍原性及び転移特性を有意に減少させることを示す図である。 図7Aは、PBSバッファ中のQQ試薬(n=10)、QQ-SONタンパク質1μg/日(n=5)、QQ-SONタンパク質5μg/日(n=5)、及びQQ-SONタンパク質10μg/日(n=10)による18日間の治療を9L細胞移植後5日目に行い、23日目に屠殺したラットにおける腫瘍体積により測定した用量依存性9L腫瘍成長曲線を示すグラフである。 図7Bは、PBSバッファ中のQQ試薬(n=10)、QQ-SONタンパク質1μg/日(n=5)、QQ-SONタンパク質5μg/日(n=5)、及びQQ-SONタンパク質10μg/日(n=10)による18日間の治療を9L細胞移植後5日目に行い、23日目に屠殺したラットにおける9L腫瘍重量を示すグラフである。 図7Cは、皮下9L腫瘍を有するマウスをPBS中のQQ試薬(実線、n=6、生存期間中央値=21日間)又はQQ-SONタンパク質(破線、10μg/日、n=8、生存期間中央値=127日間)により30日間毎日治療し、腫瘍体積が12cm3に達した時点をエンドポイントとしたカプラン・マイヤ生存率曲線(130日間)を示す図である。 図7Dは、25日間の経時的な乳房の腫瘍体積によりモニターした4T1腫瘍の成長に対する様々なQQ-SONタンパク質用量の影響を示すグラフである。 図7Eは、25日目の乳房における4T1腫瘍の重量に対する様々なQQ-SONタンパク質用量を示すグラフである。 図7Fは、QQ-SONタンパク質(n=8)又は対照としてQQ-PBS(n=8)により治療した4T1腫瘍保持マウスのMRIイメージングにより判定した様々な時点での腫瘍体積の変化を示すグラフであり、原発腫瘍の除去の無い広範な腫瘍の停滞を示す図である。 図7Gは、QQ-SONタンパク質(n=8)又は対照としてのQQ-PBS(n=8)により治療した4T1腫瘍保持マウスの35日目における腫瘍重量を示すグラフであり、原発腫瘍の除去の無い広範な腫瘍の停滞を示す図である。 図7Hは、QQ-PBS(対照、点線)及びQQ-SONタンパク質(治療、実線)により治療した4T1乳癌保持マウスの、図7Hに示す原発4T1乳癌を除去しない60日間の生存実験中のカプラン・マイヤ生存率曲線を示す図である。治療は、4T1細胞移植後5日目に開始した。腫瘍サイズの負荷、努力呼吸、抑制不可能な痛み等を含むエンドポイントに達したマウスは屠殺した。 図7Iは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIにより肺に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスのパーセンテージを示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Jは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIによりリンパ節に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスのパーセンテージを示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Kは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIにより肝臓に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスのパーセンテージを示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Lは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIにより脾臓に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスのパーセンテージを示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Mは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIにより肺に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスでのマウス当たりの平均数を示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Nは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIによりリンパ節に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスでのマウス当たりの平均数を示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Oは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIにより肝臓に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスでのマウス当たりの平均数を示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図7Pは、原発腫瘍を除去せず、QQ-SON又はQQ-PBSにより治療し、記載の日数においてMRIにより膵臓に転移巣が観察された4T1腫瘍保持マウスでのマウス当たりの平均数を示すグラフであり、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示す図である。 図8は、18日目の原発4T1乳癌の外科的除去及び6日目に開始したQQ-SONタンパク質治療後の4T1乳癌保持マウスのカプラン・マイヤ生存率曲線(250日間生存)を示す図である。
本明細書に用いた化学用語及び技術用語は、当業者が通常理解する意味を有するものとする。こうした用語は、以下を例として含む様々な標準的参考文献の文中で定義及び使用されている:J. Sambrook and D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3rd Ed., 2001、F.M. Ausubel, Ed., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols; 5th Ed., 2002、B. Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 4th Ed., Garland, 2002、D.L. Nelson and M.M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry, 4th Ed., W.H. Freeman & Company, 2004、Engelke, D.R., RNA Interference (RNAi): Nuts and Bolts of RNAi Technology, DNA Press LLC, Eagleville, PA, 2003、Herdewijn, P. (Ed.), Oligonucleotide Synthesis: Methods and Applications, Methods in Molecular Biology, Humana Press, 2004、A. Nagy, M. Gertsenstein, K. Vintersten, R. Behringer, Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual, 3rd edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; December 15, 2002, ISBN-10: 0879695919、Kursad Turksen (Ed.), Embryonic stem cells: methods and protocols in Methods Mol Biol. 2002;185, Humana Press; Current Protocols in Stem Cell Biology, ISBN: 9780470151808。
単数の用語である「a」、「an」、及び「the」は、限定的ではなく、特に明記されていない限り、或いは文脈から明らかとなる場合を除き、複数の指示物を含むものとする。
本発明の態様による方法、システム、及び組成物は、必要とする対象者を治療するための生体内でのタンパク質誘導細胞リプログラミングを提供する。
本発明の態様による方法、システム、及び組成物は、1種以上のQQ修飾リプログラミングタンパク質を生体内の罹患又は損傷細胞内へ導入することにより、罹患又は損傷細胞の正常細胞への転換を、1種以上のリプログラミングタンパク質をコードする核酸を導入することなく提供する。
本発明の態様による方法、システム、及び組成物は、1種以上のQQ修飾リプログラミングタンパク質を生体内の癌細胞内へ導入することにより、癌細胞の非癌細胞への転換を、1種以上のリプログラミングタンパク質をコードする核酸を導入することなく提供する。
本発明の態様により提供される、必要とする対象者を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象者に全身投与及び/又は局所投与することを含み、タンパク質形質導入試薬は、リプログラミングタンパク質に非共有結合し、タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含む。
本発明の態様により、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物が提供される。
「タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質」は、本明細書において「QQ試薬」とも記載されるタンパク質形質導入試薬により処理されたリプログラミングタンパク質である。「タンパク質形質導入試薬」という用語は、タンパク質形質導入試薬に非共有結合したタンパク質の哺乳類細胞内への送達を可能にすると共に、哺乳類細胞内に存在した際に、タンパク質から解離し、適切な細胞内位置へタンパク質を適切に送達させる上で有効な組成物を示す。タンパク質形質導入試薬は、本明細書において「QQ試薬」とも記載され、少なくとも1つのカチオン試薬と、少なくとも1つの脂質と、任意にエンハンサーとを含む。本明細書で用いられる「QQ修飾リプログラミングタンパク質」という用語及びその文法的変形は、本明細書で用いられる「タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質」及びその文法的変形と等価である。同様に、「QQ」タンパク質と呼ばれる1種以上のタンパク質は、タンパク質がタンパク質形質導入試薬を用いた処理により修飾されており、「タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質」であることを意味する。例えば、「QQ-SON」という用語は、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングSox2、Oct4、及びNanogタンパク質を生成するために、本明細書に記載したようにタンパク質形質導入試薬を用いた処理により修飾したSox2、Oct4、及びNanogタンパク質の混合物を示す。
適切なカチオン試薬の一例は、ポリエチレンイミン(PEI)であり、例えば、限定ではないが、PEI Mw1,200(PEI 1.2K)、PEI Mw2000(PEI 2K)、PEI Mw4000(PEI 4K)、及びPEI Mw8000(PEI 8K)である。脂質は、本明細書に記載したものと同じ一般的性質を有する、当業者に既知の任意の脂質にすることができる。こうした脂質の例には、限定ではないが、DOTMA(N-1(-(2,3-ジオレイルオキシ)プロピル-N,N,N-トリメチル-アンモニウムクロリドと、DOGS(ジオクタデシルアミド-グリシルスペルミン)と、DOTAP、1,2-ジオレオイル-3-トリメチルアンモニウム-プロパンと、DOPE、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンと、POPC、1-パルミトイル-2-オレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンと、DMPE、1,2-ジミリストイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンとが含まれる。
任意に、タンパク質形質導入試薬は、ポリエチレンイミンをカチオン試薬として含み、脂質は、DOTAP若しくはDOTMA及びDOPE若しくはDOGS、POPC及びDMPE、又はDOTAP若しくはDOTMA、DOPE若しくはDOGS、POPC及びDMPEとなる。任意に、タンパク質形質導入試薬は、表1に記載されるように、QQ1a、QQ2a、QQ3a、QQ4a、QQ5a、QQ6a、QQ7a、QQ8a、QQ9aである。
任意のエンハンサーは、細胞によるカチオン化タンパク質の取り込みを有意に促進する何れかのエンハンサーにすることができる。細胞培養におけるこうしたエンハンサーの例には、限定ではないが、MG132、プロテアーゼ阻害剤、CaCl2、DMSO、及び成長因子が含まれる。限定ではないが、細胞膜界面活性剤を含む他のエンハンサーを用いることもできる。試薬は、試薬の機能に影響しない安定剤及び他の不活性担体を含むこともできる。表1に示したように、利用する濃度及び特定の化合物は、様々である。
本明細書で用いられる「リプログラミングタンパク質」という用語は、遺伝子の転写に影響し、第1の分化細胞型から第2の異なる分化細胞型への変化を誘導するDNA結合転写因子タンパク質又はその有効部分を示す。第1の分化細胞型から第2の異なる分化細胞型への変化は、一般に、タンパク質誘導多能性幹細胞を含む過渡的幹細胞等の中間的な分化の程度が低い細胞型を介して進行する。リプログラミングタンパク質、及びこれらをコードする核酸は、ヒト及び他の種から単離されている。リプログラミングタンパク質には、限定ではないが、Asc1、Ascl1、Brca-1l、Brn2、C/EBPα、CEBPβ、c-MYC、Dlx2、EKLF、Erg1、Er71、Fli1、Foxa1、Foxa2、Foxa3、FoxC1、FoxC2、FOXG1、FOXP3、Gata1、Gata2、Gata3、Gata4、Gata6、GFI1、Hand2、Hb9、Hey1、Hey2、HNF4A、Hnf1a、Klf4、Lhx3、LIN28A、Lmx1a、Lsl1、MafA、MEF2c、Mytl1、MYF5、MyoD、NAB2、Nanog、NeuroD1、NEUROG2、NEUROG3、Nurr1、Oct4、Pdx1、Pax4、PAX5、Pax6、Prdm16、PU.1、ROR gamma、Runx2、SLC7A10、Slug、Sox2、Sox5、Sox6、Sox7、Sox9、Sox18、Stat5a、T-bet、及びTbox5が含まれる。こうしたリプログラミングタンパク質のアミノ酸配列は、本明細書に配列番号1乃至63として示した配列と共に、本明細書に配列番号65乃至127として示した、これらをコードする核酸により例示される。
QQ修飾の対象となるリプログラミングタンパク質は、リプログラミングタンパク質をコードする核酸の単離、合成、又は組換発現といった方法により取得される。こうしたタンパク質は、市販のものを入手してもよい。
「核酸」という用語は、1本鎖、2本鎖、オリゴヌクレオチド、又はポリヌクレオチドを含む任意の形態である2個以上のヌクレオチドを有するRNA又はDNA分子を示す。「ヌクレオチド配列」という用語は、核酸の1本鎖形態におけるオリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド内のヌクレオチドの順序を示す。
QQ修飾の対象となるリプログラミングタンパク質の組換発現には、タンパク質をコードする核酸が発現構築物に含まれた状態となる、核酸の発現が含まれる。
宿主細胞は、所望のリプログラミングタンパク質をコードする発現構築物により、リプログラミングタンパク質が細胞内で発現されるようにトランスフェクトし得る。
「発現構築物」及び「発現カセット」という用語は、本明細書において、発現されるべきリプログラミング因子の所望の核酸コード配列を含むと共に、作用可能に連結されたコード配列の発現に必要な、又は望ましい、1つ以上の調節エレメントを含む、2本鎖組換えDNA分子を示す。
所望のタンパク質を発現する作用が可能な発現構築物は、例えば、作用可能な連鎖において、プロモーター、所望のタンパク質をコードするDNA配列、及び転写終結部位を含む。
本明細書において使用される「調節エレメント」という用語は、核酸配列の発現の何らかの側面を制御するヌクレオチド配列を示す。代表的な調節エレメントには、例として。エンハンサー、配列内リボソーム進入部位(IRES)、イントロンと、核酸配列の複製、転写、転写後処理に寄与する複製開始点、ポリアデニル化シグナル(polyA)、プロモーター、転写終了配列、及び上流調節ドメインとが含まれる。当業者は、日常の実験の範囲内で、発現構築物において上記及び他の調節エレメントを選択及び使用することが可能である。発現構築物は、周知の方法を用いて組換的又は合成的に生成することができる。
本明細書で使用される「作用可能に連結した」という用語は、第2の核酸と機能的な関係にある核酸を示す。
発現カセットに含まれる調節エレメントは、特定の態様において、プロモーターである。
「プロモーター」という用語は、当該技術分野において周知であり、転写対象の核酸配列に作用可能に連結すると共に、RNAポリメラーゼと結合して転写を開始させる1つ以上のDNA配列を示す。プロモーターは、一般に、発現されるべきペプチド又はタンパク質をコードする核酸の上流(5’)に位置する。
含まれるプロモーターは、構成的プロモーターにすることが可能であり、又は誘導発現をもたらすことが可能である。当業者は、様々な周知のプロモーターに精通しており、指定の細胞型等、特定の環境でのペプチド又はタンパク質の発現における使用に適したプロモーターを選択することができる。
酵母宿主細胞での発現に適したプロモーターには、限定ではないが、ADH1プロモーター、PGK1プロモーター、ENOプロモーター、PYK1プロモーター等、又は調整可能なプロモーター、例えば、GAL1プロモーター、GAL10プロモーター、ADH2プロモーター、PH05プロモーター、CUP1プロモーター、GAL7プロモーター、MET25プロモーター、MET3プロモーター、CYC1プロモーター、HIS3プロモーター、ADH1プロモーター、PGKプロモーター、GAPDHプロモーター、ADC1プロモーター、TRP1プロモーター、URA3プロモーター、LEU2プロモーター、ENOプロモーター、TP1プロモーター、及びAOX1が含まれる。
原核宿主細胞での発現に適したプロモーターには、限定ではないが、バクテリオファージT7 RNAポリメラーゼプロモーター、trpプロモーター、lacオペロンプロモーター、trcプロモーター、tacプロモーター、araBADプロモーター、ssaGプロモーター、pagCプロモーター、σ70プロモーター、dpsプロモーター、spvプロモーター、SPI-2プロモーター、actAプロモーター、rpsMプロモーター、テトラサイクリンプロモーター、SP6プロモーター、バクテリオファージT3プロモーター、gptプロモーター、及びバクテリオファージラムダPプロモーターが含まれる。
他の適切な細菌及び真核生物プロモーターは、周知であり、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2nd ed. 1989; and 3rd ed., 2001、Kriegler, Gene Transfer and Expression: A Laboratory Manual (1990)、及びAusubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, 2014に記載されている。
真核細胞での発現について、発現構築物に含めることが可能なプロモーターには、限定ではないが、サイトメガロウイルス最初期プロモーターと、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼプロモーターと、初期及び後期SV40プロモーターと、ホスホグリセリン酸キナーゼ(PGK)プロモーターと、レトロウイルスからの長末端反復に存在するプロモーターと、マウスメタロチオネイン-Iプロモーター、β-アクチンプロモーター、ROSA26プロモーター、熱ショックタンパク質70(Hsp70)プロモーター、EF-1α遺伝子をコードする伸長因子1α(EF1)プロモーター、真核生物開始因子4A(eIF-4A1)プロモーター、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)プロモーター、及びラウス肉腫ウイルスの長末端反復領域(RSVプロモーター)とが含まれる。
プロモーターに加え、1つ以上のエンハンサー配列が含まれてよく、例えば、限定ではないが、サイトメガロウイルス(CMV)初期エンハンサー要素及びSV40エンハンサー要素が含まれてよい。
含まれる他の配列には、βグロブリンイントロン又は一般的なイントロン等のイントロン配列と、転写終了配列と、限定ではないがSV40-pA、βグロブリンpA、及びSCF-pA等のmRNAポリアデニル化(pA)配列とが含まれる。
発現構築物は、選択マーカー(例えば、カナマイシン又はアンピシリン耐性遺伝子)及びレプリコン等、細菌細胞における増幅に必要な配列を含み得る。
配列内リボソーム進入部位(IRES)は、mRNAにおいて内部部位での翻訳開始を許可する、任意に含まれる核酸配列である。IRESは、当該技術分野において周知であり、例えば、Pelletier, J. et al., Nature, 334:320-325, 1988、Vagner, S. et al., EMBO Rep., 2:893-898, 2001、及びHellen, C. U. et al, Genes Dev. 15:1593-1612, 2001に記載されている。
「転写終結部位」という用語は、RNAポリメラーゼによる転写を終了させることが可能なDNA配列を示す。転写終結部位は、一般に、発現されるべきペプチド又はタンパク質をコードする核酸の下流(3’)に位置する。
リーダ配列は、発現構築物に任意に含まれる。
所望のタンパク質をコードする核酸のコドン最適化を用いて、例えば、翻訳の効率を向上させることにより、特定の発現系での発現を向上させ得る。所望のタンパク質をコードする、選択された核酸は、限定ではないが、細菌、昆虫細胞、酵母、菌類、鳥類の卵、及び哺乳類細胞等、原核生物又は真核生物の任意の指定された宿主細胞における発現のためにコドン最適化し得る。
発現タンパク質は、リーダ配列及び/又はN末端メチオニン等のN末端エレメントを任意に含む。
所望のリプログラミングタンパク質をコードする1つ以上の核酸に加え、付加的タンパク質をコードする1つ以上の核酸配列を、発現ベクターに含めることができる。例えば、限定ではないが、ベータガラクトシダーゼ、緑色蛍光タンパク質、及び抗生物質耐性レポータを含むレポータをコードする核酸配列が、任意に含まれる。他の例において、hisタグ、GSTタグ、又はMBPタグが、任意に含まれる。
リプログラミングタンパク質をコードする核酸は、原核又は真核細胞への形質転換、及びコードされたペプチド及び/又はタンパク質(群)の発現のために、発現ベクターに対してクローン化することができる。本明細書において、「発現ベクター」は、適切な宿主細胞への導入時に、発現系を転写及び翻訳し、コードされたポリペプチド(群)を生成可能なポリヌクレオチドとして定義される。
発現ベクターは、当該技術分野において知られており、例えば、プラスミド、コスミド、ウイルス、及びバクテリオファージを含む。発現ベクターは、例えば、原核生物ベクター、昆虫ベクター、又は真核生物ベクターにすることができる。
例えば、作用可能な連鎖において、プロモーター、所望のタンパク質をコードするDNA配列、及び転写終結部位を含む発現構築物が、プラスミド、コスミド、ウイルス、又はバクテリオファージ発現ベクターに含まれる。
特定のベクターは、当該技術分野において知られており、当業者は、特定の目的に適したベクターを認識するであろう。
任意の適切な発現ベクター/宿主細胞系を、本発明の態様による対象者への投与のための転写因子の発現に用いることができる。
組換発現ベクターを用いたリプログラミングタンパク質の発現は、昆虫細胞、哺乳類細胞、酵母細胞、菌類、鳥類の卵、細菌細胞、又は当該技術分野において認識される他の任意の単細胞又は多細胞生物といった真核生物又は原核生物宿主細胞発現系への発現ベクターの導入により達成される。
組換発現ベクターを含む宿主細胞は、所望のタンパク質が生産される条件下で維持される。宿主細胞は、Celis, Julio, ed., 1994, Cell Biology Laboratory Handbook, Academic Press, N.Y.に記載されるような、既知の細胞培養手法を用いて培養又は維持し得る。特定の栄養素、酸素、張力、二酸化炭素、及び低減した血清レベルに関する培地の処方を含む、こうした細胞の様々な培養条件は、当業者が選択及び最適化することができる。
細菌細胞は、リプログラミングタンパク質を生産する宿主細胞として用いることができる。細菌細胞における組換えタンパク質発現及び生産されたタンパク質の精製は、Paulina Balbas, Argelia Lorence ed., 2004, Recombinant Gene Expression: Reviews and Protocols, Humana Press, New Jersey、Peter E. Vaillancourt, 2003, E. Coli Gene Expression Protocols, Springer Science & Business Mediaに記載のもの等、既知のプロトコルを用いて実施し得る。
内毒素を生産する宿主細胞型を用いる場合には、組換えにより生産したリプログラミングタンパク質を任意に精製する。例えば、10カラム体積の0.2％Triton X114を用いた追加の洗浄ステップをタンパク質精製段階において追加し、細菌により発現させた組換えリプログラミングタンパク質から内毒素を除去することができる。
或いは、ヒト細胞において内毒素反応を引き起こさない組換えリプログラミングタンパク質を生産するために、遺伝子改変細菌株、ClearColiTM BL21(DE3)を宿主細胞として用い、内毒素除去の必要が無くなるようにすることができる。
宿主細胞における発現のために、リン酸カルシウム法、ポリブレン、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、ソノポレーション、リポソーム、及びマイクロインジェクション等、組換え核酸を宿主細胞に導入するための周知の手順の何れかを用いてよく、その例は、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001、及びAusubel, F. et al., (Eds.), Current Protocols in Molecular Biology, 2014に記載されている。
無細胞発現系は、Ausubel, F. et al., (Eds.), Current Protocols in Molecular Biology, 2014に記載のもの等、リプログラミングタンパク質の発現に任意に用いられる。
本明細書に配列番号1乃至63として示すと共に配列番号65乃至127の核酸配列によりコードされるヒトリプログラミングタンパク質及びその変異体は、本明細書に記載の態様による方法において用いることができる。
本明細書において、「変異体」という用語は、1つ以上のヌクレオチド又はアミノ酸残基が、ヌクレオチド又はアミノ酸置換、追加、又は欠失により、基準の核酸配列又はリプログラミングタンパク質の機能を保持しつつ改変されている、リプログラミングタンパク質をコードする核酸配列の変形又はリプログラミングタンパク質の変形を示す。本明細書に記載の核酸配列又はリプログラミングタンパク質の変異体は、対応する核酸配列又はリプログラミングタンパク質と比較して保存された機能特性を特徴とする。
突然変異は、化学合成、部位特異的変異誘発、及びPCR仲介突然変異誘発等の標準的な分子生物学的手法を用いて導入することができる。
当業者は、所望のリプログラミングタンパク質の機能的特性を変化させることなく、1つ以上のアミノ酸変異を導入可能であることを認識するであろう。例えば、所望のリプログラミングタンパク質の機能的特性を変化させることなく、1つ以上のアミノ酸置換、追加、又は欠失を達成することができる。
リプログラミングタンパク質変異体の生物活性は、当業者により、例えば、本明細書に記載の機能アッセイ又は当該技術分野において知られている他の機能アッセイの何れかを用いて容易に判定される。
本明細書に記載のリプログラミングタンパク質の変異体は、対応するリプログラミングタンパク質と比較して保存された機能特性を特徴とし、基準リプログラミングタンパク質のアミノ酸配列に対して、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％超の同一性を有する。
基準リプログラミングタンパク質を変異体と比較する際には、アミノ酸配列内の対応位置におけるアミノ酸の同一性に加えて、アミノ酸類似性を考慮し得る。「アミノ酸類似性」とは、基準タンパク質における対応するアミノ酸位置と比較した、推定相同体におけるアミノ酸同一性及び保存的アミノ酸置換を示す。
本明細書に記載のリプログラミングタンパク質の変異体は、対応するリプログラミングタンパク質と比較して保存された機能的特性を特徴とし、基準リプログラミングタンパク質のアミノ酸配列に対して、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％超の類似性を有する。
保存的アミノ酸置換を、基準タンパク質において行い、変異体を生成することができる。
保存的アミノ酸置換は、あるアミノ酸から特性の類似する他のアミノ酸への、当該技術分野において認められている置換である。例えば、各アミノ酸は、以下の特性のうち1種以上を有するものとして表現し得る:電気陽性、電気陰性、脂肪性、方向性、極性、疎水性、及び親水性。保存的置換は、特定の構造的又は機能的特性を有するアミノ酸から、同じ特性を有する他のアミノ酸への置換である。酸性アミノ酸には、アスパラギン酸、グルタミン酸が含まれ、塩基性アミノ酸には、ヒスチジン、リジン、アルギニンが含まれ、脂肪族アミノ酸には、イソロイシン、ロイシン、及びバリンが含まれ、芳香族アミノ酸には、フェニルアラニン、グリシン、チロシン、及びトリプトファンが含まれ、極性アミノ酸には、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒスチジン、リジン、アスパラギン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、及びチロシンが含まれ、疎水性アミノ酸には、アラニン、システイン、フェニルアラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、プロリン、バリン、及びトリプトファンが含まれ、保存的置換には、各群内のアミノ酸間の置換が含まれる。アミノ酸は、相対的大きさに関して表現してもよく、アラニン、システイン、アスパラギン酸、グリシン、アスパラギン、プロリン、トレオニン、セリン、バリンは、全て一般に小さいものと見做される。
変異体には、合成アミノ酸類似体、アミノ酸誘導体、及び/又は非標準アミノ酸を含むことが可能であり、例示として、限定することなく、α-アミノ酪酸、シトルリン、カナバニン、シアノアラニン、ジアミノ酪酸、ジアミノピメリン酸、ジヒドロキシフェニルアラニン、ジエンコル酸、ホモアルギニン、ヒドロキシプロリン、ノルロイシン、ノルバリン、3-ホスホセリン、ホモセリン、5-ヒドロキシトリプトファン、1-メチルヒスチジン、3-メチルヒスチジン、及びオルニチンが含まれる。
同一性パーセントは、基準アミノ酸又は核酸配列と、推定相同体アミノ酸又は核酸配列とを含む、アミノ酸又は核酸配列の比較により決定される。2つのアミノ酸配列又は2つの核酸配列の同一性パーセントを決定するためには、配列を適切な比較の目的で揃える(例えば、ギャップを第1のアミノ酸又は核酸配列の配列に導入して、第2のアミノ酸又は核酸配列との適切なアラインメントを行う)。その後、対応するアミノ酸位置又はヌクレオチド位置のアミノ酸残基又はヌクレオチドを比較する。第1の配列内の位置に、第2の配列内の対応する位置と同じアミノ酸残基又はヌクレオチドがある場合、分子は、その位置において同一となる。2配列間の同一性パーセントは、配列が共有する同一位置数の関数となる(即ち、同一性％=同一の重複位置数/位置の総数×100％)。比較される2配列は、一般に、同じ長さであるか、ほぼ同じ長さである。
2配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを用いて達成することもできる。同一性パーセントの決定に用いられるアルゴリズムには、例示として、S. Karlin and S. Altshul, PNAS, 90:5873-5877, 1993、T. Smith and M. Waterman, Adv. Appl. Math. 2:482-489, 1981、S. Needleman and C. Wunsch, J. Mol. Biol., 48:443-453, 1970、W. Pearson and D. Lipman, PNAS, 85:2444-2448, 1988等のアルゴリズムが含まれ、これらは、限定ではないが、GAP、BESTFIT、FASTA、TFASTA、及びBLAST等のコンピュータによる実装に組み込まれており、例えば、Wisconsin Genetics Software Package(Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wis.)に組み込まれ、更に国立生物工学情報センター(National Center for Biotechnology Information)により一般に公開されている。
2配列の比較に利用される数学的アルゴリズムの非限定的な例は、Karlin and Altschul, 1990, PNAS 87:2264-2268のアルゴリズムをKarlin and Altschul, 1993, PNAS. 90:5873-5877において修正したものである。こうしたアルゴリズムは、Altschul et al., 1990, J. Mol. Biol. 215:403のNBLAST及びXBLASTプログラムに組み込まれている。BLASTヌクレオチド検索では、NBLASTヌクレオチドプログラムパラメータを、例えば、score=100、word length=12に設定して、本発明の核酸分子と相同のヌクレオチド配列を取得する。BLASTタンパク質検索では、XBLASTプログラムパラメータを、例えば、score=50、word length=3に設定して、本発明のタンパク質分子と相同なアミノ酸配列を取得する。ギャップ付きアラインメントを比較の目的で得るためには、Gapped BLASTを、Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res. 25:3389-3402に記載のように利用する。或いは、PSI BLASTを用いて、分子間の距離関係を検出する反復検索を行う。BLAST、Gapped BLAST、及びPSI Blastプログラムを利用する際には、それぞれのプログラム(例えば、XBLAST及びNBLAST)のデフォルトパラメータを用いる。配列の比較に利用する数学的アルゴリズムの他の好適な非限定的な例は、Myers and Miller, 1988, CABIOS 4:11-17のアルゴリズムである。こうしたアルゴリズムは、GCG配列アラインメントソフトウェアパッケージの一部であるALIGNプログラム(バージョン2.0)に組み込まれている。ALIGNプログラムをアミノ酸配列の比較に利用する際には、PAM120残基質量表、ギャップ長ペナルティ=12、ギャップペナルティ=4を用いる。
2配列間の同一性パーセントは、上述したものと類似する手法を用いて決定し、ギャップを認めても認めなくてもよい。同一性パーセントの計算においては、一般に正確な一致のみを考慮する。
当業者は、1つ以上の核酸又はアミノ酸変異を、それぞれ核酸又はタンパク質の機能的特性を変化させることなく導入可能であることを認識するであろう。
上述したように、本明細書に配列番号1乃至63として示したヒトリプログラミングタンパク質は、配列番号65乃至127の核酸配列によりコードされる。遺伝子コードの縮重する性質のため、代替の核酸配列が特定のリプログラミングタンパク質をコードすると理解され、更に、こうした代替の核酸を発現させて、所望のリプログラミングタンパク質を生産し得ると理解される。
「相補的」という用語は、ヌクレオチド間のワトソン・クリック型塩基対を示し、具体的には、ヌクレオチドが互いに水素結合され、チミン又はウラシル残基がアデニン残基と2つの水素結合により連結され、シトシン及びグアニン残基が3つの水素結合により連結されたものを示す。一般に、核酸は、特定の第2のヌクレオチド配列に対する「相補性パーセント」を有するものとして表現されるヌクレオチド配列を含む。例えば、ヌクレオチド配列は、特定の第2のヌクレオチド配列に対して80％、90％、又は100％の相補性を有する場合があり、これは配列の10個中8個、10個中9個、又は10個中10個のヌクレオチドが特定の第2のヌクレオチド配列に対して相補的であることを示す。例えば、ヌクレオチド配列3’-TCGA-5’は、ヌクレオチド配列5’-AGCT-3’に対して、100％相補性である。更に、ヌクレオチド配列3’-TCGA-5’は、ヌクレオチド配列5’-TTAGCTGG-3’の領域に対して、100％相補性である。
「ハイブリダイゼーション」及び「ハイブリダイズする」という用語は、相補的な核酸の対形成及び結合を示す。ハイブリダイゼーションは、当該技術分野において周知であるように、核酸の相補性の度合い、核酸の融点Tm、及びハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシー等の要因に応じて、2つの核酸間の様々な範囲で発生する。「ハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシー」とは、ホルムアミド及びデンハート液等の特定の一般的な添加物に関して、ハイブリダイゼーション培地の温度、イオン強度、及び組成の条件を示す。指定された核酸に関する特定のハイブリダイゼーション条件の決定は、当該技術分野において周知であり、例えば、J. Sambrook and D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3rd Ed., 2001、及びF.M. Ausubel, Ed., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols; 5th Ed., 2002に記載されている。高ストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件は、実質的に相補的な核酸のハイブリダイゼーションのみを可能にするものである。一般に、約85乃至100％の相補性を有する核酸は、相補性が高いと考えられ、高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする。中程度のストリンジェンシー条件は、中程度の相補性、即ち約50乃至84％の相補性を有する核酸及び相補性の度合いが高いものがハイブリダイズする条件として例示される。一方、低ストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件は、相補性の度合いが低い核酸がハイブリダイズするものとなる。
「特異的ハイブリダイゼーション」及び「特異的にハイブリダイズする」という用語は、試料中の標的核酸以外の核酸との実質的なハイブリダイゼーションの無い、特定の核酸の標的核酸とのハイブリダイゼーションを示す。
ハイブリダイゼーション及び洗浄条件のストリンジェンシーは、当業者に周知であるように、プローブ及び標的のTm並びにハイブリダイゼーション及び洗浄条件のイオン強度を含む幾つかの要因に依存する。所望のハイブリダイゼーションストリンジェンシーを達成するハイブリダイゼーション及び条件は、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001、及びAusubel, F. et al., (Eds.), Short Protocols in Molecular Biology, Wiley, 2002に記載されている。
高ストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件の例は、6×SSC、5×デンハート液、30％ホルムアミド、及び100マイクログラム/mlの変性サケ精子を含む溶液中に37℃で一晩置いた後、0.1×SSC及び0.1％SDSの溶液中において60℃で15分間洗浄する、100個のヌクレオチド長の核酸のハイブリダイゼーションである。SSCは、0.15M NaCl/0.015Mクエン酸ナトリウムである。デンハート液は、0.02％ウシ血清アルブミン/0.02％FICOLL/0.02％ポリビニルピロリドンである。
QQにより修飾したリプログラミングタンパク質は、本発明の態様による単離タンパク質である。「単離タンパク質」という用語は、タンパク質が生産される系に存在し得る、細胞、細胞残屑、及び他のタンパク質といった生体物質から、タンパク質が分離されていることを示す。「単離タンパク質」という用語は、必ずでは無いが、タンパク質が精製されたことを示す場合がある。本発明の方法及び組成物に含まれる精製タンパク質は、重量で、含まれるタンパク質の少なくとも約1乃至100％の質量、例えば重量で約25％、50％、75％、85％、95％、99％、又は約99％超の質量を含む。
「対象者」という用語は、細胞リプログラミングの有益な効果に反応する疾患又は損傷の治療を必要とする個体を示し、限定ではないが、ヒト、他の霊長類、ネコ、イヌ、ヒツジ、ウシ、ヤギ、ウマ、ブタ、家禽、ウサギ、並びにラット、マウス、及びモルモット等の齧歯類といった、哺乳類及び鳥類が一般に含まれる。本発明の態様によれは、対象者は、ヒトである。
損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態。
対象者の疾患又は損傷といった損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態の治療を示すために用いられる「治療する」及び「治療」という用語は、対象者における疾患又は損傷を抑制又は改善すること、例えば疾患の進行を遅らせること、及び/又は、疾患又は損傷の徴候又は症状を低減又は改善することを含む。
血管新生を特徴とする状態は、本発明の方法の態様により治療され、血管新生による血管の血管透過性・滞留性亢進効果(EPR効果)によるQQ修飾リプログラミングタンパク質の効果的な送達を特徴とする。
本発明の態様により治療される損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態は、様々なヒトの状態であり、限定ではないが、癌と、心血管疾患又は損傷、例として急性及び慢性心筋梗塞、虚血、心臓損傷、冠状動脈疾患、先天的心臓疾患、心筋症、例としてアルコール性心筋症、不整脈原性右室心筋症、高血圧性心筋症、拡張型心筋症、肥大性心筋症、炎症性心筋症、虚血性心筋症、全身代謝性疾患に続発する心筋症、心筋ジストロフィ、非圧縮心筋症、拘束性心筋症、及び弁膜症による心筋症と、血管疾患又は血管損傷と、貧血症と、虚血性及び出血性卒中と、代謝性の疾患又は状態、例としてI型及びII型糖尿病及び肥満症と、神経疾患及び損傷、例として脊髄損傷、外傷性脳損傷、ハンチントン病、統合失調症、アルツハイマ病、筋萎縮性側索硬化症、運動失調、自閉症、ライム病、髄膜炎、偏頭痛、運動ニューロン疾患、運動障害、例としてパーキンソン病、ニューロパシ、疼痛、神経障害性疼痛、脊髄障害、末梢及び中枢神経障害、自律神経系障害、発作性障害、例として癲癇、睡眠障害、認知症、例としてアルツハイマ病、筋ジストロフィ、シャルコー・マリー・トゥースニューロパシ1A型、及び脱髄疾患、例として急性播種性脳脊髄炎、副腎白質ジストロフィ、副腎脊髄ニューロパシ、多発性硬化症、視神経脊髄炎、視神経炎、及び横断性脊髄炎と、創傷と、炎症状態と、肝臓疾患及び損傷、例として肝臓疾患、例として家族性高コレステロール血症(FH)、クリグラー・ナジャー症候群、遺伝性高チロシン血症I型、劇症肝不全、ウイルス性肝炎、薬物誘発性肝臓損傷、硬変、遺伝性肝不全、例としてウィルソン病、ジルベール症候群、又はa1-抗トリプシン欠乏症によるもの、肝胆道癌、自己免疫性肝臓疾患、例として自己免疫性慢性肝炎又は原発性胆汁性硬変と、自己免疫疾患と、骨関節炎と、リウマチ性関節炎と、軟骨疾患又は損傷、例として関節障害、骨関節炎、軟骨損傷、外傷性破裂又は脱離、軟骨形成不全、肋軟骨炎、脊椎円板ヘルニア、再発性多発性軟骨炎、腫瘍、軟骨腫、軟骨肉腫、及び多形性腺腫によるものと、クローン病及び遺伝子異常とが含まれる。
本明細書に記載の方法及び組成物を用いて治療される特定の癌は、限定ではないが、前腫瘍性過剰増殖、上皮内癌、新生物、及び転移を含む異常細胞増殖を特徴とする。対象者における癌の治療を示すために用いられる「治療する」及び「治療」という用語は、対象者における癌を抑制又は改善すること、例えば癌の進行を遅らせること、及び/又は、癌の徴候又は症状を低減又は改善することを含む。
本発明の抗癌組成物を含む組成物の治療有効量は、治療を受けている対象者において有益な効果を有する量である。限定ではないが、前腫瘍性過剰増殖、上皮内癌、新生物、転移、腫瘍、良性腫瘍、又は発明組成物に反応する他の状態を含む異常細胞増殖を特徴とする状態等の癌を有する対象者において、QQ修飾タンパク質の治療有効量は、癌の1つ以上の徴候及び/又は症状を改善するのに有効となる。例えば、組成物の治療有効量は、限定ではないが、前腫瘍性過剰増殖、上皮内癌、新生物、転移、腫瘍、良性腫瘍、又は投与されたQQ修飾タンパク質に反応する他の状態を含む異常細胞増殖を特徴とする癌の増殖細胞を検出可能に減少させる効果がある。
こうした癌には、膀胱癌、乳房、大腸、子宮頸管、食道、頭頚部、腎臓、肺の癌、膠芽細胞腫、星状細胞腫、上衣腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、髄膜腫、顆粒細胞腫、及び神経鞘腫といった神経系の癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、皮膚癌、胃癌、睾丸癌、咽頭癌、尿膜管癌、又は腟癌等の固形及び非固形癌が含まれる。
本発明の態様による医薬組成物は、QQ修飾リプログラミングタンパク質と、医薬的に許容可能な担体とを含む。
「医薬的に許容可能な担体」という用語は、対象とする受領者に対して一般に無毒性であり、組成物に含まれるQQ修飾タンパク質又は他の活性薬剤の活性を有意に阻害しない担体又は希釈剤を示す。
本発明による組成物は、一般に、約0.1乃至99％のQQ修飾リプログラミングタンパク質を含む。
対象者への送達に適した医薬組成物は、生理学的に許容される無菌水溶液又は非水溶液、分散液、懸濁液、又は乳液、及び無菌注射液又は分散液へ再構成するための無菌粉末を例示として含む、様々な形態で調製し得る。
医薬組成物は、バッファ、溶剤、又は希釈剤を任意に含む。
適切な水性及び非水性担体の例には、水と、エタノールと、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、及びグリセロール等のポリオールと、オリーブ油等の野菜油と、オレイン酸エチル等の注射用有機エステルと、その2つ以上の適切な混合物とが含まれる。
こうした製剤は、非経口投与を含む適切な経路により投与される。投与は、全身投与又は局所投与を任意に含む。
これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤等のアジュバントを更に含み得る。微生物の活動の防止は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等により確保することができる。1つ以上の等張剤、例えば糖類又は塩化ナトリウム等の塩類も任意に含まれる。
特定の態様において、QQ修飾タンパク質は、局所適用により投与される。
局所製剤は、特定の態様において軟膏、ローション、クリーム、又はゲルにすることができる。軟膏、ローション、クリーム又はゲル基剤等の局所用剤形は、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2006, p.880-882 and p.886-888、及びAllen, L. V. et al., Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 8th Ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005, p.277-297に記載されている。
医薬組成物の医薬的に許容可能な担体及び製剤は、当該技術分野において知られており、限定ではないが、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2006、及びAllen, L.V. et al., Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 8th Ed., Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2005に記載されるものが例示として含まれる。
QQ修飾タンパク質を含む医薬組成物は、様々な全身及び/又は局所経路により対象者に投与するのに適しており、こうした経路には、限定ではないが、非経口、経口、直腸、鼻腔、肺、硬膜外、眼、耳、動脈内、心臓内、側脳室内、頭蓋内、皮内、静脈内、筋肉内、腹腔内、骨内、髄腔内、腫瘍内、膀胱内、皮下、局所、経皮、及び経粘膜、例として舌下、頬、腟、及び吸入投与経路によるものが含まれる。
医薬組成物の投与
発明組成物は、急性的又は慢性的に投与し得る。例えば、本明細書に記載の組成物は、単一用量として、又は数秒乃至数時間等の比較的限定された期間に亘る複数回用量として投与し得る。他の実施形態において、投与は、癌の長期治療のため等に、数日乃至数年の期間に亘り投与される複数回用量を含み得る。
QQ修飾タンパク質の治療有効量は、投与される組成物の投与経路及び形態並びに投与される特定の組成物、対象者において治療する状態の重篤度及び種類、対象者の種、対象者の年齢及び性別、並びに治療すべき対象者の全般的な身体特性に応じて変化する。当業者は、医療行為において一般的な上記及び他の考慮事項に応じて、過度な実験を行うことなく、本開示及び当該技術分野において知られている事柄を鑑みて治療有効量を決定することができる。一般に、治療有効量は、約0.001ng/kg乃至100mg/kg体重の範囲内となり、任意に約0.01ng/kg乃至1mg/kgの範囲内、及び更に任意に約0.1ng/kg乃至0.1mg/kgの範囲内となる。更に、投与量は、治療が急性的か継続的かに応じて調節し得る。
通常、必要とする対象者を治療するために、1乃至100回のQQ修飾タンパク質の投与が行われるが、更に多くの投与を行うこともできる。QQ修飾タンパク質は、1日2回、毎日、週2回、毎週、隔週、毎月、又は他の何らかの間隔で、1日、1週間、2週間、4週間、1ヶ月、2ヶ月、3乃至6ヶ月、又はそれ以上に亘る一連の治療において投与することができる。一連の治療は、任意に反復され、必要であれば延長して長期的治療としてもよい。
本発明の方法の態様によるQQ修飾タンパク質の投与には、所望の反応を生じさせる投与計画に従った投与が含まれる。用量を投与するための適切なスケジュールは、例えば、対象者の年齢、体重、性別、病歴、及び健康状態、使用する組成物の種類、及び投与経路を含む幾つかの要因に依存する。当業者は、特定の対象者に対する投与の用量及びスケジュールを容易に判定することができる。
本発明の実施形態による方法には、医薬製剤としてのQQ修飾タンパク質の全身又は局所投与等の投与が含まれる。投与経路の例には、限定ではないが、非経口、経口、直腸、鼻腔、肺、硬膜外、眼、耳、動脈内、心臓内、側脳室内、頭蓋内、皮内、静脈内、筋肉内、腹腔内、骨内、髄腔内、腫瘍内、膀胱内、皮下、局所、経皮、及び経粘膜、例として舌下、頬、腟、及び吸入投与経路によるものが含まれる。
QQ修飾タンパク質は、非経口的に投与してよく、例えば、静脈注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射、経皮注射、髄腔内注射、頭蓋内注射、脳脊髄内注射等の注射、及び/又は静脈又は脳脊髄内持続注入装置等による持続注入により投与し得る。
態様によれば、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、DNA結合転写因子である。タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の投与は、疾患又は損傷の部位において1つ以上の細胞型を原位置でリプログラムし、本明細書に記載の態様による疾患又は損傷を生体内で治療する効果がある。タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の投与は、疾患又は損傷の部位において1つ以上の細胞型を原位置でリプログラムし、生体内の疾患又は損傷の部位において後に原位置で正常細胞に分化する過渡的幹細胞を生成し、本明細書に記載の態様による疾患又は損傷を治療する効果がある。
本発明の態様による癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを投与することを含む。こうした方法は、癌の部位において、その部位の癌細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による脳腫瘍を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による脳腫瘍を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による脳腫瘍を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを投与することを含む。こうした方法は、脳腫瘍の部位において、その部位の脳腫瘍細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による脳腫瘍を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroDのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroDを投与することを含む。こうした方法は、膵臓癌の部位において、その部位の脳腫瘍細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを投与することを含む。こうした方法は、乳癌の部位において、その部位の乳癌細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1、及びタンパク質形質導入試薬修飾State5aのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1、及びタンパク質形質導入試薬修飾State5aのうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1、及びタンパク質形質導入試薬修飾State5aのうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1、及びタンパク質形質導入試薬修飾State5aのうち4種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1、及びタンパク質形質導入試薬修飾State5aを投与することを含む。こうした方法は、乳癌の部位において、その部位の乳癌細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogのうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを投与することを含む。こうした方法は、膵臓癌の部位において、その部位の膵臓癌細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾PDX1、タンパク質形質導入試薬修飾PAX4、タンパク質形質導入試薬修飾MafA、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾PDX1、タンパク質形質導入試薬修飾PAX4、タンパク質形質導入試薬修飾MafA、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾PDX1、タンパク質形質導入試薬修飾PAX4、タンパク質形質導入試薬修飾MafA、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による膵臓癌を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾PDX1、タンパク質形質導入試薬修飾PAX4、タンパク質形質導入試薬修飾MafA、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3を投与することを含む。こうした方法は、膵臓癌の部位において、その部位の膵臓癌細胞をリプログラミングすることにより、新たな正常細胞を生成する。
本発明の態様による急性又は慢性心筋梗塞による損傷等の心臓疾患又は心臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による心臓疾患又は心臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による心臓疾患又は心臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5のうち3種以上投与することを含む。本発明の態様による心臓疾患又は心臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな心筋細胞、平滑筋細胞、及び内皮細胞を生成する。
本発明の態様による肝臓疾患又は肝臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による肝臓疾患又は肝臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による肝臓疾患又は肝臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな肝細胞を生成する。こうした肝臓疾患又は肝臓損傷の例には、家族性高コレステロール血症(FH)、クリグラー・ナジャー症候群、及び遺伝性チロシン血症I型が含まれる。
本発明の態様による肝臓疾患又は肝臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による肝臓疾患又は肝臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による肝臓疾患又は肝臓損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな肝細胞を生成する。こうした肝臓疾患又は肝臓損傷の例には、家族性高コレステロール血症(FH)、クリグラー・ナジャー症候群、及び遺伝性チロシン血症I型が含まれる。
本発明の態様によるアテローム性動脈硬化を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾CEBP/α/β及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様によるアテローム性動脈硬化を治療する方法は、CEBP/α/β及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1の両方を投与することを含む。こうした方法は、アテローム性動脈硬化の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな泡沫細胞及びマクロファージを生成する。
本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなニューロンを生成する。
本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち4種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなグルタミン酸作動性ニューロンを生成する。
本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなグルタミン酸作動性ニューロンを生成する。
本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位のアストロサイトをリプログラミングすることにより、新たなグルタミン酸作動性ニューロンを生成する。
本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経変性疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、新たな神経幹細胞を生成する。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち4種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな運動ニューロン生成する。こうした神経疾患の例には、筋萎縮性側索硬化症(ALS)が含まれる。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち4種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち5種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち6種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな運動ニューロンを生成する。こうした神経疾患の例には、筋萎縮性側索硬化症(ALS)が含まれる。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなGABAニューロンを生成する。こうした神経疾患の例には、脊髄性筋萎縮症(SMA)が含まれる。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなGABAニューロンを生成する。こうした神経疾患の例には、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、脊髄性筋萎縮症(SMA)、及びパーキンソン病が含まれる。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2及びタンパク質形質導入試薬修飾Ascl1を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位のアストロサイトをリプログラミングすることにより、新たなGABAニューロンを生成する。こうした神経疾患の例には、脊髄性筋萎縮症(SMA)が含まれる。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち4種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなドーパミンニューロンを生成する。こうした神経疾患の例には、パーキンソン病が含まれる。
本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による神経疾患又は神経組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たなニューロンを生成する。こうした神経疾患の例には、パーキンソン病が含まれる。
本発明の態様による血液の疾患又は障害を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな造血細胞を生成する。
本発明の態様による糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな膵臓β細胞を生成する。
本発明の態様による糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAを投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の膵臓外分泌細胞リプログラミングすることにより、新たな膵臓β細胞を生成する。
本発明の態様による肥満症を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPbの一方又は両方投与することを含む。本発明の態様による肥満症を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPbの両方を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の白色脂肪細胞をリプログラミングすることにより、新たな褐色脂肪細胞を生成する。
本発明の態様による筋肉疾患又は筋肉損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾MyoDを投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな筋細胞を生成する。
本発明の態様による関節炎、骨関節炎、軟骨変性、及び/又は軟骨損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による関節炎、骨関節炎、軟骨変性、及び/又は軟骨損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による関節炎、骨関節炎、軟骨変性、及び/又は軟骨損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による関節炎、骨関節炎、軟骨変性、及び/又は軟骨損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな軟骨細胞を生成する。
本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Brca-1を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9及びタンパク質形質導入試薬修飾Slugの両方を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata3の両方を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1のうち4種以上を投与することを含む。本発明の態様による乳房疾患又は乳房組織損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1を投与することを含む。こうした方法は、細胞疾患又は損傷の部位において、その部位の線維芽細胞をリプログラミングすることにより、新たな乳管を生成する。
本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法はタンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2、のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の細胞をリプログラミングすることにより、新たな内皮細胞を生成する。
本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち1種以上を投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち2種以上を投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち3種以上を投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の細胞をリプログラミングすることにより、新たな動脈内皮細胞を生成する。
本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18の一方又は両方投与することを含む。本発明の態様による血管疾患又は血管損傷を治療する方法は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18を投与することを含む。こうした方法は、疾患又は損傷の部位において、その部位の細胞をリプログラミングすることにより、新たな静脈内皮細胞を生成する。
併用治療
本発明の態様により、治療剤の組み合わせが投与される。
一部の態様では、2種以上のQQ修飾タンパク質を対象者に投与して、必要とする対象者における障害を治療する。
他の態様では、少なくとも1種のQQ修飾タンパク質と、少なくとも1種の追加治療剤とを対象者に投与して、必要とする対象者における障害を治療する。
更に他の態様では、少なくとも1種のQQ修飾タンパク質と、少なくとも2種の追加治療剤とを対象者に投与して、必要とする対象者における障害を治療する。
一部の態様では、2種以上のQQ修飾タンパク質を対象者に投与して、必要とする対象者における癌を治療する。他の態様では、少なくとも1つのQQ修飾タンパク質と、少なくとも1種の追加治療剤とを対象者に投与して、必要とする対象者における癌を治療する。更に他の態様では、少なくとも1種のQQ修飾タンパク質と、少なくとも2種の追加治療剤とを対象者に投与して、必要とする対象者における癌を治療する。
「追加治療剤」という用語は、本明細書において、対象者において局所的又は全身的に作用する生物学的、生理学的、又は薬理学的な活性物質(又は物質群)である、化学化合物、化学化合物の混合物、生体高分子(核酸、抗体、タンパク質又はその一部、例えば、ペプチド等)、又は細菌、植物、菌類、又は動物(特に哺乳類)細胞又は組織等の生体物質由来の抽出物を示すために用いられる。
本発明の方法及び組成物の態様に含まれる追加治療剤には、限定ではないが、抗生物質、抗ウイルス剤、抗新生物薬、鎮痛剤、下熱剤、抗鬱剤、抗精神病剤、抗癌剤、抗ヒスタミン剤、抗骨粗鬆症剤、抗骨壊死剤、抗炎症剤、抗不安剤、化学療法剤、利尿剤、成長因子、ホルモン、非ステロイド性抗炎症剤、ステロイド、及び血管作用剤が含まれる。
1種以上のQQ修飾タンパク質と1種以上の追加治療剤とを利用する併用療法は、例えば、1種以上のQQ修飾タンパク質又は1種以上の追加治療剤を何れかのみ単独療法で用いた場合に観察される治療効果より大きな相乗効果を示す場合がある。
態様によれば、併用療法には:(1)1種以上のQQ修飾タンパク質を1種以上の追加治療剤と組み合わせて含む医薬組成物と、(2)1種以上のQQ修飾タンパク質と1種以上の追加治療剤とが同じ組成物中に処方されていない場合の、1種以上のQQ修飾タンパク質と1種以上の追加治療剤との同時投与とが含まれる。分離した剤形を用いる場合、1種以上のQQ修飾タンパク質は、1種以上の追加治療剤の投与に関して、同時に、断続的に、交互に、先に、後で、又は組み合わせて投与してよい。
併用治療は、本発明の方法において用いる1種以上のQQ修飾タンパク質及び1種以上の追加治療剤の有効投与量を低減し、治療指数を高めることを可能にする。
更に、癌を有する対象者又は癌を有するリスクのある対象者を治療する方法は、任意に、補助抗癌治療を含む。補助抗癌治療は、抗癌剤の投与にすることができる。
抗癌剤は、例えば、Goodman et al., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Macmillan Publishing Co., 1990に記載されている。
抗癌剤には、例示として以下が含まれる:アシビシン、アクラルビシン、アコダゾール、アクロニン、アドゼレシン、アルデスロイキン、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アンボマイシン、アメタントロン、アミホスチン、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アントラマイシン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アザシチジン、アゼテパ、アゾトマイシン、バチマスタット、ベンゾデパ、ビカルタミド、ビサントレン、メシル酸ビスナフィド、ビゼレシン、ブレオマイシン、ブレキナール、ブロピリミン、ブスルファン、カクチノマイシン、カルステロン、カペシタビン、カラセミド、カルベチマ、カルボプラチン、カルムスチン、カルビシン、カルゼレシン、セデフィンゴル、セレコキシブ、クロラムブシル、シロレマイシン、シスプラチン、クラドリビン、メシル酸クリスナトール、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デシタビン、ドキソルマプラチン、デザグアニン、メシル酸デザグアニン、ジアジクオン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロロキシフェン、ドロモスタノロン、デュアゾマイシン、エダトレキセート、エフロミチン、エルサミトルシン、エンロプラチン、エンプロマート、エピプロピジン、エピルビシン、エルブロゾール、エソルビシン、エストラムスチン、エタニダゾール、エトポシド、エトプリン、ファドロゾール、ファザラビン、フェンレチニド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルロシタビン、フォスキドン、フォストリエシン、フルベストラント、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イフォスファミド、イルモフォシン、インターロイキンII(IL-2、組換えインターロイキンII(又はrIL2)を含む)、インターフェロンα-2a、インターフェロンα-2b、インターフェロンα-n1、インターフェロンアルファ-n3、インターフェロンβ-Ia、インターフェロンγ-Ib、イプロプラチン、イリノテカン、ランレオチド、レトロゾール、ロイプロリド、リアロゾール、ロメトレキソール、ロムスチン、ロソキサントロン、マスオプロコール、メイタンシン、塩酸メクロレタミン、メゲストロール、酢酸メレンゲストロール、メルファラン、メノガリル、メルカプトプリン、メトトレキセート、メトプリン、メトウレデパ、ミチンドミド、ミトカルシン、ミトクロミン、ミトギリン、ミトマルシン、マイトマイシン、ミトスペル、ミトタン、ミトキサントロン、ミコフェノール酸、ネララビン、ノコダゾール、ノガラマイシン、オルムナプラチン、オキシスラン、パクリタキセル、ペガスパルガーゼ、ペリオマイシン、ペンタムスチン、ペプロマイシン、ペルホスファミド、ピポブロマン、ピポスルファン、塩酸ピロキサントロン、プリカマイシン、プロメスタン、ポルフィマ、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ピューロマイシン、ピラゾフリン、リボプリン、ログレチミド、サフィンゴール、セムスチン、シムトラゼン、スパルフォセート、スパルソマイシン、スピロゲルマニウム、スピロムスチン、スピロプラチン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、スロフェヌル、タリソマイシン、タモキシフェン、テコガラン、テガフール、テロキサントロン、テモポルフィン、テニポシド、テロキシロン、テストラクトン、チアミプリン、チオグアニン、チオテパ、チアゾフリン、チラパザミン、トポテカン、トレミフェン、トレストロン、トリシリビン、トリメトレキサート、トリプトレリン、ツブロゾール、ウラシルマスタード、ウレデパ、バプレオチド、ベルテポルフィン、ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、ビンデシン、ビネピジン、ビングリシナート、ビンロイロシン、ビノレルビン、ビンロシジン、ビンゾリジン、ボロゾール、ゼニプラチン、ジノスタチン、ゾレドロネート、及びゾルビシン。
補助抗癌治療は、対象者又は対象者の身体の患部の放射線治療にすることができる。
発明組成物及び方法の実施形態を以下の実施例において例示する。これらの実施例は、例示的な目的で提示するものであり、発明組成物及び方法の範囲に対する限定とは見做されない。
実施例1
リプログラミングタンパク質の発現及び調製
プラスミドの構築
Oct4、Sox2、Klf4、及びc-Myc、Nanog、GATA4、Hand2、Mef2c及びTbox5リプログラミングタンパク質のそれぞれをコードするDNAを、NovagenからのpET30a発現ベクターにおいて長いhisタグを短いhisタグ:「HHHHHHSS」(配列番号64)に置き換えたsHT-pET30a細菌発現ベクター内へ別々にサブクローニングした。第Xa因子(IEGR)切断部位は、短いhisタグとコード遺伝子との間に配置する。細菌発現ベクターの配列は、DNA塩基配列決定により確認した。
タンパク質の発現及び精製
リプログラミングタンパク質のDNA構築物は、大腸菌株BL-21(DE3)又はClearColiTM BL21(DE3)細菌細胞内へ個別に形質転換した。ClearColiTM BL21(DE3)細菌細胞を用いて、内毒素を含まない組換えリプログラミングタンパク質を生産した。単一のコロニーを、細菌タンパク質の発現用に選択した。短時間の最適化後、タンパク質の発現を、タンパク質の種類に応じて0.5乃至1.2mM IPTGにより誘導し、引き続き18℃で12乃至16時間培養した。細胞を、6Mの尿素を含む結合バッファ中に採取し、超音波処理を数回行って、タンパク質を抽出した。組換えリプログラミングタンパク質は、His-Bind Resinカラム(Novagen)を用いて、マニュアルに変更を加えて精製した。通常は、タンパク質抽出上清をカラムに2回充填し、5×カラム体積の結合バッファにより洗浄した。標準の菌株であるBL21(DE3)を用いて、組換えリプログラミングタンパク質を生産する場合には、10カラム体積の0.2％Triton X-114を用いた追加の洗浄ステップをタンパク質精製段階において追加し、細菌により発現させた組換えリプログラミングタンパク質から内毒素を除去することができる。組換えタンパク質を充填したカラムを、15乃至50mMのイミダゾールを含む10×カラム体積の洗浄バッファを用いて再度洗浄する。精製したタンパク質は、500mMイミダゾールを含む溶出バッファを用いてカラムから溶出させた。精製したタンパク質は、大量の水に対して透析し、凍結乾燥してタンパク質粉末とした。
実施例2
QQ修飾:タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を生産するためのタンパク質形質導入試薬による発現リプログラミングタンパク質の修飾
タンパク質形質導入試薬(QQ試薬)は、表1に示した試薬を含めるように組成を変化させることで調節し、特定のリプログラミングタンパク質及び細胞型に対して最も高いタンパク質形質導入効率を得ることができる。
生体内で用いるためには、合計体積を1mlとする。
1乃至6Mの尿素中のリプログラミングタンパク質及び規定のPEI、脂質を含むPBSバッファを用いて、合計体積を1mlにする。
リプログラミングタンパク質(群)は、まずリン酸ナトリウムバッファ(pH7.0、NaCl 50mM)に、タンパク質の溶解度に応じて0.5乃至10mg/mlの濃度で溶解させる。タンパク質の溶解度は、カチオン化の効率に影響することが分かっている。タンパク質を完全に溶解するために、タンパク質溶液を一晩、室温で攪拌する(リプログラミングタンパク質がシステイン残基を有するかに応じて、DTTが3mMで一晩に亘り存在する状態又は存在しない状態とする)。タンパク質は、1乃至6Mの尿素に溶解してタンパク質の溶解度を向上させることもできる。
脂質DOTAP/DOPE(1:1)乳剤を、以下の方法を用いて調製した。1mgのDOTAP/DOPE(0.5mg:0.5mg=1:1)混合物をクロロホルムに溶解し、N2ガス下で乾燥させた。乾燥させた脂質膜を、PBSバッファ、pH7.0に溶解し、脂質溶液の超音波処理を、3×30秒間、マイクロプローブ付きのFisher Scientific製超音波処理器(Sonic Dismembrator、Model 100)において7乃至8の出力で行った。脂質溶液は、更に37℃で2時間、懸濁液が半透明になるまでインキュベートした。調製した乳剤は、4℃で保管され、1ヶ月に亘り安定状態にある。
QQ試薬(脂質乳剤又は任意にCa又はDMSOを含まない)の他の材料は、上述した調製法に従って管内で混合した。次に、QQ試薬を非常にゆっくりと一滴ずつ、タンパク質溶液中へ攪拌しつつ滴定し、その後、脂質乳剤を加える。完了後、結果的に生じたタンパク質溶液は、室温で4時間置いた後、使用する。この期間には、QQ試薬をタンパク質溶液と混合し、更にタンパク質修飾反応を完了させるために穏やかに攪拌する必要がある。沈殿物が観察された場合、タンパク質溶液の遠心分離を14,000rpmで15分間行い、沈殿物を除去する。沈殿が発生した場合は、上清を用いてBCAタンパク質アッセイを実施し、溶液中に残存するタンパク質の量を調べる。細胞内へのタンパク質移動効率を確保するため、修飾タンパク質の濃度は、0.1mg/mlを上回る十分な高さにする必要がある。
一般に、QQ修飾タンパク質は、タンパク質の溶解度に応じて、0.5乃至1.5mg/mlの濃度で生体内での投与用に調製される。
QQ修飾は、個別に各タンパク質に対して、又は対象者に一緒に投与されるべきタンパク質の混合物に対して実施し得る。
QQ修飾は、任意に、個別に各タンパク質に対して実施し、QQ修飾タンパク質を共に数時間に亘り混合し、その後、小さな管に1ml/管で等分し、-20℃で保管され、数ヶ月に亘り安定状態にある。
リプログラミングタンパク質の大部分が沈殿した場合には、他のQQ試薬をタンパク質の修飾に用いることができる。一連のQQ試薬は、幅広いカチオン化試薬を、様々な脂質及びエンハンサーと共に網羅しており、そのため、全ての沈殿の問題が解決される。上述した手順は、より高濃度のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を調製するために反復することができる。
タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、脱塩カラムを通過させ、タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を残りの未反応物質から分離する。精製したタンパク質は、フィルタに通し(0.22μmカットオフ)、生体内投与前に滅菌する。精製したタンパク質画分は、滅菌前又は滅菌後に、スピンカラムを用いるなどして濃縮することが可能であり、-20℃で数週間乃至数ヶ月、安定状態で保存することができる。
様々なQQ試薬を用いて、タンパク質移動効率を最大に、細胞毒性を最小にすることもできる。加えて、様々なタンパク質を様々なQQ試薬により修飾し、細胞内へのタンパク質移動効率を最大にする。一般には、より良好な生体内送達効率のために、QQ5a乃至QQ9aが用いられる。しかしながら、これにより、生体内での毒性が高くなる場合がある。QQ5a乃至QQ9aを用いる際には、より大きなPEI及び脂質を、より低い濃度で用いることが重要である。
良好な生体内送達効率のためには、QQ1a乃至QQ4aを、生体内での毒性が少ない状態で用いる。QQ1乃至QQ4は、高い脂質濃度で用いることができる。
実施例3
リプログラミングタンパク質を、50mMリン酸ナトリウム(pH7.4)に2Mの尿素と共に溶解した。タンパク質形質導入試薬(QQ試薬)を調製法に基づいて新たに調製した。この実施例で用いたQQ試薬は、ポリエチレンイミン(PEI)1,200(1.2K、0.05乃至1.0mg/ml)及びDOTAP/DOPE(25-100μg/ml)のカクテルである。リプログラミングタンパク質のQQ修飾は、QQ試薬を、Oct4/Sox2/Nanog等の1種以上のリプログラミングタンパク質1mg/mlと、室温で4時間又は低温室で一晩に亘り混合することにより行った。
実施例4
静脈注射によるラットの脳腫瘍へのQQタンパク質の送達
フェリチンは、磁気共鳴映像法(MRI)の陰性対照試薬として有用な偏在性の鉄含有タンパク質である。
この実施例では、フェリチン、又はフェリチンをQQ試薬により処理してQQフェリチンとしたものを、ラット膠芽腫細胞株9L細胞の移植により発生させた脳腫瘍を有するラットに静脈注射する。
ラット膠芽腫細胞株9Lの細胞は、移植前に新たに調製し、1×106個/mlに調節した。頭蓋内異種移植は、標準のプロトコルにより行った。フィッシャラットを麻酔して定位フレーム内に置き、頭蓋骨を露出した。ブレグマの3mm右、1mm前方に穴を形成し、定位ホルダに装着した26sゲージ針付き10μlハミルトン製シリンジ(スイス、グラウビュンデン州ボナドゥウ)を用いて9L細胞(5μl中5×104細胞)を注射した。注射器は、深さ3.5mmまで降下させた後、深さ3.0mmまで上昇させた。腫瘍細胞は、0.5μl/10秒の速度で注射し、開頭部はホースレイのボーンワックスで覆った。9L細胞移植後12日目に、QQ修飾フェリチン又はフェリチン単体を、100μg/100μl/ラットで、ラット尾静脈より注射した。注射の4時間後、ラットを麻酔し、ラットの脳をMRIにより画像化した。MRI後、ラットを屠殺した。摘出した脳を、4％パラホルムアルデヒド中の一晩固定した後、パラフィンに埋め込み、更に分析した。薄さ6マイクロメートルの切片をそれぞれのブロックから切り取り、ヘマトキシリン及びエオシンにより染色した。脳腫瘍の大きさを、顕微鏡により判定した。
図1A及び1Bは、ラットの9L脳腫瘍内へのQQフェリチンの標的化送達と、フェリチンのみを注射したラットの9L脳腫瘍においてフェリチンが検出できないこととをMRIにより証明するものである。図1Aは、尾静脈を介してQQフェリチンを注射した9L脳腫瘍を有するラットの代表MRI画像である。矢印は、9L脳腫瘍を指しており、黒色は、腫瘍に送達されたフェリチンを示す。図1B:QQ修飾の無いフェリチンを注射した9L脳腫瘍を有するラットの代表MRI画像。この場合、脳腫瘍内にフェリチンは観察されなかったが、ラットの屠殺後、大きな9L脳腫瘍を有することが確認された。
QQフェリチンを注射した9L脳腫瘍の組織切片の二重免疫染色を、血管マーカーCD31に対する抗体と、フェリチンに対する抗体とを用いて行った。切片中の9L癌細胞の核は、DAPIにより染色した。CD31及びフェリチンの重複する免疫染色は、脳腫瘍の血管内で観察され、脳腫瘍に関連する新生血管の血管透過性・滞留性亢進効果(EPR効果)により、QQフェリチンが血管から漏出したことを示した。QQフェリチンで治療した動物では、フェリチンの免疫染色が、血管の近く又は血管に隣接する腫瘍細胞のサイトゾル内部で観察され、QQフェリチンが腫瘍細胞内に浸透したことを示した。一方、QQ修飾の無いフェリチンにより治療した9L腫瘍切片におけるフェリチンの免疫染色は、QQ修飾の無いフェリチンが腫瘍細胞に浸透しなかったことを示したが、免疫染色は、この非修飾フェリチンも腫瘍関連新生血管から漏出したことを示した。こうした非修飾フェリチンのナノ粒子は、細胞間で観察されており、組織内部の細胞間の流体のため蓄積されず、フェリチンのQQ修飾無しでは、MRIにより腫瘍は観察されなかったと思われる。
これらのデータは、脳組織切片の組織学的分析及び免疫染色により確認された、QQタンパク質送達手法によるラットの脳腫瘍に対するフェリチンの標的化送達を、MRIにより証明するものである。
実施例5
静脈注射によるマウスの乳癌へのQQタンパク質の送達。
この実施例では、フェリチン又はフェリチンをQQ試薬により処理してQQフェリチンとしたものを、マウス転移乳癌細胞株4T1細胞の移植により発生させた同所性乳房腫瘍を有するマウスへ静脈注射する。マウスにおけるマウス転移乳癌細胞株4T1細胞の移植は、自然転移性乳癌のマウスモデルである。
4T1細胞を、2ヶ月齢の雌BALB/cマウスの乳房(#4脂肪パッド)に移植した(4T1細胞20,000個/50μl/マウス)。4T1細胞移植後18日目に、4T1腫瘍は、マウス乳房内で直径およそ1.0乃至1.5cmの大きさに成長した。QQ修飾フェリチン(100μg/50μl/マウス)は、尾静脈を介して注射した。マウスは、麻酔し、MRIイメージングを、QQ修飾フェリチンの注射前、及び注射の0.5時間後、2時間後、3.5時間後、8時間後、及び18時間後に行った。
図2A乃至2Fは、乳癌保持マウスの原発腫瘍におけるQQ送達フェリチンを原発腫瘍内の暗色領域として示す、この時間経過における代表MRI画像である。この原発腫瘍の暗さは、時間に依存し、8時間後に最大に達した後、強度が減少し始めた。
MRIの結果は、プルシアンブルー染色及びフェリチン免疫染色を用いた組織学的分析により確認された。QQフェリチン注射後18時間の4T1乳癌保持マウスの原発腫瘍組織切片の免疫組織化学染色及びプルシアンブルー染色では、原発腫瘍内部でフェリチン及びプルシアンブルー染色が陽性となった。この組織学的結果により、4T1腫瘍保持マウス原発腫瘍内部のQQ送達フェリチンのMRIによる観察が確証された。
実施例6
4T1乳癌保持マウス原発腫瘍の4T1乳癌細胞の核内へのOct4及びKlf4タンパク質のQQタンパク質送達
4T1細胞(2×104個/50μl/マウス)を雌のBALB/cマウスに移植した。腫瘍細胞移植後15日目に、Alexa Fluor594標識Klf4を調製した。次に、QQ修飾非標識Oct4(QQ-Oct4)及びQQ修飾Alexa Fluor594標識Klf4を調製した。50μgのQQ-Oct4及びQQ-Alexa Fluor594標識Klf4タンパク質の腫瘍内注射を行った。マウスは、注射の5時間後に屠殺し、腫瘍組織切片を調製し、免疫染色及び蛍光顕微鏡検査を行った。原発4T1乳癌組織切片内のOct4に対する免疫染色により、4T1癌細胞におけるOct4の核局在化及びDAPIとの共局在が証明された。蛍光顕微鏡画像により、更に、原発4T1乳癌組織切片におけるKlf4の核局在化及びDAPIとの共局在が明らかとなった。
実施例7
急性心筋梗塞後のラットの損傷した心臓に対するGATA4、OCT4、及びSOX2のQQタンパク質送達
QQ修飾及び蛍光標識GATA4、Sox2、及びOct4を、腹腔内注射により心筋梗塞後のラットに投与し、QQ修飾及び蛍光標識タンパク質を、ラットの損傷心臓組織に送達させた。
GATA4、Sox2、及びOct4は、それぞれ、製造業者指定の方法によりAlexa Fluor488により標識した。標識GATA4、Sox2、及びOct4タンパク質は、小さなスピンカラムにより精製した。次に、Alexa Fluor488-GATA4、Alexa Fluor488-Sox2、及びAlexa Fluor488-Oct4をQQ修飾し、QQ修飾Alexa Fluor488-GATA4、QQ修飾Alexa Fluor488-Sox2、及びQQ修飾Alexa Fluor488-Oct4を生成した。
Lewisラットを麻酔し、冠状動脈結紮術を行ってLewisラットに心筋梗塞を発生させた。冠状動脈結紮術の24時間後に、QQ修飾Alexa Fluor488標識GATA4、QQ修飾Alexa Fluor488標識Sox2、及びQQ修飾Alexa Fluor488標識Oct4(200μg/100μl/ラット)をLewisラットに腹腔内注射した。蛍光標識タンパク質注射の7時間後に、ラットを屠殺し、心臓組織切片を調製し、梗塞サイズのための三重染色又は成熟心筋細胞を示す心筋マーカーであるα-アクチニン抗体による免疫染色を行った。
蛍光顕微鏡分析は、Alexa Fluor488-GATA4タンパク質のα-アクチニン免疫蛍光との共局在を示し、QQ-蛍光標識GATA4の腹腔内注射により、冠状動脈結紮後の損傷心臓組織の瘢痕域へのGATA4タンパク質の送達が生じたことを示した。同様に、Alexa Fluor488-Sox2及びα-アクチニン免疫蛍光の蛍光顕微鏡分析は、QQ修飾Alexa Fluor488標識Sox2の腹腔内注射により、冠状動脈結紮後の損傷心臓組織の境界域におけるSox2タンパク質の局在が生じたことを示した。最後に、Alexa Fluor488-Oct4の蛍光画像は、離れた正常心臓組織域における、注射したQQ修飾Alexa Fluor488-Oct4の局在を示した。これらの結果は、腹腔内注射により投与した蛍光標識及びQQ修飾GATA4、Sox2、及びOct4が、瘢痕域、境界域、及び正常心臓組織域の損傷心臓組織に達したことを示している。これらの結果は、QQタンパク質送達により、こうしたタンパク質が損傷心臓組織に標的化送達されたことを証明するものである。
実施例8
患者由来の9L、U251、U87、及び初代GBM細胞株を含む悪性グリオーマ細胞をタンパク質誘導多能性幹細胞(protein induced pluripotent stem cell, piPSC)へ、QQ修飾Sox2、Oct4、及びNanog(SON)タンパク質を用いて次のようにリプログラムした。0日目に、グリオーマ細胞を24時間に亘り播種し、50mmペトリ皿において増殖させた。2日目に、QQ-SONタンパク質を0.5乃至2.0μg/mlで培地に添加し、24時間に亘り培養した。翌日、新鮮なQQ-SONタンパク質を新たな培地内に添加し、24時間に亘り培養した。このようなサイクルを、細胞リプログラミングに用いるグリオーマ細胞に応じて5乃至7サイクル繰り返した。細胞リプログラミングの終わりに、培地を2日間に亘り維持用培地に変えた。細胞リプログラミング中に、piPSCコロニーが現れた。8日目に、皿全体の継代を行い、発生したpiPSCを拡張した。9L-piPSCの単層及びコロニーを共に含む、皿全体を継代したグリオーマpiPSCの免疫染色を、核マーカーであるOct4、Nanog、Rex-1、及び表面マーカーであるALP、Tra1-60、及びTra1-81を含む多能性マーカーを用いて行い、ほぼ全ての細胞が、これらの多能性マーカーに対して陽性であることが明らかとなった。一方、9L細胞の免疫染色は、これらのマーカーに対して陰性染色を示した。これらの結果は、QQ-SONタンパク質を用いた9L細胞の9L-piPSCへの細胞リプログラミングの高い変換効率を示している。
これは、Nanog及びOct4を用いた9L-piPSCのウェル全体(96ウェル)の免疫染色により確認される。陽性9L-piPSCクローンを陰性クローンと比較して計数すると、平均96±2％の転換効率となることが分かる(表2参照)。9L細胞の対照免疫染色は、これら2種の多能性マーカーNanog及びOct4に対して陰性染色を示した。9L細胞から9L-piPSCへの転換効率は、陽性染色コロニー及び単層9L-piPSCを、DAPIにより染色された全コロニー及び単層細胞と対比することにより、EVOS Auto蛍光顕微鏡が提供するソフトウェアを用いて計算した。二重化した96ウェルの9L-piPSCの免疫染色を用いて、平均転換効率及び標準偏差を計算した。
QQ-SONタンパク質(0.5ug/ml、Sox2:Oct4:Nanog=1:1:1、5回の連続サイクル)を用いて9L-piPSCを生成する9L細胞の細胞リプログラミング。
同様の細胞リプログラミングプロトコルを用いて、4T1-piPSCを4T1マウス乳癌細胞から生成した。4T1細胞の4T1-piPSCへのリプログラミング転換効率は、同じ全ウェル計数法(96ウェル)を用いると96±1.3％となる(表3参照)。
実施例9
ヒト膠芽細胞腫細胞株U251の細胞をU251-piPSCへ、QQ修飾Sox2、Oct4、及びNanog(SON)タンパク質を用いて次のようにリプログラムする。0日目に、U251膠芽細胞腫細胞を24時間に亘り播種し、50mmペトリ皿において増殖させた。2日目に、QQ-SONタンパク質を0.5乃至2.0μg/mlで培地に添加し、24時間に亘り培養した。翌日、新鮮なQQ-SONタンパク質を新たな培地内に添加し、24時間に亘り培養した。このようなサイクルを、5乃至7サイクル繰り返した。細胞リプログラミングの終わりに、培地を2日間に亘り維持用培地に変えた。細胞リプログラミング中に、U251-piPSCコロニーが現れた。8日目に、皿全体の継代を行い、発生したU251-piPSCを拡張した。
U251及びU251-piPSCの増殖活性を、Ki67陽性細胞数を判定することにより検定した。図3Aは、このアッセイの結果を示すグラフであり、グリオーマ細胞のpiPSCへの細胞リプログラミングが、その増殖を有意に減少させることを示しており、エラーバーは、3回の独立した実験の標準誤差を示す。
実施例10
患者由来初代ヒト多形膠芽細胞腫(GBM)細胞株GBM(12-14)の細胞をGBM-piPSCへ、QQ修飾Sox2、Oct4、及びNanog(SON)タンパク質を用いて次のようにリプログラムする。0日目に、GBM細胞を24時間に亘り播種し、50mmペトリ皿において増殖させた。2日目に、QQ-SONタンパク質を0.5乃至2.0μg/mlで培地に添加し、24時間に亘り培養した。翌日、新鮮なQQ-SONタンパク質を新たな培地内に添加し、24時間に亘り培養した。このようなサイクルを、5乃至7サイクル繰り返した。細胞リプログラミングの終わりに、培地を2日間に亘り維持用培地に変えた。細胞リプログラミング中に、GBM1-piPSCコロニーが現れた。8日目に、皿全体の継代を行い、発生したGBM-piPSCを拡張した。
アルキル化剤テモゾロミドに対する患者由来初代ヒトGBM(12-14)細胞(四角)及びGBM(12-14)-piPSC(丸)の用量依存的化学療法薬感受性を判定し、結果を図3Bに示す。実験は、3連で、平均±標準偏差、p<0.01として行った。GBM-piPSCの薬物感受性は、テモゾロミドに対して、親膠芽細胞腫細胞と比較して有意に増強された。
実施例11
ラット膠芽腫細胞株9Lの細胞を9L-piPSCへ、QQ修飾Sox2、Oct4、及びNanog(SON)タンパク質を用いて次のようにリプログラムする。0日目に、9Lグリオーマ細胞を24時間に亘り播種し、50mmペトリ皿において増殖させた。2日目に、QQ-SONタンパク質を0.5乃至2.0μg/mlで培地に添加し、24時間に亘り培養した。翌日、新鮮なQQ-SONタンパク質を新たな培地内に添加し、24時間に亘り培養した。このようなサイクルを、5乃至7サイクル繰り返した。細胞リプログラミングの終わりに、培地を2日間に亘り維持用培地に変えた。細胞リプログラミング中に、9L-piPSCコロニーが現れた。8日目に、皿全体の継代を行い、発生した9L-piPSCを拡張した。
カルボプラチンに対する9L細胞(四角)及び9L-piPSC(丸)の用量依存的化学療法薬感受性をMTTアッセイにより判定し、結果を図3Cに示す。実験は、3連で、平均±標準偏差、p<0.01として行った。9L-piPSCの薬物感受性は、カルボプラチンに対して、親9L細胞と比較して有意に増強された。
実施例12
マウス乳腺腫瘍細胞株4T1の細胞を4T1-piPSCへ、QQ修飾Sox2、Oct4、及びNanog(SON)タンパク質を用いてリプログラムする。0日目に、4T1細胞を24時間に亘り播種し、50mmペトリ皿において増殖させた。2日目に、QQ-SONタンパク質を0.5乃至2.0μg/mlで培地に添加し、24時間に亘り培養した。翌日、新鮮なQQ-SONタンパク質を新たな培地内に添加し、24時間に亘り培養した。このようなサイクルを、5乃至7サイクル繰り返した。細胞リプログラミングの終わりに、培地を2日間に亘り維持用培地に変えた。細胞リプログラミング中に、4T1-piPSCコロニーが現れた。8日目に、皿全体の継代を行い、発生した4T1-piPSCを拡張した。
4T1細胞及び4T1-piPSCの増殖活性を、Ki67陽性細胞数を判定することにより検定し、4T1乳腺腫瘍細胞の4T1-piPSCへの細胞リプログラミングが、その増殖を有意に減少させることが分かった。
4T1-piPSCの乳房球体形成は、4T1細胞のものと比較して減少した。
ドキソルビシン及びパクリタキセルに対する4T1細胞及び4T1-piPSCの用量依存的化学療法薬感受性をMTTアッセイにより判定した。4T1-piPSCの薬物感受性は、ドキソルビシン及びパクリタキセルに対して、親4T1細胞と比較して有意に増強された。
実施例13
グリオーマ細胞由来piPSCの3つの胚葉へのインビトロでの分化
グリオーマpiPSCの胚体(EB)を懸滴法により調製した。グリオーマpiPSCのEBを自然分化培地内に10日間置いた後、外胚葉、中胚葉、及び内胚葉のマーカーによる免疫染色を行い、外胚葉ではPAX6の陽性免疫染色、中胚葉ではデスミンの陽性免疫染色、内胚葉ではαフェトプロテイン(AFP)の陽性免疫染色を示した。対照の9L細胞の免疫染色では、これらのマーカーは陰性だった。同様の結果が4T1-piPSCについても得られ、4T1-piPSCも3つの胚葉に分化することを示した。
実施例14
グリオーマ細胞由来piPSCの神経系列へのインビトロでの分化
グリオーマpiPSCのEBを、特定の神経系列を誘導する分化培地内に14日間置いた後、神経系列マーカーによる免疫染色を行い、ニューロンではTuj Iの陽性免疫染色、アストロサイトではGFAPの陽性免疫染色、神経幹細胞ではネスチンの陽性免疫染色を示した。これらの神経特異的分化細胞は、神経細胞形態も示した。対照の9L細胞の免疫染色では、これらのマーカーは陰性だった。
実施例15
細胞リプログラミングは、間葉上皮転換(mesenchymal-to-epithelial transition, MET)及び腫瘍原性の減少をインビトロで発生させる。
E-カドヘリン(E-cad)、β-カテニン(β-cat)、ビメンチン(VMT)を含む、U251細胞及びU251-piPSCの幾つかの上皮及び間葉マーカーのウエスタンブロット分析の結果(図4A参照)は、細胞リプログラミング中のMETを示し、これは細胞形態の変化及びqRT-PCRの結果により確認される。GFAPタンパク質レベルも、U251細胞からU251-piPSCへの細胞リプログラミング後に、有意に増加しており、細胞リプログラミングにより、U251細胞の腫瘍原性が細胞リプログラミング中にインビトロで有意に減少したことを示している。アクチンタンパク質の発現を、内部標準として用いた。抗GFAP抗体を用いたU251細胞及びU251-piPSCの免疫染色により、ウエスタンブロットが示すU251-piPSCにおけるGFAPのタンパク質発現のアップレギュレートが確認された。加えて、GFAP発現細胞は、神経細胞の形態を示した。
細胞リプログラミング後のU251細胞の腫瘍原性の減少は、U251細胞及びU251-piPSCの細胞移動(図4B)及び浸潤(図4C)のインビトロアッセイにより確認され、U251-piPSCの移動及び浸潤の有意な減少を示した(p<0.01)。
同様に、上皮マーカーであるE-カドヘリンと間葉マーカーであるフィブロネクチンとを用いた41-piPSC及び4T1細胞の免疫染色を比較すると、4T1細胞が陽性E-カドヘリン免疫染色を示す一方、4T1-piPSCは、より強いE-カドヘリン免疫染色を示すことが明らかとなった。反対に、4T1細胞は、より強いフィブロネクチン免疫染色を示し、4T1-piPSCでは、ほぼ陰性のフィブロネクチン免疫染色となった。この結果により、細胞リプログラミング中の4T1細胞の4T1-piPSCへのMETが確認された。加えて、4T1-piPSCは、親4T1細胞の特性と比較して、増殖の減少(図4D)、乳房球体形成の減少(図4E)、移動の減少(図4F)、及び浸潤の減少(図4G)を示し、インビトロでの4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後に4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示した。
実施例16
グリオーマ細胞及びグリオーマpiPSCの共培養は、グリオーマpiPSCが周囲のグリオーマ細胞の表現型を変化させる傍観者効果とインビトロでの腫瘍原性の減少とを呈することを示した。
U251-piPSCとの間接共培養を40乃至64時間時間行ったU251細胞では、細胞形態の変化が観察され、共培養グリオーマ細胞の間葉上皮転換(MET)を示した。図5Aは、U251細胞の細胞形態を示す画像であり、図5Bは、U251-piPSCとの間接共培養を40乃至64時間行ったU251細胞の細胞形態の変化を示す画像である。
このMETは、抗パンカドヘリン抗体を用いたU251細胞、U251-piPSC、第1の共培養U251細胞、及び第2の共培養U251細胞の免疫染色により確認され、U251細胞におけるパンカドヘリンのサイトゾル/核局在化、及びU251-piPSC及び第1/第2の共培養U251細胞の膜/核局在化を示し、U251-piPSC間と第1/第2の共培養U251細胞間とにおける細胞-細胞接着の大きな増強が示唆された。これは、細胞リプログラミング中及び第1/第2の共培養U251細胞のMETを示すものである。第2の共培養は、第1の共培養細胞をTranswellインサート内に配置し、新鮮なU251細胞を基底外側のチャンバに配置する間接共培養実験である。別個に標識した抗GFAP及び抗Tuj1抗体を用いたU251細胞及び間接共培養したU251細胞の二重免疫染色は、神経形態を有する共培養U251細胞における有意なGFAPタンパク質発現を示す一方、U251細胞(紡錘形態)は、GFAPを発現しない。
Ki-67免疫染色によるU251細胞、U251-piPSC、及び間接共培養U251細胞の増殖アッセイの結果は、U251-piPSC及び共培養U251細胞の増殖の有意な減少を示す(図5C)。U251細胞、U251-piPSC、並びに1:1及び8:1の比(U251:U251-piPSC)での直接共培養U251細胞の移動アッセイ(図5D)及び浸潤アッセイ(図5E)の結果は、U251-piPSCとの共培養後のU251細胞の移動及び浸潤の有意な減少を示す(p<0.005)。
同様の共培養実験に続いて、4T1-piPSCとの共培養4T1細胞のMETが観察された。共培養4T1細胞及び4T1-piPSCの免疫染色は、両方の細胞がE-カドヘリンの高いタンパク質発現及びフィブロネクチンの低いタンパク質発現を有することを示し、共培養4T1細胞のMETが確認された。加えて、共培養4T1細胞は、増殖(図5F)、移動(図5G)、及び浸潤(図5H)の有意な減少も示し、4T1-piPSCとの共培養を40時間行った後の4T1細胞の腫瘍原性の有意な減少を示した。
患者由来原発脳腫瘍細胞GBM(12-14)のU251-piPSCとの共培養は、更に、共培養患者由来原発脳腫瘍細胞の間葉上皮転換及び腫瘍原性の減少、即ち、U251-piPSCの傍観者効果を発生させる。
これらの結果は、piPSCの傍観者効果が周囲の癌細胞の表現型を変化させ、腫瘍原性及び悪性度を減少させることを示している。この傍観者効果は、少数のpiPSCが周囲の多数の腫瘍細胞の悪性表現型を傍観者効果により変化させ、細胞転換癌療法の細胞メカニズムを提供可能であることを示している。
実施例17
悪性癌細胞から生じたpiPSCの生体内での腫瘍原性の有意な減少及び転移/浸潤の抑制。
第1の組の動物では、等しい数の9L細胞又は9L-piPSC(5×104個/5μl)をFisherラットの頭蓋内に移植した。第2の組の動物では、等しい数の9L細胞又は9L-piPSC(1×106個/100μl)をFisherラットの皮下に移植した。
9L細胞又は9L-piPSCを頭蓋内移植したラット(n=10)の腫瘍体積(mm3)を14日目に測定した(図6A参照)。9L細胞及び9L-piPSCを頭蓋内移植したラットのグラム単位の腫瘍重量を、4T1細胞移植後25日目に測定した(n=6、図6B参照)。結果は、9L腫瘍のものと比較して、頭蓋内9L-piPSC腫瘍の体積の有意な減少と、皮下9L-piPSC腫瘍の重量の有意な減少とを示し、9L-piPSCへの細胞リプログラミング後の9L細胞の腫瘍原性の有意な減少を示唆した。この結果は、9L細胞の浸潤の広範な抑制を示す、9L細胞及び9L-piPSC移植動物由来の腫瘍のヘマトキシリン及びエオシン(H&E)染色により確認された。即ち、9L-piPSCの頭蓋内腫瘍が明瞭で完全な境界を示した一方、9L頭蓋内腫瘍では、正常脳組織への9L腫瘍細胞の広範な浸潤により境界が破断していた。
実施例18
悪性乳癌細胞から生じたpiPSCの生体内での腫瘍原性の有意な減少及び転移/浸潤の抑制。
等しい数の4T1細胞及び4T1-piPSC(2×104個/50μl)を2乃至3ヶ月齢雌のBALB/cマウス(20グラム)の#4脂肪パッドに移植した。4T1乳房腫瘍は、細胞移植後5乃至7日目に観察された。マウスの腫瘍体積及び体重を毎日モニターした。25日目にマウスを屠殺し、腫瘍を計量した。生存実験では、腫瘍負荷に達した際にマウスを屠殺した。
4T1及び4T1-piPSC腫瘍の成長は、腫瘍体積(図6C)及び腫瘍重量(図6D)により、4T1及び4T1-piPSC移植後25日目に測定し、4T1-piPSCへの細胞リプログラミング後、4T1細胞の有意な腫瘍の停滞を示した。
4T1細胞及び4T1-piPSCを移植したマウスの肺転移を、細胞移植後25日目に分析した。4T1細胞を移植した全てのマウスが多くの転移巣を示した一方、4T1-piPSCを移植したマウスでは、細胞移植後25日目に肺転移は観察されず(図6E)、4T1細胞の4T1-piPSCへの細胞リプログラミングにより生じた広範な転移阻害を示した。この結果は、4T1保持マウス及び4T1-piPSC保持マウスの肺組織切片のH&E染色により確認され、4T1-piPSCを移植したマウスにおいて肺転移は見られなかった。
4T1細胞及び4T1-piPSCを#4脂肪パッドに移植したマウスのカプラン・マイヤ生存率曲線(図6F)は、250日間生存実験中の4T1-piPSC保持マウスの生存期間の有意な延長を証明している。これらの結果は、悪性癌細胞のpiPSCへの細胞リプログラミングが親癌細胞の腫瘍原性及び転移特性を有意に減少させ、したがって、4T1-piPSCを移植したマウスの生存を有意に延長させることを証明している。
実施例19
腫瘍細胞由来のpiPSCは、様々な分化組織環境に応じて、生体内で正常組織に分化する。
9L頭蓋内移植ラットの脳組織切片のH&E染色は、正常脳組織内への広範なグリオーマ血管新生及び脳腫瘍内部の重度の出血を示す一方、9L-piPSC頭蓋内移植ラットで観察された血管新生及び出血は遙かに少なかった。加えて、9L-piPSC頭蓋内移植ラットは、脳内の腫瘍近くで新たに分化した神経ロゼットを示した。更に、9L-piPSCを頭蓋内移植したラットの腫瘍組織スライドのH&E染色は、立方体状及び低い円柱状の上皮細胞とメラニンの褐色を有するメラニン細胞とを含む未成熟の汗腺を腫瘍内に示した。9L-piPSCを皮下移植したラットの腫瘍組織スライドのH&E染色は、更に、2層の表皮と、より長い形状で細胞基部に核を有する初期の単純円柱上皮細胞とを備えた皮膚上皮を示した。
同様に、4T1-piPSC保持マウスの腫瘤のH&E染色は、褐色及び白色脂肪細胞を共に含む脂肪細胞と成熟及び未成熟乳管とを含む正常乳房組織への移植4T1-piPSCの生体内分化を示した。
これらの結果は、腫瘍細胞由来piPSCが様々な分化組織環境に応じて生体内で様々な正常組織細胞に分化することを示している。
実施例20
系列追跡は、腫瘍細胞由来piPSCの正常組織への分化を示す。
腫瘍細胞由来piPSCが正常組織に分化する状態を確保するために、GFPを発現する9L及び4T1細胞を調製した。
GFP-9L-piPSC及びGFP-4T1-piPSCを調製した。
両方の細胞型を用いて系列追跡実験を行った。GFP-9L-piPSCについては、細胞をFisherラットの左側腹部に皮下移植した。GFP-4T1-piPSCについては、細胞を雌のBALB/cマウスの#4脂肪パッド内に移植した。小さな腫瘤が、GFP-9L-piPSC移植ラットでは10乃至15日目、GFP-4T1-piPSC移植マウスでは20乃至25日目に観察された。動物は、細胞移植後、異なる日数で屠殺し、腫瘤を採取し、H&E染色及び免疫染色用の組織切片の作成に用いた。Tuj I及びネスチン神経マーカー抗体、アディポネクチン(脂肪細胞マーカー)、サイトケラチン8,14,18(CK8,14,18)又はサイトケラチン5,8(CK5,8)(乳管マーカー)による免疫染色を、差別的に検出可能な標識を用いて実施した。
4T1-piPSC保持マウスの腫瘤の中央及び縁部のH&E染色は、共に腫瘤内での潜在的な脂肪細胞及び未成熟乳管の出現を示した。
抗Tuj I抗体を用いた系列追跡実験により得られたGFP-9L-piPSC腫瘤の組織切片の免疫染色は、同じ組織切片のGFP発現細胞のGFP蛍光と重複する陽性Tuj I免疫染色を示した。組織切片では、重複するTuj I及びGFP蛍光画像のみが得られ、これらのTuj I陽性細胞がGFP発現9L-piPSCを起源とすることが示唆された。Tuj I/GFP陽性細胞は、神経細胞形態を示した。このデータは、GFP発現9L-piPSCが生体内でTuj I陽性神経系列細胞に分化したことを実証している。
抗ネスチン抗体を用いた系列追跡実験により得られたGFP-9L-piPSC腫瘤の組織切片の免疫染色は、同じ組織切片のGFP発現細胞のGFP蛍光と重複する陽性ネスチン免疫染色を示した。組織切片では、重複するネスチン及びGFP蛍光画像のみが得られ、これらのネスチン陽性細胞がGFP発現9L-piPSCを起源とすることが示唆された。このデータは、GFP発現9L-piPSCが生体内でネスチン陽性神経系列細胞に分化したことを実証している。
抗アディポネクチン抗体による4T1-piPSC保持マウスの腫瘍組織切片の免疫染色は、GFP発現細胞由来の緑色蛍光と重複するアディポネクチン陽性免疫染色を示した。組織切片では、重複するアディポネクチン及びGFP蛍光のみが脂肪細胞形態を有する細胞において観察され、4T1-piPSC保持マウスの腫瘤の中に脂肪細胞が存在することが示唆され、更に、これらの脂肪細胞によるGFPの発現から、その起源が移植されたGFP-4T1-piPSCの分化であることが示唆された。
抗CK8,18,14及び抗CK5,8抗体による4T1-piPSC保持マウスの腫瘍組織切片の免疫染色は、GFP発現細胞由来の緑色蛍光と重複するCK8,18,14及び抗CK5,8陽性免疫染色を示した。組織切片では、重複するCK8,18,14又は抗CK5,8陽性及びGFP蛍光のみが、乳管の形態を有する細胞において観察され、移植されたGFP-4T1-piPSCの分化を起源とする未成熟乳管の存在が、これらの乳管によるGFPの発現から示唆された。
実施例21
生体内の腫瘍のQQ-SONタンパク質誘導細胞リプログラミング治療
9L腫瘍保持ラットを生成するため、9L細胞(1×106個/100μl)をFisherラットの皮下に移植した。9L移植の5日後、QQ-SONタンパク質を腫瘍内注射により毎日、1μg/日(n=5)、5μg/日(n=5)、又は10μg/日(n=10)で投与し、18日間の治療を行った。PBSバッファ中のQQ試薬を、腫瘍内注射により対照ラットに投与した(n=10)。ラットの腫瘍体積及び体重を毎日モニターした。23日目に、ラットを屠殺し、腫瘍を計量した。
腫瘍成長は、体積(図7A参照)及びグラム単位の腫瘍重量(図7B参照)により測定した。ラットは、23日目に屠殺し、腫瘍を計量した。このデータは、QQ-SON治療が腫瘍の停滞をもたらす原位置での細胞リプログラミングを誘導することを示した。
QQ-SONタンパク質治療が9L細胞を皮下移植したラットの生存に及ぼす効果を判定するために、9L細胞移植後5日目に、ラットを、PBS中のQQ試薬(n=8、生存期間中央値=21日)又はQQ-SONタンパク質(10μg/日、n=8、生存期間中央値=127日)により30日間治療した。ラットは、腫瘍負荷(12cm3未満)に達した際に屠殺した。カプラン・マイヤ生存率曲線(130日間)を図7Cに示す。このデータは、QQ-SONタンパク質治療が、9L腫瘍保持ラットの生存を有意に延長することを示した。
実施例22
生体内の腫瘍のQQ-SONタンパク質誘導細胞リプログラミング治療
同所性4T1乳癌保持マウスを生成するため、4T1細胞(2×104個/50μl)を、2乃至3ヶ月齢の雌のBALB/cマウス(20グラム)の#4脂肪パッド内に移植した。4T1乳房腫瘍は、細胞移植後5乃至7日目に観察された。マウスの腫瘍体積及び体重を毎日モニターした25日目に、マウスを屠殺し、腫瘍を計量した。生存実験では、腫瘍負荷(2グラム未満)、努力呼吸を発生させる転移、抑制不可能な痛み等を含むエンドポイントに達した際にマウスを屠殺した。
様々な用量のQQ-SONタンパク質を、QQ修飾SONタンパク質0.5μg/マウス、QQ修飾SONタンパク質1.25μg/マウス、又はQQ修飾SONタンパク質2.5μg/マウスで投与し、QQ-PBSである対照と比較した。有効性は、25日間の経時的な腫瘍体積の測定(図7D)と、25日目のグラム単位の腫瘍重量の測定(図7E)とにより判定した。
他の実験では、QQ-SONタンパク質(n=8)又は対照としてのQQ-PBS(n=8)により治療したマウスの35日間の経時的な腫瘍体積をMRIにより決定し(図7F参照)、両群の腫瘍重量を、35日目に計量することにより決定した(図7G)。QQ-SONタンパク質治療は、原発腫瘍の除去無く、広範な腫瘍の停滞を発生させた。
マウスを分析して、原発腫瘍を除去せずにQQ-SON及びQQ-PBSにより治療した4T1保持マウスの肺(図7I及び7M)、リンパ節(図7J及び7N)、肝臓(図7K及び7O)、及び脾臓(図7L及び7P)において、記載の日数でMRIにより観察された転移の数及びパーセンテージを決定した。これらの結果は、QQ-PBS治療マウスと比較して、QQ-SON治療マウスでは、4T1細胞移植後に転移を示す日が遙かに遅く、肺、リンパ節における転移巣が遙かに少なく、更に肝臓及び脾臓では転移巣が観察されなかったことを示している。このデータは、原発腫瘍を除去しないQQ-SONタンパク質治療により生じた、4T1保持マウスにおける広範な転移阻害を示している。
実施例23
原発腫瘍を除去せずにQQ-PBS及びQQ-SONタンパク質により治療した腫瘍組織切片の組織学的分析。
PBSバッファ中のQQ試薬により18日間治療したラットの9L腫瘍組織スライドのH&E染色は、広域に及ぶ血管新生を有する均一な腫瘍細胞を示した。抗VE-カドヘリン抗体による近接組織スライドの免疫染色により、血管新生が確認された。このラットは、皮下9L細胞移植後26日目に、13.5cm3(約15.5g)の腫瘍を有する状態で屠殺された。一方、QQ-SONタンパク質により18日間毎日治療したラットの腫瘍組織スライドのH&E染色は、腫瘍細胞域、結合組織域、及び線維芽細胞域を含む様々な細胞域を示した。このラットは、皮下9L細胞移植後49日目に屠殺され、その腫瘍は、大きさが0.2cm3(約0.6g)まで有意に減少していた。抗プロコラーゲン(線維芽細胞マーカー)抗体を用いた同じラットの近接腫瘍組織スライドの線維芽細胞域の免疫染色では、線維芽細胞域(陽性染色)及び腫瘍細胞域(陰性染色)が確認された。QQ-SONタンパク質により18日間治療した同じラットの腫瘍組織スライドの、抗GFAP及び抗Tuj1抗体を用いた免疫染色は、両マーカーの陽性染色をニューロン細胞形態及び神経ロゼット形成と共に示した。このデータは、注射されたQQ-SONタンパク質が神経系列細胞を含む非癌細胞へ分化する過渡的9L-piPSCの原位置での生成を誘導することを示している。
同様に、QQ-SONタンパク質により治療したマウスの4T1腫瘍組織スライドのH&E染色では、脂肪細胞及び乳管がアディポネクチン及びサイトケラチン5/8/14により陽性に免疫染色されており、注射されたQQ-SONタンパク質が、更に、乳房組織へ分化する4T1-piPSCへの原位置4T1-腫瘍細胞リプログラミングを原発腫瘍内で誘導したことを示した。
実施例24
QQ-SON治療は、治療された9L細胞のゲノム安定性を生体内で有意に高める。
共にQQ-SONタンパク質により18日間治療した2匹の皮下9L-腫瘍保持ラットの外植細胞のSKYゲノム分析を行った。一方のラット(#12)は、QQ-SON治療に対する広範な反応を示し、腫瘍は縮小を始めた。腫瘍が消失する前に、このラットを屠殺し、腫瘍を採取し、外植片及び腫瘍組織スライドとした。他のラット(#15)は、QQ-SONタンパク質治療に反応を示さず、腫瘍は成長を続け、エンドポイントに達した(12cm3超)。このラットを屠殺し、外植片及び腫瘍組織スライドを調製した。
#15ラットの外植片由来の細胞は、急速に成長し、3日間でコンフルエンスに達した。細胞は、一般的な9L細胞の紡錘形態を示した。しかしながら、#12ラットの外植片由来の細胞は、成長が非常に遅く、2週間後になって、神経形態を有する一部の細胞が幾つかのコロニーで観察された。GFAP及びTuj Iによる腫瘍組織スライドの免疫染色では、#12ラットにおいて、神経形態を示す細胞に対して両マーカーが陽性染色を示したが、#15ラットにおいて、これら2種のマーカーは陰性染色を示した。β-カテニン、CK5/6、E-カドヘリン、Lefty、Nodal、及びCripto-1による追加の免疫染色は、#12及び#15ラットにおいて反対の結果を示した。#12ラットの腫瘍組織スライドは、CK5/6、E-カドヘリン、Lefty、及びβ-カテニンの陽性染色を示したが、#15ラットの腫瘍組織スライドでは陰性染色が観察された。興味深いことに、Lefty及びE-カドヘリンは、腫瘍組織切片の同じ領域においてCK5/6及びE-カドヘリンと同じく共染色を示した。一方、#15ラットの腫瘍組織スライドは、Nodal及びCripto-1に対して陽性染色を示したが、#12の組織切片は、これら2種のマーカーに対して陰性染色を示した。これらの結果は、#12ラットの組織切片には非癌細胞への腫瘍細胞転換が存在するが、#15ラットの組織切片では、9L腫瘍細胞のままであることを示している。
外植片細胞のゲノム安定性を評価するために、分子細胞遺伝学的分析を行った。20枚の有糸分裂画像を、ラット#15及びラット#12の各外植片について収集し、ラット#15とラット#12との染色体の平均数を分析した。表4は、ラット#15及びラット#12の染色体異常の比較を示している。分子細胞遺伝学的分析は、ラット#12について35％の非クローン性染色体異常(non-clonal chromosomal aberration, NCCA)及び20％のクローン性染色体異常(clonal chromosomal aberration, CCA)、ラット#15について70％のNCCA及び15％のCCAを示した(表4)。NCCAの頻度はゲノム不安定性のレベルを表し、CCAは相対的安定性を示すため、これらのデータは、QQ-SONタンパク質治療に反応しなかった腫瘍(ラット#15)が、QQ-SON治療に対して良好な反応を示した腫瘍(ラット#12)のものより高いレベルのゲノム不均一性を示したことを示唆している。この結果は、タンパク質誘導原位置細胞リプログラミングが、治療癌細胞のゲノム安定性を有意に高めることを示し、悪性癌細胞の非癌細胞への細胞転換を示している。
実施例25
タンパク質誘導原位置細胞リプログラミングが仲介するQQ-SON誘導細胞転換癌療法は、原発腫瘍の外科的除去後の皮下9L腫瘍保持ラット及び末期4T1保持マウスの癌の治癒をもたらす。
Fisherラットへの9L細胞の皮下移植を行い、腫瘍保持ラットを発生させた。腫瘍細胞移植の5日後、QQ修飾SON(QQ-SON)タンパク質の腫瘍内注射を毎日行った。PBS中のQQ試薬(QQ-PBS)を適切な対照とした。QQ-SONタンパク質を10μg/マウス/日で用いる18日間の腫瘍内治療レジメンに続いて、90日間生存実験を行った。治療中、全ての治療ラットにおいて腫瘍成長の有意な減少が観察された。18日間の治療後、治療ラットの50％は、腫瘍体積の経時的な縮小を示し、これらのラットに触知可能な腫瘍は存在しなかった。残りの治療ラットは、有意な腫瘍成長速度の低下を示した。治療群の生存期間中央値は、49±20日間(n=8)となり、一方、対照群の製造期間は、21±4日間(n=6)となった。腫瘍の再発は、3匹の治療ラットで32、43、及び62日目に観察され、再発の中央値は45±13日間となった。再発腫瘍は、非常に積極的に成長し、12cm3超の体積に5乃至7日間で達した(表5、治療1)。第4のグリオーマ治癒ラットでは、奇形腫形成の形跡を示すことなく30ヶ月を超えて腫瘍の無い状態が続いた。
毎日の腫瘍内治療レジメンを30日間に延長すると、100％グリオーマ治癒ラットが400日間生存実験の最初の73日以内に得られた(n=8)。ここでも、腫瘍の再発が3匹の治療ラットで73、78、及び92日目に観察され(再発中央値:81±8日間)、18日間のみ治療したラットで観察された腫瘍の再発より大幅に遅くなった。残りの5匹のラットでは、400日間に亘り腫瘍の無い状態が続いた。腫瘍が再発した3匹のラットには、更に30日間の治療を行った(毎日の腫瘍内注射、10μg/日のQQ-SON)。3匹のラットのうち、2匹は、進行が非常に遅く、更に66日間(78日目に腫瘍発生)又は68日間(92日目に腫瘍再発)に亘り生存した。1匹のラットは、遅い腫瘍成長を示し、109日目に腫瘍の体積が12cm3に達した際に屠殺された(腫瘍再発確認から36日後)。治療ラットの生存期間中央値は、280±155日間(n=8)となった一方、対照群(n=6)では21±4日間となった(表5、治療2)。
この結果が再現可能であることを確認するため、上述した30日間治療実験を繰り返し、80％グリオーマ治癒ラットが最初の79日以内に得られた。2匹のラットは、遅い腫瘍成長を示したが、それぞれ29日目及び48日目に12cm3の腫瘍体積に達した(表5、治療3)。しかしながら、2匹のグリオーマ治癒ラットは、79日目及び111日目に腫瘍の再発を示した(再発中央値:95±16日間)。これら2匹のラットに対して、QQ-SONタンパク質(10μg/日)による治療を更に30日間行った。2匹のラットの一方は、遅い腫瘍成長を示し、79日目の腫瘍再発から30日後に体積が12cm3に達した。他方のラットは、更に69日間生存した。治療ラットの生存期間中央値は、276±156日間となり(n=10)、一方、QQ-PBSにより治療した対照ラットは、腫瘍移植後23±3日間のみ生存した(n=6)。治療2及び3の腫瘍治癒ラットは、両方とも15ヶ月を超えて生存し、その間に腫瘍再発も奇形腫形成も起こらなかった。
同様の結果は、4T1細胞移植後18日目に原発腫瘍を外科的除去した4T1乳癌保持マウスの末期について、QQ-PBS及びQQ-SON治療マウスの両方で観察された。毎日の腫瘍内QQ-SONタンパク質治療を5日目に行い、40日間継続した。事前に、肺転移が7日目に始まったことが明らかとなった。18日目には、MRIにより観察可能な肺転移巣が全てのマウスで観察された。250日間生存実験を行った。結果のデータ(表6)は、QQ-PBS対照マウスが25乃至47日目に死亡した一方、QQ-SON治療マウスが遙かに長く生存し、61％(n=11)のQQ-SON治療マウスが、腫瘍再発も奇形腫形成も無く、全250日間を生存したことを示した(n=18)(図8参照)。MRIの結果により、肺転移巣の消失が明らかとなった。これらのデータは、このQQ-SON誘導細胞転換癌療法の高い治療効率を実証している。
図8は、18日目に原発4T1乳癌を外科的除去した4T1乳癌保持マウスのカプラン・マイヤ生存率曲線(250日生存)である。これらの4T1乳癌保持マウスでは、QQ-PBS(対照)及びQQ-SONタンパク質(治療)による治療を、雌のBALB/cマウスの#4脂肪パッド内への4T1細胞移植後6日目に行った。原発腫瘍は、5日目頃に触知可能となり、18日目に外科的に除去された。QQ-PBS/QQ-SON治療は、毎日、腫瘍内(5μg/マウス/日)及び腹腔内注射(25μg/マウス/日)の両方で行った。
図8のカプラン・マイヤ生存率曲線の0日目は、18日目に行われた手術の日である。少数のマウスは、不完全な腫瘍の除去のため、腫瘍の再発を示した。これらのマウスは、QQ-SONタンパク質又はQQ-PBSにより腫瘍内注射で治療し、その生存を同様に比較した(点線の生存率曲線)。腫瘍の再発のないマウスについては、その生存率曲線を実線で示す。250日間生存実験全体を腫瘍の再発無く生存したマウスは、腫瘍が治癒したマウスと考えられる。腫瘍の治癒は、治療マウスの個体群の61％で達成された。
これにより、組織内で様々な非癌細胞へ分化する過渡的piPSCを生成する、腫瘍内部の癌細胞のQQ-SON誘導原位置細胞リプログラミングが実証された。分化した非癌細胞の種類は、特定の組織環境に依存する。QQ-SON誘導原位置細胞リプログラミングと組織環境誘導性分化との間の相互作用は、腫瘍内部の過渡的piPSCの発生と誘導性分化とを正確に調節し、腫瘍及び奇形腫形成を防止する。この安全なタンパク質誘導原位置細胞リプログラミング手法により、幹細胞が原位置で生成され、その後、組織環境により誘導された正常細胞へ分化して、罹患細胞に置き換わり、多数の疾患及び損傷を治療する。
配列
ヒト SRY (sex determining region Y)-box 2 (SOX2) (NM_003106) 配列番号1 (タンパク質)及び配列番号65 (DNA)
MYNMMETELKPPGPQQTSGGGGGNSTAAAAGGNQKNSPDRVKRPMNAFMVWSRGQRRKMAQENPKMHNSEISKRLGAEWKLLSETEKRPFIDEAKRLRALHMKEHPDYKYRPRRKTKTLMKKDKYTLPGGLLAPGGNSMASGVGVGAGLGAGVNQRMDSYAHMNGWSNGSYSMMQDQLGYPQHPGLNAHGAAQMQPMHRYDVSALQYNSMTSSQTYMNGSPTYSMSYSQQGTPGMALGSMGSVVKSEASSSPPVVTSSSHSRAPCQAGDLRDMISMYLPGAEVPEPAAPSRLHMSQHYQSGPVPGTAINGTLPLSHM (配列番号1)
atgtacaacatgatggagacggagctgaagccgccgggcccgcagcaaacttcggggggcggcggcggcaactccaccgcggcggcggccggcggcaaccagaaaaacagcccggaccgcgtcaagcggcccatgaatgccttcatggtgtggtcccgcgggcagcggcgcaagatggcccaggagaaccccaagatgcacaactcggagatcagcaagcgcctgggcgccgagtggaaacttttgtcggagacggagaagcggccgttcatcgacgaggctaagcggctgcgagcgctgcacatgaaggagcacccggattataaataccggccccggcggaaaaccaagacgctcatgaagaaggataagtacacgctgcccggcgggctgctggcccccggcggcaatagcatggcgagcggggtcggggtgggcgccggcctgggcgcgggcgtgaaccagcgcatggacagttacgcgcacatgaacggctggagcaacggcagctacagcatgatgcaggaccagctgggctacccgcagcacccgggcctcaatgcgcacggcgcagcgcagatgcagcccatgcaccgctacgacgtgagcgccctgcagtacaactccatgaccagctcgcagacctacatgaacggctcgcccacctacagcatgtcctactcgcagcagggcacccctggcatggctcttggctccatgggttcggtggtcaagtccgaggccagctccagcccccctgtggttacctcttcctcccactccagggcgccctgccaggccggggacctccgggacatgatcagcatgtatctccccggcgccgaggtgccggaacccgccgcccccagcagacttcacatgtcccagcactaccagagcggcccggtgcccggcacggccattaacggcacactgcccctctcacacatgtga (配列番号65)
ヒト POU class 5 homeobox 1 (POU5F1) あるいは Oct4 (NM_002701) 配列番号2 (タンパク質)及び配列番号66 (DNA)
MAGHLASDFAFSPPPGGGGDGPGGPEPGWVDPRTWLSFQGPPGGPGIGPGVGPGSEVWGIPPCPPPYEFCGGMAYCGPQVGVGLVPQGGLETSQPEGEAGVGVESNSDGASPEPCTVTPGAVKLEKEKLEQNPEESQDIKALQKELEQFAKLLKQKRITLGYTQADVGLTLGVLFGKVFSQTTICRFEALQLSFKNMCKLRPLLQKWVEEADNNENLQEICKAETLVQARKRKRTSIENRVRGNLENLFLQCPKPTLQQISHIAQQLGLEKDVVRVWFCNRRQKGKRSSSDYAQREDFEAAGSPFSGGPVSFPLAPGPHFGTPGYGSPHFTALYSSVPFPEGEAFPPVSVTTLGSPMHSN (配列番号2)
atggcgggacacctggcttcggatttcgccttctcgccccctccaggtggtggaggtgatgggccaggggggccggagccgggctgggttgatcctcggacctggctaagcttccaaggccctcctggagggccaggaatcgggccgggggttgggccaggctctgaggtgtgggggattcccccatgccccccgccgtatgagttctgtggggggatggcgtactgtgggccccaggttggagtggggctagtgccccaaggcggcttggagacctctcagcctgagggcgaagcaggagtcggggtggagagcaactccgatggggcctccccggagccctgcaccgtcacccctggtgccgtgaagctggagaaggagaagctggagcaaaacccggaggagtcccaggacatcaaagctctgcagaaagaactcgagcaatttgccaagctcctgaagcagaagaggatcaccctgggatatacacaggccgatgtggggctcaccctgggggttctatttgggaaggtattcagccaaacgaccatctgccgctttgaggctctgcagcttagcttcaagaacatgtgtaagctgcggcccttgctgcagaagtgggtggaggaagctgacaacaatgaaaatcttcaggagatatgcaaagcagaaaccctcgtgcaggcccgaaagagaaagcgaaccagtatcgagaaccgagtgagaggcaacctggagaatttgttcctgcagtgcccgaaacccacactgcagcagatcagccacatcgcccagcagcttgggctcgagaaggatgtggtccgagtgtggttctgtaaccggcgccagaagggcaagcgatcaagcagcgactatgcacaacgagaggattttgaggctgctgggtctcctttctcagggggaccagtgtcctttcctctggccccagggccccattttggtaccccaggctatgggagccctcacttcactgcactgtactcctcggtccctttccctgagggggaagcctttccccctgtctccgtcaccactctgggctctcccatgcattcaaactga (配列番号66)
ヒト Nanog homeobox (NANOG) (NM_024865) 配列番号3 (タンパク質)及び配列番号67 (DNA)
MSVDPACPQSLPCFEASDCKESSPMPVICGPEENYPSLQMSSAEMPHTETVSPLPSSMDLLIQDSPDSSTSPKGKQPTSAEKSVAKKEDKVPVKKQKTRTVFSSTQLCVLNDRFQRQKYLSLQQMQELSNILNLSYKQVKTWFQNQRMKSKRWQKNNWPKNSNGVTQKASAPTYPSLYSSYHQGCLVNPTGNLPMWSNQTWNNSTWSNQTQNIQSWSNHSWNTQTWCTQSWNNQAWNSPFYNCGEESLQSCMQFQPNSPASDLEAALEAAGEGLNVIQQTTRYFSTPQTMDLFLNYSMNMQPEDV (配列番号3)
atgagtgtggatccagcttgtccccaaagcttgccttgctttgaagcatccgactgtaaagaatcttcacctatgcctgtgatttgtgggcctgaagaaaactatccatccttgcaaatgtcttctgctgagatgcctcacacggagactgtctctcctcttccttcctccatggatctgcttattcaggacagccctgattcttccaccagtcccaaaggcaaacaacccacttctgcagagaagagtgtcgcaaaaaaggaagacaaggtcccggtcaagaaacagaagaccagaactgtgttctcttccacccagctgtgtgtactcaatgatagatttcagagacagaaatacctcagcctccagcagatgcaagaactctccaacatcctgaacctcagctacaaacaggtgaagacctggttccagaaccagagaatgaaatctaagaggtggcagaaaaacaactggccgaagaatagcaatggtgtgacgcagaaggcctcagcacctacctaccccagcctttactcttcctaccaccagggatgcctggtgaacccgactgggaaccttccaatgtggagcaaccagacctggaacaattcaacctggagcaaccagacccagaacatccagtcctggagcaaccactcctggaacactcagacctggtgcacccaatcctggaacaatcaggcctggaacagtcccttctataactgtggagaggaatctctgcagtcctgcatgcagttccagccaaattctcctgccagtgacttggaggctgccttggaagctgctggggaaggccttaatgtaatacagcagaccactaggtattttagtactccacaaaccatggatttattcctaaactactccatgaacatgcaacctgaagacgtgtga (配列番号67)
ヒト lin-28 homolog A (C. elegans) (LIN28A) (NM_024674) 配列番号4 (タンパク質)及び配列番号68 (DNA)
MGSVSNQQFAGGCAKAAEEAPEEAPEDAARAADEPQLLHGAGICKWFNVRMGFGFLSMTARAGVALDPPVDVFVHQSKLHMEGFRSLKEGEAVEFTFKKSAKGLESIRVTGPGGVFCIGSERRPKGKSMQKRRSKGDRCYNCGGLDHHAKECKLPPQPKKCHFCQSISHMVASCPLKAQQGPSAQGKPTYFREEEEEIHSPTLLPEAQN (配列番号4)
atgggctccgtgtccaaccagcagtttgcaggtggctgcgccaaggcggcagaagaggcgcccgaggaggcgccggaggacgcggcccgggcggcggacgagcctcagctgctgcacggtgcgggcatctgtaagtggttcaacgtgcgcatggggttcggcttcctgtccatgaccgcccgcgccggggtcgcgctcgaccccccagtggatgtctttgtgcaccagagtaagctgcacatggaagggttccggagcttgaaggagggtgaggcagtggagttcacctttaagaagtcagccaagggtctggaatccatccgtgtcaccggacctggtggagtattctgtattgggagtgagaggcggccaaaaggaaagagcatgcagaagcgcagatcaaaaggagacaggtgctacaactgtggaggtctagatcatcatgccaaggaatgcaagctgccaccccagcccaagaagtgccacttctgccagagcatcagccatatggtagcctcatgtccgctgaaggcccagcagggccctagtgcacagggaaagccaacctactttcgagaggaagaagaagaaatccacagccctaccctgctcccggaggcacagaattga (配列番号68)
ヒト Krueppel-like factor 4 (Klf4) (NP_004226) 配列番号5 (タンパク質)及び配列番号69 (DNA)
MRQPPGESDMAVSDALLPSFSTFASGPAGREKTLRQAGAPNNRWREELSHMKRLPPVLPGRPYDLAAATVATDLESGGAGAACGGSNLAPLPRRETEEFNDLLDLDFILSNSLTHPPESVAATVSSSASASSSSSPSSSGPASAPSTCSFTYPIRAGNDPGVAPGGTGGGLLYGRESAPPPTAPFNLADINDVSPSGGFVAELLRPELDPVYIPPQQPQPPGGGLMGKFVLKASLSAPGSEYGSPSVISVSKGSPDGSHPVVVAPYNGGPPRTCPKIKQEAVSSCTHLGAGPPLSNGHRPAAHDFPLGRQLPSRTTPTLGLEEVLSSRDCHPALPLPPGFHPHPGPNYPSFLPDQMQPQVPPLHYQELMPPGSCMPEEPKPKRGRRSWPRKRTATHTCDYAGCGKTYTKSSHLKAHLRTHTGEKPYHCDWDGCGWKFARSDELTRHYRKHTGHRPFQCQKCDRAFSRSDHLALHMKRHF (配列番号5)
atgaggcagccacctggcgagtctgacatggctgtcagcgacgcgctgctcccatctttctccacgttcgcgtctggcccggcgggaagggagaagacactgcgtcaagcaggtgccccgaataaccgctggcgggaggagctctcccacatgaagcgacttcccccagtgcttcccggccgcccctatgacctggcggcggcgaccgtggccacagacctggagagcggcggagccggtgcggcttgcggcggtagcaacctggcgcccctacctcggagagagaccgaggagttcaacgatctcctggacctggactttattctctccaattcgctgacccatcctccggagtcagtggccgccaccgtgtcctcgtcagcgtcagcctcctcttcgtcgtcgccgtcgagcagcggccctgccagcgcgccctccacctgcagcttcacctatccgatccgggccgggaacgacccgggcgtggcgccgggcggcacgggcggaggcctcctctatggcagggagtccgctccccctccgacggctcccttcaacctggcggacatcaacgacgtgagcccctcgggcggcttcgtggccgagctcctgcggccagaattggacccggtgtacattccgccgcagcagccgcagccgccaggtggcgggctgatgggcaagttcgtgctgaaggcgtcgctgagcgcccctggcagcgagtacggcagcccgtcggtcatcagcgtcagcaaaggcagccctgacggcagccacccggtggtggtggcgccctacaacggcgggccgccgcgcacgtgccccaagatcaagcaggaggcggtctcttcgtgcacccacttgggcgctggaccccctctcagcaatggccaccggccggctgcacacgacttccccctggggcggcagctccccagcaggactaccccgaccctgggtcttgaggaagtgctgagcagcagggactgtcaccctgccctgccgcttcctcccggcttccatccccacccggggcccaattacccatccttcctgcccgatcagatgcagccgcaagtcccgccgctccattaccaagagctcatgccacccggttcctgcatgccagaggagcccaagccaaagaggggaagacgatcgtggccccggaaaaggaccgccacccacacttgtgattacgcgggctgcggcaaaacctacacaaagagttcccatctcaaggcacacctgcgaacccacacaggtgagaaaccttaccactgtgactgggacggctgtggatggaaattcgcccgctcagatgaactgaccaggcactaccgtaaacacacggggcaccgcccgttccagtgccaaaaatgcgaccgagcattttccaggtcggaccacctcgccttacacatgaagaggcatttttaa (配列番号69)
ヒト c-MYC (NP_002458) 配列番号6 (タンパク質)及び配列番号70 (DNA)
MDFFRVVENQQPPATMPLNVSFTNRNYDLDYDSVQPYFYCDEEENFYQQQQQSELQPPAPSEDIWKKFELLPTPPLSPSRRSGLCSPSYVAVTPFSLRGDNDGGGGSFSTADQLEMVTELLGGDMVNQSFICDPDDETFIKNIIIQDCMWSGFSAAAKLVSEKLASYQAARKDSGSPNPARGHSVCSTSSLYLQDLSAAASECIDPSVVFPYPLNDSSSPKSCASQDSSAFSPSSDSLLSSTESSPQGSPEPLVLHEETPPTTSSDSEEEQEDEEEIDVVSVEKRQAPGKRSESGSPSAGGHSKPPHSPLVLKRCHVSTHQHNYAAPPSTRKDYPAAKRVKLDSVRVLRQISNNRKCTSPRSSDTEENVKRRTHNVLERQRRNELKRSFFALRDQIPELENNEKAPKVVILKKATAYILSVQAEEQKLISEEDLLRKRREQLKHKLEQLRNSCA (配列番号6)
atggatttttttcgggtagtggaaaaccagcagcctcccgcgacgatgcccctcaacgttagcttcaccaacaggaactatgacctcgactacgactcggtgcagccgtatttctactgcgacgaggaggagaacttctaccagcagcagcagcagagcgagctgcagcccccggcgcccagcgaggatatctggaagaaattcgagctgctgcccaccccgcccctgtcccctagccgccgctccgggctctgctcgccctcctacgttgcggtcacacccttctcccttcggggagacaacgacggcggtggcgggagcttctccacggccgaccagctggagatggtgaccgagctgctgggaggagacatggtgaaccagagtttcatctgcgacccggacgacgagaccttcatcaaaaacatcatcatccaggactgtatgtggagcggcttctcggccgccgccaagctcgtctcagagaagctggcctcctaccaggctgcgcgcaaagacagcggcagcccgaaccccgcccgcggccacagcgtctgctccacctccagcttgtacctgcaggatctgagcgccgccgcctcagagtgcatcgacccctcggtggtcttcccctaccctctcaacgacagcagctcgcccaagtcctgcgcctcgcaagactccagcgccttctctccgtcctcggattctctgctctcctcgacggagtcctccccgcagggcagccccgagcccctggtgctccatgaggagacaccgcccaccaccagcagcgactctgaggaggaacaagaagatgaggaagaaatcgatgttgtttctgtggaaaagaggcaggctcctggcaaaaggtcagagtctggatcaccttctgctggaggccacagcaaacctcctcacagcccactggtcctcaagaggtgccacgtctccacacatcagcacaactacgcagcgcctccctccactcggaaggactatcctgctgccaagagggtcaagttggacagtgtcagagtcctgagacagatcagcaacaaccgaaaatgcaccagccccaggtcctcggacaccgaggagaatgtcaagaggcgaacacacaacgtcttggagcgccagaggaggaacgagctaaaacggagcttttttgccctgcgtgaccagatcccggagttggaaaacaatgaaaaggcccccaaggtagttatccttaaaaaagccacagcatacatcctgtccgtccaagcagaggagcaaaagctcatttctgaagaggacttgttgcggaaacgacgagaacagttgaaacacaaacttgaacagctacggaactcttgtgcgtaa (配列番号70
ヒト GATA binding protein 4 (GATA4) (NM_002052) 配列番号7 (タンパク質)及び配列番号71 (DNA)
MYQSLAMAANHGPPPGAYEAGGPGAFMHGAGAASSPVYVPTPRVPSSVLGLSYLQGGGAGSASGGASGGSSGGAASGAGPGTQQGSPGWSQAGADGAAYTPPPVSPRFSFPGTTGSLAAAAAAAAAREAAAYSSGGGAAGAGLAGREQYGRAGFAGSYSSPYPAYMADVGASWAAAAAASAGPFDSPVLHSLPGRANPAARHPNLDMFDDFSEGRECVNCGAMSTPLWRRDGTGHYLCNACGLYHKMNGINRPLIKPQRRLSASRRVGLSCANCQTTTTTLWRRNAEGEPVCNACGLYMKLHGVPRPLAMRKEGIQTRKRKPKNLNKSKTPAAPSGSESLPPASGASSNSSNATTSSSEEMRPIKTEPGLSSHYGHSSSVSQTFSVSAMSGHGPSIHPVLSALKLSPQGYASPVSQSPQTSSKQDSWNSLVLADSHGDIITA (配列番号7)
atgtatcagagcttggccatggccgccaaccacgggccgccccccggtgcctacgaggcgggcggccccggcgccttcatgcacggcgcgggcgccgcgtcctcgccagtctacgtgcccacaccgcgggtgccctcctccgtgctgggcctgtcctacctccagggcggaggcgcgggctctgcgtccggaggcgcctcgggcggcagctccggtggggccgcgtctggtgcggggcccgggacccagcagggcagcccgggatggagccaggcgggagccgacggagccgcttacaccccgccgccggtgtcgccgcgcttctccttcccggggaccaccgggtccctggcggccgccgccgccgctgccgcggcccgggaagctgcggcctacagcagtggcggcggagcggcgggtgcgggcctggcgggccgcgagcagtacgggcgcgccggcttcgcgggctcctactccagcccctacccggcttacatggccgacgtgggcgcgtcctgggccgcagccgccgccgcctccgccggccccttcgacagcccggtcctgcacagcctgcccggccgggccaacccggccgcccgacaccccaatctcgatatgtttgacgacttctcagaaggcagagagtgtgtcaactgtggggctatgtccaccccgctctggaggcgagatgggacgggtcactatctgtgcaacgcctgcggcctctaccacaagatgaacggcatcaaccggccgctcatcaagcctcagcgccggctgtccgcctcccgccgagtgggcctctcctgtgccaactgccagaccaccaccaccacgctgtggcgccgcaatgcggagggcgagcctgtgtgcaatgcctgcggcctctacatgaagctccacggggtccccaggcctcttgcaatgcggaaagaggggatccaaaccagaaaacggaagcccaagaacctgaataaatctaagacaccagcagctccttcaggcagtgagagccttcctcccgccagcggtgcttccagcaactccagcaacgccaccaccagcagcagcgaggagatgcgtcccatcaagacggagcctggcctgtcatctcactacgggcacagcagctccgtgtcccagacgttctcagtcagtgcgatgtctggccatgggccctccatccaccctgtcctctcggccctgaagctctccccacaaggctatgcgtctcccgtcagccagtctccacagaccagctccaagcaggactcttggaacagcctggtcttggccgacagtcacggggacataatcactgcgtaa (配列番号71)
ヒト heart and neural crest derivatives expressed 2 (HAND2) (NM_021973) 配列番号8 (タンパク質)及び配列番号72 (DNA)
MSLVGGFPHHPVVHHEGYPFAAAAAAAAAAAASRCSHEENPYFHGWLIGHPEMSPPDYSMALSYSPEYASGAAGLDHSHYGGVPPGAGPPGLGGPRPVKRRGTANRKERRRTQSINSAFAELRECIPNVPADTKLSKIKTLRLATSYIAYLMDLLAKDDQNGEAEAFKAEIKKTDVKEEKRKKELNEILKSTVSSNDKKTKGRTGWPQHVWALELKQ (配列番号8)
atgagtctggtaggtggttttccccaccacccggtggtgcaccacgagggctacccgtttgccgccgccgccgccgcagctgccgccgccgccgccagccgctgcagccatgaggagaacccctacttccatggctggctcatcggccaccccgagatgtcgccccccgactacagcatggccctgtcctacagccccgagtatgccagcggcgccgccggcctggaccactcccattacgggggggtgccgccgggcgccgggcccccgggcctgggggggccgcgcccggtgaagcgccgaggcaccgccaaccgcaaggagcggcgcaggactcagagcatcaacagcgccttcgccgaactgcgcgagtgcatccccaacgtacccgccgacaccaaactctccaaaatcaagaccctgcgcctggccaccagctacatcgcctacctcatggacctgctggccaaggacgaccagaatggcgaggcggaggccttcaaggcagagatcaagaagaccgacgtgaaagaggagaagaggaagaaggagctgaacgaaatcttgaaaagcacagtgagcagcaacgacaagaaaaccaaaggccggacgggctggccgcagcacgtctgggccctggagctcaagcagtga (配列番号72)
ヒト myocyte enhancer factor 2C (MEF2C) (NM_001193350) 配列番号9 (タンパク質)及び配列番号73 (DNA)
MGRKKIQITRIMDERNRQVTFTKRKFGLMKKAYELSVLCDCEIALIIFNSTNKLFQYASTDMDKVLLKYTEYNEPHESRTNSDIVETLRKKGLNGCDSPDPDADDSVGHSPESEDKYRKINEDIDLMISRQRLCAVPPPNFEMPVSIPVSSHNSLVYSNPVSSLGNPNLLPLAHPSLQRNSMSPGVTHRPPSAGNTGGLMGGDLTSGAGTSAGNGYGNPRNSPGLLVSPGNLNKNMQAKSPPPMNLGMNNRKPDLRVLIPPGSKNTMPSVSEDVDLLLNQRINNSQSAQSLATPVVSVATPTLPGQGMGGYPSAISTTYGTEYSLSSADLSSLSGFNTASALHLGSVTGWQQQHLHNMPPSALSQLGACTSTHLSQSSNLSLPSTQSLNIKSEPVSPPRDRTTTPSRYPQHTRHEAGRSPVDSLSSCSSSYDGSDREDHRNEFHSPIGLTRPSPDERESPSVKRMRLSEGWAT (配列番号9)
atggggagaaaaaagattcagattacgaggattatggatgaacgtaacagacaggtgacatttacaaagaggaaatttgggttgatgaagaaggcttatgagctgagcgtgctgtgtgactgtgagattgcgctgatcatcttcaacagcaccaacaagctgttccagtatgccagcaccgacatggacaaagtgcttctcaagtacacggagtacaacgagccgcatgagagccggacaaactcagacatcgtggagacgttgagaaagaagggccttaatggctgtgacagcccagaccccgatgcggacgattccgtaggtcacagccctgagtctgaggacaagtacaggaaaattaacgaagatattgatctaatgatcagcaggcaaagattgtgtgctgttccacctcccaacttcgagatgccagtctccatcccagtgtccagccacaacagtttggtgtacagcaaccctgtcagctcactgggaaaccccaacctattgccactggctcacccttctctgcagaggaatagtatgtctcctggtgtaacacatcgacctccaagtgcaggtaacacaggtggtctgatgggtggagacctcacgtctggtgcaggcaccagtgcagggaacgggtatggcaatccccgaaactcaccaggtctgctggtctcacctggtaacttgaacaagaatatgcaagcaaaatctcctcccccaatgaatttaggaatgaataaccgtaaaccagatctccgagttcttattccaccaggcagcaagaatacgatgccatcagtgtctgaggatgtcgacctgcttttgaatcaaaggataaataactcccagtcggctcagtcattggctaccccagtggtttccgtagcaactcctactttaccaggacaaggaatgggaggatatccatcagccatttcaacaacatatggtaccgagtactctctgagtagtgcagacctgtcatctctgtctgggtttaacaccgccagcgctcttcaccttggttcagtaactggctggcaacagcaacacctacataacatgccaccatctgccctcagtcagttgggagcttgcactagcactcatttatctcagagttcaaatctctccctgccttctactcaaagcctcaacatcaagtcagaacctgtttctcctcctagagaccgtaccaccaccccttcgagatacccacaacacacgcgccacgaggcggggagatctcctgttgacagcttgagcagctgtagcagttcgtacgacgggagcgaccgagaggatcaccggaacgaattccactcccccattggactcaccagaccttcgccggacgaaagggaaagtccctcagtcaagcgcatgcgactttctgaaggatgggcaacatga (配列番号73)
ヒト transcription factor TBX5 (U80987) 配列番号10 (タンパク質)及び配列番号74 (DNA)
MADADEGFGLAHTPLEPDAKDLPCDSKPESALGAPSKSPSSPQAAFTQQGMEGIKVFLHERELWLKFHEVGTEMIITKAGRRMFPSYKVKVTGLNPKTKYILLMDIVPADDHRYKFADNKWSVTGKAEPAMPGRLYVHPDSPATGAHWMRQLVSFQKLKLTNNHLDPFGHIILNSMHKYQPRLHIVKADENNGFGSKNTAFCTHVFPETAFIAVTSYQNHKITQLKIENNPFAKGFRGSDDMELHRMSRMQSKEYPVVPRSTVRQKVASNHSPFSSESRALSTSSNLGSQYQCENGVSGPSQDLLPPPNPYPLPQEHSQIYHCTKRKGECDHPWSICFLSYLFLSLGWG (配列番号10)
atggccgacgcagacgagggctttggcctggcgcacacgcctctggagcctgacgcaaaagacctgccctgcgattcgaaacccgagagcgcgctcggggcccccagcaagtccccgtcgtccccgcaggccgccttcacccagcagggcatggagggaatcaaagtgtttctccatgaaagagaactgtggctaaaattccacgaagtgggcacggaaatgatcataaccaaggctggaaggcggatgtttcccagttacaaagtgaaggtgacgggccttaatcccaaaacgaagtacattcttctcatggacattgtacctgccgacgatcacagatacaaattcgcagataataaatggtctgtgacgggcaaagctgagcccgccatgcctggccgcctgtacgtgcacccagactcccccgccaccggggcgcattggatgaggcagctcgtctccttccagaaactcaagctcaccaacaaccacctggacccatttgggcatattattctaaattccatgcacaaataccagcctagattacacatcgtgaaagcggatgaaaataatggatttggctcaaaaaatacagcgttctgcactcacgtctttcctgagactgcgtttatagcagtgacttcctaccagaaccacaagatcacgcaattaaagattgagaataatccctttgccaaaggatttcggggcagtgatgacatggagctgcacagaatgtcaagaatgcaaagtaaagaatatcccgtggtccccaggagcaccgtgaggcaaaaagtggcctccaaccacagtcctttcagcagcgagtctcgagctctctccacctcatccaatttggggtcccaataccagtgtgagaatggtgtttccggcccctcccaggacctcctgcctccacccaacccatacccactgccccaggagcatagccaaatttaccattgtaccaagaggaaaggtgagtgtgatcacccctggtcaatttgctttctttcttaccttttcctttccttgggttgggggtga (配列番号74)
ヒト neurogenin 3 (NEUROG3) (NM_020999.3) 配列番号11 (タンパク質)及び配列番号75 (DNA)
MTPQPSGAPTVQVTRETERSFPRASEDEVTCPTSAPPSPTRTRGNCAEAEEGGCRGAPRKLRARRGGRSRPKSELALSKQRRSRRKKANDRERNRMHNLNSALDALRGVLPTFPDDAKLTKIETLRFAHNYIWALTQTLRIADHSLYALEPPAPHCGELGSPGGSPGDWGSLYSPVSQAGSLSPAASLEERPGLLGATFSACLSPGSLAFSDFL (配列番号11)
atgacgcctcaaccctcgggtgcgcccactgtccaagtgacccgtgagacggagcggtccttccccagagcctcggaagacgaagtgacctgccccacgtccgccccgcccagccccactcgcacacgggggaactgcgcagaggcggaagagggaggctgccgaggggccccgaggaagctccgggcacggcgcgggggacgcagccggcctaagagcgagttggcactgagcaagcagcgacggagtcggcgaaagaaggccaacgaccgcgagcgcaatcgaatgcacaacctcaactcggcactggacgccctgcgcggtgtcctgcccaccttcccagacgacgcgaagctcaccaagatcgagacgctgcgcttcgcccacaactacatctgggcgctgactcaaacgctgcgcatagcggaccacagcttgtacgcgctggagccgccggcgccgcactgcggggagctgggcagcccaggcggttcccccggggactgggggtccctctactccccagtctcccaggctggcagcctgagtcccgccgcgtcgctggaggagcgacccgggctgctgggggccaccttttccgcctgcttgagcccaggcagtctggctttctcagattttctgtga (配列番号75)
ヒト paired box 4 (PAX4) (NM_006193.2) 配列番号12 (タンパク質)及び配列番号76 (DNA)
MNQLGGLFVNGRPLPLDTRQQIVRLAVSGMRPCDISRILKVSNGCVSKILGRYYRTGVLEPKGIGGSKPRLATPPVVARIAQLKGECPALFAWEIQRQLCAEGLCTQDKTPSVSSINRVLRALQEDQGLPCTRLRSPAVLAPAVLTPHSGSETPRGTHPGTGHRNRTIFSPSQAEALEKEFQRGQYPDSVARGKLATATSLPEDTVRVWFSNRRAKWRRQEKLKWEMQLPGASQGLTVPRVAPGIISAQQSPGSVPTAALPALEPLGPSCYQLCWATAPERCLSDTPPKACLKPCWGHLPPQPNSLDSGLLCLPCPSSHCHLASLSGSQALLWPGCPLLYGLE (配列番号12)
atgaaccagcttggggggctctttgtgaatggccggcccctgcctctggatacccggcagcagattgtgcggctagcagtcagtggaatgcggccctgtgacatctcacggatccttaaggtatctaatggctgtgtgagcaagatcctagggcgttactaccgcacaggtgtcttggagccaaagggcattgggggaagcaagccacggctggctacaccccctgtggtggctcgaattgcccagctgaagggtgagtgtccagccctctttgcctgggaaatccaacgccagctttgtgctgaagggctttgcacccaggacaagactcccagtgtctcctccatcaaccgagtcctgcgggcattacaggaggaccagggactaccgtgcacacggctcaggtcaccagctgttttggctccagctgtcctcactccccatagtggctctgagactccccggggtacccacccagggaccggccaccggaatcggactatcttctccccaagccaagcagaggcactggagaaagagttccagcgtgggcagtatcctgattcagtggcccgtggaaagctggctactgccacctctctgcctgaggacacggtgagggtctggttttccaacagaagagccaaatggcgtcggcaagagaagctcaagtgggaaatgcagctgccaggtgcttcccaggggctgactgtaccaagggttgccccaggaatcatctctgcacagcagtcccctggcagtgtgcccacagcagccctgcctgccctggaaccactgggtccctcctgctatcagctgtgctgggcaacagcaccagaaaggtgtctgagtgacaccccacctaaagcctgtctcaagccctgctggggccacttgcccccacagccgaattccctggactcaggactgctttgccttccttgcccttcctcccactgtcacctggccagtcttagtggctctcaggccctgctctggcctggctgcccactactgtatggcttggaatga (配列番号76)
ヒト pancreatic and duodenal homeobox 1 (PDX1) (NM_000209.3) 配列番号13 (タンパク質)及び配列番号77 (DNA)
MNGEEQYYAATQLYKDPCAFQRGPAPEFSASPPACLYMGRQPPPPPPHPFPGALGALEQGSPPDISPYEVPPLADDPAVAHLHHHLPAQLALPHPPAGPFPEGAEPGVLEEPNRVQLPFPWMKSTKAHAWKGQWAGGAYAAEPEENKRTRTAYTRAQLLELEKEFLFNKYISRPRRVELAVMLNLTERHIKIWFQNRRMKWKKEEDKKRGGGTAVGGGGVAEPEQDCAVTSGEELLALPPPPPPGGAVPPAAPVAAREGRLPPGLSASPQPSSVAPRRPQEPR (配列番号13)
atgaacggcgaggagcagtactacgcggccacgcagctttacaaggacccatgcgcgttccagcgaggcccggcgccggagttcagcgccagcccccctgcgtgcctgtacatgggccgccagcccccgccgccgccgccgcacccgttccctggcgccctgggcgcgctggagcagggcagccccccggacatctccccgtacgaggtgccccccctcgccgacgaccccgcggtggcgcaccttcaccaccacctcccggctcagctcgcgctcccccacccgcccgccgggcccttcccggagggagccgagccgggcgtcctggaggagcccaaccgcgtccagctgcctttcccatggatgaagtctaccaaagctcacgcgtggaaaggccagtgggcaggcggcgcctacgctgcggagccggaggagaacaagcggacgcgcacggcctacacgcgcgcacagctgctagagctggagaaggagttcctattcaacaagtacatctcacggccgcgccgggtggagctggctgtcatgttgaacttgaccgagagacacatcaagatctggttccaaaaccgccgcatgaagtggaaaaaggaggaggacaagaagcgcggcggcgggacagctgtcgggggtggcggggtcgcggagcctgagcaggactgcgccgtgacctccggcgaggagcttctggcgctgccgccgccgccgccccccggaggtgctgtgccgcccgctgcccccgttgccgcccgagagggccgcctgccgcctggccttagcgcgtcgccacagccctccagcgtcgcgcctcggcggccgcaggaaccacgatga (配列番号77)
ヒト SOX9 protein (1-509) (Z46629.1) 配列番号14 (タンパク質)及び配列番号78 (DNA)
MNLLDPFMKMTDEQEKGLSGAPSPTMSEDSAGSPCPSGSGSDTENTRPQENTFPKGEPDLKKESEEDKFPVCIREAVSQVLKGYDWTLVPMPVRVNGSSKNKPHVKRPMNAFMVWAQAARRKLADQYPHLHNAELSKTLGKLWRLLNESEKRPFVEEAERLRVQHKKDHPDYKYQPRRRKSVKNGQAEAEEATEQTHISPNAIFKALQADSPHSSSGMSEVHSPGEHSGQSQGPPTPPTTPKTDVQPGKADLKREGRPLPEGGRQPPIDFRDVDIGELSSDVISNIETFDVNEFDQYLPPNGHPGVPATHGQVTYTGSYGISSTAATPASAGHVWMSKQQAPPPPPQQPPQAPPAPQAPPQPQAAPPQQPAAPPQQPQAHTLTTLSSEPGQSQRTHIKTEQLSPSHYSEQQQHSPQQIAYSPFNLPHYSPSYPPITRSQYDYTDHQNSSSYYSHAAGQGTGLYSTFTYMNPAQRPMYTPIADTSGVPSIPQTHSPQHWEQPVYTQLTRP (配列番号14)
atgaatctcctggaccccttcatgaagatgaccgacgagcaggagaagggcctgtccggcgcccccagccccaccatgtccgaggactccgcgggctcgccctgcccgtcgggctccggctcggacaccgagaacacgcggccccaggagaacacgttccccaagggcgagcccgatctgaagaaggagagcgaggaggacaagttccccgtgtgcatccgcgaggcggtcagccaggtgctcaaaggctacgactggacgctggtgcccatgccggtgcgcgtcaacggctccagcaagaacaagccgcacgtcaagcggcccatgaacgccttcatggtgtgggcgcaggcggcgcgcaggaagctcgcggaccagtacccgcacttgcacaacgccgagctcagcaagacgctgggcaagctctggagacttctgaacgagagcgagaagcggcccttcgtggaggaggcggagcggctgcgcgtgcagcacaagaaggaccacccggattacaagtaccagccgcggcggaggaagtcggtgaagaacgggcaggcggaggcagaggaggccacggagcagacgcacatctcccccaacgccatcttcaaggcgctgcaggccgactcgccacactcctcctccggcatgagcgaggtgcactcccccggcgagcactcggggcaatcccagggcccaccgaccccacccaccacccccaaaaccgacgtgcagccgggcaaggctgacctgaagcgagaggggcgccccttgccagaggggggcagacagccccctatcgacttccgcgacgtggacatcggcgagctgagcagcgacgtcatctccaacatcgagaccttcgatgtcaacgagtttgaccagtacctgccgcccaacggccacccgggggtgccggccacgcacggccaggtcacctacacgggcagctacggcatcagcagcaccgcggccaccccggcgagcgcgggccacgtgtggatgtccaagcagcaggcgccgccgccacccccgcagcagcccccacaggccccgccggccccgcaggcgcccccgcagccgcaggcggcgcccccacagcagccggcggcacccccgcagcagccacaggcgcacacgctgaccacgctgagcagcgagccgggccagtcccagcgaacgcacatcaagacggagcagctgagccccagccactacagcgagcagcagcagcactcgccccaacagatcgcctacagccccttcaacctcccacactacagcccctcctacccgcccatcacccgctcacagtacgactacaccgaccaccagaactccagctcctactacagccacgcggcaggccagggcaccggcctctactccaccttcacctacatgaaccccgctcagcgccccatgtacacccccatcgccgacacctctggggtcccttccatcccgcagacccacagcccccagcactgggaacaacccgtctacacacagctcactcgaccttga (配列番号78)
ヒト zinc finger protein SLUG (SLUG) gene (AF084243.1) 配列番号15 (タンパク質)及び配列番号79 (DNA)
MPRSFLVKKHFNASKKPNYSELDTHTVIISPYLYESYSMPVIPQPEILSSGAYSPITVWTTAAPFHAQLPNGLSPLSGYSSSLGRVSPPPPSDTSSKDHSGSESPISDEEERLQSKLSDPHAIEAEKFQCNLCNKTYSTFSGLAKHKQLHCDAQSRKSFSCKYCDKEYVSLGALKMHIRTHTLPCVCKICGKAFSRPWLLQGHIRTHTGEKPFSCPHCNRAFADRSNLRAHLQTHSDVKKYQCKNCSKTFSRMSLLHKHEESGCCVAH (配列番号15)
atgccgcgctccttcctggtcaagaagcatttcaacgcctccaaaaagccaaactacagcgaactggacacacatacagtgattatttccccgtatctctatgagagttactccatgcctgtcataccacaaccagagatcctcagctcaggagcatacagccccatcactgtgtggactaccgctgctccattccacgcccagctacccaatggcctctctcctctttccggatactcctcatctttggggcgagtgagtccccctcctccatctgacacctcctccaaggaccacagtggctcagaaagccccattagtgatgaagaggaaagactacagtccaagctttcagacccccatgccattgaagctgaaaagtttcagtgcaatttatgcaataagacctattcaactttttctgggctggccaaacataagcagctgcactgcgatgcccagtctagaaaatctttcagctgtaaatactgtgacaaggaatatgtgagcctgggcgccctgaagatgcatattcggacccacacattaccttgtgtttgcaagatctgcggcaaggcgttttccagaccctggttgcttcaaggacacattagaactcacacgggggagaagcctttttcttgccctcactgcaacagagcatttgcagacaggtcaaatctgagggctcatctgcagacccattctgatgtaaagaaataccagtgcaaaaactgctccaaaaccttctccagaatgtctctcctgcacaaacatgaggaatctggctgctgtgtagcacactga (配列番号79)
ヒト v-maf avian musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A (MafA) (NM_201589.3) 配列番号16 (タンパク質)及び配列番号80 (DNA)
MAAELAMGAELPSSPLAIEYVNDFDLMKFEVKKEPPEAERFCHRLPPGSLSSTPLSTPCSSVPSSPSFCAPSPGTGGGGGAGGGGGSSQAGGAPGPPSGGPGAVGGTSGKPALEDLYWMSGYQHHLNPEALNLTPEDAVEALIGSGHHGAHHGAHHPAAAAAYEAFRGPGFAGGGGADDMGAGHHHGAHHAAHHHHAAHHHHHHHHHHGGAGHGGGAGHHVRLEERFSDDQLVSMSVRELNRQLRGFSKEEVIRLKQKRRTLKNRGYAQSCRFKRVQQRHILESEKCQLQSQVEQLKLEVGRLAKERDLYKEKYEKLAGRGGPGSAGGAGFPREPSPPQAGPGGAKGTADFFL (配列番号16)
atggccgcggagctggcgatgggcgccgagctgcccagcagcccgctggccatcgagtacgtcaacgacttcgacctgatgaagttcgaggtgaagaaggagcctcccgaggccgagcgcttctgccaccgcctgccgccaggctcgctgtcctcgacgccgctcagcacgccctgctcctccgtgccctcctcgcccagcttctgcgcgcccagcccgggcaccggcggcggcggcggcgcggggggcggcggcggctcgtctcaggccgggggcgcccccgggccgccgagcgggggccccggcgccgtcgggggcacctcggggaagccggcgctggaggatctgtactggatgagcggctaccagcatcacctcaaccccgaggcgctcaacctgacgcccgaggacgcggtggaggcgctcatcggcagcggccaccacggcgcgcaccacggcgcgcaccacccggcggccgccgcagcctacgaggctttccgcggcccgggcttcgcgggcggcggcggagcggacgacatgggcgccggccaccaccacggcgcgcaccacgccgcccaccatcaccacgccgcccaccaccaccaccaccaccaccaccaccatggcggcgcgggacacggcggtggcgcgggccaccacgtgcgcctggaggagcgcttctccgacgaccagctggtgtccatgtcggtgcgcgagctgaaccggcagctccgcggcttcagcaaggaggaggtcatccggctcaagcagaagcggcgcacgctcaagaaccgcggctacgcgcagtcctgccgcttcaagcgggtgcagcagcggcacattctggagagcgagaagtgccaactccagagccaggtggagcagctgaagctggaggtggggcgcctggccaaagagcgggacctgtacaaggagaaatacgagaagctggcgggccggggcggccccgggagcgcgggcggggccggtttcccgcgggagccttcgccgccgcaggccggtcccggcggggccaagggcacggccgacttcttcctgtag (配列番号80)
ヒト neuronal differentiation 1 (NEUROD1)(NM_002500.4) 配列番号17 (タンパク質)及び配列番号81 (DNA)
MTKSYSESGLMGEPQPQGPPSWTDECLSSQDEEHEADKKEDDLEAMNAEEDSLRNGGEEEDEDEDLEEEEEEEEEDDDQKPKRRGPKKKKMTKARLERFKLRRMKANARERNRMHGLNAALDNLRKVVPCYSKTQKLSKIETLRLAKNYIWALSEILRSGKSPDLVSFVQTLCKGLSQPTTNLVAGCLQLNPRTFLPEQNQDMPPHLPTASASFPVHPYSYQSPGLPSPPYGTMDSSHVFHVKPPPHAYSAALEPFFESPLTDCTSPSFDGPLSPPLSINGNFSFKHEPSAEFEKNYAFTMHYPAATLAGAQSHGSIFSGTAAPRCEIPIDNIMSFDSHSHHERVMSAQLNAIFHD (配列番号17)
atgaccaaatcgtacagcgagagtgggctgatgggcgagcctcagccccaaggtcctccaagctggacagacgagtgtctcagttctcaggacgaggagcacgaggcagacaagaaggaggacgacctcgaagccatgaacgcagaggaggactcactgaggaacgggggagaggaggaggacgaagatgaggacctggaagaggaggaagaagaggaagaggaggatgacgatcaaaagcccaagagacgcggccccaaaaagaagaagatgactaaggctcgcctggagcgttttaaattgagacgcatgaaggctaacgcccgggagcggaaccgcatgcacggactgaacgcggcgctagacaacctgcgcaaggtggtgccttgctattctaagacgcagaagctgtccaaaatcgagactctgcgcttggccaagaactacatctgggctctgtcggagatcctgcgctcaggcaaaagcccagacctggtctccttcgttcagacgctttgcaagggcttatcccaacccaccaccaacctggttgcgggctgcctgcaactcaatcctcggacttttctgcctgagcagaaccaggacatgcccccccacctgccgacggccagcgcttccttccctgtacacccctactcctaccagtcgcctgggctgcccagtccgccttacggtaccatggacagctcccatgtcttccacgttaagcctccgccgcacgcctacagcgcagcgctggagcccttctttgaaagccctctgactgattgcaccagcccttcctttgatggacccctcagcccgccgctcagcatcaatggcaacttctctttcaaacacgaaccgtccgccgagtttgagaaaaattatgcctttaccatgcactatcctgcagcgacactggcaggggcccaaagccacggatcaatcttctcaggcaccgctgcccctcgctgcgagatccccatagacaatattatgtccttcgatagccattcacatcatgagcgagtcatgagtgcccagctcaatgccatatttcatgattag (配列番号81)
ヒト myogenic factor 5 (MYF5) (NM_005593.2) 配列番号18 (タンパク質)及び配列番号82 (DNA)
MDVMDGCQFSPSEYFYDGSCIPSPEGEFGDEFVPRVAAFGAHKAELQGSDEDEHVRAPTGHHQAGHCLMWACKACKRKSTTMDRRKAATMRERRRLKKVNQAFETLKRCTTTNPNQRLPKVEILRNAIRYIESLQELLREQVENYYSLPGQSCSEPTSPTSNCSDGMPECNSPVWSRKSSTFDSIYCPDVSNVYATDKNSLSSLDCLSNIVDRITSSEQPGLPLQDLASLSPVASTDSQPATPGASSSRLIYHVL (配列番号18)
atggacgtgatggatggctgccagttctcaccttctgagtacttctacgacggctcctgcataccgtcccccgagggtgaatttggggacgagtttgtgccgcgagtggctgccttcggagcgcacaaagcagagctgcagggctcagatgaggacgagcacgtgcgagcgcctaccggccaccaccaggctggtcactgcctcatgtgggcctgcaaagcctgcaagaggaagtccaccaccatggatcggcggaaggcagccactatgcgcgagcggaggcgcctgaagaaggtcaaccaggctttcgaaaccctcaagaggtgtaccacgaccaaccccaaccagaggctgcccaaggtggagatcctcaggaatgccatccgctacatcgagagcctgcaggagttgctgagagagcaggtggagaactactatagcctgccgggacagagctgctcggagcccaccagccccacctccaactgctctgatggcatgcccgaatgtaacagtcctgtctggtccagaaagagcagtacttttgacagcatctactgtcctgatgtatcaaatgtatatgccacagataaaaactccttatccagcttggattgcttatccaacatagtggaccggatcacctcctcagagcaacctgggttgcctctccaggatctggcttctctctctccagttgccagcaccgattcacagcctgcaactccaggggcttctagttccaggcttatctatcatgtgctatga (配列番号82)
ヒト PR-domain-containing protein 16 (PRDM16)(AF294278.1) 配列番号19 (タンパク質)及び配列番号83 (DNA)
MRSKARARKLAKSDGDVVNNMYEPNRDLLASHSAEDEAEDSAMSPIPVGSPPPFPTSEDFTPKEGSPYEAPVYIPEDIPIPADFELRESSIPGAGLGVWAKRKMEAGERLGPCVVVPRAAAKETDFGWEQILTDVEVSPQEGCITKISEDLGSEKFCVDANQAGAGSWLKYIRVACSCDDQNLTMCQISEQVIYYKVIKDIEPGEELLVHVKEGVYPLGTVPPGLDEEPTFRCDECDELFQSKLDLRRHKKYTCGSVGAALYEGLAEELKPEGLGGGSGQAHECKDCERMFPNKYSLEQHMVIHTEEREYKCDQCPKAFNWKSNFIRHQMSHDSGKRFECENCVKVFTDPSNLQRHIRSQHVGARAHACPDCGKTFATSSGLKQHKHIHSTVKPFICEVCHKSYTQFSNLCRHKRMHADCRTQIKCKDCGQMFSTTSSLNKHRRFCEGKNHYTPGGIFAPGLPLTPSPMMDKAKPSPSLNHASLGFNEYFPYRPHPGSLPFSTAPPTFPALTPGFPGIFPPSLYPRPPLLPPTSLLKSPLNHTQDAKLPSPLGNPALPLVSAVSNSSQGTTAAAGPEEKFESRLEDSCVEKLKTRSSDMSDGSDFEDVNTTTGTDLDTTTGTGSDLDSDVDSDPDKDKGKGKSAEGQPKFGGGLAPPGAPNSVAEVPVFYSQHSFFPPPDEQLLTATGAAGDSIKAIASIAEKYFGPGFMGMQEKKLGSLPYHSAFPFQFLPNFPHSLYPFTDRALAHNLLVKAEPKSPRDALKVGGPSAECPFDLTTKPKDVKPILPMPKGPSAPASGEEQPLDLSIGSRARASQNGGGREPRKNHVYGERKLGAGEGLPQVCPARMPQQPPLHYAKPSPFFMDPIYRVEKRKVTDPVGALKEKYLRPSPLLFHPQMSAIETMTEKLESFAAMKADSGSSLQPLPHHPFNFRSPPPTLSDPILRKGKERYTCRYCGKIFPRSANLTRHLRTHTGEQPYRCKYCDRSFSISSNLQRHVRNIHNKEKPFKCHLCNRCFGQQTNLDRHLKKHEHENAPVSQHPGVLTNHLGTSASSPTSESDNHALLDEKEDSYFSEIRNFIANSEMNQASTRTEKRADMQIVDGSAQCPGLASEKQEDVEEEDDDDLEEDDEDSLAGKSQDDTVSPAPEPQAAYEDEEDEEPAASLAVGFDHTRRCAEDHEGGLLALEPMPTFGKGLDLRRAAEEAFEVKDVLNSTLDSEALKHTLCRQAKNQAYAMMLSLSEDTPLHTPSQGSLDAWLKVTGATSESGAFHPINHL (配列番号19)
atgcgatccaaggcgagggcgaggaagctagccaaaagtgacggtgacgttgtaaataatatgtatgagcccaaccgggacctgctggccagccacagcgcggaggacgaggccgaggacagtgccatgtcgcccatccccgtggggtcaccgccccccttccccaccagcgaggacttcacccccaaggagggctcgccgtacgaggcccctgtctacattcctgaagacattccgatcccagcagacttcgagctccgagagtcctccatcccaggggctggcctgggggtctgggccaagaggaagatggaagccggggagaggctgggcccctgcgtggtggtgccccgggcggcggcaaaggagacagacttcggatgggagcaaatactgacggacgtggaagtgtcgccccaggaaggctgcatcacaaagatctccgaagacctgggcagtgagaagttctgcgtggatgcaaatcaggcgggggctggcagctggctcaagtacatccgtgtggcgtgctcctgcgatgaccagaacctcaccatgtgtcagatcagtgagcaggtaatttactataaagtcattaaggacattgagccaggtgaggagctgctggtgcacgtgaaggaaggcgtctaccccctgggcacagtgccgcccggcctggacgaggagcccacgttccgctgtgacgagtgtgacgaactcttccagtccaagctggacctgcggcgccataagaagtacacgtgtggctcagtgggggctgcgctctacgagggcctggctgaggagctcaagcccgagggccttggcggtggcagcggccaagcccacgagtgcaaggactgcgagcggatgttccccaacaagtacagcctggagcagcacatggtcatccacacggaggagcgcgagtacaaatgcgaccagtgtcccaaggccttcaactggaagtccaacttcatccgccaccagatgtcccacgacagcggcaaacgcttcgaatgtgaaaactgcgtgaaggtgttcacggaccccagcaaccttcagcggcacatccgctcgcagcacgtgggcgctcgggcccacgcctgccccgactgcgggaagaccttcgccacgtcctccggcctcaagcagcacaagcatatccacagcacggtgaagcctttcatatgtgaggtctgccacaagtcctacacgcagttctccaacctgtgccggcacaagcggatgcacgccgactgccgcacgcagatcaagtgcaaggactgtggccagatgttcagcactacctcctccctcaacaagcaccggcgcttctgcgagggcaagaaccattacacgccgggcggcatctttgccccgggcctgcccttgacccccagccccatgatggacaaggcaaaaccctcccccagcctcaatcacgccagcctgggcttcaacgagtactttccctacaggccgcacccggggagcctgcccttctccacggcgcctcccacgttccccgcactcacccccggcttcccgggcatcttccctccatccttgtacccccggccgcctctgctacctcccacatcgctgctcaagagccccctgaaccacacccaggacgccaagctccccagtcccctggggaacccagccctgcccctggtctccgccgtcagcaacagcagccagggcacgacggcagctgcggggcccgaggagaagttcgagagccgcctggaggactcctgtgtggagaagctgaagaccaggagcagcgacatgtcggacggcagtgactttgaggacgtcaacaccaccacggggaccgacctggacacgaccacggggacgggctcggacctggacagcgacgtggacagcgaccctgacaaggacaagggcaagggcaagtccgccgagggccagcccaagtttgggggcggcttggcgcccccgggggccccgaacagcgtggccgaggtgcctgtcttctattcccagcactcattcttcccgccacccgacgagcagctgctgactgcaacgggcgccgccggggactccatcaaggccatcgcatccattgccgagaagtactttggccccggcttcatggggatgcaggagaagaagctgggctcgctcccctaccactcggcgttccccttccagttcctgcccaacttcccccactccctttaccccttcacggaccgagccctcgcccacaacttgctggtcaaggccgagccaaagtcaccccgggacgccctcaaggtgggcggccccagtgccgagtgcccctttgatctcaccaccaagcccaaagacgtgaagcccatcctgcccatgcccaagggcccctcggcccccgcatccggcgaggagcagccgctggacctgagcatcggcagccgggcccgtgccagccaaaacggcggcgggcgggagccccgcaagaaccacgtctatggggaacgcaagctgggcgccggcgaggggctgccccaggtgtgcccggcgcggatgccccagcagcccccgctccactacgccaagccctcgcccttcttcatggaccccatctacagggtagaaaagcggaaggtcacagaccccgtgggagccctgaaggagaagtacctgcggccgtccccgctgctcttccacccccagatgtcagccatagagaccatgacagagaagctggagagctttgcagccatgaaggcggactcgggcagctccctgcagcccctcccccaccaccccttcaacttccggtccccacccccaacgctctccgaccccatcctcaggaagggcaaggagcgatacacgtgcaggtactgtgggaagatcttccccagatcagccaatctcaccagacacctgaggacgcacactggggagcagccgtacaggtgtaagtactgcgaccgctccttcagcatctcttcgaacctccagcggcacgtccggaacatccacaacaaggagaagcctttcaagtgccacctgtgcaaccgctgcttcgggcagcagaccaacctggaccggcacctcaagaagcacgagcacgagaacgcaccagtgagccagcaccccggggtcctcacgaaccacctggggaccagcgcgtcctctcccacctcagagtcggacaaccacgcacttttagacgagaaagaagactcttatttctcggaaatcagaaactttattgccaatagtgagatgaaccaagcatcaacgcgaacagagaaacgggcggacatgcagatcgtggacggcagtgcccagtgtccaggcctagccagtgagaagcaggaggacgtggaggaggaggacgacgatgacctggaggaggacgatgaggacagcctggccgggaagtcgcaggatgacaccgtgtcccccgcacccgagccccaggccgcctacgaggatgaggaggatgaggagccagccgcctccctggccgtgggctttgaccacacccgaaggtgtgctgaggaccacgaaggcggtctgttagctttggagccgatgccgacttttgggaaggggctggacctccgcagagcagctgaggaagcatttgaagttaaagatgtgcttaattccaccttagattctgaggctttaaaacatacactgtgcaggcaggctaagaaccaggcatatgcaatgatgctgtccctttccgaagacactcctctccacaccccctcccagggttctctggacgcttggttgaaggtcactggagccacgtcggagtctggagcatttcaccccatcaaccacctctga (配列番号83)
ヒト paired box 6 (PAX6) (NM_001604.5) 配列番号20 (タンパク質)及び配列番号84 (DNA)
MQNSHSGVNQLGGVFVNGRPLPDSTRQKIVELAHSGARPCDISRILQTHADAKVQVLDNQNVSNGCVSKILGRYYETGSIRPRAIGGSKPRVATPEVVSKIAQYKRECPSIFAWEIRDRLLSEGVCTNDNIPSVSSINRVLRNLASEKQQMGADGMYDKLRMLNGQTGSWGTRPGWYPGTSVPGQPTQDGCQQQEGGGENTNSISSNGEDSDEAQMRLQLKRKLQRNRTSFTQEQIEALEKEFERTHYPDVFARERLAAKIDLPEARIQVWFSNRRAKWRREEKLRNQRRQASNTPSHIPISSSFSTSVYQPIPQPTTPVSSFTSGSMLGRTDTALTNTYSALPPMPSFTMANNLPMQPPVPSQTSSYSCMLPTSPSVNGRSYDTYTPPHMQTHMNSQPMGTSGTTSTGLISPGVSVPVQVPGSEPDMSQYWPRLQ (配列番号20)
atgcagaacagtcacagcggagtgaatcagctcggtggtgtctttgtcaacgggcggccactgccggactccacccggcagaagattgtagagctagctcacagcggggcccggccgtgcgacatttcccgaattctgcagacccatgcagatgcaaaagtccaagtgctggacaatcaaaacgtgtccaacggatgtgtgagtaaaattctgggcaggtattacgagactggctccatcagacccagggcaatcggtggtagtaaaccgagagtagcgactccagaagttgtaagcaaaatagcccagtataagcgggagtgcccgtccatctttgcttgggaaatccgagacagattactgtccgagggggtctgtaccaacgataacataccaagcgtgtcatcaataaacagagttcttcgcaacctggctagcgaaaagcaacagatgggcgcagacggcatgtatgataaactaaggatgttgaacgggcagaccggaagctggggcacccgccctggttggtatccggggacttcggtgccagggcaacctacgcaagatggctgccagcaacaggaaggagggggagagaataccaactccatcagttccaacggagaagattcagatgaggctcaaatgcgacttcagctgaagcggaagctgcaaagaaatagaacatcctttacccaagagcaaattgaggccctggagaaagagtttgagagaacccattatccagatgtgtttgcccgagaaagactagcagccaaaatagatctacctgaagcaagaatacaggtatggttttctaatcgaagggccaaatggagaagagaagaaaaactgaggaatcagagaagacaggccagcaacacacctagtcatattcctatcagcagtagtttcagcaccagtgtctaccaaccaattccacaacccaccacaccggtttcctccttcacatctggctccatgttgggccgaacagacacagccctcacaaacacctacagcgctctgccgcctatgcccagcttcaccatggcaaataacctgcctatgcaacccccagtccccagccagacctcctcatactcctgcatgctgcccaccagcccttcggtgaatgggcggagttatgatacctacacccccccacatatgcagacacacatgaacagtcagccaatgggcacctcgggcaccacttcaacaggactcatttcccctggtgtgtcagttccagttcaagttcccggaagtgaacctgatatgtctcaatactggccaagattacagtaa (配列番号84)
配列番号21: ヒト HNF1 homeobox A (HNF1A) (NM_000545.5) 配列番号21 (タンパク質)及び配列番号85 (DNA)
MVSKLSQLQTELLAALLESGLSKEALIQALGEPGPYLLAGEGPLDKGESCGGGRGELAELPNGLGETRGSEDETDDDGEDFTPPILKELENLSPEEAAHQKAVVETLLQEDPWRVAKMVKSYLQQHNIPQREVVDTTGLNQSHLSQHLNKGTPMKTQKRAALYTWYVRKQREVAQQFTHAGQGGLIEEPTGDELPTKKGRRNRFKWGPASQQILFQAYERQKNPSKEERETLVEECNRAECIQRGVSPSQAQGLGSNLVTEVRVYNWFANRRKEEAFRHKLAMDTYSGPPPGPGPGPALPAHSSPGLPPPALSPSKVHGVRYGQPATSETAEVPSSSGGPLVTVSTPLHQVSPTGLEPSHSLLSTEAKLVSAAGGPLPPVSTLTALHSLEQTSPGLNQQPQNLIMASLPGVMTIGPGEPASLGPTFTNTGASTLVIGLASTQAQSVPVINSMGSSLTTLQPVQFSQPLHPSYQQPLMPPVQSHVTQSPFMATMAQLQSPHALYSHKPEVAQYTHTGLLPQTMLITDTTNLSALASLTPTKQVFTSDTEASSESGLHTPASQATTLHVPSQDPAGIQHLQPAHRLSASPTVSSSSLVLYQSSDSSNGQSHLLPSNHSVIETFISTQMASSSQ (配列番号21)
atggtttctaaactgagccagctgcagacggagctcctggcggccctgctcgagtcagggctgagcaaagaggcactgatccaggcactgggtgagccggggccctacctcctggctggagaaggccccctggacaagggggagtcctgcggcggcggtcgaggggagctggctgagctgcccaatgggctgggggagactcggggctccgaggacgagacggacgacgatggggaagacttcacgccacccatcctcaaagagctggagaacctcagccctgaggaggcggcccaccagaaagccgtggtggagacccttctgcaggaggacccgtggcgtgtggcgaagatggtcaagtcctacctgcagcagcacaacatcccacagcgggaggtggtcgataccactggcctcaaccagtcccacctgtcccaacacctcaacaagggcactcccatgaagacgcagaagcgggccgccctgtacacctggtacgtccgcaagcagcgagaggtggcgcagcagttcacccatgcagggcagggagggctgattgaagagcccacaggtgatgagctaccaaccaagaaggggcggaggaaccgtttcaagtggggcccagcatcccagcagatcctgttccaggcctatgagaggcagaagaaccctagcaaggaggagcgagagacgctagtggaggagtgcaatagggcggaatgcatccagagaggggtgtccccatcacaggcacaggggctgggctccaacctcgtcacggaggtgcgtgtctacaactggtttgccaaccggcgcaaagaagaagccttccggcacaagctggccatggacacgtacagcgggccccccccagggccaggcccgggacctgcgctgcccgctcacagctcccctggcctgcctccacctgccctctcccccagtaaggtccacggtgtgcgctatggacagcctgcgaccagtgagactgcagaagtaccctcaagcagcggcggtcccttagtgacagtgtctacacccctccaccaagtgtcccccacgggcctggagcccagccacagcctgctgagtacagaagccaagctggtctcagcagctgggggccccctcccccctgtcagcaccctgacagcactgcacagcttggagcagacatccccaggcctcaaccagcagccccagaacctcatcatggcctcacttcctggggtcatgaccatcgggcctggtgagcctgcctccctgggtcctacgttcaccaacacaggtgcctccaccctggtcatcggcctggcctccacgcaggcacagagtgtgccggtcatcaacagcatgggcagcagcctgaccaccctgcagcccgtccagttctcccagccgctgcacccctcctaccagcagccgctcatgccacctgtgcagagccatgtgacccagagccccttcatggccaccatggctcagctgcagagcccccacgccctctacagccacaagcccgaggtggcccagtacacccacacgggcctgctcccgcagactatgctcatcaccgacaccaccaacctgagcgccctggccagcctcacgcccaccaagcaggtcttcacctcagacactgaggcctccagtgagtccgggcttcacacgccggcatctcaggccaccaccctccacgtccccagccaggaccctgccggcatccagcacctgcagccggcccaccggctcagcgccagccccacagtgtcctccagcagcctggtgctgtaccagagctcagactccagcaatggccagagccacctgctgccatccaaccacagcgtcatcgagaccttcatctccacccagatggcctcttcctcccagtaa (配列番号85)
ヒト forkhead box A3 (FOXA3) (NM_004497.2) 配列番号22 (タンパク質)及び配列番号86 (DNA)
MLGSVKMEAHDLAEWSYYPEAGEVYSPVTPVPTMAPLNSYMTLNPLSSPYPPGGLPASPLPSGPLAPPAPAAPLGPTFPGLGVSGGSSSSGYGAPGPGLVHGKEMPKGYRRPLAHAKPPYSYISLITMAIQQAPGKMLTLSEIYQWIMDLFPYYRENQQRWQNSIRHSLSFNDCFVKVARSPDKPGKGSYWALHPSSGNMFENGCYLRRQKRFKLEEKVKKGGSGAATTTRNGTGSAASTTTPAATVTSPPQPPPPAPEPEAQGGEDVGALDCGSPASSTPYFTGLELPGELKLDAPYNFNHPFSINNLMSEQTPAPPKLDVGFGGYGAEGGEPGVYYQGLYSRSLLNAS (配列番号22)
atgctgggctcagtgaagatggaggcccatgacctggccgagtggagctactacccggaggcgggcgaggtctactcgccggtgaccccagtgcccaccatggcccccctcaactcctacatgaccctgaatcctctaagctctccctatccccctggggggctccctgcctccccactgccctcaggacccctggcacccccagcacctgcagcccccctggggcccactttcccaggcctgggtgtcagcggtggcagcagcagctccgggtacggggccccgggtcctgggctggtgcacgggaaggagatgccgaaggggtatcggcggcccctggcacacgccaagccaccgtattcctatatctcactcatcaccatggccatccagcaggcgccgggcaagatgctgaccttgagtgaaatctaccagtggatcatggacctcttcccttactaccgggagaatcagcagcgctggcagaactccattcgccactcgctgtctttcaacgactgcttcgtcaaggtggcgcgttccccagacaagcctggcaagggctcctactgggccctacaccccagctcagggaacatgtttgagaatggctgctacctgcgccgccagaaacgcttcaagctggaggagaaggtgaaaaaagggggcagcggggctgccaccaccaccaggaacgggacagggtctgctgcctcgaccaccacccccgcggccacagtcacctccccgccccagcccccgcctccagcccctgagcctgaggcccagggcggggaagatgtgggggctctggactgtggctcacccgcttcctccacaccctatttcactggcctggagctcccaggggagctgaagctggacgcgccctacaacttcaaccaccctttctccatcaacaacctaatgtcagaacagacaccagcacctcccaaactggacgtggggtttgggggctacggggctgaaggtggggagcctggagtctactaccagggcctctattcccgctctttgcttaatgcatcctag (配列番号86)
ヒト forkhead box A1 (FOXA1) (NM_004496.3) 配列番号23 (タンパク質)及び配列番号87 (DNA)
MLGTVKMEGHETSDWNSYYADTQEAYSSVPVSNMNSGLGSMNSMNTYMTMNTMTTSGNMTPASFNMSYANPGLGAGLSPGAVAGMPGGSAGAMNSMTAAGVTAMGTALSPSGMGAMGAQQAASMNGLGPYAAAMNPCMSPMAYAPSNLGRSRAGGGGDAKTFKRSYPHAKPPYSYISLITMAIQQAPSKMLTLSEIYQWIMDLFPYYRQNQQRWQNSIRHSLSFNDCFVKVARSPDKPGKGSYWTLHPDSGNMFENGCYLRRQKRFKCEKQPGAGGGGGSGSGGSGAKGGPESRKDPSGASNPSADSPLHRGVHGKTGQLEGAPAPGPAASPQTLDHSGATATGGASELKTPASSTAPPISSGPGALASVPASHPAHGLAPHESQLHLKGDPHYSFNHPFSINNLMSSSEQQHKLDFKAYEQALQYSPYGSTLPASLPLGSASVTTRSPIEPSALEPAYYQGVYSRPVLNTS (配列番号23)
atgctgggctcagtgaagatggaggcccatgacctggccgagtggagctactacccggaggcgggcgaggtctactcgccggtgaccccagtgcccaccatggcccccctcaactcctacatgaccctgaatcctctaagctctccctatccccctggggggctccctgcctccccactgccctcaggacccctggcacccccagcacctgcagcccccctggggcccactttcccaggcctgggtgtcagcggtggcagcagcagctccgggtacggggccccgggtcctgggctggtgcacgggaaggagatgccgaaggggtatcggcggcccctggcacacgccaagccaccgtattcctatatctcactcatcaccatggccatccagcaggcgccgggcaagatgctgaccttgagtgaaatctaccagtggatcatggacctcttcccttactaccgggagaatcagcagcgctggcagaactccattcgccactcgctgtctttcaacgactgcttcgtcaaggtggcgcgttccccagacaagcctggcaagggctcctactgggccctacaccccagctcagggaacatgtttgagaatggctgctacctgcgccgccagaaacgcttcaagctggaggagaaggtgaaaaaagggggcagcggggctgccaccaccaccaggaacgggacagggtctgctgcctcgaccaccacccccgcggccacagtcacctccccgccccagcccccgcctccagcccctgagcctgaggcccagggcggggaagatgtgggggctctggactgtggctcacccgcttcctccacaccctatttcactggcctggagctcccaggggagctgaagctggacgcgccctacaacttcaaccaccctttctccatcaacaacctaatgtcagaacagacaccagcacctcccaaactggacgtggggtttgggggctacggggctgaaggtggggagcctggagtctactaccagggcctctattcccgctctttgcttaatgcatcctag(配列番号87)
ヒト forkhead box A2 (FOXA2) (NM_021784.4) 配列番号24 (タンパク質)及び配列番号88 (DNA)
MHSASSMLGAVKMEGHEPSDWSSYYAEPEGYSSVSNMNAGLGMNGMNTYMSMSAAAMGSGSGNMSAGSMNMSSYVGAGMSPSLAGMSPGAGAMAGMGGSAGAAGVAGMGPHLSPSLSPLGGQAAGAMGGLAPYANMNSMSPMYGQAGLSRARDPKTYRRSYTHAKPPYSYISLITMAIQQSPNKMLTLSEIYQWIMDLFPFYRQNQQRWQNSIRHSLSFNDCFLKVPRSPDKPGKGSFWTLHPDSGNMFENGCYLRRQKRFKCEKQLALKEAAGAAGSGKKAAAGAQASQAQLGEAAGPASETPAGTESPHSSASPCQEHKRGGLGELKGTPAAALSPPEPAPSPGQQQQAAAHLLGPPHHPGLPPEAHLKPEHHYAFNHPFSINNLMSSEQQHHHSHHHHQPHKMDLKAYEQVMHYPGYGSPMPGSLAMGPVTNKTGLDASPLAADTSYYQGVYSRPIMNSS (配列番号24)
atgcactcggcttccagtatgctgggagcggtgaagatggaagggcacgagccgtccgactggagcagctactatgcagagcccgagggctactcctccgtgagcaacatgaacgccggcctggggatgaacggcatgaacacgtacatgagcatgtcggcggccgccatgggcagcggctcgggcaacatgagcgcgggctccatgaacatgtcgtcgtacgtgggcgctggcatgagcccgtccctggcggggatgtcccccggcgcgggcgccatggcgggcatgggcggctcggccggggcggccggcgtggcgggcatggggccgcacttgagtcccagcctgagcccgctcggggggcaggcggccggggccatgggcggcctggccccctacgccaacatgaactccatgagccccatgtacgggcaggcgggcctgagccgcgcccgcgaccccaagacctacaggcgcagctacacgcacgcaaagccgccctactcgtacatctcgctcatcaccatggccatccagcagagccccaacaagatgctgacgctgagcgagatctaccagtggatcatggacctcttccccttctaccggcagaaccagcagcgctggcagaactccatccgccactcgctctccttcaacgactgtttcctgaaggtgccccgctcgcccgacaagcccggcaagggctccttctggaccctgcaccctgactcgggcaacatgttcgagaacggctgctacctgcgccgccagaagcgcttcaagtgcgagaagcagctggcgctgaaggaggccgcaggcgccgccggcagcggcaagaaggcggccgccggagcccaggcctcacaggctcaactcggggaggccgccgggccggcctccgagactccggcgggcaccgagtcgcctcactcgagcgcctccccgtgccaggagcacaagcgagggggcctgggagagctgaaggggacgccggctgcggcgctgagccccccagagccggcgccctctcccgggcagcagcagcaggccgcggcccacctgctgggcccgccccaccacccgggcctgccgcctgaggcccacctgaagccggaacaccactacgccttcaaccacccgttctccatcaacaacctcatgtcctcggagcagcagcaccaccacagccaccaccaccaccaaccccacaaaatggacctcaaggcctacgaacaggtgatgcactaccccggctacggttcccccatgcctggcagcttggccatgggcccggtcacgaacaaaacgggcctggacgcctcgcccctggccgcagatacctcctactaccagggggtgtactcccggcccattatgaactcctcttaa (配列番号88)
配列番号25: ヒト CCAAT/enhancer binding protein (C/EBP), alpha (CEBPA) (NM_001287435.1) 配列番号25 (タンパク質)及び配列番号89 (DNA)
MSSHLQSPPHAPSSAAFGFPRGAGPAQPPAPPAAPEPLGGICEHETSIDISAYIDPAAFNDEFLADLFQHSRQQEKAKAAVGPTGGGGGGDFDYPGAPAGPGGAVMPGGAHGPPPGYGCAAAGYLDGRLEPLYERVGAPALRPLVIKQEPREEDEAKQLALAGLFPYQPPPPPPPSHPHPHPPPAHLAAPHLQFQIAHCGQTTMHLQPGHPTPPPTPVPSPHPAPALGAAGLPGPGSALKGLGAAHPDLRASGGSGAGKAKKSVDKNSNEYRVRRERNNIAVRKSRDKAKQRNVETQQKVLELTSDNDRLRKRVEQLSRELDTLRGIFRQLPESSLVKAMGNCA (配列番号25)
atgagcagccacctgcagagccccccgcacgcgcccagcagcgccgccttcggctttccccggggcgcgggccccgcgcagcctcccgccccacctgccgccccggagccgctgggcggcatctgcgagcacgagacgtccatcgacatcagcgcctacatcgacccggccgccttcaacgacgagttcctggccgacctgttccagcacagccggcagcaggagaaggccaaggcggccgtgggccccacgggcggcggcggcggcggcgactttgactacccgggcgcgcccgcgggccccggcggcgccgtcatgcccgggggagcgcacgggcccccgcccggctacggctgcgcggccgccggctacctggacggcaggctggagcccctgtacgagcgcgtcggggcgccggcgctgcggccgctggtgatcaagcaggagccccgcgaggaggatgaagccaagcagctggcgctggccggcctcttcccttaccagccgccgccgccgccgccgccctcgcacccgcacccgcacccgccgcccgcgcacctggccgccccgcacctgcagttccagatcgcgcactgcggccagaccaccatgcacctgcagcccggtcaccccacgccgccgcccacgcccgtgcccagcccgcaccccgcgcccgcgctcggtgccgccggcctgccgggccctggcagcgcgctcaaggggctgggcgccgcgcaccccgacctccgcgcgagtggcggcagcggcgcgggcaaggccaagaagtcggtggacaagaacagcaacgagtaccgggtgcggcgcgagcgcaacaacatcgcggtgcgcaagagccgcgacaaggccaagcagcgcaacgtggagacgcagcagaaggtgctggagctgaccagtgacaatgaccgcctgcgcaagcgggtggaacagctgagccgcgaactggacacgctgcggggcatcttccgccagctgccagagagctccttggtcaaggccatgggcaactgcgcgtga (配列番号89)
ヒト Spi-1 proto-oncogene (SPI1) (PU.1) (NM_001080547.1) 配列番号26 (タンパク質)及び配列番号90 (DNA)
MLQACKMEGFPLVPPQPSEDLVPYDTDLYQRQTHEYYPYLSSDGESHSDHYWDFHPHHVHSEFESFAENNFTELQSVQPPQLQQLYRHMELEQMHVLDTPMVPPHPSLGHQVSYLPRMCLQYPSLSPAQPSSDEEEGERQSPPLEVSDGEADGLEPGPGLLPGETGSKKKIRLYQFLLDLLRSGDMKDSIWWVDKDKGTFQFSSKHKEALAHRWGIQKGNRKKMTYQKMARALRNYGKTGEVKKVKKKLTYQFSGEVLGRGGLAERRHPPH (配列番号26)
atgttacaggcgtgcaaaatggaagggtttcccctcgtcccccctcagccatcagaagacctggtgccctatgacacggatctataccaacgccaaacgcacgagtattacccctatctcagcagtgatggggagagccatagcgaccattactgggacttccacccccaccacgtgcacagcgagttcgagagcttcgccgagaacaacttcacggagctccagagcgtgcagcccccgcagctgcagcagctctaccgccacatggagctggagcagatgcacgtcctcgatacccccatggtgccaccccatcccagtcttggccaccaggtctcctacctgccccggatgtgcctccagtacccatccctgtccccagcccagcccagctcagatgaggaggagggcgagcggcagagccccccactggaggtgtctgacggcgaggcggatggcctggagcccgggcctgggctcctgcctggggagacaggcagcaagaagaagatccgcctgtaccagttcctgttggacctgctccgcagcggcgacatgaaggacagcatctggtgggtggacaaggacaagggcaccttccagttctcgtccaagcacaaggaggcgctggcgcaccgctggggcatccagaagggcaaccgcaagaagatgacctaccagaagatggcgcgcgcgctgcgcaactacggcaagacgggcgaggtcaagaaggtgaagaagaagctcacctaccagttcagcggcgaagtgctgggccgcgggggcctggccgagcggcgccacccgccccactga (配列番号90)
ヒト POU class 3 homeobox 2 (POU3F2) (Brn2) (NM_005604.3) 配列番号27 (タンパク質)及び配列番号91 (DNA)
MATAASNHYSLLTSSASIVHAEPPGGMQQGAGGYREAQSLVQGDYGALQSNGHPLSHAHQWITALSHGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGDGSPWSTSPLGQPDIKPSVVVQQGGRGDELHGPGALQQQHQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQRPPHLVHHAANHHPGPGAWRSAAAAAHLPPSMGASNGGLLYSQPSFTVNGMLGAGGQPAGLHHHGLRDAHDEPHHADHHPHPHSHPHQQPPPPPPPQGPPGHPGAHHDPHSDEDTPTSDDLEQFAKQFKQRRIKLGFTQADVGLALGTLYGNVFSQTTICRFEALQLSFKNMCKLKPLLNKWLEEADSSSGSPTSIDKIAAQGRKRKKRTSIEVSVKGALESHFLKCPKPSAQEITSLADSLQLEKEVVRVWFCNRRQKEKRMTPPGGTLPGAEDVYGGSRDTPPHHGVQTPVQ (配列番号27)
atggcgaccgcagcgtctaaccactacagcctgctcacctccagcgcctccatcgtgcacgccgagccgcccggcggcatgcagcagggcgcggggggctaccgcgaagcgcagagcctggtgcagggcgactacggcgctctgcagagcaacggacacccgctcagccacgctcaccagtggatcaccgcgctgtcccacggcggcggcggcgggggcggtggcggcggcggggggggcgggggcggcggcgggggcggcggcgacggctccccgtggtccaccagccccctgggccagccggacatcaagccctcggtggtggtgcagcagggcggccgcggagacgagctgcacgggccaggcgccctgcagcagcagcatcagcagcagcaacagcaacagcagcagcaacagcagcaacagcagcagcagcagcagcaacagcggccgccgcatctggtgcaccacgccgctaaccaccacccgggacccggggcatggcggagcgcggcggctgcagcgcacctcccaccctccatgggagcgtccaacggcggcttgctctactcgcagcccagcttcacggtgaacggcatgctgggcgccggcgggcagccggccggtctgcaccaccacggcctgcgggacgcgcacgacgagccacaccatgccgaccaccacccgcacccgcactcgcacccacaccagcagccgccgcccccgccgcccccgcagggtccgcctggccacccaggcgcgcaccacgacccgcactcggacgaggacacgccgacctcggacgacctggagcagttcgccaagcagttcaagcagcggcggatcaaactgggatttacccaagcggacgtggggctggctctgggcaccctgtatggcaacgtgttctcgcagaccaccatctgcaggtttgaggccctgcagctgagcttcaagaacatgtgcaagctgaagcctttgttgaacaagtggttggaggaggcggactcgtcctcgggcagccccacgagcatagacaagatcgcagcgcaagggcgcaagcggaaaaagcggacctccatcgaggtgagcgtcaagggggctctggagagccatttcctcaaatgccccaagccctcggcccaggagatcacctccctcgcggacagcttacagctggagaaggaggtggtgagagtttggttttgtaacaggagacagaaagagaaaaggatgacccctcccggagggactctgccgggcgccgaggatgtgtacggggggagtagggacactccaccacaccacggggtgcagacgcccgtccagtga (配列番号91)
ヒト forkhead box G1 (FOXG1) (NM_005249.4) 配列番号28 (タンパク質)及び配列番号92 (DNA)
MLDMGDRKEVKMIPKSSFSINSLVPEAVQNDNHHASHGHHNSHHPQHHHHHHHHHHHPPPPAPQPPPPPQQQQPPPPPPPAPQPPQTRGAPAADDDKGPQQLLLPPPPPPPPAAALDGAKADGLGGKGEPGGGPGELAPVGPDEKEKGAGAGGEEKKGAGEGGKDGEGGKEGEKKNGKYEKPPFSYNALIMMAIRQSPEKRLTLNGIYEFIMKNFPYYRENKQGWQNSIRHNLSLNKCFVKVPRHYDDPGKGNYWMLDPSSDDVFIGGTTGKLRRRSTTSRAKLAFKRGARLTSTGLTFMDRAGSLYWPMSPFLSLHHPRASSTLSYNGTTSAYPSHPMPYSSVLTQNSLGNNHSFSTANGLSVDRLVNGEIPYATHHLTAAALAASVPCGLSVPCSGTYSLNPCSVNLLAGQTSYFFPHVPHPSMTSQSSTSMSARAASSSTSPQAPSTLPCESLRPSLPSFTTGLSGGLSDYFTHQNQGSSSNPLIH (配列番号28)
atgctggacatgggagataggaaagaggtgaaaatgatccccaagtcctcgttcagcatcaacagcctggtgcccgaggcggtccagaacgacaaccaccacgcgagccacggccaccacaacagccaccacccccagcaccaccaccaccaccaccaccatcaccaccacccgccgccgcccgccccgcaaccgccgccgccgccgcagcagcagcagccgccgccgccgccgcccccggcaccgcagcccccccagacgcggggcgccccggccgccgacgacgacaagggcccccagcagctgctgctcccgccgccgccaccgccaccaccggccgccgccctggacggggctaaagcggacgggctgggcggcaagggcgagccgggcggcgggccgggggagctggcgcccgtcgggccggacgagaaggagaagggcgccggcgccgggggggaggagaagaagggggcgggcgagggcggcaaggacggggaggggggcaaggagggcgagaagaagaacggcaagtacgagaagccgccgttcagctacaacgcgctcatcatgatggccatccggcagagccccgagaagcggctcacgctcaacggcatctacgagttcatcatgaagaacttcccttactaccgcgagaacaagcagggctggcagaactccatccgccacaatctgtccctcaacaagtgcttcgtgaaggtgccgcgccactacgacgacccgggcaagggcaactactggatgctggacccgtcgagcgacgacgtgttcatcggcggcaccacgggcaagctgcggcgccgctccaccacctcgcgggccaagctggccttcaagcgcggtgcgcgcctcacctccaccggcctcaccttcatggaccgcgccggctccctctactggcccatgtcgcccttcctgtccctgcaccacccccgcgccagcagcactttgagttacaacggcaccacgtcggcctaccccagccaccccatgccctacagctccgtgttgactcagaactcgctgggcaacaaccactccttctccaccgccaacggcctgagcgtggaccggctggtcaacggggagatcccgtacgccacgcaccacctcacggccgccgcgctagccgcctcggtgccctgcggcctgtcggtgccctgctctgggacctactccctcaacccctgctccgtcaacctgctcgcgggccagaccagttactttttcccccacgtcccgcacccgtcaatgacttcgcagagcagcacgtccatgagcgccagggccgcgtcctcctccacgtcgccgcaggccccctcgaccctgccctgtgagtctttaagaccctctttgccaagttttacgacgggactgtctgggggactgtctgattatttcacacatcaaaatcaggggtcttcttccaaccctttaatacattaa (配列番号92)
ヒト mRNA for ASC1 protein (SLC7A10 gene) (AJ277731.1) 配列番号29 (タンパク質)及び配列番号93 (DNA)
MAGHTQQPSGRGNPRPAPSPSPVPGTVPGASERVALKKEIGLLSACTIIIGNIIGSGIFISPKGVLEHSGSVGLALFVWVLGGGVTALGSLCYAELGVAIPKSGGDYAYVTEIFGGLAGFLLLWSAVLIMYPTSLAVISMTFSNYVLQPVFPNCIPPTTASRVLSMACLMLLTWVNSSSVRWATRIQDMFTGGKLLALSLIIGVGLLQIFQGHFEELRPSNAFAFWMTPSVGHLALAFLQGSFAFSGWNFLNYVTEEMVDARKNLPRAIFISIPLVTFVYTFTNIAYFTAMSPQELLSSNAVAVTFGEKLLGYFSWVMPVSVALSTFGGINGYLFTYSRLCFSGAREGHLPSLLAMIHVRHCTPIPALLVCCGATAVIMLVGDTYTLINYVSFINYLCYGVTILGLLLLRWRRPALHRPIKVNLLIPVAYLVFWAFLLVFSFISEPMVCGVGVIIILTGVPIFFLGVFWRSKPKCVHRLTESMTHWGQELCFVVYPQDAPEEEENGPCPPSLLPATDKPSKPQ (配列番号29)
atggccggccacacgcagcagccgagcgggcgcgggaaccccaggcctgcgccctcgccctccccagtcccagggaccgtccccggcgcctcggagcgggtggcgctcaagaaggagatcgggctgctgagcgcctgcaccatcatcatcgggaacatcatcggctcgggcatcttcatctcgcccaagggggtcctggagcactcaggctccgtgggtctggccctgttcgtctgggtcctgggtgggggcgtgacggctctgggctccctctgctatgcagagctgggagtcgccatccccaagtctggcggggactacgcctacgtcacagagatcttcgggggcctggctggctttctgctgctctggagcgccgtcctcatcatgtaccccaccagccttgctgtcatctccatgaccttctccaactacgtgctgcagcccgtgttccccaactgcatcccccccaccacagcctcccgggtgctgtccatggcctgcctgatgctcctgacatgggtgaacagctccagtgtgcgctgggccacgcgcatccaggacatgttcacaggcgggaagctgctggccttgtccctcatcatcggcgtgggccttctccagatcttccaaggacacttcgaggagctgaggcccagcaatgcctttgctttctggatgacgccctccgtgggacacctggccctggccttcctccagggctccttcgccttcagtggctggaacttcctcaactatgtcaccgaggagatggttgacgcccgaaagaacctacctcgcgccatcttcatctccatcccactggtgaccttcgtgtacacgttcaccaacattgcctacttcacggccatgtccccccaggagctgctctcctccaatgcggtggctgtgaccttcggggagaagctgctgggctacttttcttgggtcatgcctgtctccgtggctctgtcaaccttcggagggatcaatggttacctgttcacctactccaggctgtgcttctctggagcccgcgaggggcacctgcccagcctgctggccatgatccacgtcagacactgcacccccatccccgccctcctcgtctgttgcggggccacagccgtcatcatgctcgtgggcgacacgtacacgctcatcaactatgtgtccttcatcaactacctctgctacggcgtcaccatcctgggcctgctgctgctgcgctggaggcggcctgcactccacaggcccatcaaggtgaaccttctcatccccgtggcgtacttggtcttctgggccttcctgctggtcttcagcttcatctcagagcctatggtctgtggggtcggcgtcatcatcatccttacgggggtgcccattttctttctgggagtgttctggagaagcaaaccaaagtgtgtgcacagactcacagagtccatgacacactggggccaggagctgtgtttcgtggtctacccccaggacgcccccgaagaggaggagaatggcccctgcccaccctccctgctgcctgccacagacaagccctcgaagccacaatga (配列番号93)
ヒト achaete-scute family bHLH transcription factor 1 (ASCL1) (NM_004316.3) 配列番号30 (タンパク質)及び配列番号94 (DNA)
MESSAKMESGGAGQQPQPQPQQPFLPPAACFFATAAAAAAAAAAAAAQSAQQQQQQQQQQQQAPQLRPAADGQPSGGGHKSAPKQVKRQRSSSPELMRCKRRLNFSGFGYSLPQQQPAAVARRNERERNRVKLVNLGFATLREHVPNGAANKKMSKVETLRSAVEYIRALQQLLDEHDAVSAAFQAGVLSPTISPNYSNDLNSMAGSPVSSYSSDEGSYDPLSPEEQELLDFTNWF (配列番号30)
atggaaagctctgccaagatggagagcggcggcgccggccagcagccccagccgcagccccagcagcccttcctgccgcccgcagcctgtttctttgccacggccgcagccgcggcggccgcagccgccgcagcggcagcgcagagcgcgcagcagcagcagcagcagcagcagcagcagcagcaggcgccgcagctgagaccggcggccgacggccagccctcagggggcggtcacaagtcagcgcccaagcaagtcaagcgacagcgctcgtcttcgcccgaactgatgcgctgcaaacgccggctcaacttcagcggctttggctacagcctgccgcagcagcagccggccgccgtggcgcgccgcaacgagcgcgagcgcaaccgcgtcaagttggtcaacctgggctttgccacccttcgggagcacgtccccaacggcgcggccaacaagaagatgagtaaggtggagacactgcgctcggcggtcgagtacatccgcgcgctgcagcagctgctggacgagcatgacgcggtgagcgccgccttccaggcaggcgtcctgtcgcccaccatctcccccaactactccaacgacttgaactccatggccggctcgccggtctcatcctactcgtcggacgagggctcttacgacccgctcagccccgaggagcaggagcttctcgacttcaccaactggttctga (配列番号94)
ヒト Nurr1 gene (AB017586) 配列番号31 (タンパク質)及び配列番号95 (DNA)
MPCVQAQYGSSPQGASPASQSYSYHSSGEYSSDFLTPEFVKFSMDLTNTEITATTSLPSFSTFMDNYSTGYDVKPPCLYQMPLSGQQSSIKVEDIQMHNYQQHSHLPPQSEEMMPHSGSVYYKPSSPPTPTTPGFQVQHSPMWDDPGSLHNFHQNYVATTHMIEQRKTPVSRLSLFSFKQSPPGTPVSSCQMRFDGPLHVPMNPEPAGSHHVVDGQTFAVPNPIRKPASMGFPGLQIGHASQLLDTQVPSPPSRGSPSNEGLCAVCGDNAACQHYGVRTCEGCKGFFKRTVQKNAKYVCLANKNCPVDKRRRNRCQYCRFQKCLAVGMVKEVVRTDSLKGRRGRLPSKPKSPQEPSPPSPPVSLISALVRAHVDSNPAMTSLDYSRFQANPDYQMSGDDTQHIQQFYDLLTGSMEIIRGWAEKIPGFADLPKADQDLLFESAFLELFVLRLAYRSNPVEGKLIFCNGVVLHRLQCVRGFGEWIDSIVEFSSNLQNMNIDISAFSCIAALAMVTERHGLKEPKRVEELQNKIVNCLKDHVTFNNGGLNRPNYLSKLLGKLPELRTLCTQGLQRIFYLKLEDLVPPPAIIDKLFLDTLPF(配列番号31)
atgccttgtgttcaggcgcagtatgggtcctcgcctcaaggagccagccccgcttctcagagctacagttaccactcttcgggagaatacagctccgatttcttaactccagagtttgtcaagtttagcatggacctcaccaacactgaaatcactgccaccacttctctccccagcttcagtacctttatggacaactacagcacaggctacgacgtcaagccaccttgcttgtaccaaatgcccctgtccggacagcagtcctccattaaggtagaagacattcagatgcacaactaccagcaacacagccacctgcccccccagtctgaggagatgatgccgcactccgggtcggtttactacaagccctcctcgcccccgacgcccaccaccccgggcttccaggtgcagcacagccccatgtgggacgacccgggatctctccacaacttccaccagaactacgtggccactacgcacatgatcgagcagaggaaaacgccagtctcccgcctctccctcttctcctttaagcaatcgccccctggcaccccggtgtctagttgccagatgcgcttcgacgggcccctgcacgtccccatgaacccggagcccgccggcagccaccacgtggtggacgggcagaccttcgctgtgcccaaccccattcgcaagcccgcgtccatgggcttcccgggcctgcagatcggccacgcgtctcagctgctcgacacgcaggtgccctcaccgccgtcgcggggctccccctccaacgaggggctgtgcgctgtgtgtggggacaacgcggcctgccaacactacggcgtgcgcacctgtgagggctgcaaaggcttctttaagcgcacagtgcaaaaaaatgcaaaatacgtgtgtttagcaaataaaaactgcccagtggacaagcgtcgccggaatcgctgtcagtactgccgatttcagaagtgcctggctgttgggatggtcaaagaagtggttcgcacagacagtttaaaaggccggagaggtcgtttgccctcgaaaccgaagagcccacaggagccctctcccccttcgcccccggtgagtctgatcagtgccctcgtcagggcccatgtcgactccaacccggctatgaccagcctggactattccaggttccaggcgaaccctgactatcaaatgagtggagatgacacccagcatatccagcaattctatgatctcctgactggctccatggagatcatccggggctgggcagagaagatccctggcttcgcagacctgcccaaagccgaccaagacctgctttttgaatcagctttcttagaactgtttgtccttcgattagcatacaggtccaacccagtggagggtaaactcatcttttgcaatggggtggtcttgcacaggttgcaatgcgttcgtggctttggggaatggattgattccattgttgaattctcctccaacttgcagaatatgaacatcgacatttctgccttctcctgcattgctgccctggctatggtcacagagagacacgggctcaaggaacccaagagagtggaagaactgcaaaacaagattgtaaattgtctcaaagaccacgtgactttcaacaatggggggttgaaccgccccaattatttgtccaaactgttggggaagctcccagaacttcgtaccctttgcacacaggggctacagcgcattttctacctgaaattggaagacttggtgccaccgccagcaataattgacaaacttttcctggacactttacctttctaa(配列番号95)
配列番号32: ヒト neurogenin 2 (NEUROG2) (NM_024019) 配列番号32 (タンパク質)及び配列番号96 (DNA)
MFVKSETLELKEEEDVLVLLGSASPALAALTPLSSSADEEEEEEPGASGGARRQRGAEAGQGARGGVAAGAEGCRPARLLGLVHDCKRRPSRARAVSRGAKTAETVQRIKKTRRLKANNRERNRMHNLNAALDALREVLPTFPEDAKLTKIETLRFAHNYIWALTETLRLADHCGGGGGGLPGALFSEAVLLSPGGASAALSSSGDSPSPASTWSCTNSPAPSSSVSSNSTSPYSCTLSPASPAGSDMDYWQPPPPDKHRYAPHLPIARDCI(配列番号32)
atgttcgtcaaatccgagaccttggagttgaaggaggaagaggacgtgttagtgctgctcggatcggcctcccccgccttggcggccctgaccccgctgtcatccagcgccgacgaagaagaggaggaggagccgggcgcgtcaggcggggcgcgtcggcagcgcggggctgaggccgggcagggggcgcggggcggcgtggctgcgggtgcggagggctgccggcccgcacggctgctgggtctggtacacgattgcaaacggcgcccttcccgggcgcgggccgtctcccgaggcgccaagacggccgagacggtgcagcgcatcaagaagacccgtagactgaaggccaacaaccgcgagcgaaaccgcatgcacaacctcaacgcggcactggacgcgctgcgcgaggtgctccccacgttccccgaggacgccaagctcaccaagatcgagaccctgcgcttcgcccacaactacatctgggcactcaccgagaccctgcgcctggcggatcactgcgggggcggcggcgggggcctgccgggggcgctcttctccgaggcagtgttgctgagcccgggaggagccagcgccgccctgagcagcagcggagacagcccctcgcccgcctccacgtggagttgcaccaacagccccgcgccgtcctcctccgtgtcctccaattccacctccccctacagctgcactttatcgcccgccagcccggccgggtcagacatggactattggcagcccccacctcccgacaagcaccgctatgcacctcacctccccatagccagggattgtatctag(配列番号96)
ヒト LIM homeobox transcription factor 1, alpha (LMX1A) (NM_177398) 配列番号33 (タンパク質)及び配列番号97 (DNA)
MLDGLKMEENFQSAIDTSASFSSLLGRAVSPKSVCEGCQRVILDRFLLRLNDSFWHEQCVQCASCKEPLETTCFYRDKKLYCKYDYEKLFAVKCGGCFEAIAPNEFVMRAQKSVYHLSCFCCCVCERQLQKGDEFVLKEGQLLCKGDYEKERELLSLVSPAASDSGKSDDEESLCKSAHGAGKGTAEEGKDHKRPKRPRTILTTQQRRAFKASFEVSSKPCRKVRETLAAETGLSVRVVQVWFQNQRAKMKKLARRQQQQQQDQQNTQRLSSAQTNGGGSAGMEGIMNPYTALPTPQQLLAIEQSVYSSDPFRQGLTPPQMPGDHMHPYGAEPLFHDLDSDDTSLSNLGDCFLATSEAGPLQSRVGNPIDHLYSMQNSYFTS (配列番号33)
atgctggacggcctaaagatggaggagaacttccaaagcgcgatcgacacctcggcctccttctcctcgctgctgggcagagcggtgagccccaagtctgtctgcgagggctgtcagcgggtcatcttggacaggtttctgctgcggctcaacgacagcttctggcatgagcagtgcgtgcagtgcgcctcctgcaaagagcccctggagaccacctgcttctaccgggacaagaagctgtactgcaagtatgactacgagaagctgtttgctgttaaatgtgggggctgcttcgaggccatcgctcccaatgagtttgttatgcgggcccagaagagtgtataccacctgagctgcttctgctgctgtgtctgcgagcgacagcttcagaagggtgatgagtttgtcctgaaggaggggcagctgctctgcaaaggggactatgagaaggagcgggagctgctcagcctggtgagcccagcagcctcagactcaggtaaaagtgatgatgaagaaagtctctgcaagtcagcccatggggcagggaaaggaactgctgaggaaggcaaggaccataagcgccccaaacgtccgagaaccatcttgacaactcaacagaggcgagcattcaaggcctcatttgaagtatcctccaagccctgcaggaaggtgagagagactctggctgcagagacagggctgagtgtccgtgtcgtccaggtgtggttccaaaaccagagagcgaagatgaagaagctggccaggcgacagcagcagcagcagcaagatcagcagaacacccagaggctgagctctgctcagacaaacggtggtgggagtgctgggatggaaggaatcatgaacccctacacggctctgcccaccccacagcagctcctggccatcgagcagagtgtctacagctcagatcccttccgacagggtctcaccccaccccagatgcctggagaccacatgcacccttatggtgccgagccccttttccatgacctggatagcgacgacacctccctcagtaacctgggtgattgtttcctagcaacctcagaagctgggcctctgcagtccagagtgggaaaccccattgaccatctgtactccatgcagaattcttacttcacatcttga (配列番号97)
ヒト HB9 homeobox gene, (U07663) 配列番号34 (タンパク質)及び配列番号98 (DNA)
MEKSKNFRIEPCWRWTPHEPPLAERALAKVTSPPVPASGTGGGGGGGGASGGTSGSCSPASSEPPAAPADRLRAESPSPPRLLAAHCALLPKPGFLGAGGGGGGTGGGHGGPHHHAHPGAAAAAAAAAAAAAAAAGGLALGLHPGGAQGGAGLPAQAALYGHPVYGYSAAAAAAALAGQHPALSYSYPQVQGAHPAHPADPIKLGAGTFQLDQWLRATAGMILPKMPDFNSQAQSNLLGKCRRPRTAFTSQQLLELEHQFKFNKYLSRPKRFEVATSLMLTETQVKIWFQNRRMKWKRSKKAKEQAAQEAEKQKGGGGGAGKGGAEEPGAEELLGPPAPRDKGSGPPADLRDSDPEEDEDEDDEDHFPYSNGASVHAASSDCSSEDDSPPPRPSHQPAPQ (配列番号34)
atggaaaaatccaaaaatttccgcatcgagccctgctggcggtggaccccccacgagccgcctctcgcagagcgcgcgctggccaaggtcacgtcgccgcccgtgcccgcatctggcaccggaggtggcggcggcggcggcggggcgagcggcgggactagcggcagctgcagccccgcgtcctcggagccgccggctgcgcccgccgaccgcctgcgcgccgagagcccgtcgccgccgcgcctgctggccgcgcactgcgcgctgctgcccaagccgggcttcctgggcgcgggcggcggcggcggcggcacgggcggcgggcacggggggccccaccaccacgcgcatccgggcgcagcggccgctgccgccgccgccgccgccgccgccgccgccgccgctgggggcctggcgctggggctgcaccctgggggcgcgcagggcggcgcgggcctcccggcgcaggcggcgctctacggccacccggtctacggctactccgcggcggcggcggcggctgcgctggcgggccagcacccggcgctctcctactcgtacccgcaggtgcaaggcgcgcaccccgcgcaccccgccgaccccatcaagctgggcgccggcaccttccagctggaccagtggctgcgcgcgtccaccgcgggcatgatcctgcctaagatgcccgacttcaact (配列番号98)
ヒト LIM homeobox 3 (LHX3) (NM_178138) 配列番号35 (タンパク質)及び配列番号99 (DNA)
MLLETGLERDRARPGAAAVCTLGGTREIPLCAGCDQHILDRFILKALDRHWHSKCLKCSDCHTPLAERCFSRGESVYCKDDFFKRFGTKCAACQLGIPPTQVVRRAQDFVYHLHCFACVVCKRQLATGDEFYLMEDSRLVCKADYETAKQREAEATAKRPRTTITAKQLETLKSAYNTSPKPARHVREQLSSETGLDMRVVQVWFQNRRAKEKRLKKDAGRQRWGQYFRNMKRSRGGSKSDKDSVQEGQDSDAEVSFPDEPSLAEMGPANGLYGSLGEPTQALGRPSGALGNFSLEHGGLAGPEQYRELRPGSPYGVPPSPAAPQSLPGPQPLLSSLVYPDTSLGLVPSGAPGGPPPMRVLAGNGPSSDLSTGSSGGYPDFPASPASWLDEVDHAQF (配列番号35)
atgctgctggaaacggggctcgagcgcgaccgagcgaggcccggggccgccgccgtctgcaccttgggcgggactcgggagatcccgctgtgcgctggctgtgaccagcacatcctggaccgcttcatcctcaaggctctggaccgccactggcacagcaagtgtctcaagtgcagcgactgccacacgccactggccgagcgctgcttcagccgaggggagagcgtttactgcaaggacgactttttcaagcgcttcgggaccaagtgcgccgcgtgccagctgggcatcccgcccacgcaggtggtgcgccgcgcccaggacttcgtgtaccacctgcactgctttgcctgcgtcgtgtgcaagcggcagctggccacgggcgacgagttctacctcatggaggacagccggctcgtgtgcaaggcggactacgaaaccgccaagcagcgagaggccgaggccacggccaagcggccgcgcacgaccatcaccgccaagcagctggagacgctgaagagcgcttacaacacctcgcccaagccggcgcgccacgtgcgcgagcagctctcgtccgagacgggcctggacatgcgcgtggtgcaggtttggttccagaaccgccgggccaaggagaagaggctgaagaaggacgccggccggcagcgctgggggcagtatttccgcaacatgaagcgctcccgcggcggctccaagtcggacaaggacagcgttcaggaggggcaggacagcgacgctgaggtctccttccccgatgagccttccttggcggaaatgggcccggccaatggcctctacgggagcttgggggaacccacccaggccttgggccggccctcgggagccctgggcaacttctccctggagcatggaggcctggcaggcccagagcagtaccgagagctgcgtcccggcagcccctacggtgtccccccatcccccgccgccccgcagagcctccctggcccccagcccctcctctccagcctggtgtacccagacaccagcttgggccttgtgccctcgggagcccccggcgggcccccacccatgagggtgctggcagggaacggacccagttctgacctatccacggggagcagcgggggttaccccgacttccctgccagccccgcctcctggctggatgaggtagaccacgctcagttctga (配列番号99)
ヒト distal-less homeobox 2 (DLX2) (NM_004405) 配列番号36 (タンパク質)及び配列番号100 (DNA)
MTGVFDSLVADMHSTQIAASSTYHQHQQPPSGGGAGPGGNSSSSSSLHKPQESPTLPVSTATDSSYYTNQQHPAGGGGGGGSPYAHMGSYQYQASGLNNVPYSAKSSYDLGYTAAYTSYAPYGTSSSPANNEPEKEDLEPEIRIVNGKPKKVRKPRTIYSSFQLAALQRRFQKTQYLALPERAELAASLGLTQTQVKIWFQNRRSKFKKMWKSGEIPSEQHPGASASPPCASPPVSAPASWDFGVPQRMAGGGGPGSGGSGAGSSGSSPSSAASAFLGNYPWYHQTSGSASHLQATAPLLHPTQTPQPHHHHHHHGGGGAPVSAGTIF (配列番号36)
atgactggagtctttgacagtctagtggctgatatgcactcgacccagatcgccgcctccagcacgtaccaccagcaccagcagcccccgagcggcggcggcgccggcccgggtggcaacagcagcagcagcagcagcctccacaagccccaggagtcgcccacccttccggtgtccaccgccaccgacagcagctactacaccaaccagcagcacccggcgggcggcggcggcggcgggggctcgccctacgcgcacatgggttcctaccagtaccaagccagcggcctcaacaacgtcccttactccgccaagagcagctatgacctgggctacaccgccgcctacacctcctacgctccctatggaaccagttcgtccccagccaacaacgagcctgagaaggaggaccttgagcctgaaattcggatagtgaacgggaagccaaagaaagtccggaaaccccgcaccatctactccagtttccagctggcggctcttcagcggcgtttccaaaagactcaatacttggccttgccggagcgagccgagctggcggcctctctgggcctcacccagactcaggtcaaaatctggttccagaaccgccggtccaagttcaagaagatgtggaaaagtggtgagatcccctcggagcagcaccctggggccagcgcttctccaccttgtgcttcgccgccagtctcagcgccggcctcctgggactttggtgtgccgcagcggatggcgggcggcggtggtccgggcagtggcggcagcggcgccggcagctcgggctccagcccgagcagcgcggcctcggcttttctgggcaactacccctggtaccaccagacctcgggatccgcctcacacctgcaggccacggcgccgctgctgcaccccactcagaccccgcagccgcatcaccaccaccaccatcacggcggcgggggcgccccggtgagcgcggggacgattttctaa (配列番号100)
ヒト runt-related transcription factor 2 (RUNX2)(NM_001024630) 配列番号37 (タンパク質)及び配列番号101 (DNA)
MASNSLFSTVTPCQQNFFWDPSTSRRFSPPSSSLQPGKMSDVSPVVAAQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQQEAAAAAAAAAAAAAAAAAVPRLRPPHDNRTMVEIIADHPAELVRTDSPNFLCSVLPSHWRCNKTLPVAFKVVALGEVPDGTVVTVMAGNDENYSAELRNASAVMKNQVARFNDLRFVGRSGRGKSFTLTITVFTNPPQVATYHRAIKVTVDGPREPRRHRQKLDDSKPSLFSDRLSDLGRIPHPSMRVGVPPQNPRPSLNSAPSPFNPQGQSQITDPRQAQSSPPWSYDQSYPSYLSQMTSPSIHSTTPLSSTRGTGLPAITDVPRRISDDDTATSDFCLWPSTLSKKSQAGASELGPFSDPRQFPSISSLTESRFSNPRMHYPATFTYTPPVTSGMSLGMSATTHYHTYLPPPYPGSSQSQSGPFQTSSTPYLYYGTSSGSYQFPMVPGGDRSPSRMLPPCTTTSNGSTLLNPNLPNQNDGVDADGSHSSSPTVLNSSGRMDESVWRPY (配列番号37)
atggcatcaaacagcctcttcagcacagtgacaccatgtcagcaaaacttcttttgggatccgagcaccagccggcgcttcagccccccctccagcagcctgcagcccggcaaaatgagcgacgtgagcccggtggtggctgcgcaacagcagcagcaacagcagcagcagcaacagcagcagcagcagcagcaacagcagcagcagcagcaggaggcggcggcggcggctgcggcggcggcggcggctgcggcggcggcagctgcagtgccccggttgcggccgccccacgacaaccgcaccatggtggagatcatcgccgaccacccggccgaactcgtccgcaccgacagccccaacttcctgtgctcggtgctgccctcgcactggcgctgcaacaagaccctgcccgtggccttcaaggtggtagccctcggagaggtaccagatgggactgtggttactgtcatggcgggtaacgatgaaaattattctgctgagctccggaatgcctctgctgttatgaaaaaccaagtagcaaggttcaacgatctgagatttgtgggccggagtggacgaggcaagagtttcaccttgaccataaccgtcttcacaaatcctccccaagtagctacctatcacagagcaattaaagttacagtagatggacctcgggaacccagaaggcacagacagaagcttgatgactctaaacctagtttgttctctgaccgcctcagtgatttagggcgcattcctcatcccagtatgagagtaggtgtcccgcctcagaacccacggccctccctgaactctgcaccaagtccttttaatccacaaggacagagtcagattacagaccccaggcaggcacagtcttccccgccgtggtcctatgaccagtcttacccctcctacctgagccagatgacgtccccgtccatccactctaccaccccgctgtcttccacacggggcactgggcttcctgccatcaccgatgtgcctaggcgcatttcagatgatgacactgccacctctgacttctgcctctggccttccactctcagtaagaagagccaggcaggtgcttcagaactgggccctttttcagaccccaggcagttcccaagcatttcatccctcactgagagccgcttctccaacccacgaatgcactatccagccacctttacttacaccccgccagtcacctcaggcatgtccctcggtatgtccgccaccactcactaccacacctacctgccaccaccctaccccggctcttcccaaagccagagtggacccttccagaccagcagcactccatatctctactatggcacttcgtcaggatcctatcagtttcccatggtgccggggggagaccggtctccttccagaatgcttccgccatgcaccaccacctcgaatggcagcacgctattaaatccaaatttgcctaaccagaatgatggtgttgacgctgatggaagccacagcagttccccaactgttttgaattctagtggcagaatggatgaatctgtttggcgaccatattga (配列番号101)
ヒト SRY (sex determining region Y)-box 5 (SOX5) (NM_006940) 配列番号38 (タンパク質)及び配列番号102 (DNA)
MLTDPDLPQEFERMSSKRPASPYGEADGEVAMVTSRQKVEEEESDGLPAFHLPLHVSFPNKPHSEEFQPVSLLTQETCGHRTPTSQHNTMEVDGNKVMSSFAPHNSSTSPQKAEEGGRQSGESLSSTALGTPERRKGSLADVVDTLKQRKMEELIKNEPEETPSIEKLLSKDWKDKLLAMGSGNFGEIKGTPESLAEKERQLMGMINQLTSLREQLLAAHDEQKKLAASQIEKQRQQMELAKQQQEQIARQQQQLLQQQHKINLLQQQIQVQGQLPPLMIPVFPPDQRTLAAAAQQGFLLPPGFSYKAGCSDPYPVQLIPTTMAAAAAATPGLGPLQLQQLYAAQLAAMQVSPGGKLPGIPQGNLGAAVSPTSIHTDKSTNSPPPKSKDEVAQPLNLSAKPKTSDGKSPTSPTSPHMPALRINSGAGPLKASVPAALASPSARVSTIGYLNDHDAVTKAIQEARQMKEQLRREQQVLDGKVAVVNSLGLNNCRTEKEKTTLESLTQQLAVKQNEEGKFSHAMMDFNLSGDSDGSAGVSESRIYRESRGRGSNEPHIKRPMNAFMVWAKDERRKILQAFPDMHNSNISKILGSRWKAMTNLEKQPYYEEQARLSKQHLEKYPDYKYKPRPKRTCLVDGKKLRIGEYKAIMRNRRQEMRQYFNVGQQAQIPIATAGVVYPGAIAMAGMPSPHLPSEHSSVSSSPEPGMPVIQSTYGVKGEEPHIKEEIQAEDINGEIYDEYDEEEDDPDVDYGSDSENHIAGQAN (配列番号38)
atgcttactgaccctgatttacctcaggagtttgaaaggatgtcttccaagcgaccagcctctccgtatggggaagcagatggagaggtagccatggtgacaagcagacagaaagtggaagaagaggagagtgacgggctcccagcctttcaccttcccttgcatgtgagttttcccaacaagcctcactctgaggaatttcagccagtttctctgctgacgcaagagacttgtggccataggactcccacttctcagcacaatacaatggaagttgatggcaataaagttatgtcttcatttgccccacacaactcatctacctcacctcagaaggcagaagaaggtgggcgacagagtggcgagtccttgtctagtacagccctgggaactcctgaacggcgcaagggcagtttagctgatgttgttgacaccttgaagcagaggaaaatggaagagctcatcaaaaacgagccggaagaaacccccagtattgaaaaactactctcaaaggactggaaagacaagcttcttgcaatgggatcggggaactttggcgaaataaaagggactcccgagagcttagctgagaaagaaaggcaactcatgggtatgatcaaccagctgaccagcctccgagagcagctgttggctgcccacgatgagcagaagaaactagctgcctctcagattgagaaacagcgtcagcaaatggagctggccaagcagcaacaagaacaaattgcaagacagcagcagcagcttctacagcaacaacacaaaatcaatttgctccagcaacagatccaggttcaaggtcagctgccgccattaatgattcccgtattccctcctgatcaacggacactggctgcagctgcccagcaaggattcctcctccctccaggcttcagctataaggctggatgtagtgacccttaccctgttcagctgatcccaactaccatggcagctgctgccgcagcaacaccaggcttaggcccactccaactgcagcagttatatgctgcccagctagctgcaatgcaggtatctccaggagggaagctgccaggcataccccaaggcaaccttggtgctgctgtatctcctaccagcattcacacagacaagagcacaaacagcccaccacccaaaagcaaggatgaagtggcacagccactgaacctatcagctaaacccaagacctctgatggcaaatcacccacatcacccacctctccccatatgccagctctgagaataaacagtggggcaggccccctcaaagcctctgtcccagcagcgttagctagtccttcagccagagttagcacaataggttacttaaatgaccatgatgctgtcaccaaggcaatccaagaagctcggcaaatgaaggagcaactccgacgggaacaacaggtgcttgatgggaaggtggctgttgtgaatagtctgggtctcaataactgccgaacagaaaaggaaaaaacaacactggagagtctgactcagcaactggcagttaaacagaatgaagaaggaaaatttagccatgcaatgatggatttcaatctgagtggagattctgatggaagtgctggagtctcagagtcaagaatttatagggaatcccgagggcgtggtagcaatgaaccccacataaagcgtccaatgaatgccttcatggtgtgggctaaagatgaacggagaaagatccttcaagcctttcctgacatgcacaactccaacatcagcaagatattgggatctcgctggaaagctatgacaaacctagagaaacagccatattatgaggagcaagcccgtctcagcaagcagcacctggagaagtaccctgactataagtacaagcccaggccaaagcgcacctgcctggtggatggcaaaaagctgcgcattggtgaatacaaggcaatcatgcgcaacaggcggcaggaaatgcggcagtacttcaatgttgggcaacaagcacagatccccattgccactgctggtgttgtgtaccctggagccatcgccatggctgggatgccctcccctcacctgccctcggagcactcaagcgtgtctagcagcccagagcctgggatgcctgttatccagagcacttacggtgtgaaaggagaggagccacatatcaaagaagagatacaggccgaggacatcaatggagaaatttatgatgagtacgacgaggaagaggatgatccagatgtagattatgggagtgacagtgaaaaccatattgcaggacaagccaactga (配列番号102)
ヒト SOX6 mRNA (AF309034) 配列番号39 (タンパク質)及び配列番号103 (DNA)
MSSKQATSPFACAADGEDAMTQDLTSREKEEGSDQHVASHLPLHPIMHNKPHSEELPTLVSTIQQDADWDSVLSSQQRMESENNKLCSLYSFRNTSTSPHKPDEGSRDREIMTSVTFGTPERRKGSLADVVDTLKQKKLEEMTRTEQEDSSCMEKLLSKDWKEKMERLNTSELLGEIKGTPESLAEKERQLSTMITQLISLREQLLAAHDEQKKLAASQIEKQRQQMDLARQQQEQIARQQQQLLQQQHKINLLQQQIQVQGHMPPLMIPIFPHDQRTLAAAAAAQQGFLFPPGITYKPGDNYPVQFIPSTMAAAAASGLSPLQLQKGHASHPQINQRLKGLSDRFGRNLDTFEHGGGHSYNHKQIEQLYAAQLASMQVSPGAKMPSTPQPPNTAGTVSPTGIKNEKRGTSPVTQVKDEAAAQPLNLSSRPKTAEPVKSPTSPTQNLFPASKTSPVNLPNKSSIPSPIGGSLGRGSSLDILSSLNSPALFGDQDTVMKAIQEARKMREQIQREQQQQQPHGVDGKLSSINNMGLNSCRNEKERTRFENLGPQLTGKSNEDGKLGPGVIDLTRPEDAEGGATVAEARVYRDARGRASSEPHIKRPMNAFMVWAKDERRKILQAFPDMHNSNISKILGSRWKSMSNQEKQPYYEEQARLSKIHLEKYPNYKYKPRPKRTCIVDGKKLRIGEYKQLMRSRRQEMRQFFTVGQQPQIPITTGTGVVYPGAITMATTTPSPQMTSDCSSTSASPEPSLPVIQSTYGMKTDGGSLAGNEMINGEDEMEMYDDYEDDPKSDYSSENEAPEAVSAN (配列番号39)
atgtcttccaagcaagccacctctccatttgcctgtgcagctgatggagaggatgcaatgacccaggatttaacctcaagggaaaaggaagagggcagtgatcaacatgtggcctcccatctgcctctgcaccccataatgcacaacaaacctcactctgaggagctaccaacacttgtcagtaccattcaacaagatgctgactgggacagcgttctgtcatctcagcaaagaatggaatcagagaataataagttatgttccctatattccttccgaaatacctctacctcaccacataagcctgacgaagggagtcgggaccgtgagataatgaccagtgttacttttggaaccccagagcgccgcaaagggagtcttgccgatgtggtggacacactgaaacagaagaagcttgaggaaatgactcggactgaacaagaggattcctcctgcatggaaaaactactttcaaaagattggaaggaaaaaatggaaagactaaataccagtgaacttcttggagaaattaaaggtacacctgagagcctggcagaaaaagaacggcagctctccaccatgattacccagctgatcagtttacgggagcagctactggcagcgcatgatgaacagaaaaaactggcagcgtcacaaattgagaaacaacggcagcaaatggaccttgctcgccaacagcaagaacagattgcgagacaacagcagcaacttctgcaacagcagcacaaaattaatctcctgcagcaacagatccaggttcagggtcacatgcctccgctcatgatcccaatttttccacatgaccagcggactctggcagcagctgctgctgcccaacagggattcctcttcccccctggaataacatacaaaccaggtgataactaccccgtacagttcattccatcaacaatggcagctgctgctgcttctggactcagccctttacagctccagaagggtcatgcctcccacccacaaattaaccaaaggctaaagggcctaagtgaccgttttggcaggaatttggacacctttgaacatggtggtggccactcttacaaccacaaacagattgagcagctctatgccgctcagctggccagcatgcaggtgtcacctggagcaaagatgccatcaactccacagccaccaaacacagcagggacggtctcacctactgggataaaaaatgaaaagagagggaccagccctgtaactcaagttaaggatgaagcagcagcacagcctctgaatctctcatcccgacccaagacagcagagcctgtaaagtccccaacgtctcccacccagaacctcttcccagccagcaaaaccagccctgtcaatctgccaaacaaaagcagcatccctagccccattggaggaagcctgggaagaggatcctctttagatatcctatctagtctcaactcccctgccctttttggggatcaggatacagtgatgaaagccattcaggaggcgcggaagatgcgagagcagatccagcgggagcaacagcagcaacagccacatggtgttgacgggaaactgtcctccataaataatatggggctgaacagctgcaggaatgaaaaggaaagaacgcgctttgagaatttggggccccagttaacgggaaagtcaaatgaagatggaaaactgggcccaggtgtcatcgaccttactcggccagaagatgcagagggaggtgccactgtggctgaagcacgagtctacagggacgcccgcggccgtgccagcagcgagccacacattaagcgaccaatgaatgcattcatggtttgggcaaaggatgagaggagaaaaatccttcaggccttccccgacatgcataactccaacattagcaaaatcttaggatctcgctggaaatcaatgtccaaccaggagaagcaaccttattatgaagagcaggcccggctaagcaagatccacttagagaagtacccaaactataaatacaaaccccgaccgaaacgcacctgcattgttgatggcaaaaagcttcggattggggagtataagcaactgatgaggtctcggagacaggagatgaggcagttctttactgtggggcaacagcctcagattccaatcaccacaggaacaggtgttgtgtatcctggtgctatcactatggcaactaccacaccatcgcctcagatgacatctgactgctctagcacctcggccagcccggagcccagcctcccggtcatccagagcacttatggtatgaagacagatggcggaagcctagctggaaatgaaatgatcaatggagaggatgaaatggaaatgtatgatgactatgaagatgaccccaaatcagactatagcagtgaaaatgaagccccggaggctgtcagtgccaactga (配列番号103)
ヒト GATA binding protein 6 (GATA6) (NM_005257) 配列番号40 (タンパク質)及び配列番号104 (DNA)
MALTDGGWCLPKRFGAAGADASDSRAFPAREPSTPPSPISSSSSSCSRGGERGPGGASNCGTPQLDTEAAAGPPARSLLLSSYASHPFGAPHGPSAPGVAGPGGNLSSWEDLLLFTDLDQAATASKLLWSSRGAKLSPFAPEQPEEMYQTLAALSSQGPAAYDGAPGGFVHSAAAAAAAAAAASSPVYVPTTRVGSMLPGLPYHLQGSGSGPANHAGGAGAHPGWPQASADSPPYGSGGGAAGGGAAGPGGAGSAAAHVSARFPYSPSPPMANGAAREPGGYAAAGSGGAGGVSGGGSSLAAMGGREPQYSSLSAARPLNGTYHHHHHHHHHHPSPYSPYVGAPLTPAWPAGPFETPVLHSLQSRAGAPLPVPRGPSADLLEDLSESRECVNCGSIQTPLWRRDGTGHYLCNACGLYSKMNGLSRPLIKPQKRVPSSRRLGLSCANCHTTTTTLWRRNAEGEPVCNACGLYMKLHGVPRPLAMKKEGIQTRKRKPKNINKSKTCSGNSNNSIPMTPTSTSSNSDDCSKNTSPTTQPTASGAGAPVMTGAGESTNPENSELKYSGQDGLYIGVSLASPAEVTSSVRPDSWCALALA (配列番号40)
atggccttgactgacggcggctggtgcttgccgaagcgcttcggggccgcgggtgcggacgccagcgactccagagcctttccagcgcgggagccctccacgccgccttcccccatctcttcctcgtcctcctcctgctcccggggcggagagcggggccccggcggcgccagcaactgcgggacgcctcagctcgacacggaggcggcggccggacccccggcccgctcgctgctgctcagttcctacgcttcgcatcccttcggggctccccacggaccttcggcgcctggggtcgcgggccccgggggcaacctgtcgagctgggaggacttgctgctgttcactgacctcgaccaagccgcgaccgccagcaagctgctgtggtccagccgcggcgccaagctgagccccttcgcacccgagcagccggaggagatgtaccagaccctcgccgctctctccagccagggtccggccgcctacgacggcgcgcccggcggcttcgtgcactctgcggccgcggcggcagcagccgcggcggcggccagctccccggtctacgtgcccaccacccgcgtgggttccatgctgcccggcctaccgtaccacctgcaggggtcgggcagtgggccagccaaccacgcgggcggcgcgggcgcgcaccccggctggcctcaggcctcggccgacagccctccatacggcagcggaggcggcgcggctggcggcggggccgcggggcctggcggcgctggctcagccgcggcgcacgtctcggcgcgcttcccctactctcccagcccgcccatggccaacggcgccgcgcgggagccgggaggctacgcggcggcgggcagtgggggcgcgggaggcgtgagcggcggcggcagtagcctggcggccatgggcggccgcgagccccagtacagctcgctgtcggccgcgcggccgctgaacgggacgtaccaccaccaccaccaccaccaccaccaccatccgagcccctactcgccctacgtgggggcgccactgacgcctgcctggcccgccggacccttcgagaccccggtgctgcacagcctgcagagccgcgccggagccccgctcccggtgccccggggtcccagtgcagacctgctggaggacctgtccgagagccgcgagtgcgtgaactgcggctccatccagacgccgctgtggcggcgggacggcaccggccactacctgtgcaacgcctgcgggctctacagcaagatgaacggcctcagccggcccctcatcaagccgcagaagcgcgtgccttcatcacggcggcttggattgtcctgtgccaactgtcacaccacaactaccaccttatggcgcagaaacgccgagggtgaacccgtgtgcaatgcttgtggactctacatgaaactccatggggtgcccagaccacttgctatgaaaaaagagggaattcaaaccaggaaacgaaaacctaagaacataaataaatcaaagacttgctctggtaatagcaataattccattcccatgactccaacttccacctcttctaactcagatgattgcagcaaaaatacttcccccacaacacaacctacagcctcaggggcgggtgccccggtgatgactggtgcgggagagagcaccaatcccgagaacagcgagctcaagtattcgggtcaagatgggctctacataggcgtcagtctcgcctcgccggccgaagtcacgtcctccgtgcgaccggattcctggtgcgccctggccctggcctga (配列番号104)
ヒト GATA binding protein 1(GATA1) (NM_002049) 配列番号41 (タンパク質)及び配列番号105 (DNA)
MEFPGLGSLGTSEPLPQFVDPALVSSTPESGVFFPSGPEGLDAAASSTAPSTATAAAAALAYYRDAEAYRHSPVFQVYPLLNCMEGIPGGSPYAGWAYGKTGLYPASTVCPTREDSPPQAVEDLDGKGSTSFLETLKTERLSPDLLTLGPALPSSLPVPNSAYGGPDFSSTFFSPTGSPLNSAAYSSPKLRGTLPLPPCEARECVNCGATATPLWRRDRTGHYLCNACGLYHKMNGQNRPLIRPKKRLIVSKRAGTQCTNCQTTTTTLWRRNASGDPVCNACGLYYKLHQVNRPLTMRKDGIQTRNRKASGKGKKKRGSSLGGTGAAEGPAGGFMVVAGGSGSGNCGEVASGLTLGPPGTAHLYQGLGPVVLSGPVSHLMPFPGPLLGSPTGSFPTGPMPPTTSTTVVAPLSS (配列番号41)
atggagttccctggcctggggtccctggggacctcagagcccctcccccagtttgtggatcctgctctggtgtcctccacaccagaatcaggggttttcttcccctctgggcctgagggcttggatgcagcagcttcctccactgccccgagcacagccaccgctgcagctgcggcactggcctactacagggacgctgaggcctacagacactccccagtctttcaggtgtacccattgctcaactgtatggaggggatcccagggggctcaccatatgccggctgggcctacggcaagacggggctctaccctgcctcaactgtgtgtcccacccgcgaggactctcctccccaggccgtggaagatctggatggaaaaggcagcaccagcttcctggagactttgaagacagagcggctgagcccagacctcctgaccctgggacctgcactgccttcatcactccctgtccccaatagtgcttatgggggccctgacttttccagtaccttcttttctcccaccgggagccccctcaattcagcagcctattcctctcccaagcttcgtggaactctccccctgcctccctgtgaggccagggagtgtgtgaactgcggagcaacagccactccactgtggcggagggacaggacaggccactacctatgcaacgcctgcggcctctatcacaagatgaatgggcagaacaggcccctcatccggcccaagaagcgcctgattgtcagtaaacgggcaggtactcagtgcaccaactgccagacgaccaccacgacactgtggcggagaaatgccagtggggatcccgtgtgcaatgcctgcggcctctactacaagctacaccaggtgaaccggccactgaccatgcggaaggatggtattcagactcgaaaccgcaaggcatctggaaaagggaaaaagaaacggggctccagtctgggaggcacaggagcagccgaaggaccagctggtggctttatggtggtggctgggggcagcggtagcgggaattgtggggaggtggcttcaggcctgacactgggccccccaggtactgcccatctctaccaaggcctgggccctgtggtgctgtcagggcctgttagccacctcatgcctttccctggacccctactgggctcacccacgggctccttccccacaggccccatgccccccaccaccagcactactgtggtggctccgctcagctcatga (配列番号105)
ヒト Fli-1 proto-oncogene, ETS transcription factor (FLI1) (NM_002017) 配列番号42 (タンパク質)及び配列番号106 (DNA)
MDGTIKEALSVVSDDQSLFDSAYGAAAHLPKADMTASGSPDYGQPHKINPLPPQQEWINQPVRVNVKREYDHMNGSRESPVDCSVSKCSKLVGGGESNPMNYNSYMDEKNGPPPPNMTTNERRVIVPADPTLWTQEHVRQWLEWAIKEYSLMEIDTSFFQNMDGKELCKMNKEDFLRATTLYNTEVLLSHLSYLRESSLLAYNTTSHTDQSSRLSVKEDPSYDSVRRGAWGNNMNSGLNKSPPLGGAQTISKNTEQRPQPDPYQILGPTSSRLANPGSGQIQLWQFLLELLSDSANASCITWEGTNGEFKMTDPDEVARRWGERKSKPNMNYDKLSRALRYYYDKNIMTKVHGKRYAYKFDFHGIAQALQPHPTESSMYKYPSDISYMPSYHAHQQKVNFVPPHPSSMPVTSSSFFGAASQYWTSPTGGIYPNPNVPRHPNTHVPSHLGSYY (配列番号42)
atggacgggactattaaggaggctctgtcggtggtgagcgacgaccagtccctctttgactcagcgtacggagcggcagcccatctccccaaggccgacatgactgcctcggggagtcctgactacgggcagccccacaagatcaaccccctcccaccacagcaggagtggatcaatcagccagtgagggtcaacgtcaagcgggagtatgaccacatgaatggatccagggagtctccggtggactgcagcgttagcaaatgcagcaagctggtgggcggaggcgagtccaaccccatgaactacaacagctatatggacgagaagaatggcccccctcctcccaacatgaccaccaacgagaggagagtcatcgtccccgcagaccccacactgtggacacaggagcatgtgaggcaatggctggagtgggccataaaggagtacagcttgatggagatcgacacatcctttttccagaacatggatggcaaggaactgtgtaaaatgaacaaggaggacttcctccgcgccaccaccctctacaacacggaagtgctgttgtcacacctcagttacctcagggaaagttcactgctggcctataatacaacctcccacaccgaccaatcctcacgattgagtgtcaaagaagacccttcttatgactcagtcagaagaggagcttggggcaataacatgaattctggcctcaacaaaagtcctccccttggaggggcacaaacgatcagtaagaatacagagcaacggccccagccagatccgtatcagatcctgggcccgaccagcagtcgcctagccaaccctggaagcgggcagatccagctgtggcaattcctcctggagctgctctccgacagcgccaacgccagctgtatcacctgggaggggaccaacggggagttcaaaatgacggaccccgatgaggtggccaggcgctggggcgagcggaaaagcaagcccaacatgaattacgacaagctgagccgggccctccgttattactatgataaaaacattatgaccaaagtgcacggcaaaagatatgcttacaaatttgacttccacggcattgcccaggctctgcagccacatccgaccgagtcgtccatgtacaagtacccttctgacatctcctacatgccttcctaccatgcccaccagcagaaggtgaactttgtccctccccatccatcctccatgcctgtcacttcctccagcttctttggagccgcatcacaatactggacctcccccacggggggaatctaccccaaccccaacgtcccccgccatcctaacacccacgtgccttcacacttaggcagctactactag (配列番号106)
ヒト erythroid Kruppel-like factor EKLF gene (U37106) 配列番号43 (タンパク質)及び配列番号107 (DNA)
MATAETALPSISTLTALGPFPDTQDDFLKWWRSEEAQDMGPGPPDPTEPPLHVKSEDQPGEEEDDERGADATWDLDLLLTNFSGPEPGGAPQTCALAPSEASGAQYPPPPETLGAYAGGPGLVAGLLGSEDHSGWVRPALRARAPDAFVGPALAPAPAPEPKALALQPVYPGPGAGSSGGYFPRTGLSVPAASGAPYGLLSGYPAMYPAPQYQGHFQLFRGLQGPAPGPATSPSFLSCLGPGTVGTGLGGTAEDPGVIAETAPSKRGRRSWARKRQAAHTCAHPGCGKSYTKSSHLKAHLRTHTGEKPYACTWEGCGWRFARSDELTRHYRKHTGQRPFRCQLCPRAFSRSDHLALHMKRHL (配列番号43)
atggccacagccgagaccgccttgccctccatcagcacactgaccgccctgggccccttcccggacacacaggatgacttcctcaagtggtggcgctccgaagaggcgcaggacatgggcccgggtcctcctgaccccacggagccgcccctccacgtgaagtctgaggaccagcccggggaggaagaggacgatgagaggggcgcggacgccacctgggacctggatctcctcctcaccaacttctcgggcccggagcccggtggcgcgccccagacctgcgctctggcgcccagcgaggcctccggggcgcaatatccgccgccgcccgagactctgggcgcatatgctggcggcccggggctggtggctgggcttttgggttcggaggatcactcgggttgggtgcgccctgccctgcgagcccgggctcccgacgccttcgtgggcccagccctggctccagccccggcccccgagcccaaggcgctggcgctgcaaccggtgtacccggggcccggcgccggctcctcgggtggctacttcccgcggaccgggctttcagtgcctgcggcgtcgggcgccccctacgggctactgtccgggtaccccgcgatgtacccggcgcctcagtaccaagggcacttccagctcttccgcgggctccagggacccgcgcccggtcccgccacgtccccctccttcctgagttgtttgggacccgggacggtgggcactggactcggggggactgcagaggatccaggtgtgatagccgagaccgcgccatccaagcgaggccgacgttcgtgggcgcgcaagaggcaggcagcgcacacgtgcgcgcacccgggttgcggcaagagctacaccaagagctcccacctgaaggcgcatctgcgcacgcacacaggggagaagccatacgcctgcacgtgggaaggctgcggctggagattcgcgcgctcggacgagctgacccgccactaccggaaacacacggggcagcgccccttccgctgccagctctgcccacgtgctttttcgcgctctgaccacctggccttgcacatgaagcgccacctttga (配列番号107)
ヒト MyoD (X56677) 配列番号44 (タンパク質)及び配列番号108 (DNA)
MELLSPPLRDVDLTAPDGSLCSFATTDDFYDDPCFDSPDLRFFEDLDPRLMHVGALLKPEEHSHFPAAVHPAPGAREDEHVRAPSGHHQAGRCLLWACKACKRKTTNADRRKAATMRERRRLSKVNEAFETLKRCTSSNPNQRLPKVEILRNAIRYIEGLQALLRDQDAAPPGAAAFYAPGPLPPGRGGEHYSGDSDASSPRSNCSDGMMDYSGPPSGARRRNCYEGAYYNEAPSEPRPGKSAAVSSLDYLSSIVERISTESPAAPALLLADVPSESPPRRQEAAAPSEGESSGDPTQSPDAAPQCPAGANPNPIYQVL (配列番号44)
atggagctactgtcgccaccgctccgcgacgtagacctgacggcccccgacggctctctctgctcctttgccacaacggacgacttctatgacgacccgtgtttcgactccccggacctgcgcttcttcgaagacctggacccgcgcctgatgcacgtgggcgcgctcctgaaacccgaagagcactcgcacttccccgcggcggtgcacccggccccgggcgcacgtgaggacgagcatgtgcgcgcgcccagcgggcaccaccaggcgggccgctgcctactgtgggcctgcaaggcgtgcaagcgcaagaccaccaacgccgaccgccgcaaggccgccaccatgcgcgagcggcgccgcctgagcaaagtaaatgaggcctttgagacactcaagcgctgcacgtcgagcaatccaaaccagcggttgcccaaggtggagatcctgcgcaacgccatccgctatatcgagggcctgcaggctctgctgcgcgaccaggacgccgcgccccctggcgcagccgccttctatgcgccgggcccgctgcccccgggccgcggcggcgagcactacagcggcgactccgacgcgtccagcccgcgctccaactgctccgacggcatgatggactacagcggccccccgagcggcgcccggcggcggaactgctacgaaggcgcctactacaacgaggcgcccagcgaacccaggcccgggaagagtgcggcggtgtcgagcctagactacctgtccagcatcgtggagcgcatctccaccgagagccctgcggcgcccgccctcctgctggcggacgtgccttctgagtcgcctccgcgcaggcaagaggctgccgcccccagcgagggagagagcagcggcgaccccacccagtcaccggacgccgccccgcagtgccctgcgggtgcgaaccccaacccgatataccaggtgctctga (配列番号108)
ヒト NGFI-A binding protein 2 (EGR1 binding protein 2)(NAB2) (NM_005967) 配列番号45 (タンパク質)及び配列番号109 (DNA)
MHRAPSPTAEQPPGGGDSARRTLQPRLKPSARAMALPRTLGELQLYRVLQRANLLSYYETFIQQGGDDVQQLCEAGEEEFLEIMALVGMATKPLHVRRLQKALREWATNPGLFSQPVPAVPVSSIPLFKISETAGTRKGSMSNGHGSPGEKAGSARSFSPKSPLELGEKLSPLPGGPGAGDPRIWPGRSTPESDVGAGGEEEAGSPPFSPPAGGGVPEGTGAGGLAAGGTGGGPDRLEPEMVRMVVESVERIFRSFPRGDAGEVTSLLKLNKKLARSVGHIFEMDDNDSQKEEEIRKYSIIYGRFDSKRREGKQLSLHELTINEAAAQFCMRDNTLLLRRVELFSLSRQVARESTYLSSLKGSRLHPEELGGPPLKKLKQEVGEQSHPEIQQPPPGPESYVPPYRPSLEEDSASLSGESLDGHLQAVGSCPRLTPPPADLPLALPAHGLWSRHILQQTLMDEGLRLARLVSHDRVGRLSPCVPAKPPLAEFEEGLLDRCPAPGPHPALVEGRRSSVKVEAEASRQ (配列番号45)
atgcacagagcgccttcccccacagccgagcagccgccgggcggaggggacagcgcccgccggaccctgcagcccagactcaagcccagtgcccgagccatggcactgcctcggacgctgggggagctgcagctgtaccgggtcctgcagcgcgccaacctcctttcctactatgagaccttcatccagcagggaggggacgacgtgcagcagctgtgtgaggcgggtgaggaggagtttctggagatcatggcacttgtgggcatggccaccaagcccctccatgtccggcgcctgcagaaggcactgagagagtgggccaccaatccagggctcttcagtcaaccagtgcctgctgttcccgtctccagcatcccgctcttcaagatctctgagactgcgggtacccggaaagggagcatgagcaatgggcatggcagcccaggggaaaaggcaggcagtgcccgcagttttagccccaagagcccccttgaacttggagagaagctatcaccactgcctgggggacctggggcaggggacccccggatctggccaggccggagcactccagagtcggacgttggggcaggaggagaagaggaggctggctcgccccccttctccccccctgcagggggaggagtccctgaggggactggggctggggggctggcagcaggtgggactgggggtggtccagaccgactggagccagagatggtacgcatggtggtggaaagtgtggagaggatcttccggagcttcccaaggggggatgctggggaggtcacatccctgctaaagctgaataagaagctggcacggagcgttgggcacatctttgagatggatgataatgacagccagaaggaagaggagatccgcaaatacagcatcatctatggccgtttcgactctaagcggcgggagggcaagcagctcagcctgcacgagctcaccatcaacgaggctgctgcccagttctgcatgagggacaacacgctcttattacggagagtggagctcttctctttgtcccgccaagtagcccgagagagcacctacttgtcctccttgaagggctccaggcttcaccctgaagaactgggaggccctccactgaagaagctgaaacaagaggttggagaacagagtcaccctgaaatccagcagcctcccccaggccctgagtcctatgtacccccataccgccccagcctggaggaggacagcgccagcctgtctggggagagtctggatggacatttgcaggctgtggggtcatgtccaaggctgacgccgccccctgctgacctgcctctggcattgccagcccatgggctatggagccgacacatcctgcagcagacactgatggacgaggggctgcggctcgcccgcctcgtctcccacgaccgcgtgggccgcctcagcccctgtgtgcctgcgaagccacctctcgcagagttcgaggaagggctgctggacagatgtcctgccccaggaccccatcccgcgctggtggagggtcgcaggagcagcgtgaaagtggaggctgaggccagccggcagtga (配列番号109)
ヒト early growth response 1 (EGR1) (NM_001964) 配列番号46 (タンパク質)及び配列番号110 (DNA)
MAAAKAEMQLMSPLQISDPFGSFPHSPTMDNYPKLEEMMLLSNGAPQFLGAAGAPEGSGSNSSSSSSGGGGGGGGGSNSSSSSSTFNPQADTGEQPYEHLTAESFPDISLNNEKVLVETSYPSQTTRLPPITYTGRFSLEPAPNSGNTLWPEPLFSLVSGLVSMTNPPASSSSAPSPAASSASASQSPPLSCAVPSNDSSPIYSAAPTFPTPNTDIFPEPQSQAFPGSAGTALQYPPPAYPAAKGGFQVPMIPDYLFPQQQGDLGLGTPDQKPFQGLESRTQQPSLTPLSTIKAFATQSGSQDLKALNTSYQSQLIKPSRMRKYPNRPSKTPPHERPYACPVESCDRRFSRSDELTRHIRIHTGQKPFQCRICMRNFSRSDHLTTHIRTHTGEKPFACDICGRKFARSDERKRHTKIHLRQKDKKADKSVVASSATSSLSSYPSPVATSYPSPVTTSYPSPATTSYPSPVPTSFSSPGSSTYPSPVHSGFPSPSVATTYSSVPPAFPAQVSSFPSSAVTNSFSASTGLSDMTATFSPRTIEIC (配列番号46)
atggccgcggccaaggccgagatgcagctgatgtccccgctgcagatctctgacccgttcggatcctttcctcactcgcccaccatggacaactaccctaagctggaggagatgatgctgctgagcaacggggctccccagttcctcggcgccgccggggccccagagggcagcggcagcaacagcagcagcagcagcagcgggggcggtggaggcggcgggggcggcagcaacagcagcagcagcagcagcaccttcaaccctcaggcggacacgggcgagcagccctacgagcacctgaccgcagagtcttttcctgacatctctctgaacaacgagaaggtgctggtggagaccagttaccccagccaaaccactcgactgccccccatcacctatactggccgcttttccctggagcctgcacccaacagtggcaacaccttgtggcccgagcccctcttcagcttggtcagtggcctagtgagcatgaccaacccaccggcctcctcgtcctcagcaccatctccagcggcctcctccgcctccgcctcccagagcccacccctgagctgcgcagtgccatccaacgacagcagtcccatttactcagcggcacccaccttccccacgccgaacactgacattttccctgagccacaaagccaggccttcccgggctcggcagggacagcgctccagtacccgcctcctgcctaccctgccgccaagggtggcttccaggttcccatgatccccgactacctgtttccacagcagcagggggatctgggcctgggcaccccagaccagaagcccttccagggcctggagagccgcacccagcagccttcgctaacccctctgtctactattaaggcctttgccactcagtcgggctcccaggacctgaaggccctcaataccagctaccagtcccagctcatcaaacccagccgcatgcgcaagtaccccaaccggcccagcaagacgcccccccacgaacgcccttacgcttgcccagtggagtcctgtgatcgccgcttctcccgctccgacgagctcacccgccacatccgcatccacacaggccagaagcccttccagtgccgcatctgcatgcgcaacttcagccgcagcgaccacctcaccacccacatccgcacccacacaggcgaaaagcccttcgcctgcgacatctgtggaagaaagtttgccaggagcgatgaacgcaagaggcataccaagatccacttgcggcagaaggacaagaaagcagacaaaagtgttgtggcctcttcggccacctcctctctctcttcctacccgtccccggttgctacctcttacccgtccccggttactacctcttatccatccccggccaccacctcatacccatcccctgtgcccacctccttctcctctcccggctcctcgacctacccatcccctgtgcacagtggcttcccctccccgtcggtggccaccacgtactcctctgttccccctgctttcccggcccaggtcagcagcttcccttcctcagctgtcaccaactccttcagcgcctccacagggctttcggacatgacagcaaccttttctcccaggacaattgaaatttgctaa (配列番号110)
ヒト growth factor independent 1 transcription repressor(GFI1) (NM_005263) 配列番号47 (タンパク質)及び配列番号111 (DNA)
MPRSFLVKSKKAHSYHQPRSPGPDYSLRLENVPAPSRADSTSNAGGAKAEPRDRLSPESQLTEAPDRASASPDSCEGSVCERSSEFEDFWRPPSPSASPASEKSMCPSLDEAQPFPLPFKPYSWSGLAGSDLRHLVQSYRPCGALERGAGLGLFCEPAPEPGHPAALYGPKRAAGGAGAGAPGSCSAGAGATAGPGLGLYGDFGSAAAGLYERPTAAAGLLYPERGHGLHADKGAGVKVESELLCTRLLLGGGSYKCIKCSKVFSTPHGLEVHVRRSHSGTRPFACEMCGKTFGHAVSLEQHKAVHSQERSFDCKICGKSFKRSSTLSTHLLIHSDTRPYPCQYCGKRFHQKSDMKKHTFIHTGEKPHKCQVCGKAFSQSSNLITHSRKHTGFKPFGCDLCGKGFQRKVDLRRHRETQHGLK (配列番号47)
atgccgcgctcatttctcgtcaaaagcaagaaggctcacagctaccaccagccgcgctccccaggaccagactattccctccgtttagagaatgtaccggcgcctagccgagcagacagcacttcaaatgcaggcggggcgaaggcggagccccgggaccgtttgtcccccgaatcgcagctgaccgaagccccagacagagcctccgcatccccagacagctgcgaaggcagcgtctgcgaacggagctcggagtttgaggacttctggaggcccccgtcaccctccgcgtctccagcctcggagaagtcaatgtgcccatcgctggacgaagcccagcccttccccctgcctttcaaaccgtactcatggagcggcctggcgggttctgacctgcggcacctggtgcagagctaccgaccgtgtggggccctggagcgtggcgctggcctgggcctcttctgcgaacccgccccggagcctggccacccggccgcgctgtacggcccgaagcgggctgccggcggcgcgggggccggggcgccagggagctgcagcgcaggggccggtgccaccgctggccctggcctagggctctacggcgacttcgggtctgcggcagccgggctgtatgagaggcccacggcagcggcgggcttgctgtaccccgagcgtggccacgggctgcacgcagacaagggcgctggcgtcaaggtggagtcggagctgctgtgcacccgcctgctgctgggcggcggctcctacaagtgcatcaagtgcagcaaggtgttctccacgccgcacgggctcgaggtgcacgtgcgcaggtcccacagcggtaccagaccctttgcctgcgagatgtgcggcaagaccttcgggcacgcggtgagcctggagcagcacaaagccgtgcactcgcaggaacggagctttgactgtaagatctgtgggaagagcttcaagaggtcatccacactgtccacacacctgcttatccactcagacactcggccctacccctgtcagtactgtggcaagaggttccaccagaagtcagacatgaagaaacacactttcatccacactggtgagaagcctcacaagtgccaggtgtgcggcaaggcattcagccagagctccaacctcatcacccacagccgcaaacacacaggcttcaagcccttcggctgcgacctctgtgggaagggtttccagaggaaggtggacctccgaaggcaccgggagacgcagcatgggctcaaatga (配列番号111)
ヒト paired box 5 (PAX5) (NM_016734) 配列番号48 (タンパク質)及び配列番号112(DNA)
MDLEKNYPTPRTSRTGHGGVNQLGGVFVNGRPLPDVVRQRIVELAHQGVRPCDISRQLRVSHGCVSKILGRYYETGSIKPGVIGGSKPKVATPKVVEKIAEYKRQNPTMFAWEIRDRLLAERVCDNDTVPSVSSINRIIRTKVQQPPNQPVPASSHSIVSTGSVTQVSSVSTDSAGSSYSISGILGITSPSADTNKRKRDEGIQESPVPNGHSLPGRDFLRKQMRGDLFTQQQLEVLDRVFERQHYSDIFTTTEPIKPEQTTEYSAMASLAGGLDDMKANLASPTPADIGSSVPGPQSYPIVTGRDLASTTLPGYPPHVPPAGQGSYSAPTLTGMVPGSEFSGSPYSHPQYSSYNDSWRFPNPGLLGSPYYYSAAARGAAPPAAATAYDRH (配列番号48)
atggatttagagaaaaattatccgactcctcggaccagcaggacaggacatggaggagtgaatcagcttgggggggtttttgtgaatggacggccactcccggatgtagtccgccagaggatagtggaacttgctcatcaaggtgtcaggccctgcgacatctccaggcagcttcgggtcagccatggttgtgtcagcaaaattcttggcaggtattatgagacaggaagcatcaagcctggggtaattggaggatccaaaccaaaggtcgccacacccaaagtggtggaaaaaatcgctgaatataaacgccaaaatcccaccatgtttgcctgggagatcagggaccggctgctggcagagcgggtgtgtgacaatgacaccgtgcctagcgtcagttccatcaacaggatcatccggacaaaagtacagcagccacccaaccaaccagtcccagcttccagtcacagcatagtgtccactggctccgtgacgcaggtgtcctcggtgagcacggattcggccggctcgtcgtactccatcagcggcatcctgggcatcacgtcccccagcgccgacaccaacaagcgcaagagagacgaaggtattcaggagtctccggtgccgaacggccactcgcttccgggcagagacttcctccggaagcagatgcggggagacttgttcacacagcagcagctggaggtgctggaccgcgtgtttgagaggcagcactactcagacatcttcaccaccacagagcccatcaagcccgagcagaccacagagtattcagccatggcctcgctggctggtgggctggacgacatgaaggccaatctggccagccccacccctgctgacatcgggagcagtgtgccaggcccgcagtcctaccccattgtgacaggccgtgacttggcgagcacgaccctccccgggtaccctccacacgtcccccccgctggacagggcagctactcagcaccgacgctgacagggatggtgcctgggagtgagttttccgggagtccctacagccaccctcagtattcctcgtacaacgactcctggaggttccccaacccggggctgcttggctccccctactattatagcgctgccgcccgaggagccgccccacctgcagccgccactgcctatgaccgtcactga (配列番号112)
ヒト T-cell-specific T-box transcription factor T-bet mRNA (AF241243) 配列番号49 (タンパク質)及び配列番号113 (DNA)
MGIVEPGCGDMLTGTEPMPGSDEGRAPGADPQHRYFYPEPGAQDADERRGGGSLGSPYPGGALVPAPPSRFLGAYAYPPRPQAAGFPGAGESFPPPADAEGYQPGEGYAAPDPRAGLYPGPREDYALPAGLEVSGKLRVALNNHLLWSKFNQHQTEMIITKQGRRMFPFLSFTVAGLEPTSHYRMFVDVVLVDQHHWRYQSGKWVQCGKAEGSMPGNRLYVHPDSPNTGAHWMRQEVSFGKLKLTNNKGASNNVTQMIVLQSLHKYQPRLHIVEVNDGEPEAACNASNTHIFTFQETQFIAVTAYQNAEITQLKIDNNPFAKGFRENFESMYTSVDTSIPSPPGPNCQFLGGDHYSPLLPNQYPVPSRFYPDLPGQAKDVVPQAYWLGAPRDHSYEAEFRAVSMKPAFLPSAPGPTMSYYRGQEVLAPGAGWPVAPQYPPKMGPASWFRPMRTLPMEPGPGGSEGRGPEDQGPPLVWTEIAPIRPESSDSGLGEGDSKRRRVSPYPSSGDSSSPAGAPSPFDKEAEGQFYNYFPN (配列番号49)
atgggcatcgtggagccgggttgcggagacatgctgacgggcaccgagccgatgccggggagcgacgagggccgggcgcctggcgccgacccgcagcaccgctacttctacccggagccgggcgcgcaggacgcggacgagcgtcgcgggggcggcagcctggggtctccctacccggggggcgccttggtgcccgccccgccgagccgcttccttggagcctacgcctacccgccgcgaccccaggcggccggcttccccggcgcgggcgagtccttcccgccgcccgcggacgccgagggctaccagccgggcgagggctacgccgccccggacccgcgcgccgggctctacccggggccgcgtgaggactacgcgctacccgcgggactggaggtgtcggggaaactgagggtcgcgctcaacaaccacctgttgtggtccaagtttaatcagcaccagacagagatgatcatcaccaagcagggacggcggatgttcccattcctgtcatttactgtggccgggctggagcccaccagccactacaggatgtttgtggacgtggtcttggtggaccagcaccactggcggtaccagagcggcaagtgggtgcagtgtggaaaggccgagggcagcatgccaggaaaccgcctgtacgtccacccggactcccccaacacaggagcgcactggatgcgccaggaagtttcatttgggaaactaaagctcacaaacaacaagggggcgtccaacaatgtgacccagatgattgtgctccagtccctccataagtaccagccccggctgcatatcgttgaggtgaacgacggagagccagaggcagcctgcaacgcttccaacacgcatatctttactttccaagaaacccagttcattgccgtgactgcctaccagaatgccgagattactcagctgaaaattgataataacccctttgccaaaggattccgggagaactttgagtccatgtacacatctgttgacaccagcatcccctccccgcctggacccaactgtcaattccttgggggagatcactactctcctctcctacccaaccagtatcctgttcccagccgcttctaccccgaccttcctggccaggcgaaggatgtggttccccaggcttactggctgggggccccccgggaccacagctatgaggctgagtttcgagcagtcagcatgaagcctgcattcttgccctctgcccctgggcccaccatgtcctactaccgaggccaggaggtcctggcacctggagctggctggcctgtggcaccccagtaccctcccaagatgggcccggccagctggttccgccctatgcggactctgcccatggaacccggccctggaggctcagagggacggggaccagaggaccagggtccccccttggtgtggactgagattgcccccatccggccggaatccagtgattcaggactgggcgaaggagactctaagaggaggcgcgtgtccccctatccttccagtggtgacagctcctcccctgctggggccccttctccttttgataaggaagctgaaggacagttttataactattttcccaactga (配列番号113)
ヒト GATA binding protein 3 (GATA3) (NM_001002295) 配列番号50 (タンパク質)及び配列番号114 (DNA)
MEVTADQPRWVSHHHPAVLNGQHPDTHHPGLSHSYMDAAQYPLPEEVDVLFNIDGQGNHVPPYYGNSVRATVQRYPPTHHGSQVCRPPLLHGSLPWLDGGKALGSHHTASPWNLSPFSKTSIHHGSPGPLSVYPPASSSSLSGGHASPHLFTFPPTPPKDVSPDPSLSTPGSAGSARQDEKECLKYQVPLPDSMKLESSHSRGSMTALGGASSSTHHPITTYPPYVPEYSSGLFPPSSLLGGSPTGFGCKSRPKARSSTEGRECVNCGATSTPLWRRDGTGHYLCNACGLYHKMNGQNRPLIKPKRRLSAARRAGTSCANCQTTTTTLWRRNANGDPVCNACGLYYKLHNINRPLTMKKEGIQTRNRKMSSKSKKCKKVHDSLEDFPKNSSFNPAALSRHMSSLSHISPFSHSSHMLTTPTPMHPPSSLSFGPHHPSSMVTAMG (配列番号50)
atggaggtgacggcggaccagccgcgctgggtgagccaccaccaccccgccgtgctcaacgggcagcacccggacacgcaccacccgggcctcagccactcctacatggacgcggcgcagtacccgctgccggaggaggtggatgtgctttttaacatcgacggtcaaggcaaccacgtcccgccctactacggaaactcggtcagggccacggtgcagaggtaccctccgacccaccacgggagccaggtgtgccgcccgcctctgcttcatggatccctaccctggctggacggcggcaaagccctgggcagccaccacaccgcctccccctggaatctcagccccttctccaagacgtccatccaccacggctccccggggcccctctccgtctaccccccggcctcgtcctcctccttgtcggggggccacgccagcccgcacctcttcaccttcccgcccaccccgccgaaggacgtctccccggacccatcgctgtccaccccaggctcggccggctcggcccggcaggacgagaaagagtgcctcaagtaccaggtgcccctgcccgacagcatgaagctggagtcgtcccactcccgtggcagcatgaccgccctgggtggagcctcctcgtcgacccaccaccccatcaccacctacccgccctacgtgcccgagtacagctccggactcttcccccccagcagcctgctgggcggctcccccaccggcttcggatgcaagtccaggcccaaggcccggtccagcacagaaggcagggagtgtgtgaactgtggggcaacctcgaccccactgtggcggcgagatggcacgggacactacctgtgcaacgcctgcgggctctatcacaaaatgaacggacagaaccggcccctcattaagcccaagcgaaggctgtctgcagccaggagagcagggacgtcctgtgcgaactgtcagaccaccacaaccacactctggaggaggaatgccaatggggaccctgtctgcaatgcctgtgggctctactacaagcttcacaatattaacagacccctgactatgaagaaggaaggcatccagaccagaaaccgaaaaatgtctagcaaatccaaaaagtgcaaaaaagtgcatgactcactggaggacttccccaagaacagctcgtttaacccggccgccctctccagacacatgtcctccctgagccacatctcgcccttcagccactccagccacatgctgaccacgcccacgccgatgcacccgccatccagcctgtcctttggaccacaccacccctccagcatggtcaccgccatgggttag (配列番号114)
ヒト FOXP3 (EF534714) 配列番号51 (タンパク質)及び配列番号115 (DNA)
MPNPRPGKPSAPSLALGPSPGASPSWRAAPKASDLLGARGPGGTFQGRDLRGGAHASSSSLNPMPPSQLQLPTLPLVMVAPSGARLGPLPHLQALLQDRPHFMHQLSTVDAHARTPVLQVHPLESPAMISLTPPTTATGVFSLKARPGLPPGINVASLEWVSREPALLCTFPNPSAPRKDSTLSAVPQSSYPLLANGVCKWPGCEKVFEEPEDFLKHCQADHLLDEKGRAQCLLQREMVQSLEQQLVLEKEKLSAMQAHLAGKMALTKASSVASSDKGSCCIVAAGSQGPVVPAWSGPREAPDSLFAVRRHLWGSHGNSTFPEFLHNMDYFKFHNMRPPFTYATLIRWAILEAPEKQRTLNEIYHWFTRMFAFFRNHPATWKNAIRHNLSLHKCFVRVESEKGAVWTVDELEFRKKRSQRPSRCSNPTPGP (配列番号51)
atgcccaaccccaggcctggcaagccctcggccccttccttggcccttggcccatccccaggagcctcgcccagctggagggctgcacccaaagcctcagacctgctgggggcccggggcccagggggaaccttccagggccgagatcttcgaggcggggcccatgcctcctcttcttccttgaaccccatgccaccatcgcagctgcagctgcccacactgcccctagtcatggtggcaccctccggggcacggctgggccccttgccccacttacaggcactcctccaggacaggccacatttcatgcaccagctctcaacggtggatgcccacgcccggacccctgtgctgcaggtgcaccccctggagagcccagccatgatcagcctcacaccacccaccaccgccactggggtcttctccctcaaggcccggcctggcctcccacctgggatcaacgtggccagcctggaatgggtgtccagggagccggcactgctctgcaccttcccaaatcccagtgcacccaggaaggacagcaccctttcggctgtgccccagagctcctacccactgctggcaaatggtgtctgcaagtggcccggatgtgagaaggtcttcgaagagccagaggacttcctcaagcactgccaggcggaccatcttctggatgagaagggcagggcacaatgtctcctccagagagagatggtacagtctctggagcagcagctggtgctggagaaggagaagctgagtgccatgcaggcccacctggctgggaaaatggcactgaccaaggcttcatctgtggcatcatccgacaagggctcctgctgcatcgtagctgctggcagccaaggccctgtcgtcccagcctggtctggcccccgggaggcccctgacagcctgtttgctgtccggaggcacctgtggggtagccatggaaacagcacattcccagagttcctccacaacatggactacttcaagttccacaacatgcgaccccctttcacctacgccacgctcatccgctgggccatcctggaggctccagagaagcagcggacactcaatgagatctaccactggttcacacgcatgtttgccttcttcagaaaccatcctgccacctggaagaacgccatccgccacaacctgagtctgcacaagtgctttgtgcgggtggagagcgagaagggggctgtgtggaccgtggatgagctggagttccgcaagaaacggagccagaggcccagcaggtgttccaaccctacacctggcccctga (配列番号115)
ヒト orphan receptor ROR gamma (U16997) 配列番号52 (タンパク質)及び配列番号116 (DNA)
MDRAPQRQHRASRELLAAKKTHTSQIEVIPCKICGDKSSGIHYGVITCEGCKGFFRRSQRCNAAYSCTRQQNCPIDRTSRNRCQHCRLQKCLALGMSRDAVKFGRMSKKQRDSLHAEVQKQLQQRQQQQQEPVVKTPPAGAQGADTLTYTLGLPDGQLPLGSSPDLPEASACPPGLLKASGSGPSYSNNLAKAGLNGASCHLEYSPERGKAEGRESFYSTGSQLTPDRCGLRFEEHRHPGLGELGQGPDSYGSPSFRSTPEAPYASLTEIEHLVQSVCKSYRETCQLRLEDLLRQRSNIFSREEVTGYQRKSMWEMWERCAHHLTEAIQYVVEFAKRLSGFMELCQNDQIVLLKAGAMEVVLVRMCRAYNADNRTVFFEGKYGGMELFRALGCSELISSIFDFSHSLSALHFSEDEIALYTALVLINAHRPGLQEKRKVEQLQYNLELAFHHHLCKTHRQSILAKLPPKGKLRSLCSQHVERLQIFQHLHPIVVQAAFPPLYKELFSTETESPVGCPSDLEEGLLASPYGLLATSLDPVPPSPFSFPMNPGGWSPPALWK (配列番号52)
atggacagggccccacagagacagcaccgagcctcacgggagctgctggctgcaaagaagacccacacctcacaaattgaagtgatcccttgcaaaatctgtggggacaagtcgtctgggatccactacggggttatcacctgtgaggggtgcaagggcttcttccgccggagccagcgctgtaacgcggcctactcctgcacccgtcagcagaactgccccatcgaccgcaccagccgaaaccgatgccagcactgccgcctgcagaaatgcctggcgctggggatgtcccgagatgctgtcaagttcggccgcatgtccaagaagcagagggacagcctgcatgcagaagtgcagaaacagctgcagcagcggcaacagcagcaacaggaaccagtggtcaagacccctccagcaggggcccaaggagcagataccctcacctacaccttggggctcccagacgggcagctgcccctgggctcctcgcctgacctgcctgaggcttctgcctgtccccctggcctcctgaaagcctcaggctctgggccctcatattccaacaacttggccaaggcagggctcaatggggcctcatgccaccttgaatacagccctgagcggggcaaggctgagggcagagagagcttctatagcacaggcagccagctgacccctgaccgatgtggacttcgttttgaggaacacaggcatcctgggcttggggaactgggacagggcccagacagctacggcagccccagtttccgcagcacaccggaggcaccctatgcctccctgacagagatagagcacctggtgcagagcgtctgcaagtcctacagggagacatgccagctgcggctggaggacctgctgcggcagcgctccaacatcttctcccgggaggaagtgactggctaccagaggaagtccatgtgggagatgtgggaacggtgtgcccaccacctcaccgaggccattcagtacgtggtggagttcgccaagaggctctcaggctttatggagctctgccagaatgaccagattgtgcttctcaaagcaggagcaatggaagtggtgctggttaggatgtgccgggcctacaatgctgacaaccgcacggtcttttttgaaggcaaatacggtggcatggagctgttccgagccttgggctgcagcgagctcatcagctccatctttgacttctcccactccctaagtgccttgcacttttccgaggatgagattgccctctacacagcccttgttctcatcaatgcccatcggccagggctccaagagaaaaggaaagtagaacagctgcagtacaatctggagctggcctttcatcatcatctctgcaagactcatcgccaaagcatcctggcaaagctgccacccaaggggaagcttcggagcctgtgtagccagcatgtggaaaggctgcagatcttccagcacctccaccccatcgtggtccaagccgctttccctccactctacaaggagctcttcagcactgaaaccgagtcacctgtgggctgtccaagtgacctggaagagggactccttgcctctccctatggcctgctggccacctccctggaccccgttccaccctcacccttttcctttcccatgaaccctggagggtggtccccaccagctctttggaagtga (配列番号116)
ヒト hepatocyte nuclear factor 4, alpha (HNF4A), (NM_178849) 配列番号53 (タンパク質)及び配列番号117 (DNA)
MRLSKTLVDMDMADYSAALDPAYTTLEFENVQVLTMGNDTSPSEGTNLNAPNSLGVSALCAICGDRATGKHYGASSCDGCKGFFRRSVRKNHMYSCRFSRQCVVDKDKRNQCRYCRLKKCFRAGMKKEAVQNERDRISTRRSSYEDSSLPSINALLQAEVLSRQITSPVSGINGDIRAKKIASIADVCESMKEQLLVLVEWAKYIPAFCELPLDDQVALLRAHAGEHLLLGATKRSMVFKDVLLLGNDYIVPRHCPELAEMSRVSIRILDELVLPFQELQIDDNEYAYLKAIIFFDPDAKGLSDPGKIKRLRSQVQVSLEDYINDRQYDSRGRFGELLLLLPTLQSITWQMIEQIQFIKLFGMAKIDNLLQEMLLGGSPSDAPHAHHPLHPHLMQEHMGTNVIVANTMPTHLSNGQMSTPETPQPSPPGGSGSEPYKLLPGAVATIVKPLSAIPQPTITKQEVI (配列番号53)
atgcgactctccaaaaccctcgtcgacatggacatggccgactacagtgctgcactggacccagcctacaccaccctggaatttgagaatgtgcaggtgttgacgatgggcaatgacacgtccccatcagaaggcaccaacctcaacgcgcccaacagcctgggtgtcagcgccctgtgtgccatctgcggggaccgggccacgggcaaacactacggtgcctcgagctgtgacggctgcaagggcttcttccggaggagcgtgcggaagaaccacatgtactcctgcagatttagccggcagtgcgtggtggacaaagacaagaggaaccagtgccgctactgcaggctcaagaaatgcttccgggctggcatgaagaaggaagccgtccagaatgagcgggaccggatcagcactcgaaggtcaagctatgaggacagcagcctgccctccatcaatgcgctcctgcaggcggaggtcctgtcccgacagatcacctcccccgtctccgggatcaacggcgacattcgggcgaagaagattgccagcatcgcagatgtgtgtgagtccatgaaggagcagctgctggttctcgttgagtgggccaagtacatcccagctttctgcgagctccccctggacgaccaggtggccctgctcagagcccatgctggcgagcacctgctgctcggagccaccaagagatccatggtgttcaaggacgtgctgctcctaggcaatgactacattgtccctcggcactgcccggagctggcggagatgagccgggtgtccatacgcatccttgacgagctggtgctgcccttccaggagctgcagatcgatgacaatgagtatgcctacctcaaagccatcatcttctttgacccagatgccaaggggctgagcgatccagggaagatcaagcggctgcgttcccaggtgcaggtgagcttggaggactacatcaacgaccgccagtatgactcgcgtggccgctttggagagctgctgctgctgctgcccaccttgcagagcatcacctggcagatgatcgagcagatccagttcatcaagctcttcggcatggccaagattgacaacctgttgcaggagatgctgctgggagggtcccccagcgatgcaccccatgcccaccaccccctgcaccctcacctgatgcaggaacatatgggaaccaacgtcatcgttgccaacacaatgcccactcacctcagcaacggacagatgtccacccctgagaccccacagccctcaccgccaggtggctcagggtctgagccctataagctcctgccgggagccgtcgccacaatcgtcaagcccctctctgccatcccccagccgaccatcaccaagcaggaagttatctag (配列番号117)
ヒト signal transducer and activator of transcription Stat5A (U43185) 配列番号54 (タンパク質)及び配列番号118 (DNA)
MAGWIQAQQLQGDALRQMQVLYGQHFPIEVRHYLAQWIESQPWDAIDLDNPQDRAQATQLLEGLVQELQKKAEHQVGEDGFLLKIKLRHYATQLQKTYDRCPLELVRCIRHILYNEQRLVREANNCSSPAGILVDAMSQKHLQINQTFEELRLVTQDTENELKKLQQTQEYFIIQYQESLRIQAQFAQLAQLSPQERLSRETALQQKQVSLEAWLQREAQTLQQYRVELAEKHQKTLQLLRKQQTIILDDELIQWKRRQQLAGNGGPPEGSLDVLQSWCEKLAEIIWQNRQQIRRAEHLCQQLPIPGPVEEMLAEVNATITDIISALVTSTFIIEKQPPQVLKTQTKFAATVRLLVGGKLNVHMNPPQVKATIISEQQAKSLLKNENTRNECSGEILNNCCVMEYHQATGTLSAHFRNMSLKRIKRADRRGAESVTEEKFTVLFESQFSVGSNELVFQVKTLSLPVVVIVHGSQDHNATATVLWDNAFAEPGRVPFAVPDKVLWPQLCEALNMKFKAEVQSNRGLTKENLVFLAQKLFNNSSSHLEDYSGLSVSWSQFNRENLPGWNYTFWQWFDGVMEVLKKHHKPHWNDGAILGFVNKQQAHDLLINKPDGTFLLRFSDSEIGGITIAWKFDSPERNLWNLKPFTTRDFSIRSLADRLGDLSYLIYVFPDRPKDEVFSKYYTPVLAKAVDGYVKPQIKQVVPEFVNASADAGGSSATYMDQAPSPAVCPQAPYNMYPQNPDHVLDQDGEFDLDETMDVARHVEELLRRPMDSLDSRLSPPAGLFTSARGSLS (配列番号54)
atggcgggctggatccaggcccagcagctgcagggagacgcgctgcgccagatgcaggtgctgtacggccagcacttccccatcgaggtccggcactacttggcccagtggattgagagccagccatgggatgccattgacttggacaatccccaggacagagcccaagccacccagctcctggagggcctggtgcaggagctgcagaagaaggcggagcaccaggtgggggaagatgggtttttactgaagatcaagctgaggcactacgccacgcagctccagaaaacatatgaccgctgccccctggagctggtccgctgcatccggcacattctgtacaatgaacagaggctggtccgagaagccaacaattgcagctctccggctgggatcctggttgacgccatgtcccagaagcaccttcagatcaaccagacatttgaggagctgcgactggtcacgcaggacacagagaatgagctgaagaaactgcagcagactcaggagtacttcatcatccagtaccaggagagcctgaggatccaagctcagtttgcccagctggcccagctgagcccccaggagcgtctgagccgggagacggccctccagcagaagcaggtgtctctggaggcctggttgcagcgtgaggcacagacactgcagcagtaccgcgtggagctggccgagaagcaccagaagaccctgcagctgctgcggaagcagcagaccatcatcctggatgacgagctgatccagtggaagcggcggcagcagctggccgggaacggcgggccccccgagggcagcctggacgtgctacagtcctggtgtgagaagttggccgagatcatctggcagaaccggcagcagatccgcagggctgagcacctctgccagcagctgcccatccccggcccagtggaggagatgctggccgaggtcaacgccaccatcacggacattatctcagccctggtgaccagcacattcatcattgagaagcagcctcctcaggtcctgaagacccagaccaagtttgcagccaccgtacgcctgctggtgggcgggaagctgaacgtgcacatgaatcccccccaggtgaaggccaccatcatcagtgagcagcaggccaagtctctgcttaaaaatgagaacacccgcaacgagtgcagtggtgagatcctgaacaactgctgcgtgatggagtaccaccaagccacgggcaccctcagtgcccacttcaggaacatgtcactgaagaggatcaagcgtgctgaccggcggggtgcagagtccgtgacagaggagaagttcacagtcctgtttgagtctcagttcagtgttggcagcaatgagcttgtgttccaggtgaagactctgtccctacctgtggttgtcatcgtccacggcagccaggaccacaatgccacggctactgtgctgtgggacaatgcctttgctgagccgggcagggtgccatttgccgtgcctgacaaagtgctgtggccgcagctgtgtgaggcgctcaacatgaaattcaaggccgaagtgcagagcaaccggggcctgaccaaggagaacctcgtgttcctggcgcagaaactgttcaacaacagcagcagccacctggaggactacagtggcctgtccgtgtcctggtcccagttcaacagggagaacttgccgggctggaactacaccttctggcagtggtttgacggggtgatggaggtgttgaagaagcaccacaagccccactggaatgatggggccatcctaggttttgtgaataagcaacaggcccacgacctgctcatcaacaagcccgacgggaccttcttgttgcgctttagtgactcagaaatcgggggcatcaccatcgcctggaagtttgattccccggaacgcaacctgtggaacctgaaaccattcaccacgcgggatttctccatcaggtccctggctgaccggctgggggacctgagctatctcatctatgtgtttcctgaccgccccaaggatgaggtcttctccaagtactacactcctgtgctggctaaagctgttgatggatatgtgaaaccacagatcaagcaagtggtccctgagtttgtgaatgcatctgcagatgctgggggcagcagcgccacgtacatggaccaggccccctccccagctgtgtgcccccaggctccctataacatgtacccacagaaccctgaccatgtactcgatcaggatggagaattcgacctggatgagaccatggatgtggccaggcacgtggaggaactcttacgccgaccaatggacagtcttgactcccgcctctcgccccctgccggtcttttcacctctgccagaggctccctctcatga (配列番号118)
ヒト squalene epoxidase (ERG1) mRNA,(AF098865) 配列番号55 (タンパク質)及び配列番号119 (DNA)
MWTFLGIATFTYFYKKFGDFITLANREVLLCVLVFLSLGLVLSYRCRHRNGGLLGRQQSGSQFALFSDILSGLPFIGFFWAKSPPESENKEQLEARRRRKGTNISETSLIGTAACTSTSSQNDPEVIIVGAGVLGSALAAVLSRDGRKVTVIERDLKEPDRIVGEFLQPGGYHVLKDLGLGDTVEGLDAQVVNGYMIHDQESKSEVQIPYPLSENNQVQSGRAFHHGRFIMSLRKAAMAEPNAKFIEGVVLQLLEEDDVVMGVQYKDKETGDIKELHAPLTVVADGLFSKFRKSLVSNKVSVSSHFVGFLMKNAPQFKANHAELILANPSPVLIYQISSSETRVLVDIRGEMPRNLREYMVEKIYPQIPDHLKEPFLEATDNSHLRSMPASFLPPSSVKKRGVLLLGDAYNMRHPLTGGGMTVAFKDIKLWRKLLKGIPDLYDDAAIFEAKKSFYWARKTSHSFVVNILAQALYELFSATDDSLHQLRKACFLYFKLGGECVAGPVGLLSVLSPNPLVLIGHFFAVAIYAVYFCFKSEPWITKPRALLSSGAVLYKACSVIFPLIYSEMKYMVH (配列番号55)
atgtggacttttctgggcattgccactttcacctatttttataagaagttcggggacttcatcactttggccaacagggaggtcctgttgtgcgtgctggtgttcctctcgctgggcctggtgctctcctaccgctgtcgccaccgaaacgggggtctcctcgggcgccagcagagcggctcccagttcgccctcttctcggatattctctcaggcctgcctttcattggcttcttctgggccaaatccccccctgaatcagaaaataaggagcagctcgaggccaggaggcgcagaaaaggaaccaatatttcagaaacaagcttaataggaacagctgcctgtacatcaacatcttctcagaatgacccagaagttatcatcgtgggagctggcgtgcttggctctgctttggcagctgtgctttccagagatggaagaaaggtgacagtcattgagagagacttaaaagagcctgacagaatagttggagaattcctgcagccgggtggttatcatgttctcaaagaccttggtcttggagatacagtggaaggtcttgatgcccaggttgtaaatggttacatgattcatgatcaggaaagcaaatcagaggttcagattccttaccctctgtcagaaaacaatcaagtgcagagtggaagagctttccatcacggaagattcatcatgagtctccggaaagcagctatggcagagcccaatgcaaagtttattgaaggtgttgtgttacagttattagaggaagatgatgttgtgatgggagttcagtacaaggataaagagactggagatatcaaggaactccatgctccactgactgttgttgcagatgggcttttctccaagttcaggaaaagcctggtctccaataaagtttctgtatcatctcattttgttggctttcttatgaagaatgcaccacagtttaaagcaaatcatgctgaacttattttagctaacccgagtccagttctcatctaccagatttcatccagtgaaactcgagtacttgttgacattagaggagaaatgccaaggaatttaagagaatacatggttgaaaaaatttacccacaaatacctgatcacctgaaagaaccattcttagaagccactgacaattctcatctgaggtccatgccagcaagcttccttcctccttcatcagtgaagaaacgaggtgttcttcttttgggagacgcatataatatgaggcatccacttactggtggaggaatgactgttgcttttaaagatataaaactatggagaaaactgctaaagggtatccctgacctttatgatgatgcagctattttcgaggccaaaaaatcattttactgggcaagaaaaacatctcattcctttgtcgtgaatatccttgctcaggctctttatgaattattttctgccacagatgattccctgcatcaactaagaaaagcctgttttctttatttcaaacttggtggcgaatgtgttgcgggtcctgttgggctgctttctgtattgtctcctaaccctctagttttaattggacacttctttgctgttgcaatctatgccgtgtatttttgctttaagtcagaaccttggattacaaaacctcgagcccttctcagtagtggtgctgtattgtacaaagcgtgttctgtaatatttcctctaatttactcagaaatgaagtatatggttcattaa (配列番号119)
ヒト ets variant 2 (ETV2/ER71), (NM_014209) 配列番号56 (タンパク質)及び配列番号120 (DNA)
MDLWNWDEASPQEVPPGNKLAGLEGAKLGFCFPDLALQGDTPTATAETCWKGTSSSLASFPQLDWGSALLHPEVPWGAEPDSQALPWSGDWTDMACTAWDSWSGASQTLGPAPLGPGPIPAAGSEGAAGQNCVPVAGEATSWSRAQAAGSNTSWDCSVGPDGDTYWGSGLGGEPRTDCTISWGGPAGPDCTTSWNPGLHAGGTTSLKRYQSSALTVCSEPSPQSDRASLARCPKTNHRGPIQLWQFLLELLHDGARSSCIRWTGNSREFQLCDPKEVARLWGERKRKPGMNYEKLSRGLRYYYRRDIVRKSGGRKYTYRFGGRVPSLAYPDCAGGGRGAETQ (配列番号56)
atggacctgtggaactgggatgaggcatccccacaggaagtgcctccagggaacaagctggcagggcttgaaggagccaaattaggcttctgtttccctgatctggcactccaaggggacacgccgacagcgacagcagagacatgctggaaaggtacaagctcatccctggcaagcttcccacagctggactggggctccgcgttactgcacccagaagttccatggggggcggagcccgactctcaggctcttccgtggtccggggactggacagacatggcgtgcacagcctgggactcttggagcggcgcctcgcagaccctgggccccgcccctctcggcccgggccccatccccgccgccggctccgaaggcgccgcgggccagaactgcgtccccgtggcgggagaggccacctcgtggtcgcgcgcccaggccgccgggagcaacaccagctgggactgttctgtggggcccgacggcgatacctactggggcagtggcctgggcggggagccgcgcacggactgtaccatttcgtggggcgggcccgcgggcccggactgtaccacctcctggaacccggggctgcatgcgggtggcaccacctctttgaagcggtaccagagctcagctctcaccgtttgctccgaaccgagcccgcagtcggaccgtgccagtttggctcgatgccccaaaactaaccaccgaggtcccattcagctgtggcagttcctcctggagctgctccacgacggggcgcgtagcagctgcatccgttggactggcaacagccgcgagttccagctgtgcgaccccaaagaggtggctcggctgtggggcgagcgcaagagaaagccgggcatgaattacgagaagctgagccggggccttcgctactactatcgccgcgacatcgtgcgcaagagcggggggcgaaagtacacgtaccgcttcgggggccgcgtgcccagcctagcctatccggactgtgcgggaggcggacggggagcagagacacaataa (配列番号120)
ヒト GATA binding protein 2 (GATA2) (NM_001145661) 配列番号57 (タンパク質)及び配列番号121 (DNA)
MEVAPEQPRWMAHPAVLNAQHPDSHHPGLAHNYMEPAQLLPPDEVDVFFNHLDSQGNPYYANPAHARARVSYSPAHARLTGGQMCRPHLLHSPGLPWLDGGKAALSAAAAHHHNPWTVSPFSKTPLHPSAAGGPGGPLSVYPGAGGGSGGGSGSSVASLTPTAAHSGSHLFGFPPTPPKEVSPDPSTTGAASPASSSAGGSAARGEDKDGVKYQVSLTESMKMESGSPLRPGLATMGTQPATHHPIPTYPSYVPAAAHDYSSGLFHPGGFLGGPASSFTPKQRSKARSCSEGRECVNCGATATPLWRRDGTGHYLCNACGLYHKMNGQNRPLIKPKRRLSAARRAGTCCANCQTTTTTLWRRNANGDPVCNACGLYYKLHNVNRPLTMKKEGIQTRNRKMSNKSKKSKKGAECFEELSKCMQEKSSPFSAAALAGHMAPVGHLPPFSHSGHILPTPTPIHPSSSLSFGHPHPSSMVTAMG (配列番号57)
atggaggtggcgcccgagcagccgcgctggatggcgcacccggccgtgctgaatgcgcagcaccccgactcacaccacccgggcctggcgcacaactacatggaacccgcgcagctgctgcctccagacgaggtggacgtcttcttcaatcacctcgactcgcagggcaacccctactatgccaaccccgctcacgcgcgggcgcgcgtctcctacagccccgcgcacgcccgcctgaccggaggccagatgtgccgcccacacttgttgcacagcccgggtttgccctggctggacgggggcaaagcagccctctctgccgctgcggcccaccaccacaacccctggaccgtgagccccttctccaagacgccactgcacccctcagctgctggaggccctggaggcccactctctgtgtacccaggggctgggggtgggagcgggggaggcagcgggagctcagtggcctccctcacccctacagcagcccactctggctcccaccttttcggcttcccacccacgccacccaaagaagtgtctcctgaccctagcaccacgggggctgcgtctccagcctcatcttccgcggggggtagtgcagcccgaggagaggacaaggacggcgtcaagtaccaggtgtcactgacggagagcatgaagatggaaagtggcagtcccctgcgcccaggcctagctactatgggcacccagcctgctacacaccaccccatccccacctacccctcctatgtgccggcggctgcccacgactacagcagcggactcttccaccccggaggcttcctggggggaccggcctccagcttcacccctaagcagcgcagcaaggctcgttcctgttcagaaggccgggagtgtgtcaactgtggggccacagccacccctctctggcggcgggacggcaccggccactacctgtgcaatgcctgtggcctctaccacaagatgaatgggcagaaccgaccactcatcaagcccaagcgaagactgtcggccgccagaagagccggcacctgttgtgcaaattgtcagacgacaaccaccaccttatggcgccgaaacgccaacggggaccctgtctgcaacgcctgtggcctctactacaagctgcacaatgttaacaggccactgaccatgaagaaggaagggatccagactcggaaccggaagatgtccaacaagtccaagaagagcaagaaaggggcggagtgcttcgaggagctgtcaaagtgcatgcaggagaagtcatcccccttcagtgcagctgccctggctggacacatggcacctgtgggccacctcccgcccttcagccactccggacacatcctgcccactccgacgcccatccacccctcctccagcctctccttcggccacccccacccgtccagcatggtgaccgccatgggctag (配列番号121)
ヒト hes-related family bHLH transcription factor with YRPW motif 1 (HEY1) (NM_012258) 配列番号58 (タンパク質)及び配列番号122 (DNA)
MKRAHPEYSSSDSELDETIEVEKESADENGNLSSALGSMSPTTSSQILARKRRRGIIEKRRRDRINNSLSELRRLVPSAFEKQGSAKLEKAEILQMTVDHLKMLHTAGGKGYFDAHALAMDYRSLGFRECLAEVARYLSIIEGLDASDPLRVRLVSHLNNYASQREAASGAHAGLGHIPWGTVFGHHPHIAHPLLLPQNGHGNAGTTASPTEPHHQGRLGSAHPEAPALRAPPSGSLGPVLPVVTSASKLSPPLLSSVASLSAFPFSFGSFHLLSPNALSPSAPTQAANLGKPYRPWGTEIGAF (配列番号58)
atgaagcgagctcaccccgagtacagctcctcggacagcgagctggacgagaccatcgaggtggagaaggagagtgcggacgagaatggaaacttgagttcggctctaggttccatgtccccaactacatcttcccagattttggccagaaaaagacggagaggaataattgagaagcgccgacgagaccggatcaataacagtttgtctgagctgagaaggctggtacccagtgcttttgagaagcagggatctgctaagctagaaaaagccgagatcctgcagatgaccgtggatcacctgaaaatgctgcatacggcaggagggaaaggttactttgacgcgcacgcccttgctatggactatcggagtttgggatttcgggaatgcctggcagaagttgcgcgttatctgagcatcattgaaggactagatgcctctgacccgcttcgagttcgactggtttcgcatctcaacaactacgcttcccagcgggaagccgcgagcggcgcccacgcgggcctcggacacattccctgggggaccgtcttcggacatcacccgcacatcgcgcacccgctgttgctgccccagaacggccacgggaacgcgggcaccacggcctcacccacggaaccgcaccaccagggcaggctgggctcggcacatccggaggcgcctgctttgcgagcgccccctagcggcagcctcggaccggtgctccctgtggtcacctccgcctccaaactgtcgccgcctctgctctcctcagtggcctccctgtcggccttccccttctctttcggctccttccacttactgtctcccaatgcactgagcccttcagcacccacgcaggctgcaaaccttggcaagccctatagaccttgggggacggagatcggagctttttaa (配列番号122)
ヒト Hey2 (AB044755) 配列番号59 (タンパク質)及び配列番号123 (DNA)
MKRPCEETTSESDMDETIDVGSENNYSGQSTSSVIRLNSPTTTSQIMARKKRRGIIEKRRRDRINNSLSELRRLVPTAFEKQGSAKLEKAEILQMTVDHLKMLQATGGKGYFDAHALAMDFMSIGFRECLTEVARYLSSVEGLDSSDPLRVRLVSHLSTCATQREAAAMTSSMAHHHHPLHPHHWAAAFHHLPAALLQPNGLHASESTPCRLSTTSEVPPAHGSALLTATFAHADSALRMPSTGSVAPCVPPLSTSLLSLSATVHAAAAAATAAAHSFPLSFAGAFPMLPPNAAAAVAAATAISPPLSVSATSSPQQTSSGTNNKPYRPWGTEVGAF (配列番号59)
atgaagcgcccctgcgaggagacgacctccgagagcgacatggacgagaccatcgacgtggggagcgagaacaattactcggggcaaagtactagctctgtgattagattgaattctccaacaacaacatctcagattatggcaagaaagaaaaggagagggattatagagaaaaggcgtcgggatcggataaataacagtttatctgagttgagaagacttgtgccaactgcttttgaaaaacaaggatctgcaaagttagaaaaagctgaaatattgcaaatgacagtggatcatttgaagatgcttcaggcaacagggggtaaaggctactttgacgcacacgctcttgccatggacttcatgagcataggattccgagagtgcctaacagaagttgcgcggtacctgagctccgtggaaggcctggactcctcggatccgctgcgggtgcggcttgtgtctcatctcagcacttgcgccacccagcgggaggcggcggccatgacatcctccatggcccaccaccatcatccgctccacccgcatcactgggccgccgccttccaccacctgcccgcagccctgctccagcccaacggcctccatgcctcagagtcaaccccttgtcgcctctccacaacttcagaagtgcctcctgcccacggctctgctctcctcacggccacgtttgcccatgcggattcagccctccgaatgccatccacgggcagcgtcgccccctgcgtgccacctctctccacctctctcttgtccctctctgccaccgtccacgccgcagccgcagcagccaccgcggctgcacacagcttccctctgtccttcgcgggggcattccccatgcttcccccaaacgcagcagcagcagtggccgcggccacagccatcagcccgcccttgtcagtatcagccacgtccagtcctcagcagaccagcagtggaacaaacaataaaccttaccgaccctgggggacagaagttggagctttttaa (配列番号123)
ヒト forkhead box C1 (FOXC1) (NM_001453) 配列番号60 (タンパク質)及び配列番号124 (DNA)
MQARYSVSSPNSLGVVPYLGGEQSYYRAAAAAAGGGYTAMPAPMSVYSHPAHAEQYPGGMARAYGPYTPQPQPKDMVKPPYSYIALITMAIQNAPDKKITLNGIYQFIMDRFPFYRDNKQGWQNSIRHNLSLNECFVKVPRDDKKPGKGSYWTLDPDSYNMFENGSFLRRRRRFKKKDAVKDKEEKDRLHLKEPPPPGRQPPPAPPEQADGNAPGPQPPPVRIQDIKTENGTCPSPPQPLSPAAALGSGSAAAVPKIESPDSSSSSLSSGSSPPGSLPSARPLSLDGADSAPPPPAPSAPPPHHSQGFSVDNIMTSLRGSPQSAAAELSSGLLASAAASSRAGIAPPLALGAYSPGQSSLYSSPCSQTSSAGSSGGGGGGAGAAGGAGGAGTYHCNLQAMSLYAAGERGGHLQGAPGGAGGSAVDDPLPDYSLPPVTSSSSSSLSHGGGGGGGGGGQEAGHHPAAHQGRLTSWYLNQAGGDLGHLASAAAAAAAAGYPGQQQNFHSVREMFESQRIGLNNSPVNGNSSCQMAFPSSQSLYRTSGAFVYDCSKF (配列番号60)
atgcaggcgcgctactccgtgtccagccccaactccctgggagtggtgccctacctcggcggcgagcagagctactaccgcgcggcggccgcggcggccgggggcggctacaccgccatgccggcccccatgagcgtgtactcgcaccctgcgcacgccgagcagtacccgggcggcatggcccgcgcctacgggccctacacgccgcagccgcagcccaaggacatggtgaagccgccctatagctacatcgcgctcatcaccatggccatccagaacgccccggacaagaagatcaccctgaacggcatctaccagttcatcatggaccgcttccccttctaccgggacaacaagcagggctggcagaacagcatccgccacaacctctcgctcaacgagtgcttcgtcaaggtgccgcgcgacgacaagaagccgggcaagggcagctactggacgctggacccggactcctacaacatgttcgagaacggcagcttcctgcggcggcggcggcgcttcaagaagaaggacgcggtgaaggacaaggaggagaaggacaggctgcacctcaaggagccgcccccgcccggccgccagcccccgcccgcgccgccggagcaggccgacggcaacgcgcccggtccgcagccgccgcccgtgcgcatccaggacatcaagaccgagaacggtacgtgcccctcgccgccccagcccctgtccccggccgccgccctgggcagcggcagcgccgccgcggtgcccaagatcgagagccccgacagcagcagcagcagcctgtccagcgggagcagccccccgggcagcctgccgtcggcgcggccgctcagcctggacggtgcggattccgcgccgccgccgcccgcgccctccgccccgccgccgcaccatagccagggcttcagcgtggacaacatcatgacgtcgctgcgggggtcgccgcagagcgcggccgcggagctcagctccggccttctggcctcggcggccgcgtcctcgcgcgcggggatcgcacccccgctggcgctcggcgcctactcgcccggccagagctccctctacagctccccctgcagccagacctccagcgcgggcagctcgggcggcggcggcggcggcgcgggggccgcggggggcgcgggcggcgccgggacctaccactgcaacctgcaagccatgagcctgtacgcggccggcgagcgcgggggccacttgcagggcgcgcccgggggcgcgggcggctcggccgtggacgaccccctgcccgactactctctgcctccggtcaccagcagcagctcgtcgtccctgagtcacggcggcggcggcggcggcggcgggggaggccaggaggccggccaccaccctgcggcccaccaaggccgcctcacctcgtggtacctgaaccaggcgggcggagacctgggccacttggcgagcgcggcggcggcggcggcggccgcaggctacccgggccagcagcagaacttccactcggtgcgggagatgttcgagtcacagaggatcggcttgaacaactctccagtgaacgggaatagtagctgtcaaatggccttcccttccagccagtctctgtaccgcacgtccggagctttcgtctacgactgtagcaagttttga (配列番号124)
ヒト forkhead box C2 (MFH-1, mesenchyme forkhead 1)(FOXC2) (NM_005251) 配列番号61 (タンパク質)及び配列番号125 (DNA)
MQARYSVSDPNALGVVPYLSEQNYYRAAGSYGGMASPMGVYSGHPEQYSAGMGRSYAPYHHHQPAAPKDLVKPPYSYIALITMAIQNAPEKKITLNGIYQFIMDRFPFYRENKQGWQNSIRHNLSLNECFVKVPRDDKKPGKGSYWTLDPDSYNMFENGSFLRRRRRFKKKDVSKEKEERAHLKEPPPAASKGAPATPHLADAPKEAEKKVVIKSEAASPALPVITKVETLSPESALQGSPRSAASTPAGSPDGSLPEHHAAAPNGLPGFSVENIMTLRTSPPGGELSPGAGRAGLVVPPLALPYAAAPPAAYGQPCAQGLEAGAAGGYQCSMRAMSLYTGAERPAHMCVPPALDEALSDHPSGPTSPLSALNLAAGQEGALAATGHHHQHHGHHHPQAPPPPPAPQPQPTPQPGAAAAQAASWYLNHSGDLNHLPGHTFAAQQQTFPNVREMFNSHRLGIENSTLGESQVSGNASCQLPYRSTPPLYRHAAPYSYDCTKY (配列番号61)
atgcaggcgcgctactccgtgtccgaccccaacgccctgggagtggtgccctacctgagcgagcagaattactaccgggctgcgggcagctacggcggcatggccagccccatgggcgtctattccggccacccggagcagtacagcgcggggatgggccgctcctacgcgccctaccaccaccaccagcccgcggcgcctaaggacctggtgaagccgccctacagctacatcgcgctcatcaccatggccatccagaacgcgcccgagaagaagatcaccttgaacggcatctaccagttcatcatggaccgcttccccttctaccgggagaacaagcagggctggcagaacagcatccgccacaacctctcgctcaacgagtgcttcgtcaaggtgccccgcgacgacaagaagcccggcaagggcagttactggaccctggacccggactcctacaacatgttcgagaacggcagcttcctgcggcgccggcggcgcttcaaaaagaaggacgtgtccaaggagaaggaggagcgggcccacctcaaggagccgcccccggcggcgtccaagggcgccccggccaccccccacctagcggacgcccccaaggaggccgagaagaaggtggtgatcaagagcgaggcggcgtccccggcgctgccggtcatcaccaaggtggagacgctgagccccgagagcgcgctgcagggcagcccgcgcagcgcggcctccacgcccgccggctcccccgacggctcgctgccggagcaccacgccgcggcgcccaacgggctgcctggcttcagcgtggagaacatcatgaccctgcgaacgtcgccgccgggcggagagctgagcccgggggccggacgcgcgggcctggtggtgccgccgctggcgctgccctacgccgccgcgccgcccgccgcctacggccagccgtgcgctcagggcctggaggccggggccgccgggggctaccagtgcagcatgcgagcgatgagcctgtacaccggggccgagcggccggcgcacatgtgcgtcccgcccgccctggacgaggccctctcggaccacccgagcggccccacgtcgcccctgagcgctctcaacctcgccgccggccaggagggcgcgctcgccgccacgggccaccaccaccagcaccacggccaccaccacccgcaggcgccgccgcccccgccggctccccagccccagccgacgccgcagcccggggccgccgcggcgcaggcggcctcctggtatctcaaccacagcggggacctgaaccacctccccggccacacgttcgcggcccagcagcaaactttccccaacgtgcgggagatgttcaactcccaccggctggggattgagaactcgaccctcggggagtcccaggtgagtggcaatgccagctgccagctgccctacagatccacgccgcctctctatcgccacgcagccccctactcctacgactgcacgaaatactga (配列番号125)
配列番号62: ヒト SRY (sex determining region Y)-box 7 (SOX7) NM_031439 配列番号62 (タンパク質)及び配列番号126 (DNA)
MASLLGAYPWPEGLECPALDAELSDGQSPPAVPRPPGDKGSESRIRRPMNAFMVWAKDERKRLAVQNPDLHNAELSKMLGKSWKALTLSQKRPYVDEAERLRLQHMQDYPNYKYRPRRKKQAKRLCKRVDPGFLLSSLSRDQNALPEKRSGSRGALGEKEDRGEYSPGTALPSLRGCYHEGPAGGGGGGTPSSVDTYPYGLPTPPEMSPLDVLEPEQTFFSSPCQEEHGHPRRIPHLPGHPYSPEYAPSPLHCSHPLGSLALGQSPGVSMMSPVPGCPPSPAYYSPATYHPLHSNLQAHLGQLSPPPEHPGFDALDQLSQVELLGDMDRNEFDQYLNTPGHPDSATGAMALSGHVPVSQVTPTGPTETSLISVLADATATYYNSYSVS (配列番号62)
atggcttcgctgctgggagcctacccttggcccgagggtctcgagtgcccggccctggacgccgagctgtcggatggacaatcgccgccggccgtcccccggcccccgggggacaagggctccgagagccgtatccggcggcccatgaacgccttcatggtttgggccaaggacgagaggaaacggctggcagtgcagaacccggacctgcacaacgccgagctcagcaagatgctgggaaagtcgtggaaggcgctgacgctgtcccagaagaggccgtacgtggacgaggcggagcggctgcgcctgcagcacatgcaggactaccccaactacaagtaccggccgcgcaggaagaagcaggccaagcggctgtgcaagcgcgtggacccgggcttccttctgagctccctctcccgggaccagaacgccctgccggagaagagaagcggcagccggggggcgctgggggagaaggaggacaggggtgagtactcccccggcactgccctgcccagcctccggggctgctaccacgaggggccggctggtggtggcggcggcggcaccccgagcagtgtggacacgtacccgtacgggctgcccacacctcctgaaatgtctcccctggacgtgctggagccggagcagaccttcttctcctccccctgccaggaggagcatggccatccccgccgcatcccccacctgccagggcacccgtactcaccggagtacgccccaagccctctccactgtagccaccccctgggctccctggcccttggccagtcccccggcgtctccatgatgtcccctgtacccggctgtcccccatctcctgcctattactccccggccacctaccacccactccactccaacctccaagcccacctgggccagctttccccgcctcctgagcaccctggcttcgacgccctggatcaactgagccaggtggaactcctgggggacatggatcgcaatgaattcgaccagtatttgaacactcctggccacccagactccgccacaggggccatggccctcagtgggcatgttccggtctcccaggtgacaccaacgggtcccacagagaccagcctcatctccgtcctggctgatgccacggccacgtactacaacagctacagtgtgtcatag (配列番号126)
ヒト SOX18 (AB033888) 配列番号63 (タンパク質)及び配列番号127 (DNA)
MQRSPPGYGAQDDPPARRDCAWAPGHGAAADTRGLAAGPAALAAPAAPASPPSPQRSPPRSPEPGRYGLSPAGRGERQAADESRIRRPMNAFMVWAKDERKRLAQQNPDLHNAVLSKMLGKAWKELNAAEKRPFVEEAERLRVQHLRDHPNYKYRPRRKKQARKARRLEPGLLLPGLAPPQPPPEPFPAASGSARAFRELPPLGAEFDGLGLPTPERSPLDGLEPGEAAFFPPPAAPEDCALRPFRAPYAPTELSRDPGGCYGAPLAEALRTAPPAAPLAGLYYGTLGTPGPYPGPLSPPPEAPPLESAEPLGPAADLWADVDLTEFDQYLNCSRTRPDAPGLPYHVALAKLGPRAMSCPEESSLISALSDASSAVYYSACISG (配列番号63)
atgcagagatcgccgcccggctacggcgcacaggacgacccgcccgcccgccgcgactgtgcatgggccccgggacacggggccgccgctgacacgcgcggcctcgccgccggccccgccgccctcgccgcgcccgccgcgcccgcctcgccgcccagcccgcagcgcagtcccccgcgcagccccgagccggggcgctatggcctcagcccggccggccgcggggaacgccaggcggcagacgagtcgcgcatccggcggcccatgaacgccttcatggtgtgggcaaaggacgagcgcaagcggctggctcagcagaacccggacctgcacaacgcggtgctcagcaagatgctgggcaaagcgtggaaggagctgaacgcggcggagaagcggcccttcgtggaggaagccgaacggctgcgcgtgcagcacttgcgcgaccaccccaactacaagtaccggccgcgccgcaagaagcaggcgcgcaaggcccggcggctggagcccggcctcctgctcccgggattagcgcccccgcagccaccgcccgagcctttccccgcggcgtctggctcggctcgcgccttccgcgagctgcccccgctgggcgccgagttcgacggcctggggctgcccacgcccgagcgctcgcctctggacggcctggagcccggcgaggctgccttcttcccaccgcccgcggcgcccgaggactgcgcgctgcggcccttccgcgcgccctacgcgcccaccgagttgtcgcgggaccccggcggttgctacggggctcccctggcggaggcgctcaggaccgcgccccccgcggcgccgctcgctggcctgtactacggcaccctgggcacgcccggcccgtaccccggcccgctgtcgccgccgcccgaggccccgccgctggagagcgccgagccgctggggcccgccgccgatctgtgggccgacgtggacctcaccgagttcgaccagtacctcaactgcagccggactcggcccgacgcccccgggctcccgtaccacgtggcactggccaaactgggcccgcgcgccatgtcctgcccagaggagagcagcctgatctccgcgctgtcggacgccagcagcgcggtctattacagcgcgtgcatctccggctag (配列番号127)
本明細書にて言及した任意の特許又は公表文献は、各公表文献について明確且つ個別に出典を明記することにより本願明細書の一部とすることを示したものとして、出典を明記することにより本願明細書の一部とする。2013年10月25日提出の米国特許仮出願第61/895,562号は、出典を明記することにより本願明細書の一部とする。
本明細書に記載の組成物及び方法は、好適な実施形態を例示的に現時点で表すものであり、本発明の範囲を限定するものではない。それらの変更及び他の用途は、当業者には想到されるであろう。こうした変更及び他の用途は、請求者に記載の本発明の範囲を逸脱することなく実施することができる。
[図1]
QQ-ferritin (i.v. injection): QQフェリチン(静脈注射)
Brain Tumor: 脳腫瘍
ferritin (i.v. injection): フェリチン(静脈注射)
[図2]
Before QQ-ferritin injection: QQフェリチン注射前
Primary tumor: 原発腫瘍
Mouse 7: マウス7
0.5 hour after QQ-ferritin i.v. injection: QQフェリチン静脈注射後0.5時間
2 hour after QQ-ferritin i.v. injection: QQフェリチン静脈注射後2時間
3.5 hour after QQ-ferritin i.v. injection: QQフェリチン静脈注射後3.5時間
8 hour after QQ-ferritin i.v. injection: QQフェリチン静脈注射後8時間
18 hour after QQ-ferritin i.v. injection: QQフェリチン静脈注射後18時間
[図3]
Ki67-positive cells x 100: Ki67陽性細胞×100
MTT Assay: MTTアッセイ
Temozolomide: テモゾロミド
Carboplatin: カルボプラチン
[図4]
Actin: アクチン
Relative Migrated Cell Numbers: 相対移動細胞数
Relative Invasion Cell Numbers: 相対浸潤細胞数
Cell Numbers (x 104 Cells): 細胞数(×104個)
0hr: 0時間
48hr: 48時間
Number of colonies: コロニー数
Relative migrated cells: 相対移動細胞
[図5]
Mesenchymal: 間葉系
Epithelial: 上皮系
Relative cell number/field: 相対細胞数/視野
Ki67 proliferation: Ki67の増殖
Co-culture (1:1): 共培養(1:1)
Relative migrated cells/field: 相対移動細胞/視野
Migration: 移動
Relative invaded cells/field: 相対浸潤細胞/視野
Invasion: 浸潤
Number of Cells: 細胞数
Control: 対照
Co-culturte: 共培養
Relative Migration Cells/field: 相対移動細胞/視野
[図6A〜D]
Tumor Volume (mm3): 腫瘍体積(mm3)
Brain Implanting (n = 10): 脳移植(n=10)
Tumor Weight (Grams): 腫瘍重量(グラム)
S.C. (n = 6): 皮下(n=6)
day: 日
TUMOR WEIGHT mg: 腫瘍重量(mg)
[図6E]
Metastasis Sites: 転移部位
Number of Metastasis sites from 200 fields in the lungs: 肺内の200領域での転移部位数
[図6F]
Survival Probability: 生存確率
Control: 対照
Median: 中央値
Experiment: 実験
4T1-cell implantation (Dotted Line): 4T1細胞移植(点線)
4T1-piPSC implantation (Solid Line): 4T1-piPSC移植(実線)
No. at risk: リスクのある個体数
Days from injection: 注射からの日数
[図7A]
Tumor Volume (mm3): 腫瘍体積(mm3)
ug/day: μg/日
18-daily treatment: 18日間の治療
day: 日
[図7B]
Tumor Weight (Grams): 腫瘍重量(グラム)
9L-subcu: 9L皮下
18-daily injections: 18日間の注射
[図7C]
Survival Probability: 生存確率
9L-subcu: 9L皮下
+ Censored: + 打ち切られた
Logrank p < 0.001: ログランクp < 0.001
Day 73: 73日目
Day 78: 78日目
Day 92: 92日目
30-daily treatments: 30日間の治療
リスクのある個体数
Days of Event/Follow up: イベント/フォローアップの日数
[図7D〜G]
Tumor Volume (mm3): 腫瘍体積(mm3)
fat pad: 脂肪パッド
control: 対照
mouse: マウス
Tumor Weight (Grams): 腫瘍重量(グラム)
ug: μg
day 17: 17日目
day 24: 24日目
day 32: 32日目
[図7H]
Survival Probability: 生存確率
Control: 対照
Median: 中央値
Experiment: 実験
No. at risk: リスクのある個体数
Days from injection: 注射からの日数
[図7I]
% of mice with lung metastasis: 肺転移のあるマウスの％
[図7J]
% of mice with lymph node metastasis: リンパ節転移のあるマウスの％
[図7K]
% of mice with liver metastasis: 肝臓転移のあるマウスの％
[図7L]
% of mice with spleen metastasis: 脾臓転移のあるマウスの％
[図7M]
Number of lung metastatic lesions/mouse: 肺転移巣数/マウス
[図7N]
Number of lymph node metastatic lesions/mouse: リンパ節転移巣数/マウス
[図7O]
Number of liver metastatic lesions/mouse: 肝臓転移巣数/マウス
[図7P]
Number of spleen metastatic lesions/mouse: 脾臓転移巣数/マウス
[図8]
Survival Probability: 生存確率
Control: 対照
margin: マージン
Median: 中央値
Experiment: 実験
Grey Lines: Mice with tumor recurred treated with QQ-PBS (Dotted line) and QQ-SON proteins (Solid Line): 灰色の線:QQ-PBS(点線)及びQQ-SONタンパク質(実線)により治療した腫瘍再発の有るマウス
Black Lines: Mice without tumor reccured treated with QQ-PBS (Dotted line) and QQ-SON proteins (Solid Line): 黒線:QQ-PBS(点線)及びQQ-SONタンパク質(実線)により治療した腫瘍再発の無いマウス
No. at risk: リスクのある個体数
Days from removal of primary tumor at day 18: 18日目に原発腫瘍を除去してからの日数

Claims (33)

  1. 必要とする対象者を治療する方法であって、
    タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物を対象者に投与することを含み、前記タンパク質形質導入試薬は、前記リプログラミングタンパク質に非共有結合し、前記タンパク質形質導入試薬は、カチオン試薬及び脂質を含む、方法。
  2. 前記カチオン試薬は、ポリエチレンイミンを含む、請求項1記載の方法。
  3. 前記対象者は、損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態を有する、請求項1又は2記載の方法。
  4. 前記対象者は、癌を有する、請求項1乃至3の何れかに記載の方法。
  5. 前記対象者は、癌を有し、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogからなる群から選択されるタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む、請求項1乃至4の何れかに記載の方法。
  6. 前記対象者は、癌を有し、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを含む請求項1乃至4の何れかに記載の方法。
  7. 前記対象者は、脳腫瘍又は乳癌を有し、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogからなる群から選択されるタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む、請求項1乃至5の何れかに記載の方法。
  8. 前記対象者は、脳腫瘍又は乳癌を有し、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nanogを含む、請求項1乃至4の何れか又は6に記載の方法。
  9. 前記対象者は、心臓疾患、肝臓疾患、アテローム性動脈硬化、神経疾患、神経変性疾患、血液疾患、糖尿病、膵臓疾患、肥満症、筋肉疾患、乳房疾患、及び血管疾患からなる群から選択される疾患を有する、請求項1乃至4の何れかに記載の方法。
  10. 前記肝臓疾患は、家族性高コレステロール血症(FH)、クリグラー・ナジャー症候群、及び遺伝性高チロシン血症I型からなる群から選択される、請求項9記載の方法。
  11. 前記神経疾患又は神経変性疾患は、脊髄損傷、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、及びパーキンソン病からなる群から選択される、請求項9記載の方法。
  12. 前記状態は、心臓疾患又は心臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5のうち1種以上を含み、前記状態は、肝臓疾患又は肝臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を含み、前記状態は、肝臓疾患又は肝臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を含み、前記状態は、アテローム性動脈硬化であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1のうち1種以上を含み、前記状態は、神経変性疾患又は神経組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1の一方又は両方、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2及びタンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち1種以上を含み、前記状態は、血液の疾患又は障害であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4を含み、前記状態は、糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち1種以上を含み、前記状態は、肥満症であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPbのうち1種以上を含み、前記状態は、筋肉疾患又は筋肉損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾MyoDを含み、前記状態は、関節炎又は関節疾患若しくは損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち1種以上を含み、前記状態は、乳房疾患又は乳房組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1lのうち1種以上を含み、前記状態は、血管疾患又は血管損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18の一方又は両方を含む、請求項1乃至4の何れかに記載の方法。
  13. 前記心臓疾患又は心臓損傷は、急性心筋梗塞、慢性心筋梗塞、及び心不全からなる群から選択される、請求項12記載の方法。
  14. 必要とする対象者における疾患又は状態を治療するためのタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の使用。
  15. 前記対象者は、損傷細胞及び/又は欠損細胞を特徴とする状態を有する、請求項13記載の使用。
  16. 前記対象者は、癌を有する、請求項13又は14記載の使用。
  17. 前記対象者は、癌を有し、前記1種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、Sox2、Oct4及びNanogからなる群から選択されるリプログラミングタンパク質を含む、請求項13乃至16の何れかに記載の使用。
  18. 前記対象者は癌を有し、前記1種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、Sox2、Oct4、及びNanogを含む、請求項13乃至16の何れかに記載の使用。
  19. 前記対象者は、脳腫瘍又は乳癌を有し、前記1種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、Sox2、Oct4、及びNanogからなる群から選択されるリプログラミングタンパク質を含む、請求項13乃至17の何れかに記載の使用。
  20. 前記対象者は、脳腫瘍又は乳癌を有し、前記1種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、Sox2、Oct4、及びNanogを含む、請求項13乃至16及び18の何れかに記載の使用。
  21. 前記対象者は、心臓疾患、肝臓疾患、アテローム性動脈硬化、神経疾患、神経変性疾患、血液疾患、糖尿病、肥満症、筋肉疾患、乳房疾患、関節炎、関節疾患、及び血管疾患からなる群から選択される疾患を有する請求項13乃至16の何れかに記載の使用。
  22. 前記肝臓疾患は、家族性高コレステロール血症、クリグラー・ナジャー症候群、及び遺伝性高チロシン血症I型からなる群から選択される、請求項21記載の使用。
  23. 前記状態は、心臓疾患又は心臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を含み、前記状態は、肝臓疾患又は肝臓損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち1種以上を含み、前記状態は、アテローム性動脈硬化であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ、及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1のうち1種以上を含み、前記状態は、神経変性疾患又は神経組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1の一方又は両方、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち1種以上、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2及びタンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち1種以上を含み、前記状態は、血液の疾患又は障害であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4を含み、前記状態は、糖尿病、膵臓疾患、又は膵臓組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち1種以上を含み、前記状態は、肥満症であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPβのうち1種以上を含み、前記状態は、筋肉疾患又は筋肉損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾MyoDを含み、前記状態は、関節炎又は関節疾患若しくは損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち1種以上を含み、前記状態は、乳房疾患又は乳房組織損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca乃至1lのうち1種以上を含み、前記状態は、血管疾患又は血管損傷であり、前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち1種以上、又はタンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18の一方又は両方を含む、請求項13乃至16の何れかに記載の使用。
  24. 前記心臓疾患又は心臓損傷は、急性又は慢性心筋梗塞である、請求項22記載の使用。
  25. タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む医薬組成物。
  26. 前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、タンパク質形質導入試薬修飾Tbox、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ、タンパク質形質導入試薬修飾PU.1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Oct4、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、タンパク質形質導入試薬修飾Pax4、タンパク質形質導入試薬修飾MafA、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16、タンパク質形質導入試薬修飾MyoD、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、タンパク質形質導入試薬修飾Brca乃至1l、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、タンパク質形質導入試薬修飾Gata2,タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18からなる群から選択される1種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質を含む、請求項25記載の医薬組成物。
  27. 前記医薬組成物は、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hand2、タンパク質形質導入試薬修飾MEF2c、及びタンパク質形質導入試薬修飾Tbox5からなる群から選択される2種以上のタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質と、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa1、タンパク質形質導入試薬修飾Foxa2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Gata4、タンパク質形質導入試薬修飾Hnf1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa3のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPα、タンパク質形質導入試薬修飾CEBPβ、及びタンパク質形質導入試薬修飾PU.1と、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxg1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、タンパク質形質導入試薬修飾Nurr1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、及びタンパク質形質導入試薬修飾Mytl1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn2と、タンパク質形質導入試薬修飾Sox2及びタンパク質形質導入試薬修飾NeuroD1と、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Hb9のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Ascl1、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lhx3、タンパク質形質導入試薬修飾Hb9、タンパク質形質導入試薬修飾Lsl1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Ngn2のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2と、タンパク質形質導入試薬修飾Dlx2及びタンパク質形質導入試薬修飾Ascl1と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Brn2、タンパク質形質導入試薬修飾Mytl1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Foxa2のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Asc1、タンパク質形質導入試薬修飾Lmx1a、及びタンパク質形質導入試薬修飾Nurr1のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Pax4と、タンパク質形質導入試薬修飾Ngn3、タンパク質形質導入試薬修飾Pdx1、及びタンパク質形質導入試薬修飾MafAのうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Prdm16及びタンパク質形質導入試薬修飾C/EBPβと、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Runx2、タンパク質形質導入試薬修飾Sox5、及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox6のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Sox9、タンパク質形質導入試薬修飾Slug、タンパク質形質導入試薬修飾Stat5a、タンパク質形質導入試薬修飾Gata3、及びタンパク質形質導入試薬修飾Brca-1lのうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Erg1、タンパク質形質導入試薬修飾Er71、タンパク質形質導入試薬修飾Fli1、及びタンパク質形質導入試薬修飾Gata2のうち2種以上と、タンパク質形質導入試薬修飾Hey1、タンパク質形質導入試薬修飾Hey2、タンパク質形質導入試薬修飾FoxC1、及びタンパク質形質導入試薬修飾FoxC2のうち2種以上と、又はタンパク質形質導入試薬修飾Sox7及びタンパク質形質導入試薬修飾Sox18と、を含む、請求項25又は26記載の医薬組成物。
  28. 前記タンパク質形質導入試薬は、QQ1a、QQ2a、QQ3a、QQ4a、QQ5a、QQ6a、QQ7a、QQ8a、及びQQ9aからなる群から選択される、請求項1乃至13の何れかに記載の方法。
  29. 前記タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、QQ1a、QQ2a、QQ3a、QQ4a、QQ5a、QQ6a、QQ7a、QQ8a、及びQQ9aからなる群から選択されるタンパク質形質導入試薬により処理されたリプログラミングタンパク質である、請求項14乃至24の何れかに記載の使用。
  30. 前記タンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質は、QQ1a、QQ2a、QQ3a、QQ4a、QQ5a、QQ6a、QQ7a、QQ8a、及びQQ9aからなる群から選択されるタンパク質形質導入試薬により処理されたリプログラミングタンパク質である、請求項25乃至27の何れかに記載の医薬組成物。
  31. 実質的に本明細書に記載したような、必要とする対象者の細胞をリプログラミングする方法。
  32. 実質的に本明細書に記載したような、必要とする対象者における疾患又は状態を治療するためのタンパク質形質導入試薬修飾リプログラミングタンパク質の使用。
  33. 実質的に本明細書に記載したような医薬組成物。
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