JP2017195830A - Food composition for adiposity prevention - Google Patents

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功二 宮林
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a food composition capable of improving metabolic syndrome, while aiming at new other applications, by utilizing a fact that a peptide extracted from an ovarian crust of salmon shows excellent effect in adiposity prevention.SOLUTION: There is provided a food composition for adiposity prevention mainly composed of a peptide extracted from an ovarian crust of salmon. The food composition is utilized, in addition to adiposity prevention, for some of liver function decrease suppression, blood glucose level control, blood pressure control, whitening effect improvement or climacteric disturbance improvement.SELECTED DRAWING: Figure 1

Description

本発明は、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする脂肪蓄積予防を主な用途とする食品組成物に関する。   The present invention relates to a food composition mainly used for the prevention of fat accumulation characterized by comprising a peptide extracted from the ovary rind of salmon as a main component.

従来より水産加工において、鮭の筋子からイクラに加工する際に残るスジ(卵巣外皮)は、特に利用されることなく破棄されていた。
ところで、卵巣外皮の役割は、哺乳動物のプラセンタ(胎盤)と同じように、胎児(魚卵)へ栄養を与え、かつ守ることにあると考えられている。従って、卵巣外皮は、魚類のプラセンタ(胎盤)ともいえる器官であり、その有効活用が望まれていた。
Traditionally, in fishery processing, streaks (ovary husks) left when processing salmon braids into salmon roe have been discarded without any particular use.
By the way, it is thought that the role of the ovary hull is to nourish and protect the fetus (fish egg), similar to the placenta of mammals. Therefore, the ovarian hull is an organ that can be called a fish placenta (placenta), and its effective utilization has been desired.

このような要請に応じて、魚卵外皮を構成する収縮蛋白質(ミオシン)を分解する方法が提案されている(例えば、特許文献1参照)。
また、分解された組成物の用途として、肝臓機能低下の抑制作用を有することが見出されており、この用途に基づいて、前記組成物を健康食品や医薬の調製に活用することも既に提案されている(例えば、特許文献2参照)。
In response to such a request, a method for decomposing a contractile protein (myosin) that constitutes a fish egg shell has been proposed (see, for example, Patent Document 1).
In addition, as a use of the decomposed composition, it has been found that it has an action of suppressing a decrease in liver function, and based on this use, it has already been proposed to utilize the composition for the preparation of health foods and medicines. (For example, refer to Patent Document 2).

特許第3691497号公報Japanese Patent No. 3691497 特許第4247444号公報Japanese Patent No. 4247444

しかしながら、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドは、その後の最近の研究により、肝臓機能低下の抑制作用だけでなく、特に、メタボリックシンドロームの改善に有効である等と、他にも新たな用途が見出されている。   However, peptides extracted from the ovarian rind of rabbits have not only been effective in suppressing liver function decline, but also have other new uses, such as being particularly effective in improving metabolic syndrome. Has been issued.

本発明は、このような最近の研究成果に基づきなされたものであり、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドが脂肪蓄積予防に優れた効果を発揮することで、メタボリックシンドロームを改善するほか、他の新たな用途にも着目した食品組成物を提供することを目的としている。   The present invention has been made on the basis of such recent research results, and the peptide extracted from the ovary husk of moth exhibits excellent effects in preventing fat accumulation, thereby improving metabolic syndrome, It aims at providing the food composition which paid its attention also to the new use.

前述した目的を達成するための本発明の要旨とするところは、以下の各項の発明に存する。
[1]鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物によれば、白色脂肪細胞の中性脂肪を燃焼させるタンパク質(UCP-1)の発現が高められる。すなわち、アドレナリンが作用して、ミトコンドリアが白色脂肪細胞(内臓脂肪細胞)を燃やして褐色脂肪細胞に変換する。これにより、メタボリックシンドロームが改善される。
The gist of the present invention for achieving the object described above resides in the inventions of the following items.
[1] A food composition for preventing fat accumulation, comprising as a main component a peptide extracted from the ovary rind of salmon.
According to this food composition, the expression of a protein (UCP-1) that burns neutral fat of white adipocytes is increased. That is, adrenaline acts, and mitochondria burn white fat cells (visceral fat cells) and convert them into brown fat cells. Thereby, the metabolic syndrome is improved.

[2]鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする肝臓機能低下抑制用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、さらに抗酸化機能(抗毒性効果)があり、肝機能低下を抑制する。内臓脂肪の多い人の善玉コレステロール(HDL)と悪玉コレステロール(LDL)の割合を変化させる。
[2] A food composition for suppressing a decrease in liver function and preventing fat accumulation, comprising a peptide extracted from the ovary rind of salmon as a main component.
The food composition further has an antioxidant function (antitoxic effect) and suppresses liver function deterioration. Changes the proportion of good cholesterol (HDL) and bad cholesterol (LDL) in people with high visceral fat.

[3]鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血糖値制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、血糖値の上昇を抑制することにより、血糖値を安定的に維持する効果がある。
[3] A food composition for controlling blood glucose level and preventing fat accumulation, comprising a peptide extracted from the ovary rind of salmon as a main component.
This food composition has an effect of stably maintaining the blood glucose level by suppressing an increase in the blood glucose level.

[4]鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血圧制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、ACE阻害活性により、ACE血圧上昇酵素の働きを阻害して、血圧上昇を防止し、血圧が最適値となるように作用する。
[4] A food composition for controlling blood pressure and preventing fat accumulation, characterized by comprising as a main component a peptide extracted from the ovary skin of salmon.
The food composition inhibits the action of the ACE blood pressure increasing enzyme by ACE inhibitory activity, prevents blood pressure from rising, and acts so that the blood pressure becomes an optimum value.

[5]鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする美白効果向上用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物によれば、肌の保湿に有効であり、肌のくすみに対する改善効果があり、肌の明るさや透明感の改善に有効であり、小さな色素沈着やシミ改善に対しても有効であるため、美白効果を向上させることが可能となる。
[5] A food composition for improving the whitening effect and preventing fat accumulation, comprising a peptide extracted from the ovary husk of salmon as a main component.
According to this food composition, it is effective for moisturizing the skin, has an effect of improving dullness of the skin, is effective in improving the brightness and transparency of the skin, and is effective in improving small pigmentation and spots. Therefore, the whitening effect can be improved.

[6]鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする更年期障害改善用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。
本食品組成物は、更年期障害として、肌荒れ、不眠、冷え性、生理不順等の症状を改善することも可能である。
[6] A food composition for improving menopause and preventing fat accumulation, characterized by comprising a peptide extracted from the ovary skin of salmon as a main component.
The food composition can also improve symptoms such as rough skin, insomnia, coldness, and menstrual irregularities as climacteric disorders.

本発明に係る脂肪蓄積予防用の食品組成物によれば、脂肪蓄積予防によるメタボリックシンドロームの改善だけでなく、肝臓機能低下抑制、血糖値制御、血圧制御用、美白効果向上、それに更年期障害改善にも優れた効能を発揮することができる。   According to the food composition for preventing fat accumulation according to the present invention, not only the improvement of metabolic syndrome by preventing fat accumulation, but also the suppression of liver function, blood sugar level control, blood pressure control, whitening effect improvement, and menopausal disorder improvement. Can also demonstrate excellent efficacy.

食品組成物(SOP)の成分分析の結果を示す図表である。It is a graph which shows the result of the component analysis of a food composition (SOP). 食品組成物(SOP)の成分分析のうちアミノ酸の含有比率を動物由来のプラセンタエキスと比較して示す図表である。It is a chart which compares the content ratio of an amino acid among the component analysis of a food composition (SOP) with the placenta extract derived from an animal. 動物実験Iの結果のうちカロリーの累積量を示すグラフである。It is a graph which shows the cumulative amount of calories among the results of animal experiment I. 動物実験Iの結果のうち体重変化を示すグラフである。It is a graph which shows a body weight change among the results of the animal experiment I. 動物実験Iの結果のうち空腹時血糖を示すグラフである。It is a graph which shows fasting blood glucose among the results of the animal experiment I. 動物実験Iの結果のうち中性脂肪を示すグラフである。It is a graph which shows neutral fat among the results of animal experiment I. 動物実験Iの結果のうち白色脂肪組織中のUCP-1のmRNA発現を示すグラフである。It is a graph which shows the mRNA expression of UCP-1 in a white adipose tissue among the results of animal experiment I. 動物実験Iの結果のうち白色脂肪組織中のFASとACC1のmRNA発現を示すグラフである。It is a graph which shows the mRNA expression of FAS and ACC1 in a white adipose tissue among the results of animal experiment I. 動物実験Iの結果のうち白色脂肪組織中のACDHとACO1のmRNA発現を示すグラフである。It is a graph which shows the mRNA expression of ACDH and ACO1 in a white adipose tissue among the results of the animal experiment I. 動物実験IIにおいて被験物質の投与0日目におけるラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。It is a microscope picture of the rat primary visceral fat cells on the 0th day of administration of the test substance in animal experiment II. 動物実験IIにおいて被験物質の投与2日目におけるラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。It is a microscope picture of the rat primary visceral fat cells on the second day of administration of the test substance in animal experiment II. 動物実験IIにおいて被験物質の投与4日目におけるノルエピネフリン添加前のラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。It is a microscope picture of the rat primary visceral fat cells before the addition of norepinephrine on the fourth day of administration of the test substance in animal experiment II. 動物実験IIにおいて被験物質の投与4日目におけるノルエピネフリン添加後のラット初代内臓脂肪細胞の顕微鏡写真である。It is a microscope picture of a rat primary visceral fat cell after addition of norepinephrine on the fourth day of administration of a test substance in animal experiment II. 動物実験IIにおいてノルエピネフリン添加前の褐色脂肪細胞の顕微鏡写真である。It is a microscope picture of the brown adipocyte before norepinephrine addition in the animal experiment II. 動物実験IIにおいてノルエピネフリン添加後の褐色脂肪細胞の顕微鏡写真である。It is a microscope picture of the brown fat cell after norepinephrine addition in the animal experiment II. 単回摂取試験のスケジュールを示す説明図である。It is explanatory drawing which shows the schedule of a single intake test. 単回摂取試験の評価・観察項目を示す表である。It is a table | surface which shows the evaluation and observation item of a single intake test. 連続摂取試験のスケジュールを示す説明図である。It is explanatory drawing which shows the schedule of a continuous ingestion test. 連続摂取試験の結果のうち脂質代謝に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding lipid metabolism among the results of a continuous ingestion test. 連続摂取試験の結果のうち肝機能指標に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding a liver function parameter | index among the results of a continuous ingestion test. 連続摂取試験の結果のうち肝機能指標に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding a liver function parameter | index among the results of a continuous ingestion test. 連続摂取試験の結果のうち血糖値とHbA1cに関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding a blood glucose level and HbA1c among the results of a continuous ingestion test. 連続摂取試験の結果のうち収縮期血圧に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding systolic blood pressure among the results of a continuous ingestion test. 連続摂取試験の結果のうち拡張期血圧に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding a diastolic blood pressure among the results of a continuous ingestion test. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の水分に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding the water | moisture content of skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のかさつきに関するデータを示す図表である。It is a graph which shows the data regarding the roughness of the skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の油分に関するデータを示すグラフである。It is a graph which shows the data regarding the oil content of skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の明度に関するデータを示すグラフである。It is a graph which shows the data regarding the brightness of the skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のくすみに関するデータを示す図表である。It is a graph which shows the data regarding the dullness of skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のきめに関するデータを示すグラフである。It is a graph which shows the data regarding the skin texture among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のなめらかさ、化粧のり、化粧もちに関するデータを示す図表である。It is a graph which shows the data regarding the smoothness of skin, makeup paste, and makeup mochi among the results of the monitor test of menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の色素沈着(小)に関するデータを示すグラフ群である。It is a graph group which shows the data regarding the pigmentation (small) of skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の色素沈着(大)に関するデータを示すグラフである。It is a graph which shows the data regarding the pigmentation (large) of skin among the results of the monitor test of various climacteric symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚の毛穴数に関するデータを示すグラフである。It is a graph which shows the data regarding the number of pores of skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験の結果のうち皮膚のしわ数に関するデータを示すグラフである。It is a graph which shows the data regarding the number of wrinkles of skin among the results of the monitor test of various menopausal symptoms. 更年期諸症状のモニター試験における更年期指数の自己採点の結果と評価法を示す図表である。It is a table | surface which shows the result of the self-scoring of the menopause index in the monitor test of the menopausal symptoms, and an evaluation method. 更年期諸症状のモニター試験における更年期指数の変化を示すグラフである。It is a graph which shows the change of the menopause index in the monitor test of the menopausal symptoms.

以下、本発明の具体的な実施の形態について説明する。
[食品組成物の概要]
本発明の食品組成物は、鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とするものであり、本件出願人らによりサーモンオバリーペプチド(Salmon Ovary Peptide)と称されている。オバリー(ovary)とは、卵巣の意味であり、鮭(salmon)の卵巣より抽出した機能性アミノ酸結合物(peptide)という意味から、SOP(登録商標)と命名している。
Hereinafter, specific embodiments of the present invention will be described.
[Outline of food composition]
The food composition of the present invention is mainly composed of a peptide extracted from the ovary rind of salmon and is called Salmon Ovary Peptide by the present applicants. “Ovary” means ovary and is named SOP (registered trademark) in the sense of a functional amino acid peptide extracted from the ovary of salmon.

SOPは、鮭(サケ目サケ科(Salmonidae))の筋子からイクラに加工する際に残るヒモ状のスジ(卵巣外皮)を酵素で加水分解した後、抽出して得られたペプチドのフリーズドライ品である。その性状は、淡黄色ないし黄茶色の粉末で特異なにおいがある。SOPの分類は、健康食品原料であり、食品原料名称は、サーモン由来プラセンタ様物質(鮭卵巣外皮加水分解抽出物)となる。なお、SOPを化粧品原料として用いる場合、その名称は、鮭卵巣外皮加水分解抽出物となる。   SOP is a freeze-dried peptide obtained by hydrolyzing the string-like streak (ovary rind) remaining after processing from salmon (Salmonidae) into salmon roe by enzyme and then extracting it. It is. Its properties are light yellow or yellowish brown powder with a unique smell. The classification of SOP is health food raw material, and the name of the food raw material is salmon-derived placenta-like substance (scalpel ovary skin hydrolyzed extract). In addition, when using SOP as a cosmetic raw material, the name will be a sputum ovary skin hydrolysis extract.

一般に、動物由来の食品組成物である場合、牛海綿状脳症(BSE)、口蹄疫、その他のウィルスや抗生物質等の影響を否定し切れないが、鮭の場合、陸上動物ではないので、これらウィルス等の心配は余りない。魚の卵巣外皮を比較的調達しやすいのは鮭であるが、それでも、鮭は動物と違い何度も出産しないから、一匹のメス鮭から一生かけてとれる量は1g程度にすぎない。原料となる鮭は、日本(北海道)産に限定される。海外からの輸入サーモンまたは養殖のサーモンは、検疫上において内蔵を全て取り除くため使用できないためである。   In general, in the case of animal-derived food compositions, the effects of bovine spongiform encephalopathy (BSE), foot-and-mouth disease, and other viruses and antibiotics cannot be denied. There is not much worry about. Although it is a shark that is relatively easy to procure ovarian rind of fish, the shark does not give birth many times unlike animals, so the amount that can be taken from a single female shark is only about 1 g. The raw material cocoon is limited to Japan (Hokkaido). This is because imported salmon from overseas or aquacultured salmon cannot be used because all of the built-in salmon is removed from the quarantine.

また、イスラム圏では陸上動物由来の胎盤(プラセンタ)が、宗教上の理由等から敬遠される場合があるが、魚由来であれば食品組成物としても使用することができる。また、哺乳類の胎盤を原料にしている場合に比べれば、魚由来のSOPに違和感を感じる人も少ない。特に、鮭の卵巣外皮は加工食品の筋子として古くからの食習慣があるため、なおさら抵抗がないと言える。   In the Islamic region, placenta (placenta) derived from terrestrial animals may be avoided for religious reasons, but can be used as a food composition if derived from fish. In addition, compared to the case where the placenta of mammals is used as a raw material, few people feel uncomfortable with fish-derived SOP. In particular, it can be said that the ovarian husk of the moth has no resistance since it has a long-standing dietary habit of processed food.

[食品組成物の調製]
SOPの調製方法としては、例えば、特許文献1に記載された製法を用いると良い。すなわち、鮭の卵巣外皮を脱血してから冷水で洗浄し、洗浄後、好ましくは室温以下のオゾン水で処理する。オゾン水での処理により、付着細菌の除菌および脱脂肪等が行なわれ、さらに、構成蛋白である筋原線維蛋白の収縮蛋白質(ミオシン)の変性が防止される。
[Preparation of food composition]
As a method for preparing the SOP, for example, a manufacturing method described in Patent Document 1 may be used. That is, after removing blood from the ovary husks of sputum, it is washed with cold water, and after washing, it is preferably treated with ozone water at room temperature or lower. By treatment with ozone water, sterilization and defatting of attached bacteria are performed, and further, denaturation of contractile protein (myosin) of myofibrillar protein, which is a constituent protein, is prevented.

オゾン水処理は、洗浄および脱水した卵巣外皮を、冷水を入れたタンク中で撹拌しながら、オゾン発生装置からオゾン濃度0.2〜10ppm/Lを供給し、5〜30分間室温以下で処理される。卵巣外皮が分散状態で存在しているオゾン処理液は、溶存しているオゾンを消失させるために、撹拌しながら酵素反応温度35〜50℃付近まで加温される。   The ozone water treatment is performed at room temperature or lower for 5 to 30 minutes by supplying the ozone concentration of 0.2 to 10 ppm / L from the ozone generator while stirring the washed and dehydrated ovarian skin in a tank containing cold water. The ozone treatment liquid in which the ovarian husk is present in a dispersed state is heated to an enzyme reaction temperature of around 35 to 50 ° C. with stirring in order to eliminate the dissolved ozone.

オゾンが消失した後、酵素で加水分解する。例えば、バチルス属の産生する蛋白分解酵素により、収縮蛋白質(ミオシン)を分解する。この分解液に、直接あるいは分解液中の酵素を温度80℃以上に加温し、15分間以上撹拌し酵素を失活させた後、糸状菌の産生する蛋白分解酵素を用いて、さらに低分子化と他種類の魚卵蛋白に由来する苦味やアミノ酸臭等の分解処理を行なう。この両酵素による処理は、卵巣外皮に対し、0.02〜0.2重量%の酵素を用いて、撹拌の下、処理温度55℃、処理時間5時間、いずれもほぼ同じ条件で行なわれる。   After ozone disappears, it is hydrolyzed with enzymes. For example, contractile protein (myosin) is degraded by a proteolytic enzyme produced by Bacillus. In this degradation solution, the enzyme in the degradation solution is heated directly to a temperature of 80 ° C. or higher, stirred for 15 minutes or more to deactivate the enzyme, and then further degraded with a protease produced by filamentous fungi. And digestion of bitterness and amino acid odor derived from other types of fish egg protein. The treatment with both enzymes is performed on the ovary skin using 0.02 to 0.2% by weight of the enzyme under stirring, at a treatment temperature of 55 ° C. and for a treatment time of 5 hours.

酵素処理を終えた処理液は、酵素を失活させた後、800メッシュの濾布を用いた遠心分離により固形物を、さらに限外濾過法によりコロイド状不純物を除去する。得られたペプチドを含む濾液は適度の濃度に濃縮した後、濾液を凍結乾燥法等により、成分の分解を極力回避する観点から、水分を速やかに除去して粉砕することで、フリーズドライ品となる。なお、フリーズドライ品の性状は、前述したように、淡黄色ないし黄茶色の粉末で特異なにおいがあるが、商品としての包装・梱包に際しては、外観や味に関して識別不能となるように、無臭の白色粉末に調製すると良い。   After the enzyme treatment is deactivated, the treatment liquid after the enzyme treatment is subjected to centrifugal separation using an 800 mesh filter cloth, and further, colloidal impurities are removed by ultrafiltration. The filtrate containing the obtained peptide is concentrated to an appropriate concentration, and from the viewpoint of avoiding decomposition of the component as much as possible by freeze-drying method, etc. Become. As described above, the freeze-dried product has a peculiar smell with a pale yellow to yellow-brown powder. However, when packaging and packing as a product, it is odorless so that the appearance and taste cannot be identified. It is recommended to prepare a white powder.

[食品組成物の成分分析]
得られた食品組成物(以下「SOP」)は、成分分析の結果、図1に示す成分を含むことが判明している。また、SOPに含まれるペプチドを構成するアミノ酸に関しては、成分分析の結果、図2に示すように、動物由来のプラセンタエキスとの比較において、必須アミノ酸の含有比率の比較では、豚プラセンタエキスにはないフェニルアラニンの含有が認められる以外は、必須アミノ酸の構成成分に大きな差はない。
[Ingredient analysis of food composition]
As a result of the component analysis, the obtained food composition (hereinafter referred to as “SOP”) has been found to contain the components shown in FIG. As for the amino acids constituting the peptides contained in SOP, as a result of component analysis, as shown in FIG. 2, in the comparison with the placenta extract derived from animals, There is no significant difference in the constituents of essential amino acids except that no phenylalanine content is observed.

また、それ以外のSOPにおけるアミノ酸の構成上の特徴は、チロシン、プロリン、グリシン、ハイドロキシプロリンが多く、システインが少ない点である。SOPは、サケの卵巣成熟期における脂肪酸の活用、糖質の活用が特に卵巣で盛んであることから、豚プラセンタエキス同様、ペプチドとして、脂肪酸利用、糖利用に対する特殊な効果を有すると期待できる。
なお、SOPの原料に関する分析、並びにSOPの成分分析から、残留農薬、その他、毒性のある金属、非鉄金属の含有はなく、有害物質は認められなかった。
In addition, other structural features of amino acids in SOP are that tyrosine, proline, glycine, and hydroxyproline are many and cysteine is small. SOP is expected to have special effects on fatty acid utilization and sugar utilization as a peptide, similar to porcine placenta extract, because fatty acid utilization and carbohydrate utilization are particularly active in the ovary during salmon ovarian maturation.
From the analysis of the raw materials for SOP and the component analysis of SOP, there were no residual pesticides, other toxic metals and non-ferrous metals, and no harmful substances were found.

[動物実験I]
SOPをラットに投与し、小動物における安全性試験を実施した結果、SOPには毒性がなく、安全性に問題は認められなかった。かかる結果を基に、SOPの機能の一つである脂肪蓄積予防の有効性を判断する目的で、今度はマウスを対象としたメタボリックシンドロームに関する実験を行った。
[Animal Experiment I]
As a result of administering SOP to rats and conducting a safety test in small animals, SOP was not toxic and no problem was observed in safety. Based on these results, in order to determine the effectiveness of fat accumulation prevention, which is one of the functions of SOP, an experiment on metabolic syndrome targeting mice was conducted.

1.実験方法
(1)使用動物
6週齢のマウスを15匹使用し、Normal、Control、SOPの3群に5匹(n=5)ずつグループ分けした。ここでNormal群は、強制水泳を負荷せず(-)、通常食(CE-2(登録商標))を給餌する群である。Control群は、強制水泳を負荷し(+)、高脂肪食(HFD32(登録商標))を給餌する群である。SOP群は、強制水泳を負荷し(+)、高脂肪食(HFD32)を給餌し、さらにSOPを投与する群である。
1. Experimental Method (1) Animals Used 15 6-week-old mice were used, and 5 mice (n = 5) were grouped into 3 groups, Normal, Control and SOP. Here, the Normal group is a group that does not load forced swimming (-) and feeds a normal diet (CE-2 (registered trademark)). The Control group is a group that loads forced swimming (+) and feeds a high fat diet (HFD32 (registered trademark)). The SOP group is a group in which forced swimming is loaded (+), a high fat diet (HFD32) is fed, and SOP is administered.

(2)飼育方法
室温(23±2℃)、相対湿度50〜60%、12時間の明暗サイクル(7:00〜19:00)の環境下で、個別のステンレスケージを用いて飼育した。
マウスへの給餌は、通常食として固形飼料(CE-2)、高脂肪食として固形飼料(HFD32)、それに水を、約3ヶ月(11週)にわたり自由摂取させた。
SOPは、設定濃度(100mg/kg)になるように生理食塩水で調整後、SOP群のマウスに直ちに強制経口投与を行った。
強制水泳について、実施期間中は28℃の水温で1日10分間の強制水泳を週3回(原則として月・水・金)負荷した。
なお、実験終了日の解剖に際し、全ての群のマウスで16時間の絶食を行った。
(2) Breeding method Breeding was carried out using individual stainless steel cages in an environment of room temperature (23 ± 2 ° C.), relative humidity 50-60%, and 12 hours light-dark cycle (7: 0 to 19:00).
The mice were fed freely with solid feed (CE-2) as a normal diet, solid feed (HFD32) as a high fat diet, and water for about 3 months (11 weeks).
The SOP was adjusted with physiological saline so as to have a set concentration (100 mg / kg), and then immediately orally administered to mice in the SOP group by gavage.
About forced swimming, during the implementation period, forced swimming for 10 minutes a day at a water temperature of 28 ° C. was loaded three times a week (in principle, Monday, Wednesday, and Friday).
In the dissection of the experiment end date, all groups of mice were fasted for 16 hours.

(3)評価項目
1)摂餌量(カロリー摂取量)、体重、精巣周囲白色脂肪重量、肩甲骨周囲褐色脂肪細胞重量
2)血液生化学検査:空腹時血糖、中性脂肪、総コレステロール、HDL、インスリン、レプチン
3)血中抗酸化活性:抗酸化活性(TEAC)、過酸化脂質(LPOTEAC)量
4)白色脂肪組織 mRNA:UCP-1、fattyacidsynthase(FAS)、acetyl-CoA carboxylase1(ACC1)
5)肝臓 mRNA:acy1-CoA dehydrogenase(ACDH)、acy1-CoA oxidase1(ACO1)
(3) Evaluation items 1) Food intake (calorie intake), body weight, peri-testicular white fat weight, periosteal brown fat cell weight 2) Blood biochemistry: fasting blood glucose, triglycerides, total cholesterol, HDL 3) Blood antioxidant activity: Antioxidant activity (TEAC), lipid peroxide (LPOTEAC) level 4) White adipose tissue mRNA: UCP-1, fattyacidsynthase (FAS), acetyl-CoA carboxylase1 (ACC1)
5) Liver mRNA: acy1-CoA dehydrogenase (ACDH), acy1-CoA oxidase1 (ACO1)

2.実験結果
(1)カロリー摂取量(摂餌量)
図3は、各群のマウスが実験期間中に摂取したカロリーの1匹あたりの累積量を示している。結果として、通常食を摂取したNormal群に比べ、高脂肪食を摂取したControl群、SOP群のカロリー摂取量は高く推移した。
(2)体重変化
図4は、各群のマウスの実験期間中における体重変化の推移を示している。結果として、通常食を給餌したNormal群と比較して、高脂肪食を摂取したControl群およびSOP群の体重は顕著に増加した。
また、SOP群では、Control群に比べて、有意な体重の抑制効果が認められた。
2. Experimental results (1) Calorie intake (food intake)
FIG. 3 shows the cumulative amount of calories consumed by each group of mice during the experimental period. As a result, the caloric intake in the Control group and SOP group ingesting a high fat diet was higher than in the Normal group ingesting a normal diet.
(2) Change in body weight FIG. 4 shows changes in body weight during the experimental period of mice in each group. As a result, the body weights of the Control group and the SOP group that ingested the high fat diet increased significantly compared to the Normal group fed with the normal diet.
In the SOP group, a significant body weight suppression effect was observed as compared to the Control group.

(3)血液生化学検査
1)空腹時血糖
図5は、各群のマウスの実験終了後における空腹時血糖の値を示している。結果として、通常食を給餌したNormal群と比較して、高脂肪食を摂取したControl群およびSOP群では有意な血糖の上昇を示した。
また、SOP群では、Control群に比べて、血糖値を抑える傾向が認められた。
2)中性脂肪
図6は、各群のマウスの実験終了後における中性脂肪の値を示している。結果として、SOP群およびControl群では、強制水泳の影響か、高脂肪食による中性脂肪の上昇は認められなかった。
また、SOP群では、Normal群やControl群よりも中性脂肪が低下していた。
3)総コレステロール、HDL、インスリン、レプチン
高脂肪食を摂取したControl群およびSOP群は、Normal群と比較して、有意な上昇が認められたが、これらに関しては、SOP付与の効果は認められなかった。
4)血中抗酸化活性 TEACおよびLPOTEAC
これらに関しては、SOPを投与することにより、Normal群およびControl群と比較して、わずかではあるが抗酸化活性が測定された。
また、Normal群とControl群に差が認められなかったことより、本実験における高脂肪食負荷による酸化ストレスの増大はなかった。
さらに、SOPの投与は、LPO値には影響を及ぼさなかった。
(3) Blood biochemistry test 1) Fasting blood glucose FIG. 5 shows the value of fasting blood glucose after the experiment of the mice in each group. As a result, compared with the Normal group fed with a normal diet, the Control group and SOP group that consumed a high fat diet showed a significant increase in blood glucose.
Moreover, the tendency which suppresses a blood glucose level was recognized in the SOP group compared with the Control group.
2) Neutral fat FIG. 6 shows the value of neutral fat after the end of the experiment for each group of mice. As a result, in the SOP group and the Control group, there was no effect of forced swimming or an increase in neutral fat due to a high fat diet.
In the SOP group, the neutral fat was lower than that in the Normal group and the Control group.
3) Total cholesterol, HDL, insulin, leptin A significant increase was observed in the Control group and SOP group ingested the high fat diet compared to the Normal group, but in these cases, the effect of SOP addition was observed. There wasn't.
4) Antioxidant activity in blood TEAC and LPOTEAC
Regarding these, administration of SOP measured a little antioxidant activity compared with the Normal group and the Control group.
Moreover, since there was no difference between the Normal group and the Control group, there was no increase in oxidative stress due to high-fat diet loading in this experiment.
Furthermore, administration of SOP did not affect LPO values.

(4)白色脂肪組織(WAT) mRNA解析 UCP-1
UCP-1は、ミトコンドリア内にあるタンパク質の一種であり、細胞膜の内膜において脂肪を燃焼させ熱を生み出す機能を持つ。肥満動物では、UCP-1 の機能が低下している事が知られている。
図7は、各群のマウスの実験終了後における白色脂肪組織中のUCP-1のmRNA発現の値を示している。結果として、高脂肪食摂取により、白色脂肪組織中のUCP-1のmRNA発現が有意に減少した(NormalとControlの比較)。
SOP群では、Control群と比較して有意に増加し、Normal群と同じ発現レベルに回復した。
(4) White adipose tissue (WAT) mRNA analysis UCP-1
UCP-1 is a kind of protein in mitochondria and has the function of burning fat in the inner membrane of the cell membrane to generate heat. It is known that the function of UCP-1 is reduced in obese animals.
FIG. 7 shows the value of UCP-1 mRNA expression in white adipose tissue after the experiment of each group of mice. As a result, ingestion of a high fat diet significantly reduced UCP-1 mRNA expression in white adipose tissue (Comparison between Normal and Control).
The SOP group significantly increased compared to the Control group, and recovered to the same expression level as the Normal group.

(5)白色脂肪組織(WAT) mRNA解析 FAS、ACC1
FASは、malonyl-CoAとacetyl-CoAから脂肪酸を合成する複活性ドメイン酵素のタンパク質である。ACC1は、acetyl-CoA からmalonyl-CoA を合成する酵素の一種であり、脂肪酸合成と脂肪酸β酸化の制御に関わり、主に肝臓と脂肪組織で発現する。
図8は、各群のマウスの実験終了後における白色脂肪組織中のFAS、ACC1のmRNA発現を示している。結果として、脂肪合成に関与するFASとACC1のmRNAは、ともに同じ傾向を示し、高脂肪食負荷により、mRNAレベルが減少した。
SOP群においては、Normal群と同程度か、それ以上のmRNAレベルを示すことが明らかとなった。
(5) White adipose tissue (WAT) mRNA analysis FAS, ACC1
FAS is a multi-active domain enzyme protein that synthesizes fatty acids from malonyl-CoA and acetyl-CoA. ACC1 is a kind of enzyme that synthesizes malonyl-CoA from acetyl-CoA, is involved in the regulation of fatty acid synthesis and fatty acid β-oxidation, and is mainly expressed in the liver and adipose tissue.
FIG. 8 shows mRNA expression of FAS and ACC1 in white adipose tissue after completion of the experiment for each group of mice. As a result, both FAS and ACC1 mRNA involved in fat synthesis showed the same tendency, and the mRNA level decreased due to high fat diet loading.
In the SOP group, it became clear that the mRNA level was comparable or higher than that in the Normal group.

(6)肝臓 mRNA解析 ACDH ACO1
ACDHおよびACO1は、ともに脂質代謝関連酵素の一種であり、脂質代謝(β酸化)に関与している。
図9は、各群のマウスの実験終了後における肝臓中のACDH、ACO1のmRNA発現を示している。結果として、SOP群では、これら酵素のmRNAレベルが増大した。
(6) Liver mRNA analysis ACDH ACO1
ACDH and ACO1 are both types of lipid metabolism-related enzymes and are involved in lipid metabolism (β oxidation).
FIG. 9 shows the mRNA expression of ACDH and ACO1 in the liver after completion of the experiment for each group of mice. As a result, mRNA levels of these enzymes were increased in the SOP group.

以上のように、メタボリックシンドロームに対するSOPの効果を、マウスの高脂肪食負荷モデルで検討した結果、高脂肪食摂取による体重増加や血中の中性脂肪量を減少させることができ、SOPのメタボリックシンドロームに対する有用性が示唆された。
白色脂肪組織において、UCP-1のmRNAレベルを、Normalレベルまで回復させたことは、細胞実験での結果を裏付ける結果であった。
メタボリックシンドロームにおいて、内臓脂肪細胞の量的な増加もそうであるが、脂肪細胞が肥大化するという質的な変化が問題視されている。SOPの投与により、脂肪合成関連酵素(FAS、ACC1)および脂肪分解関連酵素(AC01、ACDH)のmRNAの発現が上昇したことは、明らかに脂肪の代謝回転が惹起されていると考える。
これにより、SOPによれば、白色脂肪細胞の中性脂肪を燃焼させるタンパク質(UCP-1)の発現が高められる。すなわち、アドレナリンが作用して、ミトコンドリアが白色脂肪細胞(内臓脂肪細胞)を燃やして褐色脂肪細胞に変換する。これにより、メタボリックシンドロームが改善される。
As described above, as a result of examining the effect of SOP on metabolic syndrome using a high fat diet load model in mice, it is possible to reduce body weight gain and blood triglyceride content by ingesting a high fat diet. The usefulness against the syndrome was suggested.
The recovery of the UCP-1 mRNA level to the normal level in white adipose tissue was a result supporting the results of the cell experiment.
In the metabolic syndrome, the qualitative change in which fat cells are enlarged is regarded as a problem, as is the increase in visceral fat cells. The increase in mRNA expression of fat synthesis-related enzymes (FAS, ACC1) and lipolysis-related enzymes (AC01, ACDH) by the administration of SOP is considered to cause fat turnover.
Thereby, according to SOP, the expression of the protein (UCP-1) which burns the neutral fat of a white adipocyte is raised. That is, adrenaline acts, and mitochondria burn white fat cells (visceral fat cells) and convert them into brown fat cells. Thereby, the metabolic syndrome is improved.

[動物実験II]
ラット初代内臓脂肪細胞(VAC)を用いて、SOPのUCP-1遺伝子発現量に対する影響について試験管内で検討を行なった。
1.試験材料
(1)被験物質
SOPを、内臓脂肪細胞分化メディウム(プライマリーセル,Lot.No.071225)に最終濃度400,100,50μg/mLになるよう添加して使用した。
(2)陰性対照物質
無添加の内臓脂肪細胞分化メディウム(プライマリーセル,Lot.No.071225)を使用した。
(3)使用細胞
内臓脂肪細胞培養キットV-1(初代,ラット,プライマリーセル:Lot.No.GI2A-F)および褐色脂肪細胞培養キットF-1(初代,ラット,プライマリーセル:Lot.No.HCEA-4)を用いた。
(4)ノルエピネフリン(以下NE)
(-)-Norepinephrine(+)-bitartratesalthydrate(SIGMA:LotNo.103K0979)を使用した。
(5)Celllysateの調製
TRI-Reagent(MolecularResearchCenter:LotNo.3681)を使用した。
[Animal Experiment II]
Using rat primary visceral fat cells (VAC), the effect of SOP on UCP-1 gene expression level was examined in vitro.
1. Test material (1) Test substance SOP was added to visceral adipocyte differentiation medium (primary cell, Lot. No. 071225) to a final concentration of 400, 100, 50 μg / mL.
(2) Negative control substance An additive-free visceral adipocyte differentiation medium (primary cell, Lot. No. 071225) was used.
(3) Cells used Visceral fat cell culture kit V-1 (primary, rat, primary cell: Lot. No.GI2A-F) and brown adipocyte culture kit F-1 (primary, rat, primary cell: Lot. No. HCEA-4) was used.
(4) Norepinephrine (hereinafter NE)
(-)-Norepinephrine (+)-bitartratesalthydrate (SIGMA: Lot No. 103K0979) was used.
(5) Preparation of Celllysate
TRI-Reagent (Molecular Research Center: Lot No.3681) was used.

2.試験方法
(1)培養操作
1)内臓脂肪細胞(VAC)
内臓脂肪前駆細胞3.0×106cellsを24穴プレートに播種し(細胞数は1.2×105cells/mL/well)、4日間内臓脂肪分化メディウムにて予備培養を行った。予備培養後(播種後4日目)に陰性対照物質および被験物質を内臓脂肪分化メディウムで規定濃度に調製し、調製済み培地を細胞に添加した。
培地交換は、被験物質添加0,2,4日目(播種4,6,8日目)に行い、回収後は新しい調製済み培地を加えた。最終日は、NE未処理群についてはそのままRNAの抽出を行い、NE処理群については被験物質を規定濃度に、RNA抽出の6時間前にNEを1×10-6M濃度に内臓脂肪分化メディウムで調製して細胞に添加した。顕微鏡観察は、被験物質添加日およびNE添加前後に行い、代表例についてホフマンモジュールレンズによる写真撮影を行った。
2. Test method (1) Culture operation 1) Visceral fat cells (VAC)
Visceral fat precursor cells 3.0 × 10 6 cells were seeded in a 24-well plate (cell number was 1.2 × 10 5 cells / mL / well) and precultured with visceral adipose differentiation medium for 4 days. After the preculture (4 days after seeding), the negative control substance and the test substance were prepared with a visceral fat differentiation medium to a prescribed concentration, and the prepared medium was added to the cells.
The medium was exchanged on the 0th, 2nd and 4th days (seeding days 4, 6 and 8) after addition of the test substance, and a freshly prepared medium was added after the collection. On the last day, RNA is extracted as it is in the NE-untreated group, and in the NE-treated group, the test substance is adjusted to the specified concentration, and NE is extracted at 1 × 10-6M concentration with visceral adipose differentiation medium 6 hours before RNA extraction. Prepared and added to cells. Microscopic observation was performed on the test substance addition date and before and after the NE addition, and representative examples were photographed with a Hoffman module lens.

2)褐色脂肪細胞(BAT)
24穴プレートに播種された褐色脂肪細胞を、増殖用メディウムで3日間培養し、コンフルエントになったのを確認した。分化誘導培地に交換して48時間培養し、陰性対照物質および被験物質を維持メディウムで規定濃度に調製し、調製済み培地を細胞に添加した。培地交換は、被験物質添加0,2,4,5日目に行い、回収後は新しい調製済み培地を加えた。NE処理については、VACと同様の処理を維持メディウムで行った。顕微鏡観察は、NE添加前後に行い、代表例についてホフマンモジュールレンズによる写真撮影を行った。
2) Brown adipocytes (BAT)
Brown adipocytes seeded in a 24-well plate were cultured in a growth medium for 3 days to confirm that they became confluent. The culture medium was replaced with a differentiation-inducing medium and cultured for 48 hours. Negative control substances and test substances were prepared with a maintenance medium at a prescribed concentration, and the prepared medium was added to the cells. The medium was replaced on the 0th, 2nd, 4th, and 5th days after addition of the test substance, and a freshly prepared medium was added after the collection. For NE treatment, the same treatment as VAC was performed with maintenance medium. Microscopic observation was performed before and after the addition of NE, and photographs of typical examples were taken using a Hoffman module lens.

(2)Celllysateの調製
培養終了後に1ウェル当たり400μLのTRI-Reagentを加えてピペッティングを行い、3ウェル分を1本のエッペンチューブに封入して直ちに−80℃で凍結保存した。
(2) Preparation of Celllysate After completion of the culture, 400 μL of TRI-Reagent was added per well and pipetting was performed. Three wells were sealed in one Eppendorf tube and immediately stored frozen at −80 ° C.

(3)RNAの抽出
サンプルを解凍した後、室温で10分間以上インキュベートした。200mLのクロロホルムを加えてよくvortexmixerで30秒間攪拌した後、20,000×g,10分間,4℃の遠心により相分離を行った。上清を別の1.5mLチューブに採取し、上清と同量の冷イソプロパノールを加えて攪拌した後、10分間インキュベートし、20,000×g、10分間、4℃の遠心によりRNAを析出させた。上清を除去し、1mLの70%エタノールにて洗浄後、20,000×g,5分間,4℃で遠心分離して上清を除き、風乾させた。これにDEPC処理した精製水を加えて総RNA溶液とした。得られたRNA溶液の濃度は吸光光度計を用いて260nmの吸光度を測定することにより算出した。
(3) Extraction of RNA After thawing the sample, it was incubated at room temperature for 10 minutes or more. After adding 200 mL of chloroform and stirring with a vortexmixer for 30 seconds, phase separation was performed by centrifugation at 20,000 × g for 10 minutes at 4 ° C. The supernatant was collected in another 1.5 mL tube, and the same amount of cold isopropanol as the supernatant was added and stirred, followed by incubation for 10 minutes, and RNA was precipitated by centrifugation at 20,000 × g for 10 minutes at 4 ° C. The supernatant was removed, washed with 1 mL of 70% ethanol, centrifuged at 20,000 × g for 5 minutes at 4 ° C. to remove the supernatant, and air-dried. DEPC-treated purified water was added thereto to make a total RNA solution. The concentration of the obtained RNA solution was calculated by measuring the absorbance at 260 nm using an absorptiometer.

(4)TotalRNAの逆転写反応
1stStrandcDNASynthesiskitforRT-PCR(AMV)(Roche)を使用した。抽出・精製したtotalRNA2.5mg分をRNaseFreeWaterで希釈し23.2mLにした。これに10×ReactionBuffer5mL,25mMMgCl210mL,DeoxynucleotideMix5mL,Random Primer5mLを加え、よく撹拌して、スピンダウンした後65℃で5分間インキュベートした。RNaseInhibitor1mLとAMVReverseTranscriptase0.8mLを加え、室温で10分間、次に42℃で60分間、つづいて95℃で5分間インキュベートし、cDNAを合成した。
(4) Total RNA reverse transcription reaction
1stStrand cDNA Synthesis kit for RT-PCR (AMV) (Roche) was used. 2.5 mg of extracted and purified total RNA was diluted with RNaseFreeWater to make 23.2 mL. To this, 10 × ReactionBuffer 5 mL, 25 mM MgCl 210 mL, Deoxynucleotide Mix 5 mL, and Random Primer 5 mL were added, stirred well, spun down, and incubated at 65 ° C. for 5 minutes. 1 mL of RNase Inhibitor and 0.8 mL of AMVReverseTranscriptase were added and incubated at room temperature for 10 minutes, then at 42 ° C. for 60 minutes, and then at 95 ° C. for 5 minutes to synthesize cDNA.

(5)Real-timePCR
AppliedBiosystems7500RealTimePCRSystem(AppliedBiosystems,Foster City,CA)を使用し、標準的なTaqManPCRkitプロトコールによりReal-timePCRを行った。
TaqManUniversalPCRMasterMix,rodentGAPDHおよびratucp-1のプライマー・プローブは全てAppliedBiosystemsより購入した。5mLRTproduct,2xTaqManUniversalPCRMasterMix,0.25mMTaqManprobe,0.9mMforwardprimerおよび0.9mMreverseprimerを含有した50mLPCR反応溶液を使用した。96穴プレート上で反応を行い、反応条件として、95℃で10分の後、95℃で15秒に続く60℃で1分のプログラムを40サイクル行った。
(5) Real-time PCR
Real-time PCR was performed using the Applied Biosystems 7500 RealTime PCR System (Applied Biosystems, Foster City, Calif.) According to the standard TaqMan PCR kit protocol.
TaqManUniversalPCRMasterMix, rodentGAPDH and ratucp-1 primer / probe were all purchased from AppliedBiosystems. A 50 mL PCR reaction solution containing 5 mL RT product, 2 × TaqManUniversal PCR MasterMix, 0.25 mM MTaqManprobe, 0.9 mM forwardprimer and 0.9 mM reverseprimer was used. The reaction was carried out on a 96-well plate, and the reaction conditions were 10 minutes at 95 ° C., followed by 40 cycles of a program of 1 minute at 60 ° C. for 15 seconds at 95 ° C.

3.試験結果
(1)細胞形態観察顕微鏡写真(VAC)
1)被験物質投与0日目(播種4日目)
内臓脂肪細胞を播種してから4日目に、各被験物質調製済みの培養液1mLを添加し、顕微鏡観察および代表例の写真撮影を行なった。
図10の顕微鏡写真に示すように、各ウェルの全体を観察したところ、脂肪細胞に脂肪滴が蓄積し始めたのが確認された。
各群間での差異は認められず、試験系が各群同条件で行われていることが確認された。
3. Test results (1) Photomicrograph of cell morphology (VAC)
1) Day 0 of administration of test substance (Day 4 of sowing)
On the 4th day after seeding the visceral fat cells, 1 mL of the culture solution prepared for each test substance was added, and microscopic observation and photography of representative examples were performed.
As shown in the micrograph of FIG. 10, when the whole of each well was observed, it was confirmed that fat droplets started to accumulate in the fat cells.
There was no difference between each group, confirming that the test system was conducted under the same conditions for each group.

2)被験物質投与2日目(播種6日目)
図11の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞も見られるが、成熟した脂肪細胞が多く見られた。また、肥大化した脂肪細胞が若干増え始めた。
SOP50μg/mL添加群では、陰性対照群と比較し、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞が多く、肥大化した脂肪細胞はほとんど認められなかった。
SOP100μg/mL添加群では、陰性対照群、50μg/mL添加群と比較して、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞の数は同程度であったが、成熟した脂肪細胞および肥大化した脂肪細胞は少なかった。
SOP400μg/mL添加群では、陰性対照群、50μg/mL添加群および100μg/mL添加群と比較し、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞は多く見られたが、成熟した脂肪細胞の数は更に少なかった。
いずれの群においても、細胞障害の様子は確認されなかった。
2) Test substance administration day 2 (seeding day 6)
As shown in the micrograph of FIG. 11, in the negative control group, adipocytes that accumulated small lipid droplets were also observed, but many mature adipocytes were observed. In addition, the number of enlarged fat cells began to increase slightly.
In the SOP 50 μg / mL addition group, compared with the negative control group, there were many adipocytes that accumulated small lipid droplets, and almost no enlarged fat cells were observed.
Compared with the negative control group and the 50 μg / mL addition group, the number of adipocytes that accumulated small lipid droplets was similar in the SOP 100 μg / mL addition group, but mature and hypertrophic adipocytes There were few.
Compared with the negative control group, the 50 μg / mL addition group, and the 100 μg / mL addition group, the SOP 400 μg / mL addition group showed more fat cells that accumulated small lipid droplets, but the number of mature adipocytes was still smaller. It was.
No cell damage was observed in any group.

3)被験物質投与4日目(播種8日目)NE添加前
図12の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、殆どの脂肪細胞が成熟細胞になり、肥大化している細胞も多くみられた。
SOP50μg/mL添加群では、成熟した脂肪細胞が増加した。また、肥大化した脂肪細胞も若干見られたが、陰性対照群と比較して、肥大化した脂肪細胞の数は少なかった。
SOP100μg/mL添加群では、50μg/mL添加群よりも小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞が多く見られ、成熟した脂肪細胞は少なかった。また、肥大化した脂肪細胞の数も少なかった。
SOP400μg/mL添加群では、陰性対照群、50μg/mL添加群および100μg/mL添加群と比較し、小さな脂肪滴を蓄積した脂肪細胞が多く見られた。成熟した脂肪細胞や肥大化した脂肪細胞もわずかに見られたが、脂肪細胞の数は少なかった。
いずれの群においても、細胞障害の様子は確認されなかった。
3) Test substance administration day 4 (seeding day 8) Before NE addition As shown in the micrograph of FIG. 12, in the negative control group, most adipocytes become mature cells and many cells are enlarged. It was.
In the SOP 50 μg / mL addition group, mature adipocytes increased. In addition, some fat cells were enlarged, but the number of fat cells enlarged was small compared to the negative control group.
In the SOP 100 μg / mL addition group, more fat cells accumulated smaller fat droplets than in the 50 μg / mL addition group, and there were fewer mature fat cells. In addition, the number of enlarged fat cells was small.
In the SOP 400 μg / mL addition group, there were many adipocytes in which small lipid droplets accumulated, compared with the negative control group, the 50 μg / mL addition group, and the 100 μg / mL addition group. There were a few mature fat cells and enlarged fat cells, but the number of fat cells was small.
No cell damage was observed in any group.

4)被験物質投与4日目(播種8日目)NE添加後
図13の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、脂肪滴が縮小している細胞も認められたが、変化があまりないものや肥大化している細胞も多くみられた。
SOP50μg/mL添加群では、脂肪滴の縮小が認められたものも多かったが、肥大化した脂肪滴も陰性対照と同程度認められた。
SOP100μg/mL添加群では、50μg/mL添加群よりも脂肪滴が縮小した脂肪細胞が多く見られ、変化しない細胞が少なかった。肥大化した脂肪滴は、50μg/mL添加群よりも若干少なかった。
SOP400μg/mL添加群では、100μg/mL添加群よりもさらに脂肪滴が縮小した脂肪細胞が多く見られ、脂肪滴の小さな脂肪細胞が多く観察された。肥大化した脂肪滴は、100μg/mL添加群と同程度認められた。
4) Test substance administration day 4 (seeding day 8) After NE addition As shown in the micrograph of FIG. 13, in the negative control group, cells with reduced lipid droplets were also observed, but there was not much change. Many cells and bloated cells were also seen.
In the SOP 50 μg / mL addition group, there were many cases in which lipid droplets were reduced, but enlarged lipid droplets were also observed in the same degree as the negative control.
In the SOP 100 μg / mL addition group, more adipocytes with reduced lipid droplets were seen and fewer cells remained unchanged than in the 50 μg / mL addition group. The enlarged fat droplets were slightly smaller than those in the 50 μg / mL addition group.
In the SOP 400 μg / mL addition group, more adipocytes with smaller lipid droplets were observed and more adipocytes with smaller lipid droplets were observed than in the 100 μg / mL addition group. Enlarged fat droplets were observed in the same degree as in the 100 μg / mL addition group.

(2)細胞形態観察顕微鏡写真(BAT)
1)NE添加前
図14の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群では、殆どの脂肪細胞が成熟細胞になり、肥大化している細胞も多くみられた。
SOP400μg/mL添加群では、陰性対照群に比べて小さな脂肪滴を数多く溜めている脂肪細胞が多く見られた。
いずれの群においても、細胞障害の様子は確認されなかった。
2)NE添加後
図15の顕微鏡写真に示すように、陰性対照群、SOP400μg/mL添加群とも、殆どの脂肪細胞がVACよりも早く反応が起き、形態的にも1時間後には大きな変化を確認できた。
SOP400μg/mL添加群では、陰性対照群に比べて形態的変化からは大きな差は確認できなかった。
(2) Microscopic photograph of cell morphology (BAT)
1) Before NE addition As shown in the micrograph in FIG. 14, in the negative control group, most of the fat cells became mature cells, and many cells were enlarged.
In the SOP 400 μg / mL addition group, more adipocytes in which many small lipid droplets were accumulated than in the negative control group were observed.
No cell damage was observed in any group.
2) After NE As shown in the micrograph of FIG. 15, in both the negative control group and the SOP 400 μg / mL addition group, most adipocytes react faster than VAC, and morphologically change significantly after 1 hour. It could be confirmed.
In the SOP 400 μg / mL addition group, a large difference was not confirmed from the morphological change compared to the negative control group.

(3)遺伝子発現解析結果
VACでは、NE未添加時におけるUCP-1遺伝子発現は検出限界以下であり、被験物質投与群においても、全ての群で検出限界以下であった。
VACのNE処理群では、全ての群でUCP-1遺伝子発現が認められた。
VACのNE処理群において、SOP400μg/mL添加群では、コントロールに比べて高いUCP-1遺伝子発現値を示した。
BATでは、NE処理の有無に関わらずUCP-1遺伝子発現が認められた。
BATのNE未処理群では、コントロールとSOP400μg/mL添加群のUCP-1遺伝子発現量は、ほぼ同等であった。
BATのNE処理群において、SOP400μg/mL添加群では、コントロールに比べてわずかに高いUCP-1遺伝子発現値を示した。
(3) Results of gene expression analysis
In VAC, the expression of UCP-1 gene when NE was not added was below the detection limit, and even in the test substance-administered group, it was below the detection limit in all groups.
In the VAC NE treatment group, UCP-1 gene expression was observed in all groups.
In the VAC NE treatment group, the SOP 400 μg / mL addition group showed a higher UCP-1 gene expression value than the control.
In BAT, UCP-1 gene expression was observed with or without NE treatment.
In the BAT NE-untreated group, the UCP-1 gene expression levels of the control and SOP 400 μg / mL added groups were almost the same.
In the BAT NE treatment group, the SOP 400 μg / mL addition group showed a slightly higher UCP-1 gene expression value than the control.

(4)考察
本試験では、脂肪蓄積抑制効果の検討を行なったが、被験物質投与2日目から4日目にかけての脂肪細胞の形態変化を観察すると、SOPは、肥大化脂肪細胞の数が陰性対照群よりも少ないことから、脂肪蓄積抑制効果よりも、成熟脂肪細胞から肥大化脂肪細胞への移行を抑制する効果が期待できると推察された。
SOPの高用量群を400μg/mLに設定したが、播種8日目においても細胞毒性が見られなかったことから、SOPを大量に摂取したとしても、内臓脂肪細胞には害を及ぼさない物質であると推察された。
UCP-1遺伝子発現解析結果より、内臓脂肪細胞、褐色脂肪細胞ともに、SOP添加群では、NE添加時におけるUCP-1遺伝子発現量を増やす傾向が見られたことから、SOPの添加によって、内臓脂肪細胞の褐色脂肪化、または褐色脂肪細胞のNE反応性向上による熱産生反応促進効果を持つ可能性が示唆された。
以上のことから、SOPは、過剰摂取をしても体内での脂肪細胞への悪影響は認められず、脂肪細胞の熱産生反応向上による抗肥満効果があると考えられる。
(4) Discussion In this study, the effect of suppressing fat accumulation was examined. When morphological changes of fat cells were observed from the 2nd day to the 4th day after administration of the test substance, SOP showed that the number of enlarged fat cells Since it was less than the negative control group, it was speculated that the effect of suppressing the transition from matured adipocytes to enlarged fat cells could be expected rather than the effect of suppressing fat accumulation.
Although the high dose group of SOP was set to 400 μg / mL, no cytotoxicity was observed even on the 8th day of seeding. Therefore, even if a large amount of SOP is ingested, it is a substance that does not harm visceral fat cells. It was inferred that there was.
From the results of UCP-1 gene expression analysis, both visceral adipocytes and brown adipocytes tended to increase the expression level of UCP-1 gene at the time of NE addition in the SOP addition group. It was suggested that there may be an effect of promoting the heat production reaction by brown fat formation of cells or improvement of NE reactivity of brown fat cells.
From the above, SOP is considered to have an anti-obesity effect by improving the heat production reaction of adipocytes without adversely affecting the fat cells in the body even if overdose.

[単回摂取試験]
前述した動物実験の結果を基に、SOPの機能性食材としての開発の可能性およびヒトにおける安全性を判断することを目的として、健常者を対象とした単回投与試験を実施するに至った。
[Single intake test]
Based on the results of the animal experiments described above, a single-dose study was conducted for healthy subjects with the aim of determining the possibility of development of SOP as a functional food and safety in humans. .

1.試験方法
健常人男性を被験者として、SOP125mg、625mgの2用量群の無作為化オープン並行群間の比較試験により、身体所見および臨床検査値の変化を確認した。
(1)被験者
同意取得時の満年齢が20歳以上60歳未満の男性12名を、年齢、体重、BMIが均等になるように無作為割付で2群に6人ずつグループ分けした。なお、被験者は、既往歴および現病歴で明確な基礎疾患がないことを条件とした。また、過去に心臓病、脳血管疾患の手術歴、治療歴のある方、肝炎、肝疾患の既往歴、治療歴のある方、精神疾患の既往歴、治療歴のある方は除く等、一定の除外基準を設けた。
(2)試験食
SOPとして、125mgまたは625mgを含有する白色粉末(外観、味、におい等で識別不可能にしてある)。
1. Test method Changes in physical findings and laboratory test values were confirmed by a comparative study between two randomized open parallel groups of SOP 125 mg and 625 mg in healthy male subjects.
(1) Subjects Twelve men aged 20 to under 60 at the time of obtaining consent were grouped into two groups of 6 in a random assignment so that age, weight, and BMI were equal. The subjects were subject to the absence of a clear underlying disease in their past and current medical history. In addition, excluding those with previous history of heart disease, cerebrovascular disease surgery, treatment history, hepatitis, liver disease history, history of treatment, history of mental illness, history of treatment, etc. Exclusion criteria were established.
(2) Test meal White powder containing 125 mg or 625 mg as SOP (distinguishable by appearance, taste, smell, etc.).

(3)試験内容
図16は試験のスケジュールを示し、図17は試験の評価・観察項目を示している。
図16に示すように、被験者に試験内容の説明を行い同意を取得した後(検査(1))、被験者は試験前日より入院する。入院1日目の12時間前(検査(2))に採血等を行い、21時以降は絶食、0時以降は飲料の摂取も控えるものとした。被験者は入院2日目に試験食を1回だけ摂取し、その直後の0時(検査(3))、2時間後(検査(4))、6時間後(検査(5))、12時間後(検査(6))に、それぞれ採血を行った。
(3) Test Contents FIG. 16 shows a test schedule, and FIG. 17 shows test evaluation / observation items.
As shown in FIG. 16, after explaining the test contents to the subject and obtaining consent (examination (1)), the subject is hospitalized from the day before the test. Blood was collected 12 hours before the first day of hospitalization (Study (2)), fasting after 21:00, and refraining from drinking after 00:00. Subjects ingested the test meal only once on the second day of hospitalization, and immediately after that, 0:00 (examination (3)), 2 hours later (examination (4)), 6 hours later (examination (5)), 12 hours Later (test (6)), blood was collected.

(4)評価項目
1)臨床検査値の異常:試験開始前に対する投与中、投与終了後の臨床検査値の変化量、変化率を求め評価した。ここでの臨床検査値は、図17の検査項目に関するものである。
2)血圧、心拍数:試験開始前に対する投与中、投与終了後の血圧、心拍数の変化量、変化率を求め評価した。
(4) Evaluation items 1) Abnormal laboratory test values: During the administration before the start of the study, the amount of change and the rate of change in the laboratory test values after the administration were obtained and evaluated. The clinical test values here relate to the test items in FIG.
2) Blood pressure and heart rate: During the administration before the start of the test, the blood pressure after the administration, the amount of change in heart rate and the rate of change were obtained and evaluated.

2.試験結果
1)安全性
試験食の摂取開始前の身体所見について、摂取後24時間までの調査においては有害事象、特記すべき症状の変化は、低用量群(125mg)、高用量群(625mg)のいずれについても認めなかった。
2)試験食の効果
高用量群では、摂取後に低用量群に比して、γ-GTPの低下が認められた。γ-GTPは肝細胞の解毒過程における細胞の過剰負荷状態において、肝細胞膜透過性が亢進することで血中に遊離するとされる。
臨床医学的には、肝臓解毒機能の指標と考えられている。アルコール性肝臓障害、脂肪肝等での血中γ-GTPの上昇が報告されている。
本試験の結果により、SOPは肝機能低下を抑制する機能を備えるものと判断できる。
2. Test results 1) Safety Regarding physical findings prior to the start of intake of the test meal, adverse events and noteworthy changes in the investigation up to 24 hours after intake were as follows: low dose group (125 mg), high dose group (625 mg) None of these were recognized.
2) Effect of test meal In the high-dose group, a decrease in γ-GTP was observed after ingestion compared to the low-dose group. γ-GTP is said to be released into the blood due to increased permeability of hepatocyte membranes in an overloaded state of cells during the detoxification process of hepatocytes.
Clinically, it is considered an indicator of liver detoxification function. An increase in blood γ-GTP due to alcoholic liver injury, fatty liver, etc. has been reported.
From the results of this test, it can be determined that SOP has a function of suppressing a decrease in liver function.

[連続摂取試験]
メタボリックシンドロームの判定基準のいずれかに該当する等の被験者を対象として、SOP入りドリンクを引用することによる長期の安全性の確認を目的とし、連続摂取試験を実施した。
[Continuous intake test]
A continuous ingestion test was conducted for the purpose of confirming long-term safety by quoting a drink containing SOP for subjects who meet any of the criteria for metabolic syndrome.

1.試験方法
SOPによるメタボリックシンドロームの諸指標に対する効果を探索すると共に、肝機能の改善効果についても副次評価項目として検討した。
(1)被験者
同意取得時の満年齢が20歳以上60歳未満の男女28名を、2群に14人ずつグループ分けし、一方をSOP群、他方をブラセボ群(B群)とした。なお、対象者は、既往歴および現病歴で明確な基礎疾患がないことを条件とした。また、過去に心臓病、脳血管疾患の手術歴、治療歴のある方、肝炎、肝疾患の既往歴、治療歴のある方、精神疾患の既往歴、治療歴のある方は除く等、一定の除外基準を設けた。
(2)試験ドリンク
SOPとして500mgを含有するドリンク(50ml)、またはブラセボドリンク(SOPを含有しない)。
1. Test Method The effects of SOP on the various metabolic syndrome indicators were searched, and the liver function improvement effect was also examined as a secondary evaluation item.
(1) Subjects 28 men and women who were 20 years old or older and less than 60 years old when consent was obtained were grouped into two groups of 14 people, one in the SOP group and the other in the placebo group (B group). The subjects were conditioned on the absence of a clear underlying disease in the past and current medical history. In addition, excluding those with previous history of heart disease, cerebrovascular disease surgery, treatment history, hepatitis, liver disease history, history of treatment, history of mental illness, history of treatment, etc. Exclusion criteria were established.
(2) Test drink A drink (50 ml) containing 500 mg as SOP, or a placebo drink (containing no SOP).

(3)試験内容
図18は、試験のスケジュールを示している。
図18に示すように、先ず被験希望者に試験内容の説明を行い同意を取得した後、エントリーした者に対して予備試験を行った。予備試験の結果、適格性確認した男女28名を、年齢、体重、BMIが均等になるように、無作為割付で2群に14人ずつグループ分けした。
12週間の試験期間中にわたり毎日、SOP群では、SOP500mgを含有するドリンク(50ml)を、ブラセボ群では、ブラセボドリンク(50ml)を、それぞれ早朝または朝食時に1本摂取した。かかる試験期間中において、試験開始時(0週)、6週目、12週目に、それぞれ採血、採尿等を行った。
(3) Test Contents FIG. 18 shows a test schedule.
As shown in FIG. 18, the test contents were first explained to the test applicant and consent was obtained, and then a preliminary test was performed on the person who entered the test. As a result of the preliminary test, 28 men and women who were confirmed to be eligible were grouped into 14 groups in 2 groups by random allocation so that age, weight and BMI were equal.
Every day during the 12-week study period, a drink containing 50 mg of SOP (50 ml) was taken in the SOP group, and a placebo drink (50 ml) was taken in the placebo group, one early in the morning or at breakfast. During the test period, blood collection, urine collection, and the like were performed at the start of the test (week 0), week 6, and week 12, respectively.

(4)評価項目
1)臨床検査値の異常:試験開始時(0週)、6週目、12週目における臨床検査値の変化量、変化率を求め評価した。
2)血圧、心拍数:試験開始時(0週)、6週目、12週目における血圧、心拍数の変化量、変化率を求め評価した。
3)特に、下記の項目を副次的評価項目として検討した。
・脂質指標の変化(中性脂肪、LDL・HDLコレステロール)
・肝機能指標の変化(γ-GTP、AST、ALT)
・血糖指標の変化(血糖値、HbA1c)
・血圧の変化(収縮期血圧、拡張期血圧)
(4) Evaluation items 1) Abnormalities in clinical laboratory values: The amount of change and the rate of change in clinical laboratory values at the start of the test (week 0), weeks 6 and 12, were evaluated.
2) Blood pressure and heart rate: Blood pressure, changes in heart rate and rate of change at the start of the test (week 0), weeks 6 and 12, and evaluated.
3) In particular, the following items were examined as secondary evaluation items.
・ Changes in lipid index (neutral fat, LDL / HDL cholesterol)
・ Changes in liver function indices (γ-GTP, AST, ALT)
・ Changes in blood glucose index (blood glucose level, HbA1c)
・ Changes in blood pressure (systolic blood pressure, diastolic blood pressure)

2.試験結果
(1)安全性
SOP群の被験者に関しては、12週間にわたる連続摂取において、有害事象の特記すべき症状の変化は認められず、安全性が確認された。
(2)副次的評価項目について
1)脂質代謝
臨床検査値に関し、中性脂肪、LDL・HDLコレステロールの実測値については、群間で明確な傾向は見られなかったので、図19に示すように階層解析を行った。
図19(a)に示すように、摂取前中性脂肪150ml/dL以上においては、有意差は認められなかったが、SOP群で実測値および変化量とも減少傾向が見られた。従って、中性脂肪高値の人の場合には、中性脂肪値の改善効果が推測される。
図19(b)に示すように、摂取前中性脂肪140ml/dL未満においては、変化量では、SOP群の方がブラセボ群より、LDLコレステロールの上昇が抑制された。従って、LDLコレステロールがやや高値の人の場合には、その上昇抑制効果があると推測される。
2)肝機能指標(γ-GTP、AST、ALT)
図20は、被験者のうち群別、男女別に、γ-GTPの分布と変化量の推移(a)、ASTの分布と変化量の推移(b)、ALTの分布と変化量の推移(c)を示している。各グラフ中の「PM」はブラセボ群の男性、「PF」はブラセボ群の女性、「SOPM」はSOP群の男性、「SOPF」はSOP群の女性の略である。
図21は、はずれ値(2人分)を除く、γ-GTPの分布と変化量の推移(a)、ASTの分布と変化量の推移(b)、ALTの分布と変化量の推移(c)を示している。
これら図20,図21に示す結果のように、明確な有意差は見られなかったが、全て減少傾向にあった。さらに、AST、ALTにおいては、SOP群がより低下傾向であった。従って、SOPは、肝機能低下を抑制して肝機能の改善に効果がある可能性も考えられる。
2. Test results (1) Safety Regarding the subjects in the SOP group, no significant change in symptom of adverse events was observed after 12 weeks of continuous ingestion, confirming safety.
(2) Secondary evaluation items 1) Lipid metabolism As for clinical laboratory test values, there was no clear tendency between groups for the measured values of neutral fat and LDL / HDL cholesterol, as shown in FIG. Hierarchical analysis was performed.
As shown in FIG. 19 (a), no significant difference was observed in the neutral fat before intake of 150 ml / dL or more, but both the actual measurement value and the change amount showed a decreasing tendency in the SOP group. Therefore, in the case of a person with a high neutral fat value, the effect of improving the neutral fat value is estimated.
As shown in FIG. 19 (b), the increase in LDL cholesterol was more suppressed in the SOP group than in the placebo group in the amount of change at neutral fat before intake of less than 140 ml / dL. Therefore, in the case of a person with slightly high LDL cholesterol, it is presumed that there is an increase suppressing effect.
2) Liver function index (γ-GTP, AST, ALT)
FIG. 20 shows γ-GTP distribution and change (a), AST distribution and change (b), and ALT distribution and change (c) for each subject group and gender. Is shown. In each graph, “PM” is an abbreviation for a male in the placebo group, “PF” is an abbreviation for a female in the placebo group, “SOPM” is an male in the SOP group, and “SOPF” is an abbreviation for a female in the SOP group.
FIG. 21 shows the transition of γ-GTP distribution and change (a), AST distribution and change (b), ALT distribution and change (c) excluding outliers (for two people). ).
As shown in these results shown in FIGS. 20 and 21, no clear significant difference was observed, but all were in a decreasing trend. Furthermore, in AST and ALT, the SOP group tended to decrease. Therefore, SOP may be effective in improving liver function by suppressing liver function decline.

3)血糖値、HbA1c
図22は、被験者の群別における血糖値の観察時点ごとの推移と変化量の推移(a)、同じく群別におけるHbA1cの観察時点ごとの推移と変化量の推移(b)を示している。
この図22に示す結果のように、SOP群は、ブラセボ群より血糖値の上昇が抑えられる傾向にあった。また、SOP群では、HbA1cが低値に抑えられる傾向にあった。
HbA1cは、赤血球の中に含まれるヘモグロビンにブドウ糖が結合したもので、検査日から過去1〜2ヵ月間の平均血糖値を反映する血糖コントロールの指標といわれており、SOPの摂取により、血糖値を安定的に維持する効果があったと考えられる。
3) Blood glucose level, HbA1c
FIG. 22 shows changes in the blood glucose level for each observation time point and changes in the amount of change (a), and changes in the amount of HbA1c for each observation time point in the group and changes in the change amount (b).
As in the results shown in FIG. 22, the SOP group tended to suppress an increase in blood glucose level compared to the placebo group. In the SOP group, HbA1c tended to be suppressed to a low value.
HbA1c is a combination of hemoglobin contained in red blood cells with glucose, and is said to be an indicator of blood glucose control that reflects the average blood glucose level over the past 1 to 2 months from the test date. It is thought that there was an effect of maintaining the stability stably.

4)血圧(収縮期血圧、拡張期血圧)
図23は、収縮期血圧の被験者全体(a)、男性(b)、女性(c)別の観察時点ごとの推移と変化量の推移を示している。
図24は、拡張期血圧の被験者全体(a)、男性(b)、女性(c)別の観察時点ごとの推移と変化量の推移を示している。
これら図23、図24に示す結果により、収縮期血圧に関しては、いずれの群でも低下傾向にあり、拡張期血圧に関しては、ブラセボ群のみが低下傾向であった。
SOPには、試験管内での試験ではACE阻害作用が認められており、この作用により収縮期血圧が低下したことが考えられる。なお、ブラセボ群で、収縮期血圧および拡張期血圧がともに減少したことの原因は不明である。
4) Blood pressure (systolic blood pressure, diastolic blood pressure)
FIG. 23 shows changes in the systolic blood pressure for each subject (a), men (b), and women (c) at each observation time point and changes in the amount of change.
FIG. 24 shows changes in the diastolic blood pressure for each subject (a), men (b), and women (c) at each observation time point and changes in the amount of change.
23 and 24, the systolic blood pressure tended to decrease in any group, and the diastolic blood pressure tended to decrease only in the placebo group.
SOP has been shown to have an ACE inhibitory effect in an in vitro test, and this action is thought to have reduced systolic blood pressure. The cause of the decrease in both systolic blood pressure and diastolic blood pressure in the placebo group is unknown.

[更年期諸症状の改善作用のモニター試験]
SOPを用いて、更年期症状があるが治療を受けるほどではない、という女性17名に4週間、8名(うちプラセボ4名)に、6週間(2週間延長)SOP500mg配合ドリンクを毎朝試飲させた。試飲前、1週間後、4週間後、(1週間中断の後)5週間後、6週間後において、ロボスキンアナライザー(登録商標)を用い肌状態の変化を測定した。また、試飲前、4週間後、(1週間中断の後)5週間後、6週間後に採血を実施し、生化学的手法を用いて体内の変化を調査した。また、更年期指数や肌状態変化を、アンケート回答というかたちで調査した。
[Monitoring test for improving menopausal symptoms]
Using SOP, 17 women who had menopausal symptoms but not enough to be treated were allowed to sample a SOP 500 mg drink every morning for 4 weeks and 8 (including 4 placebos) for 6 weeks (extended for 2 weeks) . Before tasting, after 1 week, after 4 weeks, after 5 weeks (after 1 week interruption), after 6 weeks, changes in skin condition were measured using Robo Skin Analyzer (registered trademark). In addition, blood was collected before tasting, after 4 weeks, after 5 weeks (after 1 week interruption) and after 6 weeks, and changes in the body were investigated using biochemical techniques. In addition, we investigated the menopause index and skin condition changes in the form of questionnaire responses.

その結果、肌に関しては、「かさつき」、「くすみ」、「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」、「シミの改善」、「毛穴ひきしめ」という項目における有効性が示唆された。多くが1週間以内に肌状態の改善を自覚しており、また。一時中断した時点でほぼ全員において状態が一時悪化、SOP再開群は再び改善、一方プラセボ群は悪化したままという興味深い結果も得られた。これは、SOPの肌改善効果を裏付ける結果である。   As a result, it was suggested that the skin was effective in terms of “smoothness”, “dullness”, “smoothness”, “makeup glue”, “makeup mochi”, “stain improvement”, and “pore tightening”. . Many have been aware of improvements in skin condition within a week. Interesting results were obtained, with almost all of them temporarily worsening at the time of the suspension, with the SOP restart group improving again, while the placebo group remained worse. This is a result supporting the skin improvement effect of SOP.

血液検査の結果では、ビタミン群等の変化に一定の規則性は発見できなかったが、女性ホルモンのバランスを調整している可能性が示唆された。また、中性脂肪値も改善するモニターが多かったことから、脂質代謝の改善に寄与する可能性も示唆された。
自覚変化としては、「疲労回復」、「睡眠の質改善」、「寝つき改善」、「イライラ解消」に対し、多くのモニターが1週間以内の改善を訴えた。更年期指数変化を追っても、1週間ごとに全員の指数が改善しており、更年期女性への症状緩和の効果もみられた。
Blood test results showed no regularity in changes in vitamin groups, etc., but suggested the possibility of adjusting the balance of female hormones. In addition, there were many monitors that also improved the triglyceride level, suggesting the possibility of contributing to the improvement of lipid metabolism.
As for subjective changes, many monitors complained of improvements within one week for “recovering fatigue”, “improving sleep quality”, “improving sleep”, and “eliminating irritability”. Even after the change in menopause index, the index of all members improved every week, and the effect of symptom relief on menopausal women was also observed.

今回の試験において、「SOP500mg」の女性の更年期症状の緩和や肌状態の改善に、効果があることが示唆された。肌や体への改善効果を、ほぼ全員が開始後1週間以内に自覚していたことから、この成分の即効性も確認できた。
内側から有効成分を摂取することが定着している今、美肌や疲労、更年期対策ドリンクとして期待できる。
In this study, it was suggested that SOP500mg is effective in alleviating climacteric symptoms and improving skin condition in women. Since almost everyone was aware of the improvement effect on the skin and body within one week after the start, the immediate effect of this component could be confirmed.
Now that taking active ingredients from the inside has become established, it can be expected as a drink to prevent skin and fatigue and menopause.

1.試験方法
17名のモニターについて、SOP試飲前、試飲1週間後、試飲4週間後のうち、2〜3回、測定を行った<試験I>。
さらに、4名のモニターでは4週間の試飲後、1週間の中断期間を設け(5週間後として測定)、再度1週間の試飲を再開した(6週間後として測定)。別の4名のモニターでは、4週間の試飲後、1週間の中断期間を設け(5週間後として測定)、再度1週間のプラセボの試飲を行った(6週間後として測定)<試験II>。
<試料>
SOP500mg配合ドリンク
<モニター>
下記の条件に当てはまる者17名
・35〜55歳の閉経前後の女性。
・加齢に伴い、肌荒れ、不眠(眠りが浅い)、疲れやすい、肩凝りがひどい、等の更年期症状がある。
・更年期指数が25〜55点(症状は気になるが未だ治療を必要としない程度)。
・ピルやHRT等のホルモン治療歴がない。
・現在何らかの病気をお持ちで他の薬を飲んでいない。ただし、過去に心臓病、脳血管疾患の手術歴、治療歴のある方、肝炎、肝疾患の既往歴、治療歴のある方、精神疾患の既往歴、治療歴のある方は除く。
・他の健康食品およびサプリメントを服用していない。健康食品、ビタミン剤等を長期にわたり服用している方は除く。
・なお、他の臨床試験に参加している方も除く。
1. Test method About 17 monitors, the measurement was performed 2-3 times before SOP tasting, 1 week after tasting, and 4 weeks after tasting <Study I>.
Furthermore, in the four monitors, after a tasting for 4 weeks, an interruption period of 1 week was provided (measured after 5 weeks), and the tasting for 1 week was resumed (measured after 6 weeks). In another 4 monitors, after a 4-week tasting, a 1-week interruption period was measured (measured as after 5 weeks), and another 1-week placebo tasting was performed (measured as after 6 weeks). <Study II> .
<Sample>
Drink with SOP 500mg <Monitor>
17 men and women aged between 35 and 55 who meet the following conditions.
・ With age, there are menopausal symptoms such as rough skin, insomnia (light sleep), fatigue, and stiff shoulders.
-The menopause index is 25 to 55 points (to the extent that the symptoms are worrisome but treatment is not yet required).
・ History of hormone treatments such as pills and HRT.
・ You currently have some illness and are not taking any other medicines. However, those who have a history of surgery for heart disease or cerebrovascular disease, history of treatment, history of hepatitis, liver disease, history of treatment, history of history of mental illness, history of treatment are excluded.
・ Do not take other health foods and supplements. Excluding those who have been taking health foods and vitamins for a long time.
・ Excluding those who participate in other clinical trials.

(1)肌の測定について
<試験I>に関しては、試飲前・試飲1週間後・試飲4週間後の3回、ロボスキンアナライザーを用いて顔面の測定を行った。
<試験II>に関しては、上記と同様に行った。
測定は、石鹸で洗顔後15分間放置してから行った。
ロボスキンアナライザーRSA-100(インフォワード社)(以下「ロボスキン」)は、散乱光を発する撮影ボックス内に顔面を固定し、内部に設置した高解像度カメラで顔全体を撮影し、デジタル画像として取り組み画像処理用パソコンで解析を行う。計測された数値は、効果判定の客観的な評価に用いることができる。
(計測可能な項目)
・顔面水分・油分評価
・顔面色素沈着部位評価(数・面積)
・顔面毛孔部位評価(数・面積)
・顔面しわ評価(下眼ちりめんしわ本数計測)
・顔面きめ評価
・顔面明るさ評価
(1) About skin measurement Regarding <Test I>, the face was measured three times before tasting, 1 week after tasting and 4 weeks after tasting, using a Roboskin analyzer.
<Test II> was performed in the same manner as described above.
The measurement was performed after washing with soap for 15 minutes.
Robo Skin Analyzer RSA-100 (In-Forward) (hereinafter referred to as “Robo Skin”) fixes the face in a shooting box that emits scattered light, shoots the entire face with a high-resolution camera installed inside, and works as a digital image Analyze with a computer for image processing. The measured numerical value can be used for objective evaluation of the effect determination.
(Items that can be measured)
・ Facial moisture / oil content evaluation ・ Facial pigmentation site evaluation (number / area)
・ Facial pore evaluation (number / area)
・ Facial wrinkle evaluation (measurement of lower eyelid noodle wrinkles)
・ Face texture evaluation ・ Face brightness evaluation

(2)血液検査について
<試験I>に関しては、試飲前・試飲4週間後の2回、採血をして成分分析を行った。
<試験II>に関しては、上記と同様に行った。
血液検査については、総タンパク、ビタミン各群、亜鉛、鉄、アミノ酸、基礎代謝、ストレス指数、中性脂肪等の量を測定・そのバランス等を数値に基づいて分析した。
(3)モニター自己申告の変化について
・更年期指数:試飲当日より最終日まで毎日記入
・肌アンケート:必要項目において、ポイント(1〜5)制で回答
・自覚変化:肌および体調への変化について、具体的に回答
(2) Blood test Regarding <Test I>, blood samples were collected twice before tasting and after 4 weeks of tasting, and component analysis was performed.
<Test II> was performed in the same manner as described above.
For blood tests, the amount of total protein, vitamins, zinc, iron, amino acids, basal metabolism, stress index, neutral fat, etc. were measured and their balance was analyzed based on numerical values.
(3) Changes in monitor self-reporting ・ Menopause index: Filled every day from the day of tasting to the last day ・ Skin questionnaire: In necessary items, responded with point (1-5) system Answer specifically

2.試験結果と考察
肌の状態について、ロボスキン結果および自己申告により、以下の如く評価した。
(1)水分(実測値・ランク)
水分量が多いほど、みずみずしく潤いのある肌であると判断される自覚症状の「かさつき」と同等と考えられる。
図25は、ロボスキンによる評価結果を示している。
図25中の棒グラフに示すように、試飲前と試飲1週間後、4週間後とも、数値ならびにランクにほとんど変化はみられなかった。試飲前はまだ気候が暖かかったこと、試飲4週間後は急に寒くなり空気が非常に乾燥している時期であることを考慮すると、試飲前と4週間後との間で変化のなかったことは、肌が冬でも乾燥していないことを意味しており、試飲による効果が考えられた。
2. Test results and discussion The skin condition was evaluated as follows based on the results of ROBOSKIN and self-report.
(1) Moisture (actual value / rank)
The higher the amount of water, the more likely it is to be equivalent to the “smoothness” of the subjective symptom, which is judged to be fresh and moisturized skin.
FIG. 25 shows the evaluation results using Roboskin.
As shown in the bar graph in FIG. 25, there was almost no change in numerical values and ranks before tasting and after 1 week and 4 weeks after tasting. Considering that the climate was still warm before the tasting and that it was a time when the air suddenly got cold after 4 weeks and the air was very dry, there was no change between before the tasting and after 4 weeks Means that the skin was not dry even in winter, and the effect of tasting was considered.

図26は、「かさつき」に関する4〜6週間の自己評価を示している。
自覚症状としての「かさつき」は、試験Iの4週間の試飲で17名中16名において改善している。1名は普遍であり、悪化している例は1名もなかった。また12名では、試飲1週間後から「かさつき」の改善を自覚している。
さらに、試験IIに継続参加し1週間の試飲中断を行った8名中6名で、中断時(5週間後)の「かさつき」は悪化していた。2名は不変であった。SOP再開した4名中3名は再開後(6週間後)の「かさつき」は改善していた。1名は不変であった。一方、プラセボ試飲の4名中3名では「かさつき」の改善は認められず、悪化したままであった。1名は不変であった。
以上の結果より、SOP試飲1週間で「かさつき」の改善が認められ、肌の保湿に対して有効であると考えられた。
FIG. 26 shows a 4-6 week self-assessment for “Katsu”.
“Sweetness” as a subjective symptom has improved in 16 out of 17 in the 4-week tasting of Study I. One was universal, and no one was getting worse. In addition, twelve people have noticed an improvement in “Katsutsuki” one week after tasting.
In addition, 6 of the 8 subjects who continued to participate in Study II and suspended tasting for 1 week had a worsening of “shaking” at the time of suspension (after 5 weeks). The two were unchanged. Three of the four people who resumed SOP had improved “spotting” after resumption (6 weeks later). One person was unchanged. On the other hand, 3 out of 4 placebo tastings showed no improvement in “Katsutsuki” and remained worse. One person was unchanged.
From the above results, it was considered that an improvement in “smoothness” was observed in one week of SOP tasting, and it was effective for moisturizing the skin.

(2)油分(ランク)
皮膚の油分量は多すぎても少なすぎてもならない。多すぎると油っぽくべたべたした感じになり、少なすぎるとかさつく。年齢によってふさわしい量があり、より皮膚にとってふさわしい量であるほどランクの数が多くなる(1〜5段階)。
図27は、ロボスキンによる評価結果を示している。
試験Iにおいて、試飲前に比べ、試飲1週間後、4週間後ともに若干の数値の低下が見られたが、有意差はなかった。試飲4週間後は、急に寒くなり空気が非常に乾燥している時期であったために、油分量の低下が若干みられたと思われる。
(2) Oil content (rank)
The skin should not have too much or too little oil. If it is too much, it will become greasy and sticky, and if it is too little, it will become bulky. There is an amount appropriate for the age, and the more appropriate the amount for the skin, the higher the number of ranks (1-5 levels).
FIG. 27 shows an evaluation result by Roboskin.
In Study I, although a slight decrease in the numbers was observed after 1 week and 4 weeks after tasting, there was no significant difference. After 4 weeks of tasting, it was a time when the air suddenly became cold and the air was very dry, so it seems that there was a slight decrease in the oil content.

(3)明度(ランク)
明度は、皮膚の全体的な明るさを示す。ランクや数値が高いほど明るく、低いほど暗い。ここで肌の明るさは、自覚症状の「くすみ」と同等と考えられる。
図28は、ロボスキンによる評価結果を示している。
試験Iにおいて、試飲前に比べ、試飲4週間後では若干の数値の上昇がみられ、肌の明るさが若干改善していると考えられたが、有意差は認められなかった。
図29は、「くすみ」に関する4〜6週間の自己評価を示している。
自覚症状としての肌の「くすみ」は、試験Iにおいて1週間後で改善8名、4週間後で改善6名、不変3名、悪化0名であった。さらに、試験IIに継続参加のため、1週間の試飲中断を行った8名中5名で、中断時(5週間後)の「くすみ」は悪化していた。3名は不変であった。SOP再開した4名中3名は再開後(6週間後)の「くすみ」が改善していた。1名は不変であった。一方、プラセボ試飲の4名中3名では「くすみ」の改善は認められず、悪化もしくは不変のままであった。
以上の結果より、SOPにより、肌のくすみに対する改善効果があり、肌の明るさや透明感の改善に有効であると考えられる。
(3) Lightness (rank)
Lightness indicates the overall brightness of the skin. The higher the rank and number, the brighter the light and the darker the light. Here, the brightness of the skin is considered to be equivalent to the “dullness” of the subjective symptoms.
FIG. 28 shows the evaluation results using Roboskin.
In Test I, a slight increase was observed after 4 weeks of tasting compared to before tasting, and it was considered that the skin brightness was slightly improved, but no significant difference was observed.
FIG. 29 shows a self-assessment of 4 to 6 weeks regarding “dullness”.
The skin “dullness” as a subjective symptom was 8 patients who improved after 1 week in Test I, 6 who improved after 4 weeks, 3 who remained unchanged, and 0 who became worse. Furthermore, because of continuing participation in Study II, 5 of 8 subjects who suspended tasting for one week had a worsening of “dullness” at the time of suspension (after 5 weeks). The three were unchanged. Three out of four people who resumed SOP had improved “dullness” after resumption (after 6 weeks). One person was unchanged. On the other hand, 3 out of 4 placebo tastings did not improve “dullness” and remained aggravated or unchanged.
From the above results, it is considered that SOP has an effect of improving skin dullness and is effective in improving skin brightness and transparency.

(4)きめ(ランク)
きめは、ランクが高いほど、きめ細かな肌であることを示す。きめは、自覚症状の「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」に相当すると考えられる
図30は、ロボスキンによる評価結果を示している。
試飲前に比べ、試飲1週間後では若干の数値の上昇が見られ、その効果は4週間後も同等であった。有意差は認められなかったものの、試飲1週間後という早い段階で、肌のきめが改善される傾向があると考えられた。
(4) Texture (rank)
The texture indicates that the higher the rank, the finer the skin. The texture is considered to correspond to “smoothness”, “makeup paste”, and “makeup mochi” of subjective symptoms. FIG. 30 shows the evaluation results using Roboskin.
Compared to before the tasting, a slight increase in the value was observed one week after the tasting, and the effect was the same after four weeks. Although no significant difference was observed, it was considered that the skin texture tended to improve at an early stage, one week after tasting.

図31は、「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」それぞれに関する4〜6週間の自己評価を示している。
試験Iにおいて、「なめらかさ」は、試飲1週間後で9名、4週間後で7名に改善が認められた。1名は不変であった。
「化粧のり」は、試飲1週間後で9名、4週間後で6名に改善が認められた。2名は不変であった。
「化粧もち」は、試飲1週間後で11名、4週間後で2名に改善が認められた。
4名は不変であった。
さらに、試験IIに継続参加のため、1週間の試飲中断を行った8名中6名で、中断時(5週間後)の「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」のいずれも悪化していた。1名は「化粧のり」、「化粧もち」が悪化し、「なめらかさ」は不変、もう1名は不変であった。
SOP再開した4名中3名は再開後(6週間後)の「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」のいずれも改善しているのが1名、「化粧のり」、「化粧もち」のみ改善が1名、「なめらかさ」のみの改善が1名、不変が1名であった。プラセボ群は、SOP再開群に比べて、明らかに改善の効果が劣っていると考えられた。
FIG. 31 shows self-evaluation for 4 to 6 weeks for “smoothness”, “makeup paste”, and “makeup mochi”.
In Study I, “smoothness” was improved in 9 subjects 1 week after tasting and 7 subjects after 4 weeks. One person was unchanged.
As for “Makeup Nori”, improvement was observed in 9 people after 1 week of tasting and 6 people after 4 weeks. The two were unchanged.
As for “Momochimochi”, improvement was observed in 11 persons 1 week after tasting and 2 persons after 4 weeks.
The four were unchanged.
In addition, 6 out of 8 people who suspended tasting for one week to continue participation in Study II, all of “smoothness”, “makeup paste”, and “makeup mochi” at the time of suspension (5 weeks later) It was getting worse. One person had a worsening of “makeup paste” and “makeup mochi”, “smoothness” remained unchanged, and the other was unchanged.
Three of the four people who resumed SOP improved one of “smoothness”, “makeup paste”, and “makeup mochi” after restart (six weeks later), “makeup paste”, “makeup” The improvement of only “mochi” was 1 person, the improvement of “smoothness” was 1 person, and 1 person was unchanged. The placebo group was considered to be clearly inferior in the improvement effect compared to the SOP restart group.

なお、自覚症状で「肌のキメ」という項目があるが、キメの自覚はなかなか難しく、「なめらかさ」、「化粧のり」、「化粧もち」の3項目が具体的な内容として、キメの状態を表していると判断した。
以上の結果より、SOP試飲1週間により、きめの改善効果が認められ、肌のなめらかさ、化粧のり、化粧もちに有効であると考えられる。
In addition, although there is an item of “Skin texture” in the subjective symptoms, the awareness of the texture is quite difficult, and the three items of “Smoothness”, “Makeup Nori”, “Makechimochi” are specific contents, and the state of the texture It was judged that it represents.
From the above results, it can be considered that the effect of improving the texture is recognized in one week of the SOP tasting, and it is effective for the smoothness of the skin, the makeup paste, and the makeup feeling.

(5)色素沈着
1)色素沈着(小)(実測値・ランク)
図32は、ロボスキンによる評価結果の実測値(a)とランク(b)を示している。
顔全体に見られる小さな色素沈着の数ならびにその面積は、試飲前に比べ試飲1週間後、4週間後とも有意差をもって数値の減少がみられた。
よって、SOPは、小さな色素沈着に有効であると考えられる。
(5) Pigmentation 1) Pigmentation (small) (actual value / rank)
FIG. 32 shows an actual measurement value (a) and a rank (b) of the evaluation result by Roboskin.
The number and the area of small pigmentation observed on the entire face were significantly decreased at 1 week and 4 weeks after tasting compared to before tasting.
Therefore, SOP is considered effective for small pigmentation.

2)色素沈着(大)(実測値)
図33は、ロボスキンによる評価結果の実測値を示している。
いわゆるシミに関して、試験Iでは、試飲前に比べ試飲1週間後、4週間後ともに、若干の数値の減少が見られたが、有意差は無かった。
前記1),2)より、シミ対策の特別な外用等を行わずに試飲のみで、大小のしみの数が減少していることは、シミ改善に対する有効性があると考えられる。
2) Pigmentation (large) (actual measurement)
FIG. 33 shows the actual measurement values of the evaluation results using Roboskin.
Regarding so-called stains, in Test I, there was a slight decrease in the numbers at 1 week and 4 weeks after tasting, but there was no significant difference.
From the above 1) and 2), it can be considered that the fact that the number of large and small stains is reduced only by tasting without special external application for stains is effective for improving stains.

(6)毛穴数(実測値)
図34は、ロボスキンによる評価結果の実測値を示している。
目立つ毛穴の数は、試飲前に比べ試飲1週間後、4週間後では若干の数値の低下が見られた。目立つ毛穴数が減っていることより、毛穴を引き締め目立たなくする効果が期待できると考えられる。
(6) Number of pores (actual measurement)
FIG. 34 shows the actual measurement values of the evaluation results using Roboskin.
The number of conspicuous pores was slightly lower after 1 week and 4 weeks after tasting than before tasting. From the fact that the number of conspicuous pores is reduced, it is considered that the effect of tightening the pores and making them inconspicuous can be expected.

(7)しわ数(実測値)
図35は、ロボスキンによる評価結果の実測値を示している。
目の下のちりめんじわの数は、試飲前に比べ試飲1週間後、4週間後とも若干のしわの数の減少が見られたが、有意差はなかった。しわに対する効果は、現時点では困難であると考えられる。
(7) Number of wrinkles (actual value)
FIG. 35 shows the actual measurement values of the evaluation results using Roboskin.
The number of crepe lines under the eyes showed a slight decrease in the number of wrinkles at 1 week and 4 weeks after tasting, but there was no significant difference. The effect on wrinkles is considered difficult at this time.

(8)自己申告による更年期指数の変化と具体的変化について
1)更年期指数
図36は、更年期指数の自己採点の結果と評価法を示している。
更年期指数を試験実施期間中毎日チェックさせたが、試験Iにおいて1週間後では、17名中16名、2週間後は17名中17名、3週間後は17名中15名、4週間後には17名中17名において、試飲前と比較して指数が減少しており、最大で−48という者もいた。
さらに、試験IIに継続参加のため、1週間の試飲中断を行った8名中8名において、中断時(5週間後)の更年期指数は悪化していた。SOP再開した4名中4名において、再開後(6週間後)更年期指数が改善していた。一方、プラセボ試飲の4名中2名において、改善が見られた。2名は不変で、悪化した状態のままであった。
図37は、試飲期間における更年期指数の変化を示すグラフである。
この結果より、SOP試飲1週間で更年期指数の改善が認められ、更年期症状の緩和に有効である可能性が示唆された。
(8) Changes in Menopause Index and Specific Changes due to Self-Reporting 1) Menopause Index Figure 36 shows the results of self-scoring of the menopause index and the evaluation method.
The menopause index was checked every day during the study period, but after 1 week in Study I, 16 out of 17 were 17 out of 17 after 17 weeks, 15 out of 17 after 3 weeks, 4 weeks later In 17 out of 17 people, the index decreased compared to before tasting, and some people had a maximum of -48.
Furthermore, because of continuing participation in Study II, the climacteric index at the time of suspension (after 5 weeks) was worsening in 8 out of 8 subjects who suspended the tasting for 1 week. In 4 out of 4 people who resumed SOP, the menopause index improved after resumption (6 weeks later). On the other hand, improvement was seen in 2 out of 4 placebo tastings. The two remained unchanged and remained in a deteriorated state.
FIG. 37 is a graph showing changes in the menopause index during the tasting period.
From this result, an improvement in the menopause index was observed in one week of SOP tasting, suggesting the possibility of being effective in alleviating climacteric symptoms.

2)具体的自覚症状の変化
1週間以内からモニターは、更年期障害として、肌荒れ、不眠、冷え性、生理不順等の症状において、SOPの効果による改善を実感することができた。目に見える効果があることから、飲み続ける安心感も生まれ、4週間を全員が心身共に元気にさせることが分かった。疲れを感じにくくなることで、体が軽くなり精神的にも安定するようになったのかもしれない。
逆に、中断することで精神的安定剤がなくなったこと、SOPの効果を得られないことから、試飲前の状態に戻ってしまう者もいた。この落差が、SOPを試飲したことでの肌や体調への効果を実証していると考えられる。その証拠に、試飲を再開することで肌や体調は数日で回復が見られた。プラセボ群においては、体調が試飲前と同様な状態に逆戻りしてしまった。飲み続けることで効果を得られるということの裏づけにもなると考えられる。
2) Changes in specific subjective symptoms From one week onward, the monitor was able to feel improvement due to the effect of SOP on symptoms such as rough skin, insomnia, coldness, and menstrual irregularities as menopause. The visible effect created a sense of security to continue drinking, and it turned out that all four people are well-minded. It may be that the body became lighter and mentally stable by making it harder to feel tired.
On the contrary, some people returned to the state before tasting because the mental stabilizer disappeared by interruption and the effect of SOP could not be obtained. This drop is considered to demonstrate the effect on the skin and physical condition of tasting SOP. As evidence, skin and physical condition recovered in a few days by resuming tasting. In the placebo group, her physical condition returned to the same state as before the tasting. It is thought that it can support that you can get an effect by continuing to drink.

以上、本発明の実施の形態を図面によって説明してきたが、具体的な構成はこれらの実施の形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における変更や追加があっても本発明に含まれる。例えば、本発明は食品組成物のほか、サプリメントとしても考えられるものである。   As described above, the embodiments of the present invention have been described with reference to the drawings. However, the specific configuration is not limited to these embodiments, and the present invention can be modified or added without departing from the scope of the present invention. Included in the invention. For example, the present invention can be considered as a supplement in addition to a food composition.

本発明である脂肪蓄積予防用の食品組成物は、前述したような優れた用途、特に脂肪蓄積予防の特性を有し、かつ毒性を有するものではないので、健康食品産業や医薬業界で、それらの原料として、広く利用される可能性の高いものである。   The food composition for preventing fat accumulation according to the present invention has excellent uses as described above, in particular, has characteristics of preventing fat accumulation and is not toxic. Therefore, in the health food industry and the pharmaceutical industry, As a raw material, it is highly likely to be widely used.

Claims (6)

鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする脂肪蓄積予防用の食品組成物。   A food composition for preventing fat accumulation, comprising as a main component a peptide extracted from the ovary rind of salmon. 鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする肝臓機能低下抑制用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。   A food composition for suppressing a decrease in liver function and preventing fat accumulation, characterized by comprising a peptide extracted from the ovary skin of salmon as a main component. 鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血糖値制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。   A food composition for controlling blood glucose level and preventing fat accumulation, characterized by comprising a peptide extracted from the ovary skin of salmon as a main component. 鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする血圧制御用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。   A food composition for controlling blood pressure and preventing fat accumulation, characterized by comprising as a main component a peptide extracted from the ovary rind of salmon. 鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする美白効果向上用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。   A food composition for improving the whitening effect and preventing fat accumulation, characterized by comprising a peptide extracted from the ovary skin of salmon as a main component. 鮭の卵巣外皮より抽出したペプチドを主成分とすることを特徴とする更年期障害改善用および脂肪蓄積予防用の食品組成物。   A food composition for improving menopause and preventing fat accumulation, characterized by comprising a peptide extracted from the ovary skin of salmon as a main component.
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