JP2016214179A - Container assembly set - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、容器組立体セットに関する。 The present invention relates to a container assembly set.
生化学の分野において、PCR(Polymerase Chain Reaction:ポリメラーゼ連鎖反応)の技術が確立されている。最近、PCRにおける増幅の精度や検出感度は向上してきており、極微量の検体(DNA等)を増幅し、検出・解析することができるようになってきた。PCRは、増幅の対象とする核酸(標的核酸)及び試薬を含む溶液(反応液)に熱サイクルを施すことで、標的核酸を増幅させる手法である。PCRの熱サイクルとしては、2段階又は3段階の温度で熱サイクルを施す手法が一般的である。 In the field of biochemistry, a technique of PCR (Polymerase Chain Reaction) has been established. Recently, the accuracy and detection sensitivity of amplification in PCR have improved, and it has become possible to amplify, detect, and analyze a very small amount of sample (DNA, etc.). PCR is a technique for amplifying a target nucleic acid by subjecting a solution (reaction solution) containing a nucleic acid (target nucleic acid) to be amplified and a reagent to thermal cycling. As a thermal cycle of PCR, a method of performing a thermal cycle at two or three stages of temperatures is common.
一方、医療の現場におけるインフルエンザ等の感染症の診断は、現状ではイムノクロマト等の簡易検査キットを用いることが主流である。しかし、このような簡易検査では、精度が不十分となる場合があり、より高い検査精度を期待できるPCRを感染症の診断に適用することが望まれている。また、医療機関における一般外来では、診察の時間が制限される関係から、検査に費やすことのできる時間は短時間に制限される。そのため、例えばインフルエンザの検査は、検査の精度を犠牲にして、簡易的なイムノクロマト等の検査により短時間化して行われているのが現状である。また、空港等における検疫では、迅速に結果を得る必要があるため、PCRの高速化が望まれている。 On the other hand, the diagnosis of infectious diseases such as influenza in the medical field is currently mainly performed using a simple test kit such as immunochromatography. However, in such a simple test, the accuracy may be insufficient, and it is desired to apply PCR that can be expected to have a higher test accuracy to the diagnosis of infectious diseases. Further, in general outpatients at medical institutions, the time that can be spent on examinations is limited to a short time because the examination time is limited. For this reason, for example, the inspection of influenza is carried out in a short time by a simple inspection such as immunochromatography at the expense of the accuracy of the inspection. Further, in quarantine at an airport or the like, since it is necessary to obtain a result quickly, it is desired to increase the speed of PCR.
近年、PCR法等に用いるデバイスとして、キャピラリー中に、水系液体層と非水溶性のゲル層とを交互に積層し、核酸を付着させた磁性体粒子を通過させることにより、核酸の精製を行うデバイスが提案されている(特許文献1参照)。またこのような高速なPCRを行うための反応容器として、例えば、特許文献2には、反応容器と蓋により、第1容室、第2容室が形成される反応容器が開示されており、気泡の混入防止の観点から、第1容室、第2容室の体積と、充填する液体の体積の関係を規定する発明が開示されている。
In recent years, as a device used for PCR, etc., nucleic acid is purified by alternately laminating an aqueous liquid layer and a water-insoluble gel layer in a capillary and passing magnetic particles to which the nucleic acid is attached. A device has been proposed (see Patent Document 1). As a reaction vessel for performing such high-speed PCR, for example,
特許文献2に記載の反応容器では、蓋をすることによって反応容器から溢れる液体の漏出を防止することに着目している。しかし、例えば、核酸を含む検体を前処理部で連続的に抽出、精製し、係る核酸を溶出液に溶出させ、係る核酸を含む溶出液をプランジャーによって反応容器に押し出し、引き続き反応を行う場合など、検体の導入から核酸の増幅反応までを、1つのカートリッジで一貫して行おうとする場合には、反応容器が封じられた後に、反応容器に対してさらに液体を導入することが必要となる。
In the reaction container described in
特許文献2に記載された反応容器は、プランジャーの動作によって、さらに液体が導入されることは考慮されておらず、液体が追加して導入された場合には、液体が漏出することが懸念される。
In the reaction vessel described in
本発明の幾つかの態様に係る目的の1つは、容器を組み立てる際に液体の漏出が抑制さ
れ、かつ、組み立てた後に所定の液体を導入しても内容物の漏出が抑制される容器組立体セットを提供することにある。
One of the objects according to some aspects of the present invention is a container set in which leakage of liquid is suppressed when the container is assembled, and leakage of contents is suppressed even when a predetermined liquid is introduced after assembly. It is to provide a three-dimensional set.
本発明は、上記課題の少なくとも一部を解決するために為されたものであり、以下の態様又は適用例として実現することができる。 SUMMARY An advantage of some aspects of the invention is to solve at least a part of the problems described above, and the invention can be implemented as the following aspects or application examples.
[適用例1]本発明に係る容器組立体セットの一態様は、
第1流路の一部を形成する挿入部、当該第1流路の周りに形成されたフランジ、及び、前記フランジから前記挿入部に沿って延在する筒状部、を有する第1容器と、
第2容器と、
を含み、
前記第2容器は、第2流路の一部を形成する受入部、及び、当該受入部の周囲に形成され、前記第1容器と前記第2容器とが結合されたとき、前記フランジと接合してリザーバーを形成するリザーバー形成部、を有し、
前記第1容器のうち前記フランジよりも接続端側の部分の体積をV1、
前記第1容器の前記フランジよりも接続端側に存在する前記第1流路の容積をV2、
前記受入部に挿入される前記挿入部の体積をV3、
前記受入部に挿入される前記第1流路の容積をV4、
前記第1流路から前記第2流路に導入される液体の体積をV5、及び、
前記リザーバーの容積をV6、
とした場合に、
V6≧V1+V2+V3+V4+V5
の関係を満たす。
[Application Example 1] One aspect of a container assembly set according to the present invention is as follows.
A first container having an insertion part forming a part of the first flow path, a flange formed around the first flow path, and a cylindrical part extending from the flange along the insertion part; ,
A second container;
Including
The second container is formed around a receiving part that forms a part of the second flow path and the receiving part, and is joined to the flange when the first container and the second container are combined. And a reservoir forming part that forms a reservoir,
The volume of the portion of the first container closer to the connection end than the flange is V1,
The volume of the first flow path existing on the connection end side of the flange of the first container is V2,
The volume of the insertion part inserted into the receiving part is V3,
The volume of the first flow path inserted into the receiving part is V4,
The volume of liquid introduced from the first flow path to the second flow path is V5, and
The volume of the reservoir is V6,
If
V6 ≧ V1 + V2 + V3 + V4 + V5
Satisfy the relationship.
本適用例に係る容器組立体セットによれば、第1容器及び第2容器を接続する際に形成されるリザーバーの容積が、リザーバー内に配置される物体及び流体の体積以上の大きさとなるため、液体がフランジよりも外側に漏出しにくい。また、第1容器及び第2容器を接続した後に第2容器内に導入する液体の体積を加えても、リザーバーの容積が、当該体積以上の大きさとなるため、組み立てた後に所定の液体をさらに導入しても内容物の漏出を抑制することができる。 According to the container assembly set according to this application example, the volume of the reservoir formed when the first container and the second container are connected is larger than the volume of the object and the fluid disposed in the reservoir. , Liquid is difficult to leak outside the flange. Further, even if the volume of the liquid to be introduced into the second container after adding the first container and the second container is added, the volume of the reservoir becomes larger than the volume. Even if it is introduced, leakage of contents can be suppressed.
[適用例2]適用例1において、
前記第1流路と前記第2流路とが結合されたとき、前記筒状部は、前記リザーバーに収容されてもよい。
[Application Example 2] In Application Example 1,
When the first flow path and the second flow path are combined, the cylindrical portion may be accommodated in the reservoir.
[適用例3]適用例1又は適用例2において、
前記第1流路及び前記筒状部には前記液体が満たされていてもよい。
[Application Example 3] In Application Example 1 or Application Example 2,
The first flow path and the cylindrical portion may be filled with the liquid.
[適用例4]適用例1ないし適用例3のいずれか一例において、
前記リザーバーは、前記リザーバー形成部の内側かつ前記受入部の外側であって、前記第1容器と前記第2容器とが接続されたときに、前記フランジによって区画される空間であってもよい。
[Application Example 4] In any one of Application Examples 1 to 3,
The reservoir may be a space inside the reservoir forming part and outside the receiving part and defined by the flange when the first container and the second container are connected.
[適用例5]適用例1ないし適用例4のいずれか一例において、
前記第1容器及び前記第2容器が接続された際に、
前記挿入部は、前記受入部に挿入されて前記第1流路及び前記第2流路を連通させて第1シールを形成し、
前記筒状部は、前記リザーバー形成部に挿入され、
前記フランジは、前記リザーバー形成部に内接して第2シールを形成してもよい。
[Application Example 5] In any one of Application Examples 1 to 4,
When the first container and the second container are connected,
The insertion portion is inserted into the receiving portion to communicate the first flow path and the second flow path to form a first seal;
The cylindrical part is inserted into the reservoir forming part,
The flange may be inscribed in the reservoir forming part to form a second seal.
[適用例6]適用例1ないし適用例5のいずれか一例において、
前記第1容器は、前記液体として、溶出液及び前記溶出液と混和しない液体を収納する溶出容器であり、
前記第2容器は、前記溶出液と混和しない液体及び前記溶出液に溶出した核酸と反応する試薬を前記第2流路に含む反応容器であってもよい。
[Application Example 6] In any one of Application Examples 1 to 5,
The first container is an elution container that contains an eluate and a liquid that is immiscible with the eluate as the liquid,
The second container may be a reaction container including a liquid that is immiscible with the eluate and a reagent that reacts with the nucleic acid eluted in the eluate in the second channel.
本適用例の容器組立体セットは、PCRに好適に適用できる。 The container assembly set of this application example can be suitably applied to PCR.
[請求項7]適用例1ないし適用例6のいずれか一例において、
シリンジ、及び、前記シリンジに挿入可能であり、前記シリンジに対して挿入方向に移動可能なプランジャー、を有し、物質結合性固体担体に生体関連物質を吸着させる吸着液及び該吸着液とは混和しない液体を封止収納する吸着容器と、
前記生体関連物質が吸着された前記物質結合性固体担体を洗浄する洗浄液及び該洗浄液とは混和しない液体を封止収納する洗浄容器と、
を含み、
前記第1容器は、前記液体として、溶出液及び前記溶出液と混和しない液体を収納する溶出容器であり、
前記第2容器は、前記溶出液と混和しない液体及び前記溶出液に溶出した核酸と反応する試薬を前記第2流路に含む反応容器であり、
前記吸着容器、前記洗浄容器、前記第1容器、及び、前記第2容器を接続し、前記プランジャーを挿入方向に移動させた際に、前記第2流路に溶出液及び前記溶出液と混和しない液体が導入されてもよい。
[Claim 7] In any one of the application examples 1 to 6,
An adsorbing liquid that has a syringe and a plunger that can be inserted into the syringe and that can move in the inserting direction with respect to the syringe, and that adsorbs a biological substance on a substance-binding solid carrier, and the adsorbing liquid An adsorbing container for sealing and storing immiscible liquids;
A cleaning liquid for cleaning the substance-binding solid carrier to which the biological substance is adsorbed, and a cleaning container for sealingly storing a liquid immiscible with the cleaning liquid;
Including
The first container is an elution container that contains an eluate and a liquid that is immiscible with the eluate as the liquid,
The second container is a reaction container containing in the second channel a liquid that is immiscible with the eluate and a reagent that reacts with nucleic acid eluted in the eluate.
When the adsorption container, the washing container, the first container, and the second container are connected and the plunger is moved in the insertion direction, the elution liquid and the elution liquid are mixed into the second flow path. Liquid may be introduced.
本適用例の容器組立体セットは、PCRに好適に適用できる。 The container assembly set of this application example can be suitably applied to PCR.
以下、本発明の好適な実施形態について、図面を用いて詳細に説明する。なお、以下に説明する実施形態は、特許請求の範囲に記載された本発明の内容を不当に限定するものではない。また、以下で説明される構成の全てが本発明の必須構成要件であるとは限らない。 DESCRIPTION OF EMBODIMENTS Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the drawings. The embodiments described below do not unduly limit the contents of the present invention described in the claims. In addition, not all of the configurations described below are essential constituent requirements of the present invention.
本発明に係る容器組立体セットは、生体関連物質精製カートリッジ(容器組立体)に適用可能であり、PCRを行うためのカートリッジとすることができ、生体関連物質を精製することができる。ここで、生体関連物質としては、生体に関連した物質であって、核酸(DNA、RNA)、ポリペプチド、タンパク質、多糖類などの生体高分子、タンパク質、酵素、ペプチド、ヌクレオチド、アミノ酸、ビタミンなどの生体由来の低分子有機化合物、及び無機化合物などを含む。以下の実施形態では、生体関連物質として核酸を例に用いて説明する。 The container assembly set according to the present invention is applicable to a biological material purification cartridge (container assembly), can be used as a cartridge for performing PCR, and can purify the biological material. Here, the biological substance is a substance related to the living body, such as nucleic acid (DNA, RNA), biological polymer such as polypeptide, protein, polysaccharide, protein, enzyme, peptide, nucleotide, amino acid, vitamin, etc. Including low molecular organic compounds derived from living organisms and inorganic compounds. In the following embodiments, description will be made using a nucleic acid as an example of a biological substance.
本発明に係る容器組立体セットは、生体関連物質が吸着される物質結合性固相担体を含んでもよい。ここで、物質結合性固相担体は、生体関連物質を吸着すなわち可逆的な物理的結合により保持することが可能な物質である。物質結合性固相担体の形状は微粒子であることが好ましいが、これに限らず微細な繊維や網状体であってもよく、特に限定されない。物質結合性固相担体は、生体関連物質を吸着したまま容器組立体内を所望の方向へ移動させるため、磁性を有することが好ましい。以下の実施形態では、物質結合性固相担体として核酸を吸着する磁気ビーズ30(後述の図7、図8を参照)を用いて説明する。 The container assembly set according to the present invention may include a substance-binding solid phase carrier on which a biological substance is adsorbed. Here, the substance-binding solid phase carrier is a substance capable of holding a biological substance by adsorption, that is, by reversible physical bonding. The shape of the substance-binding solid phase carrier is preferably fine particles, but is not limited thereto, and may be fine fibers or nets, and is not particularly limited. The substance-binding solid phase carrier preferably has magnetism in order to move it in a desired direction while adsorbing the biological substance. In the following embodiment, a description will be given using a magnetic bead 30 (see FIGS. 7 and 8 described later) that adsorbs a nucleic acid as a substance-binding solid phase carrier.
本実施形態に係る容器組立体セットは、第1流路の一部を形成する挿入部、当該第1流路の周りに形成されたフランジ、及び、前記フランジから前記挿入部に沿って延在する筒状部、を有する第1容器と、第2容器と、を含み、
前記第2容器は、第2流路の一部を形成する受入部、及び、当該受入部の周囲に形成され、前記第1容器と前記第2容器とが結合されたとき、前記フランジと接合してリザーバーを形成するリザーバー形成部、を有し、前記第1容器のうち前記フランジよりも接続端側の部分の体積をV1、前記第1容器の前記フランジよりも接続端側に存在する前記第1流路の容積をV2、前記受入部に挿入される前記挿入部の体積をV3、前記受入部に挿入される前記第1流路の容積をV4、前記第1流路から前記第2流路に導入される液体の体積をV5、及び、前記リザーバーの容積をV6、とした場合に、
V6≧V1+V2+V3+V4+V5
の関係を満たす。
The container assembly set according to the present embodiment includes an insertion part that forms a part of the first flow path, a flange formed around the first flow path, and the flange extending from the flange along the insertion part. Including a first container having a cylindrical portion, and a second container,
The second container is formed around a receiving part that forms a part of the second flow path and the receiving part, and is joined to the flange when the first container and the second container are combined. A reservoir forming portion for forming a reservoir, and the volume of the portion of the first container closer to the connection end than the flange is V1, and the volume of the first container is closer to the connection end than the flange. The volume of the first flow path is V2, the volume of the insertion section inserted into the receiving section is V3, the volume of the first flow path inserted into the receiving section is V4, and from the first flow path to the second. When the volume of the liquid introduced into the flow path is V5 and the volume of the reservoir is V6,
V6 ≧ V1 + V2 + V3 + V4 + V5
Satisfy the relationship.
また、本実施形態の容器組立体セットは、前記第1流路と前記第2流路とが結合されたとき、前記筒状部は、前記リザーバーに収容されてもよい。 In the container assembly set of the present embodiment, when the first flow path and the second flow path are combined, the cylindrical portion may be accommodated in the reservoir.
また、本実施形態の容器組立体セットは、シリンジ、及び、前記シリンジに挿入可能であり、前記シリンジに対して挿入方向に移動可能なプランジャー、を有し、物質結合性固体担体に生体関連物質を吸着させる吸着液及び該吸着液とは混和しない液体を封止収納する吸着容器と、前記生体関連物質が吸着された前記物質結合性固体担体を洗浄する洗浄液及び該洗浄液とは混和しない液体を封止収納する洗浄容器と、を含み、前記第1容器は、前記液体として、溶出液及び前記溶出液と混和しない液体を収納する溶出容器であり、前記第2容器は、前記溶出液と混和しない液体及び前記溶出液に溶出した核酸と反応する試薬を前記第2流路に含む反応容器であり、前記吸着容器、前記洗浄容器、前記第1容器、及び、前記第2容器を接続し、前記プランジャーを挿入方向に移動させた際に、前記第2流路に溶出液及び前記溶出液と混和しない液体が導入されてもよい。 Further, the container assembly set of the present embodiment includes a syringe and a plunger that can be inserted into the syringe and movable in the insertion direction with respect to the syringe, and is related to the substance-binding solid carrier. An adsorbing liquid for adsorbing a substance, an adsorbing container for sealingly storing a liquid immiscible with the adsorbing liquid, a cleaning liquid for cleaning the substance-binding solid carrier on which the biological substance is adsorbed, and a liquid immiscible with the cleaning liquid And a first container is an elution container that stores an eluate and a liquid that is immiscible with the eluate as the liquid, and the second container includes the elution liquid A reaction container containing in the second channel a liquid that does not mix and a reagent that reacts with nucleic acid eluted in the eluate, and connects the adsorption container, the washing container, the first container, and the second container. , When moving the serial plunger in the insertion direction, the liquid that is immiscible with the eluate and the eluate to the second flow path may be introduced.
1.容器組立体の概要
まず、図1〜図4を用いて、本実施形態に係る容器組立体1の概要について説明する。図1は、実施形態に係る容器組立体1(以下、カートリッジということがある)の正面図である。図2は、実施形態に係る容器組立体1の側面図である。図3は、実施形態に係る容器組立体1の平面図である。図4は、実施形態に係る容器組立体1の斜視図である。なお、図1〜図3における容器組立体1の状態を正立状態として説明する。
1. Outline of Container Assembly First, an outline of the
容器組立体1は、吸着容器100と、洗浄容器200と、溶出容器300と、反応容器400と、を含む。容器組立体1は、吸着容器100から反応容器400まで連通する図示しない流路を形成する容器である。容器組立体1の流路は、一方の端部はキャップ110によって、他方の端部は底部402によって閉じられている。
The
容器組立体1は、吸着容器100内で図示しない磁気ビーズに核酸を結合させ、磁気ビーズが洗浄容器200内を移動する間に精製し、溶出容器300内で図示しない溶出液液滴中に核酸を溶出させる前処理と、反応容器400内で核酸を含む溶出液の液滴に対しポリメラーゼ反応の熱サイクル処理と、を行う容器である。
The
容器組立体1の材質は、特に限定されないが、例えば、ガラス、高分子、金属などとすることができる。容器組立体1の材質にガラスや高分子などの可視光において透明性を有する材質を選択すると、容器組立体1の外部から内部(空洞内)を観察することができるのでより好ましい。また、容器組立体1の材質に、磁力を透過する物質や非磁性体を選択すると、容器組立体1に図示しない磁気ビーズを通過させる場合などに、容器組立体1の外部から磁力を与えることによってこれを行うことが容易化されるため好ましい。容器組立体1の材質は、例えば、ポリプロピレン樹脂であることができる。
Although the material of the
吸着容器100は、内部に図示しない吸着液を収容する円筒状のシリンジ部120と、シリンジ部120の内部に挿入された可動式の押子であるプランジャー部130と、プランジャー部130の一方の端部に固定されるキャップ110と、を有する。吸着容器100は、キャップ110をシリンジ部120に対して移動することでプランジャー部130をシリンジ部120の内面に摺動させ、シリンジ部120内に収容した図示しない吸着液を洗浄容器200へ押し出すことができる。なお、吸着液については、後述する。
The
洗浄容器200は、第1〜第3洗浄容器210,220,230を接合して組み立てることで得られる。第1〜第3洗浄容器210,220,230は、それぞれ内部に図示しないオイル層で仕切られた1つ以上の洗浄液層を有する。そして、第1〜第3洗浄容器210,220,230を接合することで、洗浄容器200は内部に図示しない複数のオイル層によって区切られた複数の洗浄液層を有する。本実施形態の洗浄容器200では第1〜第3洗浄容器210,220,230からなる3つの洗浄容器を用いた例について説明したが、これに限らず、洗浄液層の数に応じて適宜増減することができる。なお、洗浄液については、後述する。
The cleaning
溶出容器300は、洗浄容器200の第3洗浄容器230に接合され、内部に溶出液をプラグの形状を維持可能に収容する。ここで、「プラグ」とは、流路内において、特定の液体が一区画を占める場合の液体を意味する。より具体的には、特定の液体のプラグは、流路の長手方向において、実質的に当該特定の液体のみが内部を占める柱状のものを指し、液体のプラグによって流路の内部の一定の空間が区画されている状態を示す。ここでの実質的にとの表現は、プラグの周囲、すなわち流路の内壁に少量(例えば薄膜状)の他の物質(液体等)が存在していてもよいことを指す。なお、溶出液については、後述する。
The
核酸精製デバイス5は、吸着容器100と、洗浄容器200と、溶出容器300と、を含む。
The nucleic
反応容器400は、溶出容器300に接合され、溶出容器300から押し出された液体を受け入れる容器であると共に、熱サイクル処理時に検体を含む溶出液の液滴を収容する容器である。また、反応容器400は、図示しない試薬を収容する。なお、試薬については、後述する。
The
2.容器組立体の詳細構造
次に、容器組立体1の詳細構造について、図5及び図6を用いて説明する。図5は、実施形態に係る容器組立体1の図3におけるA−A断面図である。図6は、実施形態に係る容器組立体1の図3におけるC−C断面図である。なお、実際には、容器組立体1は、洗浄液などの内容物が充填された状態で組み立てられるものであるが、図5及び図6では容器組立体1の構造を説明するため内容物の記載を省略する。
2. Detailed Structure of Container Assembly Next, the detailed structure of the
2−1.吸着容器
吸着容器100は、シリンジ部120の一方の開口端部からプランジャー部130が挿入され、プランジャー部130の開口端部にはキャップ110が挿入されている。キャップ110は、その中央に通気部112を有し、プランジャー部130を操作したときに通気部112によってプランジャー部130の内圧の変化を抑えることができる。
2-1. Adsorption container In the
プランジャー部130は、シリンジ部120の内周面を摺動する略円筒状の押子であり、キャップ110が挿入された開口端部と、該開口端部に対向する底部からシリンジ部120の長手方向に延びる棒状部132と、棒状部132の先端の先端部134と、を有する。棒状部132はプランジャー部130の底部の中央から突出しており、棒状部132の周囲には貫通孔が形成されてプランジャー部130内とシリンジ部120内とは連通する。
The
シリンジ部120は、容器組立体1の流路2の一部を構成し、プランジャー部130を収容する大径部と、該大径部より内径が小さい小径部と、大径部から小径部へ内径を縮径する縮径部と、該小径部の先端に吸着挿入部122と、吸着挿入部122の周囲を覆う円筒状の吸着カバー部126と、を有する。容器組立体1の流路2の一部となる大径部、小径部及び吸着挿入部122は、略円筒状である。
The
プランジャー部130の先端部134は、作業者への提供時において、シリンジ部120の小径部を封止して大径部及び縮径部と小径部とを仕切り、2つの区画を形成する。
The
シリンジ部120の吸着挿入部122は、洗浄容器200における第1洗浄容器210の一方の開口端部である第1受入部214内に挿入して嵌合することでシリンジ部120と第1洗浄容器210とを接合する。吸着挿入部122の外周面と第1受入部214の内周面とは密着して内容物である液体が外部へ漏れることを防止する。
The
2−2.洗浄容器
洗浄容器200は、容器組立体1の流路2の一部を構成し、第1〜第3洗浄容器210,220,230からなる組立体である。第1〜第3洗浄容器210,220,230は、基本的な構造は同じであるので、第1洗浄容器210の構造について説明し、第2、第3洗浄容器220,230についての説明は省略する。
2-2. Cleaning Container The cleaning
第1洗浄容器210は、容器組立体1の長手方向に延びる略円筒状であって、一方の開口端部に形成された第1挿入部212と、他方の開口端部に形成された第1受入部214と、第1挿入部212の周囲を覆う円筒状の第1カバー部216と、を有する。
The
第1挿入部212の外径は第2受入部224の内径と略同じである。また、第1受入部214の内径は吸着挿入部122の外径と略同じである。
The outer diameter of the
第1洗浄容器210の第1挿入部212を第2洗浄容器220の第2受入部224に挿入して嵌合することで、第1挿入部212の外周が第2受入部224の内周と密着してシ
ールすると共に、第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とを接合する。同様にして、第1〜第3洗浄容器210,220,230が連結されて洗浄容器200を形成する。ここで「シールする」とは、少なくとも容器等に収容された液体または気体が外部に漏れないように封ずることであり、外部から内部へ液体または気体が侵入することを封ずることを含んでもよい。
By inserting and fitting the
2−3.溶出容器
溶出容器300は、容器組立体1の長手方向に延びる略円筒状であって、容器組立体1の流路2の一部を構成する。溶出容器300は、一方の開口端部に形成された溶出挿入部302と、他方の開口端部に形成された溶出受入部304と、を有する。
2-3. The elution container The
溶出受入部304の内径は第3洗浄容器230の第3挿入部232の外径と略同じである。第3挿入部232を溶出受入部304に挿入して嵌合することで、第3挿入部232の外周が溶出受入部304の内周と密着してシールすると共に、第3洗浄容器230と溶出容器300とを接合する。
The inner diameter of the
2−4.反応容器
反応容器400は、容器組立体1の長手方向に延びる略円筒状であって、容器組立体1の流路2の一部を構成する。反応容器400は、開口端部に形成された反応受入部404と、他方の閉じた端部に形成された底部402と、反応受入部404を覆うリザーバー406と、を有する。
2-4. Reaction container The
反応受入部404の内径は、溶出容器300の溶出挿入部302の外径と略同じである。溶出挿入部302を反応受入部404に挿入して嵌合することで、溶出容器300と反応容器400は接合する。
The inner diameter of the
反応受入部404の周囲には所定の空間を有するリザーバー406が設けられる。リザーバー406は、プランジャー部130の移動によって反応容器400から溢れ出る液体を受容できる容積を有する。
A
3.容器組立体の内容物及び容器組立体の操作
次に、容器組立体1の内容物について図7の(a)を用いて説明し、容器組立体1の操作について図7及び図8を用いて説明する。図7は、実施形態に係る容器組立体1の操作を説明する模式図である。図8は、実施形態に係る容器組立体1の操作を説明する模式図である。なお、図7及び図8では内容物の状態を説明するため、各容器を流路2で表現し、外形状や接合構造については省略している。
3. Contents of Container Assembly and Operation of Container Assembly Next, the contents of the
3−1.内容物
図7の(a)は、図1の状態における流路2内の内容物の状態を示す。流路2内の内容物は、キャップ110側から反応容器400へ向かって順に、吸着液10、第1オイル20、第1洗浄液12、第2オイル22、第2洗浄液14、第3オイル24、磁気ビーズ30、第3オイル24、第3洗浄液16、第4オイル26、溶出液32、第4オイル26、試薬34である。
3-1. Contents FIG. 7A shows the state of the contents in the
流路2は、容器組立体1の長手方向に直交する面の断面積が大きい部分(流路2の太い部分)と小さい部分(流路2の細い部分)とが交互に配置される。第1〜第4オイル20,22,24,26及び溶出液32は、その各液の一部または全部が流路2の細い部分に収容されている。流路2の細い部分の断面積は、隣接する互いに混和しない液体(流体であってもよい。以下同じ)の界面が流路2の細い部分に配置された場合に、その界面を安定に維持可能な面積を有する。したがって、流路2の細い部分に配置された液体によって
、その液体とその液体の上下に配置された他の液体との配置関係を安定に維持することができる。また、流路2の細い部分に配置された液体と流路2の太い部分に配置された他の液体との界面が流路2の太い部分に形成される場合であっても、強い衝撃によってその界面が乱れても、静止した状態に置くことで、界面は所定の位置で安定に形成される。
In the
流路2の細い部分は、吸着挿入部122、第1挿入部212、第2挿入部222、第3挿入部232、溶出挿入部302の内側に形成され、溶出容器300においては溶出挿入部302を超えて上方へ延在する。なお、流路2の細い部分に収容された液体は、容器を組み立てる前であっても安定に維持される。
The narrow portion of the
3−1−1.オイル
第1〜第4オイル20,22,24,26は、いずれもオイルからなり、図7の状態において各オイルの前後の液体の間でプラグとして存在する。第1〜第4オイル20,22,24,26がプラグとして存在するために、各オイルの前後で隣接する液体は、互いに相分離する液体、すなわち混和しない液体が選択される。また、第1〜第4オイル20,22,24,26を構成するオイルは、互いに異なる種類のオイルであってもよい。これらに用いることができるオイルとしては、例えば、ジメチルシリコーンオイル等のシリコーン系オイル、パラフィン系オイル及びミネラルオイル並びにそれらの混合物から選択される一種を挙げることができる。
3-1-1. Oil The first to
3−1−2.吸着液
吸着液10とは、磁気ビーズ30に核酸を吸着させる場となる液体のことを指し、例えば、カオトロピック物質を含む水溶液である。吸着液10としては、例えば、5Mグアニジンチオシアン酸塩、2%Triton X−100、50mM Tris−HCl(pH7.2)を用いることができる。吸着液10はカオトロピック物質を含有すれば特に限定されないが、吸着液10には細胞膜の破壊あるいは細胞中に含まれるタンパク質を変性させる目的で界面活性剤を含有させてもよい。この界面活性剤としては、一般に細胞等からの核酸抽出に使用されるものであれば特に限定されないが、具体的には、Triton−Xなどのトリトン系界面活性剤やTween20などのツイーン系界面活性剤のような非イオン性界面活性剤、N−ウラロイルサルコシンナトリウム(SDS)等の陰イオン性界面活性剤が挙げられるが、特に非イオン性界面活性剤を、0.1%〜2%の範囲となるように使用するのが好ましい。さらには、2−メルカプトエタノールあるいはジチオスレイトール等の還元剤を含有させることが好ましい。溶解液は、緩衝液であってもよいが、pH6〜8の中性であることが好ましい。これらのことを考慮し、具体的には、3M〜7Mのグアニジン塩、0%〜5%の非イオン性界面活性剤、0mM〜0.2mMのEDTA、0M〜0.2Mの還元剤等を含有することが好ましい。
3-1-2. Adsorbing liquid The adsorbing
ここで、カオトロピック物質とは、水溶液中でカオトロピックイオン(イオン半径の大きな1価の陰イオン)を生じ、疎水性分子の水溶性を増加させる作用を有しており、核酸の固相担体への吸着に寄与するものであれば、特に限定されない。具体的には、グアニジン塩酸塩、ヨウ化ナトリウム、過塩素酸ナトリウム等が挙げられるが、これらのうち、タンパク質変成作用の強いグアニジンチオシアン酸塩またはグアニジン塩酸塩が好ましい。これらのカオトロピック物質の使用濃度は、各物質によって異なり、例えば、グアニジンチオシアン酸塩を使用する場合には、3M〜5.5Mの範囲で、グアニジン塩酸塩を使用する場合は、5M以上で使用するのが好ましい。 Here, the chaotropic substance has a function of generating chaotropic ions (a monovalent anion having a large ionic radius) in an aqueous solution and increasing the water solubility of the hydrophobic molecule. If it contributes to adsorption | suction, it will not specifically limit. Specific examples include guanidine hydrochloride, sodium iodide, sodium perchlorate, and the like. Among these, guanidine thiocyanate or guanidine hydrochloride having a strong protein-modifying action is preferable. The concentration of these chaotropic substances used varies depending on each substance. For example, when guanidine thiocyanate is used, the concentration ranges from 3M to 5.5M, and when guanidine hydrochloride is used, it is used at 5M or more. Is preferred.
水溶液中にカオトロピック物質が存在することによって、水溶液中の核酸は、水分子に囲まれて存在するよりも、固体に吸着して存在するほうが熱力学的に有利となるため、磁気ビーズ30の表面に吸着することとなる。 Since the chaotropic substance is present in the aqueous solution, the nucleic acid in the aqueous solution is thermodynamically advantageous when it is adsorbed to a solid rather than being surrounded by water molecules. Will be adsorbed.
3−1−3.洗浄液
第1〜第3洗浄液12,14,16は、核酸の結合した磁気ビーズ30を洗浄するものである。
3-1-3. Cleaning Liquid The first to
第1洗浄液12は、第1オイル20及び第2オイル22のいずれとも相分離する液体である。第1洗浄液12は、水または低塩濃度水溶液であることが好ましく、低塩濃度水溶液の場合、緩衝液であることが好ましい。低塩濃度水溶液の塩濃度は、100mM以下が好ましく、50mM以下がより好ましく、10mM以下が最も好ましい。また、第1洗浄液12は、上述したような界面活性剤を含有してもよく、pHは特に限定されない。第1洗浄液12を緩衝液とするための塩は特に限定されないが、トリス、ヘペス、ピペス、リン酸などの塩が好ましい。さらに、第1洗浄液12は、アルコールを核酸の担体への吸着、逆転写反応、PCR反応などを阻害しない量だけ含むことが好ましい。この場合、アルコール濃度は特に限定されない。
The
なお、第1洗浄液12にカオトロピック物質を含有させてもよい。例えば、第1洗浄液12にグアニジン塩酸塩を含有させると、磁気ビーズ30等に吸着した核酸の吸着を維持または強化しつつ磁気ビーズ30等を洗浄することができる。
The
第2洗浄液14は、第2オイル22及び第3オイル24のいずれとも相分離する液体である。第2洗浄液14は、基本的に、第1洗浄液12と同じでも異なる組成であってもよいが、カオトロピック物質を事実上含まない溶液であるほうが好ましい。後の溶液に、カオトロピック物質の持ち込みを無くすためである。第2洗浄液14としては、例えば5mMトリス塩酸緩衝液からなってもよい。第2洗浄液14は、上述したように、アルコールを含むことが好ましい。
The
第3洗浄液16は、第3オイル24及び第4オイル26のいずれとも相分離する液体である。第3洗浄液16は、基本的に、第2洗浄液14と同じでも異なる組成であってもよいが、アルコールを含まない。また、第3洗浄液16は、アルコールを反応容器400に持ち込むことを防止するためにクエン酸を含むことができる。
The
3−1−4.磁気ビーズ
磁気ビーズ30は、核酸を吸着するビーズであり、容器組立体1の外にある磁石3によって移動させることができるように比較的強い磁性を有することが好ましい。磁気ビーズ30は、例えば、シリカビーズまたはシリカコーティングされたビーズであってもよい。磁気ビーズ30は、好ましくはシリカコーティングされたビーズであってもよい。
3-1-4. Magnetic Beads The
3−1−5.溶出液
溶出液32は、第4オイル26と相分離する液体であり、溶出容器300中の流路2内で第4オイル26,26に挟まれたプラグとして存在する。溶出液32は、磁気ビーズ30に吸着した核酸を、磁気ビーズ30から溶出液32中に溶出させる液体である。また、溶出液32は、加熱によって第4オイル26中で液滴となる。溶出液32は、例えば、純水を用いることができる。ここで、「液滴」とは、自由表面で囲まれた液体である。
3-1-5. The
3−1−6.試薬
試薬34は、反応に必要な成分を含む。試薬34は、反応容器400における反応がPCRである場合には、溶出液の液滴36(図8を参照)の中に溶出させた標的核酸(DNA)を増幅するためDNAポリメラーゼなどの酵素及びプライマー(核酸)と、増幅産物を検出するための蛍光プローブのうち少なくとも一つが含まれていることができ、ここでは、プライマー、酵素及び蛍光プローブの全てが含まれている。試薬34は、第4オイル26とは相溶せず、核酸を含む溶出液32の液滴36に接すると溶けて反応するものであ
り、反応容器400内の流路2の重力方向における最下部の領域に固体状態で存在する。例えば、試薬34は、凍結乾燥(フリーズドライ)したものを用いることができる。
3-1-6.
3−2.容器組立体の操作
容器組立体1の操作の一例として、図7及び図8を用いて説明する。
3-2. Operation of Container Assembly An example of the operation of the
容器組立体1の操作は、
(A)吸着容器100、洗浄容器200、溶出容器300及び反応容器400を接合して容器組立体1を組み立てる工程と、
(B)吸着液10が収容された吸着容器100に、核酸を含有する検体を導入する工程と、
(C)第2洗浄容器220から吸着容器100へ磁気ビーズ30を移動する工程と、
(D)吸着容器100を揺動して核酸を磁気ビーズ30に吸着させる工程と、
(E)吸着容器100から、第1オイル20、第1洗浄液12、第2オイル22、第2洗浄液14、第3オイル24、第3洗浄液16及び第4オイル26の順に通過して、溶出容器300へ、核酸が吸着した磁気ビーズ30を移動する工程と、
(F)溶出容器300内で、溶出液32に対して磁気ビーズ30から核酸を溶出させる工程と、
(G)核酸を含む液滴を反応容器400内の試薬34に接触させる工程と、
を含む。
The operation of the
(A) a step of assembling the
(B) introducing a sample containing nucleic acid into the
(C) a step of moving the
(D) swinging the
(E) From the
(F) a step of eluting the nucleic acid from the
(G) contacting the droplet containing the nucleic acid with the
including.
以下、各工程について順番に説明する。 Hereinafter, each process is demonstrated in order.
(A)容器組立体1を組み立てる工程
図7の(a)に示すように、組み立てる工程は、吸着容器100から反応容器400までを接合して、吸着容器100から反応容器400まで連続する流路2を形成するように容器組立体1を組み立てる。なお、図7の(a)では、吸着容器100はキャップ110が装着されているが、キャップ110をプランジャー部130に装着するのは(B)工程の後である。
(A) Step of assembling
より具体的には、反応容器400の反応受入部404に溶出容器300の溶出挿入部302を挿入し、溶出容器300の溶出受入部304に第3洗浄容器230の第3挿入部232を挿入し、第3洗浄容器230の第3受入部234に第2洗浄容器220の第2挿入部222を挿入し、第2洗浄容器220の第2受入部224に第1洗浄容器210の第1挿入部212を挿入し、第1洗浄容器210の第1受入部214に吸着容器100の吸着挿入部122を挿入する。
More specifically, the
(B)検体を導入する工程
導入する工程は、例えば検体が付着した綿棒を、吸着容器100のキャップ110が装着される開口から吸着液10の中に差し入れ、吸着液10にこれを浸漬して行う。より具体的には、吸着容器100のシリンジ部120に挿入された状態のプランジャー部130の一方の端部にある開口から綿棒を差し入れる。次に、綿棒を吸着容器100から取り出し、キャップ110を装着する。これが図7の(a)の状態である。また、検体は、ピペット等によって吸着容器100へ導入してもよい。また、検体がペースト状や固体状であれば、例えば、吸着容器100へ匙やピンセット等によりプランジャー部130の内壁に付着させたり投入したりしてもよい。図7の(a)に示すように、シリンジ部120及びプランジャー部130の中は途中まで吸着液10が充填されているが、キャップ110の装着される開口側には空間が残されている。
(B) Step of introducing the sample In the step of introducing, for example, a cotton swab to which the sample is attached is inserted into the adsorbing
検体には標的となる核酸が含まれている。以下、これを単に標的核酸ということがある
。標的核酸は、例えば、DNAやRNA(DNA:Deoxyribonucleic Acid、及び/又はRNA:Ribonucleic Asid)である。標的核酸は、検体から抽出され、後述する溶出液32に溶出された後、例えばPCRの鋳型として利用される。検体としては、血液、鼻腔粘液、口腔粘膜、その他各種の生体試料などが挙げられる。
The sample contains the target nucleic acid. Hereinafter, this may be simply referred to as a target nucleic acid. The target nucleic acid is, for example, DNA or RNA (DNA: Deoxyribonucleic Acid and / or RNA: Ribonucleic Acid). The target nucleic acid is extracted from the specimen, eluted in an
(C)磁気ビーズを移動する工程
磁気ビーズ30を移動する工程は、図7の(a)に示すように第2洗浄容器220の第3オイル24,24に挟まれてプラグ状に存在する磁気ビーズ30を、容器外部に配置した磁石3の磁力を印加した状態で、磁石3を吸着容器100へ向かって移動させることによって行う。
(C) Step of moving the magnetic beads The step of moving the
この磁気ビーズ30の移動に合わせて、あるいはこれより先にキャップ110及びプランジャー部130をシリンジ部120から抜き出す方向へ移動して、吸着液10内の検体をプランジャー部130内からシリンジ部120内へ移動させる。このプランジャー部130の移動によって、先端部134によって塞がれていた流路2は吸着液10へ連通する。
The
磁気ビーズ30は、磁石3の移動に伴って流路2内を上昇し、図7の(b)に示すように、検体のある吸着液10内へ到達する。
The
(D)核酸を磁気ビーズに吸着させる工程
核酸を吸着させる工程は、吸着容器100を揺動させて行われる。この工程は、吸着容器100の開口がキャップ110によって吸着液10が漏れ出さないように封止されているので、効率的に行うことができる。この工程により、標的核酸は、カオトロピック剤の作用により、磁気ビーズ30の表面に吸着される。この工程では、磁気ビーズ30の表面に標的核酸以外の核酸や蛋白質が吸着してもよい。
(D) Step of adsorbing nucleic acid to magnetic beads The step of adsorbing nucleic acid is performed by swinging the
吸着容器100を揺動させる方法としては、公知のボルテックスシェイカーなどの装置を用いてもよいし、作業者の手で振り混ぜてもよい。また、磁気ビーズ30の磁性を利用して、外部から磁場を与えながら吸着容器100を揺動してもよい。
As a method of swinging the
(E)核酸が吸着した磁気ビーズを移動する工程
核酸が吸着した磁気ビーズ30を移動する工程は、吸着容器100、洗浄容器200及び溶出容器300の外部から磁石3の磁力を印加しながら移動することによって磁気ビーズ30を吸着液10、第1〜第4オイル20,22,24,26及び第1〜第3洗浄液12,14,16の中を移動させる。
(E) Step of moving magnetic beads adsorbed with nucleic acid The step of moving
磁石3は、例えば、永久磁石、電磁石等を用いることができる。また、磁石3は、作業者の手で動かして行ってもよいし、機械装置等を利用して行ってもよい。磁気ビーズ30は、磁力によって引き寄せられる性質を有しているため、この性質を利用して、吸着容器100、洗浄容器200、そして溶出容器300へと、磁石3の相対的な配置を変化させて、流路2内を移動させる。磁気ビーズ30が各洗浄液を通過するときの速度は特に限定されないし、同一洗浄液内で流路2の長手方向に沿って往復するようにして移動させてもよい。なお、磁気ビーズ30以外の粒子等をチューブ内で移動させる場合は、例えば、重力や電位差を利用してこれを行うことができる。
For example, a permanent magnet or an electromagnet can be used as the
(F)核酸を溶出させる工程
核酸を溶出させる工程は、溶出容器300内で、溶出液の液滴36に対して磁気ビーズ30から核酸を溶出させる。図7における溶出液32は、溶出容器300の流路の細い部
分にプラグとして存在していたが、上記のように磁気ビーズ30を移動させる間に、反応容器400を加熱することで内容液が膨張し、図8に示すように液滴36として溶出容器300内を上方へ移動している。そして、図8の(a)に示すように、磁気ビーズ30が溶出容器300の溶出液の液滴36に到達すると、溶出液の作用により、磁気ビーズ30に吸着された標的核酸が、溶出液の液滴36内に溶出する。
(F) Step of Eluting Nucleic Acid In the step of eluting nucleic acid, the nucleic acid is eluted from the
(G)試薬34に接触させる工程
試薬34に接触させる工程は、核酸を含む液滴36を反応容器400内の最下部にある試薬34に接触させる。具体的には、図8の(b)に示すように、キャップ110を押し、プランジャー部130の先端部134によって第1オイル20を押し下げることで、磁石3の磁力が印加された磁気ビーズ30を所定位置に維持したまま、標的核酸が溶出した溶出液の液滴36が反応容器400へ移動し、反応容器400の最下部にある試薬34に接触する。液滴36が接触した試薬34は溶けて溶出液中の標的核酸と混ざり合い、例えば熱サイクルを用いたPCRを実施することができる。
(G) The process of making it contact with the
4.PCR装置
図9及び図10を用いて、容器組立体1を用いて核酸溶出処理及びPCRを行うPCR装置50について説明する。図9は、PCR装置50の概略構成図である。図10は、PCR装置50のブロック図である。
4). PCR Device
PCR装置50は、回転機構60と、磁石移動機構70と、押圧機構80と、蛍光測定器55と、コントローラー90と、を有する。
The
4−1.回転機構
回転機構60は、回転用モーター66とヒーター65とを含み、回転用モーター66を駆動することにより容器組立体1及びヒーター65を回転する。回転機構60が容器組立体1及びヒーター65を回転して上下反転させることによって、反応容器400の流路内において標的核酸を含む液滴が移動し、熱サイクル処理が行われる。
4-1. Rotation mechanism The
ヒーター65は、図示しない複数のヒーターを含み、例えば、溶出用、高温用及び低温用のヒーターを含むことができる。溶出用ヒーターは、容器組立体1のプラグ状の溶出液を加熱し、標的核酸の磁気ビーズから溶出液への溶出を促進する。高温用ヒーターは、反応容器400の流路の上流側の液体を低温用ヒーターよりも高い温度に加熱する。低温用ヒーターは、反応容器の流路の底部402を加熱する。高温用ヒーターと低温用ヒーターによって、反応容器400の流路内の液体に温度勾配を形成することができる。ヒーター65には、温度制御装置が設けられ、コントローラー90からの指令に従って、容器組立体1内の液体を処理に適した温度に設定できる。
The
ヒーター65は、反応容器400の底部402の外壁が露出する開口を有する。蛍光測定器55は、その開口から溶出液の液滴の輝度を測定する。
The
4−2.磁石移動機構
磁石移動機構70は、磁石3を移動させる機構である。磁石移動機構70は、容器組立体1内の磁気ビーズを磁石3に引き寄せるとともに、磁石3を移動させることによって磁気ビーズを容器組立体1内で移動させる。磁石移動機構70は、一対の磁石3と、昇降機構と、揺動機構と、を有する。
4-2. Magnet moving mechanism The
揺動機構は、一対の磁石3を図9の左右方向(図9の前後方向であってもよい)に揺動させる機構である。一対の磁石3は、PCR装置50に装着された容器組立体1を左右方向から挟みこむように配置(図7、図8を参照)され、容器組立体1の流路と直交する方
向(ここでは図9の左右方向)で磁気ビーズと磁石3との距離を近接させることができる。したがって、一対の磁石3を左右方向に矢印のように揺動させると、その動きに合わせて容器組立体1内の磁気ビーズが左右方向に移動する。昇降機構は、磁石3を上下方向に移動させ、磁石3の移動に合わせて磁気ビーズを図9の上下方向に移動させることができる。
The swing mechanism is a mechanism that swings the pair of
4−3.押圧機構
押圧機構80は、容器組立体1のプランジャー部を押す機構であり、プランジャー部が押圧機構80によって押されることによって、溶出容器300内の液滴が反応容器400内に押し出され、反応容器400内でPCRを実施することができるようになる。
4-3. Pressing mechanism The
図9では、押圧機構80を正立した容器組立体1の上方に配置して示しているが、押圧機構80がプランジャー部を押す方向は、図9における上下方向ではなく、例えば、上下方向に対して45度傾いていてもよい。このようにすることで、磁石移動機構70と干渉しない位置に押圧機構80を配置することが容易になる。
In FIG. 9, the
4−4.蛍光測定器
蛍光測定器55は、反応容器400の液滴の輝度を測定する測定器である。蛍光測定器55は、反応容器400の底部402に対向する位置に配置される。なお、蛍光測定器55は、マルチプレックスPCRに対応できるように、複数の波長域の輝度検出が可能であると望ましい。
4-4. Fluorescence measuring instrument The
4−5.コントローラー
コントローラー90は、PCR装置50の制御を行う制御部である。コントローラー90は、例えばCPUなどのプロセッサーと、ROMやRAMなどの記憶装置とを有する。記憶装置には各種プログラム及びデータが記憶されている。また、記憶装置は、プログラムを展開する領域を提供する。プロセッサーが記憶装置に記憶されたプログラムを実行することによって、各種の処理が実現される。
4-5. Controller The
例えば、コントローラー90は、回転用モーター66を制御して、容器組立体1を所定の回転位置まで回転させる。回転機構60には図示しない回転位置センサが設けられており、コントローラー90は、回転位置センサの検出結果に応じて回転用モーター66を駆動・停止させる。
For example, the
また、コントローラー90は、ヒーター65を制御して、ヒーターをオン・オフ制御して発熱させ、容器組立体1内の液体を所定の温度まで加熱する。
Further, the
また、コントローラー90は、磁石移動機構70を制御して、磁石3を上下方向に移動させ、図示しない位置センサの検出結果に応じて磁石3を図9の左右方向に揺動させる。
Further, the
また、コントローラー90は、蛍光測定器55を制御して、反応容器400内の液滴の輝度を測定する。この測定結果は、コントローラー90の図示しない記憶装置に保存される。
In addition, the
このPCR装置50に容器組立体1を装着し、上記3−2の(C)〜(G)の工程を実施することができ、さらにPCRを実施することができる。
The
5. 容器組立体セット
本実施形態に係る容器組立体セット500について、図面を参照しながら説明する。図11は、溶出容器300(第1容器)の斜視図である。図12は、反応容器400(第2
容器)の斜視図である。図13は、本実施形態に係る容器組立体セット500を図11及び図12のB−B断面で模式的に示す縦断面図である。容器組立体セット500は、図1〜図10を用いて説明した容器組立体1の一部である。
5. Container Assembly Set A container assembly set 500 according to this embodiment will be described with reference to the drawings. FIG. 11 is a perspective view of the elution container 300 (first container). FIG. 12 shows a reaction vessel 400 (second
It is a perspective view of a container. FIG. 13 is a vertical cross-sectional view schematically showing the container assembly set 500 according to the present embodiment in the BB cross section of FIGS. 11 and 12. The container assembly set 500 is a part of the
ここで説明する容器組立体セット500(図13)は、第1容器(溶出容器300)及び第2容器(反応容器400)を組立てることで核酸増幅反応カートリッジ502(図14)となり、さらに吸着容器100及び洗浄容器200(図1等)を核酸増幅反応カートリッジ502に接合することで、上述した容器組立体1を得ることができる。なお、各容器の接合工程順は適宜変更することができる。そして、容器組立体1を核酸増幅反応装置(PCR装置50:図9、図10)に装着することができる。
The container assembly set 500 (FIG. 13) described here becomes a nucleic acid amplification reaction cartridge 502 (FIG. 14) by assembling the first container (elution container 300) and the second container (reaction container 400), and further the adsorption container. The
図13に示すように、容器組立体セット500は、第1流体が封止収納された第1流路2aを有する第1容器である溶出容器300と、第1容器に接合して第1流路2aと連通する、第2流体が封止収納された第2流路2bを有する第2容器である反応容器400と、を含む。このように第1流体と第2流体とが別々の容器に封止収納されることで、容器同士を接合するまで容器間の流体の移動を抑制することができる。
As shown in FIG. 13, the container assembly set 500 includes an
以下、第1容器として溶出容器300を、第2容器として反応容器400を用いた組み合わせについて説明し、容器組立体セット500として溶出容器300及び反応容器400の詳細について説明した後、核酸増幅反応カートリッジ502について説明する。
Hereinafter, a combination using the
5−1.溶出容器
図11及び図13に示す第1容器は第1流体として第4オイル26及び溶出液32を収納する溶出容器300であり、上記「2−3.溶出容器」で説明した容器である。
5-1. Elution Container The first container shown in FIGS. 11 and 13 is an
第1容器は、第1流体を流通させる第1流路2aの一部を形成し、後述する反応容器400の第2流路2bの一端に挿入される挿入部である溶出挿入部302と、内部に第1流路2aの一部を形成し第1流路2aの軸方向に延びる略筒状の胴部308と、溶出挿入部302の周囲に形成された筒状部312と、筒状部312の周囲に形成されたフランジ310と、を有する。
The first container forms a part of the
第1容器は、第1流路2aを形成し、後述する反応容器400の第2流路2bの一端に挿入される挿入部である溶出挿入部302と、内部に第1流路2aの一部を形成し第1流路2aの軸方向に延びる略筒状の胴部308と、第1流路2aの周りに形成されたフランジ310と、一端が前記フランジに接し溶出挿入部302の周りに形成された筒状部312と、を有する。
The first container forms a
胴部308は、内部に第1流路2aが形成され、外部に複数のフランジを有する。また、胴部308は、一方の端部には溶出挿入部302を有し、他方の端部には溶出受入部304を有する。胴部308の溶出受入部304側の端部は内側に環状の段部306を有し、段部306にはフィルム322が貼り付けられている。なお、図11では段部306及び第1流路2aを説明するためにフィルム322を省略している。
The
また、胴部308の溶出挿入部302側の端部には、第1流路2a(又は溶出挿入部302)の周囲に形成された筒状の部分である筒状部312と、溶出挿入部302を反応受入部404へ挿入する挿入方向Sと交差する方向に突出する突起部318と、を有する。
Further, at the end of the
さらに、複数のフランジの内、最も溶出挿入部302側(接合させる第2容器側)にあるフランジ310は、溶出容器300と反応容器400とが接合する際に、リザーバー形成部407と接触してリザーバー形成部407の開口を封止し、後述するリザーバー40
6を形成する封止部である。フランジ310の外周は、リザーバー形成部407の内周と同一形状又はわずかに大きな相似形に形成される。フランジ310は、リザーバー形成部407が円筒状であるとき、円板状である。
Further, among the plurality of flanges, the
6 is a sealing portion. The outer periphery of the
筒状部312は、フランジ310から溶出挿入部302に沿って延在する形状を有し、挿入方向S側の端部が開口する。筒状部312の開口端部には、後述する反応容器400(第2容器)の移動制限部408に接触することで移動が制限される当接部314が形成されている。筒状部312の開口端部の内側には環状の段部307を有し、段部307にはフィルム320が貼り付けられている(図13)。したがって、第1流路2aは、その両端に貼り付けられたフィルム320,322により封止され、溶出液32及び第4オイル26(第1流体)を収容する。溶出液32は「3−1−5.溶出液」で説明し、第4オイル26については「3−1−1.オイル」で説明したので、重複する説明は省略する。
The
当接部314は、溶出容器300と反応容器400とが接合するときに、挿入方向Sに平行な方向で、リザーバー形成部407の一部(底面)である移動制限部408に対し接触してまたは所定間隔を有して対向配置される。当接部314は、溶出容器300と反応容器400とが接合して当接部314が移動制限部408と接触した状態で、筒状部312の内側と外側とを連通する連通孔を形成する切欠き部316を有する。
When the
切欠き部316は、筒状部312の開口端部に形成された複数の溝であり、筒状部312の内側から外側へ延びる。したがって、隣接する切欠き部316の間に形成された筒状部312の開口端部が当接部314になる。当接部314は、1つでもよいが、後述する第2流路2bの周囲に複数配置されてもよい。複数配置された当接部314は、挿入方向Sに平行な方向で、移動制限部408に対し接触して、又は、所定間隔を有して対向配置される。すなわち、当接部314は、溶出容器300及び反応容器400を接合する際の相対的な位置を決定するため、及び/又は、溶出容器300及び反応容器400を接合する際の過挿入を防止するために利用される。
The
突起部318は、フランジ310の外周よりも外方に突出するように形成されている。突起部318は、第1流路2aを挟んで対向する2箇所に形成される。なお、突起部318の数は、2箇所に限られない。
The
溶出挿入部302は、後述する反応容器400の反応受入部404に挿入する部分であり、先端が先細りになっていてフィルム320及び反応容器400のフィルム414を突き破りやすい形状である。
The
5−2.反応容器
図12及び図13に示す第2容器は、第2流体としての第4オイル26が封止収納された反応容器400であり、上記「2−4.反応容器」で説明した容器である。反応容器400は、第2流路2bは、溶出液32に溶出した核酸と反応する試薬34を含む。
5-2. Reaction Container The second container shown in FIGS. 12 and 13 is a
反応容器400(第2容器)は、内部に第2流路2bを形成する筒状の胴部403と、第2流路2bの一部を形成する受入部であって、胴部403の溶出容器300側の端部に形成され、溶出挿入部302が挿入されることによって第1流路2a及び第2流路2bを連通させる反応受入部404と、反応受入部404の周囲に形成され、溶出容器300側で開口し胴部403の周囲に形成される有底筒状のリザーバー形成部407、を有し、第1容器(溶出容器300)と接続される。また、反応容器400のリザーバー形成部407は、溶出挿入部302が挿入方向Sへ所定位置を超えて移動することを制限する移動制限部408を有し、反応容器400が溶出容器300に接続されたときに、リザーバー形成部407がフランジ310に嵌合してリザーバー406を形成する。
The reaction container 400 (second container) is a
移動制限部408は、反応容器400に溶出容器300を接合する際に、溶出挿入部302が所定位置よりも第2流路2b内へ誤って挿入されすぎる(過挿入)ことを防止する。溶出挿入部302の過挿入を防止することで、後述の第1シールS1のシールの強さを強くなりすぎないようにすることができる。移動制限部408の形状は、溶出挿入部302が所定位置よりも第2流路2b内へ挿入されすぎることを防止できる限りにおいて制限はなく、リザーバー形成部407の一部として形成される場合の他、胴部403の周囲にフランジとして設けられる場合や、胴部403から周囲に向けて配置する棒状部材として実現することも可能である。
When the
胴部403は、第2流路2bの軸方向に延びる円筒状であり、一方の端部が底部402で閉じられ、他方の端部が反応受入部404として開口する。胴部403は、第2流路2bの軸方向が長手方向である。胴部403の開口端部にはフィルム414が貼り付けられることで第2流路2bを封止し、第4オイル26及び試薬34(第2流体)を第2流路2bに封止収納する。
The
リザーバー形成部407は、第2流路2bの周囲に配置された筒状部と、筒状部と胴部403とを接続し、移動制限部408として機能する接続部と、を有する。リザーバー形成部407は、有底の円筒状である。移動制限部408は、リザーバー形成部407の筒状部の端部から胴部403に延在する部分となっている。
The
移動制限部408は、第2流路2bの周囲に形成され、内周を胴部403の外面に接続しリザーバー形成部407の下端に位置する環状の部分である。移動制限部408は、溶出挿入部302を反応受入部404へ挿入する挿入方向Sから見て円形である。また、移動制限部408の外周形状は、リザーバー形成部407が円筒以外の筒であればその形状に合わせた形状を有してもよい。移動制限部408が環状や円形であることで、第2流路2bの周囲のいずれの位置においても、第2流路2bに対し溶出挿入部302が所定位置を超えて挿入されたり、第1シールS1が強くシールされすぎないようにすることができる。
The
リザーバー形成部407は、挿入方向Sと交差する方向に貫通する貫通孔412を有する。貫通孔412は、リザーバー形成部407の開口端部から挿入方向Sの反対方向に突出する抜け止め部410に設けられる。抜け止め部410は、対向する2箇所に設けられる。また、貫通孔412は、フランジ310が接する部分よりも開口端部側であれば、リザーバー形成部407の側面に形成されてもよい。
The
5−3.核酸増幅反応カートリッジ
図13及び図14を用いて核酸増幅反応カートリッジ502及びその組立手順について説明する。図14は、実施形態に係る核酸増幅反応カートリッジ502のB−B断面図である。図14においては、溶出容器300の一部を省略して示す。核酸増幅反応カートリッジ502は、図11〜図13を用いて説明した容器組立体セット500を組み立てることで得られる。具体的な組立手順は以下のとおりである。
5-3. Nucleic Acid Amplification Reaction Cartridge A nucleic acid
まず、溶出容器300の第1流路2aの先端にある溶出挿入部302を、反応容器400の反応受入部404へ挿入する。その際、図13に示したフィルム320及びフィルム414は溶出挿入部302及び反応受入部404の先端によって押し破られて、第1流路2aと第2流路2bとが連通する。
First, the
溶出容器300の当接部314は、溶出容器300と反応容器400とが接合するときに、第2流路2bの周囲の複数箇所に配置されると共に、挿入方向Sに平行な方向で移動
制限部408に対し接触してまたは所定間隔を有して対向配置される。当接部314が移動制限部408に接触していることは必須ではない。第2流路2b内の所定位置にある溶出挿入部302をさらに過剰に挿入されそうになったときに、当接部314が移動制限部408に接触するようになっていればよい。
The
当接部314は第1流路2aの周囲に形成された筒状部312の開口端部に形成され、移動制限部408は第2流路2bの周囲に形成された環状の平坦面なので、第2流路2bに対して第1流路2aが傾斜することなく所定の状態で移動を制限することができる。
The
溶出容器300と反応容器400とが所定位置で接合すると、溶出容器300の突起部318が反応容器400の貫通孔412に嵌まり込み、溶出挿入部302が反応受入部404から抜ける方向(挿入方向Sの反対方向)に移動することを制限する。これによって、溶出容器300と反応容器400との接合状態を確実に維持することができる。
When the
切欠き部316は、当接部314が移動制限部408と接触した状態でも筒状部312の内側と外側とを連通する連通孔を形成する。そのため、当接部314と移動制限部408とが接触した状態であっても各容器から流出する第4オイル26がこの連通孔を通ることができ、筒状部312の内側にある第4オイル26が溶出容器300と反応容器400とを接合する際に抵抗とならず、ユーザーが容易に容器同士を組み立てることができる。
The
また、切欠き部316によって形成される複数の連通孔は、上記「3−2.容器組立体の操作」の及び工程(G)において溶出液32の液滴を試薬34側へ押し出す(導入する)際に、溶出容器300及び反応容器400から押し出された第4オイル26がリザーバー406内に流れ出すことを許容する。すなわち、工程(G)では、第1流路2aから液体として溶出液32及び溶出液32と混和しない第4オイル26が第2流路2bへと導入され、その際に溢れた液体が連通孔を介してリザーバー406内に流れ出す。
In addition, the plurality of communication holes formed by the
5−4.シール及びリザーバー
図14に示すように、溶出容器300と反応容器400とが接合する際には、溶出挿入部302は、反応受入部404に挿入されて第1流路2a及び第2流路2bが連通され、第1シールS1が形成される。また、溶出容器300と反応容器400とが接合する際には、筒状部312は、リザーバー形成部407に挿入され、フランジ310が、リザーバー形成部407に内接して第2シールS2が形成される。
5-4. Seal and Reservoir As shown in FIG. 14, when the
既述のように、溶出容器300と反応容器400とが接合された後、押圧機構80によって、容器組立体1のプランジャー部が押され、第1容器(溶出容器300)内の第1流体(第4オイル26)(液体)、及び溶出液32(液体)が反応容器400内に押し出される。すなわち、プランジャー部が押されることによって、第1シールS1でシールされた第1流路2a及び第2流路2b内の圧力が高まることになる。このとき、第1シールS1は、第2流路2bに存在する第4オイル26をリザーバー406へと逃がす(リークさせる)ことができる。
As described above, after the
第4オイル26のリーク量は、溶出液32を反応室(第2流路2b)に導入できる範囲で、特に限定されない。ここで、第1流路2aから第2流路2bに流入する第1流体(液体)(より具体的には第4オイル26及び溶出液32)の体積をV5と定義する。
The amount of leakage of the
一方、リザーバー406は、第1シールS1及び第2シールS2によってシールされているが、リザーバー406内には、溢れた第4オイル26とともに、気体(空気)が存在している。第4オイル26が低圧縮性の流体であるのに対して、気体は、少なくとも第4オイル26よりも高い圧縮性を有する(より圧縮されやすい)流体である。そのため、第
2シールS2のシールの強度が高くても、リザーバー406内の気体が圧縮されるため、プランジャー部を押すことができ、溶出液32を反応容器400の第2流路2b(反応室)に押し出すことができる。また、第2シールS2は、液体を漏出させず、気体を漏出させる程度のシールとしてもよい。既に述べたように、プランジャー部の押し込みは、容器組立体1を正立させた状態、又は、45度程度傾けた状態で行われるため、第2シールS2を、液体を漏出させず、気体を漏出させる程度のシールとしても、第4オイル26が外部に漏出することを避けることができる。なお、既に述べたように、「シールする」とは、少なくとも容器等に収容された液体又は気体が外部に漏れないように封ずることであるが、液体が漏れず気体が漏れる態様を含む。
On the other hand, the
また、容器組立体1には、吸着容器100、洗浄容器200及び溶出容器300等を接合するため、それぞれの容器の挿入部及び受入部により、各々の容器の間に流路のシールが形成される。一方、溶出容器300及び反応容器400の間の流路は、第1シールS1によってシールされる。第1シールS1は、流路をシールする他のシールよりも弱いシールとすることが好ましい。このようにすれば、プランジャー部が押されることによって流路の内圧が高まった際に、第1シールS1において他の流路のシールよりも先に内容物の漏出(リーク)を生じさせることができる。これにより容易に溶出液32を反応容器400(第2流路2b)に導入することができる。
In addition, in order to join the
リザーバー406は、溶出容器300(第1容器)が接続された際に、反応受入部404の外側であって、リザーバー形成部407の内側に形成される空間(容室)である。すなわち、リザーバー406は、溶出容器300(第1容器)と反応容器400とが接続された際に、フランジ310が、リザーバー形成部407の内壁面に当接することによって形成される空間である。換言すると、リザーバー406は、リザーバー形成部407の内側かつ反応受入部404の外側であって、溶出容器300(第1容器)が接続された際に、フランジ310によって区画される空間(容室)である。
The
溶出容器300と反応容器400とが接合する際に、溶出容器300のフランジ310がリザーバー形成部407内に入ると、フランジ310がリザーバー形成部407と接触してリザーバー形成部407の開口を封止する。具体的には、フランジ310の外周がリザーバー形成部407の内周面と密着しながら摺動して停止する。したがって、リザーバー形成部407内はフランジ310によって密封されることになり、リザーバー406が形成される。なお、第1流路2aと第2流路2bとが結合されたとき、筒状部312は、リザーバー406に収容される。
When the
また、溶出容器300と反応容器400とが接合する際に、溶出容器300の溶出挿入部302の一部が、反応容器400の反応受入部404内に入ると、溶出挿入部302の一部が反応受入部404の内壁面に接触して第1流路2a及び第2流路2bが連通するとともに第1シールS1が形成される。接合前に反応受入部404に存在した第4オイル24は、溶出挿入部302の一部が挿入されることにより、反応受入部404からリザーバー形成部407へと溢れ出す。
Further, when the
リザーバー406が形成される時期は、反応受入部404からの第4オイル26の溢れ始める時期よりも早期であれば、外部への第4オイル26の漏出が完全に抑えられる。しかし、例えば、図示のように、溶出容器300の筒状部312を設け、筒状部312がリザーバー形成部407に挿入されるようにすると、反応受入部404の開口から第2シールS2までの第4オイル26の流れる経路(距離)を長くすることができる。したがって、このようにすれば、リザーバー406が形成される時期は、反応受入部404からの第4オイル26の溢れ始める時期よりも遅くすることができる。また、このようにすれば、核酸増幅反応カートリッジ502の長手方向の長さを小さくすることができる。
If the time when the
リザーバー406は、概略的に述べると、溶出容器300と反応容器400とが接合する際に、溶出容器300及び反応容器400から流出した流体を受け入れる容量以上の容量を有する。したがって、溶出容器300と反応容器400とを接合する際に各容器から流出した第4オイル26をリザーバー406で受け入れることができる。また、溶出容器300と反応容器400とが接合する際に、フィルム320が破られることで第1流路2aから第4オイル26が漏れ出すとともに、溶出挿入部302が第2流路2b内に押し込まれることで、第2流路2bから第4オイル26が溢れ出す。リザーバー406は、溶出容器300と反応容器400とが接合する際に形成され、溶出容器300及び反応容器400から流出した流体(第4オイル26)を受け入れる。
Generally speaking, the
図15は、容器組立体セット500の要部のB−B断面図である。図16は、核酸増幅反応カートリッジ502の要部のB−B断面図である。図15及び図16には、各部分の体積又は容積に係る符号を付した。リザーバー406が、溶出容器300及び反応容器400から流出した流体を受け入れる容量以上の容量を有することは、以下のように言い換えることができる。
FIG. 15 is a BB cross-sectional view of the main part of the container assembly set 500. FIG. 16 is a cross-sectional view of the main part of the nucleic acid
図15に示すように、第1容器(溶出容器300)を構成する物質(例えば、ポリプロピレン)のうちフランジ310よりも接続端側(反応容器400側)の部分の体積をV1、第1容器(溶出容器300)のフランジ310よりも接続端側に存在する第1流路2a(第4オイル又は溶出液32が存在し得る)の容積をV2、反応受入部404に挿入される溶出挿入部302を構成する物質の体積をV3、反応受入部404に挿入される第1流路2a(第4オイル又は溶出液32が存在し得る)の容積をV4、及び、形成されるリザーバー406の容積をV6とする。そして、既に定義した第1流路2aから第2流路2bに導入される第1流体(液体)(第4オイル26及び/又は溶出液32)の体積をV5とすれば、
V6≧V1+V2+V3+V4+V5
の関係を満たす場合に、リザーバー406が、溶出容器300及び反応容器400から流出した流体を受け入れる容量以上の容量を有することとなる。
As shown in FIG. 15, the volume of the portion of the substance (for example, polypropylene) constituting the first container (elution container 300) on the connection end side (
V6 ≧ V1 + V2 + V3 + V4 + V5
When the above relationship is satisfied, the
上記関係を満たすことにより、第1容器(溶出容器300)及び第2容器(反応容器400)を接続する際に、リザーバー406の容積が、リザーバー406内に配置される物体(フランジ310よりも接続端側(反応容器400側)の第1容器の体積と、フランジ310よりも接続端側に存在する第1流路2a)の容積の和、以上となり第1流体の漏出を防止できる。さらに、第1流路2aから第2流路2bに導入される第1流体(第4オイル26及び溶出液32)の体積を加算しても、リザーバー406の容積がそれ以上の大きさとなるため、第1流体及び第2流体がフランジ310よりも外側に漏出しにくく、組み立てた後に所定の液体を導入しても内容物の漏出を抑制することができる。
By satisfying the above relationship, when the first container (elution container 300) and the second container (reaction container 400) are connected, the volume of the
また、上記の説明において、フィルム320及びフィルム414は、その体積が小さいため説明を省略した。しかし、フィルム320及びフィルム414は、溶出容器300及び反応容器400を接合する際に、流路を塞ぐことなく、また、第1シールS1に挟まることなくリザーバー406内若しくは溶出挿入部302及び反応受入部404の間の隙間に残る。そのため、フィルム320及びフィルム414の体積が無視できない程度の大きさである場合には、これを考慮してもよい。すなわち、フィルム320及びフィルム414の合計の体積をV7とすれば、
V6≧V1+V2+V3+V4+V5+V7
の関係を満たす場合に、リザーバー406が、溶出容器300及び反応容器400から流出した流体を受け入れる容量以上の容量を有することとなる。このような関係を満たすことにより、第1流体及び第2流体がフランジ310よりも外側に漏出しにくく、組み立て
た後に所定の液体を導入しても内容物の漏出を抑制することができる。
In the above description, the
V6 ≧ V1 + V2 + V3 + V4 + V5 + V7
When the above relationship is satisfied, the
本発明は、上述した実施形態に限定されるものではなく、さらに種々の変形が可能である。例えば、本発明は、実施形態で説明した構成と実質的に同一の構成(例えば、機能、方法、及び結果が同一の構成、あるいは目的及び効果が同一の構成)を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成の本質的でない部分を置き換えた構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成と同一の作用効果を奏する構成又は同一の目的を達成することができる構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成に公知技術を付加した構成を含む。 The present invention is not limited to the above-described embodiments, and various modifications can be made. For example, the present invention includes configurations that are substantially the same as the configurations described in the embodiments (for example, configurations that have the same functions, methods, and results, or configurations that have the same objects and effects). In addition, the invention includes a configuration in which a non-essential part of the configuration described in the embodiment is replaced. In addition, the present invention includes a configuration that exhibits the same operational effects as the configuration described in the embodiment or a configuration that can achieve the same object. In addition, the invention includes a configuration in which a known technique is added to the configuration described in the embodiment.
1…容器組立体、2…流路、2a…第1流路、2b…第2流路、3…磁石、5…核酸精製デバイス、10…吸着液、12…第1洗浄液、14…第2洗浄液、16…第3洗浄液、20…第1オイル、22…第2オイル、24…第3オイル、26…第4オイル、30…磁気ビーズ、32…溶出液、34…試薬、36…液滴、50…PCR装置、55…蛍光測定器60…回転機構、65…ヒーター、66…回転用モーター、70…磁石移動機構、80…押圧機構、90…コントローラー、100…吸着容器、110…キャップ、112…通気部、120…シリンジ部、122…吸着挿入部、126…吸着カバー部、130…プランジャー部、132…棒状部、134…先端部、200…洗浄容器、210…第1洗浄容器、212…第1挿入部、214…第1受入部、216…第1カバー部、220…第2洗浄容器、222…第2挿入部、224…第2受入部、226…第2カバー部、230…第3洗浄容器、232…第3挿入部、234…第3受入部、236…第3カバー部、300…溶出容器、302…溶出挿入部、304…溶出受入部、306…段部、307…段部、308…胴部、310…フランジ、312…筒部、314…当接部、316…切欠き部、318…突起部、320,322…フィルム、400…反応容器、402…底部、403…胴部、404…反応受入部、406…リザーバー、407…リザーバー形成部、408…移動制限部、410…抜け止め部、412…貫通孔、414…フィルム、500…容器組立体セット、502…核酸増幅反応カートリッジ、S…挿入方向、S1…第1シール、S2…第2シール
DESCRIPTION OF
Claims (7)
第2容器と、
を含み、
前記第2容器は、第2流路の一部を形成する受入部、及び、当該受入部の周囲に形成され、前記第1容器と前記第2容器とが結合されたとき、前記フランジと接合してリザーバーを形成するリザーバー形成部、を有し、
前記第1容器のうち前記フランジよりも接続端側の部分の体積をV1、
前記第1容器の前記フランジよりも接続端側に存在する前記第1流路の容積をV2、
前記受入部に挿入される前記挿入部の体積をV3、
前記受入部に挿入される前記第1流路の容積をV4、
前記第1流路から前記第2流路に導入される液体の体積をV5、及び、
前記リザーバーの容積をV6、
とした場合に、
V6≧V1+V2+V3+V4+V5
の関係を満たす、容器組立体セット。 A first container having an insertion part forming a part of the first flow path, a flange formed around the first flow path, and a tubular part extending from the flange along the insertion part; ,
A second container;
Including
The second container is formed around a receiving part that forms a part of the second flow path and the receiving part, and is joined to the flange when the first container and the second container are combined. And a reservoir forming part that forms a reservoir,
The volume of the portion of the first container closer to the connection end than the flange is V1,
The volume of the first flow path existing on the connection end side of the flange of the first container is V2,
The volume of the insertion part inserted into the receiving part is V3,
The volume of the first flow path inserted into the receiving part is V4,
The volume of liquid introduced from the first flow path to the second flow path is V5, and
The volume of the reservoir is V6,
If
V6 ≧ V1 + V2 + V3 + V4 + V5
A container assembly set that satisfies the above relationship.
前記第1流路と前記第2流路とが結合されたとき、前記筒状部は、前記リザーバーに収容される、容器組立体セット。 In claim 1,
The container assembly set, wherein the cylindrical portion is accommodated in the reservoir when the first flow path and the second flow path are combined.
前記第1流路及び前記筒状部には前記液体が満たされている、容器組立体キット。 In claim 1 or claim 2,
The container assembly kit, wherein the liquid is filled in the first flow path and the cylindrical portion.
前記リザーバーは、前記リザーバー形成部の内側かつ前記受入部の外側であって、前記第1容器と前記第2容器とが接続されたときに、前記フランジによって区画される空間である、容器組立体セット。 In any one of Claims 1 to 3,
The reservoir is a container assembly that is inside the reservoir forming part and outside the receiving part, and is a space defined by the flange when the first container and the second container are connected to each other. set.
前記第1容器及び前記第2容器が接続された際に、
前記挿入部は、前記受入部に挿入されて前記第1流路及び前記第2流路を連通させて第1シールを形成し、
前記筒状部は、前記リザーバー形成部に挿入され、
前記フランジは、前記リザーバー形成部に内接して第2シールを形成する、容器組立体セット。 In any one of Claims 1 thru | or 4,
When the first container and the second container are connected,
The insertion portion is inserted into the receiving portion to communicate the first flow path and the second flow path to form a first seal;
The cylindrical part is inserted into the reservoir forming part,
The container assembly set, wherein the flange is inscribed in the reservoir forming part to form a second seal.
前記第1容器は、前記液体として、溶出液及び前記溶出液と混和しない液体を収納する溶出容器であり、
前記第2容器は、前記溶出液と混和しない液体及び前記溶出液に溶出した核酸と反応する試薬を前記第2流路に含む反応容器である、容器組立体セット。 In any one of Claims 1 thru | or 5,
The first container is an elution container that contains an eluate and a liquid that is immiscible with the eluate as the liquid,
The container assembly set, wherein the second container is a reaction container including a liquid that is immiscible with the eluate and a reagent that reacts with the nucleic acid eluted in the eluate in the second channel.
シリンジ、及び、前記シリンジに挿入可能であり、前記シリンジに対して挿入方向に移動可能なプランジャー、を有し、物質結合性固体担体に生体関連物質を吸着させる吸着液及び該吸着液とは混和しない液体を封止収納する吸着容器と、
前記生体関連物質が吸着された前記物質結合性固体担体を洗浄する洗浄液及び該洗浄液
とは混和しない液体を封止収納する洗浄容器と、
を含み、
前記第1容器は、前記液体として、溶出液及び前記溶出液と混和しない液体を収納する溶出容器であり、
前記第2容器は、前記溶出液と混和しない液体及び前記溶出液に溶出した核酸と反応する試薬を前記第2流路に含む反応容器であり、
前記吸着容器、前記洗浄容器、前記第1容器、及び、前記第2容器を接続し、前記プランジャーを挿入方向に移動させた際に、前記第2流路に溶出液及び前記溶出液と混和しない液体が導入される、容器組立体セット。 In any one of Claims 1 thru | or 6,
An adsorbing liquid that has a syringe and a plunger that can be inserted into the syringe and that can move in the inserting direction with respect to the syringe, and that adsorbs a biological substance on a substance-binding solid carrier, and the adsorbing liquid An adsorbing container for sealing and storing immiscible liquids;
A cleaning liquid for cleaning the substance-binding solid carrier to which the biological substance is adsorbed, and a cleaning container for sealingly storing a liquid immiscible with the cleaning liquid;
Including
The first container is an elution container that contains an eluate and a liquid that is immiscible with the eluate as the liquid,
The second container is a reaction container containing in the second channel a liquid that is immiscible with the eluate and a reagent that reacts with nucleic acid eluted in the eluate.
When the adsorption container, the washing container, the first container, and the second container are connected and the plunger is moved in the insertion direction, the elution liquid and the elution liquid are mixed into the second flow path. A container assembly set in which liquids that are not to be introduced are introduced.
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