JP2016011316A

JP2016011316A - Processes for convergent synthesis of calicheamicin derivative

Info

Publication number: JP2016011316A
Application number: JP2015205319A
Authority: JP
Inventors: キースモーランジャスティン; Justin Keith Moran; グーチアンシン; Jianxin Gu
Original assignee: Wyeth LLC
Current assignee: Wyeth LLC
Priority date: 2006-02-21
Filing date: 2015-10-19
Publication date: 2016-01-21
Also published as: US8546549B2; US20130018179A1; SI2799441T1; BRPI0708149A2; DK1987048T3; RU2008132777A; JP2014196352A; GT200800161A; KR20080094925A; SG170013A1; CL2009001487A1; EP1987048B1; WO2007098124A2; IL193343A; NO20083698L; DK2799441T3; PL2799441T3; PT2799441T; CA2642194A1; PE20071229A1

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method of fewer steps involving the calicheamicin moiety with increased yields.SOLUTION: This invention describes processes for convergent synthesis of calicheamicin derivatives expressed by formula (I), and similar analogs using bifunctional and trifunctional linker intermediates. This invention describes the processes for the convergent synthesis of the calicheamicin derivatives, and similar analogs using the bifunctional and trifunctional linker intermediates. The claimed process provides a method of fewer steps involving the calicheamicin moiety with increased yields.

Description

本発明は、二官能性および三官能性リンカー中間体を使用する、カリケアマイシン誘導体および同様の類似体のコンバージェント合成方法（ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）を記載する。 The present invention describes a convergent synthesis of calicheamicin derivatives and similar analogs using bifunctional and trifunctional linker intermediates.

カリケアマイシンまたはＬＬ−Ｅ３３２８８複合体として一纒めにして知られている抗菌物質および抗腫瘍剤の優れたファミリーは、特許文献１（１９９０年）に開示されている。化合物は、適切なチオールと反応してジスルフィドを形成することができると同時に、ヒドラジドまたは同様の求核試薬などの官能基を導入することができるメチルトリスルフィドを含む。カリケアマイシンとのこの反応の例は、特許文献２に所与されている。特許文献３は、ＬＬ−Ｅ３３２８８複合体のジスルフィド化合物の目標とする形を調製する方法に関する。リンカーである４−（４−アセチル−フェノキシ）ブタン酸を、カリケアマイシンＮ−アセチルガンマジメチルヒドラジドと縮合させて、カルボン酸−ヒドラゾンを得、これをＮ−ヒドロキシスクシンイミドとさらに処理して、選択された生体高分子と結合できる状態のＯＳｕエステル（Ｎ−スクシンイミジルオキシ）を得る。 An excellent family of antibacterial and antitumor agents known as calicheamicin or LL-E33288 complex at a glance is disclosed in US Pat. The compounds include methyl trisulfides that can react with an appropriate thiol to form disulfides, while at the same time introducing functional groups such as hydrazides or similar nucleophiles. An example of this reaction with calicheamicin is given in US Pat. U.S. Patent No. 6,099,059 relates to a method of preparing the targeted form of the disulfide compound of the LL-E33288 complex. The linker 4- (4-acetyl-phenoxy) butanoic acid is condensed with calicheamicin N-acetylgammadimethylhydrazide to give the carboxylic acid-hydrazone, which is further treated with N-hydroxysuccinimide to select An OSu ester (N-succinimidyloxy) in a state capable of binding to the biopolymer thus obtained is obtained.

米国特許第４９７０１９８号明細書US Pat. No. 4,970,198 米国特許第５０５３３９４号明細書US Pat. No. 5,053,394 米国特許第５７７０７０１号明細書US Pat. No. 5,770,701

カリケアマイシン誘導体を構築するためのこれまでに開示されている合成方法は、低い全収率を有する合成ステップを含む複数のカリケアマイシンによって複雑になっている。カリケアマイシン部分は、本質的に毒性であり、合成目標の一部に既に毒性がある場合には、安全注意事項を増加する必要があり、合成ステップのそれぞれの生成物の操作中および精製中に、これらを遵守しなければならない。 Previously disclosed synthetic methods for constructing calicheamicin derivatives are complicated by multiple calicheamicins that include synthetic steps with low overall yields. The calicheamicin moiety is toxic in nature and if some of the synthesis targets are already toxic, safety precautions need to be increased, during the manipulation and purification of the respective product of the synthesis step. In addition, these must be observed.

請求されている方法は、増加した収率を有するカリケアマイシン部分を含む、より少ないステップの方法を提供する。 The claimed method provides a fewer step process involving a calicheamicin moiety with increased yield.

本明細書で論じられているのは、式（Ｉ）

［式中、
Ｚは、 Discussed herein are the compounds of formula (I)

[Where:
Z is

からなる群から選択され；
Ａｌｋ^１は、２から６個の炭素原子の分枝または非分枝のアルキレン鎖であり；
Ｓｐ^１は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ’−から選択され；
Ｚ^１は、Ｈ、または１から５個の炭素原子のアルキルであり；
Ａｒは、１から６個の炭素原子のアルキル、１から５個の炭素原子のアルコキシ、１から４個の炭素原子のチオアルコキシ、ハロゲン、ニトロ、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’および−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’から独立に選択される１、２または３個の基で場合によって置換されている１，２−、１，３−または１，４−フェニレンであるか、あるいは１から６個の炭素原子のアルキル、１から５個の炭素原子のアルコキシ、１から４個の炭素原子のチオアルコキシ、ハロゲン、ニトロ、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’および−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’から独立に選択される１、２、３または４個の基で場合によって置換されている１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、２，３−、２，６−または２，７−ナフチリデンであり；
ｎは、０から５までの整数であり；
Ｒ’は、−ＯＨ、１から４個の炭素原子のアルコキシ、１から４個の炭素原子のチオアルコキシのうちの１または２個の基で場合によって置換されている、１から５個の炭素原子の直鎖または分枝鎖のアルキルであり；
Ｓｐは、直鎖または分枝鎖の、１から１８個の炭素原子の２価または３価のアルキル基、２価または３価のアリール基またはヘテロアリール基、３から１８個の炭素原子の２価または３価のシクロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基、２価または３価のアリール−もしくはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_１８）基、２価または３価のシクロアルキル−もしくはヘテロシクロ−アルキル−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_１８）基、あるいは２から１８個の炭素原子の２価または３価の不飽和アルキル基であり、ここで、ヘテロアリールは、フリル、チエニル、Ｎ−メチルピロリル、ピリジニル、Ｎ−メチルイミダゾリル、オキサゾリル、ピリミジニル、キノリル、イソキノリル、Ｎ−メチルカルバゾイル、アミノクマリニルまたはフェナジニルであり、Ｓｐが３価の基である場合には、Ｓｐは、１から５個の炭素原子のジアルキルアミノ基、１から５個の炭素原子のアルコキシ基、ヒドロキシ基、または１から５個の炭素原子のアルキルチオ基でさらに置換されていてもよく；
Ｗ’は

Selected from the group consisting of;
Alk ¹ is a branched or unbranched alkylene chain of 2 to 6 carbon atoms;
Sp ¹ is selected from -S-, -O-, -CONH-, -NHCO- and -NR'-;
Z ¹ is H or alkyl of 1 to 5 carbon atoms;
Ar is alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 5 carbon atoms, thioalkoxy of 1 to 4 carbon atoms, halogen, nitro, —COOR ′, —CONHR ′, —O (CH ₂ ) _n COOR ′, —S (CH ₂ ) _n COOR ′, —O (CH ₂ ) _n CONHR ′ and —S (CH ₂ ) _n CONHR ′, one, two or three groups independently selected from Optionally substituted 1,2-, 1,3- or 1,4-phenylene, or alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 5 carbon atoms, 1 to 4 thioalkoxy carbon atoms, halogen, nitro, -COOR ', - CONHR', - O (CH 2) n COOR ', - S (CH 2) n COOR', - O (CH 2) n CONHR ' and - S (CH ₂ If 1, 2, 3 or 4 groups selected from _n CONHR 'independently is substituted by 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- or 2,7-naphthylidene;
n is an integer from 0 to 5;
R ′ is 1 to 5 carbons optionally substituted with one or two groups of —OH, alkoxy of 1 to 4 carbon atoms, thioalkoxy of 1 to 4 carbon atoms Straight or branched alkyl of atoms;
Sp is a linear or branched divalent or trivalent alkyl group of 1 to 18 carbon atoms, a divalent or trivalent aryl group or heteroaryl group, 2 of 2 to 3 carbon atoms. Divalent or trivalent cycloalkyl group or heterocycloalkyl group, divalent or trivalent aryl- or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₁₈ ) group, divalent or trivalent cycloalkyl- or heterocyclo-alkyl- An alkyl (C ₁ -C ₁₈ ) group, or a divalent or trivalent unsaturated alkyl group of 2 to 18 carbon atoms, wherein heteroaryl is furyl, thienyl, N-methylpyrrolyl, pyridinyl, N -Methylimidazolyl, oxazolyl, pyrimidinyl, quinolyl, isoquinolyl, N-methylcarbazoyl, aminocoumarinyl or phen When it is dinyl and Sp is a trivalent group, Sp is a dialkylamino group of 1 to 5 carbon atoms, an alkoxy group of 1 to 5 carbon atoms, a hydroxy group, or 1 to 5 May be further substituted with an alkylthio group of carbon atoms of
W '

であり；
Ｒ_１は

Is;
R ₁ is

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

Or CH ₃ ;
R ₂ is

またはＨであり；
Ｒ_３は

Or H;
R ₃ is

またはＨであり；
Ｒ_４は

Or H;
R ₄ is

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

であり；
Ｒ_５は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５または−ＣＨ（ＣＨ_３）_２であり；
Ｘは、ヨウ素原子または臭素原子であり；
Ｒ_５’は、水素またはＲＣＯ基であり、ここで、Ｒは、水素、分枝または非分枝の、１から１０個の炭素原子のアルキル、２から１０個の炭素原子のアルキレン、６から１１個の炭素原子のアリール、（Ｃ_６〜Ｃ_１１）アリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基、またはヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基であり、ここで、ヘテロアリールは、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、２−もしくは３−（Ｎ−メチルピロリル）、２−、３−もしくは４−ピリジニル、２−、４−もしくは５−（Ｎ−メチルイミダゾリル）、２−、４−もしくは５−オキサゾリル、２−、３−、５−もしくは６−ピリミジニル、２−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キノリル、または１−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−イソキノリルと定義され、すべてのアリール基およびヘテロアリール基は、１個または複数の、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、ハロ、ニトロ、１から３個の炭素原子の（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルコキシまたは１から５個の炭素原子のチオアルコキシで場合によって置換されており；
Ｑは、−ＮＮＨＣＯ−、−ＮＮＨＣＳ−、−ＮＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＮＨＣＳＮＨ−および−ＮＯ−からなる群から選択される］
のカリケアマイシン誘導体を調製する方法であって、
ａ．式

Is;
R ₅ is —CH ₃ , —C ₂ H ₅ or —CH (CH ₃ ) ₂ ;
X is an iodine atom or a bromine atom;
R ₅ ′ is hydrogen or an RCO group, wherein R is hydrogen, branched or unbranched alkyl of 1 to 10 carbon atoms, alkylene of 2 to 10 carbon atoms, 6 to An aryl of 11 carbon atoms, a (C ₆ -C ₁₁ ) aryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, or a heteroaryl or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, wherein hetero Aryl is 2- or 3-furyl, 2- or 3-thienyl, 2- or 3- (N-methylpyrrolyl), 2-, 3- or 4-pyridinyl, 2-, 4- or 5- (N-methyl). Imidazolyl), 2-, 4- or 5-oxazolyl, 2-, 3-, 5- or 6-pyrimidinyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- or 8-quinolyl, or 1 -, 3-, -, 5-, 6-, 7- or 8-isoquinolyl, all aryl and heteroaryl groups are one or more hydroxy, amino, carboxy, halo, nitro, 1 to 3 carbons Optionally substituted with an atomic (C ₁ -C ₃ ) alkoxy or a thioalkoxy of 1 to 5 carbon atoms;
Q is selected from the group consisting of -NNHCO-, -NNHCS-, -NNHCONH-, -NNHCSNH- and -NO-]
A method of preparing a calicheamicin derivative of
a. formula

のカルボン酸を、式
Ｈ_２Ｑ−Ｓｐ−ＳＨ
のメルカプト化合物と、
アルコール溶媒中、アルキルカルボン酸ａｌｋ^２ＣＯ_２Ｈ［式中、ａｌｋ^２は１から４個の炭素原子である］の存在下で、約２０℃から７０℃にて、約１から２４時間反応させて［式中、Ａｌｋ^１、Ｓｐ^１、Ａｒ、Ｚ^１、ＱおよびＳｐは上記定義の通りである］、式

A carboxylic acid of the formula H ₂ Q-Sp-SH
A mercapto compound of
The reaction is carried out in an alcohol solvent in the presence of an alkyl carboxylic acid alk ² CO ₂ H [wherein alk ² is 1 to 4 carbon atoms] at about 20 ° C. to 70 ° C. for about 1 to 24 hours. [Wherein Alk ¹ , Sp ¹ , Ar, Z ¹ , Q and Sp are as defined above],

の２重リンカー−カルボン酸を生成し、ここで、該メルカプト化合物とカルボン酸とは約１．２：１の比率で存在するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）の単離された２重リンカー−カルボン酸を、少なくとも３倍モル過剰の、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む不活性溶媒中で反応させて、式

Wherein the mercapto compound and the carboxylic acid are present in a ratio of about 1.2: 1;
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. The isolated double linker-carboxylic acid of step (b) is added in at least a 3-fold molar excess of N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or N-hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N′-disuccinimid Reaction in an inert solvent containing 0 to 50% N, N-dimethylformamide (DMF) in the presence of zyl carbonate to give the formula

［式中、Ｚは上記に定義されている］
の３重リンカー−活性化エステルを生成するステップと、
ｄ．ステップで形成された３重リンカー−活性化エステルを、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、塩基または有機塩基の存在下で、不活性有機溶媒中で反応させて、下記式

[Wherein Z is defined above]
Generating a triple linker-activated ester of
d. The triple linker-activated ester formed in the step is reacted with the methyltrithio antitumor antibiotic CH ₃ —SS—S—W ′ in the presence of a base or organic base in an inert organic solvent. The following formula

の活性化エステルを生成し、ここで、ステップｃにおける３重リンカー−活性化エステルとＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’とは３．３：１の比率であり、反応の温度は５℃以下であるステップと、
ｅ．ステップ（ｄ）の活性化エステルを単離し、精製して、式（Ｉ）

Where the triple linker-activated ester and CH ₃ —SSSW ′ in step c are in a ratio of 3.3: 1 and the reaction temperature is 5 A step that is below ℃,
e. The activated ester of step (d) is isolated and purified to give a compound of formula (I)

の抗腫瘍性抗生物質を得るステップと
を含む方法である。

Obtaining an antitumor antibiotic.

論じられているさらなる方法は、式（Ｉ） Further methods discussed are those of formula (I)

［式中、
Ｚは、

[Where:
Z is

であり；
Ｒ_１は

Is;
R ₁ is

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

Or CH ₃ ;
R ₂ is

またはＨであり；
Ｒ_３は

Or H;
R ₃ is

またはＨであり；
Ｒ_４は

Or H;
R ₄ is

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

であり；
Ｒ_５は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５または−ＣＨ（ＣＨ_３）_２であり；
Ｘは、ヨウ素原子または臭素原子であり；
Ｒ_５’は、水素またはＲＣＯ基であり、ここで、Ｒは、水素、分枝または非分枝の、１から１０個の炭素原子のアルキル、２から１０個の炭素原子のアルキレン、６から１１個の炭素原子のアリール、（Ｃ_６〜Ｃ_１１）アリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基、またはヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基であり、ここで、ヘテロアリールは、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、２−もしくは３−（Ｎ−メチルピロリル）、２−、３−もしくは４−ピリジニル、２−、４−もしくは５−（Ｎ−メチルイミダゾリル）、２−、４−もしくは５−オキサゾリル、２−、３−、５−もしくは６−ピリミジニル、２−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キノリル、または１−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−イソキノリルと定義され、すべてのアリール基およびヘテロアリール基は、１個または複数の、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、ハロ、ニトロ、１から３個の炭素原子の（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルコキシまたは１から５個の炭素原子のチオアルコキシで場合によって置換されており；
Ｑは、−ＮＮＨＣＯ−、−ＮＮＨＣＳ−、−ＮＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＮＨＣＳＮＨ−および−ＮＯ−からなる群から選択される］
の抗腫瘍性抗生物質を調製する方法であって、
ａ．式

Is;
R ₅ is —CH ₃ , —C ₂ H ₅ or —CH (CH ₃ ) ₂ ;
X is an iodine atom or a bromine atom;
R ₅ ′ is hydrogen or an RCO group, wherein R is hydrogen, branched or unbranched alkyl of 1 to 10 carbon atoms, alkylene of 2 to 10 carbon atoms, 6 to An aryl of 11 carbon atoms, a (C ₆ -C ₁₁ ) aryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, or a heteroaryl or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, wherein hetero Aryl is 2- or 3-furyl, 2- or 3-thienyl, 2- or 3- (N-methylpyrrolyl), 2-, 3- or 4-pyridinyl, 2-, 4- or 5- (N-methyl). Imidazolyl), 2-, 4- or 5-oxazolyl, 2-, 3-, 5- or 6-pyrimidinyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- or 8-quinolyl, or 1 -, 3-, -, 5-, 6-, 7- or 8-isoquinolyl, all aryl and heteroaryl groups are one or more hydroxy, amino, carboxy, halo, nitro, 1 to 3 carbons Optionally substituted with an atomic (C ₁ -C ₃ ) alkoxy or a thioalkoxy of 1 to 5 carbon atoms;
Q is selected from the group consisting of -NNHCO-, -NNHCS-, -NNHCONH-, -NNHCSNH- and -NO-]
A method of preparing an antitumor antibiotic of
a. formula

の２重リンカー−カルボン酸を生成し、ここで、該メルカプト化合物とカルボン酸とは約１．２：１の比率で存在するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）の単離された２重リンカー−カルボン酸を、塩基または有機塩基の存在下で、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、不活性有機溶媒中で反応させるステップと、
ｄ．ステップ（ｃ）の化合物を、少なくとも３倍モル過剰の、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む不活性溶媒中で反応させ、精製して、式（Ｉ）

Wherein the mercapto compound and the carboxylic acid are present in a ratio of about 1.2: 1;
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. Isolated bilinker step (b) - a carboxylic acid, in the presence of a base or an organic base, a methyltrithio antitumor antibiotic _{CH 3 -S-S-S-} W ', in an inert organic solvent And reacting with
d. The compound of step (c) is added in at least a 3-fold molar excess of N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or N- In the presence of hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N′-disuccinimidyl carbonate from 0 Reaction in an inert solvent containing 50% N, N-dimethylformamide (DMF) and purification to give a compound of formula (I)

の化合物を得るステップと
を含む方法である。

To obtain a compound of:

さらなる方法は、式（Ｉ） A further method is represented by the formula (I)

［式中、
Ｚは、

[Where:
Z is

であり；
Ｒ_１は

Is;
R ₁ is

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

Or CH ₃ ;
R ₂ is

またはＨであり；
Ｒ_３は

Or H;
R ₃ is

またはＨであり；
Ｒ_４は

Or H;
R ₄ is

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

であり；
Ｒ_５は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５または−ＣＨ（ＣＨ_３）_２であり；
Ｘは、ヨウ素原子または臭素原子であり；
Ｒ_５’は、水素またはＲＣＯ基であり、ここで、Ｒは、水素、分枝または非分枝の、１から１０個の炭素原子のアルキル、２から１０個の炭素原子のアルキレン、６から１１個の炭素原子のアリール、（Ｃ_６〜Ｃ_１１）アリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基、またはヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基であり、ここで、ヘテロアリールは、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、２−もしくは３−（Ｎ−メチルピロリル）、２−、３−もしくは４−ピリジニル、２−、４−もしくは５−（Ｎ−メチルイミダゾリル）、２−、４−もしくは５−オキサゾリル、２−、３−、５−もしくは６−ピリミジニル、２−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キノリル、または１−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−イソキノリルと定義され、すべてのアリール基およびヘテロアリール基は、１個または複数の、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、ハロ、ニトロ、１から３個の炭素原子の（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルコキシまたは１から５個の炭素原子のチオアルコキシで場合によって置換されており；
Ｑは、−ＮＮＨＣＯ−、−ＮＮＨＣＳ−、−ＮＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＮＨＣＳＮＨ−および−ＮＯ−からなる群から選択される］
の化合物の調製を含み、
ａ．式

Is;
R ₅ is —CH ₃ , —C ₂ H ₅ or —CH (CH ₃ ) ₂ ;
X is an iodine atom or a bromine atom;
R ₅ ′ is hydrogen or an RCO group, wherein R is hydrogen, branched or unbranched alkyl of 1 to 10 carbon atoms, alkylene of 2 to 10 carbon atoms, 6 to An aryl of 11 carbon atoms, a (C ₆ -C ₁₁ ) aryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, or a heteroaryl or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, wherein hetero Aryl is 2- or 3-furyl, 2- or 3-thienyl, 2- or 3- (N-methylpyrrolyl), 2-, 3- or 4-pyridinyl, 2-, 4- or 5- (N-methyl). Imidazolyl), 2-, 4- or 5-oxazolyl, 2-, 3-, 5- or 6-pyrimidinyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- or 8-quinolyl, or 1 -, 3-, -, 5-, 6-, 7- or 8-isoquinolyl, all aryl and heteroaryl groups are one or more hydroxy, amino, carboxy, halo, nitro, 1 to 3 carbons Optionally substituted with an atomic (C ₁ -C ₃ ) alkoxy or a thioalkoxy of 1 to 5 carbon atoms;
Q is selected from the group consisting of -NNHCO-, -NNHCS-, -NNHCONH-, -NNHCSNH- and -NO-]
Comprising the preparation of a compound of
a. formula

の２重リンカー−カルボン酸を生成するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）の単離された２重リンカー−カルボン酸を、少なくともＮ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む不活性溶媒中で反応させて、式

Generating a double linker-carboxylic acid of
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. The isolated double linker-carboxylic acid of step (b) is at least N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol Or in the presence of N-hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N′-disuccinimidyl carbonate In an inert solvent containing 0 to 50% N, N-dimethylformamide (DMF)

［式中、Ｚは上記に定義されている］
の３重リンカー−活性化エステルを生成するステップと、
ｄ．ステップｃにおける３重リンカー−活性化エステルを、塩基または有機塩基の存在下で、ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、不活性有機溶媒中で反応させて、式

[Wherein Z is defined above]
Generating a triple linker-activated ester of
d. The triple linker-activated ester in step c is reacted with CH ₃ —SS—S—W ′ in the presence of a base or organic base in an inert organic solvent to yield the formula

の活性化エステルを生成するステップと、
ｅ．ステップ（ｄ）の活性化エステルを単離し、精製して、式（Ｉ）

Producing an activated ester of
e. The activated ester of step (d) is isolated and purified to give a compound of formula (I)

の化合物を得るステップとを含む。

Obtaining a compound of:

本方法は、約ｐＨ７．０から９．０の移動相を有する逆相高速液体クロマトグラフィーの後に、順相クロマトグラフィーを使用することを含むステップの精製を含む。 The method includes purification of steps comprising using normal phase chromatography after reverse phase high performance liquid chromatography having a mobile phase of about pH 7.0 to 9.0.

本方法は、
ａｌｋ^１が３個の炭素原子であり；
Ｓｐ^１が−Ｏ−であり；
Ｚ^１がメチルであり；
Ａｒが非置換１，４−フェニレンであり；
Ｓｐが４個の炭素原子であり；
Ｒ_３がＨであり；
ＱがＮＮＨＣ（Ｏ）−であり；
Ｒ_２が This method
alk ¹ is 3 carbon atoms;
Sp ¹ is —O—;
Z ¹ is methyl;
Ar is unsubstituted 1,4-phenylene;
Sp is 4 carbon atoms;
R ₃ is H;
Q is NNHC (O)-;
R ₂ is

であり；
Ｒ_４が

Is;
R ₄ is

であり；
Ｒ_５がＣ_２Ｈ_５であり；
Ｒ_５’が−Ｃ（Ｏ）−Ｒであり；
Ｒがメチルであり；
Ｚが

Is;
R ₅ is C ₂ H ₅ ;
R ₅ ′ is —C (O) —R;
R is methyl;
Z is

であることを含む。

Including.

本方法は、Ａｌｋ^１が２から５個の炭素原子のアルキレンであり、Ｓｐ^１が酸素原子であることを含むが、これに限定されない。 The method includes, but is not limited to, Alk ¹ is an alkylene of 2 to 5 carbon atoms and Sp ¹ is an oxygen atom.

本方法は、Ａｌｋ^１が３個の炭素原子のアルキレンであることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, Alk ¹ is an alkylene of 3 carbon atoms.

本方法は、Ｚ^１が１から３個の炭素原子のアルキルであることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, Z ¹ is alkyl of 1 to 3 carbon atoms.

本方法は、Ａｒが、１，２−、１，３−もしくは１，４−フェニレン、または１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、２，３−、２，６−もしくは２，７−ナフチリデンであることを含むが限定されない。 In this method, Ar is 1,2-, 1,3- or 1,4-phenylene, or 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1 , 7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- or 2,7-naphthylidene.

本方法は、Ａｒが１，４−フェニレンであることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, Ar is 1,4-phenylene.

本方法は、Ｑが−ＮＮＨＣＯ−であることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, Q being -NNHCO-.

本方法は、Ｓｐが、直鎖または分枝鎖の、１から１２個の炭素原子の２価または３価のアルキル基であることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, Sp being a linear or branched divalent or trivalent alkyl group of 1 to 12 carbon atoms.

本方法は、Ｓｐが、直鎖または分枝鎖の、１から６個の炭素原子の２価または３価のアルキル基であることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, Sp being a linear or branched divalent or trivalent alkyl group of 1 to 6 carbon atoms.

本方法は、アルコール溶媒がメタノールであることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, the alcohol solvent being methanol.

本方法は、不活性溶媒がアセトニトリルであることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, the inert solvent is acetonitrile.

本方法は、アルキルカルボン酸が酢酸であることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, the alkyl carboxylic acid being acetic acid.

本方法は、不活性有機溶媒がアセトニトリルであることを含むが限定されない。 The method includes, but is not limited to, the inert organic solvent is acetonitrile.

本方法は、Ｚが In this method, Z is

であることを含むが限定されない。

Including, but not limited to.

本明細書で論じられているのは、式 What is discussed herein is the formula

［式中、
Ｚは、

[Where:
Z is

であり；
Ｒ_１は

Is;
R ₁ is

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

Or CH ₃ ;
R ₂ is

またはＨであり；
Ｒ_３は

Or H;
R ₃ is

またはＨであり；
Ｒ_４は

Or H;
R ₄ is

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

であり；
Ｒ_５は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５または−ＣＨ（ＣＨ_３）_２であり；
Ｘは、ヨウ素原子または臭素原子であり；
Ｒ_５’は、水素またはＲＣＯ基であり、ここで、Ｒは、水素、分枝または非分枝の、１から１０個の炭素原子のアルキル、２から１０個の炭素原子のアルキレン、６から１１個の炭素原子のアリール、（Ｃ_６〜Ｃ_１１）アリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基、またはヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基であり、ここで、ヘテロアリールは、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、２−もしくは３−（Ｎ−メチルピロリル）、２−、３−もしくは４−ピリジニル、２−、４−もしくは５−（Ｎ−メチルイミダゾリル）、２−、４−もしくは５−オキサゾリル、２−、３−、５−もしくは６−ピリミジニル、２−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キノリル、または１−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−イソキノリルと定義され、すべてのアリール基およびヘテロアリール基は、１個または複数の、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、ハロ、ニトロ、１から３個の炭素原子の（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルコキシまたは１から５個の炭素原子のチオアルコキシで場合によって置換されており；
Ｑは、−ＮＮＨＣＯ−、−ＮＮＨＣＳ−、−ＮＨＮＣＯＮＨ−、−ＮＮＣＳＮＨ−および−ＮＯ−からなる群から選択される］
の３重リンカー−活性化エステルを調製する方法であって、
ａ．式

Is;
R ₅ is —CH ₃ , —C ₂ H ₅ or —CH (CH ₃ ) ₂ ;
X is an iodine atom or a bromine atom;
R ₅ ′ is hydrogen or an RCO group, wherein R is hydrogen, branched or unbranched alkyl of 1 to 10 carbon atoms, alkylene of 2 to 10 carbon atoms, 6 to An aryl of 11 carbon atoms, a (C ₆ -C ₁₁ ) aryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, or a heteroaryl or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, wherein hetero Aryl is 2- or 3-furyl, 2- or 3-thienyl, 2- or 3- (N-methylpyrrolyl), 2-, 3- or 4-pyridinyl, 2-, 4- or 5- (N-methyl). Imidazolyl), 2-, 4- or 5-oxazolyl, 2-, 3-, 5- or 6-pyrimidinyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- or 8-quinolyl, or 1 -, 3-, -, 5-, 6-, 7- or 8-isoquinolyl, all aryl and heteroaryl groups are one or more hydroxy, amino, carboxy, halo, nitro, 1 to 3 carbons Optionally substituted with an atomic (C ₁ -C ₃ ) alkoxy or a thioalkoxy of 1 to 5 carbon atoms;
Q is selected from the group consisting of -NNHCO-, -NNHCS-, -NHNCONH-, -NNCSNH- and -NO-]
A method of preparing a triple linker-activated ester of
a. formula

の２重リンカー−カルボン酸を生成するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）からの２重リンカー−カルボン酸を、塩基または有機塩基の存在下で、ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、不活性有機溶媒中で反応させて、式

Generating a double linker-carboxylic acid of
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. The double linker-carboxylic acid from step (b) is reacted with CH ₃ —S—S—S—W ′ in the presence of a base or organic base in an inert organic solvent to give the formula

の２重リンカー−メチルトリチオ化合物を生成するステップと、
ｄ．ステップ（ｃ）の単離された２重リンカー−メチルトリチオ化合物を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む不活性溶媒中で反応させて、式

Generating a double linker-methyltrithio compound of:
d. The isolated double linker-methyltrithio compound of step (c) is converted to N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or In the presence of N-hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N′-disuccinimidyl carbonate, Reaction in an inert solvent containing 0 to 50% N, N-dimethylformamide (DMF) gives the formula

の３重リンカー−活性化エステルを生成するステップと
を含む方法である。

A triple linker-activator of the method.

本明細書で提示されているのは、式 Presented herein is the formula

［式中、
Ａｌｋ^１は、２から６個の炭素原子の分枝または非分枝のアルキレン鎖であり；
Ｓｐ^１は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ’−から選択され；
Ｚ^１は、Ｈ、または１から５個の炭素原子のアルキルであり；
Ａｒは、１から６個の炭素原子のアルキル、１から５個の炭素原子のアルコキシ、１から４個の炭素原子のチオアルコキシ、ハロゲン、ニトロ、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’および−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’から独立に選択される１、２または３個の基で場合によって置換されている１，２−、１，３−または１，４−フェニレンであるか、あるいは１から６個の炭素原子のアルキル、１から５個の炭素原子のアルコキシ、１から４個の炭素原子のチオアルコキシ、ハロゲン、ニトロ、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＲ’、−Ｏ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’および−Ｓ（ＣＨ_２）_ｎＣＯＮＨＲ’から独立に選択される１、２、３または４個の基で場合によって置換されている１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、２，３−、２，６−または２，７−ナフチリデンであり；
ｎは、０から５までの整数であり；
Ｒ’は、−ＯＨ、１から４個の炭素原子のアルコキシ、１から４個の炭素原子のチオアルコキシのうちの１または２個の基で場合によって置換されている、１から５個の炭素原子の直鎖または分枝鎖のアルキルであり；
Ｓｐは、直鎖または分枝鎖の、１から１８個の炭素原子の２価または３価のアルキル基、２価または３価のアリール基またはヘテロアリール基、３から１８個の炭素原子の２価または３価のシクロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基、２価または３価のアリール−もしくはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_１８）基、２価または３価のシクロアルキル−もしくはヘテロシクロ−アルキル−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_１８）基、あるいは２から１８個の炭素原子の２価または３価の不飽和アルキル基であり、ここで、ヘテロアリールは、フリル、チエニル、Ｎ−メチルピロリル、ピリジニル、Ｎ−メチルイミダゾリル、オキサゾリル、ピリミジニル、キノリル、イソキノリル、Ｎ−メチルカルバゾイル、アミノクマリニルまたはフェナジニルであり、Ｓｐが３価の基である場合には、Ｓｐは、１から５個の炭素原子のジアルキルアミノ基、１から５個の炭素原子のアルコキシ基、ヒドロキシ基、または１から５個の炭素原子のアルキルチオ基でさらに置換されていてもよく；
Ｑは、−ＮＮＨＣＯ−、−ＮＮＨＣＳ−および−ＮＮＨＣＯＮＨ−からなる群から選択され；
Ｚは、

[Where:
Alk ¹ is a branched or unbranched alkylene chain of 2 to 6 carbon atoms;
Sp ¹ is selected from -S-, -O-, -CONH-, -NHCO- and -NR'-;
Z ¹ is H or alkyl of 1 to 5 carbon atoms;
Ar is alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 5 carbon atoms, thioalkoxy of 1 to 4 carbon atoms, halogen, nitro, —COOR ′, —CONHR ′, —O (CH ₂ ) _n COOR ′, —S (CH ₂ ) _n COOR ′, —O (CH ₂ ) _n CONHR ′ and —S (CH ₂ ) _n CONHR ′, one, two or three groups independently selected from Optionally substituted 1,2-, 1,3- or 1,4-phenylene, or alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 5 carbon atoms, 1 to 4 thioalkoxy carbon atoms, halogen, nitro, -COOR ', - CONHR', - O (CH 2) n COOR ', - S (CH 2) n COOR', - O (CH 2) n CONHR ' and - S (CH ₂ If 1, 2, 3 or 4 groups selected from _n CONHR 'independently is substituted by 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- or 2,7-naphthylidene;
n is an integer from 0 to 5;
R ′ is 1 to 5 carbons optionally substituted with one or two groups of —OH, alkoxy of 1 to 4 carbon atoms, thioalkoxy of 1 to 4 carbon atoms Straight or branched alkyl of atoms;
Sp is a linear or branched divalent or trivalent alkyl group of 1 to 18 carbon atoms, a divalent or trivalent aryl group or heteroaryl group, 2 of 2 to 3 carbon atoms. Divalent or trivalent cycloalkyl group or heterocycloalkyl group, divalent or trivalent aryl- or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₁₈ ) group, divalent or trivalent cycloalkyl- or heterocyclo-alkyl- An alkyl (C ₁ -C ₁₈ ) group, or a divalent or trivalent unsaturated alkyl group of 2 to 18 carbon atoms, wherein heteroaryl is furyl, thienyl, N-methylpyrrolyl, pyridinyl, N -Methylimidazolyl, oxazolyl, pyrimidinyl, quinolyl, isoquinolyl, N-methylcarbazoyl, aminocoumarinyl or phen When it is dinyl and Sp is a trivalent group, Sp is a dialkylamino group of 1 to 5 carbon atoms, an alkoxy group of 1 to 5 carbon atoms, a hydroxy group, or 1 to 5 May be further substituted with an alkylthio group of carbon atoms of
Q is selected from the group consisting of -NNHCO-, -NNHCS- and -NNHCONH-;
Z is

からなる群から選択される］
の三官能性リンカー中間体の調製方法であって、
ａ．式

Selected from the group consisting of]
A method for preparing a trifunctional linker intermediate of
a. formula

の２重リンカー−カルボン酸を生成するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）の単離された２重リンカー−カルボン酸を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％ＤＭＦを含む不活性溶媒中で反応させて、式

Generating a double linker-carboxylic acid of
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. The isolated double linker-carboxylic acid of step (b) is converted to N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or In the presence of N-hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N′-disuccinimidyl carbonate, Reaction in an inert solvent containing 0 to 50% DMF gives the formula

の三官能性リンカー中間体を生成するステップと
を含む方法である。

Generating a trifunctional linker intermediate of:

本明細書で使用されている用語は、本発明の状況内および各用語が使用される特定の状況では、一般に、当技術分野における通常の意味を有する。ある種の用語が本明細書中の以下または他所に論じられているのは、本発明の化合物、組成物および方法ならびにそれらを製造および使用する方法を記載する際に、従事者に追加の手引きを提供するためである。その上、同じことが２つ以上の手段で言えることは認識されるであろう。その結果として、本明細書で論じられている任意の１つまたは複数の用語に対して、代替の言語および同義語が使用される場合があり、ある用語が本明細書で詳述されていようといまいと、または論じられていようといまいと、何らかの特別な意義が置かれているわけではない。本明細書で論じられている任意の用語の例を含めて、本明細書中のいずれかに例を使用することは、例証に過ぎず、本発明のまたは例示されている任意の用語の、範囲および意味を決して限定するものではない。同様に、本発明は提示されている実施例に限定されない。 The terms used in this specification generally have their ordinary meanings in the art, within the context of this invention and in the specific context where each term is used. Certain terms are discussed hereinbelow or elsewhere herein to provide additional guidance to the practitioner in describing the compounds, compositions and methods of the present invention and methods of making and using them. Is to provide. Moreover, it will be appreciated that the same can be said by more than one means. As a result, alternative languages and synonyms may be used for any one or more of the terms discussed herein, and certain terms may be elaborated herein. It doesn't mean that it has any special significance whether it is or is being discussed. Use of examples anywhere in this specification, including examples of any terms discussed herein, is merely exemplary and is intended to be used for any term of the invention or illustrated. It is in no way limiting in scope or meaning. Likewise, the invention is not limited to the examples presented.

「約」または「およそ」という用語は、一般に、所与の値または範囲の２０パーセント以内、好ましくは１０パーセント以内、およびより好ましくは５パーセント以内を意味するものとする。 The term “about” or “approximately” shall generally mean within 20 percent, preferably within 10 percent, and more preferably within 5 percent of a given value or range.

本明細書で使用される「アルコキシ」という用語は、上記定義のように、酸素基が結合しているアルキル基を指す。「チオアルコキシ」という用語は、定義されているように、硫黄基が結合しているアルコキシ基を指す。 The term “alkoxy” as used herein refers to an alkyl group to which an oxygen group is attached, as defined above. The term “thioalkoxy”, as defined, refers to an alkoxy group having a sulfur group attached thereto.

「アルキル」という用語は、飽和脂肪族基の基を指し、これには、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換されたシクロアルキル基、およびシクロアルキル置換されたアルキル基が含まれる。実施形態では、直鎖または分枝鎖のアルキルは、その骨格に６個以下の炭素原子を有する。「アルキル」という用語は、単独でまたは化学名の一部として使用することができる。「アリール」という用語は、炭素環式芳香族部分と定義され、置換または非置換であってよい。アリール基は、６から１４個の炭素原子を有し、フェニルおよびナフチルを含む。「アリール」という用語はまた、２個以上の環を有する多環式環系を含み、かかる環において、２個以上の炭素が２個の隣接している環に共通しており（この環は「縮合」している）、ここで、少なくとも１個の炭素環は芳香族であり、例えば他方の環は、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニルおよび／またはアリールであってよい。 The term “alkyl” refers to a group of saturated aliphatic groups, including straight chain alkyl groups, branched chain alkyl groups, cycloalkyl (alicyclic) groups, alkyl substituted cycloalkyl groups, and cyclo Alkyl substituted alkyl groups are included. In embodiments, a straight chain or branched chain alkyl has 6 or fewer carbon atoms in its backbone. The term “alkyl” can be used alone or as part of a chemical name. The term “aryl” is defined as a carbocyclic aromatic moiety and may be substituted or unsubstituted. Aryl groups have 6 to 14 carbon atoms and include phenyl and naphthyl. The term “aryl” also includes polycyclic ring systems having two or more rings, in which two or more carbons are common to two adjacent rings (this ring is Wherein “at least one carbocycle is aromatic, eg, the other ring may be cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkynyl and / or aryl”.

カルボキシは、−ＣＯ_２Ｈ基と定義される。 Carboxy is defined as a -CO ₂ H group.

「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素の原子を指す。 The term “halogen” or “halo” refers to an atom of fluorine, chlorine, bromine or iodine.

「ヘテロアリール」という用語は、環構造に１から４個のヘテロ原子を含む、４から１０員環の構造を指す。ヘテロアリールは、１から３個の縮合環の複素環系を含み、かかる環において、少なくとも１個の環は、芳香族の特性を有していてもよく、Ｓ、ＮおよびＯからなる群から選択される同一または異なる１から４個のヘテロ原子を含む。環系の残りの環は、完全不飽和であるか、部分的飽和であるか、または完全飽和であってよい。各環は、３から１０員を含む。本明細書で使用される「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味し、これには例えば窒素、酸素、硫黄、リンおよびセレンが含まれる。 The term “heteroaryl” refers to a 4- to 10-membered ring structure containing 1 to 4 heteroatoms in the ring structure. Heteroaryl includes a heterocyclic system of 1 to 3 fused rings, in which at least one ring may have aromatic character and from the group consisting of S, N and O Contains 1 to 4 heteroatoms of the same or different selected. The remaining rings of the ring system may be fully unsaturated, partially saturated, or fully saturated. Each ring contains 3 to 10 members. The term “heteroatom” as used herein means an atom of any element other than carbon or hydrogen, including, for example, nitrogen, oxygen, sulfur, phosphorus and selenium.

「ニトロ」という用語は、−ＮＯ_２を意味する。 The term “nitro” means —NO ₂ .

「置換された」という用語は、有機化合物について許容されるすべての置換基を含むことを企図される。広範な態様では、有機化合物について許容される置換基には、有機化合物の、非環式および環式の、分枝および非分枝の、炭素環式および複素環式の、芳香族および非芳香族の置換基が含まれる。許容される置換基は、適切な有機化合物に関して、１個または複数および同一または異なる可能性がある。本発明の目的のために、窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価に応じて化合する、本明細書で論じられている有機化合物について許容される任意の置換基および／または水素置換基を有していてもよい。本発明は、有機化合物について許容される置換基によって、何らかの方法で限定されるように意図されるものではない。 The term “substituted” is intended to include all permissible substituents for organic compounds. In a broad aspect, permissible substituents for organic compounds include acyclic and cyclic, branched and unbranched, carbocyclic and heterocyclic, aromatic and non-aromatic of organic compounds. Family substituents are included. The permissible substituents can be one or more and the same or different for appropriate organic compounds. For purposes of the present invention, a heteroatom such as nitrogen may be any substituent and / or hydrogen substituent allowed for the organic compounds discussed herein that combine depending on the valence of the heteroatom. You may have. The present invention is not intended to be limited in any way by the permissible substituents for organic compounds.

アルキルという用語は、１から１８個の炭素原子、好ましくは２から５個の炭素原子、１から４個の炭素原子または１から３個の炭素原子の、直鎖または分枝鎖のアルキルを意味する。本発明のいくつかの実施形態では、アルキルという用語はメチルである。 The term alkyl means a straight or branched alkyl of 1 to 18 carbon atoms, preferably 2 to 5 carbon atoms, 1 to 4 carbon atoms or 1 to 3 carbon atoms To do. In some embodiments of the invention, the term alkyl is methyl.

アルコール溶媒という用語は、約１００℃未満の沸点を有するメタノール、エタノールなどを意味する。 The term alcohol solvent means methanol, ethanol, etc. having a boiling point of less than about 100 ° C.

アルキレンは、上記定義のように、基というよりもむしろ二端遊離基であるアルキルを指す。アルキレンは、分枝または非分枝であってよく、２から１８個の炭素を有することができる。 Alkylene refers to alkyl, which is a two-terminal radical, rather than a group, as defined above. The alkylene can be branched or unbranched and can have 2 to 18 carbons.

周囲温度は約２５℃である。 The ambient temperature is about 25 ° C.

不活性溶媒または不活性有機溶媒は、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物、３重リンカー−活性化エステルまたは三官能性リンカー中間体を調製するステップにおいて、反応することも、共有結合を形成することもない溶媒を言い表している。不活性溶媒または不活性有機溶媒の例は、アセトニトリル／酢酸エチル（１：１）、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはアセトニトリルなどの混合物を挙げることができるが、これらに限定されない。不活性溶媒は、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを含むことができる。不活性有機溶媒は、例えばアセトニトリル、酢酸エチルまたはジクロロメタンである。 The inert solvent or inert organic solvent can react or be covalently bonded in the step of preparing the compound of formula (I), triple linker-activated ester or trifunctional linker intermediate described herein. It describes a solvent that does not form. Examples of inert solvents or inert organic solvents can include, but are not limited to, mixtures of acetonitrile / ethyl acetate (1: 1), dichloromethane, N, N-dimethylformamide, tetrahydrofuran, dioxane, or acetonitrile. . The inert solvent can include 0 to 50% N, N-dimethylformamide. Inert organic solvents are, for example, acetonitrile, ethyl acetate or dichloromethane.

有機塩基は、例えばアルキルアミン塩基であり、かかる塩基には、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルメチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン、Ｎ，Ｎ−ジエチルエチレンジアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミンまたはトリプロピルアミンが含まれ、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を含むジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピロリジン、２，６−ジ−ｔｅｒｔブチル−４−メチルピリジンまたはピリジンがさらに含まれる。塩基は、アルカリ金属水酸化物、アルカリ金属炭酸塩またはアルカリ金属重炭酸塩である。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
式（Ｉ）：

［式中、
Ｚは、

であり；
Ｒ_１は

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

またはＨであり；
Ｒ_３は

またはＨであり；
Ｒ_４は

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

であり；
Ｒ_５は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５または−ＣＨ（ＣＨ_３）_２であり；
Ｘは、ヨウ素原子または臭素原子であり；
Ｒ_５’は、水素またはＲＣＯ基であり、ここで、Ｒは、水素、分枝または非分枝の、１から１０個の炭素原子のアルキル、２から１０個の炭素原子のアルキレン、６から１１個の炭素原子のアリール、（Ｃ_６〜Ｃ_１１）アリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基、またはヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキル（Ｃ_１〜Ｃ_５）基であり、ここで、ヘテロアリールは、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、２−もしくは３−（Ｎ−メチルピロリル）、２−、３−もしくは４−ピリジニル、２−、４−もしくは５−（Ｎ−メチルイミダゾリル）、２−、４−もしくは５−オキサゾリル、２−、３−、５−もしくは６−ピリミジニル、２−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キノリル、または１−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−イソキノリルと定義され、すべてのアリール基およびヘテロアリール基は、１個または複数の、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、ハロ、ニトロ、１から３個の炭素原子の（Ｃ_１〜Ｃ_３）アルコキシまたは１から５個の炭素原子のチオアルコキシで場合によって置換されており；
Ｑは、−ＮＮＨＣＯ−、−ＮＮＨＣＳ−、−ＮＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＮＨＣＳＮＨ−および−ＮＯ−からなる群から選択される］
の化合物を調製する方法であって、
ａ．式

［式中、Ｚは上記に定義されている］
の３重リンカー−活性化エステルを生成するステップと、
ｄ．ステップｃで形成された３重リンカー−活性化エステルを、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、塩基または有機塩基の存在下で、不活性有機溶媒中で反応させて、下記式

の活性化エステルを生成するステップであって、ここで、ステップｃにおける３重リンカー−活性化エステルとＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’とは３．３：１の比率であり、反応の温度は５℃以下であるステップと、
ｅ．ステップ（ｄ）の活性化エステルを単離し、精製して、式（Ｉ）

の抗腫瘍性抗生物質を得るステップと
を含む方法。
（項目２）
ステップ（ｅ）の精製が、約ｐＨ７．０から９．０の移動相を有する逆相高速液体クロマトグラフィーの後に、順相クロマトグラフィーを使用することを含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
ａｌｋ^１が３個の炭素原子であり；
Ｓｐ^１が−Ｏ−であり；
Ｚ^１がメチルであり；
Ａｒが非置換１，４−フェニレンであり；
Ｓｐが４個の炭素原子であり；
Ｒ_３がＨであり；
ＱがＮＮＨＣ（Ｏ）−であり；
Ｒ_２が

であり；
Ｒ_４が

である、項目１に記載の方法。
（項目４）
式（Ｉ）:

［式中、
Ｚは、

であり；
Ｒ_１は

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

またはＨであり；
Ｒ_３は

またはＨであり；
Ｒ_４は

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

の２重リンカー−カルボン酸を生成し、ここで、該メルカプト化合物とカルボン酸とは約１．２：１の比率で存在するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）の単離された２重リンカー−カルボン酸を、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、塩基または有機塩基の存在下で、不活性有機溶媒中で反応させるステップと、
ｄ．ステップ（ｃ）の化合物を、少なくとも３倍モル過剰の、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む不活性溶媒中で反応させ、精製して、式（Ｉ）

の抗腫瘍性抗生物質を得るステップと
を含む方法。
（項目５）
上記ステップ（ｅ）の精製が、約ｐＨ７．０から９．０の移動相を有する逆相高速液体クロマトグラフィーの後に、順相クロマトグラフィーを使用することを含む、項目４に記載の方法。
（項目６）
ａｌｋ^１が３個の炭素原子であり；
Ｓｐ^１が−Ｏ−であり；
Ｚ^１がメチルであり；
Ａｒが非置換１，４−フェニレンであり；
Ｓｐが４個の炭素原子であり；
Ｒ_３がＨであり；
ＱがＮＮＨＣ（Ｏ）−であり；
Ｒ_２が

であり；
Ｒ_４が

である、項目４に記載の方法。
（項目７）
式（Ｉ）

［式中、
Ｚは、

であり；
Ｒ_１は

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

またはＨであり；
Ｒ_３は

またはＨであり；
Ｒ_４は

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

［式中、Ｚは上記に定義されている］
の３重リンカー−活性化エステルを生成するステップと、
ｄ．ステップｃにおける３重リンカー−活性化エステルを、塩基または有機塩基の存在下で、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、不活性有機溶媒中で反応させて、式

の抗腫瘍性抗生物質を得るステップと
を含む方法。
（項目８）
ａｌｋ^１が３個の炭素原子であり；
Ｓｐ^１が−Ｏ−であり；
Ｚ^１がメチルであり；
Ａｒが非置換１，４−フェニレンであり；
Ｓｐが４個の炭素原子であり；
Ｒ_３がＨであり；
ＱがＮＮＨＣ（Ｏ）−であり；
Ｒ_２が

であり；
Ｒ_４が

である、項目１に記載の方法。
（項目９）
Ａｌｋ^１が２から５個の炭素原子のアルキレンであり、Ｓｐ^１が酸素原子である、項目１に記載の方法。
（項目１０）
Ａｌｋ^１が３個の炭素原子のアルキレンである、項目９に記載の方法。
（項目１１）
Ｚ^１が１から３個の炭素原子のアルキルである、項目１に記載の方法。
（項目１２）
Ａｒが、１，２−、１，３−もしくは１，４−フェニレン、または１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、２，３−、２，６−もしくは２，７−ナフチリデンである、項目１に記載の方法。
（項目１３）
Ａｒが１，４−フェニレンである、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
Ｑが−ＮＮＨＣＯ−である、項目１に記載の方法。
（項目１５）
Ｓｐが、直鎖または分枝鎖の、１から１２個の炭素原子の２価または３価のアルキル基である、項目１に記載の方法。
（項目１６）
Ｓｐが、直鎖または分枝鎖の、１から６個の炭素原子の２価または３価のアルキル基である、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
上記アルコール溶媒がメタノールである、項目１に記載の方法。
（項目１８）
上記不活性溶媒がアセトニトリルである、項目１に記載の方法。
（項目１９）
上記アルキルカルボン酸が酢酸である、項目１に記載の方法。
（項目２０）
上記不活性有機溶媒がアセトニトリルである、項目１に記載の方法。
（項目２１）
Ｚが

である、項目１に記載の方法。
（項目２２）
式

［式中、
Ｚは、

であり；
Ｒ_１は

またはＣＨ_３であり；
Ｒ_２は

またはＨであり；
Ｒ_３は

またはＨであり；
Ｒ_４は

またはＨであり；
Ｒ_６またはＲ_７は、Ｈまたは

の２重リンカー−カルボン酸を生成するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の２重リンカー−カルボン酸を単離するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）からの２重リンカー−カルボン酸を、塩基または有機塩基の存在下で、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質ＣＨ_３−Ｓ−Ｓ−Ｓ−Ｗ’と、不活性有機溶媒中で反応させて、式

の２重リンカー−メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質を生成するステップと、
ｄ．ステップ（ｃ）の単離された２重リンカー−メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）またはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む不活性溶媒中で反応させて、式

の３重リンカー−活性化エステルを生成するステップと
を含む方法。
（項目２３）
Ａｌｋ^１が２から５個の炭素原子のアルキレンであり、Ｓｐ^１が酸素原子である、項目１７に記載の方法。
（項目２４）
式

の三官能性リンカー中間体を生成するステップと
を含む方法。 The organic base is, for example, an alkylamine base, such as triethylamine, N, N-diethylmethylamine, N, N-diethylaniline, N, N-diethylethylenediamine, N, N-diisopropylethylamine, tributylamine or Contains tripropylamine and further includes dimethylaminopyridine (DMAP) including diisopropylethylamine (DIEA), N-methylmorpholine, N-methylpyrrolidine, 2,6-di-tertbutyl-4-methylpyridine or pyridine . The base is an alkali metal hydroxide, alkali metal carbonate or alkali metal bicarbonate.
For example, the present invention provides the following items.
(Item 1)
Formula (I):

[Where:
Z is

Is;
R ₁ is

Or CH ₃ ;
R ₂ is

Or H;
R ₃ is

Or H;
R ₄ is

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

Is;
R ₅ is —CH ₃ , —C ₂ H ₅ or —CH (CH ₃ ) ₂ ;
X is an iodine atom or a bromine atom;
R ₅ ′ is hydrogen or an RCO group, wherein R is hydrogen, branched or unbranched alkyl of 1 to 10 carbon atoms, alkylene of 2 to 10 carbon atoms, 6 to An aryl of 11 carbon atoms, a (C ₆ -C ₁₁ ) aryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, or a heteroaryl or heteroaryl-alkyl (C ₁ -C ₅ ) group, wherein hetero Aryl is 2- or 3-furyl, 2- or 3-thienyl, 2- or 3- (N-methylpyrrolyl), 2-, 3- or 4-pyridinyl, 2-, 4- or 5- (N-methyl). Imidazolyl), 2-, 4- or 5-oxazolyl, 2-, 3-, 5- or 6-pyrimidinyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- or 8-quinolyl, or 1 -, 3-, -, 5-, 6-, 7- or 8-isoquinolyl, all aryl and heteroaryl groups are one or more hydroxy, amino, carboxy, halo, nitro, 1 to 3 carbons Optionally substituted with an atomic (C ₁ -C ₃ ) alkoxy or a thioalkoxy of 1 to 5 carbon atoms;
Q is selected from the group consisting of -NNHCO-, -NNHCS-, -NNHCONH-, -NNHCSNH- and -NO-]
A process for preparing a compound comprising:
a. formula

[Wherein Z is defined above]
Generating a triple linker-activated ester of
d. Trilinker formed in step c - activated ester, a methyltrithio antitumor antibiotic _{CH 3 -S-S-S-} W ', in the presence of a base or an organic base, in an inert organic solvent Let the following formula

Wherein the triple linker-activated ester and CH ₃ —SSSW ′ in step c are in a ratio of 3.3: 1 and the reaction The temperature is 5 ° C. or less,
e. The activated ester of step (d) is isolated and purified to give a compound of formula (I)

Obtaining an antitumor antibiotic.
(Item 2)
The method of item 1, wherein the purification of step (e) comprises using normal phase chromatography after reverse phase high performance liquid chromatography having a mobile phase of about pH 7.0 to 9.0.
(Item 3)
alk ¹ is 3 carbon atoms;
Sp ¹ is —O—;
Z ¹ is methyl;
Ar is unsubstituted 1,4-phenylene;
Sp is 4 carbon atoms;
R ₃ is H;
Q is NNHC (O)-;
R ₂ is

Is;
R ₄ is

Is;
R ₅ is C ₂ H ₅ ;
R ₅ ′ is —C (O) —R;
R is methyl;
Z is

The method according to item 1, wherein
(Item 4)
Formula (I):

[Where:
Z is

Is;
R ₁ is

Or CH ₃ ;
R ₂ is

Or H;
R ₃ is

Or H;
R ₄ is

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

Wherein the mercapto compound and the carboxylic acid are present in a ratio of about 1.2: 1;
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. The isolated double linker-carboxylic acid of step (b) is reacted with methyltrithioanti-tumor antibiotic CH ₃ —SS—S—W ′ in the presence of a base or organic base in an inert organic solvent And reacting with
d. The compound of step (c) is added in at least a 3-fold molar excess of N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or N- In the presence of hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N′-disuccinimidyl carbonate from 0 Reaction in an inert solvent containing 50% N, N-dimethylformamide (DMF) and purification to give a compound of formula (I)

Obtaining an antitumor antibiotic.
(Item 5)
5. The method of item 4, wherein the purification of step (e) comprises using normal phase chromatography after reverse phase high performance liquid chromatography having a mobile phase of about pH 7.0 to 9.0.
(Item 6)
alk ¹ is 3 carbon atoms;
Sp ¹ is —O—;
Z ¹ is methyl;
Ar is unsubstituted 1,4-phenylene;
Sp is 4 carbon atoms;
R ₃ is H;
Q is NNHC (O)-;
R ₂ is

Is;
R ₄ is

Is;
R ₅ is C ₂ H ₅ ;
R ₅ ′ is —C (O) —R;
R is methyl;
Z is

The method according to item 4, wherein
(Item 7)
Formula (I)

[Where:
Z is

Is;
R ₁ is

Or CH ₃ ;
R ₂ is

Or H;
R ₃ is

Or H;
R ₄ is

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

[Wherein Z is defined above]
Generating a triple linker-activated ester of
d. Reacting the triple linker-activated ester in step c with a methyltrithio antitumor antibiotic CH ₃ —SS—S—W ′ in the presence of a base or organic base in an inert organic solvent; formula

Obtaining an antitumor antibiotic.
(Item 8)
alk ¹ is 3 carbon atoms;
Sp ¹ is —O—;
Z ¹ is methyl;
Ar is unsubstituted 1,4-phenylene;
Sp is 4 carbon atoms;
R ₃ is H;
Q is NNHC (O)-;
R ₂ is

Is;
R ₄ is

Is;
R ₅ is C ₂ H ₅ ;
R ₅ ′ is —C (O) —R;
R is methyl;
Z is

The method according to item 1, wherein
(Item 9)
Item 2. The method according to Item 1, wherein Alk ¹ is an alkylene of 2 to 5 carbon atoms and Sp ¹ is an oxygen atom.
(Item 10)
10. A method according to item 9, wherein Alk ¹ is an alkylene of 3 carbon atoms.
(Item 11)
Item 2. The method according to Item 1, wherein Z ¹ is alkyl of 1 to 3 carbon atoms.
(Item 12)
Ar is 1,2-, 1,3- or 1,4-phenylene, or 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, Item 2. The method according to Item 1, which is 1,8-, 2,3-, 2,6- or 2,7-naphthylidene.
(Item 13)
Item 13. The method according to Item 12, wherein Ar is 1,4-phenylene.
(Item 14)
Item 2. The method according to Item 1, wherein Q is -NNHCO-.
(Item 15)
Item 2. The method according to Item 1, wherein Sp is a linear or branched divalent or trivalent alkyl group of 1 to 12 carbon atoms.
(Item 16)
Item 16. The method according to Item 15, wherein Sp is a linear or branched divalent or trivalent alkyl group of 1 to 6 carbon atoms.
(Item 17)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the alcohol solvent is methanol.
(Item 18)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the inert solvent is acetonitrile.
(Item 19)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the alkylcarboxylic acid is acetic acid.
(Item 20)
Item 2. The method according to Item 1, wherein the inert organic solvent is acetonitrile.
(Item 21)
Z is

The method according to item 1, wherein
(Item 22)
formula

[Where:
Z is

Is;
R ₁ is

Or CH ₃ ;
R ₂ is

Or H;
R ₃ is

Or H;
R ₄ is

Or H;
R ₆ or R ₇ is H or

Generating a double linker-carboxylic acid of
b. Isolating the double linker-carboxylic acid of step (a);
c. The double linker-carboxylic acid from step (b) is reacted with methyltrithio antitumor antibiotic CH ₃ —SS—S—W ′ in the presence of a base or organic base in an inert organic solvent. Expression

Generating a double linker-methyltrithio antitumor antibiotic of
d. The isolated double linker-methyltrithio antitumor antibiotic of step (c) is converted to N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4 -Dinitrophenol or N-hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or N, N'-disuccinimidyl carbonate Reaction in an inert solvent containing 0-50% N, N-dimethylformamide (DMF) in the presence of

Producing a triple linker-activated ester of:
(Item 23)
18. A method according to item 17, wherein Alk ¹ is alkylene of 2 to 5 carbon atoms and Sp ¹ is an oxygen atom.
(Item 24)
formula

Generating a trifunctional linker intermediate of:

式Ｉのカリケアマイシン誘導体の調製方法ならびに本発明の上記誘導体の調製に有用な三官能性および二官能性リンカー中間体の調製方法は、以下の反応スキームＩおよびＩＩに記載されている。 Methods for preparing calicheamicin derivatives of formula I and for preparing trifunctional and bifunctional linker intermediates useful for preparing the above derivatives of the present invention are described in Reaction Schemes I and II below.

スキームＩに従って、本明細書が参照により本明細書に援用する米国特許第５７７３００１号に見い出されているカルボン酸１［式中、Ａｌｋ^１、Ｓｐ^１、ＡｒおよびＺ^１は上記に定義されている］を、メルカプト化合物２［式中、ＳｐおよびＱは上記に定義されている］と、約１００℃未満の沸点を有するアルコール溶媒中、アルキルカルボン酸の存在下で、約５％酢酸中、約２０℃から約７０℃にて、約１から約２４時間縮合させて、２重リンカー−カルボン酸３［式中、Ａｌｋ^１、Ｓｐ^１、Ａｒ、Ｑ、ＳｐおよびＺ^１は上記定義の通りである］を得る。

According to Scheme I, the carboxylic acid 1 found in US Pat. No. 5,773,001, which is hereby incorporated by reference, wherein Alk ¹ , Sp ¹ , Ar and Z ¹ are defined above. In the presence of an alkyl carboxylic acid in an alcohol solvent having a boiling point of less than about 100 ° C. in about 5% acetic acid, Double linker-carboxylic acid 3 [wherein Alk ¹ , Sp ¹ , Ar, Q, Sp and Z ¹ are as defined above] by condensation at 20 ° C. to about 70 ° C. for about 1 to about 24 hours. There is].

２重リンカー−カルボン酸３を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）または他のカルボジイミドまたはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、０から５０％ＤＭＦまたはＤＭＦを含む、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはアセトニトリルなどの不活性溶媒中で反応させて、３重リンカー−活性化エステル４［式中、Ｚは Double linker-carboxylic acid 3 is combined with N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or N-hydroxysulfosuccinimide and 1 0,50% in the presence of 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or other carbodiimides or N, N′-disuccinimidyl carbonate Reacting in an inert solvent such as dichloromethane, tetrahydrofuran, dioxane or acetonitrile containing DMF or DMF to form a triple linker-activated ester 4 [where Z is

からなる群から選択される］を生成する。

Selected from the group consisting of:

例えば、２重リンカー−カルボン酸３を、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）または１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩およびＮ−ヒドロキシスクシンイミドまたは他の同等のカルボキシル活性化基などのカップリング剤と、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはアセトニトリルなどの不活性溶媒中で反応させることによって、本明細書に記載のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルなどの３重リンカー−活性化エステル４が形成される。周囲温度にて、ジオキサン中、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ＤＣＣが好ましい。好ましい溶媒混合物は、０から５０％ＤＭＦを含むアセトニトリルである。２重リンカー−カルボン酸３を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）または他のカルボジイミドの存在下で、０から５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含むジオキサンまたはアセトニトリルなどの不活性溶媒中で反応させることによって、３重リンカー−活性化エステル４が形成される。３重リンカー−活性化エステル４は、揮発性溶媒の除去によって単離することができ、シリカ−６０を含む不活性支持体上での逆相または順相クロマトグラフィーによってさらに精製することができる。 For example, double linker-carboxylic acid 3 can be converted to 1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC) or 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride and N-hydroxysuccinimide or other equivalent carboxyl activation A triplex such as the N-hydroxysuccinimide ester described herein by reacting with a coupling agent such as a group in an inert solvent such as N, N-dimethylformamide (DMF), tetrahydrofuran, dioxane or acetonitrile. A linker-activated ester 4 is formed. N-hydroxysuccinimide and DCC are preferred in dioxane at ambient temperature. A preferred solvent mixture is acetonitrile with 0 to 50% DMF. Double linker-carboxylic acid 3 is combined with N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or N-hydroxysulfosuccinimide and 1 , 3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide (EDCI) or other carbodiimide in the presence of 0 to 50% N, N-dimethylformamide (DMF) Triple linker-activated ester 4 is formed by reaction in an inert solvent such as dioxane or acetonitrile. Triple linker-activated ester 4 can be isolated by removal of volatile solvents and can be further purified by reverse phase or normal phase chromatography on an inert support containing silica-60.

３重リンカー−活性化エステル４を、まず最初に、炭酸ナトリウムを含むがこれに限定されないアルカリ金属炭酸塩と反応させ、アセトニトリル中で穏やかに加熱還流することによって、３重リンカー−活性化エステル４のナトリウム塩を形成する。３重リンカー−活性化エステル４のナトリウム塩をメチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質５と、約−１５℃で、不活性有機溶媒、好ましくはアセトニトリル中でさらに反応させることによって、活性化エステル６［式中、Ｚ、Ａｌｋ^１、Ｓｐ^１、Ａｒ、Ｚ^１、Ｑ、ＳｐおよびＷ’は上記に定義されている］が得られる。具体的には、Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉが、好ましいメチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質５である。アセトニトリル中、約０℃での反応が好ましい。アセトニトリル中、約０℃では、場合によって、アルカリ金属炭酸塩を、好ましくはトリエチルアミンを含む有機塩基に置き換えてもよい。 The triple linker-activated ester 4 is first reacted with an alkali metal carbonate, including but not limited to sodium carbonate, and gently heated to reflux in acetonitrile to produce the triple linker-activated ester 4 The sodium salt of is formed. By further reacting the sodium salt of triple linker-activated ester 4 with methyltrithio antitumor antibiotic 5 at about -15 ° C. in an inert organic solvent, preferably acetonitrile, the activated ester 6 [wherein , Z, Alk ¹ , Sp ¹ , Ar, Z ¹ , Q, Sp and W ′ are defined above]. Specifically, N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I is the preferred methyltrithio antitumor antibiotic 5. A reaction at about 0 ° C. in acetonitrile is preferred. At about 0 ° C. in acetonitrile, the alkali metal carbonate may optionally be replaced with an organic base, preferably containing triethylamine.

スキームＩＩにさらに記載されているように、スキームＩによるカルボン酸１［式中、Ａｌｋ^１、Ｓｐ^１、ＡｒおよびＺ^１は上記に定義されている］とメルカプト化合物２との縮合によって調製される２重リンカー−カルボン酸３を、メチルトリチオ抗腫瘍性抗生物質５と、トリエチルアミンの存在下で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中、約−５℃で反応させて中間体７を得、この中間体７を、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドと、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）または他のカルボジイミドまたはＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネートの存在下で、ＤＭＦとアセトニトリルとの不活性溶媒混合物中で反応させることによって、３重リンカー−活性化エステル６にさらに変換し、次いで、これを好ましくはクロマトグラフィーによって精製して、式（Ｉ）の抗腫瘍性抗生物質を得る。 Prepared by condensation of a carboxylic acid 1 according to Scheme I, wherein Alk ¹ , Sp ¹ , Ar and Z ¹ are defined above, and a mercapto compound 2 as further described in Scheme II The double linker-carboxylic acid 3 was reacted with methyltrithioantitumor antibiotic 5 in the presence of triethylamine in N, N-dimethylformamide (DMF) at about −5 ° C. to give intermediate 7, Intermediate 7 is converted to N-hydroxysuccinimide, 2,3,5,6-tetrafluorophenol, pentafluorophenol, 4-nitrophenol, 2,4-dinitrophenol or N-hydroxysulfosuccinimide and 1,3-dicyclohexyl. Carbodiimide (DCC), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodi The triple linker-activated ester 6 can be further reacted by reacting in an inert solvent mixture of DMF and acetonitrile in the presence of EDCI or other carbodiimide or N, N′-disuccinimidyl carbonate. This is then purified, preferably by chromatography, to give the antitumor antibiotic of formula (I).

以下の実施例は、本発明のある種の実施形態を例証するために提示されるが、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。以下の調製手法の条件の知られている改変例が、これらの化合物を調製するために使用可能であることを、当業者は容易に理解する。

The following examples are presented to illustrate certain embodiments of the invention, but should not be construed as limiting the scope of the invention. Those skilled in the art will readily understand that known variations of the conditions of the following preparative procedures can be used to prepare these compounds.

（実施例１）
ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド (Example 1)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide

メタノール５．０ｍｌ中、３−メチル−３−メルカプト−ブタン酸ヒドラジド０．５ｇ［３．４ｍｍｏｌ］の混合物を撹拌し、これに４−（４−アセチルフェノキシ）−ブタン酸０．９１ｇ［４．１ｍｍｏｌ］を素早く加え、続いてメタノール１０ｍｌおよび酢酸１．５ｍｌを加え、撹拌を２４時間続ける。反応混合物をろ過し、固体をメタノール１００ｍｌで洗浄して、表題化合物０．７８ｇを固体として得る。

A mixture of 0.5 g [3.4 mmol] of 3-methyl-3-mercapto-butanoic hydrazide in 5.0 ml of methanol was stirred, and 0.91 g of 4- (4-acetylphenoxy) -butanoic acid [4. 1 mmol] is quickly added followed by 10 ml methanol and 1.5 ml acetic acid and stirring is continued for 24 hours. The reaction mixture is filtered and the solid is washed with 100 ml of methanol to give 0.78 g of the title compound as a solid.

（実施例２）
ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド (Example 2)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide

メチルアルコール（７５ｍＬ）中、３−メチル−３−メルカプト−ブタン酸ヒドラジド（４．０ｇ、２７ｍｍｏｌ）、４−（４−アセチルフェノキシ）−ブタン酸（５．０ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）および酢酸（７．５ｍＬ）の混合物を、約４５℃で約７時間加熱する。混合物を室温に冷却する。白色固体（７．１２ｇ、９０％）をブフナー漏斗上に回収し、ＭｅＯＨで洗浄する（１０ｍＬ×２回）。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ（ｐｐｍ）１２．１４（ｓ，１Ｈ），１０．３７および１０．２１（ｓ，１Ｈ），７．７４−７．７０（ｍ，２Ｈ），６．９７−６．９５（ｍ，２Ｈ），４．０４（ｔ，２Ｈ），３．０９および３．０４（ｓ，２Ｈ），２．６６（ｓ，１Ｈ），２．４１−２．３７（ｔ，２Ｈ），２．２２および２．２０（ｓ，３Ｈ），１．９７−１．９３（ｍ，２Ｈ），１．８（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ：３７５（Ｍ^＋＋Ｎａ）。

3-methyl-3-mercapto-butanoic acid hydrazide (4.0 g, 27 mmol), 4- (4-acetylphenoxy) -butanoic acid (5.0 g, 22.5 mmol) and acetic acid (7 in methyl alcohol (75 mL). .5 mL) of the mixture is heated at about 45 ° C. for about 7 hours. Cool the mixture to room temperature. A white solid (7.12 g, 90%) is collected on a Buchner funnel and washed with MeOH (2 × 10 mL). ¹ H NMR (DMSO-d ₆ ): δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 10.37 and 10.21 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 2H), 6 97-9.95 (m, 2H), 4.04 (t, 2H), 3.09 and 3.04 (s, 2H), 2.66 (s, 1H), 2.41-2.37 (T, 2H), 2.22 and 2.20 (s, 3H), 1.97-1.93 (m, 2H), 1.8 (s, 3H), 1.47 (s, 3H). MS: 375 (M ^< + ^> + Na).

（実施例３）
ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド (Example 3)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene ] Hydrazide

ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド（実施例１または２）０．５ｇ［１．４２ｍｍｏｌ］およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド０．２２ｇ［１．８９ｍｍｏｌ］の混合物に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍｌを加え、続いて１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩０．７０ｇ［３．６５ｍｍｏｌ］を素早く加え、混合物を室温で３時間撹拌する。反応混合物を真空中で残渣に至るまで濃縮し、この残渣を酢酸エチルと水との間で分配抽出する。分離した有機層を水、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ_４）。有機層を真空中で蒸発させて油状の残渣を得、これを酢酸エチル−ヘキサンから結晶化して、表題化合物０．２１ｇを無色固体として得る。

Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide (Example 1 or 2) 0.5 g [ 1.42 mmol] and 0.22 g [1.89 mmol] of N-hydroxysuccinimide are added 10 ml of N, N-dimethylformamide, followed by 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride 0 .70 g [3.65 mmol] are quickly added and the mixture is stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture is concentrated in vacuo to a residue, which is partitioned between ethyl acetate and water. The separated organic layer is washed with water, saturated sodium chloride and dried (MgSO ₄ ). The organic layer is evaporated in vacuo to give an oily residue, which is crystallized from ethyl acetate-hexane to give 0.21 g of the title compound as a colorless solid.

（実施例４）
ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド Example 4
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene ] Hydrazide

ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド（実施例１または２）（３．６９ｇ、１０．４８ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１．３８６ｇ、１２．０５ｍｍｏｌ）の混合物をジオキサン（６０ｍＬ）中に懸濁させ、ジオキサン（３０ｍＬ）中ＤＣＣ（２．４８２ｇ、１２．０５ｍｍｏｌ）を１５分間かけて滴下する。混合物を室温で２４時間撹拌する。沈澱したジシクロヘキシル尿素をろ過分離し、ジオキサンで洗浄する（１０ｍＬ×２回）。ろ液を約５０ｍＬに濃縮し、撹拌しながら水（２５０ｍＬ）を加える。得られた白色固体をブフナー漏斗上に回収し、水で洗浄し（５０ｍＬ×２回）、真空中で室温にて乾燥させる。この白色固体にＭｅＣＮ（６０ｍＬ）を加え、混合物が溶液になるまで、この混合物を５０℃で加熱し、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）（４００ｍＬ）を加える。次いで、混合物を０〜５℃に２時間冷却する。固体をブフナー漏斗上に回収し、冷ＩＰＡで洗浄し（２０ｍＬ×２回）、真空中で乾燥させて、本実施例の生成物を白色固体として得る（３．５８ｇ、７０％）。ＭＳ：４５０（Ｍ^＋＋１）。

Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide (Example 1 or 2) (3.69 g) 10.48 mmol) and N-hydroxysuccinimide (1.386 g, 12.05 mmol) were suspended in dioxane (60 mL) and DCC (2.482 g, 12.05 mmol) in dioxane (30 mL) was added for 15 min. Add dropwise. The mixture is stirred at room temperature for 24 hours. The precipitated dicyclohexylurea is filtered off and washed with dioxane (2 × 10 mL). Concentrate the filtrate to about 50 mL and add water (250 mL) with stirring. The resulting white solid is collected on a Buchner funnel, washed with water (2 × 50 mL) and dried in vacuo at room temperature. To this white solid is added MeCN (60 mL) and the mixture is heated at 50 ° C. until the mixture is in solution and isopropyl alcohol (IPA) (400 mL) is added. The mixture is then cooled to 0-5 ° C. for 2 hours. The solid is collected on a Buchner funnel, washed with cold IPA (2 x 20 mL) and dried in vacuo to give the product of this example as a white solid (3.58 g, 70%). MS: 450 (M ⁺⁺ 1).

（実施例５）
Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉと縮合したブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド (Example 5)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) condensed with N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I ) Oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene] hydrazide

ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド（実施例４）０．５０５ｇ［１．１２ｍｍｏｌ］のアセトニトリル５０ｍｌ溶液を撹拌し、これに炭酸ナトリウム０．１２３ｇ［１．１６ｍｍｏｌ］を加え、続いて１時間穏やかに加熱還流し、室温に冷却し、ろ過する。ろ液を−１５℃に冷却し、Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉ１．４９６９ｇ［１．１ｍｍｏｌ］のアセトニトリル５ｍｌ溶液を２０分間かけて滴下することによってゆっくりと加え、撹拌を約１．５時間続ける。反応混合物を室温に暖め、約３時間撹拌する。揮発性物質を真空中で残渣に至るまで蒸発させ、この残渣を冷凍器に保存する。残渣に酢酸エチル２５ｍｌを加え、続いて冷凍器に約１時間保存する。反応混合物をろ過し、酢酸エチルを残渣に至るまで蒸発させ、この残渣を酢酸エチル１０ｍｌに溶解し、シリカゲル１１０ｇのカラムにかける。カラムを酢酸エチル中１〜５％メチルアルコールで溶出して、ＨＰＬＣによって測定される純度６５．２７％を有する所望の生成物０．３２２ｇを得る。

Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene ] A solution of 0.505 g [1.12 mmol] of hydrazide (Example 4) in 50 ml of acetonitrile was stirred, and 0.123 g [1.16 mmol] of sodium carbonate was added thereto, followed by gentle heating to reflux for 1 hour. Cool and filter. The filtrate is cooled to −15 ° C., N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I 1.4969 g [1.1 mmol] in 5 ml acetonitrile is slowly added dropwise over 20 minutes and stirring is carried out at about 1.5. Continue for hours. The reaction mixture is warmed to room temperature and stirred for about 3 hours. Volatiles are evaporated in vacuo to a residue, which is stored in a freezer. Add 25 ml of ethyl acetate to the residue and then store in a freezer for about 1 hour. The reaction mixture is filtered and the ethyl acetate is evaporated to a residue which is dissolved in 10 ml of ethyl acetate and applied to a column of 110 g of silica gel. The column is eluted with 1-5% methyl alcohol in ethyl acetate to give 0.322 g of the desired product having a purity of 65.27% as measured by HPLC.

（実施例６）
Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉと縮合したブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド (Example 6)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) condensed with N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I ) Oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene] hydrazide

ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド（４５０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）（実施例４）の、Ｅｔ_３Ｎ（０．３５ｍＬ）を含むＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）溶液を、Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉ（５００ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）溶液で、０〜５℃にて処理する。次いで、混合物を氷浴で冷却しながら、さらに１時間撹拌する。溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラム上でＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨで溶出して精製し、本実施例の生成物（３４０ｍｇ、５４％）を白色固体として得る。ＭＳ：１７８０（Ｍ^＋＋１）。

Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene ] hydrazide (450 mg, 1 mmol) (example _4), Et 3 N and _CH 3 CN (100 mL) solution containing (0.35 mL), N-acetyl--LL-E33288γ ₁ ^I of (500 mg, 0.355 mmol) in CH ₃ CN (100mL) solution and treated at 0 to 5 ° C.. The mixture is then stirred for an additional hour while cooling in an ice bath. The solvent is removed and the residue is purified on a silica gel column eluting with CH ₂ Cl ₂ -MeOH to give the product of this example (340 mg, 54%) as a white solid. MS: 1780 (M ⁺⁺ 1).

（実施例７）
Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉと縮合したブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド (Example 7)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] condensed with N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I Hydrazide

Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉ（２００ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル／酢酸エチル（１：１）１０ｍｌ溶液を−５℃で撹拌し、これにブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド（１５０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）（実施例１または２）のアセトニトリル／酢酸エチル（１：１）１０ｍｌおよびトリエチルアミン０．０６ｍｌ溶液を、１０分毎に１ｍｌアリコートずつ加える。ブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド溶液の最終分を加えた後、−５℃で２時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルカラム上でＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨで溶出して精製し、本実施例の生成物を白色固体として得る。ＭＳ１６８４（Ｍ^＋＋１）。

A solution of N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I (200 mg, 0.142 mmol) in acetonitrile / ethyl acetate (1: 1) in 10 ml was stirred at −5 ° C., and butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide (150 mg, 0.43 mmol) (Example 1 or 2) in acetonitrile / ethyl acetate (1: 1 ) Add 10 ml and 0.06 ml triethylamine solution in 1 ml aliquots every 10 minutes. After the final portion of butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide solution was added, then -5 Stir for 2 hours at ° C. The solvent was removed under reduced pressure, the residue was purified by eluting with CH ₂ Cl ₂ -MeOH on a silica gel column to give the product of this example as a white solid. MS 1684 (M ⁺⁺ 1).

（実施例８）
Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉと縮合したブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−［４−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−４−オキソブトキシ］フェニル］エチリデン］ヒドラジド
Ｎ−アセチル−ＬＬ−Ｅ３３２８８γ_１ ^Ｉと縮合したブタン酸，３−メルカプト−３−メチル−，２−［（Ｅ）−１−［４−（４−ヒドロキシ−４−オキソブトキシ）フェニル］エチリデン］ヒドラジド（１００ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ０．５ｍＬおよびアセトニトリル１．８ｍＬ溶液を２５℃で撹拌し、これにＮ−ヒドロキシスクシンイミド（２３６ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド（１６０ｍｇ０．８３５ｍｍｏｌ）を加える。加えた後に、溶液を２５℃で１時間撹拌する。アセトニトリルを減圧下で除去し、得られたＤＭＦ溶液を、撹拌中の水３ｍＬに加え、沈澱物を得る。沈澱物をろ過し、乾燥し、シリカゲルカラム上でＣＨ_２Ｃｌ_２−イソプロピルアルコールで溶出して精製し、白色固体として得られる本実施例の生成物を得る（５３ｍｇ、５０％）。ＭＳ：１７８０（Ｍ^＋＋１）。

(Example 8)
Butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- [4-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl) condensed with N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I ) Oxy] -4-oxobutoxy] phenyl] ethylidene] hydrazide N-acetyl-LL-E33288γ ₁ ^I condensed with butanoic acid, 3-mercapto-3-methyl-, 2-[(E) -1- [4- A solution of (4-hydroxy-4-oxobutoxy) phenyl] ethylidene] hydrazide (100 mg, 0.059 mmol) in DMF (0.5 mL) and acetonitrile (1.8 mL) was stirred at 25 ° C., and N-hydroxysuccinimide (236 mg, 2. 05 mmol) and 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethyl-carbodiimide (160 mg 0.835 m mol). After the addition, the solution is stirred at 25 ° C. for 1 hour. Acetonitrile is removed under reduced pressure and the resulting DMF solution is added to 3 mL of stirring water to give a precipitate. The precipitate is filtered, dried and purified on a silica gel column eluting with CH ₂ Cl ₂ -isopropyl alcohol to give the product of this example obtained as a white solid (53 mg, 50%). MS: 1780 (M ⁺⁺ 1).

Claims

Invention described in the specification.