JP2015535811A - MRI用の両親媒性錯体を含む常磁性固体脂質ナノ粒子(pSLN) - Google Patents
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Abstract
Description
発明の概要
本発明は、式(I)で示されるジアゼピン誘導体および式(II)で示されるテトラアザシクロドデカン誘導体:
[式中、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;ヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8-C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニルから選ばれる1つ以上の基で任意に置換されたリン酸基 -O-(HO-P=O)-O-によって中断されたC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 HまたはC1〜C4直線または分枝アルキル基である)から選ばれる;またはY'は、置換もしくは部分置換グリセロールのモノリン酸エステルであり、飽和または不飽和炭素鎖を有する脂肪族脂肪酸とエステル化された該グリセロールの少なくとも1つの官能基を有し、リン酸官能基は、遊離であるかまたはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属と塩化される;
Lは、カルボニル -C=O、チオカルボニル -C=S、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、オキシ-カルボニル -OCO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-、酸素 -O-およびイオウ -S-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された直線または分枝基である脂肪族C3〜C10環式および複素環式およびC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニルまたはアルキニルから選ばれる二価のリンカーである;
RI-IVおよびRI-IIIはそれぞれ独立して、-(C1〜C3)アルキルカルボキシ基である]
から選ばれる両親媒性の常磁性金属キレート部分またはその塩を含む常磁性固体脂質ナノ粒子(pSLN)であって、該キレート部分が、Gd(III)、Mn(II)、Cr(III)、Cu(II)、Fe(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Tb(III)、Yb(III)、Dy(III)、Ho(III)およびEr(III)から選ばれる常磁性金属イオンと錯体を形成する、該ナノ粒子に関する。
a)水と混ざらない低沸点有機溶媒中で、以下を混合することによって得られる有機相(O)を製造すること:
式(I)で示されるジアゼピン誘導体および式(II)で示されるテトラアザシクロドデカン誘導体:
[式中、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;ヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8〜C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニルから選ばれる1つ以上の原子または基で任意に置換されたリン酸基 -O-(HO-P=O)-O-によって中断されうるC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 HまたはC1〜C4直線および分枝アルキル基から選ばれる)から選ばれる;
Lは、カルボニル -C=O、チオカルボニル -C=S、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、オキシ-カルボニル -OCO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-、酸素 -O-およびイオウ -S-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された直線または分枝基である脂肪族C3〜C10環式または複素環式、またはC1〜C6アルキル、アルケニルまたはアルキニルから選ばれる二価のリンカーである;
RI-IVおよびRI-III はそれぞれ独立して、-(C1〜C3)アルキルカルボキシ基である]
から選ばれる金属イオンの配位に適した化合物を含む両親媒性成分であって、該キレート部分が、Gd(III)、Mn(II)、Cr(III)、Cu(II)、Fe(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Tb(III)、Yb(III)、Dy(III)、Ho(III)およびEr(III)から選ばれる常磁性金属イオンと錯体を形成する両親媒性成分;
C6〜C24直線または分枝の、飽和または不飽和鎖リン脂質、リゾ脂質、スフィンゴ脂質から選ばれる両親媒性成分(ここで、胆汁酸またはその誘導体、糖脂質、脂肪族脂肪アルコール、ジアルキルエーテル、トコフェロールまたはその混合物などの界面活性剤が存在することもできる);および
12〜24個の炭素原子の長さである直線または分枝の、飽和または不飽和炭化水素鎖を有するモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリド、またはその混合物から選ばれるグリセリドを少なくとも含み、飽和C12〜C22脂肪酸またはそのエステルを任意に含む脂質成分;
b)1種以上のイオン性または非イオン性界面活性剤、およびC3〜C8ポリ-アルキルアルコールおよびC5〜C12飽和脂肪酸から選ばれる共界面活性剤を任意に含む水溶液(W)を製造すること;
c)a)で製造した有機層(O)を、b)で製造した水溶液(W)と混合して、20℃〜40℃の温度で安定かつ透明なマイクロエマルション(W/O)を得ること;
d)ステップc)のマイクロエマルション(W/O)を、20℃〜40℃の温度で張力活性のある少なくとも1種のイオン性または非イオン性界面活性剤を含む第二の水溶液(W1)に加えて、多重エマルション(W/O/W1)を得ること;
e)多重エマルションから有機溶媒を蒸発させ、脂質ナノ粒子の懸濁液を得ること;
f)ステップe)で得た懸濁液を、ステップa)で定義した脂質成分の結晶点より低い温度に冷却して、pSLNを得ること。
本発明は、式(I)で示されるジアゼピン誘導体および式(II)で示されるテトラアザシクロドデカン誘導体:
[式中、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;ヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8〜C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニルから選ばれる1つ以上の基で任意に置換されたリン酸基 -O-(HO-P=O)-O-によって中断されたC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 HまたはC1〜C4直線または分枝アルキル基である)から選ばれる;またはY'は、置換もしくは部分置換グリセロールのモノリン酸エステルであり、飽和または不飽和炭素鎖を有する脂肪族脂肪酸とエステル化された該グリセロールの少なくとも1つの官能基を有し、リン酸官能基は、遊離であるかまたはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属と塩化される;
Lは、カルボニル -C=O、チオカルボニル -C=S、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、オキシ-カルボニル -OCO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-、酸素 -O-およびイオウ -S-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された直線または分枝基である脂肪族C3〜C10環式および複素環式およびC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニルまたはアルキニルから選ばれる二価のリンカーである;
RI-IVおよびRI-III はそれぞれ独立して、-(C1〜C3)アルキルカルボキシ基である]
から選ばれる両親媒性の常磁性金属キレート部分またはその塩を含む常磁性固体脂質ナノ粒子(pSLN)であって、該キレート部分が、Gd(III)、Mn(II)、Cr(III)、Cu(II)、Fe(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Tb(III)、Yb(III)、Dy(III)、Ho(III)およびEr(III)から選ばれる常磁性金属イオンと錯体を形成する、該ナノ粒子に関する。
脂質成分(主として固体脂質コア)は、約30〜50%(重量/重量)、好ましくは35〜45%であり、融点が37℃を超える、12〜24個の炭素原子の長さである飽和または不飽和、直線または分枝の炭化水素鎖を有するモノグリセリド、ジグリセリドもしくはトリグリセリドまたはその混合物から選ばれる少なくとも1つのグリセリドを含み、および12〜24個の炭素原子を含む飽和または不飽和、直線または分枝の脂肪酸鎖またはそのエステルを任意に含む。脂肪酸が、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸またはその混合物から選ばれるのが好ましい。脂肪酸エステル成分は、たとえば、パルミチン酸セチルによって代表される。12〜24個の炭素原子を含む、ポリエチレングリコール脂肪酸と脂肪族アルコールのモノまたはジエステルが任意に存在してもよい。pSLNにおいて、脂質成分は、固体および結晶形態である;
両親媒性成分は、脂質コアの周囲に主として見い出され、6〜24個の炭素原子を含む直線または分枝の、飽和または不飽和鎖リン脂質、リゾ脂質またはスフィンゴ脂質であるのが好ましい。それは、方法のステップa)で定義したように、pSLNの27〜45%(重量/重量)である。リン脂質であるのが好ましく、pSLNの約33〜38%であるのがより好ましい。上述したように、それは、常磁性錯体の両親媒性成分とともに脂質コアの周囲に主として見い出される;および
常磁性錯体を含む両親媒性成分は、pSLNの5〜14%、より好ましくは8〜12%であり、式(I)および/または式(II)で示される錯体である。
表3および4に示すように、そして実施例パートでより詳しく説明するように、pSLNは、溶液中、すなわち、pSLNに配合されていないキレート化両親媒性化合物と比較して、より高い緩和能値を示す。
a)水と混ざらない有機溶媒に以下の成分:常磁性金属の錯体、および6〜24個の炭素原子を含む直線または分枝の、飽和または不飽和鎖を特徴とするリン脂質、スフィンゴ脂質およびリゾ脂質(ここで、胆汁酸またはその誘導体、糖脂質、脂肪族脂肪アルコール、ジアルキルエーテル、トコフェロールまたはその混合物などの界面活性剤が、以下に詳述するように存在してもよい)から選ばれる界面活性剤によって現される両親媒性成分;脂質成分;ならびに任意の他の両親媒性および/または親水性成分(たとえば、任意にさらに適当な内因性生体分子および/または親油性または両親媒性成分の特異的認識用リガンドで修飾された、PEG、好ましくはPEG-2000などの表面コーティング用ポリマー)を溶解することによって、最初に有機相(O)を製造する。これらの成分の可溶化は、20℃〜40℃、より好ましくは25〜37℃、さらにより好ましくは30〜35℃の温度で有機相(O)を加熱することによって行われる。水と混ざらない、用いた有機溶媒は、低沸点であり、蒸発温度は、大気圧下または制御された真空条件下で20℃〜70℃である。好ましい実施態様によれば、溶媒は、塩化メチレン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、ギ酸エチルまたはそれらの混合物から選ばれるのが好ましい。
またはその塩を特徴とする。
テトラアザシクロドデカン型はいいケージをもつ両親媒性構造は、式(II):
またはその塩を特徴とする。
上記式(I)および式(II)において、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'((Y')2-N-である場合、同一もしくは異なりうる)は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;基 -O-(HO-P=O)-O-、またはヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8〜C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニル基から選ばれる1つ以上の原子または基で任意に置換された該基によって任意に中断されたC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 Hおよび直線または分枝C1〜C4アルキル基から選ばれる)から選ばれる;またはY'は、置換もしくは部分置換グリセロールのモノリン酸エステルであり、飽和または不飽和炭素鎖を有する脂肪族脂肪酸とエステル化された該グリセロールの少なくとも1つの官能基を有し、リン酸の官能基は、遊離であるかまたはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属と塩化される;
Lは、カルボニル -C=O、チオカルボニル -C=S、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、オキシ-カルボニル -OCO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-、酸素 -O-およびイオウ -S-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された脂肪族C3〜C10環式または複素環式または直線または分枝C1〜C6アルキルまたはアルキニル基から選ばれる二価のリンカーである;
RI-IVおよびRI-III はそれぞれ独立して、-(C1-C3)アルキルカルボキシ基である。
Y基が、Y基の末端窒素原子と、Yと結合する末端に存在するカルボニル(-C=O)またはチオカルボニル(-C=S)との間のアミド結合によって、L基に連結されるのが好ましい。Y基が、(Y')2-N-(ここで、Y'残基は、同一もしくは異なって、長さがC8-C16、好ましくはC10-C14、より好ましくはC10H21およびC12H25のアルキル鎖である)であるのが好ましい。
で示されるリン酸基によって中断されたC8〜C16アルキル基、より好ましくはC10〜C14アルキル基である)であってもよい。この実施態様によれば、Yは、式:Y'-NH-(ここで、Y'は、上述の1種以上のリン酸基で中断され、少なくとも1つ、好ましくは8〜16個の炭素原子、またはより好ましくは10〜14個の炭素原子を含む2または3個のカルボキシアルキル基でさらに置換されたC10〜C14アルキル基である)で示されるリン脂質である。
d)
e)
[式中、#は、式(I)で示されるジアゼピンへの結合点を示す]
から選ばれるのがより好ましい。
f)
g)
[式中、#は、式(I)で示されるテトラアザシクロドデカンへの結合点を示す]
から選ばれるのが好ましい。
n)
o)
p)
q)
[式中、Y'は、前記と同意義であり、#は、式(II)で示されるテトラアザシクロドデカンの誘導体への結合点を示す]
から選ばれるのが好ましい。
[式中、LおよびYならびにそれらの組合せL-Yは、前記の好ましい実施態様と同意義である]
で示される化合物またはその塩によって定義され、好ましくは常磁性金属イオン(Gd3+が好ましい)との錯体の形態によって定義される。
[式中、LおよびYならびにそれらの組合せL-Yは、前記の好ましい実施態様と同意義である]
を有する化合物であるか、またはその塩である。
から選ばれる。
脂質:
グリセリド:0.115〜0.170 M、
リン脂質、存在する場合:0.115〜0.170 M、
脂肪酸、存在する場合:0.032〜062 M
ポリマーコーティング(すなわち、PEG)、存在する場合:0〜0.018 M
常磁性錯体:0.014〜0.038 M;
b)平行して、または続いて、ステップa)で用いた溶媒の溶媒和特性を増加させるのに有用な1種以上の界面活性剤および任意に共界面活性物質、典型的にはポリアルキルアルコールを含む水相(W)を製造する。この相における好ましい界面活性物質は、低分子量イオン性物質、さらにより好ましくは、コール酸およびタウロコール酸またはその水和塩、コール酸ナトリウム、グリコール酸ナトリウムおよびタウロデオキシコール酸ナトリウムなどのその誘導体から選ばれるアニオン性界面活性物質から選ばれる。特に好ましい実施態様によれば、タウロコール酸ナトリウム(乳化剤として)を用い、さらに好ましくは共溶媒として1-ブタノールと組合わせ、溶解させて、水相(W)を形成する。アニオン性界面活性剤であるポリアルキル-ホスフェート、アルキル-スルフェートまたはスルホネートまたはジオクチル-ナトリウムスクシネートなどのアルキル-スルホ-スクシネートを用いることもできる。
[式中、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;ヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8〜C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニルから選ばれる1つ以上の原子または基で任意に置換されたリン酸基 -O-(HO-P=O)-O-によって中断されうるC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 HまたはC1〜C4直線および分枝アルキル基から選ばれる)から選ばれる;
Lは、カルボニル -C=O、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された直線または分枝基から選ばれる二価のリンカーである]
で示される両親媒性キレート剤またはその塩に関する。
本発明の式(I)で示される化合物は、最初に、選ばれたリンカーLとジアゼピン部分の間のアダクトの形成、次いで、リンカーの末端側のカルボン酸官能基の活性化、選ばれたY基を用いる、続いてのアミド化を含む方法によって製造することができる。最後に、得られた生成物に存在する場合、保護基を除去し、選ばれた常磁性金属で、誘導体を任意に錯体化する。
および
で定義される化合物の製造のための合成は、以下のステップ:
a)式:
または
[式中、RI-IVは、前記と同意義であり、Lは、末端カルボン酸官能基を含むリンカーである]
で示されるアダクトの製造;
b)リンカーの該末端カルボン酸官能基の活性化;
c)ステップb)の生成物と、上記Y基との間のアミド化反応;
d)式(I)または(II)で示される誘導体を得るための任意の保護基の切断;
e)常磁性錯体の形態での式(I)または(II)で示される誘導体を得るための常磁性金属イオンとのキレート化;
を含む。
反応工程式2
式(I)で示される化合物の製造
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(2,5-ジオキソ-1-ピロリジニル)オキシ]-5-オキソペント-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
化合物5(14.6 g;0.022 mol)をCH2Cl2(350 mL)に溶解させ、次いで、NHS(3.75 g;0.033 mol)を加え、混合物を氷浴で0℃に冷却した。CH2Cl2(150 mL)中のEDC(6.25 g;0.033 mol)の溶液を滴下し、次いで、反応溶液を室温にて24時間攪拌した。混合物をH2O(3x150 mL)で洗浄した。有機相を乾燥(Na2SO4)し、ろ過し、蒸発させて、6を黄色油状物で得た(15.42 g;0.020 mol)。
収率92%。
分析データ:
Mr:768.94(C38H64N4O12)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
化合物6(1当量)をCHCl3(濃度1% w/v)に溶解させた。適当なホスホエタノールアミン(1当量)(1,2-ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン、1,2-ジラウロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン DLPEまたはジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン DPPE)およびジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)(1.7当量)を、この順序で加えた。溶液を室温にて3時間〜24時間攪拌した。混合物をH2O(1x50 mL)、酸性化したH2O(pH4-5、HClにより;1x50 mL)およびH2O(1x50 mL)で連続的に洗浄した。有機相を乾燥(Na2SO4)し、ろ過し、蒸発させた。このようにして得られた粗物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、化合物7a-cを白色固体物質で得た。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファペンタコス-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
試薬:化合物6(797 mg;1.04 mmol);1,2-ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(543 mg;1.04 mmol)。
化合物7a(937 mg;0.796 mmol)。収率77%。
分析データ:
HPLC-ELSD:100%(領域%);
Mr:1177.50(C59H109N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファヘプタコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
試薬:化合物6(700 mg;0.91 mmol);1,2-ジラウロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン DLPE(500 mg;0.86 mmol)
化合物7b(927 mg、0.751 mmol)。収率87%。
分析データ:
HPLC-ELSD:100%(領域%);Mr:1233.61(C63H117N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファノナコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
試薬:化合物6(1.92 g;2.50 mmol);1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン DPPE(1.73 g;2.50 mmol)。
化合物7c(2.79 g;2.07 mmol)。収率83%。
分析データ:
HPLC-ELSD:100%(領域%);Mr:1345.82(C71H133N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
化合物7a-c(1当量)をCH2Cl2(濃度2-4% w/v)に溶解させ、溶液を攪拌し、0℃にて冷却し、次いで、TFA(6当量)を滴下した。反応混合物を室温にて1時間攪拌した。溶液を蒸発させ、残渣を新鮮なTFA(30当量)に溶解させた。この溶液を室温にて80時間攪拌した;MS分析およびHPLC-ELSDによって反応をモニターした。混合物を蒸発させ、残渣をジイソプロピルエーテルで処理して、白色固体を得、遠心分離し、ジイソプロピルエーテル(2x30 mL)で洗浄した。その固体をH2Oに懸濁させ、5%水性NaHCO3の添加によってpH6-7にて溶解させ、1M HClの添加によってpH2にて沈殿させた。固体をろ過し、減圧乾燥(P2O5)して、下記にデータを示すリガンド8a-cを得た。
6-[ビス[2-[(1,1ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファペンタコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸
試薬:化合物7a(885 mg;0.752 mmol)。
化合物8a(669 mg;0.702 mmol);収率93%。
分析データ:
HPLC-ELSD:92.3%(領域%)
Mr:953.07(C43H77N4O17P)
錯滴定(1.001 mM GdCl3):95.7%
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[(カルボキシメチル)アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファヘプタコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸
試薬:化合物7b(875 mg、0.709 mmol)。
化合物8b(750 mg;0.642 mmol);収率91%。
分析データ:
HPLC-ELSD:75.5%(領域%)
Mr:1009.18(C47H85N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[(カルボキシメチル)アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファノナコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸
試薬:化合物7c(2.79 g;2.07 mmol)
化合物8c(1.77 g;1.58 mmol);収率76%。
分析データ:
HPLC-ELSD:95.3%(領域%)
Mr:1121.39(C55H101N4O17P)
錯滴定(1.001 mM GdCl3):95.7%
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
リガンド8(a-c)(1当量)をH2O(濃度5%;pH1-2)に再懸濁させ、5% NaHCO3水溶液の添加によってpH6.5-7にて溶解させた。 GdCl3(1当量)の滴定溶液を少しずつ加えた。溶液を室温にて攪拌し、5% NaHCO3溶液の添加によってpHを一定に維持した。HPLC-ELSDおよびキシレノールオレンジアッセイによって錯形成をモニターした。凍結乾燥によって錯体を単離し、サイズ排除クロマトグラフィーによって塩から精製して、化合物9a-cを得た。
[[6-[ビス[(カルボキシメチル)アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファペンタコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸(4-)]ガドリネート(1-)]ナトリウム
試薬:化合物8a(400 mg、0.438 mmol)
化合物9a (257 mg、0.228 mmol);収率52%。
分析データ:
HPLC-ELSD:98.9%(領域%)
Mr:1129.28(C43H73GdN4NaO17P)
MSは、構造に対応した。
[6-[ビス[(カルボキシメチル)アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファヘプタコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸(4-)]ガドリネート(1-)]ナトリウム
試薬:化合物8b(690 mg、0.590 mmol)
化合物9b(614 mg;0.518 mmol);収率88%。
分析データ:
HPLC-ELSD:95.6%(領域%)
Mr:1185.39(C47H81GdN4NaO17P)
MSは、構造に対応した。
[6-[ビス[(カルボキシメチル)アミノ]-6-[(13R)-10-ヒドロキシ-10-オキシド-5,16-ジオキソ-13-(1-オキソドデシル)オキシ]-9,11,15-トリオキサ-6-アザ-10-ホスファノナコス-1-イル]-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸(4-)]ガドリネート(1-)]ナトリウム
試薬:化合物8c(500 mg、0.435 mmol)
化合物9c(517 mg、0398 mmol);収率:92%
分析データ:
HPLC-ELSD:99.2%(領域%) [8]
Mr:1297.60(C55H97GdN4NaO17P)
MSは、構造に対応した。
実施例1.1aにしたがって製造された化合物6(1当量)を、ジアルキルアミン(1当量)およびDIPEA(1.7当量)とともにCHCl3(濃度1-3% w/v)に溶解させた。反応溶液を室温にて24時間攪拌し、H2O(1x50 mL)、酸性化したH2O(pH4-5、HClにより;1x70 mL)およびH2O(1x50 mL)で連続的に洗浄した。有機相を乾燥(Na2SO4)し、ろ過し、蒸発させた。そのようにして得られた生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、下記に結果を示すように、化合物10(d-e)を油状物で得た。
試薬:化合物6(1.92 g;2.50 mmol);ジデシルアミン(0.743 g;2.50 mmol)
化合物10d(2.26 g;2:38 mmol)。収率:95 %。
分析データ:
HPLC-ELSD:95.3 %(領域%);Mr:951.42(C54H102N4O9)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
試薬:化合物6(3.13 g;4.07 mmol);ジドデシルアミン(1.44 g;4.07 mmol)
化合物10e(4.30 g、4.27 mmol)。収率:105%(溶媒残差)。
分析データ:
HPLC-ELSD:89.7%(領域%);Mr:1007.53(C58H110N4O9)。
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
化合物10d-e(1当量)をCH2Cl2(20-50 mL)に溶解させ、そのようにして得られた溶液を攪拌し、0℃に冷却し、次いで、TFA(6当量)を滴下した。反応混合物を室温にて1時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を新鮮なTFA(50当量)に溶解させた。この溶液を80時間攪拌した。混合物を蒸発させ、残渣をジイソプロピルエーテル(70 mL)で処理して、白色沈殿を得、ろ過または遠心分離し、ジイソプロピルエーテル(2x20 mL)で洗浄し、減圧乾燥(P2O5;NaOHペレット)して、リガンド11dおよび11eを白色固体で得た。粗生成物をH2Oに再懸濁させ、2N NaOHの添加によってpH6-7にて溶解させ、1M HClの添加によってpH2にて沈殿させた。
試薬:化合物10d(2.20 g、2.31 mmol)
化合物11d(1.08 g;1:48 mmol) 収率:64 %。
分析データ:
HPLC-ELSD:95.7 %(領域%)
Mr:726.99(C38H70N4O9)
錯滴定(1.001 mM GdCl3):94 %。
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
試薬:化合物10e(4.30 g、4.27 mmol);
化合物11e(2.83 g、3.61 mmol) 収率:85 %。
分析データ:
HPLC-ELSD:82.4%(領域%)。
Mr:783.10(C42H78N4O9)。
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
リガンド11d-e(1当量)をH2O(濃度5% w/v;pH1-2)に懸濁させ、2N NaOHの添加によってpH6.5-7にて溶解させる。GdCl3(1当量)の滴定溶液を少しずつ加えた。混合物を室温にて攪拌し、0.1N NaOHの添加によってpHを一定に維持した。反応溶液を濃縮して、沈殿を得た;錯体12d-eをろ過により同定した。
試薬:化合物11d(1.1 g;1:48 mmol);
化合物12d(1.12 g;1.24 mmol);収率90%。
分析データ:
HPLC-ELSD:94.6 %(領域%)
Mr:903.20(C38H66GdN4NaO9)
MSは、構造に対応した。
試薬:化合物11e(1.10 g、1.37 mmol);
化合物12e(1.02 g;1.06 mmol);収率:78 %。
分析データ:
HPLC-ELSD:94.3 %(領域%)
Mr:959.31(C42H74GdN4NaO9)。
MSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-カルボキシシクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
反応工程式5にしたがって、化合物21を製造した。
反応工程式5
(1R,4R)-4-(ヒドロキシメチル)シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
MeOH(300 mL)中のtrans-(1R,4R)-4-ヒドロキシメチルシクロヘキサンカルボン酸13(15 g;94.8 mmol)の溶液に、濃H2SO4(15 mL)を加え、次いで、反応混合物を4時間攪拌還流した。溶液を濃縮し、次いで、NH4OH水溶液添加によって塩基性化した;白色固体をろ去し、母液をEtOAc(3x70 mL)で抽出した。合せた有機層を、飽和NaCl水溶液で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、減圧蒸発して、14を黄色液体(17.26 g)で得、これ以上の精製をせずに次の反応に用いた。
定量的収率。
分析データ:
Mr:172.22(C9H16O3)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
(1R,4R)-4-[(メチルスルホニルオキシ)メチル]シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
0℃に冷却したTHF(450 mL)中の化合物14(17.26 g)の溶液に、triエチルアミン(39.4 mL;284.5 mmol)、次いで、塩化メタンスルホニル(14.9 mL;151.7 mmol)を加えた。混合物を0℃にてさらに10分間攪拌し、次いで、反応混合物を室温にて2時間攪拌した。反応混合物をセライト(0.01-0.04 mm)床でろ過し、次いで、新鮮なTHFで洗浄した。得られる溶液を減圧蒸発させて、化合物15を黄色油状物で得(30.95 g)、これ以上の精製をせずに次の反応に用いた。
定量的収率。
分析データ:
Mr:250.30(C10H18O5S)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
(1R,4R)-4-(ヨードメチル)シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
アセトン(450 mL)中の化合物15(30.95 g)およびヨウ化ナトリウム(42.64 g;284.5 mmol)の溶液を室温にて2時間攪拌し、次いで、3.5時間還流した。室温にて60時間後、追加のNaI(5 g;17.7 mmol)を加え、溶液を7時間還流した。溶媒を減圧蒸発させ、黄色残渣をジエチルエーテルで処理した;不溶性の塩をろ去し、新鮮なジエチルエーテルで洗浄した。エーテル溶液を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、化合物16を黄色液体で得た(22.43 g;79.5 mmol)。
収率:84 %
分析データ:
Mr:282.12(C9H15IO2)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
(1R,4R)-4-(ニトロメチル)シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル
DMSO(1 L)中の亜硝酸ナトリウム(10.72 g;155.4 mmol)およびフロログルシノール(10.78 g;85.4 mmol)の溶液に、化合物16(21.92 g;77.7 mmol)を加えた。窒素下、溶液を室温にて48時間攪拌した。反応混合物をH2O(3 L)で希釈し、Et2Oで抽出した。有機層を乾燥(Na2SO4)し、蒸発させて、粗生成物を得、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した。化合物17(10.35 g;51.4 mmol)を淡黄色液体で得た。
収率:66 %
分析データ:
HPLC:97.9%(HPLC 領域%)
Mr:201.22(C9H15NO4)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[(1R,4R)-4-(メトキシカルボニル)シクロヘキサン-1-イル]-6-ニトロ-1,4-ビス(フェニルメチル)-テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン
EtOH(400 mL)中のN,N'-ジベンジルエチレンジアミンアセト酢酸(18.29 g;50.7 mmol)の懸濁液を、透明な溶液が得られるまで60℃にて攪拌した;パラホルムアルデヒド(4.57 g;152.2 mmol)を加え、懸濁液を80℃にて1.5時間加熱して、暗橙色の透明溶液を得た。EtOH中の化合物17(10.21 g;50.7 mmol)の溶液を滴下し、最終溶液を80℃にて6時間攪拌した。室温にて15時間後、得られる沈殿をろ過し、EtOHで洗浄し、真空乾燥して、化合物18を白色固体物質(17.88 g;38.4 mmol)で得た。
収率:76%。
分析データ:
HPLC:99.61 %(領域%)
Mr:465.59(C27H35N3O4)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-アミノ-4-(メトキシカルボニル)シクロヘキサン-1-イル] テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン。
THF(200 mL)中の化合物18(17.88 g;38.4 mmol)の懸濁液を、透明な溶液が得られるまで40℃にて攪拌した;次いで、溶液をMeOH(150 mL)で希釈した。MeOH(50 mL)中の5% Pd/C(10.66 g)の懸濁液を加え、混合物を大気圧で40℃にて11時間水素添加した。触媒をろ去し、溶液を蒸発させて、化合物19を緑色がかった油状物で得た(9.57 g;37.4 mmol)。得られた生成物をさらに精製することなく用いた。
収率:98 %。
分析データ:
Mr:255.36(C13H25N3O2)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-(メトキシカルボニル)-シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
化合物19(9.52 g;37.3 mmol)をCH3CN(400 mL)に溶解させ、次いで、K2CO3(23.19 g;167.8 mmol)およびNa2SO4(15.88 g;111.8 mmol)を加えた。続いて、ブロモ酢酸t-ブチル(24.6 mL;167.8 mmol)を加え、混合物を80℃にて16時間攪拌した。塩をろ去し、ろ液を蒸発させ、残渣をEtOAc(200 mL)に溶解させ、溶液をH2O(3x70 mL)および飽和NaCl水溶液(70 mL)で洗浄した。有機相を乾燥(Na2SO4)し、ろ過し、蒸発させた。粗生成物(27.36 g)をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、化合物20を淡黄色油状物で得た(5.34 g;7.5 mmol)。
収率:20 %
分析データ:
Mr:711.93(C37H65N3O10)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-カルボキシ-シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
室温にて攪拌しながらi-PrOH(100 mL)中の化合物20の溶液に、2N NaOH(7.12 mL;14.2 mmol)を加え、次いで、H2O(5.5 mL)を、均質な混合物が得られるまで加えた。反応が完了しなかったため、溶液を室温にて5.5時間攪拌し、溶液を-20℃にて15時間保管した。温度を室温まで上げて、反応混合物をさらに3時間攪拌した。2N HCl(7.12 mL)でpHを7に調節し、溶液を室温にて減圧蒸発させた。残渣をH2O(80 mL)に再懸濁させ、2N HCl(7.12 mL)で酸性化し、EtOAcで抽出した。有機層を乾燥(Na2SO4)し、蒸発させて、化合物21を白色固体(4.5 g;6.45 mmol)で得た。
収率:90 %。
分析データ:
Mr:697.91(C36H63N3O10)。
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[[(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ]カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
0℃にて攪拌しながらCH2Cl2(50 mL)中の化合物21(1.09g;1.6 mmol)の溶液に、NHS(0.27g;2.3 mmol)を加え、次いで、CH2Cl2(50 mL)中のEDC(0.45g;2.3 mmol)を滴下した。反応混合物を室温にて49時間攪拌した。最終溶液をH2O(3x40 mL)で洗浄し、有機層を乾燥乾燥(Na2SO4)し、蒸発させて、22を固体(1.35 g)で得、さらに精製することなく次のステップに用いた。
定量的収率。
CHCl3(濃度2%)中の化合物22(1当量)の溶液に、選ばれたアミン(1-1.3当量)を加え、次いで、DIPEA(1.7当量)を添加した。混合物を室温にて64-72時間攪拌した。反応溶液が中性になったので、追加のDIPEA(1.7当量)を加え、反応混合物を室温にて2-21時間攪拌した。次いで、反応混合物をH2O(35 mL)で、洗液のpHが酸性になるまで希HCl(3x40 mL)で、そしてH2O(35 mL)で連続的に洗浄した。有機相を乾燥(Na2SO4)し、蒸発させて、粘稠で黄色がかった粗生成物を得、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、下記にデータを示す化合物23 a-cを黄色油状物で得た。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジデシルアミノ)-カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
試薬:化合物22(1.18 g;1:48 mmol) ジデシルアミン(0.44 g;1.48 mmol)
化合物23a(075 g、0.77 mmol)。収率:52%。
Mr:977.46(C56H104N4O9)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[ビス[2-[(1,1-ジメチル)エトキシ]-2-オキソエチル]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[[[(7R)-4-ヒドロキシ-4-オキシド-10-オキシド-10-オキソ-7-[(1-オキソドデシル)オキシ]-3,5,9-トリオキサ-4-ホスファノナデク-1-イル]アミノ]カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸ビス[(1,1-ジメチル)エチル]エステル
試薬:化合物22(1.35 g;1.56 mmol);1,2-ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(0.81 g;1.56 mmol)
化合物23c(0.84 g;0.70 mmol)。収率:45%。
Mr:1203.54(C61H111N4O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
0℃にて攪拌しながらCH2Cl2(50 mL)中の化合物23aまたは23c(1当量)の溶液に、TFA(6当量)を滴下した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、次いで、蒸発させて、残渣を新鮮なTFA(350当量)に溶解させた;次いで、溶液を室温にて24-28時間攪拌した。TFAを蒸発させ、残渣をiPr2O(40-60 mL)で処理して、白色固体を得、遠心分離によって単離し、乾燥(NaOHペレットの存在下、減圧および30℃)して、下記にデータを示す化合物24a-cを得た。
6-[[ビス(カルボキシメチル)]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[(ジデシルアミノ)カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸
試薬:化合物23a(0.75 g、0.77 mmol)
化合物24a(0.41 g;0.54 mmol) 収率:70%。
分析データ:
HPLC-ELSD:94.1%(領域%)
Mr:753.03(C40H72N4O9)
錯滴定:(0.001 M GdCl3):81.7%
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
6-[[ビス(カルボキシメチル)]アミノ]-6-[[[(7R)-4-ヒドロキシ-4-オキシド-10-オキソ-7-[(1-オキソドデシル)オキシ]-3,5,9-トリオキサ-4-ホスホノナデク-1-イル]アミノ]カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸
試薬:化合物23c(0.84 g、0.70 mmol)
化合物24c(0.67 g;0.69 mmol);収率:98%。
分析データ:
HPLC-ELSD:96.2% (領域%)
Mr:979.11(C45H79N4O17P)
錯滴定:(0.001 M GdCl3):96.9%
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
実施例2.3に記載の手順にしたがって、滴定された化合物を製造した。
[[6-[[ビス(カルボキシメチル)]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-(ジデシルアミノ)カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸(4-)]ガドリネート(1-)]ナトリウム
試薬:化合物24a(0.32 g、0:43 mmol)
化合物25a(0.33 g;0.35 mmol) 収率:83 %。
分析データ:
HPLC-ELSD:95.2%(領域 %)
Mr:929.24(C40H68GdN4NaO9)
TGA:5.7%
MSは、構造に対応した。
[[6-[[ビス(カルボキシメチル)]アミノ]-6-[(1R,4R)-4-[[(7R)-4-ヒドロキシ-4-オキシド-10-オキソ-7-[(1-オキソドデシル)オキシ]-3,5,9-トリオキサ-4-ホスファノノナデク-1-イル]アミノ]カルボニル]シクロヘキサン-1-イル]テトラヒドロ-1H-1,4-ジアゼピン-1,4(5H)-アセト酢酸(4-)]ガドリネート(1-)]ナトリウム
試薬:化合物24c(0.35 g、mmol 0.36)
化合物25c(0.31 g;0.27 mmol) 収率:77 %
分析データ:
Mr:1155.32(C45H75GdN4 NaO17P)
MSは、構造に対応した。
CH3CN(500 mL)中の化合物26(5 g;7.8 mmol)の懸濁液に、HBTU(g;mmol)およびDIPEA(g;mmol)を加え、混合物を室温にて30分間攪拌した;ジデシルアミン(2.32 g;7.8 mmol)を加え、混合物を室温にて24時間攪拌した。
分析データ
HPLC-ELSD:96.9 %(領域%)
Mr:740.08(C40H77N5O7)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
0℃に冷却したCH2Cl2(100 mL)中の化合物27(5.02 g;5.89 mmol)の溶液に、TFA(6当量)を滴下した;得られる溶液を室温にて1時間攪拌し、次いで、蒸発させた。残渣を新鮮なTFA(50当量)に溶解させ、そのようにして得られた溶液を室温にて96時間攪拌した。
分析データ
HPLC-ELSD:99.5%(領域%)
Mr:683.97(C36H69N5O7)
錯滴定(0.01 M ZnSO4):98.8%
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
H2O(50 mL)中のリガンド28(1.01 g;1.45 mmol)の溶液に、pH5-6にて、0.1 M GdCl3(14.5 mL;1.45 mmol)の溶液を少しずつ加え、溶液を室温にて攪拌し、0.1 M NaOHの添加によってpHを6.5および7.5の間に維持した。溶離駅としてH2O/CH3CN勾配を用いるアンバーライト(登録商標)XAD1600樹脂上での溶離によって溶液を脱塩した。所望生成物を含む画分をあわせ、凍結乾燥して、錯体29を白色固体物質(1.08 g;1.29 mmol)得た。収率89%。
分析データ
HPLC-ELSD:99.0%(領域%)
Mr:838.20(C36H66GdN5O7)
MSは、構造に対応した。
CH2Cl2(濃度1% w/v)中の化合物26の懸濁液に、HBTU(1当量)およびDIPEA(1.7当量)を連続的に加え、混合物を室温にて30分間攪拌した;次いで、ホスホエタノールアミン(DLPE n=10またはDMPE n=12)(1当量)を加え、混合物を室温にれ24時間攪拌した。反応混合物をH2O(100 mL)、酸性化したH2O(pH4〜5、HClにより;100 mL)およびH2O(100 mL)で連続的に洗浄した。有機層を乾燥(Na2SO4)し、ろ過し、蒸発させ、そのようにして得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、化合物30a-bを得た。
試薬:化合物26(968 mg;1.69 mmol);1,2-ジドデカニル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(980 mg;1.69 mmol)。
化合物30a(605 mg、0.53 mmol);収率32%。
分析データ
HPLC-ELSD:40.6 %(領域%)
Mr:1134.48(C57H108N5O15P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
試薬:化合物26(1.43 g;2.36 mmol)、1,2-ジテトラデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(1.50 g;2.36 mmol)。
化合物30b(2.18 g、1.97 mmol)。収率78 %。
分析データ
HPLC-ELSD:82.4 %(領域%)
Mr:1190.49(C61H116N5O15P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
0℃に冷却した CH2Cl2(濃度1% w/v)中の化合物30a-bの溶液に、TFA(6当量)を滴下し、溶液を室温にて1時間攪拌し、次いで、蒸発させた。残渣を新鮮なTFA(30当量)に溶解させ、新たな溶液を室温にて96時間攪拌する。
溶離液としてH2O/CH3CN勾配を用いるアンバーライト(登録商標)XAD1600樹脂上でのパーコレーションによって精製した。所望の生成物を含む画分をあわせ、凍結乾燥して、リガンド31bを得た。
試薬:化合物30a(600 mg、0.53 mmol)
化合物31a(501 mg、0.53 mmol)。収率98 %。
分析データ
HPLC-ELSD:61.3 %(領域 %)
Mr:966.16(C45H84N5O15P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
10-[(10R)-7-ヒドロキシ-7-オキシド-2,13-ジオキソ-10-[(1-オキソテトラデシル)オキシ]-6,8,12-トリオキサ-3-アザ-7-ホスファエサコス-1-イル]-1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7-三酢酸(31b)の製造
試薬:化合物30b(2.0 g、1.68 mmol)
化合物31b(1.1 g;1.07 mmol)。収率63 %。
分析データ
HPLC-ELSD:99.9 %(領域%)
Mr:1022.26(C49H92N5O15P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
室温にて攪拌しながら、CH3OH/H2O 10:1(1当量)中のピリジン(中和されるまで)およびGd(Ac)3の溶液を、CHCl3(濃度1% w/v)中のリガンド31a-bの懸濁液に少しずつ加えた。反応混合物を蒸発させ、残渣をCH3OH/トルエン(3x50 mL)およびCHCl3(3x50 mL)で処理し、それぞれ溶解した後に蒸発乾固した。最終残渣をH2Oに懸濁させ、凍結乾燥して、錯体32a-bを白色固体物質で得た。
試薬:化合物31a(423 mg、0.44 mmol)
化合物32a(472 mg、0.42 mmol)。収率96 %
分析データ
HPLC-ELSD:69.5 %(領域%)
Mr:1120.38(C45H81GdN5O15P)
MSは、構造に対応した。
試薬:化合物31b(900 mg、0.85 mmol)
化合物32b(991 mg、0.84 mmol)。収率99 %。
分析データ
HPLC-ELSD:92.8 %(領域%)
Mr:1176.49(C49H89GdN5O15P)
MSは、構造に対応した。
0℃にて冷却しながら、CH2Cl2(30 mL)中のEDC溶液(0.757 g;3.95 mmol)の溶液を、CH2Cl2(50 mL)中の化合物33(2 g;2.63 mmol)およびNHS(0.455 g;3.95 mmol)の溶液に滴下し、反応混合物を室温にて20時間攪拌した。次いで、混合物をH2O(3x60 mL)(中和されるまで)で洗浄し、蒸発させて、化合物34(1.78 g;2.22 mmol)を得た。収率84%。
分析データ
Mr:797.98(C39H67N5O12)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
CHCl3(70 mL)中の化合物34(1.78 g;2.23 mmol)の溶液に、ジデシルアミン(0.665 g;2.23 mmol)およびDIPEA(646 microL;3.79 mmol)を連続的に加え、溶液を室温にて72時間攪拌した。反応混合物をH2O(1x50 mL)、酸性H2O(pH4-5、HClにより、1x50 mL)およびH2O(1x50 mL)で連続的に洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、蒸発させて、化合物35a(2.27 g;2.23 mmol)を得た。定量的収率。
分析データ
Mr:980.46(C55H105N5O9)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
CHCl3(25 mL)中の化合物34(0.762 g;0.995 mmol)の溶液に、1,2-ジデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン(0.500 g;0.955 mmol)およびDIPEA [ ](276 μL;1.62 mmol)を連続的に加え、溶液を室温にて22時間攪拌した。反応混合物をH2O(1x50 mL)、酸性H2O(pH4-5、HClにより、1x50 mL)およびH2O(1x50 mL)で連続的に洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、蒸発させ、そのようにして得られた粗残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、化合物35b(0,725 g;6.01 mmol)を得た。収率63%。
分析データ
HPLC-ELSD:79.7%(領域%)
Mr:1205.53(C60H111N5O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
0℃にて冷却しながら、CH2Cl2(濃度1% w/v)中の化合物35a-bの溶液に、TFA(6当量)を滴下し、溶液を室温にて1時間攪拌し、次いで、蒸発させた。残渣を新鮮なTFA(30当量)に溶解させ、得られる溶液を室温にて80 -120時間攪拌した。反応混合物を蒸発させ、残渣をiPr2O(80-100 mL)で処理して、白色固体物質を得、遠心分離し、iPr2O(2x30 mL)で洗浄した。粗化合物36aをアンバークロム(登録商標)CG161樹脂上のクロマトグラフィーによって精製して、リガンド36aを得、粗化合物36bを乾燥し、さらに精製することなく用いた。
試薬:化合物35a(1.87 g、1.91 mmol)
化合物36a(688 mg、0.91 mmol)。収率48%。
分析データ
HPLC-ELSD:99.8 %(領域%)
Mr:756.03(C39H73N5O9)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
試薬:化合物35b(665 mg、0.55 mmol)
化合物36a(540 mg、0.55 mmol)。定量的収率
分析データ
HPLC-ELSD:99.8 %(領域%)
Mr:981.10(C44H79N5O17P)
1H-および13C-NMRおよびMSは、構造に対応した。
リガンド36a-bをH2Oに懸濁させ、2M NaOH(36a)または5% 水性NaHCO3(36b)の添加によってpH6-7にて溶解させ、次いで、0.1M NaOH(36a)または5% 水性NaHCO3(36b)の添加によってpH7に維持しながら、0.1 M(1当量) GdCl3の溶液を少しずつ加えた。凍結乾燥によって粗錯体を得、セファデックス(登録商標)G10樹脂上のサイズ排除クロマトグラフィーによって塩から精製して、錯体37a-bを得た。
試薬:化合物36a(400 mg、0.529 mmol)
化合物37a(326 mg、035 mmol)。収率66%。
分析データ
HPLC-ELSD:98.6 %(領域%)
Mr:932.24(C39H69GdN5NaO9)
MSは、構造に対応した。
試薬:化合物36b(500 mg、0.510 mmol)
化合物37a(150 mg、0.130 mmol)。収率25%
分析データ
HPLC-ELSD:61.1%(領域%)
Mr:1158.32(C44H76GdN5NaO17P)
MSは、構造に対応した。
CH2Cl2に200 mgのエピクロン200(登録商標)(Cargill Deutschland GmbH、クレーフェルト、ドイツ)、50 mgの[1,2-ジステロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-(メトキシ(ポリエチレングリコール)-2000)アンモニウム塩 DSPE-PEG-2000、65 mgの錯体9b(滴定濃度88%)、225 mgのトリパルミチン、25 mgのステアリン酸を溶解させることによって、有機相(O)を製造した。有機相を36℃に加熱し、様々な成分の溶解が完了するまで攪拌した。175 mgのタウロコール酸ナトリウム、0.2 mLの1-ブタノールおよび0.250 mLの水を含む水性相(W)を有機相に加えた。安定で透明なマイクロエマルション(W/O)が得られるまで、溶液を36℃にて30分間攪拌した(製造方法のステップc)。同時に、0.24%(重量/体積)Tween 80(登録商標)(Serva、ハイデルベルク、ドイツ)を含む水溶液W1を製造し、30℃に加熱した。30℃に維持しながら、水性相W1にマイクロエマルションW/Oを滴下して、多重エマルションW/O/W1を得た(製造方法のステップd)。次いで、45分間の攪拌下にて多重エマルションを維持しながら、大気圧にて有機溶媒を蒸発させた(ステップe)。次いで、分散液の温度を10℃まで下げ、pSLNの脂質コアを結晶化させる(ステップf)。次いで、そのようにして得られた分散液を、再生セルロース膜(Pellicon XL 30kDa)およびグルコース5.5% w/vの溶液を用いることによる限外ろ過プロセスによって、過剰の乳化剤成分から精製した。最後に、分散液を濃縮して、約8 mLにし、ろ過した(0.22 μmフィルター)。最終製剤中に存在する金属およびリンの量を、ICP-MS(ELAN 6100 パーキンエルマー)によって測定した。SLNにおけるGd(III)錯体の取り込み効率を、理論量と比較しての最終分散液中のGd(III)重量%として計算した。平均流体力学直径(z平均)および多分散指数(PdI)などの分散した粒子の特性は、DLS技術(Zetasizer Nano ZS、Malvern Instruments)によって、P=2mMの濃度にてPBS中で測定された。表面電荷・電位(ζ電位)は、ELS(ゼータサイザーナノZS、Malvern Instruments)によって、5.5%グルコース溶液中、P=2 mMの濃度で常に測定された。
化合物B22286の合成は、MAGMA 2001.12(2-3)、114-120)に記載された。その式は、以下のとおりである。
錯体9bを等価モル数のB22286と置き換え、実施例8.1に記載の手順と同様にして、SLNに錯体を配合した。分散液の化学物理的特性決定を、先の実施例に記載のように行い、データを表2に記載する。
式(II)の誘導体(B22286)、DSPE-PEG-2000で製造されたpSLNにおけるGd(III)のロードは、約12000分子単位のGd 錯体/粒子であった。この値は、タービスキャン・ラブ・エキスパート(Turbiscan Lab Expert)装置を用いて、粒子によって占有された体積分率(Φ%)を測定することによって得られた。
P/Gd(III) は、5.13であると計算された。
Minispec装置 mq20(Bruker Biospin、ドイツ)を用いて、緩和能測定を行なった。以下の式:
Ri 1obs=1/Ti,J 1obs=ri,j 1p [Gd3+] + 1/Tj 1
[式中、Ri 1obsは、SLNに製剤された造影剤について観察された緩和時間であり、T1obsは、縦緩和時間である;ここで、指数iおよびjはそれぞれ、取り込まれた造影媒体および媒体に関連する]
を用いたT1の測定からSLNに組み込まれた各錯体のr1p値を決定した。詳しくは、緩和能測定は、20 MHzおよび25℃(pH7.4)にて、アルブミン(NaCl 0.9%中HSA4%)またはヒト血漿(HP)の存在下で行なわれている。
表4:SLNに取り込まれた式(II)のGd(III)の両親媒性錯体の緩和能値r1p(mM-1s-1)
表3および4は、実施例8.1および8.2に記載したように製造された製剤の物理化学的特性の例を示す。SLNにおけるの取り込みの効率は、理論的量と比較した、最終分散液中の重量%として計算された。平均流体力学直径(z平均)および多分散指数(PdI)などの分散した粒子の特性は、DLS技術(Zetasizer Nano ZS、Malvern Instruments)によって、P=2mMの濃度にてPBS中で測定された。表面電荷・電位(ζ電位)は、ELS(ゼータサイザーナノZS、Malvern Instruments)によって、5.5%グルコース溶液中、P=2 mMの濃度で常に測定された。
DSC 25装置(Mettler Toledo)を用いて熱量測定研究を行った。一例として報告する実験において、錯体9bを含むpSLNの分散液30 mgを正確に秤量して、アルミニウムのるつぼに入れ、次いで、密閉した。5℃/分の走査速度で25℃から85℃にサンプルを加熱し、次いで、1℃/分の速度で25℃まで冷却した。対照として、水を入れたるつぼを用いて測定を行なった。製剤の製造後(4℃にて保管)2ヶ月間同じ実験を行い、結晶コアの多形において有意な変化は観察されなかった。
Balb/Cマウスの脇腹に移植された腫瘍モデルであるヒト卵巣がん(IGROV-1)を用いて、インビボ研究を行った。 7テスラMRIトモグラフ(Bruker Biospin、Germany)で画像を得た。
Terrenoら(ChemistryおよびBiodiversity、vol. 5、2008:1901-1912)に記載の手順にしたがい、薄層堆積/押し出し技術を用いて、B22286を含むリポソームを製造した。リポソーム製剤は、以下の組成を有する:B22286(15 mol%)、POPC(59 mol%)、コレステロール(23 mol%)およびDSPE-Peg2000(3 mol%)。
pSLNに取り込まれた式(I)および(II)の常磁性錯体のインビボ生体内分布を健康なC57BL/6マウスにおいて研究した。50 μmol(Gd)/kgの用量で、n匹の動物にpSLNを投与した(ここで、nは、各研究について表7-8-9-10に定義される)。投与後の異なる時点で動物を犠牲にした(表7-8-9-10を参照)。犠牲にした後、血液に対して約1:100(v/v)の比率でナトリウムヘパリン(Clexane(登録商標) 4000 IU/0.4 mL)の溶液を含むチューブに血液を保管した。潅流後、肝臓、脾臓および右腎臓を切除し、マイクロ波石灰化(MDS-2000 CEM Corporation)を用いて硝酸(65% w/v)で石灰化した。次いで、ICP-OES(OPTIMA 2100 DV パーキンエルマー)によって、Gd(III)含量を測定し、下記のとおり計算されたID%として研究において報告した:
臓器中のID%=(臓器におけるGdマイクログラム/投与された用量のGdμg)x100
血液中のID%=[(Gdマイクログラム/血液mL)x(動物の重量x72)/Gd μgで投与された用量)x100],
ここで、72は、マウスの血液体積(mL/kg)に対応する。
Claims (30)
- 式(I)で示されるジアゼピン誘導体および式(II)で示されるテトラアザシクロドデカン誘導体:
[式中、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;ヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8〜C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニルから選ばれる1つ以上の基で任意に置換されたリン酸基 -O-(HO-P=O)-O-によって中断されたC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 HまたはC1〜C4直線または分枝アルキル基である)から選ばれる;またはY'は、置換もしくは部分置換グリセロールのモノリン酸エステルであり、飽和または不飽和炭素鎖を有する脂肪族脂肪酸とエステル化された該グリセロールの少なくとも1つの官能基を有し、リン酸官能基は、遊離であるかまたはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属と塩化される;
Lは、カルボニル -C=O、チオカルボニル -C=S、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、オキシ-カルボニル -OCO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-、酸素 -O-およびイオウ -S-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された直線または分枝基である脂肪族C3〜C10環式および複素環式およびC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニルまたはアルキニルから選ばれる二価のリンカーである;
RI-IVおよびRI-III はそれぞれ独立して、-(C1〜C3)アルキルカルボキシ基である]
から選ばれる両親媒性の常磁性金属キレート部分またはその塩を含む常磁性固体脂質ナノ粒子(pSLN)であって、該キレート部分が、Gd(III)、Mn(II)、Cr(III)、Cu(II)、Fe(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Tb(III)、Yb(III)、Dy(III)、Ho(III)およびEr(III)またはその塩から選ばれる常磁性金属イオンと錯体を形成する、該ナノ粒子。 - C12〜C24飽和または不飽和の、直線または分枝アルキル鎖を有するモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリド、またはその混合物から選ばれるグリセリドを少なくとも含み、ジグリセリドおよびトリグリセリドの場合、アルキル鎖は同一または異なってよく、飽和または不飽和C12〜C22脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその混合物を任意に含む固体脂質コアを特徴とする、請求項1に記載のpSLN。
- 該グリセリドが、トリグリセリドであり、好ましくは、トリミリスチン、トリパルミチン、トリステアリンおよびトリアラキジンおよびそれらの混合物から選ばれる、請求項1〜2のいずれか1つに記載のpSLN。
- 両親媒性成分が、C6〜C24直線または分枝の、飽和または不飽和鎖リン脂質、リゾ脂質またはスフィンゴ脂質から選ばれる両親媒性化合物ならびに請求項1において定義された式(I)および/または(II)の常磁性錯体またはその塩から選ばれる両親媒性化合物を少なくとも含む該固体脂質コアの周囲の両親媒性成分を特徴とする、請求項1〜3のいずれか1つに記載のpSLN。
- 30〜50% 重量/重量の請求項2において定義された脂質;
27〜45% 重量/重量のC6〜C24直線または分枝の、飽和または不飽和鎖リン脂質、リゾ脂質またはスフィンゴ脂質から選ばれる化合物である両親媒性化合物;
5〜14% 重量/重量の請求項1において定義された式(I)および/または(II)の両親媒性常磁性錯体またはその塩;
を含む、請求項1〜4のいずれか1つに記載のpSLN。 - 生理的条件下で測定された、0.47 Tにおいて、25 mM-1s-1より高い、好ましくは30 mM-1s-1より高い緩和能値r1pを特徴とする、請求項1〜5のいずれか1つに記載のpSLN。
- 粒子分布10〜220 nm、平均流体力学直径100 nm未満および多分散指数(PdI)0.2未満を特徴とする、請求項1〜6のいずれか1つに記載のpSLN。
- 該平均直径が50〜70 nmであり、PdIが0.12〜0.18である、請求項7に記載のpSLN。
- 両親媒性成分が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトールまたはそれらの混合物から選ばれるリン脂質であり、さらに、胆汁酸、胆汁酸誘導体またはその塩、糖脂質、脂肪酸、脂肪族アルコール、ジアルキルエーテルまたはトコフェロールを任意に含む、請求項4〜8のいずれか1つに記載のpSLN。
- リン脂質が、天然由来であり、大豆または卵レシチンである、請求項9に記載のpSLN。
- 少なくとも1つのイオン性または非イオン性界面活性剤、適当な特異的リガンドおよび/またはアルキル鎖または両親媒性成分で任意に化学的に修飾されたステルス剤、任意に化学的に修飾された内因性生体分子(ここで、特異的リガンドまたは内因性生体分子は、さらに、ビタミン、ペプチドおよびポリペプチドから選ばれる)から選ばれる少なくとも1つの成分を含む、請求項10に記載のpSLN。
- ステルス剤が、リン脂質および/または葉酸で任意に化学的に修飾されたポリエチレングリコール(PEG)(DSPE-PEG 2000-葉酸)である、請求項9〜12のいずれか1つに記載のpSLN。
- 常磁性金属の両親媒性錯体を含む固体脂質ナノ粒子(pSLN)の製造方法であって、以下のステップ:
a)水と混ざらない低沸点有機溶媒中で、以下を混合することによって有機相(O)を製造すること:
請求項1において定義された式(I)で示されるジアゼピン誘導体および式(II)で示されるテトラアザシクロドデカン誘導体から選ばれる、金属イオンとキレート化するのに適した両親媒性錯体であって、該キレート部分が、Gd(III)、Mn(II)、Cr(III)、Cu(II)、Fe(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Tb(III)、Yb(III)、Dy(III)、Ho(III)およびEr(III)から選ばれる常磁性金属イオンと錯体を形成する錯体;
C12〜C24飽和または不飽和の、直線または分枝アルキル鎖を有するモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリド、またはその混合物から選ばれるグリセリドを少なくとも含み、ジグリセリドおよびトリグリセリドの場合、アルキル鎖は同一または異なってよく、飽和または不飽和C12〜C22脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその混合物を任意に含む脂質;
C6〜C24直線または分枝の、飽和または不飽和鎖リン脂質、リゾ脂質、スフィンゴ脂質から選ばれ、さらに、胆汁酸、胆汁酸誘導体またはその塩、糖脂質、脂肪酸、脂肪族アルコール、ジアルキルエーテルおよびトコフェロールを任意に含む、両親媒性界面活性剤;
b)1種以上のイオン性または非イオン性界面活性剤、およびC3〜C8ポリ-アルキルアルコールおよびC5〜C12飽和脂肪酸から選ばれる共界面活性剤を任意に含む水溶液(W)を製造すること;
c)a)で製造した有機層(O)を、b)で製造した水溶液(W)と混合して、20℃〜40℃の温度で安定かつ透明なマイクロエマルション(W/O)を得ること;
d)ステップc)のマイクロエマルション(W/O)を、20℃〜40℃の温度で張力活性剤として少なくとも1種のイオン性または非イオン性界面活性剤を含む第二の水溶液(W1)に加えて、多重エマルション(W/O/W1)を得ること;
e)多重エマルションから有機溶媒を蒸発させ、脂質ナノ粒子の懸濁液を得ること;
f)ステップe)で得た懸濁液を、ステップa)で定義した脂質成分の結晶点より低い温度に冷却して、pSLNを得ること;
を含む方法。 - ステップa)の脂質が、トリグリセリドであり、好ましくは、トリミリスチン、トリパルミチン、トリステアリンおよびトリアラキジンおよびそれらの混合物から選ばれる、請求項14に記載の方法。
- ステップa)における水と混ざらない有機溶媒が、塩化メチレン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、ギ酸エチル、1,2-ジクロロエタンおよびそれらの混合物から選ばれる、請求項14〜15のいずれか1つに記載の方法。
- 溶媒が、塩化メチレンである、請求項16に記載の方法。
- ステップa)における有機相(O)が、25℃〜40℃、より好ましくは30〜35℃の温度に暖められる、請求項14〜17のいずれか1つに記載の方法。
- ステップa)における脂質成分中の脂肪酸が、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸から選ばれる、請求項14〜18のいずれか1つに記載の方法。
- ステップa)における脂質成分が、トリパルミチンおよびステアリン酸である、請求項14〜18または19のいずれか1つに記載の方法。
- ステップa)における両親媒性界面活性剤が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトールおよびそれらの混合物、あるいは大豆または卵レシチンから選ばれるリン脂質を含むか、または、該リン脂質である、請求項14〜20のいずれか1つに記載の方法。
- さらに、モノまたはオリゴグリコシドおよびそのグリセロールのエトキシル化モノ、ジおよびトリエステルまたはそれらの混合物の添加を含む、請求項14〜21のいずれか1つに記載の方法。
- ステップb)において定義された水溶液(W)が、さらに、低分子量イオン性界面活性剤、好ましくはコール酸および誘導体、タウロコール酸およびその水和塩秒、コール酸ナトリウム、グリコール酸ナトリウムおよびタウロデオキシコール酸ナトリウムから選らばれるアニオン性界面活性剤を含み、任意に、糖脂質、脂肪酸、脂肪族アルコール、ジアルキルエーテルまたはトコフェロールから選ばれる界面活性剤を含む、請求項14〜22のいずれか1つに記載の方法。
- ステップa)において定義された有機相(O)またはステップb)において定義された水溶液(W)が、さらに、適当な特異的リガンドおよび/またはアルキル鎖または両親媒性成分で任意に化学的に修飾されたステルス剤、任意に化学的に修飾された内因性生体分子(ここで、特異的リガンドまたは内因性生体分子は、さらに、ビタミン、ペプチドおよびポリペプチドから選ばれる)から選ばれる少なくとも1つの追加成分を含む、請求項14〜23のいずれか1つに記載の方法。
- さらに、以下のステップ:
g)pSLN懸濁液の精製;
h)滅菌;
を含む、請求項14〜23のいずれか1つに記載の方法。 - 請求項13〜25のいずれか1つに記載の方法にしたがって得られる、請求項1〜12のいずれか1つに記載のpSLN。
- 式(I'):
で示されるジアゼピン誘導体、または式(II'):
で示されるテトラアザシクロドデカン
[式中、
Yは、式:Y'-NH-または(Y')2-N-で示される基であって;ここで、Y'は、直線または分枝の飽和または不飽和C8〜C16アルキル基;ヒドロキシ -OH、カルボキシ -COOR1、オキシカルボニル-(C8〜C16)アルキルおよびオキシカルボニル-(C8〜C16)アルケニルから選ばれる1つ以上の基で任意に置換されたリン酸基 -O-(HO-P=O)-O-によって中断されたC1〜C10アルキル基(ここで、R1は、水素 HまたはC1〜C4直線または分枝アルキル基である)から選ばれる;
Lは、カルボニル -C=O、チオカルボニル -C=S、アミノ -NR1-、カルボキシ -COO-、オキシ-カルボニル -OCO-、アミド -NR1CO-または-CONR1-、酸素 -O-およびイオウ -S-(ここで、R1は前記と同意義)から選ばれる原子または基で任意に置換または中断された直線または分枝基であるC1〜C6アルキルから選ばれる二価のリンカーである]
(該式(I')で示されるジアゼピンまたは式(II')で示されるテトラアザシクロドデカンは、任意に生理的に許容しうる塩の形態で、Gd(III)、Mn(II)、Cr(III)、Cu(II)、Fe(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Tb(III)、Yb(III)、Dy(III)、Ho(III)およびEr(III)から選ばれる常磁性金属イオンと任意に錯体を形成する)。 - 請求項13〜24に記載の方法にしたがってpSLNを製造するための請求項27〜28に記載の錯体の使用。
- 請求項1〜12または26に記載のpSLNを含む医薬組成物。
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