JP2015509359A - 変異tghVI対立遺伝子を含むトマト植物 - Google Patents
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Abstract
Description
−該植物は、タイプVIトリコームの腺細胞を含まないか、または少なくとも強く減少した数のタイプVIトリコームの腺細胞を有する、
−該植物は、接触時に、緑色染色を引き起こさない、
−該植物は、強く減少したレベルの揮発性物質、特にテルペン、セスキテルペンおよびアルデヒドを有する、
−該植物は、典型的なトマトの匂いを発生させないか、または典型的なトマトの匂いが少なくとも強く減少されている、および
−該植物は、フラボノイドを含まないか、または少なくとも強く減少したレベルのフラボノイドを有する。
−該植物は、タイプVIトリコームの腺細胞を含まないか、または少なくとも強く減少した数のタイプVIトリコームの腺細胞を有する、
−該植物は、接触時に、緑色染色を引き起こさない、
−該植物は、強く減少したレベルの揮発性物質、特にテルペン、セスキテルペンおよびアルデヒドを有する、
−該植物は、典型的なトマトの匂いを発生させないか、または典型的なトマトの匂いが少なくとも強く減少されている、および
−該植物は、フラボノイドを含まないか、または少なくとも強く減少したレベルのフラボノイドを有する。
a)変異tghVI対立遺伝子を含む植物を別の植物と交配すること;
b)F2植物を得るために、得られるF1を自殖すること;
c)F2においてtghVI対立遺伝子を含む植物を選択すること;
d)所望により1回以上のさらなる一連の自殖または交配を行うこと、次にtghVI対立遺伝子を含む植物を選択すること
を含む方法に関する。
a)タイプVIトリコームの腺の頭部の非存在を引き起こす変異tghVI対立遺伝子を含む植物を別の植物と交配すること;
b)所望により得られるF1を好ましい親と戻し交配すること;
c)F2において、タイプVIトリコームの腺の頭部の非存在を引き起こすtghVI対立遺伝子を含む植物を選択すること;
d)所望により1回以上のさらなる一連の自殖または交配を行うこと、次にtghVI対立遺伝子を含む植物を選択すること
を含む方法に関する。
a)寄託番号NCIMB41845の下にNCIMBで寄託された典型的な種子のtghVI対立遺伝子を含むトマト植物を、別の所望の形質を含む第2のトマト植物と交配し、F1子孫を生産すること;
b)tghVI対立遺伝子および他の所望の形質を含むF1子孫を選択すること;
c)選択されたF1子孫をいずれかの親と交配し、戻し交配子孫を生産すること;
d)他の所望の形質およびtghVI対立遺伝子を含む戻し交配子孫を選択すること;および、
e)所望により工程(c)および(d)を連続して1回以上繰り返し、他の所望の形質およびtghVI対立遺伝子を含む選択された第4以上の戻し交配子孫を生産することを含む方法をさらに提供する。本発明は、この方法により生産されるトマト植物を含む。
本発明の変異tghVI対立遺伝子を含むソラナム・リコペルシカム11R−5000の種子は、寄託受入番号NCIMB41845の下に、2011年6月13日に、NCIMB Ltd, Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen AB21 9YA, UKに寄託された。
本発明のトマト植物の作成
2つのトマト育種系であるTR306およびT029の種子を、室温で24時間、0.5%(w/v)emsの通気溶液への約10.000個の種子の浸水によりems(エチルメタンスルホネート)で処理した。
本発明の植物の表現型同定
M2トマト種子を土壌において発芽させ、小さい小植物に成長させた。次に、約7000個のランダムに選択された植物を、実生(seedling)スクリーンに移動した。
他のトマト植物への本発明の形質の導入
本発明の植物を、本発明の形質を有さない野生型(WT)トマト植物と交配した。この交配から得られたF1は、WT植物と同じ表現型を有した、すなわち、それは、接触を確立したとき緑色染色を示した。トリコームを観察したとき、F1は、腺の頭部を形成するための4つの腺細胞を有する標準タイプVIトリコームを有することを見出した。
遺伝子マッピングおよびマーカー開発
実施例3から得られた90個のF2植物集団を、800個のSNPマーカーで遺伝子型解析した。329個のこれらのSNPマーカーは確実に多型であり、緑色染色の非存在についてQTL分析を行うために使用した。単一遺伝子形質に対して予期されるとおり、1つの変異対立遺伝子は、染色体9に配置され、位置づけられた。QTLマッピングは、LODスコア41にて公開SL2.30地図のほぼ2454946bpの物理的位置に変異対立遺伝子を位置付けられることをもたらした。該位置において、変異対立遺伝子は、形質の分散の88%を説明し、これは、単一遺伝子特性を確かにする。
本発明の植物の揮発性物質分析
本発明の植物を、多くの揮発性物質について分析し、本発明の変異tghVI対立遺伝子を含まなかったトマト植物と比較した。測定されるトマト植物をプラスチックバッグに10分間置いた。次に、植物に触れ、分析される関連化合物を放出させた。次に、室温で15分間で、プラスチックバッグ内部で繊維材料をガスに導入または暴露することにより、固相微量抽出(SPME)を行った。
染色粒子の吸光度
多くのトマト植物を緑色染色について分析した。本発明の植物、本発明の変異対立遺伝子を欠いている同質遺伝子植物、野生型(標準)トマト植物およびhl(無毛)変異対立遺伝子を含む当分野の植物を含んだ(図6)。
アシル糖測定
「アシル糖」またはアシル化糖は、水に溶解しない脂肪性または粘着性化合物であることが知られているため、トマト植物からの緑色染色に恐らく寄与すると考えられていた。本発明の植物が、先行技術トマト植物と比較して、アシル糖の減少もしくは非存在を含むか否かを決定するために、実験を設計した。
本発明は、続く請求項において定義されており、以下の番号付けされた条項においてさらに記載されている:
Claims (14)
- 以下の特徴により特徴付けられるトマト植物(ソラナム・リコペルシカム(Solanum lycopersicum) L.)であって、
−該植物は、タイプVIトリコームの腺細胞を含まないか、または少なくとも強く減少した数のタイプVIトリコームの腺細胞を有する、
−該植物は、接触時に、緑色染色を引き起こさないか、または緑色染色が少なくとも強く減少されている、
−該植物は、強く減少したレベルの揮発性物質、特にテルペン、セスキテルペンおよびアルデヒドを有する、
−該植物は、典型的なトマトの匂いを発生させないか、または典型的なトマトの匂いが少なくとも強く減少されている、および
−該植物は、フラボノイドを含まないか、または少なくとも強く減少したレベルのフラボノイドを有する、
トマト植物。 - 植物が、受入番号NCIMB41845の下に寄託された典型的なサンプルの種子のゲノムにおいて存在するように、変異tghVI対立遺伝子を有し、該対立遺伝子は請求項1に定義の1つ以上の特徴、好ましくは全ての特徴を引き起こす、請求項1に記載のトマト植物。
- 受入番号NCIMB41845の下に寄託された典型的なサンプルの種子のゲノムにおいて、変異tghVI対立遺伝子が公開物理的地図(public physical map)SL2.30の位置1750800において分子SNPマーカーに連結されており、該SNPはAからGへのヌクレオチド変化である、請求項2に記載のトマト植物。
- 受入番号NCIMB41845の下に寄託された典型的なサンプルの種子から成長した植物からの変異tghVI対立遺伝子の、該対立遺伝子を有さない植物への遺伝子移入により得ることができる請求項1−3のいずれかに記載のトマト植物であって、該植物は、請求項1に定義の1つ以上の特徴、好ましくは全ての特徴を獲得している、トマト植物。
- 請求項1−4のいずれかに記載のトマト植物に成長することができるトマト種子。
- 請求項1−4のいずれかに記載のトマト植物の種子であって、該種子は少なくとも1つの変異tghVI対立遺伝子を含むが、好ましくは変異tghVI対立遺伝子についてホモ接合体である、種子。
- 請求項1−4のいずれかに記載のトマト植物または請求項5もしくは6に記載のトマト種子の子孫であって、子孫植物は少なくとも1つの変異tghVI対立遺伝子を含むが、好ましくは変異tghVI対立遺伝子についてホモ接合体である、子孫。
- 請求項1−4および7のいずれかに記載の植物または請求項5もしくは6に記載の種子を生産するために適当な繁殖物質であって、該繁殖物質は、有性生殖のために適当であり、特に小胞子、花粉、子房、胚珠、胚嚢および卵細胞から選択されるか、または栄養生殖のために適当であり、特に切片(cutting)、根、茎、細胞、プロトプラストから選択されるか、または再生可能な細胞の組織培養のために適当であり、特に葉、花粉、胚、子葉、胚軸、分裂組織細胞、根、根端、葯、花、種子および茎から選択され、繁殖物質から生産される植物は少なくとも1つの変異tghVI対立遺伝子を含むが、好ましくは変異tghVI対立遺伝子についてホモ接合体である、繁殖物質。
- 請求項1に定義の1つ以上の特徴、好ましくは全ての特徴により特徴付けられる、請求項7に記載のトマト植物。
- 請求項1−4および7のいずれかに記載の植物のトマト果実。
- 所望により加工された形態における、請求項10に記載のトマト果実またはその一部を含む食品。
- 請求項1−4、7および9のいずれかに記載のトマト植物、または請求項5もしくは6に記載の種子または請求項8に記載の繁殖物質から生産される植物の使用であって、変異tghVI対立遺伝子を含み、請求項1に定義の1つ以上の特徴、好ましくは全ての特徴により特徴付けられるトマト植物の開発のための育種計画における生殖質としての使用。
- 請求項1に定義の1つ以上の特徴、好ましくは全ての特徴により特徴付けられる、トマト植物の開発のための変異tghVI対立遺伝子の使用。
- 変異tghVI対立遺伝子を含み、請求項1に定義の1つ以上の特徴、好ましくは全ての特徴により特徴付けられるトマト植物の開発のための公開物理的地図SL2.30の位置1750800に位置する分子マーカーの使用であって、該マーカーは、AからGへのヌクレオチド変化を含むSNPマーカーである、使用。
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