JP2015216875A - Food bacterium separation/concentration apparatus and food bacterium separation/concentration method - Google Patents

Food bacterium separation/concentration apparatus and food bacterium separation/concentration method Download PDF

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真 金政
明子 種田
Akiko Taneda
明子 種田
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Satoru Matsumura
覚 松村
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a food bacterium separation/concentration apparatus and a food bacterium separation/concentration method.SOLUTION: A food bacterium separation/concentration apparatus (100) is provided, which includes: a sending container (1) for food and drink (f); a first filtration part (2) to which the food and drink (f) to be sent are sent, and by which at least a part of a solid content contained in the food and drink is removed; a second filtration part (3) to which a first filtrate (L1) filtered by the first filtration part is sent, and which captures at least the bacteria of bacteria and spores contained in the food and drink (f); a first pipeline (5) for connecting the first filtration part (2) and the second filtration part (3) to each other; a second pipeline (6) for discharging a second filtrate (L2) filtered by the second filtration part (3); a back washing water sending container (4) for sending back washing water (w) to the second filtration part (3); and flow path switching means (5a) for switching between the flow path of the first filtrate (L1) and the flow path of the back washing water (w). Also provided is a food bacterium separation/concentration method which uses the food bacterium separation/concentration apparatus and the like.

Description

本発明は食品細菌の分離濃縮装置及び食品細菌の分離濃縮方法に関する。更に詳しくは、本発明は、飲食物から固形分の多くを濾材により除去し、その後、濾液を食品細菌が通過しない濾材によって捕捉し、これを逆洗水により濾材から脱離させ、捕集し、採取する食品細菌の分離濃縮装置及び食品細菌の分離濃縮方法に関する。   The present invention relates to a food bacteria separation and concentration apparatus and a food bacteria separation and concentration method. More specifically, the present invention removes much of the solid content from food and drink with a filter medium, and then captures the filtrate with a filter medium through which food bacteria do not pass, and desorbs it from the filter medium with backwash water and collects it. The invention relates to an apparatus for separating and concentrating food bacteria to be collected and a method for separating and concentrating food bacteria.

飲食物は、細菌及び一部の細菌が形づくる芽胞による汚染とその増殖により、味や風味が損なわれ、価値が低下する。更に、食中毒細菌による汚染が生じた場合は、食中毒の原因になることが懸念される。飲食物の細菌等による汚染及びその増殖は、原料の汚染、食品加工施設、設備及び器具の汚染、加工業務従事者の汚染に加えて、洗浄、加熱、保存、流通、販売などの工程の不具合によって発生する。いずれにしても、飲食物の品質低下及び食中毒の発生を防止するためには、予め当該飲食物の生産から消費に至る全工程について細菌の汚染や増殖の可能性を把握したうえで、当該飲食物のみならず、各工程での細菌の数、種類を検査して品質を管理しておく必要がある。   Foods and drinks are deteriorated in taste and flavor due to contamination by bacteria and spores formed by some bacteria and their growth, and the value of food and drink is reduced. Furthermore, when contamination by food poisoning bacteria occurs, there is a concern that it may cause food poisoning. Contamination of food and beverages due to bacteria, etc., and their growth, in addition to contamination of raw materials, contamination of food processing facilities, equipment and tools, contamination of processing workers, defects in processes such as washing, heating, storage, distribution and sales Caused by. In any case, in order to prevent the quality of food and drink from being deteriorated and the occurrence of food poisoning, the possibility of contamination and growth of bacteria in all the processes from production and consumption of the food and drink is determined in advance. It is necessary to control the quality by inspecting not only the product but also the number and type of bacteria in each process.

検査には各種の方法があるが、食品衛生法には、食品の安全性を確保するために、微生物の規格及びその試験法が定められており、最終製品の抜き取り検査ではこの試験法が実施される場合が多い。しかし、このような公定法による検査のみでなく、工程管理の過程で微生物汚染の発生をより即時的に検出できる試験法が望まれ、自主検査として、迅速あるいは簡便な試験法による検査が行われている。例えば、食品衛生法に基づいた検査方法にも掲載されている発色・発光酵素基質法は、短期間で検査することができ、且つコストも低いため、日常的な自主的な検査に適した方法である。   There are various methods for inspection, but the Food Sanitation Law has established standards and test methods for microorganisms in order to ensure food safety. This test method is used for sampling final products. Often done. However, in addition to such inspections by official methods, a test method that can more immediately detect the occurrence of microbial contamination in the process control process is desired, and as a self-inspection, inspections are performed quickly or simply using a test method. ing. For example, the chromogenic / luminescent enzyme substrate method published in the inspection method based on the Food Sanitation Law can be inspected in a short period of time and is low in cost, so it is suitable for daily voluntary inspection. It is.

また、飲食物ではなく、水道水並びにその原水の河川、湖沼などの試料水中の微生物、特に耐塩素性病原性微生物の回収に、中空糸膜及びメンブランフィルターを用いる方法が知られている(例えば、特許文献1、2参照。)。これらの回収方法では、中空糸膜によって試料水中の対象微生物を分離、濃縮し、濃縮された対象微生物を逆洗によって中空糸膜から剥離させ、その後、対象微生物が濃縮された逆洗溶液をメンブランフィルターに導入し、対象微生物を更に分離、濃縮して回収する。   In addition, a method using a hollow fiber membrane and a membrane filter is known for recovering microorganisms, particularly chlorine-resistant pathogenic microorganisms in sample water such as rivers and lakes in tap water and its raw water, not food and drink (for example, Patent Documents 1 and 2). In these recovery methods, the target microorganism in the sample water is separated and concentrated by the hollow fiber membrane, the concentrated target microorganism is separated from the hollow fiber membrane by backwashing, and then the backwash solution in which the target microorganism is concentrated is used as the membrane. It is introduced into a filter, and the target microorganism is further separated, concentrated and recovered.

特開2004−97087号公報JP 2004-97087 A 特開2005−143379号公報JP 2005-143379 A

特許文献1、2では、対象微生物が分離、濃縮されるのが飲食物からではなく、水道水並びにその原水の河川、湖沼などの飲料水からである。このように、分離、濃縮の対象が水であるため、飲食物のように多くの固形分が含有されてはいない。そのため、中空糸膜及びメンブランフィルターはともに対象微生物の分離、濃縮に用いられている。一方、飲食物には多くの固形分が含有されており、これまで飲食物(飲食物のけん濁液を含む)の固形分を十分に除去しないままでの、食品細菌等のフィルターによる分離、濃縮は困難であった。従って、飲食物に含有される食品細菌等の定性、定量分析の精度が高いとは言えず、固形分の除去及び細菌等の分離、濃縮による精度向上が必要とされていた。   In Patent Documents 1 and 2, the target microorganisms are separated and concentrated not from food or drink but from drinking water such as tap water and rivers and lakes of the raw water. Thus, since the object of isolation | separation and concentration is water, many solid content is not contained like food and drink. Therefore, both hollow fiber membranes and membrane filters are used for separation and concentration of target microorganisms. On the other hand, foods and drinks contain a lot of solids, so far, the solids of foods and drinks (including suspensions of foods and drinks) have not been sufficiently removed and separated by filters such as food bacteria, Concentration was difficult. Therefore, it cannot be said that the accuracy of qualitative analysis and quantitative analysis of food bacteria contained in food and drink is high, and it is necessary to improve the accuracy by removing solids and separating and concentrating bacteria.

本発明は上述のような従来技術の状況に鑑みてなされたものであり、飲食物から固形分の多くを食品細菌が通過する濾材により除去し、その後、濾液を食品細菌が通過しない濾材によって捕捉し、これを逆洗水により濾材から脱離させ、捕集し、採取する食品細菌の分離濃縮装置及び食品細菌の分離濃縮方法を提供することを課題とする。   The present invention has been made in view of the state of the prior art as described above, and removes most of the solid content from food and drink with a filter medium through which food bacteria pass, and then captures the filtrate with a filter medium through which food bacteria do not pass. It is another object of the present invention to provide a food bacteria separation and concentration device and a food bacteria separation and concentration method for separating the food bacteria from the filter medium by backwashing water, collecting the collected bacteria, and collecting the food bacteria.

本発明は以下のとおりである。
1.飲食物の送出容器と、
前記送出容器から送出される前記飲食物が送り込まれ、前記飲食物に含有されていた固形分の少なくとも一部が除去される第1濾過部と、
前記第1濾過部により濾過された第1濾液が送り込まれ、前記飲食物に含有されていた食品細菌及び芽胞のうちの少なくとも食品細菌が捕捉される第2濾過部と、
前記第1濾過部と前記第2濾過部とを接続する第1配管と、
前記第2濾過部により濾過された第2濾液を排出するための第2配管と、
前記第2配管に配設され、前記第2濾過部に逆洗水を送り込むための逆洗水送出容器と、
前記第1配管に配設され、前記第1濾液と前記逆洗水の各々の流路を切り替えるための流路切替手段と、
前記第2配管に配設され、前記第2濾液を排液するときには開けられ、前記逆洗水を前記第2濾過部に送り込むときには閉じられるバルブと、を備えることを特徴とする食品細菌の分離濃縮装置。
2.前記第1濾過部に設けられた濾材を前記飲食物に含有される前記固形分の特徴に従って選択し交換することができ、前記第1濾過部に設けられた濾材、及び前記第2濾過部に設けられた濾材のうちの少なくとも一方が中空糸フィルターである前記1.に記載の食品細菌の分離濃縮装置。
3.前記飲食物及び前記逆洗水のうちの少なくとも一方に界面活性剤が配合されている前記1.又は2.に記載の食品細菌の分離濃縮装置。
4.飲食物を第1濾過部に送り込み、前記飲食物に含有されていた固形分の少なくとも一部を除去する固形分除去工程と、
前記第1濾過部より送出される濾液を第2濾過部に送り込み、前記飲食物に含有されていた食品細菌及び芽胞のうちの少なくとも食品細菌を捕捉する細菌捕捉工程と、
前記第2濾過部に設けられた濾材に捕捉された前記食品細菌及び前記芽胞のうちの少なくとも前記食品細菌を、逆洗水により前記濾材から脱離させ、前記食品細菌及び前記芽胞のうちの少なくとも前記食品細菌の濃縮液を得る濃縮液調製工程と、を備えることを特徴とする食品細菌の分離濃縮方法。
5.前記第1濾過部に設けられた濾材を前記飲食物に含有される前記固形分の特徴に従って選択し交換することができ、前記第1濾過部に設けられた濾材、及び前記第2濾過部に設けられた濾材のうちの少なくとも一方が中空糸フィルターである前記4.に記載の食品細菌の分離濃縮方法。
6.前記飲食物及び前記逆洗水のうちの少なくとも一方に界面活性剤が配合されている前記4.又は5.に記載の食品細菌の分離濃縮方法。
The present invention is as follows.
1. A delivery container for food and drink;
A first filtration unit in which the food and drink delivered from the delivery container is fed, and at least part of the solid content contained in the food and drink is removed;
The first filtrate filtered by the first filtration unit, and the second filtration unit captures at least food bacteria out of food bacteria and spores contained in the food and drink;
A first pipe connecting the first filtration unit and the second filtration unit;
A second pipe for discharging the second filtrate filtered by the second filtration unit;
A backwash water delivery container disposed in the second pipe for feeding backwash water into the second filtration unit;
A flow path switching means disposed in the first pipe for switching the flow paths of the first filtrate and the backwash water;
A food bacteria separation comprising: a valve disposed in the second pipe and opened when the second filtrate is drained and closed when the backwash water is fed into the second filtration unit. Concentrator.
2. The filter medium provided in the first filtration part can be selected and exchanged according to the characteristics of the solid content contained in the food and drink, the filter medium provided in the first filtration part, and the second filtration part The above 1. wherein at least one of the provided filter media is a hollow fiber filter. Separation and concentration apparatus for food bacteria according to 1.
3. A surfactant is blended in at least one of the food and drink and the backwash water. Or 2. Separation and concentration apparatus for food bacteria according to 1.
4). A solid content removing step of feeding food and drink into the first filtration unit and removing at least a part of the solid content contained in the food and drink,
Bacteria capture step of sending the filtrate sent from the first filtration unit to the second filtration unit and capturing at least food bacteria out of food bacteria and spores contained in the food and drink,
At least the food bacteria out of the food bacteria and the spores captured by the filter medium provided in the second filtration unit are detached from the filter medium by backwashing water, and at least the food bacteria and the spores are removed. A method for separating and concentrating food bacteria, comprising a step of preparing a concentrate for obtaining the food bacteria concentrate.
5. The filter medium provided in the first filtration part can be selected and exchanged according to the characteristics of the solid content contained in the food and drink, the filter medium provided in the first filtration part, and the second filtration part 3. The above-mentioned 4. wherein at least one of the provided filter media is a hollow fiber filter. A method for separating and concentrating food bacteria according to 1.
6). 3. The surfactant described above is blended in at least one of the food and drink and the backwash water. Or 5. A method for separating and concentrating food bacteria according to 1.

本発明の食品細菌の分離濃縮装置は、飲食物に含有されていた固形分の少なくとも一部が除去される第1濾過部と、飲食物に含有されていた食品細菌及び芽胞のうちの少なくとも食品細菌(以下、食品細菌等と略記する。)が捕捉される第2濾過部とを備え、第2濾過部に逆洗水が送り込まれる。
このような構成であることにより、飲食物における食品細菌等の定性、定量分析に供される検体から分析の精度に影響を及ぼすような寸法の大きい固形分が除去されているため、分析の精度を高めることができる。また、固形分が除去された第1濾液が第2濾過部に送り込まれて食品細菌等が捕捉され、これを逆洗水により逆洗した液を検体として用いる。そのため、飲食物に含有される食品細菌等が極めて効率よく分離され、濃縮された検体とすることができ、分析の精度をより高めることができる。
また、第1濾過部に設けられた濾材、及び第2濾過部に設けられた濾材のうちの少なくとも一方が中空糸フィルターである場合は、飲食物から効率よく固形分を除去することができ、第1濾液における食品細菌等を効率よく捕捉することもできる。
更に、飲食物及び逆洗水のうちの少なくとも一方に界面活性剤が配合されている場合は、界面活性剤の種類にもよるが、第2濾過部に設けられた濾材に捕捉された食品細菌等を効率よく逆洗することができ、飲食物に含有されていた食品細菌等を効率よく分離し、濃縮することができる。また、飲食物に界面活性剤が配合されている場合は、界面活性剤の種類にもよるが、第1濾過部での固形分除去及び食品細菌等の濾材通過を効率よく行うことができる。
The apparatus for separating and concentrating food bacteria according to the present invention includes a first filtration unit from which at least a part of solids contained in food and drink is removed, and at least food of food bacteria and spores contained in food and drink. And a second filtration part that captures bacteria (hereinafter abbreviated as food bacteria and the like), and backwash water is fed into the second filtration part.
Because of this configuration, qualitative analysis such as food bacteria in food and drink, solids with large dimensions that affect the accuracy of the analysis are removed from the specimen used for quantitative analysis, so the accuracy of the analysis Can be increased. Moreover, the 1st filtrate from which solid content was removed is sent into a 2nd filtration part, food bacteria etc. are capture | acquired, and the liquid which back-washed this with backwash water is used as a test substance. Therefore, food bacteria contained in food and drink can be separated very efficiently and a concentrated sample can be obtained, and the accuracy of analysis can be further improved.
Moreover, when at least one of the filter medium provided in the first filtration part and the filter medium provided in the second filtration part is a hollow fiber filter, the solid content can be efficiently removed from the food and drink, Food bacteria and the like in the first filtrate can also be efficiently captured.
Furthermore, when a surfactant is blended in at least one of the food and drink and the backwash water, depending on the type of the surfactant, the food bacteria captured by the filter medium provided in the second filtration unit Etc. can be backwashed efficiently, and food bacteria contained in food and drink can be efficiently separated and concentrated. Moreover, when a surfactant is blended in food and drink, although depending on the type of the surfactant, it is possible to efficiently remove the solid content in the first filtration part and pass through the filter medium such as food bacteria.

本発明の食品細菌の分離濃縮方法は、第1濾過部における固形分除去工程と、第2濾過部における細菌捕捉工程と、第2濾過部において捕捉された食品細菌等を逆洗して食品細菌等の濃縮液を得る濃縮液調製工程とを備える。
このような構成であることにより、固形分が除去された濾液から食品細菌等が効率よく捕捉され、これを逆洗によって捕集するため、飲食物からの食品細菌等の分離、濃縮が効率よくなされ、飲食物における食品細菌等の定性、定量の分析の精度を高めることができる。
また、第1濾過部に設けられた濾材、及び第2濾過部に設けられた濾材のうちの少なくとも一方が中空糸フィルターである場合、及び飲食物及び逆洗水のうちの少なくとも一方に界面活性剤が配合されている場合は、上述の分離濃縮装置のときと同様の作用、効果が奏される。
The method for separating and concentrating food bacteria according to the present invention includes a solid content removal step in the first filtration unit, a bacteria capture step in the second filtration unit, and food bacteria captured in the second filtration unit by backwashing the food bacteria. And a concentrated solution preparation step for obtaining a concentrated solution.
With such a configuration, food bacteria and the like are efficiently captured from the filtrate from which the solid content has been removed, and this is collected by backwashing. Therefore, separation and concentration of food bacteria and the like from food and drink are efficient. Thus, it is possible to improve the qualitative and quantitative analysis accuracy of food bacteria and the like in food and drink.
Moreover, when at least one of the filter medium provided in the 1st filtration part and the filter medium provided in the 2nd filtration part is a hollow fiber filter, and at least one of food and drink and backwash water is surface active. When the agent is blended, the same actions and effects as in the above-described separation and concentration apparatus are exhibited.

食品細菌の分離濃縮装置の構成を説明するための模式的な正面図である。It is a typical front view for demonstrating the structure of the isolation | separation concentration apparatus of food bacteria.

[1]食品細菌の分離濃縮装置
本発明の食品細菌の分離濃縮装置(100)は、飲食物(f)の送出容器(1)と、送出容器(1)から送出される飲食物(f)が送り込まれ、飲食物(f)に含有されていた固形分の少なくとも一部が除去される第1濾過部(2)とを備える。また、第1濾過部(2)により濾過された第1濾液(L1)が送り込まれ、飲食物(f)に含有されていた食品細菌及び芽胞のうちの少なくとも食品細菌が捕捉される第2濾過部(3)を備える。
[1] Food Bacteria Separation / Concentration Device The food bacteria separation / concentration device (100) of the present invention includes a food and drink (f) delivery container (1) and a food and drink (f) delivered from the delivery container (1). And a first filtration part (2) from which at least a part of the solid content contained in the food and drink (f) is removed. Moreover, the 1st filtrate (L1) filtered by the 1st filtration part (2) is sent in, and the 2nd filtration by which at least food bacteria are captured among food bacteria and spores contained in food and drink (f). Part (3).

更に、第1濾過部(2)と第2濾過部(3)とを接続する第1配管(5)と、第2濾過部(3)により濾過された第2濾液(L2)を排出するための第2配管(6)とを備える。また、第2配管(6)に配設され、第2濾過部(3)に逆洗水(w)を送り込むための逆洗水送出容器(4)を備える。更に、第1配管(5)に配設され、第1濾液(L1)と逆洗水(w)の各々の流路を切り替えるための流路切替手段(5a)と、第2配管(6)に配設され、第2濾液(L2)を排液するときには開けられ、逆洗水(w)を第2濾過部(3)に送り込むときには閉じられるバルブ(6a)とを備える。   Furthermore, in order to discharge | emit the 1st piping (5) which connects a 1st filtration part (2) and a 2nd filtration part (3), and the 2nd filtrate (L2) filtered by the 2nd filtration part (3). 2nd piping (6). Moreover, it is arrange | positioned by the 2nd piping (6) and is equipped with the backwash water delivery container (4) for sending backwash water (w) into the 2nd filtration part (3). Furthermore, a flow path switching means (5a) disposed in the first pipe (5) for switching the flow paths of the first filtrate (L1) and the backwash water (w), and the second pipe (6) And a valve (6a) that is opened when the second filtrate (L2) is drained and closed when the backwash water (w) is sent to the second filtration part (3).

以下、図1を参照しながら本発明の食品細菌の分離濃縮装置について詳しく説明する。
含有の有無、及び含有されているときは、その含有量を分析し、検査すべき対象となる食品細菌の衛生指標菌検査としては、一般生菌数、芽胞数、乳酸菌数、大腸菌群、大腸菌、腸球菌、緑膿菌の測定がある。食中毒病原微生物の検査としては、腸管出血性大腸菌O−157を含む病原大腸菌、黄色ブドウ球菌、サルモネラ属菌、クロストリジウム属菌のウエルシュ菌及びボツリヌス菌、ビブリオ属菌の腸炎ビブリオ、ナグビブリオ、ビブリオ・ミミカス、ビブリオ・フルビアリス及びビブリオ・コレラ、プロジオモナス・シゲロイデス、セレウス菌、キャンピロバクター属菌、エルシニア・エンテロコリチカ、リステリア・モノサイトゲネス、赤痢菌、チフス菌、パラチフスA菌の測定がある。これらの菌のうちでは、黄色ブドウ球菌のように、厚生労働省が定めた食品衛生法において検出されないことが望ましいとされている菌もあるものの、多くは検出されてはならないとされており、このような観点でも検査の精度を高める必要がある。また、食品製造者の工程管理において行われる自主検査でも、迅速な精度の高い検査が求められている。
Hereinafter, the food bacteria separation and concentration apparatus of the present invention will be described in detail with reference to FIG.
The presence or absence of content, and when it is contained, the content is analyzed, and the hygienic indicator test for food bacteria to be tested includes general viable count, spore count, lactic acid count, coliform group, coliform There are measurements of enterococci and Pseudomonas aeruginosa. As a test for food poisoning pathogenic microorganisms, pathogenic Escherichia coli including enterohemorrhagic Escherichia coli O-157, Staphylococcus aureus, Salmonella spp., Clostridium spp. , Vibrio fulviaris and Vibrio cholera, Progiomonas sigueloides, Bacillus cereus, Campylobacter spp., Yersinia enterocolitica, Listeria monocytogenes, Shigella, Salmonella typhi, and Paratyphi A. Among these bacteria, there are some bacteria, such as Staphylococcus aureus, that are preferably not detected in the Food Sanitation Law established by the Ministry of Health, Labor and Welfare, but many must not be detected. From such a viewpoint, it is necessary to increase the accuracy of the inspection. In addition, even in the self-inspection performed in the process control of the food manufacturer, a quick and highly accurate inspection is required.

また、飲食物(f)には食品細菌の他、一部の菌が形づくる芽胞も含有されていないことが好ましい。このような芽胞を形づくる菌としては、アンフィバチルス属、バチルス属、クロストリジウム属、スポロサルシナ属等の菌が挙げられる。芽胞は耐熱性が高く、高温で処理しても完全に不活化することができず、芽胞による飲食物(f)の汚染も多いため、芽胞も検出されないことが好ましい。   Moreover, it is preferable that the food / beverage (f) does not contain the spore which a part microbe forms other than food bacteria. Examples of the bacteria that form such spores include bacteria of the genus Amphibacillus, Bacillus, Clostridium, Sporosarcina. It is preferable that spores are not detected because the spores have high heat resistance and cannot be completely inactivated even when treated at high temperature, and the food and drink (f) is often contaminated by the spores.

飲食物(f)は特に限定されず、人が摂取する全ての飲食物(その原料、工程品及び食品製造用水等も含まれる。)が検査対象となる。飲食物(f)が飲物であるときは、そのまま飲食物(f)の送出容器(1)に収容し、第1濾過部(2)へと送出することができる。また、飲食物(f)が固形又は半固形の食物であるときは、これに質量比で5〜15倍、特に8〜12倍の生理食塩水等の液分を加え、ストマッカー処理等によって食物を粉砕し、その後、送出容器(1)に収容し、第1濾過部(2)へと送出する。尚、ストマッカー処理等をする場合、食物に含有されていた水等の液分が生理食塩水等に混入するが、この液分は、そのまま後述する第1濾液(L1)及び第2濾液(L2)に含有され、生理食塩水等とともに排液されることになる。   The food / drink (f) is not particularly limited, and all food / drinks ingested by humans (including raw materials, process products, water for food production, etc.) are to be examined. When the food and drink (f) is a drink, it can be stored in the delivery container (1) for the food and drink (f) as it is and sent to the first filtration section (2). In addition, when the food and drink (f) is a solid or semi-solid food, a liquid such as a physiological saline solution having a mass ratio of 5 to 15 times, particularly 8 to 12 times, is added to the food and food by stomacher treatment or the like. Is then pulverized, then accommodated in the delivery container (1) and delivered to the first filtration section (2). In addition, when a stomacher treatment or the like is performed, a liquid component such as water contained in food is mixed into physiological saline or the like, and this liquid component is directly used in the first filtrate (L1) and the second filtrate (L2) described later. ) And drained together with physiological saline and the like.

送出容器(1)は特に限定されず、所定量の飲食物(f)を収容することができ、且つ上部空間を加圧することにより飲食物(f)を第1濾過部(2)へと送出することができる容器を用いることができる。送出容器(1)としては、例えば、注射器が挙げられる。注射器であれば、正確な目盛りが付されており、容易に所定量の飲食物(f)を吸入することができるとともに、第1濾過部(2)への飲食物(f)の送出量の確認もし易いため好ましい。更に、注射器のプランジャーの動きを制御すことのできる駆動部を取り付ければ、自動化が可能である。   The delivery container (1) is not particularly limited, and a predetermined amount of food (f) can be accommodated, and the food (f) is delivered to the first filtration unit (2) by pressurizing the upper space. Containers that can be used can be used. As a delivery container (1), a syringe is mentioned, for example. If it is a syringe, it has an accurate scale, and can easily inhale a predetermined amount of food and drink (f), and the amount of food and drink (f) delivered to the first filtration unit (2). It is preferable because it is easy to check. Furthermore, automation is possible by attaching a drive that can control the movement of the plunger of the syringe.

送出容器(1)から飲食物(f)が送り込まれる第1濾過部(2)は、第1濾過部(2)に飲食物(f)を送り込むため、送出容器(1)の端部に形成された送出口が接続される送入口が設けられた外装容器を備える。外装容器の材質は特に限定されず、各種の合成樹脂又は金属等が用いられる。また、外装容器の内部には濾材(2a)が配設されており、送入口から送り込まれた飲食物(f)が濾過され、第1濾液(L1)が外装容器の送出口から送出され、第1配管(5)を流通して第2濾過部(3)に送り込まれる。   The 1st filtration part (2) into which food and drink (f) is sent from the delivery container (1) is formed at the end of the delivery container (1) in order to feed the food and drink (f) into the first filtration part (2). And an outer container provided with a delivery port to which the delivered delivery port is connected. The material of the outer container is not particularly limited, and various synthetic resins or metals are used. Moreover, the filter medium (2a) is disposed inside the outer container, the food and drink (f) sent from the inlet is filtered, and the first filtrate (L1) is sent out from the outlet of the outer container, It circulates through the first pipe (5) and is sent to the second filtration part (3).

第1濾過部(2)では、飲食物(f)に含有されていた固形分のうちの少なくとも一部が除去される。この少なくとも一部とは、寸法の大きい固形分、即ち、分析の精度の観点で夾雑物となる固形分は濾材(2a)を透過せず、捕捉されるという意味である。一方、固形分であっても、濾材(2a)を透過する寸法の小さい固形分であり、分析精度に大きな影響を及ぼすことのない固形分は濾材(2a)を透過し、第1濾液(L1)に含有されて食品細菌等とともに第2濾過部(3)に送り込まれる。   At a 1st filtration part (2), at least one part of the solid content contained in food and drink (f) is removed. This at least a part means that a solid content having a large size, that is, a solid content that becomes a contaminant from the viewpoint of accuracy of analysis does not pass through the filter medium (2a) and is captured. On the other hand, even if it is solid content, it is solid content with a small dimension which permeate | transmits a filter medium (2a), and solid content which does not have big influence on analysis precision permeate | transmits a filter medium (2a), and the 1st filtrate (L1 ) And sent to the second filtration unit (3) together with food bacteria and the like.

上述のように、夾雑物と言える固形分は可能な限り除去され、食品細菌等は好ましくは全量が濾材(2a)を透過するような第1濾過部(2)とするためには、濾材(2a)の目開きは5〜50μm、特に6〜20μm、更に8〜12μmであることが好ましい。また、食品細菌等を濾材(2a)を透過させることができる割合は、濾材(2a)を通過した飲食物(f)の細菌数を計測し、濾材(2a)を通過する前の飲食物(f)の細菌数に対する割合を算出することにより確認することができる。また、濾材(2a)は飲食物(f)に含有される固形分の特徴に従って選択し、交換することができる。   As described above, in order to obtain a first filtration part (2) in which solid content that can be said to be a contaminant is removed as much as possible and food bacteria and the like preferably pass through the filter medium (2a), the filter medium ( The opening of 2a) is preferably 5 to 50 μm, particularly 6 to 20 μm, and more preferably 8 to 12 μm. Moreover, the ratio which can permeate | transmit foodstuff bacteria etc. through a filter medium (2a) measures the number of bacteria of the food / beverage (f) which passed the filter medium (2a), and the food / beverage before passing the filter medium (2a) ( This can be confirmed by calculating the ratio of f) to the number of bacteria. Moreover, a filter medium (2a) can be selected and replaced | exchanged according to the characteristic of solid content contained in food and drink (f).

第2濾過部(3)も外装容器を備え、この外装容器の内部には濾材(3a)が配設されている。外装容器の材質は特に限定されず、第1濾過部(2)と同様に、各種の合成樹脂又は金属等が用いられる。更に、外装容器には第1配管(5)の端部が接続されており、流路切替手段(5a)の流路設定によって、第1濾液(L1)が第2濾過部(3)に送り込まれる。また、濾材(3a)により濾過された第2濾液(L2)は第2配管(6)を流通し、排液される。この場合、バルブ(6a)は開かれている。   The second filtration unit (3) also includes an exterior container, and a filter medium (3a) is disposed inside the exterior container. The material of an exterior container is not specifically limited, Various synthetic resins or metals are used similarly to the 1st filtration part (2). Furthermore, the end portion of the first pipe (5) is connected to the outer container, and the first filtrate (L1) is sent to the second filtration unit (3) by the channel setting of the channel switching means (5a). It is. Moreover, the 2nd filtrate (L2) filtered by the filter medium (3a) distribute | circulates the 2nd piping (6), and is drained. In this case, the valve (6a) is open.

第2濾過部(3)では、第1濾液(L1)に含有されていた食品細菌等が捕捉される。また、濾材(2a)を透過し、第1濾液(L1)に含有されていた小寸法の固形分のうちの少なくとも一部も捕捉される。この第2濾過部(3)では、食品細菌等は可能な限り濾材(3a)に捕捉されることが好ましく、食品細菌等の全量が濾材(3a)に捕捉され、排液となる第2濾液(L2)には食品細菌等は含有されていないことが好ましい。このように、食品細菌等の好ましくは全量が濾材(3a)に捕捉されるような第2濾過部(3)とするためには、濾材(3a)の目開きは0.001〜0.5μm、特に0.05〜0.45μm、更に0.10〜0.45μmであることが好ましい。更に、食品細菌等が濾材(3a)に捕捉される割合は、濾材(3a)を通過した飲食物(f)(廃液)の細菌数を計測し、濾材(3a)を通過する前の飲食物(f)の細菌数に対する割合を算出することにより確認することができる。   In the second filtration unit (3), food bacteria and the like contained in the first filtrate (L1) are captured. Moreover, at least a part of the small-sized solid content that has passed through the filter medium (2a) and contained in the first filtrate (L1) is also captured. In the second filtration part (3), it is preferable that food bacteria and the like are captured by the filter medium (3a) as much as possible, and the whole amount of food bacteria and the like is captured by the filter medium (3a) and becomes the second filtrate. (L2) preferably contains no food bacteria or the like. As described above, in order to obtain the second filtration part (3) in which the whole amount of food bacteria and the like is preferably captured by the filter medium (3a), the opening of the filter medium (3a) is 0.001 to 0.5 μm. In particular, it is preferably 0.05 to 0.45 μm, more preferably 0.10 to 0.45 μm. Furthermore, the rate at which food bacteria and the like are captured by the filter medium (3a) is determined by measuring the number of bacteria in the food (f) (waste liquid) that has passed through the filter medium (3a), and the food and drink before passing through the filter medium (3a). This can be confirmed by calculating the ratio of (f) to the number of bacteria.

濾材(2a)及び濾材(3a)の形態としては、中空糸、糸巻、ロール、プリーツ及びディスク(平膜)タイプが挙げられる。これらの濾材の各々の材質は特に限定されない。濾材の材質としては、ポリエチレン、ポリプロピレン等のポリオレフィン樹脂、ナイロン6、ナイロン66等のポリアミド系樹脂などが挙げられる。また、コットン、グラスファイバー等を用いてなる不織布及びネット素材を使用することもできる。更に、精密なろ過を行う濾材(3a)の場合は、孔径を均一に調製することができるポリエーテルスルフォン、ポリスルフォン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリビニリデンフロライド、ポリカーボネート、酢酸セルロースなどの樹脂素材を単独あるいは、不織布、ネット素材と組み合わせて使用することができる。   Examples of the form of the filter medium (2a) and the filter medium (3a) include hollow fiber, bobbin, roll, pleat and disk (flat membrane) types. The material of each of these filter media is not particularly limited. Examples of the material of the filter medium include polyolefin resins such as polyethylene and polypropylene, and polyamide resins such as nylon 6 and nylon 66. Moreover, the nonwoven fabric and net material which use cotton, glass fiber, etc. can also be used. Furthermore, in the case of the filter medium (3a) for performing precise filtration, resin materials such as polyether sulfone, polysulfone, polytetrafluoroethylene, polyvinylidene fluoride, polycarbonate, and cellulose acetate that can uniformly prepare the pore diameter are used. It can be used alone or in combination with a nonwoven fabric or a net material.

濾材(2a)及び濾材(3a)としては、前出のいずれの形態のいずれの材質の濾材を用いてもよい。濾材(2a)及び濾材(3a)として、前出のいずれの形態のいずれの材質の濾材を用いるかは、濾材(2a)による飲食物(f)に含有される固形分の除去効率、及び濾材(3a)による食品細菌等の捕捉効率、及び逆洗水による濾材(3a)からの食品細菌等の脱離効率などの観点で、選択して使用することが好ましい。   As the filter medium (2a) and the filter medium (3a), the filter medium of any material in any of the above forms may be used. The filter medium (2a) and the filter medium (3a) are used in any of the above forms of the filter medium, the removal efficiency of the solid content contained in the food and drink (f) by the filter medium (2a), and the filter medium It is preferable to select and use from the viewpoints of the capture efficiency of food bacteria and the like by (3a) and the elimination efficiency of food bacteria and the like from the filter medium (3a) by backwash water.

第2配管(6)には第2濾過部(3)に逆洗水(w)を送り込むための逆洗水送出容器(4)が配設される。この逆洗水送出容器(4)は、第2濾過部(3)の外装容器に接続された第2配管(6)の端部に配設され、第2濾過部(3)に逆洗水(w)が送り込まれる。逆洗水送出容器(4)は特に限定されず、上部空間を加圧することにより逆洗水(w)を第2濾過部(3)へと送出することができ、且つ所定量の逆洗水(w)を第2濾過部(3)に送り込むことができる容器を用いることができる。   The second pipe (6) is provided with a backwash water delivery container (4) for feeding backwash water (w) to the second filtration section (3). The backwash water delivery container (4) is disposed at the end of the second pipe (6) connected to the outer container of the second filtration part (3), and the backwash water is supplied to the second filtration part (3). (W) is sent. The backwash water delivery container (4) is not particularly limited, and the backwash water (w) can be sent to the second filtration unit (3) by pressurizing the upper space, and a predetermined amount of backwash water is provided. A container capable of feeding (w) into the second filtration part (3) can be used.

逆洗水送出容器(4)としては、例えば、注射器が挙げられる。注射器であれば、正確な目盛りが付されており、容易に所定量の逆洗水(w)を第2濾過部(3)に送り込むことができるため好ましい。更に、注射器のプランジャーの動きを制御することのできる駆動部を取り付ければ、逆洗の自動化が可能である。逆洗水(w)としては、生理食塩水、イオン交換水、蒸留水の他、食品衛生法で規定されているペプトン加生理食塩水、リン酸緩衝希釈水、リン酸緩衝生理食塩水等を用いることができる。また、第2濾過部(3)に逆洗水(w)を送り込むことにより、濾材(3a)に捕捉されていた食品細菌等が濾材(3a)から脱離し、食品細菌等の濃縮液として採取することができる。この場合、流路切替手段(5a)の流路設定によって、第1配管(5)の第2濾過部(3)と接続されていない他の端部から菌濃縮液を採取することができる。また、逆洗水(w)を送り込んでいるときはバルブ(6a)は閉じられている。   An example of the backwash water delivery container (4) is a syringe. If it is a syringe, since the exact scale is attached | subjected and a predetermined amount of backwash water (w) can be easily sent into a 2nd filtration part (3), it is preferable. Furthermore, if a drive unit that can control the movement of the plunger of the syringe is attached, backwashing can be automated. Backwash water (w) includes physiological saline, ion-exchanged water, distilled water, peptone-added physiological saline, phosphate buffered diluted water, phosphate buffered physiological saline, etc. stipulated by the Food Sanitation Law. Can be used. In addition, by feeding backwash water (w) into the second filtration unit (3), food bacteria captured by the filter medium (3a) is detached from the filter medium (3a) and collected as a concentrated liquid such as food bacteria. can do. In this case, the bacteria concentrate can be collected from the other end not connected to the second filtration part (3) of the first pipe (5) by setting the flow path of the flow path switching means (5a). Further, the valve (6a) is closed when the backwash water (w) is fed.

尚、第1濾液(L1)を第2濾過部(3)に送り込むための流路と、逆洗水(w)を第2濾過部(3)に送り込み、第1配管(5)の端部から菌濃縮液を採取する流路との切り替えに用いられる流路切替手段(5a)としては、例えば、三方バルブ等が挙げられる。   In addition, the flow path for sending the first filtrate (L1) to the second filtration part (3), the backwash water (w) is sent to the second filtration part (3), and the end of the first pipe (5) Examples of the flow path switching means (5a) used for switching to the flow path for collecting the bacterial concentrate from the above include a three-way valve.

更に、第1配管(5)の流路が分岐される位置の近傍であり、且つ第2濾過部(3)の側に逆止弁を配設するとともに、流路が分岐される位置より菌濃縮液が採取される側にバルブを設けることで、流路切替手段(5a)として機能させることもできる。この場合、菌濃縮液が採取される側に設けられたバルブを閉じ、バルブ6aを開くことで、第2濾液(L2)を排液として排出することができる。一方、第2濾過部(3)に逆洗水(w)を送り込み、菌濃縮液を採取するきには、バルブ6aを閉じ、菌濃縮液が採取される側に設けられたバルブを開けることで、菌濃縮液を採取することができる。   Further, a check valve is provided near the position where the flow path of the first pipe (5) is branched, and on the second filtration part (3) side, and the bacteria are separated from the position where the flow path is branched. By providing a valve on the side from which the concentrate is collected, it can also function as the flow path switching means (5a). In this case, the second filtrate (L2) can be discharged as drainage by closing the valve provided on the side where the bacteria concentrate is collected and opening the valve 6a. On the other hand, when sending backwash water (w) to the second filtration part (3) and collecting the bacteria concentrate, the valve 6a is closed and the valve provided on the side where the bacteria concentrate is collected is opened. Thus, the bacterial concentrate can be collected.

上述のようにして、逆洗水(w)によって濾材(3a)に捕捉されていた食品細菌等を濾材(3a)から脱離させることができる。この場合、濾材(3a)に捕捉されていた食品細菌等の90%以上、特に95%以上を濾材(3a)から脱離させることが好ましく、全量を脱離させることがより好ましい。尚、全量を脱離させることは容易ではないが、95%以上脱離させることは可能である。また、この脱離させることのできる割合は、濾材(3a)でろ過する前の試料液の生菌数と、濾材(3a)でろ過後に逆洗して得られた菌濃縮液の生菌数とを測定して、割合を算出することにより確認することができる。   As described above, food bacteria and the like captured by the filter medium (3a) by the backwash water (w) can be detached from the filter medium (3a). In this case, it is preferable that 90% or more, particularly 95% or more of the food bacteria and the like captured by the filter medium (3a) is desorbed from the filter medium (3a), and it is more preferable that the entire amount is desorbed. Although it is not easy to desorb the entire amount, it is possible to desorb 95% or more. Moreover, the ratio which can be made to detach | desorb is the number of living bacteria of the sample liquid before filtering with a filter medium (3a), and the number of living bacteria of the microbe concentration liquid obtained by carrying out backwashing after filtering with a filter medium (3a). And can be confirmed by calculating the ratio.

更に、飲食物(f)が飲料等の流体、及び固形、半固形の食物がストマッカー処理等により処理されて調製された飲食物(f)のいずれの場合も、菌濃縮液の濃縮倍率は、送出容器(1)に収容され、第1濾過部(2)を流通して第2濾過部(3)に送り込まれる飲食物(f)の容積と、逆洗して得られた菌濃縮液の容積とから、下記の式により算出することができる。この濃縮倍率は5倍以上、特に10倍以上であることが好ましく、50倍を超えて、より高い倍率とすることが特に好ましい。このように濃縮倍率の高い菌濃縮液であれば、たとえ少量の細菌しか含まない飲食物(f)であっても精度の高い分析をすることが可能となる。
濃縮倍率(倍)=[送出容器(1)に収容され、第1濾過部(2)を流通して第2濾過部(3)に送り込まれる飲食物(f)の容積]/[逆洗して得られた菌濃縮液の容積]
Furthermore, in any case of food and drink (f) prepared by processing fluids such as beverages and solid and semi-solid foods by stomacher treatment or the like (f), the concentration rate of the bacterial concentrate is: The volume of food and drink (f) that is housed in the delivery container (1), flows through the first filtration part (2) and is fed into the second filtration part (3), and the bacteria concentrate obtained by backwashing From the volume, it can be calculated by the following formula. This concentration ratio is preferably 5 times or more, particularly preferably 10 times or more, and more preferably 50 times or more and higher. Thus, if it is a bacteria concentration liquid with a high concentration magnification, even if it is food / beverage (f) which contains only a small amount of bacteria, it will become possible to analyze with high precision.
Concentration magnification (times) = [volume of food and drink (f) housed in the delivery container (1) and circulated through the first filtration part (2) and sent to the second filtration part (3)] / [backwashing Volume of bacterial concentrate obtained in this way]

また、菌濃縮液に含有される食品細菌等の定性、定量分析の分析法及びそれに用いる分析機器は特に限定されない。例えば、微小コロニー検査装置、フローサイトメトリー法に基づく検査装置等の光学検出器を使用することができる。更に、菌濃縮液はバイアル、アンプル等に採取し、分析に供することができる。分析法は従来の平板コロニー計数法やATP法でもよい。また、菌濃縮液は、第1配管5に接続されたチューブを流通させ、分析機器に直接送り込んで分析することもできる。   Moreover, the qualitative and quantitative analysis methods for food bacteria and the like contained in the bacterium concentrate and the analytical equipment used therefor are not particularly limited. For example, an optical detector such as a microcolony inspection device or an inspection device based on a flow cytometry method can be used. Furthermore, the bacteria concentrate can be collected in vials, ampoules, etc. and used for analysis. The analysis method may be a conventional plate colony counting method or ATP method. In addition, the bacteria concentrate can be analyzed by circulating a tube connected to the first pipe 5 and directly feeding it to an analytical instrument.

飲食物(f)及び逆洗水(w)のうちの少なくとも一方には界面活性剤を配合することができる。これによって、より効率よく食品細菌等を分離し捕集することができ、より濃縮度の高い濃縮液とすることができる。界面活性剤は、飲食物(f)及び逆洗水(w)に配合してもよく、いずれか一方のみに配合してもよい。食品細菌等を効率よく捕集し、より濃縮度の高い濃縮液とするためには、界面活性剤は少なくとも逆洗水(w)に配合することが好ましい。   A surfactant can be blended in at least one of the food and drink (f) and the backwash water (w). Thereby, food bacteria and the like can be separated and collected more efficiently, and a concentrated liquid having a higher concentration can be obtained. Surfactant may be blended in food and drink (f) and backwash water (w), or may be blended only in either one. In order to efficiently collect food bacteria and the like and to obtain a concentrated liquid with a higher concentration, it is preferable to mix the surfactant with at least backwash water (w).

界面活性剤は特に限定されないが、食品細菌、飲食物及び濾材の材質によって、捕集効率の良好な界面活性剤を選択して用いることが好ましい。界面活性剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル等のノニオン性界面活性剤などが挙げられる。この界面活性剤の具体例としては、例えば、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタントリステアレート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレエート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタントリオレエート、グリセロールα−モノステアレート、ポリエチレングリコール(2)モノステアレート、ポリエチレングリコール(10)モノステアレート、ポリエチレングリコール(25)モノステアレート、ポリエチレングリコール(23)モノセチルエーテル等が挙げられる。更に、逆洗水(w)における界面活性剤の濃度も特に限定されないが、0.001〜0.1質量%、特に0.003〜0.05質量%とすることができる。   The surfactant is not particularly limited, but it is preferable to select and use a surfactant having a good collection efficiency depending on the material of food bacteria, food and drink, and filter media. Examples of the surfactant include nonionic surfactants such as sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, and polyethylene glycol fatty acid ester. Specific examples of this surfactant include, for example, sorbitan monooleate, sorbitan monolaurate, sorbitan monostearate, polyoxyethylene (20) sorbitan monostearate, polyoxyethylene (20) sorbitan tristearate, poly Oxyethylene (20) sorbitan monolaurate, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate, polyoxyethylene (20) sorbitan trioleate, glycerol α-monostearate, polyethylene glycol (2) monostearate, polyethylene glycol ( 10) Monostearate, polyethylene glycol (25) monostearate, polyethylene glycol (23) monocetyl ether and the like. Further, the concentration of the surfactant in the backwash water (w) is not particularly limited, but may be 0.001 to 0.1% by mass, particularly 0.003 to 0.05% by mass.

[2]食品細菌の分離濃縮方法
本発明の食品細菌の分離濃縮方法は、飲食物(f)に含有されていた固形分の少なくとも一部を除去する固形分除去工程と、飲食物(f)に含有されていた食品細菌等を捕捉する細菌捕捉工程と、濾材(3a)に捕捉された食品細菌等を、逆洗水(w)により濾材(3a)から脱離させ、濃縮液を得る濃縮液調製工程と、を備える。
[2] Method for Separating and Concentrating Food Bacteria The method for separating and concentrating food bacteria of the present invention includes a solid content removing step for removing at least a part of the solid content contained in the food and drink (f), and the food and drink (f). Bacteria capture step for capturing food bacteria contained in the filter, and food bacteria captured by the filter medium (3a) are desorbed from the filter medium (3a) by backwash water (w) to obtain a concentrated liquid A liquid preparation step.

本発明の食品細菌の分離濃縮方法に用いる装置は特に限定されないが、例えば、本発明の食品細菌の分離濃縮装置(100)を用いることができる。この場合、固形分除去工程は、飲食物(f)の送出容器(1)と第1濾過部(2)とによりなされ、細菌捕捉工程は、第2濾過部(3)によりなされ、濃縮液調製工程は、第2濾過部(3)と逆洗水送出容器(4)とによって、それぞれ前述のようにしてなされる。   The apparatus used for the method for separating and concentrating food bacteria of the present invention is not particularly limited, and for example, the apparatus for separating and concentrating food bacteria of the present invention (100) can be used. In this case, the solid content removing step is performed by the feeding container (1) of the food and drink (f) and the first filtering unit (2), and the bacteria capturing step is performed by the second filtering unit (3), and the concentrated solution is prepared. The process is performed as described above by the second filtration unit (3) and the backwash water delivery container (4).

また、本発明の食品細菌の分離濃縮方法は、上述の必須の3工程に加えて、通常、以下のような他の工程を備える。例えば、必要に応じてストマッカー処理等が施された飲食物(f)を送出容器(1)から第1濾過部(2)に送り込む飲食物送出工程を備える。また、固形分の少なくとも一部が除去された濾液(L1)を第1濾過部(2)から第2濾過部(3)に送り込む送液工程を備える。更に、第2濾過部により食品細菌等が捕捉された濾液(L2)を、第2配管6の端部から排液として排出する排液工程を備える。また、第1配管5の端部から流出する菌濃縮液を無菌的に採取する菌濃縮液採取工程と、分析機器により定性、定量の分析をする分析工程を備える。   Moreover, the method for separating and concentrating food bacteria of the present invention usually includes the following other steps in addition to the above-described three essential steps. For example, the food and drink (f) subjected to the stomacher process or the like as necessary is provided with a food and drink sending process for sending the food and drink (f) from the sending container (1) to the first filtration unit (2). Moreover, the liquid feeding process which sends the filtrate (L1) from which at least one part of solid content was removed from a 1st filtration part (2) to a 2nd filtration part (3) is provided. Furthermore, the liquid filtration process (L2) by which the food bacteria etc. were capture | acquired by the 2nd filtration part is provided with the drainage process discharged | emitted from the edge part of the 2nd piping 6 as a drainage liquid. Moreover, the microbe concentration liquid collection process which aseptically collects the microbe concentration liquid which flows out from the edge part of the 1st piping 5 and the analysis process which analyzes qualitatively and quantitatively with an analytical instrument are provided.

以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
実施例1
図1に図示する食品細菌の分離濃縮装置100を用いて、下記の飲食物fを用いて菌濃縮液を調製した。
食物として生野菜を25gストマッカー処理袋に採取し、これに質量比で9倍の生理食塩水225mLを加え、ストマッカー処理により粉砕した。その後、粉砕された生野菜を含有する生理食塩水をストマッカー袋からビーカーに移し、この飲食物fを送出容器1として用いた容量100mLの注射器に吸入させた。
Hereinafter, the present invention will be described specifically by way of examples.
Example 1
Using the food bacteria separation and concentration apparatus 100 illustrated in FIG. 1, a bacterial concentrate was prepared using the following food and drink f.
As a food, raw vegetables were collected in a 25 g stomacher-treated bag, 225 mL of physiological saline 9 times in mass ratio was added thereto, and pulverized by the stomacher treatment. Thereafter, the physiological saline containing the crushed raw vegetables was transferred from the stomacher bag to a beaker, and this food and drink f was inhaled into a 100 mL syringe used as the delivery container 1.

次いで、注射器の吸入口を、第1濾過部2の外装容器に設けられた送入口に挿入し、第1濾過部2に飲食物fを送り込んだ。外装容器としては、図1のような、内部に直径25mmの平膜が設置できる樹脂製の容器(平面方向の形状は円形である。)を使用した。また、この外装容器の厚さ方向の中間部にナイロン樹脂からなる目開き10μmの第1濾材2aを配設した。これにより、分析精度の妨げとなる夾雑物と言える寸法の固形分を除去し、食品細菌等と小寸法の固形分とが含有された第1濾液L1を得た。その後、この第1濾液L1を、外装容器の下面側に接続された第1配管5内を流通させ、第1配管5に配設された三方バルブ5aの流路を調整して、第2濾過部3の外装容器に一方の端部が接続された第1配管5から第2濾過部3に送り込んだ。   Next, the suction port of the syringe was inserted into the inlet provided in the outer container of the first filtration unit 2, and the food and drink f were fed into the first filtration unit 2. As the exterior container, a resin container (the shape in the plane direction is circular) in which a flat film having a diameter of 25 mm can be installed is used as shown in FIG. In addition, a first filter medium 2a made of nylon resin and having an aperture of 10 μm was disposed in the middle portion of the outer container in the thickness direction. Thereby, the solid content of the dimension which can be said to be a contaminant which hinders analysis accuracy was removed, and the 1st filtrate L1 containing food bacteria etc. and the solid content of a small dimension was obtained. Thereafter, the first filtrate L1 is circulated in the first pipe 5 connected to the lower surface side of the outer container, the flow path of the three-way valve 5a disposed in the first pipe 5 is adjusted, and the second filtration is performed. It was fed into the second filtration unit 3 from the first pipe 5 whose one end was connected to the exterior container of the unit 3.

第2濾過部3は、カラム状の外装容器を備え、この外装容器の内部にポリスルホン樹脂からなる目開き0.4μmの中空糸フィルター(中空糸濾材)を第2濾材3aとして配設した。これにより、食品細菌等と小寸法の固形分の少なくとも一部とは第2濾材3aに捕捉され、実質的に液分のみが第2濾過部3から、外装容器に接続された第2配管6内を流通し、開けられたバルブ6aを通って第2配管6の端部から排液として排出された。   The second filtration unit 3 includes a column-shaped outer container, and a hollow fiber filter (hollow fiber filter medium) made of polysulfone resin and having a mesh size of 0.4 μm is disposed as the second filter medium 3a inside the outer container. As a result, the food bacteria and the like and at least a part of the small-sized solid content are captured by the second filter medium 3a, and only the liquid component is substantially connected from the second filtration unit 3 to the outer container 6 by the second pipe 6. It circulated through the inside and was discharged as drainage from the end of the second pipe 6 through the opened valve 6a.

次いで、第2配管6に設けられた逆洗水wの送入口に挿入された逆洗水送出容器4から、第2濾過部3に逆洗水wである生理食塩水を送り込んだ。逆洗水送出容器4としては容量10mLの注射器を用いた。この場合、バルブ6aと第1濾材2aと繋がる流路のバルブを閉じて、第1配管5の端部から菌濃縮液を流出させ、バイアルに採取した。また、このようにして採取した菌濃縮液を分析に供した。   Subsequently, the physiological saline which is the backwash water w was sent into the 2nd filtration part 3 from the backwash water delivery container 4 inserted in the feed port of the backwash water w provided in the 2nd piping 6. FIG. A syringe having a capacity of 10 mL was used as the backwash water delivery container 4. In this case, the valve | bulb of the flow path connected with the valve | bulb 6a and the 1st filter medium 2a was closed, the microbe concentration liquid was flowed out from the edge part of the 1st piping 5, and it extract | collected to the vial. In addition, the bacterial concentrate collected in this way was subjected to analysis.

この実施例では、生理食塩水を用いてストマッカー処理により調製された飲食物fを、送出容器1として用いた容量100mLの注射器により第1濾過部に2回送り込み、合計200mLの飲食物fを使用した。そして、この200mLの飲食物fに含有されていた食品細菌等が、逆洗水wとして用いた生理食塩水により濾材3aから脱離されて、捕集され、1mLの菌濃縮液が採取された。従って、食品細菌等の全量が、濾材2aを通過するとともに、濾材3aに捕捉され、且つ食品細菌等の全量が逆洗水wにより濾材3aから脱離され、捕集されたと仮定した場合、菌濃縮液に含有される食品細菌等は、200倍に濃縮されたことになる。   In this embodiment, food and drink f prepared by stomacher treatment using physiological saline is sent twice to the first filtration unit with a 100 mL syringe used as the delivery container 1, and a total of 200 mL of food and drink f is used. did. And the food bacteria etc. which were contained in this 200 mL food-drinks f were removed from the filter medium 3a with the physiological saline used as the backwash water w, were collected, and 1 mL of bacteria concentrated liquid was extract | collected. . Therefore, when it is assumed that the total amount of food bacteria and the like passes through the filter medium 2a and is captured by the filter medium 3a, and the total amount of food bacteria and the like is detached from the filter medium 3a by the backwash water w and collected. The food bacteria contained in the concentrate is concentrated 200 times.

試験例1
2000mLの生理食塩水に、大腸菌を、1mL中に0.5個存在するように混入させ、検液を調製した。その後、この検液を用いて実施例1と同様の工程で菌濃縮液を得、バイアルに採取し、平板培養法により定量分析をした。そして、検液中の菌数と菌濃縮液中の菌数とから下記の式によって菌の回収率を算出した。回収率は75%であった。
菌の回収率(%)=[(菌濃縮液中の菌数)/検液2000mL中の菌数]×100
Test example 1
A test solution was prepared by mixing 0.5 ml of E. coli in 2000 mL of physiological saline so as to be present in 1 mL. Thereafter, using this test solution, a bacterial concentrate was obtained in the same steps as in Example 1, collected in a vial, and quantitatively analyzed by a plate culture method. And the recovery rate of the bacteria was calculated from the following formula from the number of bacteria in the test solution and the number of bacteria in the bacteria concentrate. The recovery rate was 75%.
Bacterial recovery rate (%) = [(the number of bacteria in the bacteria concentrate) / the number of bacteria in the test solution 2000 mL] × 100

また、逆洗水wとして用いた生理食塩水に、各種の界面活性剤を配合し、同様にして菌濃縮液を得、バイアルに採取した。その後、平板培養法により定量分析をし、回収率を算出した。各々の界面活性剤を用いたときの、界面活性剤を配合しないときの回収率を100%としたときの回収率は表1のとおりである。   Moreover, various surfactants were mix | blended with the physiological saline used as the backwash water w, the bacteria concentrate was obtained similarly, and it extract | collected to the vial. Thereafter, quantitative analysis was performed by a plate culture method, and the recovery rate was calculated. Table 1 shows the recovery rates when each surfactant is used and the recovery rate when the surfactant is not blended is 100%.

Figure 2015216875
Figure 2015216875

表1のように、界面活性剤の種類によって差はあるものの、逆洗水wに界面活性剤を配合することによる回収率の向上を確認することができた。   As shown in Table 1, although there was a difference depending on the type of the surfactant, it was confirmed that the recovery rate was improved by adding the surfactant to the backwash water w.

尚、本発明では上記の実施例に限られず、目的、用途等によって本発明の範囲内において種々変更した実施例とすることができる。例えば、送出容器1及び逆洗水送出容器4としては、送液ポンプ及び流量計を備え、流量を正確に調整することができる各種の液容器を用いることもできる。   The present invention is not limited to the above-described embodiments, and various modifications can be made within the scope of the present invention depending on the purpose, application, and the like. For example, as the delivery container 1 and the backwash water delivery container 4, various liquid containers equipped with a liquid feed pump and a flow meter and capable of accurately adjusting the flow rate can be used.

本発明は飲食物に含有される食品細菌等の定性、定量分析の技術分野において利用することができる。特に飲食物に含有され、分析精度の妨げとなる夾雑物となる固形分が予め除去されており、菌が濃縮された液を用いるため、分析精度を向上させることができる。   The present invention can be used in the technical fields of qualitative and quantitative analysis of food bacteria contained in food and drink. In particular, the solid content that is contained in food and drink and becomes a contaminant that hinders the analysis accuracy is removed in advance, and a liquid in which bacteria are concentrated is used, so that the analysis accuracy can be improved.

100;食品細菌の分離濃縮装置、1;送出容器、f;ストマッカー処理後の飲食物、2;第1濾過部、2a;第1濾過部に設けられた濾材、3;第2濾過部、3a;第2濾過部に設けられた濾材、4;逆洗水送出容器、w;逆洗水、5;第1配管、5a;流路切替手段(三方バルブ)、6;第2配管、6a;バルブ。   DESCRIPTION OF SYMBOLS 100; Separation and concentration apparatus of food bacteria, 1; Delivery container, f; Food and drink after stomacher treatment, 2; First filtration part, 2a; Filter medium provided in the first filtration part, 3; Second filtration part, 3a A filter medium provided in the second filtration unit, 4; backwash water delivery container, w; backwash water, 5; first pipe, 5a; flow path switching means (three-way valve), 6; second pipe, 6a; valve.

Claims (6)

飲食物の送出容器と、
前記送出容器から送出される前記飲食物が送り込まれ、前記飲食物に含有されていた固形分の少なくとも一部が除去される第1濾過部と、
前記第1濾過部により濾過された第1濾液が送り込まれ、前記飲食物に含有されていた食品細菌及び芽胞のうちの少なくとも食品細菌が捕捉される第2濾過部と、
前記第1濾過部と前記第2濾過部とを接続する第1配管と、
前記第2濾過部により濾過された第2濾液を排出するための第2配管と、
前記第2配管に配設され、前記第2濾過部に逆洗水を送り込むための逆洗水送出容器と、
前記第1配管に配設され、前記第1濾液と前記逆洗水の各々の流路を切り替えるための流路切替手段と、
前記第2配管に接続され、前記第2濾液を排液するときには開けられ、前記逆洗水を前記第2濾過部に送り込むときには閉じられるバルブと、を備えることを特徴とする食品細菌の分離濃縮装置。
A delivery container for food and drink;
A first filtration unit in which the food and drink delivered from the delivery container is fed, and at least part of the solid content contained in the food and drink is removed;
The first filtrate filtered by the first filtration unit, and the second filtration unit captures at least food bacteria out of food bacteria and spores contained in the food and drink;
A first pipe connecting the first filtration unit and the second filtration unit;
A second pipe for discharging the second filtrate filtered by the second filtration unit;
A backwash water delivery container disposed in the second pipe for feeding backwash water into the second filtration unit;
A flow path switching means disposed in the first pipe for switching the flow paths of the first filtrate and the backwash water;
And a valve connected to the second pipe and opened when the second filtrate is drained and closed when the backwash water is fed into the second filtration section. apparatus.
前記第1濾過部に設けられた濾材を前記飲食物に含有される前記固形分の特徴に従って選択し交換することができ、前記第1濾過部に設けられた濾材、及び前記第2濾過部に設けられた濾材のうちの少なくとも一方が中空糸フィルターである請求項1に記載の食品細菌の分離濃縮装置。   The filter medium provided in the first filtration part can be selected and exchanged according to the characteristics of the solid content contained in the food and drink, the filter medium provided in the first filtration part, and the second filtration part The apparatus for separating and concentrating food bacteria according to claim 1, wherein at least one of the provided filter media is a hollow fiber filter. 前記飲食物及び前記逆洗水のうちの少なくとも一方に界面活性剤が配合されている請求項1又は2に記載の食品細菌の分離濃縮装置。   The apparatus for separating and concentrating food bacteria according to claim 1 or 2, wherein a surfactant is blended in at least one of the food and drink and the backwash water. 飲食物を第1濾過部に送り込み、前記飲食物に含有されていた固形分の少なくとも一部を除去する固形分除去工程と、
前記第1濾過部より送出される濾液を第2濾過部に送り込み、前記飲食物に含有されていた食品細菌及び芽胞のうちの少なくとも食品細菌を捕捉する細菌捕捉工程と、
前記第2濾過部に設けられた濾材に捕捉された前記食品細菌及び前記芽胞のうちの少なくとも前記食品細菌を、逆洗水により前記濾材から脱離させ、前記食品細菌及び前記芽胞のうちの少なくとも前記食品細菌の濃縮液を得る濃縮液調製工程と、を備えることを特徴とする食品細菌の分離濃縮方法。
A solid content removing step of feeding food and drink into the first filtration unit and removing at least a part of the solid content contained in the food and drink,
Bacteria capture step of sending the filtrate sent from the first filtration unit to the second filtration unit and capturing at least food bacteria out of food bacteria and spores contained in the food and drink,
At least the food bacteria out of the food bacteria and the spores captured by the filter medium provided in the second filtration unit are detached from the filter medium by backwashing water, and at least the food bacteria and the spores are removed. A method for separating and concentrating food bacteria, comprising a step of preparing a concentrate for obtaining the food bacteria concentrate.
前記第1濾過部に設けられた濾材を前記飲食物に含有される前記固形分の特徴に従って選択し交換することができ、前記第1濾過部に設けられた濾材、及び前記第2濾過部に設けられた濾材のうちの少なくとも一方が中空糸フィルターである請求項4に記載の食品細菌の分離濃縮方法。   The filter medium provided in the first filtration part can be selected and exchanged according to the characteristics of the solid content contained in the food and drink, the filter medium provided in the first filtration part, and the second filtration part The method for separating and concentrating food bacteria according to claim 4, wherein at least one of the provided filter media is a hollow fiber filter. 前記飲食物及び前記逆洗水のうちの少なくとも一方に界面活性剤が配合されている請求項4又は5に記載の食品細菌の分離濃縮方法。   The method for separating and concentrating food bacteria according to claim 4 or 5, wherein a surfactant is blended in at least one of the food and drink and the backwash water.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2019059279A1 (en) * 2017-09-20 2019-03-28 株式会社カネカ Device, system and method for preparing cell suspension
CN112680357A (en) * 2019-10-18 2021-04-20 株式会社岛津制作所 Microorganism recovery method and microorganism recovery apparatus
US11998908B2 (en) 2021-04-20 2024-06-04 Shimadzu Corporation Preprocessing device, preprocessing method, and non-transitory computer readable medium storing program

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