JP2014197091A - Microscope - Google Patents

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伸介 金木
Shinsuke Kaneki
伸介 金木
広二 今関
Koji Imazeki
広二 今関
祐輔 松本
Yusuke Matsumoto
祐輔 松本
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a microscope which offers reduced time required for switching between observation methods in ICSI.SOLUTION: A microscope 1 includes; a condenser turret 13 which has a disk-like shape, has a plurality of holes, each being capable of holding an optical element, formed on a main surface thereof along a circumferential direction, and allows one of the plurality of holes to be positioned on a light path by rotating about a predetermined rotation axis; and a revolver 17 which has a plurality of holders, each being capable of holding an object lens 18, formed on a main surface thereof along a circumferential direction and allows one of the plurality of holders to be positioned on the light path.

Description

本発明は、ステージ上に載置された標本を観察する顕微鏡の技術に関し、特に、顕微授精に好適な顕微鏡に関する。   The present invention relates to a microscope technique for observing a specimen placed on a stage, and particularly to a microscope suitable for microinsemination.

近年、顕微鏡の一用途として、高度生殖医療の分野における顕微授精が知られている。顕微授精は、顕微鏡下で精子と卵子とを授精させる方法であり、一般に、精子が納められたマイクロピペットをホールディングピペットで固定された卵子に突き刺して卵子に精子を注入する卵細胞質内精子注入法(Intracytoplasmic Sperm Injection:以下、「ICSI」という)により行われる。このICSIでは、ステージ上で標本を操作するため、ステージの上方に大きな作業空間を有する倒立顕微鏡を用いることが一般的である。   In recent years, microinsemination in the field of advanced reproductive medicine has been known as an application of a microscope. Microinsemination is a method of fertilizing sperm and ovum under a microscope. In general, sperm injection in the cytoplasm is performed by inserting a micropipette containing sperm into an egg fixed with a holding pipette and injecting sperm into the egg. (Intracytoplasmic Sperm Injection: hereinafter referred to as “ICSI”). In this ICSI, in order to operate a specimen on the stage, it is common to use an inverted microscope having a large working space above the stage.

また、顕微授精の分野では、卵子の授精率を向上させるため、卵子を立体的に観察可能なレリーフコントラスト観察法(以下、「RC観察法」という)が知られている(特許文献1参照)。   In the field of micro insemination, a relief contrast observation method (hereinafter referred to as “RC observation method”) capable of observing an egg three-dimensionally is known in order to improve the insemination rate of the egg (refer to Patent Document 1). .

また、近年、顕微授精の分野では、授精率を向上させるため、複数の観察法を適宜切り替えながら顕微鏡を使用する顕微授精の方法が注目されている。たとえば、RC観察法、微分干渉観察法(以下、「DIC観察法」という)および偏光観察法(以下、「PO観察法」という)を観察目的に応じて切り替えながら使用する方法が普及しつつある。   In recent years, in the field of micro insemination, in order to improve the insemination rate, a micro insemination method using a microscope while appropriately switching a plurality of observation methods has attracted attention. For example, a method of using an RC observation method, a differential interference observation method (hereinafter referred to as “DIC observation method”) and a polarization observation method (hereinafter referred to as “PO observation method”) while switching depending on the observation purpose is becoming widespread. .

DIC観察法は、RC観察法に比べて高倍率で対象物を観察することができ、卵子に比べて小さな精子の観察に適しているため、良質な精子を選別する際に用いられる。   The DIC observation method can observe an object at a higher magnification than the RC observation method, and is suitable for observing small sperm as compared to an egg, and is therefore used when selecting high-quality sperm.

また、PO観察法は、複屈折性を有する卵子の紡錘体の観察に適しているため、卵子に精子を注入する際に、紡錘体を誤って傷つけてしまうことを防止しつつ、紡錘体の位置を確認する際に用いられる。   In addition, the PO observation method is suitable for observing an ovum spindle having birefringence, so that when the sperm is injected into the ovum, the spindle is prevented from being damaged accidentally, Used when confirming the position.

特開昭51−29149号公報JP 51-29149 A

ところで、従来のICSIを行う顕微鏡では、各光学ユニットの切り替えを電動化することにより、観察方法を切り替えるまでの作業時間の短縮を図っている。しかしながら、レボルバに装着された各対物レンズとコンデンサターレットの各光学素子とが実際に切り替わるまでにかかる時間については考慮されていなかった。このため、ICSIを行う顕微鏡では、レボルバ内における対物レンズまたはコンデンサターレット内における光学素子の配置によっては、レボルバまたはコンデンサターレットの回転量が大きくなり、観察方法を切り替えるまでに時間がかかるという問題点があった。   By the way, in the microscope which performs the conventional ICSI, the operation time until switching the observation method is shortened by electrically switching each optical unit. However, the time taken until the objective lenses mounted on the revolver and the optical elements of the condenser turret are actually switched is not considered. For this reason, in a microscope that performs ICSI, depending on the arrangement of the objective lens in the revolver or the optical element in the condenser turret, the amount of rotation of the revolver or condenser turret increases, and it takes time to switch the observation method. there were.

本発明は、上記に鑑みてなされたものであって、ICSIにおける観察法の切り替え時間をより短縮することができる顕微鏡を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of the above, and an object of the present invention is to provide a microscope that can further shorten the switching time of the observation method in ICSI.

上述した課題を解決し、目的を達成するために、本発明にかかる顕微鏡は、標本を照射する光を発生する光源と、各々が前記光の光路上に配置可能であり、入射した前記光の光学特性を変化させる複数の光学ユニットと、を備え、卵細胞質内精子注入法で用いる複数の観察法それぞれに応じて前記光路上における前記複数の光学ユニットそれぞれの配置を切り替える顕微鏡であって、円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって前記複数の穴部のいずれか一つを前記光路上に配置可能なコンデンサターレットと、各々が対物レンズを保持可能な複数の保持部が主面の周方向に沿って形成され、該複数の保持部のいずれかを前記光路上に配置可能なレボルバと、を備え、前記コンデンサターレットは、前記複数の穴部のうち光学素子を保持しない所定の空穴を基準に見たときに主面の周方向に沿って適用倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用開口板がそれぞれ前記複数の穴部に保持され、前記レボルバは、前記複数の保持部のいずれか一つに保持された最小倍率の第1対物レンズを基準に見たときに主面の周方向に沿って倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズがそれぞれ前記複数の保持部に保持されていることを特徴とする。   In order to solve the above-described problems and achieve the object, a microscope according to the present invention includes a light source that generates light for illuminating a specimen, and each of the light sources can be disposed on the optical path of the light. A microscope for switching the arrangement of each of the plurality of optical units on the optical path in accordance with each of a plurality of observation methods used in an intracytoplasmic sperm injection method, A plurality of hole portions, each of which can hold an optical element, are formed along the circumferential direction of the main surface, and any one of the plurality of hole portions is formed by rotating about a predetermined axis. A condenser turret that can be arranged on the optical path and a plurality of holding parts each capable of holding an objective lens are formed along the circumferential direction of the main surface, and any one of the plurality of holding parts can be arranged on the optical path Nare And the condenser turret has a plurality of application magnifications that are sequentially increased along the circumferential direction of the main surface when viewed from a predetermined hole that does not hold an optical element among the plurality of holes. Relief contrast observation aperture plates are respectively held in the plurality of holes, and the revolver is mainly used when viewed from the first objective lens having the minimum magnification held in any one of the plurality of holding portions. A plurality of relief contrast observation objective lenses whose magnifications are sequentially increased along the circumferential direction of the surface are respectively held by the plurality of holding portions.

また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板の後に、DICプリズムが前記穴部によってさらに保持され、前記レボルバは、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする。   Further, the microscope according to the present invention is the above-described invention, wherein the condenser turret is formed in the order of the bright field observation method, the relief contrast observation method, and the differential interference observation method in the order of the intracytoplasmic sperm injection method, A DIC prism is further held by the hole after a plurality of relief contrast observation aperture plates, and the revolver is provided with a magnification of each of the plurality of relief contrast observation objective lenses after the plurality of relief contrast observation objective lenses. A higher objective lens is further held by the holding unit.

また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で偏光観察法を行う場合、前記第1対物レンズの後に、前記第1対物レンズより倍率が高い偏光観察法用対物レンズが前記保持部によって保持されていることを特徴とする。   Further, the microscope according to the present invention is the microscope according to the above invention, wherein the revolver has a magnification larger than that of the first objective lens after the first objective lens when the microscope performs polarization observation by the sperm injection method in the egg cytoplasm. The polarization observation method objective lens is held by the holding unit.

また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板は、第1レリーフコントラスト観察用開口板および第2レリーフコントラスト観察用開口板を有し、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズは、第1レリーフコントラスト観察用対物レンズおよび第2レリーフコントラスト観察用対物レンズを有し、前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記空穴の後に、前記第1レリーフコントラスト観察用開口板より開口数が小さい第2レリーフコントラスト観察用開口板が前記穴部によってさらに保持され、前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記第1対物レンズの後に、前記第1対物レンズより倍率が高く、かつ、前記第1レリーフコントラスト観察用対物レンズより倍率が低い第2レリーフコントラスト観察用対物レンズがさらに前記保持部によって保持されていることを特徴とする。   The microscope according to the present invention is the above-described invention, wherein the plurality of relief contrast observation aperture plates include a first relief contrast observation aperture plate and a second relief contrast observation aperture plate, and the plurality of relief contrast observation apertures. The observation objective lens has a first relief contrast observation objective lens and a second relief contrast observation objective lens, and the condenser turret has a plurality of relief contrasts having different magnifications according to the microscope's intracytoplasmic sperm injection method. When performing the observation method, after the hole, a second relief contrast observation aperture plate having a smaller numerical aperture than the first relief contrast observation aperture plate is further held by the hole, and the revolver In the egg cytoplasm sperm injection method, a plurality of relics having different magnifications are used. When performing the contrast contrast observation method, a second relief contrast observation objective lens having a magnification higher than that of the first objective lens and lower than that of the first relief contrast observation objective lens is provided after the first objective lens. Furthermore, it is characterized by being held by the holding part.

また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板のうち最も開口数が小さい第1レリーフコントラスト観察用開口板の後に、DICプリズムが前記穴部によってさらに保持され、前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズのうち最も倍率が低い第1レリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする。   Further, the microscope according to the present invention is the above-described invention, wherein the condenser turret is formed in the order of the bright field observation method, the relief contrast observation method, and the differential interference observation method in the order of the intracytoplasmic sperm injection method, After the first relief contrast observation aperture plate having the smallest numerical aperture among the plurality of relief contrast observation aperture plates, a DIC prism is further held by the hole, and the revolver is adapted to inject the sperm into the egg cytoplasm. When performing the bright field observation method, the relief contrast observation method, and the differential interference observation method in this order, the plurality of the relief contrast observation objective lenses are arranged after the first relief contrast observation objective lens having the lowest magnification. Objective relief higher than the magnification of each objective lens for relief contrast observation 'S is characterized in that it is further held by the holding portion.

本発明にかかる顕微鏡によれば、コンデンサターレットに空穴から周方向に沿って複数のレリーフコントラスト観察用開口板が設けられ、レボルバに最小倍率の第1対物レンズを基準に見たときに周方向に沿って倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズが設けられている。これにより、ICSIにおける観察方法の切り替え時間をより短縮することができるという効果を奏する。   According to the microscope of the present invention, the condenser turret is provided with a plurality of relief contrast observation aperture plates along the circumferential direction from the air holes, and the revolver is circumferential when viewed from the first objective lens having the minimum magnification. Are provided with a plurality of relief contrast observation objective lenses having successively higher magnifications. Thereby, there exists an effect that the switching time of the observation method in ICSI can be shortened more.

図1は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の概略構成を示す概念図である。FIG. 1 is a conceptual diagram showing a schematic configuration of a microscope according to an embodiment of the present invention. 図2は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の構成を示すブロック図である。FIG. 2 is a block diagram showing the configuration of the microscope according to the embodiment of the present invention. 図3は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡のコンデンサターレットの構成を模式的に示す図である。FIG. 3 is a diagram schematically illustrating the configuration of the condenser turret of the microscope according to the embodiment of the present invention. 図4は、標本を含むシャーレの平面図である。FIG. 4 is a plan view of a petri dish including a specimen. 図5は、図5のA−A線断面図である。5 is a cross-sectional view taken along line AA in FIG. 図6は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡のレボルバの構成を模式的に示す図である。FIG. 6 is a diagram schematically showing the configuration of the revolver of the microscope according to the embodiment of the present invention. 図7は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の操作入力部の構成を示す図である。FIG. 7 is a diagram showing a configuration of the operation input unit of the microscope according to the embodiment of the present invention. 図8は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の設定情報記録部が記録する設定情報を示す図である。FIG. 8 is a diagram showing setting information recorded by the setting information recording unit of the microscope according to the embodiment of the present invention. 図9は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡が実行するコンデンサターレットおよびレボルバの切替処理の概要を示すフローチャートである。FIG. 9 is a flowchart showing an outline of the condenser turret and revolver switching process executed by the microscope according to the embodiment of the present invention. 図10Aは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 10A is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope according to the embodiment of the present invention. 図10Bは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 10B is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope according to the embodiment of the present invention. 図10Cは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 10C is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the embodiment of the present invention. 図10Dは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 10D is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the embodiment of the present invention. 図11は、本発明の一実施の形態の変形例1にかかる顕微鏡のコンデンサターレットの各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。FIG. 11 is a diagram schematically showing the arrangement of optical elements attached to the holes of the condenser turret of the microscope according to the first modification of the embodiment of the present invention. 図12は、本発明の一実施の形態の変形例1にかかる顕微鏡のレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。FIG. 12 is a diagram schematically showing the arrangement of the objective lenses attached to the holes of the revolver of the microscope according to the first modification of the embodiment of the present invention. 図13Aは、本発明の一実施の形態の変形例1にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合に、精子の不動化および吸引に20倍RC観察を用いるときの手順を示す図である。FIG. 13A illustrates the immobilization and suction of sperm when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the first modification of the embodiment of the present invention. It is a figure which shows a procedure when using 20 times RC observation. 図13Bは、本発明の一実施の形態の変形例1にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合に、精子の不動化および吸引に20倍RC観察を用いるときの手順を示す図である。FIG. 13B shows the immobility of sperm when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the first modification of the embodiment of the present invention. It is a figure which shows the procedure when using 20 times RC observation for conversion and aspiration. 図14Aは、本発明の一実施の形態の変形例1にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合に、精子の不動化および吸引にDIC観察を用いるときの手順を示す図である。FIG. 14A is a schematic diagram illustrating immobilization and suction of sperm when a user performs ICSI using a BF observation method, an RC observation method, and a DIC observation method in the microscope according to the first modification of the embodiment of the present invention. It is a figure which shows the procedure when using DIC observation. 図14Bは、本発明の一実施の形態の変形例1にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合に、精子の不動化および吸引にDIC観察を用いるときの手順を示す図である。FIG. 14B shows the sperm immobility when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the first modification of the embodiment of the present invention. It is a figure which shows the procedure when using DIC observation for conversion and aspiration. 図15は、本発明の一実施の形態の変形例2にかかる顕微鏡のレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。FIG. 15 is a diagram schematically illustrating the arrangement of the objective lenses attached to the holes of the revolver of the microscope according to the second modification of the embodiment of the present invention. 図16は、本発明の一実施の形態の変形例2にかかる顕微鏡の記録部の設定情報記録部が記録する設定情報を示す図である。FIG. 16 is a diagram illustrating setting information recorded by the setting information recording unit of the recording unit of the microscope according to the second modification of the embodiment of the present invention. 図17Aは、本発明の一実施の形態の変形例2にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 17A is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope according to the second modification of the embodiment of the present invention. 図17Bは、本発明の一実施の形態の変形例2にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 17B is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope according to the second modification of the embodiment of the present invention. 図17Cは、本発明の一実施の形態の変形例2にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 17C is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the second modification of the embodiment of the present invention. 図17Dは、本発明の一実施の形態の変形例2にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 17D is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the second modification of the embodiment of the present invention. It is. 図18は、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡のコンデンサターレットの各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。FIG. 18 is a diagram schematically showing the arrangement of optical elements attached to the holes of the condenser turret of the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図19は、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡のレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。FIG. 19 is a diagram schematically illustrating the arrangement of the objective lenses attached to the holes of the revolver of the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図20は、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡の記録部の設定情報記録部が記録する設定情報を示す図である。FIG. 20 is a diagram illustrating setting information recorded by the setting information recording unit of the recording unit of the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図21Aは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 21A is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図21Bは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 21B is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図21Cは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 21C is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図21Dは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 21D is a diagram showing a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. It is. 図22Aは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 22A is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図22Bは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 22B is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図22Cは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 22C is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. 図22Dは、本発明の一実施の形態の変形例3にかかる顕微鏡において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。FIG. 22D is a diagram showing a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope according to the third modification of the embodiment of the present invention. It is.

以下、図面を参照して、本発明を実施するための形態(以下、「実施の形態」という)について説明する。なお、以下に説明する実施の形態によって本発明が限定されるものではない。さらに、図面の記載において、同一の部分には同一の符号を付して説明する。   DESCRIPTION OF EMBODIMENTS Hereinafter, embodiments for carrying out the present invention (hereinafter referred to as “embodiments”) will be described with reference to the drawings. The present invention is not limited to the embodiments described below. Further, in the description of the drawings, the same portions will be described with the same reference numerals.

図1は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の概略構成を示す概念図である。図2は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の構成を示すブロック図である。図1および図2において、顕微鏡1が載置される平面をXY平面とし、XY平面と垂直な方向をZ方向として説明する。   FIG. 1 is a conceptual diagram showing a schematic configuration of a microscope according to an embodiment of the present invention. FIG. 2 is a block diagram showing the configuration of the microscope according to the embodiment of the present invention. 1 and 2, the plane on which the microscope 1 is placed will be described as an XY plane, and a direction perpendicular to the XY plane will be described as a Z direction.

図1および図2に示す顕微鏡1は、標本Spが収容されたシャーレ100を観察する顕微鏡本体部2と、顕微鏡1の各種の操作の入力を受け付ける操作入力部3と、顕微鏡本体部2が撮像した画像データに対応する画像を表示する表示部4と、顕微鏡1を駆動する各種プログラムやパラメータ等を記録する記録部5と、顕微鏡本体部2および表示部4を制御する制御部6と、を備える。顕微鏡本体部2、操作入力部3、表示部4、記録部5および制御部6は、データが送受信可能に有線または無線で接続されている。   The microscope 1 shown in FIGS. 1 and 2 has a microscope main body 2 that observes the petri dish 100 in which the specimen Sp is accommodated, an operation input unit 3 that receives inputs of various operations of the microscope 1, and the microscope main body 2 captures images. A display unit 4 for displaying an image corresponding to the image data, a recording unit 5 for recording various programs and parameters for driving the microscope 1, and a control unit 6 for controlling the microscope main body unit 2 and the display unit 4. Prepare. The microscope main body 2, the operation input unit 3, the display unit 4, the recording unit 5, and the control unit 6 are connected by wire or wireless so that data can be transmitted and received.

まず、顕微鏡本体部2について詳細に説明する。顕微鏡本体部2は、光源10と、ポラライザ11と、コンペンセータ12と、コンデンサターレット13と、コンデンサレンズ14と、ステージ15と、ターレット位置検出部16と、レボルバ17と、対物レンズ18と、レボルバ位置検出部19と、DICプリズム20と、アナライザ21と、結像レンズ22と、光路分割プリズム23と、撮像部24と、ミラー25と、接眼レンズ26と、駆動制御部27と、を備える。   First, the microscope main body 2 will be described in detail. The microscope main body 2 includes a light source 10, a polarizer 11, a compensator 12, a condenser turret 13, a condenser lens 14, a stage 15, a turret position detector 16, a revolver 17, an objective lens 18, and a revolver position. A detection unit 19, a DIC prism 20, an analyzer 21, an imaging lens 22, an optical path splitting prism 23, an imaging unit 24, a mirror 25, an eyepiece lens 26, and a drive control unit 27 are provided.

光源10は、制御部6の制御のもと、標本Spを照射する光を発生する。光源10は、ハロゲンランプ、キセノンランプまたはLED(Light Emitting Diode)等によって構成される。   The light source 10 generates light that irradiates the specimen Sp under the control of the control unit 6. The light source 10 includes a halogen lamp, a xenon lamp, an LED (Light Emitting Diode), or the like.

ポラライザ11は、光源10とコンペンセータ12との間の光路上に配置され、光源10が照射する照明光の1方向の偏光成分のみを透過させる。ポラライザ11は、光軸XAを回転軸として回転可能に光路上に配置される。ポラライザ11は、光学素子の1つである偏光板を用いて構成される。また、ポラライザ11は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ11aによって光軸XAを中心にして回転させられる。なお、本実施の形態1では、ポラライザ11が第1偏光板として機能する。   The polarizer 11 is disposed on the optical path between the light source 10 and the compensator 12 and transmits only the polarization component in one direction of the illumination light emitted by the light source 10. The polarizer 11 is disposed on the optical path so as to be rotatable about the optical axis XA as a rotation axis. The polarizer 11 is configured using a polarizing plate that is one of optical elements. Further, the polarizer 11 is rotated around the optical axis XA by a motor 11 a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27. In the first embodiment, the polarizer 11 functions as the first polarizing plate.

コンペンセータ12は、標本Spの異方性による位相差を測定するための光学素子であり、リタデーションを可変する構造を有する。コンペンセータ12は、ポラライザ11を透過した光のリタデーションを変化させる。コンペンセータ12は、ポラライザ11とコンデンサターレット13との間の光路上に配置される。コンペンセータ12は、光軸XAを回転軸として回転可能に光路上に配置される。   The compensator 12 is an optical element for measuring the phase difference due to the anisotropy of the specimen Sp, and has a structure for changing the retardation. The compensator 12 changes the retardation of the light transmitted through the polarizer 11. The compensator 12 is disposed on the optical path between the polarizer 11 and the condenser turret 13. The compensator 12 is disposed on the optical path so as to be rotatable about the optical axis XA as a rotation axis.

コンペンセータ12は、液晶または波長板を用いて構成される。具体的には、コンペンセータ12は、ベレークコンペンセータ、セナルモン式コンペンセータ、ブレースケーラコンペンセータ、石英楔コンペンセータおよび液晶変調素子を用いて構成される。コンペンセータ12としては、卵子の紡錘体を観察するPO観察を行う際に視野のリタデーションがほぼ均一となることが望ましいため、液晶変調素子、セナルモン式コンペンセータ、ブレースケーラコンペンセータが好ましい。なお、コンペンセータ12として、液晶変調素子を用いる場合、液晶分子を電気的に制御することによって、リタデーションを変化させることができる。   The compensator 12 is configured using a liquid crystal or a wave plate. Specifically, the compensator 12 is configured using a bereak compensator, a senal mon type compensator, a brace scaler compensator, a quartz wedge compensator, and a liquid crystal modulation element. The compensator 12 is preferably a liquid crystal modulation element, a senalmon type compensator, or a brace scaler compensator because it is desirable that the retardation of the visual field be substantially uniform when performing PO observation for observing the ovum spindle. When a liquid crystal modulation element is used as the compensator 12, the retardation can be changed by electrically controlling the liquid crystal molecules.

また、コンペンセータ12として、セナルモン式コンペンセータを用いる場合、コンペンセータ12内の波長板に対するポラライザ11の回転によって、コンペンセータ12のリタデーションを変化させることができる。さらに、コンペンセータ12として、ブレースケーラコンペンセータを用いる場合、コンペンセータ12内のプリズムの回転によって、コンペンセータ12のリタデーションを変化させることができる。さらにまた、コンペンセータ12は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ12aによって光軸XAを中心にして回転させられる。   When a Senalmon type compensator is used as the compensator 12, the retardation of the compensator 12 can be changed by the rotation of the polarizer 11 with respect to the wave plate in the compensator 12. Further, when a brace scaler compensator is used as the compensator 12, the retardation of the compensator 12 can be changed by the rotation of the prism in the compensator 12. Furthermore, the compensator 12 is rotated around the optical axis XA by a motor 12a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27.

コンデンサターレット13は、円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって複数の穴部のいずれか一つを光路上に配置する。コンデンサターレット13は、観察方法や対物レンズ18の倍率に応じて切り替えて用いられる複数の光学素子をそれぞれ複数の穴部に保持する。コンデンサターレット13は、ポラライザ11とコンデンサレンズ14との間の光路上に回転可能に配置される。コンデンサターレット13は、観察法に応じて回転させられることによって、いずれかの光学素子を光路上に挿脱可能に配置する。また、コンデンサターレット13は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ13aによって回転させられる。   The capacitor turret 13 has a disk shape, and a plurality of holes each capable of holding an optical element are formed along the circumferential direction of the main surface. By rotating about a predetermined axis as a rotation axis, a plurality of holes are formed. Either one is placed on the optical path. The condenser turret 13 holds a plurality of optical elements that are used by switching according to the observation method and the magnification of the objective lens 18 in a plurality of holes. The condenser turret 13 is rotatably disposed on the optical path between the polarizer 11 and the condenser lens 14. The condenser turret 13 is rotated in accordance with the observation method, so that one of the optical elements is detachably disposed on the optical path. Further, the capacitor turret 13 is rotated by a motor 13 a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27.

図3は、コンデンサターレット13の構成を模式的に示す図である。図3に示すように、コンデンサターレット13は、円盤状をなし、複数の穴部130のうち光学素子を保持しない所定の空穴130を基準に見たときに主面の周方向に沿って適用倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用開口板を保持する。具体的には、コンデンサターレット13は、複数の穴部130それぞれによって20倍RC用開口板131(第1RC用開口板)と、40倍RC用開口板132(第2RC用開口板)と、60倍DIC用プリズム133と、を保持する。より詳細には、コンデンサターレット13は、空穴130(1番)を基準に見たときに周方向に沿って20倍RC用開口板131(2番)、40倍RC用開口板132(3番)および60倍DIC用プリズム(4番)の順で各穴部130に保持される。   FIG. 3 is a diagram schematically showing the configuration of the capacitor turret 13. As shown in FIG. 3, the capacitor turret 13 has a disk shape and is applied along the circumferential direction of the main surface when viewed from a predetermined hole 130 that does not hold an optical element among the plurality of holes 130. A plurality of relief contrast observation aperture plates having successively higher magnifications are held. Specifically, the capacitor turret 13 includes a 20 × RC opening plate 131 (first RC opening plate), a 40 × RC opening plate 132 (second RC opening plate), and 60 The double DIC prism 133 is held. More specifically, the capacitor turret 13 has a 20 × RC opening plate 131 (No. 2) and a 40 × RC opening plate 132 (3) along the circumferential direction when viewed from the air hole 130 (No. 1). No.) and 60 × DIC prism (No. 4) in this order.

空穴130は、コンデンサターレット13の回転により光路上に配置される。空穴130は、コンデンサターレット13とともに開口板を構成する。空穴130は、光源10からの照明光を遮らない十分な大きさで形成され、開口数の高い照明を実現する。空穴130は、たとえば、顕微鏡1が明視野観察法(以下、「BF観察法」という)またはPO観察法を行う際に用いられる。具体的には、空穴130は、顕微鏡1がBF観察法を行う場合、ユーザが顕微授精の準備のため、4倍または10倍の対物レンズ18を用いてシャーレ100内における場所探しやマニピュレータによって操作されるマイクロピペットの針先の位置決め等を行う際に用いられる。   The air hole 130 is arranged on the optical path by the rotation of the condenser turret 13. The air holes 130 constitute an aperture plate together with the capacitor turret 13. The air hole 130 is formed with a sufficient size that does not block the illumination light from the light source 10 and realizes illumination with a high numerical aperture. The holes 130 are used, for example, when the microscope 1 performs a bright field observation method (hereinafter referred to as “BF observation method”) or a PO observation method. Specifically, when the microscope 1 performs the BF observation method, the hole 130 is used for searching for a place in the petri dish 100 or using a manipulator by using a 4 × or 10 × objective lens 18 in preparation for microinsemination. It is used when positioning the tip of a micropipette to be operated.

RC観察用開口板131は、コンデンサターレット13の回転により光路上に配置される。RC観察用開口板131は、RC観察に用いられる開口板であり、光路上に配置された際に光軸XAからずれた(偏心した)位置に形成された開口131aの一部に偏光板131bを有する。開口131aは、RC観察用開口板131の中心からずれた位置に形成されることによって偏斜照明を実現する。このように構成されたRC観察用開口板131は、たとえば、ユーザが顕微鏡1で20倍のRC観察法を行う場合に用いられる。   The RC observation aperture plate 131 is disposed on the optical path by the rotation of the condenser turret 13. The RC observation aperture plate 131 is an aperture plate used for RC observation, and is disposed on a part of the aperture 131a formed at a position shifted (eccentric) from the optical axis XA when arranged on the optical path. Have The opening 131a is formed at a position shifted from the center of the RC observation opening plate 131, thereby realizing oblique illumination. The RC observation aperture plate 131 configured in this way is used, for example, when the user performs a 20-fold RC observation method with the microscope 1.

RC観察用開口板132は、コンデンサターレット13の回転により光路上に配置される。RC観察用開口板132は、RC観察に用いられる開口板であり、光路上に配置された際に光軸XAからずれた(偏心した)位置に形成された開口132aの一部に偏光板132bを有する。開口132aは、RC観察用開口板132の中心からずれた位置に形成されることによって偏斜照明を実現する。このように構成されたRC観察用開口板132は、たとえば、ユーザが顕微鏡1で40倍のRC観察法を行う場合に用いられる。   The RC observation aperture plate 132 is arranged on the optical path by the rotation of the condenser turret 13. The RC observation aperture plate 132 is an aperture plate used for RC observation, and is disposed on a part of the aperture 132a formed at a position shifted (eccentric) from the optical axis XA when placed on the optical path. Have The opening 132a is formed at a position shifted from the center of the RC observation opening plate 132, thereby realizing oblique illumination. The RC observation aperture plate 132 configured in this way is used, for example, when the user performs a 40-fold RC observation method with the microscope 1.

DICプリズム133は、コンデンサターレット13の回転により光路上に配置される。DICプリズム133は、後述する対物レンズ18側の像側に配置されたDICプリズム20と対をなし、微分干渉光学系を構成する。DICプリズム133は、ノマルスキープリズム等を用いて構成される。DICプリズム133は、たとえば、ユーザが顕微鏡1で60倍のDIC観察法を行う際に用いられる。   The DIC prism 133 is arranged on the optical path by the rotation of the condenser turret 13. The DIC prism 133 is paired with a DIC prism 20 disposed on the image side on the objective lens 18 side, which will be described later, and constitutes a differential interference optical system. The DIC prism 133 is configured using a Nomarski prism or the like. The DIC prism 133 is used, for example, when the user performs a DIC observation method of 60 times with the microscope 1.

このように構成されたコンデンサターレット13は、観察法に応じて、コンデンサターレット13がモータ13aによって回転させられることによって、光路上に配置される光学素子が切り替えられる。具体的には、コンデンサターレット13は、RC観察法を行う場合、RC観察用開口板131またはRC観察用開口板132が光路上に配置され、DIC観察法を行う場合、DICプリズム133が光路上に配置され、BF観察法またはPO観察法を行う場合、空穴130が光路上に配置される。   In the thus configured condenser turret 13, the optical element disposed on the optical path is switched by rotating the condenser turret 13 by the motor 13a according to the observation method. Specifically, when performing the RC observation method, the condenser turret 13 has the RC observation aperture plate 131 or the RC observation aperture plate 132 disposed on the optical path. When performing the DIC observation method, the DIC prism 133 is disposed on the optical path. When the BF observation method or the PO observation method is performed, the hole 130 is disposed on the optical path.

コンデンサレンズ14は、光源10から出射された照明光を集光し、シャーレ100内の標本Spを含む領域に対して均一に照射する。なお、コンデンサレンズ14は、光源10から出射された照明光の光量を調整可能な視野絞りと、視野絞りの径を変化させる視野絞り操作部とを設けてもよい。   The condenser lens 14 collects the illumination light emitted from the light source 10 and uniformly irradiates the region including the sample Sp in the petri dish 100. The condenser lens 14 may include a field stop that can adjust the amount of illumination light emitted from the light source 10 and a field stop operation unit that changes the diameter of the field stop.

ステージ15は、XYZ方向に移動自在に構成される。ステージ15は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ15aによってXY平面内またはZ方向に移動する。ステージ15は、標本Spが配置されたシャーレ100が載置される。ステージ15は、制御部6の制御のもと、XY平面における所定の原点位置を基点としてモータ15aの駆動量が算出されることによって、標本Sp上の所望の観察箇所(観察領域)に移動する。また、ステージ15は、制御部6の制御のもと、標本Spに対するコンデンサレンズ14および対物レンズ18のピントが合う位置(合焦位置)に移動する。なお、ステージ15に、シャーレ100を一定温度に保持する加温部を設けてもよい。また、ステージ15は、電動である必要はなく、手動で移動可能であってもよい。   The stage 15 is configured to be movable in the XYZ directions. The stage 15 is moved in the XY plane or in the Z direction by a motor 15 a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27. On the stage 15, the petri dish 100 on which the specimen Sp is placed is placed. The stage 15 moves to a desired observation location (observation region) on the specimen Sp by calculating the driving amount of the motor 15a based on a predetermined origin position on the XY plane under the control of the control unit 6. . Further, the stage 15 moves to a position (focus position) where the condenser lens 14 and the objective lens 18 are in focus with respect to the sample Sp under the control of the control unit 6. The stage 15 may be provided with a heating unit that holds the petri dish 100 at a constant temperature. Moreover, the stage 15 does not need to be electrically driven and may be manually movable.

ここで、標本Spが配置されたシャーレ100について詳細に説明する。図4は、標本Spを含むシャーレ100の平面図である。図5は、図4のA―A線断面図である。   Here, the petri dish 100 in which the specimen Sp is arranged will be described in detail. FIG. 4 is a plan view of the petri dish 100 including the specimen Sp. 5 is a cross-sectional view taken along line AA in FIG.

図4および図5に示すように、顕微授精で用いられるシャーレ100は、卵子Sp11に精子Sp12を授精させるICSI用ドロップR1(培養液)および精子Sp12を選別する精子選別用ドロップR2(培養液)が形成され、各ドロップが空気に触れて細菌に感染することを防止するミネラルオイルWaによって覆われている。なお、シャーレ100内におけるドロップの数は、適宜変更することができる。   As shown in FIGS. 4 and 5, the petri dish 100 used for microinsemination is an ICSI drop R1 (culture solution) for fertilizing sperm Sp12 to an egg Sp11 and a sperm selection drop R2 (culture solution) for selecting sperm Sp12. And is covered with mineral oil Wa that prevents each drop from touching the air and infecting bacteria. Note that the number of drops in the petri dish 100 can be changed as appropriate.

ターレット位置検出部16は、光路上に配置されたコンデンサターレット13の光学素子(穴番号)を検出し、この検出結果を制御部6に出力する。ターレット位置検出部16は、エンコーダや光フォトインタラプタ等を用いて構成される。なお、ターレット位置検出部16は、駆動制御部27からモータ13aに出力される駆動信号に応じて駆動するモータ13aのパルス数に基づいて、光路上に配置されたコンデンサターレット13の光学素子を検出し、この検出結果を制御部6に出力してもよい。   The turret position detection unit 16 detects the optical element (hole number) of the condenser turret 13 arranged on the optical path, and outputs the detection result to the control unit 6. The turret position detection unit 16 is configured using an encoder, an optical photo interrupter, or the like. The turret position detection unit 16 detects the optical element of the capacitor turret 13 arranged on the optical path based on the number of pulses of the motor 13a that is driven according to the drive signal output from the drive control unit 27 to the motor 13a. The detection result may be output to the control unit 6.

レボルバ17は、標本Spを挟んでコンデンサターレット13と対向する光路上に配置される。レボルバ17は、各々が対物レンズ18を保持可能な複数の保持部170(穴部)が主面の周方向に沿って形成される。レボルバ17は、複数の保持部170のいずれかを光路上に配置する。レボルバ17は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ17aによって回転させられることによって、光路上に観察法に応じた対物レンズ18を配置する。レボルバ17は、スイングレボルバ等を用いて構成される。   The revolver 17 is disposed on the optical path facing the condenser turret 13 with the sample Sp interposed therebetween. In the revolver 17, a plurality of holding portions 170 (holes) each capable of holding the objective lens 18 are formed along the circumferential direction of the main surface. The revolver 17 arranges any of the plurality of holding units 170 on the optical path. The revolver 17 is rotated by a motor 17a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27, thereby arranging the objective lens 18 corresponding to the observation method on the optical path. The revolver 17 is configured using a swing revolver or the like.

図6は、レボルバ17の複数の保持部170それぞれ保持される各対物レンズの配置を模式的に示す図である。図6に示すように、レボルバ17は、最小倍率の対物レンズ181(1番)を基準に見たときに周方向に沿って倍率を高くした20倍のRC用対物レンズ182(2番)、40倍のRC用対物レンズ183(3番)および最大倍率の対物レンズ184(4番)がそれぞれ各保持部170によって保持される。   FIG. 6 is a diagram schematically illustrating the arrangement of the objective lenses held by the plurality of holding units 170 of the revolver 17. As shown in FIG. 6, the revolver 17 includes a 20 × RC objective lens 182 (No. 2) having a magnification increased along the circumferential direction when viewed with the objective lens 181 (No. 1) having the minimum magnification as a reference. The 40 × RC objective lens 183 (No. 3) and the maximum magnification objective lens 184 (No. 4) are respectively held by the holding units 170.

対物レンズ181は、マイクロピペットの針先の観察に適した倍率、たとえば、4倍の低倍率を有する対物レンズであり、BF観察法に用いられる。   The objective lens 181 is an objective lens having a magnification suitable for observing the tip of a micropipette, for example, a low magnification of 4 times, and is used for the BF observation method.

対物レンズ182は、卵子または精子の観察に適した20倍のRC用対物レンズであり、20倍RC観察法に用いられる。対物レンズ182は、対物レンズ182の瞳位置に、透過率の異なる3つの領域を有するモジュレータ1821を有する。モジュレータ1821は、100%の透過率を有する領域1821aと、25%程度の透過率を有する領域1821bと、0%の透過率を有する領域1821cと、を有する。モジュレータ1821は、コンデンサレンズ14の瞳位置に配置された20倍RC観察用開口板131と光学的に共役な関係を有する。また、対物レンズ182は、卵子の紡錘体を主な観察対象とし、ほぼ同程度の倍率が要求されるPO観察法にも適用される。   The objective lens 182 is a 20 × RC objective lens suitable for observing an egg or sperm, and is used in a 20 × RC observation method. The objective lens 182 has a modulator 1821 having three regions with different transmittances at the pupil position of the objective lens 182. The modulator 1821 includes a region 1821a having a transmittance of 100%, a region 1821b having a transmittance of approximately 25%, and a region 1821c having a transmittance of 0%. The modulator 1821 has an optically conjugate relationship with the 20 × RC observation aperture plate 131 disposed at the pupil position of the condenser lens 14. The objective lens 182 is also applied to a PO observation method in which an ovum spindle is a main observation target and approximately the same magnification is required.

対物レンズ183は、卵子または精子の観察に適した40倍のRC用対物レンズであり、40倍RC観察法に用いられる。対物レンズ183は、対物レンズ183の瞳位置に、透過率の異なる3つの領域を有するモジュレータ(図示せず)を有する。   The objective lens 183 is a 40 × RC objective lens suitable for observing an egg or sperm, and is used in a 40 × RC observation method. The objective lens 183 has a modulator (not shown) having three regions with different transmittances at the pupil position of the objective lens 183.

対物レンズ184は、良質な精子の選別に適した倍率、たとえば60倍または100倍等の高倍率を有する対物レンズであり、DIC観察法に用いられる。   The objective lens 184 is an objective lens having a magnification suitable for selection of high-quality sperm, for example, a high magnification such as 60 times or 100 times, and is used in the DIC observation method.

レボルバ位置検出部19は、光路上に配置された対物レンズ18(レボルバ17の穴番号)を検出し、この検出結果を制御部6に出力する。レボルバ位置検出部19は、エンコーダや光フォトインタラプタ等を用いて構成される。なお、レボルバ位置検出部19は、駆動制御部27からモータ17aに出力される駆動信号に応じて駆動するモータ17aのパルス数に基づいて、光路上に配置された対物レンズ18(レボルバ17の穴番号)を検出し、この検出結果を制御部6に出力してもよい。   The revolver position detector 19 detects the objective lens 18 (hole number of the revolver 17) arranged on the optical path, and outputs the detection result to the controller 6. The revolver position detector 19 is configured using an encoder, an optical photo interrupter, or the like. Note that the revolver position detector 19 is configured so that the objective lens 18 (hole of the revolver 17) disposed on the optical path is based on the number of pulses of the motor 17a that is driven according to the drive signal output from the drive controller 27 to the motor 17a. Number) may be detected, and the detection result may be output to the control unit 6.

DICプリズム20は、DICプリズム133と対を成し、微分干渉光学系を構成する。DICプリズム20は、ノマルスキープリズム等を用いて構成される。DICプリズム20は、対物レンズ18とアナライザ21との間の光路上に対して挿脱可能に配置される。また、DICプリズム20は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ20aによって光路上に配置される。   The DIC prism 20 is paired with the DIC prism 133 and constitutes a differential interference optical system. The DIC prism 20 is configured using a Nomarski prism or the like. The DIC prism 20 is detachably disposed on the optical path between the objective lens 18 and the analyzer 21. Further, the DIC prism 20 is arranged on the optical path by a motor 20 a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27.

アナライザ21は、対物レンズ18の後段の観察側の光路上に配置される。アナライザ21は、光軸XAを回転軸として回転可能に光路上に配置される。アナライザ21は、ポラライザ11との相対的な位置関係に応じて標本Spを透過した光の1方向の偏光成分のみを透過させる。また、ポラライザ11およびアナライザ21は、顕微鏡1がPO観察を行う場合、互いに偏光方向が直交するクロスニコルの状態になるように配置される。また、アナライザ21は、駆動制御部27の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはDCモータ等によって構成されたモータ21aによって光軸XAを回転軸として回転させられる。なお、アナライザ21は、光路上に挿脱可能に配置されてもよい。なお、本実施の形態1では、アナライザ21が第2偏光板として機能する。   The analyzer 21 is disposed on the optical path on the observation side after the objective lens 18. The analyzer 21 is disposed on the optical path so as to be rotatable about the optical axis XA as a rotation axis. The analyzer 21 transmits only the polarization component in one direction of the light transmitted through the sample Sp according to the relative positional relationship with the polarizer 11. Further, the polarizer 11 and the analyzer 21 are arranged so as to be in a crossed Nicol state in which the polarization directions are orthogonal to each other when the microscope 1 performs PO observation. Further, the analyzer 21 is rotated about the optical axis XA as a rotation axis by a motor 21 a configured by a stepping motor, a DC motor, or the like under the drive control of the drive control unit 27. The analyzer 21 may be arranged to be detachable on the optical path. In the first embodiment, the analyzer 21 functions as the second polarizing plate.

結像レンズ22は、対物レンズ18から出射された光を集光して観察像を結像する。結像レンズ22は、一または複数のレンズを用いて構成される。   The imaging lens 22 condenses the light emitted from the objective lens 18 and forms an observation image. The imaging lens 22 is configured using one or a plurality of lenses.

光路分割プリズム23は、結像レンズ22で結像された観察像の光を撮像部24とミラー25に分割する。光路分割プリズム23は、接合面に光を分割するためのコーティングが施されたプリズムを用いて構成される。   The optical path dividing prism 23 divides the light of the observation image formed by the imaging lens 22 into the imaging unit 24 and the mirror 25. The optical path splitting prism 23 is configured by using a prism having a coating for splitting light on the joint surface.

撮像部24は、結像レンズ22および光路分割プリズム23を経て入射された標本Spの観察像を撮像して画像データを生成し、この画像データを制御部6へ出力する。撮像部24は、CCD(Charge Coupled Device)またはCMOS(Complementary Metal Oxide Semiconductor)等の撮像素子を用いて構成される。   The imaging unit 24 captures an observation image of the specimen Sp incident through the imaging lens 22 and the optical path dividing prism 23 to generate image data, and outputs the image data to the control unit 6. The imaging unit 24 is configured using an imaging element such as a charge coupled device (CCD) or a complementary metal oxide semiconductor (CMOS).

ミラー25は、結像レンズ22から出射された観察像を接眼レンズ26へ向けて反射する。なお、ミラー25と接眼レンズ26との光路上に、複数のリレーレンズを設けてもよい。   The mirror 25 reflects the observation image emitted from the imaging lens 22 toward the eyepiece lens 26. A plurality of relay lenses may be provided on the optical path between the mirror 25 and the eyepiece lens 26.

接眼レンズ26は、結像レンズ22、光路分割プリズム23およびミラー25を介して入射された観察像を拡大する。接眼レンズ26は、一または複数のレンズを用いて構成される。   The eyepiece 26 enlarges the observation image incident through the imaging lens 22, the optical path splitting prism 23, and the mirror 25. The eyepiece 26 is configured using one or a plurality of lenses.

駆動制御部27は、駆動ドライバおよびCPU(Central Processing Unit)等を用いて構成され、制御部6の制御のもと、顕微鏡本体部2の各光学ユニットを移動または回転させる。具体的には、駆動制御部27は、制御部6の制御のもと、モータ11a、モータ12a、モータ13a、モータ15a、モータ17a、モータ20a、モータ21aそれぞれを駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、ステージ15、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を所定の位置に回転または移動させる。   The drive control unit 27 is configured using a drive driver, a CPU (Central Processing Unit), and the like, and moves or rotates each optical unit of the microscope main body 2 under the control of the control unit 6. Specifically, the drive control unit 27 drives the polarizer 11, the motor 12 a, the motor 13 a, the motor 15 a, the motor 17 a, the motor 20 a, and the motor 21 a under the control of the control unit 6. The compensator 12, the condenser turret 13, the stage 15, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are rotated or moved to predetermined positions.

操作入力部3は、顕微鏡1の各種の操作の入力を受け付ける。操作入力部3は、キーボード、マウス、ジョイスティック、タッチパネルおよび各種ボタン等を用いて構成され、各種スイッチの操作に応じた指示信号を制御部6に出力する。   The operation input unit 3 receives input of various operations of the microscope 1. The operation input unit 3 is configured using a keyboard, a mouse, a joystick, a touch panel, various buttons, and the like, and outputs instruction signals according to operations of various switches to the control unit 6.

図7は、操作入力部3の構成を示す図である。図7に示すように、操作入力部3は、各観察法を指示する指示信号の入力を受け付けるボタンB1〜B5と、コントラストを調整する指示信号の入力を受け付けるボタンB6,B7と、対物レンズ18の倍率を指示する指示信号の入力を受け付けるボタンB8〜B13と、を有する。   FIG. 7 is a diagram illustrating a configuration of the operation input unit 3. As shown in FIG. 7, the operation input unit 3 includes buttons B1 to B5 that receive input of instruction signals for instructing each observation method, buttons B6 and B7 that receive input of instruction signals for adjusting contrast, and the objective lens 18. Buttons B8 to B13 for receiving an input of an instruction signal for instructing the magnification.

表示部4は、制御部6を介して撮像部24から入力される画像データに対応する画像を表示する。表示部4は、液晶または有機EL(Electro Luminescence)等からなる表示パネルを用いて構成される。   The display unit 4 displays an image corresponding to the image data input from the imaging unit 24 via the control unit 6. The display part 4 is comprised using the display panel which consists of a liquid crystal or organic EL (Electro Luminescence).

記録部5は、顕微鏡1に実行させる各種プログラム、プログラムの実行中に使用される各種データを記録する。記録部5は、フラッシュメモリおよびRAM(Random Access Memory)等の半導体メモリを用いて構成される。また、記録部5は、観察法毎に光路上における各光学ユニットそれぞれの位置情報を対応付けた設定情報を記録する設定情報記録部51を有する。   The recording unit 5 records various programs to be executed by the microscope 1 and various data used during the execution of the programs. The recording unit 5 is configured using a semiconductor memory such as a flash memory and a RAM (Random Access Memory). The recording unit 5 includes a setting information recording unit 51 that records setting information in which position information of each optical unit on the optical path is associated with each observation method.

図8は、設定情報記録部51が記録する設定情報を示す図である。図8に示すように、設定情報T1には、各観察法に応じたレボルバ17の対物レンズ18とコンデンサターレット13の光学素子の組み合わせが記録されている。図8に示すように、BF観察法を行う場合、第1対物レンズ181と空穴130との組み合わせが記載されている。   FIG. 8 is a diagram showing the setting information recorded by the setting information recording unit 51. As shown in FIG. 8, in the setting information T1, combinations of the objective lens 18 of the revolver 17 and the optical elements of the condenser turret 13 corresponding to each observation method are recorded. As shown in FIG. 8, when performing the BF observation method, a combination of the first objective lens 181 and the air hole 130 is described.

制御部6は、CPU等を用いて構成され、顕微鏡1を構成する各部の動作を統括的に制御する。制御部6は、操作入力部3から入力される操作信号に応じて、駆動制御部27を駆動することによって顕微鏡1を構成する各光学ユニットを移動させる。具体的には、制御部6は、設定情報記録部51が記録する設定情報T1を参照し、駆動制御部27に複数の光学ユニットをそれぞれ観察法毎に応じた光路上の位置へ移動させることによって観察法を変更する。   The control unit 6 is configured using a CPU or the like, and comprehensively controls the operation of each unit configuring the microscope 1. The control unit 6 moves each optical unit constituting the microscope 1 by driving the drive control unit 27 in accordance with the operation signal input from the operation input unit 3. Specifically, the control unit 6 refers to the setting information T1 recorded by the setting information recording unit 51 and causes the drive control unit 27 to move the plurality of optical units to positions on the optical path corresponding to each observation method. Change the observation method.

このように構成された顕微鏡1は、制御部6の制御のもと、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21それぞれの光路上における位置や角度を切り替えることで、BF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を行うことができる。   The microscope 1 configured as described above switches the position and angle of each of the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 on the optical path under the control of the control unit 6. BF observation method, RC observation method, PO observation method and DIC observation method can be performed.

つぎに、顕微鏡1が実行するコンデンサターレット13およびレボルバ17の駆動処理について説明する。図9は、顕微鏡1が実行するコンデンサターレット13およびレボルバ17の切替処理の概要を示すフローチャートである。なお、以下においては、レボルバ17の駆動を例に説明する。   Next, a driving process for the condenser turret 13 and the revolver 17 executed by the microscope 1 will be described. FIG. 9 is a flowchart showing an outline of switching processing of the condenser turret 13 and the revolver 17 executed by the microscope 1. Hereinafter, the driving of the revolver 17 will be described as an example.

図9に示すように、操作入力部3から観察法を指示する指示信号が入力された場合、制御部6は、レボルバ位置検出部19を介して光路上におけるレボルバ17の現在の穴番号を取得する(ステップS101)。   As shown in FIG. 9, when an instruction signal instructing an observation method is input from the operation input unit 3, the control unit 6 acquires the current hole number of the revolver 17 on the optical path via the revolver position detection unit 19. (Step S101).

続いて、観察法に応じた対物レンズ18が装着された指示の穴番号から現在の穴番号を引いた値が負((指示の穴番号−現在の穴番号)<0)の場合(ステップS102:Yes)において、顕微鏡1は、後述するステップS103へ移行する。これに対して、観察法に応じた対物レンズ18が装着された指示の穴番号から現在の穴番号を引いた値が負でない場合(ステップS102:No)、顕微鏡1は、後述するステップS106へ移行する。   Subsequently, when the value obtained by subtracting the current hole number from the instruction hole number to which the objective lens 18 is attached according to the observation method is negative ((instruction hole number−current hole number) <0) (step S102). : Yes), the microscope 1 proceeds to Step S103 described later. On the other hand, when the value obtained by subtracting the current hole number from the instruction hole number in which the objective lens 18 according to the observation method is attached is not negative (step S102: No), the microscope 1 proceeds to step S106 described later. Transition.

ステップS103において、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さい((指示の穴番号−現在の穴番号)<(最大の穴番号÷2))場合(ステップS103:Yes)、顕微鏡1は、後述するステップS104へ移行する。これに対して、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さくない場合(ステップS103:No)、顕微鏡1は、後述するステップS105へ移行する。   In step S103, the absolute value of the difference between the indicated hole number and the current hole number is smaller than half of the maximum hole number ((indicated hole number−current hole number) <(maximum hole number / 2)). ) (Step S103: Yes), the microscope 1 proceeds to step S104 described later. On the other hand, when the absolute value of the difference between the designated hole number and the current hole number is not smaller than half of the maximum hole number (step S103: No), the microscope 1 proceeds to step S105 described later. .

ステップS104において、制御部6は、駆動制御部27によって指示の穴番号へレボルバ17を反時計回りに移動させる。その後、顕微鏡1は、本処理を終了する。   In step S104, the control unit 6 causes the drive control unit 27 to move the revolver 17 counterclockwise to the designated hole number. Thereafter, the microscope 1 ends this process.

ステップS105において、制御部6は、駆動制御部27によって指示の穴番号へレボルバ17を時計周りに移動させる。その後、顕微鏡1は、本処理を終了する。   In step S105, the control unit 6 causes the drive control unit 27 to move the revolver 17 clockwise to the designated hole number. Thereafter, the microscope 1 ends this process.

ステップS106において、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さい((指示の穴番号−現在の穴番号)<(最大の穴番号÷2))場合(ステップS106:Yes)、顕微鏡1は、後述するステップS107へ移行する。これに対して、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さくない場合(ステップS106:No)、顕微鏡1は、後述するステップS108へ移行する。   In step S106, the absolute value of the difference between the indicated hole number and the current hole number is smaller than half of the maximum hole number ((indicated hole number−current hole number) <(maximum hole number / 2)). ) (Step S106: Yes), the microscope 1 proceeds to step S107 described later. On the other hand, when the absolute value of the difference between the designated hole number and the current hole number is not smaller than half of the maximum hole number (step S106: No), the microscope 1 proceeds to step S108 described later. .

ステップS107において、制御部6は、駆動制御部27によって指示の穴番号へレボルバ17を時計周りに移動させる。その後、顕微鏡1は、本処理を終了する。   In step S107, the controller 6 causes the drive controller 27 to move the revolver 17 clockwise to the indicated hole number. Thereafter, the microscope 1 ends this process.

ステップS108において、制御部6は、駆動制御部27によって指示の穴番号へレボルバ17を反時計回りに移動させる。その後、顕微鏡1は、本処理を終了する。   In step S108, the controller 6 causes the drive controller 27 to move the revolver 17 counterclockwise to the indicated hole number. Thereafter, the microscope 1 ends this process.

このように制御部6は、駆動制御部27を介して上述した切替処理をレボルバ17に実行することにより、現在の穴番号と指示の穴番号との関係からレボルバ17を回転させる回転方向を決定してレボルバ17を時計回りまたは反時計回りに回転させる。これにより、操作入力部3から入力された指示信号の観察法に応じた穴番号を光路上に挿入する場合であっても、レボルバ17の移動量(回転量)を最小にすることができる。なお、制御部6は、コンデンサターレット13の場合であっても、同様の切替処理を行う。これにより、コンデンサターレット13の移動量を最小にすることができる。   In this way, the control unit 6 determines the rotation direction for rotating the revolver 17 from the relationship between the current hole number and the indicated hole number by executing the switching process described above on the revolver 17 via the drive control unit 27. Then, the revolver 17 is rotated clockwise or counterclockwise. Thereby, even when the hole number corresponding to the observation method of the instruction signal input from the operation input unit 3 is inserted on the optical path, the movement amount (rotation amount) of the revolver 17 can be minimized. Note that the control unit 6 performs the same switching process even in the case of the capacitor turret 13. Thereby, the movement amount of the capacitor turret 13 can be minimized.

つぎに、顕微鏡1においてICSIを実施する場合において、観察法を切り替えたときのコンデンサターレット13およびレボルバ17の移動について詳細に説明する。図10Aは、本実施の形態1にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。図10Bは、本実施の形態1にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。図10Cは、本実施の形態1にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。図10Dは、本実施の形態1にかかる顕微鏡1において、顕微鏡1でBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す図である。   Next, the movement of the condenser turret 13 and the revolver 17 when the observation method is switched when the ICSI is performed in the microscope 1 will be described in detail. FIG. 10A is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope 1 according to the first embodiment. FIG. 10B is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope 1 according to the first embodiment. FIG. 10C is a diagram illustrating a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the first embodiment. FIG. 10D is a diagram illustrating a procedure when the microscope 1 according to the first embodiment performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method with the microscope 1.

まず、ユーザが顕微鏡1でBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合を説明する。この場合、図10Aに示すように、ユーザによって顕微鏡1の電源が投入されると、顕微鏡1は、初期化処理を実行する(A1)。   First, a case where the user performs ICSI with the microscope 1 using the BF observation method and the RC observation method will be described. In this case, as shown in FIG. 10A, when the microscope 1 is turned on by the user, the microscope 1 executes an initialization process (A1).

続いて、図10A(1)に示すように、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21をBF観察法の位置に移動させる(A2)。この場合、制御部6は、レボルバ17の1番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット13の1番を光路上に挿入する。ユーザは、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動完了後、マニュピュレータ(図示せず)に装着されたホールディングピペットの位置の調整を行う(A3)。   Subsequently, as shown in FIG. 10A (1), the control unit 6 drives the drive control unit 27 to observe the polarizer 11, the compensator 12, the capacitor turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 by BF observation. Move to the legal position (A2). In this case, the control unit 6 inserts No. 1 of the revolver 17 on the optical path and inserts No. 1 of the capacitor turret 13 on the optical path. After the movement of the revolver 17 and the condenser turret 13 is completed, the user adjusts the position of the holding pipette attached to the manipulator (not shown) (A3).

その後、操作入力部3のボタンB2から20倍のRC観察法を指示する指示信号が入力された場合(A4)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のRC観察法の位置に移動させる(A5)。この場合、図10A(2)に示すように、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット13の2番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ17およびコンデンサターレット13それぞれの移動量は、1穴分となる。ユーザは、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動完了後、精子Sp12が入った精子選別用ドロップR2を観察するため、ステージ15を手動または電動で移動させる(A6)。ステージ15の移動後、ユーザは、インジェクションする精子Sp12の選別を行う(A7)。   Thereafter, when an instruction signal for instructing a 20-fold RC observation method is input from the button B2 of the operation input unit 3 (A4), the control unit 6 drives the drive control unit 27 to thereby connect the polarizer 11 and the compensator 12. Then, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the RC observation method 20 times (A5). In this case, as shown in FIG. 10A (2), the control unit 6 inserts the second of the revolver 17 on the optical path and inserts the second of the capacitor turret 13 on the optical path. At this time, the amount of movement of each of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is one hole. After completing the movement of the revolver 17 and the condenser turret 13, the user moves the stage 15 manually or electrically to observe the sperm sorting drop R2 containing the sperm Sp12 (A6). After the movement of the stage 15, the user selects the sperm Sp12 to be injected (A7).

続いて、操作入力部3のボタンB3から40倍のRC観察法を指示する指示信号が入力された場合(A8)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のRC観察法の位置に移動させる(A9)。この場合、図10A(3)に示すように、制御部6は、レボルバ17の3番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット13の3番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ17およびコンデンサターレット13それぞれの移動量は、1穴分となる。ユーザは、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動完了後、インジェクションピペットで精子Sp12の尾部に損傷を与え、精子Sp12を不動化し、不動化させた精子Sp12をインクジェクションピペットで吸引する(A10)。   Subsequently, when an instruction signal for instructing a 40-fold RC observation method is input from the button B3 of the operation input unit 3 (A8), the control unit 6 drives the drive control unit 27, whereby the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the RC observation method 20 times (A9). In this case, as shown in FIG. 10A (3), the control unit 6 inserts the third of the revolver 17 on the optical path and inserts the third of the condenser turret 13 on the optical path. At this time, the amount of movement of each of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is one hole. After the movement of the revolver 17 and the condenser turret 13 is completed, the user damages the tail of the sperm Sp12 with the injection pipette, immobilizes the sperm Sp12, and sucks the immobilized sperm Sp12 with the ink injection pipette (A10).

その後、操作入力部3のボタンB2から20倍のRC観察法を指示する指示信号が入力された場合(A11)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のRC観察法の位置に移動させる(A12)。この場合、図10A(4)に示すように、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット13の2番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ17およびコンデンサターレット13それぞれの移動量は、1穴分となる。ユーザは、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動完了後、卵子Sp11が入ったICSI用ドロップR1を観察するため、ステージ15を手動または電動で移動させる(A13)。ステージ15の移動後、ユーザは、授精させる卵子Sp11をホールディングピペットで固定し(A14)、インジェクションピペットを卵子Sp11に刺し、卵子Sp11内に精子Sp12を注入する(A15)。   Thereafter, when an instruction signal for instructing a 20-fold RC observation method is input from the button B2 of the operation input unit 3 (A11), the control unit 6 drives the drive control unit 27, whereby the polarizer 11 and the compensator 12 are driven. Then, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the RC observation method 20 times (A12). In this case, as shown in FIG. 10A (4), the control unit 6 inserts the second of the revolver 17 on the optical path and inserts the second of the condenser turret 13 on the optical path. At this time, the amount of movement of each of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is one hole. After completing the movement of the revolver 17 and the condenser turret 13, the user moves the stage 15 manually or electrically to observe the ICSI drop R1 containing the egg Sp11 (A13). After the stage 15 is moved, the user fixes the egg Sp11 to be inseminated with a holding pipette (A14), stabs the injection pipette into the egg Sp11, and injects the sperm Sp12 into the egg Sp11 (A15).

続いて、ユーザは、精子Sp12が入った精子選別用ドロップR2を観察するため、ステージ15を手動または電動で移動させる(A16)。この場合、図10A(5)に示すように、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット13の2番を光路上に挿入した状態で維持させる。このため、レボルバ17およびコンデンサターレット13それぞれは、移動しない。その後、顕微鏡1は上述した図10A(2)〜図10A(5)(A7〜A15)を繰り返す。   Subsequently, the user moves the stage 15 manually or electrically in order to observe the sperm sorting drop R2 containing the sperm Sp12 (A16). In this case, as shown in FIG. 10A (5), the control unit 6 maintains the revolver 17 with the second number inserted on the optical path, and maintains the second state with the capacitor turret 13 inserted on the optical path. Let For this reason, the revolver 17 and the condenser turret 13 do not move. Thereafter, the microscope 1 repeats the above-described FIGS. 10A (2) to 10A (5) (A7 to A15).

このようにユーザが顕微鏡1でBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、最大で1穴分となる。   As described above, when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method with the microscope 1, the movement amount of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is a maximum of one hole.

つぎに、ユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合について説明する。この場合、図10Bに示すように、図10B(1)〜図10B(4)は、図10A(1)〜図10A(4)にそれぞれ対応する。   Next, a case where the user performs ICSI using the BF observation method, RC observation method, and PO observation method with the microscope 1 will be described. In this case, as shown in FIG. 10B, FIGS. 10B (1) to 10B (4) correspond to FIGS. 10A (1) to 10A (4), respectively.

続いて、図10B(5)に示すように、操作入力部3のボタンB4から20倍のPO観察を指示する指示信号が入力された場合(B15)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のPO観察法の位置に移動させる(B16)。この場合、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット13の1番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット13の移動量は、1穴分となる一方、対物レンズ18は、移動しない。コンデンサターレット13の移動後、ユーザは、卵子Sp11内にある紡錘体を探索し、紡錘体の位置を特定する(B17)。   Subsequently, as shown in FIG. 10B (5), when an instruction signal instructing 20 times PO observation is input from the button B4 of the operation input unit 3 (B15), the control unit 6 controls the drive control unit 27. By driving, the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the 20 times PO observation method (B16). In this case, the control unit 6 keeps the revolver 17 No. 2 inserted in the optical path and inserts the condenser turret No. 1 No. 1 in the optical path. At this time, the moving amount of the condenser turret 13 is equivalent to one hole, while the objective lens 18 does not move. After the movement of the condenser turret 13, the user searches for the spindle in the ovum Sp11 and specifies the position of the spindle (B17).

その後、図10B(6)に示すように、操作入力部3のボタンB2から20倍のRC観察を指示する指示信号が入力された場合(B18)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のRC観察法の位置に移動させる(B19)。この場合、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット13の2番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット13の移動量は、1穴分となる一方、対物レンズ18は、移動しない。コンデンサターレット13の移動後、ユーザは、卵子Sp11の紡錘体を避けてインジェクションピペットを卵子Sp11に刺し、卵子Sp11内に精子Sp12を注入する。続いて、顕微鏡1は、上述した図10B(2)〜図10B(6)を繰り返す。   Thereafter, as shown in FIG. 10B (6), when an instruction signal instructing 20 times RC observation is input from the button B2 of the operation input unit 3 (B18), the control unit 6 drives the drive control unit 27. By doing so, the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the 20 times RC observation method (B19). In this case, the control unit 6 maintains the revolver 17 in the state in which the revolver 17 is inserted in the optical path, and inserts the capacitor turret 13 in the optical path. At this time, the moving amount of the condenser turret 13 is equivalent to one hole, while the objective lens 18 does not move. After moving the condenser turret 13, the user avoids the spindle of the ovum Sp11 and inserts an injection pipette into the ovum Sp11, and injects the sperm Sp12 into the ovum Sp11. Subsequently, the microscope 1 repeats the above-described FIGS. 10B (2) to 10B (6).

このようにユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合、レボルバ17およびコンデンサターレット13それぞれの移動量は、最大で1穴分となる。   As described above, when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method with the microscope 1, the movement amount of each of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is a maximum of one hole.

つぎに、ユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合について説明する。この場合、図10Cに示すように、図10C(1)〜図10C(2)は、図10A(1)〜図10A(2)にそれぞれ対応する。   Next, a case where the user performs ICSI with the microscope 1 using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method will be described. In this case, as shown in FIG. 10C, FIGS. 10C (1) to 10C (2) correspond to FIGS. 10A (1) to 10A (2), respectively.

図10C(3)に示すように、操作入力部3のボタンB5からDIC観察法を指示する指示信号が入力された場合(C8)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21をDIC観察法の位置に移動させる(C9)。この場合、制御部6は、レボルバ17の4番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット13の4番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、それぞれ2穴分となる。レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動後、ユーザは、精子Sp12頭部内の状態を観察し、精子Sp12頭部内に空胞がない精子Sp12を選別する(C10)。   As shown in FIG. 10C (3), when an instruction signal instructing the DIC observation method is input from the button B5 of the operation input unit 3 (C8), the control unit 6 drives the drive control unit 27 to The polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the DIC observation method (C9). In this case, the control unit 6 inserts No. 4 of the revolver 17 on the optical path and inserts No. 4 of the capacitor turret 13 on the optical path. At this time, the amount of movement of the revolver 17 and the condenser turret 13 is two holes, respectively. After the revolver 17 and the condenser turret 13 are moved, the user observes the state in the sperm Sp12 head, and selects the sperm Sp12 having no vacuole in the sperm Sp12 head (C10).

図10C(4)に示すように、操作入力部3のボタンB3から40倍のRC観察法を指示する指示信号が入力された場合(C11)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を40倍のRC観察法の位置に移動させる(C12)。このとき、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、それぞれ1穴分となる。レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動後、ユーザは、インジェクションピペットで精子Sp12の尾部に損傷を与え、精子Sp12を不動化させて吸引する(C13)。その後、顕微鏡1は、上述した図10C(2)〜図10C(6)を繰り返す。   As shown in FIG. 10C (4), when an instruction signal instructing a 40-fold RC observation method is input from the button B3 of the operation input unit 3 (C11), the control unit 6 drives the drive control unit 27. Accordingly, the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the 40 times RC observation method (C12). At this time, the amount of movement of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is one hole each. After the revolver 17 and the condenser turret 13 are moved, the user damages the tail of the sperm Sp12 with the injection pipette, immobilizes the sperm Sp12, and sucks it (C13). Thereafter, the microscope 1 repeats the above-described FIG. 10C (2) to FIG. 10C (6).

このようにユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合、レボルバ17の移動量およびコンデンサターレット13の移動量は、それぞれ最大で2穴分となる。   As described above, when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method with the microscope 1, the movement amount of the revolver 17 and the movement amount of the capacitor turret 13 become a maximum of two holes, respectively. .

つぎに、ユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合について説明する。この場合、図10Dに示すように、図10D(1)〜図10D(5)は、上述した図10C(1)〜図10C(5)にそれぞれ対応する。   Next, a case where the user performs ICSI with the microscope 1 using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method will be described. In this case, as illustrated in FIG. 10D, FIGS. 10D (1) to 10D (5) correspond to FIGS. 10C (1) to 10C (5) described above, respectively.

続いて、図10D(6)に示すように、操作入力部3のボタンB4から20倍のPO観察を指示する指示信号が入力された場合(D19)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のPO観察法の位置に移動させる(D20)。この場合、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット13の1番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット13の移動量は、1穴分となる一方、対物レンズ18は、移動しない。コンデンサターレット13の移動後、ユーザは、卵子Sp11内にある紡錘体を探索し、紡錘体の位置を特定する(D21)。   Subsequently, as shown in FIG. 10D (6), when an instruction signal instructing 20 times PO observation is input from the button B4 of the operation input unit 3 (D19), the control unit 6 controls the drive control unit 27. By driving, the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the 20 times PO observation method (D20). In this case, the control unit 6 keeps the revolver 17 No. 2 inserted in the optical path and inserts the condenser turret No. 1 No. 1 in the optical path. At this time, the moving amount of the condenser turret 13 is equivalent to one hole, while the objective lens 18 does not move. After moving the condenser turret 13, the user searches for the spindle in the egg Sp11 and specifies the position of the spindle (D21).

その後、図10D(7)に示すように、操作入力部3のボタンB2から20倍のRC観察を指示する指示信号が入力された場合(D22)、制御部6は、駆動制御部27を駆動することによって、ポラライザ11、コンペンセータ12、コンデンサターレット13、レボルバ17、DICプリズム20およびアナライザ21を20倍のRC観察法の位置に移動させる(D23)。この場合、制御部6は、レボルバ17の2番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット13の2番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット13の移動量は、1穴分となる一方、対物レンズ18は、移動しない。コンデンサターレット13の移動後、ユーザは、卵子Sp11の紡錘体を避けてインジェクションピペットを卵子Sp11に刺し、卵子Sp11内に精子Sp12を注入する。続いて、顕微鏡1は、図10C(2)〜図10C(7)を繰り返す。   Thereafter, as shown in FIG. 10D (7), when an instruction signal instructing 20 times RC observation is input from the button B2 of the operation input unit 3 (D22), the control unit 6 drives the drive control unit 27. By doing so, the polarizer 11, the compensator 12, the condenser turret 13, the revolver 17, the DIC prism 20, and the analyzer 21 are moved to the position of the RC observation method 20 times (D23). In this case, the control unit 6 maintains the revolver 17 in the state in which the revolver 17 is inserted in the optical path, and inserts the capacitor turret 13 in the optical path. At this time, the moving amount of the condenser turret 13 is equivalent to one hole, while the objective lens 18 does not move. After moving the condenser turret 13, the user avoids the spindle of the ovum Sp11 and inserts an injection pipette into the ovum Sp11, and injects the sperm Sp12 into the ovum Sp11. Subsequently, the microscope 1 repeats FIGS. 10C (2) to 10C (7).

このようにユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合、レボルバ17およびコンデンサターレット13それぞれの移動量は、最大で2穴分となる。   In this way, when the user performs ICSI using the BF observation method, RC observation method, PO observation method, and DIC observation method with the microscope 1, the movement amount of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is a maximum of two holes. Become.

以上説明した本発明の一実施の形態によれば、レボルバ17の各穴に装着される対物レンズの配置およびコンデンサターレット13の各穴に設けられた光学素子をICSIに最適な配置にする。これにより、ICSIにおける観察方法の切り替え時間を最小限に抑えることができる。この結果、ICSIの作業時間を短縮することができるので、卵子をインキュベーター外へ取り出しておく時間を最小にすることができる。   According to the embodiment of the present invention described above, the arrangement of the objective lens mounted in each hole of the revolver 17 and the optical element provided in each hole of the condenser turret 13 are optimally arranged for ICSI. Thereby, the switching time of the observation method in ICSI can be minimized. As a result, the ICSI work time can be shortened, so that the time for taking out the egg out of the incubator can be minimized.

(変形例1)
本発明の一実施の形態では、レボルバ17の各穴に装着する対物レンズの配置およびコンデンサターレットの各穴に設けられた光学素子の配置を変更することもできる。なお、上述した本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡1と同一の構成には同一の符号を付して説明する。
(Modification 1)
In one embodiment of the present invention, the arrangement of the objective lens mounted in each hole of the revolver 17 and the arrangement of the optical elements provided in each hole of the condenser turret can be changed. In addition, the same code | symbol is attached | subjected and demonstrated to the structure same as the microscope 1 concerning one Embodiment of this invention mentioned above.

図11は、本発明の一実施の形態の変形例1にかかるコンデンサターレットの各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。   FIG. 11 is a diagram schematically showing the arrangement of optical elements attached to the holes of the capacitor turret according to the first modification of the embodiment of the present invention.

図11に示すように、コンデンサターレット13には、空穴130(1番)から周方向に沿って20倍RC用開口板131(2番)と、40倍RC用開口板132(4番)とが設けられている。さらに、コンデンサターレット13には、20倍RC用開口板131と40倍RC用開口板132との間に60倍DIC用プリズム133(3番)が設けられている。   As shown in FIG. 11, the capacitor turret 13 has a 20 × RC opening plate 131 (No. 2) and a 40 × RC opening plate 132 (No. 4) along the circumferential direction from the air hole 130 (No. 1). And are provided. Further, the capacitor turret 13 is provided with a 60 × DIC prism 133 (No. 3) between the 20 × RC opening plate 131 and the 40 × RC opening plate 132.

図12は、本発明の一実施の形態の変形例1にかかるレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。   FIG. 12 is a diagram schematically showing the arrangement of the objective lenses mounted in the holes of the revolver according to the first modification of the embodiment of the present invention.

図12に示すように、レボルバ17には、4倍対物レンズ181(1番)を基準に周方向に沿って20倍RC観察用対物レンズ182(2番)と、40倍RC観察用対物レンズ183(4番)と、が設けられている。さらに、レボルバ17には、20倍RC観察用対物レンズ182と、40倍RC観察用対物レンズ183との間の周回上に60倍対物レンズ184(3番)が設けられている。   As shown in FIG. 12, the revolver 17 includes a 20 × RC observation objective lens 182 (No. 2) and a 40 × RC observation objective lens along the circumferential direction with reference to the 4 × objective lens 181 (No. 1). 183 (No. 4). Further, the revolver 17 is provided with a 60 × objective lens 184 (No. 3) on the circumference between the 20 × RC observation objective lens 182 and the 40 × RC observation objective lens 183.

このように構成された顕微鏡1においてICSIを実施する場合において、観察法を切り替えたときのコンデンサターレット13およびレボルバ17の移動について詳細に説明する。   The movement of the condenser turret 13 and the revolver 17 when the observation method is switched when the ICSI is performed in the microscope 1 configured as described above will be described in detail.

図13Aは、本実施の形態1の変形例1にかかる顕微鏡1において、ユーザが顕微鏡1でBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合において、精子の不動化および吸引に20倍RC観察を用いるときの手順を示す図である。図13Bは、本実施の形態1の変形例1にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合において、精子の不動化および吸引に20倍RC観察を用いるときの手順を示す図である。   FIG. 13A shows the immobilization of sperm in the microscope 1 according to the first modification of the first embodiment when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method with the microscope 1. It is a figure which shows the procedure when using 20 times RC observation for attraction | suction. FIG. 13B shows immobilization of sperm when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the first modification of the first embodiment. It is a figure which shows the procedure when using 20 times RC observation for suction.

図13A(4)および図13B(4)に示すように、ユーザが顕微鏡1でDIC観察法を用いてICSIを実施する場合において、精子Sp12の不動化およびインジェクションピペットで吸引するとき、40倍RC観察でなく、20倍RC観察を行う。この場合、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、最大で1穴分となる。たとえば、顕微鏡1が設定された観察法から20倍RC観察法またはDIC観察法に切り替える場合、レボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、1穴分となる。   As shown in FIGS. 13A (4) and 13B (4), when the user performs ICSI using the DIC observation method with the microscope 1, when immobilizing the sperm Sp12 and sucking with an injection pipette, 40 times RC Perform 20x RC observation instead of observation. In this case, the amount of movement of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is a maximum of one hole. For example, when the microscope 1 is switched from the set observation method to the 20-fold RC observation method or the DIC observation method, the amount of movement of the revolver 17 and the capacitor turret 13 is one hole.

図14Aは、本実施の形態1の変形例1にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合において、精子の不動化および吸引にDIC観察を用いるときの手順を示す図である。図14Bは、本実施の形態1の変形例1にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合において、精子の不動化および吸引にDIC観察を用いるときの手順を示す図である。   FIG. 14A shows DIC for immobilization and suction of sperm when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the first modification of the first embodiment. It is a figure which shows the procedure when using observation. FIG. 14B shows the immobilization of sperm when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the first modification of the first embodiment. It is a figure which shows the procedure when using DIC observation for suction.

図14A(4)および図14B(4)に示すように、ユーザが顕微鏡1でDIC観察法を用いる場合において、精子Sp12の不動化およびインジェクションピペットで吸引するとき、40倍RC観察でなく、DIC観察を行う。この場合、レボルバ17およびコンデンサターレット13は移動しない。   As shown in FIGS. 14A (4) and 14B (4), when the user uses the DIC observation method with the microscope 1, when the sperm Sp12 is immobilized and sucked with an injection pipette, the DIC is not a 40-fold RC observation. Make observations. In this case, the revolver 17 and the condenser turret 13 do not move.

以上説明した本発明の一実施の形態にかかる変形例1によれば、顕微鏡1でICSIにDIC観察法を用いる場合において、精子の不動化およびインジェクションピペットで吸引するときの観察法を40倍RC観察法に変えて20倍RC観察法またはDIC観察法を用いるとき、ICSIにおける観察法の切り替え時間を最小限に抑えることができるので、ICSIの作業時間を短縮することができる。   According to the modification 1 according to the embodiment of the present invention described above, when using the DIC observation method for ICSI with the microscope 1, the observation method when immobilizing the sperm and sucking with the injection pipette is 40 times RC. When using the 20-fold RC observation method or the DIC observation method instead of the observation method, the switching time of the observation method in ICSI can be minimized, so that the ICSI work time can be shortened.

(変形例2)
本発明の一実施の形態では、レボルバ17の各穴に装着する対物レンズの配置をさらに変更することができる。
(Modification 2)
In one embodiment of the present invention, the arrangement of the objective lenses mounted in the holes of the revolver 17 can be further changed.

図15は、本発明の一実施の形態の変形例2にかかるレボルバ17の各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。   FIG. 15 is a diagram schematically illustrating the arrangement of the objective lenses mounted in the holes of the revolver 17 according to the second modification of the embodiment of the present invention.

図15に示すように、レボルバ17には、4倍対物レンズ181(1番)から周方向に沿って20倍PO観察用対物レンズ185(2番)、20倍RC観察用対物レンズ182(3番)、40倍RC観察用対物レンズ183(4番)および60倍対物レンズ184(5番)が設けられている。   As shown in FIG. 15, the revolver 17 includes a 20 × PO observation objective lens 185 (No. 2) and a 20 × RC observation objective lens 182 (3) from the 4 × objective lens 181 (No. 1) along the circumferential direction. No.), a 40 × RC observation objective lens 183 (No. 4) and a 60 × objective lens 184 (No. 5) are provided.

図16は、記録部5の設定情報記録部51が記録する設定情報を示す図である。図16に示すように、設定情報T2には、各観察法に応じたレボルバ17の対物レンズ18とコンデンサターレット13の光学素子の組み合わせが記録されている。本発明の実施の形態1の変形例2では、PO観察法の場合、20倍PO観察用対物レンズ185と空穴130との組み合わせが記載されている。   FIG. 16 is a diagram illustrating setting information recorded by the setting information recording unit 51 of the recording unit 5. As shown in FIG. 16, in the setting information T2, the combination of the objective lens 18 of the revolver 17 and the optical element of the condenser turret 13 corresponding to each observation method is recorded. In the second modification of the first embodiment of the present invention, in the case of the PO observation method, a combination of the 20 × PO observation objective lens 185 and the hole 130 is described.

このように構成された顕微鏡1において、ICSIに実施した場合において、観察法を切り替えたときのコンデンサターレット13およびレボルバ17の移動について詳細に説明する。図17Aは、本実施の形態1の変形例2にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図17Bは、本実施の形態1の変形例2にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図17Cは、本実施の形態1の変形例2にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図17Dは、本実施の形態1の変形例2にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法おびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。   In the microscope 1 configured as described above, the movement of the capacitor turret 13 and the revolver 17 when the observation method is switched in the case of implementation to ICSI will be described in detail. FIG. 17A shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope 1 according to the second modification of the first embodiment. FIG. 17B shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope 1 according to the second modification of the first embodiment. FIG. 17C shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the second modification of the first embodiment. FIG. 17D shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the second modification of the first embodiment.

図17A(2)、図17B(2)、図17C(2)および図17D(2)に示すように、ユーザが顕微鏡1でPO観察法を行う場合において、第2対物レンズ182とは別の対物レンズ18を用いるとき、観察法毎に切り替えるレボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、BF観察法から20RC観察法に切り替えるときのみ2穴分となり、それ以外が1穴分または移動しない。なお、図17A〜図17Dは、上述した図10A〜図10Dにそれぞれ対応する。   17A (2), FIG. 17B (2), FIG. 17C (2), and FIG. 17D (2), when the user performs the PO observation method with the microscope 1, the second objective lens 182 is different. When the objective lens 18 is used, the amount of movement of the revolver 17 and the condenser turret 13 to be switched for each observation method is two holes only when switching from the BF observation method to the 20RC observation method, and the rest does not move for one hole or move. 17A to 17D correspond to FIGS. 10A to 10D described above, respectively.

以上説明した本発明の一実施の形態の変形例2によれば、ユーザがPO観察法において20倍RC観察用対物レンズ182と別の対物レンズ185を用いる場合、ICSIにおける観察法の切り替え時間を最小限に抑えることができるので、ICSIの作業時間を短縮することができる。   According to the second modification of the embodiment of the present invention described above, when the user uses a 20 × RC observation objective lens 182 and another objective lens 185 in the PO observation method, the switching time of the observation method in ICSI is reduced. Since it can be minimized, ICSI work time can be shortened.

(変形例3)
本発明の一実施の形態では、コンデンサターレット13の各穴に配置する光学素子およびレボルバ17の各穴に装着する対物レンズ18の配置をさらに変更することができる。なお、上述した本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡1と同一の構成には同一の符号を付して説明する。
(Modification 3)
In the embodiment of the present invention, the arrangement of the optical elements arranged in the holes of the condenser turret 13 and the objective lens 18 attached to the holes of the revolver 17 can be further changed. In addition, the same code | symbol is attached | subjected and demonstrated to the structure same as the microscope 1 concerning one Embodiment of this invention mentioned above.

図18は、本発明の一実施の形態の変形例3にかかるコンデンサターレット13の各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。   FIG. 18 is a diagram schematically showing the arrangement of optical elements attached to the holes of the capacitor turret 13 according to the third modification of the embodiment of the present invention.

図18に示すように、コンデンサターレット13には、空穴130(1番)から周方向に沿って10倍RC用開口板134(2番)と、20倍RC用開口板131(3番)と、40倍RC用開口板132(4番)と、60倍DIC用プリズム133(5番)との順で配置されている。   As shown in FIG. 18, the capacitor turret 13 has a 10 × RC opening plate 134 (No. 2) and a 20 × RC opening plate 131 (No. 3) along the circumferential direction from the air hole 130 (No. 1). The 40 × RC aperture plate 132 (No. 4) and the 60 × DIC prism 133 (No. 5) are arranged in this order.

図19は、本発明の一実施の形態の変形例3にかかるレボルバ17の各穴に装着される対物レンズ18の配置を模式的に示す図である。   FIG. 19 is a diagram schematically showing the arrangement of the objective lenses 18 attached to the holes of the revolver 17 according to the third modification of the embodiment of the present invention.

図19に示すように、レボルバ17には、4倍対物レンズ181(1番)を基準に周方向に沿って10倍RC用対物レンズ185(2番)と、20倍RC用対物レンズ182(3番)と、40倍RC用対物レンズ183(4番)と、60倍対物レンズ184(5番)とが配置されている。   As shown in FIG. 19, the revolver 17 includes a 10 × RC objective lens 185 (No. 2) and a 20 × RC objective lens 182 (#) along the circumferential direction with reference to the 4 × objective lens 181 (No. 1). No. 3), a 40 × RC objective lens 183 (No. 4), and a 60 × objective lens 184 (No. 5) are arranged.

図20は、記録部5の設定情報記録部51が記録する設定情報を示す図である。図20に示すように、設定情報T3には、各観察法に応じたレボルバ17の対物レンズ18とコンデンサターレット13の光学素子との組み合わせが記載されている。本発明の一実施の形態の変形例3では、10倍RC観察法の場合、10倍RC観察用対物レンズ185と10倍RC用開口板134との組み合わせが記載されている。   FIG. 20 is a diagram illustrating the setting information recorded by the setting information recording unit 51 of the recording unit 5. As shown in FIG. 20, the setting information T3 describes a combination of the objective lens 18 of the revolver 17 and the optical element of the condenser turret 13 according to each observation method. In the third modification of the embodiment of the present invention, in the case of the 10 × RC observation method, a combination of the 10 × RC observation objective lens 185 and the 10 × RC aperture plate 134 is described.

このように構成された顕微鏡1のICSIに用いる各観察法の組み合わせにおいて、マニピュレータの針合わせで10倍RC観察法を用いる場合のコンデンサターレット13およびレボルバ17の移動について詳細に説明する。図21Aは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図21Bは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図21Cは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図21Dは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。   The movement of the condenser turret 13 and the revolver 17 when the 10-fold RC observation method is used for needle alignment of the manipulator in the combination of the observation methods used for the ICSI of the microscope 1 configured as described above will be described in detail. FIG. 21A shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment. FIG. 21B shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment. FIG. 21C shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment. FIG. 21D shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment.

図21A(1)、図21B(1)、図21C(1)および図21D(1)に示すように、顕微鏡1がマニピュレータの位置合わせを行う場合において、10倍RC観察法を用いるとき、観察法毎に切り替えるレボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、最大で2穴分となる。なお、図21A〜図21Dは、上述した図10A〜図10Dにそれぞれ対応する。   21A (1), FIG. 21B (1), FIG. 21C (1) and FIG. 21D (1), when the microscope 1 aligns the manipulator, the observation is performed using the 10 × RC observation method. The amount of movement of the revolver 17 and the condenser turret 13 switched for each method is a maximum of two holes. 21A to 21D correspond to FIGS. 10A to 10D described above, respectively.

また、顕微鏡1のICSIに用いる各観察法の組み合わせにおいて、卵子のホールディングおよびインジェクションに10倍RC観察を用いる場合のコンデンサターレット13およびレボルバ17の移動について詳細に説明する。図22Aは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法およびRC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図22Bは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびPO観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図22Cは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。図22Dは、本実施の形態1の変形例3にかかる顕微鏡1において、ユーザがBF観察法、RC観察法、PO観察法およびDIC観察法を用いてICSIを実施する場合の手順を示す。   The movement of the condenser turret 13 and the revolver 17 in the case of using 10-fold RC observation for egg holding and injection in the combination of observation methods used for ICSI of the microscope 1 will be described in detail. FIG. 22A shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method and the RC observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment. FIG. 22B shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the PO observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment. FIG. 22C shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment. FIG. 22D shows a procedure when the user performs ICSI using the BF observation method, the RC observation method, the PO observation method, and the DIC observation method in the microscope 1 according to the third modification of the first embodiment.

図22A(4),(5)、図22B(4),(5)、図22C(4),(5)および図22D(4),(5)に示すように、ユーザが顕微鏡1で卵子Sp11のホールディングおよびインジェクションを行う際に10倍RC観察法を行う場合、観察法毎に切り替えるレボルバ17およびコンデンサターレット13の移動量は、最大で2穴分となる。なお、図21A〜図21Dは、上述した図10A〜図10Dにそれぞれ対応する。   22A (4), (5), FIG. 22B (4), (5), FIG. 22C (4), (5) and FIG. 22D (4), (5) When performing the 10-fold RC observation method when performing Sp11 holding and injection, the amount of movement of the revolver 17 and the capacitor turret 13 switched for each observation method is a maximum of two holes. 21A to 21D correspond to FIGS. 10A to 10D described above, respectively.

以上説明した本発明の一実施の形態の変形例3によれば、ユーザがマニピュレータの針合わせ、または卵子Sp11のホールディングおよびインジェクションにおいて、BF観察法または20倍RC観察法に代えて、10倍RC観察法を行う場合に、ICSIにおける観察法の切り替え時間を最小限に抑えることができるので、ICSIの作業時間を短縮することができる。   According to the third modification of the embodiment of the present invention described above, the user replaces the BF observation method or the 20 × RC observation method with 10 × RC in the needle alignment of the manipulator or the holding and injection of the egg Sp11. When performing the observation method, the switching time of the observation method in ICSI can be minimized, so that the work time of ICSI can be shortened.

さらに、本発明の一実施の形態の変形例3によれば、ICSIにおいて10倍RC観察法を用いるので、標本Spに対して様々な対応を行うことができる。   Furthermore, according to the third modification of the embodiment of the present invention, since the 10-fold RC observation method is used in ICSI, various correspondences can be made to the specimen Sp.

また、本発明では、顕微鏡本体部、操作入力部、表示部、記録部および制御部を備えた顕微鏡を例に説明したが、たとえば試料を拡大する対物レンズ、対物レンズを介して試料を撮像する撮像機能、および画像を表示する表示機能を備えた撮像装置、たとえばビデオマイクロスコープ等であっても、本発明を適用することができる。   In the present invention, a microscope provided with a microscope main body, an operation input unit, a display unit, a recording unit, and a control unit has been described as an example. For example, an objective lens for enlarging a sample, and imaging a sample via the objective lens The present invention can also be applied to an imaging apparatus having an imaging function and a display function for displaying an image, such as a video microscope.

また、本発明では、コンデンサターレットに設けられた光学素子およびレボルバに設けられた対物レンズそれぞれの配置を時計回りで説明していたが、たとえば空穴および第1対物レンズを基準に周方向に反時計周りに配置しても適用することができる。   In the present invention, the arrangement of the optical element provided in the condenser turret and the objective lens provided in the revolver has been described clockwise. For example, the optical element provided in the condenser turret is counterclockwise in the circumferential direction with reference to the hole and the first objective lens. It can be applied even if it is arranged around the clock.

また、本発明では、ポラライザとアナライザとをクロスニコルの状態にするため、ポラライザを回転させていたが、たとえばアナライザを回転させる場合であっても適用することができる。もちろん、ポラライザとアナライザとをそれぞれ回転させる場合であっても適用することができる。   In the present invention, the polarizer is rotated in order to bring the polarizer and the analyzer into a crossed Nicol state. However, the present invention can be applied even when the analyzer is rotated, for example. Of course, the present invention can be applied even when the polarizer and the analyzer are rotated.

1 顕微鏡
2 顕微鏡本体部
3 操作入力部
4 表示部
5 記録部
6 制御部
10 光源
11 ポラライザ
11a,12a,13a,15a,17a,20a,21a モータ
12 コンペンセータ
13 コンデンサターレット
14 コンデンサレンズ
15 ステージ
16 ターレット位置検出部
17 レボルバ
18 対物レンズ
19 レボルバ位置検出部
20 DICプリズム
21 アナライザ
22 結像レンズ
23 光路分割プリズム
24 撮像部
25 ミラー
26 接眼レンズ
27 駆動制御部
51 設定情報記録部
100 シャーレ
130 空穴
131,132 RC観察用開口板
131b,132b 偏光板
133 DICプリズム
181,182,183 対物レンズ
401 リタデーション情報記録部
Sp 標本
Sp11 卵子
Sp12 精子
XA 光軸
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Microscope 2 Microscope main body part 3 Operation input part 4 Display part 5 Recording part 6 Control part 10 Light source 11 Polarizer 11a, 12a, 13a, 15a, 17a, 20a, 21a Motor 12 Compensator 13 Condenser turret 14 Condenser lens 15 Stage 16 Turret position Detection unit 17 Revolver 18 Objective lens 19 Revolver position detection unit 20 DIC prism 21 Analyzer 22 Imaging lens 23 Optical path splitting prism 24 Imaging unit 25 Mirror 26 Eyepiece lens 27 Drive control unit 51 Setting information recording unit 100 Petri dish 130 Air holes 131, 132 RC observation aperture plate 131b, 132b Polarizing plate 133 DIC prism 181, 182, 183 Objective lens 401 Retardation information recording part Sp specimen Sp11 Egg Sp12 Sperm XA Optical axis

Claims (5)

標本を照射する光を発生する光源と、各々が前記光の光路上に配置可能であり、入射した前記光の光学特性を変化させる複数の光学ユニットと、を備え、卵細胞質内精子注入法で用いる複数の観察法それぞれに応じて前記光路上における前記複数の光学ユニットそれぞれの配置を切り替える顕微鏡であって、
円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって前記複数の穴部のいずれか一つを前記光路上に配置可能なコンデンサターレットと、
各々が対物レンズを保持可能な複数の保持部が主面の周方向に沿って形成され、該複数の保持部のいずれかを前記光路上に配置可能なレボルバと、
を備え、
前記コンデンサターレットは、前記複数の穴部のうち光学素子を保持しない所定の空穴を基準に見たときに主面の周方向に沿って適用倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用開口板がそれぞれ前記複数の穴部に保持され、
前記レボルバは、前記複数の保持部のいずれか一つに保持された最小倍率の第1対物レンズを基準に見たときに主面の周方向に沿って倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズがそれぞれ前記複数の保持部に保持されていることを特徴とする顕微鏡。
A light source that generates light for irradiating the specimen, and a plurality of optical units that can be arranged on the optical path of the light, and that changes the optical characteristics of the incident light, A microscope that switches the arrangement of each of the plurality of optical units on the optical path according to each of a plurality of observation methods to be used,
A plurality of hole portions each having a disc shape and capable of holding an optical element are formed along the circumferential direction of the main surface, and any one of the plurality of hole portions is rotated by rotating about a predetermined axis. A condenser turret that can be placed on the optical path;
A plurality of holding portions each capable of holding the objective lens are formed along the circumferential direction of the main surface, and a revolver capable of arranging any of the plurality of holding portions on the optical path;
With
The capacitor turret includes a plurality of relief contrast observation aperture plates in which application magnifications are sequentially increased along the circumferential direction of the main surface when viewed from a predetermined hole that does not hold an optical element among the plurality of holes. Are respectively held in the plurality of holes,
The revolver has a plurality of relief contrast observations in which the magnification is sequentially increased along the circumferential direction of the main surface when viewed from the first objective lens having the minimum magnification held in any one of the plurality of holding units. A microscope, wherein objective lenses are respectively held by the plurality of holding portions.
前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板の後に、DICプリズムが前記穴部によってさらに保持され、
前記レボルバは、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする請求項1に記載の顕微鏡。
The condenser turret includes a DIC prism after the plurality of relief contrast observation aperture plates when the microscope performs the bright-field observation method, the relief contrast observation method, and the differential interference observation method in the order of sperm injection in the egg cytoplasm. Is further held by the hole,
2. The revolver is further characterized in that an objective lens having a higher magnification than each of the plurality of relief contrast observation objective lenses is further held by the holding unit after the plurality of relief contrast observation objective lenses. Microscope.
前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で偏光観察法を行う場合、前記第1対物レンズの後に、前記第1対物レンズより倍率が高い偏光観察法用対物レンズが前記保持部によって保持されていることを特徴とする請求項2に記載の顕微鏡。   In the revolver, when the microscope performs the polarization observation method by the sperm injection method in the cytoplasm, the objective lens for the polarization observation method having a higher magnification than the first objective lens is provided by the holding unit after the first objective lens. The microscope according to claim 2, wherein the microscope is held. 前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板は、第1レリーフコントラスト観察用開口板および第2レリーフコントラスト観察用開口板を有し、
前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズは、第1レリーフコントラスト観察用対物レンズおよび第2レリーフコントラスト観察用対物レンズを有し、
前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記空穴の後に、前記第1レリーフコントラスト観察用開口板より開口数が小さい第2レリーフコントラスト観察用開口板が前記穴部によってさらに保持され、
前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記第1対物レンズの後に、前記第1対物レンズより倍率が高く、かつ、前記第1レリーフコントラスト観察用対物レンズより倍率が低い第2レリーフコントラスト観察用対物レンズがさらに前記保持部によって保持されていることを特徴とする請求項2に記載の顕微鏡。
The plurality of relief contrast observation aperture plates have a first relief contrast observation aperture plate and a second relief contrast observation aperture plate,
The plurality of relief contrast observation objective lenses include a first relief contrast observation objective lens and a second relief contrast observation objective lens,
The condenser turret has a smaller numerical aperture than the first relief contrast observation aperture plate after the vacancy when the microscope performs a plurality of relief contrast observation methods with different magnifications by the intracytoplasmic sperm injection method. 2 Relief contrast observation aperture plate is further held by the hole,
The revolver has a higher magnification than the first objective lens after the first objective lens when the microscope performs a plurality of relief contrast observation methods with different magnifications by the intracytoplasmic sperm injection method, and the first 3. The microscope according to claim 2, wherein a second relief contrast observation objective lens having a magnification lower than that of the first relief contrast observation objective lens is further held by the holding unit.
前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板のうち最も開口数が小さい第1レリーフコントラスト観察用開口板の後に、DICプリズムが前記穴部によってさらに保持され、
前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズのうち最も倍率が低い第1レリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする請求項1に記載の顕微鏡。
The condenser turret has the largest numerical aperture among the plurality of relief contrast observation aperture plates when the microscope performs the bright field observation method, the relief contrast observation method, and the differential interference observation method in the order of sperm injection in the egg cytoplasm. After the first relief contrast observation aperture plate is small, the DIC prism is further held by the hole,
The revolver has the lowest magnification among the plurality of relief contrast observation objectives when the microscope performs the bright field observation method, the relief contrast observation method, and the differential interference observation method in the order of sperm injection in the egg cytoplasm. 2. The microscope according to claim 1, wherein an objective lens having a higher magnification than each of the plurality of relief contrast observation objective lenses is further held by the holding unit after the first relief contrast observation objective lens.
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